SU134213A1 - Способ серологической идентификации бактерий - Google Patents

Description

Современные методы серологического анализа бактерий, учитывающие суммарный эффект реакции антиген-антитело на большом числе клеток, не пригодны дл  регистрации этой реакции на отдельных клетках , что необходимо при изучении см ешанных культур, изменчивости бактерий и дл  идентификации возбудителей в патологическом материале .

Предлагаемые;, способ позвол ет проводить серологический анализ отдельных бактериальных клеток. Сущность изобретени  заключаетс  в том, что примен етс  аноптральна  микроскопи  бактериальных клеток , обработанных гомологичной антисывороткой и нммергированных в желатиновом геле с показателем светопреломлени , равным соответствующему показателю протопласта клетки. Каплю исследуемоГ взвеем (жидкой культуры или смыва бактериальной массы с поверхности плотной питательной среды) нанос т на покровное стекло и смешивают с каплей соответствующей антисыворотки. Сразу же после смешивани  покровное стекло (каплей книзу) накладывают на предметное стекло, предварительно покрытое тонким слоем (не более 0,2 лш) желатинового гел  с соответствующим показателем светопреломлени . Приготоьленный препарат исследуют в аноптральном микроскопе. При этом. в случае положительной реакции антиген-антитело, клетки имеют вид оптически пустых тел, окаймленных утолн1енпой и блест п1,ей клеточной стенкой.

Дл  приготовлени  желатинового гел  навеска сухой очищенной желатины добавл етс  к определенному объему слабощелочного 0,1 М раствора NaCl и оставл етс  на несколько часов до полного набухани  желатины. Затем осторожным подогреванием желатину раствор ют и просветл ют путем кип чени  с  ичным белком и удалени  хлопьев фильтрацией или центрифугированием расплавлен1 ой массы. После

№ 134213- 2

установлени  нейтральной реакции расплавленную желатину разливают по пробиркам и стерилизуют дробно текучим паром. Показатель светопреломлени  находитс  в следуюи1ем соотношении с концентрацией желатины (в %):

Концентраци 

желатины (в %)10152025303540

Показатель светопреломлени 1 ,350 1,358 1,366 1,374 1.382 1,390 1,397

П род м е т и 3 о б р е те и ;i  

Способ серологической идентификации бактерий в живом состо нии , отличающийс  тем, что, с целью регистрации реакции антиген-антитело на изолированных бактериальных клетках, обрабатывают бактерии гомологичной антисывороткой, а затем иммергируют в желатиновом геле с показателем светопреломлени , равным соответствующему показателю протопласта клетки, и микроскопируют в аноптральном микроскопе.