SU1064954A1 - Способ экстракорпоральной детоксикации организма - Google Patents

Abstract

СПОСОБ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОЙ ДЕТОКСИКАЦИИ ОРГАНИЗМА путем использовани  взвеси изолированнь1х клеток печени, отделенных от крови полупроницаемой мембраной , отличающийс  тем, что, с .Целью повторного использовани  клеток печени, взвесь изолированных клеток печени в питательной среде помещают в замкнутые оболочки из полупроницаемой мембраны объемом 1,01 ,2 см , сформированные гранулы внос т в колонку, заполненную кровезаменителем, про . пускают через нее кровь, по окончании перфузсш гранулы отмывают и помещают в питательную среду дл  хранени .

Description

Од

1

;о

СП

4 Изобретение относитс  к медицине, в частно ти к гепатологии и токсикологии, и может быть использовано при лечении заболеваний и токсических поражени х печени с целью комле сации ее утраченных функций. Известен способ экстракорпоральной детокси кации организма путем использовани  взвеси изолированных клеток печеии, отделенных от крови полупроиицдемш мембраной 1. Однако .известный способ не всегда и не везде может быть использован в силу своей сложности, об зательного наличи  сложного оборудовани , т. е. центров, где имеютс  annaiраты искусственна  почка, перитонеального диализа. Кроме того, не всегда возможно провести вмешательство на брюшной полости (это перитонеальш ш диализ), так как имеетс  спаечный процесс в брюшной полости, которые ограш1чивак т возможность проведени  этой операции. Значит перитонеальный диализ имеет свои ограничени  и не всегда может быть .использован дл  лечени  больных с острой печеночнсж недостаточностью. При и щользовании этгих способов клеточна  взвесь аллогенной печени примен етс  всего лишь раз и затем выбрасываетс . Поэтому способ требует большо го количества заготовки биологического матери ала и запаса клеточной взвеси. Цель изобретени  - повторное использование клеток печени. Указанна  цель достигаетс  тем, что согласно способу экстракорпоральной детоксикаоди орга низма путем использовани  взвеси изолированных клеток печени, отделеннь1х от крови полупроницаемой мембраной, взвесь изолированных клеток печени и питательной среде помещают в замкнутые оболочки из полупроницаемой мембраны объемом 1,0-1,2 см , сформированные гранулы внос т в колонку, заполненную кровезаменителем, пропускают через нее кровь, по окончании перфузии гранулы отмывают Ч помещают в питательную среду дл  хранени . Способ осуществл ют следующим образом. Взвесь изолированных клеток печени (полученную ферментно-механическим способом) развод т в среде 199 до концентрации 210 (20 млн/мл), заполн ют ими .с.точной градуировкой и системой гибких сили коновых . Одновременно-Провод т подго товку полупроницаемой целлофановой пленки, рассекают ее на определенной формы квадраты, которые первоначально помещают в физиологический раствор, а затем перенос т в раствор диоцида .1:2000 с последующим промьшанием дастиллированной водой. Участок пленки как бы надевают на конец силиконового шланга и, отступив на 1 см от его конЦа, накладьшают лигатуру, после чего в эту полость ввод т 1 м клеточной взвеси и, зат гива  шгатуру, удал ют силиконовый шланг. Избыток пленки и шовHojro материала удал ют. Готов т 250-300 гранул и помещают их во флакон со средой 199. Производ  забор необходимого количества гранул, заполн ют ими колонку, через которую провод т перфузию крови. Дл  этих целей вьщел ют сосуды (артерию и вену) и катетеризируют дл  формировани  артериовенозного шунта. Колонку с гранулами подключают к шунту таким образом. Чтобы артериальна  кровь в колонку поступала снизу вве|рх, заполн   ее на всем прот мсенди, и выходила через верхнюю канюлю, котора  соедин етс  с венозной системой. Перфузию продолжают в течение 2 ч со скоростью 100-120 мл/мин. Затем колонку отключают от шунта и кровь возвращаетс  в систему. После этого осуществл ют промывку колонки и гранул и последние помещают на 1-2 сут в среду 199. Этим самым П) создаем все услови  дл  восстановлени  их запасов и ф)нкций, так как они наход тс  в культуральНйй среде, где есть все необходимые метаболиты.дл  их восстановлени  и обеспечени  жизнеспособности. Следовательно, клет-. ки могут восстановить свой метаболический балансИ могут быть использованы повторно дл  детоксикации крови. Кроме того, клетки i наход щиес  в гранулах (они подвергались обработке токсическими веществами), могут повышать свои детоксикационные свойства, как -бы трениру сь - отрабатыва  свою детоксикационную функцию. Метаболизиру  многие вещества, синтезиру  многие ферменты и метаболиты , клетка как бы приближена в данных услови х к объекту действи , т. е. биолошчес КИМ средам, и будет значительно больше вли ть на процессы восстановлени  равновеси  биологической среды, так как она находитс  в малых объемах . Поэтому процессы диффузии и осмоса, ультрафильтрации будут осуществл тьс  между гранулами- и средой зна штельно быстрее , чем Б системе аппарата Искусственна  почка. После сохранени  клеток в среде 199. их вновь помещают в колонку, последшою подключают к артериовенозному шунту и провод т перфузию в течение 1,5-2,0 ч. Затем колонку и гранулы промывают раствором Хенса и последние помещают в среду 199. Через 1-2 сут Гранулы вновь используютдл  операии детоксикации организма. Таким образом, ранулы используют 3-5 раз дл  детоксикации крови и организма по указанной методике, Проведены операции подключени  колонки гранулами у 3 больных 6 отравленными Cltt и печеночно-почечной недостаточностью. артериовенозному шунту подключают KortoHу объемом 350 мл, которую заполн ют граулами и кровезаменителем так, чтобы-артерильна  KjWBb заполн ла ее снизу. Отток крови

регулируют уровнем подъема крлонки (40-60 см) и скоростью кровотока. Перфузию провод т в течение 1,5-2,0 ч. Во врем  проведени  операции осуществл ют клиническое наблюдение а больными и через 30-60 мин забор крови :5

дл  биохимического исследовани . В результате проведени  операции установлено, что у больн1 1Х улучшаетс  общее состо ние (сознание, АД, Р1, частота дыхани ), больные станов тс  контактными , отвечают на вопросы. При биохимическом 10 контроле уменьшаетс  концентраци  токсических веществ на. 50-60% (аммиак, билирубин) и . повышаетс  концентраци  некоторых метаболитов на 20-40% (мочевина, холестерин). Все это . позвол ет сделать вывод о благопри тном тече- is НИИ клинико-лабораторных тестов контрол  у

больных и благопри тном вли нии проводимой . операции, что оказьшает существенное вли ние на исход заболевани .

Способ найдет широкое пртменение в отделе-; ни х интенсивной терапии дл  лечени  острой печеночной недостаточности при поражени х печени , использование его обеспечивает многократное эффективное применение взвеси изолированных клеток печени, оказьшает вли ние на степень детокСицируемой и метаболической функции изолированных клеток. Прсщесс o6pkзсюани  гранул позвол ет успешно отделить клетки от крови и предупредить анфилактические реакции и в то же врем  приблизил их к объекту действи  - биологическим жидкост м.

Claims (1)

1. СПОСОБ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОЙ ДЕТОКСИКАЦИИ ОРГАНИЗМА путем использования взвеси изолированных клеток печени, отделенных от крови полупроницаемой мембраной, отличающийся тем, что, с Целью повторного использования клеток печени, взвесь изолированных клеток печени в питательной среде помещают в замкнутые оболочки из полупроницаемой мембраны объемом 1,ΟΙ,2 см^ сформированные гранулы вносят в колонку, заполненную кровезаменителем, пропускают через нее кровь, по окончании перфузии гранулы отмывают и помещают в питательную среду для хранения.

   < 10645