SE447118B - 4"-deoxi-4"-acylamido-derivat av oleandomyciner, erytromyciner och erytromycinkarbonat - Google Patents

Description

10 15 20 25 4147 1'I8 2 I. där var och en av R1 och R2 representerar väte eller alkanoyl med 2-3 kolatomer; Z är (a) -m-c(cH3>3. (b) -CH(R5) Y (c) -<:::> eller (Ö) -(CH2)m-heterocyklyl; m är O eller 1; Rs är väte, klor, hydroxyl, amino eller alkoxi med 1-4 kolatomer; Y är väte, klor, brom, fluor, alkyl med 1-4 kolatomer, alkoxi med 1-4'kolatomer, trifluormetyl eller karbalkoxi med 2-5 kolatomer; heterocyklyl är tienyl, pyrazinyl, pyridyl, furyl, imidazolyl, tiazolyl, isotia- zolyl, oxazolyl, isoxazolyl, pyrrolyl, tiadiazolyl eller monometylderivat av nämnda heterocyklyler; och farmaceutiskt godtagbara syraadditionssalter därav.

Föreningarna som faller under ovan angivna allmänna formeln I inklusive de epimera formerna och de farmaceutiskt god- tagbara salterna därav är effektiva antibakteriella medel 10 15 zo_ 25 30 35 3 447118 gentemot grampositiva mikroorganismer, exempelvis Stephylococcus aureus och Streptococcus pyogenes, in vitro och många därav är aktiva in vivo vid parenteral och oral administration. Många av föreningarna (och salter därav) är också aktiva gentemot vissa gramnegativa mikro- organismer, såsom kocker, exempelvis Pasteurella multo- cida och Neisseria sicca.

På grund av relativt större aktivitet och styrka gynnas de föreningar enligt uppfinningen, som är sammanställda i nedanstående tabell: Rz 111 z H H eller cocH3 (a) -(CH2)m-c(cr13)3: m = 0, 1; (b) cH(R5)-@\ där R5 = H, y Cl eller OCH MQ (d) -(cH2)m- heterocyklyl; m = 0 3 Föredragna föreningar enligt uppfinningen är de bland de i ovanstående tabell sammanställda, i vilka Z är -C(CH3)3, "m2 "@/Y' '© 2-pyrazinyl, 4-metyl-5-tiazolyl, 4-metyl-5-oxazolyl eller där Y är väte, klor eller fluor; isoxazolyl.

Speciellt föredragna bland de i ovanstående tabell samman- ställda för de, i vilka Z representerar en av de ovannämnda heterocyklylgrupperna och R1 är väte. 10 15 20 25 30 35 447 118 4 Föreningar som faller under den ovan angivna formeln I framställes genom att man med lämpligt acyleringsmedel acylerar det motsvarande 4"-aminoderivatet. Acylerings- reaktionen genomföres på det sättet, att man bringar det lämpliga 4"-aminoderivatet i ett gentemot reaktionen inert lösningsmedel i kontakt med ett reaktivt derivat av det lämpliga acyleringsmedlet. Bland typiska reaktiva derivat av acyleringsmedlen kan nämnas syrakloriderna, anhydrid- erna (enkla eller blandade), syraazid, en aktiv ester eller tioester med exempelvis N-hydroxiftalimid, N-hydr- oxisuccinimid, en fenol eller tiofenol, och "kondensations- produkten" med ett "kondensationsmedel", såsom en karbodiimid, en alkoxiacetylen, N,N'-karbonyldiimidazol, N,N'-karbonyl- ditriazol och hexahalogencyklotrifosfatriaziner.

Föredragen acylering enligt förevarande uppfinning innefat- tar omsättning av det lämpliga 4"-aminoförsteget för före- ningarna med formeln I med syrakloriden (eller bromiden) av det lämpliga acyleringsmedlet i närvaro av en syraacceptor.

Lämpliga syraacceptorer är tertiära aminer, såsom trialkyl- aminer med 1-4 kolatomer per alkylgrupp, N-metylanilin, pyridin, N-etylpiperidin och N-metylmorfolin. När man som lösningsmedel använder ett vattenhaltigt system, kan man som syraacceptor använda en oorganisk bas, exempelvis en alkalimetallhydroxid. Acyleringen kan genomföras i ett vattenhaltigt eller icke vattenhaltigt lösningsmedelssystem.

I vattenhaltiga system genomföres reaktionen i allmänhet vid ett pH mellan 6 och ca 9 och vid en temperatur mellan ca 0 och ca 50°C. Den kan också genomföras i instabila emulsioner av vatten och med vatten icke blandbara, orga- niska lösnignsmedel, såsom metylisobutylketon och lägre alkylacetat inom ett pH-intervall mellan ca 2 och ca 4. I icke vattenhaltiga system genomföres reaktionen vid en temperatur mellan ca 0 och ca 50°C i närvaro av en i lös- ningsmedlet löslig syraacceptor, exempelvis en av de ovan uppräknade tertiära aminerna. 10 15 20 25 30 35 5 447118 Man föredrar också omsättning av den lämpliga 4"-amino- föreningen med syraformen av det lämpliga acylerings- medlet i närvaro av en karbodiimid. Detta förfarande före- drages ofta på grund av att det är bekvämt, att reaktions- komponenterna är lättillgängliga och på grund av produkt- utbytet. När man använder karbodiimid som kondensations- medel, kan man använda vattenhaltiga eller icke vatten- haltiga lösningsmedelssystem. När ett vattenhaltigt system användes, injusteras pH lämpligen mellan ca 5 och ca 8, helst mellan ca 6 och ca 7. Vid en typisk utföringsform blandas reaktionskomponenterna syra oçh karbodiimid i ekvimolara proportioner i ett lämpligt lösningsmedel (tetra- hydrofuran, dioxan), och en lösning av vatten och ett med vatten blandbart organiskt lösningsmedel (vatten plus dioxan eller tetrahydrofuran) innehållande reaktionskompo- nenten aminomakrolid tillsättes vid rumstemperaturen. Bland- ningen omröres i flera timmar) till dess att reaktionen är slutförd. Temperaturer mellan ca -5 och ca +30°C tillämpas i allmänhet. I det flesta fall användes kondensationsmedlet i ett överskott upptill ca 10%. Den acylerade produkten ut- vinnes på inom här ifrågavarande industriområde känt sätt.

Syraadditionssalter av föreningarna enligt uppfinningen framställes lätt genom behandling av föreningar med formeln I med minst en ekvimolär mängd av den lämpliga syran i ett gentemot reaktionen inert lösningsmedel. När det föreligger fler än en basisk grupp i en förening med formeln I möjlig- göres genom tillsats av en tillräcklig mängd syra före neutralisation av var och en av de basiska grupperna bild- ning av polysyraadditionssalter. Syraadditionssalterna ut- vinnes genom avfiltrering, om de är olösliga i det gente- mot reaktionen inerta lösningsmedlet, genom utfällning åstadkommen genom tillsats av ett icke lösningsmedel för syraadditionssaltet eller genom indunstning av lösnings- medlet. Representativa bland sådana salter är hydroklorid, hydrobromid, fosfat, sulfat, formiat, acetat, propionat, butyrat, citrat, glykolat, laktat, tartrat, malat, maleat, fumarat, glukonat, stearat, mandelat, pamoat, bensoat, 10 15 20 25 30 35 447 118 6 succinat, laktat, p-toluensulfonat och aspartat, men uppfinningen är icke begränsad till dessa salter.

Reaktionskomponenterna 11-monoalkanoyl-, 2'-monoalkanoyl- och 11,2'-dialkanoyl-4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin fram- ställes genom reduktiv aminering av motsvarande 11-mono- alkanoyl-, 2'-monoalkanoyl- och 11,2'-dialkanoyl-4"- deoxi-4"-oxo-oleandomycin med användning av palladium på träkol, väte (mellan ca 0,006 och ca 3,5 MPa) och ammoniumacetat i ett lämpligt lösningsmedel, såsom metanol, och isopropanol vid en temperatur mellan ca 20 och ca 50°C.

Alternativt kan man som reduktionsmedel i stället för palladium på träkol och väte använda natriumcyanoborhydrid.

De avestrade derivaten framställes bekvämt genom solvolys av de motsvarande 2'-monoalkanoyl-4"-deoxi-4“-amino-oleando- mycinerna.

De nödvändiga 4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycinestrarna framstäl- les genom selektiv oxidation av 4"-hydroxigruppen med an- vändning av N-klorsuccinimid och dimetylsulfid åtföljd av tillsats av en tertiär amin, exempelvis trietylamin. N- klorsuccinimiden och dimetylsulfiden kombineras i ett gentemot reaktionen inert lösningsmedel vid ung. OOC. Efter 10-20 minuter injusteras temperaturen i den så erhållna blandningen på ett värde mellan ca 0 och -25°C och den lämpliga oleandomycinestern tillsättes. Reaktionsbland- ningen omröres under en tid av mellan ca 2 och ca 4 timmar, varpå den tertiära aminen tillsättes och kylbadet avlägsnas.

För att påskynda reaktionen kan man lämpligen använda N- klorsuccinimiden och dimetylsulfiden i ett upptill 20- faldigt överskott. Den tertiära aminen användes i ekvi- molar mängd i förhållande till den använda mängden N-klor- succinimid. Lämpliga gentemot reaktionen inerta lösnings- medel för reaktionen är toluen, bensen, etylacetat, kloro- form, metylenklorid och tetrahydrofuran. Alternativt an- vändes dimetylsulfoxidättiksyraanhydrid eller dimetyl- sülfoxid-trifluorättiksyraanhydrid som oxidationsmedel. 10 15 20 25 30 35 7 447118 De önskade 4"-deoxi-4“-amino-oleandomycinderivaten isoleras genom att man utnyttjar fördelen av deras basiska natur.

En vattenlösning av det råa aminoderivatet extraheras inom ett intervall för småningom stigande pH, så att neutrala eller icke-basiska material extraheras vid lägre pH och produkten vid ett pH av ung. 10.Extraktionsmedlen (etylacetat eller dietyleter) tvättas med saltlösning och vatten, torkas över natriumsulfat och indunstas, varigenom man erhåller produkten.

Stereokemin hos utgángsmaterialen, som leder till de anti- bakteriella medlen enligt förevarande uppfinning, överens- stämmer med det naturliga materialet. Genom oxidationen av 4"-hydroxigruppen i oleandomycin till en keton och efter- följande omvandling av nämnda keton till 4"-aminerna före- ligger möjlighet till ändring av 4"-substituentens stereo- kemi från den naturliga produktens. Följaktligen är det möjligt, att vid omvandling av 4"-oxo~reaktionskomponent- erna till aminer erhålla epimera aminer. I praktiken obser- veras,att båda de epimera aminerna föreligger i slutproduk- ten i varierande mängdförhållanden beroende på val av syn- tesmetod. Om den isolerade produkten till övervägande del består av en av epimererna, kan nämnda epimer renas genom sådana metoder som upprepar kristallisation i ett lämpligt lösningsmedel till konstant smältpunkt. Den andra epimeren, dvs. som föreligger i mindre mängd i det ursprungliga iso- lerade materialet, utgör den övervägande produkten i moder- luten. Den kan utvinnas ur denna på för fackmannen känt sätt, exempelvis genom att moderluten indunstas och åter- stoden underkastas upprepad omkristallisation till en produkt med konstant smältpunkt eller genom kromatogra- fering. Ehuru blandningen av epimera aminer kan separeras på sätt som är välkända för fackmannen, kan det av prak- tiska skäl ofta vara fördelaktigt att använda blandningen sådan den isoleras ur reaktionen. Om man använder epimera blandningar av 4"-aminoreaktionskomponenterna erhålles givetvis en epimer blandning av de acylerade produkterna. 10 15 20 25 30 447 118 a Den så bildade epimera blandningen kan separeras på för fackmannen känt sätt. Båda epimererna av en given före- ning uppvisar emellertid samma typ av aktivitet och ehuru separationen är önskvärd, är den icke alltid nödvändig.

Föreningarna I uppvisar in vitro aktivitet gentemot ett flertal grampositiva mikroorganismer och gentemot vissa gramnegativa mikroorganismer, såsom de med sfärisk eller ellipsoid form (kocker). Deras aktivitet gentemot olika mikroorganismer påvisas lätt vid prov in vitro med an- vändning av hjärna-hjärta-infusionsmedium medelst den vanliga 2-faldiga spädningstekniken. Deras aktivitet in vitro gör dem användbara för topisk applikation i form av salvor, krämer och liknande, för sterilationsändamâl, exempelvis av sjukrumsutensilier; och som industriella antimikrobmedel, exempelvis för vattenbehandling, slem- bekämpning och konservering av mâlningsfärg och trä.

För användning in vitro, exempelvis för topisk applikation, är det ofta bekvämt att bereda den valda produkten med en farmaceutiskt godtagbar bärare, exempelvis en vegetabi- lisk olja, en mineralolja eller en uppmjukande kräm. De kan likaledes lösas eller dispergeras i vätskeformiga bärare eller lösningsmedel, exempelvis vatten, alkohol, glyceroler eller blandningar därav eller andra farmaceu- tiskt godtagbara, inerta medier, dvs. medier som icke har någon gynnsam effekt på den aktiva beståndsdelen. För sådana ändamål är det i allmänhet acceptabelt att den aktiva beståndsdelens koncentration ligger mellan ca 0,01 och upptill ca 10 viktprocent räknat på den totala bland- ningen. 10 15 20 25 30 35 40 9 447 118 Dessutom är många föreningar enligt förevarande uppfinning aktiva in vivo gentemot grampositiva och vissa gramnegativa mikro- organismer vid oral och/eller parenteral administration på männi- skor och djur. Deras aktivitet in vivo är mera begränsad vad be- träffar känsliga organismer och bestämmes på det vanliga sättet, som innefattar infektering med testorganismen av möss med väsent- ligen likformig vikt och efteråt skeende behandling av försöks- djuren ovalt eller subkutant med testföreningen. I praktiken ympas möss, exempelvis 10 stycken, intraperitonealt med lämpligt utspäd- da kulturer innehållande ung. 1-10 gånger LD1OO (den lägsta kon- centration av organismen, som erfordras för att alla försöksdjuren dör). Kontrollprov genomföres samtidigt, vid vilka möss ympas med lägre utspädningar som kontroll med avseende på möjliga variationer beträffande testföreningens virulens. Testföreningen administreras 0,5 timmar efter ympningen och upprepas 4, 24 och 48 timmar senare. överlevande möss hálles 4 dagar efter den sista behandlingen och antalet överlevande antecknas.

Vid användning in vivo kan dessa nya föreningar administreras ovahzeller parenteralt, exempelvis genom subkutan eller íntramusku- lär injiciering i doser mellan ca 1 och ca 200 mg/kg kroppsvikt och dag. Ett gynnsamt doseringsintervall ligger mellan ca S och ca 100 mg/kg och det föredragna intervallet ligger mellan ca 5 och ca 50 mg/kg kroppsvikt och dag. För parenteral injiciering lämpliga vehikler är antingen vattenhaltiga (vatten, isotonísk koksaltlös- ning, isotonísk dextroslösning, Ringer's lösning] eller icke-vat- tenhaltiga såsom feta oljor av vegetabiliskt ursprung (bomul1sfrö- olja, jordnötsolja, majsolja, sesamolja), dimetylsulfoxid och andra icke-vattenhaltiga vehikler, som icke stör preparatets terapeutiska effektivitet och som icke är giftiga i de volymer eller proportio- ner, varmed de användes (glycerol, propylenglykol, sorbítol). Dess- utom kan man med fördel framställa beredningar lämpliga för impro- viserad tillredning av lösningar före administrationen. Sådana be- redningar kan innehålla vätskeformiga utspädningsmedel, exempelvis propylenglykol, díetylkarbonat, glycerol, sorbítol etc; buffert- substanser, hyaluronidas, lokalanestetika och oorganiska salter för erhållande av önskvärda farmakologiska egenskaper. Dessa föreningar kan också kombineras med olika farmaceutiskt godtagbara, inerta bärare, bl.a. fasta utspädningsmedel, vattenhaltiga vehikler, 0- giftiga organiska lösningsmedel i form av kapslar, tabletter, sug- tabletter, karameller, torra blandningar, suspensíoner, lösningar, 10 15 20 25 30 35 447 118 10 elixirer, parenterala lösningar eller suspensioner. I allmänhet an- vändes föreningarna i olika doseringsformer vid koncentrationer mellan ca 0,5 och ca 90 viktprocent räknat på den totala blandningen.

I följande exempel har man icke bemödat sig om att utvinna maximal mängd bildad produkt eller optimera utbytet av en given produkt. Exemplen är endast illustrativa för förfarandet och för de genom detta framställbara produkterna.

I vart och ett av Exemplen 1-36 användes som reaktionskompo- nent 11-acetyl-4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin den i Exempel E som huvudkomponent erhållna epimeren.

Exempel 1: 11-acetyl-4"-deoxi-4"-(Z-fenylacetamído)-oleandomycin.

En lösning av 11-acetyl-4"-deoxi-4"-amíno-oleandomycín (2,88 g, 3,95 mmol) i tetrahydrofuran (60 ml) och vatten (30 ml), som in- justerats på pH 8,0 genom tillsats av utspädd saltsyra, försattes vid rumstemperaturen, droppvis och under omrörning inom loppet av 3 minuter med en lösning av fenylacetylklorid (0,549 ml) i tetra- hydrofuran (4 ml). Reaktionsblandníngens pH hölls vid 7,9-8,1 genom samtidig tillsats av en utspädd vattenlösning av natríumhydroxid (1-normal). Reaktionsblandningen omrördes i 5 minuter vid rums~ temperaturen och hälldes därefter under omrörning i en blandning av vatten-etylacetat (1:1), och pH injusterades på 9,0. Den orga- niska fasen avskildes, tvättades med vatten och därefter med en saltlösning, varpå den torkades över Na2SO4. Genom índunstning av lösningsmedlet erhölls en produkt i form av ett vitt skum (3,2 g).

Detta löstes i en het lösning av 30 ml vatten och 45 ml aceton och den så erhållna lösningen koncentrerades genom kokning till en un- gefärlig volym av 60 ml, där produkten började utkristallísera.

Blandningen kyldes, den fasta substansen avfiltrerades och torkades 1 vakuum. Utbyte 2,61 g, smältpunkt 154-1s1°c.

NMR; d'š%â1 7,36 (S, sa), s,so (a, 1H), 3,66 (S, za), 3,40 3 (S, SH), 2,66 (m, ZH), 2,35 (2, 6H), 2,06 (S, SH).

Exempel 2-24: Det i Exempel 1 beskrivna förfarandet upprepades med den ändringen, att man i stället för fenacetylklorid använde för framställningar lämplig syraklorid: 447118 11 m:N .mv @m.N mmm .mv @m.N .m:N .sv mm.N mmm .mv @«.m N m N m:N .mv mm.N .mmm .vv _m.m mmm .Ev m_.m om_-m.mmm m : Umlmv- :U m mmm .mv [email protected] mmm .mv mm.N .m=N .sv mm.N mmm ”mv @«.m V m N m:N .mv om.m .mmm .wv _m.m mmm av mm.N mm_-_@m m : um-Nv- zu m mzm .mv mQ.N mmm .mv mm.N .mzN .ev [email protected] mmm .mv @N.m Q m N m=N .mv [email protected] .mmm .wv Om.m m=< .mv @m.m O«_-mm_ m z Umuflwv zu N n n n n n a nW@ mmm mv @m.N m:N av cm N mzm mv Nm N Q m N m:N .mv om m .m=_ .vv @m.m m=« .Ev m«.N m.mmm-om_ m m uNU-mv- av N N U .pxcømmmmem N mmaamxm mwm%\Umzz 0 mm O NI 1:2 m 3 o flit #63.

Nmmmuv z 12 447 118 .hmm .mv mm.m .hmm .mv mm.m .hmm .ev mm.m .hmm.m .mv mm.m .hm m.P .mv mm.m .hmm .mv mm.m .hmm .mmv mm.m . . . Mhmm ”mv mmmm ”hmm Hmv mmfim hmm ev mm m hmm mv mm m hmm mv mm m .hmm .mv mm.m .hmm .mv mm.m .hmm .mv mm.m . . . Mhmm Hmv mhmm ”hmm Hmv mmum hmm .ev mm.m .hmm mv hm.m hmm .mv mm m .hmm mv mm m hmv .mv mm m .hmm Ev mm.m . . . ..hmm..mv [email protected] mmflm hmm mv Pm m hmm mv mm m hmm mmv mm m .hmm .mv mm.m .hmm .mv mm.m .hmm .mv mm.m .hmm .mv m_.m .hmm .mv mm.m .hmm .ev mm.m .hmm .mv mm.m .hmm .mv mm.m .hmm .mv mm.m .hmm .mv mm.m .hmm .mv mm.m .hmm .mv mm.m .hmm .ev mm.m .hmm .mv mm.m .hmm .mv mm.m .hmv .mv mm.m .hmm .mv mm.m .hmm .mv mm.m .hmm .mv mm.m .hmm .Ev mm.m .hmm .mv _m.m .hmm .mv mm.m .hmm .mv mm.m .hmm .Ev m_.m m mmm.. hësxm »~m> mmmm-hmmvmu .mmmmmmmmm m.m v._v mm m_.-mm_ hmmmmommm-mv-mmm mm m.mm_-m.mm_ hmmmmommu-mv-mmu mh mmm-mmv hmmmUmmmm~mv-mmm m Emmm mmm> hmmmmmm-mv-mmm m mm_-m.mmm hmmmmmmu-mv-mmm m mm_-mm_ hmmmUm-mv-mmU m oo .pxmzmphmem N hwmemxm 447 118 13 n .mmm .mv [email protected] mmm .mv mm.m .mmm .ev mm.m .mmm .mv Qm.m m m mmm .mv mm.m .mmm .vv mm.m .mmm .ev mm.m mmm-mmm m Ummøvmum-vm mm . .mmm ”mv mo.m mmm .mv mm.m mmm .sv mm.m .mmm mv om.m mmcmmmmm m m m m _ mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m .mmm .ev mm.m -mm@=mmv mmm-@mm m u-mU|mv- mo mm .mmm .mv [email protected] .mmm .mv @m.m mmm .sv om.m .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m mmvmmm-m .mmm .mv [email protected] .mmm .mv mm.m mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m mmm .mv mm.m .mmm .av mm.m .mmm .Ev @m.m @mm-mm_ mmmmemmmmmmm-m mm .mmm .mv @_.m mmm .av mm.m .mmm .ev om.m .mmm .mv @m.m mmm .mv mm.m .mmm .sv mm.m .mmm .mv mm.m m.mmm-m.mmm mmmmemmmm»mm-m mm .mmm .mv [email protected] mmm .mv mm.m .mmm .ev mm.m .mmm .mv mm.m _ mmm .mv mm.m .mmm .mv @m.m .mmm .ev mm.m mmv mmammlm mm . .mmm .mv [email protected] mmm .mv mm.m .mmm .ev [email protected] .mmm .mv mm.m mmm .mv mm m .mmm .mv mm.m .mmm .ev mm.m mmm-mmm mm=mm\m mm mm .mm==mmmmem m mmmemmm 14 447 118 ~.o~ Im wN> wmnmcmnuxm pxswowm ñnv .HowmEmm:fihm:Hm Eom mfiozu >m wc«cwzm>:m flmë muxnvohamn m ~.P\w owv Hwmwflxofiwfimwfix mn wafinmwmnmoumëohxcnofiox wmummxwwwcs cwuxsuohmmcofiuxmmn >m mcflcmmfinmfiumo fimv .mmm .mv ov.N .ñ:N .mv @_.N .flmv .mv vN.N .NaN .ev wv.N .^:N .mv [email protected] .^=N .vv [email protected] .mmm .mv vo.N HM=@.~w~ wm.N..^@w FEM [email protected]..^:@.m ”WW NMHW :N N m vm N = W Nm N _ = N .Nav .mv NN.N .^=N .ev _v.N Ußmw ”MW MWHW « Q n n « N « n n ^mN mv QN N ^=v vv NN m ^=« av _» N .fimm .wv @_.N Hñzv ”mv QNHN HAIN ”ev ONMN H^=N ”mv NNHN ^:N mv QN N ^=F wv va m ñmq Ev cv N .mmm .Nv .oF.N Hñzw .mm vm_N .ÛQN Hav Wv W .ñ=m._ mv NN N ^=m _ mv ON N ^:m _ mv NN N .~=m.v .mv @<.N .^=_ .vv NO.N .^=m .Ev @«_N NNUQU wzïv šz Esxw w@~|co» m.NNv-mNP mwfumfiw Efivfim äwfi> vc .»x==m@NmEw N^N:uvU-Nmu NN m=vunN=zvmu NN ^<=@uNu|Nv-N:u NN ^«=@ummu-Nv-N:U NN mmvufimmuovmu N.Q ON N Hmmëoxm 10 15 ZO 25 30 35 40 15 447 118 Exempel 25: L(+)-11-acetyl-4"-deoxi-4"-(1-hydroxí-2-fenylacetamido) oleandomzcin. N-hydroxisuccinimid (296 mg, 2,97 mmol) sattes under omrörning till en lösning av L(+)-mandelsyra (391 mg, 2,57 mmol) i tetrahydrofuran (20 ml). När lösningen var fullständig tillsattes dicyklohexylkarbodiimid (531 mg, 2,57 mmol). Reaktionsblandníngen omrördes i 1 timme vid rumstemperaturen och filtrerades därefter för avlägsnande av dicyklohexylkarbamid. Fílterkakan tvättades med tetrahydrofuran (5 ml) och det kombinerade filtratet och tvättvätskan behandlades med 11-acetyl-4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin (1,5 g, 2,05 mmol) under kväveatmosfär vid rumstemperaturen. Reaktionsbland- ningen omrördes i 1 timme och hälldes därefter i en blandning av metylenklorid och vatten (1:1). Den organiska fasen avskildes, kom- binerades med en lika stor volym vatten och pH injusterades under omrörning på 10,5. Den organiska fasen avskildes och tvättades först med vatten och därefter med en saltlösning, varpå den torka- des över Na2S04. Genom indunstning av extraktet erhölls råproduk- ten i form av ett vitt skum (1,51 g). Detta löstes i en het lösning av 20 ml aceton och 20 ml vatten och den så erhållna lösningen in- dunstades under atmosfärstrycket genom kokning, till dess att den blev grumlig. Koncentratet omrördes i 1,5 timmar vid rumstempera- turen, varpå det fasta materialet avfiltrerades och torkades vid 60°C i hög vakuum. Utbyte 962 mg vita kristaller, smältpunkt 236,5- 2400C (sönderdelning).

NMR; JTMS 7,45 (m, se), 6,91 (a, m), 5,16 (S, m), 3,31 CDCl3 (5, SH), 2,68 (m, ZH), 2,35 (S, 6H), 2,08 (5, SH).

Exempel 26: 11-acetyl-4"-deoxi-4"-(pivaloylamido)oleandomycin.

Till en lösning av 1H-tetrazolyl-1-ättiksyra (795 mg, 5,92 mmol) i tetrahydrofuran (10 ml) sattes vid rumstemperaturen och under omrörning pivaloylklorid (0,728 ml, 5,92 mmol). Blandningen blev grumlíg och omrördes i 15 minuter. Därefter sattes den droppvis (5,5 ml) under omrörning till en lösning av 11-acetyl-4"-deoxí-4"- amino-oleandomycin (1,5 g, 2,05 mmol) i vatten (15 ml) och tetra- hydrofuran (30 ml) vid rumstemperaturen och pH 8,0. Blandningens pH bibehölls vid 7,9-8,1 genom samtidig tillsats av 1N-NaOH allt- efter behov. Reaktíonsblandningen hälldes därefter i en under om- rörning hållen blandning av etylacetat och vatten och pH injustera- des på 10,5. Den organiska fasen avskildes, tvättades först med vatten och därefter med saltlösning, varpå den torkades över Na2S04.

Genom indunstníng av lösningsmedlet erhölls produkten i form av ett 447 118 16 vitt skum, (1,52 g).

NMR= øfššål 5,83 (a, 1H), 3,38 (S, sn) 2,66 cm, zu), 2,33 (S, en), z,os (s,3sH), 1,10 (5, QH).

Exempel 27-36: 11-acetyl-4"-deoxi-4"-(Z-fluorbensamido)-oleandomycín.

En lösning av 11-acetyl-4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin (1,50 g, 2,05 mmol) i tetrahydrofuran (35 ml) och vatten (15 ml), som in- justerats på pH 8,0 genom tillsats av utspädd saltsyra, försattes vid rumstemperaturen droppvis och under omrörning under loppet av 3 minuter med en lösning av Z-fluorbensoylklorid (0,27 ml) i tetra- hydrofuran (5 ml). Blandningens pH hölls vid 7,9-8,1 genom samtidig tillsats av en utspädd vattenlösning av natriumhydroxid (1-normal).

Reaktionsblandníngen omrördes i 5 minuter vid rumstemperaturen och hälldes därefter under omrörning i en blandning av vatten och etyl- acetat (111) och pH injusterades på 9,0. Den organiska fasen av- skildes, tvättades med vatten och därefter med saltlösning och tor- kades över Na2SO4. Genom índunstníng av lösníngsmedlet erhölls pro- dukten i form av ett vitt skum (1,61 g).

NMR; É%â1 - 7,40 (m, 4H), 3,50 (S, sn), 2,70 (m, zn), 2,38 (S, an), 2,10 (s,3sH).

Följande föreningar framställdes på analogt sätt ur för ända- målet lälupliga syraklorider /Z-C(0)Cl/ och 11-acetyl-4"-de0xí-4"- amíno-oleandomycin. 447 118 17 .mmm Hmv mQ.~ .mmm .mv mm.N mmm Hav mm.N mmm .mv mm.m .mmm mv mm.m .mmm .sv mm.m mmm av mm.m .mmm .mv om.m .mmm .mv Qm.m mmm .ev mm.m mmm .mv m<.m .mmm .mv mm.m .mmm .sv mo.m mmm .ev om.m .mmm .mv mo.~ .mmm .mv mm.m mmm .ev mm.~ mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m .mmm .ev mo.m mmm .av mmmm .mmm .mv mo.m .mmm .mv mm.N mmm .sv mm.m mmm .mv mm.m .mmm .ev @m.m .mmm .sv Qm.m mmm .Ev.mm.m .mmm .mv mo.~ mmm .mv mm.~ mmm .sv mm.~ .mmm .mv mm.m .mmm .mv mO.m mmm .ev mm.m .mmm .mv mQ.N mmm .mv mm.~ mmm .av mm.~ .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m mmm .ev mm.m . . .mmm .mv mO.m .mmm .mv mm.m mmm .av mm.m mmm mv mm m .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m mmm .av mm.m .mmm .mv om.~ mmm .mv mm.~ mmm .ev Qm.~ .mmm .mv @m.m .mmm .mv mo.m mmm .ev m~.m .mmm .mv mQ.~ mmm .mv mm.~ mmm .ev mm.~ .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m mmm .ev mm.m m mumu mzmmvmmz mmmmmmlm mm mmzmomummmmmkpmëamvnw mm. mmmmmm-~ mm mmm:m-~ mm mmmummu-m Nm mmmumu-m mm mmmUmovuommU-m cm «mmU@mmU-m mm mmmu mm N fimmmewxm 10 15 20 25 30 35 447 118 18 Exempe137 : 4"-deoxi-4"-/4-(1,2,3-tiadiazolyl)-karboxamido/olean- domzcin.

A. Till en lösning av 2'-acetyl-4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin (2,0 g, 2,7 mmol) och trietylamin (0,77 ml, 5,5 mmol) i torr me- tylenkloríd (20 ml), vilken lösning hade en temperatur av 25°C, sattes under omrörning 1,2,3-tiadiazol-4-karboxylsyraklorid (0,4) g, 2,7 mmol) i en portion. Efter 10 minuter omrördes reak- tíonsblandníngen med metylenklorid (80 ml) och vatten (100 ml) och pH injusterades därefter på 9,5 med en 1~normal vattenlösning av natriumhydroxid. Den organiska fasen avskildes, tvättades 4 gånger med lika volymer vatten och torkades över Na2SO4. Lösnings- medlet avlägsnades under reducerat tryck och man erhöll råproduk- ten i form av ett brungult skum (2,5 g) genom kolonnkromatogra- fering på kiseldioxidgel (200 g kiseldíoxidgel, kolonndimensíon: 3,5 x 49 cm, eluering med kloroform-isopropanol í volymförhållan- det 95:5) erhölls rent 21acetyl-4"-deoxí-4"-/4-(1,2,3-tiadiazolyl) karboxamido/oleandomycin i form av ett färglöst, amorft skum (1,4 g).

NMR; Jgšíêls 3,51 (s, an), 2,10 (s, za) B. 2'-acetylderivatet omrördes i 24 timmar vid ZSOC i metanol (30 ml) och metanolen avlägsnades därefter i vakuum, varigenom man erhöll rubrikföreningen i form av ett vitt, amorft skum (1,3 g, 60,3%).

NMR; qfrëlgâl -9,zs (s, 1H),s,5o(s, za), 2,32 (s, en).

Masspektrumë m/e = 256, 158. §§g¶g§l¿y裏ï: Pâ sätt som angíves i Exempel37 men med använd- ning av lämplig syraklorid i stället för 1,2,3-tiadiazo1-4-kar- boxylsyraklorid framställdes de i nedanstående tabell sammanställ- da föreningarna.

I de fall 2-acetyl-4"-deoxi-4"-(acylamido)oleandomycin-för- Steget fö? ett gíV6f 4"“¿90Xí-4"-( acYlamid0)01eandomycín icke an- gives betyder detta, att försteget icke isolerats före desacyle- ringen. 19 447 118 Procenttalen i den tredje kolumnen (den med kolumnhuvudet "Z") anger utbytet av ifrågavarande förening beräknat på mängden som utgångsmateríal använt 2'-acetyl-4"-deoxí-4"-amino-oleando- mycin 20 447 118 mm? www www www .fizm .mv m~.~ .hmm .mv ,m.m .ñmcmm ¥mmHx>mOmmmm@ :mmm mmcommmß .:~ .mmm m.m mm> mm .mF.m mm> <: mms mmmm=mE-m< .ñzm .mv mo.ß_.~:@ .mv mN.~ .hmm .mv m«.m .Nm.m mm>.@= .°N.m w«> |mmm= :mmm mm=omo»@ .:N .mmm m.m Mn=m .mv $~.~ .mmm .mv mv om m n:v .mv om.ß .mmm .mv mN.N .mmm .mv .mv «m.m .nzv .mv m,.m .mmm .mv o<.n .fimøflh æ%mwM»w»Hw%wN r . . A =mmm mm=om°m@ .=~ .mmv H m mm .Nm.m mm> .mm~ _m.~ .fimm fm.m .arv .mmm wfi> .mmm .mv ~m.~ m. .n _ .ñzm .mv m<.m .^m_ .sv N m : .ev om.m .^=v .sv m<.m .^=m .mv mN.~ .mmm .mv Qm.m .fimcmm Mmmmma |oHm cflhm wmcopopc .N:m_N m mm> <= .mm.m mm> < .omm .mmw : mms mmmm=@e-m< fi«>.mmv H>Ho~mHu|< fi>HoNmfiu|« ^wN.ßmv H>HoNwfi~omfl|m|H>uwE|m ~mQ.mNv H>Hommmmomm-m ñwm.Nov H>H0mmm»omm|m ^mN.m«v H>=mNmm>m-N ^«ß.Pov m>mmm»@-m ø\E vsshuxømmmmë m Hmm%\v.mzz IUOU I (\I vw mv Nw vw ow mm mm Hmmëwxm 447 118 21 mmm .mmm ø\E mëßhmxw mmmz .mmm .mv mm.N .mmm .mv mm.~ .mmm .mv mm.N .mmm .mv Nm.m .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.~ .mmm .mv mm.m .mmm .sv mm.m .mmm .ev Nm.m .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.N .mmm .mv mm.~ .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.~ .mmm .mv mm.N .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m .mmm .mv m~.~ .mmm .mv mm.m mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m . . =. Mmmm Hmv mmflm mmm mv mm N mmm mv mm m .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.N .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m .m v .Mmm .mw mm.m mm .m m~.N . mm .m mm.~ .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.~ .mmm .mv mm.~ .mmm .mv ~m.m .mmm .mv Nm.m .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.N .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m m mumm .mmm mmmm m>moNmxo|w|m>uoE|~ mmmcwn mmm=m-N mmm.~mv m>moNmxomm|m|m>u®E|m mmm.oov mmmo~wxomm|m|mmuoE|m mmm.mmv m>mowmxo1m|mmuoE|m m%moNmxo|m«m>uwE|m mmo.mwv m>moNmmu|<|m>umE|~ m>mo~wmu|w«mæumE|~ mmm.mmv m>moNmmu|m|mzmwE|« m>mo~mmm«m|m>mwE|« mm mm wm mm Nm mm om av mv vv mv mv mmmämxm 22 447 118 @\e mm. .@«~ www .mmm “ESMHXQ mmmz .hmm .mv Om.N .mmm .mv m«.m .^:_ .ev N«.m .ñzm .ev mm.ß .hmm .ev QN.m .mmm .av [email protected] .ñzm .mv m«.N .hmm .mv v«.m .mmm .mv m@.@ .mmm .mv Q«.m .fimm .mv _m.m .mmm .mv m~.~ .mmm .mv m<.~ .mmm .mv m«.m .mmm .mv [email protected] m.

HUQU mmzz mzmku H>@mH>@-N : mm H>m:«-m m mm Hzfioumxouwnfiäuošnw I mm N Nm flmaäwxm 10 15 20 25 30 35 40 B 447 118 Exempel 59: 4"-deoxi-4"-nikotinamido-oleandomycin. Till en lösning av 4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin (2,0 g, 2,7 mmol) i 35 ml ace- ton och 15 ml vatten, vilken lösning hölls vid pH 7,9-8,0 genom tillsats av en 1-normal vattenlösning av natriumhydroxid, sattes portionsvis under loppet av ung. 1 timme nikotinoylklorid-hydro- klerid (3,12 g, 14,8 mmol). Reaktionsblandningen hälldes därefter i en under omrörning hållen blandning av 300 ml etylacetat och 300 ml vatten och pH injusterades på 9,5 med en 1-normal vatten- lösning av natriumhydroxid. Den organiska fasen avskildes, tvät- tades med vatten (2 x 300 ml) och torkades över vattenfritt nat- riumsulfat. Lösningmedlet avlägsnades i vakuum och man erhöll rått 2'-acetyl-4"-deoxi-4"-nikotinamido-oleandomycin i form av ett gult skum. Genom kromatografering på kiseldioxidgel (elueringen påbör- jades med kloroform och avslutades med en blandning av kloroform och isopropanol i volymförhållandet 9:1) erhölls 530 mg rent, amorft Z'-acetyl-4"-deoxi-4"-nikotínamido-oleandomycin (23,5 % utbyte).

Hela utbytet (530 mg) omrördes över natten vid ZSOC i 25 ml meta- nol, varpå lösningsmedlet avlägsnades i vakuum. Man erhöll på det- ta sätt rubrikföreningen i kvantitativt utbyte i form av ett färg- löst skum.

NMR; ofggêl 8,66 (m, 1H), s,os (m, 1H), 7,39 (m, 1H), 3,41 (S, sa), 2,64 (s,36H).

Exempel60: 4"-deoxi-4"-pikolinamido-oleandomycin. Till en lösning av 2"-acetyl-4"-deoxi-4"-amíno-oleandomycin (6,0 g, 8,2 mmol) och 2-pikolinsyra (1,10 g, 9,0 mmol) i 75 ml metylenklorid, vilken lös- ning hade en temperatur av ZSOC, sattes N,N'-dicyklohexylkarbodi- :mid (1,so g, 9,0 mmoi). efter 1,5 timmars omrörning vid zs°c cun- der vilken tid en kraftig fällning av N,N'-dicyklohexylkarbamid bildades), tillsattes ytterligare Z-pikolinsyra (1,1 g, 9,0 mmol) och N,N'-dicyklohexylkarbodiimid (1,8 g, 9,0 mmol) och blandningen omrördes vid 2500 i ytterligare 1 timme. Reaktionsblandningen filtre- rades därefter genom diatomacéejord. Filtratet omrördes med 100 ml vatten medan pH injusterades på 9,5 med en 1-normal vattenlösning av natriumhydroxid. Den organiska fasen avskildes, tvättades med vatten (2 X 100 ml), torkades över vattenfrítt natriumsulfat och lösningsmedlet avlägsnades i vakuum, varigenom man erhöll rått 2'-acetyl-4"-deoxi-4"-pikolinamido-oleandomycin (10,5 g). Råpro- dukten omrördes vid 25°C hela natten i 150 ml metanol. Lösnings- medlet avlägsnades i vakuum och man erhöll rubríkföreningen i rå 10 15 20 25 447 118 24 form. Genom kromatograferíng på kíseldioxidgel (150 g) och eluering, först med kloroform och senare med kloroform/ísopropanol i volym- förhållandet 9515 erhölls 4,5 g 4"~deoxi-4"-pikolinamido-oleandomy- cin í form av ett färglöst, amorft skum, (69,3%). Av den amorfa produkten kristalliserades 1,5 g i etylacetat, varigenom man er- höll 1,2 g kristallinískt 4"-deoxi-4"-píkolinamido-oleandomycin solvatiserat med en ekvimolar mängd etylacetat, smältpunkt 140- 143°c.

NMR- JTMS CDn 8,13 (m, 4n), 3,44 (s, 3n), 2,30 (s, en), 2,05 (s, SH). 3 Exemgel 61-63: Det i Exempel 59 beskrivna förfarandet upprepades men i stället för Z-pikolinsyra användes för framställning av ne- danstående föreningar lämplig syra i kombination med lämplig 4"- deoxí-4"-amino-makrolidz 61. 2'-acetyl-4"-deoxi-4"-(2-tienyl)karboxamido-oleandomycin i form av ett färglöst, amorft skum, utbyte 65%.

NMR; cfšbgål 7,46 (s, m), 7,39 (s, (n), 6,99 (m, 1n), (s, 3n), 2,25 (sfsn), 2,06 (s, 3n), 62. 4"-deoxi-4"-(2-tíenyl)karboxamido-oleandomycin.

Nmmfšâïâl 7,49 (m, 3n), 7,04 (m, 3n), 3,43 (s, 3n), 2,29 (s, en). 5 ' 63. 4"-deoxí-4"-(3-isoxazolyl)karboxamido-oleandomycin.

NMR; Jšgål 2,27 (s, an), 3,40 (s, 3n), Ala-mönster med nA vid 6,72, HB vid ,37 (JAB = 1Hz, ZH).

Masspektrum: m/e 239, 158. 3,40 10 15 20 25 25 447 118 Exempel 64: 4"-deoxi-4"-fenylacetamido-oleandomycin-fosfat. Till en lösning av 4"-deoxí-4"-fenylacetamido-oleandomycin (6,0 g, 7,5 mmol) i etylacetat sattes fosforsyra (85% HSPO4, 0,79 g, 6,8 mmol) vid 0°C. Fosfatet utföll i form av en krístallinisk massa, avfiltrerades och torkades.

NMR; (S, 6n). 3 Exempel A: 11,2'-diacetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin. Till 4,5 g N-klorsuccinímid, 50 ml bensen och 150 ml toluen i en torr kolv försedd med magnetisk omrörare och kväveinledningsrör, vilken bland- ning kyits 6111 -s°c, sattes 3,36 mi dimetyisuifid. efter omrör- ning vid OOC i 20 minuter kyldes kolvinnehållet till -25°C och be- handlades med 5,0 g 11,2'-diacetyl-oleandomycín i 100 ml toluen.

Kylningen och omrörningen fortsattes i Z timmar, varpå 4,73 ml trietylamin tillsattes. Reaktionsblandningen omrördes vid OOC i 15 minuter och hälldes därefter i 500 ml vatten. Med en 1-normal vattenlösníng av natriumhydroxid injusterades pH på 9,5 och den organiska fasen avskildes, tvättades med vatten och en saltlös- ning och torkades över natriumsulfat. Lösningsmedlet avlägsnades i vakuum och man erhöll 4,9 g av den önskade produkten i form av ett skum.

NMR (60 MHZ) d'š§ål (ppm)= 3,48 cs, 3H), 2,61 tm, za), 2,23 (5, za), 66h 2,03 (S, 6nJ§ På analogt sätt framställdes följande 11,Z'-dialkanoyl-4"- deoxi-4"-oxo-oleandomyciner ur motsvarande 11,2'-dialkanoyl-olean- domyciner: 11,Z'-dipropionyl- 10 15 20 ZS 30 35 40 447 118 % 11-acetyl-2'-propionyl- '- 11-propionyl-2'-acetyl- Exempel B: 11-acetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycín. En lösning av 4,0 g 11,2'~diacetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin i 75 ml metanol omrördes vid rumstemperaturen hela natten. Reaktionsblandníngen koncentrerades under reducerat tryck, varigenom man erhöll produk- ten i form av ett skum. En díetyleterlösning av índunstningsåter- stoden gav vid behandling med hexan 2,6 g av produkten i form av en vit, fast substans, med smältpunkt 112-117°C.

NMR (eo MHz) (s, 6H) och 2,01 (S, SH).

På ovan angivet sätt framställdes 11-propionyl-4"-deoxi-4"- oleandomycin ur 11,2'-dipropionyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin.

Exempel C: 2'-acetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin. Dimetylsulfid (0,337 ml) sattes till en grumlig lösning av 467 mg N-k1orsuccin- imid i 20 ml toluen och 6 ml bensen, vilken lösning kylts till -SOC och hölls under kväveatmosfär. Efter omrörning vid OOC i 20 minuter kyldes blandningen till -ZSOC och 1,46 g 2'-acetyl-oleando- mycin och 15 ml toluen”tillsattes. Omrörningen fortsattes i 2 tim- mar vid -ZOOC, varpå 0,46 ml trietylamín tillsattes. Reaktionsbland- ningen hölls vid -ZOOC i ytterligare 5 minuter, varpå dess tempe- ratur fick stiga till OOC. Blandníngen hälldes under omrörning i 50 m1 vatten och 50 ml etylacetat. Den vattenhaltiga blandningens pH injusterades på 9,5 genom tillsats av en vattenlösning av nat- riumhydroxid. Den organiska fasen avskildes därefter, torkades över natríumsulfat och indunstades i vakuum till ett vitt skum (1,5 g).

Genom triturering med dietyleter erhölls 864 mg råprodukt, som om- kristalliserades två gånger i metylenkloríd-dietyleter, varigenom man erhöll 212 mg av den rena produkten med en smältpunkt av 183-1ss,s°c.

Analys - %C %H %N beräknat för C37H61O13N: 61,1 8,5 1,9 funnet: 60,9 8,4 1,9 NMR (so MH2) d"TMS (ppmyz 5,60 (m, 1H), 3,50 cs, su), 2,73 cncl (m, zu), 2,23 (S, en), oçñ z,o3 (S, sa).

På analogt sätt framställdes Z'-propionyl-4"-deoxí-4"-oxo- oleandomycin ur 2'-propionyl-oleandomycin. 10 15 20 25 30 35 40 ”- 447 118 Exempel D: 4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin. En lösning av 1,0 g 2'- acetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin i 20 ml metanol omrördes vid rumstemperaturen hela natten. Lösningen koncentrerades i vakuum och man erhöll den önskade produkten i form av ett vitt skum (937 mg).

NMR (so MHz) Jgšêl (ppmm 5,60 (m, m), 3,50 (s, an), 2,85 (m, zH), och 2,26 (SÉ en).

På analogt sätt hydrolyserades 2'-propionyl-4"-deoxi-4"- oxo-oleandomycin till 4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin.

Exempel E: 11-acetyl-4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin. Till en sus- pension av 10% palladium-på-träkol (10 g) i metanol (100 ml) sat- tes ammoniumacetat (21,2 g) och den så erhållna uppslamningen be- handlades med en lösning av 11-acetyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin (20 g) i 100 ml av samma lösningsmedel. Suspensionen skakades vid rumstemperaturen i en väteatmosfär med ett begynnelsetryck av 345 kPa. Efter 1,5 timmar avfiltrerades katalysatorn och filtratet sattes under omrörning till en blandning av vatten (1200 ml) och kloroform (500 ml). Blandningens pH injusterades från 6,4 till 4,5 och den organiska fasen avskíldes. Den vattenhaltiga fasen extra- herades med kloroform (500 ml) och behandlades därefter med etyl- acetat (500 ml) och pH injusterades på 9,5 med 1N-NaOH. Etylace- tatfasen avskildes och den vattenhaltiga fasen extraherades åter- igen med etylacetat. Etylacetatextrakten kombinerades, torkades över natriumsulfat och índunstades till ett gult skum (18,6 g), som omkristalliserades i diisopropyleter, varigenom man erhöll 6,85 g renad produkt med en smältpunkt av 157,5-16000. Med hjälp av NMR-data och tunnskiktskromatografering (TLC) bevisades pro- dukten vara en enkel epimer i ställningen C-4". Det använda TLC- systemet var CHCl3:CH30H:NH40H (9:2:0,1) på kiseldioxidgelplattor.

Som framkallningssystem användes vanillín;HšPO4:C2H5OH (5 g:50 ml: 100 ml), som sprutades på de till ca 80-100 C upphettade_TLC-plat- torna. Den som huvudmängd erhållna epimeren var mindre polär än den i mindre mängd erhållna epimeren.

NMR ( J, CDCl3): 3,41 (3H)s, 2,70 (2H)m, 2,36 (6H)s, och 2,10 (3H)s.

Den andra epimeren, som förelåg i det råa skummet i en mängd av 20-25% erhölls genom småningom skeende koncentration och filtre- ring av moderlutarna.

På analogt sätt framställdes följande mono-alkanoyl- och di- 10 15 20 25 30 35 40 447 118 28 alkanoylestrar av 4"-deoxi-4"-amino-oleandomycín (båda C-4"-Épi- mererna) ur lämpliga mono-alkanoyl och di-alkanoyl-4"-deoxi-4"- oxo-oleandomyciner. När en 2'-ester framställdes, användes iso- propanol som lösningsmedel: 11,2'-díacetyl- 2'-acetyl 2'-propíony1- 11,2'-dipropionyl- 11-propíonyl- 11-acetyl-21propionyl- 11-propionyl-2¿acetyl- Exempel F: 4"-deoxi-4"-amino-oleandomycin. En lösning av Z'-ace- tyl-4"-deoxi-4"-oxo-oleandomycin (20 g) i metanol (125 ml) omrör- des vid rumstemperaturen hela natten och behandlades därefter med ammoniumacetat (21,2 g). Den så erhållna lösningen kyldes i ett is- bad och behandlades med natríumcyanoborhydrid (1,26 g). Därefter avlägsnades kylbadet och reaktionsblandningen omrördes vid rums- temperaturen i 2 timmar, varpå den hälldes i vatten (600 ml) och dietyleter (600 ml) och pH injusterades från 8,3 till 7,5. Eter- fasen avskildes och den vattenhaltiga fasens pH injusterades på 8,25. Dietyleter- och etylacetatextrakten framställda vid detta pH ställdes också undan och pH höjdes till 9,9. Dietyleter- och etylacetatextrakten vid detta pH kombinerades, tvättades först en gång med vatten och därefter med en mättad saltlösning och tor- kades över natriumsulfat. De senare extrakten som framställts vid pH 9,9 koncentrerades till ett skum och kromatograferades på ki- seldioxidgel (160 g) med användning av kloroform som lösningsmedel och första elueringsmedel. Efter 11 fraktioner om vardera 12 ml ändrades elueringsmedlet till 5% metanol-95% kloroform. Vid frak- tionen 370 ändrades elueringsmedlet till 10% metanol-90% kloroform och vid fraktionen 440 till 15% metanol-85% kloroform. Fraktioner- na 85-260 kombinerades och indunstades i vakuum till torrhet, vari- genom man erhöll 2,44 g av den önskade produkten.

NMR cd", cnclšh 5,56 (m, nn, 3,36 (s, sa), 2,9 (m, za), och 2,26 (s, @H). 10 15 20 25 29 447 118 Exempel n Allmän metod - alfa-alkoxi-fenylättiksyror. Lämplig bensen med for- meln XYC6H4, vattenfri kloral i molförhållandet 4,24:1,00 och blandningen om- :fördes och kyiaes 1-.111 o°c. Aluminiummoria (0,3: man sattes droppvis till blandningen under kraftig omröring, varvid tempera- turen hölls mellan 0 och 5°C. När aluminiumkloridtillsatsen slut- förts, fick reaktionsblandningens temperatur stiga till 15-18°C.

Blandningen omrördes i 1 timme och kyldes därefter till 0-2°C. Den omrördes vid denna temperatur ytterligare 60 timmar och hälldes Fenyl-triklormetylkarbinol- där X och Y har ovan angivna betydelser, sattes till därefter i en lika stor volym isvatten. derivatet extraherades med n-butylacetat eller n-butanol ( 2 x 250 ml). De kombinerade extrakten tvättades med vatten (3 x 100 ml) och torkades därefter över natriumsulfat. Man avlägsnade lösnings- medlet och erhöll karbinolen, som om så önskas renas genom vakuum- destillation.

Karbinolen löstes i en alkohol svarande mot den alkoxigrupp, som önskas och lösningen sattes därefter droppvis till en under återílöde kokande lösning av samma alkohol innehållande minst 3 ekvivalenter KOH (räknat på karbinolen). Sedan tillsatsen slutförts kokades reaktionsblandningen i 3 timmar, varpå den indunstades till torrhet. Aterstoden upptogs i vatten, pH injusterades på 3,5 och vattenblandningen extraherades med lämpligt lösningsmedel (n-butyl- acetat, eter, metylenklorid). Extraktet tvättades först med salt- lösning och därefter med vatten, varpå det torkades (Na2S04) och indunstades till torrhet, varigenom man erhöll produkten.

IN VITRO-DATA (MIKÄpg/ml) - I följande tabeller anges MIK-data för representativa föreningar enligt uppfinningen med avseende på 5 olika mikroorganismer.

I Pröd. 447 118 30 In vitro data (MIK pg/ml) Staph. Staph. Strap. Pasturella Neisseria enligt aureus aureus pyogenes multocida sicca exempel 011005 01140011 020203 5911001 660000 1 30.10 330.10 30.10 0.70 0.78 2 30.10 30.10 30.10 3.12 0.20 3 0.20 1.56 30.10 _ 1.56 0.20 4 0.76 1.56 30.10 6.25 0.39 5 30.10 0.20 30.10 25 0.39 ¶ 6' ' 0.39 0.70 0.20 12.5 0.70 7 0.73 0.39 30.10 6.25 0.78 s 6.25 6.25 0.20 6.25 3.12 9 0.70 0.39 0.20 12.5 1.56 10 0.70 0.39 30.10 6.25 1.56 11 0.79 0.73 0.39 12 0.20 0.20 ' 30.10' 0.39 0.39 13 0.78 0.39 30.10 1.56 0.70 11. 30.10 0.39 30.10 6.25 0.20 15 1.56 0.70 0.20 6.25 0.70 31 447 118 Prod . en- Staph. Staph. Strcp. Pasturclla Neisseria liflt GX" aureus aureus pyogenes multocida sicca effiPel OIAOOS OIMOOR 020203 5911001 660000 16 1.56 1.56 50.10 6.25 1.56 17 12.5 12.5 0.78 25 12.5 18 0.39 0.20 _'<_0.10 3.12 - 19 1.56 1.56 0.78 1.56 1.56 D(-) form 20 0.78 0.39 0.39 3.12 1.56 21 0.39 0.39 0.1 3.1 0.39 22 0.78 0.78 0.39 1.56 0.39 23 1.56 1.56 0.39 .3.1 0.39 21+ 6.25 3.1 3.1 25 12.5 25 6.25 12.5 0.39 12.5 3.12 26 0.39 0.78 0.20 3.1 0.39 27 3.12 6.25 0.78 25 >50 28 6.25 6.25 3.12 29 3.12 6.25 1.56 25 >50 30 6.25 6.25 1.56 12.5 6.25 31 1.56 6.25 1.56 25 12.5 32 3.1 3.1 1.56 25 6.25 447 1 18 32 Produkt Staph. Staph. Strap. Pasturclla Nei-šería | enligt aureus aureus pyøgcnes multocidn sicca E exempel 01AO05 OIMOOR 02C203 59A00l 66CO00 I 33 13.78 1.56 0.39 25 25 34 1.56 3.1 0.78 6.25 12.5 35 3.1 6.25 0.78 _ 25 25 36 1.56 3.1 1.56 _ 25 25 37 0.39 0.78 0.025 12.5 12.5 38 3.12 12.5 1.56 >5O 25 39 1.56 - 1.56 >5O 12.5 40 0.78 - 0.39 5 25 6-25 41 1.56 - ° 0.78 0.78 50 42 3:12 - 1.56 1.56 12.5 44 0.39 0.78 0.10 25 25 46 3.12 - 0.78 50 12.5 33 447 118 Prc-dukt Staph. Staph. Strap. Pasturella Neisseria enligt aureus aureus pyogenes multocida sicca exšmpel 01A005 01A4 00k 02C203 59A001 66000 47 3.12 - 5.12 1.56 12.5 so 48 0.39 0. 78 0.05 12.5 >50 50 6.25 - 0.78 50 12.5 51 6.25 12.5 1.56 . 50 50 52 12.5 - 6.25 50 25 53 0.78 0.78 0.78 6.25 6.25 54 3.1 _ 0.78 0.20 6.25 3.1 56 3.12 3.12 0. 78 '12.5 12.5 57 0.78 1.56 0.78 12.5 6.25 58 1.56 6.25 0.78 50 25 59 3.12 6.25 1.56 50 25 so 1.56 6.25 0.78 '50 25 sz 1.56 3.12 ' >5o 25 o.o5 63 0.39 0.78 0.006 12.5 12.5 gåâïgdo- 0.39 - 0-2 50 25

Claims (3)

10 15 20 25 30 35 34 447 118 Patentkrav

1. Föreningar med formeln I, där var och en av R1 och R2 representerar väte eller alkanoyl med 2-3 kolatomer; Z är (6) -(CH2)m-C(CH3)3, (b) -CH(R5) Y © (d) -(CH2)m-heterocyklyl; m är 0 eller 1; Rs är väte, klor, hydroxyl, amino eller alkoxi med 1-4 kolatomer; Y är väte, klor, brom, fluor, alkyl med 1-4 kolatomer, alkoxi med 1-4 kolatomer, trifluormetyl eller karbalkoxi med 2-5 kol- atomer; heterocyklyl är tienyl, pyrazínyl, pyridyl, furyl, imid- azolyl, tiazolyl, isotiazolyl, oxazolyl, isoxazolyl, pyrrolyl, tiadiazolyl eller monometylderivat av nämnda heterocyklyler; och farmaceutiskt godtagbara syraadditionssalter därav. (CH2)m-hetero- eller

2. Föreningar enligt krav 1, varvid Z är - cyklyl, k ä n n e t e c k n a d e av att heterocyklyl är 2-pyr- azinyl, varvid föreningen är 4"-deoxi-4"-(2-pyraziny1)karboxa- mido-oleandomycin. 447118

3. Föreningar enligt krav 1. k ä n n e t e c k n a d e av att i formel I R1 är acetyl, Rz är väte och Z är t-butyl.