SK279322B6 - Mikrobiologický spôsob hydroxylácie dusíkatých het - Google Patents

Mikrobiologický spôsob hydroxylácie dusíkatých het Download PDF

Info

Publication number
SK279322B6
SK279322B6 SK137-93A SK13793A SK279322B6 SK 279322 B6 SK279322 B6 SK 279322B6 SK 13793 A SK13793 A SK 13793A SK 279322 B6 SK279322 B6 SK 279322B6
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
acid
microorganisms
carboxylic acids
nitrogenous
hydroxy
Prior art date
Application number
SK137-93A
Other languages
English (en)
Other versions
SK13793A3 (en
Inventor
Andreas Kiener
Andreas Tschech
Andreas Tinschert
Klaus Heinzmann
Original Assignee
Lonza A.G. (Dir.:Basel)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lonza A.G. (Dir.:Basel) filed Critical Lonza A.G. (Dir.:Basel)
Publication of SK13793A3 publication Critical patent/SK13793A3/sk
Publication of SK279322B6 publication Critical patent/SK279322B6/sk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/10—Nitrogen as only ring hetero atom
    • C12P17/12—Nitrogen as only ring hetero atom containing a six-membered hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/79—Acids; Esters
    • C07D213/80—Acids; Esters in position 3
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/14—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/24—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Description

Oblasť techniky
Vynález sa týka nového mikrobiologického spôsobu prípravy dusíkatých hydroxyheterocyklických karboxylových kyselín alebo ich rozpustných solí všeobecného vzorca (I)
pri ktorom sa vychádza z zodpovedajúcich dusíkatých heterocyklických karboxylových kyselín. Vynález sa týka aj nových mikroorganizmov vhodných na spôsob prípravy.
V nasledujúcom texte sa ako dusíkaté heterocyklické karboxylové kyseliny, hydroxylované alebo nehydroxylované, chápu tiež ich rozpustné soli, ako napríklad ich alkalické soli alebo amónne soli.
Doterajší stav techniky
Dusíkaté 2-hydroxyheterocyklické karboxylové kyseliny sú dôležitými medziproduktmi pri syntézach účinných látok. Napríklad kyseliny 2-hydroxynikotínová sa používa ako východisková látka na prípravu kyseliny 2-chlómikotínovej (US patentový spis 4 081 451), ktorá je napríklad dôležitým medziproduktom na výrobu farmaceutických prostriedkov (Ann. Pharm. Fr., 1980, 38 (3), str., 243-252).
Dosiaľ nie sú známe žiadne mikrobiologické spôsoby prípravy dusíkatých hydroxyheterocyklických karboxylových kyselín.
Úlohou vynálezu je poskytnúť jednoduchý a ekologický mikrobiologický spôsob prípravy chemicky ťažko dostupných dusíkatých 2-hydroxyheterocyklických karboxylových kyselín.
Podstata vynálezu
Túto úlohu vyriešil spôsob prípravy podľa vynálezu uvedený v patentovom nároku 1 a nové mikroorganizmy podľa patentového nároku 6.
Spôsob podľa vynálezu spočíva v tom, že sa dusíkatá heterocyklická karboxylová kyselina všeobecného vzorca (II)
kde Rj a R2 sú rovnaké alebo rozdielne a znamenajú atóm vodíka, atóm halogénu alebo C [ -C4-alkylovú skupinu a X znamená atóm dusíka alebo skupinu CR3, v ktorej R3 znamená atóm vodíka alebo atóm halogénu, ako substrát, prevedie pomocou mikroorganizmov, ktoré zužitkujú kyselinu 6-metylnikotínovú a ktoré obsahujú špecifickú hydroxylázu, na dusíkatú hydroxyheterocyklickú karboxylovú kyselinu všeobecného vzorca (I)
kde R], R2 a X majú uvedený význam.
Pod pojmom mikroorganizmy zužitkujúce kyselinu 6-metylnikotínovú, ktorc obsahujú špecifickú hydroxylázu sa rozumie nasledujúce:
Ak sa napríklad pestuje biomasa z kalu čistiacich zariadení ako inokulum s kyselinou 6-metylnikotínovou, získajú sa mikroorganizmy zužitkujúce kyselinu 6-metylnikotínovú, t. j. mikroorganizmy, ktoré rastú s kyselinou 6-metylnikotínovou ako jediným zdrojom uhlíka, dusíka a energie. Ak sa metódami bežnými v odbore podrobia selekcii mikroorganizmy, ktoré úplne odbúravajú kyselinu 6-metylnikotínovú cez kyselinu 6-hydroxy-6-metylnikotínovú ako medziprodukt, získajú sa mikroorganizmy, ktoré obsahujú špecifickú hydroxylázu. To znamená, že sa získajú mikroorganizmy, ktoré špecificky hydroxylujú jediný atóm uhlíka, ktorý leží medzi kyselinovou funkciou a atómom dusíka.
Na spôsob podľa vynálezu sú vhodné v podstate všetky mikroorganizmy, ktoré sa týmto spôsobom podrobili selekcii, napríklad z kalov čistiacich zariadení alebo vzoriek pôdy. Tieto mikroorganizmy nie sú v literatúre opísané a sú súčasťou vynálezu.
Výhodne sa pri spôsobe podľa vynálezu používajú mikroorganizmy s označením Ki 101 (DSM 6920), rovnako ako aj ich dcsccndenty a mutanty. Mikroorganizmy boli uložené 10. 02. 1992 v Nemeckej zbierke pre mikroorganizmy a bunkové kultúry GmbH, Mascheroderweg lb, D-3300 Braunschweig.
Vedecký opis mikroorganizmov Ki 101 (DSM 6920):
drobné tyčinky
0,4 - 0,5
1,0-1,5 bunková forma šírka pm dĺžka v pm pohyblivosť kmitanie Gram-reakcia lýza 6-%ným KOH aminopeptidáza (Cerny) spóry oxidáza kataláza +
+ +
+
Rod cez 16S rRNA-sekvenčnú analýzu sa nedal určiť.
Selekcia a pestovanie týchto mikroorganizmov s kyselinou 6-metylnikotínovou sa uskutočňuje metódami bežnými v odbore.
Počas selekcie sa účelne uskutoční sereening mikroorganizmov za aeróbnych podmienok. Výhodne sa mikroorganizmy počas sreeningu pestujú v pokoji (nie za trepania).
Množstvo kyseliny 6-metylnikotínovej je počas selekcie a pestovania účelné až do 1 % hmotn., výhodne do 0,5 % hmotn.
Selekcia a pestovanie sa účelne uskutočňujú pri hodnote pH od 5 do 9, výhodne od 6 do 8.
Teplota počas selekcie a pestovania môže byť medzi 15 až 50 °C, výhodne medzi 25 až 40 °C.
Zvyčajne sa selekcia a pestovanie uskutočnia v médiu obsahujúcom minerálne soli, výhodne v médiu s obsahom minerálnych solí, ktorého zloženie je uvedené v tabuľke 1.
Keď sa dosiahne vhodná optická hustota pri 650 nm (OD650) od 0,5 do 100, môžu sa mikroorganizmy zbierať buď metódami bežnými v odbore, alebo sa môže subsrát, dusíkatá heterocyklická kyselina, pridať priamo k mikroorganizmom na vlastnú reakciu (biotransformáciu). Vlastná biotransformácia sa potom uskutoční s nerastúcimi bunkami metódami v odbore bežnými.
Ako substráty všeobecného vzorca (II) môžu sa použiť napríklad kyselina nikotínová, kyselina pyrazínkarboxylová alebo ich halogénderiváty alebo C1-C4 alkylderiváty.
Ako halogénderiváty kyseliny nikotínovej alebo kyseliny pyrazínkarboxylovej sa výhodne hydroxylujú kyselina 6-chlómikotínová, kyselina 5,6-dichlómikotínová a kyselina 5-chlórpyrazínkarboxylová.
Ako derivát kyselina Ci-C4-alkylpyrazínkarboxylovej sa výhodne hydroxyluje kyselina 5-metylpyrazínkarboxylová.
Substrát sa na biotransformáciu môže pridávať kontinuálne alebo jednorázovo. Výhodne sa substrát pridáva tak, aby koncentrácia substrátu v kultivačnom médiu neprekročila 10 % hmotn., výhodne 7 % hmotn.
Ako médium sa môžu použiť na biotransformáciu média bežné v odbore. Výhodne sa biotransformácia uskutočňuje v nízkomolámom fosfátovom pufri.
Zvyčajne sa biotransformácia vykonáva so suspenziou mikroorganizmov, ktorá má optickú hustotu od 0,5 do 100 pri 650 nm (ODôsq), výhodne od 5 do 50.
Biotransformácia sa účelne vykonáva pri teplote od 15 do 50 °C, výhodne od 25 do 35 °C a pri hodnote pH od 5 do 9, výhodne od pH 6,5 do 7,5. Po obvyklom reakčnom čase od 5 hod. do 3 dní sa môže hydroxylovaný produkt všeobecného vzorca (I) izolovať v odbore bežnými metódami, napr. okyslením bezbunkového supematantu.
Dusíkaté hydroxyheterocyklické karboxylové kyseliny pripravené týmto spôsobom všeobecného vzorca (I)
v ktorom ak X znamená atóm dusíka, R] a R2 sú zhodné alebo rozdielne a znamenajú atóm vodíka, atóm halogénu alebo C[-C4-alkylovú skupinu s výnimkou, že R] a R2 nie sú súčasne atómom vodíka, rovnako ako keď X znamená CH-funkciu, R| a R2 znamenajú atóm halogénu, nie sú v literatúre opísané.
Najvýhodnejšími z týchto nových zlúčenín sú kyselina 5,6-dichlór-2-hydroxynikotínová, kyselina 3-hydroxy-5-methylpyrazínkarboxylová a kyselina 3-hydroxy-5-chlórpyrazinkarboxylová.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1
Izolácia mikroorganizmov zužitkujúcich kyselinu 6-metylnikotínovú
300 ml Erlenmeyrova banka sa naplní 100 ml média obsahujúceho minerálne soli, ktoré obsahuje 1 mmol kyseliny 6-metylnikotínovej (tabuľka 1) a zmieša sa s 10 ml kalu z čistiacich zariadení firmy LONZA AG vo Visp, Švajčiarsko alebo sa zmieša so vzorkou pôdy z podniku LONZA, Visp a inkubuje sa v pokoji pri 30 °C. Po 10 dňoch sa v niektorých kultúrach mohla spektrofotometricky preukázať kyselina 2-hydroxy-6-metylnikotínová. Tieto kultúry sa potom niekoľkokrát preočkujú do čerstvého média obsahujúceho minerálne soli. Potom sa bunkové suspenzie, ktoré tvoria kyselinu 2-hydroxy-6-metylnikotínovú nanesú na rovnaké médium, ktoré obsahuje 1,6 % (hmotn./obj.) agaru. Agarové doštičky sa potom inkubujú pri 30 °C v atmosfére, ktorá obsahuje 4 % (¾ a 96 % N2. Jednotlivé kolónie sa prenesú do kvapalného média a inku bujú sa v pokoji. Bakteriálny kmeň s označením KilOl (DSM 6920) vytvoril počas rastu na kyseline 6-metylnikotínovej kyselinu 2-hydroxy-6-mctylnikotínovú.
Príklad 2
Mikrobiologická oxidácia kyseliny nikotínovej na kyselinu 2-hydroxynikotínovú
Mikroorganizmy s označením KilOl (DSM 6920) sa inkubujú v 800 ml média obsahujúceho minerálne soli (tabuľka 1) s pridaním 8 mmol kyseliny 6-metylnikotínovej v 1 litrovej Fembachovej banke pri 30 °C na trepačke pri 100 ot./min. (otáčky za min.). Inokulum má 5 % (obj./obj.). Po 5 dňoch je ODg5o približne 0,5. Potom sa bunky zoberú a jedenkrát sa premyjú 50 molámym fosfátovým pufrom s hodntou pH 7,0. Potom sa bunky resuspendujú v 20 ml 50 mM fosfátovom pufri s hodnotou pH 7,0., ktorý obsahuje 200 mg (1,38 mmol) sodnej soli kyseliny nikotínovej. ODgso je 20. Po 6 hod. inkubácie na trepačke pri 30 °C sa chromatografiou v tenkej vrstve už nedokázala kyselina nikotínová. Potom sa biomasa odstredí a supematant sa okyslí na hodnotu pH 2,5, aby sa kyselina 2-hydroxynikotínová vyzrážala. Pomocou ' H-NMR (DMSO) analýzy sa nedokázala v izolovanom produkte žiadna nečistota. Spolu sa izolovalo 140 mg (1 mmol) kyseliny 2-hydroxynikotínovej, čo zodpovedá výťažku 72 %, vzhľadom na kyselinu nikotínovú.
Tabuľka 1
Zásobné roztoky média obsahujúceho minerálne soli
Zásobný roztok 1:
NaH2PO4.2H2O 156,0g
NH4CI 10,0g
K2SO4 1,2g pH upraviť s KOH na7,0 destilovaná voda 500,0 ml
Zásobný roztok 2:
kyselina p-aminobenzoová 8,0 mg
D-biotin 2,0mg kyselina nikotínová 20,0mg
Ca-D-pantotenát 10,0mg pyridoxalhydrochlorid 30,0mg tiaminhydrochlorid 20,0mg kyanokobalamin 10,0mg destilovaná voda 100,0 ml, sterilné filtrovať
Zásobný roztok 3:
HC1 (37 %) 7,0 ml
FeC12 4H2O1,5 g
ZnCfy 0,07 g
MnCl2 4H2O0,1 g
H3BO3 0,006 g
C0CI2 · 6H2O 0,19 g
CuCl2.7H2O 0,002 g
NiCb · 6H2O 0,024 g
Na2Mo04.2H2O 0,036 g destilovaná voda 1000,0 ml, autoklávovať, 121 °C, 20 min.
Zásobný roztok 4:
NaOH 0,5 g
Na2SeO3 . 5H2O 0,003 g
Na2WC>4.2H2O 0,004 g destilovaná voda 1000,0 ml, autoklávovať, 121 °C, 20 min.
Zásobný roztok 5:
MgCl2.6H2O 40,0 g
CaCl2 · 2H2O 5,0 g destilovaná voda 200,0 ml, autoklávovať, 121 °C, 20 min.
Kyselina 6-metylnikotínová (500 mM) sodná soľ kyseliny 6-metylnikotínovej 80,0 g destilovaná voda 1000,0 ml, autoklávovať, 121 °C, 20 min.
Rastové médium 10 mM kyselina 6-metylnikotínová roztok 1 25,0 ml kyselina 6-metylnikotínová 20,0 ml destilvaná voda 1000,0 ml, autoklávovať, 121 °C, 20 min.
Po sterilizácii sa pridá roztok 2 roztok 3 roztok 4 roztok 5
0,5 ml
1,0 ml
1,0 ml
0,5 ml kde Rj a R2 sú zhodné alebo rozdielne a znamenajú atóm vodíka, atóm halogénu alebo Ci-C4-alkylovú skupinu a X znamená atóm dusíka alebo CF3 skupinu, kde R3 znamená atóm vodíka alebo atóm halogénu, vyznačujúci sa tým, že sa dusíkatá heterocyklická karboxylová kyselina alebo jej rozpustné soli všeobecného vzorca (II)
kde R] a R2 a X majú uvedený význam, ako substrát, premenia pomocou mikroorganizmov zužitkujúcich kyselinu 6-metylnikotínovú a obsahujúcich špecifickú hydroxylázu, na produkt všeobecného vzorca (I)
2. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa t ý m , že sa ako substrát použijú dusíkaté heterocyklické karboxylové kyseliny všeobecného vzorca (II)
Tabuľka 2:
Príklad 3 až 7
Príklady 3 až 7 sa vykonávajú podľa príkladu 2. Výsledky sú zhrnuté v tabuľke 2.
Príklad Východzia litka Kor»ce-.tr, bm/Qb ODeso Cas Produkt VýťaSok
nm cm
3 sodná boP kys. b-cblómikotínovaj t T 30 ib kys. 6-ehler-2hydroxynlkottnoví 70 Z izal.
* odnA íaľ kya.5,6dlchlôrnlkotínovaj 1 X 20 lá kya. 3,6-dichlúr- 2-riydroxyniKotínavA 20 Z anal.
S sodná soT ky«. pyraz fnkarboxyloV.J 0.3Ϊ 5 24 kye. 3-hydroxypyrazťnkarboxylová 70 X anal.
b «odnA soľ kys. 5-maty ipy razí nkarbaxylov· j O,3X 5 24 kya. 3-hydroxy3-metylpyrazlnkarboxylovA 80 Z anal·
7 sodná soľ kya. 5-chlôrpyrazínkarboxylevej O.3I S 24 Kye. 3-hydroxyS-chldrpyrazínkarbexylevá SO x anal.
v tabuľke 2:
hm/ob znamená hmotnosť/objem izol. znamená izolované anal. znamená analyticky
Analytické údaje k príkladu 6 (kyselina 3-hydroxy-5-metylpyrazínkarboxylová) >H-NMR: (DMSO, 400 MHz) δ v ppm 2,4, s; 2,6 s; 3,8 s; 7,8 s.
'3C-NMR: (DMSO, 100,5 MHR) δ v ppm 20, t; 40, m; 130 s; 134, s; 155, s; 164, s; 170, s.
Analytické údaje k príkladu 7 (kyselina 3-hydroxy-5-chlórpyrazínkarboxylová
ÍH-NMR:(D2O a dioxan, 400 MHz) δ ppm 3,8, s; 4,7, s; 8,0, s.
13C-NMR: (D2O a dioxan, 100,5 MHz) δ ppm 132, s; 133, s; 145, s; 149, s; 164, s; 172 s.

Claims (10)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Mikrobiologický spôsob hydroxylácie dusíkatých heteroxyklických karboxylových kyselín alebo ich rozpustných solí všeobecného vzorca (I) kde Ri a R2 sú rovnaké alebo rôzne a znamenajú atóm vodíka, atóm chlóru alebo metylovú skupinu a X znamená atóm dusíka alebo CH skupinu.
  2. 3. Spôsob podľa aspoň jedného nároku 1 a 2, vyzná č u j ú c i sa tým, že sa reakcia vykonáva s mikroorganizmami označenými KÍ101 DSM 6920 alebo ich descendentami a mutantmi.
  3. 4. Spôsob podľa aspoň jedného nároku 1 až 3, v y značujúci sa tým, že sa reakcia vykonáva pri jednorázovom alebo kontinuálnom pridaní substrátu tak, že koncentrácia substrátu nepresiahne v kultivačnom médiu 10 % hmotnostných.
  4. 5. Spôsob podľa aspoň jendého nároku 1 až 4, v y značujúci sa tým, že sa reakcia vykonáva pri teplote od 15 do 50 °C a pri pH od 5 do 9.
  5. 6. Mikroorganizmy, ktoré zužitkovávajú kyselinu 6-metylnikotinovú ako jediný zdroj uhlíka, dusíka a energie cez kyselinu 2-hydroxy-6-metylnikotínovú.
  6. 7. Mikroorganizmy, podľa nároku 6 s označením KÍ101 uložené pod DSM 6920 a ich descendenty a mutanty, zachovávajúce si schopnosti pôvodného mikroorganizmu.
  7. 8. Dusíkaté hydroxyheterocyklické karboxylové kyseliny všeobecného vzorca (I) v ktorom keď X znamená atóm dusíka, R| a R2 sú rovnaké alebo rôzne a znamenajú atóm vodíka, atóm halogénu alebo C[-C4-alkylovú skupinu s výnimkou, že R) a R2 neznamenajú spoločne atóm vodíka a keď X znamená CH skupinu, R) a R2 znamená atóm chlóru.
  8. 9. Kyselina 5,6-dichlór-2-hydroxynikotínová.
  9. 10. Kyselina 3-hydroxy-5-metylpyrazínkarboxylová.
  10. 11. Kyselina 3-hydroxy-5-chlórpyrazínkarboxylová.
SK137-93A 1992-03-04 1993-02-25 Mikrobiologický spôsob hydroxylácie dusíkatých het SK279322B6 (sk)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CH67292 1992-03-04

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SK13793A3 SK13793A3 (en) 1993-10-06
SK279322B6 true SK279322B6 (sk) 1998-10-07

Family

ID=4192473

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK137-93A SK279322B6 (sk) 1992-03-04 1993-02-25 Mikrobiologický spôsob hydroxylácie dusíkatých het

Country Status (17)

Country Link
US (2) US5306630A (sk)
EP (1) EP0559116B1 (sk)
JP (1) JPH06199797A (sk)
KR (1) KR100274205B1 (sk)
CN (1) CN1077748A (sk)
AT (1) ATE153698T1 (sk)
CA (1) CA2091005C (sk)
CZ (1) CZ282939B6 (sk)
DE (1) DE59306547D1 (sk)
DK (1) DK0559116T3 (sk)
ES (1) ES2101887T3 (sk)
GE (1) GEP19991710B (sk)
GR (1) GR3024286T3 (sk)
LT (1) LT3114B (sk)
LV (1) LV10504B (sk)
RU (1) RU2122029C1 (sk)
SK (1) SK279322B6 (sk)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9426293D0 (en) * 1994-12-28 1995-02-22 Zeneca Ltd Composition,compound and use
US5763232A (en) * 1996-02-15 1998-06-09 Mitsubishi Chemical Corporation Method for producing 3-hydroxy nitrogen-containing six-membered cylic compound
US6767741B1 (en) * 1999-08-27 2004-07-27 Invitrogen Corporation Metal binding compounds and their use in cell culture medium compositions
AU7081500A (en) * 1999-08-27 2001-03-26 Invitrogen Corporation Metal binding compounds and their use in cell culture medium compositions
AU2002220603A1 (en) * 2000-10-06 2002-04-15 Lonza A.G. Biotechnological method for preparing carboxylic acids with a hydroxy-nitrogen heterocycle
NZ584157A (en) * 2007-09-27 2012-04-27 Toyama Chemical Co Ltd Organic amine salt of 6-fluoro-3-hydroxy-2-pyrazinecarbonitrile and method for producing the same
BR112013011418B1 (pt) * 2010-11-12 2021-03-16 Fujifilm Toyama Chemical Co., Ltd Derivado de pirazino[2,3-d]isoxazol, métodos para a produção de um derivado de pirazino [2,3-d]isoxazol e compostos

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4081451A (en) * 1975-03-20 1978-03-28 Schering Corporation Process for preparing 2-halogeno nicotinic acids
JPS6061567A (ja) * 1983-09-14 1985-04-09 ロンザ　リミテツド ２−ピリジンカルボン酸−ν−オキサイドから２−ヒドロキシピリジンを製造する方法
CH658866A5 (de) * 1984-02-21 1986-12-15 Lonza Ag Verfahren zur herstellung von 6-hydroxynikotinsaeure.
CH658867A5 (de) * 1984-02-22 1986-12-15 Lonza Ag Verfahren zur herstellung von 6-hydroxynikotinsaeure.
IN170700B (sk) * 1989-12-20 1992-05-02 Lonza Ag
US5236832A (en) * 1990-02-13 1993-08-17 Lonza, Ltd. Microbiological oxidation of methyl groups in heterocycles
US5242816A (en) * 1990-07-10 1993-09-07 Lonza Ltd. Microbiological oxidation of alkyl groups in heterocycles
CZ279464B6 (cs) * 1990-09-24 1995-05-17 Lonza A.G. Způsob hydroxylace methylových skupin v aromatických heterocyklech, hybridní plasmidy pL05 a p L04 uložené v mikroorganismech Pseudomonas putida a Escherichia coli
CZ279488B6 (cs) * 1990-09-25 1995-05-17 Lonza A.G. Způsob mikrobiologické výroby hydroxylovaných heterocyklů
US5238830A (en) * 1991-02-04 1993-08-24 Lonza Ltd. Microbiological process for the production of 6-hydroxypicolinic acid
KR100233330B1 (ko) * 1991-02-04 1999-12-01 하인즈 모제르 6-히드록시피콜린산을 제조하기 위한 미생물학적 방법
JPH0728750B2 (ja) * 1991-03-30 1995-04-05 池田食研株式会社 微生物によるピラジン酸の水酸化物の製造方法
JPH0740951B2 (ja) * 1991-03-30 1995-05-10 池田食研株式会社 微生物による含窒素複素環化合物の水酸化物の製造方法
FI922125A (fi) * 1991-06-21 1992-12-22 Lonza Ag Mikrobidogiskt foerfarande foer framstaellning av 5-hydroxipyrazinkarboxylsyra
MX9204902A (es) * 1991-08-30 1993-05-01 Lonza Ag Procedimiento microbiologico para la preparacion de acido 6-hidroxipirazincarboxilico.
JP2583719B2 (ja) * 1992-08-10 1997-02-19 株式会社日立製作所 ガス制御式出力安定化ガスレーザ装置

Also Published As

Publication number Publication date
CZ27293A3 (en) 1994-01-19
LV10504A (lv) 1995-02-20
JPH06199797A (ja) 1994-07-19
ES2101887T3 (es) 1997-07-16
DE59306547D1 (de) 1997-07-03
KR100274205B1 (ko) 2000-12-15
LTIP377A (en) 1994-06-15
DK0559116T3 (da) 1997-06-16
CZ282939B6 (cs) 1997-11-12
GEP19991710B (en) 1999-08-05
LV10504B (en) 1996-02-20
ATE153698T1 (de) 1997-06-15
CN1077748A (zh) 1993-10-27
GR3024286T3 (en) 1997-10-31
EP0559116A3 (en) 1994-07-06
EP0559116A2 (de) 1993-09-08
KR930019834A (ko) 1993-10-19
CA2091005A1 (en) 1993-09-05
SK13793A3 (en) 1993-10-06
LT3114B (en) 1994-12-27
CA2091005C (en) 2001-09-25
US5364940A (en) 1994-11-15
RU2122029C1 (ru) 1998-11-20
US5306630A (en) 1994-04-26
EP0559116B1 (de) 1997-05-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5173412A (en) Microbiological process for the production of hydroxylated pyrazine derivatives
SK279322B6 (sk) Mikrobiologický spôsob hydroxylácie dusíkatých het
JP3098310B2 (ja) ６−ヒドロキシピコリン酸の微生物学的製法
US5516661A (en) Microbiological process for the production of aromatic hydroxy-heterocyclic carboxylic acids
SK278570B6 (en) Microbiological production method for 5-hydroxypyrazinecarboxylic acid
US5270203A (en) Biologically pure culture of Alcaligenes faecalis DSM 6335
US5264361A (en) Microbiological process for the production of 6-hydroxypicolinic acid
US5352592A (en) Microbiological process for the production of 5-hydroxypyrazinecarboxylic acid
US5266469A (en) Microbiological process for the production of 6-hydroxynicotinic acid
US4673646A (en) Production of 2-hydroxymuconic semialdehyde
SK278790B6 (sk) Mikrobiologický spôsob výroby kyseliny6-hydroxypyr
US5338667A (en) Microbiological process for the production of malonyl-7-amino-cephalosporanic acid derivatives using Sphingomonas sp. DSM 7007
US5264362A (en) Microbiological process for the production of 6-hydroxynicotinic acid
US5266482A (en) Agrobacterium useful for the microbiological process for the production of hydroxylated pyrazine derivatives
US5238830A (en) Microbiological process for the production of 6-hydroxypicolinic acid
US4617156A (en) 2-hydroxymuconic semialdehyde bisulfite adduct
US5268294A (en) Alcaligenes faecalis strains useful for the microbiological process for the production of 6-hydroxypicolinic acid