SU1655489A1 - Method for stimulating the corneal reparation - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к медицине, а именно к офтальмологии. Цель изобретени  - сокращение срока. Стимулируют репарацию роговицы путем инстилл ции 0,1-1.0%-ного раствора кератансульфата Стимулирующий эффект на 50-70% от исходной попул ции клеток получают через 48-72 ч после добавлени  раствора кератансульфата Способ позвол ет улучшить стимул цию клеток пораженной роговицыThe invention relates to medicine, namely to ophthalmology. The purpose of the invention is to reduce the time. Stimulate corneal repair by instilating a 0.1-1.0% keratan sulfate solution. A stimulating effect of 50-70% of the initial cell population is obtained 48-72 hours after adding the keratan sulfate solution. The method improves the stimulation of corneal cells.

Description

Изобретение относитс  к медицине, а именно к офтальмологии.The invention relates to medicine, namely to ophthalmology.

Целью изобретени   вл етс  сокращение срока.The aim of the invention is to reduce the duration.

Способ осуществл ют следующим образом .The method is carried out as follows.

Роговицу животного размельчают, лио- филизируют Из лиофилизированной роговицы готов т раствор, который обрабатывают коллагеназой или трипсином. После фильтрации раствор осаждают 75%-ным этанолом и вновь лиофилизируют. При необходимости лиофилизат раствор ют средой Игла или средой 199 до 0,1-1,0%-ной концентрации и добавл ют в культуру кера- тоцитов. Через 48 ч производ т подсчет клеток . Стимулирующий эффект на 50-70% от исходной попул ции получают через 48 ч после добавлени  раствора кератансульфата . Всего исследовано 50 проб на культуре кератоцитов от IV-VII пассажей.The animal's cornea is crushed, lyophilized. A solution is prepared from the lyophilized cornea, which is treated with collagenase or trypsin. After filtration, the solution is precipitated with 75% ethanol and again lyophilized. If necessary, the lyophilisate is dissolved with Eagle's medium or medium 199 to 0.1-1.0% concentration and added to keratocyte culture. After 48 h, cells were counted. A stimulating effect of 50-70% of the initial population is obtained 48 hours after the addition of the keratan sulfate solution. A total of 50 samples of keratocytes from IV-VII passages were investigated.

Пример 1. В культуру кератоцитов от IV пассажа (посевна  концентраци  10 кл/мл) добавл ют 0,1%-ный раствор кератансульфата в количестве 0,5 мл к 1,5 млExample 1. A keratan sulfate 0.1% solution in an amount of 0.5 ml to 1.5 ml was added to a keratocyte culture from passage IV (inoculum concentration 10 cells / ml) in an amount of 0.5 ml.

культуральной среды, содержащей 1% сыворотки крупного рогатого скота. Через 72 ч культивировани  подсчитывают количество клеток на приборе Морфомат Количество клеток на 48% больше, чем в контроле.culture medium containing 1% bovine serum. After 72 h of cultivation, the number of cells on a Morphomat device is counted. The number of cells is 48% more than in the control.

Дл  контрол  в культуру кератоцитов от IV пассажа (посевна  концентраци  104 кл/мл) добавл ют 0,1%-ный физиологический раствор в количестве 0,5 мл к 1,5 мл культуральной среды Через 48 ч культивировани  количество клеток не измен етс  от исходной посевной плотности Аналогичные результаты получены во всех контрольных опытах.For control, keratocytes from passage IV (culture of 104 cells / ml) are added to a culture of 0.1% physiological saline in an amount of 0.5 ml to 1.5 ml of culture medium. After 48 hours of culture, the number of cells does not change from the original seed density Similar results were obtained in all control experiments.

Пример 2.В культуру кератоцитов от IV пассажа (посевна  концентраци  104 кл/мл) добавл ют 0,5 мл 0,5%-ного раствора кератансульфата к культурной среде, содержащей 1% сыворотки крупного рогатого скота. Через 72 ч культивировани  отмечаетс  увеличение числа клеток на 60% по сравнению с посевной концентрацией.Example 2. In a keratocyte culture from passage IV (104 cell concentration / ml), 0.5 ml of 0.5% keratan sulfate solution was added to the culture medium containing 1% bovine serum. After 72 hours of cultivation, the number of cells increased by 60% compared with the seed concentration.

Пример 3. В культуру кератоцитов от VII пассажа (посевна  концентраци  104 кл/мл) добавл ют 0,5 мл 1%-ного расОExample 3. To a culture of keratocytes from passage VII (seeding concentration 104 cells / ml) 0.5 ml of 1% raO was added.

с  с with with

ЈьЈ

0000

оabout

твора кератансульфата к культуральной среде , еодержащёй 1 % сыворотки крупного рогатого скота. Через 96 ч культивировани  отмечаетс  увеличение числа клеток на 70% по сравнению с посевной концентрацией.solution of keratan sulfate to the culture medium containing 1% cattle serum. After 96 hours of cultivation, the number of cells increased by 70% compared with the seed concentration.

Пример 4. Кролику породы Шиншилла весом 3,5 кг под местной анестезией сде- ланы разрезы роговицы, Проводитс  инстилл ци  1 %-ного раствора кератансульфата 3 раза в день по 2 капли. Через 7 дней после операции отмечаетс  активаци  кератоцитов в зоне разреза, количество их увеличено, по вл етс  молодой коллаген.Example 4. A 3.5-kg Chinchilla rabbit under local anesthesia was used to make corneal incisions. Instillation of 1% keratan sulfate solution 3 times a day, 2 drops. 7 days after surgery, keratocytes are activated in the incision area, their number is increased, young collagen appears.

Сравнительна  морфометри  опытных и контрольный препаратов показывает уве0A comparative morphometry of the experimental and control preparations shows an increase.

5five

личение площади и числа клеток в опыте в 1,5 раза по сравнению с контролем.the area and number of cells in the experiment is 1.5 times compared with the control.

Клинические испытани  у больных с послеоперационным отеком роговицы показывают положительное действие препарата на репарацию роговицы после кератотомии.Clinical trials in patients with postoperative corneal edema show a positive effect of the drug on corneal repair after keratotomy.

Использование изобретени  позволит улучшить стимул цию клеток пораженной роговицы.The use of the invention will improve the stimulation of cells of the affected cornea.

Claims (1)

Формула изобретени Invention Formula Способ стимул ции репарации роговицы путем инстилл ции раствора на роговицу , отличающийс  тем, что, с целью сокращени  срока, в качестве раствора используют 0,1-1,0%-ный раствор кератансульфата .A method of stimulating corneal repair by instillation of a solution on the cornea, characterized in that, in order to shorten the period, a solution of 0.1-1.0% keratan sulfate is used as a solution.