SU568677A1 - Aspergillus niger p-1 strain as producer of citric acid - Google Patents

Description

(54) ШТАМЛ1 ASPERGILLUS NIGER Р-1 - ПРОДУЦЕНТ ЛИМОННОЙ КИСЛОТЫ(54) STAMP1 ASPERGILLUS NIGER P-1 - PRODUCER OF LEMONIC ACID

12 Длина Конидиеносцев 3-4 мм, диаметр сечени  конидиенасцез 20 мкм. Органическа  среда. Сусло-агар. У п тисуточной культуры форма «анндий йрутла , .в диаметре 6 мкм. Конидиальные головки в среднем 125-145 мкм. Везикулы круглые, в среднем 27-29 мкм. Конидиеносцы длиной выШе 4 мм. Диаметр сечени  15 мкм. По морфологическим признакам штамм Р-1 отличаетс  от исходного штамма ЭУ-119, что видно-из приведенного в табл. 1. Таблица 112 The length of the Conidiophores is 3-4 mm, the diameter of the cross section is 20 µm. Organic Wednesday. Wort agar. In the five-day culture, the form “anndy yrutla, in a diameter of 6 μm. Conidial heads on average 125-145 microns. Vesicles are round, on average 27-29 microns. Conidiophores longer than 4 mm. The diameter of the cross section is 15 microns. According to morphological features, strain P-1 differs from the original strain EU-119, which can be seen from the table. 1. Table 1

Примечание. Длина конидиеиосцев штамма ЭУ-119 0,7-5, Р-1 3-4 мм.Note. The length of the conidium strains of the strain EU-119 is 0.7-5, R-1 is 3-4 mm.

Культуральные признаки. Среда ЧапекаДокса . Гигантска  колони , выращенна  в чашке Петри ири 32° С, на п тые сутки имеет круглую форму диаметром 45-50 мм. Край колоний ровный, аспорогенна  зона - 6 мм.Cultural features. ChapekDox Wednesday. Giant colonies grown in a Petri dish of 32 ° C, on the fifth day, have a round shape with a diameter of 45-50 mm. The edge of the colonies is flat, the asporogenic zone is 6 mm.

Субстратный мицелий радиально складчатый . Спороношение тоже радиальное (под вли 1нием складчатого мицели ), скудное, тймно-коричневое, с пушистым воздушным мицелием.Substrate mycelium radially folded. Sporulation is also radial (under the influence of the first folded mycelium), scanty, dark brown, with a fluffy aerial mycelium.

Среда сусло-araip. П тисуточна  гигаигска  колони , кругла . Диаметр колонии 90 мм. Центр колонии с редким возвышенным споро1ношением, затем следует по с с густым, низким спороношекием, которое в направлении кра  становитс  редким.Wednesday is a must-araip. P the daily gigaigsky colonies, round. The diameter of the colony is 90 mm. The center of the colony is with a rare, elevated sporulation, then follows along with a thick, low sporoscera, which becomes rare in the direction of the edge.

Ферментационна  среда. На ферментационной Ораде, употребл емой дл  получени  лимонной кислоты, 24-часовой мицелий тонкий , складчатый, коричневатый. В ходе цикла мицелий становитс  беловатым, более плотным и складчатым. Основание мицели  становитс  буроватым. Мицелий эластичный, коПри/мер . Посевной материал (конидии) штамма Aspergillus niger Р-1 получают при посеве чистой культуры штамма на сусло-агаровой среде. Культивирование производ т приFermentation medium. In fermentation orada, used to produce citric acid, the 24-hour mycelium is thin, folded, brownish. During the cycle, the mycelium becomes whitish, more dense and folded. The base of the mycelium becomes brownish. Mycelium elastic, coPri / measures. Seed material (conidia) of the strain Aspergillus niger P-1 is obtained by sowing a pure culture of the strain on wort agar medium. Cultivation is carried out at

нидий не Oi6pa:3yeT или образует очень мало. Антагонистические свойства. Штамм Р-1, обладает более высокой устойчивостью к бактери м-антагонистам , чем ЭУ-1-19, и подавл ет развитне газообразующих, кислотообразующих и денитрифицирующих (.нитр-итообразующ ,их) .бактерИЙ (Bact. coli, Leuconostock гаеsentericides; Pseudomonas (Ps) fluorescens),Nidium is not Oi6pa: 3yeT or forms very little. Antagonistic properties. Strain P-1, has a higher resistance to bacteri antagonists than EU-1-19, and suppresses the development of gas-forming, acid-forming and denitrifying (.nitto-forming, them) bacteria (Bact. Coli, Leuconostock gaesentericides; Pseudomonas (Ps) fluorescens),

встречающихс  в ферментационном (процессе лимонной кислоты.encountered in fermentation (citric acid process.

Биохимические признаки. Хорощо сбраживает мелас1сные и синтетические среды при поверхностном способе культивировани , шыход лимонной кислоты от сахара мелассы достигает 99-100%.Biochemical signs. Well blessed with molasses and synthetic media with a superficial method of cultivation, the yield of citric acid from molasses sugar reaches 99-100%.

Кроме того, съем лимонной кислоты с единицы площади мицели  увеличиваетс  в среднем на 14,8% и на мелассных средах штамм образует в среднем 97,8% лимонной кислоты от суммы кислот.In addition, the removal of citric acid per unit area of the mycelium increases on average by 14.8% and, on molasses media, the strain forms an average of 97.8% of citric acid based on the amount of acids.

Полученные результаты приведены в табл. 2.The results are shown in Table. 2

Таблица 2table 2

30 30-32° С в течение 9 сут в кюветах площадью 10-12 дм . ЗрелыеКОНИДИИ отдел ют от м-ицели  цри помощи вакуумного устройспна. Выт ход опор (кон дий) с 1 дм площади среды30 30-32 ° С for 9 days in cuvettes with an area of 10-12 dm. Mature KONIDII are separated from the m-target by a vacuum device. The course of the supports (condium) is removed from 1 dm of the area of the medium

1,0-1,1 г. Собранные конидии смешивают со стерильным активированным углем в соотношении 1 : 2. Такой посев-ной материал используетс  дл  .микробиологического получени  лиманной «нслоты. Дл  роста мицели  и образовани  кислоты готов т ферментационную среду следующего состава, г/л;1.0-1.1 g. The collected conidia are mixed with sterile activated carbon in a ratio of 1: 2. Such a seed is used to microbiologically obtain estrogen. For the growth of mycelium and the formation of acid, a fermentation medium of the following composition is prepared, g / l;

Меласса250Molasses250

Ферроцианид кали 1,1Potassium Ferrocyanide 1.1

Фосфорнокислый калий однозамеш,енный0,16 Сернокислый цинк 0,005Potassium phosphate odnozamesh, enny 0.16 Zinc sulfate 0.005

рН среды6,8-7,0pH of medium 6,8-7,0

.Мелассный paCTBoip нагревают до 100° С и до|ба|Вл ют раотепное количество фер.роцианида кали . Простарилизованный раствор охлаждают до 45° С и добавл ют фосфорнокислый калий и сернокислый цвнк. Приготовленный раствор наливают ,з бродильные кюветы высотой сло  12 см и ввод т споры штамма Р-1 из расчета 100 мг/м илощади кювета. В стадии роста и .развити  мицели  (в течение 24-36 ч) температура культивироваии  должна быть 34-36° С и аэраци  воздуха 3-4 Л43 в 1 ч на 1 м .мицели . После шолного образовани  мицели  в период активного кислотообразовани  температура культивировани  должна быть 31-3-3° С и аэраци  воздуха 15-18 м в I ч на I м мицели . Испарение в продолжение иолного цикла ферментации составл ет 45-50% от иачального объема раствора. При таком режиме через 9 сут кисло:пность раствора достигает 180-210 г/л, остаетс  несброженным 0,5-0,7% сахара. В сброженном растворе содержитс  97-98% лимонной кислоты и 2-3% глюконовой, щавелевой ,  блочной, сахарной, фумаровой,  нтарной , малоновой, адипиновой кислот. В течение всего цикла ферментации непрерывно происходит нарастание биомассы гриба, котора  .в коице цикла достигает 1,8-2,4 кг/м в пересчете  а сухой вес.The melted paCTBoip is heated to 100 ° C and the active amount of potassium ferrocyanide is applied to | ba | The prostrate solution is cooled to 45 ° C and potassium phosphate and sulphate are added. The prepared solution is poured, for fermentation cells with a layer height of 12 cm and spores of strain R-1 are injected at the rate of 100 mg / m and the area of the cell. In the stage of growth and development of the mycelium (within 24-36 h), the cultivation temperature should be 34-36 ° C and aeration of air 3-4 L43 at 1 h per 1 m. After the formation of mycelium during the period of active acid formation, the cultivation temperature should be 31-3-3 ° C and air aeration of 15-18 m in I h on the I m mycelium. Evaporation during the entire fermentation cycle is 45-50% of the initial volume of the solution. In this mode, after 9 days sour: the solution reaches 180-210 g / l, 0.5-0.7% of sugar remains unfermented. The fermented solution contains 97-98% citric acid and 2-3% gluconic, oxalic, malic, sugar, fumaric, succinic, malonic, adipic acids. During the entire fermentation cycle, the biomass of the fungus continuously increases, which reaches 1.8–2.4 kg / m in terms of a dry weight.

Claims (1)

Формула изобретени  Штамм Aspergillus niger Р-1 - продуцент лимонной кислоты. Хранитс  в коллекции экспериментального завода биохимических ирепаратов института микробиологии И1М. А. Кирхенштейна, г. Рига. 5 Морфологические признаки. У п тисуточной культуры иа среде Чатека-Докса канидиальные головки имеют круглую фор:Му диаметром 205-215 мкм. Пузырьки (везикулы) выт нутой фор.мы диаметром 27 мкм. Стеригмы однослойные, длина стеригм 10 .икм. Конидии круглые, их средний диаметр 7 мкм. Длина конидиеиосцев 3-4 мм, диаметр 20 мкм. Культуральные признаки. Среда Чапека-Докса . П тисуточ1на  гигантска  колони , круглой формы, диаметром 45-50 мм. Край колонии равный, аспорогенна  зона - 6 мм. Субстратный мицелий радиально складчатый . Спороношение скудное, темно-коричневое , с пушистым воздушным мицелием.Claims of the invention: Aspergillus niger P-1 strain producing citric acid. It is kept in the collection of the experimental plant of biochemical and preparations of the Institute of Microbiology I1M. A. Kirhenshteyna, Riga. 5 Morphological features. In the case of the daily culture in the Shakek-Doksa medium, the canidial heads have a circular shape: Mu with a diameter of 205-215 microns. Vesicles (vesicles) of elongated shape. We are 27 microns in diameter. Single-layer sterigma, sterigm length 10. Um. Conidia are round, their average diameter is 7 microns. The length of the conidia is 3-4 mm, the diameter is 20 microns. Cultural features. Wednesday of čapek-doksa. Five times a giant colony, round shape, diameter 45-50 mm. The edge of the colony is equal, the asporogenic zone is 6 mm. Substrate mycelium radially folded. Sporulation scanty, dark brown, with a fluffy aerial mycelium. Среда сусло-агар. П тисуточна  гигантска  колони  диаметром 90 мм. Центр колонии с редким возвышенным спороиошением, затем следует по с с густым, низким спороношением , который по направлению к краю становитс  редким.Wednesday is wort agar. Five times a giant colony with a diameter of 90 mm. The center of the colony is with rarely elevated sporulation, then follows along with thick, low sporulation which becomes rare towards the edge. Ферментационна  среда. 24-часовой мицелий тонкий, складчатый, коричневого цвета. В ходе цикла - после 3 сут мицелий становитс  беловатым, более плотным и складчатым . Основание мицели  становитс  буроватьим . Мицелий эластичный, конидий не образует или образует очень мало. Антагонистические свойства. Обладает высокой устойчивостью к бактери м-аптагоиистам.Fermentation medium. The 24-hour mycelium is thin, folded, brown in color. During the cycle - after 3 days, the mycelium becomes whitish, more dense and folded. The base of the mycelium becomes butimim. Mycelium is elastic, conidia does not form or forms very little. Antagonistic properties. It is highly resistant to bacteria m-aptagoistam. Подавл ет развитие газообразующих, кислотообразующих и денитрифицирующих (|нитритообразующих ) бактерий (Bact. coli, Leuconostock mesentericides, Pseudomonas (Ps) fluorescens), встречающихс  в ферментаци0 онном процессе лимонной кислоты.Suppresses the development of gas-generating, acid-forming and denitrifying (| nitrite-forming) bacteria (Bact. Coli, Leuconostock mesentericides, Pseudomonas (Ps) fluorescens) found in the fermentation process of citric acid. Биохимические признаки. Хорошо сбраживает мелассные растворы при поверхностном способе культивировани . Выход лимонной кислоты на 14,8% больше с единицы площадиBiochemical signs. Well blesses molasses solutions with a superficial method of cultivation. The output of citric acid is 14.8% more per unit area 5 мицели , а на меласоных средах штамм образует в среднем 97,8% 5 micelles, and on molasses media the strain forms on average 97.8% лимонной кислоты от суммы «ислот.citric acid from the amount of "islot.