TW200918103A - Use of novel compound having affinity for amyloid, and process for production of the same - Google Patents

Description

200918103 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 【0001】 本發明係有關於新舰粉樣蛋自親和性化合物的使用及製造 方法’特別是’以全身性澱粉樣難病（amylGidQsis)為首的澱 粉樣蛋白（a_id)蓄積疾病_靖方面，對於病灶部位婦樣 蛋白的制’極為有用，係有關於生齡織巾賴粉樣蛋白檢測 試藥。 、 【先則技術】 【0 0 0 2】 。被稱為殿粉樣蛋白的纖維狀蛋白質，因為沉積於體内各個不 同器官或組織而導致發病的疾病，總稱為殿粉樣變性病 («Sis)。殿粉樣變性病共通之處，是被稱為祕 的-種含豐富乙型-片U_sheet)結構的纖維狀蛋白質沉積於八 身各臟ϋ或局部，使賴料_魅魏料的骸彡。所_ : 粉樣蛋白，顧粉樣蛋白f或變異f狀腺運送蛋自 (transthyretin)、冷2 微小球蛋白（Beta 2 m彳 7 u . 各獅粉樣蛋白的前____ 等 體的總稱。殿粉樣蛋白，無綠由哪—種白^集 所形成’都具有豐富乙-(一結構 =:蛋: 乙塑-片祕_縣心寧⑷錢黃素I:與) 200918103 專的化&物就都具有殺粉棒蛋白親和性的特徵。 [0003] 澱粉樣變性病（amyloidosis)，因為殿粉樣蛋白的沉積型離， 可以分類物畴繼㈣（systemie _。心⑷^局 部性殿粉樣難病（local a_id〇sis)。 王身!·生从樣變性病，係在全身的各個部份因為殿粉樣蛋白 沉積而引起的絲。全身性麟樣變性病，例如：撕臟做出的 樣蛋自⑼積全身的II▼而發生障礙的家族性澱粉樣變性 病；心臟及侧料大藝處，麟縣自_的料性甲狀腺 運k蛋白;祕樣雖病；長期騎病患的骨、關科處發病的透 析殿粉樣變_;慢,_節風濕症（rheumatism)等的慢性發炎 性疾病續發急性期蛋白—血清缝狀蛋白A (serum _oid A; SAA)所致的澱粉樣蛋白沉積而發病的反應性aa ;殿粉樣變性病（續 2也殿粉樣變性病）；由免疫球蛋白起源的澱粉樣蛋白沉積全身臟 器而發病的免疫細胞性澱粉樣變性病等。 局部性澱粉樣變_，係一部份臟器中，殿粉樣蛋白沉積而 弓丨起的疾病。局雜驗樣變性病，例如：麟樣蛋白沉積在腦 相阿!!海默氏症（Alzheimer dis酸）、腦血管殿粉樣變性病、 庫貝氏病（Creutzfeldt-Jakobdisease)等的腦驗樣變性病以 卜第一型糖尿病伴心胰臟或騰島瘤處殿粉樣蛋 200918103 白沉積 ㈣蛋自沉麵时麟粉觀性病，皮膚處 •澱粉樣變性病等。 [0004] 澱叔樣變性病的診斷，如果是全身性澱粉樣變性病的情形 時、，先從可以做活組織切片（bi〇㈣的部位如皮膚、腎臟、 :腸等採输織果紅染色或硫黃素τ染色來進行，剛果紅 疋種對殿私樣蛋白的乙型片親和性很高的勞光性化合物，藉由 化種疋向排列性（orientati〇n)在偏光顯微鏡下呈現雙折射 (Birefri_ce)，所以可以將組織内沉積的殿粉樣蛋白_性 地染色。同樣地，硫黃素了也是具有麟樣蛋白親和性的營光性 化合物，和剛果紅-樣地被使用著。齡這樣的組靖色，得到 陽性結果後’再配合使用抗體的免錢色等，可以進行確定診斷。 但是，用剛果紅或硫黃素τ自色，即使在偏光顯微鏡下觀察，也 有很難判定陽性的時候。 [0005] 另一方面，近年來，正子射出斷層攝影（p〇sitr〇nEmissi〇n Tomography ; PET)、單光子射出電腦斷層攝影（Single ph〇t〇n Emission Computed Tomography; SPECT)、磁核共振攝影（Magnetic 200918103

Resonance Imaging)等的影像診斷設備顯著地普及的同時，全身 性澱粉樣變性病用影像診斷的方法也一直被研究著。 但是’剛果紅或硫黃素τ，標示作為影像診斷探索劑（pr〇be) 來使用時，制祕蛋自的結合特紐（speeifieity)很差，無 法得到良好的檢測敏感度，是其缺點。 再者’由_果紅具有致舰，不能應用在人體的診斷用途 上。 因此對全身性澱粉樣變性病的親和性和檢測度高、也可以應 用在生體内（^㈣檢測的螢光試藥，即剛果紅衍生物—雙 羥基羰基-4-羥基）苯乙烯基苯 (bis C3-hydroxycarbonyl-4-hydroxy) styrylbenzene ； BSB) 或其衍生物，就被討論過《非專利文獻十四、專利文獻七》。咖， 因為躲㈣腦殿粉樣變性病和全身性澱粉樣變性病的殿粉樣蛋 白有很同的親和性、其結構上又不具聯苯胺（b㈣^㈣的处構， 減少致紐的問題’有人報告域·標示可赠秘像診斷探 [0006] 面腦;#01秦樣變性病的代表例是阿兹海默氏症 (Alzheimer disease ’以下稱為⑹，因為不可能從生體切片取 樣，將具有很高的殿粉樣蛋白親和性化合物作為標記物（marker) 200918103 使用，從生體内（in vivo)檢測AD的嘗試已經在進行中。 像這樣的腦内澱粉樣蛋白影像診斷用探索劑，其大多數是對 殿粉樣蛋白親和性很高、且腦部滲移性很高、疏水性 (hydrophobic)低分子化合物，用各種放射性核種如碳u (11〇、 氟18 ( F)、和硪123 (1231 )等標示後的化合物。具體實例，有： 以6-碘-2-[4’ -(N，N-二曱基氨基）笨基]苯並噻唑（6_i〇d〇 2-[4 -(N，N-dimethylamino) phenyl] benzothiazole ;以下稱 為「TZDM」）、或6-羥基-2-[4，-(N-曱基氨基）苯基]笨並噻唑 (6-hydroxy-2-[4’ - ( N-methylamino) phenyl]benzothiazole;以下稱為「6-0H-BTA-1」）等為首之種種 的硫黃素（Thioflavine)衍生物《專利文獻一、非專利文獻三》； 以（E)-4-曱基氨基-4’ -經基笑 ((E)-4-methylamino-4，-hydroxystilbene;以下稱為 「SB-13」）、或(E)-4-二曱基氨基-4’磁芪 ((E)-4-dimethylamino-4，-iodine-stilbene;以下稱為 「m-I-SB」）等為首之種種芪化合物《專利文獻二、非專利文獻四、 非專利文獻五》；以6-碘-2-[4’ -(N，N-二甲基氨基）苯基]苯並喔 口坐(6-iod〇-2-[4’ - (N，N-dimethyl amino) phenyl] benoxazole ;以下稱為「IBOX」）、6-[2-(氟）乙氧基]-2-[2-(2-二 甲基氨基噻唑-5-基）乙烯基]苯並噁唑 (6-[2-(flouro)ethoxy]-2-[2- (2-dimethylamino thiazol 200918103 -5-yl) ethenyl]benzoxazole)為首之苯並。惡唾衍生物《非專利 文獻六、非專利文獻七》；以2-(1-{6-[(2-氟乙基）（曱基）氨基]-2-萘基}亞乙基）丙二腈（2-(l-{6- [(2-fluoro ethyl) (methyl)amino]-2-naphthyl}ethylidene) malononitrile ;以下 稱為「FDDNP」）為首的DDNP衍生物《專利文獻四、非專利文獻八》; 及，以6-峨-2-[4, -(N，N-二曱基氨基）苯基]味唑並[u-a]n比啶 (6-iodine-2-[4, -(N, N- dimethylamino) phenyl] * imidazo[l，2-a]pyridine ;以下稱為「IMPY」）為首的咪唑並吡啶 (lmidazopyridine)衍生物《專利文獻三、非專利文獻九》等用 C或放射性鹵素標示的化合物，都一直有人提出報告。還有，·關 於這些影像診斷用探索劑（probe)的一部份，實施頭部影像（ imaging)研究，在阿兹海默氏症病人方面，所謂健康正常例子， 也有報告明確齡放射能異常地缝㈣部《料敎獻十、非 專利文獻十一、非專利文獻十二、非專利文獻十三》。 還有’國際公報第2007/002540號說明小冊中，揭露以殿粉 樣蛋白親和ί±為基礎，用乙二醇（6卿16卿1灿）或聚乙二醇 (polyethyleneglycoi)為介質’結合放射性同位素標示部位的 一系列化合物《專利文獻五》。 再者’國際公報第讀/o議號說明小冊中，揭露有抑制

腦内代謝為目的，έ士人从朴去A pfJ 口5個原子的方香族雜環基所做成的一系列 化合物《專利文獻六》。 糸列 200918103 [0007] 【專利文獻一】特表2004-506723號公報。 【專利文獻二】特表2005-504055號公報。 【專利文獻三】特表2005-512945號公報。 【專利文獻四】特表2002-523383號公報。 【專利文獻五】國際公報第2007/002540號說明小冊。 【專利文獻六】國際公報第2007/063946號說明小冊。 【專利文獻七】國際公報第2005/016888號說明小冊。 【非專利文獻一】J. A. Hardy & G. A. Higgins, Alzheimer s Disease: The Amyloid Cascade Hypohesis. M ,

Science, 1992, 256，頁 184-185 。 【非專利文獻二】G. McKhann 等人，“Clinical diagnosis of Alzheimer s disease: Report of the NINCDS-ADRDA Work Group under the auspices of Department of Health and Human Services Task Force on Alzheimer s Disease." , Neurology, 1984, 34,頁 939-944。 【非專利文獻三】Z. -P. Zhuang等人，“Radioiodinated Styrylbenzenes and Thioflavins as Probes for Amyloid Aggregates. ”，J. Med. Chem.，2001，44,頁 1905-1914 o 200918103 【非專利文獻四】Masahiro Ono等人，“llC-labeled stilbene derivatives as A/3-aggregate-specific PET imaging agents for Alzheimer s disease." , Nuclear Medicine and Biology, 2003， 30，頁 565-571 。 【非專利文獻五】H. F. Kung等人，“Novel Stilbenes as Probes for amyloid plaques .，，，J. American Chemical Society, 2001，123，頁 12740-1274卜 【非專利文獻六】Zhi-Ping Zhuang等人，“IBOX (2-(4’ -dimethylaminophenyl) -6- iodobensoxazole): a ligand for imaging amyloid plaques in the brain. ”，Nuclear Medicine and Biology, 2001，28，頁 887-894。 【非專利文獻七】Furumoto Y等人，“rc]BF-227: A New nC-Labeled 2-Ethenylbenzoxazole Derivative for Amyloid-/3 Plaques Imaging. ” , European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging，2005，32，Sup. 1，頁 759。 【非專利文獻八】Eric D. Agdeppa等人， M2-Dia1ky1amino-6-Acy1ma1ononi tri1e Subst i tuted Naphthalenes (DDNP Analogs): Novel Diagnostic and Therapeutic Tools in Alzheimer s Disease.，，，Molecular Imaging and Biology, 2003， 5，頁 404-417 。 12 200918103 【非專利文獻九】Zhi-Ping Zhuang等人， “Structure-Activity Relationship of

Imidazo[l, 2-a]pyridines as Ligands for Detecting/3-Amyloid Plaques in the Brain. ”，J. Med. Chem, 2003，46，頁 237-243。 【非專利文獻十】W. E. Klunk等人，“Imaging brain amyloid in Alzheumer s disease with Pittsburgh Compound-B.”，Ann. Neurol.，2004，55，頁 306-319。 【非專利文獻H】Nicolaas P. L. G. Verhoeff等人，. “In-Vivo Imaging of Alzheimer Disease β-Amyloid With [11CJSB-13 PET.M , American Journal of Geriatric Psychiatry, 2004， 12，頁 584-595 。 【非專利文獻十二】Hiroyuki Arai等人，"[llC]-BF-227 AND PET to Visualize Amyloid in Alzheimer s Disease Patients", Alzheimer s & Dementia: The Journal of the Alzheimer s Association, 2006，2，Sup. 1, S312。 【非專利文獻十三】Christopher M. Clark等人，"Imaging Amyloid with 1123 IMPY SPECT1’，Alzheimer’s & Dementia: The Journal of the Alzheimer s Association, 2006, 2, Sup. 1, S342。 【非專利文獻十四】D. M. Skovronskyetal·, Proc. Natl. Acad. Sci.，2000，97, 7609。 13 200918103 【發明内容】 【發明所欲解決之問題】 [0008] 如同前述，以澱粉樣蛋白作為對象的影像診斷探索劑，雖然 已經揭露各種化合物’但是以臨赫用為導向的研究仍在進行著。 TZDM、ΙΒ0Χ及的峨用鬥：標示後的化合物，應用在 正苇老鼠的實驗結果，給藥後2分鐘的時點，任何一者都可發現 向腦部滲移。但是這些化合物從正f組織藝清力（dearance) 並不充分，隨著投與後的時間經過，顯示有慢慢地向腦内集積的 傾向（特表 2005-512945 號公報、Zhi-PingZhuang 等人，Nuclear Medicine and Biology，2001，28，頁 887-894、H. F. Kung 等 人，J. Am. Chem. Soc.，2001，123，頁 12740-12741)。從正常 組織的廓清力不充分的話，則無法得到澱粉樣蛋白集積部份完整 的對照影像，此為其問題。SB-13用[UC]標示後的化合物，用於大 老鼠的實驗，得到的結果顯示具有從正常組織的廓清力，但是該 庵β力的速度也s尤不上很快（Masahiro Ono等人，Nuclear

Medicine and Biology, 2003，30，頁 565 - 571 )。 【0009】 另一方面’ IMPY為首的具有咪唾並η比唆（imidazopyridine) 骨架結構的化合物，投與後真有向腦内滲移、集積在澱粉樣蛋白 14 200918103 處的性質之同時，和前述化合物不同，具有較快的正常組織廓清 力’性質較優，此點在[125ι]標示化合物所做實驗之結果中已經明 確顯示了。但疋’ IMPY在基因逆向變異測試（Reverse Mutation

Test)係呈現陽性的化合物，此化合物作為影像診斷探索劑使用 的時候，就必須充分地注意莫投與量和投與形態（國際公開第〇3 /106439號說明小冊）。 關於FDDNP ’也有報告指出在基因逆向變異測試（reverse mutation test)中呈現陽性（國際公開第〇3/1〇6439號說明小 冊）。 [0010] 以澱粉樣蛋白為標靶的影像診斷探索劑，具有澱粉樣蛋白親 和性、從正常組織的廓清力#常快速的IMPY讀點能繼續維持， 而致犬變性的毒性能被抑制，這樣的化合物是合於理想、可以使 用，但目刖時點，具備此種性能的化合物尚未有人提出。 【0011】 本發明有鑑於前述情況，藉由提供具有澱粉樣蛋白親和性、 且致大變性的毒性被抑制的化合物，可以做到生體外及生體内的 樣蛋白尚敏感度檢測，此為本發明之目的。 15 200918103 【解決問題的方法】 [0012] 本發明團隊發現：將氫氧基鍵合在咪唑並吡啶 (lmidazopyridine)〜苯基（phenyl) f架結構上的碳的化合物， 具備了對殿粉樣蛋自的親和性，並且，致突變性等的毒性很低， 以及’將該化合物群類作為探賴使用，則無論在生體外和生體 内都能高敏感度地檢測殿粉樣蛋白，完成本發明。 【0013】 也就是說，依據本發明的-個面向，係提供，含有下列化學 式⑴： 【0014】 【化9】

16 【0015】 200918103 所表示的化合物或其魅所做成的檢觀積生織峽粉樣蛋 白之檢測試藥。 Γ0016] 所謂生體組織’係已知_粉樣變性病（amyiGidQsis)的各 種沉積殿粉樣蛋白的組織。像這樣的生體組織的代表性例子有 腦、心臟、肺臟、胰臟、骨路、關料，最具代表性的生體組織 是腦。以腦騎㈣情料’代表性的_觀性絲是阿兹海 默症（Alzheimer，s disease ; AD)、路易氏體失智症⑽_ with Lewy bodies ; DLB)。 【0017】 ’ 化學式⑴巾，R3係下耻學式所絲之化學基； 【0018】 【化10】 • 1 | I * *| R1— Η〇 -c- η m •0-^ « 【0019】 R1係放射性鹵素取代基；m制〜4的整數；n係〇或i的整數 200918103 放射性鹵素，可以使用各種核種，較理想的是從氟18 (1卞）、溴 75 (75Br)、溴 76 )、碘 123 (,)、碘 ΐ24 (124ι)、碘 (巧） 和峨131門）所形成群類選出。又，化學式⑴中，㈣的情 形時，m=〇〜4較為理想;㈣的情形時，㈣〜斗較為理想。 【0020】 A、A、A、和A4各自獨立，係碳或氮，但至少有一者是碳。^、 A和A之中’有二個以上是碳則較為理想；全部都是碳， 則更紐想。再者，化學式（1)巾，R3健合在A1、A2、A3、 或A的任者的石反。a、a2、a3、和人4之任一者，係沒有與p 鍵CT的㈣情形時’與之鍵合的氫原子就不被取代。前述化學式 ⑴所不的氫氧基’可以和構成該苯基骨架結翻任何—個碳妙 合’不過，若_苯基骨钱_ 4，位制赌合是最理想^ R_合位置’並沒有特別限制A1、A2、A3、或V之碳，但是A3 的石反、亦即6位置的碳是較為理想的。 前述化學式⑴之化合物係新規化合物，而本發明，依其另 -面向，係提供放射性#素標示有機化合物的製造方法。包含· 調製含有下舰學式⑵所㈣聽合物 射 性鹵素離子的反應溶液的_作業， /、放射 18 [0022]200918103 【化11】

[0023] 〔化學式中，A1、A2、A3和A4係個別獨立的碳或氮； R4係下列化學式所表示之化學基， 【0024】 【化12】

[0025] m係0〜4的整數； η係0或1的整數。 R2，當m=n=0時，R2係非放射性鹵素取代基、确基（nitro)取 代基、碳數3〜12的三烧基銨（trialkyl ammonium)取代基、碳 19 200918103 數3〜12的三烧基曱錫烧基（trialkyl stannyl)取代基或三笨 基曱錫烧基（triphenyl stannyl)取代基；當111妾0及/或11关〇 時’ R2係非放射性鹵素取代基、曱烧續酸（methane sulfonic acid) 取代基、三氟甲烧續酸（trifluoromethane sulfonic acid)取 代基、或芳香族項酸取代基。此處，A1、A2、A3、和A4之中，至 少有一者係碳；R4係結合在A1、A2、A3、或A4的碳。〕 及 藉由將反應條件給予前述反應溶液，合成含有下列化學式（1)所 表示的化合物或其鹽類的合成作業， [0026] 【化13】

[0027] 〔化于式中’ A、A、A3和A4係與化學式（2)相同； R3係下列化學式所表示之化學基， 20 [0028] 200918103 f化14】

【0029】

Rl係放射性齒素取代基； 至少有一者係碳；R3係結合在A1、 m和n係與化學式（2)相同。 此處，Α!、Α2、Α3、和Α4之中， A2、A3、或 Α4 的碳。〕 · 包含以上二者為其特徵的放射性鹵 素標示有機化合物的製造方法 【〇〇3〇】 化學式（2)中，A1、A2、A3、和A4久白猸, 徊s A各自獨立，係碳或氮 ―至夕有一者是碳。Al、A2、A3 較兔㈣ Λ之中，有二個以上是碳 季4理想；全部都是礙’則更為理想。再者，化學式⑵ 係結合在Υ、Α2、Α3、或y.的任—者的碳。V、γ、八3、和 之任—者’係沒有與R4鍵合的碳的情形時，與之鍵合的氣原^ 7取代。前述化學式⑵所示的氫氧基，可以和構成該苯基 ，的任何—個碳結合’不過’若與該笨架結構的4，位置的碳妹 是最理想的。R4的結合位置，於A1、A2、Α3、 反、、、σ Λ、或Λ之碳，並 21 200918103 有特別限制，但是的碳、亦即6位置的碳是較為理想的。 【0031】 凋製含有前述化學式⑵所表之前驅物化合物或其鹽類與放 射性鹵素料的反應溶㈣健，例如，將前輸化合物或其鹽 類溶解於惰性有機溶射，此處，勤加人以已知的方法所得到 的含放射性卣素離子的溶液，就可以進行了。 惰性有機賴’可贿用不與該前驅物化合物或其鹽類及放 射性i素離子有反應性的各種輔，例如，所使⑽放射性函素 疋放射|±蛾的h形’可以適當使用的是甲醇；所使用的放射性函 素是放射性氟的情形，可以適當使用的是乙腈（acetGnitriie)。 合成前述化學式（1)所表的化合物或其鹽類的合成作業中， 給予反應容易的反應條件，化學式（2)的化合物的R3，用添加到 反應洛液中放射性鹵素離子來取代的反應，只要能使反應進行的 條件即可，並沒有特別的限制，按照放射性由素離子的種類，可 以使用一般已知的反應條件。 [0032] 本發明之放射性鹵素標示有機化合物的製造方法中，作為故 射性鹵素離子’例如，氟18 (i8f)、溴75 (¾)、溴76 〇)、 碘 123 (1231 )、碘 124 (1241 )、碘 125 (1251 )或碘 131 (1311)都可 22 200918103 以使用。 斤表示的放射性鹵素取代基係蛾123 (⑵丨）、蛾124 (mi)、 碟 125 (1251 )或誠 n ri3iT、μ y . 人 八131 ( 1)的化學式（1)的化合物，製造該化 口物時作為放射性卣素離子，可以個別使用埃123離子（巧 i〇n) ^124^(^ ion)>^i25^ (-1 ion) ,^131 離子（I ion)。作為化學式（？）的化合物，當m==n=〇時，使 用R係峨το素’疋素、碳數3〜12的三絲曱錫烧基㈤禮^ stannyl)械基或三苯基曱錫烷基（计__伽卿。取代 基的化合物；當㈣及An列時，使用r2是峨元素的化合物， 疋較合於理想的·’特別是m=n=Q時，使用㈣峨元素、碳數3 12的一甲基甲錫燒基（trimethyi)取代基、三丁基甲 錫烷基（tributy 1 stanny 1)取代基或三苯基甲錫烷基（tHpheny 1 stannyl)取代基的化合物，更為理想。 製造R1所表示的放射性齒素取代基係氟18(1乍）的化學式（1) 的化合物’作為放射性鹵素離子，使用氟丨8離子，作為化學式（2) 的化合物，當m=n=0時，R2係硝基（nitro)取代基、或碳數3 〜12的三烧基銨（trialkyl ammonium)取代基的化合物，當m矣 0 及/或 π#0 時’R2係三氟甲烧續酸(trifiuoromethanesulfonic acid)取代基或曱苯續酸（toluene sulfonic acid)取代基的合 物，使用這些化合物是較為理想的。 製造R1所表示的放射性鹵素取代基係溴75( 75Br)或溴76( 76Br) 23 200918103 的化學式（1)的化合物，作為放射性_素離子，可以個別使用溴 75離子或演76離子，作為化學式⑵的化合物，使用r2係溴元 素的化合物是較為理想的。 【0033】 又，依據本發明之另-個面向，係提供刊化學式⑵所表 放射性鹵賴財機化合物調伽的前驅物化合物或其鹽類： 【0034】 【化15】 R4

[0035] 〔化學式中，A1 I、心^係_獨立的碳或氮. R4係下列化學式所表示之化學基， ， 【化16】 24 【0036】 200918103 R2

【0037] m係0〜4的整數； η係0或1的整數。 R2 ’當m=n=0時’ R2係非放.射性鹵素取代基、瑣基（nitro)取 代基、碳數3〜12的三烧基銨（trialkyl ammonium)取代基、碳 數3〜12的三烧基甲錫烧基（trialkyl stannyl)取代基或三苯 基甲錫烷基（triphenyl stannyl)取代基；當111关〇及/或η关〇 時，R係非放射性鹵素取代基、曱烧確酸（methane sulfonic acid) 取代基、三氟甲烷磺酸（trifluoromethane sulfonic acid)取 代基、或芳香族磺酸取代基。 此處，Ai、A2、A3、和A4之中，至少有一者係碳；R4係結合在丨、 A2、A3、或 A4 的碳。〕 【0038】 作為化學式（2)的R2的非放射性幽素取代基，採用放射性氣 元素的親核取代反應（nucleophilic substitution reaction) 中可以成為標的之ii素、或與放射性碘元素之間的同位素交換反 應（isotopic exchange reaction)中可以成為標的之鹵素，都 25 200918103 可以使用。較理想的是使用蛾、漠、或氣。作為三烷基甲錫烷基 取代基，可以使用各種取代基，而三甲基甲錫烷基取代基和三丁 基曱錫烧基取代基是能夠較理想地使用。化學式（2)中，理想的 R，係選自碘、溴、三曱基甲錫烷基取代基、三丁基曱錫烷基取代 基、三氟曱烧續酸取代基、和三苯基曱錫烷基取代基所成群類者。 又，化學式（2)中’ n=0時，m=〇〜4是較為理想的；n=1時， m=l〜4是較為理想的。 * [0039] 化學式（2)中，A1、A2、A3、和之A4,係各自獨立，係碳或 氮^旦至少有—者必須是碳。Al、a2、A3、和之a4之中有三者以 上疋奴疋較為理想的，全部都是碳則更為理想。再者，化學式（2) 中A 、A 、A、或A4之任一者，係沒有與R4鍵合的碳的情形 時’與之鍵合軌好就不被取代。誠化學式⑵所示的氮氧 基’可以和構成該笨基結構的任何—個碳結合，不過，若與該笨 基結構的4位置的碳結合是最理想的。R4的結合位置，於γ、 A A、或A之碳，並沒有特別限制，但是a3的碳、亦即6位置 的碳是較為理想的。 【發明之成果】 26 200918103 【0040] 藉由本發明，可以得^: 等毒性受到抑制，使得蛋白親合性、並且致突變性 之4靜外r· ;廣範圍澱粉樣變性病的澱粉樣蛋白 於樣蛋白檢二仙。）和生體内⑴咖。）的檢測均能使用的殿 «蛋白檢職藥、及其所涵細製造方法和製翻中間物 (intermediate)〇 【實施方式】 實施本發明之最佳狀態】 【0041】 ※放射性自素標示有機彳b合物調製狀祕物化合物的合成方法 以下，以6二丁基甲錫烧基_2-(4’ _經基苯基)味嗤並 [1，2 a]比0疋（6-tributyl stannyl-2-(4， —hydroxyphenyl) imidazo [l，2-a] pyridine).為例，說明本發明的一個面向關連 之放射性S素標示有機化合物調製用之前驅物化合物的合成方 法0 [0042] 首先，使 4’ -經基乙醯笨（4’ -hydroxy acetophenone)與 溴化銅（CuBr2)發生反應，合成2-溴-4’ -羥基乙醯苯 (2-bromo-4，-hydroxy acetophenone)〔圖一、作業一〕。此時 27 200918103 的反應，可以依照已知的方法、例如文獻《King L. Carroll & Ostrum G. Kenneth, Journal of Organic Chemistry, 1964, 29(12)，頁.3459-3461》所記載的方法來進行。 【0043】 其次，將前述已合成之^溴-4’ -羥基乙醯苯，與2-氨基-5-溴口比咬（2-amino -5-bromopyridine)發生反應，合成6-溴 -2-(4’ -羥基苯基)-咪唑並[l，2-a]°比啶 (6-bromo-2-(4, -hydroxyphenyl) imidazo[l, 2-a]pyridine) 〔圖一、作業二〕。此作業可以依據以下之要領來進行。 【0044] 首先’將2-溴-4’ -經基乙醯苯和2-氨基-5-漠π比咬溶解在乙 腈（acetonitrile)等惰性冢劑中溶解，在回流溫度，使其反應2 〜6小時，生成6-漠-2-(4’ _羥基苯基)p米哇並[1，2-a]*»比咬的漠 化氫鹽’形成白色沉澱。此際所用的溶劑，乙腈之外，甲醇 (methanol)或丙酮（acet〇ne)，在相同的反應時通常所用的溶 劑，都可以使用。又，反應溫度如果是可以進行回流的溫度的話， 就可以了，例如，乙腈作為溶劑的情形時，9〇t就可以了。並且， 所用溶劑的量，如果對於反應屬充分的量即可，但是過量的話， 由於…、去件到反應物的沉殿，必須要謹慎。例如，使用相當於1〇 28 200918103 毫莫耳（mmol)的2->臭-4’ -經基乙醢苯來反應的時候，大約使用 40〜50毫升的溶劑就可以了。 【0045】 接下來，將反應液過濾、”分離沉澱物後，將此白色沉殿物懸 浮於曱醇/水的混合液（1 ·· n中，該懸浮液中再加入相對於沉 澱物超過甚多量的碳酸氫鈉水溶液，則6—溴_2_(4，_羥基苯棊） 咪唑並[l，2-a]吡啶游離出來，生成沉澱。藉由過濾取得此新生成 的沉澱物，就可以得到本作業目標產物6_溴_2_(4，_羥基苯基） 咪唑並[l，2-a]吡啶〔圖一、作業二〕。曱醇/水混合液的量，只 要能使反應進行的充足量，並無特別限定的必要，但是過多的話， 因為會妨礙生成物的析出’必須要注意。舉例來說，若是使用相 當於10毫莫耳的2-漠-4，-經基乙醯苯的情形時，大約使用4〇〜 1〇〇毫升程度的曱醇/水混合液，就可以了。又，碳酸氮納的量， 、 相對於反應基本物的前述沉殿物，只要是超過甚多即可，並無特 別限制’例如，若係於前述條件下使其反應的情形，添加大約25 毫升程度的飽和碳酸氫鈉水溶液到反應液中，就可以了。 【0046】 接著，將合成出來的6-漠-2-(4，-經基苯基),米嗤並[i，2-a] °比咬充分乾燥後，溶解於二噪垸（di〇xane)，加入三乙胺 29 200918103 (triethylamine)後，再加入雙[三丁基錫](Ms[tributyl tin]) 及催化劑量的四個（三苯基膦）化鈀（tetrakis (triphenyl phosphine)palladium(O))。將此反應液加熱至約則艽使其反應 24小時以後，餾去溶劑，進$于色層分析法精製，可以得到目標產 物6-三丁基甲錫烧基-2-(4’ -經基苯基)咪唾並[i，2-a]n比咬 (6-tributyl stannyl -2-(4, -hydroxy phenyl)-imidazo [1, 2-a] pyridine)〔圖一、作業三〕。此際，雙[三丁基錫]的量， 相對於反應基本物是過剩量的話，就可以了。具體來說，相對於 反應基本物的6-溴-2-(4’ -經基苯基>米唾並[i，2-a]n比唆的莫耳 數比，若是1. 5倍程度就可以了。 【0047] 還有’想要得到6位置取代基是三丁基曱錫烷基取代基以外 的三烧基曱錫烧基取代基的化合物的情形時，作業三使用的雙[三 丁基錫](bis[tributyl tin])得取代物，可以按照目的選用不 同的雙[三烷基錫](bis[trialkyl tin])。舉例來說，要合成6 位置取代基是三甲基甲錫烷基取代基的化合物的情形時，在作業 三’使用雙[三曱基錫](bis[trimethyl tin])，進行前述反應即 〇 30 【0048] 200918103 又’為了要得到6位置取代基是非放射性#素取代基的化合 物’鹵素取代基是溴元素化合物的話，作業二所得到的化合物就 這樣使用即可，6位置的_素取代基是氟元素、氯元素、和碘元素 化合物的話，在作業二，2-氨基-5-漠吼唆的替代物分別使用2-氣基-5-乱D比咬、2-氨基-5-氯咐^定、2-氨基-5-破η比咬，實施與作 業二相同的反應即可。 【0049] 為了得到在6位置以氧原子為介質結合取代基的化合物，在 作業二’使2-氨基-5-溴吡啶的替代物2-氨基-5-經基吡咬 (2-amino-5-hydroxy pyridine)反應，合成 2-(4，-羥基苯 基)-6-羥基咪唑並[l，2-a]吡啶（2-(4，-hydroxy Phenyl) -6-hydroxy imidazo [l，2a]pyridine) ’ 此處，在鹼（base)的 存在下，使其與所欲導入之取代基的溴化物反應即可。舉例來說， 為了得到6位置結合3-氟丙氧基取代基的化合物，在碳酸鉀的存 在下，使2-(4 -羥基苯基)-6-羥基咪唑並[1，2-a]吡啶與卜溴一 氟丙烷（l-bromo-3-fluoro propane)發生反應即可。 【0050】 再者，為了得到6位置以烷基鏈為介質結合取代基的化合 物，實施以下的操作即可。舉例來說，6位置的取代基，係 31 200918103 溴丙基的化合物的話，作業二所得到之2-(4，-羥基苯基)-6-溴-咪唑並[l，2-a]吡啶，與烯丙基三丁基錫（aiiyi tributyl tin) 反應，轉變成6-烯丙基-2-(4’ -羥基苯基）-咪唑並[l，2-a]吡啶 以後’進行硼氫化反應（hydroboration)與氧化反應 (oxidation)’轉變成2-(4，-羥基苯基）-6-(3，-羥基丙基）咪 唑並[l，2-a]吡啶（2-(4，-hydroxy phenyl)-6-(3，-hydroxy propyl) imidazo [1，2a]pyridine)，然後在三苯基膦（triphenyi f phosphine)的存在下’藉由四溴甲烧（Tetrabr〇m〇me也ane)，進 行氫氧基的溴化即可。 前述化學式⑴中，A!、A2、A、a4中的Al是氮的化合 物、並且、前述化學式⑵中，A5、A6、A7、和y中的^是氮 的化合物，例如’在圖一的作業二，2_氨基H髮的替代物， 除了使用2-氨基-5令岭以外，依照前述方法為賴可以製造出 月丨J甲八 和A中的Y和A4是氮的 化合物、並且、前述化學式⑵中，A1、α2彳、和 和a4是氮的化合物，例如，在圖m，2—氨衫令 替代物，除了使用氨基—3_溴_；[，2,4~三嗪 、、 (6 amin〇-3-bromo~l，2,4-triazine)以外，把昭十 則可以製造蜂。， 卜舰_方法為準 32 200918103 【0051】 ※放射性由素標示有機化合物的合成方法 其次’以2-(4’ -羥基苯基)-6-[1231]鐵味唑並[i，2-a]fl比啶 (2 (4 -hydroxy phenyl) -6-[123I]i〇do iraidazo Cl，2a]pyridine)為例，說明本發明的另一面向之相關放射性·鹵 素標示有機化合物之製造方法。 【0052】 2-(4’ -羥基苯基)-6—[123i]碘咪唑並[i，2-a]吡啶之製造， 首先，得到提供標示的放射性鹵素離子之[，]礙化鈉溶液。[⑶j] 放射性碘，可以依照一般已“的方法例如以氙氣為標靶、實施質 子知射的方法，就可以得到。將此[i23I]放射性峨依照一般已知的 方法做成[1231]碘化鈉溶液，應用於標示作業。 【0053】 其次’將標示前驅物的6-三丁基曱錫烷基-2-(4，-羥基笨基) 〇米嗤並[1，2-a]*1 比咬（6-tributylstannyl-2-(4，-hydroxy phenyl) lmidazo [l，2a]pyridine)溶解於惰性有機溶劑中，加入前述的 [1231 ]碘化鈉溶液、酸和氧化痢，使其反應，得到目標產物2_(4，一 夢工基本基)-6-[ I]峨味唾並[i，2-a]n比ti定（2-(4’ -hydroxy phenyl)-6-[ l]i〇d〇 imidazo [l，2a]pyridine)。溶解前驅物的 33 200918103 惰性有機溶劑，只要不會與標示前驅物和[1231]蛾化鈉之間有反應 性的各種溶劑，都可以使用，較理想的是使用甲醇。 【0054] 酸，可以使用各種物質，較理想的是使用鹽酸。 氧化劑，只要能使反應液中的碘發生氧化的物質就可以了， 並沒有特別的限制，較理想的是使用過氧化氫或過醋酸 (peracetic acid)。氧化劑的量，只要能使反應液中的碘發生氧 化的充分的量，就可以了。 [0055] 碘以外之放射性鹵素標示物，藉由使用按照目的之放射性鹵 素將按照合成目的之標示前驅物加以標示，就可以合成。舉例來 說’合成6-[18F]氟丙氧基-2-(4’ -羥基苯基）咪唑並[1，2-3]吡啶 的話’將標示前驅物2-(4’ -羥基苯基)-6-(3，-對甲苯確酸氧基 丙氧基）味嗤並(2-(4’ -hydroxy phenyl)-6-(3’ -paratoluene sulfonyloxy propoxy) imidaz〇 [l，2a]pyridine)’在相間移動催化劑和碳酸鉀的存在下，與[^] 氟化物離子發生反應即可。 34 [0056] 200918103 ※本發明相關之檢測試藥及調製方法 澱粉樣蛋白由於前驅蛋白的種類 具有乙型片U sheet) 異的構造，隹 .^ 坆P疋其共同點。以澱粉樣* 象之¥色試藥’以硫黃素了_果紅為首，—蛋白為對 確認錄，無粉樣蛋㈣ 型片作為 能力。 々择e知都有相同的染色 白質「化學式⑴的化合物，對觀粉樣物蛋 白質(以下，稱為「A々」)做為前驅物崎樣蛋=歧 但是’對於已知能與廣範_後樣蛋白結合 ^ = ’ 礙澱粉樣蛋白的結合作用。. 、京了則具有阻 因此，本發明相關之化料⑴的化合物 素丁相同地且有對妒研九出與硫黃 本發明相關之化學式⑴的化合物，對於多撕此^ 具有相同的親和性。 ，蛋白，顯示 也就是說，本發明之麟樣蛋白 果紅同樣，可以庙田产樂’與硫黃素Τ或剛 病的診斷。奴方而入^ 及局雜趨粉樣變性 蛋白性_病，_實例有免疫球 贫白邮顧紐豸、反舰AA_ 性病、透析姆#媒_ 變f病豕族性澱粉樣變 两還析我粉樣變性病、老年性;殿 樣變性病，列與£ 11病等。局部性殿粉 W病解實財麟粉樣變性病、 皮膚;殿於样纖W·— 我畚樣變性病’、 々樣雜病、触性結節性殺粉樣變性病等。 35 200918103 【0057】 本發明之澱粉樣蛋白檢測試藥，不僅可以應用在以活組織切 片（biopsy)為對象的體外（in vitro)使用之試藥，也可以應 用作為體内（in vivo)使用之試藥。 [0058] 本發明相關之殿粉樣蛋白檢測試藥，與其他一般所知的放射 性診斷劑一樣，將前述化學式（1)所表的放射性鹵素標示化合物 依照所需調整為適當酸驗值（pH)的水或生理食鹽水、或者調配 林格氏液等溶劑來調製。在這種情形下，本化合物之濃度，必須 是調配後保有本化合物安定性的濃度以下。本化合物之投與量， 只要是能充分使投與藥劑之分布情形影像化的濃度，並沒有特別 的限制。舉例來說，若是碘-123 (1231)標示化合物及氟-18 (叩） 標示化合物的情形時，體重60公斤的成人一人相當50〜6〇〇百萬 貝克（MBq)程度，可以靜脈給藥或局部給藥來使用。投與後之藥 劑分布，可以用一般已知的方法加以影像化，例如—423 (mj) 標示化合物的情形時’用單光子射出電腦斷層攝影（Single ph〇t〇n

Emission Computed Tomography ; SPECT);氟-18 (18F)標示化合 物的隋形時，用正子射出斷層攝影（Positron Emissi〇n Tomography ; PET) ’可以將其影像化。 36 200918103 0 0 5 9 ”精由將本發明之殿粉樣蛋白檢測試藥投與至生體内，可以將 〉儿積在腦、心臟、肺、消化道、血管、肝臟、胰臟、_、關節、 祕等生體組織的·樣蛋白影像化，對於沉積在活組織切片有 困難的生體組織，如腦、心臟、肺、胰臟、骨絡和關節的澱粉樣 蛋白影像化很有用處。 【實施例】 【0060】 以下所記载的實施例、比較例及參考例，將更進—步詳細說 明本發明’但是本發明並未侷限於此處之内容。 又，下述實施例方面，提供實驗用的各化合物之名稱，如附 表一之定義。 【0061】 【附表一】 附表一實施例供評價化合物之名稱

立合物名稱 常用名 一'^ 化合物1 6-溴-2-(4’ _羥基苯基）咪唑並[1,2-a]吡啶 -- (6-bromo-2-(4' -hydroxyphenyl) imidazo[ 1,2-a]pyridine ) 化合物2 2-(4’ -羥基苯基)-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶 ~~---~~ (2-(4, -hydroxyphenyl)-6-iodo imidazo[l,2-a]pyridine) —J 37 200918103 化合物3 " 6-(3’ -氟丙氧基)-2-(4’ -羥基苯基）咪唑並[1,2-a]吡啶 (6-0' -fluoropropoxy)-2-(4，-phenyl)imidazo[l,2-a]pyridine) 化合物4 2-(4’ -羥基苯基)-6-碘咪唑並[U-a]嘧啶 (2-(4’ -hydroxyphenyl)-6-iodo imidazo[l，2-a]pyrimidine) 化合物5 γη-ΐπ -羥基苯基)-6-碘咪唑並[1,2-a]吡啶 ([125I]-2-(4' -hydroxyphenyl)-6-iodo imidazo[l ,2-a]pyridine) 化合物6 —[气]-2-(4’ -羥基苯基)-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶 ([123I]-2-(4' -hydroxyphenyl)-6-iodo imidazo[ 1,2-a]pyridine ) 化合物7 6-溴-2-(4’ -羥基苯基）咪唑並[1,2-a]吡嗪 (6-bromo-2-(4' -hydroxyphenyl) imidazo[l,2-a]pyrazine) 化合物8 2-(4’ -經基苯基)-6-捵咪哔並[l，2-a]吡嗪 (2-(4，-hydroxyphenyl)-6-iodo imidazo[l,2-a]pyrazine) 化合物9 [1231]-2-(4’ -羥基苯基)-6-碘咪唑並[1,2-a]嘧啶 ([1231]-2-(4’ -hydroxyphenyl)-6-iodo imidazo[l,2-a]pyrimidine) 化合物10 [1231]-2-(4’ -羥基苯基)-6-碘咪唑並[l，2-a]吡嗪 ([123I]-2-(4， -hydroxyphenyl)-6-iodo imidazo[ 1,2-a] pyrazine ) 化合物11 Π]-2-(4,-羥基苯基)-8-碘咪唑並[l，2-a]吡啶 ([123I]-2-(4' -hydroxyphenyl)-8-iodo imidazo[ 1,2-a]pyridine ) 【0062】 (實施例Μ) 6-三丁基甲錫烷基-2-(4’ -羥基苯基）咪唑並 [l，2-a]°tfc咬（6-tributyl stanny卜2-(4’ -hydroxyphenyl) imidazo[l，2-a]pyridine)之合成 【0063】 溴化銅（CuBn) 28.17公克（相當126毫莫弄）中加入醋酸 乙酯（ethyl acetate) 50毫升，使其懸濁。將& 18公克（相當 60. 0 毫莫耳）4 -經基乙酿苯（4’ -hydroxy acetophenone)溶 解於醋酸乙酯50毫升和氣仿（chloroform) 50毫升的混合液中， 將該溶液再加入前述懸濁液中，進行加熱回流。5小時以後，將反 應液冷卻至室温’進行過濾’將濾液減壓濃縮之。殘渣溶解於醋 38 200918103 酸乙酯，加入活性碳進行脫色後，過濾溶液、將其濃縮。所得到 的粗生成物，用快速矽凝膠管柱色層分析法（flash silicagel column chromatography)(溶離液：氣仿/曱醇=2〇//1；)加以精 製，然後從醋酸乙酯一石油醚進行再結晶，得到2_漠_4，—經基乙 醯苯（2-bromo- 4’ -hydroxyacetophenone) 7. 25 公克（相當 33 7 毫莫耳）〔圖一、作業一〕。 1J 4 6 ο ο rk 將2->臭-4 -起基乙醯苯2.15公克（相當1〇. 〇毫莫耳）和 2-氨基-5-溴°比咬（2-amino-5-bromopyridine) 1.74 公克（相告 10. 0毫莫耳）溶解於5〇毫升乙腈（acetonitrile)中，在i〇5°c 油浴加熱回流6小時。反應結束後，將反應液冷卻至室溫，過滅 分離沉殿物後’用乙腈洗淨之，減壓使其乾燥。將所得到之粗I士 晶懸浮於20毫升水和20毫升甲醇之混合液中，於該懸濁液中加 入約25毫升飽合碳酸氫鈉溶液，用超音波洗淨器振動5分鐘。從 所得到之混合物過濾分離沉澱物，用水仔細洗淨，減壓下使之乾 燥’得到6_溴_2_(4，—羥基苯基)咪唑並[丨，2-a]吡啶2· 41公克 (相當8. 32毫莫耳）〔圖一、作業二〕。

-羥基苯基)咪唑並Π，2-a]吡啶i38毫克（相 39 200918103 當0.476毫莫耳）溶解於溶解於20毫升二噁烷（di〇xane)，加入 二乙胺（triethylamine) 2毫升後，再加入雙（三丁基鍚）36〇微 升（相當0.713宅莫耳）和四個（三苯基膦）化|巴（ktrakis (triphenyl phosphine)palladium(O)) 20 毫克（催化劑數量）。 將反應混合物在90 C攪拌22小時後，減壓將溶劑蒸顧除去，把殘 渣用製備型薄層色層分析法（preparative TLC)《溶離液：己烷 /醋酸乙酯=1/4》加以精製。然後將所得到之粗生成物用回收 分取高效能液相層析法（recycle fractional HPLC)《高效能液 相層析裝置：日本分析工業公司製造之LC-908，管柱：日本分析 工業公司製造之JAIGEL 2H、二個管柱連結，移動相：氣仿》加以 精製’彳于到6-二丁基甲錫燒基-2-(4’ -經基苯基）Ρ米峻並[i，2-a] 比咬（6 tributyl stannyl -2-(4 -hydroxy phenyl) imidazo[l，2-a]pyridine) 47 毫克（相當 94. 9 微莫耳）〔圖一、 作業三〕。 [0066] 所得到的二丁基曱錫烧基-2~(4’ -經基苯基）味嗤並 [1，2-a]吡啶’其核磁共振（NMR)測定結果（内部標準物質：四 曱基硅烷|^6廿&11^1：1^13113116])’如下所示。 40 [0067] 200918103 使用的核磁共振裝置.JNM-ECP-500 (日本電子公司製造） W-NMR(溶劑：重氯仿、共振頻率：5〇〇MHz ): 5 8. 01-7. 94 ( m， 1H )、7. 71 -7. 67 ( m，2H )、7. 70-7· 67 ( m，1H )、7. 64-7. 60 (m，1H )、7. 20-7.11 ( m，1H )、6. 89-6. 85 ( m，2H )、1. 62-1. 46 (m，6H )、1. 34 ( sext，J = 7. 3 Hz，6H )、1· 18-L 03 ( m，6H )、 0.90 ( t，J= 7.3 Hz, 9H )，。 [0068] 13C-麗R (溶劑：重氯仿、共振頻率：125MHz): 5 157. 85、 145.Η、144. 72、131. 90、129. 93、127. 62、124. 02、122. 59、 116.14、116. 09、106.19、28. 96、27. 27、13. 62、9. 81。 【0069] (實施例Ι_2) [ Ι]-2-(4 7類·基苯基)-6-块味峻並[1,2-a]®ifc咬 ([I25I]-2-(4, -hydroxy phenyl) -6-iodo imidazo[l，2-a]pyridine)之合成 [0070] 6-三丁基曱錫烧基-2-(4’ -羥基苯基)咪嗤並[1，2-a]°比咬的 曱醇溶液（濃度：1毫克/毫升）53微升（AL)中，加入1莫耳 /升之鹽酸75微升、136MBq的[1251]蛾化鈉（容量為40微升）、 41 200918103 10%(w/ v)過氧化氫10微升。將該混合液在5(TC靜置10分鐘後， 用附有以下條件的高效能液相層析法（High performance liquid chiOmatography ; HPLC)，將[1251]-2-(4’ -羥基苯基)-6-碘咪唑並 [l，2-a]t定（[125i]-2- (4’ -hydroxy phenyl) -6-iodo imidazo[l，2-a]pyridine)的析離部份（fracti〇nati〇n)分離取 得。 .

[0071] HPLC之條件： 管柱：Phenomenex LunaC18 (商品名，Phenomenex 公司製造， 規格：4.6X150毫米） 移動相：含0.1%三氟醋酸之水溶液//含〇· 1%三氟醋酸之乙腈 = 80/20—0/100 (17分鐘，直線斜率） 流速：1.0毫升/分鐘. 檢測器：紫外線可見光吸光光度計（檢測波長：282nm)及放 射線檢測器（型式·· STEFFI型，raytest公司製造） [0072] 於該析離部分加人水H)毫升後，把織舰人逆相管柱《商 品名：S印-Pak〔商標登錄〕Light C18 Cartridges，公 司製造，充填劑之充填量：13〇毫克》作為沖提液，將門 42 200918103 -羥基苯基)-6-碘咪唑並[l，2-a]吡啶吸著捕集於該管柱。用i毫 升水洗淨該管柱後，再用1毫升乙醇沖提，使-羥基 苯基)-6-碘咪唑並[1，2-a]吡啶溶出，所得到的化合物放射能量在 剛合成後係37_ 5MBq。又’依據以下條件，用薄詹層析法（tlc) 測定時，其放射化學純度係96. 5%。 【0073] 薄層層析法（TLC)分析條件： TLC層析板：RP-18F254 (商品名，Meruku公司製造） 展開相：曱醇/水= 20/1 檢測器：Bio-Imaging Analyzer，BAS-2500 (型式：BAS-2500， 富士照相底片公司製造） [0074] (實施例1-3) [1231]-2-(4’ -羥基苯基)-6-破咪唑並[i，2-a]咐i咬 ([125j ]_2-(4, -hydroxy phenyl) -6-iodo imidazo[l，2-a]pyridine)之合成 【0075] 6-二丁基曱錫烧基-2-(4’ -羥基苯基)咪唾並[i，2-a]Dita定的 曱醇溶液（濃度：1毫克/毫升）70微升（#L)中，加入1莫耳 43 200918103 /升之鹽酸75〜100微升、236~454MBq的[1231]碘化鈉（容量為 15〜120微升）、1毫莫耳/升之碘化鈉溶液7. 5〜微升、l〇%(W /V)過氧化氫10〜15微升。將該混合液在50°C加熱10分鐘後， 用與實施例1-2相同條件的高效能液相層析法（High performance liquid chromatography ; ΗΡίΧ) ’ 將[1231]-2-(4’ -經基苯基)-6-峨咪唾並[1，2-a]n比咬（[123I]-2- (4’ -hydroxy phenyl) -6-iodo imidazo[l，2-a]pyridine)的析離部份（fractionation)分離取 得。 [0076] 於該析離部分加入水10毫升後，把該液體放入逆相管柱《商 〇口名.Sep Pak〔商標登錄〕Light C18 Cartridges，Waters 公 司製造’充填劑之充填量：13〇毫克》作為沖提液，將[⑵〗]—2一(4, -經基苯基)1剩^並[1，2_&]«吸_餘鮮柱。用1毫 升水洗淨遠官柱後’再用丨毫升乙醇沖提’使[123丨]—2—(4，_經基 苯基）6峨味唾並[；1，2钟比咬溶出，所制的化合物放射能量在 剛合成後係21〜l_q。又，依據與實施例卜⑽同條件，用薄 層層析法（TLC)測定時，其放射化學純度係99.挪。 [0077] (實施例 1-4) 6-速、 决Z C4 -羥基苯基）咪唑並[12_a]吡啶 44 200918103 (6-bromo-2-(4， -hydroxy phenyl) imidazo[l, 2-aJpyridine) 之合成 [0078] 溴化銅（CuBn) 28· 17公克（相當126毫莫荨）中加入醋酸 乙酯（ethyl acetate) 50毫升，使其懸濁。將8. 18公克（相當 6〇·〇 毫莫耳）4’ -羥基乙醢苯（4，-hydroxy acetophenone)溶 解於醋酸乙醋50毫升和氯仿（chloroform) 50毫升的混合液中， 將該溶液再加入前述懸濁液中，進行加熱回流。5小時以後’將反 應液冷卻至室溫，進行過濾，將濾液減壓濃縮之。殘渣溶解於醋 酸乙酯，加入活性碳進行脫色後，過濾溶液、將其濃縮。所得到 的粗生成物，用快速矽凝膠管柱色層分析法（flash silicagel column chromatography)《溶離液：氯仿/曱醇= 20/1》加以精 製，然後從醋酸乙酯一石油醚進行再結晶，得到2-溴-4’ -羥基乙 酿苯（2-bromo-4，- hydroxy acetophenone) 7. 25 公克（相當 33.7毫莫耳）〔圖二、作業一〕。 【0079】

將2-溴-4’ -羥基乙醯苯2.15公克（相當10.0毫莫耳）和 氨基-5-漠11 比咬（2-amino'5-bromopyridine) 1.74 公克（相當 10. 0毫莫耳）溶解於50毫升乙腈（acetonitrile)中，在l〇5°C 45 200918103 油洛加熱回流6小時。反應結束後’將反應液冷卻至室溫，過滅 分離沉澱物後，用乙腈洗淨之，減壓使其乾燥。將所得到之粗結 晶懸浮於20毫升水和20毫升甲醇之混合液中，於該懸濁液中加 9 入約25毫升飽合碳酸氫鈉溶液，用超音波洗淨器振動5分鐘。從 所得到之混合物過遽分離沉殿物，用水仔細洗淨，減壓下使之乾 燥’得到6-漠-2-(4’ -經基苯基)味唾並[l，2-a>比π定2. 41公克 (相當8. 32毫莫耳）〔圖二、作業二〕。 【0080】 所得到的6-溴-2-(4’ -羥基苯基）咪唑並[^―心吡啶，其 核磁共振（NMR)測定結果（内部標準物質：二甲基亞砜 [dimethylsulfoxide])，如下所示。 【0081】 使用的核磁共振裝置：TNM_EGp_5G()(日本電子公司製造) j-NMR (溶劑：重二甲其托说 u , T基亞礙、共振頻率：500MHz): (5 9.54 br. s, 1H ) ' 8. 83~8. 81 (m ιυ\ 0^. 、 vm，IH)、8.17( s, 1H)、7.79-7. 74 m, 2H ) ' 7. 51 ( d, J = 9 r uv lu λ ^ y* 〇 Hz, 1H ) , 7. 3〇( dd, J = 9. 6, 1. 8 Hz, 1H )、6. 86-6. 81 ( m 2H [0082] 46 200918103 13C-NMR(溶劑··重二曱基亞砜、共振頻率·· 125MHz): (5 158.15、 146. 40、143. 79、127. 82、127. 67、127.14、125. (U、117· 87、 116.15、108. 60、106. 05。.

[0083] (實施例1-5) 2-(4’ -經基苯基)-6-破-味峻並[1,2-a]»*1定 (2-(^ -hydroxy phenyl)-6-iodo imidazo[l, 2-a]pyridine) 之合成 【0084] 溴化銅（CuBn) 28· 17公克（相當126毫莫耳）中加入醋酸 乙酯（ethyl acetate) 50毫升，使其懸濁。將8.18公克（相當 60.0 宅莫耳）4 -經基乙醯笨（4，-hydroxy acetophenone)溶 解於醋酸乙酯50毫升和氣仿（chloroform) 50毫升的混合液中， 將該溶液再加入前述懸濁液中，進行加熱回流。5小時以後，將反 應液冷卻至室溫’進行過濾’將濾液減壓濃縮之。殘渣溶解於醋 酸乙酯，加入活性碳進行脫色後，過濾溶液、將其濃縮。所得到 的粗生成物，用快速矽凝膠管柱色層分析法（flash silicagel column chromatography)《溶離液：氯仿/甲醇= 20/1》加以精 製’然後從醋酸乙酯一石油醚進行再結晶，得到2-溴-4，-羥基乙 醢苯（2-brom〇-4’ - hydroxy acetophenone) 7. 25 公克（相當 47 200918103 33.7毫莫耳）〔圖三、作業一〕。 [0085] 將2-溴-4，_羥基乙醯苯441毫克（相當2.0毫莫耳）和2一 氨基-5-碘吡啶（2-amino-5-iodopyridine) 449 毫克（相當 2 〇 宅莫耳）溶解於15毫升乙腈（acetonitrile)中，在油浴 加熱回流5小時。反應結束後，將反應液冷卻至室溫，過濾分離 沉澱物後，用乙腈洗淨之，減壓使其乾燥。將所得到之粗結晶懸 浮於10毫升水和10毫升甲醇之混合液中，於該懸濁液中加入約 10毫升飽合碳酸氫鈉溶液，用超音波洗淨器振動5分鐘。從所得 到之混合物過濾分離沉澱物，用水仔細洗淨，減壓下使之乾燥， 得到2-(4 -經基笨基)—6-峨味嗤並[j，2-小匕。定526毫克（相當 1. 56毫莫耳）〔圖三、作業二〕。 田 [0086] ’其核 所得到的2—(4,—經基苯基)+蛾咖坐m μ*定 磁共振⑽R)測定結果（内部標準物質：二甲基亞硬 [dimethylsulfoxide])，如下所示。 [0087] 子公司製造） 使用的核磁絲裝置：纖_EGp_5()()(日本電 48 200918103 W-NMR (溶劑：重二曱基亞砜、共振頻率：500MHz) ·· (5 8. 86-8. 84 ( m，1H )、8.14’（ s，1H )、7. 78-7· 74 ( m，2H )、 7. 40-7. 35 ( m，2H )、6. 86-6. 82 ( m，2H )。 [0088] 13C-NMR(溶劑：重二甲基亞颯、共振頻率：125MHz): 6 158. 08、 145.87、143.87、132.48、131.72、127. 67、124. 99、118.14、 116.14、108· 02、75. 85。 【0089】 - (實施例1-6) 2-(4’ -羥基苯基)-6-埃-咪唑並[1,2-a]嘧啶 (2-(4' -hydroxy phenyl)-6-iodo imidazo[l, 2-a]pyrimidine) 之合成 【0090】 溴化銅（CuBn) 28.17公克（相當126毫莫耳）中加入醋酸 乙酯（ethyl acetate) 50毫升，使其懸濁。將8.18公克（相當 60.0 宅莫耳）4’ -經基乙醯苯（4，-hydroxy acetophenone)溶 解於醋酸乙酯50毫升和氣仿（chl〇r〇form) 50毫升的混合液中， 將該溶液再加入前述懸濁液中，進行加熱回流。5小時以後’將.反 應液冷卻至室溫，進行過濾，將濾液減壓濃縮之。殘渣溶解於醋 49 200918103 酉文乙酯，加入活性碳進行脫皂後，過濾溶液、將其濃縮。所得到 的粗生成物，用快速矽凝膠管柱色層分析法（flash silicagel column chromatography)《溶離液：氣仿/甲醇二加/丨》加以精 製’然後從醋酸乙酯一石油趟進行再結晶，得到2_溴_4，一經基乙 醯苯（2-bromo-4，- hydroxy acetophenone) 7. 25 公克（相當 33.7毫莫耳）〔圖四、作業一〕。

οο rL

將2-漠-4’ -羥基乙醯苯646毫克（相當3. 〇毫莫耳）和2一 氨基-5-蛾°比咬（2-amino-5-iodopyridine) 668 毫克（相當 3 〇 毫莫耳）溶解於20毫升乙腈（acetonitrile)中，在ll〇°c油浴 加熱回流8小時。反應結束後，將反應液冷卻至室溫，過濾分離 沉殿物後’用乙腈洗淨之，減壓使其乾燥。將所得到之粗結晶懸 浮於10毫升水和10毫升曱醇之混合液中，於該懸濁液中加入約 10毫升飽合碳酸氫鈉溶液，用超音波洗淨器振動3分鐘。從所得 到之混合物過濾分離沉澱物，用水仔細洗淨，減壓下使之乾燥， 得到2-(4’ -羥基苯基)-6-碘咪唑並[l，2-a]嘧啶737毫克（相當 « 2.19毫莫耳）〔圖四、作業二〕。 [0 0 9 2] 所得到之2-(4’ -經基苯基)-6-破0米唾並[1，2-a]嘴咬，其核 50 200918103 磁共振（NMR)測定結果（内*部標準物質：二甲基亞颯 [dimethylsulfoxide])，如下所示。 【0 0 9 3] 使用的核磁共振裝置·· jNM—ECP_5〇〇 (日本電子公司製造） H-NMR (溶劑.重二甲基亞石風、共振頻率：5〇〇MHz): 59. 8〇 (br. s，1H )、9. 35 ( d，J = 2. 3 Hz，1H )、8. 60 ( d，J = 2. 3 Hz，1H )、8. 23 ( s，1H )、7. 94-7. 90 ( m，2H )、6· 98-6. 94 ( m， 2H )。 · 【0094] 13C-NMR(溶劑：重二甲基亞砜、共振頻率：i25MHz ): d i58.87、 154. 00、147.18、146. 77、139. 07、127. 68、124. 50、115. 85、 106.10、73. 46。 【0095] (實施例1-7) 6-(3’ -氟丙氧基)-2-(4’ -經基苯基)味峻並 [1，2-a]*比咬（6- (3 -f luoro propoxy)~2-(4，-hydroxyphenyl) imidazo[l，2-a]pyridine)的合成 51 [0096] 200918103 2->臭-3-經基^比咬31.11公克（相當178.88毫莫耳）溶解於 二曱基亞礙（dimethyl sulfoxide) 95· 8毫升中，於其中加入丄 莫耳/公升的曱氧基納一曱醇溶液89. 9毫升（相當89. 9毫莫耳） 後，將反應液加熱至90°C，顧去曱醇。再將反應液冷卻至5°c以 下，加入甲基碘（methyl iodide) 29· 2公克（相當205. 62毫莫 耳）’於室溫下繳半17小時。反應結束後，將反應液注入冰水中， 用乳仿抽挺一次’合併的亂仿層用1莫耳/公升的氣氧化鈉洗淨 後’用飽和食鹽水洗淨二次，.以無水硫酸鈉乾燥後，減壓下餾去 溶劑，得到 2-演-3-甲氧基°比咬（2-bromo-3-methoxy pyridine) 20. 74公克（相當110. 31毫莫耳）〔圖五、作業一〕。 [0097] 濃硫酸83毫升冷卻至零下5〇c (_5乞），謹慎地將9〇%硝酸 83毫升加入其中，然後再謹慎地加入2_溴_3_甲氧基吡啶2〇. 69 公克（相當110. 04毫莫耳）。反應混合物在冰浴下繳半5分鐘後， 再於室溫麟10分鐘，额加熱至砍獅Η、時。反應液冷卻 至至溫後’ ‘fe’lf少量連續地注人冰水巾，生成沉缝，過遽取得 此沉殿物，用水仔細洗淨，在五氧化二鱗(此〇印penta〇xide) 的存在下減壓乾燥之，得到2_漠_3_甲氧基一卜确基吼咬 (2-bromo-3-methoxy-6-nitropyridine)17. 41 公克（相當 74. 71 毫莫耳）〔圖五、作業二〕。 52 [0098] [0098]200918103 將2-溴-3-甲氧基-6-硝基β比啶π. 36公克（相當74. 50毫莫 耳）溶解於520毫升的乙醇中，在氬氣流下，加入披鈀木炭 (palladium charcoal) (50% 溼度）11. 63 公克後，滴入一水合肼 (hydrazin monohydrate) 88.4毫升。將此混合物加熱回流45 分鐘後’冷卻至室溫，過濾披鈀木炭，然後用乙醇洗淨過濾物， 將洗淨液和濾液合併一起。妹此混合液減壓濃縮後，加入水402 毫升和濃氨水38毫升’用氯仿抽提八次，合併起來的氯仿層，用 無水硫酸鈉乾燥後，減壓濃縮，接著減壓蒸餾，得到2-氨基-5- 曱氧基σ比咬（2-amino-5-methoxypyridine)8· 14 公克（相當 65. 57 毫莫耳）〔圖五、作業三〕。 [0099] 將 4 -本醒氧基乙稀苯（4 -benzoyloxy acetophenone) 13. 50公克（相當59. 66毫莫耳）溶解於甲醇iioo毫升中，加入 二>臭化四-特-丁基銨（tetra-n-butyl ammonium tribromide) 34. 52公克（相當71. 59毫莫耳）’於室溫攪拌過夜。減壓下餾去 溶劑’將殘渣溶解於醋酸乙酯，用水將其洗淨二次後，用飽和食 鹽水洗淨。將醋酸乙酯層用無水硫酸鈉乾燥後，減壓濃縮所得到 的粗生成物用石夕凝膠筒柱色層分析法（silicagel c〇lumn 53 200918103 chromatography )《溶離液：己烷 / 甲叉二氣[methylene chloride] = 1/1》加以精製，得到4，-苯醯氧基-2-溴乙烯苯 (4 -benzoyl〇xy-2-bromo acetophenone) 13. 38 公克（相當 43. 84毫莫耳）〔圖五、作業四〕。 【0100] 將4’ -笨醯氧基—2-溴乙烯苯13. 33公克（相當43. 68毫莫 耳）和 2-氨基-5-曱氧基D比咬（2-amin〇-5-methoxy pyridine)5. 67 公克（相當45.67毫莫耳）溶解於481毫升乙醇（ethanol)中， 加熱回流2小時。反應液冷卻後，加入礙酸氫納6. 64公克（相當 79.09毫莫耳），將反應物再加熱回流4小時。反應結束後，將溶 劑減壓濃縮，殘渣溶解於氣仿後，用水洗淨。氯仿層以無水硫酸 納乾燥後’餾去溶劑，所得到的粗生成物用矽凝膠筒柱色層分析 法（silicagel column chromatography)《溶離液：氯仿/醋酸 乙醋= 20/1》加以精製，得到2_(4，_苯醯氧基苯基)_6_曱氧基 米0坐並[l，2-a]口比咬（2-(4，-benzoyloxyphenyl)-6-methoxy lmidazo [i，2a]pyridine) ι〇 2〇 公克（相當 3〇 87 毫莫耳）〔圖 五、作業五〕。 [0101] 將充分乾燥除去水分的2-(4，-苯醯氧基苯基)-6-曱氧基咪 54 200918103 峻並[1，2~a]n比°定4·9〇公克（相當14.83毫莫耳）溶解於245毫 升亂仿中，冷卻至零下破（一脱）。將三漠化蝴12. 62毫升（相 當133. 48毫莫耳）溶解於二氯甲烷134毫升的溶液滴入，加熱至 室溫後獅17小時。反應結束後，將反棘降溫至冰冷，加入甲 醇668毫升’然後在室溫中攪拌3小時以後，減壓濃縮反應混合 物。所得到之粗生成物中，加入氣仿290毫升和甲醇29毫升再壓 (repulp)後’將沉澱物過濾分離。過濾分離的沉澱物用氯仿洗 淨後’進行減壓乾燥，得到2_(4’ —苯醯氧基苯基)-6-羥基咪唑並 [l，2-a]n比咬（2-(4’ -benzoyloxyphenyl)-6-hydroxy imidazo [1，2a]pyridine)3. 〇〇公克（相當13. 28毫莫耳）〔圖五、作業六〕。 [0102] 2-(4’ -笨醯氡基苯基)-6-羥基咪唑並[1，2-a]吡啶560毫克 (相當2. 48毫莫耳）溶解於21毫升的二曱基甲醢胺 (dimethylformamide)，加入碳酸鉀1. 37公克（相當9. 90毫莫 耳）和 1-溴-3-氟丙烧（l-bromo-3-fluoropropane) 349 毫克（相 當2. 48毫莫耳），室溫下攪拌24小時。減壓下濃縮反應液後，於 其中加入氯仿10毫升和曱醇10毫升再壓、過濾。濃縮濾液，所 得到之粗生成物用矽凝膠筒柱色層分析法（silicagel column chromatography)《溶離液：氯仿/甲醇= 20/1》加以精製，得 到6-(3’ -氟丙氧基)-2-(4’ -羥基苯基)咪唑並[l，2-a]吡啶 55 200918103 C6-(3* -fluoro propoxy) -2-(4^ -hydroxyphenyl) imidazo [l，2a]Pyridine)151毫克（相當〇.527微莫耳）〔圖五、作業七〕。 【0103] 所得到的6-(3’ -氟丙氧基)-2-(4，-經基苯基)咪哇並 [1，2-a]吡啶，其核磁共振（NMR)測定結果（内部標準物質：二 甲基亞石風[以11161±^1311^€^(16])，如下所示。 【0104] 使用的核磁共振裝置：JNM-GSX-270 (日本電子公司製造） H-NMR (溶劑·重二曱基亞颯、共振頻率：27〇MHz):㈣· 52 (s, 1H )、8. 22 ( d，J = 2. 2 Hz，1H )、8. 〇8 ( s，iH )、7. 75-7. 65 (m，2H)、7.44( d，J = 9.6 Hz，lH)、6 99 (dd，J = 96, 2.2Hz，1H)、6.85-6.75(m，2H)、4.62(dt，2jHF = 47〇Hz| J = 6.0Hz,2H)> 4.05(t, J = 6.0Hz, 2H ) . 2.13 ( dquint, 3J, =25. 9 Hz，J = 6· 0 Hz，2H )。 [0105] (實施例1-8) 6-溴-2-(4’ -羥基苯基）咪唑並[i,2_a]痛咬 (6-bromo-2-(4, -hydroxy phenyl) imidazo[l，2-a]pyrimidine)之合成 56 200918103 【0106】 溴化銅（CuBn) 28.17公克（相當126毫莫耳）中加入醋酸 乙醋（ethyl acetate) 50毫升’使其懸濁。將8.18公克（相當 6〇.〇 毫莫耳）4，-羥基乙醯麥（4，—hydr0Xy acetophenone)溶 解於醋酸乙酯50毫升和氣仿（chl〇roform) 5〇毫升的混合液中， 將該溶液再加入前述懸濁液中，進行加熱回流。5小時以後，將反 應液冷卻至室溫，進行過濾，將濾液減壓濃縮之。殘渣溶解於醋 酸乙酯，加入活性碳進行脫色後，過濾溶液、將其濃縮。所得到 的粗生成物，用快速石夕凝勝管柱色層分析法（Hash silicagel column chromatography)《溶離液：氣仿/曱醇=20/1》加以精 製，然後從醋酸乙酯一石油醚進行再結晶，得到2-漠-4，-經基乙 醯苯（2-bromo-4，- hydroxy acetophenone) 7. 25 公克（相當 33.7毫莫耳）〔圖六、作業一〕。 [0107] 將2-溴-4’ -羥基乙醯苯748毫克（相當3. 5毫莫耳）和2-氨基-5-溴°密π定（2-amino-5-bromopyrimidine) 605 毫克（相當 3. 5毫莫耳）溶解於30毫升乙腈（acetonitrile)中，在11〇。〇 油浴加熱回流5小時。反應結束後，將反應液冷卻至室温，過濾 分離沉澱物後，用乙腈洗淨之，減壓使其乾燥。將所得到之粗結 57 200918103 晶懸浮於ίο毫升水和15毫升甲醇之混合液中，於該懸濁液中加 入約10毫升飽合碳酸氫鈉溶液，用超音波洗淨器振動5分鐘。從 所得到之混合物過濾分離沉澱物，用水仔細洗淨，減壓下使之乾 燥，得到6-溴-2-(4’ _羥基苯基)咪唑並[1，2—a]嘧啶 (6-bromo-2-(4, -hydroxy phenyl) imidazo[l，2-a]pyrimidine) 289 毫克（相當 0.997 毫莫耳）〔圖 六、作業二〕。 [0108] 所得到之6-溴-2-(4’ -羥基笨基)咪唑並[丨，2-a]嘧啶，其核 磁共振（NMR)測定結果（内部標準物質：二甲基亞碾 [dimethylsulfoxide])，如下所示。 【0109] 使用的核磁共振裝置：JNM-ECP-500 (日本電子公司製造） H.R (溶劑：重二甲基亞砜、共振頻率：5()晒z) n (br. s，1H )、9. 21 ( d，J = 2. 5 Hz，1H )、8· 46 ( d，J = 2. 5 Hz，1H )、8. 09 ( s，1H )、7. 79-7. 75 ( m，2H )、6. 83-6. 79 (m，2H )。 [0110] C-NMR(溶劑：重二甲基亞石風、共振頻率：】25MHz ):幻58. 、 58 200918103 149. 99、147. 68、146. 88、134. 78、127. 93、124. 52、116. 23、 106.83、103.94。 【0111】 ψ (實施例1-9) 6-氟-2-(4’ -羥基苯基)咪唑並[l，2-a]吡啶 (6-fluoro-2-(4’ -hydroxy phenyl) imidazo[l，2-a]pyridine) 之合成 【0112】 溴化銅（CuBr*2) 40. 〇公克（相當179毫莫耳）中加入醋酸乙 酯（ethyl acetate) 70毫升，使其懸濁。將11. 6公克（相當85. 3 毫莫耳）的4’ -經基乙醯苯（4’ -hydroxy acetophenone)溶解 於醋酸乙醋70毫升和氣仿（chloroform) 70毫升的混合液中，將 該溶液再加入前述懸濁液中，進行加熱回流。5. 5小時以後，將反 應液冷卻至室溫’進行過濾，將濾液減壓濃縮之。殘渣溶解於醋 酸乙醋’加入活性碳進行脫色後，過濾溶液、將其濃縮。所得到 的粗生成物’用快速矽凝膠管柱色層分析法（flash Silicagel columnchiOmatography)《溶離液：氣仿/曱醇= 20/1》加以精 製，然後從醋酸乙酯一石油醚進行再結晶，得到2-溴~4，-羥基乙 醯本（2-broino-4 - hydroxy acetophenone) 10. 2 公克（相當 * 47. 3毫莫耳）〔圖七、作業一〕。 59 200918103 【0113】 將2-演-4’ _起基乙酿本439毫克（相當2· 〇毫莫耳）和2- * 氨基-5-氟吡啶（2-amino-5-fluoropyridine) 224 毫克（相當 2. 0 毫莫耳）溶解於20毫升乙腈（acetonitrile)中，在ii〇°c油浴 加熱回流5小時。反應結束後，將反應液冷卻至室溫，過遽分離 沉澱物後，用乙腈洗淨之，減壓使其乾燥。將所得到之粗結晶溶 解於8毫升水和8毫升甲醇之混合液中，然後加入約1〇毫升飽合 碳酸氫納溶液，用超音波洗淨器振動5分鐘。從所得到之混合物 過濾分離沉澱物，用水仔細洗淨，減壓下使之乾燥，得到6-氟 -2-(4’ -羥基苯基）咪唑並[i，2-a]吡啶（6-fluoro_2一(4， -hydroxyphenyl) imidazo[l;2-a]pyridine)302 毫克（相當 1.32 毫莫耳）〔圖七、作業二〕。 【0114】 所得到之6-氟-2-(4,，基苯基)咪咬並以，2—a]fl比咬，其核 磁共振（NMR)測定結果（内部標準物f :二甲基亞礙 [dimethylsulfoxide])，如下所示。 【0115】 使用的核磁共振裝置：勝EGp_5⑽（日本電？公司製造) 200918103 H-腫（溶劑.重二曱基亞砜、共振頻率：5〇〇馳）：占9 45 (br. s, 1H ) > 8. 65 ( ddd, 3J„F= 4. 6 Hz, J = 2. 5, 0. 7 Hz, 1H ) > 8.16-8.15 ( m，1H )、7. 75-7-· 69 ( m，2H )、7. 56-7. 51 ( m, 1H )、 7. 23 ( ddd, Jhf = 8.4 Hz, J = 9. 9, 2. 5 Hz, 1H ) ' 6. 82-6. 76 (m, 2H )。 【0116】 C-MR(溶劑：重二曱基亞砜、共振頻率：丄25MHz):占（57. 82、 152· 81 (d，Jcf - 232· 3 Hz )、146· 58、142 92、127 35、124 99、 117.19 ( d, 3Jcp = 9.6 Hz ) > 116.40 ( d, 2JCF = 25. 9 Hz ) ^ 115. 89、113. 66 ( d, Jcf = ,41. 8 Hz )、]_〇g 48。 【0117] 19F-NMR (溶劑：重二甲基亞砜、共振頻率：47〇順z) :5141. 93 (br. s ) 0 【0118】 (實施例1-10) 2-(4’ -羥基苯基)-6-確基味唑並[1,2-a]吡啶 (2-(4( -hydroxy phenyl)-6-nitro iinidazo[l, 2-a]pyridine) 之合成 61 200918103 【0119】 溴化銅（CuBn) 40.0公克（相當179毫莫耳）中加入醋酸乙 酯（ethyl acetate) 70毫升；使其懸濁。將11· 6公克（相當85. 3 毫莫耳）的4 基乙醢苯（4 -hydroxy acetophenone)溶解 於醋酸乙酯70毫升和氣仿（chloroform) 70毫升的混合液中，-將 該溶液再加入前述懸濁液中，進行加熱回流。5· 5小時以後，將反 應液冷卻至室溫，進行過濾，將濾液減壓濃縮之。殘渣溶解於醋 酸乙酯，加入活性碳進行脫色後，過濾溶液、將其濃縮。所得到 的粗生成物’用快速矽凝膠管柱色層分析法（flash silicagel column chromatography)《溶離液：氯仿/甲醇= 20/1》加以精 製，然後從醋酸乙酯一石油鉍進行再結晶，得到2-漠-4，-經基乙 酿笨（2-bromo-4，- hydroxy acetophenone) 10. 2 公克（相當 47. 3毫莫耳）〔圖八、作業一〕。 [0120] 將2-溴-4’ -羥基乙醯苯432毫克（相當2.0毫莫耳）和2_ 氨基-5-确基n比σ定（2-amino-5-nitropyridine) 279 毫克（相當 2. 0毫莫耳）溶解於20毫升乙腈（acetonitrile)中，在 油浴加熱回流6小時。反應結束後，將反應液冷卻至室溫，過渡 分離沉澱物後，用乙腈洗淨之，減壓使其乾燥。將所得到之粗結 晶懸浮於8毫升水和8毫升甲醇之混合液中，然後加入約§毫升 62 200918103 飽合碳酸氫納溶液，用超音波洗淨器振動3分鐘。從所得到之 合物過濾分離沉澱物，用水仔細洗淨，減壓下使之乾燥，得到 2-(4’ -經基苯基)-6-硝基味嗤並[l，2-a]a比咬（2-(4，-hydroxy phenyl)-6-nitro imidazo[l，2-a]pyridine)148 毫克（相當 〇. 58〇 毫莫耳）〔圖八、作業二〕。 【0121】 所得到之2-(4’ -經基笨基)_6_石肖基嗦峻並^，2_a]n比嘴，其 核磁共振（NMR)測定結果（内部標準物質：二曱基亞碱 [dimethylsulfoxide])，如下所示。 【0122] 使用的核磁共雜置·· .EM0 (日本電子公司製造） lH_MR (溶劑：f二甲基亞颯、共振頻率：5_z): d 9. 74-9. 72 ( m, 1H ) ' 9 SQ r κ ;( br. s, 1H )^8.39 ( s, 1H ) 7. 87 ( dd, J = 9. 9 2 S Rv m \ U Hz，1H )、7· 79_7. 74 ( m，2H )、 7· 65-7. 61 ( in, 1H )、6|6 8〇 ( m，2H )。 [0123] 13C-NMR(溶劑：重二甲其s T基亞碾、共振頻率：125MHz): 6158.47、 148. 51、145. 25、136 63、197 n〇 0·叫 127. 93、127. 8卜 124. 06、118. 92、 63 200918103 116.09、115.92、110.37。 【0124] (實施例II-l) 6-三丁基甲錫烧基_2-(4’ -羥基苯基）咪唑並 [1,2-a]喊咬（6-tributyl stannyl-2-(4’ -hydroxyphenyl) imidazo[l，2-a]pyrimidine)之合成 【0125】 溴化銅（CuBr2) 28.17公克（相當126毫莫耳）中加入醋酸 乙酯（ethyl acetate) 50毫升，使其懸浮。將8.18公克（相當 60.0 宅莫耳）的 4’ -經基乙醯苯（4’ -hydroxy acetophenone) 溶解於醋酸乙酯50毫升和氯仿（chloroform) 50毫升的混合液 中’將該溶液再加入前述懸濁液中，進行加熱回流。5小時以後， 將反應液冷卻至室溫，進行過滤’將濾、液減壓濃縮之。殘渣溶解 於醋酸乙酯，加入活性碳進行脫色後，過濾溶液、將其濃縮。所 得到的粗生成物，用快速矽凝膠管柱色層分析法（f lash si丨icagel column chromatography)(溶離液：氣仿/甲醇=2〇//1)加以精 製，然後從醋酸乙酯一石油_進行再結晶，得到2_溴_4，_羥基乙 醯苯（2-broino- 4’ -hydroxyacetophenone) 7. 25 公克（相當 33 7 毫莫耳）〔圖十、作業一〕。 64 [0126] [0126]200918103 將2-溴-4’ -羥基乙醯笨748毫克（相當3.48毫莫耳）和5_ >臭-2-氨基嘧咬（5-bromo-2-amino-pyrimidine) 605 毫克（相當 3. 48毫莫耳）溶解於3〇毫升乙腈（acetonitrile)中，在11〇。〇 油浴加熱回流5小時。反應結束後，將反應液冷卻至室溫，過淚 分離沉澱物後，用乙腈洗淨之，減壓使其乾燥。將所得到之粗結 晶懸浮於10毫升水和15毫升甲醇之混合液中，於該懸濁液中加 入約10毫升飽合碳酸氫鈉溶液，用超音波洗淨器振動5分鐘。從 所得到之混合物過濾分離沉澱物，用水仔細洗淨，減壓下使之乾 燥，所得到之固體用Ν,Ν-二甲基甲醯胺（N，N- dimethyl formamide ; DMF)再結晶，得到6-溴-2-(4’ -羥基苯基)咪唑並 [l，2-a>密咬（6-bromo-2-(4’ -hydroxy phenyl) imidazo [1，2a]pyrimidine)289毫克（相當1· 00毫莫耳）〔圖十、作業二〕。 [0127] 將6-漠-2-(4’ -經基苯基)p米β坐並[1，2-a]°^定75. 4毫克(相 當0. 260毫莫耳）溶解於HL0毫升二噁烷（dioxane)，加入三乙 胺（triethylamine) 2. 0毫升後，再加入雙（三丁基錫） (bis[tributyl tin]) 0. 20毫升（相當0. 39毫莫耳）和四個（三 笨基膦）化 1巴（tetrakis (triphenyl phosphine) palladium(0)) 20.1毫克（催化劑數量）。將反應混合物在90°C攪拌l〇小時後， 65 200918103 減壓將溶劑蒸顧除去，把殘潰用快速石夕凝膠管柱色層分析去 (flash silicagel c〇lumn chromatography) : 醋酸乙醋= 1/1>加以精製。得到6-三丁基甲基|(4,二經 基苯基)啦坐並[l，2-a]^ (6—tributyl stannyl_2_(4， -hydroxy phenyl) imidaz〇[1，2_a] pyrimidine) 24 〇 毫克（相 當0. 048毫莫耳）〔圖十、作業三〕。 [0128] 所得到的6—三丁基甲錫烷基-2-(4’ -羥基苯基)咪唑並 [l，2-a]嘧啶，其核磁共振（NMR)測定結果（内部標準物質：二 甲基亞砜[以肥1±7131^(^〇16])，如下所示。 [0129] 使用的核磁共振裝置：JNM-ECP-500 (日本電子公司製造） W-NMR(溶劑：重氯仿、共振頻率：500MHz):占8.41 ( s，1H)、 8. 23 ( s，1H )、7. 80 ( d，J = 8. 7 Hz, 2H )、7. 63 ( s，1H )、 6. 93 ( d，J = 8. 7 Hz，2I〇、1. 57-1. 51 ( m，6H )、1. 37-1. 23 (m，6H )、1.16-1.12 ( m，6H )、〇. 88 ( d，J = 7. 3 Hz，9H )。 【0130】 (實施例II-2) 6-三丁基甲錫燒基-2-(4，-羥基苯基）咪唑並 66 200918103 [l，2-a]吡嗪（6-tributyl stannyl-2-(4，-hydroxyphenyl) imidazo[l，2-a]pyrazine)之合成 【0131】 溴化銅（CuBn) 28.17公克（相當126毫莫耳）中加入醋酸 乙酯（ethyl acetate) 50毫升，使其懸浮。將8.18公克（相當 60.0 毫莫耳）的 4 -經基乙醯苯（4’ -hydroxy acetophenone) 溶解於醋酸乙酯50毫升和氯仿（chlor〇f〇rm) 50毫升的混合液 中，將該溶液再加入前述懸濁液中，進行加熱回流。5小時以後， 將反應液冷卻至室溫，進行過濾，將濾液減壓濃縮之。殘渣溶解 於醋酸乙酯’加入活性碳進行脫色後，過濾溶液、將其濃縮。所 得到的粗生成物，用快速矽凝膠管柱色層分析法（f lash si 1 icagei column chromatography)(溶離液：氣仿/曱醇=20/1)加以精 製’然後從醋酸乙酯一石油醚進行再結晶，得到2-溴-4，-羥基乙 酿笨（2-bromo- 4，-hydroxyacetophenone) 7. 25 公克（相當 33. 7 宅莫耳）〔圖十一、作業一〕^ 【0132】 將2-溴-4’ -羥基乙醯苯4. 66公克（相當21. 6毫莫耳）和 5-溴-2-氨基η比嗪（5-bromo-2-amin〇-pyazine) 2. 53 公克（相當 14. 5毫莫耳）溶解於11〇毫升乙腈（acetonitrile)中，在ι10 67 200918103 C油浴加熱回流3. 5小時。反應結束後，將反應液冷卻至室溫， 過渡分離沉澱物後，用乙腈洗淨之，減壓使其乾燥。將所得到之 粗結晶懸浮於10毫升水和10毫升曱醇之混合液中，於該懸濁液 中加入約20毫升飽合碳酸氫鈉溶液，用超音波洗淨器振動1〇分 鐘。從所得到之混合物過濾分離沉澱物，用水仔細洗淨，減壓下 使之乾燥，得到6-溴-2-(4，-羥基苯基)咪唑並[1,2-a]吡嗪 (6-bromo~2-(4, -hydroxy phenyl) imidazo [1, 2a]pyrazine) ψ 1.32公克（相當4. 55毫莫耳）〔圖十一、作業二〕。 【0133】 將6-溴-2-(4’ -羥基苯基)咪唑並[1，2-a]吡嗪1. 〇〇公克(相 當3_45毫莫耳）溶解於50.〇毫升二噁烷（di〇xane)，加入三乙 胺（triethylamine) 20毫升後，再加入雙（三丁基錫） (以3[1：1'比扯711^11])4.5毫升（相當5.18毫莫耳）和四個（三 本基膦）化把（tetrakis (triphenyl phosphine) palladium(O)) 239毫克（催化劑數量）。將反應混合物在9〇°c攪拌24小時後， 減壓將溶劑蒸德除去，把殘潰用快速石夕凝膠管柱色層分析法 (flash silicagel column chromatography)《溶離液：己烷/ 醋酸乙酯= 1/1》加以精製。得到6_三丁基甲錫烷基_2_(4，一羥 基本基）味°坐並[1，2-a] °比嗪（6-tributyl stannyl-2-(4， -hydroxy phenyl) imidazo[l，2-a] pyrazine) 314 毫克（相當 68 200918103 0.628毫莫耳）〔圖十一、作業三〕。 【0134】 所得到的6-三丁基甲錫烷基-2-(4, ~羥基苯基)咪唑並 [l，2-a]吡嗪，其核磁共振（臓）測定結果（内部標準物質：四 甲基硅烧[^1^11^1^13113此])，如下所示。 * [0135] 使用的核磁共振裝置：J^-ECP-500 (日本電子公司製造） ΐ-NMR(溶劑：重氯仿、共振頻率：500MHz): d921 (s，1H)、 7· 95 ( s，1H )、7· 79 ( d，J = 8. 7 Hz，2H )、7. 77 ( s，in )、 6.91 ( d，J = 8.7 Hz，2H )、l.7(H 55 ( m 6H )、l 38 i 3i (m，6H)、1.18-1.15( m，6H)、0.89(d，j = 7 3Hz，9H)。 ^ [0136] · 13C-NMR(溶劑：重氯仿、共振頻率：125MHz): 、⑽[ 143. 5、140. 3、128. 0、124. 9、123· 6、116 卜 1〇6. 9、29. 〇、以、 13. 7、10.0。 [0137] (實施例II-3) 2-(4’ -經基苯基)〜6♦味嗤並[以一·嗓 69 200918103 (2-(4* -hydroxy phenyl)-6-iodo imidazo[l, 2-a]pyrazine) 之合成 [0138] 實施例II-2所得到的6-三丁基甲錫烷基-2-(4，-羥基苯基) 咪唑並[l，2-a]吡嗪314毫冬（相當0.628毫莫耳）溶解於二氯 甲烷（dichloromethane)5. 0毫升中，加入同樣已溶解碘元素U4 毫克（相當〇· 942毫莫耳）的5. 0毫升二氯甲烷。反應混合物在〇 °C攪拌10分鐘、在室溫攪拌3〇小時後，加入飽和碳酸氫鈉溶液 和飽和硫代硫酸鈉（sodium thiosulfate)溶液，將沉澱物過滤 分離後，以水、醋酸乙酯的順序將其洗淨，減壓下使其乾燥，得 到2-(4 -羥基苯基)-6-碘-咪唑並[i，2-a]吡嗪（2-(4，-hydroxy phenyl)-6-iodo imidazo[l，2-a]pyrazine) 131 毫克（相當 〇 389 毫莫耳）〔圖十二、作業一〕。 ψ 【0139】 所得到的2-(4 -輕基笨基)_6_蛾令坐並2_a]n比嗪，其 核磁共振（NMR)測定結果（内部標準物質：四甲基硅烷 [tetramethylsilane])，如下所示。 【0140】 200918103 使用的核磁共振裝置：JNM-ECP-500 (日本電子公司製造） iH-NMR (溶劑：重二曱基曱酿胺[dimethylformamide]、共振 頻率：500MHz): 59.89 ( s，1H )、9.01 ( s，1H )、8.82，（ s， 1H )、8.42 ( s，1H )、7. 92 ( d，J = 8· 7 Hz，2H )、6. 93 ( d， J = 8. 7Hz，2H )。 【0141】 (實施例11-4) 8-三丁基甲錫炫基-2-(4，-羥基苯基）咪唑並 [1, 2-a]°it«^ (8-tributyl stannyl-2-(4, -hydroxyphenyl) imidazo[l,2-a]pyridine)之合成 【0142】 溴化銅（CuBr2) 28.17公克（相當126毫莫耳）中加入醋酸 乙酯（ethyl acetate) 50亳升，使其懸浮。將& 18公克（相當 60.0¾莫耳）的 4 -經基乙醯苯（4’ -hydroxy acetophenone) 溶解於醋酸乙酯50耄升和氣仿（chloroform) 50毫升的混合液 中’將該溶液再加入刖述懸濁液中，進行加熱回流。5小時以後， 將反應液冷卻至室溫，進行過濾，將濾液減壓濃縮之。殘渣溶解 於醋酸乙酯，加入活性碳進行脫色後，過濾溶液、將其濃縮。所 得到的粗生成物，用快速矽凝膠管柱色層分析法（f lash si丨icagel column chromatography)(溶離液：氯仿^/甲醇= 2〇//1)加以精 71 200918103 製，然後從醋酸乙酯一石油醚進行再結晶，得到2-溴-4，-輕基己 酿苯（2-bromo- 4’ -hydroxyacetophenone) 7. 25 公克（相當 33 ^ 毫莫耳）〔圖十三、作業一〕。 【0143] 將2-溴-4’ -羥基乙醯苯432毫克（相當2. 01毫莫耳）和3〜 溴-2-氨基°比咬（3-bromo -2-amino-pyridine) 348 毫克（相卷 2. 01毫莫耳）溶解於20毫升乙腈（acetonitrile)中，在iiQt 油浴加熱回流6小時。反應結束後，將反應液冷卻至室溫，過淚 分離沉澱物後’用乙腈洗淨之，減壓使其乾燥。將所得到之粗社 晶懸浮於8毫升水和8毫升甲醇之混合液中，於該懸濁液中加^ 約8毫升飽合碳酸氩鈉溶液，用超音波洗淨器振動5分鐘。從戶厅 得到之混合物過濾分離沉澱物，用水仔細洗淨，減壓下使之乾燥， 得到8-溴-2-(4’ -羥基苯基)咪唑並[l，2-a]吡啶 (8-bromo-2-(4， -hydroxy phenyl) imidazo [l，2a]pyridine) 368毫克（相當1.27毫莫耳）〔圖十三、作業二〕。 【0144] 將8-溴-2-(4’ -羥基苯基)咪唑並[1，2-a]吡啶75. 2毫克(相 當0. 260毫莫耳）溶解於1〇. 〇毫升二噁烧（dioxane)，加入三乙 胺（triethylamine) 2. 0毫升後，再加入雙（三丁基錫） 72 200918103 (bis[tributyl tin]) 〇. 20毫升（相當〇. 39毫莫耳）和四個（三 本基膦）化i巴（tetrakis (triphenyl phosphine) pal ladium(O)) 20.1毫克（催化劑數量）。將反應混合物在9(rc攪拌u小時後， 減壓下將溶劑蒸餾除去，把殘渣用快速矽凝膠管柱色層分析法 (flash silicage 1 column bhromatography)《溶離液：己烧/ 醋酸乙酯= 1/1》加以精製。得到8_三丁基甲錫烷基_2_(4，-羥 基本基）咪峻並[l，2-a] °比咬（8-tributyl stannyl-2-(4， -hydroxy phenyl) imidazo[1，2_a] pyridine) 62· 5 毫克（相當 0· 125毫莫耳）〔圖十三、作業三〕。 【0145】 所得到的8-三丁基曱錫烧基_2_(4’ —經基苯基)咪唾並 [1’2-a]吡啶，其核磁共振（NMR)測定結果（内部標準物質：四 TS^^[tetramethylsilane])，WTm*。 【0146】 H-NMR (溶劑：重氣仿、共振頻率：5〇〇MHz):占8. 廿

6. 4 Hz’ 1H )、7. 87 ( d，J = 8. 7 Hz，2H )、7. 7〇 ( s，1H 17 (d, J = 6.4Hz, lH)>6.87(d, J = 8. 7 Hz, 2H ) 6. 68-6. 66 ( m, 1H ) > 1. 69-1. 56 ( m, 6H ) ^ 1. 38-1. 30 ( m, 6H ) > 1.28-1.16 ( m, 6H )^0.88-( t, J = 7. 3 Hz, 9H )〇 73 200918103 【0147】 13C-NMR(溶劑：重氣仿、共振頻率：125MHz): 5145. 2、141. 0、 139. 2、132. 4、131. 8、127. 7、127, 3、125. 0、115.4、112. 2、 106.4、29.2、27.4、13.7、10.2。 【0148】 (實施例II-5) [1231]-2-(4’ -羥基苯基)-6-碟咪唑並[1,2_3]嘧 咬（[1231]-2-(4’ -hydroxy phenyl)-6-iodo imidazo[l，2-a]pyrimidine)之合成 【0149】 三丁基曱錫烧基-2-(4’ -羥基苯基)咪唾並[1，2-a]嘧啶的 甲醇溶液（濃度.1毫克/毫升）1〇〇微升中，加入2莫耳/升之 鹽酸100微升、621MBq的[1231]碘化鈉（容量為15〇微升）、1毫莫 耳/升之碘化鈉溶液20微升、l〇%(W / V)過氧化氫20微升。將該 混合液在50°C加熱10分鐘後，用與實施例1-2相同條件的高效能 液相層析法（High performance liquid chromatography ; HPLC)， 將[1231]-2-(4，-羥基苯基)-6-碘咪唑並[1，2-a]嘧啶 ([123I]-2-(4，-hydroxy phenyl) -6-iodo imidazo [l，2-a]pyrimidine)的析離部份（fractionation)分離取得。 200918103 【0150] 實施前項相同的作業，得到門]_2_(4, _經基苯基)—6♦米 唑並[l，2-a]嘧咬（[i23i]-2-(4，，dr〇xy 細⑹ -6-iodo imidazo [l’2-a]pyrimidine)《試藥添加量：6_三丁基甲錫烧基 -2-(4 -羥基苯基)咪唑並[u—a]嘧啶的甲醇溶液〇農度：i毫克 /¾升）150微升、2莫耳/升之鹽酸75微升、487MBq的[⑵^碘 化納（合量為150微升）、1毫莫耳/升之破化納溶液2Q微升·(w / V)過氧化氫30微升》。 [0151】 將别項及再前項的作業所得到之二個析離部份 (fractionation)混合起來，混合液中加入水1〇毫升，把該液 體放入逆姆柱《商品名：Sep_Pak〔商標登錄〕Light C8 Cartridges，Waters公司製造，充填劑之充填量：145毫克》作 為沖提液’將[1231]-2-(4’ -經基苯基)+峨味嗤並⑴卜❸密啶吸 著捕集於該管柱。用1毫升水洗淨該管柱後，再用丨毫升二乙基 醚（diethyl ether)沖提，使[⑵丨]—2_(4，-羥基苯基)_6_碘咪唑 並[l，2-a]嘧啶溶出，所得到的化合物放射能量在剛合成後係 67MBq °又’依據以下條件，用薄層層析法（TLC)測定時，其放 射化學純度係92. 5%。 75 200918103 【0152】 薄層層析法（TLC)分析條件.： TLC層析板.Si 1 ics Gel 60 F254 (商品名，Meruku公司製造） 展開相：氣仿/甲醇/三乙胺= 100/1/2 檢測器：Rita Star (商品名，raytest公司製造） 【0153】 (實施例II-6) [1231]-2-(4，-輕基苯基)-6-块味啥並[1,3]¾^ ([1231]-2-(4’ -hydroxy phenyl)-6-iodo imidazo[l，3]pyrazine)之合成 【0154】 6-三丁基甲錫烧基-2-(4’ -經基苯基)咪*坐並[1，2-8]1¾唤的 甲醇溶液（濃度：1毫克/毫升）100微升中，加入2莫耳/升之 鹽酸75微升、469MBq的[1231]蛾化納（容量為1〇〇微升）、1毫莫 耳/升之碘化鈉溶液20微升、10%(W / V)過氧化氫20微升。將該 混合液在50°C加熱10分鐘後，用與實施例1-2相同條件的高效能 液相層析法（High performance liquid chromatography ; HPLC)， 將[1231]-2-(4’ -羥基苯基)-6-碘咪唑並[1，3]吡嗪 qi23jj_2-(4, -hydroxy phenyl) -6-iodo imidazo 76 200918103 [l，3]pyrazine)的析離部份（fractionation)分離取得。 【0155】 將該析離部份（fractionation)加入水1〇毫升，把該液體 放入逆相管柱《商品名：Sep-Pak〔商標登錄〕Light C8 Cartridges，Waters公司製造，充填劑之充填量：145毫克》作 為沖提液，將[1231]-2-(4’ -羥基苯基)-6-碘咪唑並[1，3]吡嗪吸著 捕集於該管柱。用1毫升水洗淨該管柱後，再用1毫升二乙基醚 (diethyl ether)沖提，使[1231]-2-(4’ -經基苯基)-6-峨味°坐並 [1，3]吡嗪溶出，所得到的化合物放射能量在剛合成後係133MBq。 又，依據與實施例II-5相同^條件，用薄層層析法（TLC)測定 時’其放射化學純度係99. 0%。 【0156】 (實施例II-7) [1231]-2-(4,-羥基苯基)-8-碘-咪唑並[l，2-a]吡 ^ ([123I]-2-(4, -hydroxy phenyl)-8-iodo imidazo[l，2-a]pyridine)之合成 【0157】 8-三丁基甲錫烷基-2-(4’ -羥基苯基)咪唑並[l，2-a]吡啶的 甲醇溶液（濃度：1毫克/毫升）70微升中，加入2莫耳/升之 77 200918103 鹽酸50微升、454MBq的[123I]硤化鈉（容量為loo微升）、i毫莫 耳/升之碘化鈉溶液20微升，、10%(W / V)過氧化氫2〇微升。將該 混合液在50 C加熱10分鐘後’用與實施例1-2相同條件的高效能 液相層析法（High performance liquid chromatography ; HPLC)， 將[1231]-2-(4，-經基苯基)-8-蛾口米嗤並[l，2-a] °比咬 ([123Ι]-2-(4’ -hydroxyphenyl) -8-iodo imidazo[l，2-a] pyridine)的析離部份（fractionation)分離取得，得到 [1231]-2-(4’ -經基苯基)-8-蛾。米唾並[1，2-a] 0比咬。 [0158] 將該析離部份（fractionation)加入水10毫升，把該液體 放入逆相管柱《商品名：Sep-Pak〔商標登錄〕Light C18 Cartridges ’ Waters公司製造，充填劑之充填量：130毫克》作 為沖提液’將[1231]-2-(4，-羥基苯基)-8-碘咪唑並[1，3]吡啶吸著 捕集於該管柱。用1毫升水洗淨該管柱後，再用1毫升二乙基醚 (diethyl ether)沖提，使[1231]-2-(4，-羥基苯基)-8-碘咪唑並 [1，3]吡啶溶出，所得到的化合物放射能量在剛合成後係185MBq。 又，依據與實施例Π-5相同.的條件，用薄層層析法（TLC)測定 時’其放射化學純度係91. 7%。 78 【0159】 200918103 (參考例1) [125Ι]-ΙΜΡΥ的合成 ψ. 【0160】 為了應用在l〇gP〇ctairal研究的相關比較例（比較例I —6 )上， 依照以下方法，合成[125I]-IMPY。 【0161】 依照文獻〔Zhi-PingZhuang 等人，j. Med. Chem，2003, 46, 頁237-243〕記載的方法，合成6-三丁基曱錫烷基-2-[4’ -(N，N- 二甲基氨基）苯基]咪0坐並[1，2-8]°比咬 (6-tributylstannyl-2-[4’ _(N，N-dimethylamino)phenyl]imi dazo[l，2-a]pyridine)，溶解於曱醇中（濃度為1毫克/毫升;)。 於该溶液53微升中，加入1莫耳/升的鹽酸75微升、13. 5MBq 的[I]峨化納20微升、10%(W/V)過氧化氫1〇微升。將該混合液 放在50 C靜置10分鐘後’依照與實施例i_2相同條件的高效能液 相層析法’將[I]-IMPY的析離部份（斤扣衍⑽的丨如）分離取出。 【0162】 ， 於該析離部份加入水10毫升，放入逆相管柱（商品名：

Sep Pak〔商標登錄〕Light Cl8 Cartridges，Waters 公司製造， 充填劑之充填量：丨3〇毫克）作為沖提液，將[125i]-impy吸附捕集 79 200918103

進行與實施例1-2相同條件的薄層色層分析法， 度係98. 0%。 夺係2. 6MBq;又， 其放射化學的純 【0163】 (參考例2) [123Ι]-ΙΜΡΥ的合成 【0164】 - 為了應用在腦集積性研究之相關比較例（比較例1_7)，依照 以下方法，合成[123Ι]-ΙΜΡΥ。 【0165】 依照文獻〔Zhi-PingZhuang 等人，J. Med. Chem，2003, 46, 頁237-243〕記載的方法，合成6-三丁基甲錫烷基-2-[4，-(N，N- 二甲基氨基）苯基]咪唑並[l，2-a]吡啶 (6-tributylstannyl-2-[4,- -(N，N-dimethylamino)phenyl]imidazo[l，2-a]pyridine) ’ 溶解 於甲醇中（濃度為1毫克/毫升）。於該溶液53微升中，加入1 莫耳/升的鹽酸100微升、190〜240MBq的[1231]碘化鈉20〜50微 升、1毫莫耳/升的碘化鈉溶液10微升、10%(W/V)過氧化氫10 200918103 微升。將該混合液放在50¾靜置ι〇分鐘後，依照與實施例卜2 相同條件的高效能液相層析法，將的析離部份 (fractionation)分離取出。 【0166】 於该分離部份加入水1〇毫升，放入逆相管柱（商品名：

Sep-Pak〔商標登錄〕Light C18 Cartridges，Waters 公司製造， 充填劑之充填量：13G毫克）作為沖提液，將[123ιΗΜργ吸附捕集 於該2管柱。用1毫升水洗淨該管柱後，以丨毫升乙醇作為沖提液， 將[123i]-impy溶出。所得到之放射能量在剛合成時係47〜56MBq ; 又’進行與實施例1-2才目同條件的薄層色層分躲，其放射化學 的純度係98. 0%。 【0167】 (實施例Η卜實施例卜14、比較例卜i〜比較例卜5)殿粉樣 蛋白親和性之測定 本發明之化合__樣蛋白親和性，#由以下生體外⑸ vitro)結合試驗加以評價。 【0168】 (1) A点_ (胜肽研究所）用磷酸緩衝液（酸鹼值(邱)7. 4 )溶解， 200918103 在37C震盪62〜72小時，得到凝集A/3懸濁液（濃度：相當1毫 克/¾升，以下，在本實施例中，稱為「殿粉樣蛋白懸濁液」)。 [0169] (2)關於前述澱粉樣蛋白懸濁液，依照文獻（Naiki，H.等人、

Laboratory Investigation. II、頁 374-383(1996))記載的方法， 藉由使用硫黃素T (thioflavin T，Fluka公司製造）的螢光光度 測定，進行定性實驗，確認在（1)得到之凝集化A石係澱粉樣蛋 白（測定條件：激發波長446奈米（nm)、螢光波長490奈米）。 [0170] (3)依照文獻（Wang, Y·等人、J. Labelled Compounds Radiopharmaceut.M， S239(2001))記載的方法，將 2-(4，-氨 基苯基）苯並嗔唑（2-(4’ -aminophenyl) benzothiazole)作為 標示前驅物，配製[1251]2-(3’ -碘-4，-氨基苯基）苯並噻唑 ([1251]2-(3’ -iodo-4’ -aminophenyl)benzothiazole;以下稱 為「[1251]3，-Ι-ΒΤΑ-0」）’溶解於乙醇。在製造時，使用12〜7lMBq 的[1251]碘化鈉（以容量計，10〜30微升），在剛合成後，得到1 〜22 MBq 的[1251]3’ -Ι-ΒΤΑ-0。剛果紅（Congo red)、硫黃素 τ、 及6-甲基-2-[4’ -(N，N-二甲基氨基）苯基]苯並噻唑 (6-methyl-2- [4* -(N, N- dimethyl amino)phenyl] 82 200918103 benzothiazole ;以下稱為「6-Me-BTA-2」），可以將市售試藥商口口 就其原樣秤量使用。 【0171] (4) 分別依照文獻（Wang，Y.等人、j. Labelled Compounds Radiopharmaceut.M，S239(2001))及文獻（Zhiiang，Z.P.等人、 又河6(1.〇^111.逆，237(2003))，記載的方法，合成2-(3，_碘-4，_ 氨基笨基）笨並°塞唾（2-(3’ -iodo-4，-aminophenyl) benzothiazole ;以下稱為「3，-i-BTA-o」）及 IMPY。 [0172] (5) 將[1251]3’ -I-BTA_〇、各評價化合物及澱粉樣蛋白的最後濃 度’依照附表二記栽之濃度，溶解於含有〇. 1%牛血清白蛋白 (albumin)之碌酸緩衝液（酸鹼值7. 4)，調製成試樣，充填到有 1 96洞孔的微量板（microplate)的各個小井（well)(容量約0.3 毫升）中。 83 200918103 【0173] 【附表二】 附表二試樣溶液中相關各化合物的最後濃度 實驗 評價化合物 評價化合物濃度 [1251]3’ -Ι-ΒΤΑ-0 濃度 澱粉樣蛋白 比較例1-1 3，-Ι-ΒΤΑ-0 各槿濃度:· 0 ’ 〇·〇〇 卜 0.01， 〇·1，1，10， 1〇〇 ’ 1000 毫微莫耳/公升 (nmol/L) 400微微莫耳，公升 (pmol/L) 1微莫耳/公升 (/^mol/L) 比較例1-2 剛果紅 .比較例1-3 硫黃素T 比較例1-4 6-Me-BTA-2 比較例1-5 IMPY 實施例1-11 化合物1 _^例1-12 化合物2 !施例1-13 化合物3 化合物4 【0174】 (6)將已充填試樣溶液的微量板在22°C用固定速度（400轉/分 名里）震盪3小時以後，藉由將各試樣溶液用玻璃纖維過滤器（giass f iber f i 1 ter)(商品名：Muliitiscreen™—FC，Mi 1 ip〇a 公司製造） 過濾，分離出與澱粉樣蛋白結合的[1251]3，-I-BTA-0及未與澱粉 樣蛋白結合的[1251]3，-Ι-ΒΤΑ-0。 【0175】 (7)將各試樣溶液過濾所用的玻璃纖維過濾器，用含有〇. 1%牛血 清白蛋白的磷酸缓衝液（酸鹼值7. 4)洗淨（〇. 5毫升、5次），玻 84 200918103 璃纖維過絲之放射能量，用自動小井·伽碼系統（autowel卜 丨system)《型式：ARC-301B，Al〇ka公司製造》測定，作為結合 在澱粉樣蛋白的各試樣溶液之放射能量，用於計算阻礙率（以下， 各評價化合物濃度是〇的試樣，其湖放射能量當作A ;評價化合 物濃度是0· GG1毫微莫耳/公相上的試樣，其侧放射能量當 作B)。 【0176】 (8) 另外，含有〇.1%牛血清白蛋白的填酸緩衝〉夜（酸驗值7 中，調製成6-Me-BTA-2的15微莫耳（#mol) /公升的溶液、 [1]3’ -Ι-ΒΤΑ-0的400微微莫耳(pmol)/公升的溶液、a々i 4。 的1微莫耳（//mol)/公升的溶液，進行與前述（6)及（？）相同 的作業，測定放射能量。所求得的放射能量作為背景放射能量， 用在計算阻礙率（以下，當作BG)。 【0 17 7】 (9) 應用前述⑺及⑻所測定到之放射能量 式 ⑴： " 【0178】 【數學1】 85 *100 {%) 200918103 阻礙率

B-BG A-BG 【0179] 求出阻礙率。所得到的阻礙率轉換為正規分布的概率單位 (piObit)後之值，將該值相對於評價化合物濃度之對數，於座 仏上點記（plot)、連結作成圖形（graph)、藉由最小平方法做成 独直線應用此直線，纽雜量在各評價化合物無添加試樣 的值變成—半時’求出各評價化合物濃度，作為各化合物的5⑽ 阻礙濃度（町稱為「I值」）。將此值物旨標來細，評定各 評價化合物的麟樣蛋白（凝集Μ知。）親和性。 [0180】 2化合物相關逸值顯示於附表三。化合物卜心 =不到100的1C·具有比剛果紅和硫黃素Τ都; 她—㈣娜果:顯示化 特別是，=::r(r集化‘)親繼 與-相同的_蛋白(凝集：:6=_高 【〇 1 8 1】 86 200918103 【附表三】 附表三本發明化合物的IC5DX值 會田么 _ 貫驗 評定化合物 1。5〇%値(咖〇l/L) 比較例1-1 3’ -Ι-ΒΤΑ-0 10.1 比較例1-2 剛果紅 >1000 比較例1-3 比較例1-4 " 硫黃素T . >1000 6-Me-BTA-2 25.4 比較例1-5 實施例1-1 i~~~~ IMPY 4.0 化合物1 4.4 實施例1-12 化合物2 46.0 實施例Ι-Ϊ3 ~ 化合物3 54.4 貫施例1-14 化合物4 54.1 【0182】 (實施例1-15、實施例π-8〜11-10、比較例1-6)使用辛醇抽出 法測定分配係數 【0183】 ， 使用一般所知的辛醇（octanol)抽出法測定得到之分配係數 (以下稱為「logP octanol j )’作為化合物之腦血液障壁（brain blood ban^ ’以下稱為「購」）透過性的指標。 【0184】 在實知例1-2所調製的化合物5的二乙基醚溶液（實施例 M5)'在實施例1卜5所調製的化合物9的二乙基醚溶液（實施 例Π 8)、在實施例11-6所調製的化合物10的二乙基醚溶液（實 87 200918103 施例11-9)、在實施例11-7所調製的化合物u的二乙基醚溶液(實 施例II-1G)、及在參考例丨所調製的[1231]—ΙΜργ ^二乙基麟液 (比較例1-6)，將這些分別在含有1〇毫克/毫升抗壞血酸 (ascorbicacid) 理食鹽水中稀釋，調整至放射能濃度為2〇 〜30MBq/毫升。膽完成之試樣溶液各取1()微升，分別加入辛 醇…。加仙毫升，然後，添加1〇毫莫耳/公升填酸缓衝液(酸 驗值7. 4) 2毫升，_ 3〇秒鐘。將混合液用低速離心機（細 轉Λ刀’ 60分鐘）離心分離後，辛醇層與水層分別取丨毫升，在 1動小井伽碼系統（aut_l · Tsystem)《型式：ARC-301B， 服a公司製造》測計個別的放射能讀數（CQUnt)。利用所得到之 放射能讀數，應用公式⑵，算出1〇gP_Qi值。 [0185] , 【數學2】 層放 gggg Λ 、水~ j…⑵ 【0186】 125將結果顯示於附表四。化合物5之l〇gP_nol值，係L 6 ; [I ] IMPY之logp。—值，係2. ：1。可以通過腳的化合物，已 知其1〇和_值係1〜3之_值《Douglas D. Dischino等人， 88 200918103 J. Nucl. Med.，（1983)，24，頁 1030-1038》。從以上結果，顯示此 二化合物，與IMPY相同，具有BBB通過性。 [0187] 【附表四】 附表四本發明化合物之1〇gpQetanQi值 實驗 化合物 lOgPocianol 値 比較例1-6 [I25I]-IMPY 2.1 實施例1-15 化合物_5 1.6 ^實施例Π-8 化合物9 ，1.7 1 實施例Π-9 化合物10 2.3 — 實施例Π-10 化合物11 3.0 【0188】 (實施例1-16、比較例1-7)腦部滲移性及廓清力（ciearance) 的測定 【0189】 用化合物6，測定雄性威斯達(Wistar)種類的大鼠週大） 之腦部放射能集積的隨時間之變化。 89 200918103 【0190] 將化合物6(實施例1—16)溶解於含有1〇毫克/毫升抗壞血 酸（ascorbic acid)的生理食鹽水所成之溶液（放射能濃度2〇 〜3030MBq /毫升）0. 05毫并，及在前述參考例2所調製成的 [123I]-IMPY (比較例1-7)溶解於含有1〇毫克/毫升抗壞血酸 (ascorbic acid)的生理食鹽水所成之溶液（放射能濃度2〇〜 3030MBq/毫升）〇. 05毫升，分別從被硫苯妥（thiopental，一種 短效麻藥）麻醉的威斯達(Wistar)種類的大鼠（7週大）的尾靜脈 注射進去體内。投與後2分鐘、5分鐘、30分鐘、60分鐘，從腹 部大動脈抽血後，摘取腦部，用自動小井·伽碼系統（autoweU · rsystem)《型式：ARC-301B，Aloka公司製造》測計腦的放射能 (以下’在本實施例，以A表示），然後，測定腦的質量。又，將 投與液稀釋1〇〇〇倍所成之溶液，取〇. 〇5毫升，用同樣的方法測 定其放射能量（以下，在本實施例，以B表示）。應用這些測定結 果’從下列公式（3)，算出在各解剖時間點上，腦的單位重量所 相當的放射能集積量（％ID/g)。 在各時間點，實施例1-16、及比較例1-7同時使用2隻動物 進行實驗。 【數學3】 【0191】 200918103 %/Z)/g = _A__ BxlOOOx腦的貿量

xlOO

【0192】 其結果顯7F於附表五。如附表五所示，化合物6，在投盘後2 分鐘的時點，發現其與鬥HMPY有_的集積，其後到達6〇分 鐘時’醜示有快速消失的傾向。從這個結果，顯示化合物6，與 ΓΙΗΜΡΥ _樣，具有很高的腦部渗雜（shift)及快速從腦部 的廓清力。 0 19 3 【附表五】 腦部放魏缝（大鼠） 化合物

[123I]-IMPY 化合物6 後 ~~L02 096 0.99 一30分鐘後 0.20 0.16 60分鐘後 0.08 0.04 0 19 4] (實施例1-17)腦部澱粉樣蛋白描現的確認 【0 19 5】 91 200918103 為了評價本發明相關之化合物能否描現腦部澌粉樣蛋白，進行以下實 驗。 [0196] (1)將AA-«(胜肽研究所製造）溶解於磷酸緩衝液（酸鹼值7 4)，在別 °C振盪72小時，得到凝集八㈣濁液⑽濃度：相當】毫克/毫升，以下， 於本實施例，稱為「澱粉樣蛋白懸濁液」）。 [0197】 ⑵在雜威斯達(Wistar)麵的大鼠（7週大）的單側扁桃腺，注射前 述澱粉樣蛋白懸濁液25微升（相’當&微克）；作為對照者，似一側的扁 桃腺，注射顧缓衝生理食躲（_值7 4) 25微升。注概粉樣蛋白 懸濁液和繼緩衝生理食鹽水（酸驗值7 4)丨日後，將大鼠做成檢體。 【0198】 (3)將化合物6鱗於含有10毫克/毫升抗壞城的生理食鹽水中，當 作試樣溶液（放雜濃度32MBq /料）。將麟·尾靜餘射到大鼠（投 與量：0. 5毫升’投與之放射能：相當16 MBq)。 【0199】 (4)投與60分鐘後將腦部摘取出來，用切片機（micr〇t〇me)《型式： 92 200918103 CM3050S，萊卡公司製造》製作成厚度1〇微米的腦切片。將該腦切片放在 影像板（imaging plate)上使其曝光2〇小時以後，使用生物影像分析儀 (Bioimaging analyzer)《型式：BAS_25〇〇，富士照相底片公司製造》進 行圖像解析。 [0200] (5)使用生物影像分析儀進行前述圖像解析結束以後，藉由硫黃素τ做病 理染色、使用螢光顯微鏡（型式：^20004型，Nik〇n公司製造；激發波 長：400〜440毫微米 '檢測波長：47〇毫微米）做出影像，確認澱粉樣蛋 白在該切片上沉積的情形（圖九b)。 [0201] #又私樣蛋白進入腦内的大鼠腦切片之自動射線攝影（如tOTadi〇gram) 及硫S素T染色的影像顯示於圖九。如該圖所示，在注人絲樣蛋白的一 側之扁桃腺，看到明確的放射能集積。又，從放射能集積部位的硫黃素7 染色的結果，確認在該部位存在有麟樣蛋自m在注射生理食 鹽水之-側之魏腺，和其他部佩較，紐確财意義的放射能集積。 從這個結果來看’化合物6:具有集積於腦内殿粉樣蛋白處的性能， 顯示有描現出腦内澱粉樣蛋白的能力。 93 【0202】 200918103 (實施例I 18〜1-20)基因逆向變異試驗（Reverse Mutation Test) [0 2 0 3] 為了 §周查化合物1、化合物2及化合物4的基因突然變異（Mutation) 誘發〖生使用老鼠傷寒桿菌（Saimoneiiatyphimurium)的TA98及TA100， 進行基因逆向變異測試（以下稱為「Ames試驗」）。 【0204】 試驗係分為無添加S 9 mix及添加S 9 mix的情形來實施。陰性對象， 係使用二曱基頻；陽性對象，&無添加s 9 mix的情形時，使用2 (2_ 聯糠醯)-3-(5-硝基-2-聯糠醯）丙稀醯胺 (2-(2-furyl)-3-(5-nitro-2-furyl)acrylamide)，在添加 S 9 mix 的情 形時’使用 2-氣基蒽（2-amino anthracene)。 [0205] 試驗用板（plate)的各試樣的添加量，以5〇〇〇微克/板做為最高用 量，分成7種用量（公比數為3)。被驗物質和試驗菌株（TA98或τΑ1〇〇)、 或者被驗物質和S 9 mix和試驗菌株混合後，在試驗用板上的洋菜凍培養 基上重複塗層，於3Π：培養48小時。評價的方法係計算培養後的板上的基 因逆向變異群落（〇)1师）數來實施，基因逆峻異群落數顯示陰性對照 的2倍以上之值、並且有隨濃度增加的情形，即為陽性。 94 200918103 [0206] 其U顯示於附表六。關於化合物丨、化合物2及化合物4處理群的 基因逆向變異群落數，任和s 9 mix添加之有無、及被驗物質添加 量’均無祕，均未達陰性賴補處理群的2倍。從以上絲化合物i、 化5物2及化&物4判疋為Ames陰性，任何-者均可斷定並無基因突然變 異誘發性。 [0207] 【附表六】 附表六 Ames試驗結果 化合物 致突變件 h 無添加 S9mix 添加S9niiX TA98 TA100 TA98 TA100 貫施例1-18 化合物1 陰性 陰性 陰性 陰性 實施例1-19 化合物2 陰性 陰性 陰性 陰性 實施例1-20 化合物4 陰性 陰性’ 隆性 陰性 【0 2 0 8】 (實施例11-11、11-12、比較例II-1)腦部滲移性及廓清力的測 定 . 【0209】 使用化合物10及化合物11 ’測定雄性威斯達(Wistar)種類 的大鼠（7週大）之腦部放射能集積的隨時間之變化。 95 200918103 【0210】 在化合物10 (實施例H—丨丨）、化合物il (實施例11-12)、 及前述參考例2調製的[123I]-IMPY (比較例Π-1)，各別溶解於含 有毫克/毫升抗壞血酸之生理食鹽水所成之溶液（放射能濃度 20〜31MBq/毫升）取〇. 05毫升，分別從被硫苯妥（thiopental， 一種短效麻藥）麻醉的威斯達(Wistar)種類的大鼠週大）的尾 靜脈注射進體内。投與後2分鐘、5分鐘、30分鐘、60分鐘，從 腹。P大動脈抽血後’摘取腦_，測定腦的質量，然後用單頻分析 儀ySingle-channel analyzer)《型式：Sp 2〇，應用光研工業公 司製造》測計腦的放射能（以下，在本實施例，以A表示）/又， ^同樣的方法啦殘餘的全身之放射能量（以下，在本實施例， 時間點上i應^_定結果，從下列公式⑷，算出在各解剖 ’腦的單位重量所相當的放射能細量（％ID/g)。 ， 在各時間點，係使用3隻動物來進行實驗。 【0211】 . 【數學四】

%/0/g s：____A 腦的質童x卿 …（4) 96 200918103 [0212] 其結果顯示於附表七。如咐主 寸表七所示，化合物10及化合物 11，與[123Π-IMPY相同，在投邀尨9 \ 與後2分鐘_’可以看到高的放 射能集積，其後的60分鐘，顯千此、± *'、'貝不快逮消失的傾向。從這個結果， 化合物10及化合物11，與[123丨]Tu ° 1HMPY_，顯示具有高的腦部滲 移性及快速地從腦部廓清的性質。 " 【0213】 【附表七】 化合物 實施例Π-11 化合 實施例Π-12 化合物ΊΓ 比較例Π-1 [123Ι]-ΙΜΡΫ 放雜_ (大氣） ~033~~

30分鐘後 0.08 0.09 0.23 60^}¾^ 0.02^ 0.03 0.09 【0214] (實施例II 13)化合物1Q注人麟樣蛋自的示範域，其活體 外（ex vivo)自動射線攝影（抓。⑽丨卿柳） " 【0215】 ⑴將A〜(胜肽研究所製造）溶解於魏緩衝液（酸驗 在37°C振盪72小時〇曰不丨,古+ /含 ；， 得侍到1毫克/毫升之凝集A/3懸濁液（以下， 97 200918103 · 於本實施例，稱為「殿粉樣蛋白懸濁液」）。 [0216] (2 )在雄性威斯達(Wistar)種類的大鼠（7週大）的單側扁桃腺， 注射前述澱粉樣蛋白懸濁液2.5微升（相當25微克）；作為對照 組，係另一側的扁桃腺，注射磷酸緩衝生理食鹽水（酸鹼值7.4) 2. 5微升。注射澱粉樣蛋白懸濁液和填酸緩衝生理食鹽水（酸驗值 * " 7.4) 1曰後，將大鼠做成檢體。 【0217] (3) 將化合物10溶解於含有1〇毫克/毫升抗壞血酸的生理食鹽 水中，當作試樣溶液（試樣溶液中的放射能濃度毫升）。 用硫苯妥麻醉大鼠’將此溶液從大鼠尾靜脈注射到體内（投與量. 〇· 5毫升，投與之放射能：相當15 MBq)。 [0218] (4) 投與60分鐘後將腦部摘取出來，用切片機《型式：CM3〇5〇s， 萊卡公司製造》製作成厚度10微米的腦切片。將該腦切片放在影 像板上使其曝光20小時以後，使用生物影像分析儀《型式. BAS-2500，富士照相底片公司製造》進行圖像解析。 98 200918103 【0219】 (5)使用生物影像分析儀進行㈣圖像解析結束以後，藉由硫黃 素T做病理染色、使用榮光顯微鏡《型式：τ删㈣型，敝〇n 公司製造：激發波長：400〜440毫微米、檢測波長：47〇毫微米》 做出影像’物澱雜蛋白在該切片上沉躺情形（圖十四b)。 【0 2 2 0】 . 殿粉樣蛋白進入腦内的大鼠，其腦切片之自動射線攝影 (autoradiogram)及硫黃素τ染色的影像顯示於圖十四。如該圖 所不，在注人絲樣蛋自躺液侧之扁桃腺，看刺確的放射能 集積。另-方面’在注射生理食鹽水側之扁桃腺，和其他部位比 較，無法確認有㈣的放射能_。又，根據此自騎義影來 看，澱粉樣蛋白進入部位以外，幾乎看不到放射能集積。並且， 從硫黃素T染色的結果，在放射能集積部位，確認有澱粉樣蛋白 的存在（圖十四b)。由這個結果，化合物10具有在腦部澱粉樣蛋 白處集積的性能，顯示有描現出腦部澱粉樣蛋白的能力。 【0221】 (貝施例11-14)化合物11注入殿粉樣蛋白的示範大氣，其活體 外（ex vivo)自動射線攝影（autoradiogram) 99 200918103 [0222] 將化合物11溶解於10毫克/毫升之抗壞血酸溶液中作為試 樣溶液（試樣溶液中的放射能濃度30 MBq /毫升），除此以外‘y、 行與實施例11-13相同之作業。 進 Γ0223] 殿粉樣蛋白進入腦内的大鼠腦切片之自動射線攝影 (aUt〇radi〇grara)及硫黃素τ染色的影像顯示於圖十五。如該圖 所不，在注人殿粉樣蛋白懸濁液側之爲桃腺，看到明確的放射妒 集積。又，從硫黃素T染色的結果，在放射能集積部位，確認^ 殿粉樣蛋㈣存在（圖十五仏另—方面，纽射生理食鹽水側 之扁桃腺’和其他部位比較，無法確認有意義的放射能集積。根 據以上的結果，化合物n具有在腦顧粉樣蛋白處集積的性能， 顯示有描現出腦部澱粉樣蛋白的能力。 【0224】 (實施例11-15)基因逆向變異測試 [0225] 為了调查化合物8的基目突賴觸發性，制老鼠傷轉 菌（Salmoneiia typhimurium)的薦及ΤΜ〇〇，進行基因逆向 100 200918103 變異測試（以下稱為「Ames試驗」）。 [0226] 試驗係分為無添加S 9 mix及有添加S 9 mix的情形來實施。 陰f生對,、、、係使用一曱基亞礙；陽性對照，在無添加s 9 mix的 情形時’使用2-(2-聯糠醯;^3-(5-硝基-2-聯糠醯）丙烯醯胺 (2-(2-furyl)-3-(5-nitro-2-furyl)acrylamide)，在添加 S 9 mix的f月形時，使用2_氨基蒽（2-amin〇anthracene)。 [0227] Λ驗用板（piate)的化合物g的添加量，以微克/板 作為最高用量’作成7種用量（公比數為3)。化合物8和試驗菌 株（TA98或TA1GG)、或者化合物8和s 9 mix和試驗菌株混合後， 在試驗用板上洋菜;東做的培養基上重複塗層於取培養狀小 f »f價的方法係5+算培養後板上的基因逆向變異群落（⑶^卿) 數來實施’基因逆向變鱗落數顯示陰性龍的2 Μ上之 並且有隨濃度增加的情形，認定作為陽性。 口 [0228] 其結果顯示於附表八。關於化合物8處理群的基因逆向變異 群落數’任-菌株和s 9 mix添加之有無、及被驗物質添加量均 101 200918103 無關係，係未達陰性對照物f處理群的2倍。另—方面，陽性對 照處理群，顯示明確的逆向變轉落數。從以上之結果，化合物8 判定為Ames陰性，可斷定並無基因突然變異誘發性。口 【0229】 ψ 【附表八】 附表八Ames試驗之結果 1---- 化合物 CH致突變性 —— —無添加 TA98 S9mix ΤΔ 1ΠΠ 添加 ΤΛ ΠΟ S9mix [1ϋίΓΠ-15 化合物8 陰性 1A,1UU 陰性 U\y〇 陰性 TA100 陰性 (實施例II1-1〜實施例ΠΙ_2)澱粉樣蛋白結合性之確認 【0 2 3 0】 為了調查本發明相關化合物之結合_ (meehanism)，使用 以香樹脂醇（amyrin)做為前驅物的澱粉樣蛋白，實施與硫黃素τ 的結合阻礙實驗。在第二型糖尿病，_鱗储積胰臟的殿粉 樣蛋白。 [0 2 3 1] ※方法 (1)將人的香樹脂醇《和光純藥工業製造》溶解於顧緩衝液（酸 102 200918103 驗值7. 4)，在37°C振盪72小時，得到1毫克/毫升之凝集香樹 脂醇懸濁液（以下於本實施例，稱為「澱粉樣蛋白懸濁液」）。 [0232] (2)關於前述澱粉樣蛋白懸濁液’依照文獻《Naiki，η.等人、

Laboratory Investigation. II、頁 374-383(1996)》記載的方 法’藉由使用硫黃素T (thioflavin T，Fluka公司製造）的螢光 光度測定，進行定性實驗’確認在（丨）得到之凝集化香樹脂醇係 殿粉樣蛋白（測定條件：激發波長446奈米（nm)、螢光波長490 奈米）。 【0233】 (3)將殿粉樣蛋白懸濁液溶解於磷酸緩衝液（酸驗值7. 4)中， 把厥粉樣蛋白懸濁液中的香樹脂醇濃度做成15微莫耳（//M)。又， 將硫黃素T溶解於氫氧化鈉緩衝液（酸鹼值8. 5 )，把硫黃素T濃 度做成50毫莫耳（_)。 【0234】 (4)各評價化合物和澱粉樣蛋白的最後濃度如附表九記載之濃 度，將其溶解於50毫莫耳磷酸緩衝液（酸鹼值7. 4)，作成試樣溶 液。在（3)調製完成的澱粉樣蛋白液和硫黃素τ液各5〇微升、 103 200918103 試樣溶液50微升，充填到有96洞孔的微量板（micr〇plate)的 各個小井（well)(容量約〇.3毫升）中。 【0235】 【附表九】 砰寸就試樣溶液中相關各化合物的最後濃度 實驗 管施何[TTT 1 評價化合物 評價化合物濃度 硫黃素广 濃度 ^粉樣蛋白 M/JIBI/U 111-1 實施例m-2 化合物1 化合物2 各濃度· 0,1.5,15,30 微莫耳/公升 5微莫耳/公升 2.6微莫耳/公升 [0236] ------ (5) 50毫莫耳磷酸緩衝液（酸鹼值7. 4) 1〇〇微升和讥毫莫耳甘 氨酸一氫氧化鈉（glycine_Na0H)緩衝液混合作為空白對照 (blank)，實施與（4)相同作業，應用在阻礙率的計算（以下， 作為BG)。 ^ 【0237] (6) 將已充填試樣溶液的微量板，在室溫靜置3〇小時後，用微 量板讀數器（microplate reader)《型式：SPECTRA ΜΑχ GEMINI 狀；

Molecular Devices公司製造》測定各試樣溶液的螢光強度《測定 條件.激發波長446奈米、螢光波長490奈米》，以下，各評價化 合物濃度為0的試樣，其螢光強度為A ;評價化合物濃度為1. 5 104 200918103 微莫耳/公升以上的試樣，其螢光強度為B。 【0238】 ⑺應用前述（6)所測得的螢絲度，從τ列數學式⑸: 【0239] 【數學5】 阻礙率(%) (5) 【0240】 * 求出阻礙率。 【0241] 各評價化合物的阻礙率顯示於附表十。化合物1和化合物2 共同地，任何一種濃度都阻礙硫黃素T的結合。由此結果，顯示 化合物1和化合物2對硫黃素T的結合有競合性阻礙。硫黃素τ 能夠認得澱粉樣蛋白的乙型片構造而結合，這是一般公認的事 實，因此，化合物1和化合物2，與硫黃素Τ 一樣具有對澱粉樣蛋 白的結合機轉，也就疋§兄，顯不其能夠認传殿粉樣蛋白的乙型片 構造而結合。 105 200918103 【0242] 【附表十】 * 附表十本發魏合物·硫黃素τ騎粉樣蛋白（香樹脂醇）結 合的阻礙率

【0243】 (實施例II1-3)澱粉樣蛋白結合性之測定 【0244】 本發明化合物賴_蛋自親合性，將藉由以下生體外（in vitro)結合試驗加以評價。 【0245 ※方法 (1)應用實施例III-1和實施例ΠΙ_2所記載的方法，調製i亳 克/毫升的凝集化香樹脂醇懸濁液（以下，於本實施例稱為「澱 粉樣蛋白懸濁液」）。 106 200918103 【0246] 從已被報告出來的文獻《Burke, M. J.等人，Biochemistry. 11，頁2435-2439 (1972)》所記載的方法，加上部份改變，藉由 以下（2)和（3)的作業’ §周製出具有交叉乙型片（cr〇ss f-sheet) 構造的胰島素（insulin)。 【0247] (2)胰島素5毫克（Sigma Aldoreach Japan公司製造）溶解於 用鹽酸調整酸鹼值為2的去離子水1毫升中，在加熱丨〇分鐘 後’於乾冰/乙醇中急速冷卻。 【0248】 (3)將（2)的樣本液在9(rc加熱5分鐘後，於乾冰/乙醇中急 速冷卻。相同的作業程序反覆10次以後，樣本液變成凝膠狀，以 目視加以確認。 【0249】 (4)將（3)的樣本液經過離心分離《16〇〇〇公克χ15分鐘》以 後’除去上層澄清液，將沉如丨毫升去離子水溶解，得到凝集 化騰島素懸濁液（以下，於本實驗，稱為「姨島素殿粉樣蛋白懸 107 200918103 濁液」）。 [0250] 從已報告出來的文獻《Ohhashi，Y.等人，j〇urnal 〇f

Biological Chemistry. 2M，頁 32843-32848 (2005)》所記載的 方法，加上部份改變，藉由以下（5)和（6)的作業，調製出具 有交叉乙型片（cross 々-sheet)構造的石2微小球蛋白（/52 microglobulin)。 [0251] (5) 冷2微小球蛋白（0riental公司製造）i毫克/毫升的溶液 中’添加含1〇〇冑莫耳氣化鈉的5〇 ^莫耳甘氨酸—鹽酸緩衡液(酸 驗值2. 5)後’使崎音波溫水槽在坑進行1分鐘的超音波灰 理’接下來不做超音波處理9分鐘，加熱至肌。 [0252] (6) 將（5)的操作接續著反覆17次以後，將此樣本液進行與前 述⑵相同的處理，此樣本液以離心分離《16000公克xi5分鐘》 =後’时上層澄清液，將沉齡解於含⑽㈣耳氣化鈉的5〇 宅莫耳甘赠-動1緩衝液（崎值2. 5) & 5毫升，得到凝 々2 U小球蛋白懸濁液（以下，於本實驗，稱為「胸殿粉樣蛋 108 200918103 白懸濁液」）。 【0253】 藉由實施例III-1和實施例m_2所記載的應用硫黃素τ (Fluka公司製造）作螢光光度測定的定性實驗，確認在⑷和 ⑻得到驗集化胰A素和;_b/32微小球蛋自雜粉樣蛋白。 【0254】 ⑺調製前述實施例卜3的方賴合成的化合物6的水溶液（放 射能濃度500MBq/毫升）’甩含〇. 1%牛血清白蛋白的顧緩衝液 (酸驗值7.4)將其稀釋，調製成2_(4,，基苯基)_6♦米唾並 [1，2 a]嘧啶（2-(4 -hydroxy phenyl)-6-i〇d〇 imidazo [Uajpyrimidine)的總量相當1〇〜1〇1〇微微莫耳（pM)的溶 液。 【0255】 (8) 96孔微量板的各小井，添加前述（7)調製完成的溶液5〇 微升（最後濃度0.2〜20. 2微微莫耳）、香樹酯醇懸濁液或胰島素 沒又粉樣蛋白懸濁液或在2ππ殿粉樣蛋白懸濁液以含〇. 1 %牛血清的酸 緩衝液（酸鹼值7.4)稀釋後的溶液50微升（最後濃度0. 8微克 /毫升）以厚，再加入相同緩衝液15〇微升。 109 200918103 [0 2 5 6] (9)在22°C將該微量板以固定速度（400轉/分鐘）震盪3小時 以後，各小井的混合液，藉由以玻璃纖維過濾器（glass fiber filter)《Milip〇a公司製造，型號MuitiscreenTM-FC》過渡，將 結合了殿粉樣蛋白的化合物6和游離的化合物6分離。 [0 2 5 7] (10)過濾了混合液的玻璃纖維過濾器，用含〇1%牛血清白蛋白 的構酸緩衝液洗淨（0.2毫升X5次）後，用自動小井·伽碼*** (autoweU . r system)《型式：ARC-301B ’ Aloka 公司製造》剛 定玻璃纖維過濾器之放射能量。 [0258] (11)彳文（10)的測定結果，評價化合物6的澱粉樣蛋白結合量 與已添加的澱粉樣蛋白量之間的關係。非特異性結合，係從前述 (8)的未添加澱粉樣蛋白懸濁液的樣本求出來（實施例卜幻。 [0 2 5 9] 試樣溶液中的化合物㈣濃度，與前述⑴）所測得的義 纖維過濾、器上之放射能讀數⑽）之間的關係，顯示於圖十六。 110 200918103 添加殿粉樣蛋_濁液之群纟i (針六，香_較粉樣蛋白添 加群組、胰島素殿粉樣蛋白添加群組、和点^殿粉樣蛋白添加群 組）、與未添加殿粉樣蛋㈣濁液之群組（圖十六，殿粉樣蛋白未 添加群組）做比較’其放射能全部都是高的；又，依照化合物1 的添加濃度為_ ’ 贿H上之放雜也增加。於本實 驗相關之各條件’任何—者峡粉樣蛋自（以及化合物6結合的 灰粉樣蛋自）也比麵纖維過濾⑽祕（卿e _)為大。因 此’殿粉樣蛋白被保留在賴纖維上，玻賴維之放射能讀數就 =反應結合麵祕蛋㈣化合物6量。玻频維之放射能 。貝數Ik著化合物6濃度增加而增加’並且，與_樣蛋白未添 群、、比較因為其放射能較高，顯示化合物6係具有與殿粉樣 蛋白特異性結合性質的化合物。 【0260】 (實知例IV)各臟器的放射能分布率之測定 【0 2 6 1】 . 為了確5忍本發明相關之化合物具有能夠分布S目標臟器、以 及良好的排出體外廓清力，使用化合物6，測定s請大鼠(細呢此

Dawley Rat，大白鼠）《8週大》的各臟器之放射能集積之經時間 變化。 111 200918103 [0262] 6-三丁基甲錫烧基-2-(4’ -經基苯基)咪唾並[1，2-a]°比咬 (tributyl stannyl -2-(4* - hydroxyl phenyl) imidazo [l，2a]pyridine)的乙腈溶液《濃度：1毫克/毫升》4〇0微升中， 加入加入1莫耳/升的硫酸400微升、1毫莫耳/毫升的蛾化納 10微升、1074MBq的[1231]硬化納270微升、30%(W/V)過氧化氫1〇 微升。將該混合液在40°C靜覃10分鐘後，用附有下列條件的高效 能液相層析法（High performance liquid chromatography ; HPLC)’將[1231]-2-(4’ -經基苯基)-6-埃味》坐並[l，2-a] n比。定 ([1231]-2-(4’ -hydroxy phenyl) -6-iodo imidazo[l，2-a] pyridine)的析離部份（fractionation)分離取得。 [0 2 6 3] HPLC之條件： 管检:YMC—Pack Pro C8(商品名，YMC公司製造，規格:4. 6x150 毫米） 移動相：10毫莫耳曱酸緩衝液（酸鹼值3.0) /乙腈= 80/20 480/20-^10/90 (0 分鐘—20 分鐘->30 分鐘） 流速：1. 0毫升/分鐘 檢測器：紫外線可見光吸光光度計（檢測波長：282nm)及放 112 200918103 射線檢測器（型式：STEFFI型，raytest公司製造） [0264] 於該析離部份加入水10毫升，放入Sep_Pakcl8管柱（商品 名.Sep-Pak〔商標登錄〕Light Cl8 Cartridges，Waters 公司 製造，充填劑之充填量：13〇亳克）作為沖提液，將[⑵丨]_2一(4， -羥基苯基)-6-碘咪唑並[i，2-a]吡啶吸附捕集於該管柱。用丄毫 升水洗淨該管柱後，以1毫异二乙基醚作為沖提液，將pq] -2-(4 -經基苯基)-6-峨味α坐並[丨，2_a] π比唆（化合物6)溶出。 所得到之放射能量在剛合成時係47〇MBq ;又，進行下列條件的薄 層色層分析法（TLC) ’其放射化學的純度係98%。 [0 2 6 5] 薄層層析法（TLC)分析條件： TLC層析板：Silics Gel 60 F254 (商品名，Meruku公司製造） 展開相：醋酸乙酯/甲醇·/二乙胺=1〇〇/4/1 檢測器.Rita Star (商品名，raytest公司製造） 【0 2 6 6】 化合物6的二乙基醚溶液，用含有10毫克/毫升抗壞血酸的 生理食鹽水稀釋，將放射能濃度調整至8〜12MBq/毫升。調製完 113 200918103 成的試樣溶液各0· 2毫升，無麻醉下從尾靜脈注射到前述大白鼠 體内，技與後5分鐘、30分鐘、6〇分鐘、18〇分鐘之時點，從腹 部大動脈抽血後，依照附表十一記載的各臟器，摘取出來。摘取 的臟器質量和放射能，依照與實施例IM相同的方法計測之。此 外，摘取臟器後的各大白鼠的全身（以下，稱為「殘餘全身」）放 射能也要計測之。應用這些計測結果，從下述數學式（6)，算出 各時間點的各臟器單位質量所相當的放射能分布率（。/。①/忌）。 又，本實驗，於各時間點，係使用3隻動物。 【0267] 【數學6】 ¥in/ 目標臟器的放射能(cpm) λΙ ί)/8·* _** — (全部瞬納放射能總和+殘餘全身的奋射能fcpm)) χ ,兩隨的χ 100 ... (θ) [0268] 結果顯示於附表十-。如附表十一所示，化合物6，在投與後 5分鐘分布於各臟器後，其放射能之大部分係分布在小腸和大腸。 此外，其放射能分布率係從小腸向大腸滲移。由此來看，化合物6， 投與後很快地獅汁酿，顯示具有良好的向體外的廊清力。 還有，澱粉樣蛋白蓄積現象，觀察看看腦、心臟、肺、胰臟、 骨頭等’各組織共同地在投與後5分鐘明確看到放射能集積，確 114 200918103 認化合物6已分佈。又，投與後5分鐘和投與後⑽分鐘做比較 《(投與後5分鐘彻/g) /(投與後⑽分鐘彻々)》，分 別顯示：腦122、心臟13、肺7、胰臟14、骨頭4等很高的數值。 由此來看’在婦樣蛋白蓄積的組織中，顯示快速的放射能分布 以及快速的廓清力。 從以上所述’生體組織巾作為澱粉樣蛋自檢測試藥，必須呈 現投與後能夠早期地放射能备布、以及達成快速地體外廓清力。 【0 2 6 9】 【附表Η】 附表十一 組織/ 投與後5分鐘 投與後30分鐘 投與後 »分鐘 投與後180分鐘 臟器 平均値 標準誤差 平均値 標準誤差 平均値 標準誤差 平均値 標準誤差 血液 0.285 0.021 0.174 0.026 0.122 0.012 0.109 0.013 腦 0.721 0.072 0.124 0.010 0.030 0.002 0.006 0.001 心臟 0.619 0.054 0.147 0.021 0.063 0.004 0.047 0.004 肺 0.657 0.037 0.209 ，0.025 0.120 ^ 0.009 0.089 0.007 肝臟 2.008 0.235 0.509 0.096 0.181 0.010 0.083 ο.όοΓΐ 脾臟 0.462 0.024 0.140 0.028 0.075 0.003 0.072 0.016 胰臟~^ 0.846 0.119 0.207 0.028 0.084 0.004 0.060 1 0.002 胃 0.360 0.079 1.025 0.164 1.043 0.227 1.081 0.373 小腸 1.078 0.337 6.335 0.349 8.207 0.455 1.408 0.107 大腸 0.116 0.014 0.070 0.010 0.066 0.005 7.296 0.454 腎臟 0.999 0.133 0.540 0.108 0.244 Γο.οιο 0.108 0.011 腎上腺 4.648 1.354 0.642 0.226 0.260 0.064 0.020 0.035 骨骼 0.222 0.017 0.088 0.015 0.058 0.002 0.053 0.010 骨髓 0.713 0.178 0.194 0.043 0.000 0.000 0.030 0.053 肌肉 0.381 0.050 0.078 0.016 0.034 0.002 0.022 0.001 115 200918103 【產業方面的可能應用】 【0270】 本發明相關的生體組織中的澱粉樣蛋白檢測試藥，在以全身 性幾粉樣變性病為首的澱粉樣變性病中，可以應用作為澱粉樣蛋 白的蛋白質之生體外（invitro)及生體内（invivo)的診斷劑。 【圖式簡單說明】 【0271】 【圖一】6-三丁基曱錫烷基-2-(4’ -羥基苯基)咪唑並[l，2-a]吡 (6-tributyl stannyl-2-(4, -hydroxy phenyl) imidazo [l，2-a] pyridine)的合成過程圖式。 【圖二】6-溴-2-(4，-羥基苯基)咪唑並[1,2-a]吡啶 (6-brom〇-2-(4，-hydroxy phenyl) imidazo [1, 2-a] pyridine)的合成過程圖式。 【圖二】2-(4 _經基苯基)_6_峨0米〇坐並[l，2_a]B比〇定 (2-(4, -hydroxy phenyl)-6-iodo imidazo [1,2-a] pyridine)的合成過程圖式。 【圖四】2-(4’ -羥基苯基)-6-碘咪唑並[1,2-a]嘧啶 116 200918103 (2-(^ -hydroxy phenyl)-6-iodo imidazo [1,2-a] pyrimidine)的合成過程圖式。 【圖五】6-(3’ -氟丙氧基)-2-(4’ -羥基苯基)咪唑並[l，2-a]吡 (Θ-Ο* -fluoro propoxy)-2-(45 -hydroxy phenyl) imidazo [l，2-a] pyridine)的合成過程圖式。 【圖六】6-溴-2-(4’ -羥基苯基)咪唑並[l，2-a]嘧啶 (6-bromo-2-(4, -hydroxy phenyl) imidazo [1,2-a] pyrimidine)的合成過程圖式。 【圖七】6-氟-2-(4’ -經基苯基)咪唾並[l，2-a] 比鳴（6-fluoro -2-(4, -hydroxy phenyl) imidazo [1,2-a] pyridine) 的合成過程圖式。 【圖八】2-(4’ -羥基苯基)-6-硝基咪唑並[l，2-a]吡啶 (2-(4 -hydroxy phenyl)-6-nitro imidazo [1,2-a] pyridine)的合成過程圖式。 【圖九】化合物6投與後的腦切片：（a)自動射線攝影、及⑻ 硫黃素T染色試樣的螢光顯微鏡影像（澱粉樣蛋白懸濁 117 2〇〇9l8l〇3 液之投與部位放大圖示）。 【圖十】6—三丁基曱錫烷基-2-(4’ -羥基苯基)咪唑並[l，2-a]嘧 唆（6-tributyl stannyl-2-(4’ -hydroxy phenyl) imidazo [l，2-a] pyrimidine)的合成過程圖式。 【圖十一】6-三丁基曱錫烷基-2-(4，-羥基苯基)咪唑並[l，2-a] ^比嗪（6-tributyl stanny卜2-(4’ -hydroxy phenyl) imidazo [l，2-a] pyrazine)的合成過程圖式。 【圖十二】2-(4’ -羥基苯基)-6-蛾咪唑並[l，2-a]吡嗪（2-(4’ -hydroxy phenyl)-6-iodo imidazo [1,2-a] pyrazine)的合成過程圖式。 【圖十二】8-二丁基甲錫烧基_2-(4’ -經基苯基)n米唾並[1，2一a] 口比咬（8-tributyl stannyl-2-(4，-hydroxy phenyl) imidazo [l，2-a] pyridine)的合成過程圖式。 【圖十四】化合物10投與後的腦切片：（a)自動射線攝影、及（b) 硫黃素T染色試樣的螢光顯微鏡影像（澱粉樣蛋白懸 濁液之投與部位袜大圖示）。 118 200918103 【圖十五】化合物11投與後的腦切片：（a)自動射線攝影、及（b) 硫黃素T染色試樣的螢光顯微鏡影像（澱粉樣蛋白懸 濁液之投與部位放大圖示）。 【圖十六】化合物6的殿粉樣蛋白結合能力顯示圖。 119

Claims (1)

1. 200918103 十、申請專利範圍·· 其係含有下 1、一種檢測沈積生體組織澱粉樣蛋白的檢測試藥， J化予式（1)所表示之化合物或其鹽類： ί化1】

   [化2】 * t * m R1— ίί2 -c- • ·« m o- ·. * R1係放射性鹵素取代基； m係0〜4的整數； η係0或1的整數； 此處，A1、Α2、Α3、和Α4之中，至少有—者係放射性南素取 代基； · R係結合在A1、A2、Α3、或Α4的碳〕。 120 200918103 2、 如申請專利範圍第1項所述之檢測試藥，其申A〗、a2、a3 和A4之中，至少有三者录碳。 3、 如申請專利範圍第2項所述之檢測試藥，Αι、Α2、Α3、_σΑ4 全部都是碳。 4、如申請專利範圍第】項〜第3項之任_項所述之檢測試藥， 其中R1係由氟18⑺、溴75 (1)、漠761123 (1231)、破 124 (1241)、硬 125 (，）或碟 131 (1311)所 群類選出。 、如申請專職圍第1項〜第4項之任-項所述之檢測試藥， 其中生體組織係腦、心臟、肺、胰臟、骨絡或關節。- 、-種放雜#素標村機化合物的製造方法，其係包括： 調製作業：·含有刊化學式⑵所絲的化合物或其魄 類此化合物·_及放祕峰軒敝應溶液：^ 【化3】 121 200918103

   〔化學式中，1 r4 ，A 、A2、A3和A4係個別獨立的碳或氮； 糸下列化學式所表示之化學基， 【化4】 R2- h2 ，«Μ 《 im L m係〇〜4的整數； η係〇或1的整數；. R2，當m=n=〇時’ R2係非放射性鹵素取代基、硝基（nitr〇) 取代基石反數3〜12的二烧基銨（trialkyl ammonium)取 代基、碳數3〜12的三烷基甲錫烷基（trialkyl stannyl) 取代基或二苯基甲錫烧基（triphenyl stannyl)取代基； 當m妾0及/或11关〇時，R2係非放射性齒素取代基、甲烷磺 酸（methane sulfonic acid)取代基、三氟甲烧石黃酸 (trifluoromethane sulfonic acid)取代基、或芳香族石& 酸取代基所成群類之化學基；此處，A1、A2、A3、和A4之中 至少有一者係放射性鹵素取代基；R4係結合在A1、Α2 或A4的碳〕 122 200918103 及； 5成作業·藉由將反應條件給予前述反應溶液，合成下列 ψ 化予式（1)所表示的化合物或其鹽類， 【化5】

   〔化予式中，A1、Α2、Α3和Α4係與化學式（2)相同； R3係下列化學式所表示之化學基， 【化6】 R1--C---Ο-- ，in , , U R係放射性齒素取代基； m和η係與化學式（2)相同； 此處，A、Α2、α3、和Α4之中，至少有一者係放射性鹵素取 代基； R係結合在A1、a2、Α3、或Α4的碳〕 包含以上二者為其特徵的放射性鹵素標示有機化合物的製造 方法。 123 200918103 7、 如申請專利範圍第6項所述之放射性_素標示有機化合物的 製造方法，其中A1、A2、A3、和A4之中，至少有三者是碳。 8、 如申請專利範圍第7項所述之放射性_素標示有機化合物的 製造方法，其中A1、A2、A3、和A4全部都是碳。 9、 如申請專利範圍第6項〜第8項所述之放射性函素標示有機 化合物的製造方法，其中R2係選自碘元素、溴元素、碳數3 〜12的三烷基錢（trial’kyl ammonium)取代基或三苯基曱錫 院基（triphenyl stannyl)取代基所形成群類；放射性鹵素 離子，係選自碘123 (1231 )離子、碘124 (1241 )離子、碘125 (1251)離子及碘131 (131〇離子所形成群類；R2係選自碘123 (1231)、碘 124 (1241 )、硤 125 (1251 )及碘 131 (13|1)所形成 群類。 10、如申請專利範圍第9項所述之放射性鹵素標示有機化合物 的製造方法’其中R2係選自碘元素、三甲基曱錫烷基 (trimethyl stannyl)取代基、三丁基甲錫烷基（tributyl stannyl)取代基、和三苯基曱錫烧基（triphenyi stannyl) 取代基所成群類之化學基。 ί s] 124 200918103 11、 如申請專利範圍第6項〜第8項所述之放射性鹵素標示有 機化合物的製造方法’其中R係選自確基（nitro)、碳數3 〜12的三烷基銨（trialkyl ammonium)取代基、曱烧續酸 (methane sulfonic acid)取代基、三氟甲烧續酸 (trifluoromethane sulfonic acid)取代基、及芳香族續 酸取代基所成群類之化學基；放射性_素離子，係氟18 (卞） 離子；R1係氟18。 * 12、 如申請專利範圍第11項所述之放射性鹵素標示有機化合 物的製造方法，其巾R2係三氟曱獅酸(trif luQranethane sulfonic acid)取代基或甲苯磺酸（toluene sulf〇nic acid)取代基。 1 3、如中請專利顧第6項〜第8項所述之放射_素標示有 機化合物的製造方法，其中元素；放射㈣素離子， 係溴75(75Br)離子、或溴76(76Br)離子；Rl係溴75(75Br)、 或溴 76 (76Br)。 ’ 14、-種放射性i素標示有機化合物調製用的前驅物化合物或 其鹽類，其係如下列化學式⑵所表示之玫射性齒素標示 125 200918103 有機化合物調製用的前驅物化合物或其鹽類： 【化7】

   (2) 〔化學式中’ A1、A2、A3和A4係個別獨立的破或氮； R係下列化學式所表示之化學基； 【化8】

   m係0〜4的整數； η係0或1的整數； R2 ’當m=η=0時，R2係非放射性鹵素取代基、硝基（nitro) 取代基、碳數3〜12的三烧基錢（trialkyl ammonium)取 代基、碳數3〜12的三烧基甲鍚烧基（trialkyl stannyl) 取代基或三苯基甲錫烧基（triphenyl stannyl)取代基； 當πιτ^Ο及/或n#0時，R2係非放射性鹵素取代基、甲院 續酸（methane sulfonic acid)取代基、三氟甲貌碍酸 (trifluoromethane sulfonic acid)取代基、或芳香族 126 200918103 磺酸取代基； 此處，A1、A2、A3、和A4之中，至少有一者係碳；r4係結 合在A1、A2、A3、或A4的碳〕。 1 5、如巾請專利範圍第i 4項所述之放射性岐標示有機化合 物調製用的前驅物化合物或其鹽類，其中A,、A2、A3、和 A4至少有三個是碳。 1 6、如申請專利範圍第丄“所述之放射性鹵素標示有機化合 物調製用的前驅物化合物或其鹽類，其中Al、A3、和 A全部都是碳。 17、如申請專利範圍第i 4項〜第丄6項之任一項所述之放射 性鹵素標示有機化合物調製用的前驅物化合物或其鹽類’ 其中R2係選自硬元素、溴元素、三曱基曱錫烷基（trimethyl Stannyl)取代基、三丁基甲錫烧基（tributyl stannyl) 取代基及二本基甲錫玫基（triphenyl starmyl)取代基所 成群類的化學基。 127