SE452244B - PROCEDURE AND COMPOSITION FOR THE CONSERVATION AND INCREASE OF THE NUTRITION OF GREEN PLANTS - Google Patents
PROCEDURE AND COMPOSITION FOR THE CONSERVATION AND INCREASE OF THE NUTRITION OF GREEN PLANTSInfo
- Publication number
- SE452244B SE452244B SE8001062A SE8001062A SE452244B SE 452244 B SE452244 B SE 452244B SE 8001062 A SE8001062 A SE 8001062A SE 8001062 A SE8001062 A SE 8001062A SE 452244 B SE452244 B SE 452244B
- Authority
- SE
- Sweden
- Prior art keywords
- bacteria
- complex
- activity
- per
- bacterial
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 25
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 20
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 title claims description 7
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 title 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 54
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 40
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 35
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 35
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 35
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 31
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 claims description 27
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 27
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 claims description 24
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 claims description 21
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims description 21
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 claims description 21
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 claims description 20
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 claims description 20
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 claims description 20
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims description 20
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims description 20
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 claims description 17
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 16
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 16
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 15
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 12
- 241000588912 Pantoea agglomerans Species 0.000 claims description 10
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 claims description 10
- 239000004460 silage Substances 0.000 claims description 10
- 108010073178 Glucan 1,4-alpha-Glucosidase Proteins 0.000 claims description 9
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims description 9
- 239000008107 starch Substances 0.000 claims description 9
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims description 9
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 claims description 8
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 8
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 8
- 230000002573 hemicellulolytic effect Effects 0.000 claims description 8
- 241000588921 Enterobacteriaceae Species 0.000 claims description 6
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 claims description 6
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 claims description 6
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 241000588698 Erwinia Species 0.000 claims description 5
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 claims description 5
- 241000531155 Pectobacterium Species 0.000 claims description 5
- 241001464837 Viridiplantae Species 0.000 claims description 5
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 claims description 5
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 5
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 claims description 5
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 claims description 4
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 claims description 4
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 4
- 229940089837 amygdalin Drugs 0.000 claims description 4
- YZLOSXFCSIDECK-UHFFFAOYSA-N amygdalin Natural products OCC1OC(OCC2OC(O)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1OC(C#N)c3ccccc3 YZLOSXFCSIDECK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims description 4
- YGHHWSRCTPQFFC-UHFFFAOYSA-N eucalyptosin A Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(OC(C#N)C=2C=CC=CC=2)OC(CO)C(O)C1O YGHHWSRCTPQFFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 108010066429 galactomannanase Proteins 0.000 claims description 4
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 claims description 4
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 claims description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 4
- XUCIJNAGGSZNQT-JHSLDZJXSA-N (R)-amygdalin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H](C#N)C=2C=CC=CC=2)O1 XUCIJNAGGSZNQT-JHSLDZJXSA-N 0.000 claims description 3
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 3
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 claims description 3
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 claims description 3
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 3
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 claims description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 3
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 claims description 3
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 claims description 3
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 3
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 3
- LWGJTAZLEJHCPA-UHFFFAOYSA-N n-(2-chloroethyl)-n-nitrosomorpholine-4-carboxamide Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)N1CCOCC1 LWGJTAZLEJHCPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229920000881 Modified starch Polymers 0.000 claims description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 claims description 2
- WLYASUUWHLJRIL-UHFFFAOYSA-N [N].[N].[N] Chemical compound [N].[N].[N] WLYASUUWHLJRIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 claims 2
- 241000223261 Trichoderma viride Species 0.000 claims 1
- 238000009413 insulation Methods 0.000 claims 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 25
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 15
- 230000001461 cytolytic effect Effects 0.000 description 12
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 12
- 240000004658 Medicago sativa Species 0.000 description 11
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 10
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 235000017587 Medicago sativa ssp. sativa Nutrition 0.000 description 8
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 8
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 8
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 7
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 6
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 6
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 6
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 6
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 6
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 6
- XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N ammonia nh3 Chemical compound N.N XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010084185 Cellulases Proteins 0.000 description 4
- 102000005575 Cellulases Human genes 0.000 description 4
- 241000209219 Hordeum Species 0.000 description 4
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 4
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 4
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 4
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960002160 maltose Drugs 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101710112457 Exoglucanase Proteins 0.000 description 3
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000010624 Medicago sativa Nutrition 0.000 description 3
- 229940025131 amylases Drugs 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 108010047754 beta-Glucosidase Proteins 0.000 description 3
- 102000006995 beta-Glucosidase Human genes 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 3
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 2
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 2
- 108010064851 Plant Proteins Proteins 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000013877 carbamide Nutrition 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 125000001547 cellobiose group Chemical group 0.000 description 2
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 2
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 229910000069 nitrogen hydride Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000021118 plant-derived protein Nutrition 0.000 description 2
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 2
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WDMUXYQIMRDWRC-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxy-3,4-dinitrobenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C([N+]([O-])=O)=C1O WDMUXYQIMRDWRC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000945 Amylopectin Polymers 0.000 description 1
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 description 1
- 108010082340 Arginine deiminase Proteins 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 101710188964 Catalase-1 Proteins 0.000 description 1
- 229920003043 Cellulose fiber Polymers 0.000 description 1
- XFXPMWWXUTWYJX-UHFFFAOYSA-N Cyanide Chemical compound N#[C-] XFXPMWWXUTWYJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N D-Cellobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 101710121765 Endo-1,4-beta-xylanase Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 108010056771 Glucosidases Proteins 0.000 description 1
- 102000004366 Glucosidases Human genes 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-L Malonate Chemical compound [O-]C(=O)CC([O-])=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 108010059820 Polygalacturonase Proteins 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N Salicin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1)c1c(CO)cccc1 NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 241000223259 Trichoderma Species 0.000 description 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N Xylose Natural products O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N alpha-salicin Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 150000001860 citric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 235000019621 digestibility Nutrition 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 230000007247 enzymatic mechanism Effects 0.000 description 1
- 108010093305 exopolygalacturonase Proteins 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 229920001519 homopolymer Polymers 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 108010078226 phenylalanine oxidase Proteins 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 108020001775 protein parts Proteins 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 229940120668 salicin Drugs 0.000 description 1
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K30/00—Processes specially adapted for preservation of materials in order to produce animal feeding-stuffs
- A23K30/10—Processes specially adapted for preservation of materials in order to produce animal feeding-stuffs of green fodder
- A23K30/15—Processes specially adapted for preservation of materials in order to produce animal feeding-stuffs of green fodder using chemicals or microorganisms for ensilaging
- A23K30/18—Processes specially adapted for preservation of materials in order to produce animal feeding-stuffs of green fodder using chemicals or microorganisms for ensilaging using microorganisms or enzymes
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Fodder In General (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
452 244 2 I den franska patentskriften 2 361 828 beskrives ett förfarande för konservering av och ökning av näringsvärdet hos gröna växter medelst surgörning medelst mjölksyra. Vid detta förfarande sätter man till växterna före ensileringen dels bakterier som kan åstadkomma mjölksyrajäsning och dels en faktor som nedbryter högre glucider till jäsbara sockerarter, vilka kan utnyttjas av bakterierna för mjölksyra- jäsningen. Denna nedbrytningsfaktor består av gram-positiva bakteri- er, vilka förjäser stärkelse, glukos, mannitol, ramnos, sackaros, amygdalin och arabinos men icke förjäser maltos, inositol och sorbi- tol. Dessa bakterier har dessutom följande egenskaper: VP +; oxidas +; katalas 1; nitrater 1; karbamid -; citrater -; indol -; H28 -. 452 244 2 French Pat. No. 2,361,828 discloses a process for preserving and increasing the nutritional value of green plants by acidification by lactic acid. In this process, bacteria that can cause lactic acid fermentation and a factor that breaks down higher glucides into fermentable sugars, which can be used by the bacteria for lactic acid fermentation, are added to the plants before ensilage. This degradation factor consists of gram-positive bacteria, which ferment starch, glucose, mannitol, rhamnose, sucrose, amygdalin and arabinose but do not ferment maltose, inositol and sorbitol. These bacteria also have the following properties: VP +; oxidase +; catalase 1; nitrates 1; urea -; citrates -; indole -; H28 -.
Denna nedbrytningsfaktor kan även innehålla ett eller flera enzymer som kan spjälka polysackarider, särskilt stärkelse, pentosaner och andra komplexa polysackarider, under bildning av jäsbara sockerarter.This degradation factor may also contain one or more enzymes which can cleave polysaccharides, in particular starch, pentosans and other complex polysaccharides, to form fermentable sugars.
Enligt nämnda patentskrift kan man till fodret särskilt sätta dels ett hemicellulolytiskt komplex av svampursprung, vilket såsom huvudakti- vitet uppvisar en galaktomannanasaktivitet och dessutom uppvisar se- kundära aktiviteter av samma typ som xylanaser, amylaser och pekti- naser, och dels ett amylas som kan bilda den maltos som erfordras för att bakterierna skall kunna producera mjölksyra. ““ I den franska patentskriften 2 390 908 beskrives en förbättring av förfarandet enligt den franska patentskriften 2 361 828. Under det att det amylas som användes enligt den franska patentskriften 2 361 828 är ett exoamylas av svampursprung som icke fullständigt nedbryter stärkelse, är det amylas som användes enligt den franska patentskríften 2 390 908 ett amylas av bakterieursprung. Detta en- zym (endoamylas) verkar på den gelatinerade stärkelsen och produce- rar huvudsakligen Ol-D-maltos samt en liten mängd d-D-glukos.According to the said patent specification, a hemicellulolytic complex of fungal origin can be added to the feed in particular, which as the main activity exhibits a galactomannanase activity and in addition exhibits secondary activities of the same type as xylanases, amylases and pectinases, and an amylase which can form the maltose required for the bacteria to produce lactic acid. French Pat. No. 2,390,908 discloses an improvement in the process of French Pat. No. 2,361,828. While the amylase used in French Pat. No. 2,361,828 is an exoamylase of fungal origin which does not completely degrade starch, it is amylase. used in French Pat. No. 2,390,908 is an amylase of bacterial origin. This enzyme (endoamylase) acts on the gelatinized starch and mainly produces Ol-D-maltose and a small amount of d-D-glucose.
Detta enzym verkar inom pH-intervallet 5-8. I den franska patent- skriften 2 390 908 beskrives även användning av amyloglukosidas, som har en mycket kraftigare verkan gentemot kedjorna av amylos och amylopektin under bildning av o(-D-glukos. Den enzymatiska kompo- sitionen enligt denna patentskrift innehåller även ett hemicellulo- lytiskt komplex av svampursprung, som verkar på polysackaridbestånds- delarna i cellmembranen och på dextrinerna inom ett pH-intervall från 5,5 till 2.This enzyme acts in the pH range 5-8. French Pat. No. 2,390,908 also discloses the use of amyloglucosidase, which has a much stronger action against the chains of amylose and amylopectin to form o (-D-glucose. The enzymatic composition of this patent also contains a hemicelluloside). lytic complex of fungal origin, which acts on the polysaccharide constituents in the cell membranes and on the dextrins in a pH range from 5.5 to 2.
Föreliggande uppfinning avser ett förbättrat förfarande och en förbättrad komposition för ensilering av växter. Förbättringen av- ser såväl den enzymatiska kompositionen som bakteriekompositionen. 452 244 Uppfinningen avser sålunda ett förfarande för kon- servering av och ökning av näringsvärdet hos gröna växter genom surgörning medelst mjölksyra, varvid man till växterna före ensilering sätter en faktor för nedbrytning av högre glucider till jäsbara glucider, vilka kan utnyttjas av bakterier som producerar mjölksyra genom jäsning, vilken nedbrytningsfaktor består av ett enzymkomplex och ett bakteriekomplex, och en komposition för genomförande av detta förfarande. Förfarandet och komposítionen kännetecknas av att enzymkomplexet förutom ett eventuellt svampamylas, ett eventuellt bakterieamylas, ett eventuellt amyloglukosidas och ett eventuellt hemicelluloly- tiskt komplex av svampursprung, vilket såsom huvudaktivitet uppvisar en galaktomannanasaktivitet, innefattar ett cellulas eller cellulolytiskt komplex av svampursprung härrörande från Tríchoderma viride, vilket kan nedbryta nativ cellulosa till glukos, har en aktivitet C1 av 50-0,005 internationella en- heter och en aktivitet Cx av 500-0,05 internationella enheter per 100 g färska växter, och under ensileríngsbetingelserna bi- behåller minst 30% av denna aktivitet efter tio dygn; och att bakteriekomplexet innefattar gramnegativa bakterier, vilka hör till familjen Enterobacteriaceae, släktet Erwinia eller Pecto- bacterium, grupp Herbicola, nämligen Enterobacter agglomerans (CNCM, I-114) med de jäsningsegenskaper som anges i tabell I.The present invention relates to an improved process and composition for ensiling plants. The improvement relates to both the enzymatic composition and the bacterial composition. The invention thus relates to a process for preserving and increasing the nutritional value of green plants by acidification by lactic acid, wherein a factor is added to the plants before ensilage for the breakdown of higher glucides into fermentable glucides, which can be used by bacteria producing lactic acid. by fermentation, which degradation factor consists of an enzyme complex and a bacterial complex, and a composition for carrying out this process. The process and composition are characterized in that the enzyme complex, in addition to an optional fungal amylase, an optional bacterial amylase, an optional amyloglucosidase and an optional hemicellulolytic complex of fungal origin, which has as main activity a galactomannanase activity, comprises a cellulose or cellulosic can degrade native cellulose to glucose, has an activity C1 of 50-0,005 international units and an activity Cx of 500-0.05 international units per 100 g of fresh plants, and under the ensilage conditions retains at least 30% of this activity after ten days; and that the bacterial complex comprises gram-negative bacteria, which belong to the family Enterobacteriaceae, the genus Erwinia or Pectobacterium, group Herbicola, namely Enterobacter agglomerans (CNCM, I-114) with the fermentation properties given in Table I.
Det enzymatiska komplexet kännetecknas sålunda_ av att det förutom de förut använda enzymerna även innehåller ett cellu- lolytiskt komplex eller cellulas som kan spjälka B-bindningarna (1 + 3 och 1 -»4) i polysackarider; dessa bindningar angripes icke av det förut använda enzymatiska komplexet.The enzymatic complex is thus characterized in that, in addition to the enzymes previously used, it also contains a cellulolytic complex or cellulase which can cleave the B bonds (1 + 3 and 1 - »4) in polysaccharides; these bonds are not attacked by the previously used enzymatic complex.
Man använder ett cellulolytiskt komplex av svampursprung, som bryter ned den naturliga cellulosan och de andra polysackariderna i cellmembranen.A cellulolytic complex of fungal origin is used, which breaks down the natural cellulose and the other polysaccharides in the cell membranes.
Detta enzym verkar inom en pH-zon mellan 2 och 5. Det förelig- ger ett synergistiskt fenomen mellan det cellulolytiska komplexet och det hemicellulolytíska komplexet när det gäller nedbrytning av växtstrukturer.This enzyme acts within a pH zone between 2 and 5. There is a synergistic phenomenon between the cellulolytic complex and the hemicellulolytic complex in terms of degradation of plant structures.
På grund av cellulosans omgivning i växterna kräver hydrolysen av cellulosan flera enzymer eller ett enda enzym som uppfyller flera funktioner, nämligen följande: hydrolys av de amorfa zonerna; sväll- ning av de kristallina områdena och sönderbrytning av vätebindning- arna under bildning av linjära molekyler; hydrolys av cellobios o 452 244 4 till glukos; transglukosylering av di- och oligosackarider samt sönderbrytning av oregelbundna bindningar i cellulosan och dess pri- nürahydrolysprodukter.Due to the environment of the cellulose in the plants, the hydrolysis of the cellulose requires several enzymes or a single enzyme that fulfills several functions, namely the following: hydrolysis of the amorphous zones; swelling of the crystalline regions and breaking of the hydrogen bonds to form linear molecules; hydrolysis of cellobiosis to glucose; transglucosylation of di- and oligosaccharides as well as breakdown of irregular bonds in the cellulose and its prinuric hydrolysis products.
Det cellulolytiska komplexet har valts som funktion av de ovan_ angivna kriterierna och efter ett stort antal försök med olika väx- ter. _ V _ Ett cellnlas definieras med hjälp av sin aktivitet uttryckt i internationella enheter per g produkt, varvid en internationell enhet (IE) är den mängd enzym som på ett givet cellnlosasubstrat frigör redueerandë soekerarter ifen mängd ekvivalent med en mikro-UI' mol glnkos per minutÄ Aktiviteterna varierar med det använda substratet. 'Om man'så- ”" lunda bestämmer-aktiviteten på pulvriserat Whatman-papper CC 31, erhåller man aktiviteten G1; och om man bestämmer aktiviteten på karboximetylcellulosa, erhåller man aktiviteten CX.The cellulolytic complex has been chosen as a function of the above criteria and after a large number of experiments with different plants. A cell laser is defined by its activity expressed in international units per g of product, whereby an international unit (IU) is the amount of enzyme which on a given cellless substrate releases reducing search species in an amount equivalent to one micro-UI 'mol of glucose per gram. minutes The activities vary with the substrate used. If the man thus determines the activity on powdered Whatman paper CC 31, one obtains the activity G1; and if one determines the activity on carboxymethylcellulose, one obtains the activity CX.
Det enligt uppfinningen använda komplexet uppvisar en_mvcket” hög cellulolytisk aktivitet samt sekundäraraktiviteter av hemideleq-f 7' lulolytisk typ. Den höga cellulolytiska aktiviteten visar sig geÄ nom mycket höga aktiviteter C1 och CX och genom en cellobiasaktivir tet (ß -glukosídas ) .The complex used according to the invention exhibits a very high cellulolytic activity as well as secondary activities of the hemideleq-f 7 'lulolytic type. The high cellulolytic activity is manifested by very high activities C1 and CX and by a cellobias activity (ß -glucosidase).
Det enzymatiska komplexets aktivitet Cl, definierat enligt ovan, består av en aktivitet CX plus en okänd faktor. Aktiviteten 5 452 244 Cl medför särskilt en förmåga att solubilisera cellulosan.The activity C1 of the enzymatic complex, defined as above, consists of an activity CX plus an unknown factor. In particular, the activity 5 452 244 Cl entails an ability to solubilize the cellulose.
Aktiviteten C1 kan bryta ned nativ cellulosa (kristallin cel- lulosa med en polymerisationsgrad DP ) 3500 glukosenheter) till amorf cellulosa.Activity C1 can degrade native cellulose (crystalline cellulose with a degree of polymerization DP (3500 glucose units) to amorphous cellulose.
Det enzymatiska komplexets aktivitet CX visar sig särskilt såsom en reducerande förmåga hos endo- och exoglukanaser. Dessa enzymer verkar huvudsakligen på cellulosafibrerna i zonerna med låg kristallinitet och skär av de långa glukoskedjorna till kortare enheter. lg-glukosidasaktiviteten verkar på de cellobiosenheter som erhålles efter inverkan av CX.The activity CX of the enzymatic complex is shown in particular as a reducing ability of endo- and exoglucanases. These enzymes act mainly on the cellulose fibers in the low crystallinity zones and cut off the long glucose chains into shorter units. The Ig glucosidase activity acts on the cellobiose units obtained after the action of CX.
Dessa olika aktiviteter kan icke verka separat. Det existerar en synergism mellan Cl och CX för nedbrytningen av homopolymererna.These different activities can not work separately. There is a synergism between C1 and CX for the degradation of the homopolymers.
De enzymatiska mekanismerna Cl och CX leder till bildning av cello- bios, som sedan hydrolyseras av ett /9-glukosidas under bildning av två glukosenheter.The enzymatic mechanisms C1 and CX lead to the formation of cellobiose, which is then hydrolyzed by one / 9-glucosidase to form two glucose units.
De reaktioner som leder till cellulosans hydrolys återges ne- dan schematiskt: C Nativ cellulosa ---l-r-9- Reaktiv cellulosa _ hydrolytiskt C .Q Reaktiv cellulosa ------9* Cellobios “ hydrolytiskt ß -glukosidas Cellobios ---------à 2 molekyler glukos Komplexet Cl solubiliserar daikristallina cellulosan (po1ymeri- sationsgrad DP ) 3500 glukosmonomerer) och producerar reaktiv cellu- losa (amorf cellulosa).The reactions leading to the hydrolysis of the cellulose are shown schematically below: C Native cellulose --- lr-9- Reactive cellulose _ hydrolytic C .Q Reactive cellulose ------ 9 * Cellobiosis hydrolytically ß -glucosidase Cellobiosis --- ------ à 2 molecules of glucose The complex Cl solubilizes the daicrystalline cellulose (polymerization degree DP) 3500 glucose monomers) and produces reactive cellulose (amorphous cellulose).
Under inverkan av det enzymatiska komplexet CX (endo- och exo- glukanaser) avklippes kedjorna av reaktiv cellulosa, antingen inuti kedjan och slumpmässigt när det gäller endoglukanaserna eller från de icke-reducerande ändarna när det gäller exoglukanaserna.Under the influence of the enzymatic complex CX (endo- and exoglucanases), the chains of reactive cellulose are cleaved, either within the chain and randomly in the case of the endoglucanases or from the non-reducing ends in the case of the exoglucanases.
Dessa olika reaktioner ger cellobiosenheter.These different reactions give cellobio units.
De erhållna cellobiosenheterna hydrolyseras av ett ß-glukosi- das under bildning av 2 molekyler glukos.The resulting cellobiose units are hydrolyzed by a β-glucosidase to form 2 molecules of glucose.
Om man använder svampcellulaser enligt uppfinningen, kan det enzymatiska komplexet Cl och CX hydrolysera olöslig nativ cellulo- sa till glukos.Using fungal cellulases according to the invention, the enzymatic complex C1 and CX can hydrolyze insoluble native cellulose to glucose.
Cellulaserna enligt uppfinningen väljes icke enbart som funktion av de ovan angivna allmänna villkoren utan även som funktion av cel- lulasernas polysackarolytiska uppförande i den speciella ensilerings- miljön. I '452 244 6 Det polysackarolytiska uppförandet har bestämts på två olika typer av substrat, nämligen dels (a) rena substrat och dels (b) dehydratiserade substrat. (a) Rena substrat.The cellulases according to the invention are selected not only as a function of the general conditions stated above but also as a function of the polysaccharolytic behavior of the cellulases in the particular ensiling environment. I '452 244 6 The polysaccharolytic behavior has been determined on two different types of substrates, namely (a) pure substrates and (b) dehydrated substrates. (a) Pure substrate.
Man har bestämt aktiviteten av cellulaserna A, B, C, D, E och F på olika substrat vid en given koncentration i ett medium buffrat med en 0,1M acetatbuffert. dvs. vid pH H,8 och temperaturen 50°C efter 20 minuters hydrolys.The activity of cellulases A, B, C, D, E and F on different substrates at a given concentration in a medium buffered with a 0.1 M acetate buffer has been determined. i.e. at pH H, 8 and the temperature 50 ° C after 20 minutes of hydrolysis.
Den reducerande förmågan har bestämts enligt metoden med hexaferro- Aktiviteten har bestämts på vanligt sätt, cyanid. De erhållna resultaten är sammanställda i nedanstående tabell. 511351141' Wyatman- _ - Arabíno- gtära J han* _ I (koncen- papper c' M' C Pektln Xyhn' galak tan ' 'keigë bgödfrš: .'- 17- '7- °.2-'>% 0.257- 0.10 1- mzsv. o.zs'r.The reducing ability has been determined according to the method with hexaferro- The activity has been determined in the usual way, cyanide. The results obtained are summarized in the table below. 511351141 'Wyatman- _ - Arabíno- gtära J han * _ I (koncen- papper c' M 'C Pektln Xyhn' galak tan '' keigë bgödfrš: .'- 17- '7- ° .2 -'>% 0.257- 0.10 1- mzsv. O.zs'r.
ENZEW I ' (mivítet) IE/S -E/z IE/z :IE/s IE/g iE (cl) (CX) /s IE/z A 400 6444 356 511 22 394 544 3 211 5660 322 611 33 100 300 C 266 1999 411 311 0 244 389 D 52 6440 255 511 0 120 132 5 372 8500 305 605 0 0 0 F 960 1666 -xoso :zoo o - o 140 IE = internationella enheter "'~.II|- 7 452 244 (b) Dehydratiserade substrat.ENZEW I '(activity) IE / S -E / z IE / z: IE / s IE / g iE (cl) (CX) / s IE / z A 400 6444 356 511 22 394 544 3 211 5660 322 611 33 100 300 C 266 1999 411 311 0 244 389 D 52 6440 255 511 0 120 132 5 372 8500 305 605 0 0 0 F 960 1666 -xoso: zoo o - o 140 IE = international units "'~ .II | - 7 452 244 (b) Dehydrated substrates.
Aktiviteten av enzymerna A, B, C, D, E och F har även bestämts på olika dehydratiserade växtsubstrat.The activity of enzymes A, B, C, D, E and F has also been determined on various dehydrated plant substrates.
Aktiviteten har bestämts vid pH 3,8, H,8 och 5,8 och vid tempe- raturen BOOC efter en hydrolystid av 2U timmar. Den reducerande förmågan har bestämts enligt metoden med dinitrosalicylsyra. De erhållna resultaten är sammanställda i nedanstående tabell.The activity has been determined at pH 3.8, H, 8 and 5.8 and at the temperature BOOC after a hydrolysis time of 2U hours. The reducing ability has been determined according to the method with dinitrosalicylic acid. The results obtained are summarized in the table below.
Substrat.Substrate.
- Lfllflfn Raigräs z Majs Betmassa Halm ' Cellulas ' pH AKmvnzflIE/g) 310 2010 2200 1550 1010 1560 A 4.0 2440 2560 . 2000 1530 1690 5,0 1560 2220 1690 1500 1530 3,0 1550 1610 1530 1220 1390 B 4,8 1280 2060 1670 1220 1500 5.0 090 1600 1940 090 1280 3.0 1200 1510 1:90 1110 m0 ç 4,0 1200 1150 1510 1110 1290 5.8 940 1560 1170 720 1110 3.0 1390' 14-10 1410 1210 H67 p 4,0 _1190 2050 1390 1111 1306 5.0 090 1120 1530 912 1222 3,0 011 1190 1111 555 694 1: 4,0 912 1520 1250 0 594 5,8 0 1167 1278 0 594 0.0 1306 1:00 500 ° 691 556 r 4. s 009 912 _1222 010 5.0 150 1000 550 550 444 332 452 244 8 De erhållna försöksresultaten har gjort det möjligt att bestäm- ma aktiviteten hos det cellulolytiska komplex som skall användas vid ensilering i enlighet med föreliggande uppfinning.- L fl l fl fn Raigräs z Majs Betmassa Halm 'Cellulas' pH AKmvnz fl IE / g) 310 2010 2200 1550 1010 1560 A 4.0 2440 2560. 2000 1530 1690 5.0 1560 2220 1690 1500 1530 3.0 1550 1610 1530 1220 1390 B 4.8 1280 2060 1670 1220 1500 5.0 090 1600 1940 090 1280 3.0 1200 1510 1:90 1110 m0 ç 4.0 1200 1150 1510 1110 1290 5.8 940 1560 1170 720 1110 3.0 1390 '14-10 1410 1210 H67 p 4.0 _1190 2050 1390 1111 1306 5.0 090 1120 1530 912 1222 3.0 011 1190 1111 555 694 1: 4.0 912 1520 1250 0 594 5 , 8 0 1167 1278 0 594 0.0 1306 1:00 500 ° 691 556 r 4. s 009 912 _1222 010 5.0 150 1000 550 550 444 332 452 244 8 The experimental results obtained have made it possible to determine the activity of the cellulolytic complex. to be used in ensilage in accordance with the present invention.
Man har sålunda funnit, att det cellulas eller cellulolytiska komplex som skall sättas till de färska växter som skall ensileras bör ha en aktivitet Cl av 50-0,005 internationella enheter och en aktivitet CX av 500-0,05 internationella enheter per 100 g växter.It has thus been found that the cellulase or cellulolytic complex to be added to the fresh plants to be ensiled should have an activity C1 of 50-0.005 international units and an activity CX of 500-0.05 international units per 100 g of plants.
Detta aktiviteter bestämmes vid pH Ä,8 och temperaturen 5000 efter 20 minuters hydrolys.This activity is determined at pH δ, 8 and the temperature 5000 after 20 minutes of hydrolysis.
Det valda cellulaset bör dessutom bibehålla en betydande akti- vitet även efter en lång uppehållstid i silon.The selected cellulase should also maintain significant activity even after a long residence time in the silo.
Man har experimentellt visat, att under försöksbetingelser lik- nande betingelserna vid ensilering så bibehåller det cellulolytiska komplexet efter tio dygn minst 30% av sin ursprungliga aktivitet.It has been experimentally shown that under experimental conditions similar to the conditions of ensilage, the cellulolytic complex retains at least 30% of its original activity after ten days.
Hastigheten avden enzymatiska nedbrytningen av växtstrukturen är en funktion av elimineringen av glukosen. Den önskade förskjut- ningen av den enzymatiska jämvikten erhålles genom användning av bak- terier med kraftig jäsningsförmåga, varvid mediets surgörning blir mycket snabb. När växtmassan har stabiliserats, avbrytes bakterie- proliferationen samt produktionen av mjölksyra, medan däremot cellu- lasets cellulolytiska aktivitet bibehålles under mera än tio dygn.The rate of enzymatic degradation of the plant structure is a function of the elimination of glucose. The desired shift of the enzymatic equilibrium is obtained by using bacteria with strong fermentation ability, whereby the acidification of the medium becomes very fast. Once the plant mass has stabilized, the bacterial proliferation and the production of lactic acid are interrupted, while the cellulolytic activity of the cellulase is maintained for more than ten days.
Den aktivitet under produktion och ackumulering av glukos som cellulaset utövar i ensileringsmediet ökar de ensilerade växternas näringsvärde.The activity during the production and accumulation of glucose that the cellulase exerts in the ensiling medium increases the nutritional value of the ensiled plants.
Det vid förfarandet enligt uppfinningen använda enzymatiska komplexet innefattar alltså ett cellulas eller ett celluloly- tiskt komplex med de ovan angivna egenskaperna i kombination med de enzymer som beskrives i den franska patentskriften 2 390 908, dvs. ett svampamylas, ett bakterieamylas, ett amyloglukosidas och ett hemicellulolytiskt komplex.The enzymatic complex used in the process according to the invention thus comprises a cellulase or a cellulolytic complex with the above-mentioned properties in combination with the enzymes described in French Pat. No. 2,390,908, i.e. a fungal amylase, a bacterial amylase, an amyloglucosidase and a hemicellulolytic complex.
Dessa enzymer i kompositionen har sålunda en komplementär ver- kan pâ grund av sin aktivitet gentemot glucider, från komplexa till enkla sådana, vid pH-värden från 7 till 2. Vid temperaturer mellan 10 och 3000, dvs. temperaturer vanliga vid ensilering, ändrar Konserveringstid, , 0 5 10 15 20 dygn . , ' _ pH u 8 100 °4 97 % 61 v, 26 % 3% pa 5,8 100 % 85 % 58 % 27 :s o if. 452 244 sig aktivitetsmaxima för varje enzym allteftersom pH-värdet sjunker; pH-värdet sjunker icke under 3,5 i silon.These enzymes in the composition thus have a complementary action due to their activity against glucides, from complex to simple ones, at pH values from 7 to 2. At temperatures between 10 and 3000, ie. temperatures common during ensilage, change Preservation time,, 0 5 10 15 20 days. , '_ pH u 8 100 ° 4 97% 61 v, 26% 3% pa 5,8 100% 85% 58% 27: s o if. Activity maxima for each enzyme as the pH drops; The pH does not fall below 3.5 in the silo.
Bakteriekomplexet enligt uppfinningen innefattar vissa speciella bakteriestammar, vilka användes i blandning med andra bakteriestammar och enzymer, som anges i känd litteratur och föreliggande beskrivning. Detta nya komplex ger mycket förbättrade ensileringsresultat. De speciella bakteriestam- marna är gram-negativa bakterier hörande till familjen Enterobacteriaceae, släktet Erwinia eller Pectobacterium, gruppen Herbicola. De kallas Enterobacter agglomerans (klassi- ficering enligt Bergey's Manual of Bacteriology, åttonde upp- lagan). En stam av Enterobacter agglomerans har deponerats hos Institut Pasteur, Paris, den 11 februari 1980 under nr I-114.The bacterial complex of the invention comprises certain particular bacterial strains which are used in admixture with other bacterial strains and enzymes set forth in the known literature and present disclosure. This new complex provides much improved ensiling results. The special bacterial strains are gram-negative bacteria belonging to the family Enterobacteriaceae, the genus Erwinia or Pectobacterium, the group Herbicola. They are called Enterobacter agglomerans (classification according to Bergey's Manual of Bacteriology, eighth edition). A strain of Enterobacter agglomerans was deposited with the Institut Pasteur, Paris, on 11 February 1980 under I-114.
I nedanstående tabell I anges egenskaperna hos dylika bak- terier.Table I below lists the properties of such bacteria.
Tabell I Enterobacter agglomerans Gram-reaktion - Arabinos + Utnyttjande av malonat + Maltos - Glukos + Trehalos + Fenylalanin-desaminas - Xylos - ONPG + Stärkelse + Indol A - Oxydas - H28 - Gelatin + LDC - Amygdalin + ODC - Melibios - Ureas - V.P. + Sackaros + Rhamnos - Arginin-dihydrolas - Salicin - Adonitol - Inositol - - Sorbitol ~ Användningen av dessa speciella bakteriestammar för ensilering av växter i kombination med andra bakteriestammar och enzymer sker enligt välkända metoder. Bakterierna kan odlas på en näringsbärare innehållande cerealiemjöl. Den komposition som skall införas i silon innefattar en blandning av de erforderliga bakterierna avsatta på en eventuellt löslig bärare och de ovan angivna enzymerna. 452 244 10 Enligt en föredragen utföringsform av uppfinningen anbringas enzymerna och bakterierna på en cerealiebärare (vete, korn, korn som fått gro), företrädesvis i finmald form.Table I Enterobacter agglomerans Gram reaction - Arabinos + Utilization of malonate + Maltose - Glucose + Trehalose + Phenylalanine desaminase - Xylose - ONPG + Starch + Indole A - Oxidase - H28 - Gelatin + LDC - Amygdalin + ODC - Melibios - Ureas. + Sucrose + Rhamnose - Arginine dihydrolase - Salicin - Adonitol - Inositol - - Sorbitol ~ The use of these special bacterial strains for ensiling plants in combination with other bacterial strains and enzymes takes place according to well-known methods. The bacteria can be grown on a nutrient carrier containing cereal flour. The composition to be introduced into the silo comprises a mixture of the required bacteria deposited on an optionally soluble carrier and the above-mentioned enzymes. According to a preferred embodiment of the invention, the enzymes and bacteria are applied to a cereal carrier (wheat, barley, barley which has germinated), preferably in finely ground form.
Enligt en annan föredragen utföringsform av uppfinningen anbring- as bakterierna och enzymerna på en bärare av typen förgelatinerad stärkelse, maltohexos, etc., dvs. en bärare som är lättlöslig i kallt vatten.According to another preferred embodiment of the invention, the bacteria and enzymes are applied to a carrier of the type pregelatinized starch, maltohexose, etc., i.e. a carrier that is readily soluble in cold water.
Stärkelsen och de andra polysackariderna i bärarna adderas till gluciderna i växterna och ökar sålunda ensilagets näríngsvärde.The starch and the other polysaccharides in the carriers are added to the glucides in the plants and thus increase the nutritional value of the silage.
Kompositionen innefattande blandningen av bakterier uppburna på bärare och enzymatiskt komplex, eventuellt avsatt på en cerealie- bärare, kan innehålla olika proportioner av de olika beståndsdelarna.The composition comprising the mixture of bacteria carried on carrier and enzymatic complex, optionally deposited on a cereal carrier, may contain different proportions of the various constituents.
Den torra blandningen innehåller från 100 000 till 1 000 000 kocker och från 100 000 till 1 000 000 baciller per g.The dry mixture contains from 100,000 to 1,000,000 cooks and from 100,000 to 1,000,000 bacilli per g.
Mängderna av cellulas, hemicellulolytiskt komplex, amylas och amyloglukosidas kan variera. Dessa mängder beräknas som funktion av naturen av det foder som skall behandlas.The amounts of cellulase, hemicellulolytic complex, amylase and amyloglucosidase may vary. These amounts are calculated as a function of the nature of the feed to be treated.
Den mängd cellulas som skall sättas till de färska växter som skall ensileras bör motsvara en aktivitet Cl av 50-0,005 interna- tionella enheter per 100 g växter; mängden bör alltså vara från 2 se till 2 x 10_u promille, räknat på de gröna växternas vikt, när man använder ett cellulas med en titer av 250 internationella enheter per g. Mängden bakterieamylaser med en titer av 250 enheter/g bör vara mellan 0,05 och 0,20 promille, räknat på växternas vikt; mäng- den svampamylaser med en titer av 50 000 enheter PS 50/g bör vara mellan 0,10 och 0,20 promille, räknat på växternas vikt; mängden amyloglukosidas med en titer av 200 enheter AG/g bör vara mellan 0,10 och 0,70 promille, räknat på växternas vikt; och mängden hemi- cellulolytiskt komplex med en titer av 35 000 internationella en- heter per g bör vara mellan 0,05 och 0,20 promille, räknat pä väx- ternas vikt.The amount of cellulase to be added to the fresh plants to be ensiled should correspond to an activity C1 of 50-0,005 international units per 100 g of plants; the amount should therefore be from 2 see to 2 x 10_u per mille, calculated on the weight of the green plants, when using a cellulase with a titer of 250 international units per g. The amount of bacterial amylases with a titer of 250 units / g should be between 0, 05 and 0.20 per mille, calculated on the weight of the plants; the amount of fungal amylases with a titer of 50,000 units PS 50 / g should be between 0.10 and 0.20 per mille, calculated on the weight of the plants; the amount of amyloglucosidase with a titer of 200 units AG / g should be between 0.10 and 0.70 per mille, based on the weight of the plants; and the amount of hemicellolytic complex with a titer of 35,000 international units per g should be between 0.05 and 0.20 per mille, calculated on the weight of the plants.
När enzymerna avsättes på cerealiebärare i enlighet med den föredragna utföringsformen av uppfinningen, kan den produkt som inblandas i ensilaget innehålla ca 1 kg enzymer per 9 kg bärare.When the enzymes are deposited on cereal carriers in accordance with the preferred embodiment of the invention, the product incorporated into the silage may contain about 1 kg of enzymes per 9 kg of carriers.
När man använder en löslig bärare, kan viktförhållandet mellan enzymerna och bäraren variera och vara från 1:1,5 till lzü.When using a soluble carrier, the weight ratio of the enzymes to the carrier can vary and be from 1: 1.5 to lzü.
Införandet av cellulas uppburet på en bärare ökar mängden till- gängliga jäsbara sockerarter, vilket medför en kraftigare och snab- bare produktion av mjölksyra. Växtproteinet konserveras härigenom bättre. Dessutom ökas medíets näringsvärde. 11 452 244 Man har genomfört försök i mikrosilor och i minisílor för att visa värdet av ett cellulolytiskt komplex och bakterier hörande till familjen Enterobacteriaceae i enlighet med föreliggande uppfin- ning. Man har studerat de olika konserveringsparametrarna samt de parametrar som återspeglar växtstrukturen. (1) Försök genomförda i mikrosilor.The introduction of cellulase supported on a carrier increases the amount of available fermentable sugars, which leads to a stronger and faster production of lactic acid. The plant protein is thus better preserved. In addition, the nutritional value of the media is increased. Experiments have been performed in microsilos and in minisilos to show the value of a cellulolytic complex and bacteria belonging to the family Enterobacteriaceae in accordance with the present invention. The various conservation parameters and the parameters that reflect the plant structure have been studied. (1) Tests performed in microsilos.
En första försöksserie har genomförts på laboratorium i mikro- silor.A first series of experiments has been carried out in a laboratory in microsilosers.
Dessa försök har genomförts med luzern i månaden maj. De an- vända mikrosilorna har en kapacitet av 1 kg. Luzernen finhackades och ensilerades sedan under följande betingelser.These experiments were carried out with alfalfa in the month of May. The microsilars used have a capacity of 1 kg. The alfalfa was finely chopped and then ensiled under the following conditions.
(A) I en serie mikrosilor användes ett konserverande tillsats- medel bestående av 90% cerealiebärare och 10% förblandning. För- blandningen bestod av ett bakteriekomplex (fem mjölksyrabakteríer på laktosbärare); ett enzymatiskt komplex bestående av ett amylas av svampursprung, ett amylas av bakterieursprung, ett amylogluko- sidas och ett hemicellulolytískt komplex av svampursprung uppvisan- de såsom huvudaktivitet en galaktomannanasaktivitet; och en energi- rik bärare bestående av finmalt korn plus laktoserum. Bakterie- komplexet och det enzymatiska komplexet ingick i förblandningen i en mängd av vardera 1%.(A) A series of microsilosers used a preservative additive consisting of 90% cereal carrier and 10% premix. The premix consisted of a bacterial complex (five lactic acid bacteria on lactose carrier); an enzymatic complex consisting of an amylase of fungal origin, an amylase of bacterial origin, an amyloglucosidase and a hemicellulolytic complex of fungal origin having as main activity a galactomannanase activity; and an energy-rich carrier consisting of finely ground barley plus lactose. The bacterial complex and the enzymatic complex were included in the premix in an amount of 1% each.
Det konserverande tillsatsmedlet sattes till luzernen i en mängd av 2% (mängden tillsatt förblandning var alltså 0,2%). Till luzernen sattes även 1% korn.The preservative additive was added to the alfalfa in an amount of 2% (the amount of premix added was thus 0.2%). 1% barley was also added to the alfalfa.
(B) I en serie mikrosílor genomfördes behandling med samma konserverande tillsatsmedel som under (A) ovan, men dessutom till- sattes ett cellulas av svampursprung (härrörande från Trichoderma gviride) med en aktivitet Cl av 250 enheter/g och en aktivitet CX av 2500 enheter/g (aktiviteterna bestämdes vid pH Ä,B och tempe- raturen 50°C efter en reaktionstid av 20 minuter). Detta cellulas tillsattes antingen i en mängd av 2 g/ton färska växter (dvs. 2 x 10-H vikt~%) (försök B) eller i en mängd av 200 g/ton färska väx- ter (dvs. 0,02 vikt-%) (försök B').(B) In a series of microsiles, treatment was carried out with the same preservative additive as in (A) above, but in addition a cellulase of fungal origin (derived from Trichoderma gviride) with an activity C1 of 250 units / g and an activity CX of 2500 was added units / g (activities were determined at pH Ä, B and the temperature 50 ° C after a reaction time of 20 minutes). This cellulase was added either in an amount of 2 g / ton of fresh plants (ie 2 x 10-H weight ~%) (Experiment B) or in an amount of 200 g / ton of fresh plants (ie 0.02 wt. -%) (experiment B ').
(C) I en serie míkrosilor genomfördes kontrollförsök med luzern utan någon behandling med konserveringsmedel.(C) In a series of microsilors, control experiments were performed with alfalfa without any treatment with preservatives.
Efter 100 dygns ensílering öppnades míkrosilorna, och man be- stämde pH-värdet, mängden bildad mjölksyra och förhållandet mellan ammoniak och totalkväve. De erhållna resultaten är sammanställda i nedanstående tabell. 452 244 12 pH Mjölksyra NH3/totalkväve (%) (g/kg torrsubstans) Kontroll 5,66 26 g 25,15 Luzern + 0,2% förblandning (A) H,13 1U3,68 16,33 Luzern + 0,2% förblandning + cellulas av svamp- 4,32 1U4,75 16,20 ursprung, 2 g/ton (B) Luzern + 0,2% förblandning + cellulas av svamp- 3,73 169,47 15,02 ursprung' 200 g/ton (B') Av försöksresultaten framgår, att det konserverande tillsats- medlet förbättras avsevärt, när man sätter ett cellulas till det bakteriekomplex och det enzymatiska komplex som beskrives i den franska patentskriften 2 390 908. Man erhåller en bättre konserve- ring av växterna, vilket visar sig vid en jämförelse mellan försök A och försök B'. pH-värdet sjunker sålunda från U,13 till 3,73, dvs. en minskning med 10%. Mjölksyraproduktionen ökar med 15%.After 100 days of ensilage, the microsilars were opened, and the pH value, the amount of lactic acid formed and the ratio of ammonia to total nitrogen were determined. The results obtained are summarized in the table below. 452 244 12 pH Lactic acid NH3 / total nitrogen (%) (g / kg dry matter) Control 5.66 26 g 25.15 Lucerne + 0.2% premix (A) H, 13 1U3.68 16.33 Lucerne + 0.2 % premix + cellulase of fungus- 4.32 1U4.75 16.20 origin, 2 g / ton (B) Lucerne + 0.2% premix + cellulase of fungus- 3.73 169.47 15.02 origin '200 g / ton (B ') The test results show that the preservative additive is considerably improved when a cellulase is added to the bacterial complex and the enzymatic complex described in French Pat. No. 2,390,908. A better preservation of the plants is obtained. , which is shown by a comparison between experiment A and experiment B '. The pH value thus drops from U, 13 to 3.73, i.e. a reduction of 10%. Lactic acid production increases by 15%.
Förhållandet mellan ammoniakkväve och totalkväve minskar med 8%.The ratio of ammonia nitrogen to total nitrogen decreases by 8%.
Den snabba surgörningen av mediet leder till en bättre konserve- ring av växtproteinet. (2) Försöksgenomförda i minisilor.The rapid acidification of the medium leads to a better preservation of the plant protein. (2) Experiments carried out in mini silos.
I minisilor med en kapacitet av 150 kg genomfördes försök med luzern i månaden juni. Luzernen finhackades och ensilerades där- efter under de nedan angivna betingelserna.In mini silos with a capacity of 150 kg, experiments with alfalfa were carried out in the month of June. The alfalfa was finely chopped and then ensiled under the conditions given below.
(A) I en serie minisilor genomfördes behandling med samma kon- serverande tillsatsmedel som anges under 1(A) ovan, varvid för- blandningen tillsattes i en mängd av 0,2%.(A) In a series of minisilors, treatment was carried out with the same preservative additive as given in 1 (A) above, the premix being added in an amount of 0.2%.
(B) I en serie minisilor genomfördes behandling med samma konserverande tillsatsmedel som under (A) ovan och i samma mängd, och dessutom tillsattes samma cellulas av svampursprung som anges under 1(B) ovan i en mängd av 2 g/ton luzern.(B) In a series of minisilors, treatment was carried out with the same preservative additive as under (A) above and in the same amount, and in addition the same cellulase of fungal origin as indicated under 1 (B) above was added in an amount of 2 g / ton of alfalfa.
Efter 100 dygns ensilering öppnades minisilorna, och det en- silerade materialet analyserades. De erhållna resultaten är sam- manställda i nedanstående tabell. _-:_.V._=,, . . ............ 13 452 244 Å B 0,2% förblandning O,2% förblandning + cellulas (2 g/ton) Torrsubstans (%) 23,67 27,27 E.N.A. (g/kg torrsubstans) 51,25 Ä8,97 pH 3,20 3,9Ä Mjölksyra (g/kg (torrsubstans) 80,62 11h,uo Ättiksyra (g/kg torrsubstans) 17,U2 20,04 NH3/totalkväve (%) 18,40 13,31 Totalkväve (g/kg torrsubstans) 21,70 23,12 Ammoniakkväve (g/kg torrsubstans) 3,87 3,09 De erhållna resultaten visar tydligt de fördelar som erhålles vid tíllsättning av ett cellulas till det bakteriekomplex plus enzymkomplex som beskrivas i den franska patentskriften 2 390 908.After 100 days of ensilage, the mini-silos were opened, and the ensiled material was analyzed. The results obtained are summarized in the table below. _-: _. V ._ = ,,. . ............ 13 452 244 Å B 0.2% premix 0.2% premix + cellulase (2 g / ton) Dry matter (%) 23.67 27.27 E.N.A. (g / kg dry matter) 51.25 Ä8.97 pH 3.20 3.9Ä Lactic acid (g / kg (dry matter) 80.62 11h, uo Acetic acid (g / kg dry matter) 17, U2 20.04 NH3 / total nitrogen ( %) 18.40 13.31 Total nitrogen (g / kg dry matter) 21.70 23.12 Ammonia nitrogen (g / kg dry matter) 3.87 3.09 The results obtained clearly show the advantages obtained by adding a cellulase to it. bacterial complex plus enzyme complex described in French Pat. No. 2,390,908.
Tillsättningen av cellulas ger ett lägre pH~värde, 3,9U mot H,2O (minskning med 6%). Vidare erhålles en kraftigare mjölksyra- bildning (ökning med 29,53%). Ensilagets proteindel konserveras bättre vid användningen av cellulaset, vilket framgår av analysvär- dena. Man erhåller sålunda i detta fall ett lägre förhållande mel- lan ammoniak och totalkväve (minskning 27,6%), en högre protein- halt (ökning 6%) och en lägre halt ammoniakkväve (minskning 20,1%).The addition of cellulase gives a lower pH value, 3.9U against H, 2O (reduction by 6%). Furthermore, a stronger lactic acid formation is obtained (increase by 29.53%). The protein part of the silage is better conserved during the use of the cellulase, which is evident from the analysis values. Thus, in this case, a lower ratio is obtained between ammonia and total nitrogen (decrease 27.6%), a higher protein content (increase 6%) and a lower content of ammonia nitrogen (decrease 20.1%).
Den större surgörningshastigheten kan förklaras av det faktum att bakterierna snabbare kan disponera en avsevärd mängd jäsbara sockerarter som lätt kan omvandlas till mjölksyra. Detta beror på effekten av det i mediet införda cellulaset.The higher rate of acidification can be explained by the fact that the bacteria can dispose of a considerable amount of fermentable sugars more quickly, which can easily be converted to lactic acid. This is due to the effect of the cellulase introduced into the medium.
Uppfinningen illustreras genom följande exempel. Den enligt föreliggande uppfinning använda, på bärare uppburna blandningen be- står av det komplex som beskrives i den franska patentskriften 2 568 828 och/eller den franska patentskriften 2 390 908, det en- zymatiska komplexet enligt föreliggande uppfinning samt gram-nega- tiva baciller hörande till familjen Enterobacteriaceae, släktet Erwinia eller Pectobacterium, grupp Herbicola. Dessa baciller in- blandas i blandningen i en mängd av 105-106 baciller/g. 452 244 . .M 3 Exempel. Man genomförde försök i silor med en kapacitet av 4_m .The invention is illustrated by the following examples. The carrier-supported composition of the present invention consists of the complex described in French Pat. No. 2,568,828 and / or French Pat. No. 2,390,908, the enzymatic complex of the present invention and gram-negative bacilli. belonging to the family Enterobacteriaceae, genus Erwinia or Pectobacterium, group Herbicola. These bacilli are mixed into the mixture in an amount of 105-106 bacilli / g. 452 244. .M 3 Example. Experiments were carried out in silos with a capacity of 4_m.
Man ensilerade hundäxing (Lucifer) som hade skördats i juni i början av axbildningen. Det finhackade fodret underkastades ensilering under fyra olika betingelser. _ (A) Ensilering utan behandling (B) Ensilering på känt sätt med 4 liter myrsyra per ton.Dog ax (Lucifer) which had been harvested in June at the beginning of the ax formation was ensiled. The finely chopped feed was subjected to ensilage under four different conditions. _ (A) Silage without treatment (B) Silage in a known manner with 4 liters of formic acid per tonne.
(C) Ensilering med en sådan förblandning av bakterier och enzymer som beskrivesi.de franska patentskrifterna 2 361 828 och 2 390 908 samt ett sådant cellulas av svamp- ursprung som har beskrivits ovan. Bakterierna utgjordes av en kultur av sju på bärare uppburna bakterier, vars egen- skaper anges i den franska patentskriften 2 361 820, sid.7, nr 1-7. Man tillsatte 10 kg blandning per ton.(C) Ensilation with such a premix of bacteria and enzymes as described in French Patents 2,361,828 and 2,390,908 and such cellulase of fungal origin as described above. The bacteria consisted of a culture of seven carrier-borne bacteria, the properties of which are set forth in French Pat. No. 2,361,820, p. 7, nos. 1-7. 10 kg of mixture per ton were added.
(B) Bnsilering med samma blandning som anges under (C) ovan samt I gram-negativa bakterier Enterobacter agglomerans. Dessa bak- terier tillsattes i en mängd av 10 kg/ton.(B) Silage with the same mixture as given under (C) above and in gram-negative bacteria Enterobacter agglomerans. These bacteria were added in an amount of 10 kg / ton.
Efter 90-100 dygn öppnades de olika silorna, och man analyserade ensilagen. De erhållna resultaten är sammanställda i nedanstående tabell II. 15 \ k. 4 4 nl. _ GL L 5 ._ 4.. o 3.3. .o NG .3 w SÅ n o .. 3:3. Q å 3.? .i NQJ u q me: på., Ww...fl._._. _ www» .. .... ..o.fi...ß . m3 m . ... . . . . . . . . _. 4 »mmm 2.2 _ . Immå Q. 31mm. ...IÉSS 36 ._ . . . _ _. . . . . . . . . . . . . . . . - . . . . . , _ _ _ . . UHNUOu Z .Z MCHHUCQSUE Gnfimnswuuøu. wåuwvhflfiëwflu. wxficøwfio.. ...... äflmmëz .mz1z. mn .Spwaåflm HH aHwnmB_ v '- 452 244 4 16 Av försöksresultaten framgår, att redan blandningen enligt de franska patentskrifterna 2 361 828 och 2 390 908 plus cellulas av svamp- ursprung gav en förbättrad ensilering, vilket framgår av följande: pix-värde: sänktes från 5,25 till 4,02. ' Mjölksyrahalten höjdes från 23 till 90 g/kg torrsubstans.After 90-100 days, the different silos were opened, and the silage was analyzed. The results obtained are summarized in Table II below. 15 \ k. 4 4 nl. _ GL L 5 ._ 4 .. o 3.3. .o NG .3 w SÅ n o .. 3: 3. Q to 3.? .i NQJ u q me: på., Ww ... fl ._._. _ www ».. .... ..o. fi ... ß. m3 m. .... . . . . . . . _. 4 »mmm 2.2 _. Immå Q. 31mm. ... IÉSS 36 ._. . . _ _. . . . . . . . . . . . . . . . -. . . . . , _ _ _. . UHNUOu Z .Z MCHHUCQSUE Gn fi mnswuuøu. wåuwvh flfi ëw fl u. wx fi cøw fi o .. ...... ä fl mmëz .mz1z. mn .Spwaå fl m HH aHwnmB_ v '- 452 244 4 16 The test results show that even the mixture according to French patents 2,361,828 and 2,390,908 plus cellulase of fungal origin gave an improved ensilage, as shown by the following: pix value: was reduced from 5.25 to 4.02. The lactic acid content was increased from 23 to 90 g / kg dry matter.
Proteinerna skyddades bättre, eftersom förhållandet mellan ammoniak- kväve och totalkväve sjönk från 17,76 till 14 och förhållandet mellan lösligt kväve och totalkväve sjönk från 63,80 till 48,10.The proteins were better protected, as the ratio of ammonia nitrogen to total nitrogen decreased from 17.76 to 14 and the ratio of soluble nitrogen to total nitrogen decreased from 63.80 to 48.10.
Denna blandning hade dessutom den fördelen, att den icke gav någon bildning av propionsyra och smörsyra.This mixture also had the advantage that it did not give any formation of propionic acid and butyric acid.
Blandningen (D) enligt föreliggande uppfinning medför en ytterligare förbättring, vilket framgår av följande: pH-värdet sänktes från 4,02_till 3,70.The mixture (D) of the present invention provides a further improvement, as shown by the following: The pH was lowered from 4.02 to 3.70.
Mjölksyrahalten höjdes från 90 till 122 g/kg torrsubstans.The lactic acid content was increased from 90 to 122 g / kg dry matter.
Proteinerna skyddades bättre, eftersom förhållandet mellan ammoniak- kväve och totalkväve sjönk från 14 till 8 och förhållandet mellan iösligt :wave och totauwäve-sjönk från 48,10 1-.111 44. ' ' Blandningen enligt uppfinningen hade också den fördelen, att den icke gav någon bildning av propionsyra eller smörsyra.The proteins were better protected because the ratio of ammonia nitrogen to total nitrogen decreased from 14 to 8 and the ratio of soluble: wave to total nitrogen decreased from 48.10 1-.111 44. The mixture according to the invention also had the advantage that it did not gave some formation of propionic acid or butyric acid.
Smältbarheten och intagbarheten av de erhållna ensilagen undersöktes genom att ensilagen gavs till får. Härvid erhölls följande reslutat. šf (B) 0,64 foderenheter/kg.The digestibility and ingestibility of the obtained silage were examined by giving the silage to sheep. The following results were obtained. šf (B) 0.64 feed units / kg.
(C) 0,74 foderenheter/kg.(C) 0.74 feed units / kg.
(D) 0,82 foderenheter/kg.(D) 0.82 feed units / kg.
Kvävebalansen hos växande djur har också undersökts. Man fann härvid, att foder ensilerade i enlighet med föreliggande uppfinning gav de bästa resultaten. Vid utfodring med foder behandlat i enlighet med föreliggande uppfinning blev den kvarhållna kvävemängden mera än dubbelt så stor som vid utfodringen med foder behandlat med myrsyra.The nitrogen balance in growing animals has also been investigated. It was found here that feed ensiled in accordance with the present invention gave the best results. When feeding with feed treated in accordance with the present invention, the amount of nitrogen retained became more than twice as large as when feeding with feed treated with formic acid.
De erhållna resultaten är sammanställda i nedanstående tabell III.The results obtained are summarized in Table III below.
Claims (10)
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR7903499A FR2448299A2 (en) | 1979-02-12 | 1979-02-12 | Ensilage using added cellulase(s) - esp. by fermentation of Enterobacter agglomerans |
| FR7915887A FR2459006A2 (en) | 1979-06-21 | 1979-06-21 | Ensilage using added cellulase(s) - esp. by fermentation of Enterobacter agglomerans |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SE8001062L SE8001062L (en) | 1980-08-13 |
| SE452244B true SE452244B (en) | 1987-11-23 |
Family
ID=26221011
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SE8001062A SE452244B (en) | 1979-02-12 | 1980-02-11 | PROCEDURE AND COMPOSITION FOR THE CONSERVATION AND INCREASE OF THE NUTRITION OF GREEN PLANTS |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| AR (1) | AR219435A1 (en) |
| AT (1) | AT368842B (en) |
| AU (1) | AU537458B2 (en) |
| BG (1) | BG48331A3 (en) |
| CA (1) | CA1127101A (en) |
| CH (1) | CH643988A5 (en) |
| DD (1) | DD149015A6 (en) |
| DE (1) | DE3005020A1 (en) |
| DK (1) | DK57980A (en) |
| ES (1) | ES488462A2 (en) |
| GB (1) | GB2046567B (en) |
| GR (1) | GR74002B (en) |
| HU (1) | HU185784B (en) |
| IT (1) | IT1212401B (en) |
| LU (1) | LU82150A1 (en) |
| NL (1) | NL8000876A (en) |
| PL (1) | PL122629B1 (en) |
| PT (1) | PT70817A (en) |
| RO (1) | RO85921B (en) |
| SE (1) | SE452244B (en) |
| YU (1) | YU43215B (en) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FI66282C (en) * | 1982-11-02 | 1984-10-10 | Valio Meijerien | FOERFARANDE FOER ENSILERING AV GROENFODER ELLER FULLSAED |
| GB2159388A (en) * | 1984-06-01 | 1985-12-04 | Pan Britannica Ind Ltd | Preservation of silage |
| DE3916563A1 (en) * | 1989-05-20 | 1990-11-22 | Atochem Werke Gmbh | COMBINATION DEVICE AND METHOD FOR ACIDIFYING GREEN FORAGE AND PREVENTING AEROBIC DEGRADING PROCESSES IN GAERFUTTER |
| WO1991015966A1 (en) * | 1990-04-18 | 1991-10-31 | Ssv-Development Oy | Enzyme treated forage for silage |
| LT3208B (en) * | 1992-04-10 | 1995-03-27 | Ssv Dev Oy | Enzyme products for use in the improvement of feed value and conservation of fibrous crops |
| US5981835A (en) * | 1996-10-17 | 1999-11-09 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Transgenic plants as an alternative source of lignocellulosic-degrading enzymes |
| US6818803B1 (en) | 1997-06-26 | 2004-11-16 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Transgenic plants as an alternative source of lignocellulosic-degrading enzymes |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE302239B (en) * | 1960-03-29 | 1968-07-08 | N Nilsson | |
| IT1109471B (en) * | 1976-08-17 | 1985-12-16 | Deral Sa | PROCEDURE AND PRODUCT FOR THE PRESERVATION AND ENHANCEMENT OF GREEN VEGETABLES AND OF THE WET PRODUCTS UNDER AGRO-FOOD INDUSTRIES |
| FR2361828A1 (en) * | 1976-08-17 | 1978-03-17 | Deral Sa | Silaging process for plants for animal feeds - by adding to lactic fermentation a factor for breaking down higher glucides |
| FR2390908A2 (en) * | 1977-05-18 | 1978-12-15 | Deral Sa | Silaging process for plants for animal feeds - by adding to lactic fermentation a factor for breaking down higher glucides |
| GB1547063A (en) * | 1977-07-07 | 1979-06-06 | Salen Interdevelop Ab | Process for the biological ensiling of vegetable and/or animals materials |
-
1980
- 1980-02-08 GR GR61164A patent/GR74002B/el unknown
- 1980-02-08 HU HU80293A patent/HU185784B/en unknown
- 1980-02-11 DK DK57980A patent/DK57980A/en not_active Application Discontinuation
- 1980-02-11 AR AR279921A patent/AR219435A1/en active
- 1980-02-11 SE SE8001062A patent/SE452244B/en not_active IP Right Cessation
- 1980-02-11 YU YU349/80A patent/YU43215B/en unknown
- 1980-02-11 LU LU82150A patent/LU82150A1/en unknown
- 1980-02-11 IT IT8019844A patent/IT1212401B/en active
- 1980-02-11 DD DD80218995A patent/DD149015A6/en not_active IP Right Cessation
- 1980-02-11 DE DE19803005020 patent/DE3005020A1/en active Granted
- 1980-02-11 CA CA345,395A patent/CA1127101A/en not_active Expired
- 1980-02-11 ES ES488462A patent/ES488462A2/en not_active Expired
- 1980-02-11 BG BG46562A patent/BG48331A3/en unknown
- 1980-02-11 PL PL1980221935A patent/PL122629B1/en unknown
- 1980-02-11 AU AU55412/80A patent/AU537458B2/en not_active Expired
- 1980-02-11 CH CH111280A patent/CH643988A5/en not_active IP Right Cessation
- 1980-02-11 PT PT70817A patent/PT70817A/en not_active IP Right Cessation
- 1980-02-12 NL NL8000876A patent/NL8000876A/en not_active Application Discontinuation
- 1980-02-12 AT AT0074580A patent/AT368842B/en not_active IP Right Cessation
- 1980-02-12 RO RO100155A patent/RO85921B/en unknown
- 1980-02-12 GB GB8004578A patent/GB2046567B/en not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| HU185784B (en) | 1985-03-28 |
| DD149015A6 (en) | 1981-06-24 |
| GB2046567A (en) | 1980-11-19 |
| PL221935A3 (en) | 1980-10-20 |
| CH643988A5 (en) | 1984-07-13 |
| PL122629B1 (en) | 1982-08-31 |
| AT368842B (en) | 1982-11-10 |
| IT1212401B (en) | 1989-11-22 |
| GB2046567B (en) | 1983-11-30 |
| YU34980A (en) | 1983-02-28 |
| PT70817A (en) | 1980-03-01 |
| GR74002B (en) | 1984-06-06 |
| DE3005020C2 (en) | 1991-08-01 |
| DK57980A (en) | 1980-08-13 |
| RO85921A (en) | 1985-01-24 |
| CA1127101A (en) | 1982-07-06 |
| ATA74580A (en) | 1982-04-15 |
| DE3005020A1 (en) | 1980-08-28 |
| AU5541280A (en) | 1980-08-21 |
| IT8019844A0 (en) | 1980-02-11 |
| YU43215B (en) | 1989-06-30 |
| AR219435A1 (en) | 1980-08-15 |
| NL8000876A (en) | 1980-08-14 |
| SE8001062L (en) | 1980-08-13 |
| LU82150A1 (en) | 1980-05-07 |
| AU537458B2 (en) | 1984-06-28 |
| ES488462A2 (en) | 1980-10-01 |
| BG48331A3 (en) | 1991-01-15 |
| RO85921B (en) | 1985-01-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0468596B1 (en) | Enzymatic treatment of silage | |
| Hope et al. | Activity, origins and location of cellulases in a silt loam soil | |
| Borneman et al. | Fermentation products and plant cell wall-degrading enzymes produced by monocentric and polycentric anaerobic ruminal fungi | |
| Ray et al. | Optimization of fermentation conditions for cellulase production by Bacillus subtilis CY5 and Bacillus circulans TP3 isolated from fish gut | |
| EP0563133B1 (en) | Formulation for treating silage | |
| Aiello et al. | Effect of alkaline treatments at various temperatures on cellulase and biomass production using submerged sugarcane bagasse fermentation with Trichoderma reesei QM 9414 | |
| Ning et al. | Effects of microbial enzymes on starch and hemicellulose degradation in total mixed ration silages | |
| GB1591810A (en) | Process and composition for the preservation of vegetables | |
| US7718415B1 (en) | Acetyl esterase producing strains and methods of using same | |
| US4751089A (en) | Composition and method for ensilaging fodder and grain | |
| EP0634899B1 (en) | Enzyme products for use in the improvement of feed value and conservation of fibrous crops | |
| Friedrich et al. | Mixed culture of Aspergillus awamori and Trichoderma reesei for bioconversion of apple distillery waste | |
| Gattinger et al. | The use of canola meal as a substrate for xylanase production by Trichoderma reesei | |
| JP7388628B2 (en) | Cellulose decomposition-enhancing composition and cellulose decomposition-enhancing mutant strain | |
| SE452244B (en) | PROCEDURE AND COMPOSITION FOR THE CONSERVATION AND INCREASE OF THE NUTRITION OF GREEN PLANTS | |
| SU843700A3 (en) | Method of green plant ensilaging | |
| CN117264861B (en) | Bacillus subtilis for coexpression of multi-cellulase genes, construction method and application thereof | |
| WO1988004527A1 (en) | Fermentative procedure for feed preservation and an additive for performing the preservation | |
| JP2004173688A (en) | Silage modifier and method for preparing silage | |
| Prajanban et al. | Selection of high β-glucanase produced Aspergillus strain and factors affecting the enzyme production in solid state fermentation | |
| RU1799395C (en) | Strain of bacterium acidocaldarius used for straw ensilage | |
| Sun et al. | Effects of thermophilic and acidophilic microbial consortia on maize steeping | |
| de los Angeles Olvera-Treviño et al. | An endoglucanase from an isolated strain of Bacillus circulans | |
| WO2020232331A2 (en) | Digestion of forage containing lignocellulose with fibrolytic enzymes and recombinant bacterial expansins | |
| Khan et al. | Formation of esterase, xylanase and xylosidase by cellulolytic anaerobes |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| NUG | Patent has lapsed |
Ref document number: 8001062-2 Effective date: 19940910 Format of ref document f/p: F |