SU1119689A1 - Method of processing sperm - Google Patents

Abstract

1. СПОСОБ ОБРАБОТКИ СПЕРМЫ , включающий ее разбавление синтетической средой, охлаждение до 2-4°С, эквилибрацию , добавление криопротектора, повторную эквилибрацию, замораживание и оттаивание , отличающийс  тем, что, с целью лучшего сохранени  оплодотвор ющей способности семени при обработке спермы птиц, эквилибрацию охлажденной спермы провод т в течение 30-50 мин, а повторную эквилибрацию с криопротектором - в течение 20-70 с. 2. Способ по п. 1, отличающийс  тем, что в качестве криопротектора берут NN-диметилацетамид в количестве 7,4-8% разбавл емой спермы. i1. METHOD FOR SPERM TREATMENT, including its dilution with synthetic medium, cooling to 2-4 ° C, equilibration, adding cryoprotectant, re-equilibration, freezing and thawing, characterized in that, in order to better preserve the fertilizing ability of the seed during sperm processing birds, equilibration of chilled sperm was carried out for 30-50 min, and re-equilibration with a cryoprotectant - within 20-70 s. 2. A method according to claim 1, characterized in that NN-dimethylacetamide in an amount of 7.4-8% diluted sperm is taken as a cryoprotectant. i

Description

QD 05 00.QD 05 00.

СО Изобретение относитс  к искусственному осеменению, в частности к замораживанию и оттаиванию спермы птиц. Известен способ обработки спермы птиц, заключающийс  в том, что сперму разбавл ют при комнатной температуре синтетической средой с криопротектором (этиленгликоль в конечной концентрации ), эквилибрируют при 2-4°С в течение 50-70 мин, а потом замораживают. Оттаивание производ т в пенициллиновых флаконах в вод ной бане при 70-75°С в течение 7-10 с. Оплодотворенность  иц кур и гусынь, осемененных отта нной спермой, составл ет 60,9 и 78,5%, вывод молодн ка 41,6 и 64,2% соответственно Недостатком данной технологии  вл етс  то, что этиленгликоль не оказывает полного защитного эффекта от действи  сверхнизких температур при такой предварительной обработке спермы, на что указывает низкий процент вывода молодн ка. При увеличении времени взаимодействи  этиленгликол  со сперми ми, оплодотвор юща  способность их снижаетс  в 1,5-2,0 раза уже в период эквилибрации. Наиболее близким к изобретению по технической сущнос|ги,  вл етс  способ обработки спермы, вф1ючающий ее разбавление синтетической средой, охлаждение до 2-4°С эквилибрацию, добавление криопротектора, повторную эквилибрацию, замораживание и оттаивание 2. Однако при обработке известным способом спермы птиц снижаетс  оплодотвор юща  способность семени. Кроме того, при использовании в качестве криопротектора глицерина необходимы дополнительные затраты на удаление глицерина из отта нной спермы. Целью изобретени   вл етс  сохранение оплодотвор ющей способности семени при обработке спермы птиц. Указанна  цель достигаетс  тем, что согласно способу обработки спермы, включающему ее разбавление синтетической средой, охлаждение до 2 -4°С, эквилибрацию, добавление криопротектора, повторную эквилибрацию , замораживание и оттаивание, эквилибрацию охлажденной спермы провод т в течение мин, а повторную эквилибрацию с криопротектором провод т в течение 20-70 с. При этом в качестве криопротектора берут NN-диметилацетамид (ДМАА) в количестве 7,4-8% разбавл емой спермы. Способ осуществл к)т следующим образом . Свежеполученную сперму разбавл ют синтетической средой в соотнощении 1:1, помещают в камеру, охлажденную до 2-4°С, и выдерживают 30-50 мин, добавл ют ДМАА в количестве 7,4-8,0% и замораживают до -196°С в жидком азоте, оттаивание производ т в вод ной бане с температурой 50-56°С в течение с, ДМАА добавл ют за 20-70 с до замораживани . При искусственном осеменении кур криоконсервированной спермой предлагаемым способом, Оплодотворенность  иц по  ичной породе 94,6-77,7%, при выводе молодн ка в среднем 71,5%. Всего проинкубировано 1738  иц. При искусственном осеменении кур замороженной спермой, обработанной по предлагаемому способу, Оплодотворенность  иц выще по сравнению с известной технологичей 1 на 22,6%. Выще получен и вывод молодн ка 29,9%. При этом следует отметить , что на подготовку спермы, замороженной с ДМАА, дл  осеменени  12 кур затрачиваетс  одним человеком 1 мин. Следует отметить, что при осеменении кур м сных пород спермой, замороженной в соответствии с изобретением, получено 65,2% оплодотворенных  иц. При искусственном осеменении гусынь один раз в п ть дней спермой, разбавленной 1:3 синтетической средой и замороженной по предлагаемому способу, Оплодотворенность  иц была 83,8%, при выводе молодн ка 64,2%. При осеменении гусынь спермой, замороженной по известной технологии 1, Оплодотворенность  иц составила только 70,6% при выводе молон ка 52,7%. Таким образом, разница по оплодотворениости  иц составила 13,2%, а по выводу молодн ка 11,5%. Пример. Свежеполученную сперму петухов разбавили синтетической средой в соотнощении 1:1, затем охладили до 2°С, выдержали при указанной температуре в течение 45 мин. После этого в разбавленную среду был добавлен ДМАА в количестве 8% разбавленной спермы. Эквилибрацию с криопротектором осуществл ли в течение 50 с, после чего сперму замораживали до -196°С в жидком азоте. Перед оплодотворением провод т оттаивание в вод ной бане при 55°С в течение 7 с. Кур данной породы осемен ли один раз в три дн  дозой 0,18-20 мл. Оплодотворенность  иц составила 83,5% при выводе молодн ка в среднем 71,5%. В таблице приведены показатели оплодотворенности  иц и вывода молодн ка, полученные по предлагаемому способу обработки и известному. Предлагаемый способ обработки спермы птиц обеспечивает высокую Оплодотворенность  иц как при осеменении кур  ичных , так и м сных пород, а также при осеменении гусынь.CO The invention relates to artificial insemination, in particular, to freezing and thawing of semen of birds. A known method for treating semen of birds is that sperm is diluted at room temperature with a synthetic medium with a cryoprotectant (ethylene glycol at a final concentration), equilibrated at 2-4 ° C for 50-70 minutes, and then frozen. Thawing is carried out in penicillin vials in a water bath at 70-75 ° C for 7-10 s. The fertilization of the hens of chickens and geese inseminated with thymotic sperm is 60.9% and 78.5%, the hatching of young people is 41.6% and 64.2%, respectively. The disadvantage of this technology is that ethylene glycol does not have a complete protective effect ultralow temperatures with such sperm pretreatment, as indicated by the low rate of hatching. With an increase in the time of interaction of ethylene glycol with sperm, their fertilizing ability decreases 1.5-2.0 times already during the equilibration period. The closest to the invention by technical essence is the method of processing sperm, incorporating its dilution with synthetic medium, cooling to 2-4 ° C, equilibration, adding cryoprotectant, re-equilibration, freezing and thawing 2. However, when processed in a known manner, bird semen decreases fertilizing ability of the seed. In addition, when glycerol is used as a cryoprotectant, additional costs are required for the removal of glycerol from the secreted sperm. The aim of the invention is to preserve the fertilizing ability of the seed during the processing of semen from birds. This goal is achieved in that according to the method of processing sperm, including its dilution with synthetic medium, cooling to 2-4 ° C, equilibration, adding cryoprotectant, re-equilibration, freezing and thawing, equilibrating cooled sperm is carried out for min, and re-equilibration the cryoprotectant is held for 20-70 s. At the same time, NN-dimethylacetamide (DMAA) in the amount of 7.4-8% diluted sperm is taken as a cryoprotector. The method is implemented as follows. Freshly obtained semen is diluted with a synthetic medium at a ratio of 1: 1, placed in a chamber cooled to 2-4 ° C, and held for 30-50 min, DMAA is added in an amount of 7.4-8.0% and frozen to -196 C in liquid nitrogen, thawing is carried out in a water bath with a temperature of 50-56 ° C for s, DMAA is added 20-70 s before freezing. In artificial insemination of chickens with cryopreserved sperm using the proposed method, fertilization of eggs on egg breed is 94.6-77.7%, and when young are removed, an average of 71.5%. A total of 1738 eggs were incubated. In artificial insemination of chickens with frozen sperm, processed by the proposed method, the fertilization of eggs is higher than the known technology 1 by 22.6%. The output of the young was 29.9% higher. It should be noted that the preparation of sperm, frozen with DMAA, for insemination of 12 chickens is spent by one person for 1 min. It should be noted that during insemination of chicken meat by sperm frozen in accordance with the invention, 65.2% of fertilized eggs were obtained. In the artificial insemination of geese once every five days with sperm diluted 1: 3 with synthetic medium and frozen according to the proposed method, the fertilization of eggs was 83.8%, and at the time of hatching, the young were 64.2%. In insemination of geese with sperm frozen using the known technology 1, fertilization of eggs amounted to only 70.6%, while milk was removed to 52.7%. Thus, the difference in fertilization of eggs amounted to 13.2%, and according to the conclusion of the young, 11.5%. Example. Freshly received rooster sperm was diluted with a synthetic medium in a ratio of 1: 1, then cooled to 2 ° C, kept at the same temperature for 45 minutes. After that, DMAA was added to the diluted medium in an amount of 8% diluted sperm. Equilibration with the cryoprotectant was performed for 50 s, after which the sperm was frozen to -196 ° C in liquid nitrogen. Before fertilization, thawing is carried out in a water bath at 55 ° C for 7 s. Chickens of this breed are inseminated once every three days with a dose of 0.18–20 ml. Fertilization of eggs amounted to 83.5% with a young hatching average of 71.5%. The table shows indicators of fertilization of eggs and young hatching, obtained by the proposed method of treatment and known. The proposed method of processing sperm of birds provides high fertilization of eggs in the course of insemination of chicken, chicken and meat breeds, as well as in insemination of geese.

ПредлагаемыйProposed

по  ичной породеon breed

по м сной породеby sea breed

Известный (с этиленгликол ми )Known (with ethylene glycol)

71,571.5

83,5 65,283.5 65.2

41,641.6

60,960.9

Claims (2)

1. СПОСОБ ОБРАБОТКИ СПЕРМЬ1, включающий ее разбавление синтетической средой, охлаждение до 2—4°С, эквилибрацию, добавление криопротектора, повторную эквилибрацию, замораживание и оттаивание, отличающийся тем, что, с целью лучшего сохранения оплодотворяющей способности семени при обработке спермы птиц, эквилибрацию охлажденной спермы проводят в течение 30—50 мин, а повторную эквилибрацию с криопротектором — в течение 20—70 с.1. METHOD OF PROCESSING Sperm1, including its dilution with a synthetic medium, cooling to 2-4 ° C, balancing, adding a cryoprotectant, re-balancing, freezing and thawing, characterized in that, in order to better preserve the fertilizing ability of the seed during processing of bird sperm, balancing chilled sperm is carried out for 30-50 minutes, and re-balancing with cryoprotectant for 20-70 s. 2. Способ по π. 1, отличающийся тем, что в качестве криопротектора берут NN-диметилацетамид в количестве 7,4—8% разбавляемой спермы.2. The method according to π. 1, characterized in that as a cryoprotectant take NN-dimethylacetamide in the amount of 7.4-8% diluted semen. СО 05 00. СОСО 05 00. СО