SU889003A1 - Способ получени диагностической псевдотуберкулезной сыворотки - Google Patents
Способ получени диагностической псевдотуберкулезной сыворотки Download PDFInfo
- Publication number
- SU889003A1 SU889003A1 SU792773922A SU2773922A SU889003A1 SU 889003 A1 SU889003 A1 SU 889003A1 SU 792773922 A SU792773922 A SU 792773922A SU 2773922 A SU2773922 A SU 2773922A SU 889003 A1 SU889003 A1 SU 889003A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- pseudotuberculosis
- serum
- immunization
- diagnostic
- dose
- Prior art date
Links
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
I
Изобретение относитс к микробиологии и касаетс получени диагностических препаратов.
Известен способ получени диагностической псевдотуберкулезной сыворотки путем выращивани псевдотуберкулезных микробов на питательной среде с последующей иммунизацией животныхпродуцентов: и отделением сыворотки крови 0.
Однако известный способ не обеспечивает , получени сыворотки с высокой специфичностью.
Целью изобретени вл етс повышение специфичности сыворотки.
Эта цель достигаетс тем, что способ получени диагностической псевдотуберкулезной сыворотки осуществл ют .путем выращиёани псевдотуберкулезных микробов на питательной среде с последующей иммунизацией животныхпродуцентов и отделением сыворотки крови, псевдотуберкулезный микроб выращивают при 10-12 С, выдел ют специфический поверхностный, антиген и иммунизацию провод т однократно в дозе 0,1-0,15 мл с содержанием белка 100 мкг/мл физиологического раствора .
Согласно предлагаемому способу получени псевдотуберкулезных сывороток дл иммунизации используют высокоспецифический поверхностный антиген , полученный из микробной клетки ;У. pseudotuberpulosiS без нарушени его природной структуры. Выделенный комплекс вл етс сильным антигенным раздражителем способным даже при однократной иммунизации вызывать ги1S периммунный ответ макроорганизма. Дл иммунизации кроликов выдел ют поверхностную субстанцию псевдотуберкулезного микроба наиболее щад щим способом - механической дезинтегра20 цией, что обеспечивает сохранение вещесТ:ва в нативной форме. Далее из поверхностной субстанции осаждают высокомолекул рную фракцию центрифугированием при 35000 q. Эту фракцию затем перераствор ют в небольшом, объеме низкомолекул рной фракции (супернатанте ). Иммунизаци кроликов смесью этих фракций с превалированием высокомолекул рного компонента обеспечивает острый иммунный ответ животных.
Дл иммунизации кроликов используют антиген в низких концентраци х по белку (10-15 мкг) дл одноразового внутривенного введени вещества. Антиген, вз тый в дозе менее 10 мкг, гуморального ответа не вызывает. .Использование же антигена в дозе, превышающей 15 мкг, вызывает иммунологический паралич. Дл получени специфических диагностических псевдотуберкулезных сывороток оптимальной дозой вводимого препарата вл етс 10-15 мкг в 0,1 мл физиологического раствора.
Пример. Материалом дл иммунизации кроликов служит комплекс поверхностных антигенов псевдотуберкулезного микроба. Чтобы получить его культуру микроба выращивают в течение 2-3 суток на м со-пептонном агаре при 10-12 С, что позвол ет сохранить микроорганизмы в S-форме (в стабильном состо нии). Затем культуру смывают физиологическим раствором с фосфатным буфером (рН 7 , 2-7 ,) .центрифугируют при 5500-6000 g об/мин в течение 30 мин и двукратно отмывают этим же раствором, центрифугируют культуру по 30 мин. Надосадочну жидкость удал ют. Осадок ресуспендируют до концентрации 200 в физиолгическом растворе с фосфатным буфером (рН 7,,), а поверхностный антиген отдел ют на механическом дезинтеграторе в течение 15 мин, дающий 3000 колебаний в минуту. После отделени поверхностной субстанции бактерии осаждают центрифугированием при босо об/мин в течение 30 мин и удал ют. Суспернатант консервируют мертиолатом натри (1:5000-1:10000, экспозици 1 ч при 4°С) и вновь центрифугируют при 9000 об/мин (дл удалени единичных бактерий). Осадок удал ют, а супернатант центрифугируют при 37000 q в течение 2-х часов при 4°С. Полученный осадок (высокомолекул рную фракцию поверхностного антигена) перераст.вор ют в минимальном количестве (1/5 часть) суспер- нанта (низкомолекул рна фракци ),
определ ют количество белка по Лоури и развод т до концентрации 100 мкг белка в 1 мл физиологическим раствором .
Схема иммунизации животных. Кроликов весом 2, кг однократно иммунизируют внутривенно в краевую ушную вену в дозе 0,1 мл (10-15 мкг белка) препарата, растворенного в 0,1 мл физиологического раствора. Через 8 дней провод т пробное вз тие крови и определ ют титр гемагглютининов . 8 зависимости от индивидуальной чувствительности животных титры антител колеблютс в пределах 1/6 00-1/51300. Дл иммунизации животных используют антиген, приготовленный согласно предлагаемому способу , который развод т физиологическим раствором до концентрации 100 мкг белка, определенного методом Лоури. После установлени титра антител животных обескровливают, отдел ют сыворотку , лиофильно сушат и хран т в холодильнике при °С. Срок хранени (срок наблюдени ) более года.
Специфичность сывороток проверили в реакции непр мой гемагглютинации с чумным антигенным диагностикумом и в реакции агглютинации с живыми культурами S. enteritidis, S. paratyphi Е, Е. coli 0-12, с вакцинным штаммом чумного микроба (EV) и диагностикумом брюшного тифа.
Сыворотки, приготовленные по известному способу, давали положительные РИГА и РА с чумным эритроцитарным антигенным диагностикумом и вакцинным штаммом чумного микроба (EV/) в разведении 1:50. Сыворотки,приготовленные предложенным способом, имеют положительные РИГА и РА с указанными диагностикумами в разведени х 1:АО и 1:20 соответственно. С остальными культурами реакции оказались отрицательными .
Полученные диагностические превдотуберкулезные сыворотки обладают до.статочной чувствительностью, высокой специфичностью, имеют высокую концентрацию антител и найдут широкое применение в баклаборатори х санэпидстанций с целью диагностики псевдотуберкулеза и установлени серологической принадлежности возбудител заболевани . Сроки получени этих сывороток в 2раза короче известного ранее способа, что экономически более выгодно.
58890034
Claims (1)
- Формула изобретени выращивают при 10-12°С, выдел ютСпособ получени диагностической и иммунизацию провод т однократно псевдотуберкулезной сыворотки путем в дозе 0,1-0,15 мл с содержанием белвыращивани псевдотуберкулезных мик- s ка 100 мкг/мл физиологического растробов на питательной среде с после- вора.дующей иммунизацией животных-проду-Источники информации,центов и отделением сыворотки крови, прин тые во внимание при экспертизе отличающийс тем, что, 1, Королюк A.M. Серологическа с целью повышени специфичности сы- (в диагностика псевдотуберкулеза. Канд. воротки, псевдотуберкулезный микроб дис. Л., 1971.специфический поверхностный антиген
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU792773922A SU889003A1 (ru) | 1979-06-01 | 1979-06-01 | Способ получени диагностической псевдотуберкулезной сыворотки |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU792773922A SU889003A1 (ru) | 1979-06-01 | 1979-06-01 | Способ получени диагностической псевдотуберкулезной сыворотки |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU889003A1 true SU889003A1 (ru) | 1981-12-15 |
Family
ID=20831021
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU792773922A SU889003A1 (ru) | 1979-06-01 | 1979-06-01 | Способ получени диагностической псевдотуберкулезной сыворотки |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
SU (1) | SU889003A1 (ru) |
-
1979
- 1979-06-01 SU SU792773922A patent/SU889003A1/ru active
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Verwey | A type-specific antigenic protein derived from the Staphylococcus | |
US4816253A (en) | Novel mutant strain of Listeria monocytogenes and its use in production of IgM antibodies and as an immunotherapeutic agent | |
Courant et al. | Biochemical and immunological heterogeneity of Bacteroides melaninogenicus | |
Thomas et al. | Studies on primary atypical pneumonia. II. Observations concerning the relationship of a non-hemolytic streptococcus to the disease | |
JPH0450531B2 (ru) | ||
US4567041A (en) | Mutant strain of Listeria monocytogenes and its use in production of IgM antibodies and as an immunotherapeutic agent | |
Nakhla et al. | Studies on the antigen in β-haemolytic streptococci that cross-reacts with an antigen in human myocardium | |
Neter et al. | Differences in antibody response of rabbit to intravenously injected soluble and cell-attached enterobacterial antigen | |
US3636192A (en) | Meningococcal polysaccharide vaccines | |
Collins | The effect of the growth rate on the composition of S. enteritidis cell walls | |
Mirick et al. | STUDIES ON A NON-HEMOLYTIC STREPTOCOCCUS ISOLATED FROM THE RESPIRATORY TRACT OF HUMAN BEINGS: II. IMMUNOLOGICAL CHARACTERISTICS OF STREPTOCOCCUS MG | |
FR2515518A1 (fr) | Procede de production de preparations immunobiologiques applicables pour le diagnostic, la prevention et/ou le traitement d'infections par le candida guilliermondii, et preparations immunobiologiques en resultant | |
SU889003A1 (ru) | Способ получени диагностической псевдотуберкулезной сыворотки | |
Rake et al. | STUDIES ON MENINGOCOCCUS INFECTION: IV. The Antigenic Complex of the Meningococcus—Group-Specific Carbohydrate and Protein Fractions | |
JPH0664065B2 (ja) | 菌体外膜保有菌の免疫学的測定法 | |
SU1673973A1 (ru) | Способ диагностики заболеваний растений, вызванных РSеUDомоNаS SYRINGae 1у серогруппы | |
SU1708846A1 (ru) | Штамм бактерий NeISSeRIa меNINGIтIDIS серогруппы В - продуцент капсульного полисахарида и полисахаридно-белкового комплекса | |
Lyampert et al. | The reaction of heart and other organ extracts with the sera of animals immunized with group A streptococci | |
SU1163635A1 (ru) | Штамм @ 125/121 серовара 59,используемый дл получени моноспецифической диагностики сыворотки | |
RU2145353C1 (ru) | Штамм бактерий moraxella bovis "г97-вниви", используемый для изготовления диагностикумов и вакцин против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота | |
SU1750689A1 (ru) | Способ получени полисахаридно-белковой вакцины против NeISSeRIa меNINGIтIDIS серогруппы В | |
SU595996A1 (ru) | Способ обнаружени и идентификации холерных вибрионов | |
SU1177344A1 (ru) | ШТАММ ΙιΕΚΒΙΝΙΑ РЗЕЛГЮТЦВЕКСиЬ0313 "ШОЙБУЛАКСКИЙ 82", ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ. | |
SU581139A1 (ru) | Штамм -8845 дл получени типовой агглютинирующей сыворотки | |
Matthews et al. | Identification of rabbit antibodies directed against Candida albicans |