SU1386910A1 - Method of prognosing progress of pathologic process in children in brain concussion cases - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к медицине , точнее к детской травматологии, касаетс  способов прогнозировани  исхода сотр сени  головного мозга у детей. Цель изобретени  - повьтение точности прогнозировани  при легкой черепной травме. Дл  этого суспензию порции крови и смеси 96%-ного этанола и трихлорэтана в соотношении 1:1 вртр хивают и инкубируют в ультратермостате при 60°С 15 мин. Фильтруют дл  осаждени  белков, к фильтрату добавл ют дистиллированную воду, выдерживают до расслоени  фракций. Используют верхнюю фракцию с очищенными желчными кислотами. Качественное определение желчных кислот осуществл ют с помощью восход щей тонкослойной хроматографии на силикагеле. П тна желчных кислот идентифицируют в УФ-лучах (360 нм). слThis invention relates to medicine, more specifically to pediatric traumatology, and to methods for predicting the outcome of brain damage in children. The purpose of the invention is to increase the accuracy of prediction in case of mild cranial trauma. For this, a suspension of a portion of blood and a mixture of 96% ethanol and trichloroethane in the ratio of 1: 1 vr is incubated and incubated in an ultrathermostat at 60 ° C for 15 minutes. It is filtered to precipitate proteins, distilled water is added to the filtrate, and is held until the fractions are stratified. Use the upper fraction with purified bile acids. Qualitative determination of bile acids is carried out by ascending thin layer chromatography on silica gel. Bile acid patches are identified in UV light (360 nm). cl

Description

00 00 Од00 00 Od

соwith

Изобретение относитс  к медицине 8 частности к детской травматологии, ц касаетс  способов прогнозировани  исхода сотр сени  головного мозга у детей.The invention relates to medicine 8, in particular, to pediatric traumatology, c relates to methods for predicting the outcome of brain damage in children.

Цель изобретени  - повьппение точности прогнозировани  при легкой черепно-мозговой травме.The purpose of the invention is to improve the prediction accuracy in mild traumatic brain injury.

Способ осуществл етс  следующим образом.The method is carried out as follows.

К 1,0 мл сыворотки крови, вз той у больного в течение первых суток Йосле травмы, добавл ют 30 мл смеси 96 -кого.1этанолтрихлорэтана. Смесь 6°-ного этанола и трихлорэтана беру Ь соотношении 1:1. Полученную суспензию встр хивают, затем инкубируют в ультратермостате при 60°С в течение 15 мин, фильтруют дл  удалени  осаж- денньк белков, например через «бумажный фильтр. Осадок белков на фильтре Промывают 10 мл смеси 96 -ного зта- Вол-трихлорэтана (1:1). Затем к фильтрату добавл ют 5 мл дистиллированно Воды. Смесь встр хивают 1 мин и ос- Тавл ют на 15 мин до полного расслоени  фракций. Верхн   этанольновод- на  фракци  содержит очищенные желч - вые кислоты, ее используют. Нижнюю фракцию, котора  состоит из трихлорэтана с удаленными примес ми, отбрасывают . Ползгченный экстракт желчных кислот вьтаривают досуха на роторном Испарителе. Осадок раствор ют в 0,3 мл бутанола. В осадке содержатс  свободные и конъюгированные желчные кислоты. To 1.0 ml of blood serum, taken from the patient during the first day of Yosle injury, add 30 ml of a mixture of 96-eth. Ethanol trichloroethane. I take a mixture of 6 ° ethanol and trichloroethane at a 1: 1 ratio. The resulting suspension is shaken, then incubated in an ultrathermostat at 60 ° C for 15 minutes, filtered to remove precipitated proteins, for example through a paper filter. The precipitate of proteins on the filter Washed with 10 ml of a mixture of 96-th site-Vol-trichloroethane (1: 1). Then 5 ml of distilled water is added to the filtrate. The mixture was shaken for 1 minute and allowed to stand for 15 minutes until complete separation of the fractions. The upper ethanol-containing fraction contains purified bile acids, it is used. The bottom fraction, which consists of trichloroethane with impurities removed, is discarded. The bile acid pollen extract is dried on a rotary evaporator. The precipitate is dissolved in 0.3 ml of butanol. Free and conjugated bile acids are contained in the sediment.

Качественное определение желчных кислот осуществл етс  с помощью восход щей тонкослойной хроматографии на силикагеле. Дл  разделени  желчны кислот используют систему растворителей следующего состава: изооктан, дизопропиловый эфир, уксусна  кислота , изопропиловый спирт, этиленхло- рид, вода в соотношении 2:1:1:1: :1.:0,26.Qualitative determination of bile acids is carried out by ascending thin layer chromatography on silica gel. For bile acid separation, a solvent system of the following composition is used: isooctane, disopropyl ether, acetic acid, isopropyl alcohol, ethylene chloride, water in a ratio of 2: 1: 1: 1:: 1.: 0.26.

Хроматографию провод т на стекл нных пластинах размером 50x18 см, покрытых слоем силикагел  марки ЛС 5 (40 мкм фирмы Хемапол - Чехословаки  Толщина сло  0,25 мм. На пластину нанос т 0,1 мл экстракта желчных кислот , вьщеленного из сьторотки крови. Р дом с опытными образцами нанос т 0,02 мл смеси стандартных желчных кислот в концентрации 1 мг/ мл. Посл разделени  пластинку высушивают наChromatography was carried out on glass plates 50x18 cm in size coated with a layer of silica gel of the brand LS 5 (40 µm from Hemapol - Czechoslovakia. The layer thickness was 0.25 mm. 0.1 ml of bile acids extracted from blood flow was applied to the plate. with test samples, 0.02 ml of a mixture of standard bile acids at a concentration of 1 mg / ml is applied. After separation, the plate is dried on

воздзгхе, опрыскивают 0,1%-ным раствором концентрированной серной кислоты :В 96°-ном , этаноле. П тна желчных кислот идентифицируют в УФ-свете (360 нм).Sprayed with a 0.1% solution of concentrated sulfuric acid: In 96 ° ethanol. Bile acid patches are identified in UV light (360 nm).

Дл  количественного определени  содержани  желчных кислот в сыворотке крови методом спектрофлуориметрии участки п тен силикагел  с желчными кислотами (опытные и контрольные) снимгшт с пластинки, раствор ют в 2 мл концентрированной серной кислоты , инкубируют в ультратермостате в течение 1 ч при . Силикагель осаждают центрифугированием при 1500 g Надосадочна  жидкость содержит желчные кислоты в концентрированной серной кислоте, Флуориметрию провод т при длине волны 470 нм. Количество желчных кислот в сыворотке крови вычисл ют по формулеTo quantify serum bile acids by spectrofluorimetry, spots of silica gel with bile acids (test and control) taken from a plate, dissolved in 2 ml of concentrated sulfuric acid, are incubated in an ultrastatic column for 1 hour at. Silica gel is precipitated by centrifugation at 1500 g. The supernatant contains bile acids in concentrated sulfuric acid. Fluorimetry is carried out at a wavelength of 470 nm. The amount of bile acids in the serum is calculated by the formula

л - 92 Эопl - 92 Eop

А -,BUT -,

JCTJct

где А - количество желчных кислот, мкмоль/л;where a is the amount of bile acids, µmol / l;

Эдп - экстинкци  опытного образца;Edp - the extinction of the prototype;

Э. - зкстинкци  стандартного образца .E. - Standardization Sample.

Пример 1. Больна  Б.С., 11 лет, поступила в РДКБ 18.05.84. Травму получила 18.05.84 - ударилась головой об угол двери. Сознание не тер ла: затем была головна  боль, повторна  рвота. Диагноз при поступлении: сотр сение головного мозга. При неврологическом обследовании- обнаружен горизонтальный нистагм, умеренные вегетативные нарушени  - бледность кожных покровов, потливость , лабильность пульса. Рент- :генограммы .черепа без патологических изменений. Глазное дно без патологических изменений. Клинический анализ крови и мочи без изменений. Приведенные данные не позвол ют прогнозировать исход травмы. Желчные кислоты в сыворотке крови не обнаружены.Example 1. Ill BS, 11 years old, entered the RCCH 18.05.84. Received injury 05/18/84 - hit her head on the corner of the door. Consciousness did not lose: then there was headache, repeated vomiting. Diagnosis at admission: brain forgiveness. Neurological examination revealed horizontal nystagmus, moderate vegetative disorders - pallor of the skin, sweating, pulse lability. Rent-: genograms of the skull without pathological changes. The fundus of the eye without pathological changes. Clinical analysis of blood and urine without changes. These data do not allow to predict the outcome of the injury. Bile acids in the serum were not detected.

Отсутствие желчных кислот в сыворотке крови Позволило прогнозировать неблагопри тный исход сотр сени  головного мозга с отдаленными последстви ми . Последующее обследование через 1 год вы вило наличие жалоб на головные боли, нарушение сна, повышенную утомл емость, возбудимость.Absence of bile acids in the blood serum Allowed to predict the unfavorable outcome of brain damage with long-term consequences. A follow-up examination after 1 year revealed the presence of complaints of headaches, sleep disturbances, increased fatigue, and excitability.

снижение успеваемости, снижение зрени , тошноту, снижение аппетита.decrease in progress, decrease in sight, nausea, decrease in appetite.

Пример 2. Больной Г.Д., 12 лет, поступил в РДКБ 01.12.82. Травму получил 01. 02.82- на бегу врезалс  в бетонный столб, сознание не , затем по вилась головна  боль и тошнота. Рвоты не было. Диагноз пр поступлении: сотр сение головного мозга. При неврологическом обследовании обнаружен горизонтальный нистагм, умеренно выраженные вегетативные расстройства - бледность, потливость, лабильность пульса. Рент генограммы черепа без патологических изменений Глазное дно - без патологических изменений. Анализ крови и мочи в норме.Example 2. Patient GD, 12 years old, entered the Russian Children's Clinical Hospital on 01.12.82. I received an injury on 01. 02.82. I ran into a concrete pillar on the run, my mind didn’t, then there was headache and nausea. Vomiting was not. Diagnosis of admission: brain lesion. Neurological examination revealed horizontal nystagmus, moderately pronounced autonomic disorders - pallor, sweating, pulse lability. Roentgenogram rent without pathological changes. The fundus of the eye is without pathological changes. Blood and urine tests are normal.

Приведенные данные не позволили прогнозировать исход травмы. Путем исследовани  желчных кислот в сыворотке крови обнаружено их содержание в количестве 21,9. Обнаружение желчных кислот в сыворотке крови в незначительном количестве 21,9 мкмоль/л позволило прогнозировать неблагопри тный исход сотр сени  головного мозга с отдаленными последстви ми. Последующее обследование через год после травмы вы вило жалобы на снижение пам ти и нарушение сна.These data did not allow us to predict the outcome of the injury. By examining bile acids in the serum, their content was detected in an amount of 21.9. The detection of bile acids in the blood serum in an insignificant amount of 21.9 µmol / l made it possible to predict the unfavorable outcome of brain damage with long-term consequences. A follow-up examination a year after the injury revealed complaints of memory loss and sleep disturbance.

Пример 3. Больна  Е.Н, 8 лет, поступила в РДКБ 04.02.83. Травму получила 04.02.83 - толкнул мальчик, ударилась головой об стенку Сознание не тер ла, по вилась сонливость , головна  боль, двухкратна  рвота. Диагноз при поступлении: сотExample 3. Sick E.N., 8 years old, entered the RCCH 04.02.83. 04.02.83 was injured - the boy pushed, hit his head against the wall. Consciousness did not lose, drowsiness, headache, vomiting twofold appeared. Diagnosis at admission: honeycomb

Q Q

35 35

00

5five

00

р сение головного мозга. При неврологическом обследовании вы влен горизонтальный нистагм, бледность, гипергидроз, лабильность пульса. Про- веден1 ые клинические исследовани  крови и мочи существенных изменений не вы вили. Рентенограммы черепа без патологических измененш. Глазное дно без патологических изменений.brain growth. Neurological examination revealed horizontal nystagmus, pallor, hyperhidrosis, pulse lability. Conducted clinical studies of blood and urine did not reveal significant changes. Roentgenograms of the skull without pathological changes. The fundus of the eye without pathological changes.

Claims (1)

Проведенные исследовани  не позволили прогнозировать исход травмы. Желчные кислоты в сыворотке крови обнаружены в количестве 40,9мкмоль/л. Обнаружение в сыворотке крови желчнЕлх кислот в количестве 40,9 мкмоль/л позволило прогнозировать благопри т-, ный исход сотр сени  головного мозга - без отдаленных последствий. Повторное обследование через 1 год после травмы никаких жалоб или отклонений в состо нии центральной нервной системы не вы вило. Формула изобрете-ни Studies have not allowed to predict the outcome of the injury. Bile acids in serum were detected in the amount of 40.9 μmol / l. The detection of 40.9 µmol / l in the serum of gallic acids made it possible to predict the beneficial outcome of brain effusion - without long-term consequences. A follow-up examination 1 year after injury did not reveal any complaints or abnormalities in the state of the central nervous system. Invention Formula Способ прогнозировани  течени  патологического продесса у детей при сотр сении головного мозга путем био,- хнмического исследовани  биологичес-. кой жидкости, отличающийс  тем, что, с целью повышени  точности прогнозировани  при лех кой черепно- мозговой травме в сыворотке крови, в течение суток после травмы определ ют содержание желчных кислот и при их уровнеот 40,9до 138,8 мкмоль/л прогнозируют благопри тное, а при уровне 21,9 мкмоль/л и ниже - неблагопри тное течение процесса.A method for predicting the course of pathological progression in children when brain is compressed by a biological, chemical, biological research. This fluid, characterized in that, in order to improve the prediction accuracy of serum in the presence of a lethal traumatic brain injury, the content of bile acids is determined within 24 hours after the injury and they predict a favorable level at 40.9 to 138.8 µmol / l. , and at a level of 21.9 μmol / l and below, an unfavorable course of the process.