TW201408319A - 用於治療法布瑞氏症的α－半乳糖苷酶Ａ及１－脫氧野尻霉素（１－ＤＥＯＸＹＧＡＬＡＣＴＯＮＯＪＩＲＩＭＹＣＩＮ）之共調配物 - Google Patents

用於治療法布瑞氏症的α－半乳糖苷酶Ａ及１－脫氧野尻霉素（１－ＤＥＯＸＹＧＡＬＡＣＴＯＮＯＪＩＲＩＭＹＣＩＮ）之共調配物 Download PDF

Info

Publication number
TW201408319A
TW201408319A TW102125649A TW102125649A TW201408319A TW 201408319 A TW201408319 A TW 201408319A TW 102125649 A TW102125649 A TW 102125649A TW 102125649 A TW102125649 A TW 102125649A TW 201408319 A TW201408319 A TW 201408319A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
gal
dgj
formulation
administered
enzyme
Prior art date
Application number
TW102125649A
Other languages
English (en)
Other versions
TWI594763B (zh
Inventor
Richie Khanna
Kenneth Joseph Valenzano
Susan Elizabeth Fowles
Original Assignee
Amicus Therapeutics Inc
Glaxosmithkline Ip Dev Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Amicus Therapeutics Inc, Glaxosmithkline Ip Dev Ltd filed Critical Amicus Therapeutics Inc
Publication of TW201408319A publication Critical patent/TW201408319A/zh
Application granted granted Critical
Publication of TWI594763B publication Critical patent/TWI594763B/zh

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46—Hydrolases (3)
    • A61K38/47—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2), e.g. cellulases, lactases
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2465—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1) acting on alpha-galactose-glycoside bonds, e.g. alpha-galactosidase (3.2.1.22)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01022—Alpha-galactosidase (3.2.1.22)

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本申請案提供包含α-半乳糖苷酶A組合該α-半乳糖苷酶A之活性位點特異性帶位子(chaperone)之組合物，以及治療有需要個體之法布瑞氏症(Fabry disease)之方法，其包括向該個體投與該等組合物之方法。本申請案亦提供增加α-半乳糖苷酶A酶調配物之活體外及活體內穩定性之方法。

Description

用於治療法布瑞氏症的α-半乳糖苷酶A及1-脫氧野尻霉素(1-DEOXYGALACTONOJIRIMYCIN)之共調配物 相關申請案之交叉參考
本申請案主張2012年7月17日申請之美國臨時申請案第61/672,566號之優先權，其係以全文引用方式併入本文中。
本申請案係關於包含α-半乳糖苷酶A酶與1-脫氧半乳糖野尻黴素之共調配物之組合物，且係關於藉由向需要治療之個體投與該等共調配物來治療、預防及/或改善法布瑞氏症(Fabry Disease)之方法。本申請案亦係關於可用於治療法布瑞氏症之組合物及醫藥。
法布瑞氏症係進行性、X染色體連鎖性之鞘糖脂代謝先天性差錯，其係因α-Gal A基因(GLA)中之突變所致之胞溶體酶α-半乳糖苷酶A(α-Gal A)之缺陷而引起。儘管係X染色體連鎖性病症，但女性可表現不同的臨床表現程度。法布瑞氏症係罕見疾病，且據估計其發病率介於1/40,000男性至1/117,000總人群之間。此外，存在法布瑞氏症之晚發性表型之變化形式，該等變化形式因其不呈現經典體徵及症狀而可能診斷不足。此及針對法布瑞氏症之新生兒篩選之研究表明，法布瑞氏症之實際發病率可能高於目前所估計之發病率。
該疾病之臨床表現可能與殘餘α-Gal A含量相關。未經治療之法布瑞氏症患者之預期壽命有所降低，且通常在第4個或第5個十年中發生死亡，此乃因血管疾病影響腎臟、心臟及/或中樞神經系統。酶缺陷致使受質球形三醯神經醯胺(globotriaosylceramide,GL-3)在遍及身體各處之血管內皮及內臟組織中發生細胞內累積。由於鞘糖脂沈積，故通常在生命之第3個至第5個十年中出現腎功能逐步惡化且發生氮血症，但可能早在第2個十年中發生。在半合子(男性)及雜合子(女性)患者二者中均發現腎損傷。
在大多數男性及許多女性中均發生心臟疾病。早期心臟發現包括左心室擴大、瓣膜損害及傳導異常。二尖瓣閉鎖不全(mitral insufficiency)係最常發的瓣膜損傷，其通常出現在兒童或青少年中。腦血管表現主要係由多病灶性小血管損害引起且可包括血栓形成、暫時性腦缺血、腦底動脈缺血及動脈瘤、癲癇發作、偏癱、半身麻木、失語症、迷路性病症或大腦出血。腦血管表現之平均發作年齡為33.8歲。隨年齡增加可表現出人格改變及精神病行為。
目前批準之對法布瑞氏症之治療係酶替代療法(「ERT」)。目前有兩種α-Gal A產品可用於治療法布瑞氏症：阿加糖酶α(agalsidase alfa)(Replagal®，Shire Human Genetic Therapies)及阿加糖酶β(Fabrazyme®；Genzyme公司)。ERT之該兩種形式意欲利用该等酶之重組形式(其以靜脈內方式投與)來補償患者之不充足的α-Gal A活性。儘管ERT在許多情形下有效，但該治療亦具有限制性。ERT尚未證明會降低中風之風險，心肌響應緩慢，且GL-3自腎臟之一些細胞類型之消除受到限制。一些患者對ERT產生免疫反應。
1-脫氧半乳糖野尻黴素及其鹽1-脫氧半乳糖野尻黴素鹽酸鹽(亦以其美國採用的名稱(USAN)米加司他(migalastat)鹽酸鹽而為人所知)藉由選擇性地結合至酶而用作突變體α-Gal A之藥理學帶位子 (chaperone)，由此增加該酶之穩定性且有助於該酶摺疊成其正確的三維形狀。此對α-Gal A之穩定作用容許細胞之品質控制機構識別適當摺疊之酶，從而使得酶至溶酶體之運輸有所增加，從而容許該酶實現其預期的生物學功能，即代謝GL-3。由於恢復α-Gal A自ER至溶酶體之適當運輸，故米加司他鹽酸鹽亦降低錯誤摺疊蛋白於ER中之累積，此可減輕對細胞之應力及一些可為法布瑞氏症之促成因子之類發炎性反應。已實施米加司他鹽酸鹽之多種活體外及活體內臨床前研究以及臨床研究。已顯示米加司他鹽酸鹽增加細胞內α-Gal A蛋白之量且增強突變體酶至溶酶體之輸送。
本申請案係關於用於治療法布瑞氏症之組合物，其包含α-半乳糖苷酶A(α-Gal A)酶(例如，重組人類α-Gal A(rhα-Gal A))以及α-Gal A酶之活性位點特異性帶位子(ASSC)(例如，1-脫氧半乳糖野尻黴素(DGJ))。
本申請案亦係關於治療法布瑞氏症之方法，其係藉由向需要該治療之個體投與α-Gal A酶以及α-Gal A酶之活性位點特異性帶位子(ASSC)(例如，1-脫氧半乳糖野尻黴素(DGJ))來達成。
本申請案亦提供用於治療法布瑞氏症之包含α-Gal A酶與α-Gal A酶之活性位點特異性帶位子(ASSC)(例如，1-脫氧半乳糖野尻黴素(DGJ))之經組合調配物。
本申請案亦提供α-Gal A酶及α-Gal A酶之活性位點特異性帶位子(ASSC)(例如，1-脫氧半乳糖野尻黴素(DGJ))之用途，其用以製備用於治療法布瑞氏症之醫藥，其中該治療包含向有需要之個體投與包含α-Gal A酶與α-Gal A酶之ASSC之共調配物之組合物。
在特定實施例中，1-脫氧半乳糖野尻黴素係1-脫氧半乳糖野尻黴素-鹽酸鹽(DGJ-HCl)，其亦稱為米加司他鹽酸鹽。在一個實施例中， α-Gal A酶係阿加糖酶α或阿加糖酶β。
在某些實施例中，將α-Gal A酶與DGJ組合以產生共調配物，之後投與個體。
在某些實施例中，提供α-Gal A酶與α-Gal A酶之活性位點特異性帶位子(ASSC)(例如，1-脫氧半乳糖野尻黴素(DGJ))之共調配物以進行非經腸投與。在一個實施例中，藉由單一或重複靜脈內推注(bolus injection)來投與共調配物。在一個實施例中，藉由靜脈內輸注來投與共調配物。
在某些實施例中，α-Gal A酶係與介於約0.5μM與約20μM之間之濃度之DGJ組合。在某些實施例中，α-Gal A酶係與約1.2μM、2μM、4μM、8μM或12μM之濃度之DGJ組合。
在某些實施例中，DGJ係與介於約50μM與約20,000μM之間之濃度之α-Gal A酶組合。在某些實施例中，DGJ係與約449μM、748μM、1,495μM、4,490μM或14,950μM之濃度之α-Gal A酶組合。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約1.2μM α-Gal A酶及約449μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約1.2μM α-Gal A酶及約748μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約1.2μM α-Gal A酶及約1,495μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約1.2μM α-Gal A酶及約4,490μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約1.2μM α-Gal A酶及約14,950μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約2μM α-Gal A酶及約449μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約2μM α-Gal A酶及約748μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約2μM α-Gal A酶及約1,495μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約2μM α-Gal A酶及約4,490μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約2μM α-Gal A酶及約14,950μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約4μM α-Gal A酶及約449μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約4μM α-Gal A酶及約748μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約4μM α-Gal A酶及約1,495μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約4μM α-Gal A酶及約4,490μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約4μM α-Gal A酶及約14,950μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約8μM α-Gal A酶及約449μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約8μM α-Gal A酶及約748μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約8μM α-Gal A酶及約1,495μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約8μM α-Gal A酶及約4,490μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約8μM α-Gal A酶及約14,950μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約12μM α-Gal A酶及約449μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約12μM α-Gal A酶及約748μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約12μM α-Gal A酶及約1,495μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約12μM α-Gal A酶及約4,490μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含約12μM α-Gal A酶及約14,950μM DGJ。
本發明亦提供介於約0.5μM與約20μM間之α-Gal A及介於約50μM與約20,000μM間之DGJ或其醫藥上可接受之鹽之共調配物之用途，其用以製備用於治療法布瑞氏症之醫藥，其中該醫藥經調配以供非經腸投與個體。
本發明亦提供約1.2μM、2μM、4μM、8μM或12μM α-Gal A及約449μM、748μM、1,495μM、4,490μM或14,950μM DGJ或其醫藥上可接受之鹽之共調配物之用途，其用以製備用於治療法布瑞氏症之醫藥，其中該醫藥經調配以供非經腸投與個體。
本發明亦提供用於治療法布瑞氏症之包含介於約0.5μM與約20μM間之α-Gal A及介於約50μM與約20,000μM間之DGJ或其醫藥上可接受之鹽之共調配物，其中該共調配物係以非經腸方式投與。
本發明亦提供用於治療法布瑞氏症之包含約1.2μM、2μM、4μM、8μM或12μM α-Gal A及約449μM、748μM、1,495μM、4,490μM或14,950μM DGJ或其醫藥上可接受之鹽之共調配物，其中該共調 配物係以非經腸方式投與。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生DGJ對α-Gal A酶之莫耳比如下之共調配物：介於約13,000：1與約50：1之間，或介於約10,000：1與約75：1之間，或介於約1,000：1與約100：1之間。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之共調配物之α-Gal A酶之劑量介於約0.1mg/kg與約5mg/kg之間。在某些實施例中，投與個體之共調配物之α-Gal A酶之劑量為約0.3mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、2mg/kg或3mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之共調配物之DGJ之劑量介於約0.1mg/kg與約15mg/kg之間。在某些實施例中，投與個體之共調配物之DGJ之劑量為約0.1mg/kg、0.3mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、3mg/kg或10mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約0.3mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約0.1mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約0.3mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約0.3mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約0.3mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約0.5mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約0.3mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約1mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約0.3mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約3mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約0.3mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約10mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約0.5mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約0.1mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約0.5mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約0.3mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約0.5mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約0.5mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約0.5mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約1mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約0.5mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約3mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約0.5mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約10mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約1mg/kg，且投與個 體之DGJ之劑量為約0.1mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約1mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約0.3mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約1mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約0.5mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約1mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約1mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約1mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約3mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約1mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約10mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約2mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約0.1mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約2mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約0.3mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約2mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約0.5mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之 共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約2mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約1mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約2mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約3mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約2mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約10mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約3mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約0.1mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約3mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約0.3mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約3mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約0.5mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約3mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約1mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約3mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約3mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之α-Gal A酶之劑量為約3mg/kg，且投與個體之DGJ之劑量為約10mg/kg。
本發明亦提供α-Gal A與DGJ或其醫藥上可接受之鹽之共調配物 之用途，其用以製備用於治療法布瑞氏症之醫藥，其中該醫藥經調配以供非經腸投與個體，且其中該共調配物之α-Gal A經調配用於以介於約0.1mg/kg與約0.5mg/kg之間之量投與，且該共調配物之DGJ經調配用於以介於約0.1mg/kg與約15mg/kg之間之量投與。
本發明亦提供α-Gal A與DGJ或其醫藥上可接受之鹽之共調配物之用途，其用以製備用於治療法布瑞氏症之醫藥，其中該醫藥經調配以供非經腸投與個體，且其中該共調配物之α-Gal A經調配用於以約0.3mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、2mg/kg或3mg/kg之量投與，且該共調配物之DGJ經調配用於以約0.1mg/kg、0.3mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、3mg/kg或10mg/kg之量投與。
本發明亦提供用於治療法布瑞氏症之包含α-Gal A與DGJ或其醫藥上可接受之鹽之共調配物，其中該共調配物係以非經腸方式投與，且其中該共調配物之α-Gal A係以介於約0.1mg/kg與約0.5mg/kg之間之量投與，且該共調配物之DGJ係以介於約0.1mg/kg與約15mg/kg之間之量投與。
本發明亦提供用於治療法布瑞氏症之包含α-Gal A與DGJ或其醫藥上可接受之鹽之共調配物，其中該共調配物係以非經腸方式投與，且其中該共調配物之α-Gal A係以約0.3mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、2mg/kg或3mg/kg之量投與，且該共調配物之DGJ係以約0.1mg/kg、0.3mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、3mg/kg或10mg/kg之量投與。
根據本申請案之一個態樣，提供增強α-Gal A至法布瑞氏症個體之組織(例如心臟、腎臟或皮膚組織)之遞送之方法。該等方法包括以靜脈內方式向個體投與α-Gal A以及ASSC，其中α-Gal A及ASSC係存於共調配物中。在一些實施例中，α-Gal A以及ASSC係以下列劑量投與：足以在投與該劑量後約24小時內在個體之血漿及/或組織中產生α-Gal A之峰值濃度。在一些實施例中，α-Gal A以及ASSC係以下列劑 量投與：足以在投與該劑量後約0.2小時至約50小時或約40小時、30小時、20小時、10小時、5小時、1小時、0.5小時或更少小時內在個體之血漿及/或組織中產生α-Gal A之峰值濃度。在一些實施例中，劑量在個體之肝中不產生有毒含量之α-Gal A。
本申請案另外提供增加呈適當構形之α-Gal A酶在活體內及活體外之穩定性之方法。在一個實施例中，向需要該治療之個體投與α-Gal A酶(例如，重組人類α-Gal A(rhα-Gal A))以及α-Gal A酶之ASSC(例如，1-脫氧半乳糖野尻黴素)。α-Gal A酶在與ASSC組合時之構形較穩定且極適合經受(例如)熱及pH挑戰。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物在等於或大於約pH 5、6或7之pH下穩定。
在某些實施例中，本申請案之共調配物在延長之時段內維持物理及化學穩定性，且具有適於靜脈內投與之黏度。
在各種非限制性實施例中，α-Gal A酶之ASSC係α-Gal A酶之小分子抑制劑，包括α-Gal A酶之可逆競爭性抑制劑。
在一個特定非限制性實施例中，ASSC係1-脫氧半乳糖野尻黴素(DGJ)或1-脫氧半乳糖野尻黴素之醫藥上可接受之鹽、酯或前藥。在一個實施例中，鹽係鹽酸鹽(即，1-脫氧半乳糖野尻黴素-HCl)。
在一個特定的非限制性實施例中，提供重組人類α-Gal A(rhα-Gal A)與1-脫氧半乳糖野尻黴素-HCl之組合調配物用於以0.3mg/kg rhα-Gal A及0.1mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供重組人類α-Gal A(rhα-Gal A)與1-脫氧半乳糖野尻黴素-HCl之組合調配物用於以0.3mg/kg rhα-Gal A及0.3mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以0.3mg/kg rhα-Gal A及0.5mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以0.3mg/kg rhα-Gal A及1mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以0.3mg/kg rhα-Gal A及3mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以0.3mg/kg rhα-Gal A及10mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以0.5mg/kg rhα-Gal A及0.1mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以0.5mg/kg rhα-Gal A及0.3mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以0.5mg/kg rhα-Gal A及0.5mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以0.5mg/kg rhα-Gal A及1mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以0.5mg/kg rhα-Gal A及3mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要 之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以0.5mg/kg rhα-Gal A及10mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以1mg/kg rhα-Gal A及0.1mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以1mg/kg rhα-Gal A及0.3mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以1mg/kg rhα-Gal A及0.5mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以1mg/kg rhα-Gal A及1mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以1mg/kg rhα-Gal A及3mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以1mg/kg rhα-Gal A及10mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以2mg/kg rhα-Gal A及0.1mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以2mg/kg rhα-Gal A及0.3 mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以2mg/kg rhα-Gal A及0.5mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以2mg/kg rhα-Gal A及1mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以2mg/kg rhα-Gal A及3mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以2mg/kg rhα-Gal A及10mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以3mg/kg rhα-Gal A及0.1mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以3mg/kg rhα-Gal A及0.3mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以3mg/kg rhα-Gal A及0.5mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以3mg/kg rhα-Gal A及1mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以3mg/kg rhα-Gal A及3mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
在另一實施例中，提供共調配物用於以3mg/kg rhα-Gal A及10mg/kg 1-脫氧半乳糖野尻黴素(呈HCl鹽形式)之劑量靜脈內投與有需要之患者。
本發明亦提供α-Gal A及DGJ或其醫藥上可接受之鹽之共調配物之用途，其用以製備用於治療法布瑞氏症之醫藥，其中該醫藥經調配以供靜脈內投與個體，且其中該共調配物之α-Gal A經調配用於以約0.3mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、2mg/kg或3mg/kg之量投與，且該共調配物之DGJ(呈HCl鹽形式)經調配用於以約0.1mg/kg、0.3mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、3mg/kg或10mg/kg之量投與。
本發明亦提供用於治療法布瑞氏症之包含α-Gal A與DGJ或其醫藥上可接受之鹽之共調配物，其中該共調配物係以靜脈內方式投與，且其中該共調配物之α-Gal A係以約0.3mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、2mg/kg或3mg/kg之量投與，且該共調配物之DGJ(呈HCl鹽形式)係以約0.1mg/kg、0.3mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、3mg/kg或10mg/kg之量投與。
本申請案亦提供用於治療個體中之法布瑞氏症之套組，該套組包含介於約0.5μM與20μM之間之α-Gal A酶，及介於約50μM與約20,000μM之間之1-脫氧半乳糖野尻黴素。
圖1顯示在IV輸注投與α-Gal A或α-Gal A與DGJ-HCl之共調配物後WT小鼠中之α-Gal A(JR-051)之血漿PK，如實例1中所述。(DGJ或1-脫氧半乳糖野尻黴素亦稱作「AT1001」)。共調配組合物在圖形中稱作「COF」。
圖2顯示如在IV輸注投與α-Gal A或α-Gal A與DGJ-HCl之共調配物後在WT小鼠中藉由西方墨點(Western blot)所量測之血漿中α-Gal A(JR-051)之含量，如實例1中所述。「+」：1mg/kg JR-051；「-」：無化合物(JR-051或DGJ或二者)。
圖3A-B顯示在IV輸注投與α-Gal A或α-Gal A與DGJ-HCl之共調配物後WT小鼠中之(A)腎臟及(B)心臟組織中之α-Gal A(JR-051)之組織吸收，如實例1中所述。
圖4顯示在IV輸注投與α-Gal A或α-Gal A與DGJ-HCl之共調配物後GLA KO小鼠中之α-Gal A(JR-051)之血漿PK，如實例2中所述。共調配組合物在圖形中稱作「COF」。
圖5A-C顯示在IV輸注投與α-Gal A或α-Gal A與DGJ-HCl之共調配物後GLA KO小鼠之心臟組織中之α-Gal A(JR-051)之GL-3降低(A)及(C)及組織吸收(B)，如實例2中所述。
圖6顯示在IV輸注投與α-Gal A或α-Gal A與DGJ-HCl之共調配物後GLA KO小鼠之心臟組織中之GL-3降低(降低%)，如實例2中所述。
圖7A-C顯示在IV輸注投與α-Gal A或α-Gal A與DGJ-HCl之共調配物後GLA KO小鼠之腎臟組織中之α-Gal A(JR-051)之GL-3降低(A)及(C)及組織吸收(B)，如實例2中所述。
圖8顯示在IV輸注投與α-Gal A或α-Gal A與DGJ-HCl之共調配物後GLA KO小鼠之腎臟組織中之GL-3降低(降低%)，如實例2中所述。
圖9A-B顯示利用或不利用DGJ調配之α-Gal A在人類活體內全血中之穩定性。共調配α-Gal A(JR-051)與DGJ-HCL增加酶在血液中之穩定性，且防止損失酶活性。
圖10A-H顯示源於法布瑞氏症患者之纖維母細胞中之α-Gal A吸收(A-D)及GL-3降低(E-H)。纖維母細胞表現R301Q(A、C、E及G)或C52S(B、D、F及H)突變。利用單獨或與0.1μM、1.0μM、10μM或 100μM DGJ調配之α-Gal A(JR-051或Fabrazyme)來培養細胞。
圖11A-C顯示在將單獨或呈與DGJ之共調配物形式之α-Gal A投與GLA KO小鼠後在皮膚、心臟及腎臟中之GL-3降低%，如實例3中所述。數據正規化為未經治療之KO及WT小鼠組織中之GL-3含量；降低%=100%-未經治療之%。
為清楚說明起見且不具有限制性，將此實施方式劃分為以下子部分：(i)定義；(ii)酶替代療法；(iii)醫藥組合物；(iv)利用ERT及ASSC治療法布瑞氏症；(v)活體外穩定性；及(vi)活體內穩定性。
定義
在本申請案之上下文中及在使用各術語之具體上下文中，此說明書中所用術語通常具有其在業內之普通含義。某些術語在下文或在本說明書其他地方進行論述，以在闡述本申請案之組合物及方法及如何製備該等組合物及使用該等方法中為從業人員提供額外指導。
術語「法布瑞氏症」係指經典法布瑞氏症、晚發性法布瑞氏症以及在編碼α-半乳糖苷酶A(α-Gal A)之基因中具有突變之半合子女性。如本文所使用，術語「法布瑞氏症」進一步包括個體展現低於正常內源性α-Gal A之活性之任何病況。
「1-脫氧半乳糖野尻黴素」(DGJ)係指(2R,3S,4R,5S)-2-(羥甲基)六氫吡啶-3,4,5-三酶。如本文所使用，通篇引用之「1-脫氧半乳糖野尻黴素」或「DGJ」或「AT1001」包括其游離鹼及任何醫藥上可接受 之鹽形式。DGJ之鹽酸鹽稱為米加司他鹽酸鹽。
術語「α-半乳糖苷酶A」或「α-Gal A」係指具有包含α-D-半乳糖苷(包括半乳糖寡糖、半乳甘露聚糖及半乳糖脂)之非還原末端α-D-半乳糖殘基之水解之酶性活性之蛋白質。在某些實施例中，α-Gal A包含由IUBMB酶命名法EC 3.2.1.22闡述之酶(例如參見，http：//www.chem.qmul.ac.uk/iubmb/enzyme/EC3/2/1/22.html；Suzuki等人，α-Galactosidase from Mortierella vinacea.Crystallization and propertties.J.Biol.Chem.245(1970)781-786；及Wiederschain,G.及Beyer,E.[Interrelation of α-D-fucosidase and α-D-galactosidase Activities in man and animals]。Dokl.Akad.Nauk S.S.S.R.231(1976)486-488)。在某些實施例中，α-Gal A包含由包含人類GLA基因(例如，由GenBank登錄號NM_000169界定之人類GLA基因)之核酸編碼之蛋白質。在某些實施例中，α-Gal A包含包括由GenBank登錄號NP_000160界定之胺基酸序列之蛋白質。
在某些實施例中，α-Gal A可自以內源性方式表現α-Gal A之細胞獲得，或α-Gal A可為重組人類α-Gal A(rhα-Gal A)，如本文所述。在一個非限制性實施例中，rhα-Gal A係全長野生型α-Gal A。在其他非限制性實施例中，rhα-Gal A包含存於野生型α-Gal A中之胺基酸殘基之子集，其中該子集包括形成用於受質結合及/或受質降低之活性位點之野生型α-Gal A之胺基酸殘基。因此，本發明涵蓋為包含用於受質結合及/或受質降低之野生型α-Gal A活性位點以及可或可不存於野生型α-Gal A中之其他胺基酸殘基之融合蛋白之rhα-Gal A。
α-Gal A可自商業來源獲得或可藉由熟習此項技術者所知之合成技術獲得。野生型酶可自重組細胞表現系統(例如，哺乳動物細胞(例如CHO細胞)或昆蟲細胞，通常參見頒予Desnick等人之美國專利第5,580,757號；頒予Selden等人之美國專利第6,395,884號及第6,458,574 號；頒予Calhoun等人之美國專利第6,461,609號；頒予Miyamura等人之美國專利第6,210,666號；及頒予Selden等人之美國專利第6,083,725號)、人類胎盤或動物乳液純化。
獲得適於醫藥應用之α-Gal A之其他合成技術可參見(例如)頒予Lebowitz等人之美國專利第7,560,424號及美國專利第7,396,811號；頒予Lebowitz等人之美國公開申請案第2009/0203575號、第2009/0029467號、第2008/0299640號、第2008/0241118號、第2006/0121018號及第2005/0244400號；美國專利第7,423,135號、第6,534,300號及第6,537,785號；國際公開申請案第2005/077093號及美國公開申請案第2007/0280925號及第2004/0029779號。該等參考文獻係以全文引用方式併入本文中。
在某些實施例中，α-Gal A係阿加糖酶α，其係藉由遺傳改造技術在人類細胞系中產生。阿加糖酶α可以Replagal®形式自Shire Plc.(Dublin,Ireland)購得。
在某些實施例中，α-Gal A係阿加糖酶β，其係藉由重組DNA技術在中國倉鼠卵巢(CHO)細胞系中產生。阿加糖酶β可以Fabrazyme®形式自Genzyme公司(Cambridge,MA)購得。
在某些實施例中，α-Gal A係重組人類α-Gal A，其係在以編碼人類α-Gal A基因之表現載體轉化之CHO細胞中產生(JCR Pharmaceuticals Co.Ltd,(Japan))，其識別為JR-051。
除包含與本文所述人類α-Gal A蛋白相同之胺基酸序列之蛋白質以外，此揭示亦涵蓋與該人類α-Gal A蛋白「實質上類似」之α-Gal A蛋白。本文中所述與參考蛋白「實質上類似」之蛋白質包括以下蛋白質：保持天然蛋白之某些結構及功能特徵，但在一或多個胺基酸位置不同於天然胺基酸序列(即由胺基酸取代)。
自天然序列改變之蛋白質可由取代天然蛋白內之胺基酸殘基並 選擇具有期望活性之蛋白質製備。例如，可用其他殘基來系統地取代α-Gal A蛋白之胺基酸殘基，及然後可在標準分析中測試經取代蛋白質，以評估該等取代對蛋白質水解α-D-半乳糖苷(包括半乳糖寡糖、半乳甘露聚糖及半乳糖脂)中之末端非還原α-D-半乳糖殘基之能力；及/或治療或預防法布瑞氏症能力之效應。
在一些實施例中，為保持功能活性，實施保守胺基酸取代。如本文所使用，語言「保守胺基酸取代」意欲包括胺基酸殘基經具有類似側鏈之胺基酸殘基替代之取代。業內已界定具有類似側鏈之胺基酸殘基之家族，包括鹼性側鏈(例如離胺酸、精胺酸、組胺酸)、酸性側鏈(例如天冬胺酸、麩胺酸)、不帶電之極性側鏈(例如甘胺酸、天冬醯胺酸、麩醯胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、酪胺酸、半胱胺酸)、非極性側鏈(例如丙胺酸、纈胺酸、白胺酸、異白胺酸、脯胺酸、***酸、甲硫胺酸、色胺酸)、β-分枝側鏈(例如蘇胺酸、纈胺酸、異白胺酸)及芳香族側鏈(例如酪胺酸、***酸、色胺酸、組胺酸)。其他取代涉及一胺基酸殘基用具有小側鏈之另一殘基(例如丙胺酸或甘胺酸)替代。胺基酸取代之肽可由標準技術(諸如自動化化學合成)製備。
在一個實施例中，本揭示內容之α-Gal A蛋白與本文所述或業內已知之α-Gal A蛋白之胺基酸序列同源至少約70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%。
如本文所使用，兩個胺基酸序列間之同源性%等效於兩個序列間之一致性%。兩個序列間之一致性%係該等序列共有之一致位置數之函數(即，同源性%=一致位置之數量/總位置數量×100)，其中應慮及為達成兩個序列之最佳比對而需要引入之空位數及各空位長度。
例如，兩種胺基酸序列間之一致性%可如下來測定：使用已納入 至ALIGN程序(第2.0版)中之E.Meyers及W.Miller之算法(Comput.Appl.Biosci.,4：11-17(1988))，使用PAM120加權殘基表(weight residue table)、空位長度罰分12及空位罰分4。此外，兩個胺基酸序列間之一致性%可如下來測定：使用已納入至GCG軟體包中之空位程序中之Needleman及Wunsch(J.Mol.Biol. 48：444-453(1970))算法，使用Blossum 62矩陣或PAM250矩陣，及空位加權16、14、12、10、8、6或4及長度加權1、2、3、4、5或6。
另外或另一選擇為，本揭示內容之蛋白質序列另外可用作「查詢序列」以對公用數據庫實施搜尋，例如，以識別相關序列。可使用(例如)Altschul等人(1990)J.Mol.Biol. 215：403-10之XBLAST程序(第2.0版)實施該等搜尋。為獲得空位比對用於比較目的，可利用空位BLAST，例如，如Altschul等人(1997)Nucleic Acids Res. 25(17)：3389-3402中所述。當利用BLAST及空位型BLAST程序時，可使用各別程序(例如，XBLAST及NBLAST)之預設參數。參見美國國家生物技術資訊中心(National Center for Biotechnology Information，NCBI)網站。
術語「AUC」代表評估身體隨時間完全暴露於所給藥物之數學計算值。在繪製給藥後之血液中之濃度之圖形中，藥物濃度變量位於y-軸上且時間位於x-軸上。AUC係藥物濃度曲線與x-軸上所指定時間間隔之間之面積。AUC用作給藥方案之指導且用以比較體內不同的藥物可用度。
術語「Cmax」代表給藥後達成之最大血漿濃度。
根據本申請案，「個體」或「患者」係人類或非人類動物。在某些實施例中，個體係哺乳動物。在某些實施例中，個體係人類。儘管動物個體較佳地係人類，但本申請案之化合物及組合物亦可應用於獸醫醫學中，例如，用於治療家養物種，例如犬、貓及各種其他寵物； 農場動物物種，例如牛、馬、綿羊、山羊、豬等；野生動物，例如，在原野中或在動物園中；及禽類物種，例如雞、火雞、鵪鶉、鳴禽等。
術語「酶替代療法」或「ERT」係指將非天然、經純化酶引入至該酶缺乏之個體中。所投與酶可自天然來源或藉由重組表現獲得。該術語亦係指在另外需要或受益於經純化酶之投與(例如，患有蛋白質不足)之個體中引入經純化酶。所引入酶可為在活體外產生之經純化重組酶或自所分離組織或流體(例如，胎盤或動物乳)或植物純化之酶。
術語「佐劑」或「佐劑療法」係指用於增加效力、安全性或換言之促進或增強主要物質、治療或程序之性能之任一額外物質、治療或程序。
術語「共調配物」係指包含諸如用於ERT之酶等酶(例如，α-Gal A酶(例如，人類重組α-Gal A酶(rhα-Gal A))之組合物，該酶係與該酶之ASSC調配在一起。在某些實施例中，ASSC係1-脫氧半乳糖野尻黴素(DGJ)或1-脫氧半乳糖野尻黴素之醫藥上可接受之鹽、酯或前藥。在一個實施例中，該鹽係鹽酸鹽(即，1-脫氧半乳糖野尻黴素-HCl)。在某些實施例中，用共調配物治療個體包含向個體投與共調配物從而使得α-Gal A酶及ASSC作為共調配物之一部分同時併行投與。
術語「組合療法」係指與各療法在個別投與時之效應相比結果有所增強之任一療法。組合療法中之個別療法可併行或連續投與。
增強可包括各種療法之效應之任一改良，該任一改良與該等療法在單獨實施時達成之結果相比可產生有利之結果。增強效應及增強效應之測定可藉由各種參數來量測，例如(但不限於)：時間參數(例如，治療之時長、恢復時間、治療之長期效應或治療之可逆性)；生物學參數(例如，細胞數、細胞體積、細胞組成、組織體積、組織大 小、組織組成)；空間參數(例如，組織強度、組織大小或組織可接達性)及生理學參數(例如，體形塑造、疼痛、不適、恢復時間或可見標記)。所增強效應可包括協同性增強，其中所增強效應大於各療法在獨自實施時之加性效應。所增強效應亦可包括加性增強，其中該所增強效應實質上等於各療法在獨自實施時之加性效應。所增強效應亦可包括小於協同效應之效應，其中該所增強效應低於各療法在獨自實施時之加性效應，但仍好於各療法在獨自實施時之效應。
術語「穩定適當構形」係指化合物或肽或其他分子與野生型蛋白或與可在活體外及活體內實施其野生型功能之突變體蛋白以使野生型或突變體蛋白之結構可維持其天然或適當形式之方式結合之能力。此效應自身實際上可通過以下各項中之一或多者表現：(i)增加蛋白質之儲架壽命；(ii)每單位量之蛋白質更高之活性；或(iii)更大之活體內效力。其可以實驗方式通過以下各項觀察到：在表現期間自ER之產量增加；對因溫度增加(例如，如在熱穩定性分析中所測定)或離液劑之存在所致之解摺疊之抗性更大，及藉由類似方式。
如本文所使用，術語「活性位點」係指蛋白質中具有某一具體生物學活性之區域。例如，其可為結合受質或其他結合伴侶且貢獻直接參與化學鍵之形成及斷裂之胺基酸殘基之位點。此申請案中之活性位點可涵蓋酶之催化位點、抗體之抗原結合位點、受體之配體結合域、調控子之結合域或所分泌蛋白之受體結合域。活性位點亦可涵蓋反式激活、蛋白-蛋白相互作用或轉錄因子及調控子之DNA結合域。
如本文所使用，術語「活性位點特異性帶位子(chaperone)」係指包括蛋白質、肽、核酸、碳水化合物等之任一分子，其可逆地與蛋白質之活性位點發生特異性相互作用且增強穩定分子構形之形成。如本文所使用，「活性位點特異性帶位子」不包括存於細胞之ER中之一般內源性帶位子(例如Bip、鈣聯蛋白或鈣網蛋白)或一般的非特異性化 學帶位子(例如氘化水、DMSO或TMAO)。
如本文所使用，術語「經純化的」係指在降低或消除無關物質(即污染物，包括從中獲得該材料之天然材料)之存在之條件下分離出之材料。例如，經純化蛋白較佳地實質上不含在細胞中與該純化蛋白結合之其他蛋白質或核酸；經純化核酸分子較佳地實質上不含與該經純化核酸分子一起可在細胞內發現之蛋白質或其他不相關核酸分子。如本文所使用，在材料之分析測試之背景下，術語「實質上不含」係以可操作方式使用。較佳地，實質上不含污染物之經純化材料為至少95%純淨，更佳地至少97%純淨，且更佳地仍至少99%純淨。純度可藉由層析、凝膠電泳、免疫分析、組成分析、生物學分析及業內已知之其他方法來評估。在具體實施例中，經純化意指污染物之含量低於管理機構為向人類或非人類動物安全投與所能接受之含量。
如本文所使用，術語「突變體」及「突變」意指遺傳材料(例如，DNA)中之任何可檢測到之改變或此一改變之任何過程、機制或結果。此包括基因之結構(例如，DNA序列)有所改變之基因突變、起因於任何突變過程之任何基因或DNA以及由經改質基因或DNA序列表現之任何表現產物(例如，RNA、蛋白質或酶)。
如本文所使用，術語「突變體蛋白」係指自含有致使蛋白質序列改變之遺傳突變之基因轉譯之蛋白質。在具體實施例中，該等突變致使蛋白質無法在ER中正常存在之條件下達成其天然構形。無法達成此構形致使該等蛋白質降解，而非藉助其在蛋白質輸送系統中之正常途徑輸送至其在細胞內之適當位置。其他突變可致使活性降低或較迅速之轉換。
如本文所使用，術語「野生型基因」係指編碼能夠具有正常的活體內生物學功能活性之蛋白質之核酸序列。野生型核酸序列可含有不同於已知公開之序列之核苷酸改變，只要該等改變產生對生物學活 性具有極少或不具有效應之胺基酸取代即可。術語野生型亦可包括經改造以編碼能夠相對於內源或天然蛋白增加或增強活性之蛋白質之核酸序列。
如本文所使用，術語「野生型蛋白」係指由野生型基因編碼能夠在於活體內表現或引入時具有功能生物學活性之蛋白質。術語「正常野生型活性」係指蛋白質在細胞中之正常生理學功能。該功能可藉由已知用以確立蛋白質之功能之任何方式來測試。
術語「經遺傳改質」係指在引入包含編碼基因產物之編碼序列連同控制編碼序列之表現之調控元件之核酸後表現特定基因產物之細胞。核酸之引入可藉由業內已知之任一方法(包括基因打靶及同源重組)來實現。如本文所使用，該術語亦包括已經改造以藉由(例如)基因激活技術表現或過表現正常地不由該細胞表現之內源性基因或基因產物之細胞。
片語「醫藥上可接受」不論是否結合本申請案之醫藥組合物使用皆係指在生理學上具有耐受性且當投與人類時通常不產生不良反應之分子實體及組合物。較佳地，如本文所使用，術語「醫藥上可接受」意指已獲得聯邦或州政府之管理機構批準或已列於美國藥典(U.S.Pharmacopeia)或其他通常公認之藥典中可用於動物(且更特定而言人類)中。術語「載劑」係指與化合物一起投與之稀釋劑、佐劑、賦形劑或媒劑。該等醫藥載劑可為無菌液體，例如水及油。水或水性溶液鹽水溶液及水性右旋糖及甘油溶液較佳用作載劑，尤其用作可注射溶液之載劑。適宜醫藥載劑闡述於E.W.Martin，第18版之「Remington's Pharmaceutical Sciences」中。
術語「治療有效劑量」及「有效量」係指化合物之足以引起治療反應之量。在ASSC及α-Gal A一起於共調配物中投與之實施例，術語「治療有效劑量」及「有效量」可係指共調配物之足以引起治療反 應之量。治療反應可為使用者(例如，臨床醫師)將認為療法之有效反應之任何反應。因此，治療反應通常可為疾病或病症之一或多種症狀或體徵之改善。
法布瑞氏症之替代標記有所改良之非限制性實例包括細胞(例如，纖維母細胞)及組織中之α-GAL含量或活性增加；GL-3累積降低，如藉由使用組織學在腎臟間質微血管生檢中之改變所量測；尿GL-3含量降低；腎功能(包括腎臟小球濾過率(GFR)及24-小時尿蛋白之評價；高半胱胺酸及血管細胞黏附分子-1(VCAM-1)之血漿濃度降低；心肌細胞及瓣膜纖維細胞內之GL-3累積降低；心臟肥大(尤其左心室)降低，瓣膜生長不足及心律不整改善；蛋白尿改善；諸如CTH、乳糖苷基神經醯胺、神經醯胺等脂質之尿濃度降低，及葡萄糖苷基神經醯胺及鞘磷脂之尿濃度增加(Fuller等人，Clinical Chemistry.2005；51：688-694)；腎臟小球上皮細胞中不存在層狀包涵體(斑馬體(Zebra body))；腎功能改良；少汗症減輕；缺乏血管角質瘤；及聽力異常(例如高頻感覺神經性失聰、進行性失聰、突發性耳聾或耳鳴)改良。神經症狀之改良包括暫時性腦缺血(TIA)或中風之預防；及自身表現為肢端感覺異常(四肢燒傷或發麻)之神經性病變疼痛之改善。
應注意，在活體外產生、輸送或儲存經純化治療蛋白期間抑制的ASSC之濃度仍可因ASSC在活體內投與時之稀釋(及因平衡改變而接連發生之結合移位)、生物可用度及代謝且出於此應用之目的而構成「有效量」。
酶替代療法
目前已批準之法布瑞氏症之治療係酶替代療法。目前有兩種產品可用於治療法布瑞氏症：阿加糖酶α(Replagal®，Shire Human Genetic Therapies)及阿加糖酶β(Fabrazyme®；Genzyme公司)，其已在全球出售。ERT之該兩種形式意欲利用该等酶之重組形式(其以靜 脈內方式投與)來補償患者之不充足的α-Gal A活性。已證明ERT會降低GL-3於腎臟之微血管內皮及某些其他細胞類型中之沈積。儘管ERT在許多情形下有效，但該治療亦具有限制性。ERT尚未證明會降低中風之風險，心肌響應緩慢，且GL-3自腎臟之一些細胞類型之消除受到限制。一些患者對ERT產生免疫反應。
所推薦之阿加糖酶α之劑量為0.2mg/kg體重，其係每2週以靜脈內輸注形式進行輸注。
所推薦之阿加糖酶β之劑量為1mg/kg體重，其係每2週以靜脈內輸注形式進行輸注。
醫藥組合物
根據本申請案，1-脫氧半乳糖野尻黴素(DGJ)可以游離鹼形式或以藥理學上可接受之鹽形式(包括1-脫氧半乳糖野尻黴素鹽酸鹽(亦稱為米加司他鹽酸鹽))投與。其可以適於非經腸投與之形式(包括(例如)呈用於靜脈內投與之無菌水性溶液形式)投與。本申請案之化合物及組合物可以醫藥組合物形式藉由與醫藥上可接受之載劑或賦形劑之混合物來調配。
在某些實施例中，DGJ及α-Gal A係一起調配於單一組合物中(即，共調配在一起)。此一組合物在投與個體後增強α-Gal A在儲存期間(即，活體外)及活體內二者之穩定性，因此增加循環半衰期、組織吸收，且使得α-Gal A之治療效力增加(例如，增加組織GL-3含量之降低)。共調配物較佳地適於靜脈內投與。
本申請案之特徵在於液體醫藥共調配物(例如，包含α-Gal A及DGJ之調配物)之性質與業內公認之調配物相比有所改良。
在某些實施例中，本申請案之共調配物包括適於靜脈內投與之α-Gal A酶及DGJ。
在某些實施例中，本申請案之組合物包含α-Gal A酶與α-Gal A酶 之ASSC之共調配物。在某些實施例中，ASSC係1-脫氧半乳糖野尻黴素。在某些實施例中，ASSC係1-脫氧半乳糖野尻黴素-HCl。
在某些實施例中，共調配物組合物包含以下濃度之α-Gal A：介於約0.05μM與約100μM之間、或介於約0.1μM與約75μM之間、或介於約0.2μM與約50μM之間、或介於約0.3μM與約40μM之間、或介於約0.4μM與約30μM之間、或介於約0.5μM與約20μM之間、或介於約0.6μM與約15μM之間、或介於約0.7μM與約10μM之間、或介於約0.8μM與約9μM之間、或介於約0.9μM與約8μM之間、或介於約1μM與約7μM之間、或介於約2μM與約6μM之間、或介於約3μM與約5μM之間。上文所列舉濃度中間之濃度及範圍亦意欲為本申請案之一部分。
在某些實施例中，共調配物組合物包含以下濃度之α-Gal A：約0.1μM、0.2μM、0.3μM、0.4μM、0.5μM、0.6μM、0.7μM、0.8μM、0.9μM、1μM、1.1μM、1.2μM、1.5μM、2μM、2.5μM、3μM、3.5μM、4μM、4.5μM、5μM、5.5μM、6μM、6.5μM、7μM、7.5μM、8μM、8.5μM、9μM、9.5μM、10μM、10.5μM、11μM、11.5μM、12μM、12.5μM、13μM、13.5μM、14μM、14.5μM或15μM。
在某些實施例中，共調配物組合物包含以下濃度之α-Gal A：介於約0.0025mg/ml與約5mg/ml之間、或介於約0.005mg/ml與約4.5mg/ml之間、或介於約0.025mg/ml與約4mg/ml之間、或介於約0.05mg/ml與約3.5mg/ml之間、或介於約0.25mg/ml與約3mg/ml之間、或介於約0.5mg/ml與約2.5mg/ml之間、或介於約0.75mg/ml與約2mg/ml之間、或介於約1mg/ml與約1.5mg/ml之間。上文所列舉濃度中間之濃度及範圍亦意欲為本申請案之一部分。
在某些實施例中，共調配物組合物包含以下濃度之DGJ：介於約 10μM與約25,000μM之間、或介於約50μM與約20,000μM之間、或介於約100μM與約15,000μM之間、或介於約150μM與約10,000μM之間、或介於約200μM與約5,000μM之間、或介於約250μM與約1,500μM之間、或介於約300μM與約1,000μM之間、或介於約350μM與約550μM之間、或介於約400μM與約500μM之間。上文所列舉濃度中間之濃度及範圍亦意欲為本申請案之一部分。
在某些實施例中，共調配物組合物包含以下濃度之DGJ：介於約0.002mg/ml與約5mg/ml之間、或介於約0.005mg/ml與約4.5mg/ml之間、或介於約0.02mg/ml與約4mg/ml之間、或介於約0.05mg/ml與約3.5mg/ml之間、或介於約0.2mg/ml與約3mg/ml之間、或介於約0.5mg/ml與約2.5mg/ml之間、或介於約1mg/ml與約2mg/ml之間。上文所列舉濃度中間之濃度及範圍亦意欲為本申請案之一部分。
在某些實施例中，共調配物組合物包含以下濃度之DGJ：約50μM、100μM、150μM、200μM、250μM、300μM、350μM、400μM、450μM、500μM、550μM、600μM、650μM、700μM、750μM、800μM、850μM、900μM、950μM、1,000μM、2,000μM、3,000μM、4,000μM、5,000μM、6,000μM、7,000μM、8,000μM、9,000μM、10,000μM、11,000μM、12,000μM、13,000μM、14,000μM、15,000μM、16,000μM、17,000μM、18,000μM、19,000μM或20,000μM。
在某些實施例中，共調配物組合物包含以下濃度之DGJ：約449μM、748μM、1,495μM、4,490μM或14,950μM。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含α-Gal A酶及DGJ，其中該α-Gal A係以選自由1.2μM、2μM、4μM、8μM及12μM組成之群之濃度存在；且其中該DGJ係以選自由449μM、748μM、1,495μM、4,490μM及14,950μM組成之群之濃度存在。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約1.2μM α-Gal A酶及約449μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約1.2μM α-Gal A酶及約748μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約1.2μM α-Gal A酶及約1,495μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約1.2μM α-Gal A酶及約4,490μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約1.2μM α-Gal A酶及約14,950μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約2μM α-Gal A酶及約449μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約2μM α-Gal A酶及約748μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約2μM α-Gal A酶及約1,495μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約2μM α-Gal A酶及約4,490μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約2μM α-Gal A酶及約14,950μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約4μM α-Gal A酶及約449μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約4μM α-Gal A酶及約748μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約4μM α-Gal A酶及約1,495μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約4μM α-Gal A酶及約4,490μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約4μM α-Gal A酶及約14,950μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約8μM α-Gal A酶及約449μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約8μM α-Gal A酶及約748μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約8μM α-Gal A酶及約1,495μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約8μM α-Gal A酶及約4,490μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約8μM α-Gal A酶及約14,950μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約12μM α-Gal A酶及約449μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約12μM α-Gal A酶及約748μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約12μM α-Gal A酶及約1,495μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約12μM α-Gal A酶及約4,490μM DGJ。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含約12μM α-Gal A酶及約14,950μM DGJ。
本發明亦提供介於約0.5μM與約20μM間之α-Gal A及介於約50μM與20,000μM間之DGJ或其醫藥上可接受之鹽之共調配物之用途， 其用以製備用於治療法布瑞氏症之醫藥，其中該醫藥經調配以供非經腸投與個體。
本發明亦提供約1.2μM、2μM、4μM、8μM或12μM α-Gal A及約449μM、748μM、1,495μM、4,490μM或14,950μM DGJ或其醫藥上可接受之鹽之共調配物之用途，其用以製備用於治療法布瑞氏症之醫藥，其中該醫藥經調配以供非經腸投與個體。
本發明亦提供包含以下之共調配物之用途：介於約0.0025mg/ml與約5mg/ml之間、或介於約0.005mg/ml與約4.5mg/ml之間、或介於約0.025mg/ml與約4mg/ml之間、或介於約0.05mg/ml與約3.5mg/ml之間、或介於約0.25mg/ml與約3mg/ml之間、或介於約0.5mg/ml與約2.5mg/ml之間、或介於約0.75mg/ml與約2mg/ml之間、或介於約1mg/ml與約1.5mg/ml之間之α-Gal A；及介於約0.002mg/ml與約5mg/ml之間、或介於約0.005mg/ml與約4.5mg/ml之間、或介於約0.02mg/ml與約4mg/ml之間、或介於約0.05mg/ml與約3.5mg/ml之間、或介於約0.2mg/ml與約3mg/ml之間、或介於約0.5mg/ml與約2.5mg/ml之間、或介於約1mg/ml與約2mg/ml之間之DGJ或其醫藥上可接受之鹽，其用以製備用於治療法布瑞氏症之醫藥，其中該醫藥經調配以供非經腸投與個體。
本發明亦提供包含以下之共調配物之用途：介於約0.05μM與約100μM之間、或介於約0.1μM與約75μM之間、或介於約0.2μM與約50μM之間、或介於約0.3μM與約40μM之間、或介於約0.4μM與約30μM之間、或介於約0.5μM與約20μM之間、或介於約0.6μM與約15μM之間、或介於約0.7μM與約10μM之間、或介於約0.8μM與約9μM之間、或介於約0.9μM與約8μM之間、或介於約1μM與約7μM之間、或介於約2μM與約6μM之間、或介於約3μM與約5μM之間之α-Gal A；及介於約10μM與約25,000μM之間、或介於約50μM與約 20,000μM之間、或介於約100μM與約15,000μM之間、或介於約150μM與約10,000μM之間、或介於約200μM與約5,000μM之間、或介於約250μM與約1,500μM之間、或介於約300μM與約1,000μM之間、或介於約350μM與約550μM之間、或介於約400μM與約500μM之間之DGJ或其醫藥上可接受之鹽，其用以製備用於治療法布瑞氏症之醫藥，其中該醫藥經調配以供非經腸投與個體。
本發明亦提供包含以下之共調配物之用途：約0.1μM、0.2μM、0.3μM、0.4μM、0.5μM、0.6μM、0.7μM、0.8μM、0.9μM、1μM、1.1μM、1.2μM、1.5μM、2μM、2.5μM、3μM、3.5μM、4μM、4.5μM、5μM、5.5μM、6μM、6.5μM、7μM、7.5μM、8μM、8.5μM、9μM、9.5μM、10μM、10.5μM、11μM、11.5μM、12μM、12.5μM、13μM、13.5μM、14μM、14.5μM或15μM α-Gal A；及約50μM、100μM、150μM、200μM、250μM、300μM、350μM、400μM、450μM、500μM、550μM、600μM、650μM、700μM、750μM、800μM、850μM、900μM、950μM、1,000μM、2,000μM、3,000μM、4,000μM、5,000μM、6,000μM、7,000μM、8,000μM、9,000μM、10,000μM、11,000μM、12,000μM、13,000μM、14,000μM、15,000μM、16,000μM、17,000μM、18,000μM、19,000μM或20,000μM DGJ或其醫藥上可接受之鹽，其用以製備用於治療法布瑞氏症之醫藥，其中該醫藥經調配以供非經腸投與個體。
本發明亦提供用於治療法布瑞氏症之包含介於約0.5μM與約20μM間之α-Gal A及介於約50μM與約20,000μM間之DGJ或其醫藥上可接受之鹽之共調配物，其中該共調配物係以非經腸方式投與。
本發明亦提供用於治療法布瑞氏症之包含約1.2μM、2μM、4μM、8μM或12μM α-Gal A及約449μM、748μM、1,495μM、4,490μM或14,950μM DGJ或其醫藥上可接受之鹽之共調配物，其中該共調 配物係以非經腸方式投與。
本發明亦提供包含以下之共調配物：介於約0.0025mg/ml與約5mg/ml之間、或介於約0.005mg/ml與約4.5mg/ml之間、或介於約0.025mg/ml與約4mg/ml之間、或介於約0.05mg/ml與約3.5mg/ml之間、或介於約0.25mg/ml與約3mg/ml之間、或介於約0.5mg/ml與約2.5mg/ml之間、或介於約0.75mg/ml與約2mg/ml之間、或介於約1mg/ml與約1.5mg/ml之間之α-Gal A；及介於約0.002mg/ml與約5mg/ml之間、或介於約0.005mg/ml與約4.5mg/ml之間、或介於約0.02mg/ml與約4mg/ml之間、或介於約0.05mg/ml與約3.5mg/ml之間、或介於約0.2mg/ml與約3mg/ml之間、或介於約0.5mg/ml與約2.5mg/ml之間、或介於約1mg/ml與約2mg/ml之間之DGJ或其醫藥上可接受之鹽，其用於治療法布瑞氏症，其中該共調配物係以非經腸方式投與。
本發明亦提供包含以下之共調配物：介於約0.05μM與約100μM之間、或介於約0.1μM與約75μM之間、或介於約0.2μM與約50μM之間、或介於約0.3μM與約40μM之間、或介於約0.4μM與約30μM之間、或介於約0.5μM與約20μM之間、或介於約0.6μM與約15μM之間、或介於約0.7μM與約10μM之間、或介於約0.8μM與約9μM之間、或介於約0.9μM與約8μM之間、或介於約1μM與約7μM之間、或介於約2μM與約6μM之間、或介於約3μM與約5μM之間之α-Gal A；及介於約10μM與約25,000μM之間、或介於約50μM與約20,000μM之間、或介於約100μM與約15,000μM之間、或介於約150μM與約10,000μM之間、或介於約200μM與約5,000μM之間、或介於約250μM與約1,500μM之間、或介於約300μM與約1,000μM之間、或介於約350μM與約550μM之間、或介於約400μM與約500μM之間之DGJ或其醫藥上可接受之鹽，其用於治療法布瑞氏症，其中該共調配物係以非經腸方式投與。
本發明亦提供包含以下之共調配物：約0.1μM、0.2μM、0.3μM、0.4μM、0.5μM、0.6μM、0.7μM、0.8μM、0.9μM、1μM、1.1μM、1.2μM、1.5μM、2μM、2.5μM、3μM、3.5μM、4μM、4.5μM、5μM、5.5μM、6μM、6.5μM、7μM、7.5μM、8μM、8.5μM、9μM、9.5μM、10μM、10.5μM、11μM、11.5μM、12μM、12.5μM、13μM、13.5μM、14μM、14.5μM或15μM α-Gal A；及約50μM、100μM、150μM、200μM、250μM、300μM、350μM、400μM、450μM、500μM、550μM、600μM、650μM、700μM、750μM、800μM、850μM、900μM、950μM、1,000μM、2,000μM、3,000μM、4,000μM、5,000μM、6,000μM、7,000μM、8,000μM、9,000μM、10,000μM、11,000μM、12,000μM、13,000μM、14,000μM、15,000μM、16,000μM、17,000μM、18,000μM、19,000μM或20,000μM DGJ或其醫藥上可接受之鹽，其用於治療法布瑞氏症，其中該共調配物係以非經腸方式投與。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ組合以產生DGJ對α-Gal A酶之莫耳比如下之共調配物：介於約10：1與約20,000：1之間；或介於約20：1與約15,000：1之間；或介於約50：1與約10,000：1之間；或介於約100：1與約5,000：1之間；或介於約150：1與約1,000：1之間；或介於約200：1與約500：1之間；或介於約250：1與約450：1之間；或介於約300：1與約400：1。
適於靜脈內投與使用之醫藥共調配物包括無菌水溶液(若可溶於水)或分散液及供臨時製備無菌可注射溶液或分散液之無菌粉末。在某些實施例中，該形式為無菌且流動程度使其具有容易注射性。在某些實施例中，該形式在製造及儲存條件下穩定，且經保存防止受到諸如細菌及真菌等微生物的污染作用。在某些實施例中，該組合物包含載劑，諸如溶劑或分散介質，含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘 油、丙二醇及聚乙二醇及諸如此類)、其適宜混合物，及植物油。適當流動性可藉由例如使用諸如卵磷脂等包衣、藉由維持所需粒徑(在分散液之情形)以及藉由使用表面活性劑維持。防止微生物之作用可由各種抗細菌劑和抗真菌劑(例如對羥基苯甲酸、氯丁醇、苯酚、苯甲醇、山梨酸及諸如此類)達成。
在許多情形中，其較佳包括等滲劑，例如糖類或氯化鈉。可注射組合物之延長吸收可由使用延長吸收劑(例如單硬脂酸鋁及明膠)之組合物達成。無菌可注射溶液可由以下製備：將所需量之α-Gal A及ASSC(例如DGJ)與上文所列舉之各種其他成份(若需要)一起納入適當溶劑中，隨後進行過濾或最終滅菌。通常，分散液係由各種經滅菌活性成份納入含有基本分散介質及上文所列舉之所需其他成份的無菌媒劑中製備。在用於製備無菌可注射溶液之無菌粉末之情形，較佳製備方法係真空乾燥及冷凍乾燥技術，其產生活性成份加上任何所需其他成份(來自其先前無菌過濾溶液)的粉末。
在某些實施例中，共調配物可含有賦形劑。可包括於共調配物中之醫藥上可接受之賦形劑係緩衝液，例如檸檬酸鹽緩衝液、磷酸鹽緩衝液、乙酸鹽緩衝液及碳酸氫鹽緩衝液、胺基酸、脲、醇、抗壞血酸、磷脂類；蛋白質，例如血清白蛋白、膠原蛋白及明膠；鹽，例如EDTA或EGTA及氯化鈉；脂質體；聚乙烯基吡咯啶酮；糖類，例如右旋糖酐、甘露糖醇、山梨糖醇及甘油；丙二醇及聚乙二醇(例如，PEG-4000、PEG-6000)；甘油；甘胺酸或其他胺基酸；及脂質。供與共調配物一起使用之緩衝液系統包括檸檬酸鹽、乙酸鹽、碳酸氫鹽及磷酸鹽緩衝液。
共調配物亦可含有非離子清潔劑。較佳非離子清潔劑包括聚山梨糖醇酯20、聚山梨糖醇酯80、曲拉通(Triton)X-100、曲拉通X-114、諾納德(Nonidet)P-40、辛基α-葡糖苷、辛基β-葡糖苷、Brij 35、普流尼克(Pluronic)及吐溫20(Tween 20)。
對於蛋白質及帶位子製劑之凍乾而言，蛋白質濃度可為0.1-10mg/mL。可將增積劑(例如甘胺酸、甘露糖醇、白蛋白及右旋糖酐)添加至凍乾混合物中。此外，可將可能的低溫保護劑(例如二糖類、胺基酸及PEG)添加至凍乾混合物中。亦可添加上文所列示之緩衝液、賦形劑及清潔劑中之任一者。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物經調配用於靜脈內投與。上述非經腸共調配物之投與可為週期性注射大劑量製劑，或者可藉由自在外部之貯器(例如，靜脈注射袋)靜脈內投與來投與。
利用ERT及ASSC治療法布瑞氏症
根據本申請案，提供使用α-Gal A(例如，rhα-Gal A)以及α-Gal A之ASSC(例如，DGJ)之方法。本申請案之一個實施例提供α-Gal A(例如rhα-Gal A ERT)及ASSC之組合療法，其中該α-Gal A及ASSC係共調配在一起且係以共調配物形式併行投與個體。在某些實施例中，ASSC 1-脫氧半乳糖野尻黴素係與α-Gal A一起共調配為醫藥組合物。
在某些實施例中，投與途徑係靜脈內投與。投與可為週期性推注製劑，或自(例如)在外部之貯器(例如，靜脈注射袋)以持續釋放劑型經長時間段(例如)藉由靜脈內投與。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之該共調配物之α-Gal A酶之劑量係介於約0.05mg/kg與約10mg/kg之間，或介於約0.1mg/kg與約5mg/kg之間，或介於約0.2mg/kg與約4mg/kg之間，或介於約0.3mg/kg與約3mg/kg之間，或介於約0.4mg/kg與約2mg/kg之間，或介於約0.5mg/kg與約1.5mg/kg之間，或介於約0.5mg/kg與約1mg/kg之間。上文所列舉濃度中間之濃度及範圍亦意欲為本申請案之一部分。
在某些實施例中，投與個體之共調配物之α-Gal A酶之劑量為約 0.05mg/kg、0.1mg/kg、0.2mg/kg、0.3mg/kg、0.4mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、1.5mg/kg、2mg/kg、2.5mg/kg、3mg/kg、3.5mg/kg、4mg/kg、4.5mg/kg或5mg/kg。
在某些實施例中，α-Gal A酶及DGJ經組合以產生供投與個體之共調配物，其中投與個體之共調配物之DGJ之劑量係介於約0.05mg/kg與20mg/kg之間，或介於約0.1mg/kg與約15mg/kg之間，或介於約0.2mg/kg與約10mg/kg之間，或介於約0.3mg/kg與約10mg/kg之間，或介於約0.4mg/kg與約9mg/kg之間，或介於約0.5mg/kg與約8mg/kg之間，或介於約0.6mg/kg與約7mg/kg之間，或介於約0.7mg/kg與約6mg/kg之間，或介於約0.8mg/kg與約5mg/kg之間，或介於約0.9mg/kg與約4mg/kg之間，或介於約1mg/kg與約3mg/kg之間，或介於約1.5mg/kg與約2mg/kg之間。上文所列舉濃度中間之濃度及範圍亦意欲為本申請案之一部分。
在某些實施例中，投與個體之共調配物之DGJ之劑量為約0.05mg/kg、0.1mg/kg、0.2mg/kg、0.3mg/kg、0.4mg/kg、0.5mg/kg、0.6mg/kg、0.7mg/kg、0.8mg/kg、0.9mg/kg、1mg/kg、2mg/kg、3mg/kg、4mg/kg、5mg/kg、6mg/kg、7mg/kg、8mg/kg、9mg/kg或10mg/kg。
在某些實施例中，本申請案之共調配物組合物包含α-Gal A酶及DGJ，其中投與個體之共調配物之α-Gal A之劑量之濃度為選自由0.3mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、2mg/kg及3mg/kg組成之群；且其中投與個體之共調配物之DGJ之劑量之濃度為選自由0.1mg/kg、0.3mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、3mg/kg及10mg/kg組成之群。
本發明亦提供α-Gal A及DGJ或其醫藥上可接受之鹽之共調配物之用途，其用以製備用於治療法布瑞氏症之醫藥，其中該醫藥經調配以供非經腸投與個體，且其中該共調配物之α-Gal A經調配用於以介 於約0.1mg/kg與約0.5mg/kg之間之量投與，且該共調配物之DGJ經調配用於以介於約0.1mg/kg與約15mg/kg之間之量投與。
本發明亦提供α-Gal A及DGJ或其醫藥上可接受之鹽之共調配物之用途，其用以製備用於治療法布瑞氏症之醫藥，其中該醫藥經調配以供非經腸投與個體，且其中該共調配物之α-Gal A經調配用於以約0.3mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、2mg/kg或3mg/kg之量投與，且該共調配物之DGJ經調配用於以約0.1mg/kg、0.3mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、3mg/kg或10mg/kg之量投與。
本發明亦提供α-Gal A及DGJ或其醫藥上可接受之鹽之共調配物之用途，其用以製備用於治療法布瑞氏症之醫藥，其中該醫藥經調配以供非經腸投與個體，且其中該共調配物之α-Gal A經調配用於以如下量投與：介於約0.05mg/kg與約10mg/kg之間、或介於約0.1mg/kg與約5mg/kg之間、或介於約0.2mg/kg與約4mg/kg之間、或介於約0.3mg/kg與約3mg/kg之間、或介於約0.4mg/kg與約2mg/kg之間、或介於約0.5mg/kg與約1.5mg/kg之間、或介於約0.5mg/kg與約1mg/kg；且該共調配物之DGJ經調配用於以如下量投與：介於約0.05mg/kg與20mg/kg之間、或介於約0.1mg/kg與約15mg/kg之間、或介於約0.2mg/kg與約10mg/kg之間、或介於約0.3mg/kg與約10mg/kg之間、或介於約0.4mg/kg與約9mg/kg之間、或介於約0.5mg/kg與約8mg/kg之間、或介於約0.6mg/kg與約7mg/kg之間、或介於約0.7mg/kg與約6mg/kg之間、或介於約0.8mg/kg與約5mg/kg之間、或介於約0.9mg/kg與約4mg/kg之間、或介於約1mg/kg與約3mg/kg之間、或介於約1.5mg/kg與約2mg/kg之間。
本發明亦提供α-Gal A及DGJ或其醫藥上可接受之鹽之共調配物之用途，其用以製備用於治療法布瑞氏症之醫藥，其中該醫藥經調配以供非經腸投與個體，且其中該共調配物之α-Gal A經調配用於以如 下量投與：約0.05mg/kg、0.1mg/kg、0.2mg/kg、0.3mg/kg、0.4mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、1.5mg/kg、2mg/kg、2.5mg/kg、3mg/kg、3.5mg/kg、4mg/kg、4.5mg/kg或5mg/kg；且該共調配物之DGJ經調配用於以如下量投與：約0.05mg/kg、0.1mg/kg、0.2mg/kg、0.3mg/kg、0.4mg/kg、0.5mg/kg、0.6mg/kg、0.7mg/kg、0.8mg/kg、0.9mg/kg、1mg/kg、2mg/kg、3mg/kg、4mg/kg、5mg/kg、6mg/kg、7mg/kg、8mg/kg、9mg/kg或10mg/kg。
本發明亦提供用於治療法布瑞氏症之包含α-Gal A及DGJ或其醫藥上可接受之鹽之共調配物，其中該共調配物係以非經腸方式投與，且其中該共調配物之α-Gal A係以介於約0.1mg/kg與約0.5mg/kg之間之量投與，且該共調配物之DGJ係以介於約0.1mg/kg與約15mg/kg之間之量投與。
本發明亦提供用於治療法布瑞氏症之包含α-Gal A及DGJ或其醫藥上可接受之鹽之共調配物，其中該共調配物係以非經腸方式投與，且其中該共調配物之α-Gal A係以約0.3mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、2mg/kg或3mg/kg之量投與，且該共調配物之DGJ係以約0.1mg/kg、0.3mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、3mg/kg或10mg/kg之量投與。
本發明亦提供用於治療法布瑞氏症之包含α-Gal A及DGJ或其醫藥上可接受之鹽之共調配物，其中該共調配物係以非經腸方式投與，且其中該共調配物之α-Gal A係以如下量投與：介於約0.05mg/kg與約10mg/kg之間、或介於約0.1mg/kg與約5mg/kg之間、或介於約0.2mg/kg與約4mg/kg之間、或介於約0.3mg/kg與約3mg/kg之間、或介於約0.4mg/kg與約2mg/kg之間、或介於約0.5mg/kg與約1.5mg/kg之間、或介於約0.5mg/kg與約1mg/kg；且該共調配物之DGJ係以如下量投與：介於約0.05mg/kg與20mg/kg之間、或介於約0.1mg/kg與約15mg/kg之間、或介於約0.2mg/kg與約10mg/kg之間、或介於約0.3 mg/kg與約10mg/kg之間、或介於約0.4mg/kg與約9mg/kg之間、或介於約0.5mg/kg與約8mg/kg之間、或介於約0.6mg/kg與約7mg/kg之間、或介於約0.7mg/kg與約6mg/kg之間、或介於約0.8mg/kg與約5mg/kg之間、或介於約0.9mg/kg與約4mg/kg之間、或介於約1mg/kg與約3mg/kg之間、或介於約1.5mg/kg與約2mg/kg之間。
本發明亦提供用於治療法布瑞氏症之包含α-Gal A及DGJ或其醫藥上可接受之鹽之共調配物，其中該共調配物係以非經腸方式投與，且其中該共調配物之α-Gal A係以如下量投與：約0.05mg/kg、0.1mg/kg、0.2mg/kg、0.3mg/kg、0.4mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、1.5mg/kg、2mg/kg、2.5mg/kg、3mg/kg、3.5mg/kg、4mg/kg、4.5mg/kg或5mg/kg；且該共調配物之DGJ係以如下量投與：約0.05mg/kg、0.1mg/kg、0.2mg/kg、0.3mg/kg、0.4mg/kg、0.5mg/kg、0.6mg/kg、0.7mg/kg、0.8mg/kg、0.9mg/kg、1mg/kg、2mg/kg、3mg/kg、4mg/kg、5mg/kg、6mg/kg、7mg/kg、8mg/kg、9mg/kg或10mg/kg。
在一個非限制性實施例中，以共調配物形式投與之DGJ及重組人類α-Gal A顯示對血漿酶活性及至組織中之酶吸收具有驚人的效力。在野生型小鼠中，與靜脈內投與單獨的α-Gal A相比，重組人類α-Gal A(rhα-Gal A)之血漿半衰期在單一靜脈內注射α-Gal A及DGJ之共調配物後增加5倍，且血漿AUC增加4倍。另外，在野生型小鼠中，與靜脈內投與單獨的α-Gal A相比，α-Gal A至腎臟及心臟組織中之組織吸收在單一靜脈內注射α-Gal A及DGJ之共調配物後增加高達1.5倍。
在一個非限制性實施例中，以共調配物形式投與之DGJ及重組人類α-Gal A顯示對血漿酶活性、至組織中之酶吸收以及GL-3在組織中之降低具有驚人的效力。在內源性α-Gal A表現缺陷之小鼠(即，GLA敲除型小鼠)中，重組人類α-Gal A(rhα-Gal A)之血漿半衰期在單一靜 脈內注射α-Gal A與DGJ之共調配物後0.5hr時增加高達3倍且在此後1hr時增加高達6倍。另外，與單獨α-Gal A之治療相比，在靜脈內投與後，GL-3降低的更顯著，且小鼠之心臟及腎臟組織中α-Gal A之增加更顯著。
在某些非限制性實施例中，α-Gal A及DGJ之共調配物可以靜脈內方式投與個體，其量有效達成之血漿AUC濃度為當α-Gal A以與該共調配物相同之劑量但缺乏DGJ投與個體時所達成之血漿AUC濃度的介於約0.5倍與10倍之間、或介於約1倍與約8倍之間、或介於約1.5倍與約6倍之間、或介於約2倍與約5.5倍之間、或介於約2.5倍與約5倍之間、或介於約3倍與約4.5倍之間。
在某些非限制性實施例中，α-Gal A及DGJ之共調配物可以靜脈內方式投與個體，其量有效達成之α-Gal A組織吸收量為當α-Gal A以與該共調配物相同之劑量但缺乏DGJ投與個體時所達成之α-Gal A組織吸收量的介於約0.5倍與10倍之間、或介於約1倍與約8倍之間、或介於約1.5倍與6倍之間、或介於約2倍與約5.5倍之間、或介於約2.5倍與約5倍之間、或介於約3倍與約4.5倍之間。
共調配物之遞送可持續若干小時、一週至若干週、一個月至若干月或長達一年或更多年範圍內之預選擇之投與時段。在某些實施例中，劑型係適合經延長之時間段遞送α-Gal A者。該等遞送裝置可適合投與α-Gal A達若干小時(例如，2小時、12小時或24小時至48小時或更長)至若干天(例如，2天至5天或更長，約100天或更長)至若干個月或年。在一些該等實施例中，該裝置適合遞送達約1個月至約12個月或更長之範圍內之時段。α-Gal A遞送裝置可為適合向個體投與α-Gal A達例如以下之時段者：約2小時至約72小時、約4小時至約36小時、約12小時至約24小時；約2天至約30天、約5天至約20天、約7天至約100天或更長、約10天至約50天；約1週至約4週；約1個月至約24個月 或更長、約2個月至約12個月、約3個月至約9個月；或其他時間範圍，在該等範圍內包括增加之範圍(若需要)。
在某些實施例中，本申請案之方法包括藉由(例如)靜脈內投與向個體投與存於與DGJ之共調配物中之α-Gal A之劑量，其中該劑量係每天一次、每兩天一次、每三天一次、每四天一次、每五天一次或每六天一次投與。在某些實施例中，該劑量不會使α-Gal A在個體之肝中產生毒性含量。在一些實施例中，α-Gal A及DGJ之共調配物係以下列劑量投與：足以在投與該劑量後約24小時內在個體之組織中產生α-Gal A之峰值濃度。在某些實施例中，共調配物係以下列劑量投與：足以在投與該劑量後介於約0.2小時至約50小時之間、或介於約0.2小時至約24小時之間、或介於約0.2小時至約5小時之間、或介於約0.2小時至約1小時之間、或介於約0.2小時至約0.5小時之間、或約40小時、30小時、20小時、10小時、5小時、1小時、0.5小時或更少小時內在個體之組織中產生α-Gal A之峰值濃度。上文所列舉範圍中間之範圍亦意欲為本申請案之一部分。在一些實施例中，共調配物係以單劑量形式投與。在一些實施例中，共調配物係以多劑量形式投與。
活體外穩定性
主要挑戰係確保替代蛋白調配物在其儲架壽命期間之穩定性。例如，重組酶之小瓶通常僅供單次使用，且應丟棄未使用之產品。另外，重組酶通常必須由健康照護專業人員進行重構、稀釋及投與，且該投與應不得延誤。重組酶通常必須在低溫(例如，2℃至8℃)下儲存，且該產品僅在有限量之時間(例如，至多24小時)內穩定。
當ASSC及α-Gal A存於同一組合物中時，本申請案之共調配組合物提供更穩定之組合物。除使所投與蛋白質在活體內穩定以外，ASSC可逆性地結合且使α-Gal A之構形在活體外穩定，由此預防共調配物之聚集及降解，並延長其儲架壽命。可使用業內熟知之技術(例 如，差示掃描量熱法或圓偏光二色性)來評估ASSC/替代蛋白相互作用之分析。
例如，倘若組合物之水性可注射共調配物係於適於使用針及注射器抽取內容物之具塞小瓶中提供，則ASSC之存在抑制α-Gal A之聚集。該小瓶可供單次使用或多次使用。在另一實施例中，共調配物係呈乾燥或凍乾狀態，此會需要與標準或所提供之生理稀釋劑重構成液體狀態。在此情形下，ASSC之存在使α-Gal A在重構期間及之後穩定，從而預防聚集。在共調配物係供靜脈內投與之液體(例如在與靜脈內投與管線或導管連接之無菌袋中)之實施例中，ASSC之存在賦予相同益處。
除使欲投與之替代蛋白穩定以外，ASSC之存在使得α-Gal A共調配物能夠在約7.0-7.5之中性pH下儲存。此賦予蛋白質之益處在於，通常必須在較低pH下儲存以保持穩定性。例如，胞溶體酶(例如α-Gal A)通常在低pH(例如，5.0或更低)下保持穩定構形。然而，替代酶在低pH下之經延長儲存可加快酶及/或共調配物之降解。在某些實施例中，本申請案之共調配物在介於約5與約9之間、或介於約6與約8之間、或介於約6.5與約7.5之間、或介於約7與約7.5之間之pH下仍然穩定。
如上所述，本申請案之液體共調配物具有有利的穩定性及儲存性質。液體共調配物之穩定性不取決於儲存之形式，且包括(但不限於)冷凍、凍乾、噴霧乾燥之共調配物或活性成份懸浮於其中之共調配物。穩定性可在所選擇溫度下在所選擇時間段內來量測。在本申請案之一個態樣中，於液體共調配物中之蛋白質係呈液體形式穩定至少約1週、至少約2週、至少約3週、至少約1個月、至少約2個月、至少約3個月、至少約4個月、至少約5個月、至少約6個月、至少約12個月、至少約18個月。上文所列舉時間段中間之值及範圍亦意欲為本申 請案之一部分，例如，約3個月、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月、12個月、13個月、14個月、15個月、16個月、17個月、18個月、19個月、20個月、21個月、22個月、23個月或約24個月。此外，意欲包括使用任何上文所列舉值作為上限及/或下限之組合之值之範圍。
在某些實施例中，共調配物在室溫(約30℃)或約37℃或約40℃或約45℃下穩定至少約1個月，及/或在約2-8℃下穩定至少約1年，或更佳地在約2-8℃下穩定至少約2年。在某些實施例中，共調配物在以下溫度下穩定：介於約35℃與約90℃之間、或介於約40℃與約85℃之間、或介於約45℃與約80℃之間、或介於約50℃與約75℃之間、或介於約55℃與約70℃之間、或介於約60℃與約70℃之間。此外，共調配物較佳地在共調配物之冷凍(至(例如)-80℃)及解凍(下文稱作「冷凍/解凍循環」)後穩定。
液體共調配物中蛋白質之穩定性(例如，蛋白質穩定性及/或污染降低)亦可定義為共調配物中之蛋白質之單體、聚集或片段或其組合之百分比。在某些實施例中，若在目視檢查色彩及/或澄清度時，或如藉由UV光散射或藉由尺寸排除層析、非變性PAGE或用於測定大小之其他方法等所量測，蛋白質實質上不顯示聚集、沈澱及/或變性之跡象，則蛋白質在共調配物中「保持其物理穩定性」。在本申請案之一個態樣中，穩定液體共調配物係以聚集物形式存於共調配物中之蛋白質小於約10%、或小於約5%、或小於約5%、或小於約4%、或小於約3%、或小於約2%、或小於約1%之共調配物。
在一個實施例中，液體共調配物之物理穩定性係藉由在攪拌應力分析(例如，24小時或48小時之攪拌應力分析)後測定共調配物之濁度來測定。例如，攪拌應力分析可藉由以下來實施：將適宜體積之液體共調配物置於帶有磁攪拌器(例如，多點式HP，550rpm)之燒杯 中，在任一適宜時間(例如，在T0-T48(hr))移除等份試樣，並對該等等份試樣實施適宜分析(若需要)。在相同條件下但無攪拌之共調配物之試樣用作對照。
可使用來自Hach(德國)之實驗室濁度量測系統來實施濁度量測，且其係以濁度單位(NTU)報告。
組合物之穩定性(例如，蛋白質穩定性及/或污染降低)亦可藉由(例如)量測蛋白質降解或污染物生長或存在來量測。蛋白質降解可藉由(例如)反相HPLC、非變性PAGE、離子交換層析、肽圖譜或類似方法來測定。
可在預定時間且與一或多個標準相比量測本文所述濃度下之α-Gal A在ASSC存在下之穩定性，例如，以聚集或降解之百分比形式表示。例如，適宜標準係類似於測試條件但α-Gal A不與ASSC接觸之組合物。比較α-Gal A在一定濃度下之穩定性。可顯示特定濃度下之α-Gal A以及ASSC之適宜性，即較不存在ASSC具有相當或更佳之穩定性。
活體內穩定性
如上文針對活體外共調配物所闡述，存在α-Gal A之ASSC具有延長血漿中外源性α-Gal A之半衰期之益處，由此在較長時間段內維持有效替代蛋白質含量，從而使得增加臨床上受影響組織至α-Gal A之暴露，且由此增加蛋白質至組織中之吸收。此賦予患者如下有益效應：增強緩解、降低頻率及/或降低所投與量。此亦會降低治療之成本。
除使野生型替代α-Gal A穩定以外，ASSC亦將穩定並增強內源性突變體α-Gal A之表現，該等突變體α-Gal A因阻止ER中之適當摺疊及處理之突變而有缺陷，如在諸如法布瑞氏症等構形病症中一樣。
本申請案之組合物及方法之範圍不應受本文所述之具體實施例 及所遵循之實例之限制。實際上，除彼等在本文中所述者以外，彼等熟習此項技術者應自上述說明及隨附實例及圖明瞭本申請案所述組合物及方法之各種修改。該等修改意欲屬於隨附申請專利範圍之範圍內。
實例 實例1：靜脈內投與野生型小鼠之rhα-Gal A及DGJ-HCl之藥物動力學及組織吸收
重組人類α-Gal A(rhα-Gal A)與1-脫氧半乳糖野尻黴素-HCl(DGJ-HCl)之共調配物之藥物動力學(PK)及組織吸收係在單一靜脈內(IV)輸注投與野生型(WT)小鼠後測定。(1-脫氧半乳糖野尻黴素亦稱作「AY1001」，重組人類α-Gal A亦稱作「JR051」)。
八週齡雄性WT C57BL/6小鼠(n=5)接受單獨或共調配有3mg/kg或10mg/kg DGJ-HCl(游離鹼當量分別為3.66mg/kg及12.2mg/kg DGJ-HCl)之rhα-Gal A 1mg/kg(經由頸靜脈IV輸注)。表1闡述該等化合物之莫耳比：
在JR-051後0min、15min、30min、45min、60min及90min及24hr收集血漿。在JR-051後24hr收集皮膚、心臟及腎臟。JR-051血漿含量及組織吸收係藉由活性及西方墨點來評價(參見下文方法部分)。在單獨投與之JR-051組與共調配有AT1001之JR-051組之間作比較。
結果
血漿：IV輸注投與後之WT小鼠中之α-Gal A(JR-051)之血漿PK顯 示於圖1及圖2中。DGJ與α-Gal A之共調配物改良WT小鼠中之α-Gal A PK(如藉由活性及西方墨點所量測)。總體而言，共調配DGJ與α-Gal A使α-Gal A AUC及半衰期分別增加多至4倍及5倍，如下表2中所顯示。DGJ對血漿α-Gal A含量之效應具有劑量依賴性。
心臟及腎臟組織：共調配DGJ與α-Gal A改良野生型小鼠中至腎臟中以及於心臟組織中之α-Gal A吸收(如藉由活性及西方墨點所量測)，如圖3中所顯示。總體而言，共調配DGJ與α-Gal A使α-Gal A吸收增加大於單獨投與α-Gal A所觀察到者的高達1.5倍。在皮膚中，未觀察到α-Gal A或共調配之α-Gal A+DGJ有顯著效應(數據未顯示)。
實例2：靜脈內投與GLA敲除型小鼠之rhα-Gαl A及DGJ-HCl之藥物動力學、組織吸收及受質降低
疾病相關組織中重組人類a-Gαl A(rhα-Gal A)與1-脫氧半乳糖野尻黴素-HCl(DGJ-HCl)之共調配物之藥物動力學(PK)、組織吸收及受質降低係在單一靜脈內(IV)輸注投與GLA敲除型小鼠(GLA KO)(即，缺陷內源性α-Gal A表現之小鼠)後測定。
十二週齡雄性GLA KO小鼠(n=6)經由頸靜脈IV輸注接受0.3mg/kg、1mg/kg或3mg/kg單獨或共調配有1mg/kg、3mg/kg及10mg/kg DGJ(游離鹼當量分別為1.22mg/kg、3.66mg/kg及12.2mg/kg DGJ-HCl)之JR-051。在開始輸注後0.5hr及1hr收集血漿以量測JR-051含量。心臟及腎臟中之酶吸收及GL-3含量係在投與JR-051後7天量測(參見下文方法部分)。表3闡述該等化合物之莫耳比：
結果
血漿：IV輸注投與後之GLA KO小鼠中JR-051之血漿含量顯示於圖4中。GLA KO小鼠中單獨α-Gal A之循環含量有劑量依賴性增加。共調配DGJ與α-Gal A進一步增加α-Gal A之循環含量。總體而言，DGJ共調配物使α-Gal A之血漿含量在自開始輸注起0.5hr增加多至3倍且在自開始輸注起1hr增加多至6倍。
心臟組織：GLA KO小鼠之心臟組織中之組織吸收及GL-3降低顯示於圖5及圖6中。在心臟中，單獨投與α-Gal A觀察到劑量依賴性GL-3降低及α-Gal A增加。總體而言，DGJ與α-Gal A之共調配物引起較投與單獨α-Gal A所觀察到者更大之GL-3降低及α-Gal A活性。儘管共調配α-Gal A及DGJ對心臟組織中之α-Gal A活性之效應似乎依賴DGJ之劑量，但劑量依賴性效應對於GL-3降低並不明顯。心臟中之GL-3降低表明，當共調配DGJ與較低劑量之α-Gal A(例如，0.3mg/kg或1mg/kg)時，α-Gal A之效能有所增加，從而達成類似於單獨α-Gal A之 劑量較高(3mg/kg)者之效應。
腎臟組織：GLA KO小鼠之腎臟組織中之組織吸收及GL-3之降低顯示於圖7及圖8中。在腎臟中，單獨投與α-Gal A觀察到到劑量依賴性GL-3降低及α-Gal A增加。總體而言，DGJ與α-Gal A之共調配物引起較投與單獨α-Gal A所觀察到者更大之GL-3降低及α-Gal A活性。儘管共調配α-Gal A及DGJ對腎臟組織中之α-Gal A活性之效應似乎依賴DGJ之劑量，但劑量依賴性效應對於GL-3降低並不明顯。腎臟中之GL-3降低表明，當共調配DGJ與較低劑量之α-Gal A(例如，1mg/kg)時，α-Gal A之效能有所增加，從而達成類似於單獨α-Gal A之劑量較高(3mg/kg)者之效應。
實例3：靜脈內投與GLA敲除型小鼠之rhα-Gal A及DGJ-HCl之藥物動力學、組織吸收及受質降低
在十四週齡GLA KO小鼠中測試共調配產物之重複投與。小鼠接受四次兩週一次(每兩週一次)的0.5mg/kg、1mg/kg或3mg/kg單獨或共調配有0.3mg/kg、1mg/kg、3mg/kg或10mg/kg DGJ(AT1001)之α-Gal A(JR-051)之IV大劑量注射。表4闡述該等化合物之莫耳比。量測α-Gal A之血漿及組織含量以及GL-3之組織含量。
結果 α-Gal A血漿含量
投與DGJ共調配物顯示增加α-Gal A含量之趨勢。用於α-Gal A含量之1小時時間點分析所收集之血漿係經1-2小時窗口收集。用於α-Gal A含量之2小時時間點分析所收集之血漿係經3-4.5小時窗口收集。
α-Gal組織吸收
總體而言，DGJ共調配物增加了至疾病相關組織(皮膚、心臟及腎臟)中之α-Gal A吸收。與3mg/kg及10mg/kg DGJ之共調配物使得在α-Gal A之每個劑量水準下之組織吸收皆較大。在心臟及腎臟中，當投與DGJ以及較低劑量之α-Gal A時，α-Gal A之效能有所增加，從而達成類似於單獨α-Gal A劑量較高者之效應。儘管單獨α-Gal A顯示劑量依賴性組織吸收，但在此實驗中所測試試樣中未檢測到DGJ之明顯劑量依賴性效應。
組織中之GL-3降低
如下表5-7及圖11A-C所顯示，在重複投與單獨α-Gal A之情形下，在皮膚、心臟及腎臟中觀察到劑量依賴性GL-3降低。與所有劑量之α-Gal A之DGJ共調配物在所有所測試組織中皆引起顯著更大之GL-3降低。儘管未在此實例中之所測試試樣中檢測到DGJ之明顯劑量依賴性效應，但較高劑量之DGJ(3mg/kg及10mg/kg)顯示較大GL-3降低。當共調配較低劑量之α-Gal A(例如，0.5mg/kg或1mg/kg)與DGJ(3mg/kg或10mg/kg)時，效能類似於或大於較高劑量之單獨α-Gal A 所達成者。
在2側t測試中p<0.05；#：相對於各別單獨JR-051
在2側t測試中p<0.05；#：相對於各別單獨JR-051
在2側t測試中p<0.05；#：相對於各別單獨JR-051
替代性給藥方案
在替代性方案中，將在GLA KO小鼠中測試共調配產物之重複投與。小鼠將接受0.5mg/kg、1.0mg/kg或2mg/kg單獨或或共調配有0.3mg/kg、1mg/kg、3mg/kg及10mg/kg DGJ之α-Gal A(JR-051)。該等化合物將每隔一週經由IV大劑量尾靜脈注射投與總共4次注射(總研究持續時間=8週)。表8闡述該等化合物之莫耳比。
在替代性方案中，可在GLA KO小鼠中測試共調配產物之重複投與。小鼠將接受0.3mg/kg、1.0mg/kg或3mg/kg單獨或或共調配有0.5mg/kg、1mg/kg、3mg/kg及10mg/kg DGJ之α-Gal A(JR-051)。該等化合物將每隔一週經由IV大劑量尾靜脈注射投與總共4次注射(總研究持續時間=8週)。表9闡述該等化合物之莫耳比。
實例1-3之方法 血漿α-Gal A活性之量測
對於血漿α-Gal A活性量測，在分析之前利用溶解緩衝液(1%曲拉通X-100，150mM NaCl，25mM Bis-Tris，pH 6.5)將試樣稀釋約400倍。將經稀釋血漿(20μL)添加至50μL分析緩衝液(27mM檸檬酸鈉，46mM磷酸氫二鈉，6mM 4-甲基傘形醯基-α-D-吡喃半乳糖苷(4-MUG)，90mM N-乙醯基-D-半乳胺糖，pH 4.6)中，並在37℃下培育1小時。藉由添加70μL 0.4M甘胺酸(pH 10.8)終止反應。在於355nm下激發後，在Victor3平板讀取器(Perkin Elmer,Waltham,MA)上讀取460nm下之螢光。將原始螢光計數進行背景扣除(僅由分析緩衝液界定)。每天運行7nM至15μM範圍內之4-MU標準曲線，以將螢光計數轉換成絕對α-Gal A活性，其表示為所釋放4-MU之奈莫耳數/毫升血漿/小 時(nmol/mL/hr)。
藉由西方墨點量測血漿α-Gal A蛋白
使於溶解緩衝液中之經稀釋血漿(1：50)(約10μg總蛋白)在4-12%聚丙烯醯胺凝膠(Invitrogen,Grand Island,NY)上經受SDS-PAGE，將其轉移至硝化纖維素膜(Invitrogen)，並利用兔抗人類α-Gal A一級抗體(1：2000稀釋；來自Shire Pharmaceuticals,Cambridge,MA)進行免疫墨點分析。使用過氧化酶結合型山羊抗兔二級抗體(Jackson Immunosearch Labs,West Grove,PA)以及增強之化學發光(Pierce,Rockford,IL)檢測蛋白帶。在Image Station 4000R(Kodak,Rochester,NY)上掃描墨點。
組織α-Gal A活性(吸收)之量測及西方墨點
來自突變型小鼠之組織溶解產物係藉由在200μL溶解緩衝液(0.1%曲拉通X-100，27mM檸檬酸鈉，46mM磷酸氫二鈉，pH 4.6)中利用微量均質機(Pro Scientific,Thorofare,NJ)將約50mg組織在冰上均質化3秒至5秒來製備。將溶解產物(20μL)添加至50μL分析緩衝液(27mM檸檬酸鈉，46mM磷酸氫二鈉，6mM 4-甲基傘形醯基-α-D-吡喃半乳糖苷(4-MUG)，90mM N-乙醯基-D-半乳胺糖，pH 4.6)中，並在37℃下培育1小時。藉由添加70μL 0.4M甘胺酸(pH 10.8)終止反應。在於355nm下激發後，在Victor3平板讀取器(Perkin Elmer,Waltham,MA)上讀取460nm下之螢光。將原始螢光計數進行背景扣除(僅由分析緩衝液界定)。根據製造商說明書使用BCA蛋白分析(Pierce,Rockford,IL)來測定組織溶解產物中之總蛋白濃度。每天運行1.3nM至30mM範圍內之4-MU標準曲線，以將螢光計數轉換成絕對α-Gal A活性，其表示為所釋放4-MU之奈莫耳數/毫升總蛋白/小時(nmol/mL/hr)。對於組織西方墨點而言，隨後將完全相同之程序如上所述用於血漿，只是使用50μg組織溶解產物。
組織GL-3含量之量測
使用Fast Prep均質機(Pro Scientific,Thorofare,NJ)在水(1：16.7組織：水)中均質化小鼠組織。添加5×均質物之體積之丙酮：甲醇(50：50)。在Fast Prep系統中渦旋、再均質化試樣，並在室溫下以10600g離心10分鐘。藉由添加200μL二甲亞碸(DMSO)、50μL乳糖苷基神經醯胺內部標準物(來自牛乳酪；Matreya,LLC,Pleasant Gap,PA)(最終濃度為1.4μg/mL)及600μL水：甲醇(13：87)，隨後進行渦旋來製備每一上清液(200μL上部有機部分)用於固相萃取。固相萃取係在預條件化之Bond Elut 40μm、100mg C-18管柱(Varian公司，Palo Alto,CA)上藉由以下來實施：用67：23：10甲醇：丙酮：水洗滌，並用1mL 9：1丙酮：甲醇洗脫至含有200μL於DMSO中之0.2mM乙酸鈉之矽烷化玻璃培養管中。總GL-3含量係自20μL每一試樣萃取物且藉由液相層析-串聯質譜(LC-MS/MS)來測定。LC係使用丙酮：甲醇：乙腈(ACN)以及乙酸鈉二元流動相系統(流動相A：40：60甲醇：水以及0.1mM乙酸鈉；流動相B：75：15：10丙酮：甲醇：CAN以及0.1mM乙酸鈉)以0.5mL/min之流速在C18管柱(Aqua 3μm 100×3.0mm,125A,Phenomenex,Torrance,CA)上來實施。最終GL-3洗脫條件為90%流動相B。MS/MS分析係在正離子模式(ESI+)下實施，且在每一試樣中識別GL-3之十二種不同同種型[C16：0、C18：0、C20：0、C22：1、C22：0、C23：0、C22：0(2OH)、C24：2、C24：1、C24：0、C24：1(2OH)、C24：0(2OH)]以及內部標準物。監測到以下轉變：C16：0，m/z 1046.70→m/z 884.7；C18：0，m/z 1074.8→m/z 912.8；C20：0，m/z 1102.8→m/z 940.8；C22：1，m/z 1128.8→m/z 966.8；C22：0，m/z 1130.9→m/z 968.8；C23：0，m/z 1144.9→m/z 982.8；C22：0(2OH)，m/z 1146.9→m/z 984.8；C24：2，m/z 1154.9→m/z 992.8；C24：1，m/z 1156.9→m/z 994.8；C24：0，m/z 1158.9→m/z 996.9；C24：1(2OH)，m/z 1172.9→m/z 1010.8； C24：0(2OH)，m/z 1174.9→m/z 1012.8；及乳糖苷基神經醯胺內部標準物，m/z 982.9→m/z 820.8。為進行定量，測定每一同種型之面積計數，且然後進行加和從而獲得總GL-3面積計數。測定總GL-3面積計數對內部標準物之面積計數之比率，且基於應用至於DMSO中製得之11點校準曲線之線性最小平方擬合方程式，使用該比率計算每一試樣中GL-3之最終濃度。將總GL-3量測值正規化為每一試樣之濕組織重量。
實例4：共調配DGJ與α-Gal A增加α-Gal A在活體內血液中之穩定性
檢驗共調配α-Gal A與DGJ對α-Gal A在活體內血液中之穩定性之效應。在37℃下測定全血中之α-Gal A活性之時間依賴性損失。利用或不利用10μM DGJ調配5nM及50nM α-Gal A。如圖9A-B中所顯示，當不利用DGJ調配時之α-Gal A在全血試樣中之半衰期為約4-5小時。DGJ使酶穩定且防止酶去活化。
實例5：共調配DGJ與α-Gal A增加在源於法布瑞氏症患者之細胞中之酶吸收及GL-3降低
測定共調配α-Gal A與DGJ對源自法布瑞氏症患者之R301Q及C52S纖維母細胞中之α-Gal A吸收及GL-3降低之效應。測試0.5nM單獨或共調配有0.1μM、1.0μM、10μM或100μM DGJ之α-Gal A。如圖10A及C中所顯示，在R301Q細胞中，DGJ使JR051之吸收增加多至3倍，相比之下，使Fabrazyme®之吸收增加多至4.6倍。如圖10B及D中所顯示，在C52S細胞中，DGJ使兩種酶之吸收增加多至4.2倍。圖形條代表來自4個單獨實驗之所編譯數據之平均值。
就降低GL-3含量而言，如圖10E-H中所顯示，在兩種細胞系中，0.5nM之JR051引起與Fabrazyme®類似之GL-3含量降低(約為基線之70-80%)。另外，該兩種酶之間的與DGJ共培育後之降低亦類似(約為基線之40-50%)。圖形條代表來自4個單獨實驗之所編譯數據之平均 值。
本發明之範圍並不限於本文所述具體實施例。實際上，除彼等本文所述者外，彼等熟習此項技術者根據上文說明及附圖應明瞭本發明之各種修改。該等修改意欲屬於隨附申請專利範圍之範圍內。此外，本文所列舉之任何範圍及濃度中間之範圍及濃度亦意欲為本申請案之一部分。
本申請案通篇引用專利、專利申請案、出版物、產品說明、GenBank登錄號及方案，該等之揭示內容係出於所有目的而以全文引用方式併入本文中。

Claims (16)

  1. 一種醫藥組合物，其包含以下之共調配物：介於約0.5μM與約20μM之間之α-半乳糖苷酶A；及介於約50μM與約20,000μM之間之1-脫氧半乳糖野尻黴素(1-deoxygalactonojirimycin)或其醫藥上可接受之鹽，其中該醫藥組合物經調配以非經腸投與個體。
  2. 如請求項1之醫藥組合物，其中該α-半乳糖苷酶A係重組人類野生型α-半乳糖苷酶A。
  3. 如請求項1之醫藥組合物，其中該1-脫氧半乳糖野尻黴素係1-脫氧半乳糖野尻黴素之鹽酸鹽。
  4. 如請求項1之醫藥組合物，其中該醫藥組合物經調配以靜脈內投與。
  5. 如請求項1之醫藥組合物，其中該α-半乳糖苷酶A係以選自由約1.2μM、2μM、4μM、8μM及12μM組成之群之濃度存在；且該1-脫氧半乳糖野尻黴素係以選自由約449μM、1,495μM、4,490μM及14,950μM組成之群之濃度存在。
  6. 如請求項1之醫藥組合物，其中該1-脫氧半乳糖野尻黴素及該α-半乳糖苷酶A係以1-脫氧半乳糖野尻黴素對α-半乳糖苷酶A之莫耳比介於約13,000：1與約50：1之間存在。
  7. 一種治療個體之法布瑞氏症(Fabry disease)之方法，其包含向該個體投與包含以下之共調配物之醫藥組合物：介於約0.5μM與約20μM之間之α-半乳糖苷酶A；及介於約50μM與約20,000μM之間1-脫氧半乳糖野尻黴素或其醫藥上可接受之鹽，其中該醫藥組合物係以非經腸投與該個體。
  8. 如請求項7之方法，其中該醫藥組合物係靜脈內投與。
  9. 如請求項7之方法，其中該醫藥組合物係以一劑量投與，其中α-半乳糖苷酶A之劑量係介於約0.1mg/kg與約5mg/kg之間，且1-脫氧半乳糖野尻黴素之劑量係介於約0.1mg/kg與約15mg/kg之間。
  10. 如請求項7之方法，其中α-半乳糖苷酶A之劑量係選自由約0.3mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、2mg/kg及3mg/kg組成之群。
  11. 如請求項7之方法，其中1-脫氧半乳糖野尻黴素之劑量係選自由約0.1mg/kg、0.3mg/kg、1mg/kg、3mg/kg及10mg/kg組成之群。
  12. 如請求項7之方法，其中α-半乳糖苷酶A之劑量係1mg/kg，且其中1-脫氧半乳糖野尻黴素之劑量係3mg/kg。
  13. 如請求項7之方法，其中該醫藥組合物係以足以在投與一劑量後在約0.2小時與約5小時之間之時間點達成α-半乳糖苷酶A之尖峰血漿濃度之劑量投與。
  14. 如請求項7之方法，其中投與該醫藥組合物每天一次、每兩天一次、每三天一次、每四天一次、每五天一次、每六天一次或每七天一次。
  15. 如請求項7之方法，其中該個體係哺乳動物。
  16. 如請求項7之方法，其中該個體係人類。
TW102125649A 2012-07-17 2013-07-17 用於治療法布瑞氏症的α－半乳糖苷酶Ａ及１－脫氧半乳糖野尻黴素之共調配物 TWI594763B (zh)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261672566P 2012-07-17 2012-07-17

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TW201408319A true TW201408319A (zh) 2014-03-01
TWI594763B TWI594763B (zh) 2017-08-11

Family

ID=49949213

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW106121988A TW201803589A (zh) 2012-07-17 2013-07-17 用於治療法布瑞氏症的α-半乳糖苷酶Ａ及１-脫氧半乳糖野尻黴素之共調配物
TW102125649A TWI594763B (zh) 2012-07-17 2013-07-17 用於治療法布瑞氏症的α－半乳糖苷酶Ａ及１－脫氧半乳糖野尻黴素之共調配物

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW106121988A TW201803589A (zh) 2012-07-17 2013-07-17 用於治療法布瑞氏症的α-半乳糖苷酶Ａ及１-脫氧半乳糖野尻黴素之共調配物

Country Status (6)

Country Link
US (2) US9694056B2 (zh)
EP (1) EP2874648A4 (zh)
CA (1) CA2917995C (zh)
HK (1) HK1209625A1 (zh)
TW (2) TW201803589A (zh)
WO (1) WO2014014938A1 (zh)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2652553C (en) 2006-05-16 2020-08-18 Amicus Therapeutics, Inc. Use of 1-deoxygalactonojirimycin or a salt thereof in the treatment of fabry disease
ES2541933T3 (es) 2008-02-12 2015-07-28 Amicus Therapeutics, Inc. Método para predecir la respuesta al tratamiento farmacológico con chaperona de enfermedades
US9603362B2 (en) * 2014-03-14 2017-03-28 Solenis Technologies, L.P. Organic acid antimicrobial compositions
GB201508025D0 (en) 2015-05-11 2015-06-24 Ucl Business Plc Fabry disease gene therapy
FI3957320T3 (fi) 2015-12-30 2023-11-23 Amicus Therapeutics Inc Vahvistettu hapan alfa-glukosidaasi pompen taudin hoitoon
BR112018013151A2 (pt) 2015-12-30 2018-12-18 Amicus Therapeutics Inc alfa-glicosidase ácida aumentada para o tratamento da doença de pompe
EP3432882B1 (en) * 2016-03-22 2021-09-01 Amicus Therapeutics, Inc. Methods of treating fabry disease in patients having the g9331a mutation in the gla gene
US11357834B2 (en) * 2017-01-10 2022-06-14 Amicus Therapeutics, Inc. Recombinant α-galactosidase A for treatment of Fabry disease
US10251873B2 (en) 2017-05-30 2019-04-09 Amicus Therapeutics, Inc. Methods of treating fabry patients having renal impairment
ES2716305B2 (es) 2017-12-11 2019-11-27 Fund Biomedica Galicia Sur Uso de chaperonas farmacologicas para el tratamiento de enfermedades de deposito lisosomal
KR20200128676A (ko) 2018-02-06 2020-11-16 아미쿠스 세라퓨틱스, 인코포레이티드 임신 환자의 파브리병 치료를 위한 미갈라스타트의 용도
WO2020047282A1 (en) 2018-08-29 2020-03-05 University Of Copenhagen Lysosomal enzymes modified by cell based glycoengineering
WO2020046132A1 (en) 2018-08-31 2020-03-05 Leiden University Pharmacological chaperones for enzyme treatment therapy
NL2021840B1 (en) 2018-10-19 2020-05-13 Univ Leiden Pharmacological Chaperones For Enzyme Treatment Therapy
AU2020327019A1 (en) 2019-08-07 2022-03-03 Amicus Therapeutics, Inc. Methods of treating Fabry disease in patients having a mutation in the GLA gene
US11623916B2 (en) 2020-12-16 2023-04-11 Amicus Therapeutics, Inc. Highly purified batches of pharmaceutical grade migalastat and methods of producing the same

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6458574B1 (en) 1996-09-12 2002-10-01 Transkaryotic Therapies, Inc. Treatment of a α-galactosidase a deficiency
GB9909066D0 (en) 1999-04-20 1999-06-16 Oxford Glycosciences Uk Ltd Therapies
AU2001269923A1 (en) * 2000-06-19 2002-01-02 Genzyme Corporation Combination enzyme replacement, gene therapy and small molecule therapy for lysosomal storage diseases
EP2361631A1 (en) 2002-04-25 2011-08-31 Shire Human Genetic Therapies, Inc. Treatment of alpha-galactosidase a deficiency
SI2332567T1 (sl) 2003-01-31 2015-08-31 The Mount Sinai School Of Medicine Of New York University Kombinirana terapija za zdravljenje motenj pomanjkanja proteina
US7446098B2 (en) 2003-02-18 2008-11-04 Mount Sinai School Of Medicine Of New York University Combination therapy for treating protein deficiencies
AU2004293115A1 (en) * 2003-11-25 2005-06-09 Mount Sinai School Of Medicine Of New York University Chaperone-based therapy for Niemann-Pick disease
US20100113517A1 (en) * 2007-03-30 2010-05-06 Amicus Therapeutics, Inc. Method for the treatment of fabry disease using pharmacological chaperones
MX2009011473A (es) * 2007-04-26 2010-01-18 Amicus Therapeutics Inc Regimenes de dosificacion para el tratamiento de enfermedades por almacenamiento lisosomal que utilizan chaperonas farmacologicas.
US9206457B2 (en) * 2009-05-26 2015-12-08 Amicus Therapeutics, Inc. Utilization of pharmacological chaperones to improve manufacturing and purification of biologics

Also Published As

Publication number Publication date
CA2917995A1 (en) 2014-01-23
US9694056B2 (en) 2017-07-04
CA2917995C (en) 2021-01-26
TWI594763B (zh) 2017-08-11
EP2874648A4 (en) 2015-12-30
TW201803589A (zh) 2018-02-01
US20150174214A1 (en) 2015-06-25
EP2874648A1 (en) 2015-05-27
US10357548B2 (en) 2019-07-23
US20170360901A1 (en) 2017-12-21
HK1209625A1 (zh) 2016-04-08
WO2014014938A1 (en) 2014-01-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI594763B (zh) 用於治療法布瑞氏症的α－半乳糖苷酶Ａ及１－脫氧半乳糖野尻黴素之共調配物
JP6952831B2 (ja) ポンペ病の処置のための高濃度α−グルコシダーゼ組成物
US10155027B2 (en) Alpha-galactosidase A and 1-deoxygalactonojirimycin co-formulation for the treatment of fabry disease
ES2566549T3 (es) Formulaciones estables de enzima degradante de hialuronano
JP7436545B2 (ja) 高ｍ６ｐ組換えタンパク質の選択方法
KR102365936B1 (ko) Adamts13의 피하 투여
JP2023166014A (ja) コラーゲン７組成物及びそれを用いる方法
JP2023062160A (ja) グルコセレブロシダーゼ及びイソファゴミンを含む製剤
JP6516855B2 (ja) Ｃ１エステラーゼ阻害剤の医薬製剤
EA045023B1 (ru) Подкожное введение adamts13

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Annulment or lapse of patent due to non-payment of fees