TR201922907A2 - Osteoartri̇t tedavi̇si̇ i̇çi̇n yeni̇ bi̇r vi̇skoelasti̇k formülasyonu ve bunun üreti̇m yöntemi̇ - Google Patents

Abstract

Bu buluş, osteoartrit tedavisi için geliştirilen yeni bir viskoelastik formülasyonu ve bunun üretim yöntemi ile ilgilidir. Buluşun amacı, Osteoartrit (OA)?ten kaynaklanan ağrıyı hafifletme, etkinliği azalan sinoviyal sıvıya destek sağlama ve osteokondral lezyonları tedavi etme amacıyla eklem içi uygulamalarda kullanılmak üzere çapraz bağlı hiyaluronik asit, kondroitin sülfat ve çapraz bağlı olmayan hiyaluronik asit (Lineer HA) içeren yeni bir viskoelastik jel geliştirilmesidir.

Description

TARIFNAME OSTEOARTRIT TEDAVISI IÇIN YENI BIR VISKOELASTIK FORMÜLASYONU VE BUNUN ÜRETIM YÖNTEMI Teknik Alan Bu bulus, osteoartrit (OA)"ten kaynaklanan agriyi hafifletme, etkinligi azalan sinoviyal siviya destek saglama ve osteokondral lezyonlari tedavi etme amaciyla gelistirilen yeni bir viskoelastik formülasyonu ve bunun üretim yöntemi ile ilgilidir. Önceki Teknik Osteoartrit (0A), dünya çapinda milyonlarca insani etkileyen en yaygin, kronik (uzun süreli) eklem hastaligidir. 0A ayrica dejeneratif eklem hastaligi, dejeneratif artrit, asinmis ve yipranmis artrit olarak da adlandirilmaktadir. Eklem iki kemigin bir araya geldigi yerdir ve bu kemiklerin uçlari kikirdak adi verilen koruyucu doku ile kaplidir. Kikirdak, eklem hareketinin neredeyse sürtünmesiz bir sekilde gerçeklesmesini saglayan dayanikli ve kaygan bir dokudur. Kemik uçlari ve kikirdak arasinda kayganligi saglayan sinoviyal sivi Vücutta dogal olarak bulunan Hiyalüronik Asit (HA)"ten olusmaktadir. Bu sinoviyal sivinin viskozitesi, yaglama ve sok emici özellikleri mekanik etkilerden dolayi zamanla azalir ve kikirdaklar birbirine sürtünmeye, yok olmaya baslar. Kikirdagin zamanla asinip yok olmasiyla kemikler arasinda sürtünme artar ve 0A ilerler. 0A, kikirdak parçalanmasinin yani sira, eklemin tamamini etkiler. Kemik yapisinda degisikliklere ve eklemi bir arada tutans kaslari kemige baglayan bag dokularinin bozulmasina, ayni zamanda eklem kapsülünün iltihaplanmasina neden olur. görülebilir. OA belirtileri zamanla gelisir ve ilerledikçe kötülesir. Agri, sertlik, hassasiyet, esneklik kaybi, eklem sesleri, kemik çikintilari (0ste0fit) olusumu ve sisme OA"nin belirtileri arasinda gösterilebilir. 29280.13 Eklemlerdeki hasar geri alinamamasina ragmen, spor yapmak, saglikli kiloda olmak ve uygulanan bazi tedaviler hastaligin ilerlemesini yavaslatabilir, agri ve eklem fonksiyonlarinin iyilestirilinesine yardimci olabilir. Basta agri olmak üzere OA semptomlarini hafifletmeye yardimci olabilecek yöntemlerden biri ilaç kullanimidir. Asagida yaygin olarak kullanilan ilaçlar ve etkileri gösterilmektedir: Asetaminofen: Asetaminofen'in (Tylenol, digerleri), hafif ila orta siddette agri çeken bazi 0steoartrit hastalarina yardim ettigi bilinmektedir. Önerilen dozdan daha fazla asetaminofen alinmasi karaciger hasarina neden olabilir. Steroîd olmayan antienflamatuar ilaçlar (NSAID'Ier): Advil (ibuproferi) ve Aleve (naproksen) gibi NSAID'ler agrinin yani sira sisligi de azaltir. Duloxetine (Cymbalta): Normalde bir antidepresan olarak kullanilan bu ilacin ayrica 0steoartrit agrisi dahil olmak üzere kronik agriyi tedavi etmek için de kullanilir. Fizik tedavi de OA semptomlarini hafifletmek için kullanilabilir. Bunlarin yani sira cerrahi ve diger islemler de sunlardir: Kortizon enjeksiyonlar: Kortikosteroid ilaç enjeksiyonlari eklemdeki agriyi hafifletebilir. Bu islem sirasinda doktor eklemin etrafindaki alani kontrol eder, ardindan eklemdeki bosluga bir igne yerlestirir ve ilaci enjekte eder. Her yil alinabilecek kortizon enjeksiyonlarinin sayisi genel olarak üç veya dört enjeksiyonla sinirlidir, çünkü ilaç zaman içinde eklem hasarini kötülestirir. Viskoelastik enjeksiyonlar: HA enjeksiyonlari, dizde bir miktar tamponlama saglayarak agri rahatligi saglayabilir. Hyaluronik asit normalde eklem sivisinda dogal olarak bulunan bir bilesendir. Kemikleri yeniden hizalamak: Diz osteotomisinde, bir cerrah kemigi dizin üstünde veya altina keser ve ardindan bir kama kemigini çikarir veya ekler. Bu, vücut agirligini dizin yipranmis kismindan uzaklastirir. 29280.13 o Eklem degistirme: Eklem degistirme cerrahisinde (artroplasti), cerrah hasarli eklem yüzeylerinizi söküp yerine plastik ve metal parçalarla degistirir. Cerrahi riskler enfeksiyonlari ve kan pihtilarini içerir. Yapay eklemler asinabilir veya gevseyebilir ve sonunda degistirilmesi gerekebilir. Bu tedaviler arasinda günümüzde en çok tercih edilen yöntem ise problemli bölgeye viskoelastik enjeksiyonlarin yapilmasidir. Bu enjeksiyonlardan en çok tercih edileni ise HA enjeksiyonlaridir. HA, eklemleri çevreleyen sinoviyal sivida dogal olarak bulunan jel benzeri bir maddedir. Bu madde yaglama ve tamponlama saglar, amortisör görevi görür ve kemiklerin birbirini asindirmasi yerine yumusak hareket etmelerine yardimci olur. Eklem içi kayganlastirici HA enjeksiyonlari agriyi hafifletmek ve patolojik durumlarda eklem içi yaralarin iyilesmesini saglamak için sinoviyal siviya destek saglamak amaciyla kullanilir. Ayni zamanda osteoartritik eklemin fizyolojik çevresini gelistirerek viskoelastisitesini yeniden kazanmasini saglar, sürtünmeyi azaltir ve hareket kabiliyetini arttirirlar. OA"li kisilerin eklem sivisinda düsük miktarda HA bulunur. OA'li dizde HA konsantrasyonu yaklasik olarak normal seviyenin yarisina düser. HAanin viskoz ve elastik özelliklerindeki degisiklikler eklemin gerilme ve kayma kuvvetlerine karsi dayanma kabiliyetini azaltir. HA enjeksiyonlari sinoviyal sividaki normal seviyelerin geri kazanilmasina yardimci olabilir. Bu enjeksiyonlar sadece eklemi yaglamakla kalmaz, iltihaplanmayi da azaltabilir ve kikirdaklari daha fazla asinma ve yipranmaya karsi koruyabilir. Enjeksiyonlar doktor veya saglik uzmani tarafindan haftalik periyotlarla yapilir. Yapilacak enjeksiyon sayisi HA konsantrasyonuna bagli olarak degisiklik gösterebilir. Enjeksiyon yapmadan önce, doktor sismeyi azaltmak için diz ekleminden sivinin bir kismini bir igneyle alarak aspirasyon yapabilir. Çapraz bagli olmayan hiyaluronik asit (Lineer HA) etki süresinin kisa olmasi ve hacim olusturma konusunda yetersizligi nedeniyle bazi dezavantajlara sahiptir. HA 29280.13 viskoelastik özelliklerinin gelistirilmesi ve kalicilik özelliginin artmasi amaciyla ethyldimethylaminopropyl carbodiimide (EDC), bütandiol diglisidileter (BDDE) veya divinil sülfon (DVS) gibi çapraz baglayicilarla çapraz baglama islemlerine maruz birakilmaktadir. Çapraz baglanma reaksiyonu birkaç reaktif kullanilarak gerçeklestirilen molekül içi ve moleküller arasi bir esterlesme reaksiyonudur. Bu teknik kullanilarak HA formülasyonunun eklemde kalma süresinin arttirilabilecegi öngörülinüstür. Çapraz baglanma derecesinin arttirilmasiyla HA,nin fiziksel, kimyasal ve biyolojik özellikleri belirgin bir sekilde degismektedir. Çapraz baglanmis HA'nin jel süspansiyonu, çapraz baglanmamis HA'dan farkli reolojik özelliklere sahiptir. Seyreltik çözeltide, çapraz baglanmis HA'nin düsük frekansindaki modül, çapraz baglanmamis HA'dan daha yüksektir ve bu çapraz baglanmis malzemeler için bir ag yapisinin olustugunun göstergesidir. Daha yüksek konsantrasyonlarda, dolasik ag olustugunda sabit kesme viskozitesi ya da elastik modül çapraz baglanmamis HA"dan daha yüksek degildir. Lineer yapida olan HA Viskoelastik maddenin eklemin mekanik etkisine karsi vücutta kalma süresi çapraz bagli olan HA7dan daha kisadir. Çapraz bagli HA7nin mekanik dayanimi lineer yapida olan zincirlerden daha fazladir. Tedaviyi uygulayan uzman çapraz bagli olmayan HA (Lineer HA) enjeksiyonunu haftalik araliklarla yaparken, çapraz bagli HA içeren Viskoelastiklerde bu süre daha uzundur. Bu sebeple genellikle uzman doktor Vücutta kalma süresi daha uzun olan ve mekanik dayanimi daha yüksek olan çapraz bag da içeren enjeksiyonlari tercih etmektedir, Çapraz bag içeren Viskoelastik tek enjeksiyon yapilsa bile etkili sonuçlar ortaya koydugu görülmüstür. Teknigin bilinen durumunda, sodyum hiyaluronatin eklem bölgesine uygulandigi durumlarda sinoviyal sivinin reolojisini degistirir, hareket kabiliyetinde hizlica bir rahatlama saglar ve agriyi azaltir. Fakat geleneksel olarak kullanilan çapraz bagli olmayan HA"nin (Lineer HA) etkisi geçicidir. Çünkü HA, einilineden veya metabolize olmadan önce, eklem içerisinde ancak 72 saate kadar kalabilmektedir. 29280.13 Bu durum hastanin konfor süresini yeteri kadar uzatmamakla birlikte esas problem düzelmediginden hasarli eklem kikirdagi iyilestirilemez. Teknikte bilinen uygulamalardan USS323617B2 sayili Birlesik Devletler patent basvurusu dokümaninda, HA, carbodiimide türevi çapraz baglayicilar ile çapraz bagli HA formülasyonlari OAlnin tedavisinde kullanilmaktadir. Teknikte bilinen uygulamalardan EPl44394SBl sayili Avrupa patent basvurusu dokümaninda, insan eklemlerinin derece I ve derece 11 osteoartrit tarafindan zarar görmüs eklem kikirdaginin yaglanmasi ve yenilenmesinde sodyum hiyalüronat ve kondroitin sülfat karisiminin sinerjik etkisinden bahsedilmektedir. Bu patent basvurusunda, lineer HA ile kondroitin sülfat kombinasyonu osteoartrit tedavisinde kullanilmistir. Teknikte bilinen uygulamalardan U86051560 sayili Birlesik Devletler patent basvurusu dokümaninda, göz içi lens implantasyonlarinda kullanilan viskoelastik enjeksiyonlar kondroitin sülfat / sodyum hiyalüronat bilesimleri tampon çözelti ortaminda hazirlanmistir ve bu yapilar arasinda olusan güçlü etkilesimlerin arttirilmis çözelti stabilitesi ve gelistirilmis fiziksel özellikler sergiledigi bulunmustur. Teknikte bilinen uygulamalardan biri olan Falcone, S. J. Ve arkadaslarina ait bir makalede ise, hyalüronik asidin biyomedikal uygulamalardaki kullanimi, fiziksel özellikleri, reolojik özellikleri ve çapraz bagli HAinin lineer HA"dan farklarindan söz edilmektedir. [Falcone, S. J., Palmeri, D., & Berg, R. A. (2006). Biomedical Applications of Hyalumnic Acid. Polysacchari'des for Drug Delivery ami 29280.13 Bulusun Kisa Açiklamasi Bulusun amaci Osteoartrit (OA)"ten kaynaklanan agriyi hafifletme, etkinligi azalan sinoviyal siviya destek saglama ve osteokondral lezyonlari tedavi etme amaciyla eklem içi uygulamalarda kullanilmak üzere yeni bir viskoelastik jel gelistirilmesidir. Bulusun diger amaci, kikirdagin rejenerasyonu için uygun bir madde olan kondroitin sülfat, sodyum hiyaluronat ile karistirilarak sinerjik bir etki olusturmasidir. Bulusun diger amaci, yapisinda yogun bir sekilde bulunan sülfat gruplarinin sagladigi negatif yükünden dolayi kondroitin sülfat, pozitif yüke sahip dokuya iyi bir sekilde yapismasi sayesinde dokuda kalma süresinin arttirilmasidir. Bulusun bir diger amaci, karisimda bulunan çapraz bagli HA sayesinde jelin mekanik dayaniminin ve vücutta kalma süresinin arttirilmasidir. Bulusun Ayrintili Açiklamasi Bulus konusu viskoelastik jel, Osteoartrit (OAYten kaynaklanan osteokondral lezyonlarin tedavisi amaciyla eklem içi uygulamalarda kullanilmak üzere gelistirilmis olup, üç aktif bilesenden olusan yeni bir viskoelastik jel formülasyonu içermektedir. Bu bilesenler sunlardir: i. Çapraz bagli hiyaluronik asit ii. Kondroitin sülfat iii. Çapraz bagli olmayan hiyaluronik asit (Lineer HA) Bulus konusu viskoelastik jel formülasyonunda bulunan bilesenler Tablo lldeki oranlar çevresinde hazirlanmakta olup, formülasyonda bulunan ve yukarida da açiklanan aktif maddelerin derisimleri (tercihen) su araliktadir: 29280.13 - Kondroitin sülfat - Çapraz bagli olmayan HA : 6-20 mg/ml Tablo 1. Sadece Çapraz bagli HA reaksiyonu/sentezi için gerekli olan bilesenlerin agirlikça % birlesim oranlaridir. Etken ve Yardimci Birim Formülü Maddeler (% Agirlikça) Hiyalüronik Asit Bütandiol Diglisidileter % 0, Deiyonize su % 80-95 Bulus kapsaminda gerçeklestirilen Viskoelastik jelin üretim yöntemi; Deiyonize su içerisinde %1 °lik NaOH çözeltisinin hazirlanmasi, Bu çözeltinin üzerine yavas yavas Hiyalüronik Asit (HA) eklenerek çözülmesia Bütandiol Diglisidileter (BDDEYin, HA karisimina eklenerek homojen bir sekilde karistirilmasi, Karisimin 40 °C"de 1 saat boyunca su banyosu içerisinde çapraz baglanma reaksiyonuna birakilmasi, Reaksiyon sonrasi jel oda sicakligina kadar gelene kadar sogutulmasi, Fosfat tampon çözeltisi (PBS) içerisinde, sogutulan jel karisiminin, pH: 6,8- 7,4 olana kadar 0.1 M hidroklorik asit (HCl) ile nötralize edilmesi (Bu isleme pH sabit olana kadar devam edilir) 29280.13 - 6 saat sonra karisimin elek yardimiyla süzülmesi ve yeni PBS çözeltisi ilave edilerek j elin 10 saat boyunca daha sismeye birakilmasi, - Sisen jelin ardi ardina yeni PBS çözeltisiyle ile 8-10 defa daha tekrar yikanmasi ve süzülmesi, (Bu islem reaksiyon sirasinda meydana gelen saßizliklar ve çapraz baglayici ajan olan BDDE 'nin mümkün oldugunca giderilmesi için 8-10 defa iekrarlanmistir. BDDE miktari son nihai iirilnde 2 ppm 'den düsük olmasi gerekmektedir (FDA 'nin belirlemis oldugu bir deger). Yani saflasiirma isleminin mümkün oldugunca en iyi .bir sekilde yapilabilmesi için defalarca yikama islemi gerçeklestirilmislir.) - Sonrasinda elde edilen jelin 50-300 mikronluk parçacik boyutlarina getirilmesi, - Kondroitin sülfat (CS) ve Çapraz bagli olmayan HA"nin (Lineer HA) ekstrüzyonu kolaylastirilmasi için çapraz bagli HA jele eklenmesi, (Ba katilma islemi rotasyonel karistirici ile 12 rpm 'de 24 saat boyunca gerçekl es ti ri l m ekledi r. ) - Nihai karisimin pH'sinin 7°ye ayarlanmasi ve vakum uygulanarak siringalara dolumunun yapilmasi, - Dolum islemi sonrasinda siringalara buhar sterilizasyonu isleminin uygulanmasi adimlarindan olusmaktadir. Bulus konusu viskoelastik jel, özel olarak bulus I. ve II. derece osteoartritten muzdarip insan eklemlerine (uygulama bölgesi diz, omuz, sakroiliak, kalça, ayak bilegi, dirsek, interfalanksiyal ve bilek eklemleri dahil olmak üzere) eklemin yaglanmasi ve kikirdagin kendini yenilemesi için kullanilabilmektedir. Bulus kapsaminda kikirdagin rejenerasyonu için uygun bir madde olan kondroitin sülfat, sodyum hyaluronat ile karistirilarak sinerjik bir etki olusturmasi amaçlanmaktadir. Bu etki disinda ayni zamanda karisimda bulunan çapraz bagli HA, jelin mekanik dayanimini ve vücutta kalma süresini arttirmasini saglamaktadir. Bulus konusu viskoelastik jel ile saglanan tedavinin kayda deger etkinligi, 29280.13 viskoelastik tedavinin bilinen faydalari ile sinerjistik olarak birlestirilmis kondrojenez tesviki ile iliskilendirilebilir. Kondroitin sülfat ve sodyum hiyalüronat matriksinin implante edilmesi, dogal olarak ortaya çikan kondrositlerin sürekliligini artirabilir ve tahrip edilen kikirdagm orijinal halini yeniden olusturarak kendini yenilemesi saglanabilir. Ayrica kondroitin sülfat yapisinda bulunan negatif yüklü sülfat gruplanyla pozitif yüklü dokuyu çok iyi bir sekilde absorplar ve alikonma süresi uzayarak hasta konforu uzatilmis olur. Bulus kapsaminda çapraz bagli HA ile kondroitin sülfat kombine edilmesi, lineer HA içeren kombinasyonlara göre etki süresinin daha uzun olmasini saglamaktadir. Sinoviyal sivi ve ekstraselülar matriks içerisinde de bulunan kondroitin sülfat mekanik olarak kikirdagi sikica çevreler ve yüksek derecede negatif yüklü sülfat gruplariyla, kikirdagin sikistirma esnekligine yol açan direncin çogunu temin eden elektrostatik itme olusturmak için esnek bir tabaka olusturmak üzere su ve katyonlari (Na+) baglama kabiliyetine sahiptir. Hem kondroitin sülfat hem de sodyum hiyalüronat, genellikle mukopolisakaritler olarak bilinen glikozaminoglikanlardir. Kondroitin sülfat ve sodyum hiyalüronatin sulu çözelti içinde karistirilmasiyla, moleküler birimlerin bir kismi için N- asetilamino grubunda hidrojen baglanmasiyla birbirlerini hizaladiklari ve birbirlerini çektikleri görülmüstür. Hidrojen baglanma etkilesimi, kondroitin sülfat ve sodyum hyaluronat için birkaç olasi etkilesimlerden yalnizca biridir. Kondroitin sülfat türevi kürecikler ve hyaluronat türevi kürecikler birbirleriyle etkilesime girme kabiliyetine sahiptir ve bu etkilesim polimerlerin karbonhidrat Zincirleri arasinda gerçeklestigi varsayilmistir. Sulu çözeltide kondroitin sülfatin sodyum hiyalüronata eklenmesi karisimin viskozitesini önemli ölçüde arttirir. Viskozitedeki bu artisin, esas olarak çözünen konsantrasyon artisindan ziyade moleküler agirliktaki artistan kaynaklandigi görülmektedir. Çözünen-çözücünün viskozitesi, molekül agirliginin ve çözünen konsantrasyonunun bir fonksiyonudur. Kondroitin sülfat ve sodyum hiyalüronat arasindaki hidrojen baglanma etkilesimi, moleküler boyutun etkili bir sekilde genislemesine neden olacaktir. Böylece, karisimin 29280.13 viskozitesi artacaktir. Kondroitin sülfat ve sodyum hyaluronat arasindaki etkilesimin herhangi bir konsantrasyonda da gerçeklesebilir. Bununla birlikte, sinerjik Viskozite etkisi, konsantrasyon etkisi ve moleküllerin etkilesime yakinligi nedeniyle daha yüksek konsantrasyonda daha belirgindir. Tüm bu etkilesimler formülasyonda bulunan kondroitin sülfatin çapraz bagli olmayan HA7nin (Lineer HA) üzerine etkisini göstermektedir. TR TR

Claims (1)

1.ISTEMLER . Osteoartrit (0A),ten kaynaklanan agriyi hafifletme, etkinligi azalan sinoviyal siviya destek saglama ve 0ste0k0ndral lezyonlarin tedavisi amaciyla eklem içi uygulamalarda kullanilmak üzere gelistirilmis olan ve Hiyalüronik Asit (HA), Bütandiol Diglisidileter (BDDE), NaOH ve Deiyonize su ile sentezlenen Çapraz bagli hiyaluronik asit (HA) içeren ve aktif bilesen olarak içerisindeki Çapraz bagli hiyaluronik asit (HA), çapraz bagli olmayan hiyaluronik asit (Lineer HA) ve kondroitin sülfat (CS) ile karakterize edilen yeni bir Viskoelastik formülasyonu. . Sentezlenen çapraz bagli hiyaluraonik asit (HA) içerisinde agirlikça; %7-17 NaOH ve % 80-95 Deiyonize su bulunmasi ile karakterize edilen Istem lideki gibi yeni bir Viskoelastik formülasyonu. . içerisindeki aktif inadde derisimlerinin; 2-12 mg/ml Çapraz bagli HA, 6-20 mg/ml çapraz bagli olmayan HA (Lineer HA) ve 8-35 mg/ml Kondroitin sülfat ile karakterize edilen Istem l°deki gibi yeni bir Viskoelastik formülasyonu. . I. ve 11. derece osteoartritten muzdarip insan eklemlerine, eklemin yaglanmasi ve kikirdagin kendini yenilemesi için kullanilan yukaridaki istemlerden herhangi birindeki gibi yeni bir Viskoelastik formülasyonu. . I. ve H. derece osteoartritten muzdarip kisilerin diz, omuz, sakroiliak, kalça, ayak bilegi, dirsek, interfalanksiyal ve bilek eklemlerinden en az birine, eklemin yaglanmasi ve kikirdagin kendini yenilemesi için kullanilan istem 4*deki gibi yeni bir Viskoelastik formülasyonu. 29280.13 6. Yukaridaki istemlerden herhangi birindeki gibi bir Viskoelastik jelin üretim yöntemi olup; deiyonize su içerisinde NaOH çözeltisinin hazirlanmasi, bu çözeltinin üzerine yavas yavas Hiyalüronik Asit (HA) eklenerek çözülmesi, bütandiol diglisidileter (BDDEYin, HA karisimina eklenerek homojen bir sekilde karistirilmasi, karisimin su banyosu içerisinde çapraz baglanma reaksiyonuna birakilmasi, reaksiyon sonrasi jel oda sicakligina kadar gelene kadar sogutulmasi, fosfat tampon çözeltisi (PBS) içerisinde, sogutulan jel karisiminin, hidroklorik asit (HCl) ile nötralize edilmesi, karisimin elek yardimiyla süzülinesi ve yeni PBS çözeltisi ilave edilerek jelin daha da sismeye birakilmasi, sisen jelin ardi ardina yeni PBS çözeltisiyle ile tekrar yikanmasi ve süzülmesi, sonrasinda elde edilen jelin 50-300 mikronluk parçacik boyutlarina getirilmesi, Kondroitin sülfat (CS) ve Çapraz bagli olmayan HA”nin (Lineer HA) ekstrüzyonu kolaylastirilmasi için çapraz bagli HA jele eklenmesi, nihai karisimin pH°sinin Tye ayarlanmasi ve vakum uygulanarak siringalara doluinunun yapilmasi, dolum islemi sonrasinda siringalara buhar sterilizasyonu isleminin uygulanmasi adimlarini içermesi ile karakterize edilmektedir. 7. Deiyonize su içerisinde %1”lik NaOH çözeltisinin hazirlanmasi adimi ile karakterize edilen Istein 6'daki gibi bir Viskoelastik jel üretim yöntemi. 29280.13 Karisimin 40 °C”de 1 saat boyunca su banyosu içerisinde çapraz baglanma reaksiyonuna birakilmasi adimi ile karakterize edilen Istem 6”daki gibi bir Viskoelastik jel üretim yöntemi, Fosfat tampon çözeltisi (PBS) içerisinde, sogutulan jel karisiminin, pH: 6,8- 7,4 olana kadar 0.1 M hidroklorik asit (HCl) ile nötralize edilmesi adimi ile karakterize edilen Istein 6”daki gibi bir Viskoelastik jel üretim yöntemi. pH degeri sabitlenene kadar PBS içerisinde karisimin HCl ile nötralize edilmesi adimi ile karakterize edilen Istem 6”daki gibi bir Viskoelastik jel üretim yöntemi. 6 saat sonra karisimin elek yardimiyla süzülmesi ve yeni PBS çözeltisi ilave edilerek jelin 10 saat boyunca daha sismeye birakilmasi adimi ile karakterize edilen Istem 6'daki gibi bir viskoelastik jel üretim yöntemi. Sisen jelin ardi ardina yeni PBS çözeltisiyle ile 8-10 defa daha yikanmasi ve süzülmesi adimi ile karakterize edilen Istem 6”daki gibi bir viskoelastik jel üretim yöntemi. 29280.13 TR TR