SU1100306A1 - Питательна среда дл выращивани энтомопатогенных бактерий - Google Patents

Abstract

ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ ЭНТОМОПАТОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ,включающа  кукурузную муку В качестве источника углерода, источники азота и минеральных солей и водопроводную ВОДУ, отличающа с  тем, что, с целью увеличени  выхода бактерий , а также удешевлени  питательной среды, она содержит в качестве источника азота и минеральных солей отжим-т ную жидкость - отход переработки льна При следующем соотношении компонентов , мае.%: Кукурузна  мука 0,5-1 Отжимна  жидкость отход переработки 3-4(по сульна хому весу) Водопроводна  вода Остальное

Description

00

о л

Изобретение относитс  к микробиоогической промышленности-, в частноси к питательным средам дл  выращиваи  микроорганизмов - продуцентов бактериальных препаратов.

Известна питательна  среда, предтавл юща  собой мочильную жидкость, полученную при переработке льносолоы Г1 3 .

Однако эта питательна  среда не пригодна дл  выращивайи  энтомопатогенных бактерий, поскольку в качестве источника углерода она содержит в основном органические ннзкомолекул рныё кислоты (до 4000-500-0 мг/л) . Наиболее близкой к предлагаемой по технической сущности и достигаемому эффекту  вл етс  питательна  среда дл  выращивани  энтомопатогеннык бактерий 2, включающа  кукурузную муку в качестве -источника углерода, источники азота и минеральных солейи воду. Среда в качестве источника азота и минеральных вещёств содержит активный ил (в сухом . или жидком виде) при следующем соотношении компонентов:

Кукурузна  мука, г 10-15 Сухой активный ил,г 10-30 Вода водопроводна , млДо 1000 или . кукурузна  мука, г 10-15 жидкий активный ил,мл 250-750 Вода водопроводна ,мл До 1000 Сухой (жидкий) активный ил, получемый на заводах кормовых дрожжей, по своим питательным свойствам обладает ценными качествами: содержит 50% сырого протеина, витамины и минеральные элементы. , Питательные среды, содержащие активный ил заводов кормовых , приготавливают следующим образом .Отвешивают и высыпают в реактор нужное количество сухого ила или кукурузной муки (либо других продуктов или субпродуктов, содержащих полисахариды ) , в ту же емкость заливают по расчету водопроводную воду с температурой 30-40°С, перемешивают, устанавливают рН 7,8-8,0 при помощи 30%-ного раствора едкой щелочи. Кип т т 15 мин, перемешивают, при этом провер ют значение рН, которое должно составл ть 7,5-8,0, Полученную среду стерилизуют при или пропускают через установку непрерывной стерилизации.

После стерилизации рН среды должно быть в пределах 6,8-7,2. Полученную среду дл  ферментации с целью производства биомассы засевают жидкой посевной культурой (инокул том) в количестве 3-4% по отношению к ферментационной среде.

Однако известна  питательна  среда содержит парафины 1,9-2,9%, токсические и -дурнопахнущие продукты, образующиес  при кислотном гидролизе древесины, а азот доминирует в основном в виде микробной биомассы и  вл етс  трудноусво емым продуктом, что не позвол ет получить высокий выход бактерий. Кроме того, среда достаточно дорога .

О Целью изобретени   вл етс  увеличение выхода бактерий, а также удешевление питательной среды.

Поставленна  цель достигаетс  тем, что питательна  среда дл  выра5 щивани  энтомопатогенных бактерий, включающа  кукурузную муку 6 качестве источника углерода, источники азота и минеральньте соли и воду, содержит в качестве источника азота и минеральных солей отжимную жидкость отход переработки льна при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Кукурузна  мука 0,5-1,0

Отжимна  жидкость отход переработки

льна3-4(по сухому весу)

Водопроводна  вода Остальное

Сущность изобретени  заключаетс 

следующем.

Отжимна  жидкость содержит (сухое вещество) при следующем соотношении омпонентов, вес.%:

Сырой протеин 20-40

Минеральный остаток

(из них 30-40%) 8-20,0 Пектиновые вещества 2-3 Лигнин10-12

Целлюлоза14-25

Полисахариды3-4

Отжим из вымоченного льна получают в производственных услови х от 1-й пары вальцов отжимно-промывной машины, создающей Д авление на вымоченную льносолому (тресту) в пределах 40-80 кг/см поширине сло . Получаемый под высоким давлением вальцов экстракт льна содержит белковые и пектиновые вещества стебл  льна, которые не переход т свободно в мочильную жидкость при биологической мочке. При прохождении через вальцы отжимно-промывной машины ткани и клетки набухшей льносоломы разрываютс  и их содержимое переходит в отжимную жидкость, котора  может служить дл  микроорганизмов в соста-. ве питательной среды источником азота и углерода.

Количество отжимной жидкости в питательной среде регламентируетс  интересами производства препаратов на этой питательной среде. Эту величину удобно выражать через количество сухого вещества (в жидкой или высушенной отжимной жидкости). При содержании в питательной среде 1-2% отжимной жидкости (по сухому вещест- ву) в культуральной жидкости нарастание титра микробных тел не превышает 1,5-2,5 млрд/мл, что недостаточно . При увеличении концентрации отжимной жидкости до 6-7% (по сухому

Показатели

Ил БВК сухой 3 мае.% Кукурузна  мука 1 мас.%

Вода водопроводна  До 1000 мл

2,67+0,06/3,43+0,06

Примечание. Показатели накоплени  микроорганизмов при выращивании нц предлагаемой среде и на среде, прин той за прототип; в числителе дл  Bacillus thuringiensis var galleriae Jsak; в знаменателе - дл  Bacillus thuringiensic var dendro-r limus.

Кроме того, как показали исследовани , данна  питательна  среда с

веществу) и выше зат гиваетс  процесс вегетативного делени  клеток, зш едленно идет процесс спорообразовани , врем  формировани  свободных спор удлин етс  до 4-5 сут и вюие. . Сравнение предлагаемой питательной среды с известной (прототип) представлено в табл. 1.

таблица 1

Предлагаема  среда

Прототип

Осадок отжимной жидкости

сухой 3 мае.%

Кукурузйа  мука 0,5 мас.%

Вода водопроводна  До 100%

3,01+0,18/3,26±0,16 6,55/6,95 6,70/6,80

7,

7,40/7,80

выращенными на ней микроорганизмами характеризуетс  высокой инсектицидностью , также лучше поедаетс  насекомыми и гусеницами, что приводит к более высокой их гибели (например,

гусеницами овощной моли (galleria mellanella Z).

В табл. 2 приведены данные, показывающие вли ние питательной среды на инсектицидность бактерий.

Т а б л и ц а 2

2 млн,

46,7 200 тыс.

ae 22,2

2 млн.

42,2

Vair dendrolimus

200 тыс.

31,1 Пример. Отвешивают и высыпают в варочный аппарат высушенную от- 65

82,2

97,8 77,8 100,0

57,8

88/7

51,1

53,3

88,9 жимную жидкость в количестве 3% и кукурузную муку,в ту же емкость заливают по расчету водопроводную воду d температурой 30-40С, перемешивают, устанавливают рН 7,8-8,2 при помоЩи 30%-ного растбора едкого натра. Кип т т 15-20 мин, перемешивают, провер ют рН, значение которого должно составить около 7,4-7,8. Полученную среду .стерилизуют при 121-128 с или пропускают чер4з установку непрерывной стерилизации. После стерилизации рН среды должен быть в пределах 6,6-7,2. Полученную среду дл  ферментадии с целью производства биомассы засевают жидкой посевной культурой (инокул том) в количестве 4-5% по отношению к ферментационной среде. Используют культуру Bacillus thuringiensis var galleriae и var dendrolimus .

Результаты определени  эффективности отжимной жидкости в сравнении со средой активного или производства белкрвовитаминного концентрата (БВК) приведены в табл. 3.

Таблица 3

Claims (1)

1. ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ ЭНТОМОПАТОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ,включающая кукурузную муку в качестве ис точника углерода, источники азота и минеральных солей и водопроводную воду, отличающаяся тем, что, с целью увеличения выхода бактерий, а также удешевления питательной среды, она содержит в качестве источника азота и минеральных солей отжим-г иую жидкость - отход переработки льна При следующем соотношении компонентов , мае.%:

   Кукурузная мука 0,5-1 Отжимная жидкость отход переработки льна 3-4(по су- Водопроводная вода хому весу) Остальное м