SU1005791A1 - Method of including substances to liposoms - Google Patents
Method of including substances to liposoms Download PDFInfo
- Publication number
- SU1005791A1 SU1005791A1 SU813311712A SU3311712A SU1005791A1 SU 1005791 A1 SU1005791 A1 SU 1005791A1 SU 813311712 A SU813311712 A SU 813311712A SU 3311712 A SU3311712 A SU 3311712A SU 1005791 A1 SU1005791 A1 SU 1005791A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- liposomes
- internal volume
- solution
- glucose
- liposoms
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
- A61K9/1277—Processes for preparing; Proliposomes
Abstract
СПОСОБ ВКЛЮЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВ В ЛИПОСОМЫ путем добавлени спиртового раствора фосфолипидов в водный раствор исследуемого вещества с последующим отделением липосом от невключившегос материала, отличающийс тем, что, с целью увеличени внутреннего объема липосом, процесс включени веществ а липосомы провод т при температуре от -10 до -40 С в течение двух или более суток с послелук пшм нагреванием до комнатной темпёратурыMETHOD FOR INCLUDING SUBSTANCES IN LIPOSOMS by adding an alcohol solution of phospholipids to an aqueous solution of the test substance, followed by separating liposomes from non-included material, characterized in that, in order to increase the internal volume of liposomes, the incorporation process of liposomes is carried out at a temperature of from -10 to -40 C for two or more days with posleuk psm heating to room temperature
Description
ел ate
соwith
Изобретение относитс к биохимии, а именно к методам получени липосом, и может быть использовано в микробиологии фармакологии и медицине.The invention relates to biochemistry, in particular to methods for producing liposomes, and can be used in microbiology, pharmacology and medicine.
Известен способ приготовлени липосом путем введени эфирного раствора липидов в водную фазу, содержащую включаемое вещество, с последующим испарением эфира при нагревании l 1.There is a known method for preparing liposomes by introducing an ethereal lipid solution into the aqueous phase containing the substance to be included, followed by evaporation of the ether by heating l 1.
Однако данный способ имеет ограниченное применение из-за высокой температуры 55-60°С) водного раствора, включаемого вещества, из-за невозможности включать в липосомы термолабильные соединени .However, this method is of limited use due to the high temperature of 55-60 ° C) of an aqueous solution, the substance to be included, and the impossibility of including thermolabile compounds in liposomes.
Известен способ получени липосом, включающий приготовление спиртового раствора фосфсшипидов, введение этого раствора в водный раствор включаемого вещества и отделени образовавщихс липосом от невключившегос материала путем ультрацентрифугировани , диализа или гель-хроматографии 23. .A known method for producing liposomes involves preparing an alcohol solution of phosphospides, introducing this solution into an aqueous solution of the substance to be switched on and separating the resulting liposomes from the non-included material by ultracentrifugation, dialysis or gel chromatography 23.
Однако известным способом получают липосомы с небольшим внутренним объемом (около 4 мкл/мк моль липидов)- и, соответственно, с низким процентом включени исследуемого вещества.However, liposomes with a small internal volume (about 4 µl / µm mole of lipids) are obtained in a known manner - and, accordingly, with a low percentage of the test substance.
Целью изобретени вл етс увеличение внутреннего объема липосом.The aim of the invention is to increase the internal volume of liposomes.
Поставленна цель достигаетс тем, что, согласно способу введени вещества в липосомы путем добавлени спиртового раствора фосфолипидов в водный раствор исследуемого вещества с последующим отделением липосом от невключившегос материалаi процесс включени веществ в липосомы провод т при температуре от -10 до -40°С в течение двух или более суток. с последующим нагреванием до комнатной температуры.The goal is achieved according to the method of introducing a substance into liposomes by adding an alcoholic solution of phospholipids to an aqueous solution of the test substance, followed by separating liposomes from non-included material and incorporating substances into liposomes at -10 to -40 ° C for two or more days. followed by warming to room temperature.
Способ осуществл ют следующим образом .The method is carried out as follows.
П р и м е р. В 1 мл 96° этанолаPRI me R. In 1 ml of 96 ° ethanol
раствор ют 62 мг .дипальмитоилфосфагидилхолина , 23 мг холестерина и 1,6 мг62 mg of dipalmitoylphosphagidylcholine, 23 mg of cholesterol and 1.6 mg are dissolved
дицетилфосфата, 560 мкл этанольногоdiethyl phosphate, 560 μl of ethanol
.раствора липидов (80 мкмолей) щприцомa solution of lipids (80 mol) syringe
тонкой иглой ввод т в 8 мл раствора глюкозы - С (50 мкКи/мл) в 0,01 Мwith a fine needle injected into 8 ml of glucose solution - C (50 µci / ml) in 0.01 M
фосфатном буфере (рН 7,4). Об образовании липосом суд т по резкому помутнению раствора. Суспензию замораживают при температуре -40°С и хран -т вphosphate buffer (pH 7.4). The formation of liposomes is judged by the sharp turbidity of the solution. The suspension is frozen at -40 ° C and stored in
течение двух суток. По истечении этого срока препарат оттаивают при комнатной температуре и по 2 мл нанос т на хроматрграфическую колонку мм), заполненную сефадексом G-25 (грубый). Элюцию провод т 0,О1 М фосфатнь1м буфером рН 7,4, собира фракции объемом 5 мл. Выход липосом определ ют по помутнению раствора визуально и спектрофотометрически при 330 им. Фракции , содержащие;липосомы, объедин ют. Элюируемую свободную глюкозу-С 14 обнаруживают измерением радиоактивности во фракци х и также объедин ют. Измерение радиоактивности глюкозы-С в препаратах липосом и невключившейс глюкозы провод т с Помощью жидкостного сцинтилл ционного счетчика РЖС-2М, использу сцинтил тор .ЖС-8. Суммарный внутренний объем липосом определ ют по эффективности включени глюкозы-С в липосомы, выраженной в процентах. Расчет процента включени глюкозы-С в липосомы производ т исход из суммарной радиоактивности глюкозы-С в обеих фракци х. Процент включени глюкозы-С в липосомы был равен 8,06. Внуренний объем липосом составл л 8,06мкп for two days. After this period, the preparation is thawed at room temperature and 2 ml applied onto a chromatographic column, mm), filled with Sephadex G-25 (coarse). The elution was carried out with 0, O1 M phosphate buffer pH 7.4, and collecting 5 ml fractions. The yield of liposomes is determined by turbidity of the solution visually and spectrophotometrically at 330 nm. Fractions containing; liposomes are pooled. The eluted free glucose-C 14 is detected by measuring radioactivity in fractions and is also pooled. The measurement of the radioactivity of glucose-C in preparations of liposomes and non-glucose glucose is carried out using a RZHS-2M liquid scintillation counter using a sc. The total internal volume of liposomes is determined by the efficiency of glucose-C incorporation into liposomes, expressed as a percentage. The calculation of the percentage of glucose-C incorporation into liposomes is based on the total radioactivity of glucose-C in both fractions. The percentage of glucose-C incorporation into liposomes was 8.06. The internal volume of liposomes was 8.06 uF
. на 1 мкм ОЛЬ вз тых липидов. Дл липосом , полученных по известному способу, эти величины составили 3,43% и 3,43 мк соответственно.. 1 µm OLA lipids taken. For liposomes obtained by a known method, these values were 3.43% and 3.43 microns, respectively.
Способ позвол ет получать липосомы с большим внутренним объемом; чем в .известном способе. В таблице приведены данные сопоставительного анализа по определению внутреннего объема липосом, полученных предлагаемым и известным способом, т.е. включение глюкозы-С в липосомы до и после замораживани и оттаивани .The method allows to obtain liposomes with a large internal volume; than in the well-known method. The table shows the data of comparative analysis to determine the internal volume of liposomes obtained by the proposed and in a known manner, i.e inclusion of glucose-C in liposomes before and after freezing and thawing.
Без замораживани Without freezing
(известный способ)3016878О63,433,43(known method) 3016878О63,433,43
Замораживание (1 сут)4537887254,864,86 Замораживание 8О64 99556 (2 сут) Замораживан иа 8О19 82725 (3 сут)Freezing (1 day) 4537887254,864,86 Freezing 8О64 99556 (2 days) Freezing ia 8О19 82725 (3 days)
Двухсуточна инкубаци при комнатной температуре, без замораживани не приводитк увеличению внутреннего объема липосом.Two-day incubation at room temperature, without freezing, does not lead to an increase in the internal volume of liposomes.
Электронномикроскопическое изучениеElectron microscopic examination
Продолжение таблицьContinuation table
, липосом, полученных по предлагаемому способу, показало увеличение их размеров , по сравнению с липосомами, подученП ными известным способом, с Сохранением монобислойной структуры. 8,О6 8,О6 8.84 8,84, liposomes obtained by the proposed method, showed an increase in their size, compared with liposomes obtained by a known method, with the preservation of a monobiscular structure. 8, O6 8, O6 8.84 8.84
Claims (1)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU813311712A SU1005791A1 (en) | 1981-07-03 | 1981-07-03 | Method of including substances to liposoms |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU813311712A SU1005791A1 (en) | 1981-07-03 | 1981-07-03 | Method of including substances to liposoms |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU1005791A1 true SU1005791A1 (en) | 1983-03-23 |
Family
ID=20967007
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU813311712A SU1005791A1 (en) | 1981-07-03 | 1981-07-03 | Method of including substances to liposoms |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
SU (1) | SU1005791A1 (en) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5711965A (en) * | 1990-02-08 | 1998-01-27 | A. Natterman & Cie. Gmbh | Alcoholic aqueous gel-type phospholipid composition, its use and topical preparation containing it |
WO2003075890A1 (en) * | 2002-03-05 | 2003-09-18 | Transave, Inc. | Methods for entrapment of bioactive agent in a liposome or lipid complex |
-
1981
- 1981-07-03 SU SU813311712A patent/SU1005791A1/en active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
i.BeameF )., BanqEtiam A.P.Btocfrtrr H3ioptlVS.Mta,i976, ,443, № 3, p. 629-634. 2.BatZiN S.jKornE.D. Biodiim BioplTSS Actcl,1673, V, 298, p. 1O151019. * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5711965A (en) * | 1990-02-08 | 1998-01-27 | A. Natterman & Cie. Gmbh | Alcoholic aqueous gel-type phospholipid composition, its use and topical preparation containing it |
WO2003075890A1 (en) * | 2002-03-05 | 2003-09-18 | Transave, Inc. | Methods for entrapment of bioactive agent in a liposome or lipid complex |
AU2003225689B2 (en) * | 2002-03-05 | 2009-03-26 | Transave, Inc. | Methods for entrapment of bioactive agent in a liposome or lipid complex |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Porter | Separation and isolation of fractions of rabbit gamma-globulin containing the antibody and antigenic combining sites | |
Nicholson et al. | Purification to homogeneity and the N-terminal sequence of human leukotriene C4 synthase: a homodimeric glutathione S-transferase composed of 18-kDa subunits. | |
Yamada et al. | Biochemical characteristics of isolated rat liver stellate cells | |
Hagan et al. | Purification and biochemical properties of human plasminogen | |
IE54642B1 (en) | Lipids in aqueous phase | |
Miller et al. | The dependence of the lipid bilayer membrane: buffer partition coefficient of pentobarbitone on pH and lipid composition. | |
JPS61500182A (en) | Immunoassays and compositions | |
Horowitz et al. | Reference phase analysis of free and bound intracellular solutes. I. Sodium and potassium in amphibian oocytes | |
Ames et al. | Purification and characterization of the membrane-bound complex of an ABC transporter, the histidine permease | |
YAGI et al. | Preparation of flavin adenine dinucleotide from Eremothecium ashbyii | |
Rottem et al. | Cholesterol distribution and movement in the Mycoplasma gallisepticum cell membrane | |
Bruscalupi et al. | Plasma membrane changes associated with rat liver regeneration | |
Kandror et al. | Casein kinase II from Rana temporaria oocytes: Intracellular localization and activity during progesterone‐induced maturation | |
Anderson et al. | Analysis of membrane lipid composition of mammalian cells during the development of thermotolerance | |
SU1005791A1 (en) | Method of including substances to liposoms | |
Snart et al. | Uptake of steroid hormones into artificial phospholipid/cholesterol membranes | |
Van der Steen et al. | Lipid dependence of glycophorin-induced transbilayer movement of lysophosphatidylcholine in large unilamellar vesicles | |
Elgavish et al. | In vitro effects of vitamin D 3 on the phospholipids of isolated renal brush border membranes | |
Mackenzie et al. | Regulation of cell lipid metabolism and accumulation III. The lipid content of mammalian cells and the response to the lipogenic activity of rabbit serum | |
Fiala et al. | Binding of a [14C] hydrocortisone metabolite in liver supernatant | |
Dominguez et al. | Na+ electrochemical gradient and Na+-Ca2+ exchange in rat proximal tubule | |
Ward et al. | The chemical and biochemical properties of fluorocitric acid | |
Swift et al. | A Simply Prepared Broth for Producing Hemolytic Streptococcal Hematoxin (Streptolysin). | |
Watson et al. | Penicillin as an antigen | |
Warnock et al. | The isolation and preliminary characterization of apotransketolase from human erythrocytes |