SU1188948A1 - Способ выделени фосфолипазы А2 из да кобры - Google Patents
Способ выделени фосфолипазы А2 из да кобры Download PDFInfo
- Publication number
- SU1188948A1 SU1188948A1 SU843718820A SU3718820A SU1188948A1 SU 1188948 A1 SU1188948 A1 SU 1188948A1 SU 843718820 A SU843718820 A SU 843718820A SU 3718820 A SU3718820 A SU 3718820A SU 1188948 A1 SU1188948 A1 SU 1188948A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- solution
- phospholipase
- ammonium
- acetic acid
- cobra
- Prior art date
Links
Landscapes
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
СПОСОБ ВЬЩЕЛЕНИЯ ФОСФОЛИПАЗЫ AJ , ИЗ ЯДА КОБРЫ, вк.гаочаюш;нй растворение да в буферном растворе с последующим центрифугированием, выделе- / нием целевого продукта путем аффинной хроматографии, элюции и лиофилизации , отличающийс тем, что, с целью упрощени процесса и повьшени степени очистки целевого продукта, растворение провод т в 0,045-0,055 М буферном растворе уксуско-кислого аммони при рй 7,4-7,6, хроматограф1го осуществл ют на пенткл-агарозе Б -r.oj же бу зерном растворе, а злюцию в 0,45-0,55 М растворе уксусно-кислого амьюни и лиофилизируют полученньм раствор двгкды. $
Description
Изобретение относитс к ферментной промь1шленности, в частности к получению чистой фосфолипазы А из да кобры.
Целью изобретени вл етс упрощение процесса и повышение степени очистки целевого продукта.
Пример 1. К 1,0г да кобры добавл ют 8,0 мл раствора 0,045 М уксусно-кислого аммони с удельной электропроводностью 4, S см, рН 7,4, смесь медленно перемешивают 4 ч при 4°С. Растворенный д цед1Трифугируют при 5000 об/мин при в течение 30 мин. Осадок выбрасывают., насадочную жидкость используют дл хроматографии. На уравновешенную с 0,045 М раствором уксусно-кислого
аммони (удельна электропроводность 4,4-10 S , рН 7,4) колонку с пентил-агарозой (размеры колонки
00 00 2,1 f-i6 см) нанос т раствор да. Ког- лонку злюируют с 0,045 М раствором
со уксусно-кислого аммони с удельной
4 электропроводностью 4,4 S ,
00 рН 7,4 со скоростью 30 мл/ч, отбирают фракции по 15 мл. Оптическую плотность элюата. регистрируют непрерывно с помощью Увикорд-11. Остальные компоненты да кобры кроме фосфолипазы А в данных услови х проход т колонку, а фосфолипаза А, имеюща оптиму 4 гидрофобности и активно : сти при рЦ.7,5, св зываетс на пентил-агарозе и ее элюируют градиентом ионной силь концентрацией уксуснокислого аммони 0,45 М с удельной электропроводнйстыо 32-10 S см , рН 7,4. Фракции, имеющие фосфолипазную активность, объедин ют (выход 92 мл) и лиофилизируют дважды.
Характеристика препарата: выход 65,1%. Степень очистки 25 раз.
..П ример2. К 1,0г да кобры добавл ют 8,0 мл раствора 0,050 М уксусно-кислого аммони с удельной электропроводностью 4,510 S см рН 7,5, смесь медленно перемешивают в течение 4 ч при . Растворенный д центрифугируют при 5000 об/мин при в течение 30 мин. Осадок выбрасьшают, надосадочную жидкость используют дл хроматографии. На уравновешенную с 0,050 М раствором уксусно-кислого аммони (удельна электропроводность 4, S см рН 7;5) колонку с пентш1 агарозой (размеры колонки 2,1 К 16 см) нанос т раствор да.
Колонку промывают с 0,050 М раствором уксусно-киелого аммони с ;-удельной электропроводностью 4,5)С к 10 S , рН 7,5 со скоростью 30 мл/ч, отбирают фракции по 15 мл. Оптическую плотность элюата регистрируют непрерывно с помощью Увикорда11 , Остальные компоненты да кобры кроме фосфолипазы А в данных услови х проход т колонку, а фосфолипаза А-, имеюща оптимум гидрофобности и активности при рН 7,5, св зываетс на пентил-агарозе и ее элюируют 0,50 М раствором уксусно-кислого ам;Мони с удельной электропроводно-,стью 34-10 S cM SpH 7,5. Фракции имеющие фосфолипазную активность, объедин ют (объем 90 мл) и лиофилизируют дважды.
Выход препарата 65,3% и степень очистки 25,2 раз.
Примерз. К 1,0г да добавл ют 8,0 мл раствора 0,055 М уксуснокислого аммони с удельной электропроводностью 4,6,-10 S см , рН 7,6 смесь медленно перемешивают 4 ч при . Растворенный д центрифугируют при 5000 об/мин при 4С в течение 30 мин. Осадок выбрасывают, надосадочную жидкость используют дл хроматографии . На ура вновешенную с 0,055 раствором уксусно-кислого аммони (удельна электропроводность 4,6)С iflO S , рН 7,6) колонку с пентил-агарозой (размеры колонки 2,1 х16) нанос т раствор да.
Колрн1су промь1вают с 0,055 Д раствором уксусно-кислого аммони с удельной электропроводностью 4,6 0 S см , рН 7,6 со скоростью 30 мл/ч, собирают фракции по 15 мп. Оптическую плотность элюата регистрируют непрерывно с помощью Увикорда-11 . Остальные компоненты да кроме фосфолипазы Ag в данных услови х проход т колонку, афосфолипаза А„, имеюща оптимум гидрофобности и активности при рН 7,5 св зываетс на пентил-агарозу и ее элюируют 0,55 М раствором уксусно-кислого аммони с удельной электропроводностью 36.10 S см , рН 7,6. Фракции, содержащие фосфолипазную активность, объедин ют (объем 92 мл) и лиофилизирзпот дважды.
Выход препарата 65,0% и степень очистки25 раз.
Технико-экономическа эффектна-. ность использовани предлагаемого способа выражаетс в возможности количественного вьщелени фосфолипазы А из да кобры простым и дешевым способом, а остальной д без фосфс- .липазы А можно использовать дл получени других биоактивных белков или после высушивани сохранить.
Claims (1)
- СПОСОБ ВЬЩЕЛЕНИЯ ФОСФОЛИПАЗЫ ИЗ ЯДА КОБРЫ, включающий растроре-
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU843718820A SU1188948A1 (ru) | 1984-04-02 | 1984-04-02 | Способ выделени фосфолипазы А2 из да кобры |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU843718820A SU1188948A1 (ru) | 1984-04-02 | 1984-04-02 | Способ выделени фосфолипазы А2 из да кобры |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1188948A1 true SU1188948A1 (ru) | 1990-11-30 |
Family
ID=21110565
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU843718820A SU1188948A1 (ru) | 1984-04-02 | 1984-04-02 | Способ выделени фосфолипазы А2 из да кобры |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU1188948A1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008020741A2 (fr) * | 2006-08-16 | 2008-02-21 | Wisdom Asset Company | Procédé permettant d'extraire la phospholipase a2 du venin d'agkistrodon blomhoffii ussuriensis |
-
1984
- 1984-04-02 SU SU843718820A patent/SU1188948A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Ансалон У.Р., Шамборапт О.Г., Мирошников А.И. Биоорганическа хк ми 3 (II) 1553-1559, 1977. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008020741A2 (fr) * | 2006-08-16 | 2008-02-21 | Wisdom Asset Company | Procédé permettant d'extraire la phospholipase a2 du venin d'agkistrodon blomhoffii ussuriensis |
| WO2008020741A3 (fr) * | 2006-08-16 | 2008-07-24 | Wisdom Asset Company | Procédé permettant d'extraire la phospholipase a2 du venin d'agkistrodon blomhoffii ussuriensis |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Thanh et al. | Isolation and characterization of the multiple 7S globulins of soybean proteins | |
| Rosenberg et al. | Multiple bovine thrombin components | |
| Burke | The purification of interferon | |
| JPH06794B2 (ja) | グルタミン酸レセプタ−阻害物質 | |
| DE69834742T2 (de) | Verfahren für extraktion und verwendung der schlüpf-flüssigkeit des atlantiklachses | |
| Myers | Trapped water of dental enamel | |
| EP2145896A2 (en) | Recovery of a heat shock protein | |
| SU1188948A1 (ru) | Способ выделени фосфолипазы А2 из да кобры | |
| KR100320394B1 (ko) | 멤브레인크로마토그래피시켜비타민-k의존형단백질을정제시키는방법 | |
| Synge et al. | Bound amino acids in protein-free extracts of Italian ryegrass | |
| US4027012A (en) | Process for the extraction of components having anticoagulant activity "in vivo" from snake venoms and products obtained | |
| EP0057359B1 (de) | Verfahren zur Herstellung von Kallikrein aus Schweinepankreas-Extrakten | |
| Gabius et al. | Identification of a cell cycle-dependent gene product as a sialic acid-binding protein | |
| Campargue et al. | Analysis of Hydroxyproline and Hydroxyproline-Arabinosides of Plant Origin by High-Performance Anion-Exchange Chromatography–Pulsed Amperometric Detection | |
| Pogell et al. | [32] Specific elution with substrate | |
| US4960756A (en) | Lectin like protein substance, method of obtaining same and anti-tumor agent comprising same | |
| JP4565230B2 (ja) | グリコシル化および非グリコシル化タンパク質の分離法 | |
| FUNATSU et al. | Structure and Toxic Function of Ricin I Purification Procedures of Ricin D | |
| WO1990005181A1 (de) | REINIGUNG VON Cu/Zn-SUPEROXIDDISMUTASE | |
| CA1334390C (en) | Glycoprotein growth modulation materials | |
| KR20200022052A (ko) | 설파타아제 단백질을 정제하는 방법 | |
| JP3108767B1 (ja) | ｃｈｉｂ２型キチナーゼの製造法 | |
| SU1055732A1 (ru) | Способ выделени фактора роста нервной ткани из змеиного да | |
| EP0042560A2 (en) | A process for producing and obtaining anaphylatoxin- and cocytotaxin-containing leucotaxine preparations and of anaphylatoxin and cocytotaxin proteins in molecularly homogeneous, biologically active form | |
| JP4112236B2 (ja) | レクチンの分離精製方法並びに動物血漿固定化担体及びアフィニティーカラム |