SU940020A1 - Способ определени глюкозы - Google Patents
Способ определени глюкозы Download PDFInfo
- Publication number
- SU940020A1 SU940020A1 SU802980917A SU2980917A SU940020A1 SU 940020 A1 SU940020 A1 SU 940020A1 SU 802980917 A SU802980917 A SU 802980917A SU 2980917 A SU2980917 A SU 2980917A SU 940020 A1 SU940020 A1 SU 940020A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- glucose
- solution
- determination method
- measuring
- glucose determination
- Prior art date
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЛЮКОЗЫ
1
Изобретение относитс к аналитической биохимии и может быть использовано в научно-исследовательской работе, пищевой и микробиологической промышленност х, бродильном производстве, клинических исследовани х .
Известен способ определени глюкозы путем внесени пробы анализируемого вещества в смесь, содержащую буферный раствор , глюкозооксидазу, пероксидазу и индикаторный субстрат - о-толуидин с последующим измерением плотности полученного раствора 1.
Недостатком способа вл етс его сложность , св занна с необходимостью введени двух ферментов, глюкозооксидазы и пероксидазы , что приводит к ограничению возможности использовани способа.
Наиболее близким по технической сущности и достигаемым результатам к предлагаемому вл етс способ определени глюкозы путем введени пробы анализируемого вещества в смесь, содержащую буферный раствор с рН 4-5, глюкозооксидазу и индикаторный субстрат - 2,6-дихлорфенолиндофенол с последующим измерением оптической плотности полученного раствора 2.
Недостатком способа вл етс его невысока чувствительность (б-Ю М) и точность (ошибка составл ет 20%).
Цель изобретени - повышение чувствительности и точности способа.
Поставленна цель достигаетс тем, что в способе определени глюкозы путем внесени пробы анализируемого вещества в смесь, содержащую буферный раствор, глюкозооксидазу и индикаторный субстрат с последующим измерением оптической плотности полученного раствора, в качестве индикаторного субстрата используют N,N,N, N- тетраметил-п-фенилендиамин и процесс ведут при рН 7,3-8.
Ион-радикальна соль N,N,N, N - тетра15 метил-п-фенилендиамина имеет рко-синее окрашивание (А. макс 606 нм), исчезающее при восстановлении, характеризуетс высоким коэффициентом мол рного погашени ( 1, СМ ), стабилен в течение длительного времени при рН 4,6.
Пример}. При проведении измерений в спектрофотометрическую кювету внос т 2,2 мл Na-фосфатного буферного раствора (рН 7,7; 0.2М), 0,3 мл рабочего раствора ион-радикальной соли N,N, N, N-тетраметил-n-фенилендиамина (0,164 мг/мл, рН 4,6), 0,1 мл раствора глюкозооксидазы (2 мг/мл). После проведени измерени начальной оптической плотности при 606 им реакцию инициируют добавлением в раствор 50 мкл исследуемого раствора глюкозы. После завершени реакции (5 мин) регистрируют полное изменение оптической плотности. Концентрацию глюкозы рассчитывают из калибровочного графика зависимости изменени оптической плотности от концентрации глюкозы. Результаты анализа приведены -в табл. 1.
Таблица 1 Разбавление в кювете в 53,раза. Пример 2. При проведении измерений в спектрофотометрическую кювету внос т 2,2 мл Na-фосфатного буферного раствора (рН 7,6; 0,2М), 0,3 мл рабочего раствора ион-радикальной соли N, N, N,N- тетраметил-п-фенилендиамина (0,164 мг/мл, рН 4,6), ОД мл раствора глюкозооксидазы (2 мг/мл). Фотометрирование реакции провод т при 606 нм. Реакцию инициируют добавлением в раствор 50 мкл исследуемого раствора глюкозы. О скорости реакции суд т, измер тангенс угла наклона линейного участка графика зависимости величины оптической плотности от времени. Концентрацию глюкозы рассчитывают из калибровочного графика зависимости скорости ферментативной реакции от концентрации глюкозы. Результаты анализа представлены в табл. 2.
Таблица 2
Claims (2)
- Разбавление в кювете в 53 раза. Формула изобретени Способ определени глюкозы путе.м внесени пробы анализируемого вещества в смесь, содержанхую буферный раствор, глюкозооксидазу и индикаторный субстрат с последующим измерением оптической плотности полученного раствора, отличающийс тем, что, с целью повыщени чувствительности и точности способа, в качестве индикаторного субстрата используют N,N, NiN- тетраметил-п-фенилендиамин и процесс ведут при рН 7,3-8,0. Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе 1.Патент США Re № 29498, кл. 195-1035, опублик. 1977.
- 2.Патент США № 3009862, кл. 195-1035 опублик. 1961 (прототип).
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU802980917A SU940020A1 (ru) | 1980-07-04 | 1980-07-04 | Способ определени глюкозы |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU802980917A SU940020A1 (ru) | 1980-07-04 | 1980-07-04 | Способ определени глюкозы |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU940020A1 true SU940020A1 (ru) | 1982-06-30 |
Family
ID=20917315
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU802980917A SU940020A1 (ru) | 1980-07-04 | 1980-07-04 | Способ определени глюкозы |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
SU (1) | SU940020A1 (ru) |
-
1980
- 1980-07-04 SU SU802980917A patent/SU940020A1/ru active
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4350762A (en) | Aminopyrine improved Trinder's reagent and dosing process for hydrogen peroxide from enzymatic oxidation of metabolic substrata with the same | |
Dorsey et al. | A heated biuret-Folin protein assay which gives equal absorbance with different proteins | |
Trettnak et al. | Fibre-optic glucose sensor with a pH optrode as the transducer | |
Fossati et al. | Use of 3, 5-dichloro-2-hydroxybenzenesulfonic acid/4-aminophenazone chromogenic system in direct enzymic assay of uric acid in serum and urine. | |
Graf et al. | Method for determination of hydrogen peroxide, with its application illustrated by glucose assay. | |
EP0071934B1 (en) | Method for preparing a color stable chromogenic analytical element | |
Smith | Determination of sulfite using a sulfite oxidase enzyme electrode | |
US5516700A (en) | Automated urinalysis method | |
US3979262A (en) | Compositions and methods for the determination of oxidizing agents | |
DK155052B (da) | Reagens, testmateriale og fremgangsmaade til detektering af naervaerelsen og/eller bestemmelse af koncentrationen af glucose i en forsoegsproeve | |
Morin et al. | Single Glucose Oxidase—Peroxidase reagent for two-minute determination of serum glucose | |
CN109239059A (zh) | 一种糖化血清蛋白测定试剂盒及其制备方法和应用 | |
EP0116307B1 (en) | Composition, analytical element and method for the quantification of creatine kinase | |
EP0215170B1 (en) | Single color reading method for determining fructosamine | |
GB1601771A (en) | Kinetic method for determination of glucose concentrations with glucose dehydrogenase | |
NIshi et al. | Three turbidimetric methods for determining total protein compared. | |
Gochman et al. | Interlaboratory comparison of enzymatic methods for serum glucose determination | |
Jordan | Uroporphyrinogen III cosynthetase: a direct assay method | |
JP2528457B2 (ja) | 過酸化水素の定量法 | |
SU940020A1 (ru) | Способ определени глюкозы | |
Rosalki | A simple colorimetric method for the determination of serum alpha-hydroxybutyric dehydrogenase activity | |
Kamoun et al. | Ultramicromethod for determination of plasma uric acid. | |
Hamafuji et al. | Clinical application of the serum 1, 5‐anhydroglucitol assay method using glucose 3‐dehydrogenase | |
Perez-Bendito et al. | Nonenzymatic stopped-flow fluorimetric method for direct determination of uric acid in serum and urine. | |
Bergmeyer | Experimental techniques |