SU623556A1 - Способ получени гиалуронидазы - Google Patents

Description

Изобретение относитс  к химико-фармацевтической промышленности, а именно к получению биологически активных веществ, которые могут быть использованы в медицине в качестве лекарственных препаратов, .

Известен способ получени  гиалуро- нидазы из семенников крупного рогатого скота, включающий в себ  измельчение ткани, кислотный автолиз в течение 18-20 ч при 38 С, ацетоновое осаждйние , растворение осажденного фермента в дистиллированной воце, отгонку ацетона под вакуумом, стерилизацию и лиофилизацию ij .

Недостатком этого способа  вл етс  то, что используемые в качестве сырь  дл  получени  гиалуронидазы семенники крупного рогатого скота не  вл ютс  наиболее богатым источником этого фермента , что приводит к недостаточно высокой удельной активности конечного ферментного препарата. Кроме того, использование процедуры ацетонового осаждени  значительно усложн ет и удорожает производство гиалуронидазных препаратов и делает его опасным в пожарном отношении . Получаемые таким способом пре-ч параты гиалуронидазы отличаютс  упель - ной активностью.

Наиболее близким к изобретению  вл етс  способ получени  гиалуронидазы путем измельчени  животного сырь , экстрагировани  солевым раствором хлористого натри  и очистки r2j ,

Недостатком этого способа  вл етс  низка  удельна  активность получаемой гиалуронидазы и незначительный ее выход , менее 1О%,

Целью изобретени   вл етс  повышение чистоты и вь)хода целегого продукта. Эта цель достигаетс  тем, что в качестве сырь  используютподчелюстные железы собак, а очистку производ т диализом против оистиллированной воды и отстаиванием при О-6°С в течение 3-4 кед.

Claims (2)

1. Пример. 4Q5 г подчелюстных слюнных желез, полученных у 62 свежо; .6 Забитых .собак различных пород непосредственно после сн ти  mxypbii гомогенизи- руют с прмошью электрической м сорубки . После этого этапа получают всего 49О г гомогената, содержащего 8554,5 фермента с уаельной активностью 0,14О К гомогенату добавл ют 2,45 л 1,5%-кого растворч хлористого натри . Экстракцию провод т в течение 30 мин при периодическом встр хивании и 5 С, Полученный экстракт центрифугируют при 6ООО О в течение 30 мин при 4 С. К осадку вновь прибавл ют 800 мл 1,5%-ного раствора хлористого натри  и провод т повторную экстракцию. Полученные надосадочные жидкости соедин ют и диализнруют против дистиллированной воды в течение 24 ч при 5°С. Диализат центрифугируют в течение 30 мин при 4 С. После этого получают ЗООС мл раствора гиалуронидазы, содержащего 14833,2 Е фермента с удельной активностью 0,216. Выход препарата на этом этапе составл ет 173%, а чистота препарата повышаетс  в 1,5 раза. Затем указанные выше ЗООО мл надосадочной жидкости оставл ют дл  отстаивани  в течение 3-4 нед при 0-6 С. Полученный гиалуронидазный препарат центрифугируют при 6ООО Р в течение 30 мин при 4 С. Получают 2900 мл раствора гиалуронидазы , содержащего 14841,2 Е фермента с удельной активностью 0,458. Выход препарата 173%, а чистота препарата повышаетс  в 3,3 раза. Предлагаемый способ позвол ет существенно увеличить чистоту гиалуроницазы , значительно повысить ее выход. Получаемый препарат содержит значительно меньше балдастных белков и поэтому будет давать значительно меньше аллергических осложнений, которые возникают при применении других препаратов. Формула изобретени  Способ получени  гиалуронидазь путем измельчени  животного сырь , экстрагировани  солевым раствором хлористого натри  и очистки, отличающийс   тем, что, с целью повышени  чистоты и выхода целевого продукта, в качестве сырь  используют подчелюстные железы собак, а очистку провод т диализом против дистиллированной воды и отстаиванием при О-6 С в течение 3-4 нед. Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе: 1.Технологи  м сных и технических продуктов. Справочник, Пищева  промышленность , М., 1973, с. 516-517.
2. 2.Гуров В. А. Производство органопрепаратов . М.,Пищева  промышленность , 1976, с. 80.