SK4293A3 - Pyridine derivatives - Google Patents
Pyridine derivatives Download PDFInfo
- Publication number
- SK4293A3 SK4293A3 SK42-93A SK4293A SK4293A3 SK 4293 A3 SK4293 A3 SK 4293A3 SK 4293 A SK4293 A SK 4293A SK 4293 A3 SK4293 A3 SK 4293A3
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- group
- formula
- alkyl
- compound
- carbon atoms
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
- C07D495/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D495/04—Ortho-condensed systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
- C07D213/63—One oxygen atom
- C07D213/65—One oxygen atom attached in position 3 or 5
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/44—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material not provided for elsewhere, e.g. haptens, metals, DNA, RNA, amino acids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/5308—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for analytes not provided for elsewhere, e.g. nucleic acids, uric acid, worms, mites
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6887—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids from muscle, cartilage or connective tissue
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Pyridine Compounds (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Soft Magnetic Materials (AREA)
- Paper (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
Avšak zlúčeniny všeobecného vzorca IA sú až doteraz z moča a ako také uskutočňovanie a časovo prírodnými zlúčeninami získanými extrakciou nespĺňajú požiadavky kladené na štandardizovaných, reprodukovateľných, spoľahlivých nanáročných testov.
Vzhľadom na vyššie uvedené je snaha získať dobre definované štandardné pyridínolinové krížovo väzobné faktory.
Je preto cieľom vynálezu poskytnúť nové pyridínové deriváty a vyvinúť spôsob ich prípravy chemickou syntézou, zaháňajúcou prípravu zlúčenín všeobecného vzorca IA, v podstate v Čistej forme a tým umožniť uskutočňovanie merania kostných zmien pri dobrých štandardizovaných podmienkach.
Podstata vynálezu
Predmetom vynálezu je zlúčenina všeobecného vzorca I
I
CH)
X, O
CHXi (I)
Z-R, v ktorom každý z X, Y a Z nezávisle znamená alkylovú skupinu b i až 8 atómami uhlíka, alkylovú skupinu s 1 až 0 atómami uhlíka, prerušenú jedným, alebo dvomi heteroatómami, zvolenými zo skupiny zaháňajúcej atóm kyBlíka, atóm dusíka a atóm síry, cykloalkylovú skupinu, cykloalkylalkylovú Bkupinu, v ktorej alkylový zvyšok obBahuje 1 až 4 atómy uhlíka, alkylcykloalkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy skupinu, v ktorej až 4 atómy uhlíka, skupinu, prípadne uhlíka, alkylcykloalkylénalkylovú každý alkylový zvyšok obsahuje 1 prípadne substituovanú arylovú substituovanú heteroarylovú skupinu, alkylarylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, alkylheteroarylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje i až 4 atómy uhlíka, alkylarylénalkylovú skupinu, v ktorej každý alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, alkylheteroarylénalkylovú skupinu, v ktorej každý alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, arylakylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obBahuje 1 až 4 atómy uhlíka, heteroalkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, pričom arylový alebo heteroarylový zvyšok vyššie uvede4 ných skupín je prípadne substituovaný,
Rg znamená skupinu COOH alebo jej .funkčný derivát, skupinu CHO, kyano-skupinu, alkoxylovú skupinu s 1 až 8 atómami uhlíka, skupinu SOz,skupinu -PO3H alebo jej funkčný derivát, skupinu -SO3H derivát, primárnu, sekundárnu, amíno-skupinu, nasýtenú, alebo alebo jej funkčný alebo terciárnu nenasýtenú cyklickú amínovú skupinu, alebo skupinu všeobecného vzorca a
Rs
CH - R« (a) v ktorom
Rs znamená primárnu, sekundárnu, alebo terciárnu amínoskupinu, alebo nasýtenú, alebo nenasýtenú cyklickú amínovú skupinu, a
Rs znamená skupinu -COOH alebo jej funkčný derivát.
každý Bi a Rz nezávisle znamená atóm vodíka alebo má niektorý z významov uvedený pre Rg ,
R4 znamená hydroxy-skupinu, alkoxylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka alebo polyalkylénoxy-skupinu,
Xi znamená atóm vodíka alebo hydroxy-skupinu a
Xz© znamená anión, s výhradou spočívajúcou v tom, že
i) keď oba X a Y obsahujú alkylové zvyšky, potom dĺžka reťazca alkylového zvyšku v -Y- je o aspoň jeden uhlíkový atóm kratšia než dľžka alkylového zvyšku v -X-, a
ii) XzO je iný než Cl© alebo CHgCOCS v prípade, že každý z -X-Ri a -Z-Rg znamená -(CHz)2-CH-COOH ,
NHz — Y —Rz znamená -CHz -CH—COOH
NHz a R4 Alkylovou skupinou alkylová skupina s alkýlová skupina s znamená hydroxyskúpinu.
s 1 až 8 atómami uhlíka je výhodne 1 až 6 atómami uhlíka a výhodnejšie 1 až 4 atómami uhlíka, najmä alkylová až 4 skupina 1 až 2 atómami uhlíka.
Arylová skupina s výhodou znamená íenylovú skupinu, 1-naítylovú skupinu alebo 2-naítylovú skupinu, najmä íenylovú skupinu. Arylová skupina môže byť substituovaná, napríklad mono. di- alebo trisubstituovaná hydroxy-skupinou, alkylovou skupinou s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxylovou skupinou s 1 až 4 atómami uhlíkka a/alebo atómom halogénu. Výhodnou arylovou skupinou je nesubstituovaná, alebo monosubstituovaná íenylová skupina.
Výhodnou heteroarylovou skupinou je nasýtený alebo až 6-členný heterocyklický kruh, napríklad tiazolylový, piperidinylový, piperazinylový nenasýtený 5imidazolylový, alebo ítaloylový kruh. V prípade, že je tento heterocyklický kruh substituovaný, potom môže byť mono-, trisubstituovaný hydroxy-skupinou, alkylovou alkoxylovou skupinou a/alebo atómom halogénu di- alebo skupinou. Výhodnou heteroarylovou skupinou je nesubstituovaná arylová skupina.
V prípade, že Ri , R2 , Ra alebo R5 znamená sekundárnu amíno-skupinu, potom je touto skupinou s výhodou skupina -NHRa., v ktorej R®, znamená alkylovú skupinu s 1 až 8 atómami uhlíka, alkylovú skupinu s 1 substituovanú skupinou COOH, až 8 atómami uhlíka prípadne alebo jej funkčným derivátom.
alkenylovú skupinu s až 8 atómami uhlíka, cykloalkýlovú skupinu, cykloalkylalkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 8 atómov uhlíka, íenylovú skupinu, lenylalkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 8 atómov uhlíka, alebo R* znamená skupinu -Ya alebo skupinu -ZÄ-Yb kde Ya znamená ochrannú skupinu schopnú kovalentnej reakcie s alebo ochrannou skupinou, Za znamená dištačnú Yb znamená ochrannú, alebo antigénovú skupinu, biotinyl alebo skupinu odvodenú od molekuly schopnej tvoriť komplex s inou molekulou, ako je biotín-avidinové činidlo.
V prípade, že Ri , Rz , Ra alebo R5 znamená terciárnu amiantigénom, skupinu a no-skupinu, potom je touto skupinou s výhodou skupina -MRaRa', v ktorej Η«. má vyššie uvedený význam a R^ má nezávisle niektorý z významov uvedených pre R«.
dvoma substituentami, ktoré si neprekážaj ú.
N-ochranné skupiny, akými sú Y«. alebo Yb zaháňajú napríklad skupiny popísané v Protective Groups in Organic Synthesis, T.W.Green, J.Wiley a Sons (1981), 219-287: týmito skupinami sú napríklad acylová skupina ako je íormylová skupiny, acetylová skupina, tri íluoracetylová skupina, metoxysukcinylová skupina hydroxysukcinylová skupina alebo benzoylová skupina, prípadne substituovaná na íenylovom kruhu, napríklad p-metoxykarbonylovou skupinou, p-metoxylovou skupinou, p-nitro-skupinou alebo p-íenylsulíonamidokarbonylovou skupinou, ďalej alkoxykarbonylová skupina, akou je terc.butoxykarbonylová skupina, izobutyloxykarbonylová skupina alebo metoxykarbonylová skupina, ďalej allyloxykarbonylová skupina, arylmetoxykarbonylová skupina ako je
9-fluorenylmetoxykarbonylová skupina alebo benzyloxykarbonylová skupina, prípadne substituovaná na íenylovom kruhu p-metoxylovou skupinou, p-nitro-skupinou, o- alebo p-chlór-skupinou, m-fenylovou skupinou alebo 3,4-dimetylovou skupinou, ďalej tritylová skupina, arylmetylová skupina, ako je benzylová skupina, prípadne substituovaná na kruhu p-metoxylovou skupinou, p-nitro-skupinou alebo p-chlór-skupinou, a nakoniec arylsulfonylová skupina akou je fénylsulfonylová skupina, prípadne substituovaná na kruhu p-raetylovou skupinou alebo p-metoxylovou skupinou, alebo naftylsulíonylová skupina, pripadne substituovaná na kruhu napríklad amínovou skupinou alebo dialkylamínovou skupinou, v ktorej každý alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka.
Ako príklady funkčných derivátov karboxylovej kyseliny je možné uviesť halogenidy kyseliny, anhydridy kyseliny (vrátane zmietaných anhydridov kyselín), aktivované estery, aktivované amidy, atď.. Z halogenidov kyseliny sa najčastejšie používa chlorid kyseliny. Príklady anhydridov kyseliny zahŕňajú cyklické anhydridy a zmiešané anhydridy, akými sú zmiešané s výhodou Ra. a Ra sú navzájom priestorovo ~7 anhydridy kyseliny dialky1 íosíorečnej, zmiešané anhydridy kyseliny dialky1íosíoritej atď.. Medzi príkladmi aktivovaných esterov, ako významov všeobecnejšie definovaných substituentov Ri , Hz . R3 alebo Rs možno uviesť alkylester, v ktorom alkylový zvyšok obsahuje 1 až 8 atómov uhlíka, napríklad metylester alebo etylester. kyanometylester, p-nitroíenylester, ester s N-hydroxysukcínimidom, prípadne na kruhu substituovaný fenyl-alebo benzylester alebo fluorfenylmetylester. Príklady aktivovaných amidov karboxylovej kyseliny, ako významov všeobecnejšie definovaných substituentov Bi, B2, Ba alebo Rs zaháňajú amidy s imidazolom, dimety1imidazolom alebo triazolom. Karboxylovými amidovými skupinami vo významoch všeobecnejšie definovaných substituentov môžu byť tiež skupiny -CONHz , - CONHRa. alebo CONRaRa , ktoré boli už definované vyššie.
Príkladom funkčných derivátov skupín -30a H alebo -POaH sú napríklad Ci_6-alkyl, benzyl-, íenyl-, allyl- alebo trimetylsilylestery, halogenidy kyseliny, napríklad chlorid kyseliny, alebo nižšie dialkylamidy, napríklad dietyl- alebo diizopropylamidy. Výhodné sú (alkoxy)(diamíno)íosíiny, napríklad fosíín, v ktorom alkoxylová skupiny znamená metoxylovú skupinu, butoxylovú skupinu, allyloxy-skupinu alebo benzoxy-skupinu a diamínová skupina znamená diétylamínovú skupinu, . dipropylamínovú skupinu, alebo diizopropylamínovú skupinu.
Ako príklady aniónu Xz - možno uviesť OH-, Cl~ , Br-, J-, CH3COO- a CF3COO- .
Vhodné dištančné skupiny vo význame všeobecnejšie definovaného substituentu zahúňajú napríklad skupinu všeobecného vzorca b
- Rz - X3 - (b) v ktorom
X3 znamená dvojmocnú skupinu odvodenú od funkčného zvyšku schopného pre kovalentnú reakciu s ochrannou skupinou alebo antigénom
Ib znamená alkylénovú skupinu s i až 6 atómami uhlíka, prípadne preruSenú jedným, alebo dvoma heteroatómami zvolenými z množiny zahŕňajúcej atóm kyBlíka, atóm síry, skupinu CO, skupinu —NHCO-, skupinu . -CO-NH-,
-N-alky1—CO-skupinu, v ktorej alkylový zvySok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, -CO-N-alkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyôok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, skupinu -NH- a -N-alkylovú «skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, ďalej hydroxy-substituovanú alkylénovú skupinu, v ktorej alkylénový zvyšok obBahuje 1 až 6 atómov uhlíka, alkylénovú skupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, skupinu -CHRe alebo skupinu všeobecného vzorca oCi
(«i) v ktorom každý z obecných substituentov s a t nezávisle znamená 0, 1, 2 alebo 3, kruh A je prípadne substituovaný a Be znamená prípadne chránený zvyšok, ktorý je pripojený k alía-uhlíku prirodzenej, alebo neprirodzenej alía-amínokyseliny.
Každý z obecných substituentov Zi a Xa môže nezávisle znamenať napríklad skupinu -C0-, skupinu -CS- alebo skupinu -NH-.
Príkladom významu obecného substituentu Rg je prípadne N-chránený zvyšok, ktorý je prítomný na alía-uhlíku lyzinu.
Vhodné príklady skupiny všeobecného vzorca b zahŕňajú napríklad eukcinyl, beta-Ala alebo dvojmocný zvyšok odvodený od kyseliny 3-amínopropánovej, 3-aminoizobutánovej, kyseliny 4-amínobutánovej, kyseliny NH2-CíCHg)2-COOH, kyseliny 6-amínohexánovej, kyseliny i,8-diamínooktánovej, kyseliny 1,6-di9 amínohexánove j alebo kyseliny NHz - (CH2 ) 1 -λ -CO-NH-(CHz ) 1 -6 -NHi.
Vhodné skupiny schopné pre kovalentnú reakciu s antigénom alebo ochrannou skupinou vo význame všeobecného vzorca Ya zahŕňajú napríklad skupinu všeobecného vzorca bi
- Rz - Z4 (bi ) v ktorom
Hz má vyššie uvedený význam a
X4 znamená funkčný zvyšok schopný pre reakciu s antigénom alebo ochrannou skupinou.
Príklady významov obecného substituentu X4 zahŕňajú karboxylovú skupinu, amínovú skupinu alebo jej funkčný derivát schopný reagovať s antigénom alebo ochrannou skupinou. V skupine všeobecného vzorca bi Hz s výhodou znamená alkylénovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka alebo alkenylénovú skupinu s 2 až 6 atómami uhlíka.
Pod antigénovou skupinou sa rozumie skupina odvodená od nosičovej molekuly ako je napríklad používaná pri príprave protilátok, napríklad bovinný sérový albumín, ovalbumín, tyreoglobulín alebo hemocyanín z kuželnatky (keyhole limpet hemocyanin), alebo od imunostimulačnej 1ipoamínokyseliny alebo lipopeptidu, napríklad takej zlúčeniny, v ktorej je lipofilný zvyšok tripalmitoylovým zvyškom ako je to napríklad uvedené G.Jung-om a kol. v Int.J.Peptide Protein Res. 37, 1991, 46-57. Príkladom lipopeptidov sú N-palmitoyl-S-/2,3-bis(palmitoyloxy)-(2RS)-propyl/-/R/-cysteín (uvádzaný ako PamaCys-OH), PamaCys-Ser, Pam3Cys-Ser-(lys)4 a Pama Cys-Sei—(Glu)4.
V zlúčeninách všeobecného vzorca I, sú individuálne, alebo v ľubovoľnej kombinácii, alebo subkombinácii výhodné nasledujúce významy :
1) X znamená skupinu -(CHz)n, v ktorej n znamená celé číslo od 2 do 8. Výhodnejšie n znamená 2.
2) Y znamená -(CH2)m, kde m znamená n-1. Výhodnejšie m zna mená 1.
3) Z znamená skupinu -(CHz)p, ktorej p znamená celé číslo od 1 do 8. Výhodnejšie p znamená 2.
4) Ri znamená skupinu OH.
5) Ri znamená atóm vodíka, karboxylová skupinu alebo jej .funkčný derivát, primárnu, sekundárnu, alebo terciárnu amínovú skupinu alebo skupinu všeobecného vzorca a, s výhodou skupinu všeobecného vzorca a.
6) R2 znamená atóm vodíka, karboxylovú skupinu alebo jej funkčný derivát, primárnu, sekundárnu, alebo terciárnu amínovú skupinu, alebo skupinu všeobecného vzorca a, s výhodou skupinu všeobecného vzorca a.
7) Ra znamená karboxylovú skupinu alebo jej íunkóný derivát, primárnu, sekundárnu alebo terciárnu amínovú skupinu alebo skupinu všeobecného vzorca a.
3) Skupina všeobecného vzorca a znamená skupinu R 5-CH-CGOH
I alebo jej funkčný derivát, kde R 5 znamená skupinu -NH2 alebo skupinu -NHR* , napríklad takú skupinu, v ktorej R 5 znamená skupinu -NH2 , -NHYe. alebo -NH2e-Yb a karboxylová skupina je nahradená jej funkčným derivátom, napríklad esterom alebo amidom.
9) V skupine všeobecného vzorca a R 5 znamená skupinu -ΝΗ2α-Υυ·
10) V skupine všeobecného vzorca a v prípade keď R 5 unamená skupinu -NHZa-Yb, Yt> znamená s výhodou antigénovú skupinu, výhodnejšie antigénovú skupinu odvodenú od bovinného sérového albumínu alebo hemocyaninu z kuželnatky.
11) Skupina vSeobecného vzorca a znamená skupinu.
R 5-CH-CO-NHRe, v ktorej R 5 znamená NH2 alebo NHY*.
f
R«. výhodne znamená 2a.-Yb· Yt> výhodne znamená antigénovú skupinu, výhodne odvodenú od bovinného sérového albumínu alebo hemocyaninu z kuželnatky.
V rámci výhodného uskutočnenia vynález zahúŕia zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom X znamená skupinu -CK2-CHz-, Y znamená skupinu -CH-, každý z Ri a Rz znamená zvyšok všeobecného vzorca, a, v ktorom R5 znamená skupinu -NH2 alebo skupinu NHY \ , kde Y Λ znamená ochrannú skupinu a Rs znamená skupinu -COOH alebo alkoxykarbonylovú skupinu, v ktorej alkoxylový zvyäok obsahuje 2 až 7 atómov uhlíka, Xi znamená atóm vodíka alebo skupinu OH, s výhodou atóm vodíka,· Z znamená skupinu -CHz- CHz - a Ba znamená zvyšok všeobecného vzorca a, v ktorom R5 znamená skupinu -NHz alebo skupinu NHY Ä a Rs znamená skupinu -CONH~Za-Yb alebo skupinu -CONHY*.
V rámci ďalšieho výhodného uskutočnenia vynález zahŕňa zlúčeniny všeobecného vzorca 1, v ktorom X znamená skupinu -CHz -CH2 -, Z znamená skupinu -CH2-CHz , každý z Ri a Rs znamená zvyšok všeobecného vzorca a, v ktorom R5 znamená skupinu -NHz alebo skupinu NHY a a Rs znamená skupinu -COOH alebo alkoxykarbonylovú skupinu, v ktorej alkoxylový zvyšok obsahuje 2 až 7 atómov uhlíka, Xi znamená atóm vodíka alebo skupinu OH, s výhodou atóm vodíka, Y znamená skupinu -CH2- a
Rz znamená zvyšok všeobecného vzorca a, v ktorom R 5 znamená skupinu -NH2 alebo skupinu -NHY Ä a Rs znamená skupinu -CONH-Zeu-Yb alebo skupinu -CONHYe. .
V rámci ďalšieho výhodného uskutočnenia vynález zahoria zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom Z znamená skupinu -CHz-CHz-, Y znamená skupinu -CHz-, každý z Rz a R3 znamená zvyšok všeobecného vzorca a, v ktorom R5 znamená skupinu -NHz
C.
alebo skupinu NHY α a R5 znamená skupinu -COOH, alebo alkoxykarbonylovú skupinu, v ktorej alkoxylový zvyšok obsahuje 2 až' 7 atómov uhlíka, Xi znamená atóm vodíka alebo skupinu OH, s výhodou atóm vodíka, X znamená skupinu -CH2-CHz - a Ri znamená zvyšok všeobecného vzorca a, v ktorom R5 znamená skupinú -NHz alebo skupinu -NHY Λ a Rs znamená skupinu -CONH-Za-Yb alebo skupinu -CONHYÄ.
Zlúčeniny všeobecného vzorca I a TA môžu existovať napríklad vo .forme solí. Tieto soli zahýbajú adičné soli s kyselinami, napríklad s organickými kyselinami, polymérnymi kyselinami alebo anorganickými kyselinami, napríklad hydrochloridy a acetáty a formy solí získané so skupinami karboxylovej, suliónovej alebo fosforečnej kyBeliny, prítomnými v molekule, napríklad soli alkylických kovov alebo substituované alebo nesubstituované amónne soli a tzv. interné soli v prípade, keď molekula obsahuje aspott jednu skupinu všeobecného vzorca a.
Skupina všeobecného vzorca a obsahuje asymetrický uhlíkový atóm a môže byť prítomná v konfigurácii D alebo L. Zlúčeniny všeobecného vzorca I a ΙΛ tiež obsahujú asymetrický uhlík v prípade, keď Xi znamená skupinu OH. Vynález takto zahí*tta optické izoméry a rovnako tiež diastereoizoméry zlúčenín všeobecného vzorca ΙΛ a zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom Χχ znamená skupinu OH a v molekule sú prítomné až tri skupiny všeobecného vzorca a. To isté platí pre východzie látky obsahujúce skupinu všeobecného vzorca a alebo zahi*ttajúce Xi, ktorý znamená skupinu OH.
Vynález tiež zahótta spôsob prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo IA, ktorého podstata spočíva v tom, že sa a) zlúčenina všeobecného vzorca II
v ktorom X, Y, Ri , Bz a H4 majú vyššie definované významy, uvedie do reakcie zo zlúčeninou všeobecného vzorca III
X9 - CHz - CHXi - Z - R3 · (III) v ktorom
Xi, Za Ra majú vyššie uvedený význam
Χ5 znamená odštiepiteľnú skupinu, alebo sa
b) zlúčenina všeobecného vzorca I alebo IA prevedie na inú zlúčeninu všeobecného vzorca I alebo IA a potom sa takto získaná zlúčenina všeobecného vzorca I alebo IA izoluje vo voľnej íorme, alebo vo forme soli.
V zlúčeninách všeobecného vzorca III, X© môže znamenať napríklad halogenid, pripadne substituované amónium, metánalebo etánsulíonát alebo tosylát. Ak X© znamená halogenid, môže byť prevedený na anión ako Xz~.
Stupeň a) spôsobu podľa vynálezu aprotickom rozpúšťadle, s výhodou pri rozmedzia od teploty okolia do teploty varu reakčnej zmesi.
sa môže uskutočniť v teplote z teplotného nižšej ako je teploty
Stupeň b) spôsobu podľa vynálezu môže napríklad zahŕňať odstránenie aspoň jednej ochrannej skupiny zo zlúčeniny všeobecného vzorca I v chránenej forme alebo zavedenie aspoň jednej ochrannej alebo antigénovej skupiny do zlúčenina všeobecného vzorca I alebo IA, prípadne prostredníctvom dištančnej skupiny.
S cieľom prípravy zlúčenín všeobecného vzorca I obsahujúcej aspoň jednu antigénovú skupinu, sa zlúčenina všeobecného vzorca IA alebo zlúčenina všeobecného vzorca I, v ktorom R3 a/alebo Ri a/alebo B2 znamená karboxylovú skupinu, -SOaH alebo -PO3H alebo ich funkčný derivát, primárnu, sekundárnu alebo terciárnu aminovú skupinu alebo skupinu všeobecného vzorca a neobsahujúcou antigénovú skupinu, uvedie do reakcie s antigénom, prípadne prostredníctvom dištančnej skupiny.
V prípade, Že je ochranná skupina alebo antigénová skupina pripojená prostredníctvom dištančnej skupiny, môže sa uvedená reakcia alternatívne uskutočniť s dištančnou .skúpinou, ktorá je pripojená buď k zlúčenine všeobecného vzorca I alebo
IA alebo k zlúčenine poekytujúcej ochrannú Bkupinu alebo k antigénu. Alternatívne môže byť zlúčenina všeobecného vzorca I obsahujúca substituent Ya uvedená do reakcie so zlúčeninou poskytujúcou ochrannú skupinu alebo s antigénom, pričom každá z nich obsahuje dištančnú Bkupinu, ktorá je komplementárna k Υ» s cieľom získať požadované dištančné skupiny Z*.
To isté platí pre prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom Yb znamená biotinyl alebo skupinu obdobnej .funkcie.
Zlúčeniny všeobecného vzorca II, ktoré sa pri spôsobe podľa vynálezu požívajú ako východzie látky sú tiež novými zlúčeninami a ako také tvoria súčasť vynálezu.
Zlúčeniny všeobecného vzorca II môžu byť pripravené spôsobom, podstata ktorého spočíva v tom, že sa
i) odstráni aspoň jedna ochranná skupina z amíno-skupiny alebo z karboxy-skupiny zlúčeniny všeobecného vzorca II alebo sa aduje aspoň jedna ochranná skupina na amíno-skupinu alebo karboxy-skupinu zlúčeniny všeobecného vzorca II, prípadne prostredníctvom dištančnej skupiny, alebo sa ii) cyklizuje zlúčenina všeobecného vzorca IV
v ktorom X, Y, Bi a B2 majú vyššie definované významy a Zz znamená odštiepi teľnú skupinu, a potom sa takto získaná zlúčenina všeobecného vzorca II, v ktorom ILj znamená skupinu OH, prípadne éteriíikuje na zlúčeninu všeobecného vzorca II, v ktorom R4 znamená alkoxylovú skupinu alebo polyalkylénoxy-skupinu, a
takto získaná zlúčenina všeobecného vzorca II sa izoluje vo voľnej forme, alebo vo forme soli.
Uvedený stupeň i) sa môže uskutočniť o sebe známym postupom.
Uvedený stupeň ii) sa môže vhodne uskutočniť v inertnom rozpúšťadle, s výhodou pri teplote okolia. Uvedená cyklizácia sa môže s výhodou uskutočniť v prítomnosti zásady akou je napríklad 1,5-diazabicyklo/4.3.0/non-5-én (DBN) alebo 1,8-diazabicyklo/5.4.0/undec-7-én (DBU).
Pokiaľ v tomto popise nie je špecificky popísaná príprava použitých východzích látok, môžu sa tieto pripravovať postupom, ktorý je analogický s postupom opísaným v príklade 4.
Vynález bude v ďalšej časti popisu bližšie objasnený pomocou konkrétnych príkladov uskutočnenia, ktoré majú ilustračný charakter a nijako neobmedzujú rozsah vynálezu, ktorý je jednoznačne definovaný formuláciou patentových nárokov.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1
3-hydroxy-l-(5-terc.butoxykarbonylamíηο-5-terc . butoxykarbony1penty 1) -4- (5_-terc . butoxykarbonylamíno-'l-terc-butoxykarbonyl-/2ety1)-5-(3-terc.butoxykarbony1amíno-3-terc.butoxykarbonylpropyl)pyridíniumjodid
2,0 g 3-hydroxy-4-(1-terc.butoxykarbonylamíno-1-terc.butoxykarbony 1-J^-ety 1 )-5-( 3-terc . butoxy karbony lamí ηο-3-terc . buto xykarbonylpropy1)pyridínu a 1,9 g terc.butyl-6-jód-2-terc~butoxykarbonylamínohexanoátu v 25 ml dioxánu sa zahrieva na teplotu 110 °C počas jednej hodiny. Po odparení sa požadovaná zlúčenina izoluje chromatograíicky na stĺpci silikagelu za pou žitia elučnej sústavy tvorenej zmesou metylénchloridu, metanolu a amoniaku v objemovom pomere 95:5:0,5.
Hmotnostné spektrum (FAB) : M+ 881
Príklad 2
3-Hydroxy-1-( 5-amíno-5-karboxypenty1) -4- (Ί,-amí no-l-karboxy-^ety1)5-(3-amino-3-karboxypropy1)pyridíniumhydrochlorid
206 mg zlúčeniny z príkladu 1 sa mieáa v 20 ml zmesi kyseliny triíluoroctovej a vody v objemovom pomere 95 : 5 po dobu 90 minút. Po pridaní diétyléteru sa vylúči surová požadovaná zlúčenina, ktorá sa potom odfiltruje. Tento produkt sa rozpustí v 2 ml metanolu a získaný roztok sa okyslí na hodnotu pH 1 2N roztokom kyseliny chlorovodíkovej v dietyléteri. Po odparení sa získaný zvySok prečistí preparátívnou vysoko výkonnou kvapalinovou chromatograíiou HPLC).
Stĺpec : Macherey/Nagel SA5/SCX 5 m 4,6 x 200 mm, elučné činidlá : A : 0,02M LÍCI B : 0,2M LÍCI, gradient : A + 0 až 100 % B v priebehu 50 minút, detekcia : UV 290 nm.
Frakcia obsahujúca požadovanú zlúčeninu sa odsolí prechodom stĺpcom Bio-Gel P2 (50-100 mesh) pri použití elučného činidla tvoreného vodou. Po lyoíilizácii sa izoluje čistá požadovaná zlúčeniny.
Hmotnostné spektrum (FAB) : M+ 413.
Príklad 3
Terc.butylester kyseliny 2-terc.butoxykarbonylamínoamíno-4-/3hydroxy-4- (1-terc . butoxykarbony 1-1-amí no-^'-ety 1) -5-pyridiny 1/ -butánovej
212 mg 1,13-di-terc-butyl7-terc.butoxykarbonylaza-2,12di-terc.butoxykarbonylamíno-5,9-dioxotridekanodiátu sa rozpustí v 10 ml tetrahydroíuránu a k získanému roztoku sa pridá 0,26 ml 1,8-diazabicyklo/5,4,0/undec-7-énu. Tento roztok sa mieša po dobu 15 hodín pri teplote okolia a potom sa odparí. Reakčná zmes sa rozdelí chromatograíicky na stĺpci silikagelu, pričom sa ako elučná sústava použije zmes metylénchloridu a metanolu v objemovom pomere 96 : 4. Z odpovedajúcej írakcie eluátu sa získa požadovaná zlúčenina.
Hmotnostné spektrum (FAB) : MH+ 596.
Príklad 4
1,13-di-terc.buty1-7-terc.butoxykarbonylaza-2,12-di-terc. butoxykarbonylamíno-5,9-dioxotridekanodiát, ktorý bol v príklade 3 použitý ako východzia látka, sa môže pripraviť nasledujúcim spôsobom
a) Terc.buty1-2-terc,butoxykarbonylamíno-5,6-epoxyhexanoát
K 13,8 g terc . buty 1-2-terc . butoxykarbony lamí ηο-5-hexenoátu rozpusteného v 400 ml metylénchloridu sa pridá 13,1 g kyseliny m-chlórperoxybenzoovej (90%) . Po 18 hodinovom miešaní pri teplote okolia sa k reakčnej zmesi pridá zmes ľadu a nasýteného roztoku hydrogénuhličitanu sodného. Vodná íáza sa dva krát extrahuje metylénchloridom. Organické roztoky sa zlúčia, vysušia a odparia. Po chromatograíi i na silikageli za použitia elučnej sústavy tvorenej zmesou etylacetátu a hexánu v objemovom pomere 1 : 2,5 sa získa požadovaná zlúčenina 4a.
Hmotnostné spektrum (FAB) MH+ 286.
b) 1,13-Di-terc.buty1-7-N-benzylaza-5,9-dihydroxy-2,12-di18 terc.butoxykarbonylamínotridekanodiát benzylamínu sa zahrieva Reakčná zmes sa potom silikagelu za použitia
Zmes 1 <3 zlúčeniny 4a a 0,18 ml na teplotu 70 °C po dobu 13 hodín, rozdelí chromatograíicky na stľpci elučnej sústavy tvorenej zmesou acetónu a hexánu v objemovom pomere 2 : 2. Z príslušnej írakcie eluátu sa potom získa požadovaná zlúčenina 4b.
Hmotnostné spektrum (FAB) : MH+ 710.
c) 1,13-Di-terc.butyl-7-aza-5,9-dihydroxy-2,12-di-terc.butoxykarbony lamí notridekanodiát
9,48 g zlúčeniny 4b sa rozpustí v 350 ml etanolu a získaný roztok sa hydrogenuje v prítomnosti hydrogenačného katalyzátora (l,4g) tvoreného 10 % paládiom na uhlí pri teplote okolia a pri normálnom tlaku. Hydrogenačná zmes sa potom zíiltruje a íiltrát sa odparí. Požadovaná zlúčenina 4c sa prečistí chromatograíicky na stĺpci silikagelu pri použití elučnej sústavy tvorenej zmesou metylénchloridu a metanolu v objemovom pomere 9:1.
Hmotnostné spektrum (FAB) : MH+ 620.
d) 1,13-Di-terc.buty1-7-terc.butoxykarbonylaza-5,9-dihydroxy2,12-di-terc.butoxykarbonylamínotridekanodiát
K 7,7 g zlúčeniny 4c rozpustenej v 310 ml tetrahydroíuránu sa rýchlo pridá 4,1 g di-terc.butyldikarbonátu Výsledný roztok sa mieša po dobu 3 hodín pri teplote okolia.
Po odparení sa požadovaná zlúčenina 4d prečistí chromatograíicky na stĺpci silikagelu pri použití elučnej sústavy tvorenej zmesou hexánu a etylacetátu v objemovom pomere 6:4.
Hmotnostné spektrum (FAB) : MH+ 720.
e) 1,13-Di-terc.buty1-7-terc.butoxykarbonylaza-2,12-di-terc. butoxykarbonylamíno-5,9-dioxotridekanodiát
K roztoku 140 ml metylénchloridu a 2,4 ml oxalylchloridu sa pri teplote -70 °C po kvapkách pridá roztok 4,0 ml dimetylsulíoxidu v 42 ml metylénchloridu. Po 15 minútach sa k tomuto roztoku pomaly , pri teplote -70 °C, pridá zmes 8,0 g zlúčeniny 4d v 80 ml metylénchloridu. Po 3 hodinách miešania pri teplote -70 °C sa pri teplote -50 °C pridí 15,7 ml trietylamínu. Táto zmes sa potom naleje na zmes ľadu a vody. Rozdelí sa íáza a vodná fáza sa extrahuje (2 krát)
Všetky organické írakcie sa zlúčia, vysušia a chromatograíicky na stĺpci sústavy tvorenej zmesou hexánu príslušnej dietyléterom.
odparia. Zvyšok sa prečistí silikagelu pri použití elučnej a atylacetátu v objemovom pomere 6 : 4. Potom sa írakcie eluátu získa požadovaná zlúčenina 4e. Hmotnostné spektrum (FAB) : MH+ 715.
Príklad 5
3-Hydroxy-l-(2-hydroxy-5-amíno-5-karboxypenty1)-4-(1-amíno1- karboxy-2-ety1)-5-(3-amíno-3-karboxypropy1)pyridíniumhydrochlorid
Opakujú sa postupy z príkladov 1 a 2 za použitia terc.butyl-5-hydroxy-6-jód-2-terc.butoxykarbonylamínohexanoátu. Hmotnostné spektrum (FAB) : M+ 429.
3-Hydroxy-l-(2-hydroxy-5-terc-butoxykarbonylamíηο-5-terc.butoxykarbonylpenty1)-4-(1-terc.butoxykarbonylamíno-1-terc.butoxykai— bony1-2-ety1)-5-(3-terc.butoxykarbonylamíηο-3-terc.butoxykai— bonylpropy1)pyridíniumjodid, hmotnostné spektrum (FAB) : M+ 897.
Príklad 6
3-Hydroxy-l-/5-terc.butoxykarbonylamíηο-5-Ν-(1-metoxykarbony12- ety1)karboxamidopenty1/-4-(1-terc.butoxykarbonylamíno-l-terc. butoxykarbony1-2—ety 1)-5-(terc.butoxykarbonylamíno—3-terc.bu— toxykarbonylpropy1)pyridíniumjodid
235 mg zlúčeniny z príkladu 3 a 230 mg e-jód-N-terc.butoxykarbonylamíno(metyl-beta-alaly1)lyzinu v 1 ml dioxánu sa zahrievajú na teplotu 120 °C po dobu 30 minút. Po odparení sa požadovaná zlúčenina prečietí chromatograíicky na silikageli pri použití eluČnej sústavy tvorenej zmesou stylacetátu a metanolu v objemovom pomere 7:3.
Hmotnostné spektrum (FAB) : M + 910.
Príklad ,7
3-Hydroxy-l-/5-terc.butoxykarbonylamíησ-5-Ν-(l-karboxy-2-ety1)karboxamidopenty1/-4-(1-terc.butoxykarbonylamíno-l-terc.butoxykarbony 1-2-e ty 1 )5-(3-terc.butoxykarbonylamíno-3-terc.butoxykarbony 1 propy Dpyridíni umhy drox i d mg zlúčeniny z príkladu 6 sa rozpustí v 5 ml metanolu a 2 ml 0,2N roztoku hydroxidu sodného a získaný roztok sa mieša po dobu 5 hodín pri teplote okolia. Potom sa pridá 10 ml vody a 10 ml metylénchloridu a následne Ba, pri intenzívnom miešaní, pridáva 0,2N kyselina chlorovodíková až po dosiahnutie hodnoty pH 2 až 3. Organická vrstva sa oddelí, vysuší nad síranom sodným a odparí. Zvyšok sa prečistí chromatograíicky na stĺpci silikagelu pri použití eloučnej sústavy tvorenej zmesou metylénchloridu a metanolu v objemovom pomere 6 : 4. Z prÍBlušnej írakcie eluátu sa získa požadovaná zlúčenina.
Hmotnostné spektrum (FAB) : M+ B96.
Príklad 8
BOC IN boc m
t.butyl 02C
COOt.butyl
OH
II
BOC IN
CO-ΜΗ- (CH2)2 -CO-NH- (CH2>4 -NH-CO- (CH^ mg zlúčeniny z príkladu 7 sa rozpustí v 1 ml N,N-dimetylíormamidu a 12 mg l-hydroxybenzotriazolu a následne sa k zÍBkanému roztoku pridá 13zul diizopropyletylénamínu (Huenigova zásada), 32 mg N-biotiny1-1,4-diaminobutánu v 2 ml N,N-dimety1 íormamidu a 15 mg N,N-dicyklohexylkarbodiimidu. Táto zmes sa mieša pri teplote okolia po dobu 23 hodín. Po odparení a chromatograíi i na stĺpci silikagelu pri použití elučnej sústavy tvorenej zmesou metylénchloridu, metanolu a amoniaku v objemovom pomere 90 10 : 1, sa z príelušnej írakcie eluátu izoluje požadovaná zlúčenina.
Hmotnostnó spektrum (FAB) : M*·1192.
Príklad 9
128 mg zlúčeniny z príkladu 8 sa rozpustí v 25 ml zmesikyseliny triíluoroctovej a vody v objemovom pomere 95 :5a takto získaný roztok sa mieša po dobu jednej hodiny pri teplote okolia. Rozpúšťadlá sa potom odparia a zvyšok ea prečiBtí vysokovýkonnou chromatograíiou (HPCL).
Stĺpec : Hypersil ODS 4,6 x 250 mm, elučné činidlá : A : 100 X Hz O, IX CF3COOH,
B : 80 X CHaOH, 20 X H20, IX CF3COOH, gradient : A + 20 X B v priebehu 20 minút.
Hmotnostné spektrum (FAB) : M+ 780~
Príklad 10
Deoxypyridínolin-l-beta-BSA-konjugát mg zlúčniny z príkladu 7 sa rozpustí v 0,4 ml N,Ndimety1 íormamidu a následne sa k získanému roztoku pridajú .» 3,3 mg N-ety 1-N-( 3-dimetylamínopropy 1) karbodiimidhydrochloridu a potom ešte 2,3 mh N-hydroxysukcínimidu. Získaný roztok sa mieša po dobu 2 hodín pri teplote okolia a potom sa k nemu pridá 65 mg bovinného sérového albumínu (BSA) v 2 ml fosfátového puíru (pH=8) a v miešaní sa pokračuje ešte po dobu 6 hodín. Rozpúšťadlá sa následne odparia a zvyšok sa rozpustí v 10 ml zmesi kyseliny tri íluoroctovej a vody v objemovom pomere 95 : 5. Získaný roztok sa mieša po dobu 90 minút pri teplote okolia. Po odparení sa zvyšok prečistí chromatograficky na produkte Bio-Gel P 6 (100-200 mesh) pri použití elučnej sústavy tvorenej zmesou vody a kyseliny octovej v objemovom pomere 98 : 2. Získaný vysoko, ^molekulárny podiel sa izoluje a použije pre imunizáciu.
Príklad 11
Deoxypyridínoli n-l-beta-alany1-KLH-kon j ugát
2,5 mg zlúčeniny z príkladu 7 sa rozpustí v 2,5 ml N,Ndimety1 íormamidu,a následne sa k získanému roztoku pridá 0,7 mg N-ety1-N-(3-dimetylamínopropyl)karbodiimidhydrochloridu a potom 0,5 mg N-hydrosukcínimidu. Táto zmes sa zmieša po dobu 90 minút pri teplote okolia. Potom sa pridá 34,2 mg hemocyanínu z kuželnatky (KHL) v 0,5 ml 50 % glycerolu a v miešaní sa pokračuje pri teplote okolia po dobu 36 hodín. Potom sa pridá 5 ml zmesi kyseliny tri íluoroctovej a vody v pomere 95 : 5 a roztok sa mieša ešte po dobu 75 minút pri teplote okolia. Potom sa kyseliny tri fluoroctová a voda odstráni odparením. Zvyšok sa premyje (odstreďovaním) niekoľkokrát vodou a následne sa použije pre imunizáciu.
Príklad 12
3-Hydroxy-4-(2-terc.butoxykarbony lamíno-2-karboxyetyl )-5-(3terc.butoxykarbonylamíησ-3-terc.butoxykarbonylpropyl)pyridín
0,5 g zlúčeniny z príkladu 3 sa rozpustí v 10 ml vody a 10 ml metanolu a potom sa k takto získanému roztoku pridá 1 g hydroxidu sodného. Výsledný roztok sa mieša po dobu 3 hodín pri teplote okolia a potom spracuje postupom popísaným v príklade 8.
Hmotnostné spektrum (FAB) : MH+ 540.
Príklad 13
3-Hydroxy-4-/1-terc.butoxykarbonylamíno-l-N-(1-etylmetoxykal·— bony1)karboxymido-2-ety1/-5-(3-terc.butoxykarbonylamíηο-3-terc. butoxykarbonylpropyl)pyridín
320 mg zlúčeniny z príkladu 12, 200 mg 1-hydroxybenzotriazolu, 300 mg N,N-dicyklohexylkarbodiimidu a 200 mg betaalanínmetylesteru sa rozpustí v 10 ml tetrahydroíuránu a získaný roztok sa mieša cez noc pri teplote okolia. Po odparení rozpúšťadla sa zvyšok prečistí chromatograíicky na silikageli pri použití elučnej sústavy tvorenej zmesou metylénchloridu a metanolu v pomere 95 : 5.
Hmotnostné spektrum (FAB) : MH+ 625.
Príklad 14
3-hydroxy-l-(5-terc.butoxykarbonylamíno-5-terc.butoxykarbony1penty1)-4-/1-terc.butoxykarbonylamíno-l-N-(1-metoxykarbony12—ety1-karboxamido—2-ety1/—5-(3-terc.butoxykarbonylamíno—3terc.butoxykarbonylpropyl)pyridíniumjodid
Táto zlúčenina sa pripraví postupom popísaným v príklade 1.
Hmotnostné spektrum (FAB) : M+ 910.
Príklad 15
3-Hydroxy-l-(5-terc.butoxykarbonylamíno-5-terc.butoxykarbony1penty1)-4-/1-terc.butoxykarbonylamíno-l-N-(i-karboxy-2-ety1)karboxymido-2-ety1/-5-(3-terc.butoxykarbonylamino-3-terc.butoxy karbony 1 propy 1 )pyridíniumhydroxid
Táto zlúčenina sa pripraví postupom popísaným v príklade 7. Hmotnostné spektrum (FAB) : M+ 896.
Príklad 16
Zlúčenina z príkladu 15 sa kopuluje s BSA alebo KLH rovnako ako je to popísané v príkladoch 10 a 11. Výsledné zlúčeniny majú buď BSA alebo KLH pripojený ku karboxylovej skupinu bočného reťazca v polohe 4 pyridíniového kruhu.
Príklad 17 kyselina 2-amino-4-/3-hydroxy-4-(1-karboxy-l-amíηο-2-ety1)-5pyridiny1/butánová
K 200 mg zlúčeniny z príkladu 3 sa pridá 20 ml zmesi kyseliny triíluoroctovej a vody v pomere 95 : 5 a zmes sa po 90 minútach odparí.
Hmotnostné spektrum (FAB) : MH+ 284.
Zlúčeniny všeobecného vzorca I a IA je možné využívať pri stanovení hladín pyridinolinových a deoxypyridinoliových križovo väzobných faktorov odvodených z degradácie kolagénu a prítomných v biologických tekutinách, napríklad v moči alebo krvnom sére. Medzi stavy, ktoré sú u ľudí a zvierat charakterizované vysokým stupňom kostnej resorpcie alebo abnormálnou rovnováhou medzi kostnou tvorbou a kostnou resoorpciou, sú napríklad osteoporóza (rednutie kosti), Pagetova choroba.
- 25 vývoj benígnych alebo malígnych kostných nádorov alebo rakovinovej metastázy kostí, osteomalácia (mäknutie kosti), prpimárny hype.rparatyreoidizmus (chorobný stav vyvolaný zvýšenou činnosťou prištitných teliesok), terapia zlúčeninami , ktoré zvyšujú stupeň kostnej resorpcie (napríklad glukokoi— tikoidmi), osteoartritída (zápal kosti a kĺbov) reumatoidná artritída.
Kvantitatívne stanovenie hladín týchto krížovo väzobných faktorov sa môže uskutočniť napríklad použitím imunologických metód, elektrochemickej titrácie, fyzikálnej fluorescenčnej spektroskopie alebo ultrafialovej absorbancie. Tieto metódy sa môžu uskutočniť priamo s telesnou tekutinou bez jej predchádzajúceho čistenia alebo až po jej prečistení, napríklad v prípade, keď telesná tekutina obsahuje nadmerné množstvo kontaminujúcich látok. Spôsobom podľa vynálezu sa môžu stanoviť voľné krížovo väzobné faktory prítomné v biologických tekutinách alebo krížovo väzobné faktory uvoľnené hydrolýzou peptidov z degradácie kolagénu a prítomné v telesných tekutinách. Pod totálnou hladinou krížovo väzobného faktoru sa myslí celkové množstvo alebo koncentrácia voľného krížovo väzobného faktora a hydrolyzovaného krížovo väzobného faktora prítomné, resp. prítomná v telesnej tekutine.
Kvantitatívne stanovenie pyridínolinových alebo deoxypyridínolinových krížovo väzobných faktorov sa v biologických tekutinách s výhodou uskutočňuje pri použití imunologických metód. V súlade s tým sa pripravia protilátky špecifickej zlúčeniny všeobecného vzorca I nesúce aspoň jednu antigénovú skupinu, ktoré sú ďalej uvádzané ako imunogén. Môžu byť pripravené buď polyklonálne alebo monoklonálne protilátky, ktoré sú imunoreaktívne so zlúčeninou všeobecného vzorca I nesúcou aspoň jednu antigénovú skupinu, v ktorej Xi znamená atóm vodíka a/alebo s takou substituovanou zlúčeninou, v ktorej Xi znamená skupinu OH. V rámci výhodného uskutočnenia vynálezu sa pripravia špecifické protilátky, ktoré sú imunoreaktívne so zlúčeninou všeobecného vzorca I, ktorá nesie aspoň jednu antigénovú skupinu a v ktorej Xi znamená atóm vodíka.
Ako už bolo uvedené vyššie, môže byť v zlúčeninách, môže byť v zlúčeninách všeobecného vzorca I uvedená antigénová skupina pripojená priamo alebo nepriamo v definovanej polohe : antigénová skupina môže byť napríklad prítomná vo všeobecnom substituente Si , Bz alebo Sa, najmä vo všeobecnom substituente .» R3 alebo Bz . S výhodou je antigénová skupina pripojená prostredníctvom dištančnej skupinu. Zlúčeniny všeobecného vzorca IA pripravené spôsobom podľa vynálezu sa tiež môžu použiť pre prípravu odpovdajúcej zlúčeniny všeobecného vzorca I nesúcej jednu, dve, alebo tri antigénové skupiny, ktoré boli definované vyššie.
Uvedená produkcia protilátky sa môže uskutočniť konvenčnými technikami zahŕňajúcimi injekčnú aplikáciu zlúčeniny všeobecného vzorca I nesúcej aspoň jednu antigénovú skupinu vhodnému cicavcovi akým je myš, králik alebo ovca pri použití imunologických techník, ktoré sú v tomto odbore všeobecne známe (Laboratory Techniques in Biochemistry and Molecular Biology, Cambell, A.M., 1986,13 Elservier). Séra sa • titrujú s cieľom stanovenia tvorby protilátok voči imunogénu. Slezinové bunky, alebo periférne krvné lymíocyty môžu byť • izolované, homogenizované a potom zlúčené napríklad s rakovinovými bunkami na vytvorenie kondenzovaného bunkového hybridu, ktorý produkuje monoklonálne protilátky, ktoré sú imunoreaktívne s požadovanou krížovo väzobnou zlúčeninou všeobecného vzorca I podľa vynálezu. Príprava monoklonálnej protilátky sa môže uskutočniť pri použití techník popísaných G.Galfre-om a C.Milstein-om v Meth.Enzymol.73,1(1981).
Polyklonálne alebo najmä monoklonálne protilátky alebo ich fragmenty pripravené vyššie uvedenými spôsobmi alebo ekvivalentnými spôsobmi sa môžu použiť pri rôznych imunometrických postupoch stanovujúcich koncentráciu pyridinolinových alebo dezoxypyridínolinových krížovo väzobných ía28 inových krížovo väzobných faktorov odvodených z degradácie kolagénu v biologickej tekutine pri použití zlúčeniny všeobecného vzorca IA pripravenej spôsobom podľa vynálezu,
3) spôsob kvantitatívneho stanovenia koncentrácie , celkových alebo voľných pyridínolinových alebo deoxypyridinolinových krížovo väzobných faktorov odvodených z , degradácie kolagénu v biologickej tekutine, pričom tento spôsob zahŕňa uvedenie biologickej tekutiny do styku so špecifickými polyklonálnymi, alebo monoklonálnymi protilátkami, ktoré sú imunoreaktivne so zlúčeninou všeobecného vzorca I, neobsahujúce antigénovú skupinu a v ‘ ktorej Xi znamená atóm vodíka alebo skupinu OH,
4) použitie zlúčeniny všeobecného vzorca IA pripravenej spôsobom podľa vynálezu alebo zlúčeniny všeobecného vzorca I , neobsahujúcej antigénovú skupinu ako štandardu pre kvantitatívne stanovenie koncentrácie celkových alebo voľných pyridínolinových krížovo väzobných faktorov odvodených z degradácie kolagénu v biologickej tekutine,
5) vyššie definované polyklonálne a monoklonálne protilátky,
6) bunkový rad, ktorý vylučuje uvedené monoklonálne j ' protilátky, i
i : 7) spôsob produkcie uvedených monoklonálnych protilátok, . i : 8) súpravu na imunometrické stanovenie množstva alebo koncentrácie celkových alebo voľných pyridínolinových i alebo deoxy py r idí nol i nových krížovo väzobných faktorov .1 odvodených z degradácie kolagénu v biologickej tekutine, /i
-j obsahujúcu kompozíciu obsahujúcu vyššie definovanú g
protilátku alebo jej imunologický reaktívny fragment a J . prídavné činidlo pre uskutočňovanie uvedeného imunome27 ktorov, odvodených od degradácie kolagénu, v biologických tekutinách. Tieto imunometrické postupy zahŕňajú použitie monoklonálnej látky alebo jej fragmentu, ktoré sú kopulované s detekovateľnym značiacim členom. Príklady vhodných značiacich členov zahŕňajú napríklad enzýmy, koenzýmy, inhibítory enzýmov, chromoíory, íluoroíory, chemiluminiscenčné látky, paramagnetické kovy, spinové tracery a rádionuklidy. Príklady štandardných imunometrických postupov vhodných pre vyhodnotenie stupňa kostnej resorpcie zahŕňajú napríklad imunosorpčné stanovenie s kopúlovaným enzýmom (ELISA), rádioimunologické stanovenie (RIA) a sendvičové imunorádiometrické stanovenie (IRMA)
Zlúčenina všeobecného vzorca I, ktoré nemá antigénovú skupinu alebo zlúčenina všeobecného vzorca IA pripravená podľa vynálezu, kde Xi znamená atóm vodíka alebo skupinu OH, sa môže použiť ako referenčný štandard pre kvantitatívne stanovenie koncentrácie pyridinolinových alebo deoxypyridinolinových krížovo väzobných faktorov odvodených z degradácie kolagénu v biologických tekutinách, napríklad pri ľubovoľnej z vyššie uvedených kvantitatívnych metód stanovenia alebo v rámci súpravy , ktorá sa používa pre takéto metódy stanovenia.
Vzhľadom na vyššie uvedené vynález poskytuje :
1) Spôsob stanovenia metabolizmu väzobných tkanív,napríklad kostnej alebo chrupavkovitej resorpcie, kvantitatívnym stanovením koncentrácie celkových alebo voľných pyridinolinových alebo deoxypyridinolinových krížovo väzobných faktorov odvodených od degradácie kolagénu v biologickej tekutine pri použití zlúčeniny všeobecného vzorca I.
2) spôsob stanovenia abnormalít metabolizmu väzobných tkanív, napríklad kostnej, alebo chrupavkovitej resoi— pcie, kvantitatívnym stanovením koncentrácie celkových alebo voľných pyridínolinových alebo dezoxypyridíno29 trického stanovenia, spoločne s inštrukciami poskytujúcimi návod na stanovenie pri použití zlúčeniny IA pripravenej spôsobom podľa vynálezu alebo zlúčeniny vSeobecného vzorca I, ktorá neobsahuje antigénovú skupinu a v ktorej Xi znamená atóm vodíka alebo skupinu OH, najmä atóm vodíka, vo funkcii Štandardu.
Claims (11)
1. Spôsob prípravy zlúčeniny vSeobecného vzorca x, O
Cllj
I
CIIX,
I
Z-Rj v ktorom každý z X, Y atómami uhlíka, zvolenými zo dusíka a cy k 1 oa 1 ky 1 a 1 ky 1 ov ú obsahuje 1 až 4 a Z nezávisle znamená alkylovú skupinu s 1 až 8 <
uhlíka, alkylovú skupinu b 1 až 8 atómami preruäenú jedným, alebo dvomi heteroatómami, skupiny zahfhajúcej atóm kyslíka, atóm atóm síry, cykloalkylovú skupinu, skupinu, v ktorej alkýlový zvyšok atómy uhlíka, alkylcykloalkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy skupinu, v ktoré až 4 atómy uhlíka, skupinu, prípadne uhlíka, alkylcykloalky1énlalkylovú každý alkylový zvyšok obsahuje 1 prípadne substituovanú arylovú substituovanú heteroarylovú skupinu, alkyiarylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, alky1heteroarylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, alkylarylénalkylovú skupinu, v ktorej každý alkylový zvyšok obsahuje 1 až
- 31 4 atómy uhlíka, alkylheteroarylénalkylovú skupinu, v ktorej každý alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, arylakylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, heteroalkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, pričom arylový alebo heteroarylový zvyšok vyššie uvedených skupín je prípadne substituovaný.
Ba znamená skupinu COOH alebo jej íunkčný derivát, skupinu CHO, kyano-skupinu, alkoxylovú skupinu s 1 až 8 atómami uhlíka, skupinu SOz,skupinu -POaH alebo jej funkčný derivát, skupinu -SO3H alebo jej funkčný derivát, primárnu, sekundárnu, alebo terciárnu amíno-skupinu, nasýtenú, alebo nenasýtenú cyklickú amínovú skupinu, alebo skupinu všeobecného vzorca a (a) v ktorom
R& znamená primárnu, sekundárnu, alebo terciárnu amínoskupinu, alebo nasýtenú, alebo nenasýtenú cyklickú amínovú skupinu, a
Rs znamená skupinu -COOH alebo jej funkčný derivát, každý Ri a Rz nezávisle znamená atóm vodíka alebo má niektorý z významov uvedený pre R3,
R4 znamená hydroxy-skupinu, alkoxylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka alebo polyalkylénoxy-skupinu,
Xi znamená atóm vodíka alebo hydroxy-skupinu a
Χ2θ znamená anión, s výhradou spočívajúcou v tom, že keď oba X a Y obsahujú alkylové zvyšky, potom dĺžka reťazca alkylového zvyšku v -Y- je o aspoň jeden uhlíkový atóm kratšia než dľžka alkylového zvyšku v -X-, vyznačený tým, že
a) sa zlúčenina všeobecného vzorca II (II) v ktorom X, Y, Bi , Bz a H4 majú vyššie definované významy, uvedie do reakcie zo zlúčeninou všeobecného vzorca III
Xs - C Hz - CHXi - Z - fi3 (III) v ktorom
Xi , Z a Ha majú vyššie uvedený význam a X© znamená odštiepiteľnú skupinu, alebo
b) zlúčenina všeobecného vzorca I alebo IA prevedie na inú zlúčeninu všeobecného vzorca I alebo IA a potom Ba takto zíekaná zlúčenina všeobecného vzorca I alebo IA izoluje vo voľnej forme, alebo vo forme Boli.
2.
Zlúčenina všeobecného vzorca IA (ΙΑ) v ktorom Xi znamená atóm vodíka alebo hydroxy-Bkupinu a Xz»' znamená chloridový, alebo acetátový ión, pripravená BpÔBobom t
definovaným v nároku 1.
3. Zlúčenina všeobecného vzorca I v ktorom každý z X, Y a Z nezávisle znamená alkylovú skupinu s 1 až 8 atómami uhlíka, alkylovú skupinu s 1 až 8 atómami uhlíka, prerušenú jedným, alebo dvomi heteroatómami, zvolenými zo Bkupiny zahŕňajúcej atóm kyslíka, atóm dusíka a atóm bíry, cykloalkýlovú skupinu, cykloalkylalkylovú Bkupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje i až 4 atómy uhlíka, alkylcykloalkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy skupinu, v ktorej až 4 atómy uhlíka, skupinu, prípadne
Ra
- 34 uhlíka, alkylcykloalkenylalkylovú každý alkylový zvyšok obsahuje 1 pripadne substituovanú arylovú substituovanú heteroarylovú skupinu, alkylarylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, alkylheteroarylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, alkylarylénalkylovú skupinu, v ktorej každý alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, alkylheteroarylénalkylovú skupinu, v ktorej každý alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, arylakylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, heteroalkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, pričom arylový alebo heteroarylový zvyšok vyššie uvedených skupín je prípadne substituovaný, znamená skupinu COOH alebo jej funkčný derivát, skupinu CHO, kyano-skupinu, alkoxylovú skupinu s 1 až 8 atómami uhlíka, skupinu SO2,skupinu -POa H alebo jej funkčný derivát, skupinu -SOgH alebo jej funkčný derivát, primárnu, sekundárnu.
alebo terciárnu nenasýtenú cyklickú amíno-skupinu, nasýtenú, alebo amínovú skupinu, alebo skupinu všeobecného vzorca a
R© - CH - R© (a) v ktorom
R© znamená primárnu, sekundárnu, alebo terciárnu amínoskupinu, alebo nasýtenú, alebo nenasýtenú cyklickú amínovú skupinu, a
R© znamená skupinu -COOH alebo jej funkčný derivát, každý Ri a R2 nezávisle znamená atóm vodíka alebo má niektorý z významov uvedený pre Ra,
R4 znamená hydroxy-skupinu, alkoxylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka alebo polyalkylénoxy-skupinu,
Xi znamená atóm vodíka alebo hydroxy-skupinu a
Xz© znamená anión.
s výhradou spočívajúcou v tom, že
i) keď oba X a Y obsahujú alkylové zvyšky, potom dĺžka reťazca aikylového zvyšku v -Y- je o aspoň jeden uhlíkový atóm kratšia než dľžka -X-, aikylového zvyšku v ii) Xz “ je iný než Cl- alebo CH3 C00~ v prípade, z -X-Ri a -Z-R3 znamená ~(CHz)z-CH-COOH , každý
N Hz
Y-Rz znamená
-CHz -CH-COOH
NHz a R4 znamená hydroxyskúpinu.
4. Zlúčenina podľa nároku 3, v ktorej X znamená skupinu -CH2 -CHz , Y znamenná skupinu -CHz-, každý z Ri a Rz znamená zvyšok všeobecného vzorca a, v ktorom Rs znamená skupinu -NH2 alebo skupinu NHY a, kde Y a znamená ktorej znamená ochrannú ·. skupinu a Rs skupinu -COOH alebo alkoxykarbonyiovú skupinu, v alkoxylový zvyšok obsahuje 2 až ž atómov uhlíka, Xi znamená atóm vodíka alebo skupinu OH, Z znamená skupinu -CHz -CHz -a R3 znamená zvyšok všeobecného vzorca a, v ktorom Rs znamená skupinu -NHz alebo skupinu -NHY a a R> znamená skupinu -CONH-Za-Υι> , Υ» znamená antigénovú skupinu, alebo X znamená skupinu -CHz-CHz-, Y znamená skupinu -CHz-, Z znamená 3kupinu -CHz-CHz-, každý z Ri a R3 znamená zvyšok všeobecného vzorca a, v ktorom R=. znamená skupinu -NH2 alebo skupinu kde Y a znamená ochrannú skupinu a R, znamená skupinu alebo alkoxykarbonylovú skupinu,v ktorej alkoxylový
NHY a, -COOH zvyšok obsahuje 2 až 7 atómov uhlíka, Xi znamená atóm vodíka alebo skupinu OH a Rz znamená skupinu -NHz alebo NHY a a R? znamená skupinu -CONH-Z»-Y„ , kde Υ» znamená antigénovú skupinu.
ťoužlt údeniny všeobecného vzorca IA podľa nároku 2 alebo zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa nároku 3 neobsahu1.
- 36 v júcej antigénové skupiny, ako stanovenie koncentrácie celkových vých alebo cieoxypyridínolinových odvodených od degradácie kolagénu
Štandardu pre kvantitatívne alebo voľných pyridínolinokrižovo väzobných faktorov, v biologickej tekutine.
6. Spôsob stanovenia abnormalít metabolizmu väzobných tkanív akými sú napríklad kostná a chrupavkovitá resorpcia, kvantitatívnym určením koncentrácie celkových alebo voľných 5 pyridínolinových alebo deoxypyridínolinových krížovo väzobných faktorov, odvodených od kolagénu, v biologickej tekutine, v yznačený tým, že sa použije zlúčenina všeobecného vzoj— *
ca I podľa nároku 3 alebo zlúčenina všeobecného vzorca IA podľa nároku 2.
a
7. Spôsob kvantitatívneho stanovenia koncentrácie celkových alebo voľných pyridínolinových alebo deoxypyridínolinových krížovo väzobných faktorov, odvodených od degradácie kolagénu, v biologickej tekutine, vyznačený t ý m, že sa biologická tekutina uvedie do styku so Špecifickými polyklonálnymi alebo monoklonálnymi protilátkami, ktoré sú imunoreaktivne so zlúčeninou vSeobecného vzorca I podľa nároku nesúcou aspoň jednu antigénovú skupinu alebo so zlúčeninou vSeobecného vzorca I * podľa nároku 4.
8. Polyklonálna alebo monoklonálna protilátka alebo jej frag ment, ktoré sú imunoreaktívne so zlúčeninou všeobecného vzorca I podľa nároku 3, ktorá nesie aspoň jednu antigénovú skupinu alebo so zlúčeninou vSeobecného vzorca I podľa nároku 4.
9. Bunkový rad vylučujúci monokionálnu protilátku podľa nároku 3.
10. Súprava pre imunometrické stanovenie množstva alebo koncentrácie celkových alebo voľných pyridínolinových alebo deoxypyridínolinových krížovo väzobných faktorov, odvodených od degradácie kolagénu, v biologickej tekutine, v y z n a č en á t ý m, že zahŕňa kompozíciu obsahujúcu protilátku alebo
- 37 jej imunologický reaktívny fragment podľa nároku 8 a prídavné činidlo pre uskutočňovanie uvedeného imunometrického stanovenia spoločne s inštrukciami pre uskutočňovanie tohto imunometrického stanovenia, pričom sa ako štandard používa zlúčenina všeobecného vzorca I podľa nároku 3 bez antigénovej skupiny.
11. Súprava pre stanovenie množstva alebo koncentrácie celkových alebo voľných pyridínolinových alebo deoxypyridínolinových krížovo väzobných faktorov, odvodených od degradácie kolagénu, v biologickej tekutine, vyznačenátým, že ako štandard obsahuje zlúčeninu väeobecnély vzorca IA podľa nároku 2 alebo zlúčeninu všeobecného vzorca I, podľa nároku 3 bez antigénovej skupiny.
12. Zlúčenina všeobecného vzorca II
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB929202139A GB9202139D0 (en) | 1992-01-31 | 1992-01-31 | Improvements in or relating to organic compounds |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SK4293A3 true SK4293A3 (en) | 1993-11-10 |
| SK281137B6 SK281137B6 (sk) | 2000-12-11 |
Family
ID=10709643
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SK42-93A SK281137B6 (sk) | 1992-01-31 | 1993-01-28 | Spôsob prípravy pyridínových derivátov, ich použitie a medziprodukty na ich prípravu |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0556152B1 (sk) |
| JP (1) | JP3544549B2 (sk) |
| AT (1) | ATE210645T1 (sk) |
| AU (1) | AU663909B2 (sk) |
| CA (1) | CA2088396A1 (sk) |
| CZ (1) | CZ288038B6 (sk) |
| DE (1) | DE69331293T2 (sk) |
| DK (1) | DK0556152T3 (sk) |
| ES (1) | ES2169723T3 (sk) |
| FI (1) | FI104896B (sk) |
| GB (1) | GB9202139D0 (sk) |
| HU (1) | HU214677B (sk) |
| NO (1) | NO180779C (sk) |
| PT (1) | PT556152E (sk) |
| SG (1) | SG43065A1 (sk) |
| SK (1) | SK281137B6 (sk) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5620861A (en) * | 1992-07-31 | 1997-04-15 | Metra Biosystems, Inc. | Method and kit for pyridinium crosslink assay |
| US5756361A (en) * | 1992-12-17 | 1998-05-26 | Metra Biosystems, Inc. | Screening method for periodontal disease |
| US5736344A (en) * | 1992-12-17 | 1998-04-07 | Metra Biosystems, Inc. | Serum pyridinium crosslinks assay |
| US5661039A (en) * | 1995-03-01 | 1997-08-26 | Metra Biosystems, Inc. | Perspiration assay for bone resorption |
| US5723619A (en) * | 1997-01-13 | 1998-03-03 | Bayer Corporation | Method for the synthesis of deoxypyridinoline |
| US5834610A (en) * | 1997-05-06 | 1998-11-10 | Johnson; Gary M. | Conversion of pyridinoline to deoxypyridinoline |
| CN105801688A (zh) * | 2016-04-14 | 2016-07-27 | 苏州博源医疗科技有限公司 | 脱氧吡啶酚免疫原、抗体和检测试剂及制备方法 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS59148766A (ja) * | 1983-02-10 | 1984-08-25 | Otsuka Pharmaceut Co Ltd | ピリジン誘導体 |
| US4973666A (en) * | 1987-11-06 | 1990-11-27 | Washington Research Foundation | Peptide fragments containing HP and LP cross-links |
| GB8929366D0 (en) * | 1989-12-30 | 1990-02-28 | Rowett Research Inst | Method to detect connective tissue disorder in humans and animals |
-
1992
- 1992-01-31 GB GB929202139A patent/GB9202139D0/en active Pending
-
1993
- 1993-01-15 HU HU9300108A patent/HU214677B/hu not_active IP Right Cessation
- 1993-01-26 ES ES93810049T patent/ES2169723T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1993-01-26 DK DK93810049T patent/DK0556152T3/da active
- 1993-01-26 AT AT93810049T patent/ATE210645T1/de not_active IP Right Cessation
- 1993-01-26 DE DE69331293T patent/DE69331293T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1993-01-26 SG SG1996003175A patent/SG43065A1/en unknown
- 1993-01-26 PT PT93810049T patent/PT556152E/pt unknown
- 1993-01-26 EP EP93810049A patent/EP0556152B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-01-28 NO NO930284A patent/NO180779C/no unknown
- 1993-01-28 FI FI930367A patent/FI104896B/fi active
- 1993-01-28 SK SK42-93A patent/SK281137B6/sk unknown
- 1993-01-29 JP JP01341493A patent/JP3544549B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1993-01-29 CZ CZ1993106A patent/CZ288038B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1993-01-29 AU AU32105/93A patent/AU663909B2/en not_active Ceased
- 1993-01-29 CA CA002088396A patent/CA2088396A1/en not_active Abandoned
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO930284L (no) | 1993-08-02 |
| HU214677B (hu) | 1998-04-28 |
| HU9300108D0 (en) | 1993-04-28 |
| ATE210645T1 (de) | 2001-12-15 |
| NO180779C (no) | 1997-06-18 |
| DE69331293T2 (de) | 2002-07-18 |
| EP0556152A1 (en) | 1993-08-18 |
| CZ288038B6 (cs) | 2001-04-11 |
| FI104896B (fi) | 2000-04-28 |
| PT556152E (pt) | 2002-05-31 |
| EP0556152B1 (en) | 2001-12-12 |
| SK281137B6 (sk) | 2000-12-11 |
| HUT70276A (en) | 1995-09-28 |
| AU3210593A (en) | 1993-08-05 |
| NO930284D0 (no) | 1993-01-28 |
| AU663909B2 (en) | 1995-10-26 |
| NO180779B (no) | 1997-03-10 |
| JPH0641078A (ja) | 1994-02-15 |
| GB9202139D0 (en) | 1992-03-18 |
| JP3544549B2 (ja) | 2004-07-21 |
| DK0556152T3 (da) | 2002-04-08 |
| DE69331293D1 (de) | 2002-01-24 |
| CA2088396A1 (en) | 1993-08-01 |
| FI930367A0 (fi) | 1993-01-28 |
| ES2169723T3 (es) | 2002-07-16 |
| SG43065A1 (en) | 1997-10-17 |
| FI930367A (fi) | 1993-08-01 |
| CZ10693A3 (en) | 1993-12-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5688921A (en) | Reagents and methods for the detection and qualification of thyroxine in fluid samples | |
| US5593896A (en) | Reagents and methods for the detection and quantification of thyroxine in fluid samples | |
| AU2010284614B2 (en) | Imatinib immunoassay | |
| US5601824A (en) | Homobidental, trifunctional linkers used in immunologically active conjugates | |
| JPH06228091A (ja) | 三機能性抗体を合成する際の中間体としてのトリス−マレインイミド化合物 | |
| AU2011224719A1 (en) | Lenalidomide and thalidomide immunoassays | |
| AU630668B2 (en) | Protein labelling using bifunctional hydrazine and hydrazine compounds | |
| EP2442804B1 (en) | Derivatives, reagents, and immunoassay for detecting levetiracetam | |
| SK4293A3 (en) | Pyridine derivatives | |
| US20140302618A1 (en) | Clozapine Immunoassay | |
| EP0844246A1 (en) | Reagents for labeling sh groups, process for the preparation of them, and method for labeling with them | |
| JP2732825B2 (ja) | 新規なベンゾジアゼピン−タンパク質結合体 | |
| CN114560819B (zh) | 取代三嗪化合物、其制备方法及在氨基酸、肽、蛋白、细胞标记中的应用 | |
| Adamczyk et al. | Synthesis of immunocomponents for the measurement of lead (Pb) by fluorescence polarization immunoassay | |
| Moroder et al. | Immunoassays of peptide hormones and their chemical aspects | |
| US6175016B1 (en) | Pyridine derivatives | |
| JP4008446B2 (ja) | ベンゼン環上に二置換基を有するβ−ベンジルオキシアスパラギン酸誘導体 | |
| DeMarco et al. | Lisinopril | |
| US6291198B1 (en) | Antibody that recognizes pyrazine derivative and method for measuring 1,2-dicarbonyl derivative using said antibody | |
| US5824786A (en) | Synthesis of galactosylhydroxylysine | |
| JPH07504271A (ja) | ジアルキルチオカルバモイルハライドを用いるｎ末端ペプチド分解 |