SU369137A1 - METHOD OF STABILIZATION BUTIRYLHOLINESTERASE - Google Patents

Description

1one

Изобретение относитс  iK ферментной промышленности , а именно к способам стабилизации бутирилхолинэстеразы.This invention relates to the iK enzyme industry, and specifically to methods for stabilizing butyrylcholinesterase.

Известен способ стабилизации бутирилХОлинэстеразы с использо-ваеием полисахарида. В ка1чеСТ1ве последнего используют высушенный крахмальный гель.There is a method of stabilizing butyrylHOLIesterase using polysaccharide. The dried starch gel is used in the ka-hlstl of the latter.

С целью увеличени  сроков годности и активности бутирилхоли1нэстеразы по предлагаемому способу в качестве стабилизатора июпользуют аннаНЫ.In order to increase the shelf life and activity of butyrylchol1esterase by the proposed method, the annunciators are used as a stabilizer.

Ио;следние ввод т в .фермент в 1ВИде раствора , Шри этом соотношение мапнана ai бутирилхолииэстеразы составл ет 1 :2.Io; the latter are introduced into the enzyme in 1 Vide of the solution; Sri, the ratio of mapnan ai butyrylcholium esterase is 1: 2.

По .предлагаемому спосо бу используют внеклеточные маннаны, полученные микробиологическим синтезом с помошью микроорганизмов Rhodotorula rubra ВКМу 341 и Rhod pilimana .e.According to the proposed method, extracellular mannans obtained by microbiological synthesis with the help of microorganisms Rhodotorula rubra VKMu 341 and Rhod pilimana .e are used.

К раствору фермента, концентраци  «оторото равна 2 мг/мл, доба.вл ют такое же количество раствора маннана с конце.нтрацией 2 мг/мл. Получениую смесь номешают в термостат при 40-60°С, выдерживают 2 час, охлаждают и определ ют а.ктивнасть бутирилхолинэстеразы нотенциометрическим титрованием .To the enzyme solution, the concentration of the sprout is equal to 2 mg / ml, and the same amount of the mannan solution with the end of 2 mg / ml is added. The preparation of the mixture was incubated in a thermostat at 40-60 ° C, held for 2 hours, cooled, and the a. Activity of butyrylcholinesterase was determined by non-potentiometric titration.

Пример 1. В 2 мл раствора бутирилхолинэстеразы (концентраци  1 ) добавл ют 2 мл раствора маннанов Rh. pilimanae Example 1. In 2 ml of a solution of butyrylcholinesterase (concentration 1), 2 ml of a solution of mannans Rh are added. pilimanae

(Концентраци  2 мг/мл). Полученную смесь выдерживают при 55°С.(Concentration 2 mg / ml). The resulting mixture was kept at 55 ° C.

Пачальна  активность бутирилхолинэстеразы Е (1,18±0,594) 10- ммоль/мл.Broken activity of butyrylcholinesterase E (1.18 ± 0.594) 10-mmol / ml.

После выдерж1ки при указанной тем.пературе активность фермента в контроле со-стаВл ет (2,228±0,175)-10-3, а в олытНОМ образце 4,73-10- ммоль/мл.After incubation at the indicated temperature, the enzyme activity in the control was (2.228 ± 0.175) -10-3, and in the test sample 4.73-10 mmol / ml.

П р и м е р 2. Опыт прОвод т в тех же услови х , но используют маннаны Rh. rubra.EXAMPLE 2. The experiment was carried out under the same conditions, but using Rh mannans. rubra.

В .контрольном опыте активность бутирилхолинэстеразы (3,228±1,78) Ю-з, а в опытном (4,691±0,162) ммоль/мл.In the control experiment, the activity of butyrylcholinesterase (3.228 ± 1.78) U-s, and in the experimental (4.691 ± 0.162) mmol / ml.

Та1ким образом, под действием маннана Rh. rubra бутилхолинэстераза стабНЛизируетс  против тепло.вой и активации на 45,2%.Thus, under the action of mannan Rh. rubra butylcholinesterase stabilizes against heat and your activation by 45.2%.

Пример 3. Опыт провод т в тех же услови х , но смесь в термостате выдержи.вают при 25°С В течение 1 час.Example 3. The experiment was carried out under the same conditions, but the mixture in the thermostat was kept at 25 ° C for 1 hour.

При применении маннана Rh. pilimanae активность фермента в контроле составл ет 7,81-10, а в опыте 10,63-10 ммоль/мл.When using mannan Rh. pilimanae enzyme activity in the control is 7.81-10, and in the experiment 10.63-10 mmol / ml.

При применении маннана Rh. rubra активность фермента в контроле (11,51 + ±0,391)-10-3, а в опытном (14,16+0,480) 10 ммоль/мл.When using mannan Rh. rubra enzyme activity in the control (11.51 + ± 0.391) -10-3, and in the experimental (14.16 + 0.480) 10 mmol / ml.

Таким образом, актив1ность фермента после тепловой обработки на 23% выше чем в контрольном опыте. 3 Предмет изобретени  1. Опасоб- стабилизации бутирилхолинэстеразы , отличающийс  тем, что, с целью увеличени  сроков гаднасти и актиено сти бутирил-5 холинэстеразы, в качестве стабилизатора используют маннаНы. 4 2. On особ ио п. 1, отличающийс  тем, что маИНаны ввод т IB виде раствора. 3. Опасоб гоо  п. 1 и 2, отличающийс  тем, что соотношение вводимого маннана к бутирилхолинэстеразы составл ет 1 :2. Thus, the enzyme activity after heat treatment is 23% higher than in the control experiment. 3 Subject of the invention 1. The hazardous stabilization of butyrylcholinesterase, characterized in that, in order to increase the timing of the cipher and actuality of the butyryl-5 cholinesterase, manna is used as a stabilizer. 4 2. On particulars of claim 1, characterized in that the MAINANs are administered in an IB form of solution. 3. A hazard of paragraphs 1 and 2, characterized in that the ratio of mannan to butyrylcholinesterase administered is 1: 2.