SU1479515A1 - Method of producing immobilized bacterial cells - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к биотехнологии, конкретно к способам получени  микробных клеток-деструкторов анионных поверхностно-активных веществ. Целью изобретени   вл етс  упрощение процесса и повышение активности иммобилизованных клеток при деструкции анионных поверхностно-активных веществ. Способ заключаетс  в иммобилизации бактериальных клеток путем смешивани  водной суспензии клеток - деструкторов анионных поверхностно-активных веществ PSEUDOMONAS AERUGINOSA 1 С или P.ALCALIGENES TR с анионообменным поливинилспиртовым или поликапроамидным волокном, содержащим химически закрепленный флокул нт, и проведении св зывани  при модуле ванны 20-30, температуре 28-33°С в течение 20-30 мин. При этом поливинилспиртовое или поликапроамидное волокно содержит 1-1,5 моль полиэтиленимина и/или полиэпоксидоамина на 1г волокна, а его обработку осуществл ют водной суспензией микробных клеток с концентрацией 0,6-1,0 ед. оптической плотности. Способ упрощает процесс иммобилизации бактериальных клеток и позвол ет увеличить их активности при деструкции анионных поверхностно-активных веществ в 4-6 раз. 1 з.п. ф-лы, 1 табл.The invention relates to biotechnology, and specifically to methods for the production of microbial cells-destructors of anionic surfactants. The aim of the invention is to simplify the process and increase the activity of immobilized cells during the destruction of anionic surfactants. The method consists in immobilizing bacterial cells by mixing an aqueous suspension of cells — destructors of the anionic surfactants PSEUDOMONAS AERUGINOSA 1 C or P.ALCALIGENES TR with anion-exchange polyvinyl alcohol or polycaproamide fiber containing flocculated flocculation pattern; , temperature 28-33 ° C for 20-30 minutes. At the same time, polyvinyl alcohol or polycaproamide fiber contains 1-1.5 mol of polyethyleneimine and / or polyepoxidamide per g fiber, and its processing is carried out with an aqueous suspension of microbial cells with a concentration of 0.6-1.0 units. optical density. The method simplifies the process of immobilization of bacterial cells and allows increasing their activity during the destruction of anionic surfactants by 4-6 times. 1 hp f-ly, 1 tab.

Description

(21)4278459/28-13(21) 4278459 / 28-13

(22)02.06.87(22) 06/02/87

(46) 15.05.89. Бкш. № 18(46) 05/15/89. Bksh. Number 18

(71)Ленинградский институт текстильной и легкой промышленности(71) Leningrad Institute of Textile and Light Industry

им. С.М. Кироваthem. CM. Kirov

(72)А.Б.Лобова, И.И.Шамолина, С.С.Ставска , Л.А.Таранова и О.С.Рад- ченко(72) A. B. Lobov, I. I. Shamolin, S. S. Stavsk, L. A. Taranov and O. S. Radchenko

(53) 577.15(088.8)(53) 577.15 (088.8)

(56)Синицыи А.А. и др. Иммобилизаци  дрожжей Saccharomyces cerevisiae на алюмоборосиликатных стекловолокнах . Биотехнологи  , 1986, К 3,(56) Sinitsy A.A. et al. Immobilization of Saccharomyces cerevisiae on aluminoborosilicate glass fibers. Biotechnologists, 1986, K 3,

с. 66-69.with. 66-69.

Патент США № 4177107, кл. С 07 G 7/02, 1979.U.S. Patent No. 4,177,107, cl. C 07 G 7/02, 1979.

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММОБИЛИЗОВАННЫХ БАКТЕРИАЛЬНЫХ КЛЕТОК(54) METHOD FOR OBTAINING IMMOBILIZED BACTERIAL CELLS

(57)Изобретение относитс  к биотехнологии , конкретно к способам получени  микробных клеток-деструкторов анионных поверхностно-активных веществ . Целью изобретени   вл етс  упрощение процесса и повышение активнести иммобилизованных клеток при деструкции анионных поверхностно-активных веществ. Способ заключаетс  в иммобилизации бактериальных клеток путем смешивани  водной суспензии клеток-деструкторов анионных поверхностно-активных веществ Pseudomonas aeruginosa 1C или P. alcaligenes TR с анионообменным поливинилспиртовым или поликапроамидным волокном, содержащим химически закрепленный флоку- л нт, и проведении св зывани  при модуле ванны 20-30, температуре 28-33°С в течение 20-30 мин. При этом голи- винилспиртовое или поликапроамидное волокно содержит 1-1,5 мель полиэти- ленимина и/или полиэпоксидоамина на 1 г волокна, а его обработку осуществл ют водной суспензией микробных клеток с концентрацией 0,6-1,0 ед. оптической плотности. Способ упрощает процесс иммобилизации бактериальных клеток и позвол ет увеличить их активности при деструкции анионных поверхностно-активных веществ в 4- 6 раз. 1 з.п. ф-лы, 1 таол.(57) The invention relates to biotechnology, specifically to methods for producing microbial cells-destructors of anionic surfactants. The aim of the invention is to simplify the process and increase the activity of immobilized cells during the destruction of anionic surfactants. The method consists in immobilizing bacterial cells by mixing an aqueous suspension of the cells-destructors of the anionic surfactants Pseudomonas aeruginosa 1C or P. alcaligenes TR with anion-exchange polyvinyl alcohol or polycaproamide fiber containing chemically fixed flocculant and conducting linking and conducting linking. 30, temperature 28-33 ° C for 20-30 minutes. At the same time, golivinil alcohol or polycaproamide fiber contains 1-1.5 microns of polyethyleneimine and / or polyepoxide of amine per 1 g of fiber, and its processing is carried out with an aqueous suspension of microbial cells with a concentration of 0.6-1.0 units. optical density. The method simplifies the process of immobilization of bacterial cells and allows to increase their activity during the destruction of anionic surfactants 4-6 times. 1 hp f-ly, 1 taol.

ЈJ

vJvJ

СЈSЈ

Изобретение относитс  к биотехнологии , в частности к получению иммобилизованных микробных клеток-дест- ,рукторов анионных поверхностно-активных веществ (АПАВ), которые могут быть использованы как катализаторы со специфической и контролируемой активностью в очистке вредных промыш- ленных выбросов р да химических производств .The invention relates to biotechnology, in particular, to the production of immobilized microbial cells, destinations, anionic surfactants (APAS), which can be used as catalysts with specific and controlled activity in the purification of harmful industrial emissions from a number of chemical plants.

Цель изобретени  - упрощение процесса и повышение активности иммобилизованных клеток при деструкции анионных поверхностно-активных веществ.The purpose of the invention is to simplify the process and increase the activity of immobilized cells during the destruction of anionic surfactants.

Способ получени  иммобилизованных клеток деструкторов АПАВ заключаетс  в смешивании водной суспензии клеток Pseudomonas alcaligenes TR (ВКПМ В-2981) или Pseudomonas aeruginosa 1C с пористым адсорбентом - анионоThe method of obtaining immobilized cells of the APAS destructors consists in mixing an aqueous suspension of Pseudomonas alcaligenes TR cells (VKPM B-2981) or Pseudomonas aeruginosa 1C with a porous adsorbent - anion

3- 3-

обменным полипиштлспиртовым или по- пикамроамидным волокном, содержащим химически закрепленный флокул нт полиэтиленимин и/или полизпоксидо- амин в количестве 1,0-1,5 моль на 1 г адсорбента, а иммобилизацию осуществл ют при модуле ванны 20-30, температуре 28-ЗЗ С в течение 20- 30 мин. Предпочтительно использовать водную суспензию клеток с концентрацией 0,6-1,0 единиц оптической плотности .exchange polypentine alcohol or pyramide amide fiber containing chemically fixed floc nt polyethylenimine and / or polyispoxide amine in the amount of 1.0-1.5 mol per 1 g of adsorbent, and immobilization is carried out at a bath module of 20-30, temperature 28-Z3 C for 20-30 minutes It is preferable to use an aqueous suspension of cells with a concentration of 0.6-1.0 units of optical density.

Поливинилспиртовое или поликапро- амидное волокно, 1 г которого содержит 1-1,5 моль химически закрепленного флокул нта, обладает повышенным сродством к микробным клеткам-деструкторам анионных поверхностно-активных веществ за счет включени  поли- этиленимина и/или полиэпоксидоамина в структуру носител . Это позвол ет осуществл ть иммобилизацию клеток в течение 20-30 мин в м гких услови х без использовани  сложного оборудовани , необходимого дл  -облучени  Закрепление микробной клетки на некотором рассто нии от волокнистой матрицы через содержащиес  в волокне молекулы химически св занного полиэтиленимина и/или полиэпоксидоамина обеспечивает этой клетке большую подвижность, чем если бы последн   находилась в массе полимера, улучшает доступ к ней субстрата, способствует эффективной работе фермент ной системы иммобилизованной микробной клетки и полному сохранению ее активности.Polyvinyl alcohol or polycaproamide fiber, 1 g of which contains 1-1.5 moles of chemically fixed flocculant, has an increased affinity for microbial destructive cells of anionic surfactants due to the inclusion of polyethylenimine and / or polyepoxide of amine in the support structure. This allows the cells to be immobilized for 20-30 minutes under mild conditions without using the complex equipment necessary for irradiation. The microbial cell is fixed at some distance from the fibrous matrix through the molecules of chemically bound polyethylenimine and / or polyepoxidamine contained in the fiber. provides this cell with greater mobility than if the latter were in the polymer mass, improves the access of the substrate to it, contributes to the efficient operation of the enzyme system of the immobilized micro hydrochloric cells and complete preservation of its activity.

Использование предлагаемого способа позвол ет упростить процесс за (счет устранени  стадии радиационной полимеризации, а также повысить активность иммобилизованных клеток при деструкции анионных поверхностно- активных веществ от 1,5-3,6 (при пол ном сохранении активности клеток) до 9,2-15,3 мг деструктированных АПАВ на 1 мг клеток, т.е. в 4-6 раз.Using the proposed method allows to simplify the process by (eliminating the stage of radiation polymerization, as well as increasing the activity of immobilized cells during the destruction of anionic surfactants from 1.5-3.6 (with complete preservation of cell activity) to 9.2-15 , 3 mg of degraded APAS per 1 mg of cells, i.e., 4-6 times.

Способ иллюстрируетс  следующими примерами. The method is illustrated by the following examples.

Пример 1. Анионообменное по- ливинилспиртовое волокно (1 г), содержащее химически закрепленный полиэтиленимин в количестве 1 моль/г, обрабатывают   течение 20 мин водной суспензией микробной культуры P.al- caligenes TR (ВКПМ В-2981) (20 мл) с концентрацией клеток 0,6 ед. оптической плотности при 28 С. ВолокноExample 1. Anion-exchange polyvinyl alcohol fiber (1 g) containing chemically fixed polyethyleneimine in an amount of 1 mol / g is treated for 20 minutes with an aqueous suspension of microbial culture of P. caligenes TR (VKPM B-2981) (20 ml) with concentration cells 0.6 units optical density at 28 C. Fiber

00

5five

))

5 five

5 five

00

5 five

00

00

высушивают нл воздух, а т л т ем промывают дистиллированной водой. Содержание клеток, иммобилизованных на волокне , составл ет 12 мг/г. Активность клеток, иммобилизованных на волокне, 9,2 мг деструктированного АПАВ на мг клеток (таблица).air is dried, and washed with distilled water. The content of cells immobilized on the fiber is 12 mg / g. The activity of cells immobilized on the fiber, 9.2 mg of degraded anionic surfactants per mg of cells (table).

П р и м е р 2. Анионообменное по- ливинилспиртовое волокно (1 г), содержащее химически закрепленный по- лиотиленимин в количестве 1,3 моль/г, обрабатывают в течение 25 мин водной суспензией микробной культуры P.alca- ligenes TR (25 мл) с концентрацией клеток 0,8 ед. оптической плотности при температуре 30°С... Волокно высушивают на воздухе, а затем промывают дистиллированной водой. Содержание клеток, иммобилизованных на волокне, составл ет 15 мг/г. Активность клеток , иммобилизованных на волокне, 9,6 мг деструктированного АПАВ на 1 мг клеток.PRI mme R 2. Anion-exchange polyvinyl alcohol fiber (1 g) containing 1.3 mol / g of chemically fixed polyotyleneimine is treated for 25 minutes with an aqueous suspension of microbial culture of P. alchigenes TR (25 ml) with a cell concentration of 0.8 units. optical density at a temperature of 30 ° C ... The fiber is dried in air, and then washed with distilled water. The content of cells immobilized on the fiber is 15 mg / g. The activity of cells immobilized on the fiber is 9.6 mg of the destructed anionic surfactants per 1 mg of cells.

П р и м е р 3. Анионообменное по- ливинилспиртовое волокно (1 г), содержащее химически закрепленный полиэтиленимин в количестве 1,5 моль/г, обрабатывают в течение 30 мин водной суспензией микробной культуры P.alca- ligenes TR (30 мл) с концентрацией клеток 1,0 ед. оптической плотности при 33°С. Волокно высушивают на воздухе , а затем промывают дистиллированной водой. Содержание клеток, иммобилизованных на волокне, составл ет 21 мг/г. Активность клеток, иммобилизованных на волокне ,11,8 мг деструктированного АПАВ на 1 мг клеток.PRI me R 3. Anion-exchange polyvinyl alcohol fiber (1 g) containing chemically fixed polyethylenimine in an amount of 1.5 mol / g is treated for 30 minutes with an aqueous suspension of microbial culture of P. alcienes TR (30 ml) with a cell concentration of 1.0 units. optical density at 33 ° C. The fiber is dried in air and then washed with distilled water. The content of cells immobilized on the fiber is 21 mg / g. The activity of cells immobilized on the fiber is 11.8 mg of the destructed anionic surfactants per 1 mg of cells.

П р и м е р 4. Анионообменное Поливинилспиртовое волокно (1 г), содержащее химически закрепленный полиэтиленимин в количестве 0,6 моль/г обрабатывают в течение 20 мин водной суспензией микробной культуры P.alca- igenes TR (20 мл) с концентрацией клеток 0,6 ед. оптической плотности при 28°С. Волокно высушивают на воздухе , а затем промывают дистиллированной водой. Содержание клеток, иммобилизованных на волокне, составл ет 6 мг/г. Активность клеток, иммобилизованных на волокне снижаетс  в два раза - до 5,0 мг деструктированного АПАВ на 1 мг клеток.PRI me R 4. Anion-exchange Polyvinyl alcohol fiber (1 g) containing chemically fixed polyethylenimine in an amount of 0.6 mol / g is treated for 20 minutes with an aqueous suspension of microbial culture of P. alcaigenes TR (20 ml) with a cell concentration 0.6 units optical density at 28 ° C. The fiber is dried in air and then washed with distilled water. The content of cells immobilized on the fiber is 6 mg / g. The activity of cells immobilized on the fiber is halved - to 5.0 mg of degraded anionic surfactants per mg of cells.

Анионообменное Поливинилспиртовое (поликапроамидное) волокно, содержащее флокул ит в количестве более 1,5 моль на 1 грамм, обладает низкой прочностью и повышенной хрупкостью,Anion-exchange Polyvinyl alcohol (polycaproamide) fiber containing flocculate in an amount of more than 1.5 mol per 1 gram, has low strength and increased fragility,

no-irony исппль u H iT) его ;ш  пммобн- пизлшш микробных клеток представл етс  нецелесообразным.no-irony is u h iT) it; w microbial microbial cells seem impractical.

Пример 5, Анионообмонное по- ливишшспнртовое( 1 г) волокно, содержащее химически закрепленный по- лиэтиленимин в количестве 1,3 моль/г, обрабатывают в течение 30 мин водной суспензией микробной культуры P.aeru- ginosa 1C (30 мл) с концентрацией клеток 0,9 ед. оптической плотности, при 30°С. Волокно высушивают на воздухе , а затем промывают.дистиллированной водой. Содержание клеток, им- мобилизованных на волокне, составл ет 23 мг/г. Активность клеток, иммобилизованных на волокне, равна 15,5мг деструктированного АПАВ на 1 мг клеток .Example 5 Anion-abonance poly-phytonic (1 g) fiber containing 1.3 mol / g chemically fixed polyethylenimine is treated for 30 minutes with an aqueous suspension of microbial culture of P. aeruginosa 1C (30 ml) with a cell concentration 0.9 units optical density at 30 ° C. The fiber is dried in air and then washed with distilled water. The content of cells immobilized on the fiber is 23 mg / g. The activity of cells immobilized on the fiber is equal to 15.5 mg of degraded anionic surfactants per 1 mg of cells.

П р и м е р 6. Анионообменное попивинилспиртовое волокно (1 г),содержащее химически закрепленный по- лиэпоксидоамин в количестве 1,2 моль/г, обрабатывают в течение 25 мин водной суспензией микробной культуры P.alcaligenes TR (25 мл) с концентрацией клеток 0,8 ед. оптической плотности при 30°С. Волокно высушивают на воздухе, а затем промы- вают-дистиллированной водой. Содержание клеток, иммобилизованных на волокне , составл ет 18 мг/г. Активность клеток, иммобилизованных на волокне, 11,2 мг деструктированного АПАВ на 1 мг клеток.PRI me R 6. Anion exchange popivinyl alcohol fiber (1 g) containing 1.2 mol / g of chemically fixed polyepoxidamine is treated with an aqueous suspension of microbial culture of P.alcaligenes TR (25 ml) for 25 minutes cells 0.8 units optical density at 30 ° C. The fiber is dried in air and then washed with distilled water. The content of cells immobilized on the fiber is 18 mg / g. The activity of cells immobilized on the fiber is 11.2 mg of the destructed anionic surfactants per 1 mg of cells.

Пример 7. Анионообменное поликапроамидное волокно (1 г), содержащее химически закрепленный по - лиэпоксидоамин в количестве 1, 1 моль/г, обрабатывают в течение 20 мин водной суспензией микробной культуры P.aeruginosa 1C (20 мл) с концентрацией клеток 0,7 ед. оптической плотности при 28°С.Волокно высушивают на воздухе,а затем промывают .дистиллированной водой.Содержание клеток,иммобилизованных на волокне, составл ет 13 мг/г. Активность клеток, иммобилизованных на волокне, 9,1 мг дест- руктированного АПАВ на мг 1 клеток.Example 7. Anion-exchange polycaproamide fiber (1 g) containing 1, 1 mol / g chemically fixed polyepoxidamine in an amount of 1a / 1 is treated with an aqueous suspension of microbial culture of P.aeruginosa 1C (20 ml) with a cell concentration of 0.7 units . optical density at 28 ° C. The fiber is dried in air and then washed with distilled water. The content of cells immobilized on the fiber is 13 mg / g. The activity of cells immobilized on the fiber is 9.1 mg of degraded anionic surfactants per mg 1 cells.

П р и м е р 8. Анионообменное поликапроамидное волокно (1 г), содержащее химически закрепленный по- лиэпоксидоамин в количестве 1,0 моль/г обрабатывают в течение 20 мин водной суспензией микробной культуры P.alcaligenes TR (25 мл) с концентрацией клеток 0,6 ед. оптической плотностиPRI me R 8. Anion-exchange polycaproamide fiber (1 g) containing chemically fixed polyepoxidamine in an amount of 1.0 mol / g is treated for 20 minutes with an aqueous suspension of microbial culture of P.alcaligenes TR (25 ml) with a cell concentration 0.6 units optical density

5 five

5 о 5 o

5five

0 5 0 0 5 0

5 five

при 28°С. Волокно высушивают на воздухе , а затем промывают дистиллированной водой. Содержание клеток, иммобилизованных на волокне, составл ет 12 мг/г. Активность клеток, иммобилизованных на волокне 9,3 мг деструктированного АПАВ на 1 мг клеток.at 28 ° C. The fiber is dried in air and then washed with distilled water. The content of cells immobilized on the fiber is 12 mg / g. The activity of cells immobilized on a fiber is 9.3 mg of degraded anionic surfactants per 1 mg of cells.

П р и м е р 9. Анионообменное поликапроамидное волокно (1 г), содержащее химически закрепленный по- лиэтиленимин в количестве 1,2 моль/г, обрабатывают в течение 25 мин водной суспензией микробной культуры P.alcaligenes TR (30 мл) с концентрацией клеток 0,8 ед. оптической плотности при 30°С. Волокно высушивают на воздухе , а затем промывают дистиллированной водой. Содержание клеток, иммобилизованных на волокне, составл ет 15 мг/г. Активность клеток, иммобилизованных на волокне, 9,9 мг деструктированного АПАВ на мг клеток.PRI me R 9. Anion-exchange polycaproamide fiber (1 g) containing 1.2 mol / g of chemically fixed polyethyleneimine is treated for 25 minutes with an aqueous suspension of microbial culture of P.alcaligenes TR (30 ml) with a concentration of cells 0.8 units optical density at 30 ° C. The fiber is dried in air and then washed with distilled water. The content of cells immobilized on the fiber is 15 mg / g. The activity of the cells immobilized on the fiber is 9.9 mg of degraded anionic surfactants per mg of cells.

Пример 10. Анионообменное поликапроамидное волокно (1 г), содержащее химически закрепленный по- лиэтиленимин в количестве 1 ,4 моль/г, обрабатывают в течение 30 мин водной суспензией микробной культуры P.aeruginosa 1C (30 мл) с концентрацией клеток 1,0 ед. оптической плотности при 33°С. Волокно высушивают на воздухе , а затем промывают дистиллированной водой. Содержание клеток, иммобилизованных на волокне, составл ет 22 мг/г. Активность клеток, иммобилизованных на волокне, 14,2 мг деструктированного АЛАВ на 1 мг клеток.Example 10. Anion-exchange polycaproamide fiber (1 g) containing 1, 4 mol / g of chemically fixed polyethylenimine is treated for 30 minutes with an aqueous suspension of microbial culture of P.aeruginosa 1C (30 ml) with a cell concentration of 1.0 units . optical density at 33 ° C. The fiber is dried in air and then washed with distilled water. The content of cells immobilized on the fiber is 22 mg / g. The activity of cells immobilized on the fiber, 14.2 mg of degraded ALAV per 1 mg of cells.

Пример 11. Анионообменное поливинилспиртовое волокно (1 г), содержащее химически закрепленный полиэтиленимин и полиэпоксидоамин в количестве 1,3 моль/г, обрабатывают в течение 25 мин водной суспензией микробной культуры P.alcaligenes TR (28 мл) с концентрацией клеток 0,9ед. оптической плотности при 30°С. Волокно высушивают на воздухе, а затем промывают дистиллированной водой. Содержание клеток, иммобилизованных на волокне, составл ет 21 мг/г. Активность клеток, иммобилизованных на волокне, 12,6 мг деструктированного АПАВ на 1 мг клеток.Example 11. Anion-exchange polyvinyl alcohol fiber (1 g) containing chemically fixed polyethylenimine and polyepoxidoamine in an amount of 1.3 mol / g, is treated for 25 minutes with an aqueous suspension of microbial culture of P.alcaligenes TR (28 ml) with a cell concentration of 0.9 units. optical density at 30 ° C. The fiber is dried in air and then washed with distilled water. The content of cells immobilized on the fiber is 21 mg / g. The activity of cells immobilized on the fiber is 12.6 mg of the destructed anionic surfactants per 1 mg of cells.

Пример 12. Анионообменное поликапроамидное волокно (1 г), содержащее химически закрепленные полиэтиленимин и полиэпоксидоамин в количестве 1,2 моль/г, обрабатываютExample 12. Anion-exchange polycaproamide fiber (1 g), containing chemically fixed polyethyleneimine and polyepoxidamine in the amount of 1.2 mol / g, is treated

в ic iPHiif1 }() млн водной гуспензней микробной куиьтуры P.aeruginosa 1C (26 мл) с концентрацией кчеток 1,0ед оптической плотности при 33°С. Во- покно высушивают на воздухе, а затем промывают дистиллированной водой . Содержание клеток, иммобилизованных па волокне, составл ет 20 мг/г Активность клеток, иммобилизованных на волокне, равна 13,4 мг деструкти- рованного ЛПЛВ на мг клеток.in ic iPHiif1} () million water suspensions of microbial fluid P.aeruginosa 1C (26 ml) with a concentration of 1.0 counts of optical density at 33 ° C. Air dry and then rinse with distilled water. The content of cells immobilized on fiber fibers is 20 mg / g. The activity of cells immobilized on the fiber is equal to 13.4 mg of degraded LPLV per mg of cells.

Пример ы 13-24. Иммобилизацию провод т, как описано в примерах 1-12, варьиру  содержание ПЭИ и/или IDA в составе гюликапроамидного (13-18 примеры) ипи поливинилспирто- вого (19-24) волокон.Example s 13-24. Immobilization is carried out as described in examples 1-12, varying the content of PEI and / or IDA in the composition of the hycaproamide (13-18 examples) of polyvinyl alcohol (19-24) fibers.

Примеры 25-32. Иммобилизацию провод т, как описано в примерах 1-12, измен   модуль волны (объем суспензии в 1 мг, добавленный на 1 г волокна), температуру, продолжительность иммобилизации и концентрацию клеток в суспензии.Examples 25-32. Immobilization was carried out, as described in examples 1-12, by modifying the wave modulus (suspension volume of 1 mg, added per 1 g of fiber), temperature, duration of immobilization, and cell concentration in suspension.

Диализ данных примера 25 показывает , что уменьшение модул  обработки (соответственно, объема суспензии в 1 мл необходимого дл  обработки 1 г волокна) до 15 приводит к снижению количества клеток, закрепл емых на волокне, вследствие недостаточного количества обрабатывающей суспензии и неравномерности обработки носител . Увеличение модул  до 35 (пример 26) нецелесообразно, поскольку при возрастании объема обрабатывающей суспензии волокно (при прочих равных услови х иммобилизации) сорбирует - в силу своей анионообменной емкости и структурных особенностей - такое же количество клеток, как и при модуле 30 (пример 3).The dialysis data of example 25 shows that reducing the treatment module (respectively, the suspension volume in 1 ml of 1 g of fiber required for processing) to 15 leads to a decrease in the number of cells attached to the fiber due to insufficient treatment suspension and uneven processing of the carrier. An increase in the modulus to 35 (example 26) is impractical because with an increase in the volume of the suspension processing fiber (other things being equal immobilization) it absorbs — due to its anion-exchange capacity and structural features — the same number of cells as in module 30 (example 3) .

Уменьшение концентрации клеток в суспензии до 0,4 ед. опт. плотности при модуле обработки 20 (пример 27) не обеспечивает высокое содержание, клеток на волокне вследствие их недостаточного количества в исходной суспензии, тогда как использование дл  иммобилизации суспензий с повышенной концентрацией клеток (пример 28), no-первых, тэтрудн ет процесс иммобилизации вследствие агрегировани  Пактерий в концентрированных растворах, во-вторых, в любом случае не удаетс  закрепл ть на волокне Kue.Tim г, количестве большем, чем почлол ю1 мкогтные и структурReducing the concentration of cells in suspension to 0.4 units. wholesale The density of the processing module 20 (Example 27) does not provide a high content of cells on the fiber due to their insufficient number in the initial suspension, while using immobilization of suspensions with an increased concentration of cells (Example 28), firstly, the process of immobilization due to aggregation The bacteria in concentrated solutions, secondly, in any case, can not be fixed on the fiber Kue.Tim g, more than the number of pulp and structures

00

5five

00

5five

00

5five

00

5five

ныс особенности предлагаемого носи- тен  .Now the features of the proposed nosyten.

Продолжительность обработки определ етс  периодом, после которого наступает равновесие между клетками, иммобилизованными на волокне и наход щимис  в свободном состо нии в суспензии . Следовательно, уменьшение времени контакта волокон с суспензией клеток (пример 29) не позвол ет достигнуть такого равновеси , вследствие чего на волокне успевает закрепитьс  необходимое количество клеток . После наступлени  равновеси  продолжение иммобилизации (увеличе- ние времени контакта клеток с волокном - пример 30) нецелесообразно, так как с носителем уже св залось такое количество клеток, которое максимально возможно при прочих равных услови х (пример 3).The duration of treatment is determined by the period after which an equilibrium occurs between cells immobilized on the fiber and in a free state in suspension. Therefore, reducing the contact time of the fibers with the cell suspension (Example 29) does not allow such an equilibrium to be achieved, as a result of which the necessary number of cells is fixed on the fiber. After equilibrium, the continuation of immobilization (an increase in the time of cell contact with the fiber — Example 30) is impractical because the carrier has already associated such a number of cells that is maximum possible under other equal conditions (Example 3).

Аналогичные закономерности наблюдаютс  и при уменьшении (ниже 28°С) либо при увеличении (выше 33°С) температуры иммобилизации (примерь 31 и 32).Similar patterns are observed with a decrease (below 28 ° C) or with an increase (above 33 ° C) immobilization temperature (example 31 and 32).

Описанные примеры (дл  удобства сравнени ) приведены дл  ПВС волокна , содержащего ПЭИ в количестве 1,0 и 1,5 моль/г, и микробной культуры P.alcaligenes TR. Однако подобные закономерности распростран ютс  и на все прочие виды волокон, которые приведены в примерах 1-24, а также оба вида микробных культур.The described examples (for convenience of comparison) are given for PVA fiber containing PEI in the amount of 1.0 and 1.5 mol / g, and microbial culture of P.alcaligenes TR. However, such patterns apply to all other types of fibers, which are given in examples 1-24, as well as both types of microbial cultures.

Активности бактерий-деструкторов АПАВ определ ют по изменению концентрации АПАВ (додецилсульфата натри  - дл  культуры P.aeruginosa 1C и ал- килбензолсульфаната - дл  культуры P.alcaligenes TR) в водном растворе колориметрически по реакции с мети- леновым синим и выражают в 1 мг снижени  концентрации соответствующего АПАВ на 1 мг свободных или иммобилизованных клеток. При этом содержание клеток в водном растворе АПАВ подбирают равным количеству клеток, иммобилизованных на г волокна, iThe activities of the bacteria-destructors of anti-surfactants are determined by the change in the concentration of anti-surfactants (sodium dodecyl sulfate for P.aeruginosa 1C culture and alkylbenzenesulfonate for P.alcaligenes TR culture) in an aqueous solution colorimetrically by reaction with methylene blue and expressed as 1 mg reduction. the concentration of the corresponding anionic surfactants per 1 mg of free or immobilized cells. The content of cells in an aqueous solution of anionic surfactants is chosen equal to the number of cells immobilized per g of fiber, i

Таким образом, использование предлагаемого способа позвол ет упростить процесс за счет исключени  стадии радиационной полимеризации и повысить активность иммобилизованных клеток при деструкции АПАВ в 4-6 раза - от 1,5-3,6 до 9,2-15,3 мг деструктиро- ванного АПАВ на 1 мг клеток, поскольку активность клеток в известном спогобе при пммпбмди ьшин сохран етс , а в предлагаемом возрастает в 4- 6 раз .Thus, the use of the proposed method allows to simplify the process by eliminating the stage of radiation polymerization and increase the activity of immobilized cells during the destruction of anionic surfactants 4-6 times - from 1.5-3.6 to 9.2-15.3 mg of degraded AAL on 1 mg of cells, since the activity of the cells in the well-known procedure at PMmpmbdin remains, and in the proposed increases by 4-6 times.

Claims (2)

1. Способ получени  иммобилизованных бактериальных клеток, заключающийс  в смешивании водного раствора клеток бактерий с пористым ионообменным синтетическим адсорбентом, инкубации смеси дл  закреплени  клеток на адсорбенте и промывании адсорбента водным раствором, отличающийс  тем, что, с целью упрощени  процесса и повышени  активности иммобилизованных клеток при деструкции анионных поверхностно-активных1. A method of producing immobilized bacterial cells, which consists in mixing an aqueous solution of bacteria cells with a porous ion-exchange synthetic adsorbent, incubating the mixture to fix the cells on the adsorbent and washing the adsorbent with an aqueous solution, characterized in that, in order to simplify the process and increase the activity of immobilized cells during destruction anionic surfactants 00 веществ, иммобилизации подвергают клетки Pseudomonas aeruginosa 1C или P.alcaligencs ВКПМ В-2981, в качестве адсорбента используют анионооб- менное поливигашспиртовое или поли- капроамидное волокно, содержащее 1,0-1,5 моль полиэтиленимина и/или полиэпоксидоамина на 1 г волокна, а инкубацию провод т в течение 20- 30 мин при 28-33°С, устанавлива  соотношение суспензии клеток - адсорбент , равным 20-30 мл на 1 г адсорбента .Substances immobilized are cells of Pseudomonas aeruginosa 1C or P.alcaligencs VKPM B-2981, anion exchange polyvigash alcohol or polycaproamide fiber containing 1.0-1.5 mol polyethylenimine and / or polyepoxide of amine per 1 g of fiber is used as an adsorbent The incubation is carried out for 20-30 minutes at 28-33 ° C, the ratio of the cell suspension to the adsorbent is set to 20-30 ml per 1 g of the adsorbent. 2. Способ по п. отличающийс  тем, что концентрацию клеток в водной суспензии устанавливают равной 0,6-1,0 единицам оптической плотности.2. The method according to claim 1, wherein the concentration of cells in the aqueous suspension is set to 0.6-1.0 units of optical density.