TW201628661A - 氟-18麩胱甘肽綴合物作為成像過度表現l-pgds腫瘤或神經病變之正子放射斷層造影追蹤劑之應用 - Google Patents

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Abstract

一種正子放射斷層造影追蹤劑，用以成像過度表現載脂蛋白型***素D合成酶(Lipocalin-type prostaglandin D synthase, L-PGDS)之腫瘤或腦神經細胞之用途。本發明已製備使用可接受量放射性的氟18標定之氟丁基依他尼酰胺之穀胱甘肽綴合物 (glutathione conjugate of fluorine-18-labeled fluorobutyl ethacrynic amide)，其可與載脂蛋白型***素D合成酶(Lipocalin-type prostaglandin D synthase, L-PGDS)結合，並可用於體外和體內的成像研究。

Description

氟-18麩胱甘肽綴合物作為成像過度表現L-PGDS腫瘤或神經病變之正子放射斷層造影追蹤劑之應用
本發明係關於一種正子放射斷層造影追蹤劑，特別是一種基於氟-18麩胱甘肽綴合物作為成像過度表現L-PGDS腫瘤或神經病變之正子放射斷層造影追蹤劑之應用。
正子放射斷層造影(Positron emission tomography，PET)已成為診斷醫學中重要的功能性造影模式，小分子(如：藥物)與生物大分子(如：蛋白質)的活體內造影皆需仰賴正子射源(如：氟-18)。由於氟-18相對較低的能量(0.64 MeV)以及相對長的半衰期(t1/2 =109.7分鐘)，使其具有低放射劑量、組織穿透距離短及可多步驟合成與可延伸造影流程等特性。
氟-18與其他第二週期元素原子大小相近，適合模擬氧或氫原子；氟-18的敏感性高，作為放射標記的造影劑僅需非常低的濃度即可造影而不會有毒性的疑慮。
氟-18可藉由直接取代反應與透過雙官能基(bifunctional group)間接反應導入分子中，前者包括親核或親電的途徑；而雙官能基又稱輔基(prosthetic group)或氟-18合成組元(synthon)，用於連結蛋白質或胜肽與氟-18結合分子。
因此，如何開發用於正子放射斷層造影的氟-18造影劑是目前極需努力目標。
本發明之目的之一是開發氟-18麩胱甘肽綴合物作為成像過度表現L-PGDS腫瘤或神經病變之正子放射斷層造影追蹤劑之應用。
依據本發明之一實施例，一種正子放射斷層造影追蹤劑，用以成像過度表現載脂蛋白型***素D合成酶(Lipocalin-type prostaglandin D synthase, L-PGDS)之腫瘤或腦神經細胞之用途，其具有下列代表式3之18 F氟丁基依他尼酰胺之穀胱甘肽綴合物或其醫藥可接受之鹽。
依據本發明之另一實施例，一種成像過度表現載脂蛋白型***素D合成酶之腫瘤或神經細胞之方法，包含：對一受試者投予具有代表式3之化合物或其醫藥可接受之鹽；以及對該受試者執行正子放射斷層造影以成像過度表現L-PGDS之腫瘤或腦神經病變。
以下藉由具體實施例配合所附的圖式詳加說明，當更容易瞭解本發明之目的、技術內容、特點及其所達成之功效。
載脂蛋白型***素D合成酶(Lipocalin-type prostaglandin D synthase, L-PGDS)表現於腦部。依據報導L-PGDS與神經病變(例如阿茲海默症)或腫瘤(例如腦瘤、乳癌或卵巢癌)相關。此外，L-PGDS是腦脊液中最主要蛋白成份之一。
本發明已製備使用可接受量放射性的氟18標定之氟丁基依他尼酰胺之穀胱甘肽綴合物 (glutathione conjugate of fluorine-18-labeled fluorobutyl ethacrynic amide) 或其醫藥可接受之鹽，其可與載脂蛋白型***素D合成酶(Lipocalin-type prostaglandin D synthase, L-PGDS)結合，並可用於體外和體內的成像研究。
在一實施例中，氟18標定之氟丁基依他尼酰胺之穀胱甘肽綴合物具有化學式(3)，以下簡稱[18 F]FBuEA-GS 3，其中[18 F]FBuEA-GS 3可為掌性或其混合物。式(3)
如本文所述，「醫藥上可接受的鹽」指的是本發明化合物之鹽或兩性離子形式。這些化合物的鹽類之製備例如可在化合物反應的最終分離和純化或是獨立通過使化合物與具有合適陽離子的酸類反應而製得。合適的藥學上可接受的陽離子包括鹼金族（如鈉或鉀）和鹼土族（如鈣或鎂）陽離子。此外，對於包含鹼性中心的本發明化合物，其藥學上可接受的鹽是藉由與藥學上可接受的酸形成的酸加成鹽。
可用於形成藥學上可接受的鹽的酸類實例包括無機酸(例如鹽酸、氫溴酸、硫酸和磷酸)，以及有機酸(例如草酸、馬來酸、琥珀酸、丙二酸、乳酸和檸檬酸)。有鑑於此，本文中出現的化合物意在包括本文所揭示的化合物以及其藥學上可接受的鹽、溶劑合物(solvate)(例如，水合物）、酯類或前藥。
本發明之製備及應用已見於PLoS One 2014 11;9(8):e104118. Epub 2014 Aug 11，在此將其全文以參照方式引入。
在一實施例中，一種成像過度表現L-PGDS之腫瘤或神經細胞之方法，包含：對一受試者投予具有代表式3之化合物或其醫藥可接受之鹽；以及對該受試者執行PET以成像過度表現L-PGDS之腫瘤或腦神經病變。
以下通過具體實施例配合附圖詳加說明，可更容易瞭解本發明的目的、技術內容、特點及所達成的功效，並據以實施，但不能以此限定本發明的保護範圍。 一般製備及檢測
[18 F]HF之產生是於台灣核能研究所(Nuclear Energy Research institute, NERI)以PET追蹤劑回旋加速器(GE, TR-30)以18 O(p,n)18 F 原子反應進行。放射化學實驗是以TracerLAB FXFN 合成模組(GE medical systems, Milwaukee, WI)進行。 TracerLAB FXFN 合成模組中的粗混合物[18 F]FBuEA 2是使用反相高效液相層析(RP-HPLC)純化，其由Waters 510幫浦及UVIS探測器(λ= 254 nm)組成，UVIS探測器與Berthholdc-flow探測器(Raytest, GABI Star)及column CHEMCOSORB 7-ODS-H, 10x250 mm, 5μm串接。標記化合物[18 F]FBuEA2的同一性之確認是藉由在HPLC層析色譜上與真實化合物相比較。將在254 nm處的紫外線吸收峰積分以與將質量關聯至吸收度的標準曲線比較。僅有40 GBq/μmol以下的特定活性可被正確量測。放射性是以Capintec R15C劑量校準器測量。重組人類glutathione S-transferase alpha-1(GSTA1 human, 50μg/50μL)是購自Techno Gene Ltd (ENZ-469)。重組人類glutathione S-transferase Pi-1 (GSTP1 human人類, 25μg/25μL)是購自Alpha Diagnostic International Inc. (GST P35-R-25)。L-PGDS和m-PGES 1酵素是購自Cayman Chemical Inc.。這些酵素產品都是在剛打開時立即用於酵素反應。用於結合分析的HPLC系統包括Waters 510幫浦及線性UVIS檢測器(λ= 254 nm)，其組裝為與Berthholdc-flow探測器串接，以購自Tosoh Bioscience LLC的在顆粒大小為10μm的TSKgel G3000 PW 7.5x300(mm)進行。流量設置為1mL /分鐘。
PET是在核能研究所以microPET R4(Concorde Microsystems Inc.)及NanoPET / CT(MEDISO Inc.)進行。這些機器都是由Siemens Medical Solutions, Knoxville, United States所製造。   [18 F]FBuEA-GS 3 之放射化學合成
化合物3之製備如下所示。
簡而言之，[18 F]FBuEA 2之製備由[18 F]F2 （824 mCi）與甲苯磺酸鹽經由在合成模組中進行一系列純化而得。氟化劑由是從3.5 mg K2 CO3 、0.5mL水及穴狀配體[2,2,2]（15 mg）/CH3 CN（1mL）所獲得的。此外，氟化過程中亦使用叔丁醇（0.4mL）。
化合物2之混合物進一步使用HPLC設定純化。流速為3mL/分鐘。梯度設定起始為從20% CH3 CN水溶液(其由混合CH3 CN及0.05%三氟乙酸獲得)，通過95%CH3 CN溶液10分鐘，最終在20分為100%CH3 CN溶劑。tR =14.8分鐘。連同半製備型RP-HPLC純化的製劑在1小時內完成。收集到的分餾(3mL，82mCi)抽出一部分(7mCi，0.2mL)轉移到一圓底燒瓶中(10mL)，接著於減壓環境使用膜泵濃縮以獲得殘餘物。依序以CH3 CN(1mL)、H2 O(1mL)及GSH(20mg)加至此殘餘物。加入NaOH水溶液(50mM)調整pH直到8.2(0.6mL，在1分鐘內)。攪拌15分鐘。在以0.45μm的尼龍過濾器(Merck)過濾後，將濾液(2.6mL)以使用半製備型RP-HPLC純化。層析設置與所述化合物2之製備相同。梯度設置與述的[18 F]FBuEAGS 3相同。保留時間(TR )為14.6分鐘。所收集的分餾(6mL)使用膜泵於減壓環境中濃縮10分鐘，以提供[18 F]FBuEA-GS 3，放射化學產率為5%(2.05mCi)，其專一活性為33 GBq/μmol，放射化學為98%，其係基於初始[18 F]F2 (824 mCi)放射氟離子之計算。
對於每組實驗，從濃度為440μCi/0.2mL的純化[18 F]FBuEA-GS 3抽取0.01mL體積。於一小時內完成由[18 F]FBuEA 2合成及純化[18 F]FBuEA-GS 3。由放射性氟18 F2 起始，以半製備性RP-HPLC純化的全程製備在2小時內完成。非放射性FBuEA-GS 3另行分離製備，並如上述通過RP-HPLC分析，除了使用分析掌性層析代替(Chiralcel OD-RH 0.46615 cm, Daicel Chemical Industries, LTD.)。梯度設置與上述相同，而流速為0.7mL/分鐘。 FBuEA-GS 3對由PGH2 產生PGD2 的競爭性抑制生物測定
此試驗是依據市售試劑盒(Cayman cat. No. 10006595)。簡言之，此方法被分成兩部分)。第一部分是關於在L-PGDS催化作用下由PGH2 產生PGD2 的檢測。PGD2之形成可由AT-56(dibenzocycloheptenyl tetrazolyl piperidine)所抑制。為了與由FBuEA-GS 3的抑制作用比較，尿苷(uridine)被用作反向對照。第二部分是關於以酵素免疫試驗(EIA)測定PGD2 的濃度，其中PGD2 -偶聯物作競爭物。由乙酰膽鹼酯酵素(acetylcholineesterase)及PGD2 所聯結的偶聯物競爭性地結合地固定的抗體。在洗滌後，剩餘的偶聯物可以催化乙酰膽鹼水解，而釋放的硫代膽鹼替換5,59二硫代雙-2-硝基苯甲酸(5,59-dithio-bis-2-nitrobenzoic acid)的一個硫基，得到有色的5-硫基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoic acid)，UV吸光度之波長最大值為412nm。吸光度強度與由PGH2 產生的PGD2 濃度成反比。因此，檢測器感測的吸光度越強，受質產生越有效的抑制。在執行此測定之前，通過繪製檢測活性對應PGD2 作為競爭對象建構校準曲線。在三個受質的完整測定過程中，活性範圍是在41.4%-61.2%之間，這是在可靠線性檢測26.8% (15000pg/mL)到76.9% (468.8pg/mL)之間。抑制百分比之計算為[(Absinitial – Abscontrol )2(Absinhibitor – Abscontrol )]/(Absinitial –Abscontrol )x100%。實驗是以重複方式進行。 放射性配體與受試酵素之結合試驗
上述[18 F]FBuEA-GS 3以蒸餾水(1 mL)稀釋。抽出一等分的試樣(20ml)到如表S3所示的各酵素溶液的微型離心管。整個混合物以在25℃保溫15分鐘，然後通過使用HPLC加上凝膠過濾層析TSKgel G3000PW 7.5 x 300, 10μm, Tosoh Bioscience LLC)進行分析。使用蒸餾水作為引流液。流速為1mL/分鐘。 測定[18 F]FBuEA-GS 3對L-PGDS的結合常數(Kd)
250μg/200μL的市售L-PGDS(人類重組，Cayman, No.10006788)與tris-HCl緩衝液(50μL，100μM，pH= 8.0)混合，以提供儲液(250μg/250μL)。由儲液所取出的一等分(10μL)被加入到一個微量離心管(200μL)。加入溶於tris-HCl緩衝液的[18 F]FBuEA-GS 3溶液。製備非放射性FBuEA-GS 3的載體溶液，其係通過對儲液的連續稀釋，以提供濃度為4、30、80、600、1600及4800μM的各種樣品。將5μL體積的每一樣品加到上述的微型離心管，以生成最終濃度為1、7.5、20、150、400及1200μM。使用5μL的tris-HCl作為對照組。將混合物立即(5秒)轉移至HPLC以進行結合分析。另一測定組以10分鐘的平衡時間使用HPLC，與前者相同的條件，除了平衡時間延長為10分鐘以外。   細胞攝取[18 F]FBuEA-GS 3之研究
新製備的[18 F]FBuEA-GS 3以培養基(DMEM，5%FBS)稀釋於離心管，濃度為10μCi/50μL。當細胞培養於微量滴定板24小時之後，將生長培養基(500mL)替換為500mL[18 F]FBuEA-GS 3混合物，接著溫育於37℃。將放射性追蹤劑的加入時間點錯開，使得每一組可以同時收穫。在0.25、0.5、1.5、3及5小時的不同時間點，進行培養基收集。在收獲過程中，從各孔收集放射性培養基，接著用500μL的PBS沖洗兩次。將培養基及沖洗液(1.5mL)合併以進行計數；計數被視為細胞外的放射性。接著，將細胞以0.25%胰蛋白酵素-EDTA(30μL)分解，並以PBS沖洗孔兩次。將細胞及沖洗液(1.5mL)兩者合併以進行計數；計數被視為細胞內的放射性。使用伽瑪閃爍計數器(Packard 5000, Packard Instrument Co. laboratory)測量放射性，並校正衰退。全部的攝取研究的樣品在每一時間點進行三次重複。
攝取率是根據以下公式計算： 吸收率(%)=Countintracellular =Countextracellular + Countintracellular )X100% 大鼠模式
所有的體內實驗符合NHMRC台灣實驗動物管理與使用指南。在執行評估前，已獲得長庚醫院動物使用協議第2013092702和CGU12-055宣誓書批准。Sprague-Dawley(SD)大鼠(8週齡)是由台灣BioLasco動物有限公司取得。大鼠圈養於恆定的環境條件中，並且在整個實驗期間允許自由獲得食物和水。在成像研究過程中，通過吸入混於200mL/分鐘氧氣的異氟醚(Forthane，Abott)使大鼠被麻醉。涉及動物的所有研究均符合國家和機構的指導方針進行。在成像的兩個星期前，以1.0x105 C6膠質瘤細胞(美國ATCC)立體定向接種健康雄性SD大鼠於右半部。
在C6膠質瘤細胞被注射到大鼠的紋狀體之後，將動物放置在加熱墊上直到它們完全回復。當異種移植的腫瘤大小已經成長為1-2mm直徑大小，動物在控制之下由研究人員每天早晨轉移到動物設施。動物至少每天被探望以觀察疼痛或痛苦的跡象;如果動物出現昏睡，未顯示進食或飲水超過24小時，或重量損失大於20%的體重，將進行安樂死，以避免進一步的痛苦。在成像之前，所有的老鼠都貼有靜脈和動脈導管。體內異種移植的C6膠質瘤成像是在移植程序2週後，直到腫瘤體積達到了直徑3mm至5mm，與正常腦組織的邊界清楚。在動物從麻醉中恢復後進行常規口服餵養。這些動物被小心地定期監測有關餵食品質、互動及營養不良症狀。動物照護單位管控異常情況，例如在72小時內進食攝取率小於50%時，後腿輕癱或體重下降大於20%。只要滿足上述條件之一時，此動物將以***(ketamine)和甲苯噻嗪鹽酸(xylazine)組合鎮靜，隨後通過二氧化碳及靜脈注射利多卡因(xylocaine, 200mg)安樂死。 [18 F]FBuEA-GS 3的體外生物分佈
在注射活性為0.9至1.2mCi的[18 F]FBuEA-GS 3後，將14個樣本進行分離。五隻大鼠分別用於提供在注射[18 F]FBuEA-GS 3後的在15、30、60、90及120分鐘後5個時間點之試樣。試樣包括1)器官組織，如腦、肝、脾、心臟、腎、肺、結腸、小腸、胃、睾丸、顱骨及肌肉，及2)體液，如血和尿液。這些試樣被提交為利用固體閃爍計數器伽馬射線計數器(Packard 5000, Packard Instrument Co. laboratory)進行放射性計數。各試樣的計數值進一步除以樣本重量以得到最終的表達作為每個樣本重量的注射劑量百分比(%ID/g)。 HPLC 放射代謝物分析
如上述所得的2.14-2.72mCi[18 F]FBuEA-GS 3被溶於生理鹽水溶液(0.2-0.3mL)。5隻大鼠的每一隻的注射劑量範圍為每0.1mL0.9到1.14mCi，除了60分鐘實驗組用了0.3mL。在15、30、60、90及120分鐘時，從5隻大鼠的每一隻收集動脈血(2mL)。在室溫3500rpm離心5分鐘後，將上清液(0.5mL)與非放射性真實FBuEA-GS(從1mg/1mL抽取10mL)混合，隨後使用上述的梯度條件進行半製備型RP-HPLC調查。放射性層析記錄係使用放射性同位素探測器(Bioscan, Washington, DC, USA)記錄並採集。 免疫組織學染色
收集大鼠全腦並固定於4%福馬林中達48小時，隨後以石蠟包埋以進行免疫組織學染色。組織切片以5.0mm厚度分離，然後用L-PGDS專一性兔多株抗體套組(Novus，NBP1-79280)進行染色。免疫活性斑點之評估是利用辣根過氧化物酵素(HRP)檢測套組(DAKO，Glostrup，DK)。蘇木精和曙紅(Hematoxylin and eosin)染色用來評價細胞密度和腫瘤位置。 MRI成像
MRI被用於定位C6腫瘤病灶部位。大鼠被固定俯臥於一射頻線圈(38mm內徑)，並放置於一4.7-T的橫孔成像系統 (Varian Inc., Palo Alto, CA, USA)。恆定體溫利用熱氣流維持於37℃。使用初始多片梯度回波成像序列(重複時間：150ms；回波時間：3.5ms；矩陣：128x128；視場：40x40 mm2 ；片厚度：2mm)以取得軸向、冠狀面和矢狀成像平面每個7片，以及後續掃描正確定位。然後收集具有8回波和8.0 ms的回波間隔(有效回波時間，32ms)的一多片T2加權快速自旋回波掃描，其使用參數為重複時間2000ms，32x32mm視野，128x128矩陣，2mm厚度16次獲取及8冠狀切片。 PET/CT成像
PET掃描實驗是在MRI實驗後的72小時內執行，MRI實驗是用以確認經由經尾靜脈注射給予[18 F]FBuEA-GS 3成功接種腫瘤。microPET及nanoPET/CT這兩款機器都有採用。數據是以列表模式格式收集120分鐘。為進行重建，動態PET獲取在掃描進行階段被分為六個20分鐘框架。每個框架中的原始數據接著分級成三維正弦圖，有三個跨度及47個環差。使用具有16子集和四個迭代的二維有序子集期望最大化算法(two-dimensional ordered-subsets expectation-maximization algorithm)校正數據的散射及衰減。聲譜記錄被重建成0.095x0.095x0.08 立方公分像素大小的斷層圖像(128x128x95)。   結果
由平行實驗所得的非放射性FBuEA-GS 3可使用分析型掌性HPLC解析為比例為9:1的兩種異構體。為達成製備目的，由半製備型RP-HPLC純化所得的[18 F]FBuEA-GS 3的兩種異構體混合物被立即用於所有實驗中，包括放射配體酵素結合測定、細胞攝取研究、體外生物分佈實驗及體內PET研究。從一系列實驗可知，[18 F]FBuEA-GS 3可由[18 F]F2 獲得(轟擊結束，end of bombardment(EOB))，最終的放射化學產率為5%。其特定活性和放射化學純度分別被測定為33 GBq/μmol和98%(圖1b)。 PGD2 生產之競爭性抑制劑FBuEA-GS的生物測定。
迄今為止，除了AT-56(IC50 =95μM,  dibenzocycloheptenyl tetrazolyl piperidine)之外，目前L-PGDS並無有效抑制劑。測試是在競爭性PGD2-乙酰膽鹼酯酵素偶聯物存在下經由間接測定PGD2形成的方式執行，其中乙酰膽鹼酯酵素裂解乙酰膽鹼及受質 5,59-dithiobis(2-nitrobenzoic acid)而產生成色的5-硫基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoic)，其可見光吸光度波長最大值λmax 為412 nm。
根據AT-56的IC50 值，需要200 μM受質的工作濃度，以確保AT-56可用作正向對照(圖2)。尿苷(uridine, 5.6±14.3%)具有相對大的偏差反映了順序測定法之複雜性。所觀察到的抑制作用相比於先前研究所觀察的相對較高。相較於表現出完全抑制的正向對照AT-56(97.6±16.0%)，FBuEA-GS 3(74.1±4.8%)的數據為顯著。 放射性配體酵素結合測定
L-PGDS催化***素H2 (prostaglandin H2 , PGH2 )之氧化作用，PGH2 為花生四烯酸(arachidonic acid, AA)經由COX酵素的催化和還原所得到的代謝產物(也稱為***素)。為了進行比較，本發明亦採用L-PGDS的相對應部分mPGES-1，其可由COX衍生的PGH2催化形成PGE2。GST酵素催化GSH與[18 F]FBuEA 2共軛結合，而未有任何顯著地與其代謝產物[18 F]FBuEA-GS 3結合。因此，GST-P1和GST-A1-1酵素僅被用作負向對照。酵素的特定活性按以下順序為：COX-1(20單位/μL)＞COX-2(7.8單位/μL)＞mPGES-1(2.2單位/μL)＞＞L-PGDS(2.461023單位/μL)＞GST-P1≈GSTA1-1(5x10-4 單位/μL)。     表一、本發明之一實例之[18 F]FBuEA-GS 3對酵素之結合比例。
有趣的是，mPGES-1較L-PGDS具有1000倍更大的特定活性比，但並未表現出任何的結合親和力。GSTA1-1和GSTP1的弱結合親和力無法以較低的特定活性解釋，因為L-PGDS具有相似的特定活性(超過5倍)並表現出顯著的結合能力。 生物測試
相較於正常細胞，[18 F]FBuEA-GS 3在腫瘤細胞中具有更高的放射性積累(9% vs. 6%，圖未示)。雖然C6膠質瘤纖維母細胞的追蹤劑攝取差異是統計誤差範圍內(P＜0.001(0分鐘)，p＜0.05(其他時間點)，但在C-6膠質瘤細胞的積累水平較高。累積模式亦與[18 F]FBuEA 2不盡相同，其中[18 F]FBuEA 2在腫瘤細胞的攝取相對於正常細胞為低(圖未示)。在達到穩定狀態(約15分鐘)後，仍可維持在腫瘤細胞的優先積累放射性，但此後便逐漸下降。[18 F]FBuEA-GS 3的體內半生期(t1/2 )被測定為60分鐘。
基於半衰期為1小時，在2小時動態研究中使用體內PET成像(使用micro PET)，並測定大鼠體內的放射性分佈(圖3)。收集14個不同的組織樣本以研究大鼠中注射1.0-1.5mCi[18 F]FBuEA-GS 3的生物分佈。放射性主要位於***系統。在大腦中僅發現微量的化合物3 (0.05% ID/g)。由於PET具有定量特性，因此可以區分腫瘤和正常組織的放射活性。接著將[18 F]FBuEA-GS 3評做為成像患有腦瘤的大鼠的成像追蹤劑(圖4)。腫瘤被成功接種於腦的右上部，並通過MRI成像證實。然後同一隻大鼠被取用以量測由[18 F]FBuEA-GS 3所發出的γ光子，其中[18 F]FBuEA-GS 3是在MRI成像之後72小時內注入。從三個截面的重建圖像顯示與MRI成像檢測的腫瘤區域相吻合的明顯熱點。由0-120分的動態PET圖像指出腫瘤及非腫瘤病灶區域的訊號強度伴隨地下降。成像結果與體外放射性積累的研究結果相符(圖3a)。成像實驗已對兩隻不同的C6神經膠質瘤大鼠使用兩台PET掃描機器進行兩次獨立實驗。兩隻大鼠的腫瘤病灶的放射性積累水平兩者為顯而易見的，但尚未進行定量比較。
以上所述之實施例僅是為說明本發明之技術思想及特點，其目的在使熟習此項技藝之人士能夠瞭解本發明之內容並據以實施，當不能以之限定本發明之專利範圍，即大凡依本發明所揭示之精神所作之均等變化或修飾，仍應涵蓋在本發明之專利範圍內。
無
圖1a至1c顯示使用掌性分析RP-HPLC及半製備型RP-HPLC之分析效果。其中圖1a顯示非放射性FBuEA-GS 3之外消旋混合物藉由掌性分析RP-HPLC解析為兩個部分。主峰和次峰代表兩種異構體的存在。注射體積：0.01mL，樣品濃度為1 mg/0.2mL。圖1b顯示[18 F]FBuEA-GS 3在以半製備型RP-HPLC純化後所具有的典型層析圖。注射體積：0.01 mL，純化後的樣品濃度：440μCi/0.2 mL。圖1c顯示純化後的[18 F] FBuEA-GS 3與真實樣品共混合後使用半製備型RP-HPLC所產生的HPLC層析圖。注射量為0.2 mL，真實樣品濃度為 0.02 mg/0.2 mL。
圖2顯示在200μM測試化合物存在時的抑制由PGH2 形成PGD2 之效果。
圖3顯示大鼠體中[18 F]FBuEA-GS 3分佈的體外分析。
圖4a至4b顯示C6神經膠質瘤大鼠腦部的PET及MRI影像。其中圖4a顯示20至40分鐘之三個方向橫截面所拍攝的動態PET影像。右下角為MRI影像。圖4b為不同時間之冠狀截面影像(注射[18 F]FBuEA-GS3後的10-30分、30-60分、60-90分、90-120分)。注射劑量：1.58 mCi/0.5 mL。
無

Claims (7)

  1. 一種正子放射斷層造影追蹤劑，用以成像過度表現載脂蛋白型***素D合成酶(Lipocalin-type prostaglandin D synthase, L-PGDS)之腫瘤或腦神經細胞之用途，其具有下列代表式或其醫藥可接受之鹽：
  2. 如請求項1所述之正子放射斷層造影追蹤劑，其中該過度表現L-PGDS之腫瘤為腦癌。
  3. 如請求項1所述之正子放射斷層造影追蹤劑，其中該正子放射斷層造影追蹤劑為掌性。
  4. 一種成像過度表現載脂蛋白型***素D合成酶(Lipocalin-type prostaglandin D synthase, L-PGDS)之腫瘤或神經細胞之方法，包含：       對一受試者投予具有下列代表式之化合物或其醫藥可接受之鹽；以及對該受試者執行正子放射斷層造影以成像過度表現L-PGDS之腫瘤或腦神經病變。
  5. 如請求項4所述之成像過度表現載脂蛋白型***素D合成酶之腫瘤或神經病變之方法，其中該過度表現L-PGDS之腫瘤為腦癌。
  6. 如請求項4所述之成像過度表現載脂蛋白型***素D合成酶之腫瘤或神經病變之方法，其中該正子放射斷層造影追蹤劑為掌性。
  7. 如請求項4所述之成像過度表現載脂蛋白型***素D合成酶之腫瘤或神經病變之方法，其中該神經病變為阿茲海默症。
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