SA520412451B1 - .تركيبات لتعديل التعبير الوراثي عن c9orf72 - Google Patents
.تركيبات لتعديل التعبير الوراثي عن c9orf72 Download PDFInfo
- Publication number
- SA520412451B1 SA520412451B1 SA520412451A SA520412451A SA520412451B1 SA 520412451 B1 SA520412451 B1 SA 520412451B1 SA 520412451 A SA520412451 A SA 520412451A SA 520412451 A SA520412451 A SA 520412451A SA 520412451 B1 SA520412451 B1 SA 520412451B1
- Authority
- SA
- Saudi Arabia
- Prior art keywords
- certain embodiments
- antisense
- mrna
- modified
- nucleosides
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 23
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 title abstract description 56
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 claims description 185
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 172
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 claims description 134
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 claims description 98
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 61
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 55
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 40
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 33
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical group P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 claims description 28
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 claims description 28
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 26
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 23
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 claims description 19
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 14
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 claims description 12
- 150000004713 phosphodiesters Chemical class 0.000 claims description 11
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 9
- 238000013461 design Methods 0.000 claims description 6
- 239000005549 deoxyribonucleoside Substances 0.000 claims description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims 1
- BITYAPCSNKJESK-UHFFFAOYSA-N potassiosodium Chemical class [Na].[K] BITYAPCSNKJESK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000011800 void material Substances 0.000 claims 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 abstract description 133
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 70
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 46
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 29
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 26
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 abstract description 17
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 abstract description 17
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 109
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 98
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 87
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 87
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 76
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 76
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 73
- 241000764238 Isis Species 0.000 description 68
- ABEXEQSGABRUHS-UHFFFAOYSA-N 16-methylheptadecyl 16-methylheptadecanoate Chemical compound CC(C)CCCCCCCCCCCCCCCOC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC(C)C ABEXEQSGABRUHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 66
- 238000005417 image-selected in vivo spectroscopy Methods 0.000 description 66
- 238000012739 integrated shape imaging system Methods 0.000 description 66
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 64
- 108020000948 Antisense Oligonucleotides Proteins 0.000 description 61
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 60
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 51
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 46
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 43
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 41
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 40
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 38
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 38
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 37
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 36
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Chemical class Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 33
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 32
- 206010002026 amyotrophic lateral sclerosis Diseases 0.000 description 30
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 28
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 28
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 28
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 28
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 27
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 27
- -1 ccarbon Substances 0.000 description 26
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 24
- 102000007999 Nuclear Proteins Human genes 0.000 description 23
- 108010089610 Nuclear Proteins Proteins 0.000 description 23
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 22
- 125000002619 bicyclic group Chemical group 0.000 description 21
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 19
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 19
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 18
- 239000000047 product Substances 0.000 description 18
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 17
- 201000011240 Frontotemporal dementia Diseases 0.000 description 16
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 16
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 15
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 15
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 15
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 14
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 13
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 13
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 13
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 12
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 12
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 12
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 12
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 12
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 11
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 11
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 11
- 125000001570 methylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])[*:2] 0.000 description 11
- LRSASMSXMSNRBT-UHFFFAOYSA-N 5-methylcytosine Chemical compound CC1=CNC(=O)N=C1N LRSASMSXMSNRBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 10
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 10
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 10
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 9
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 9
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 9
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 9
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 9
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical compound CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 8
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 8
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 8
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 235000021092 sugar substitutes Nutrition 0.000 description 8
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 8
- 108060002716 Exonuclease Proteins 0.000 description 7
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 7
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 description 7
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 7
- 102000013165 exonuclease Human genes 0.000 description 7
- 230000006870 function Effects 0.000 description 7
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 7
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 7
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 7
- 238000007914 intraventricular administration Methods 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 125000004573 morpholin-4-yl group Chemical group N1(CCOCC1)* 0.000 description 7
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 7
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 7
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 7
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 102000053171 Glial Fibrillary Acidic Human genes 0.000 description 6
- 101710193519 Glial fibrillary acidic protein Proteins 0.000 description 6
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 6
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 6
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 6
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 150000002243 furanoses Chemical class 0.000 description 6
- 210000005046 glial fibrillary acidic protein Anatomy 0.000 description 6
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 6
- 229940127073 nucleoside analogue Drugs 0.000 description 6
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 6
- 238000009877 rendering Methods 0.000 description 6
- 238000011160 research Methods 0.000 description 6
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 6
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 5
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 5
- 102100031780 Endonuclease Human genes 0.000 description 5
- 108700024394 Exon Proteins 0.000 description 5
- 240000008415 Lactuca sativa Species 0.000 description 5
- 108010047956 Nucleosomes Proteins 0.000 description 5
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 5
- 125000004103 aminoalkyl group Chemical group 0.000 description 5
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 5
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 5
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 5
- 230000004992 fission Effects 0.000 description 5
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 5
- 125000003843 furanosyl group Chemical group 0.000 description 5
- 210000001623 nucleosome Anatomy 0.000 description 5
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 5
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 5
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 5
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 5
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 5
- 235000012045 salad Nutrition 0.000 description 5
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 5
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 229940113082 thymine Drugs 0.000 description 5
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 5
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000011990 Corticobasal Degeneration Diseases 0.000 description 4
- 108010067035 Pancrelipase Proteins 0.000 description 4
- 206010034010 Parkinsonism Diseases 0.000 description 4
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 4
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 4
- DHXVGJBLRPWPCS-UHFFFAOYSA-N Tetrahydropyran Chemical compound C1CCOCC1 DHXVGJBLRPWPCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 125000002723 alicyclic group Chemical group 0.000 description 4
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 230000004700 cellular uptake Effects 0.000 description 4
- 239000011651 chromium Substances 0.000 description 4
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 4
- 229940092125 creon Drugs 0.000 description 4
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 4
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 4
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 4
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 4
- 125000002743 phosphorus functional group Chemical group 0.000 description 4
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 4
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 4
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 4
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 239000002342 ribonucleoside Substances 0.000 description 4
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 125000004169 (C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 description 3
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000008733 Citrus aurantifolia Nutrition 0.000 description 3
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical group C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 3
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 3
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N Thiophosphoric acid Chemical class OP(O)(S)=O RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000011941 Tilia x europaea Nutrition 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 3
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 3
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 3
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 3
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 3
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 3
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 3
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 3
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 3
- 102000054766 genetic haplotypes Human genes 0.000 description 3
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 239000004571 lime Substances 0.000 description 3
- 125000005699 methyleneoxy group Chemical group [H]C([H])([*:1])O[*:2] 0.000 description 3
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 3
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 3
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 3
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- HCUOEKSZWPGJIM-YBRHCDHNSA-N (e,2e)-2-hydroxyimino-6-methoxy-4-methyl-5-nitrohex-3-enamide Chemical compound COCC([N+]([O-])=O)\C(C)=C\C(=N/O)\C(N)=O HCUOEKSZWPGJIM-YBRHCDHNSA-N 0.000 description 2
- IVNJKQPHHPMONX-WCCKRBBISA-N 2-aminoacetic acid;(2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid Chemical compound NCC(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N IVNJKQPHHPMONX-WCCKRBBISA-N 0.000 description 2
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 description 2
- 108020005544 Antisense RNA Proteins 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KPYSYYIEGFHWSV-UHFFFAOYSA-N Baclofen Chemical compound OC(=O)CC(CN)C1=CC=C(Cl)C=C1 KPYSYYIEGFHWSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 2
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- 125000000824 D-ribofuranosyl group Chemical group [H]OC([H])([H])[C@@]1([H])OC([H])(*)[C@]([H])(O[H])[C@]1([H])O[H] 0.000 description 2
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 2
- 235000017274 Diospyros sandwicensis Nutrition 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 235000008247 Echinochloa frumentacea Nutrition 0.000 description 2
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 208000034826 Genetic Predisposition to Disease Diseases 0.000 description 2
- GLZPCOQZEFWAFX-UHFFFAOYSA-N Geraniol Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCO GLZPCOQZEFWAFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101001088738 Homo sapiens Probable ribonuclease 11 Proteins 0.000 description 2
- 241000282838 Lama Species 0.000 description 2
- 240000000233 Melia azedarach Species 0.000 description 2
- 101001088737 Mus musculus Putative inactive ribonuclease 11 Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 240000004072 Panicum sumatrense Species 0.000 description 2
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 2
- 102100033987 Probable ribonuclease 11 Human genes 0.000 description 2
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 2
- FTALBRSUTCGOEG-UHFFFAOYSA-N Riluzole Chemical compound C1=C(OC(F)(F)F)C=C2SC(N)=NC2=C1 FTALBRSUTCGOEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 2
- HMNZFMSWFCAGGW-XPWSMXQVSA-N [3-[hydroxy(2-hydroxyethoxy)phosphoryl]oxy-2-[(e)-octadec-9-enoyl]oxypropyl] (e)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C\CCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCCO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\CCCCCCCC HMNZFMSWFCAGGW-XPWSMXQVSA-N 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N alprazolam Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N2C(C)=NN=C2CN=C1C1=CC=CC=C1 VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003050 axon Anatomy 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 2
- 108091092328 cellular RNA Proteins 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 208000025434 cerebellar degeneration Diseases 0.000 description 2
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical group C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 2
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 2
- 125000000596 cyclohexenyl group Chemical group C1(=CCCCC1)* 0.000 description 2
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 2
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 2
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 2
- 239000011229 interlayer Substances 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 238000005304 joining Methods 0.000 description 2
- 229940063721 lioresal Drugs 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 2
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 208000031237 olivopontocerebellar atrophy Diseases 0.000 description 2
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 2
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 2
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 2
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- GOLXNESZZPUPJE-UHFFFAOYSA-N spiromesifen Chemical compound CC1=CC(C)=CC(C)=C1C(C(O1)=O)=C(OC(=O)CC(C)(C)C)C11CCCC1 GOLXNESZZPUPJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000547 substituted alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 2
- 125000004962 sulfoxyl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 2
- 125000001412 tetrahydropyranyl group Chemical group 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000012250 transgenic expression Methods 0.000 description 2
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 2
- 238000011277 treatment modality Methods 0.000 description 2
- 125000000876 trifluoromethoxy group Chemical group FC(F)(F)O* 0.000 description 2
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 2
- 125000004400 (C1-C12) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- WRNGPIFYDWVAPZ-UHFFFAOYSA-N 2-(4-chloro-2-methylphenoxy)ethanol Chemical compound CC1=CC(Cl)=CC=C1OCCO WRNGPIFYDWVAPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4,6-dichloropyrimidine-5-carbaldehyde Chemical group NC1=NC(Cl)=C(C=O)C(Cl)=N1 GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASJSAQIRZKANQN-CRCLSJGQSA-N 2-deoxy-D-ribose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)CC=O ASJSAQIRZKANQN-CRCLSJGQSA-N 0.000 description 1
- OALHHIHQOFIMEF-UHFFFAOYSA-N 3',6'-dihydroxy-2',4',5',7'-tetraiodo-3h-spiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-3-one Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(I)=C(O)C(I)=C1OC1=C(I)C(O)=C(I)C=C21 OALHHIHQOFIMEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GICIECWTEWJCRE-UHFFFAOYSA-N 3,4,4,7-tetramethyl-2,3-dihydro-1h-naphthalene Chemical compound CC1=CC=C2C(C)(C)C(C)CCC2=C1 GICIECWTEWJCRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DEXFNLNNUZKHNO-UHFFFAOYSA-N 6-[3-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperidin-1-yl]-3-oxopropyl]-3H-1,3-benzoxazol-2-one Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C1CCN(CC1)C(CCC1=CC2=C(NC(O2)=O)C=C1)=O DEXFNLNNUZKHNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000238876 Acari Species 0.000 description 1
- ORILYTVJVMAKLC-UHFFFAOYSA-N Adamantane Natural products C1C(C2)CC3CC1CC2C3 ORILYTVJVMAKLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001093575 Alma Species 0.000 description 1
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 description 1
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 description 1
- 241000189662 Calla Species 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100036375 Carbonic anhydrase-related protein Human genes 0.000 description 1
- 102000011727 Caspases Human genes 0.000 description 1
- 108010076667 Caspases Proteins 0.000 description 1
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000070918 Cima Species 0.000 description 1
- 108091033380 Coding strand Proteins 0.000 description 1
- 206010010264 Condition aggravated Diseases 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical group OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 1
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 1
- 241001633942 Dais Species 0.000 description 1
- 101100447432 Danio rerio gapdh-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010011878 Deafness Diseases 0.000 description 1
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 1
- 206010013642 Drooling Diseases 0.000 description 1
- 102000004533 Endonucleases Human genes 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical group C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 101150057182 GFAP gene Proteins 0.000 description 1
- 101150112014 Gapdh gene Proteins 0.000 description 1
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 206010019851 Hepatotoxicity Diseases 0.000 description 1
- 101000714515 Homo sapiens Carbonic anhydrase-related protein Proteins 0.000 description 1
- 101000908713 Homo sapiens Dihydrofolate reductase Proteins 0.000 description 1
- 101000891092 Homo sapiens TAR DNA-binding protein 43 Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010065042 Immune reconstitution inflammatory syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 1
- 241000282553 Macaca Species 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241000252067 Megalops atlanticus Species 0.000 description 1
- 108700011259 MicroRNAs Proteins 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 208000021642 Muscular disease Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- GLZPCOQZEFWAFX-JXMROGBWSA-N Nerol Natural products CC(C)=CCC\C(C)=C\CO GLZPCOQZEFWAFX-JXMROGBWSA-N 0.000 description 1
- 208000005736 Nervous System Malformations Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000282579 Pan Species 0.000 description 1
- 208000027089 Parkinsonian disease Diseases 0.000 description 1
- 108091093037 Peptide nucleic acid Proteins 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 101710130181 Protochlorophyllide reductase A, chloroplastic Proteins 0.000 description 1
- 108091030071 RNAI Proteins 0.000 description 1
- 108091081062 Repeated sequence (DNA) Proteins 0.000 description 1
- 208000004756 Respiratory Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 206010038743 Restlessness Diseases 0.000 description 1
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 208000008630 Sialorrhea Diseases 0.000 description 1
- 108091027967 Small hairpin RNA Proteins 0.000 description 1
- 235000009233 Stachytarpheta cayennensis Nutrition 0.000 description 1
- 101100054666 Streptomyces halstedii sch3 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008221 Superoxide Dismutase-1 Human genes 0.000 description 1
- 108010021188 Superoxide Dismutase-1 Proteins 0.000 description 1
- 102100040347 TAR DNA-binding protein 43 Human genes 0.000 description 1
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 1
- 230000007495 abnormal renal function Effects 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 150000001251 acridines Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 125000002877 alkyl aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000852 azido group Chemical group *N=[N+]=[N-] 0.000 description 1
- 238000002869 basic local alignment search tool Methods 0.000 description 1
- 238000009227 behaviour therapy Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 101150006308 botA gene Proteins 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 210000001638 cerebellum Anatomy 0.000 description 1
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 1
- 210000004289 cerebral ventricle Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004927 clay Substances 0.000 description 1
- 230000009194 climbing Effects 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 125000000332 coumarinyl group Chemical class O1C(=O)C(=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 238000009402 cross-breeding Methods 0.000 description 1
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000004980 cyclopropylene group Chemical group 0.000 description 1
- 208000031513 cyst Diseases 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- FASDKYOPVNHBLU-SSDOTTSWSA-N dexpramipexole Chemical compound C1[C@H](NCCC)CCC2=C1SC(N)=N2 FASDKYOPVNHBLU-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- 229950004920 dexpramipexole Drugs 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 125000001301 ethoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000012854 evaluation process Methods 0.000 description 1
- 229940014425 exodus Drugs 0.000 description 1
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000002224 folic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 150000003278 haem Chemical class 0.000 description 1
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000007686 hepatotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000304 hepatotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 1
- BHEPBYXIRTUNPN-UHFFFAOYSA-N hydridophosphorus(.) (triplet) Chemical class [PH] BHEPBYXIRTUNPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003365 immunocytochemistry Methods 0.000 description 1
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 1
- 230000005917 in vivo anti-tumor Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 1
- 230000002687 intercalation Effects 0.000 description 1
- 238000009830 intercalation Methods 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 238000006317 isomerization reaction Methods 0.000 description 1
- 101150011498 lad gene Proteins 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical group 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000003137 locomotive effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- CAAULPUQFIIOTL-UHFFFAOYSA-N methyl dihydrogen phosphate Chemical class COP(O)(O)=O CAAULPUQFIIOTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 description 1
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 1
- 230000000116 mitigating effect Effects 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 125000002950 monocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001002 morphogenetic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 238000006384 oligomerization reaction Methods 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- HFHZKZSRXITVMK-UHFFFAOYSA-N oxyphenbutazone Chemical compound O=C1C(CCCC)C(=O)N(C=2C=CC=CC=2)N1C1=CC=C(O)C=C1 HFHZKZSRXITVMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002831 pharmacologic agent Substances 0.000 description 1
- 150000005053 phenanthridines Chemical class 0.000 description 1
- 150000002988 phenazines Chemical class 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000008039 phosphoramides Chemical class 0.000 description 1
- 125000004437 phosphorous atom Chemical group 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 230000006461 physiological response Effects 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000003762 quantitative reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 201000004193 respiratory failure Diseases 0.000 description 1
- 230000004202 respiratory function Effects 0.000 description 1
- 230000002207 retinal effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 229940072169 rilutek Drugs 0.000 description 1
- 229960004181 riluzole Drugs 0.000 description 1
- 125000006413 ring segment Chemical group 0.000 description 1
- 101150067879 sas-6 gene Proteins 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003378 silver Chemical group 0.000 description 1
- 238000004513 sizing Methods 0.000 description 1
- 239000010454 slate Substances 0.000 description 1
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 210000000225 synapse Anatomy 0.000 description 1
- 238000011191 terminal modification Methods 0.000 description 1
- 125000004001 thioalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 1
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 1
- 238000009966 trimming Methods 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
- A61P21/02—Muscle relaxants, e.g. for tetanus or cramps
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
- A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/22—Anxiolytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
- C07H21/04—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with deoxyribosyl as saccharide radical
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/11—Antisense
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
- C12N2310/315—Phosphorothioates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
- C12N2310/321—2'-O-R Modification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
- C12N2310/322—2'-R Modification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
- C12N2310/323—Chemical structure of the sugar modified ring structure
- C12N2310/3231—Chemical structure of the sugar modified ring structure having an additional ring, e.g. LNA, ENA
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/33—Chemical structure of the base
- C12N2310/334—Modified C
- C12N2310/3341—5-Methylcytosine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/34—Spatial arrangement of the modifications
- C12N2310/341—Gapmers, i.e. of the type ===---===
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/34—Spatial arrangement of the modifications
- C12N2310/346—Spatial arrangement of the modifications having a combination of backbone and sugar modifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/35—Nature of the modification
- C12N2310/352—Nature of the modification linked to the nucleic acid via a carbon atom
- C12N2310/3525—MOE, methoxyethoxy
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2320/00—Applications; Uses
- C12N2320/30—Special therapeutic applications
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Neurology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Psychology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
يتعلق الاختراع الحالي بالكشف عن تركيبات وطرق لتقليل التعبير الوراثي عن C9ORF72 mRNA وبروتين في حيوان. تكون هذه الطرق مفيدة لعلاج، منع، تحسين، أو إبطاء تفاقم أمراض التنكس العصبي neurodegenerative diseases في فرد يكون في حاجة لذلك.
Description
تركيبات لتعديل التعبير الوراشي عن 09011772 COMPOSITIONS FOR MODULATING C90RF72 EXPRESSION الوصف الكامل
خلفية الاختراع
يتم إيداع الطلب الحالي مع قائمة متواليات بتنسيق إلكتروني. يتم توفير قائمة المتواليات CALS
بعنوان BIOLO269WOSEQ_ST25. txt تم إنشاؤه بتاريخ 15 أبريل» 2016؛ jug حجمه
4 كيلو بايت. يتم هنا تضمين المعلومات بالتنسيق الإلكتروني لقائمة المتواليات كمرجع بأكملها.
يتم توفير تركيبات وطرق لتعديل التعبير الوراثي عن mRNA 0908772 وبروتين في الخلايا
والحيوانات. تكون هذه التركيبات والطرق مفيدة لعلاج» منع؛ تحسين؛ أو إبطاء تفاقم أمراض
التنكس العصبي cneurodegenerative diseases بما في ذلك التصلب الجانبي الضموري frontotemporal dementia الخرف الجبهي الصدغي ((ALS) amyotrophic lateral sclerosis
«(CBD) corticobasal degeneration syndrome متلازمة التنكس القاعدي القشري «(FTD) والتنكس الزيتوني ¢ atypical Parkinsonian syndromed haa المتلازمة الباركتسونية 0
-(OPCD) olivopontocerebellar degeneration الجسري المخيخي
يعتبر التصلب الجانبي الضموري (ALS) مرض تنكس عصبي مميت يتميز إكلينيكيًا بواسطة شلل
متفاقم يؤدي إلى الموت من جراء فشل تنفسي؛ نمطيًا خلال من عامين إلى ثلاثة أعوام من بدء
ظهور الأعراض (-1688 ,344 ,2001 Rowland and Shneider, N.
Engl.
J.
Med., 5 1700). يعتبر ALS هو مرض التنكس العصبي الذي يأتي في المركز الثالث بين الأمراض
الأكتر شيوعًا في دول العالم «(Hirtz et al., Neurology, 2007, 68, 326-337) all ولا
يوجد حاليًا علاجات نافعة له. تكون تقريبًا 710 من الحالات عائلية بطبيعتهاء بينما يتم تصنيف
الجزء الأكبر من المرضى الذين تم تشخيصهم بالمرض باعتبارهم أفراد متفرقون حيث إنه يبدو وأنه
يحدث على نحو عشوائي بين هذا التعداد (-533 ,70 ,2008 Chio et al., Neurology, 0 537). هناك إدراك متزايد؛ بالاعتماد على البيانات الإكلينيكية؛ خاصة بعلم الوراثة؛ وخاصة
بالويائيات؛ أن ALS والخرف الجبهي الصدغي (FTD) يمثلا تسلسلاً متداخلاً من المرض؛ يتميز
من حيث التسبب في المرض بواسطة وجود عناصر مدخلة موجبة ل 1100-43 خلال الجهاز
العصبي المركزي ¢J.
Clin.
Neurosci, 2009, 16, 1131-1135 «Hodges Lillo) .(Neumann et al., Science, 2006, 314, 130-133 حتى تاريخه؛ تم اكتشاف عدد من الجينات باعتبارها مسببة ل ALS الوراثي التقليدي؛ على سبيل المثال Johnson et al., Neuron, 2010, 68, ( VCP 00117 «FUS (TARDBP «SOD1 Maruyama et ‘Kwiatkowski et al., Science, 2009, 323, 1205-1208 ¢857-864 5 ¢Rosen et al., Nature, 1993, 362, 59-62 ¢al., Nature, 2010, 465, 223-226 Vance et al., Brain, 2009, ¢Sreedharan et al., Science, 2008, 319, 1668-1672 868-876 ,129( مؤخرًاء لقد أشار تحليل الرابط الخاص بأقارب يعانون من العديد من حالات (ALS 710 و15-770م أنه جد موضع مهم للمرض على الذراع القصير للكروموسوم 9 Morita et ¢Boxer et al., J.
Neurol.
Neurosurg.
Psychiatry, 2011, 82, 196-203) 0 Pearson et al.
J.
Nerol., 2011, 258, 647- ¢al., Neurology, 2006, 66, 839-844 (Vance et al., Brain, 2006, 129, 8368-876 655 تعتبر الطفرة في (pall 09011772 هي السبب الجيني الأكثر شيوعًا ل .FTD 5 ALS تكون الطفرة التي تسبب ALS=FTD هي تمدد كبير لتكرار Lua نوكليوتيد (GGGGCC) hexanucleotide في الإنترون الأول الخاص بالجين Delesus—Hernandez et ¢Renton et al., Neuron, 2011, 72, 257-268) COORF72 5 Neuron, 2011, 72, 245-256 ,.له). يوجد نمط فرداني «use haplotype يغطي الجين 60/2 في غالبية الحالات المرتبطة بهذه المنطقة ),72 ,2011 Renton et al., Neuron, 257-8). يكون هذا الموضع على الكروموسوم 9021 مسئلاً عن تقريبًا نصف ALS الوراثي وتقريبًا ربع كل حالات حالات ALS في مجموعة مشاركة في دراسة مكونة من 405 المرضى 0 الفنلنديين )978-985 ,9 ,2010 .(Laaksovirta et al., Lancet Neurol., يوجد نمط فرداني مؤسس؛ يغطي الجين (COORFT2 في غالبية الحالات المرتبطة بهذه المنطقة. لا يوجد Ula علاجات Aled لعلاج أمراض التنكس العصبي هذه. لهذاء يكمن أحد الأهداف في توفير تركيبات وطرق لعلاج أمراض التنكس العصبي هذه. الوصف العام للاختراع توفر تجسيدات معينة طرقاء مركبات؛ وتركيبات لتثبيط التعبير الوراثي عن COORF72 mRNA والبروتين في الخلاياء الأنسجة؛ والحيوانات. توفر تجسيدات معينة طرقًاء مركبات؛ وتركيبات لتقليل
مستويات COORFT2 mRNA والبروتين في (WAY الأنسجة؛ والحيوانات. توفر تجسيدات معينة مركبات مضادة لاتجاه النسخ antisense compounds موجهة لحمض نووي 0901172. في تجسيدات معينة؛ تكون المركبات المضادة لاتجاه النسخ عبارة عن أوليجو نوكليوتيدات معدلة ‘modified oligonucleotides في تجسيدات معينة؛ تكون الأوليجو نوكليوتيدات المعدلة أحادية الجديلة.
في تجسيدات معينة»؛ يتم تقليل نواتج ترجمة غير ATG المصاحبة للتكرار المصاحب ل 2 ر(ترجمة (RNA في تجسيدات معينة؛ تكون نواتج ترجمة RNA المصاحبة ل
2 هي بولي - (جليسين -برولين) «poly—(glycine—proline) بولي-(جليسين-ألانين) «poly—(glycine—alanine) وبولي -(جليسين - أرجنين) (ممتصتعته -عصك راع)-ر01م. في تجسيدات معينة؛ يتم على نحو مميز اختزال صور متغيرة معينة من COORFT2 mRNA في تجسيدات معينة؛ تكون الصور المتغيرة من mRNA 09011772 المختزلة على نحو مميز عبارة عن صور متغيرة معالجة من mRNA مسبق محتوي على إنترون 1. في تجسيدات معينة؛ يحتوي إنترون 1 على تمدد لتكرار هكسا نوكليوتيد hexanucleotide repeat expansion في تجسيدات معينة؛ الصور تكون المتغيرة من mRNA 09011772 المختزلة على نحو مميز هي صورة متغيرة ل 5 اال مصاحبة لمسبب المرض CIORFT2 في تجسيدات معينة؛ تكون الصورة المتغيرة ل mRNA المصاحبة لمسبب المرض 09018172 هي NM_001256054.1 (المتوالية رقم: 1). في تجسيدات معينة؛ يكون تمدد تكرار الهكسا نوكليوتيد مصحوبًا بمرض مصاحب ل COORFT2 في تجسيدات معينة؛ يكون تمدد تكرار الهكسا نوكليوتيد مصحويًا بمرض مصاحب لتمدد تكرار هكسا نوكليوتيد COORFT2 في تجسيدات معينة؛ يشتمل تمدد تكرار الهكسا نوكليوتيد على 30 0 وحدة تكرار من ©©606060؛ أكثر من 30 وحدة تكرار من ©©0000؛ أكثر من 100 وحدة تكرار من «GGGGCC أكثر من 500 وحدة تكرار من ©©00060؛ أكثر من 1000 وحدة تكرار من GGGGCC في تجسيدات معينة؛ يكون تمدد تكرار الهكسا نوكليوتيد مصحويًا ببؤر nuclear foci dugg في تجسيدات معينة؛ تكون نواتج ترجمة RNA المصاحبة ل 0901172 مصحوية ببؤّر نووية. في تجسيدات معينة؛ تكون نواتج ترجمة RNA المصاحبة ل 0901172 Sle 5 عن بولي- (جليسين -برولين)؛ بولي-(جليسين -ألانين)؛ وبولي- (جليسين - أرجنين). في تجسيدات معينة؛ تكون التركيبات والطرق الموصوفة هنا مفيدة لتقليل مستويات COORF72
mRNA مستويات بروتين «COORFT2 نواتج ترجمة انطع «CCOORFT2 والبؤر النووية. في تجسيدات معينة؛ تكون التركيبات والطرق الموصوفة هنا مفيدة لاختزال انتقائيًا الصورة المتغيرة من mRNA المصاحبة لمسبب المرض COORFT2 يمكن أن يحدث هذا الاختزال بطريقة معتمدة على الزمن أو بطريقة معتمدة على الجرعة.
أيضًا يتم توفير طرق مفيدة لمنع؛ علاج؛ تحسين؛ وإبطاء تفاقم الأمراض المصاحبة ل 0908772. في تجسيدات معينة؛ تكون هذه الأمراض؛ الاضطرابات؛ والحالات المصاحبة ل 09081772 هي أمراض التنكس العصبي. في تجسيدات معينة؛ يكون مرض التنكس العصبي هو التصلب الجانبي الضموري ((ALS) الخرف الجبهي الصدغي ((FTD) متلازمة التنكس القاعدي القشري (05)؛ المتلازمة الباركنسونية اللانمطية؛ والتنكس الزيتوني الجسري المخيخي (OPCD)
0 يمكن أن تنطوي هذه الأمراض على واحد أو أكثر من عوامل الخطرء الأسباب؛ أو النتائج على نحو مشترك. تتضمن عوامل الخطر والأسباب المعينة لتطؤر مرض تنكس عصبيء و» بشكل محدد؛ FTD 5 ALS الاستعداد الوراثي وكبر السن. في تجسيدات معينة؛ تتضمن طرق العلاج إعطاء مركب 09011772 مضاد لاتجاه النسخ إلى فرد في حاجة لذلك. في تجسيدات معينة؛ يكون المركب المضاد لاتجاه النسخ عبارة عن أوليجو 5 نوكليوتيد معدل أحادي الجديلة. في تجسيدات معينة؛ يكون الأوليجو نوكليوتيد المعدل أحادي الجديلة متممًا لحمض نووي ل .COORFT2 ينبغي فهم أن DS من الوصف العام السابق والوصف التفصيلي التالي يعتبرا توضيحيين وتفسيريين فقط ولا يعتبرا محددين للاختراع؛ Wg لعناصر الحماية. هناء يتضمن استخدام الصورة المفردة صورة 0 الجمع ما لم يتم تحديدًا ذكر شيء بخلاف ذلك. على النحو المستخدم هناء استخدام "أو" يعني 'و/أو' ما لم يتم ذكر شيء بخلاف ذلك. بشكل إضافي؛ على النحو المستخدم هناء استخدام 'و" يعني 'و/أو" ما لم يتم ذكر شيء بخلاف ذلك. علاوة على ذلك؛ لا يعتبر استخدام المصطلح 'متضمن" إضافة إلى الصور الأخرى؛ مثل 'يتضمن" و"تضمن" محددًا. أيضًاء تشتمل المصطلحات مثل "عنصر" أو 'مكون" على كل من العناصر والمكونات المشتملة على وحدة واحدة والعناصر 5 والمكونات التي تشتمل على أكثر من وحدة واحدة؛ ما لم يتم تحديدًا ذكر شيء بخلاف ذلك.
تتضمن المركبات الخاصة بالاختراع صورًا متغيرة من المركبات التي تم الكشف عنها حيث يتم استبدال واحدة أو أكثر من ذرات الهيدروجين hydrogen الكربون ccarbon النيتروجين nitrogen الأكسجين oxygen أو السفلر sulfur بنظير مستقر من نفس العنصر. تكون عناوين القطاعات المستخدمة هنا لأغراض تنظيمية فقط ولا ينبغي تفسيرها باعتبارها محددة لموضوع الطلب الموصوف. يتم هنا بوضوح تضمين كل المستندات؛ أو أجزاء من المستندات؛ المذكورة في هذا الكشف؛ متضمنة؛ على سبيل المثال لا الحصرء البراءات؛ طلبات البراءات؛ طلبات البراءات المنشورة» المقالات» الكتب» الأطروحات؛ وأرقام الوصول إلى بنك الجينات ومعلومات المتوالية المصاحبة التي يمكن الحصول عليها من خلال قواعد البيانات National Center for Jie (NCBI) Biotechnology Information والبيانات الأخرى المشار إليها خلال الكشف هنا كمراجع للأجزاء من المستند التي تمت مناقشتها هناء إضافة إلى تضمنيها بأكملها. التعريفات ما لم يتم توفير تعريفات بعينهاء تكون التسيمات المستخدمة فيما يتعلق ب والإجراءات والتقنيات الخاصة بء الكيمياء التحليلية؛ الكيمياء العضوية التخليقية؛ والكيمياء الطبية والصيدلية الموصوفة هنا هي تلك المعروفة جيدًا والمستخدمة على نحو شائع في الفن. قد يتم استخدام التقنيات القياسية 5 لللتخليق الكيميائي؛ والتحليل الكيميائي. ما لم يتم توضيح شيء بخلاف ذلك؛ يكون للمصطلحات التالية المعاني التالية: يشير "0-2-ميثوكسي إيثيل" (MOE 5 2’ ~OCH2CH2-0OCH3 5 2-1401 La) إلى تعديل ب 0 -ميثوكسي dil للموضع 2 الخاص بحلقة فُورانوز furanose ring يكون سكر معدل ب 2'- 0-ميثوكسي إيثيل هو سكر معدل. يعني "1408-2 نوكليوزيد" Lia) 0-2 -ميثوكسي إيثيل نوكليوزيد) نوكليوزيد nucleoside مشتمل على شطر سكر معدل ب MOE يعني "نوكليوزيد به استبدال عند الموضع 72 نوكليوزيد مشتمل على مجموعة استبدال عند الموضع 72 من حلقة الفُورانوز بخلاف H أو 011. في تجسيدات معينة؛ نوكليوزيدات بها استبدال عند الموضع 2" تتضمن نوكليوزيدات بتعديلات للسكر ثنائي الحلقات.
يعني "5 -ميثيل سيتوزين "S—methylcytosine سيتوزين معدل cytosine modified باستخدام مجموعة methyl group (Hise ملحقة بالموضع 5”. يكون 5-ميثيل سيتوزين عبارة عن قاعدة نووية معدلة. يشير 'معطى بالتزامن" إلى الإعطاء المشترك لاثنين من العوامل الصيدلية بطريقة حيث يتم إظهار التأثيرات الدوائية الخاصة بكليهما في المربيض في نفس الوقت. لا يتطلب الإعطاء المصاحب أن يتم إعطاء كلا العوامل الصيدلية في تركيبة صيدلية فردية؛ في نفس صورة الجرعة؛ أو بواسطة نفس طريقة الإعطاء. لا تحتاج تأثيرات كلا العوامل الصيدلية إلى إظهار نفسها في نفس الوقت. تحتاج التأثيرات فقط إلى أن تكون متداخلة لفترة زمنية ولا تحتاج إلى أن تكون متساوية في امتدادها. يعني "إعطاء' توفير عامل صيدلي إلى Olson ويتضمن؛ على سبيل المثال لا الحصر الإعطاء 0 بواسطة إخصائي طبي والإعطاء الذاتي. يشير 'تحسين" إلى calla emia إيقاف» أو عكس مؤشر واحد على الأقل لحدة Alls أو مرض. قد يتم تحديد حدة المؤشرات بواسطة إجراءات ذاتية أو موضوعية؛ التي تكون معروفة لذوي المهارة في المجال. يشير "حيوان” إلى إنسان أو حيوان من غير البشرء بما في ذلك؛ على سبيل المثال لا الحصر؛ 5 الفتران» fall الأرانب؛ الكلاب؛ القطط الخنازيرء والرئيسيات من غير البشرء بما في edly على سبيل المثال لا الحصرء القرود والشمبانزي. يشير "جسم مضاد "anitbody إلى جزيء يتميز بالتفاعل بشكل ald مع Mie للضد بطريقة ماء حيث يتم تعريف كل من الجسم المضاد ومؤّلد الضد بالنسبة لبعضها البعض. قد يشير الجسم المضاد إلى جزيء جسم مضاد تام أو أية شظية أو منطقة منه؛ مثل السلسلة الثقيلة؛ السلسلة 0 الخفيفة؛ منطقة «Fab ومنطقة Fc يعني Jali مضاد لاتجاه النسخ "antisense activity أي نشاط يمكن الكشف عنه أو قابل للقياس يُعزى إلى تهجين مركب مضاد لاتجاه النسخ بالحمض النووي المستهدف الخاص به. في تجسيدات معينة؛ يتمثل نشاط مضاد لاتجاه النسخ في انخفاض في المقدار أو التعبير الوراثي عن حمض نووي مستهدف أو البروتين المشفر بواسطة الحمض النووي المستهدف هذا. 5 يعني "المركب المضاد لاتجاه النسخ” مركب أوليجومري قادر على الخضوع لتهجين بحمض نووي مستهدف من خلال الارتباط بالهيدروجين. تتضمن أمثلة على المركبات المضادة لاتجاه النسخ
المركبات أحادية الجديلة ومزدوجة الجدائل؛ مثلء الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ؛ «shRNA «siRNAs مط العا والمركبات التي أساسها الإشغال. يعني "التثبيط المضاد لاتجاه النسخ” خفض مستويات الحمض النووي المستهدف في وجود مركب مضاد لاتجاه النسخ متمم لحمض نووي مستهدف مقارنة بمستويات الحمض النووي المستهدف أو في ظل عدم وجود المركب المضاد لاتجاه النسخ. تكون cll مضادة لاتجاه "Fall هي تلك الآليات المتضمنة تهجين مركب بحمض نووي مستهدف؛ حيث تكون نتيجة أو تأثير التهجين La) التحلل المستهدف أو الإشضغال المستهدف باستخدام التوقف المفاجئ المصاحب للآلية الخلوية المتضمن؛ على سبيل المثال؛ الاستنساخ أو الجدل. 0 يعني "أوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ" أوليجو نوكليوتيد أحادي الجديلة محتوي على متوالية قاعدة نووية تسمح بتهجين لمقطع مناظر من حمض نووي مستهدف. يشير 'تكامل قاعدة" إلى السعة لإقران القاعدة الدقيق الخاص بقواعد نووية خاصة بأوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ مع القواعد النووية المناظرة في حمض نووي مستهدف (أي؛ التهجين)؛ ويتم بواسطة ارتباط بهيدروجين من نوع Hoogsteen «Watson=Crick أو Hoogsteen عكسي Ladd بين 5 القواعد النووية المناظرة. يعني "سكر ثنائي الحلقات" حلقة فُورانوز معدلة بواسطة تجسير اثنتين من الذرات. يكون السكر ثنائي الحلقات عبارة عن سكر معدل. يعني 'نوكليوزيد ALS الحلقات "Bicyclic nucleoside (أيضًا (BNA نوكليوزيد به شطر سكر مشتمل على جسر يصل اثنتين من ذرات الكريون الخاصة بحلقة السكرء وبالتالي يتم تكوين نظام 0 حلقة ثنائية الحلقات. في تجسيدات معينة؛ يصل الجسر الكريون عند الموضع 4" والكريون عند الموضع 72 من حلقة السكر. يعني 'مستنسخ COORFT2 مضاد لاتجاه النسخ” مستنسخات منتجة من الجديلة غير المشفرة Lia) جديلة مضادة لاتجاه النسخ وجديلة قالب) الخاصة بجين 090181772. يختلف مستنسخ 2 المضاد لاتجاه النسخ عن 'مستنسخ 09011772 مع اتجاه النسخ” المستنسخ على 5 نحو مقبول» الذي يتم إنتاجه من الجديلة المشفرة (أيضًا الجديلة مع اتجاه النسخ) الخاصة بجين
2. في تجسيدات معينة؛ يكون مستنسخ 09081772 مضاد لاتجاه النسخ عبارة عن
المتوالية رقم: 18. 'مثبط نوعي لمستنسخ 0908772 المضاد لاتجاه النسخ” يشير إلى أي عامل قادر على التثبيط النوعي للتعبير الوراثي عن مستنسخ COORFT2 المضاد لاتجاه النسخ و/أو نواتج التعبير الوراثي عنه عند المستوى الجزيئي. كما هو مستخدم هناء 'نوعي" يعني تقليل أو تثبيط التعبير Shel عن مستنسخ 09081772 المضاد لاتجاه النسخ بدون تقليل المستنسخ غير المستهدف وصولاً إلى درجة يمكن إدراكها Ae) سبيل المثالء يُقلل متبط نوعي لمستنسخ 2901172 مضاد لاتجاه النسخ من التعبير الوراثي عن مستنسخ COORFT2 المضاد لاتجاه النسخ؛ ولكنه لا يُقلل من التعبير الوراثي عن مستنسخ 69081772 مع اتجاه النسخ وصولاً إلى درجة يمكن إدراكها).
0 تتضمن مثبطات مستنسخ 0908772 المضاد لاتجاه النسخ النوعي المركبات المضادة لاتجاه siRNAs «gel الأبتمرات؛ الأجسام المضادة؛ الببتيدات؛ الجزيئات الصغيرة؛ والعوامل الأخرى القادرة على تثبيط التعبير الوراثي عن التعبير الوراثي عن مستنسخ 09081772 المضاد لاتجاه النسخ و/أو نواتج التعبير الوراثي عنه؛ مثل نواتج ترجمة RAN المصاحبة لمستنسخ 0908772 المضاد لاتجاه النسخ.
5 يعني 'مرض مصاحب ل 9081772" أي مرض مصحوب بأي حمض نووي ل 0908172 أو ناتج التعبير الوراثي له. قد تتضمن هذه الأمراض مرض تنكس عصبي. يمكن أن تتضمن أمراض التتكس العصبي هذه FTD 5 ALS في تجسيدات معينة؛ يكون المرض المصاحب ل 09081772 ناتجًا بواسطة (أو يكون مصحويبًا ب) تمدد لتكرار هكسا نوكليوتيد. في تجسيدات معينة؛ قد يشتمل تمدد تكرار هكسا نوكليوتيد على «<GGGGGC 0606666 «GGGGCC أو GGGGCG متكررة
0 على الأقل 30 مرة؛ أكثر من 30 مرة؛ أكثر من 100 مرة؛ أكثر من 500 مرة؛ أو أكثر من 1000 مرة. تعني gle ترجمة RAN مصاحبة ل "COORFT2 ببتيد شاذ aberrant peptide أو بوليمرات di= peptide polymers من داي ببتيد مترجمة من خلال ترجمة RAN (أي ¢ مصحبة للتكرار؛ وترجمة مستقلة من نوع غير (ATG في تجسيدات معينة؛ تكون نواتج ترجمة RAN المصاحبة ل
5 0908772 عبارة عن أي من بولي-(جليسين-برولين)؛ بولي -(جليسين -ألانين)؛ وبولي = Gala) أرجنين).
يعني 'حمض نووي ل 9081772" أي حمض نووي يقوم بتشفير 09011772. على سبيل المثال؛ في تجسيدات cima يتضمن حمض نووي ل COORFT2 متوالية DNA تقوم بتشفير 9011772؛ متوالية RNA مستنسخة من DNA يقوم بتشفير 09010772 Las في ذلك DNA مجموعة العوامل الوراثية المشتملة على الإنترونات والإكسونات (أي؛ MRNA مسبق)؛ ومتوالية MRNA تقوم بتشفير
COORFT2 بتشفير بروتين ash mRNA "COORF72 يعني افاعم COORFT2 5 يعني 'صورة متغير من mRNA مصاحبة لمسبب المرض 9018172" الصورة المتغير من COORF72 mRNA المعالجة من صورة متغير من MRNA مسبق ل COORFT2 محتوي على تكرار الهكسا نوكليوتيد. يحتوي mRNA مسبق ل COORFT2 على تكرار الهكسا نوكليوتيد عندما يبدأ استنساخ mRNA المسبق في المنطقة من موضع البدء الخاص بالإكسون 18 إلى موضع 0 البدء الخاص بالإكسون «IB على سبيل المثال. النوكليوتيدات من 1107 إلى 1520 من متوالية مجموعة العوامل الوراثية (المتوالية رقم: 2 متمم الوصول إلى بنك الموروثات رقم NT_008413.18 المشذب من النوكليوزيدات من 27535000 إلى 27565000). في تجسيدات معينة؛ يتم قياس مستوى صورة متغيرة ل mRNA مصاحبة لمسبب المرض 09081772 لتحديد المستوى ل mRNA مسبق خاص ب 69081772 محتوي على تكرار الهكسا نوكليوتيد في عينة. يشير 'مثبط COORFT2 نوعي" إلى أي عامل قادر على تثبيط التعبير الوراثي عن 2908772 mRNA و/أو بروتين 0908772 بشكل خاص عند المستوى الجزيئي. على سبيل المثال؛ تتضمن مثبطات 09081772 النوعية الأحماض النووية (متضمنة المركبات المضادة لاتجاه النسخ)؛ siRNAs الأبتمرات؛ الأجسام المضادة؛ الببتيدات» الجزيئات الصغيرة»؛ والعوامل الأخرى القادرة على 0 تثبيط التعبير Shell عن mRNA 29081772 و/أو بروتين COORFT2 بالمثل؛ في تجسيدات divas قد توثر مثبطات 090181772 النوعية على العمليات الجزيئية الأخرى في حيوان. تعني "بنية غطاء” أو 'شطر غطاء طرفي" تعديلات كيميائية؛ قد تم تضمينها عند أي طرف من مركب مضاد لاتجاه النسخ. يعني 0" أو JA مقيد "constrained ethyl نوكليوزيد ثنائي الحلقات به شطر سكر مشتمل 5 على جسر يصل الكريون عند الموضع 4" والكريون عند الموضع 02 حيث يكون للجسر الصيغة: 4’-CH(CH3)-0-2’
يعني "نوكليوزيد إيثيل مقيد" (أيضًا نوكليوزيد (CEL نوكليوزيد مشتمل على شطر سكر ثنائي الحلقات مشتمل على جسر '0-2-(11)0113©-”4. تشير 'منطقة متميزة كيميائيًا" إلى منطقة من مركب مضاد لاتجاه النسخ تكون بطريقة ما مختلفة كيميائيًا عن منطقة أخرى من نفس المركب المضاد لاتجاه النسخ. على سبيل المثال؛ تكون منطقة بها 0-2 -ميتوكسي Ji نوكليوزيدات متميزة كيميائيًا عن منطقة بها نوكليوزيدات بدون تعديلات 0-2 -ميثوكسي إيثيل. يعني "مركب مضاد لاتجاه النسخ خيمري" مركبًا مضادًا لاتجاه النسخ يشمل اثنتين على الأقل من المناطق المتميزة كيميائيًا؛ يشتمل كل موضع على العديد من الوحدات الفرعية. يعني "الإعطاء المشترك" إعطاء اثنين أو أكثر من العوامل الصيدلية إلى فرد. قد يكونا الاثنين أو 0 أكثر من العوامل الصيدلية في تركيبة صيدلية فردية؛ أو قد يكونا في تركيبات صيدلية منفصلة. كل من الاثنين أو أكثر من العوامل الصيدلية قد يتم إعطاء من خلال طرق إعطاء متشابهة أو مختلفة. يشتمل الإعطاء المشترك على الإعطاء المتوازي أو المتعاقب. يعني 'تكامل" السعة للإقران Lad بين قواعد نووية خاصة بحمض نووي أول وحمض نووي ثان. سيتم إدراك 'تشتمل dail "ele على" و'مشتمل على" باعتبارها تنطوي على تضمين خطوة 5 مذكورة أو عنصر أو مجموعة من الخطوات أو العناصر ولكن بدون استثناء أية خطوة أخرى أو عنصر AT أو مجموعة من الخطوات أو العناصر (BAY) تعني "قواعد نووية متجاورة" قواعد نووية تقع مباشرة بجوار بعضها البعض. يشير 'تصميم” أو '"مصمم ل" إلى lee تصميم مركب أوليجومري يهجن بشكل خاص جزيء حمض نووي مختار. 0 تعني 'مادة مخففة" مكونًا في تركيبة يفتقر إلى النشاط الدوائي؛ ولكنه يكون ضروري أو مطلوب صيدليًا. على سبيل المثال» في الأدوية التي يتم حقنهاء قد تكون المادة المخففة عبارة عن سائل؛ على سبيل المثال محلول ملحي. تعني "جرعة" كمية محددة من عامل صيدلي متوفر في عملية إعطاء واحدة»؛ أو في فترة زمنية محددة. في تجسيدات معينة؛ قد يتم إعطاء جرعة في واحدة؛ اثنتين؛ أو أكثر من الجرعات الكبيرة؛ 5 الأقراصء أو الحُقن. على سبيل المثال» في تجسيدات معينة حيث يكون الإعطاء تحت الجلد مطلويًاء تتطلب الجرعة المطلوية Laas لا يتوافق بسهولة مع حقنة فردية؛ لهذاء قد يتم استخدام اثنين
أو أكثر من الحُقن لتحقيق الجرعة المطلوية. في تجسيدات معينة؛ يتم إعطاء العامل الصيدلي عن طريق التسريب على مدار فترة زمنية ممتدة أو على نحو مستمر. قد يتم نكر الجرعات في صورة مقدار من العامل الصيدلي في الساعة؛ اليوم؛ الأسبوع,؛ أو الشهر. يعني 'مقدار فعال" في سياق تعديل نشاط أو Glow علاج أو منع حالة إعطاء ذلك المقدار من العامل الصيدلي إلى كائن خاضع للعلاج في حاجة لذلك canal) العلاج. أو الوقاية من إما في جرعة فردية أو كجزء من سلسلة؛ تكون فعالة لتعديل ذلك التأثيرء أو لعلاج أو الوقاية من أو تحسين تلك الحالة. قد يتنوع المقدار الفعال بين الأفراد اعتمادًا على صحة الفرد الذي سيتم علاجه والحالة الفيزيائية cad المجموعة التصنيفية من الأفراد الذين سيتم علاجهم؛ صيغة التركيبة؛ تقييم الحالة الطبية للفرد؛ والعوامل الأخرى ذات الصلة. 0 تعني "الفعالية" القدرة على إنتاج تأثير مطلوب. يتضمن "التعبير Shall كل الوظائف التي بواسطتها يتم تحويل المعلومات المشفرة الخاصة بجين إلى البنيات الموجودة والعاملة في خلية. تتضمن هذه البنيات؛ إلا أن الأمر ليس قاصرًا على نواتج الاستنساخ والترجمة. تعني "البؤرة' أو "البؤر" جسمًا نوويًا أو سيتوبلازمي مشتملاً على مستنسخ COORFT2 في 5 تجسيدات معينة؛ تشتمل 550 على مستنسخ COORFT2 واحدة على الأقل. في تجسيدات معينة؛ تشتمل بور COORFT2 على مستنسخات مشتملة على أي من وحدات تكرار هكسا نوكليوتيد التالية: «GGGGCC 066666 0000002 راأن GGGGCG تعني acid بشكل تام" أو 'متمم بنسبة 7100" أن تشتمل كل قاعدة نووية خاصة بحمض نووي Jf على قاعدة نووية متممة في حمض نووي ثان. في تجسيدات معينة؛ يكون حمض نووي أول 0 عبارة عن مركب مضاد لاتجاه النسخ ويكون حمض نووي مستهدف عبارة عن حمض نووي ثان. يعني "جابمر" مركبًا مضادًا لاتجاه النسخ خيمريًا حيث يتم وضع منطقة داخلية محتوية على العديد من النوكليوزيدات التي تدعم انشطار 11 RNase فيما بين المناطق الخارجية المحتوية على واحد أو أكثر من النوكليوزيدات؛ حيث يتم كيميائيًا تمييز النوكليوزيدات المشتملة على المنطقة الداخلية عن النوكليوزيد أو النوكليوزيدات المشتملة على المناطق الخارجية. قد تتم الإشارة إلى المنطقة الداخلية 5 باعتبارها 'فجوة" وقد تتم الإشارة إلى المناطق الخارجية باعتبارها "الأجنحة".
يعني 'تمدد تكرار هكسا نوكليوتيد" سلسلة من ست قواعد (على سبيل المثال» ‘GGGGCC «<GGGGCG «GGGGGG أو (GGGGGC متكررة مرتين على الأقل. في تجسيدات معينة؛ قد يتم وضع تمدد تكرار الهكسا نوكليوتيد في إنترون 1 0380 من حمض نووي ل COORFT2 في تجسيدات معينة؛ يتضمن تمدد تكرار هكسا نوكليوتيد مسبب للمرض على الأقل 30؛ أكثر من 30؛ أكثر من 100 أكثر من 500؛ أو أكثر من 1000 وحدة تكرار من «GGGGCC 0000060 06 )؛ أو GGGGGC في حمض نووي ل COORFT2 ويكون مصحويًا بمرض. في تجسيدات معينة؛ تكون وحدات التكرار متعاقبة. في تجسيدات معينة؛ يت متفسير وحدات التكرار بواسطة 1 أو أكثر من القواعد النووية. في تجسيدات معينة؛ يتضمن تمدد تكرار هكسا نوكليوتيد من نوع غير معالج 23 أو أقل من وحدات التكرار الخاصة ب «GGGGCC 00606006 000000 ؛ 0 أو GGGGGC في حمض نووي ل 09081772. في تجسيدات معينة؛ تكون وحدات التكرار متعاقبة. في تجسيدات معينة؛ يتم تفسير وحدات التكرار بواسطة 1 أو أكثر من قواعد نووية. يعني "التهجين" تطويع جزيبئات الحمض النووي المتممة. في تجسيدات معينة؛ تتضمن جزيئات الحمض النووي المتممة؛ على سبيل المثال لا الحصرء مركبًا مضادًا لاتجاه النسخ وحمضًا نووتًا مستهدقًا. في تجسيدات معينة؛ تتضمن جزيئات الحمض النووي المتممة؛ على سبيل المثال لا 5 الحصرء أوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ وحمضًا نوويًا مستهدقًا. يعني 'تحديد حيوان يعاني من مرض مصاحب ل 901:72" تحديد حيوان قد تم تشخيص إصابته بمرض مصاحب ل COORFT2 أو معرئّض لإظهار مرض مصاحب ل COORFT2 يتضمن الأفراد المعزضين لإظهار مرض مصاحب ل COORFT2 هؤلاء الذين لديهم واحد أو أكثر من عوامل الخطر لإظهار مرض مصاحب ل «COORFT2 بما في ذلك؛ من لديهم تاريخ شخصي أو 0 عائلي أو استعداد وراثي لواحد أو أكثر من الأمراض المصاحبة ل COORFT2 قد يتم تنفيذ هذا التحديد بواسطة أية طريقة متضمنة تقييم تاريخ طبي للفرد والاختبارات الإكلينيكية القياسية أو عمليات التقييم؛ Jie الاختبار الوراثي. يعني 'مجاور بشكل مباشر" عدم وجود أية عناصر تداخية فيما بين العناصر المجاورة بشكل مباشر. 5 يعني "af إنسان أو حيوان من غير البشر مختار للعلاج أو المعالجة.
يعني 'تثبيط 29018772" تقليل المستوى أو التعبير الوراثئي عن COORFT2 mRNA و/أو بروتين. في تجسيدات معينة؛ يتم تثبيط مستويات mRNA 0908772 و/أو البروتين في وجود مركب مضاد لاتجاه النسخ يستهدف «COORFT2 بما في ذلك أوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ يستهدف 090117772 مقارنة بالتعبير الوراثي عن مستويات COORFT2 mRNA و/أو البروتين في ظل عدم وجود مركب مضاد لاتجاه النسخ خاص ب 09081772 مثل أوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ. يشير 'تثبيط التعبير الوراثي أو النشاط" إلى انخفاض أو احسار التعبير الوراثي أو النشاط ولا يشير بالضرورة إلى إزالة تامة للتعبير الوراثي أو النشاط. يشير 'رابط نوكليوزيد بيني" إلى الرابطة الكيميائية فيما بين النوكليوزيدات. 0 تعني "النوكليوزيدات المرتبطة" نوكليوزيدات متجاورة مرتبطة معًا بواسطة رابط نوكليوزيد بيني. يعني (aes نووي مؤمن" أو LNA" 'نوكليوزيدات "INA مونومرات حمض نووي بها جسر يصل اثنتين من ذرات الكربون فيما بين الموضعين 4" و2" من وحدة السكر الخاصة بالنوكليوزيد؛ وبالتالي يتم تكوين سكر ثنائي الحلقات. تتضمن أمثلة على السكر ثنائي الحلقات هذاء إلا أن الأمر ليس قاصرًا على أ) ©-1-ميثيلين أوكسي (:012-0-2©-47) (LNA (ب) 8]-0-ميثيلين أوكسي (LNA )4:-0©12-0-2(( 5 (ج) إيثيلين أوكسي (:012(2-0-2)-47) LNA (د) أمينو أوكسي LNA )47-©12-0-11)8(-2( و(ه) أوكسي أمينو (:0-2-(0112-1)8-:4) LNA كما هو موضح فيما يلي. io Bs : oo Br fom 8 .0 ! بج 0 WH ؟؟ أ By Ox RO 0~ 7 جا + Je يها ] {a} 6 ={ ={ 0 على النحو المستخدم clin تتضمن مركبات LNA على سبيل المثال لا الحصرء مركبات بها جسر 0 واحد على الأقل Lad بين الموضع 4" والموضع 2” الخاصين بالسكر حيث يشتمل كل من الجسرين على حدة على 1 أو من 2 إلى 4 من المجموعات المرتبطة المختارة على حدة من حمارقة) بنع)]- <=C(=0)~ «—C(=NR1)= «=C(R1)=N- ~C(R1)=C(R2)~ - -(8<)؛ -0-. -8:)81(2- -«(0-)5- و-(10)81-؛ حيث:» تكون صفرء 1 أو 2؛ n تكون 1» 2؛ 3, أو 4؛ كل 81 و2 تكون» على aa عبارة عن cH مجموعة حماية؛ هيدروكسيل؛
«sh 01-2 01-012 ألكيل به استبدال» 012-02 ألكنيل» 012-22 ألكنيل به استبدالء 2©-012 ألكينيل» 012-02 ألكينيل به استبدال» €20-C5 أريل» €20-C5 أريل به استبدال؛ شق حلقة غير متجانسة؛ شق حلقة غير متجانسة به استبدال؛ أريل غير متجانس؛ أريل غير متجانس به استبدال» شق 07-05 أليفاتي حلقي» شق 07-05 أليفاتي حلقي به استبدال؛ هالوجين» 011؛ 00112 «COOT1 183 «SJL أسيل «(C(=0)~H) أسيل به استبدال» «ON سلفونيل (0(2-11-)5)؛ أو سلفوكسيل (1[1-(0-)5)؛ وكل 11 و12 تكونء؛ على حدة؛ عبارة عن H 01-2 ألكيلء 01-012 ألكيل به استبدال» 12-02 ألكنيل» 012-202 ألكنيل به استبدالء 2©-012 ألكينيل» 012-02 ألكينيل به استبدال» €20-C5 أريل» €20-C5 أريل به استبدال؛ أسيل(11-(0-)6)؛ أسيل به استبدال» شق حلقة غير متجانسة؛ شق حلقة غير متجانسة به 0 استبدال» 01-012 أمينو gine 01-2012 «JST ألكيل به استبدال أو مجموعة Alas تتضمن أمثلة على مجموعات التجسير عند الموضعين -”4 2" المتضمنة في التعريف الخاص ب هل إلا أن الأمر ليس قاصرًا على واحدة بالصيغ: ~[C(R1)(R2)In-0~ «~[C(R1)(R2)In~ ٠ -8182(0)-0-(0)81- أو ©-(8182)-(0-11)81-. علاوة على ذلك؛ تتضمن مجموعات التجسير الأخرى المتضمنة في التعريف الخاص ب LNA الجسور ”112-2©-:4. -0112(2)-”4 ’2 :3-2ردس)- :4 «4’-CH2-0-2’ :2-م-2ر2س)- :4 2-(1ع)-012-0-'4 و:0-2-(112-14)81©-:4؛ حيث كل 1 و22 تكون» على Ble aa عن cH مجموعة حماية أو 01-012 ألكيل. Lia يضمن في التعريف الخاص ب LNA وفقًا للاختراع LNAs حيث يتم توصيل مجموعة الهيدروكسيل عند الموضع 2' الخاصة بحلقة ريبوزيل السكر بذرة الكريون عند الموضع 4' الخاصة 0 بحلقة السكرء وبالتالي يتم تكوين جسر ميثيلين أوكسي (”0112-0-2-”4) لتكوين شطر السكر ثنائي الحلقات. يمكن أيضًا أن يكون الجسر عبارة عن مجموعة ميثيلين (-0112-) تصل ذرة الأكسجين عند الموضع 2' وذرة الكريون عند الموضع 4" يتم استخدام المصطلح ميثيلين أوكسي LNA )47-0112-0-2( لها. علاوة على ذلك؛ في Alls شطر السكر ثنائي الحلقات المشتمل على مجموعة تجسير من إيثيلين في هذا الموضع؛ يتم استخدام المصطلح إيثيلين أوكسي (-”4 LNA )0-2:-012012 5 يتم أيضًا تضمين 1-0- ميثيلين أوكسي (:0112-0-2-”4)؛ أيزومر
من ميثيلين أوكسي (:4-012-0-2) 1178 في التعريف الخاص ب INA على النحو
المستخدم هنا.
يشير "عدم توافق" أو 'قاعدة نووية غير متممة" إلى الحالة عندما تكون قاعدة نووية خاصة بحمض
نووي أول غير قادرة على الإقران بالقاعدة النووية المناظرة الخاصة بحمض نووي ثان أو مستهدف.
يشير 'رابط نوكليوزيد بيني معدل" إلى استبدال أو أي تغيير من رابطة نوكليوزيد بيني طبيعية
الحدوث (أي؛ رابطة نوكليوزيد بيني لفوسفو داي إستر).
تعني "قاعدة نووية معدلة" أية قاعدة نووية بخلاف أدينين» سيتوزين؛ جوانين؛ ثيميدين» أو يوراسيل.
تعني 'قاعدة نووية غير معدلة" قواعد البورين أدينين (A) adenine وجوانين guanine (6)» وقواعد uracil (©)؛ وبوراسيل cytosine (1)؛ سيتوزين pyrimidine bases thymine البيريميدين ثيمين (U) 10
يعني "نوكليوزيد معدل" نوكليوزيد به؛ على حدة؛ شطر سكر معدل و/أو قاعدة نووية معدلة.
يعني "'نوكليوتيد معدل" يعني نوكليوتيد cd على حدة؛ شطر سكر معدل؛ رابط نوكليوزيد بيني معدل؛
و/أو قاعدة نووية معدلة.
يعني "أوليجو نوكليوتيد معدل" أوليجو نوكليوتيد يشمل على الأقل رابط نوكليوزيد بيني معدل واحد؛ 5 مكر معدل» و/أو قاعدة Luger معدلة.
يعني 'سكر معدل" استبدال و/أو أي تغيير من شطر سكر طبيعي.
يعني 'مونومر" وحدة فردية من أوليجومر. تتضمن المونومرات؛ على سبيل المثال لا الحصر؛
النوكليوزيدات والنوكليوتيدات؛ سواء أكانت طبيعية الحدوث أو معدلة.
يعني "Cel نمط نوكليوزيد غير معدل ومعدل في مركب مضاد لاتجاه النسخ. يعني 'شطر سكر طبيعي" شطر سكر موجود في RNA i )2-11( DNA (2-077).
يعني 'رابط نوكليوزيد بيني طبيعي الحدوث" رابط فوسفو داي إستر في المواضع من 3 إلى 5 .
تشير 'قاعدة نووية غير متممة' إلى زوج من القواعد النووية التي لا تُكوّن روابط هيدروجين مع
بعضها البعض أو بخلاف ذلك تدعم التهجين.
يشير "حمض نووي" إلى جزيئات تتكون منن نوكليوتيدات مونومرية. يتضمن حمض نووي؛ على سبل المثال لا الحصرء أحماض ردبو نووية (RNA) ribonucleic acids أحماض ديوكسي رببو
deoxyribonucleic acids dass (0178)؛ أحماض نووبة أحادية الجديلة؛ أحماض نووية مزدوجة
«(siRNA) small interfering ribonucleic acids نووية تداخلية صغيرة guy الجدائل» أحماض
(miRNA) microRNAs
تعني 'قاعدة نووية' شطر حلقي غير متجانس قادر على الإقران بقاعدة حمض نووي آخر.
تشير ALY قاعدة نووية" إلى قاعدة نووية قادرة على إقران قاعدة بقاعدة نووية أخرى. على سبيل المثال» في DNA يكون الأدينين (A) متممًا للثيمين (T) على سبيل المثال» في RNA يكون
الأدينين (A) متممًا لليوراسيل (U) في تجسيدات معينة؛ تشير قاعدة نووية متممة إلى قاعدة
نووية خاصة بمركب مضاد لاتجاه النسخ تكون قادرة على إقران القاعدة بقاعدة نووية خاصة
بالحمض النووي المستهدف الخاص به. على سبيل (JUL إذا كانت قاعدة نووية عند موضع معين
من مركب مضاد لاتجاه النسخ قادرة على ريط الهيدروجين بقاعدة نووية عند موضع معين من
0 حمض نووي مستهدف؛, ثم يتم اعتبار موضع ارتباط الهيدروجين فيما بين الأوليجو نوكليوتيد والحمض النووي المستهدف متممًا عند زوج القاعدة النووية ذلك. تعني 'متوالية القاعدة النووية" ترتيب القواعد النووية المتجاورة المستقل عن أي سكر» رابط و/أو تعديل قاعدة نووية. يعني 'نوكليوزيد" قاعدة نووية مرتبط بسكر.
5 يتضمن "عامل محاكي لنوكليوزيد" تلك البنيات المستخدمة لاستبدال السكر أو السكر والقاعدة وليس بالضرورة الرابط عند واحد أو أكثر من مواضع مركب أوليجومري مثل على سبيل المثال العوامل المحاكية للنوكليوزيد المحتوية على مورفولينو» سيكلو هكسنيل؛ سيكلو هكسيل؛ تترا هيدرو بيرانيل؛ العوامل المحاكية للسكر ثنائي الحلقات؛ أو ثلاثي الحلقات؛ على سبيل (Jal وحدات من السكر غير الفورانوز. يتضمن العامل المحاكي للنوكليوتيد تلك البنيات المستخدمة لاستبدال
0 انوكليوزيد والرابط عند واحد أو أكثر من مواضع مركب أوليجومري مثل على سبيل JU الأحماض النووية للببتيد أو مركبات مورفولينو (مركبات مورفولينو مرتبطة بواسطة “N(H)~ 0-(0-)©- أو رابط آخر من غير فوسفو داي إستر). يتداخل بديل السكر مع المصطلح الأشمل نوعًا ما عامل محاكي لنوكليوزيد ولكن يُقصد أن يبين استبدال وحدة السكر (حلقة فُورانوز) فقط. يتم هنا توفير حلقات تترا هيدرو بيرانيل توضيحية لمثال على بديل للسكر حيث قد تم استبدال مجموعة
Su 5 الفورانوز allay حلقة تترا هيدرو بيرانيل. يشير "عامل محاكي" إلى مجموعات تم استبدالها
لسكرء قاعدة نووية؛ و/أو رابط نوكليوزيد بيني. بشكل cole يتم استخدام عامل محاكي بدلاً من السكر أو توليفة من سكر -رابط نوكليوزيد بيني؛ ويتم الحفاظ على القاعدة النووية لتهجين هدف مختار. يعني 'نوكليوتيد" نوكليوزيد به مجموعة فوسفات مرتبطة تساهميًا بجزءِ السكر من النوكليوزيد. يشير "التأثير غير ذي الصلة' إلى تأثير بيولوجي غير مطلوب أو ضار مصاحب لتعديل RNA 5 أو بروتين التعبير الوواثي عن جين بخلاف الحمض النووي المستهدف المقصود.
يعني "المركب الأوليجومري" أو "أوليجومر" بوليمر لوحدات مونومرية فرعية مرتبطة تكون قادرة على تهجين منطقة على الأقل من جزيء حمض نووي. يعني "أوليجو نوكليوتيد" بوليمر خاص بالنوكليوزيدات المرتبطة يمكن أن يكون كل منها معدلاً أو غيرمعدل؛ كل مستقل عن AY
0 يعني "الإعطاء عن طريق الحقن غير المعوي" الإعطاء من خلال الحقن (على سبيل المثال؛ لحقن بجرعة كبيرة) أو التسريب. يتضمن الإعطاء عن طريق الحقن غير المعوي الإعطاء تحت cals الإعطاء عبر الوريد؛ الإعطاء في العضلء الإعطاء عبر الشريان؛ الإعطاء داخل الغشاء البريتونيء أو الإعطاء داخل الجمجمة؛ على سبيل المثال؛ الإعطاء داخل الغمد أو داخل البطين الدماغي.
يعني "ببتيد" Wis مكونًا عن طريق ربط اثنين على الأقل من الأحماض الأمينية بواسطة روابط أميد. دون حصر؛ على النحو المستخدم هناء يشير ببتيد إلى بولي ببتيدات وبروتينات. يعني "عامل صيدلي" مادة توفر فائدة علاجية عند إعطاؤها إلى فرد. على سبيل المثال» في تجسيدات معينة؛ يكون أوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ مستهدف ل COORFT2 عبارة عن عامل صيدلي.
0 يشتمل 'مشتق مقبول "Waa على أملاح مقبولة صيدليًاء مترافقات؛ عقاقير أولية أو أيزومرات من المركبات الموصوفة هنا. تعني "أملاح مقبولة "Waa أملاح مقبولة فسيولوجيًا وصيدليًا من المركبات المضادة لاتجاه النسخ؛ أي؛ أملاح تحتفظ بالنشاط البيولوجي المطلوب للأوليجو نوكليوتيد الرئيسي ولا تنقل التأثيرات السامة غير المطلوية إليه.
يعني 'رابط فوسفوروثيوات" رابطًا Lad بين نوكليوزيدات حيث يتم تعديل رابطة الفوسفو داي إستر
عن طريق استبدال واحدة من ذرات الأكسجين غير المجسرة بذرة سلفر. يكون رابط من
فوسفوروثيوات عبارة عن رابط نوكليوزيد بيني معدل.
يعني "hat عددًا محددًا من القواعد النووية المتجاورة (أي؛ المرتبطة) الخاصة بحمض نووي. في تجسيدات dime يكون gia عبارة عن عدد محدد من القواعد النووية المتجاورة الخاصة بحمض
نووي مستهدف. في تجسيدات dime يكون Ble ga عن عدد محدد من القواعد النووية المتجاورة
الخاصة بمركب مضاد لاتجاه النسخ.
يشير 'يمنع” أو 'منع" إلى تأجيل أو تأخير بداية أو ظهور مرض» اضطراب؛ أو حالة لفترة زمنية
من دقائق إلى أيام؛ أسابيع إلى شهور؛ أو على نحو غير محدد.
0 يعني "عقار أولي" Sle علاجيًا يتم تحضيره في صورة غير نشطة يتم تحويلها إلى صورة نشطة داخل الجسم أو الخلايا الخاصة به بواسطة تأثير clay داخلية أو مواد كيميائية أخرى أو حالات. يشير "Gly Jad laid إلى مقدار من عامل صيدلي يوفر فائدة اتقائية أو وقائية إلى حيوان. يتم تعريف "منطقة" باعتبارها sha من الحمض النووي المستهدف به بنية واحدة على الأقل قابلة
5 ل لتعريف» وظيفة؛ أو سمة مميزة. يعني gn) نوكليوتيد" نوكليوتيد به هيدروكسي عند الموضع 72 الخاص بجزءٍ السكر من النوكليوتيد. قد يتم تعديل الريبو نوكليوتيدات باستخدام أي من مجموعة متنوعة من مجموعات الاستبدال. تعني "أملاح” أملاح مقبولة فسيولوجيًا وصيدليًا من المركبات المضادة لاتجاه النسخ» أي؛ أملاح
0 تحتفظ بالنشاط البيولوجي المطلوب للأوليجو نوكليوتيد الرئيسي ولا تنقل التأثيرات السامة غير المطلوبة إليه. يتم تعريف "المقاطع” باعتبارها أجزاء أصغر أو ثانوية من مناطق داخل حمض نووي مستهدف. تشتمل الأنواع "المقصرة” أو "المشذبة' من الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموضحة هنا على واحدء اثنين أو أكثر من النوكليوزيدات المحذوفة.
تعني "الآثار الجانبية" استجابات فسيولوجية تُعزى إلى علاج بخلاف الآثار المطلوية. في تجسيدات معينة؛ تتضمن الآثار الجانبية؛ دون pan تفاعلات موضع hall شذوذ اختبار وظيفة Al) شذوذ وظيفة الكلى» سمية الكبد؛ سمية IS شذوذ الجهاز العصبي «all وحالات الاعتلال العضلي. يعني "أوليجو نوكليوتيد أحادي الجديلة" أوليجو نوكليوتيد غير مهجن بجديلة متممة. "أوليجو نوكليوتيد معدل أحادي الجديلة' يعني أوليجو نوكليوتيد معدل غير مهجن بجديلة متممة. يتم تعريف 'مواقع"» على النحو المستخدم هناء باعتبارها مواضع قاعدة نووية مميزة داخل حمض نووي مستهدف. يعني 'تفاقم بطيء" انخفاضًا في ظهور المرض. يشير "قابل للتهجين بشكل خاص” إلى مركب مضاد لاتجاه النسخ له درجة كافية من التكملة فيما بين أوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ وحمض نووي مستهدف للحث على تأثير مطلوبء بينما يتم إظهار تأثيرات ضئيلة أو لا يتم إظهار تأثيرات على أحماض نووية غير مستهدفة في ظل الظروف حيث يكون ارتباط نوعي مطلوبًاء أي» في ظل ظروف فسيولوجية في حالة تجارب في جسم HS الحي والمعالجات الدوائية. تشير 'ظروف تهجين صارمة" أو 'ظروف صارمة' إلى الظروف التي في ظلها سوف يهجن مركب 5 أوليجومري المتوالية المستهدفة الخاصة به؛ ولكن على عدد ضئيل من المتواليات الأخرى. يعني "ST يعني إنسان أو حيوان من غير البشرمختار للعلاج أو المعالجة. يشير "هدف" إلى بروتين؛ تعديله يكون مطلوبًا. يشير "جين مستهدف" إلى جين يقوم بتشفير هدف. يعني "استهداف" أو 'مستهدف" عملية تصميم واختيار مركب مضاد لاتجاه النسخ سيهجن بشكل 0 خاص Lass نوويًا مستهدفًا وبحث على تأثير مطلوب. يعني كل من "حمض نووي مستهدف"؛ RNA" مستهدف" و'مستنسخ RNA مستهدف" 5 (ana نووي مستهدف" Liana نوويًا قادرًا على أن يتم استهدافه بواسطة المركبات المضادة لاتجاه النسخ. تعني "منطقة مستهدفة" جزءًا من حمض نووي مستهدف يتم استهداف واحد أو أكثر من المركبات المضادة لاتجاه النسخ له. 5 يعني 'مقطع مستهدف" متوالية النوكليوتيدات الخاصة بحمض نووي مستهدف يتم استهداف مركب alias لاتجاه النسخ له. يشير "الموقع المستهدف 5 إلى غالبية النوكليوتيد عند الموضع 5"
الخاص بمقطع مستهدف. يشير "الموقع المستهدف 3”” إلى غالبية النوكليوتيد عند الموضع 3" الخاص بمقطع مستهدف. يعني 'مقدار فعال علاجيًا" مقدار من عامل صيدلي يوفر فائدة علاجية إلى فرد. تعني 'يعالج" أو 'علاج” أو "العلاج" إعطاء تركيبة لتفعيل تعديل أو تحسين مرض أو Als 5 تعني "قواعد نووية غير معدلة" قواعد البورين أدينين (A) وجوانين (6)؛ وقواعد البيريميدين (7)؛ سيتوزين «(C) وبوراسيل (U) يعني 'نوكليوتيد غير معدل" نوكليوتيد مكون من قواعد نووية طبيعية الحدوث؛ أشطار سكرء وروابط نوكليوزيد بيني. في تجسيدات معينة؛ يكون نوكليوتيد غير معدل عبارة عن نوكليوتيد RNA (أي 8]- 0-ريبو نوكليوزيدات) أو نوكليوتيد DNA (أي 8-70]-ديوكسي ريبو نوكليوزيد). 0 يعني 'مقطع "alia العديد من النوكليوزيدات المعدلة لمنح أوليجو نوكليوتيد خصائص Jie نشاط مثبط معزز» ألفة ارتباط متزايدة لحمض نووي مستهدف؛, أو مقاومة للتحلل بواسطة إنزيمات نوكلياز في جسم الكائن الحي. تجسيدات معينة توفر تجسيدات معينة تركيبات وطرق لتقليل إجمالي التعبير Shell عن COORF72 mRNA والبروتين. توفر تجسيدات معينة تركيبات وطرق لتقليل الصورة المتغيرة من MRNA المصاحبة لمسبب المرض 901»1772. توفر تجسيدات معينة طرق لعلاج؛ منع؛ تحسين؛ أو إبطاء تفاقم الأمراض المصاحبة ل 2 في فرد يكون في dala لذلك. أيضًا تتم دراسة طرق لتحضير عقار لعلاج؛ منع؛ أو 0 تحسين مرض مصاحب ل COORFT2 تتضمن الأمراض المصاحبة ل 090181772 أمراض التنكس العصبي. في تجسيدات معينة؛ قد يكون مرض التنكس العصبي عبارة عن ALS أو FID في تجسيدات معينة؛ قد يكون مرض التنكس العصبي عائليًا أو متقطع الحدوث. يوفر الكشف الحالي التجسيدات المرقمة غير الحصرية التالية: التجسيد 1. مركب مشتمل على أوليجو نوكليوتيد معدل modified oligonucleotide يتكون من 5 12 إلى 30 من النوكليوزيدات المرتبطة dug متوالية قاعدة نووية تشمل على الأقل 8؛ على الأقل 9 على الأقل 10؛ على الأقل 11؛ على الأقل 12 على الأقل 13؛ على الأقل 14 على الأقل
ا على الأقل 16 على الأقل 17؛ على الأقل 18؛ على الأقل 19 أو على الأقل 20 من القواعد النووية المتعاقبة لأي من متواليات القاعدة النووية 560060685 nucleobase الخاصة بالمتواليات أرقام: المتواليات أرقام: 55-22 التجسيد 2. المركب الخاص بالتجسيد 1 حيث تكون متوالية القاعدة النووية الخاصة بالأوليجو 5 نوكليوتيد المعدل متممة بنسبة على الأقل 780؛ على الأقل 781 على الأقل 782 على الأقل 3. على الأقل 784 على الأقل 785 على الأقل 786 على الأقل 787 على الأقل 788 على الأقل 789 على الأقل 790 على الأقل 791 على الأقل 792 على الأقل 793 على الأقل 94 على الأقل 795 على الأقل 796؛ على الأقل 797 على الأقل 798 على الأقل 9 أو 7100 للمتوالية رقم: 1 أو المتوالية رقم 2. 0 التجسيد 3. المركب وفقًا للتجسيدين 1 و2؛ حيث يكون الأوليجو نوكليوتيد المعدل أوليجو نوكليوتيد معدل أحادي الجديلة. التجسيد 4. المركب وفقًا لأي من التجسيدات 3-1؛ حيث يشتمل الأوليجو نوكليوتيد المعدل على رابط نوكليوزيد بيني معدل واحد على الأقل. التجسيد 5. المركب الخاص بالتجسيد 4؛ حيث يكون رابط النوكليوزيد البيني المعدل الواحد على 5 الأقل عبارة عن رابط نوكليوزيد بيني من فوسفوروثيوات. التجسيد 6. المركب Bg للتجسيدين 4 و5؛ حيث يشتمل الأوليجو نوكليوتيد المعدل على رابط من فوسفو داي إستر واحد على الأقل. التجسيد 7. المركب الخاص بالتجسيد 5؛ حيث يكون كل رابط نوكليوزيد بيني معدل عبارة عن رابط نوكليوزيد بيني من فوسفوروثيوات. 0 التجسيد 8. المركب وفقًا لأي من التجسيدات 7-1 حيث يشمل نوكليوزيد واحد على الأقل قاعدة نووية معدلة. التجسيد 9. المركب الخاص بالتجسيد 8؛ حيث تكون القاعدة النووية المعدلة عبارة عن 5-ميثيل التجسيد 10. المركب وفقًا لأي من التجسيدات 9-1 حيث يشتمل نوكليوزيد واحد على الأقل 5 خاص بالأوليجو نوكليوتيد المعدل على سكر معدل.
التجسيد 11. المركب الخاص بالتجسيد 10؛ حيث يشتمل كل نوكليوزيد خاص بالأوليجو نوكليوتيد المعدل على سكر معدل. التجسيد 12. المركب Bag للتجسيدين 10 أو 11؛ حيث يكون السكر المعدل الواحد على الأقل عبارة عن سكر معدل ثنائي الحلقات.
التجسيد 13. المركب الخاص بالتجسيد 12؛ حيث يشتمل السكر ثنائي الحلقات على جسر كيميائي فيما بين الموضعين 4" و2" من السكر؛ حيث يتم اختيار الجسر الكيميائي من: d= «4’=(CH2)2-0-2" 5 CH(R)-0-2’ حيث تكون على حدة C1-C6 H ألكيل» و01-66 ألكوكسي. التجسيد 14. المركب الخاص بالتجسيد 13 حيث يكون الجسر الكيميائي عبارة عن -4
CH(R)-0-2" 0 وحيث R تكون ميثيل. التجسيد 15. المركب الخاص بالتجسيد 13 حيث يكون الجسر الكيميائي عبارة عن -4 :0-2-(1)8© وحيث تكون H التجسيد 16. المركب الخاص بالتجسيد 13 حيث يكون الجسر الكيميائي عبارة عن -4 :0-2-(1)8© وحيث R تكون —CH2-0-CH3 5 التجسيد 17. المركب Wg للتجسيدين 10 أو 11؛ حيث يشتمل السكر المعدل الواحد على الأقل على مجموعة 0-2 -ميثوكسي إيثيل. التجسيد 18. المركب Bg لأي من التجسيدات 10-1 أو 16-12؛ حيث يكون الأوليجو نوكليوتيد المعدل عبارة عن جابمر. التجسيد 19. المركب الخاص بالتجسيد 18؛ حيث يكون الجابمر gapmer عبارة عن أي من 0 جابمر MOE ela 3-8-7 MOE 3-10-7 جابمر MOE 4-8-6 جابمر 4-10-6 (MOE جابمر MOE 6-10-4؛ جابمر MOE 6-8-4« جابمر MOE 7-8-3 أو جابمر -7 MOE 10-3. التجسيد 20. المركب وفقًا لعنصر الحماية 5؛ حيث يشتمل الأوليجو نوكليوتيد المعدل على روابط نوكليوزيد بيني في أي من النتماذج التالية: 5005585585555000055» ¢SO00SSSSSSSSSSO00SS 25 05 *4* 555555 5000000555555+ 550055 500005555555 00055 5000555555555
¢SO0000SSSSSSSSSOSS 55 500555555555000 005 6 **> 55 505555555550000 أو 0000-5 0 00 حيث؛ و < رابط فوسفوروثيوات «phosphorothioate linkage و - رابط فوسفو داي إستر. التجسيد 19. تركيبة تشتمل على المركب وفقًا لأي تجسيد سابق أو ملح من ذلك وواحدة على الأقل من مادة حاملة أو مادة مخففة مقبولة صيدليًا. التجسيد 20. التركيبة الخاصة بالتجسيد 19؛ تشتمل بشكل إضافي على مثبط نوعي لمستنسخ 2 مضاد لاتجاه النسخ. التجسيد 21. التركيبة الخاصة بالتجسيد 20؛ حيث يكون المثبط النوعي لمستنسخ COORFT2 0 المضاد لاتجاه النسخ عبارة عن مركب مضاد لاتجاه النسخ. التجسيد 22. التركيبة الخاصة بالتجسيد 21؛ حيث يكون المركب المضاد لاتجاه النسخ عبارة عن أوليجو نوكليوتيد معدل. التجسيد 23. التركيبة الخاصة بالتجسيد 22؛ حيث يكون الأوليجو نوكليوتيد المعدل أحادي الجديلة. التجسيد 24. التركيبة الخاصة بالتجسيدات 22 أو 23؛ حيث يشتمل الأوليجو نوكليوتيد المعدل 5 على متوالية قاعدة نووية تكون متممة بنسبة على الأقل 780 على الأقل 785 على الأقل 790 على الأقل 791 على الأقل 792 على الأقل 793 على الأقل 794 على الأقل 795 على الأقل 796 على الأقل 7297 على الأقل 98/ على الأقل 299 أو 7100 لمستنسخ 2 المضاد لاتجاه النسخ. التجسيد 25. التركيبة الخاصة بالتجسيد 24؛ حيث يشتمل مستنسخ 69011772 المضاد لاتجاه 0 النسخ على متوالية القاعدة النووية للمتوالية رقم: 18. التجسيد 26. طريقة تشتمل على إعطاء حيوان المركب أو التركيبة الخاص أو الخاصة بأي تجسيد سابق. التجسيد 27. الطريقة الخاصة بالتجسيد 26 حيث يكون الحيوان هو إنسان. التجسيد 28. الطريقة الخاصة بالتجسيدات 26 و27؛ حيث يؤدي إعطاء المركب إلى منع؛ علاج؛ 5 تحسينء أو إبطاء تفاقم مرض مصاحب لذ COORFT2
التجسيد 29. الطريقة الخاصة بالتجسيد 28؛ حيث يكون المرض المصاحب ل 0908772 ناتجًا بواسطة تمدد لتكرار هكسا نوكليوتيد. التجسيد 30. الطريقة الخاصة بالتجسيد 28؛ حيث يكون المرض المصاحب ل COORFT2 هو التصلب الجانبي الضموري (ALS) الخرف الجبهي الصدغي (211)؛ متلازمة التنكس القاعدي القشري «(CBD) المتلازمة الباركنسونية اللانمطية؛ والتنكس الزيتوني الجسري المخيخي (OPCD) التجسيد 31 الطريقة الخاصة بالتجسيدات 30-26 حيث يؤدي الإعطاء إلى تقليل sll النووية. التجسيد 32 الطريقة الخاصة بالتجسيدات 26- 1 3 حيث يؤدي الإعطاء إلى تقليل التعبير hs عن نواتج ترجمة RAN المصاحبة ل COORFT2 0 0908772 عبارة عن أي من بولي-(جليسين -برولين)؛ بولي - (جليسين (OY وبولي - (جليسين -أرجنين). التجسيد 34. استخدام المركب أو التركيبة وفقًا لأي من التجسديات 33-1 لتصنيع دواء لعلاج التجسيد 35. مركب يتكوّن من أوليجو نوكليوتيد معدل Uy للصيغة التالية» أو ملح من ذلك: HO o 5 NZ NH, Sr ap; oJ NH, 0 0 _ 0 0 : SN 0 NH, ot NH» 050 TY ملم En “To CY feo © No 6 No بك نات Oe ١ N NH 0 > و-موب sy vs-h=o Co محاوه ب" د 4 به الاج Yi ١ EEN ات R= SRN TE لأس Reg N NH N 9 مما Hg—p=o < Tr يي به He—f=0 ب سا ما pee 1 وح وب 7 9 HS—P=0 NH 4 A SRE a RRS N i ل 9 ap No 3. محف ~O~ / 0 _ ب محم I. HS—P=0 : 15 wat دا a. 0 ٠ i. . wun = 0 : التجسيد 36 تركيبة تتكوّن من ملح الصوديوم من اوليجو نوكليوتيد معدل وفقا للصيغة التالية 0 ax 1 0
HO. ير NZ NH, op N >< يز 0 N 2 > 5
NZ NH; N— عي ° oJ NH, 0 0 o مدنو AS! o 9 NH ل NH, قثن © So Sh ° AS © .ا 8 0 Na 0 م اي مل oo” 0 Na 0 0 oJ NH, Q o” ومو AD a 0 N NH ل oJ 9 A نوي LAU مدقو i
Na م 0 © © NSN" NH, - NH 0 Na 0 © | 0» 0 Na No و OS وام 0 NH, 0 _ [S] o-p=0 AS Q 0ع <> N 1.3 ©
Na © So Na © No 0 9 NH, 0 06 0 ب م 0 Na 09 | A 0 1 N No "7 لبه wm, 7 2 NH 0
Og he sp=0 <1 IC §-h=0 SN 1 ص0 يريم كيم< لا © 0 | JY Ns 0 2 1S
Na حم 0 0 OH
NH, 0 9 i .ا محلو
S80 oy مس 9 مم
ND Tee 0 0 0 ا 7 o 0
S NH, ؟ oJ y
CL N © 0-0-0 NH 98 1° oN 2 0 5 ل ولا ١لا 0 ألم كي لا الول 0 و 0 o eo. 2 oO صقي 0-£=0
Na Na? . To tet د 2. . i. RP - التجسيد 37 مركب يتكوّن من اوليجو نوكليوتيد معدل وفقا للصيغة التالية أو ملح من ذلك: 0 ow NH, NH,
HO. N" “NZ SNH, oY Nosy 0 LA > ال J) 0” No NTN 0 oJ 0 0 0 o
HS—P=0 N 9 4 Toy 9 pp 9 A H8—P=0 NH 0 4
NTN NH, s A HS-P=0 < NP Ng 0 مم o o لما 0 9 oJ 0 Y 0
HO—P=0 Ty : AS 3 ° 1 - 0 | HS—P=0 | i 0 مسر مس HS—p=0 ory v اذ رم" 0 oJ o : 0 0 -
HO-P=0 HS—P=0 NH oy Cr نح ou? eS “Tor ص NH, 0 | No 0 oJ 0 1° Je HS—P=0 PSN 0
HO-P=0 Ne Sy p= ¢ J o 1 0 NN 9 N 2 0 90 oJ NH, eo . 0 sells 0 6 oJ \ MHz Hs—P=0 AS No - N
Ho-p=0 4 Ty 9 مخضم 0 oo
Lo) 0 J 0 Q 0 o” ° NH, HS—P=0 Tr ® oJ هه HS—P=0 SN o No
Hoo NH 0 LK 0 ~ 9 | A يم 0 0 مما 0 0 OH oJ 6 وحكوبا 8-0-0
2 ع oq ب - “a 0 0 + + م م الا ل : التجسيد 38. تركيبة تتكوّن من ملح الصوديوم من اوليجو نوكليوتيد معدل وفقا للصيغة التالية 0
SY NH, NH,
HO. o N NZ NH, AS رضت بم o DY AL 6 ol 0 0 0 © ودع SL py o N i ث8 NH ® O SN s-P=0 Or oe 9 34 7 ا <> NTN, لاسي صمي ول | مم NH, ص 0 Na 0 0 © 9 oJ 0 لما 0 9-0 NH © Or 0 o
Na 2 Or oo LA ومو N 0 "ل © ا وم 0 © 4 NH ~~ 0 Na 0 الك PN 0 وريم“ كيم- لا 6 ot o 0 0 0 ©o-p=0 Or ©s—p=0 Or Sd 1 Pa 0 فى I Ro Na © و NS 9 0 0 حبوى NH 0 NH Na 09 | A 9 oJ NH, ? N. ’ "0
Sop Os-p=0 of ON 0 0-P=0 Ne Sy : ¢ [ J _ 6 > ال J ® © NSN 7 و ملا NTN Na 0 9 oS وم 9. , جب ماه 0 © lo} 0 oS 8 ومو © ع Or Na No b= ا ol 5 0 0 ص 0 مس 9 أو
Na 0 0 0 oJ 0 3 0 5 NH, د وقوه 1 ةمون i ©s-p=0 AD ne 9 ول تت 4 Or م © No ص0 Na A Na بن لجف 0 مما oJ 0 0 دكي ب
Na ع 2 ع .. 5 . + - - م 0 0 + Rr ب التجسيد 39. مركب يتكوّن من اوليجو نوكليوتيد معدل وفقا للصيغة التالية أو ملح من ذلك: o
N o NH ¢ Tow 2
HOS N NPN Tr AN بم o No No o oJ NH; 0 0 _
I 0
H8—p=0 aS > NH, 1S NH, 09 No Hs-P=0 بح 0 بح
HO-P=0 pegs a Ee 0 0 0
TIS mw 5 Regt ووب > 9 NH o/ o PS HS-P=0 | BY 9 NH o No o No Hs—p=0 My 4 لب ONS 6 oJ م 2) NH. 0 _ [] []
HO-P=0 Or HS—P=0 NN 7 oS iJ ° vo © i v HS bo He o p= eu) ب لها Ra 0 6 N N 2 صقم 1 محلو - 1 0 "
IN AGL 0 NSN SNH, o” 0 ول 0 1 OH oJ
NH, 0 y 9 o a0 HS—P=0 NH p= 4 N : 34 7 متم CT) NERS سن 7 ليا 0 NH; 9 re HO-P=0 ot يو Sn
HS—P=0 SN 0 > ال 0 | A NN
No 0 0 = [= مم محلو 0 s oq ب - الا ل + + 0 0 م - ب : التجسيد 40. تركيبة تتكوّن من ملح الصوديوم من اوليجو نوكليوتيد معدل وفقا للصيغة التالية 5
0 a. 0 NH,
HO. N NP NH, NH SN 0 A LA 0 لي © لي 0 لذ NH, 0 0 [] _ ص0 مك بوه N 0 © NH; oJ NH;
N © © “No © وحمو AQ o 0 بح 8 0 Na © A 0-p=0 LA > له 0 @ O N70 0 0 Na 0 0 oJ NH, 0 0 وو SN al NH oJ ® 9 PN 8-0-0 LL eo. © NH,
Na لالد © 6 NTO s-p=0 Ne 0 Na © اله ل N ص0 0 Na N NZ 0 oJ 0 0 NH, 0 P
Sie: fe وح 6 © 0 ب No Na © NTN 0 7 0 NH, 0 0 1 N 6 ب أ ١ فى ا 0 0 N N—~NZ oo | oS o Og po ¢ To ° N
S—P=0 1 َم ل اسن 0 1 لب © Oo انس 0
Na REE Na 0 OH له ل 0 a SE TU 2 My ooo CM ب 2 | 4 اج © N NN " لما pie 9 NH o NH, ? oJ 2 0. ©0-P=0 Ny 8-1-0 SN 4 ¢ 1 J © 0 A © عير Na N70 Na 0 0 موع o-p=0 ب Na Nel . fw “ Ze £ 0 5 - في ٠ ب ٠ 0 ب ب رداب التجسيد 41 مركب يتكوّن من اوليجو نوكليوتيد معدل وفقا للصيغة التالية أو ملح من ذلك: fo a0 NH. ¢ || 0 2
Ho. اي ا =N 0 2 [NH LA - Bd Ro lo) ot NH, 0 0 ددحمو 1 bs NH, 1 NH, 0 A بيد 0 بخ< وحمو 0 ملس 6 8 لا Ho-P=0 “Ko ~~ 0 0 0 0 4 o Hz py a ص ب N
Hoe AN HS-P=0 Or 9 ع به ول 0 و HO-p=0 a) ry R=? كا اذ 0 لت o 0 NH; == o
HO-P=0 محم مي Ne é yr 6 34 6 0 ل NH,
No NON HO-P=0 دا 0 0 1 ¢ [ N 0 o لي الس 9 7 Q ale 6 p= HS—P=0 2 بح محبوه 3 ¢ 1 Pon, o
No o 0 oJ o ا وحمو احا 0 6 ) . NH حوب Jr NH N ny
HS—P=0 Pa SN 5 > pig 6 0 N 0 NNT ربريم- o NH
N 0 2 == pa Lo رخبم Y NH, 3 NH; HS—P=0 > بر ال b= ~N HS—P=0 Ny 6 NTN
HS—-P=0 CY jx 1 0 _ 9 No NTN 0 ما > © On ص0 9 وحم ون Hoo gy 0 0 1 + + 0 a ب - : التجسيد 42 تركيبة تتكوّن من ملح الصوديوم من اوليجو نوكليوتيد معدل وفقا للصيغة التالية
— 2 9 —
HO. Lox, 1 iy الما * ed OL, 9 ل NH 0 0 o 2 يرج ددم 1 NH, oJ NH, y PS g Be ميم LX 6 ل NH; 0 0 0 0 مم8 AGS 0 وو Or 1 NH, مدطو ملس ال ونس فقي Ne يرج با ey ا ooo ه٠ 0 Ne == -
RENE Sd ير مق ل اذا ما Cr لتك مل ey
Ne” 0 ve " ° pe 2 N 1 د 0 با 3 oh ea o =p ¢ gy, Na é S oy Ha يما o” NH =A ed Lo" يعم 9 oo os deo Cy o be ) N ® = "1 @ LN 4 i» " ° o”
Na ما 0 Na 6 - وح © قوت ومو oS التجسيد 43. المركب أو التركيبة وفقًا لأي من التجسديات 25-1 أو 42-35( حيث يكون بشري 09081772 mRNA المركب قادرًا أو تكون أو التركيبة قادرة على تقليل التعبير الوراثي عن أو بروتين في كائن تديي. التجسيد 44. المركب أو التركيبة وفقًا لأي من التجسديات 25-1 أو 42-35؛ حيث يكون المركب قادرًا أو تكون أو التركيبة قادرة على تحسين عرض واحد على الأقل خاص بالتصلب الجانبي الضموري ((ALS) الخرف الجبهي الصدغي (210)؛ متلازمة التنكس القاعدي القشري (CBD) المتلازمة الباركنسونية اللانمطية؛ أو التنكس الزبتوني الجسري المخيخي .(OPCD) التجسيد 45. المركب أو التركيبة الخاص أو الخاصة بالتجسيد 44؛ حيث يكون العرض الخاص ب ALS 10 عبارة عن أي من القصور الحركي» القلق» RETR as التجسيد 46. المركب أو التركيبة Gg لأي من التجسديات 25-1 أو 42-35؛ حيث يكون المركب قادرًا أو تكون أو التركيبة قادرة على تأخير تفاقم المرض. التجسيد 47. المركب أو التركيبة Gg لأي من التجسديات 25-1 أو 42-35؛ حيث يكون المركب قادرًا أو تكون أو التركيبة قادرة على تمديد فترة البقاء على قيد الحياة. 5 التجسيد 48. المركب أو التركيبة Be لأي من التجسديات 25-1 أو 42-35؛ حيث يكون المركب قادرًا أو تكون أو التركيبة قادرة على تقليل نواتج ترجمة RAN المصاحبة ل COORFT2
— 0 3 — التجسيد 49 المركب أو التركيبة وفقًا لأي من التجسديات 25-1 أو 42-35 حيث يكون المركب قادرًا أو تكون أو التركيبة قادرة على اختزال الصور المتغيرة من MRNA المصاحبة لمسبب المرض 0908772 انتقائيًا. التجسيد 50. المركب أو التركيبة Gg لأي من التجسديات 25-1 أو 42-35؛ حيث يكون المركب قادرًا أو تكون أو التركيبة قادرة على تقليل Hall النووية. التجسيد 51. مركب يتكوّن من أوليجو نوكليوتيد معدل وفقًا للصيغة التالية؛ أو ملح من ذلك: 0 N 1 He دم i» no a ap ب 7 ب 0 NH, oe AS ° 2 NH, 1 NH, .ا 9 No HS—P=0 AS 6 ١ No ا No 9 نما Rg لما 5 0 أ ود وحم ون HR CL ا b=; RA o NH; 0 NH; ey o ° NH, ب 0 ١ 5 CL, 7 IN CL pg = ١ "+ 0 0 مما =e ميم يب ملم PN ) / OH oJ 0 0 0* يم 0 or محون 9 hed "ELLE No) ص hy NH, 2 ot i Ha-f=o ap HO g 0 eu به وحمو Heo التجسيد 52. طريقة تشتمل على إعطاء حيوان المركب الخاص بالتجسيد 51. التجسيد 53. الطريقة الخاصة بالتجسيد 52؛ حيث يكون الحيوان هو إنسان. التجسيد 54 الطريقة الخاصة بالتجسيد 53« حيث يؤدي الإعطاء إلى تثبيط 4002 التجسيد 55. الطريقة الخاصة بالتجسيد 53؛ حيث يؤدي الإعطاء إلى (aie علاج؛ تحسين؛ أو إبطاء تفاقم مرض مصاحب ل COORFT2 التجسيد 56. الطريقة الخاصة بالتجسيد 55؛ حيث يكون المرض المصاحب ل COORFT2 ناتجًا بواسطة تمدد لتكرار هكسا نوكليوتيد.
التجسيد 57 الطريقة الخاصة بالتجسيد 55 حيث يكون المرض المصاحب ل CO90RF72 هو أي من التصلب الجانبي الضموري (81.5)؛ الخرف الجبهي الصدغي ¢(FTD) متلازمة التنكس القاعدي القشري (CBD) المتلازمة الباركنسونية اللانمطية؛ أو التنكس الزيتوني الجسري المخيخي (OPCD) . التجسيد 58 الطريقة الخاصة بالتجسيد 53« حيث يؤدي f لإعطاء إلى تقليل البؤر النووية. التجسيد 59. الطريقة الخاصة بالتجسيد 53؛ حيث يؤدي الإعطاء إلى تقليل التعبير الوراثي عن نواتج ترجمة RAN المصاحبة ل 090181772. التجسيد 60. الطريقة الخاصة بالتجسيد 59« حيث تكون نواتج ترجمة RAN المصاحبة ل 2 عبارة عن أي من بولي -(جليسين -برولين)؛ بولي- (جليسين -ألانين)؛ وبولي - FIC ) 10 جليسين- أر< جنين). التجسيد 61. تركيبة تتكوّن من ملح الصوديوم من أوليجو نوكليوتيد معدل By للصيغة التالية: a N 0 Tr N He ¢ جلا HO N"“N""NH, 4 NH S ° 1 o ae 0 oJ NH, 0 0 P 6 NH, iJ NH, : بن مدب 5 ل An (Fa ١ Na © 0 Ne © لبا ”0 oJ NH; 0 yy 0 o-p= > 9 i ا م محا 0 ١ ١ TL, © oy | ولا ١لا 09و 0 Na لما No woo سما © مما oJ NH o 9 NH, © A 0” وحمو ير 0-P=0 Ne 6 CL, Na” é CL, og 0 ad NH, ee د جك ا eC كح ١ 0 ° مم 6 دير له 9 N Nn 6 ا SN محموة CL, Na © 0 : OH oJ 0 م oo R= ne N 0 TL ° 1 : للم oy موه Na. ey 0 / _ NH, Q 1 i > مم 90-0 يرا مفو يسك Na 0 0 Na ° N الما ما به ©o-p=0 مدقو Ne : لمم التجسيد 62 طريقة تشتمل على إعطاء حيوان التركيبة الخاصة بالتجسيد 60 التجسيد 63. الطريقة الخاصة بالتجسيد 62؛ حيث يكون الحيوان هو إنسان.
التجسيد 64. الطريقة الخاصة بالتجسيد 63؛ حيث يؤدي الإعطاء إلى تثبيط COORFT2 التجسيد 65. الطريقة الخاصة بالتجسيد 62؛ حيث يؤدي الإعطاء إلى (aie علاج؛ تحسين؛ أو إبطاء تفاقم (gaye مصاحب ل COORFT2 التجسيد 66. الطريقة الخاصة بالتجسيد 65؛ حيث يكون المرض المصاحب ل 0908772 ناتجًا بواسطة تمدد لتكرار هكسا نوكليوتيد. التجسيد 67. الطريقة الخاصة بالتجسيد 65؛ حيث يكون المرض المصاحب ل 09081772 هو أي من التصلب الجانبي الضموري (ALS) الخرف الجبهي الصدغي (FID) متلازمة التنكس القاعدي القشري (CBD) المتلازمة الباركنسونية اللانمطية؛ أو التنكس الزيتوني الجسري المخيخي .(OPCD) 10 التجسيد 68 الطريقة الخاصة بالتجسيد 63؛ حيث يؤدي الإعطاء إلى تقليل sll النووية. التجسيد 69. الطريقة الخاصة بالتجسيد 63؛ حيث يؤدي الإعطاء إلى تقليل التعبير الوراثي عن نواتج RAN daa yi المصاحبة ل .COORF72 التجسيد 70. الطريقة الخاصة بالتجسيد 09« حيث تكون نواتج ترجمة RAN المصاحبة ل 2 عبارة عن أي من بولي -(جليسين -برولين)؛ بولي- (جليسين -ألانين)؛ وبولي - 5 (جليسين-أرجنين). المركبات المضادة لاتجاه النسخ تتضمن المركبات الأوليجومرية؛ على سبيل المثال لا الحصرء أوليجو نوكليوتيدات؛ أوليجو نوكليوزيدات؛ نظائر أوليجو نوكليوتيد. عوامل محاكية لأوليجو نوكليوتيد؛ المركبات المضادة لاتجاه النسخ؛ الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ؛ 5 SIRNAS قد يكون مركب أوليجومري lad 0 الاتجاه "mall لحمض نووي مستهدف؛ مما يعني أنه قادر على الخضوع إلى تهجين بحمض نووي مستهدف من خلال الارتباط بالهيدروجين. في تجسيدات معينة؛ يكون لمركب alias لاتجاه النسخ متوالية قاعدة نووية تشتمل؛ عند كتابتها في الاتجاه من 5" إلى 3؛ على المتمم العكسي للمقطع المستهدف من حمض نووي مستهدف يتم استهدافه بالنسبة له. في هذه التجسيدات المحددة؛ يكون لأوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ 5 متوالية قاعدة نووية تشتمل؛ عند كتابتها في الاتجاه من 5" إلى 03 على المتمم العكسي للمقطع المستهدف من حمض نووي مستهدف يتم استهدافه بالنسبة له.
في تجسيدات معينة؛ يكون مركب مضاد لاتجاه النسخ مستهدف لحمض نووي ل 09081772 بطول من 12 إلى 30 وحدة ثانوية. بصياغة أخرى؛ تكون هذه المركبات المضادة لاتجاه النسخ مكونة من 2 إلى 30 وحدة ثانوية مرتبطة. في تجسيدات معينة؛ يكون المركب المضاد لاتجاه النسخ Use من 8 إلى 80؛ من 12 إلى 50؛ من 15 إلى 30؛ من 18 إلى 24؛ من 19 إلى 22؛ أو 20 من الوحدات الثانوية المرتبطة. في تجسيدات معينة؛ تكون المركبات المضادة لاتجاه النسخ بطول من 8؛ 9 ]161514131 23222120191817 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49« 50 51 52 53 54 55 وي 57 قي 59 60 61 62 63 64 65 66 67« 68« 69« 70 712071 13 74 715 716 77 78 719 أو 80 من الوحدات الثانوية 0 المرتبطة؛ أو نطاق تم تعريفه بواسطة اثنين من القيم السابقة. في بعض التجسيدات يكون المركب المضاد لاتجاه النسخ هو أوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه ail) وتكون الوحدات الثانوية المرتبطة هي النوكليوزيدات. في تجسيدات معينة قد تكون الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ المستهدفة لحمض نووي ل COORFT2 مقصرة أو مشذبة. على سبيل المثال؛ قد يتم حذف وحدة ثانوية فردية من الطرف 5" cud) 5 عند الموضع 5”)؛ أو على نحو بديل من الطرف 73 (التشذيب عند الموضع 3"). قد يحتوي مركب مضاد لاتجاه النسخ مستهدف لحمض نووي ل 0908772 مقصر أو مشذب على اثنتين من الوحدات الثانوية محذوفة من الطرف 5" أو على نحو بديل قد يحتوي على اثنتين من الوحدات الثانوية المحذوفة من الطرف 3" من المركب المضاد لاتجاه النسخ. على نحو بديل؛ قد يتم تشتيت النوكليوزيدات المحذوفة خلال المركب المضاد لاتجاه النسخ؛ على سبيل المثال» في مركب 0 مضاد لاتجاه النسخ محتوي على نوكليوزيد محذوف من الطرف 5 ونوكليوزيد واحد محذوف من الطرف 3". عندما توجد وحدة ثانوية إضافية فردية في مركب مضاد لاتجاه النسخ مطوّلء قد يتم وضع الوحدة الثانوية الإضافية عند الطرف 5" أو 3 من المركب المضاد لاتجاه النسخ. عندما توجد اثنين أو أكثر من الوحدات الثانوية الإضافية؛ قد تكون الوحدات الثانوية المضافة مجاورة لبعضها البعض؛ 5 على سبيل المثال» في مركب مضاد لاتجاه النسخ محتوي على اثنتين من الوحدات الثانوية المضافة إلى الطرف 5” (الإضافة عند الموضع 5”)؛ أو على نحو بديل إلى الطرف 3” (الإضافة
عند الموضع 3”)؛ من المركب المضاد لاتجاه النسخ. على نحو بديل؛ قد يتم تشتيت الوحدات الثانوية المضافة خلال المركب المضاد لاتجاه النسخ؛ على سبيل المثال» في مركب مضاد لاتجاه النسخ محتوي على وحدة ثانوية واحدة مضافة إلى الطرف 5" ووحدة ثانوية واحدة مضافة إلى الطرف 3 قد يكون من الممكن زيادة أو تقليل طول مركب مضاد لاتجاه النسخ, مثل أوليجو نوكليوتيد مضاد
لاتجاه النسخ, و/أو إدخال قواعد غير متوافقة بدون إزالة النشاط. على سبيل المثال» في Woolf et (Proc.
Natl.
Acad.
Sci.
USA 89:7305-7309, 1992) al. تم اختبار سلسلة من الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ بطول قواعد نووية 25-13 Lad يتعلق بقدرتها على الحث على حدوث انشطار ل RNA مستهدف في نموذج حقن خلية بيضة. كانت الأوليجو نوكليوتيدات المضادة
0 الاتجاه النسخ بطول 25 قاعدة نووية مع 8 أو 11 قاعدة غير متوافقة بالقرب من أطراف الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ قادرة على توجيه انشطار نوعي إلى MRNA المستهدف, بالرغم من كونه إلى مدى أقل من الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ التي لم تحتو على أية قواعد غير متوافقة. بالمثل؛ تم تحقيق استهداف انشطار نوعي باستخدام أوليجو نوكليوتيدات مضادة لاتجاه النسخ من 13 قاعدة نووية؛ متضمنة تلك المحتوية على 1 أو 3 من القواعد غير المتوافقة.
أوضح dd.
Natl.
Cancer Inst. 93:463-471( Gautschi et al. مارس 2001( قدرة أوليجو نوكليوتيد به تكامل بنسبة 7100 ل mRNA 6501-2 ومحتوي على 3 قواعد غيرمتوافقة مع bel—xL mRNA على تقليل التعبير الوراثي عن كل من bel=xLg bel=2 في المعمل وفي جسم الكائن الحي. علاوة على ذلك أوضح الأوليجو نوكليوتيد هذا نشاط ضد الورم فعال في جسم الكائن الحي. (Nuc.
Acid.
Res. 16:3341-3358,1988) Dolnick y Maher idl سلسلة من الأوليجو
0 نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ بها 14 قاعدة نووية مترادفة؛ والأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ بها 28 و42 قاعدة نووية مكونة من متوالية من اثنين أو ثلاثة من الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ المترادفة؛ على التوالي» فيما يتعلق بقدرتها على إيقاف ترجمة DHFR بشري في تجرية خلية شبكية لأرنب. كان كل من الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الثلاثة المشتملة على 14 قاعدة نووية بمفرده قادرًا على تثبيت الترجمة؛ بالرغم من أنه عند مستوى
5 أكثر اعتدالاً من الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ المحتوي على 28 أو 42 قاعدة نووية. بواعث المركب المضاد لاتجاه النسخ
في تجسيدات معينة؛ قامت المركبات المضادة لاتجاه النسخ المستهدفة لحمض نووي ل 0901772 على نحو كيميائي بتعديل الوحدات الثانوية الموضوعة في أنماط أو بواعث؛ لمنح المركبات المضادة لاتجاه النسخ خصائص Jie نشاط مثبط معزز» ألفة ارتباط متزايدة لحمض نووي مستهدف, أو مقاومة للتحلل بواسطة إنزيمات نوكلياز في جسم الكائن الحي.
تحتوي المركبات المضادة لاتجاه النسخ الخيمرية نمطيًا على منطقة واحدة على الأقل معدلة بحيث يتم منح مقاومة متزايدة لتحلل النوكلياز» امتصاص خلوي متزايد؛ ألفة ارتباط متزايدة للحمض النووي المستهدف؛ و/أو نشاط مثبط متزايد. قد تعمل منطقة ثانية من مركب مضاد لاتجاه النسخ خيمري اختيارتًا كركيزة ل 11 RNase لنوكلياز داخلي خلوي؛ تقوم بإجراء انشطار لجديلة RNA الخاصة ب RNA:DNA مزدوج.
يتم اعتبار المركبات المضادة لاتجاه النسخ المحتوية على باعث جابمر مركبات مضادة لاتجاه النسخ خيميرية. في جابمر يتم وضع منطقة داخلية محتوية على العديد من النوكليوتيدات التي تدعم انشطار Lad RNaseH بين المناطق الخارجية المحتوية على العديد من النوكليوتيدات المتميزة كيميائيًا عن النوكليوزيدات الخاصة بالمنطقة الداخلية. في حالة أوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ محتوي على باعث جابمرء يعمل مقطع الفجوة بشكل عام باعتباره الركيزة لانشطار النوكلياز
5 الداخلي؛ بينما تشتمل المقاطع الجناحية على نوكليوزيدات معدلة. في تجسيدات معينة؛ يتم تمييز المناطق الخاصة بجابمر بواسطة أنواع أشطار السكرالمشتمل كل منها على منطقة مميزة. قد تتضمن أنواع أشطار السكر التي يتم استخدامها لتمييز المناطق الخاصة بجابمر في بعض التجسيدات —B 0-ريبو نوكليوزيدات؛ (SoD ريبو نوكليوزيدات؛ 2'-نوكليوزيدات معدلة (قد تتضمن 2”- نوكليوزيدات معدلة هذه 27-1101 و0113-0-2؛ من بين أخرى)؛ ونوكليوزيدات معدلة لسكر
شائي الحلقات (قد تتضمن النوكليوزيدات المعدلة للسكر ثنائي الحلقات هذه تلك المحتوية على جسر 0112(0-0-2)-”4؛ حيث =n 1 أو =n 2 و:0112-0-012-2-:4). يُفضل؛ تشتمل كل منطقة متميزة على أشطار سكر غير منتظمة. كثيرًا ما يتم وصف Cael الجناح - الفجوة - الجناح باعتباره 74-7-27» حيث "1" تمثل طول منطقة الجناح 5" "7" تمثل طول منطقة الفجوة؛ و72" Jia طول منطقة الجناح 3”. على النحو المستخدم هناء يكون لجابمر موصوف باعتبارة X="
2-2" تشكيل بحيث يتم وضع مقطع الفجوة بشكل مباشر بجوار كل من المقطع الجناحي عند الموضع 5" والمقطع الجناحي 3". ومن ثم؛ لا توجد نوكليوتيدات متداخلة فيما بين المقطع الجناحي
عند الموضع 5” ومقطع الفجوة»؛ أو مقطع الفجوة والمقطع الجناحي 3”. يمكن أن يشتمل أي من المركبات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة هنا على باعث جابمر. في بعض التجسيدات؛ 36 و7 تكونا متشابهتين» في تجسيدات أخرى تكونا مختلفتين. في تجسيد مفضل؛ 7 تكون فيما بين 8 و15 من النوكليوتيدات. X 57 أو 7 يمكن أن تكون Ul من 5-4-3201 6» 7ق 10.9 12.11 161514013 18:17 20.19؛ 30:25 أو أكثر من النوكليوتيدات. ومن ad تتضمن الجابمرات الموصوفة lia بدون حصر؛ على سبيل المثال 5-10-5 4-10-5« 4-10-4؛ 4- 3-0 3-10-3 2-10-2 5-و-ي 4-9-5« 5-9-4« 5-8-5« 4-8-5« 5-8-4« 5- 5-7 5-7-4 4-7-5. أو 4-7-4 في تجسيدات معينة؛ يحتوي المركب المضاد لاتجاه النسخ على باعث 'وينجمر wingmer محتوي 0 على تشكيل جناح فجوة أو فجوة - جناح؛ أي تشكيل 1-7 أو 7-27 كما هو موصوف Lad سبق لتشكيل الجابمر. ومن ead تتضمن تشكيلات ونجمر الموصوفة هناء دون حصرء على سبيل المثال 5- 10< 4-8« 12-4 4-12 14-3 2-16 1-18 10-23-10 10-1 2-6 13-2 5- ١3 -8. أو 8-6 في تجسيدات معينة؛ تتضمن المركبات المضادة لاتجاه النسخ المستهدفة لحمض نووي ل 5 09081772 باعث جابمر 5-10-5. في تجسيدات معينة؛ المركبات المضادة لاتجاه النسخ المستهدفة لحمض نووي ل 09081772 باعث جابمر 5-8-5 في تجسيدات معينة؛ تشتمل المركبات المضادة لاتجاه النسخ المستهدفة لحمض نووي ل 0901172 على تعديلات على السكر في أي من الأنماط التالية: ceeekkdddddddkkeee ¢ckekddddddddkekee § <kekeddddddddekeke «ekddddddddekekeee «eekkddddddddkkeee 0 حيث؛ = نوكليوزيد معدل من 2'-0-ميثوكسي إيثيل d = 2"-ديوكسي نوكليوزيد» و =k توكليوزيد CEt 25 في تجسيدات معينة؛ يشتمل مركب مضاد لاتجاه النسخ مستهدف لحمض 5550( ل COORFT2 على باعث فجوة ضيقة. في تجسيدات معينة.؛ يشتمل أوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ بفجوة ضيقة
مستهدف لحمض نووي ل 09081772 على مقطع فجوة من 89 7 أو 26 ديوكسي نوكليوتيدات موضوعة بشكل مباشر بجوار وفيما بين المقاطع الجناحية الخاصة ب 5؛ 4 3. 2؛ أو 1 من النوكليوزيدات المعدلة كيميائيًا. في تجسيدات معينة؛ يشتمل التعديل الكيميائي على سكر ثنائي الحلقات. في تجسيدات معينة؛ يشتمل السكر ثنائي الحلقات على جسر من الموضع 4" إلى الموضع 2" مختار من بين: الجسر ”0112(0-0-2)-”4؛ حيث « تكون 1 أو 2؛ و-012-”4 '0-0112-2. في تجسيدات معينة؛ يشتمل السكر ثنائي الحلقات على جسر -0-(01)003-:4 8027 تجسيدات معينة؛ يشتمل التعديل الكيميائي على 2”-شطر سكر معدل غير ثنائي الحلقات. في تجسيدات معينة؛ يشتمل 2”-شطر السكر المعدل غير ثنائي الحلقات على مجموعة 2-0 = ميثيل إيثيل أو مجموعة 0-2- ميثيل. 0 الأحماض النووية المستهدفة؛ المناطق المستهدفة ومتواليات النوكليوتيد تتضمن متواليات النوكليوتيد التي تقوم بتشفير 090141772؛ دون juan ما يلي: متمم الوصول إلى بنك الموروثات رقم NM_001256054.1 (المتضمن هنا باعتباره المتوالية رقم: 1)؛ متمم الوصول إلى بنك الموروثات رقم NT_008413.18 المشذب من قاعدة نووية من 27535000 إلى 27565000 (المتضمن هنا باعتباره المتوالية رقم: 2)؛ الوصول إلى بنك الموروثات رقم 5 30068108.1 (المتضمن هنا باعتباره المتوالية رقم: 3)؛ الوصول إلى بنك الموروثات رقم NM_018325.3 (المتضمن هنا باعتباره المتوالية رقم: 4)؛ الوصول إلى بنك الموروثات رقم 1 ا(لمتضمن هنا باعتباره المتوالية رقم: 5 الوصول إلى بنك الموروثات رقم NM_145005.5 (المتضمن هنا باعتباره المتوالية رقم: 6)؛ الوصول إلى بنك الموروثات رقم 1 را(لمتضمن هنا باعتباره المتوالية رقم: oT الوصول إلى بنك الموروثات رقم BUI94591.1 0 (المتضمن هنا باعتباره المتوالية رقم: 8)» محدد المتوالية 4141_014_A (المتضمن هنا باعتباره المتوالية رقم: 9)؛ ومحدد المتوالية 4008_73_A (المتضمن هنا باعتباره المتوالية رقم: 10)؛ والوصول إلى بنك الموروثقات رقم NW_001101662.1 المشذب من النوكليوزيدات من 8522000 إلى 8552000 (المتضمن هنا باعتباره المتوالية رقم: 11). يتم إدراك أن المتوالية الموضحة في كل متوالية رقم في الأمثلة المتضمنة هنا تكون مستقلة عن أي 5 تعديل يتم إجراؤه على شطر سكرء رابط نوكليوزيد بيني أو قاعدة نووية. بهذه الكيفية؛ قد تشتمل المركبات المضادة لاتجاه النسخ المحددة بواسطة متوالية رقم على؛ على حدة؛ واحد أو أكثر من
التعديلات التي تم إجراؤها على شطر سكرء رابط نوكليوزيد بيني؛ أو قاعدة نووية. توضح المركبات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة بواسطة (Isis No) Isis Number توليفة من متوالية القاعدة النووية وباعث. في تجسيدات معينة؛ تكون منطقة مستهدفة عبارة عن منطقة محددة US خاصة بالحمض النووي المستهدف. على سبيل المثال؛ قد تشتمل منطقة مستهدفة على UTR 37 UTR 5 إكسون؛ إنترون» موصل إكسون/إنترون؛ منطقة تشفير» منطقة بدء ترجمة؛ dilate إنهاء dan jill أو منطقة حمض نووي محددة أخرى. يمكن الحصول على المناطق المحددة هيكليًا ل COORFT2 عن طريق رقم وصول من قواعد البيانات المتواليات NCBI Jie ويتم تضمين هذه المعلومات عنا كمرجع. في تجسيدات معينة؛ قد تشتمل منطقة مستهدفة على المتوالية من موقع مستهدف 5 خاص بمقطع 0 مستهدف واحد Jab المنطقة المستهدفة إلى موقع مستهدف 3 ald بمقطع مستهدف لآخر داخل نفس المنطقة المستهدفة. يتضمن الاستهداف تحديد مقطع مستهدف واحد على الأقل يتهجن به مركب مضاد لاتجاه النسخ؛ بحيث يحدث تأثير مطلوب. في تجسيدات dime يتمثل التأثير المطلوب في انخفاض في مستويات حمض نووي مستهدف ل mRNA في تجسيدات cine يتمثل التأثير المطلوب في انخفاض 5 مستوبيات البروتين المشفر بواسطة الحمض النووي المستهدف أو تغير ha ظاهري مصاحبة للحمض النووي المستهدف. قد تحتوي منطقة مستهدفة على واحد أو أكثر من المقاطع المستهدفة. قد تتداخل العديد من المقاطع المستهدفة داخل منطقة مستهدفة. على نحو بديل؛ قد تكون غير متداخلة. في تجسيدات معينة؛ يتم فصل المقاطع المستهدفة داخل منطقة مستهدفة بواسطة ما لا يزيد عن حوالي 300 من 0 النوكليوتيدات. في تجسيدات معينة؛ يتم فصل المقاطع المستهدفة داخل منطقة مستهدفة بواسطة عدد من النوكليوتيدات يبلغ؛ يبلغ حوالي؛ لا يتعدى لا يتعدى حوالي؛ 250« 200؛ 150 100< 90؛ 0 60« 50؛ 40« 30؛ 20 أو 10 نوكليوتيدات على الحمض النووي المستهدف؛ أو يكون عبارة عن نطاق محدد بواسطة أي اثنتين من القيم السابقة. في تجسيدات معينة؛ يتم فصل المقاطع المستهدفة داخل منطقة مستهدفة بواسطة ما لا يزيد عن» أو ما لا يزيد عن حوالي» 5 نوكليوتيدات 5 على الحمض النووي المستهدف. في تجسيدات معينة؛ تكون المقاطع المستهدفة متجاورة. تتم دراسة
المناطق المستهدفة المحددة بواسطة نطاق محتوي على حمض نووي بادئ يكون عبارة عن أي من المواقع المستهدفة 5” أو المواقع المستهدفة 3” المدرجة هنا. قد توجد المقاطع المستهدفة الملائمة في UTR ”5؛ منطقة تشفير؛ UTR 37؛ إنترون؛ إكسون؛ أو موصل إكسون/إنترون. تكون المقاطع المستهدفة المحتوية على رامزة بدء أو رامزة إيقاف أيضًا عبارة عن مقاطع مستهدفة ملائمة. قد يستثني مقطع مستهدف ملائم بشكل خاص منطقة محددة هيكليًا معينة مثل رامزة البدء أو رامزة الإيقاف. قد يتضمن تحديد المقاطع المستهدفة الملائمة Ale تتعلق بمتوالية حمض نووي مستهدف بمتواليات أخرى خلال مجموعة العوامل الوراثية. على سبيل (JU قد يتم استخدام خوارزم 7 لتحديد مناطق التشابه بين الأحماض النووية المختلفة. يمكن أن تمنع هذه المقارنة اختيار متواليات المركب المضاد لاتجاه النسخ التي قد تتهجن بطريقة غير نوعية بمتواليات بخلاف حمض نووي مستهدف مختار (أي؛ متواليات غير مستهدفة أو خارج نطاق الاستهداف). قد يكون هناك تنوع في النشاط (على سبيل JU كما هو محدد بنسبة مئوية من انخفاض مستويات الحمض النووي المستهدف) للمركبات المضادة لاتجاه النسخ داخل منطقة مستهدفة. في تجسيدات معينة؛ تكون الانخفاضات في مستويات mRNA 090181772 دالة على تثبيط التعبير 5 الوراثي عن 0908772. تكون الانخفاضات في مستويات بروتين 09081772 دالية أيضًا على تثبيط التعبير الوراثي عن mRNA المستهدف. يكون الانحفاض في وجود بور COORFT2 RNA الممددة دالاً على تثبيط التعبير الوراثي عن .COORFT2 بشكل إضافي؛ تكون تغيرات النمط الظاهري دالة على تثبيط التعبير الوراثي عن \CIORFT2 على سبيل المثال؛ قد تكون دالة الحركة والتنفس المحسنة دالة على تثبيط التعبير Shall عن 09081772. 0 التهجين في بعض التجسيدات؛ يحدث التهجين فيما بين مركب مضاد لاتجاه النسخ تم الكشف عنه هنا وحمض نووي ل .COORFT2 تنطوي الآلية الأكثر شيوعًا الخاصة بالتهجين على ارتباط بهيدروجين (على سبيل المثال؛ من نوع Hoogsteen «Watson—Crick أو Hoogsteen عكسي) فيما بين القواعد النووية المتممة الخاصة بجزيئات الحمض النووي. 5 يمكن أن يحدث التهجين في ظل ظروف متنوعة. تكون الظروف الصارمة معتمدة على المتوالية ويتم تحديدها بواسطة طبيعة وتركيبة جزيئات الحمض النووي التي سيتم تهجينها.
تكون طرق تحديد ما إذا كانت متوالية قابلة للتهجين بشكل خاص بحمض نووي مستهدف معروفة جيدًا في المجال. في تجسيدات معينة؛ تكون المركبات المضادة لاتجاه النسخ المتوفرة هنا قابلة للتهجين بشكل خاص باستخدام حمض نووي ل .COORFT2 التكملة
يكون مركب مضاد لاتجاه النسخ وحمض نووي مستهدف متممين لبعضهما البعض عندما يمكن أن يرتبط عدد كافي من قواعد نووية خاصة بالمركب المضاد لاتجاه النسخ من خلال ارتباط بهيدروجين بالقواعد النووية المناظرة الخاصة بالحمض النووي المستهدف؛ بحيث سيحدث تأثير مطلوب (Ae) سبيل (JU) التثبيط المضاد لاتجاه النسخ الخاص بحمض نووي مستهدف؛ مثل حمض نووي ل (COORFT2
0 قد يتم تعديل القواعد النووية غير المتممة فيما بين مركب مضاد لاتجاه النسخ وحمض نووي ل 2 شربطة أن يظل المركب المضاد لاتجاه النسخ قادرًا على التهجين بشكل خاص بحمض نووي مستهدف. علاوة على ذلك؛ قد يتهجن مركب مضاد لاتجاه النسخ على واحد أو أكثر من مقاطع حمض نووي ل COORFT2 بحيث لا يتم تضمين المقاطع المتداخلة أو المتجاورة في حدث التهجين lo) سبيل (JB بنية حلقية؛ بنية غيرمتوافقة أو على شكل دبوس شعر).
5 في تجسيدات معينة؛ تكون المركبات المضادة لاتجاه النسخ التي تم توفيرها هناء أو gia مخصص منهاء أو تكون على الأقل؛ متسة بسبة 70)ن 180 385 386 387 788 189 3190 191 2 94 95 196 197 198 799 أو 0 لحمض نووي ل «COORFT2 منطقة مستهدفة؛ مقطع مستهدف؛ أو جزء مخصص منها. يمكن تحديد النسبة المئوية لتكملة مركب مضاد لاتجاه النسخ باستخدام حمض نووي مستهدف باستخدام الطرق الروتينية.
0 على سبيل المثال؛ سيمثل مركب مضاد لاتجاه النسخ حيث تكون من 18 إلى 20 من القواعد النووية الخاصة بالمركب المضاد لاتجاه النسخ متممة لمنطقة مستهدفة؛ وعلى هذا ستتهجن بشكل ala ¢ تكملة بنسبة 790. في هذا المثال» قد يتم تجميع القواعد النووية المتبقية غير المتممة أو نشرها مع القواعد النووية المتممة ولا تحتاج إلى أن تكون متجاورة مع بعضها البعض أو مع القواعد النووية المتممة. بهذه الكيفية؛ سيكون لمركب مضاد لاتجاه النسخ بطول 18 قاعدة نووية مشتمل
5 على 4 (أربعة) من القواعد النووية غير المتممة التي تكون محاطة بواسطة اثنتين من المناطق المتممة بشكل تام بالحمض النووي المستهدف 777.8 من إجمالي التكملة بالحمض النووي
المستهدف وعلى هذا سيكون واقعًا في مجال الاختراع الحالي. يمكن تحديد النسبة المئوية لتكملة مركب مضاد لاتجاه النسخ باستخدام منطقة من حمض نووي مستهدف على نحو روتيني باستخدام برامج (basic local alignment search tools) BLAST وبرامج PowerBLAST المعروفة في الفن )410 403 ,215 ,1990 Madden y Zhang ‘Altschul et al., J.
Mol.
Biol., (Genome Res., 1997, 7, 649 656 5 يمكن تحديد التجانس بالنسبة المئوية؛ تطابق المتوالية أو التكملة؛ بواسطة؛ على سبيل «JUall برنامج «Wisconsin Sequence Analysis Package) Gap الإصدار 48 Genetics Computer Group, University Research Park, Madison <Unix «(Wis باستخدام الإعدادات الافتراضية؛ التي تستخدم خوارزم Adv.
Appl. ) Waterman y Smith
.(Math., 1981, 2, 482 489 10 في تجسيدات معينة؛ تكون المركبات المضادة لاتجاه النسخ التي تم توفيرها هناء أو جزءِ مخصص منهاء متممة بشكل تام (أي؛ ALS بنسبة 7100) لحمض نووي مستهدف؛ أو جزءِ مخصص منه. على سبيل JU قد يكون مركب مضاد لاتجاه النسخ متممًا بشكل تام لحمض نووي ل 2 ...أو منطقة مستهدفة؛ أو مقطع مستهدف أو متوالية مستهدفة die على النحو المستخدم هناء تعني 'متمم بشكل تام" أن تكون كل قاعدة نووية خاصة بمركب مضاد لاتجاه النسخ قادرة على إقران قاعدة بدقة مع القواعد النووية المناظرة خاصة بحمض نووي مستهدف. على سبيل المثال؛ يكون مركب مضاد لاتجاه النسخ به 20 قاعدة نووية متممًا بشكل تام بمتوالية مستهدفة تكون بطول 400 قواعد نووية؛ طالما أنه يوجد جزءٍ به 20 قاعدة نووية مناظر من الحمض النووي المستهدف الذي يكون متممًا بشكل تام للمركب المضاد لاتجاه النسخ. يمكن Load استخدام متمم بشكل تام بالإشارة إلى جزءِ محدد من الحمض النووي الأول و/أو الحمض النووي الثاني. على سببيل (JB يمكن أن يكون ha مكون من 20 قاعدة نووية (ald بمركب مضاد لاتجاه النسخ به 0 قاعدة نووية Ladd بشكل تام" بمتوالية مستهدفة يبلغ طولها 400 قواعد نووية. يكون all المكون من 20 قاعدة نووية الخاص بالأوليجو نوكليوتيد الذي به 30 قاعدة نووية متممًا بشكل تام للمتوالية المستهدفة إذا اشتملت المتوالية المستهدفة على جزءِ مناظر من 20 قاعدة نووية حيث تكون كل قاعدة نووية متممة للجزءٍ المكون من 20 قاعدة نووية الخاص بالمركب المضاد لاتجاه 5 النسخ. في نفس الوقت؛ قد يكون أو لا يكون المركب المضاد لاتجاه النسخ الذي به 30 قاعدة نووية
بأكمله متممًا بشكل تام للمتوالية المستهدفة؛ اعتمادًا على ما إذا كانت 10 قواعد نووية المتبقية الخاصة بالمركب المضاد لاتجاه النسخ متممة أيضًا للمتوالية المستهدفة. قد يكون موقع قاعدة نووية غير متممة عند الطرف 5” أو الطرف 73 من المركب المضاد لاتجاه Ful على نحو بديلء قد تكون القاعدة النووية أو القواعد النووية غير المتممة عند موضع داخلي من المركب المضاد لاتجاه النسخ. عندما توجد اثنين أو JST من القواعد النووية غير المتممة؛ فإنها قد تكون متجاورة (أي؛ مرتبطة) أو غير متجاورة. في أحد التجسيدات؛ يتم وضع قاعدة نووية غير متممة في المقطع الجناحي الخاص بأوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ لجابمر. في تجسيدات معينة؛ تشتمل المركبات المضادة لاتجاه النسخ التي تكون بطول؛ أو تكون بطول يصل إلى 1312 161514 17 18 19 أو 20 من القواعد النووية على ما لا يزيد عن Led 0 لا يزيد عن 3 ما لا يزيد عن 2؛ أو ما لا يزيد عن 1 من قاعدة (قواعد) نووية غير متممة بالنسبة إلى حمض نووي مستهدف؛ مثل حمض نووي ل CCOORFT2 أو gia مخصص منها. في تجسيدات معينة؛ تشتمل المركبات المضادة لاتجاه النسخ التي تكون بطول؛ أو تكون بطول يصل إلى 12ء 13 14 15 16< 17 201918 22:21 23» 24 25 26» 2827 29 أو من القواعد النووية على ما لا يزيد عن 6؛ ما لا يزيد عن 5؛ ما لا يزيد عن 4؛ ما لا يزيد عن 5 3؛ما لا يزيد عن 2؛ أو ما لا يزيد عن 1 قاعدة (قواعد) نووية غير متممة بالنسبة إلى حمض نووي مستهدف؛ مثل حمض نووي ل 090117772؛ أو gia مخصص منها. تتضمن المركبات المضادة لاتجاه النسخ التي تم توفيرها هنا أيضًا تلك التي تكون متممة لجز من حمض نووي مستهدف. على النحو المستخدم هناء يشير "جزء" إلى عدد محدد من القواعد النووية المتجاورة gl) المرتبطة) داخل منطقة أو مقطع حمض نووي مستهدف. يمكن Wail أن يشير "a 0 إلى عدد محدد من القواعد النووية المتجاورة الخاصة بمركب مضاد لاتجاه النسخ. في تجسيدات معينة؛ تكون المركبات المضادة لاتجاه النسخ, متممة eral مكون من 8 قواعد نووية على الأقل خاص بمقطع مستهدف. في تجسيدات معينة؛ تكون المركبات المضادة لاتجاه النسخ متممة لجزء مكون من 9 قواعد نووية على الأقل خاص بمقطع مستهدف. في تجسيدات معينة؛ تكون المركبات المضادة لاتجاه النسخ متممة لجزء مكون من 10 قواعد نووية على الأقل خاص بمقطع مستهدف. 5 في تجسيدات معينة؛ تكون المركبات المضادة لاتجاه النسخ؛ متممة shad مكون من 11 قاعدة نووية على الأقل خاص بمقطع مستهدف. في تجسيدات معينة؛ تكون المركبات المضادة لاتجاه
النسخ؛ متممة لجزء مكون من 12 قاعدة نووية على الأقل خاص بمقطع مستهدف. في تجسيدات معينة؛ تكون المركبات المضادة لاتجاه النسخ» متممة shal مكون من 13 قاعدة نووية على الأقل خاص بمقطع مستهدف. في تجسيدات معينة؛ تكون المركبات المضادة لاتجاه النسخ» متممة لجزء مكون من 14 قاعدة نووية على الأقل خاص بمقطع مستهدف. في تجسيدات معينة؛ تكون المركبات المضادة لاتجاه النسخ؛ متممة edad مكون من 15 قاعدة نووية على الأقل خاص بمقطع مستهدف. أيضًا تتم دراسة المركبات المضادة لاتجاه النسخ التي تكون متممة oral مكون على الأقل من 109 11 12 13 14 15 16 18:17 2019 أو أكثر من القواعد النووية خاص بمقطع مستهدف؛ أو نطاق محدد بواسطة اثنتين من هذه القيم. التطابق 0 قد تشتمل المركبات المضادة لاتجاه النسخ التي تم توفيرها هنا Ladd نسبة تطابق مئوية محددة مع متوالية نوكليوتيد معينة؛ رقم المتوالية؛ أو مركب ممثل بواسطة رقم Tsis خاص» أو جزءٍ منه. على النحو المستخدم هناء يكون مركب مضاد لاتجاه النسخ مطابقًا للمتوالية التي تم الكشف عنها هنا إذا اشتمل على نفس قدرة إقران القاعدة النووية. على سبيل المثال» سيتم اعتبار RNA يحتوي على يوراسيل بدلاً من ثيميدين في متوالية DNA تم الكشف عنها مطابقًا لمتوالية DNA حيث إن كلاً 5 من اليوراسيل والثيميدين يقترنان بالأدينين. تتم دراسة الأنواع المقصرة والمطّلة من المركبات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة هنا إضافة إلى المركبات المشتملة على قواعد غير متطابقة بالنسبة إلى المركبات المضادة لاتجاه النسخ التي تم توفيرها هنا أيضًا. قد تكون القواعد غير المتطابقة مجاورة لبعضها البعض أو منتشرة خلال المركب المضاد لاتجاه النسخ. يتم حساب نسبة التطابق المئوية الخاصة بمركب مضاد لاتجاه النسخ Uy لعدد القواعد التي لها قدرة إقارن قاعدة 0 مطابقة بالنسبة إلى المتوالية التي تتم مقارنتها بها. في تجسيدات معينة؛ تكون المركبات المضادة لاتجاه النسخ» أو أجزاء منهاء مطابقة بنسبة على الأقل 0 80 185 190 195 1296 1297 798 799 أو 7100 لواحد أو أكثر من المركبات المضادة لاتجاه النسخ أو أرقام المتواليات؛ أو gia منهاء التي تم الكشف عنها هنا. في تجسيدات معينة؛ تتم مقارنة جزءِ من المركب المضاد لاتجاه النسخ eda بطول مساوي من 5 الحمض النووي المستهدف. في تجسيدات معينة؛ تتم مقارنة جزءِ مكون من 8؛ 9< ¢10 11 12؛
3 + 15 16 17« 18« 19 20« 21 22( 23 24؛ أو 25 قاعدة نووية بجزءِ بطول مساوي من الحمض النووي المستهدف. في تجسيدات معينة؛ تتم مقارنة جزءِ من الأوليجو نوكليوتيد المضاد لاتجاه النسخ بجزءِ بطول مساوي من الحمض النووي المستهدف. في تجسيدات معينة؛ تتم مقارنة eh مكون من 8؛ 9 10( 11 12« 13« 14ء ¢15 16 17« 18 19 20» 21» 22» 23 24 أو 5 قاعدة Ags بجزء بطول مساوي من الحمض النووي المستهدف. التعديلات يكون نوكليوزيد عبارة عن توليفة من قاعدة-سكر. على نحو طبيعي يكون جزء القاعدة النووية (أيضًا المعروفة باعتبارها القاعدة) من النوكليوزيد عبارة عن شطر قاعدة حلقية غير متجانسة. تكون 0 النوكليوتيدات عبارة عن نوكليوزيدات تتضمن بشكل إضافي مجموعة فوسفات مرتبطة تساهميًا بجزءِ السكر من النوكليوزيد. بالنسبة لتلك النوكليوزيدات التي تتضمن بنتو فورانوزيل سكر؛ يمكن ربط مجموعة الفوسفات بشطر هيدروكسيل عند الموضع 2" 3' أو 5' من السكر. يتم تكوين الأوليجو نوكليوتيدات من خلال الارتباط التساهمي لنوكليوزيدات متجاورة ببعضها anal لتكوين أوليجو نوكليوتيد بوليمري خطي. داخل بنية الأوليجو نوكليوتيد؛ Sale ما تتم الإشارة إلى مجموعات الفوسفات 5 باحتبارها مكونة لروابط النوكليوزيد البيني الخاصة بالأوليجو نوكليوتيد. تشتمل التعديلات على المركبات المضادة لاتجاه النسخ على مجموعات استبدال أو تغييرات على روابط نوكليوزيد بيني؛ أشطار سكرء أو قواعد نووية. غالبًا ما يتم تفضيل المركبات المضادة لاتجاه النسخ المعدلة عن الصور غير المعالجة بسبب الخصائص المطلوية Jie على سبيل المثال؛ الامتصاص الخلوي المعززء الألفة المعززة لحمض نووي مستهدف؛ الثبات المتزايد في وجود 0 إنزيمات نوكلياز» أو نشاط مثبط متزايد. قد يتم أيضًا استخدام النوكليوزيدات المعدلة كيميائيًا لزيادة ألفة الارتباط الخاصة بأوليجو نوكليوتيد alias لاتجاه النسخ مقصر أو Clie للحمض النووي المستهدف الخاص به. ply على ذلك؛ غالبًا ما يمكن الحصول على نتائج قابلة للمقارنة باستخدام المركبات المضادة لاتجاه النسخ الأقصر التي تحتوي على هذه النوكليوزيدات المعدلة كيميائيًا. 5 روابط النوكليوزيد البيني المعدلة
يكون رابط نوكليوزيد بيني طبيعي الحدوث خاص ب DNA 5 RNA عبارة عن رابط فوسفو داي إستر عند الموضع من 3' إلى 5'. غالبًا ما يتم اختيار المركبات المضادة لاتجاه النسخ المحتوية على واحد أو أكثر من روابط النوكليوزيد البيني المعدلة؛ أي طبيعية الحدوث؛ مقارنة بالمركبات المضادة لاتجاه النسخ المحتوية على روابط نوكليوزيد بيني طبيعية الحدوث بسبب الخصائص المطلوبة مثلء على سبيل المثال؛ الامتصاص الخلوي المعزز» الألفة المعززة للأحماض النووية المستهدفة؛ والثبات المتزايد في وجود إنزيمات نوكلياز. تتضمن الأوليجو نوكليوتيدات المحتوية على روابط نوكليوزيد بيني معدلة روابط نوكليوزيد بيني تحافظ على ذرة فوسفور إضافة إلى روابط نوكليوزيد بيني غير المحتوية على ذرة فوسفور. تتضمن روابط النوكليوزيد البيني المحتوية على الفوسفور النموذجية؛ على سبيل المثال لا الحصرء فوسفو 0 داي إسترات» فوسفو تراي clin) مركبات ميثيل فوسفات؛ فوسفوراميدات؛ ومركبات فوسفوروثيوات. تكونطرق تحضير روابط محتوية على الفوسفور وغير محتوية على الفوسفور معروفة جيدًا. في تجسيدات معينة؛ تشتمل المركبات المضادة لاتجاه النسخ المستهدفة لحمض نووي ل 0901172 على واحد أو أكثر من روابط النوكليوزيد البيني المعدلة. في تجسيدات معينة؛ يتم نشر روابط النوكليوزيد البيني المعدلة (pe Gi خلال المركب المضاد لاتجاه النسخ. في تجسيدات معينة؛ تكون 5 روابط النوكليوزيد البيني المعدلة عبارة عن روابط فوسفوروثيوات. في تجسيدات معينة؛ يكون كل رابط نوكليوزيد بيني خاص بمركب مضاد لاتجاه النسخ عبارة عن رابط نوكليوزيد بيني من فوسفوروثيوات. في تجسيدات معينة؛ تشتمل المركبات المضادة لاتجاه النسخ المستهدفة لحمض نووي J 09011772 على رابط فوسفو داي إستر واحد على الأقل ورابط فوسفوروثيوات واحد على الأقل. في تجسيدات معينة؛ تتضمن المركبات المضادة لاتجاه النسخ المستهدفة لحمض نووي ل COORF72 0 روابط نوكليوزيد بيني في أي من الأنماط التالية: ¢50000ssss8s8sss00ss 5005555555550055 + 9 005 و5055555555500055؟ حيث؛ 5 = رابط من فوسفوروثيوات؛ و 0 = رابط من فوسفو داي إستر. أشطار السكر المعدل 5 يمكن أن تحتوي المركبات المضادة لاتجاه النسخ الخاصة بالاختراع اختياريًا على واحد أو أكثر من التوكليوزيدات حيث قد تم تعديل مجموعة السكر. قد تمنح هذه النوكليوزيدات المعدلة الخاصة بالسكر
BLS معززًا للنوكلياز» all ربط متزايدة؛ أو خاصية بيولوجية مفيدة أخرى للمركبات المضادة لاتجاه النسخ. في تجسيدات dime تشتمل النوكليوزيدات على أشطار حلقة gay فُورانوز معدلة كيميائيًا. تتضمن أمثلة على حلقات ريبو فُورانوز المعدلة كيميائيًا دون حصرء إضافة مجموعات استبدال (متضمنة مجموعات استبدال عند الموضعين 5' و2'؛ تجسير ذرات الحلقات غير التوأمية لتكوين أحماض نووية ثنائية الحلقات «(BNA) bicyclic nucleic acids استبدال ذرة الأكسجين في حلقة الريبوزيل ب 8» N(R) أو 8) (81()82)©؛ 81 و22 تكون كل منها على حدة H 01-212 ألكيل أو مجموعة حماية) وتوليفات منها. تتضمن أمثلة على مركبات سكر معدلة كيميائيًا نوكليوزيد به استبدال ب ='5="-F2 ميثيل (انظر طلب البراءة الدولي 2008/101157 . WO المنشور بتاريخ 08/21/8 للنوكليوزيدات الأخرى التي بها استبدال ب 5'؛ 2'- بيس الأخرى التي تم الكشف 0 عنها) أو استبدال ذرة الأكسجين في حلقة الريبوزيل ب 5 مع مجموعة استبدال إضافية عند الموضع 2 (انظر طلب براءة الاختراع الأمريكية المنشور 152005-0130923)؛ المنشور بتاريخ 16 يونيو؛ 2005( أو على نحو بديل مجموعة استبدال عند الموضع 5' ل BNA (انظر طلب البراءة الدولي 2007/134181 WO المنشور بتاريخ 07/22/11 حيث يتم استبدال LNA على سبيل المثال بميثيل عند الموضع 5' أو مجموعة '5-فينيل). 5 تتضمن أمثلة على نوكليوزيدات محتوية على أشطار سكر معدل دون حصر نوكليوزيدات تشمل مجموعات Jas ul '5-فينيل؛ '5-ميقيل 2'-F 4-58 «(S JR) 2-0013 -:2 2'-O(CH2)20CH3 5 27-00112011217 <OCH2CH3 يمكن أيضًا اختيار مجموعة الاستبدال عند الموضع 2' من أليل؛ أمينو» sal ثيو» 0-أليل» 0-21-2210 ألكيل» «OCH2F «OCF3 <«O~CH2-C(=0)-N(Rm)(Rn) <«O(CH2)2-O-N(Rm)(Rn) »0)6002 25663 ر-ه «CH2-C(=0)~N(RI)=(CH2)2-N(Rm)(Rn) 0 حيث كل Rm Rl وصع تكون» على حدة؛ عبارة عن H أو C1-C10 ألكيل به استبدال أو ليس به استبدال. على النحو المستخدم هناء تشير 'نوكليوزيدات ثنائية الحلقات" إلى نوكليوزيدات معدلة تشتمل على شطر سكر ثنائي الحلقات. تتضمن أمثلة على الأحماض النووية ثنائية الحلقات (BNA) دون حصر نوكليوزيدات مشتملة على جسر Lad بين ذرات حلقة الريبوزيل عند الموضعين 4 و2. في 5 تجسيدات معينة؛ تتضمن المركبات المضادة لاتجاه النسخ التي تم توفيرها هنا واحدًا أو أكثر من نوكليوزيدات BNA حيث يشتمل الجسر على واحدة من الصيغ: '0-2-(0112)-'4 ¢(LNA) ='4
2-و-رهم)؛ 4'—(CH2)2-0-2" مسب 4-CH(CH3)-0-2" 4-5 CH(CH20CH3) -0-2' (ونظائرها انظر البراءة الأمريكية 7,399,845 المودعة بتاريخ 15 يوليوء 2008)؛ '0-2-(013()0113)©-4 (ونظائرها انظر PCT/US2008/068922 المنشور باعتباره 1770/2009/006478 بتاريخ 8 يناير» 2009)؛ '2-(012-11)0013-'4 (ونظائرها انظر PCT/US2008/064591 المنشور باعتباره 1170/2008/150729, بتاريخ 11 ديسمبر» 2008)؛ '2-(4-0112-0-14)013 (انظر طلب براءة الاختراع الأمريكية المنشور 092004-0 المنشور بتاريخ 2 سبتمبر» 2004)؛ od’ —CH2-N(R)=0-2" حيث R تكون (JS 01-012 H أو مجموعة حماية (انظر البراءة الأمريكية 7,427,672 المودعة بتاريخ 23 سبتمبرء 2008)؛ '2-(4-0112-0)1()0113 Chattopadhyaya et al., J. kil) ¢(Org. Chem., 2009, 74, 118-134 0 و2-(002-)4-012-0 (ونظائرها انظر 4 المنشور باعتباره 2008/154401 (WO المنشور بتاريخ 8 rand (2008 لقد تم إيضاح نوكليوزيدات ثنائية الحلقات إضافية في المراجع المنشورة (انظر على سبيل المثال:
Frieden et ¢Srivastava et al., J. Am. Chem. Soc., 2007, 129(26) 8362-8379
Elayadi et al., Curr. ¢al., Nucleic Acids Research, 2003, 21, 6365-6372 15
Braasch et al., Chem. Biol., 2001, ¢Opinion Invens. Drugs, 2001, 2, 558-561
Wahlestedt ¢Orum et al., Curr. Opinion Mol. Ther., 2001, 3, 239-243 ¢8, 1-7
Singh et al., fet ملق Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 2000, 97, 5633-5638
Koshkin et al., Tetrahedron, 1998, 54, ¢Chem. Commun., 1998, 4, 455-456 ¢Kumar et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 1998, 8, 2219-2222 ¢3607-3630 20 البراءات الأمريكية أرقام ¢Singh et al., J. Org. Chem., 1998, 63, 10035-10039 6,670,461 ¢6,770,748 ¢6,794,499 ¢7,034,133 ¢7,053,207 ¢7,399,845 نشرات طلبات البراءات الأمريكية أرقام 1152008-0039618؛ 46,268,490 6,525,191 طلبات البراءات الأمريكية أرقام «US2004-0171570 052007-1؛ 12/129,154؛ 61/099,844: 61/097,787 ¢61/086,231 61/056,564؛ 5
CWO 2007/134181 61/026,995؛ 60/989,574؛ الطلبات الدولية 8
2005/021570 0؟؛ 2004/106356 70؛ طلبات PCT الدولية
¢PCT/US2008/066154 ¢PCT/US2008/068922 و PCT/US2008/064591 يمكن
تحضير كل من النوكليوزيدات ثنائية الحلقات السابقة مشتملة على واحد أو أكثر من تشكيلات
السكر الكيميائية الفراغية متضمنة على سبيل المثال sya فورانوز و3]-1-ريبو فورانوز (انظر طلب البراءة الدولي PCT/DKIB/00393 المنشور بتاريخ 25 مارس» 1999 باعتباره
(WO 99/14226
على النحو المستخدم هناء تشير "النوكليوزيدات أحادية الحلقة" إلى نوكليوزيدات تشتمل على أشطار
Sa معدل لا تكون أشطار سكر ثنائي الحلقات. في تجسيدات معينة؛ قد يكون شطر السكرء أو
نظير شطر السكرء لنوكليوزيد معدلاً أو به استبدال عند أي موضع.
0 على النحو المستخدم هناء يشير 'نوكليوزيد ثنائي الحلقات عند الموضعين 2-74" أو "توكليوزيد AUS الحلقات عند المواضع من 4 إلى 2" " إلى نوكليوزيد ثنائي الحلقات مشتمل على dala فورانوز تشمل جسرًا يصل اثنتين من ذرات الكربون الخاصة بحلقة الفورانوز يصل ذرة الكربون عند الموضع 2" وذرة الكريون عند الموضع 4" الخاصتين بحلقة السكر. في تجسيدات معينة؛ تتضمن أشطار السكر ثنائي الحلقات لنوكليوزيدات BNA على سبيل المثال لا
5 الحصرء مركبات بها جسر واحد على الأقل Led بين ذرات الكريون عند الموضع 4' والموضع 2" الخاصين بشطر سكر من بنتو فورانوزيل بما في ذلك دون حصر الجسور المشتملة على 1 أو من 1 إلى 4 من المجموعات المرتبطة المختارة على حدة من ~C(Ra)=C(Rb)~ «~[C(Ra)(Rb)In— «~C(Ra)=N— ٠ -(معلاجحاءت -زفجاءت -روجاء-ت -فت «=Si(Ra)2~ -«رمحات ¢=N(Ra)~
20 حيث:
x تكون صفرء 1 أو 2؛ « تكون 21 3 أو 4؛ كل Ra و86 تكون» على baa عبارة عن 11 مجموعة حماية؛ هيدروكسيل» 01-012 (JS 01-2 ألكيل به استبدالء «Jussi €12-C2 012-62 ألكنيل به استبدال» (Jali C12-C2
5 012-02 ألكينيل به استبدال» €20-C5 أريل» €20-C5 أريل به استبدال» شق حلقة غير
متجانسة؛ شق حلقة غير متجانسة به استبدال؛ أريل غير متجانسء أريل غير متجانس به استبدال؛
شق 07-05 أليفاتي حلقي» شق 07-05 أليفاتي حلقي به استبدال» هالوجين» OJ] 111112
«COOT1 103 1 أسيل(11-(0-)0)؛ أسيل به استبدال» «ON سلفونيل (0(2-11-)5)؛ أو
سلفوكسيل (11-(0-)5)؛ و
كل 11 و12 تكون» على san عبارة عن 11» «JH C1-C12 01-012 ألكيل به استبدال» —C2
5 012 ألكنيل» 012-02 ألكنيل به استبدال» 012-62 «Jaki 012-02 ألكينيل به استبدالء
€20-C5 «uj €20-C5 أربل به استبدال؛ أسيل (11-(0-))؛ أسيل به استبدال» شق حلقة غير
متجانسة؛ شق حلقة غير متجانسة به استبدال» C1-C12 أمينو ألكيل؛ 01-012 أمينو ألكيل به
استبدال أو مجموعة حماية.
في تجسيدات معينة؛ يكون الجسر الخاص بشطر سكر ثنائي الحلقات عبارة عن —[C(Ra)(Rb)In— 0 +-0-وا(طع) (مع)ء]- ~C(RaRb)-N(R)-O- أو -(ع)0-11-(طم8)©-. في تجسيدات
معينة؛ يكون الجسر عبارة عن ~CH2-2" ’4 :012(2-2)-47 :012(3-2)-”4 -012-:4
0-2؛ :0012(2-0-2)-4؛ :2-(0112-0-11)6- 4 و-:0-2-(0112-11)8- ”4 حيث كل
ج تكون» على Baa عبارة عن dH مجموعة حماية أو 01-2012 ألكيل.
في تجسيدات معينة؛ يتم بشكل إضافي تحديد النوكليوزيدات ثنائية الحلقات بواسطة التشكيل الأيزومري. على سبيل (JU) قد يكون نوكليوزيد مشتمل على جسر '0-2-(112©)-"'4. بالتشكيل 1-0 أو
بالتشكيل ]-0. سابقًاء تم تضمين Galina Lt أوكسي (:47-0112-0-2) :0178 في الأوليجو
نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ التي أظهرت نشاطًا مضادًا لاتجاه النسخ ) Frieden et al,
(Nucleic Acids Research, 2003, 21, 6365-6372
في تجسيدات معينة؛ تتضمن النوكليوزيدات ثنائية الحلقات تلك المحتوية على جسر من الموضع 4' إلى 0 2 حيث تتضمن هذه الجسور دون تحديد؛ "0-2 (012)- 4ه «B-D-4'-CH2-0-2" ='4
«4'-CH(CH3)-0-2' «4'-CH2-N(R)-0-2' «4'-CH2-0-N(R)-2' «((CH2)2-0-2'
R حيث 4'=(CH2)3-2' و «4'-CH2-CH(CH3)~2" «4'~CH2-N(R)~-2' «4'~CH2-S-2'
تكون (H مجموعة حماية أو 61-012 ألكيل.
في تجسيدات معينة؛ يكون للنوكليوزيدات ثنائية الحلقات الصيغة:
T,~0— وه 0 QQ
Typ حيث: theterocyclic base moiety تكون شطر قاعدة حلقية غير متجانسة Bx —CH2-0~ «=C(=0)~N(Rc)~CH2~ «—~CH2-N(Rc)~CH2~ تكون ~Qa~Qb—Qc~ ¢—N(Rc)~O—CH2 sl ~CH2-N(Rc)-O~ «N(Rc)~ 5 Re تكون C1-C12 ألكيل de gana of حماية بأمينو amino protecting group و تكون JS من (Thy Ta على حدة 11» مجموعة حماية بهيدروكسيل hydroxyl protecting group ¢ مجموعة مترافق cconjugate group مجموعة فوسفور reactive phosphorus groupe lie ¢ شطر فوسفور phosphorus moiety أو موضع توصيل تساهمي بوسط حامل. 0 في تجسيدات معينة؛ يكون للنوكليوزيدات ثنائية الحلقات الصيغة: “نز 2 J ~o
Ty حيث: Bx تكون شطر قاعدة حلقية غير متجانسة؛ Ta و16 تكون كل منهماء على حدة H مجموعة حماية بهيدروكسيل؛ مجموعة مترافق» مجموعة فوسفور متفاعل؛ شطر فوسفور أو موضع توصيل تساهمي بوسط حامل؛ 2- «Jain ألكينيل» 1-06 ألكيل به 02-06 «Juli C2-C6 «SH C1-C6 تكون Za C6 ألكنيل به استبدال» €2-C6 ألكينيل به استبدال؛ أسيل acyl أسيل به استبدال؛ أميد به استبدال substituted amide يول thiol أو Jodi به استبدال. في أحد التجسيدات؛ تكون كل من المجموعات التي بها استبدال» على حدة؛ بها استبدال أحادي أو 0 متعدد بمجموعات استبدال مختارة على حدة من هالوجين halogen أوكسرى «oxo هيدروكسيل «OJc hydroxyl 01100 812 13 701-)00؛ و NJeC(=X)NJcld حيث كل Je
Jeg Id تكون» على saa عبارة عن 11» 6©-01 ألكيل» أو €1-C6 ألكيل به استبدال و تكون © أو 111 في تجسيدات معينة؛ يكون للنوكليوزيدات ثنائية الحلقات الصيغة: و1 م a Ty 5 حيث: Bx تكون شطر قاعدة حلقية غير متجانسة؛ Ta و16 تكون كل منهماء على حدة H مجموعة حماية بهيدروكسيل؛ مجموعة مترافق» مجموعة فوسفور متفاعل؛ شطر فوسفور أو موضع توصيل تساهمي بوسط حامل؛ 7 تكون C1-C6 ألكيل» 02-06 ألكنيل» 2-06 ألكينيل» 01-26 ألكيل به استبدال»ء -2 0 66 ألكنيل به استبدال» €2-06 ألكينيل به استبدال أو أسيل (-(0-)) به استبدال. في تجسيدات معينة؛ يكون للنوكليوزيدات ثنائية الحلقات الصيغة: ie Bx oh qe dq N OR حيث: Bx تكون شطر قاعدة حلقية غير متجانسة؛ Thy Ta 5 تكون كل منهماء على حدة dH مجموعة حماية بهيدروكسيل» مجموعة مترافق» مجموعة فوسفور متفاعل» شطر فوسفور أو موضع توصيل تساهمي بوسط حامل؛ Rd تكون 6©-01 «sll 6©-01 ألكيل به استبدال» «Justi C2-C6 02-06 ألكنيل به استبدال» 02-66 ألكينيل أو €2-C6 ألكينيل به استبدال؛ كل «qb sqa عو qd تكون» على حدة؛ عبارة عن (H هالوجين» C1-C6 «JS C1-C6 ألكيل به 0 - استبدالء €2-C6 ألكنيل» 02-66 ألكنيل به «Jasin 02-06 ألكينيل أو 6>-2 ألكينيل به
استبدال» C1-C6 ألكوكسيل»؛ 6©-01 ألكوكسيل به استبدال؛ أسيل؛ أسيل به استبدال» 1-66 أمينو ألكيل أو C1-C6 أمينو ألكيل به استبدال؛ في تجسيدات معينة؛ يكون للنوكليوزيدات ثنائية الحلقات الصيغة: db gq, 5 Ey” :0-7 qe qr 0 حيث: Bx تكون شطر قاعدة حلقية غير متجانسة؛ Ta و16 تكون كل منهماء على حدة H مجموعة حماية بهيدروكسيل؛ مجموعة مترافق» مجموعة فوسفور متفاعل؛ شطر فوسفور أو موضع توصيل تساهمي بوسط حامل؛ كل من qe «qb «ga وكو تكون» على حدة؛ هيدروجين» هالوجين» 12©-1© ألكيل» 01-2012 ألكيل به استبدال» 012-02 ألكنيل» 012-02 ألكنيل به استبدال» C12-C2 ألكينيل» 012-202 ألكينيل به استبدال» 61-012 ألكوكسي» 01-212 ألكوكسي به استبدال» <OJj ز51؛ «SOJj <Jj2SO علدزتل .13 «O—C(=O)NJjJk «C(=0)Jj <«C(=O)NJjlk «C(=0)OJj «CN N(H)C(=O)NJjJk <N(H)C(=NH)NJjJk أى ¢N(H)C(=S)NJjJk أو عو 5 be qf تكون t=C(qg)(gh) 5 عو وطو تكون كل منهماء على حدة؛ (H هالوجين» C1-C12 ألكيل أو 01-012 ألكيل به استبدال. لقد تم وصف تخليق وتحضير النوكليوزيدات ثنائية الحلقات من أدينين» سيتوزين» جوانين» 5- ميثيل-سيتوزين» ثيمين وبوراسيل المشتملة على جسر '4-0112-0-2؛ مع عملية تكوين الأوليجومرات الخاصة lg وخصائص التعرف على الحمض النووي ( Koshkin et al, (Tetrahedron, 1998, 54, 3607-3630 0 تم أيضًا وصف تحضير النوكليوزيدات ثنائية الحلقات في 98/39352 WO و99/14226 WO لقد تم أيضًا تحضير نظائر نوكليوزيدات ثنائية الحلقات متنوعة تشتمل على مجموعات التجسير من الموضع 4' إلى 2 مثل '0112-0-2-'4 و4-012-5-2 ( Kumar et al., Bioorg.
(Med.
Chem.
Lett., 1998, 8, 2219-2222 تم أيضًا وصف تحضير مركبات مزدوجة من
أوليجو ديوكسي guy نوكليوتيد مشتملة على نوكليوزيدات ثنائية الحلقات كركائز لإنزيمات بوليمراز
حمض نووي (99/14226 (Wengel et al., WO علاوة على ذلك؛ فقد تم وصف تخليق 2'-
Singh ( نظير أوليجو نوكليوتيد جديد عالي الألفة مقيد من حيث الشكل في المجال BNA sel
(et al, J.
Org.
Chem., 1998, 63, 10035-10039 5 بالإضافة إلى ذلك؛ فقد تم تحضير
2-أمينو = و2'-ميثيل أمينو-؟ 317/8 وقد تم توضيح الثبات الحراري للمركبات المزدوجة الخاصة
بها باستخدام جدائل RNA و0178 متممة من قبل.
في تجسيدات معينة؛ يكون للنوكليوزيدات ثنائية الحلقات الصيغة:
1-0 0 Bx
0-Ty/ di زه di q;
10 حيث:
Bx تكون شطر قاعدة حلقية غير متجانسة؛
Ta و16 تكون كل منهماء على حدة H مجموعة حماية بهيدروكسيل؛ مجموعة مترافق» مجموعة
فوسفور متفاعل؛ شطر فوسفور أو موضع توصيل تساهمي بوسط حامل؛
كل «qj «qi عاو واو تكون» على حدة؛ عبارة عن 11» هالوجين» 01-212 ألكيلء 01-212 ألكيل به استبدال» 012-02 ألكنيل؛ء 012-02 ألكنيل به استبدال» C12-C2 ألكينيل» 012-202
«SOJj ز51؛ <OJj به استبدال» 61-012 ألكوكسيل» 601-012 ألكوكسي به استبدالل» Jali
«O—C(=O)NJjJk «C(=0)Jj «C(=O)NJjJk <«C(=0)0Jj «CN «N3 «NIJjJk <SO2Jj
$NJjIk(=S)C(H)N sl C(=O)NJjJk(H)N «N(H)C(=NH)NJjJk و
تكون qi وزو أو او وءاو معًا Ble عن =C(qg) (gh) حيث عو gh g تكون JS منهماء على حدة؛ 0 117, هالوجين» 01-012 ألكيل أو 01-012 ألكيل به استبدال.
لقد تم وصف نوكليوزيد ثنائي الحلقات حلقي كربوني واحد محتوي على جسر —(CH2)3-2" ’4
Frier et al., Nucleic Acids Research, ) CH2-2’-4’~CH=CH وجسر نظير الألكنيل
Albaek et al., J.
Org.
Chem., 2006 71, و-7731 1997, 25(22), 4429-4443
— 4 5 — 7740( 25080 أيضًا وصف تخليق وتحضير نوكليوزيدات ثنائية الحلقات حلقية كريونية مع عملية تكوين الأوليجومرات الخاصة بها والدراسات البيولوجية الكيميائية ) Srivastava et al., J.
Am. (Chem.
Soc., 2007, 129(26), 8362-8379 فى تجسيدات معينة؛ تتضمن النوكليوزيدات ثنائية الحلقات؛ إلا أن الأمر ليس قاصرًا على؛ )( ~a 5 ]1-ميثيلين أوكسي BNA (:12-0-2©-:4)؛ (ب) 8]-0-ميثيلين أوكسي (:012-0-2-:4) BNA (ج) إيثيلين أوكسي «(4'=(CH2)2-0-2") BNA )3( أمينو أوكسي -012-0-:4) BNA ((2-(0)8 (ه) أوكسي أمينو BNA (:0-2-(47-0112-11)8)؛ (و) Hine (ميثيلين أوكسي) BNA (:0-2-(4”7-011)0113) (تتم أيضًا الإشارة إليه باعتباره إيثيل مقيد أو (cBt (ز) ميثيلين-ثيو BNA (:012-5-2©-47)؛ (ح) ميثيلين -أمينو «(4’~CH2-N(R)=2’) BNA (ط) die 0 حلقي كربوني BNA (:2-(112-01)013©-47)؛ (ي) بروبيلين حلقي كريوني -:4) «BNA (CH2)3-27) )<( فينيل 31718 كما هو موضح فيما يلي. و fe _ الاسم NEN ا NEN 8# 0( بم ابل الم لقم wd ae = eg > Ron . (z) (3) (ب) 0 Bx م سا سي الصا Bx اط Pee 0, Bx Sah mer SAT ST "© 3( و C@) 0B Fo Be Foe oS ير ثم i ded مكب ا الى يي ا لهي <> 0 يا 0 = Bx Cua تكون الشطر القاعدي و تكون؛ على حدة؛ oH مجموعة حماية؛ C1-C6 ألكيل أو -01 Ss <6 كما هو مستخدم clin المصطلح "نوكليوزيد من تترا هيدرو بيران معدل" أو 'نوكليوزيد من THP معدل" يعني نوكليوزيد به 'سكر" من تترا هيدرو بيران مكون من ست ذرات به استبدال للوحدة البنائية من بنتو فورانوزيل في النوكليوزيدات العادية ويمكن الإشارة إليه باعتباره بديل للسكر. تتضمن النوكليوزيدات من THP المعدلة؛ إلا أن الأمر ليس قاصرًا Lee le تتم الإشارة إليه في المجال باعتباره هكسيتول حمض نووي (HNA) hexitol nucleic acid » أنيتول حمض نووي
canitol nucleic acid (ANA) مانيتول حمض نووي (MNA) manitol nucleic acid (انظر (Leumann, Bioorg.
Med.
Chem., 2002, 10, 841-854 أو فلورو HNA (F-HNA) به نظام حلقة من تترا هيدرو بيرانيل كما هو موضح فيما يلي. م HO—~_O HO—~_O HO—_ F OCH; في تجسيد بعينه؛ يتم اختيار بدائل السكر التي لها الصيغة: qq, je: q7 4 ds Bx كار 18 2 حيث: Bx تكون شطر قاعدة حلقية غير متجانسة؛ تكون كل من 13 و14» على حدة؛ عبارة عن مجموعة ربط نوكليوزيد بيني تريط نظير نوكليوزيد من 0 تترا هيدرو بيران بالمركب الأوليجومري أو تكون واحدة من T3 و74 عبارة عن مجموعة ربط نوكليوزيد بيني تربط نظير نوكليوزيد من تترا هيدرو بيران بمركب أوليجومري أو أوليجو نوكليوتيد وتكون 13 و14 عبارة عن cH مجموعة حماية بهيدروكسيل؛ مجموعة مترافق مرتبط أو مجموعة طرفية عند الموضع 5' أو الموضع 3'؛ «qd «q3 «q2 «ql 5و؛ 6و 5 q7 تكون كل منها على C1-C6 H san ألكيل» C1-C6 ألكيل به استبدال» €2-C6 ألكنيل» 02-06 ألكنيل به استبدال» €2-C6 ألكينيل أو 02-06 ألكينيل به استبدال؛ و تكون واحدة من 1 و82 عبارة عن هيدروجين ويتم اختيار الأخرى من هالوجين؛ ألكوكسي به استبدال أو ليس به اسقدال» 201112 811 043 «OC(=X)J1 0111112--)00؛ «CN 5 NI3C(=X)NJ 2 حيث X تكون SO أو 1011 وكل 11 12 و13 تكون» على حدة؛ 0 عبارة عن oH 6>-01 ألكيل. في تجسيدات معينة؛ تكون كل من «ql 2و» «q3 4و» 5 6و و7و عبارة عن AH تجسيدات معينة؛ تكون واحدة على الأقل من «ql 02» 03؛ «q5 «qd 06 و7 بخلاف H في تجسيدات معينة؛
تكون واحدة على الأقل من «q5 «qd q3 »02 «ql 06 و7 عبارة عن ميثيل. في تجسيدات dime يتم توفير نوكليوزيدات THP حيث تكون واحدة من 181 و22 عبارة عن AF تجسيدات معينة؛ 1 تكون فلورو و2عا تكون 11؛ 11 تكون ميثوكسي R25 تكون 11 و11 تكون Seine إيثوكسي و2 تكون 11.
في تجسيدات معينة؛ تشتمل بدائل السكر على حلقات بها أكثر من 5 ذرات وأكثر من ذرة غير متجانسة واحدة. على سبيل المثال فقد تم إيضاح نوكليوزيدات تشتمل على أشطار سكر من مورفولينو واستخدامها في المركبات الأوليجومرية (انظر على سبيل المثال: Braasch et al., Biochemistry, 2002, 41, 4503-4510 والبراءات الأمريكية 5,698,685؛ ¢5,166,315 ¢5,185,444 5 5,034,506( كما هو مستخدم؛ المصطلح 'مورفولينو" يعني بديل للسكر له
0 الصيغة التالية: Bx مح ا
0 في تجسيدات معينة؛ قد يتم تعديل مركبات مورفولينو؛ على سبيل المثال عن طريق إضافة أو تغيير مجموعات استبدال متنوعة من الصيغة البنائية للمورفولينو السابقة. تتم الإشارة إلى بدائل السكر هذه
هنا باعتبارها '"مركبات مورفولينو معدلة".
يتم أيضًا توفير توليفات من التعديلات بدون تحديد؛ مثل نوكليوزيدات بها استبدال ب 5-7-2'- ميثيل (انظر الطلب الدولي 2008/101157 WO 207 المنشور بتاريخ 08/8/21 للنوكليوزيدات التي بها استبدال ب 5" 2'-بيس الأخرى التي تم الكشف عنها) واستبدال ذرة الأكسجين الخاصة بحلقة الريبوزيل ب 5 واستبدال إضافي عند الموضع 2' (انظر طلب البراءة الأمريكي المنشور (US2005-0130923 المنشور بتاريخ 16 يونيو؛ 2005) أو على نحو بديل
0 ااستبدال عند الموضع 5' من حمض نووي ALS الحلقات (انظر الطلب الدولي PCT WO 1 المنشور بتاريخ 07/11/22 حيث يكون نوكليوزيد ثنائي الحلقات -0112-'4 '0-2 به استبدال إضافي عند الموضع 5' باستخدام مجموعة 5'-ميثيل أو 5'-فينيل). لقد تم أيضًا وصف تخليق وتحضير النوكليوزيدات ثنائية الحلقات الكريونية الحلقية مع دراسات تكوين
Srivastava et al., J. «Jal الأوليجومر والكيمياء البيولوجية الخاصة بها (انظرء على سبيل .(Am. Chem. Soc. 2007, 129)26(, 8362-8379 في تجسيدات معينة؛ تشتمل المركبات المضادة لاتجاه النسخ على واحد أو أكثر من نوكليوزيدات من سيكلو هكسنيل معدلة؛ يكون عبارة عن نوكليوزيد به سيكلو هكسنيل مكون من ست ذرات محل الوحدة البنائية من بنتو فورانوزيل في النوكليوزيدات طبيعية الحدوث. تتضمن النوكليوزيدات من 5 سيكلو هكسنيل المعدلة؛ إلا أن الأمر ليس قاصرًا على تلك الموصوفة في المجال (انظر على المنشور (WO 2010/036696 المنشورء؛ المملوك على نحو مشترك» PCT سبيل المثال طلب
Robeyns et al., J. Am. Chem. Soc., 2008, 130(6), 1979- 2010 بتاريخ 10 أبريل»
Nauwelaerts ¢Horvath et al., Tetrahedron Letters, 2007, 48, 3621-3623 ¢1984
Gu et al, fet al., J. Am. Chem. Soc., 2007, 129(30), 9340-9348 10 ‘Nucleosides, Nucleotides & Nucleic Acids, 2005, 24(5-7), 993-998
Robeyns ¢Nauwelaerts et al., Nucleic Acids Research, 2005, 33(8), 2452-2463 et al., Acta Crystallographica, Section F: Structural Biology and Crystallization
Gu et al., Tetrahedron, 2004, 60(9), ‘Communications, 2005, F61(6), 585-586
Wang ct al., ¢Gu et al., Oligonucleotides, 2003, 13(6), 479-489 2111-2123 5
Verbeure et al., Nucleic Acids Research, ¢J. Org. Chem., 2003, 68, 4499-4505 ‘Wang et al., J. Org. Chem., 2001, 66, 8478-82 ¢2001, 29(24), 4941-4947
Wang et al., Nucleosides, Nucleotides & Nucleic Acids, 2001, 20(4-7), 785- المنشورء PCT طلب ¢Wang et al., J. Am. Chem., 2000, 122, 8595-8602 ¢788 تم تضمين النص الخاص WO 01/049687 المنشور PCT وطلب WO 06/047842 0
X بكل من كمرجع هناء بأكمله). يكون لنوكليوزيدات من سيكلو هكسنيل معدلة معينة الصيغة و 12 لمن oy 08 Bx ب 97 6 5
X
حيث لكل على حدة من نظير النوكليوزيد من سيكلو هكسينل الواحد على الأقل المذكور بالصيغة
:
Bx تكون شطر قاعدة حلقية غير متجانسة؛
تكون كل من 13 و14» على حدة؛ عبارة عن مجموعة ربط نوكليوزيد بيني تريط نظير نوكليوزيد من
5 سيكلو هكسنيل بمركب مضاد لاتجاه النسخ أو تكون واحدة من 73 و74 Ble عن مجموعة ربط
نوكليوزيد بيني تريط نظير نوكليوزيد من تترا هيدرو بيران بمركب مضاد لاتجاه النسخ وتكون
الأخرى من 173 و74 عبارة عن dH مجموعة حماية (diay Hug مجموعة مترافق مرتبط أو
مجموعة طرفية عند الموضع 5' أو الموضع 3'؛
«qd «q3 «q2 «ql 5و؛ 6و 5 q7 تكون كل منها على C1-C6 H san ألكيل» C1-C6 ألكيل به 0 - ااستبدالء €2-C6 ألكنيل» 02-06 ألكنيل به استبدال» 02-06 ألكينيل 02-06 ألكينيل به
استبدال أو مجموعة استبدال بالسكر أخرى.
تكون العديد من النظم الحلقية أحادية الحلقة؛ ثنائية الحلقات؛ وثلاثية الحلقات الأخرى معروفة في
المجال وتكون ade باعتبارها بدائل سكر يمكن استخدامها لتعديل النوكليوزيدات للتضمين في
المركبات الأوليجومرية كما هو متوفر هنا (انظر على سبيل المثال مقال المراجعة: Leumann, (Christian J.
Bioorg. & Med.
Chem., 2002, 10, 841-854 5 . يمكن أن تخضع هذه
النظم الحلقية إلى عمليات استبدال إضافية متنوعة لتعزيز نشاطها بشكل إضافي.
على النحو المستخدم هناء يعني "2”- سكر معدل" فورانوزيل سكر معدل عند الموضع 2'. في
تجسيدات معينة؛ تتضمن هذه التعديلات مجموعات الاستبدال المختارة من: هاليد؛ متضم؛ على
سبيل المثال لا الحصر ألكوكسي به استبدال وليس به استبدال, ثيو ألكيل به استبدال وليس به 0 استبدالء أمينو ألكيل به استبدال وليس به استبدالء؛ ألكيل به استبدال وليس به Jail أليل به
استبدال وليس به استبدالء وألكينيل به استبدال وليس به استبدال. في تجسيدات معينة؛ يتم اختيار
التعديلات عند الموضع 2" من مجموعات الاستبدال المتضمنة؛ على سبيل المثال لا الحصر:
«O(CH2)nONH2 <«O(CH2)nF «O(CH2)nCH3 «O(CH2)nNH2 <O[(CH2)nO]mCH3
<OCH2C(=0)N(H)CH3 و «O(CH2)nON[(CH2)nCH3]2 حيث my n تكونان من 1 إلى حوالي 10. يمكن Und اختيار مجموعات استبدال عند الموضع 2' من: 01-012 ألكيل, ألكيل به
استبدال» ألكنيل» ألكينيل» ألكأريل؛ أرالكيل» 0-ألكأريل sf 0- أراتكيل Br «Cl <OCN «SCH3 «SH
«CN ع «SO2CH3 «SOCH3 «OCF3 «CF3 01102 12102 113 11112 سيكلو ألكيل غير متجانسء سيكلو ألكأريل غير متجانسء أمينو ألكيل أمينو» بولي ألكيل أمينو» سيليل به استبدال؛ مجموعة انشطار (RNA مجموعة مرشد؛ عامل إقحام؛ مجموعة لتحسين خصائص الحركية الدوائية؛ أو مجموعة لتحسين خصائص الديناميكية الدوائية Spal مضاد لاتجاه النسخ؛ ومجموعات الاستبدال الأخرى التي لها نفس الخصائص. في تجسيدات معينة؛ تشتمل نوكليوزيدات معدلة على سلسلة جانبية ل 27-1401 (-11944 ,272 ,1997 Baker et al., J.
Biol.
Chem., 12000( 22 تم وصف de gens الاستبدال ب 2-1401 باعتبارها مشتملة على ألفة ارتباط محسنة مقارنة بنوكليوزيدات غير معدلة وبنوكليوزيدات معدلة أخرى؛ مثل 2'-0-ميثيل» 0-بروبيل؛ و©-أمينو بروييل. لقد تم Lind عرض أوليجو نوكليوتيدات بها مجموعة الاستبدال ب 2-1101 0 باعتبارها مثبطات مضادة لاتجاه النسخ خاصة بالتعبير Shell عن جين بسمات واعدة للاستخدام في جسم الكائن الحي Altmann et ¢Helv.
Chim.
Acta, 1995, 78, 486-504 Martin) Altmann et al., Biochem.
Soc.
Trans., 1996, ¢al., Chimia, 1996, 50, 168-176 (Altmann et al., Nucleosides Nucleotides, 1997, 16, 917-926 5 ¢24, 630-637 على النحو المستخدم هناء يشير "معدل في الموضع 2' " أو ad استبدال في الموضع 2' " إلى 5 تن وكليوزيد مشتمل على سكر مشتمل على مجموعة استبدال عند الموضع 2' بخلاف H أو OH تتضمن نوكليوزيدات معدلة عند الموضع 2"؛ على سبيل المثال لا الحصرء نوكليوزيدات ثنائية الحلقات حيث يصل الجسر الذي يصل اثنتين من ذرات الكربون الخاصة بحلقة السكر ذرة الكريون عند الموضع 2” وذرة الكريون الأخرى من حلقة السكر؛ ونوكليوزيدات بمجموعات استبدال عند الموضع 2 غير مجسرة؛ مثل أليل؛ ginal ¢ أزيدو؛ 5 « 0-أليل» 10©-1©-0 ألكيل؛ OCF3~ «0O—(CH2)2-0-N(Rm)(Rn) <2'~O(CH2)2SCH3 «0O-CH3-0-(CH2)2 0 أو -0-002 «C(=0)~N(Rm)(Rn) حيث كل Rn y Rm تكون»؛ على aa عبارة عن 11 أو به استبدال أو ليس به استبدال 01-010 ألكيل. قد تشتمل نوكليوزيدات معدلة عند الموضع 2' بشكل إضافي على تعديلات أخرى؛ على سبيل المثال عند مواضع أخرى من السكر و/أو عند القاعدة النووية. على النحو المستخدم هناء يشير "2-1" إلى نوكليوزيد مشتمل على Su يشمل مجموعة فلورو عند 5 الموضع 2' من حلقة السكر.
على النحو المستخدم هناء يشير كل من 27-0148" أو '2-00113 '¢ "0-2-ميثيل" أو '0-2-
ميثوكسي" إلى نوكليوزيد مشتمل على سكر يشمل مجموعة 2-00113- الخاص بحلقة السكر. على النحو المستخدم هناء يشير كل من "MOE" أو 2-1407" أو '"2’=OCH2CH20CH3" أو "0-2 -ميثوكسي إيثيل" إلى نوكليوزيد مشتمل على سكر يشمل مجموعة 00112011200113 -
عند الموضع 2' الخاص بحلقة السكر.
تكون الطرق لعمليات تحضير مركبات السكر المعدلة معروفة جيدًا بالنسبة لهؤلاء من ذوي المهارة في المجال. تتضمن بعض البراءات الأمريكية التمثيلية التي توضح تحضير مركبات السكر المعدلة هذه بدون تحديد. :U.S. 4,981,957؛ ¢5,118,800 ¢5,319,080 ¢5,359,044 ¢5,393,878 ¢5,446,137 ¢5,466,786 5,514,785؛ ¢5,519,134 ¢5,567,811
¢5,576,427 ¢5,591,722 ¢5,597,909 ¢5,610,300 ¢5,627,053 ¢5,639,873 ¢5,646,265 ¢5,670,633 ¢5,700,920 5,792,847 5 6,600,032 والطلب الدولي PCT/US 2005/019219 المودع بتاريخ 2 «ss 2005 والمنشور باعتباره WO 1 في 22 ديسمبر « 2005 والتي تم تضمين كل منها هنا كمرجع بأكملها. على النحو المستخدم هناء يشير "أوليجو نوكليوتيد" إلى مركب مشتمل على العديد من
5 النوكليوزيدات المرتبطة. في تجسيدات معينة؛ يتم تعديل واحد أو أكثر من العديد من نوكليوزيدات. في تجسيدات معينة؛ يشتمل أوليجو نوكليوتيد على واحد أو أكثر من ريبو نوكليوزيدات (RNA) و/أو ديوكسي رببو نوكليوزيدات (DNA) في النوكليوتيدات المشتملة على أشطار سكر معدلء يتم الحفاظ على أشطار القاعدة النووية (الطبيعية؛ المعدلة أو توليفة منها) للتهجين بهدف من حمض نووي ملائم.
0 في تجسيدات معينة؛ تشتمل المركبات المضادة لاتجاه النسخ على واحد أو أكثر من نوكليوزيدات بها أشطار سكر معدل. في تجسيدات معينة؛ يكون شطر السكر المعدل عبارة عن 2”7-1401. في تجسيدات معينة؛ يتم وضع نوكليوزيدات معدلة 27-1401 في باعث جابمر. في تجسيدات معينة؛ يكون شطر السكر المعدل عبارة عن نوكليوزيد ثنائي الحلقات محتوي على مجموعة تجسير )47 '0-2-(011)0113). في تجسيدات معينة؛ يتم وضع نوكليوزيدات معدلة (:0-2-(011)0113-:4)
خلال الأجنحة الخاصة بباعث جابمر. تركيبات وطرق لصياغة التركيبات الصيدلية
يمكن مزج الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ من المواد النشطة أو الخاملة المقبولة صيدليًا لتحضير التركيبات الصيدلية أو الصيغ. تكون تركيبات وطرق لصياغة التركيبات الصيدلية معتمدة على عدد من المعايير» متضمنة؛ على سبيل المثال لا الحصرء طريقة الإعطاء؛ مدى المرضء أو الجرعة التي سيتم إعطاؤها.
يمكن استخدام مركب مضاد لاتجاه النسخ مستهدف لحمض نووي ل 09081772 في التركيبات الصيدلية عن طريق دمج المركب المضاد لاتجاه النسخ مع مادة مخففة أو مادة حاملة مقبولة صيدليًا ملائمة. تتضمن مادة مخففة مقبولة صيدليًا محلول ملحي منظم بفوسفات -ع1:21م1105م (PBS) buffered saline يكون PBS عبارة عن مادة مخففة ملائمة للاستخدام في تركيبات سيتم توصيلها بالحقن غير المعوي. بناءً على ذلك؛ في أحد التجسيدات؛ يتم في الطرق الموصوفة هنا يتم
0 استخدام تركيبة صيدلية مشتملة على مركب مضاد لاتجاه النسخ مستهدف لحمض نووي ل 2 ومادة مخففة مقبولة صيدليًا. في تجسيدات معينة؛ تكون المادة المخففة المقبولة lara عبارة عن PBS في تجسيدات معينة؛ يكون المركب المضاد لاتجاه النسخ عبارة عن أوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ. تتضمن التركيبات الصيدلية المشتملة على المركبات المضادة لاتجاه النسخ أية أملاح مقبولة
5 صيدلليًاء إسترات؛ أو أملاح من هذه الإسترات؛ أو أي أوليجو نوكليوتيد HAT يكون؛ عند الإعطاء حيوان» بما في ذلك إنسان. قادرًا على توفير (بشكل مباشر أو غير مباشر) ناتج الأيض النشط بيولوجيًا أو وحدة بنائية له. بناءًة على ذلك؛ على سبيل المثال؛ ينسحب الكشف أيضًا على أملاح مقبولة صيدليًا من المركبات المضادة لاتجاه النسخ؛ عقاقير أولية؛ أملاح مقبولة صيدليًا من هذه العقاقير الأولية؛ والمكافئات البيولجية الأخرى. تتضمن الأملاح المقبولة صيدليًا الملائمة؛ على سبيل
0 المثال لا الحصرء أملاح الصوديوم والبوتاسيوم. يمكن أن يتضمن عقار أولي تضمين نوكليوزيدات إضافية عند واحد من أو كلا الطرفين الخاصين بمركب مضاد لاتجاه النسخ يتم شطرها بواسطة إنزيمات نوكلياز داخلية Land) داخل الجسم؛ لتكوين المركب المضاد لاتجاه النسخ النشط. المركبات المضادة لاتجاه النسخ المترافقة
5 قد تكون المركبات المضادة لاتجاه النسخ مرتبطة تساهميًا بواحد أو أكثر من الأشطار أو المترافقات التي تعزز النشاط التوزيع الخلوي أو الامتصاص الخلوي للأوليجو نوكليوتيدات المضادة
لاتجاه النسخ الناتجة. تتضمن مجموعات المترافق النمطية أشطار الكوليسترول وأشطار الشحم. تتضمن مجموعات المترافق الإضافية مركبات كربوهيدرات» مركبات and فوسفوري؛ بيوتين؛ فينازين» فولات» فينانثريدين» أَتتراكينُون» أكريدين» مركبات فلوريسيين» مركبات رودامين؛ مركبات كومارين؛ والأصباغ.
يمكن أيضًا أن تكون المركبات المضادة لاتجاه النسخ معدلة لتشتمل على واحد أو أكثر من مجموعات التثبيت التي تكون بشكل عام ملحقة بواحد من أو كلا طرفي المركبات المضادة لاتجاه النسخ لتعزيز خصائص cio على سبيل (JU) ثبات النوكلياز. يتم في مجموعات التثبيت تضمين بنى غطاء. تقوم هذه التعديلات الطرفية بحماية المركب المضاد لاتجاه النسخ المشتمل على حمض نووي طرفي من das النوكلياز الخارجي؛ ويمكن أن تساعد في توصيل و/أو تحديد موقع داخل
0 خلية. يمكن أن يوجد الغطاء عند الطرف 5' (الغطاء 5')؛ أو عند الطرف 3' (الغطاء 3')؛ أو يمكن أن يوجد على كلا الطرفين. تكون بنيات الغطاء معروفة جيدًا في المجال وتتضمن؛ على سبيل (Jd) أغطية غير أساسية من ديوكسي معكوسة. تتضمن مجموعات التثبيت 3' و5' التي يمكن استخدامها لتغطية واحد أو أكثر من أطراف مركب مضاد لاتجاه النسخ لمنح ثبات النوكلياز تلك التي تم الكشف عنها في WO 004602/03 المنشور بتاريخ 16 ينايرء 2003.
5 العلاج بمزرعة خلوية ومركبات مضادة لاتجاه النسخ يمكن اختبار تأثيرات المركبات المضادة لاتجاه النسخ على مستوىء نشاط أو التعبير Shell عن الأحماض النووية COORFT2 في المعمل في مجموعة متنوعة من أنواع الخلية. تكون أنواع الخلية المستخدمة لعمليات التحليل هذه متاحة من المؤردين التجاريين Ae) سبيل المثال American Type Culture Collection, Manassus, VA; Zen—Bio, Inc., Research Triangle Park,
(NC; Clonetics Corporation, Walkersville, MD 0 ويتم استنباتها وفقًا لتعليمات المؤرد باستخدام المواد الكاشفة المتاحة تجارتًا Ae) سبيل المتال Invitrogen Life Technologies, (Carlsbad, CA تتضمن أنواع الخلية التوضيحية؛ على سبيل المثال لا الحصر؛ خلايا HepG2 WIA 3م116 والخلايا الكبدية الرئيسية. الاختبار المعملي للأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ
5 يتم هنا وصف طرق لعلاج الخلايا باستخدام الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ؛ التي يمكن تعديلها على نحو ملائم للعلاج مع المركبات المضادة لاتجاه النسخ الأخرى.
بصفة عامة؛ يتم علاج الخلايا باستخدام الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ عندما تصل الخلايا إلى تقريبًا 780-60 من التشابك في المستنبت. تتضمن مادة كاشفة واحدة يتم استخدامها على نحو معتاد لإدخال الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ في الخلايا المستنبتة المادة الكاشفة لنقل شحم الكاتيونية LIPOFECTIN (nvitrogen, Carlsbad, CA) 5 يتم خلط الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ مع LIPOFECTIN في 1 (nvitrogen, Carlsbad, CA) OPTI-MEM لتحقيق التركيز النهائي المطلوب الخاص بأوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ وتركيز 110011207177 يتراوح نمطيًا من 2 إلى 12 ميكرو جرام/مللي لتر لكل 100 نانو مولار من أوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ. تتضمن مادة كاشفة أخرى مستخددمة لإدخال الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ في 0 الخلايا المستنبتة (nvitrogen, Carlsbad, CA) LIPOFECTAMINE يتم خلط أوليجو نوكليوتيد slaty alias النسخ مع LIPOFECTAMINE في وسط مصل مختزل 1 OPTI-MEM (nvitrogen, Carlsbad, CA) لتحقيق التركيز المطلوب الخاص بأوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ وتركيز LIPOFECTAMINE الذي يتراوح نمطيًا من 2 إلى 12 ميكرو جرام/مللي لتر لكل 0 نانو مولار أوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ. تتضمن تقنية أخرى مستخدمة لإدخال الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ في الخلايا المستنبتة التثقيب الكهربائي. يتم علاج الخلايا باستخدام الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ بواسطة الطرق الروتينية. يتم نمطيًا تجميع الخلايا بعد 24-16 ساعة من العلاج بأوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ؛ في هذا الوقت يتم قياس مستويات RNA أو البروتين الخاصة بالأحماض النووية المستهدفة بواسطة 0 الطرق المعروفة في الفن والموصوفة هنا. بصفة عامة؛ عندما يتم تنفيذ الطرق العلاجية في العديد من النسخ؛ يتم تقديم البيانات كمتوسط لطرق العلاج الخاصة بالنسخة. يتنوع تركيز أوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ المستخدم من سلالة خلية إلى سلالة خلية. تكون طرق لتحديد تركيز الأوليجو نوكليوتيد المضاد لاتجاه النسخ الأمثل لسلالة خلية معينة معروفة جيدًا في المجال. يتم نمطيًا استخدام الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ عند تركيزات 5 تتراوح من 1 نانو مولار إلى 300 نانو مولار عند نقل عدوى ب LIPOFECTAMINE يتم استخدام
الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ عند تركيزات أعلى تتراوح من 625 إلى 20.000 نانو مولار عند نقل العدوى باستخدام التثقيب الكهربائي.
RNA عزل يمكن إجراء تحليل RNA على إجمالي RNA الخلوي أو بولي mRNA +(). تكون طرق عزل الع معروفة جيدًا في المجال. يتم تحضير RNA باستخدام طرق معروفة جيدًا في الفن» على سبيل JUall باستخدام Ladg (nvitrogen, Carlsbad, CA) TRIZOL Reagent لبروتوكولات المصنْع الموصى بها. تحليل تثبيط المستويات المستهدفة أو التعبير الوراثي يمكن تجرية تثبيط مستويات أو التعبير الوراثي عن حمض نووي ل 09081772 بمجموعة متنوعة 0 من الطرق المعروفة في الفن. على سبيل JU يمكن تحديد كم مستويات الحمض النووي المستهدف بواسطة؛ على سبيل المثال. تحليل بقعة 000600 تفاعل سلسلة بوليمراز تنافسي «(PCR) polymerase chain reaction أو PCR في الزمن الفعلي محدد للكم. يمكن إجراء تحليل RNA على إجمالي RNA الخلوي أو بولي mRNA +(). تكون طرق عزل RNA معروفة جيدًا في المجال. يكون تحليل Northern dais روتينيًا أيضًا في المجال. يمكن على نحو ملائمة إنجاز PCR 5 في الزمن الفعلي المحدد للكم باستخدام 7600 Sequence i 7700 <ABI PRISM 7900 PE—Applied Biosystems, Foster City, CA المتاح تجارتاء المتاح من Detection System Fadl لتعليمات Bg والمستخدم تحليل POR في الزمن الفعلي المحدد للكم لمستويات RNA المستهدفة يمكن إتمام تحديد كم مستويات RNA المستهدفة بواسطة POR في الزمن الفعلي المحدد للكم 0 باستخدام 7600 <ABI PRISM 7700 أو PE) 7900 Sequence Detection System (Applied Biosystems, Foster City, CA وفتًا لتعليمات المصنّع. طرق PCR ]ه في الزمن الفعلي المحدد للكم تكون معروفة جيدًا في المجال. قبل PCR في الزمن الفعلي؛ يتم تعريض RNA المعزول إلى تفاعل ترانسكريتاز عكسي (RT) ينتج DNA متمم (cDNA) يتم بعد ذلك استخدامه باعتباره الركيزة لتضخم PCR الزمن الفعلي. 5 “يتم إجراء تفاعلات RT و0018 في الزمن الفعلي تتابعيًا في نفس عين العينة. يتم الحصول على المواد
الكاشفة الخاصة ب RT و00 في الزمن الفعلي من Invitrogen (Carlsbad, CA) يتم shal تفاعلات RT-PCR في الزمن الفعلي بواسطة طرق معروفة جيدًا بالنسبة لذوي المهارة في المجال. يتم قياس كميات هدف الجين (أو (RNA التي تم الحصول عليها بواسطة PCR في الزمن الفعلي باستخدام إما مستوى التعبير الوراثي الخاص بجين يكون التعبير الوراثي الخاص به cb مثل سيكلو فيلين م» أو عن طريق تحديد كم إجمالي RNA باستخدام Invitrogen, ) RIBOGREEN (Inc.
Carlsbad, CA يتم تحديد كم سيكلو فيلين A التعبير الوراثي بواسطة 001 في الزمن الفعلي؛ عن طريق التشغيل في نفس الوقت مع الهدف؛ مضاعفة الإرسال؛ أو على نحو منفصل. يتم تحديد كم إجمالي RNA باستخدام sale كاشفة لتحديد كم Invetrogen, Inc. ( RIBOGREEN RNA (Eugene, OR يتم توضيح طريق تحديد كم RNA بواسطة RIBOGREEN في et «Jones, L.J مله (368-374 ,265 ,1998 (Analytical Biochemistry, يتم استخدام الأداة لم (PE Applied Biosystems) CYTOFLUOR 4000 لقياس فلورة RIBOGREEN يتم تصميم المجسات والمواد البادئة للتهجين بحمض نووي ل COORFT2 تكون طرق لتصميم PCR في الزمن الفعلي المجسات والمواد البادئة معروفة جيدًا في المجال؛ وقد تتضمن استخدام gly مثل (Applied Biosystems, Foster City, CA) PRIMER EXPRESS Software تحليل مستويات البروتين يمكن تقييم التثبيط المضاد لاتجاه النسخ الخاص بالأحماض النووية COORFT2 عن طريق قياس مستويات بروتين COORFT2 يمكن تقييم مستويات بروتين 09011772 أو تحديد الكم بمجموعة متنوعة من الطرق معروفة جيدًا في الفنء مثل الترسيب المناعي, تحليل بقعة Western (تكوين بقعة مناعية)» تجرية sale ماصة مناعية مرتبطة بإتزيم enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) 0 تجارب البروتين المحددة للكم؛ تجارب نشاط البروتين Ao) سبيل (JU تجارب نشاط الكاسباز) » الكيمياء الهيستولوجية immunohistochemistrydac Lill » كَيمّياء سيتولوجية ein immunocytochemistry أو تصنيف الخلية المنشط بالفلورة لك fluorescence—activated (FACS) sorting يمكن تحديد الأجسام المضادة الموجهة لهدف والحصول عليها من مجموعة متنوعة من المصادرء مثل كتالوج MSRS الخاص بالأجسام المضادة ) Aerie Corporation, (Birmingham, MI 5 » أو يمكن تحضيرها عبر طرق توليد جسم مضاد أحادي النسيلة أو متعدد
النسائل التقليدية المعروفة جيدًا في الفن. تكون الأجسام المضادة المفيدة للكشف عن 0908772
من جرذ؛ قرد؛ وإنسان متاحة تجاريًا.
الاختبار في جسم الكائن الحي للمركبات المضادة لاتجاه النسخ
يتم اختبار المركبات المضادة لاتجاه النسخ؛ على سبيل المثال. الأوليجو نوكليوتيدات المضادة الاتجاه النسخ؛ في الحيوانات لتقييم قدرتها على تثبيط التعبير hol) عن 09081772 وإنتاج
تغيرات خاصة بالنمط الظاهري» (Jie وظيفة تحرك وتنفس محسنة. في تجسيدات معينة؛ يتم قياس
وظيفة التحرك بواسطة قضيب دوّارء قوة القبضة؛ تسلق سارية؛ الأداء في مجال مفتوح؛ عارضة
توازن؛ اختبار أثر كف القدم الخلفي في الحيوان. في تجسيدات معينة؛ يتم قياس التنفس بواسطة
مخطط تحجم الجسم بأكمله؛ مقاومة الغزوء وقياسات الامتثال في الحيوان. قد يتم إجراء الاختبار في
0 الحيوانات الطبيعية؛ أو نماذج مرض تجريبية. بالنسبة للإعطاء إلى الحيوانات؛ تتم صياغة الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ في sale مخففة مقبولة صيدليًا؛ مثل محلول ملحي منظم بفوسفات (PBS) أو سائل PES اصطناعي (aCSF) artificial cerebrospinal fluid يتضمن الإعطاء طرق إعطاء بالحقن غير المعوي, مثل داخل الغشاء البربتوني؛ في الوريد؛ وتحت الجلد؛ إضافة إلى طرق الإعطاء المركزية مثل داخل البطين الدماغي أو داخل الغمد. يكون حساب جرعة
5 أوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ وتكرار الجرعة واقعًا في قدرات هؤلاء من ذوي المهارة في المجال؛ ويعتمد على عوامل مثل طريقة الإعطاء ووزن جسم الحيوان. بعد فترة من العلاج باستخدام الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ؛ يتم عزل RNA عن نسيج ONS أو CSF ويتم قياس التغيرات في التعبير الوراثي عن حمض نووي ل COORFT2 استهداف 09011772
0 قد تهجن الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة هنا Linea نوويًا COORFT2 J في أية مرحلة خاصة بمعالجة RNA على سبيل المثال؛ يتم هنا وصف الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ التي تكون متممة ل MRNA مسبق أو mali MRNA بشكل إضافي؛ قد تهجن الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة هنا أي عنصر من حمض نووي ل 2 . على سبيل المثال؛ يتم هنا وصف الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ التي
5 تكون متممة «(sus إنترون» UTR «57 UTR 37 منطقة تكرار؛ تمدد لتكرار هكسا نوكليوتيد؛ وصلة إقران» وصلة إقران إكسون :إكسون؛ خافض لإقران خاص exonic splicing silencers s=Sh
(255)؛ معزز إقران ald بإكسون «(ESE) exonic splicing enhancer إكسون «1A إكسون 8 إكسون ele إكسون ld إكسون 16؛ إكسون 2؛ إكسون 3؛ إكسون 4؛ إكسون 5؛ إكسون © إكسون T إكسون 8؛ إكسون 9؛ إكسون 10 إكسون el] إنترون 1؛ إنترون 2؛ إنترون 3؛ إنترون 4 إنترون 5؛ إنترون 6؛ إنترون 7 إنترون 8؛ إنترون 9؛ أو إنترون 10 لحمض نووي ل
COORFT2 5 في تجسيدات معينة؛ تهجن الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة هنا كل الصور المتغيرة من COORFT2 في تجسيدات معينة؛ تهجن الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة هنا انتقائيًا صورًا متغيرة معينة من COORFT2 في تجسيدات معينة؛ تهجن الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة هنا انتقائيًا صورًا متغيرة من COORFT2 محتوية 0 على تمدد لتكرار هكسا نوكليوتيد. في تجسيدات معينة؛ تهجن الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة هنا انتقائيًا صورًا متغيرة من mRNA مسبق محتوية على تكرار الهكسا نوكليوتيد. في تجسيدات معينة؛ تتضمن صورًا متغيرة MRNA مسبق من 090181772 محتوية على تمدد لتكرار هكسا نوكليوتيد المتوالية رقم: 3-1 و10-6. في تجسيدات معينة؛ يشمل تمدد تكرار الهكسا نوكليوتيد هذا على الأقل 24 من وحدات التكرار الخاصة بأي من 066066622 ‘GGGGGG
«GGGGGC 5 أو GGGGCG في تجسيدات معينة؛ تثبط الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة هنا التعبير الوراثي عن كل الصور المتغيرة من (A.
COORFT2 تجسيدات معينة؛ تثبط الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة هنا التعبير oll عن كل الصور المتغيرة من 69081772 على نحو متساوي. في تجسيدات معينة؛ تثبط الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ 0 الموصوفة هنا على نحو مميز التعبير الوراثئي عن واحد أو أكثر من صور متغيرة من 2 في تجسيدات معينة؛ تثبط الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة هنا على نحو مميز التعبير الوراثئي عن صور متغيرة من 090117772 محتوية على تمدد لتكرار هكسا نوكليوتيد. في تجسيدات معينة؛ تثبط الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة هنا انتقائيًا التعبير الوراثي عن صور متغيرة من mRNA مسبق محتوية على تكرار الهكسا نوكليوتيد.
5 في تجسيدات معينة؛ تثبط الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة هنا انتقائيًا التعبير الوراثي عن الصورة المتغيرة من mRNA المصاحبة لمسبب المرض COORFT2 في
تجسيدات معينة؛ تتضمن صور متغيرة mRNA مسبق من COORFT2 محتوية على تمدد لتكرار هكسا نوكليوتيد المتوالية رقم: 3-1 و10-6. في تجسيدات معينة؛ يشمل تمدد تكرار الهكسا نوكليوتيد هذا على الأقل 24 من وحدات التكرار الخاصة بأي من «GGGGCC 0000060 ؛ ©00006؛ أو ©©0000. في تجسيدات معينة؛ يكوّن تمدد تكرار الهكسا نوكليوتيد الور النووية. في تجسيدات معينة؛ تكون الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة هنا مفيدة لتقليل البؤر النووية. قد يتم تقليل البؤر النووية Lad يتعلق بالنسبة المئوية من الخلايا مع البؤر إضافة إلى عدد البؤر لكل خلية. التثبيط الانتقائي لصور متغيرة مصاحبة لمسبب المرض معينة في أمثلة معينة هناء تكشف مجموعة مسبار المادة ald) 18753905 عن صورة متغيرة MRNA 0 (على سبيل المثال (NM_001256054.1 معالجة من صورة متغيرة MRNA مسبق محتوية على تكرار الهكسا نوكليوتيد. الصور المتغيرة MRNA المعالجة من صورة متغيرة MRNA مسبق محتوية على تكرار الهكسا نوكليوتيد (أي؛ "الصورة المتغيرة من MRNA المصاحبة لمسبب المرض ('COORFT2 يحتوي MRNA مسبق على تكرار الهكسا نوكليوتيد عندما يبدأ استنساخ MRNA المسبق في المنطقة من موضع البدء الخاص بالإكسون 18 إلى موضع البدء الخاص بالإكسون 5 18 على سبيل Jill النوكليوتيدات من 1107 إلى 1520 من متوالية مجموعة العوامل الوراثية (المتوالية رقم: 2؛ متمم الوصول إلى بنك الموروثات رقم NT_008413.18 المشذب من نوكليوزيدات من 27535000 إلى 27565000). تم تصميم أوليجو نوكليوتيدات في هذه المنطقة لاستهداف انتقائيًا الصورة المتغيرة mRNA مسبق المحتوية على تكرار الهكسا نوكليوتيد. يقيس 5 منتج MRNA (أي الصورة المتغيرة ل MRNA المصاحبة لمسبب المرض (COORFT2 0 الخاص بالصورة المتغيرة mRNA مسبق المحتوية على تكرار الهكسا نوكليوتيد و» لهذاء يقيس انخفاض الصورة المتغيرة mRNA مسبق المحتوية على تكرار الهكسا نوكليوتيد. السمات المميزة ل 09011772 قد تهجن الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة هنا أية صورة متغيرة من 2 عند أية حالة معالجة داخل أي عنصر خاص بالجين COORFT2 على سبيل 5 المثالء قد تهجن الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة هنا إكسون؛ إنترون» 5 «UTR 118 37.؛منطقة تكرار؛ تمدد لتكرار هكسا نوكليوتيد» وصلة إقران» وصلة إقران
— 9 6 — إكسون:إكسون؛ خافض لإقران خاص بإكسون (ESS) معزز إقران خاص بإكسون (ESE) إكسون ه1ء إكسون 1B إكسون 16؛ إكسون 10؛ إكسون 16 إكسون 2؛ إكسون 3؛ إكسون 4؛ إكسون 5؛ إكسون 6؛ إكسون 7. إكسون 8 إكسون 9,؛ إكسون 10؛ إكسون 11 إنترون el إنترون 2؛ إنترون 3 إنترون ed إنترون 5؛ إنترون 6؛ إنترون 7 إنترون 8؛ إنترون 9؛ أو إنترون 10. على سبيل المثالء قد تستهدف الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ أي من الإكسونات المميزة فيما يلي في الجداول 5-1 للصور المتغيرة من 090181772 المتنوعة الموصوفة Lad يلي. قد تستهدف الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة هنا Wiad الصور المتغيرة غير المميزة فيما يلي ويتم تمييز هذه الصور المتغيرة في GENBANK علاوة على ذلك؛ قد تستهدف Und الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة هنا العناصر بخلاف الإكسونات ويتم تمييز هذه 0 العناصر في GENBANK الجدول 1 المقاطع الوظيفية ل NM_001256054.1 (المتوالية رقم: 1( رقم ~- ب - a ارا ذا ب الإكسو موقع بداية موقع إيقاف موقع البداية بالنسبة إلى موقع الإيقاف بالنسبة mRNA mRNA i المتوالية رقم: 2 إلى المتوالية رقم: 2 0 إكسون 1 158 1137 1294
إكسون 159 646 7839 8326 2 إكسون 647 706 9413 972 3 إكسون 707 802 12527 12622 4 إكسون 803 867 13354 13418 5
— 0 7 — إكسون 941 1057 16396 16512 7 إكسون 1058 1293 18207 18442 8 إكسون 1294 1351 24296 253 9 إكسون 1352 1461 26337 2046
إكسون 1462 3339 26581 2858 11 الجدول 2 المقاطع الوظيفية ل NM_018325.3 (المتوالية رقم: 4( رقم “ - . 7 - “yo. . 7 الاكسو موقع بداية موقع إيقاف موقع البداية بالنسبة إلى ie الإيقاف بالنسبة mRNA mRNA i المتوالية رقم: 2 إلى المتوالية رقم: 2 O إكسون 1 63 1510 1572 13 إكسون 64 551 7839 8326 2 إكسون 552 611 9413 9472 3 إكسون 612 707 12527 12622 4
— 1 7 — إكسون 708 172 13354 13418
إكسون 773 845 147704 14776 6 إكسون 846 962 16396 16512 7 إكسون 963 1198 18207 18442 8 إكسون 1199 1256 24296 24353 9 إكسون 1257 1366 26337 266
إكسون 1367 3244 26581 28458 11 الجدول 3 المقاطع الوظيفية ل NM_145005.5 (المتوالية رقم: 6) موقع الإيقاف و دا و د | موقع البداية بالنسبة BEN موقع بداية | موقع إيقاف | 2277 بالتسبة إلى mRNA| mRNA الى المتوالية رقم: 2 المتوالية رقم: 2
و (إكسون 5 إلى إنترون 5) الجدول 4 المقاطع الوظيفية ل 1 DBOTO3TS. (المتوالية رقم: 7) مما rE EE رقم الإكسون موقع بداية | aay] [See mRNA| mRNA | إلى المتوالية رقم: 2 المتوالية رقم: 2 إكسون (EST 3 ينتهي قبل نهاية الإكسون | 525 562 9413 9450 fast 5 الجدول 5 المقاطع الوظيفية ل 310194591.1 (المتوالية رقم: 8( احا الع Beets an, موقع إيقاف بلنسبةإلى mRNA | mRNA الى المتوالية رقم: 2 المتوالية رقم: 2 ES ve 681 798 13354 13465 (إكسون 5 إلى
إنترون 5)
دلالات معينة في تجسيدات معينة؛ يتم هنا توفير طرق لعلاج فرد تشتمل على إعطاء واحدة أو أكثر من التركيبات الصيدلية الموصوفة هنا. في تجسيدات معينة؛ يعاني الفرد من مرض تنكس عصبي. في تجسيدات معينة؛ يعاني الفرد من خطر إظهار مرض تنكس عصبيء بما في ذلك؛ على سبيل المثال لا الحصرء ALS أو 1710 في تجسيدات معينة؛ تم تحديد الفرد باعتباره يعاني من مرض مصاحب ل 090117:72. في تجسيدات معينة؛ يتم هنا توفير طرق لتقليل على نحو وقائي التعبير الوراثي عن 6901172 في فرد. تتضمن تجسيدات معينة علاج فرد في حاجة لذلك عن Gob إعطاء إلى فرد مقدار فعال Ladle من مركب مضاد لاتجاه النسخ مستهدف لحمض نووي ل
CO9ORF72 0 في أحد التجسيدات؛ يكون إعطاء مقدار فعال علاجيًا من مركب مضاد لاتجاه النسخ مستهدف لحمض نووي ل 090181772 مصحويًا بمراقبة مستويات 690181772 في فردء لتحديد استجابة فرد لإعطاء المركب المضاد لاتجاه النسخ. قد يتم استخدام استجابة فرد لإعطاء المركب المضاد لاتجاه
النسخ بواسطة طبيب لتحديد مقدار وفترة التدخل العلاجي. 5 في تجسيدات معينة؛ يؤدي إعطاء مركب مضاد لاتجاه النسخ مستهدف لحمض نووي ل 2 إلى انخفاض التعبير الوراثي عن COORFT2 بمقدار على الأقل 15؛ 302520 50» 55 60« 65« 70 75 80 85 90 95 أو 51/99 نطاق محدد بواسطة اثنتين من هذه القيم. في تجسيدات معينة؛ يؤدي إعطاء مركب مضاد لاتجاه النسخ مستهدف لحمض نووي ل 090181772 إلى وظيفة تحرك وتنفس محسنة في حيوان. في تجسيدات معينة؛ 0 يُحسن إعطاء مركب مضاد لاتجاه النسخ خاص ب COORFT2 من وظيفة التحرك والتنفس بمقدار على الأقل 15» 20 25» 30 35 40 45« 50 55 60« 65» 70 175 80 85 90 95 أو 9 أو نطاق محدد بواسطة اثنتين من هذه القيم. في تجسيدات معينة؛ يتم استخدام التركيبات الصيدلية مشتملة على مركب مضاد لاتجاه النسخ التي تستهدف 09081772 لتحضير عقار لعلاج مريض يعاني من أو عرضة لمرض تنكس عصبي 5 متضمن FID 5 ALS
علاجات توليفية معينة في تجسيدات معينة؛ يتم إعطاء واحدة أو أكثر من التركيبات الصيدلية الموصوفة هنا على نحو مشترك مع واحد أو أكثر من العوامل الصيدلية الأخرى. في تجسيدات معينة؛ يتم تصميم واحد أو أكثر من العوامل الصيدلية الأخرى هذه لعلاج نفس المرض؛ الاضطراب؛ أو الحالة باعتباره الواحدة أو أكثر من التركيبات الصيدلية الموصوفة هنا. في تجسيدات معينة؛ يتم تصميم واحد أو أكثر من العوامل الصيدلية الأخرى هذه لعلاج مرض مختلف»؛ اضطراب مختلف؛ أو dlls مختلفة باعتباره الواحدة أو أكثر من التركيبات الصيدلية الموصوفة هنا. في تجسيدات معينة؛ يتم تصميم واحد أو أكثر من العوامل الصيدلية الأخرى هذه لعلاج أثر جانبي غير مطلوب خاص بواحدة أو أكثر من التركيبات الصيدلية الموصوفة هنا. في تجسيدات معينة؛ يتم إعطاء واحدة أو أكثر من
0 التركيبات الصيدلية الموصوفة هنا على نحو مشترك مع عامل صيدلي آخر لعلاج أثر غير مطلوب خاص بذلك العامل الصيدلي الآخر. في تجسيدات معينة؛ يتم إعطاء واحدة أو أكثر من التركيبات الصيدلية الموصوفة هنا على نحو مشترك مع عامل صيدلي آخر لإنتاج تأثير توليفي. في تجسيدات معينة؛ يتم إعطاء واحدة أو أكثر من التركيبات الصيدلية الموصوفة هنا على نحو مشترك مع عامل صيدلي آخر لإنتاج تأثير تأزري.
5 في تجسيدات معينة؛ يتم إعطاء واحدة أو أكثر من التركيبات الصيدلية الموصوفة هنا وواحد أو أكثر من العوامل الصيدلية الأخرى في نفس الوقت. في تجسيدات معينة؛ يتم إعطاء واحدة أو أكثر من التركيبات الصيدلية الموصوفة هنا وواحد أو أكثر من العوامل الصيدلية الأخرى في أوقات مختلفة. في تجسيدات معينة؛ يتم تحضير واحدة أو أكثر من التركيبات الصيدلية الموصوفة هنا وواحد أو أكثر من العوامل الصيدلية الأخرى Lae في صيغة فردية. في تجسيدات معينة؛ يتم
0 تحضير واحدة أو أكثر من التركيبات الصيدلية الموصوفة هنا وواحد أو أكثر من العوامل الصيدلية الأخرى على نحو منفصل. في تجسيدات معينة؛ تتضمن العوامل الصيدلية التي قد يتم إعطاؤها بشكل مشترك مع تركيبة صيدلية موصوفة هنا Dexpramipexole g «(Lioresal) Lioresal <(Rilutek) Riluzole في تجسيدات معينة؛ تتضمن العوامل الصيدلية التي قد يتم إعطاؤها بشكل مشترك مع مثبط
COORFT2 5 نوعي موصوف (ld على سبيل المثال لا الحصرء مثبط 9011772 إضافي.
في تجسيدات معينة؛ تتضمن العوامل الصيدلية التي يمكن إعطائها على نحو مشترك مع مثبط نوعي ل 0908772 الموصوفة هناء إلا أن الأمر ليس قاصرًا على؛ مثبط نوعي لمستنسخ COORFT2 مضاد لاتجاه النسخ. في تجسيدات معينة؛ يكون المثبط النوعي لمستنسخ 9011772 المضاد لاتجاه النسخ عبارة عن مركب مضاد لاتجاه النسخ. في تجسيدات معينة؛ يكون المركب المضاد الاتجاه النسخ عبارة عن أوليجو نوكليوتيد معدل. في تجسيدات معينة؛ يكون الأوليجو نوكليوتيد المعدل أحادي الجديلة. في تجسيدات معينة؛ يتم إعطاء العامل الصيدلي الذي يتم إعطائه على نحو مشترك قبل إعطاء تركيبة صيدلية موصوفة هنا. في تجسيدات معينة؛ يتم إعطاء العامل الصيدلي المعطى على نحو مشترك بعد إعطاء تركيبة صيدلية موصوفة هنا. في تجسيدات معينة يتم إعطاء العامل الصيدلي 0 المعطى على نحو مشترك في نفس الوقت كتركيبة صيدلية موصوفة هنا. في تجسيدات معينة تكون جرعة العامل الصيدلي المعطى على نحو مشترك مماثلة للجرعة التي سيتم إعطاؤها إذا تم إعطاء العامل الصيدلي المعطى على نحو مشترك بمفرده. في تجسيدات معينة تكون جرعة العامل الصيدلي المعطى على نحو مشترك أقل من الجرعة التي سيتم إعطاؤها إذا تم إعطاء العامل الصيدلي المعطى على نحو مشترك بمفرده. في تجسيدات معينة تكون جرعة العامل الصيدلي 5 المعطى على نحو مشترك أكبر من الجرعة التي سيتم إعطاؤها إذا تم إعطاء العامل الصيدلي المعطى على نحو مشترك بمفرده. في تجسيدات معينة؛ يعزز الإعطاء على نحو مشترك لمركب ثان من تأثير مركب أول؛ بحيث يؤدي الإعطاء على نحو مشترك للمركبات إلى تأثير يكون أكبر من تأثير إعطاء المركب الأول بمفرده. في تجسيدات (Al يؤدي الإعطاء على نحو مشترك إلى تأثيرات تكون إضافية لتأثيرات 0 المركبات عند إعطائها بمفردها. في تجسيدات معينة؛ يؤدي الإعطاء على نحو مشترك إلى تأثيرات تكون فائقة الإضافة لتأثيرات المركبات عند إعطائها بمفردها. في تجسيدات معينة؛ يكون المركب الأول هو مركب مضاد لاتجاه النسخ. في تجسيدات معينة؛ يكون المركب الثاني هو مركب مضاد لاتجاه النسخ. تركيبات مقارنة معينة 5 في تجسيدات معينة؛ تكون المركبات الموصوفة هنا أكثر قابلية للاحتمال من 1515 576816؛ ISIS 576974 5 577061« 1515 577065« و/أو ISIS 577083. تم اختيار ISIS
ISIS 577061 ISIS 576974 1519 6 577065 و1515 577083 باعتبارما مركبات مقارنة لأنها أظهرت مستويات عالية من انخفاض mRNA 0908772 المعتمد على الجرعة في الدراسات المتنوعة الموصوفة في cad ag WO2014/062691 تم اعتبار ISIS 6 15 576974 1515 577061« 1515 577065 و1515 577083 مركبات lle 5 الفعالية والكفاءة. بشكل إضافيء تكون ISIS 577065 ISIS 577056 و1515 576816 الموصوفة في WO2014/062691 متشابهة من حيث الصيغة البنائية كمركبات موصوفة هنا. على سبيل «JU يكون ل ISIS 577065 تداخل 16 قاعدة نووية مع ISIS 601287؛ يكون ل 577056 تداخل 16 قاعدة نووية مع ISIS 606679؛ يكون ل ISIS 576816 تداخل 18 قاعدة نووية مع ¢(18—mer) 802473 ISIS ويكون ل ISIS 576816 تداخل 18 قاعدة نووية 0 مع ISIS 802459 في تجسيدات معينة؛ ISIS sins 576816؛ MOE als 5-10-5, به متوالية (من 5” إلى 3:) GCCTTACTCTAGGACCAAGA (متضمنة هنا باعتبارها المتوالية رقم: 21)؛ حيث يكون كل رابط نوكليوزيد بيني عبارة عن رابط فوسفوروثيوات؛ يكون كل سيتوزين بيني عبارة عن 5-ميثيل سيتوزين؛ وبشتمل كل من النوكليوزيدات 5-1 و20-16 على مجموعة 2'-0-ميثوكسي إيثيل؛ تم 5 وصفها مسبقًا في (W02014/062691 متضمنة هنا كمرجع, عبارة عن مركب مقارنة. حقق 5 576816 متوسط درجة تقديرية FOB يبلغ 7.00 في دراسة خاصة بالقابلية للاحتمال الحادة في الفئران (انظر المثال 3 Lad يلي في هذا الطلب). حققت مركبات معينة موصوفة هنا درجة تقديرية FOB أقل في دراسة مشابهة خاصة بالقابلية للاحتمال salad) في الفئران (انظر المثال 2 فيما يلي في هذا الطلب)؛ Lay في ذلك ISIS 801287« 1515 6806679 1515 802473« 0 و1915 802459. على هذاء تكون مركبات معينة موصوفة هنا أكثر قابلية للإحتمال من المركب المقارن ISIS 576816 في تجسيدات معينة؛ يكون ISIS 576974 جابمر MOE 5-10-5, به متوالية (من 5” إلى 3( GGGACACTACAAGGTAGTAT (متضمنة هنا باعتبارها المتوالية رقم: 56)؛ حيث يكون كل رابط نوكليوزيد بيني عبارة عن رابط فوسفوروثيوات؛ يكون كل سيتوزين بيني عبارة عن 5-ميثيل 5 سيتوزين؛ ويشتمل كل من النوكليوزيدات 5-1 و20-16 على مجموعة 2'-0-ميثوكسي إيثيل؛ تم وصفها مسبقًا في (WO2014/062691 متضمنة هنا كمرجع؛ عبارة عن مركب مقارنة. Gin
ISIS 576974 متوسط درجة تقديرية FOB يبلغ 5.67 في دراسة خاصة بالقابلية للاحتمال الحادة في الفئران (انظر المثال 3 فيما يلي في هذا الطلب). حققت مركبات Lime موصوفة هنا درجة تقديرية FOB أقل في دراسة مشابهة خاصة بالقابلية للاحتمال salad) في الفئران (انظر المثال 2 Lad يلي في هذا الطلب)؛ بما في ذلك ISIS 801287؛ ISIS «806679 ISIS 802473« و1515 802459. على هذاء تكون مركبات معينة موصوفة هنا أكثر قابلية للإحتمال من المركب المقارن 1515 576974. في تجسيدات معينة؛ يكون ISIS 577061؛ جابمر MOE 5-10-5 به متوالية (من 5 إلى 3( TACAGGCTGCGGTTGTTTCC (متضمنة هنا باعتبارها المتوالية رقم: 57( حيث يكون كل رابط نوكليوزيد بيني عبارة عن رابط فوسفوروثيوات؛ يكون كل سيتوزين بيني عبارة عن 5-ميثيل 0 سيتوزين؛ ويشتمل كل من النوكليوزيدات 5-1 و20-16 على مجموعة 2'-0-ميثوكسي إيثيل؛ تم وصفها مسبقًا في (WO2014/062691 متضمنة هنا كمرجع؛ عبارة عن مركب مقارنة. Gin ISIS 577061 متوسط درجة تقديرية FOB يبلغ 7.00 في دراسة خاصة بالقابلية للاحتمال الحادة في الفئران (انظر المثال 3 فيما يلي في هذا الطلب). حققت مركبات معينة موصوفة هنا درجة تقديرية FOB أقل في دراسة مشابهة خاصة بالقابلية للاحتمال salad) في الفئران (انظر المثال 2 5 فيما يلي في هذا الطلب)؛ Lay في ذلك ISIS 801287؛ ISIS «806679 ISIS 802473« و1515 802459. على هذاء تكون مركبات معينة موصوفة هنا أكثر قابلية للإحتمال من المركب المقارن ISIS 577061. في تجسيدات معينة؛ يكون ISIS 577065 جابمر MOE 5-10-5. به متوالية (من 5 إلى 3( CCCGGCCCCTAGCGCGCGAC (متضمنة هنا باعتبارها المتوالية رقم: 58( حيث يكون كل 0 رابط نوكليوزيد بيني عبارة عن رابط فوسفوروثيوات؛ يكون كل سيتوزين بيني عبارة عن 5-ميثيل سيتوزين» وبشتمل كل من النوكليوزيدات 5-1 و20-16 على مجموعة 2'-0-ميثوكسي ei) تم وصفها مسبقًا في (WO2014/062691 متضمنة هنا كمرجع؛ عبارة عن مركب مقارنة. Gin ISIS 577065 متوسط درجة تقديرية FOB يبلغ 6.00 في دراسة خاصة بالقابلية للاحتمال الحادة في الفئران (انظر المثال 3 فيما يلي في هذا الطلب). حققت مركبات Lime موصوفة هنا درجة 5 تقديرية FOB أقل في دراسة مشابهة خاصة بالقابلية للاحتمال الحادة في الفئران (انظر المثال 2 Lad يلي في هذا الطلب)؛ بما في ذلك ISIS 801287؛ ISIS «806679 ISIS 802473«
و1515 802459. على هذاء تكون مركبات معينة موصوفة هنا أكثر قابلية للإحتمال من المركب المقارن ISIS 577065. في تجسيدات معينة؛ يكون ISIS 577083 جابمر MOE 5-10-5؛ به متوالية (من 5 إلى 3:) GGTAACTTCAAACTCTTGGG (متضمنة هنا باعتبارها المتوالية رقم: 59)؛ حيث يكون كل رابط نوكليوزيد بيني عبارة عن رابط فوسفوروثيوات؛ يكون كل سيتوزين بيني عبارة عن 5-ميثيل سيتوزين» وبشتمل كل من النوكليوزيدات 5-1 و20-16 على مجموعة 2'-0-ميثوكسي ei) تم وصفها مسبقًا في (WO2014/062691 متضمنة هنا كمرجع؛ عبارة عن مركب مقارنة. Gin ISIS 577083 متوسط درجة تقديرية FOB يبلغ 7.00 في دراسة خاصة بالقابلية للاحتمال الحادة في الفئران (انظر المثال 3 فيما يلي في هذا الطلب). حققت مركبات Lime موصوفة هنا درجة 0 تقديرية FOB أقل في دراسة مشابهة خاصة بالقابلية للاحتمال الحادة في الفئران (انظر المثال 2 فيما يلي في هذا الطظلب)؛ Lay في ذلك ISIS «806679 ISIS «801287 ISIS 802473« و1515 802459. على هذاء تكون مركبات معينة موصوفة هنا أكثر قابلية للإحتمال من المركب المقارن ISIS 577083 في تجسيدات معينة؛ يكون ISIS 577056« جابمر MOE 5-10-5؛ به متوالية (من 5" إلى 3:) AATCTTTATCAGGTCTTTTC 5 (متضمنة هنا باعتبارها المتوالية رقم: 60( حيث يكون كل رابط نوكليوزيد بيني عبارة عن رابط فوسفوروثيوات؛ يكون كل سيتوزين بيني عبارة عن 5-ميثيل سيتوزين» وبشتمل كل من النوكليوزيدات 5-1 و20-16 على مجموعة 2'-0-ميثوكسي ei) تم وصفها مسبقًا في (WO2014/062691 متضمنة هنا كمرجع؛ عبارة عن مركب مقارنة. حقق 5 577056 متوسط درجة تقديرية FOB يبلغ 6.5 في دراسة خاصة بالقابلية للاحتمال الحادة 0 في الفئران (انظر المثال 3 Lad يلي في هذا الطلب). حققت مركبات dime موصوفة هنا درجة تقديرية FOB أقل في دراسة مشابهة خاصة بالقابلية للاحتمال salad) في الفئران (انظر المثال 2 فيما يلي في هذا الطظلب)؛ Lay في ذلك ISIS «806679 ISIS «801287 ISIS 802473« و1515 802459. على هذاء تكون مركبات معينة موصوفة هنا أكثر قابلية للإحتمال من المركب المقارن ISIS 577056. 5 علاجات plo محددة
تعتبر الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الخاصة ب COORFT2 البشري الموصوفة هنا
علاجات بشرية ممكنة. يتم فحص المتغيرات المتنوعة الخاصة بالفعالية»؛ الكفاءة؛ و/أو القابلية
للاحتمال. تتضمن هذه المتغيرات تثبيط إجمالي التعبير الوراثي عن RNA 90181772 في المعمل؛
تثبيط إجمالي التعبير الوراثي عن الصورة المتغيرة من RNA المصاحبة لمسبب المرض الخاص ب
COORFT2 5 في المعمل؛ الاستجابة للجرعة في المعمل (1050)؛ تثبيط معمليًا إجمالي RNA أو
RNA السبب للمرض و/أو البروتين في حيوان متحوّر Lig محتوي على جين ناقل ل
2 بشري في الأنسجة ذات الصلة (على سبيل المثال» المخ و/أو الحبل الشوكي)» القابلية
للاحتمال في الفأرء القابلية للاحتمال في الجرذء و/أو القابلية للاحتمال في أحد الكائنات الرئيسية.
تتضمن مرقمات القابلية للاحتمال التي يمكن قياسها الدم ومتغيرات كيمياء المصلء متغيرات كيمياء 0 088 وزني الجسم والعضوء الملاحظات العامة و/أو الاختبارات السلوكية؛ و/أو المرقمات البيولوجية
الكيميائية GFAP Jie و/أو ATF] قد يتم قياس القابلية للاحتمال الحادة أو ممتدة المدى.
تركيبات معينة
801287 1515 -1
في تجسيدات معينة؛ يتم تمييز ISIS 801287 كجابمر MOE 4-8-6 به متوالية (من 5” إلى GCCCCTAGCGCGCGACTC 03 5 (متضمنة هنا باعتبارها المتوالية رقم: 33)؛ حيث تكون
كل من النوكليوزيدات 4-1 و18-13 عبارة عن نوكليوزيدات معدلة ب 0-2-ميثوكسي إيثيل
jon) وتكون كل من النوكليوزيدات 12-5 عبارة عن نوكليوزيدات 2”-ديوكسي؛ حيث تكون
روابط النوكليوزيد البيني فيما بين النوكليوزيدات من 2 إلى 3 من 3 إلى 4؛ من 13 إلى 14؛ من
4 إلى 15؛ ومن 15 إلى 16 عبارة عن روابط فوسفو داي إستر وتكون روابط النوكليوزيد البيني فيما بين النوكليوزيدات من 1 إلى 2؛ من 4 إلى 5؛ من 5 إلى 6؛ من 6 إلى dT من 7 إلى 6؛
من 8 إلى 9؛ من 9 إلى 10 من 10 إلى 11» من 11 إلى 12 من 12 إلى 13؛ من 16 إلى
7؛ ومن 17 إلى 18 عبارة عن روابط فوسفوروثيوات» وحيث يكون كل سيتوزين بيني Ble عن
5-ميثيل سيتوزين.
Ges 00080 بواسطة الرمز الكيميائي التالي: 801287 ISIS في تجسيدات معينة»؛ يتم وصف mCeo mCes mCds Tds Ads 60: mCds 605 mCds Gds mCeo Geo Aeo mCes Tes 25
«Cua tmCe
٠ 8 0 ٠ أدينين؛ = A -ميثيل سيتوزين "5 = mC جوانين؛ = G ثيمين؛ - 7
Joy »ع - مكر معدل ب 0-2-ميثوكسي إيثيل 5 سكر 2 -ديوكسي ردبوزء - رابط نوكليوزيد بيني من فوسفوروثيوات؛ و - » رابط نوكليوزيد بيني من فوسفو داي إستر. < 0 بواسطة الصيغة البنائية الكيميائية التالية» أو ملح 801287 ISIS يتم وصف chine في تجسيدات من ذلك: 0 0 3 | by N Ii وباي ب" 7 بت 0َ " My ny
Q ot oy ° 2 eo” طلم ب محم re ] 75 pe ا ١ of Na]
Je ١ كا الاب ات 0 a, موب مت محرو i i” لي ري“ بجنا re An ا 9 - NH, pa 0. ° مح Ty ما ا موب سم ©
Hie re © هده 1 " OH 1.9 0 0 Heo iy 0 ira RESH 1 ا وحمو o on 3 gr
HS—P=0 ; 801287 1515 .1 الصيغة البنائية الكيميائية التالية:
ا مكاي ol : Ce SER oO,
ATEN عر LEE
STON ١ الج أل TY اك ادم ضع “ كب SPS he 1.3 ae ofp | WET . hgh: et SLX, الصيغة البنائية 2 ملح الصوديوم من ISIS 801287 806679 1515 -2 في تجسيدات معينة؛ يتم تمييز ISIS 806679 كجابمر MOE 6-10-4؛ به متوالية (من 5” إلى GGTTAATCTTTATCAGGTCT ):3 5 (متضمنة هنا باعتبارها المتوالية رقم: 49)؛ حيث تكون كل من النوكليوزيدات 6-1 و20-17 عبارة عن نوكليوزيدات معدلة ب 0-2-ميثوكسي إيثيل ريبوز» وتكون كل من النوكليوزيدات 16-7 عبارة عن نوكليوزيدات 2”-ديوكسي؛ حيث تكون روابط النوكليوزيد البيني فيما بين النوكليوزيدات من 2 إلى 3؛ من 3 إلى 4؛ من 4 إلى 5؛ من 5 إلى 6» من 6 إلى 7» ومن 17 إلى 18 عبارة عن روابط فوسفو داي إستر وتكون روابط 0 النوكليوزيد البيني فيما بين النوكليوزيدات من 1 إلى 2؛ من 7 إلى 8؛ من 8 إلى 9 من 9 إلى 10؛ من 0 إلى 11؛ من 11 إلى 12 من 12 إلى 13؛ من 13 إلى 14؛ من 14 إلى 15؛ من 15 إلى 16» من 16 إلى 7 من 18 إلى 19 ومن 19 إلى 20 عبارة عن روابط فوسفوروثيوات» وحيث يكون كل سيتوزين بيني Ble عن 5'-ميثيل سيتوزين. Ges Geo 180 بواسطة الرمز الكيميائي التالي: 806679 ISIS Chay في تجسيدات معينة»؛ يتم ‘Teo Aeo معط Tds mCds Tds Tds Tds Ads Tds mCds Ads Gds Geo Tes mCes Te 5 حيث؛
— 2 8 — =A أدينين ¢ =mC 5 ”-ميثيل سيتوزين 6 - جوانين؛ 7 - ثيمين؛ ع <-سكر معدل ب 0-2 ميثوكسي إيثيل ريبوز =d سكر 2 ديوكسي ربوز - رابط نوكليوزيد بيني من فوسفوروثيوات؛ و ٠ - رابط نوكليوزيد بيني من فوسفو داي إستر. في تجسيدات معينة؛ يتم ISIS Chay 806679 بواسطة الصيغة البنائية الكيميائية التالية؛ أو ملح 0 من ذلك: NH NH2 تدع HO ° 6 NH, Ans 0 ليم وح وي مستي a—b=o ل ممه رع و ما ,15 Rx: Se, fe TT ote po N LL 0 0 _ 0 Ts 5 = HN NH; 1 oJ ° ا ب He-p=o ا ِ محرو مما ال ع مهي بح حلمم iy امهم "١ ل م o N © a or, سل Hz HS—bmo = o | No ee 1 7 وحنو ل اا ملم م “oy No Sr الصيغة البناثية 3. 1515 806679 في تجسيدات معينة؛ يتم وصف ملح الصوديوم من 1515 806679 بواسطة الصيغة البنائية الكيميائية التالية:
ol ب mo FI بام الى ١ اجاح طم المي EN ب" م عا و 15 تيم ie nL oS SR اسع RAEN ry . pea . ne” Rey, He STE TE RUS o ° Nhs na” & LA SE hs ا On ١ AE \ SEE eS el IRIS “ما ” Ln REN > الصيغة البنائية 4. ملح الصوديوم من ISIS 806679 3- 1515 802473 في تجسيدات معينة؛ يتم تمييز ISIS 802473 كجابمر MOE 4-8-6 به متوالية (من 5" إلى GCCTTACTCTAGGACCAA ):3 5 (متضمنة هنا باعتبارها المتوالية رقم: 47)؛ حيث تكون كل من النوكليوزيدات 4-1 و18-13 عبارة عن نوكليوزيدات معدلة ب 0-2-ميثوكسي إيثيل om) ¢ وتكون كل من النوكليوزيدات 12-5 عبارة عن نوكليوزيدات 2”-ديوكسي؛ حيث تكون روابط النوكليوزيد البيني فيما بين النوكليوزيدات من 2 إلى 3؛ من 3 إلى 4 من 13 إلى 14؛ من 4 إلى 15؛ ومن 15 إلى 16 عبارة عن روابط فوسفو داي إستر وتكون روابط النوكليوزيد البيني 0 فيما بين النوكليوزيدات عته من 1 إلى 2؛ من 4 إلى 5؛ من 5 إلى 6؛ من 6 إلى 7؛ من 7 إلى 8» من 8 إلى 9؛ من 9 إلى 10؛ من 10 إلى 11 من 11 إلى 12؛ من 12 إلى 13 من 16 إلى 17 ومن 17 إلى 18 عبارة عن روابط فوسفوروثيوات؛ وحيث يكون كل سيتوزين بيني عبارة عن 5”-ميثيل سيتوزين. في تجسيدات معينة؛ يتم وصف ISIS 802473 بواسطة الرمز الكيميائي التالي: Ges mCeo عد mCeo mCes Aes معذ tmCeo Tes Tds Ads mCds Tds mCds Tds Ads Gds Geo حيث؛ =A أدينين
”-ميثيل سيتوزين 5 =mC جوانين؛ - ثيمين؛ - 7 ع - سكر معدل ب 0-2-ميثوكسي إيثيل ريبوز سكر 2 ديوكسي ربوز =d 5 رابط نوكليوزيد بيني من فوسفوروثيوات؛ و - » م - رابط نوكليوزيد بيني من فوسفو داي إستر. بواسطة الصيغة البنائية الكيميائية التالية؛ أو ملح 802473 ISIS في تجسيدات معينة؛ يتم وصف من ذلك: 1,
N ro qr re
LEN . NZ “NH, Tr ASS 6 oJ NH, 0 0 P
HS—P=0 N NH ww ١ oN 0 L oJ] : الل ١ A EER 0” ا ° بم ne 0 oJ NH 0 ry
Ho-P=0 SN 9 NH ل 9 o CL al Tr مور ry لقا لما oy SAS 6 oJ 0 0 NH R= N
HO-P=0 HS—P=0 NSN 0” pS Lf HS ad MHz 0 0 "© الي 4 0 5 ah ? 13 o 0 SL 0 00 80 oy HELO N NH 0” 0 | 0 2
Noy حا oS on On
NH, ) 2 0 A p= N
Hg-3=0 0 ne ° 9 7 “ey يما 3 he Ha ا N gy
YRS ب 0 o 0
Hs-p=o Ho-P=0 به 10 802473 ISIS .5 الصيغة البنائية بواسطة الصيغة البنائية 502473 ISIS في تجسيدات معينة؛ يتم وصف ملح الصوديوم من الكيميائية التالية:
— 5 8 — 0 N NH 0 NH. Cn 10 < HO. o " N” “NH; Tr CL, ot NH, 0 0 o 0 ©5-P=0 NH NH SN © 9 | 2 ot 8 : CL, موك Cl, ا ميم ملك 0 w Fy R= “ers o” 0 2 © 0 TNR on MER CO ,0 8-0 هيم في 0 لا Na o Ne | ) © من وح 6 مما اع طم ١| لنضل. P= NH p= Ns 0 o : 0 ". 8 s ; 0 Es ny oJ 0 . 2 5 صم 0 لبا سما oJ 0 0 N NH NTN " NH Fs-h=0 "ey pu موه oJ بن 0 م nO o Tr ad 3 د "0 حب Na EN aed يو دحوو NTN ) 1 2 © © Na 0 0 > NH, Q 1 NH ب AS 0. ome 2 5 مدع = A ® NNT إ نم _ لما So Na لم ° a R 7 0 به لوه ودلو6 Na Nal الصيغة البنائية 6. ملح الصوديوم من ISIS 802473 4- 1515 802459 في تجسيدات معينة؛ يتم تمييز ISIS 802459 كجابمر MOE 3-10-7 به متوالية (من 5" 5 إلى GCCTTACTCTAGGACCAAGA (C3 (متضمنة هنا باعتبارها المتوالية رقم: 21)؛ حيث تكون كل من النوكليوزيدات 3-1 و20-14 عبارة عن نوكليوزيدات معدلة ب 0-2 ميتوكسي إيثيل ريبوز» وتكون كل من النوكليوزيدات 13-4 عبارة عن نوكليوزيدات 2”-ديوكسي؛ حيث تكون روابط النوكليوزيد البيني Led بين النوكليوزيدات من 2 إلى 3؛ من 3 إلى 4؛ من 14 إلى من 15 إلى 16» من 16 إلى 17« ومن 17 إلى 18 عبارة عن روابط فوسفو داي إستر 0 وتكون روابط النوكليوزيد البيني فيما بين النوكليوزيدات هي من 1 إلى 2؛ من 4 إلى 5؛ من 5 إلى 6» من 6 إلى 7© من 7 إلى 8؛ من 8 إلى 9؛ من 9 إلى 10؛ من 10 إلى 11 من 11 إلى c12 من 12 إلى 13 من 13 إلى 14؛ من 18 إلى 19 ومن 19 إلى 20 عبارة عن روابط فوسفوروثيوات؛ وحيث يكون كل سيتوزين بيني Ble عن 5'”-ميثيل سيتوزين.
— 8 6 —
Ges mCeo بواسطة الرمز الكيميائي التالي: 802459 ISIS في تجسيدات معينة؛ يتم وصف mCeo Tds Tds Ads mCds Tds mCds Tds Ads Gds Gds Aeo mCeo mCeo Aeo Aes «Cus ¢Ges Ae ‘ أدينين =A 5”-ميثيل سيتوزين < © 5 جوانين؛ - 6 3 “pati =T ع - سكر معدل ب 0-2-ميثوكسي إيثيل ريبوز
Op سكر 2'-ديوكسي - 0 رابط نوكليوزيد بيني من فوسفوروثيوات؛ و - * 0 م - رابط نوكليوزيد بيني من فوسفو داي إستر. في تجسيدات معينة؛ يتم وصف 1515 502459 بواسطة الصيغة البنائية الكيميائية التالية؛ أو ملح من ذلك: ©
HO. 4 Po i G بمب 0ًَ LO OL, o out NH, 0 oe 0 _
Le وحمو iy $J ey
AF ١ Ee o” 0 0 0 oJ NH, يما ° arg
REN TL, محم Cr Sad N ly لب ما 2 6 oJ 0 0 NH; R=
HO-P=0 Hs—P=0 طم 0 0 Tr 0 an; 9 به He لب با 5 Ee veg=o Cr Ho-feo oe =p .
Rd ل مالا N 1 ny =e fo رم Coan eS od > © لب ملم م وحنو 2 Heme ¢ J os ما ١ ري 0 ب
Hs—b=0 به مم 802459 ISIS .7 الصيغة البنائية 5
— 7 8 — الكيميائية التالية: 1 He 0 ل 5 HO.
NT NT ONH, NH SN or UL, اقب oo ° 0 وم od 9 ©8-P=0 NH; NH SN © ha A o 8 2 Na } IN TL, N Soto TL, لي محف 1 لما TY ww Or 5 oS NH, 1 بح وم ودار وحمو NaS © No ob No ذا “Ne يما بم oJ 0 0 NH 0 4 اي مفو ©0-p=0 لب ا ey Ne 0 0 o يما ا ما مما ما oJ ميا كل A Na” 9 ١١ 6 © N 1 موه 7 ° Ne ol ° K NH o ¢ i © 0 4 Lr NR, كير Na ١١" ا مجع ’ N 9 ما بو ا 5 ٠ قي 5 4 با NH; 0 2 4 5 8 Lo | ET 0 5< ب ي- لا 6 © Q p= Nee A By Na 0 _ 4 0 0 88 ال ا 5“ وج 0 يم oy " w * 0 ممتي موه 0 الصيغة البنائية 8. ملح الصوديوم من ISIS 802459
الأمثلة بينما قد تم وصف مركبات؛ تركيبات» وطرق بعينها موصوفة هنا بنوعية وفقًا لتجسيدات معينة؛ تعمل الأمثلة التالية فقط لبيان المركبات الموصوفة هنا ولا يُقصد أن تحد منها. يتم تضمين كل من 0 المراجع المذكورة في الطلب الحالي كمرجع بأكملها هنا. المثال 1: الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ التي تستهدف 09011772 البشري تم تصميم الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ في الجدول التالي باعتبارها جابمرات MOE يحتوي مقطع الفجوة المركزي الخاص dS جابمر على نوكليوزيدات 2”-ديوكسي وتتم إحاطته بواسطة المقاطع الجناحية على كل من النوكليوزيدات المحتوية على الطرف 5" وعلى 5 الطرف 3 التي يشتمل كل منها على مجموعة 1015-72 يتم إدراج الباعث النوعي الخاص بكل
— 8 8 — جابمر في الجدول Jul ممثلاً بواسطة ثلاثة أرقام مفصولة بواسطة شرطات. تمثل الأرقام عدد النوكليوزيدات في الجناح 5 الفجوة؛ والجناح 3”؛ على التوالي. تكون كل الوحدات البنائية للسيتوزين خلال كل أوليجو نوكليوتيد عبارة عن مركبات 5-ميثيل سيتوزين. تكون روابط النوكليوزيد البيني للجابمرات عبارة عن روابط فوسفوروثيوات وفوسفو داي إستر مختلطة. يتم تقديم روابط النوكليوزيد البيني لكل جابمر في عمود alll حيث "0" تشير إلى رابط فوسفو داي إستر وه" تشير إلى رابط فوسفوروثيوات. يتم توجيه كل أوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ مدرج في الجدول التالي إلى متوالية مجموعة العوامل الوراثية ل 090181772 البشريء المدلل عليها هنا باعتبارها المتوالية رقم: 2 (المتممة لرقم الوصول لبنك الجينات NT_008413.18 المشذب من النوكليوزيدات من 27535000 إلى 0 27565000). 'موضع البدء" يشير إلى النوكليوزيد الأعلب عند الموضع 5”- الذي يستهدفه الجابمر في متوالية مجموعة العوامل الوراثية البشرية. "موضع الإيقاف" يشير إلى النوكليوزيد الأغلب عند الموضع 3” الذي يستهدفه الجابمر في متوالية مجموعة العوامل الوراثية البشرية. الجدول 6 الأوليجو نوكليوتيدات المضادة slat النسخ التي تستهدف 09081772 البشري الم مو مو اليا توا 8 ضع ضع 2 — المتوالية الرابط لية ay) | all | 5 عث )3 al c م 3- CCGGCCCCTAGCGCGCGA 141 14} 1 | 0000ه 5005555555555 10 2 CT| 64| 45| 6 55 2 — 7 4- CCGGCCCCTAGCGCGCGA 141 14} 1 | $0008555888888000 10 2 CT| 64| 45| 7 55 2 -6 ER a
21 10 * CT| ابم 45| 658 4- - 2 10 000000555555555: | CCGGCCCCTAGCGCGCGA 141 14} 1 2 * CT| اي 45| 659 3- -5 2 و 50000555555585005 | CGGCCCCTAGCGCGCGAC 141 14} 1 3 i 17 63] 45| 660
-5 2 _g | Seooosssssssssoos CCGGCCCCTAGCGCGCGA 141 14 791 4 i Cl 64] 46| 661 5 -4 2 و 5000555555555 0005 | CGGCCCCTAGCGCGCGAC 14 14] 1 3 i 17| 63] 45| 662 6 -4 2 و 50005555555550005 | CCGGCCCCTAGCGCGCGA 141 14 791 4 i © اج 46| 663 6 -6 2 و 000005555555550: CGGCCCCTAGCGCGCGAC 141 14} 1 3 i T| 63] 45| 664 4 -6 2 و 50000055555555505 | CCGGCCCCTAGCGCGCGA 141 14} 1 4 i Cl اج 46| 665 4 -4 2 10 | SO00ssssssssss000 CCCTAGCGCGCGACTCCT 141 14) 801 5 5 GA| 59| 40| 274 6-
2 10 0005555555555000 | CCCCTAGCGCGCGACTCC 14 14 801 6 s TG | 60| 41] 275 6- -4 2 10 000555555555000, GCCCCTAGCGCGCGACTC 14 14] 1 7 9 CT| ا 42] 276 6- -4 2 10 50005555555555000 | GGCCCCTAGCGCGCGACT 14 141 1 8 9 CCl اه 43| 7 6- -4 2 10 50005555555555000 | CGGCCCCTAGCGCGCGAC 141 14} 1 9 9 TC| ادم 44| 8 6- -6 2 داو 0 CCCTAGCGCGCGACTCCT 141 14) 801 5 GA | 59] 40] 279 4- -6 2 10 0000055555555550 | CCCCTAGCGCGCGACTCC 14 14 801 6 s TG | 60| 41| 280 4- -6 2 10 00000555555855550 | GCCCCTAGCGCGCGACTC 14 14] 801 7 9 CT| 0١ ا42 1 4- -6 2 داو 0 GGCCCCTAGCGCGCGACT 141 14) 801 8 9 CCl اهو 43| 282 4- 2-6 50000055555555550 | CGGCCCCTAGCGCGCGAC 141 14} 1 °1 10 5 TC| 63] 44| 3
— 9 1 — اا es -4 3 14 14١ 1 —8 | soosssssssssoooss | CCTAGCGCGCGACTCCTG 0 58| 41 | 284 6 -4 3 14 14١ 1 —8 | soosssssssssoooss | CCCTAGCGCGCGACTCCT 1 59| 42| 285 6 -4 3 14 14١ 1 —8 | soosssssssssoooss | CCCCTAGCGCGCGACTCC 2 60 | 43 | 286 6 -4 3 14 14١ 1 —8 | soosssssssssoooss | GCCCCTAGCGCGCGACTC 3 61 | 44 | 7 6 -4 3 14 14١ 1 —8 | soosssssssssoooss | GGCCCCTAGCGCGCGACT 4 62 | 45| 288 6 -4 3 14 14١ 1 —8 | soosssssssssoooss | CGGCCCCTAGCGCGCGAC 63 | 46 | 289 6 -6 3 14 14١ 1 —8 | soooosssssssssoss | CCTAGCGCGCGACTCCTG 0 58| 41| 290 4 -6 3 14 14١ 1 —8 | soooosssssssssoss | CCCTAGCGCGCGACTCCT 1 59 | 42 | 291 4 7
3 14| 14| 801 —-8 | soooosssssssssoss | GCCCCTAGCGCGCGACTC 3 61| 44 | 293 4 -6 3 14| 14| 801 —8 | soooosssssssssoss | GGCCCCTAGCGCGCGACT 4 62| 45| 294 4 -6 3 14| 14| 801 —8 | soooosssssssssoss | CGGCCCCTAGCGCGCGAC 63| 46| 295 4 -4 3 او 0 AGGCTGCGGTTGTTTCCC 14 141 1 6 5 TC| ادد 03| 6 6- -4 3 10 50005555555558000 | CAGGCTGCGGTTGTTTCC 14 14 1 7 5 CT| 23| 04| 297 6- -5 3 ه١ 9ت 008 GGCTGCGGTTGTTTCCCT 14 141 1 8 5 C| 21] 03] 8 5 -5 3 _g | Seooosssssssssoos AGGCTGCGGTTGTTTCCC 141 14 801 2 i TI 22| 04] 299 5 -5 4 و 50000555555558005| CAGGCTGCGGTTGTTTCC 141 14} 1 0 i C| 23] 05| 300 5
3 ه١ 8 GGCTGCGGTTGTTTCCCT 14 141 1 8 i Cl 21] 03] 301 6 -4 3 ه١ 8 AGGCTGCGGTTGTTTCCC 141 14 801 2 i 17| 22) 04] 302 6 -4 4 و 50005555555850005| CAGGCTGCGGTTGTTTCC 141 14} 1 0 i Cl 23] 05| 303 6 -6 3 و 50000055555555505 GGCTGCGGTTGTTTCCCT 14 14] 1 8 i Cl 21] 03| 304 4 -6 3 ه١ AGGCTGCGGTTGTTTCCC 141 14 801 2 i 17| 22) 04] 5 4 -6 4 و $00000sssssssss0s | CAGGCTGCGGTTGTTTCC 141 14} 1 0 i Cl 23] 05| 306 4 -4 4 14| 14| 1 —8 | soosssssssssoooss | GCTGCGGTTGTTTCCCTC 1 20] 03| 307 6 -4 4 14| 14| 1 —8 | soosssssssssoooss | GGCTGCGGTTGTTTCCCT 2 21| 04| 308 6 4| 4 14| 14| 1 50055555555500055| AGGCTGCGGTTGTTTCCC 3-8 22] 05 309
4 14 14١ 1 —8 | soosssssssssoooss | CAGGCTGCGGTTGTTTCC
4 23 06| 310 6 -6
4 14 14١ 1 —8 | soooosssssssssoss | GCTGCGGTTGTTTCCCTC
1 20 03] 1 4 -6
4 14 14١ 1 —8 | soooosssssssssoss | GGCTGCGGTTGTTTCCCT
2 21 04] 2 4 -6
4 14 14١ 1 —8 | soooosssssssssoss | AGGCTGCGGTTGTTTCCC
3 221 05| 3 4 -6
4 14 14١ 1 —8 | soooosssssssssoss | CAGGCTGCGGTTGTTTCC
4 23 | 06| 314 4 -6
3 10 50000055555555550 AGGCTGCGGTTGTTTCCC 14 141 1
6 58 16 221] 03] 5 4- -6
3 10 0000055555558550( CAGGCTGCGGTTGTTTCC 14 141 1
7 58 CT| 23| 04| 6 4- -3
2 10 005555555550000, GCCTTACTCTAGGACCAA 50 79 802
459 |90 ]09 ا 58 1 -7
حالم لم لس متسس ل ا
>| 0 ® ATI 31] 12] 460 7- -3 4 10 | SOOssssssssss0000 CTGCGATCCCCATTCCAG 82] 81| 802 6 5 11| 05| 86 1 7- -4 2 10 50005555555555000 | GCCTTACTCTAGGACCAA 80 | 79] 802 1 : GA| 09| 90| 462 6- -4 4 | | Sooossssssssssooo TCTGTCTTTGGAGCCCAA 50 80 802 > a AT! 31| 12] 463 6- -4 4 10 $0005555858585000 | CTGCGATCCCCATTCCAG 82| 81] 802 6 5 11| 05| 86 464 6- -6 2 10 | S00000sssssssssso GCCTTACTCTAGGACCAA 50 79 802 1 ّ GA| 09| 90| 465 4- -6 4 10 000005555885550 | TCTGTCTTTGGAGCCCAA 80 | 80 | 802 > a اكه 31| 12] 466 4- -6 4 داو 0 CTGCGATCCCCATTCCAG 82] 81| 802 6 5 11| 05| 86 467 4- = 2 د د لور 5 GCCTTACTCTAGGACCAA 50 79 802 1 ّ 04| 09| 90| 468 3-
4 10 000000555555555 TCTGTCTTTGGAGCCCAA 50 80 802 58 AT! 1| 12] 9 3- -7 4 10 000000555555555 CTGCGATCCCCATTCCAG 82| 1 802 6 55 11 05| 86| 0 3- -3 4 80| 79- 2 —8 | sosssssssssooooss | GCCTTACTCTAGGACCAA 7 09 92+ 1 7 -3 4 80| 80| 802 —8 | sosssssssssooooss | TCTGTCTTTGGAGCCCAA 8 31 14) 472 7 4 4 80| 79- 2 —8 | soosssssssssoooss | GCCTTACTCTAGGACCAA 7 09 92 3 6 4 4 80| 80| 802 —8 | soosssssssssoooss | TCTGTCTTTGGAGCCCAA 8 31 14] 474 6 -6 4 80| 79- 2 —8 | soooosssssssssoss | GCCTTACTCTAGGACCAA 7 096 92 5 4 -6 4 80| 80| 802 —8 | soooosssssssssoss | TCTGTCTTTGGAGCCCAA 8 31 14 | 476 4 4| -7 80| 79- 2 000005555555555 | GCCTTACTCTAGGACCAA 7| -8 09 92 7
اق = 4 80| 80| 2 —8 | sooooosssssssssss | TCTGTCTTTGGAGCCCAA 8 31| 14| 8 3 -3 4 10 $00ss8ssssssss0000 | GGTTAATCTTTATCAGGT 13] 13} 806 2 " CT| و89 70| 3 7- -3 0055555555550000 | TGGTTAATCTTTATCAGG 131 13| 806 0 TC| 90| 71] 674 7- -3 5 10 50055555555550000 | CTGGTTAATCTTTATCAG 13 13] 56 1 s 67 91| 72] 675 7- -4 4 10 500055555555655000| GGTTAATCTTTATCAGGT 13] 13} 56 2 " CT| و8 70| 676 6- -4 5 10 50005555555555000 | TGGTTAATCTTTATCAGG 13] 13] 806 0 TC| 90| 71| 677 6- -4 5 10 50005555555555000 | CTGGTTAATCTTTATCAG 13/13 56 1 s 67 91| 72| 678 6- -6 4 10 $00000sssssssssso | GGTTAATCTTTATCAGGT 13] 13} 806 2 " CT| و 70| 679 4- 5 6 مس | 766747077476466 | 13] 13] 6
-08-
IF
4- -6 50000055555555550 | CTGGTTAATCTTTATCAG 13/13 56 1 5 GT| 91] 72| 1 4- -7 4 10 0000005555555555| GGTTAATCTTTATCAGGT 13/13 6 2 > CT| 89| 70| 682 3- -7 5 10 000000555555555 | TGGTTAATCTTTATCAGG 13] 13 | 806 0 > TC| 90| 71| 683 3- -7 5 10 0000005555558585| CTGGTTAATCTTTATCAG 13] 13| 806 1 5 GT| و١ 72| 684 3- -4 5 13] 13| 6 —8 | soosssssssssoooss | GTTAATCTTTATCAGGTC 2 88 | 71| 685 6 -4 5 13] 13| 6 —8 | soosssssssssoooss | GGTTAATCTTTATCAGGT 3 89 | 72| 686 6 -4 5 13] 13| 6 —8 | soosssssssssoooss | TGGTTAATCTTTATCAGG 4 90 | 73| 687 6 -4 5 14] 14| 6 —8 | soosssssssssoooss | CTAGCGCGCGACTCCTGA 5 57| 40| 688 6
— 9 9 — 6- 806 13/13 5 ١ 999055 GTTAATCTTTATCAGGTC 8— 689 | 71 | 88 2 4 6- 806 13/13 5 soooosssssssssoss | GGTTAATCTTTATCAGGT | 8— 690 +72 | 89 3 4 6- 806 13/13 5 soooosssssssssoss | TGGTTAATCTTTATCAGG | 8— 691 | 73 | 90 4 4 6- 806 14 |14 5 soooosssssssssoss | CTAGCGCGCGACTCCTGA | 8— 692 |40 | 57 5 4 المثال 2: القابلية للاحتمال الخاصة بالأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ التي تستهدف 060612 البشري في الفئران تم اختبار الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة فيما سبق في الفئران لتقييم القابلية للاحتمال الخاصة بالأوليجو نوكليوتيدات. تلقى كل فأر من نوع 057/816 البري جرعة فردية داخل البطين الدماغي تبلغ 700 ميكرو جرام من أوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ مدرج في الجدول التالي . تكونت كل مجموعة علاج من 4 Old . عند 3 lela يعد عملية الحقن 3 تم تقييم كل فأر Gy لسبع معايير مختلفة. تتمثل المعايير السبعة في (1) كون الفأر مبتهجًا؛ متنبهًا؛ ومستجيبًا؛ (2) كون الفأر Waly أو منحنيًا بدون منبهات؛ (3) إظهار الفأر لأية حركة بدون منبهات 0 (4) إظهار الفأر لحركة للأمام بعد رفعه؛ (5) إظهار الفأر لأية حركة بعد رفعه؛ (6) استجابة Lal لحدوث قرصة في الذيل؛ (7) التنفس المنتظم. لكل من المعايير السبعة المختلفة؛ تم إعطاء كل فأر درجة تقديرية جزئية تبلغ صفر إذا وفى بالمعايير أو 1 إذا لم يوف بها. بعد أن تم تقييم كل المعايير السبعة؛ تم تجميع كل الدرجات التقديرية الجزئية لكل فأر ثم تم وضع متوسط لكل de gana . على سبيل المثال » إذا كان فأر مبتهجًاء متنبهًّاء ومستجيبًا بعد 3 ساعات من جرعة د اخل
البطين الدماغي تبلغ 700 ميكرو جرام؛ ووفى بكل المعايير (AV) فإنه سيحصل على درجة تقديرية مجمعة تبلغ صفر. إذا لم يكن فأر آخر مبتهجًاء guile ومستجيبًا بعد 3 ساعات من جرعة داخل البطين الدماغي تبلغ 700 ميكرو جرام ولكنه وفى بكل المعايير «(AY فإنه سيتلقى درجة تقديرية تبلغ 1. يتم تقديم النتائج باعتبارها متوسط الدرجات التقديرية لكل مجموعة علاج. الجدول 7 قيم القابلية للإحتمال salad) به[بسس م EE
للا ساس سا سس ااا نس
ا
سا انس سا نس ا ساس ساس
المتال 3: القابلية للإحتمال الخاصة بالأوليجو نوكليوتيدات من 2014/062691 WO تم اختبار الأوليجو نوكليوتيدات الموصوفة في 2014/062691 WO في دراسة القابلية للاحتمال الحادة في الفئران. تم علاج وتحليل المجموعات المكونة من 3 فتئران من نوع 057/816 البري كما هو موصوف فى المثال 2. تتضمن الأوليجو نوكليوتيدات المختبرة تلك المدرجة فى الجدول التالى؛ التي تكون جابمرات MOE 5-10-5 بسلسلة رئيسية كاملة من فوسفوروثيوات ويكون كل سيتوزين بيني عبارة عن 5-ميثيل سيتوزين. يتم عرض مواضع البدء والإيقاف على المتوالية رقم: 2 التي يستهدفها كل أوليجو نوكليوتيد. يتم تقديم النتائج باعتبارها متوسط الدرجات التقديرية لكل مجموعة علاج في الجدول التالي. توضح هذه النتائج أنه يتم احتمال ISIS 576816؛ ISIS 576974؛ ISIS «577065 1515 «577061 5 577083« و1515 577056 على نحو ضعيف. 0 الجدول 8 قيم القابلية للاحتمال الحادة بعد 3 ساعات من العلاج باستخدام الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ من 2014/062691 WO 3 : : الدرجات | المتوالية رق .2 | موضع | وضع المتوائية )> Algal 65 ا البدء الإيقاف التقديرية | رقم الجدول 9 5 قيم القابلية للاحتمال الحادة بعد 3 ساعات من العلاج باستخدام الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ من 2014/062691 WO رقم 1515 المتوالية البدء الإيقاف التقديرية رقم AATCTTTATCAGGTCTTTTC | 1385 1366 6 65
JU) 4: التثبيط المضاد لاتجاه النسخلصورة متغيرة من COORFT2 mRNA البشري في خلايا HepG2 يتم اختبار الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة فيما سبق بالنسبة لتأثيرها على 20.000 المستنبتة عند كثافة تبلغ HepG2 WA في المعمل. يتم تثقيب 0908772 mRNA خلية لكل عين كهربائيًا باستخدام أوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ. بعد فترة علاج تبلغ تقريبًا 5 بواسطة بواسطة 09011772 mRNA ويتم قياس مستويات LIAN عن RNA ساعة؛ يتم عزل 4
RTS3905 في الزمن الفعلي. يتم استخدام مجموعة مسبار المادة البادئة البشرية SPCR المدلل عليها هنا باعتبارها <GGGTCTAGCAAGAGCAGGTG (متوالية المادة البادئة الأمامية المتوالية رقم: 12؛ متوالية المادة البادئة العكسية 001004651 خؤفف 0101100 ؛ المدلل عليها هنا باعتبارها المتوالية رقم: 13؛ متوالية المسبار 0 - 14 المدلل عليها هنا باعتبارها المتوالية رقم: TGATGTCGACTCTTTGCCCACCGC
MRNA عن صورة متغيرة من RTS3905 يكشف (TAQ—man مجموعة مسبار المادة البادثة مسبق محتوية MRNA من صورة متغيرة ل dallas (NM_001256054.1 (على سبيل المثال المعالجة من صورة متغيرة ل MRNA على تكرار الهكسا نوكليوتيد. تكون الصورة المتغيرة من
MRNA الك مسبق محتوية على تكرار الهكسا نوكليوتيد هنا عبارة عن "الصورة المتغيرة من 15 مسبق على تكرار الهكسا نوكليوتيد MRNA المصاحبة لمسبب المرض 0901172". يحتوي إلى TA مسبق في المنطقة من موضع البدء الخاص بالإكسون the MRNA استنساخ fay عندما (بصفة عامة النوكليوتيدات من 1107 إلى 1520 الخاصة 1B موضع البدء الخاص بالإكسون بمتوالية مجموعة العوامل الوراثية: المتوالية رقم: 2؛ متمم رقم الوصول لبنك الجينات المشذب من النوكليوزيدات من 27535000 إلى 2756500. على هذاء NT_008413.18 0 mRNA تستهدف الأوليجو نوكليوتيدات المصممة في هذه المنطقة انتقائيًا الصورة المتغيرة ل الصورة (sf) MRNA المسبق المحتوية على تكرار الهكسا نوكليوتيد. يقيس 753905 منتج mRNA الخاص بالصورة المتغيرة ل (COORFT2 المصاحبة لمسبب المرض mRNA المتغيرة من المسبق المحتوية على تكرار الهكسا نوكليوتيد و؛ على هذاء يقيس انخفاض الصورة المتغيرة ل المسبق المحتوية على تكرار الهكسا نوكليوتيد. يتم قياس مستويات الصورة المتغيرة من mRNA 25 الخاص RNA المصاحبة لمسبب المرض 0908772 وصللاً إلى إجمالي محتوى mRNA
بالخلية. كما هو مقاس بواسطة RIBOGREEN® ثم تتم مقارنة مستويات الصورة المتغيرة من mRNA المقاسة مع تلك الخاصة WAIL التي لم يتم علاجها باستخدام الأوليجو نوكليوتيد المضاد لاتجاه النسخ. المثال 5: التثبيط المضاد لاتجاه النسخ المعتمد على الجرعة لصورة متغيرة من COORFT2 mRNA 5 بشري يتم اختبار الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة فيما سبق بجرعات متنوعة في خلايا HepG2 يتم وضع الخلايا في أطباق عند كثافة تبلغ 20.000 خلية لكل عين وتثقيبها كهربائيًا باستخدام الأوليجو نوكليوتيد المضاد لاتجاه النسخ. بعد فترة علاج تبلغ Goji 16 ساعة أو 4 ساعة؛ يتم عزل RNA عن الخلايا ويتم قياس مستويات mRNA 090181772 بواسطة بواسطة SPCR 0 في الزمن الفعلي. يتم استخدام مجموعة مسبار المادة البادئة ل COORFT2 البشري لقياس الصورة المتغيرة من mRNA المصاحبة لمسبب المرض COORFT2 يتم ضبط مستويات الصورة المتغيرة من MRNA المصاحبة لمسبب المرض 690117772 وفثًا لإجمالي محتوى (RNA كما هو مقاس بواسطة RIBOGREEN® يتم حساب التركيز المتبط الأقصى النصفي (IC50) لكل أوليجو نوكليوتيد اعتمادًا على تثبيط مستويات الصورة المتغيرة MRNA الملاحظة عند كل 5 جرعة فردية من الأوليجو نوكليوتيد المضاد لاتجاه النسخ. المثال 6: التثبيط المضاد لاتجاه النسخ ل COORFT2 بواسطة أوليجو نوكليوتيدات مضادة لاتجاه النسخ من مصدر بشري- قرد الريبص ذات تفاعلية تبادلية في خلايا LLC-MK2 يتم اختبار الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة فيما سبق المتفاعلدتبادليًا بشكل تام مع حمض نووي ل COORFT2 من قرد (ail بالنسبة لتأثيرها على COORF72 mRNA 0 لقرد الرّبّص في المعمل. يتم تثقيب LLC-MK2 WA من قردٍ الرّبص المستنبتة عند كثافة تبلغ 0 خلية لكل عين كهربائيًا باستخدام الأوليجو نوكليوتيد المضاد لاتجاه النسخ. بعد فترة علاج تبلغ تقريبًا 24 ساعة؛ يتم RNA Jie عن الخلايا ويتم قياس مستويات CY9ORF72 mRNA بواسطة بواسطة PCR كمي في الزمن الفعلي. يتم استخدام مجموعة مسبار المادة البادئة 0 ا(لمتوالية الأمامية TGTGACAGTTGGAATGCAGTGA المدلل عليها هنا 5 باعتبارها المتوالية رقم: 15؛ المتوالية العكسية «GCCACTTAAAGCAATCTCTGTCTTG المدلل عليها هنا باعتبارها المتوالية رقم: 16؛ متوالية المسبار
TCGACTCTTTGCCCACCGCCA المدلل عليها هنا باعتبارها المتوالية رقم: 17 -مجموعة مسبار مادة بادئة (TAQ-man لقياس إجمالي مستويات mRNA 0908172. يستهدف 0 الإكسون 2 الخاص بمستنسخات mRNA و»؛ على هذاء يقيس إجمالي مستنسخات mRNA يتم ضبط مستويات U5 090181772 mRNA لإجمالي محتوى 8178 كما هو مقاس بواسطة (RIBOGREEN® 5 ثم تتم مقارنة مستويات الصورة المتغيرة من MRNA المقاسة مع تلك الخاصة بالخلايا التي لم يتم علاجها باستخدام الأوليجو نوكليوتيد المضاد لاتجاه النسخ. المثال 7: التثبيط المضاد لاتجاه النسخ المعتمد على الجرعة ل mRNA 09081772 البشري في 11-2 يتم اختبار الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة فيما سبق بجرعات متنوعة في 0 خلايا LLC-MK2 يتم وضع الخلايا في أطباق عند كثافة تبلغ 20.000 خلية لكل عين وتثقيبها كهربائيًا باستخدام الأوليجو نوكليوتيد المضاد لاتجاه النسخ. بعد فترة علاج تبلغ تقريبًا 16 ساعة أو 4 ساعة؛ يتم عزل RNA عن LIAN ويتم قياس مستويات mRNA 09011772 بواسطة بواسطة PCR كمي في الزمن الفعلي. يتم استخدام مجموعة مسبار المادة البادئة 8753750 لقياس إجمالي مستويات .COORF72 mRNA يتم ضبط مستويات Lids 0908772 mRNA لإجمالي محتوى RNA كما هو مقاس بواسطة (RIBOGREEN® ثم تتم مقارنة مستويات الصورة المتغيرة من mRNA المقاسة مع تلك الخاصة بالخلايا التي لم يتم علاجها باستخدام الأوليجو نوكليوتيد المضاد لاتجاه النسخ. المثال 8: التثبيط المضاد لاتجاه النسخ ل mRNA 09081772 البشري في نموذج فأر Dade وراثيًا 0 .يتم اختبار الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة فيما سبق في اثنين من سلالات فأر متحوّر (BAC Gilyy مدلل عليهما هنا باعتبارهما 9141© 5 «COB183 يُعبر كل منهما وراثيًا عن جين COORFT2 بشري مشذب مشتمل على إكسونات 5-1. تشتمل جينات Lal COORFT2 المشذبة الخاصة بالسلالات الفأرية 9341© و93183© على 110 و450 تكرار هكسا نوكليوتيد؛ على التوالي. يتلقى كل فأر في كل مجموعة علاج 350 ميكرو جرام من أوليجو نوكليوتيد 5 مضاد لاتجاه النسخ. ثم يتم تحليل مستويات التعبير الوراثي الخاصة ب RNA 09018772 البشري بواسطة RT-PCR يتم تنفيذ أيضًا الاستجابات للجرعة.
المتال 9: التثبيط المضاد لاتجاه النسخ ل mRNA 090181772 في الأرومات الليفية في مريض تم اختبار الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة فيما سبق بالنسبة لتأثيرها على mRNA 0908772 في المعمل. تمت إضافة الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ المدرجة في الجدول التالي إلى طبق قبل إضافة الأرومات الليفية الخاصة (ia par 709-152 عند كثافة تبلغ 20.000 خلية في العين. يتم إدراج التركيزات النهائية الخاصة بالأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ بعد إضافة الخلايا في الجدول التالي. بعد 30 ثانية من الرج؛ تم تثقيب الخلايا كهربائيًا ثم نقلها إلى طبق مزرعة مطلي ب Primaria بعد 16 ساعة؛ تم عزل RNA من الخلاياء وتم قياس مستويات إجمالي COORF72 mRNA (أي؛ mRNA بدءًا من الإكسون 1/8 5 mRNA بدءًا من الإكسون (1B ومستويات mRNA المصاحب لمسبب المرض 0 (نظر المثال 4) بواسطة RT-qPCR تم استخدام مجموعات مسبار المادة البادئة البشرية RTS 0 ,(انظر المثال 6) 5 RTS3905 (انظر المثال 4) للكشف عن إجمالي 0908772 MRNA 5 mRNA المصاحب لمسبب المرض الخاص ب 0908172؛ على التوالي. تم قياس مستويات إجمالي mRNA الخاص ب 9011772 و108178 المصاحب لمسبب المرض الخاص ب 2 وصلاً إلى إجمالي محتوى RNA الخاص بالخلية؛ كما هو مقاس بواسطة RIBOGREEN® 5 ثم تمت مقارنة مستويات mRNA المقاسة بتلك الخاصة بالخلايا التي لم يتم علاجها باستخدام الأوليجو نوكليوتيد المضاد لاتجاه النسخ. يتم عرض النتائج في الجدول التالي. مدخل nd’ يعني غير محدد. كانت قيم 1050 المدرجة باعتبارها "nd" غير محددة؛ لأنه لم يتم تثبيط الهدف على النحو الكافي لتحديد 1050. توضح النتائج أن كل الأوليجو نوكليوتيدات المدرجة فيما يلي قامت بتثبيط الصورة المتغيرة من COORF72 mRNA المصاحبة لمسبب المرض. قامت 0 الأوليجو نوكليوتيدات التي لا تستهدف بشكل خاص MRNA المسبق للصورة المتغيرة الخاصة بالتكرار بتثبيط كل من mRNA 090181772 المصاحب لمسبب المرض وإجمالي 0901772 mRNA قامت الأوليجو نوكليوتيدات التي تستهدف بشكل خاص MRNA المسبق للصورة المتغيرة الخاصة بالتكرار انتقائيًا بتثبيط mRNA 9081772 المصاحب لمسبب المرض. الجدول 10 5 مستويات mRNA 0908772 بعد التثبيط المضاد لاتجاه النسخ في الأرومات الليفية في مربيض
IE
1050 إ: 1050 إ: (ميكرو (ميكرو (UTC (UTC مولار) مولار) وو | اسان ايو ا 0.1 < nd 791664 1500 nooo 01> nd 801278 won lw 012 nd 801279 #060) 0.08 nd 801282
[Aw aw
0.1 > nd 801285 ww 0.1 > nd 801286 ww 0.1 > nd 801287 = ww 0.1 < nd 801288 eo oe ow 0.1 < nd 801292 nd 801293 ww
اتا نأض
0.1 < nd 801294 ew
nd 801316 < 0.1 اتا كان ننه
802459 0.10 0.18 —_ ا
0.21 0.39 802464 ow ow
01> 01> 802465
ا لا ل ا تسد 0# ا ان ااا
0.5 - 0.7 802469 sw
0.12 0.27 802471 dw ow
0.1 > 0.18 802473 ow ww
0.1 > 0.12 802477 woe ww
0.1 < nd 806676 ew
0.1 < nd 806679
woe ow nd 806680 >01 يح حم أ« ww nd 806690 >01 اح اح المثال 10: التثبيط المضاد لاتجاه النسخ ل mRNA 09081772 البشري في نموذج فأر Opie وراثيًا تم اختبار الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة Lad سبق في سلالة فأر متحؤر BAC Lily 5 093841 (انظر المثال 8)؛ التي تعبر Why عن جين 690181772 بشري مشتمل على منطقة المعزز خلال الإكسون 5 و110 تكرار هكسا نوكليوتيد. تكونت كل مجموعة علاج من 3-2 فأر. تلقى كل فأر جرعة كبيرة فردية داخل البطين الدماغي تبلغ 350 ميكرو جرام من أوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ مدرج في الجداول التالية أو PBS بعد أسبوعين؛ تم قتل الفئران بأسلوب القتل الرحيم» وتم تحليل مستويات التعبير hell الخاصة بالصورة المتغيرة من COORFT2 mRNA 0 البشري المصاحب لمسبب المرض و/أو إجمالي COORFT2 mRNA البشري بواسطة 7-0001 كما هو موصوف في المثال 9. لم يتم استكمال تحليل مستويات MRNA للصورة المتغيرة من 09081772 المصاحب لمسبب المرض للأوليجو نوكليوتيدات التي لا تستهدف بشكل خاص MRNA المسبق للصورة المتغيرة لتكرار COORFT2 تعرض النتائج في الجداول التالية متوسط النسبة dogiall لمستوبات mRNA 09018772 البشري المقاسة بالنسبة إلى المتوسط المقاس للمجموعة المعالجة باستخدام PBS الجدول 11 مستويات mRNA 0901817772 البشري بعد التثبيط المضاد لاتجاه النسخ في الفئران المتحوّرة Gly
لصم م مامد امم الإجمالي الإجمالي ١ المسببة للمرض ١ المسببة للمرض
Coe elo mew
IEE) EN) لم I 7)
IE] ET) I ITE
Cel wl wl wn »د www wes »د ا RT 0)
ow EE x ow —_ oe ت- ت- ت- الجدول 12 مستويات COORFT2 mRNA البشري بعد التثبيط المضاد لاتجاه النسخ في الفئران المتحوّرة وراثيًا رقم 1515 مم
المثال 11: التثبيط المضاد لاتجاه النسخ المعتمد على الجرعة ل mRNA 09081772 البشري في
نموذج فأر متحوّر Gly
تم اختبار الأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ الموصوفة فيما سبق في اثنين من سلالات
فأر متحؤر وراثيًا BAC 9341© و098183. يعبر كل منها وراثيًا عن جين 90181772 بشري
مشذب مشتمل على إكسونات 5-1. تشتمل جينات COORFT2 البشريبة المشذبة الخاصة
بالسلالات الفأرية 9841© و98183© على 110 و450 تكرار هكسا نوكليوتيد» على التوالي
(انظر المثال 8). تكونت كل مجموعة علاج من 4-2 فثئران. تلقى كل فأر جرعة كبيرة فردية
داخل البطين الدماغي تبلغ 30 ميكرو جرام؛ 100 ميكرو جرام؛ 300 ميكرو جرام؛ أو 700 ميكرو 0 جام من أوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ كما هو مُدرج في الجداول التالية أو PBS بعد
أسبوعين؛ تم قتل الفئران بأسلوب القتل الرحيم؛ وتم تحليل مستويات التعبير الوراثي الخاصة بالصورة
المتغيرة من mRNA 09018772 البشري المصاحب لمسبب المرض و/أو إجمالي 0908772
mRNA البشري بواسطة 7-0008 كما هو موصوف في المثال 9. تعرض النتائج في الجداول
التالية متوسط النسبة المئوية mRNA bi ginal 09081772 البشري المقاسة بالنسبة إلى المتوسط 5 المقاس للمجموعة المعالجة باستخدام da PBS تبلغ 100 أو أكثر تعني أن الأوليجو نوكليوتيد
المضاد لاتجاه النسخ لم يُقلل من mRNA أو زاد مقدار mRNA
الجدول 13
مستويات MRNA 0908772 البشري بعد التثبيط المضاد لاتجاه النسخ المعتمد على الجرعة في
الفئران المتحوّرة Gils 091841
الحبل الشوكي )7 للمعالجة ب | القشرة (7 للمعالجة ب التركيز (ميكرو رقم (PBS (PBS ISIS جرام)
802459 ااا EC الا el ow
الجدول 14 مستويات mRNA 09081772 البشري بعد التثبيط المضاد لاتجاه النسخ المعتمد على الجرعة في الفتران المتحوّرة Gly 918183 الحبل الشوكي )7 للمعالجة ب | القشرة )7 للمعالجة ب التركيز (ميكرو | (PBS (PBS رقم ISIS جرام) الصورنة المتغيرة الصورة المتغيرة المسببة للمرض المسببة للمرض 801287
الس اسه mew المثال 12: القابلية للاحتمال الخاصة بالأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ التي تستهدف 2 البشري في الفثران تلقى كل فأر من نوع 057/816 البري جرعة فردية داخل البطين الدماغي تبلغ 700 ميكرو جرام من أوليجو نوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ مدرج في الجدول التالي؛ كما هو موصوف في المثال 2. تكونت كل مجموعة علاج من 4 فئران. عند 8 أسابيع بعد الحقنء تم تقييم الفثران By لسبع معايير مختلفة. تتمثل المعايير في (1) كون HU مبتهجًاء متنبهًاء ومستجيبًا؛ (2) كون الفأر Waly أو منحنيًا بدون منبهات؛ (3) إظهار الفأر لأية حركة بدون منبهات؛ (4) إظهار JL لحركة أمامية بعد رفعه؛ (5) إظهار الفأر لأية حركة بعد رفعه؛ (6) استجابة الفأر لقرصة في الذيل؛ (7) التنفس 0 المنتظم. لكل من المعايير السبع؛ تم إعطاء فر درجة تقديرية جزئية تبلغ صفر إذا وَفى بالمعايير و1 إذا لم يوف بها. بعد أن تم تقييم كل المعايير السبع» تم تجميع الدرجات التقديرية لكل فأر وتم أخذ المتوسط داخل كل مجموعة علاج. يتم تقديم النتائج في الجدول التالي. تم ذبح الحيوانات عند 8 أسابيع. تم تجميع القشرة والحبل الشوكي من كل حيوان؛ وتم RT shal PCR تم تحديد مستويات التعبير الوراثي الخاصة بالعامل الالتهابي بالطعم الخيفي (AIF1) 5 كقياس للالتهاب. تم Lad تحديد مستويات التعبير الوراثي الخاصة بالبروتين الحمضي الليفي الدبقي (GFAP) كقياس لنشاط الخلية الدبقية. تم قياس النتائج إلى Gpadh وبتم تقديمها بالنسبة إلى
مجموعة مقارنة باستخدام PBS (1.0) في الجدول التالي. ".7.0 يشير إلى أنه لم توجد بيانات لأنه لم يتم إجراء التجرية. علامة النجمة (*) تشير إلى أن النتيجة المناظرة تمثل متوسط 3-1 OLA الجدول 15: القابلية للاحتمال الخاصة بالأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ التي تستهدف 90:72 في الفئران الدرجات التقديرية | GFAP ATF] رقم 1518 FEY PORE 1م (الحجبل Grap المتوالية : يب" (المخيخ) الشوكي) )05( | sy أسابيع من | الشوكي) ً الحقن EEE EE EE EE EOE EE EE EE اكد EEE ET EO) اك ESD IE IEE! IE) EE IE OEE) IE OE حا IEE) I IEE IE IE IED BOE نإ [se ا
ا مت مت ته ته مت ت"- مت ته oo wo مت مت ت- مت ته
ته مت مت مت مت on ته نت مت من ow ow ow ow مت مت مت ته تت مت م"
ا الا ww 08 wl el w on wo on ته مت من ا of w ow مت مت ا wl wl w oo ww
[eof لتك اك الح نا المثال 13: القابلية للاحتمال الخاصة بالأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ التي تستهدف 2 البشري في الجرذان تم فصل جرذان من نوع Sprague Dawley إلى مجموعات تتكون من 4 أو 6 جرذان. ركل جرذ في كل مجموعة من الجرذان جرعة فردية 3 مجم داخل الغمد (IT) intrathecal من الأوليجو نوكليوتيد الموضح في الجدول التالي. عند 3 ساعات وعند 8 أسابيع بعد الجرعة Jah الغمد؛ تم تقييم حركة الأجزاء السبع المختلفة من الجسم لكل جرذ. تتمثل أجزاء الجسم السبع في (1) ذيل الجرذ؛ )2( الوضعية الخلفية للجرذ؛ (3) القوائم الخلفية للجرذ؛ (4) كف القدم الخلفية للجرذ؛ )5( الأقدام الأمامية للجرذ؛ (6) الوضعية الأمامية للجرذ؛ (7) رأس الجرذ. لكل من أجزاء الجسم السبع 0 المختلفة؛ تم إعطاء كل جرذ درجة تقديرية جزئية تبلغ صفر إذا كانت أجزاء الجسم متحركة أو 1 إذا كانت أجزاء الجسم مصابة بالشلل. بعد أن تم تقييم كل من أجزاء الجسم السبع؛ تم تجميع الدرجات التقديرية الجزئية لكل جرذ ثم يتم وضع متوسط لكل مجموعة. على سبيل المثال, إذا كان ذيل الجرذء رأسه؛ وكل أجزاء الجسم المقيمة متحركة بعد 3 ساعات بعد الجرعة داخل الغمد البالغة 3 مجم؛ فإنه يصحل على درجة تقديرية مجمعة تبلغ صفر. إذا لم يكن جرذ آخر محركًا لذيله بعد 3 5 ساعات من الجرعة داخل الغمد البالغة 3 مجم ولكن كانت كل أجزاء الجسم المقيمة متحركة؛ فإنه ستلقى درجة تقديرية تبلغ 1. تتلقى الجرذان المعالجة بالمحلول الملحي بصفة عامة درجة تقديرية تبلغ صفر. ستكون درجة تقديرية عند الطرف الأقصى من النطاق موحية بوجود سُمية حادة. يتم تقديم النتائج في الجدول التالي باعتبارها متوسط الدرجات التقديرية لكل مجموعة علاج. تم ذبح الحيوانات عند 8 أسابيع. تم تجميع القشرة والحبل الشوكي من كل حيوان» وتم RT shal PCR 0 تم تحديد مستويات التعبير الوراثي الخاصة ب 8171 كقياس للالتهاب. تم أيضًا تحديد مستويات التعبير الوراثي الخاصة ب (GFAP) كقياس لنشاط الخلية الدبقية. علامة نجمة (*) تشير إلى أن النتيجة المناظرة تمثل متوسط 3-2 فثتران. تم قياس النتائج إلى Gapdh ويتم تقديم بالنسبة إلى مجموعة مقارنة باستخدام PBS (1.0) في الجدول التالي.
الجدول 16: القابلية للاحتمال الخاصة بالأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ التي تستهدف 2 في الجرذان الدرجات | الدرجات التقديرية | التقديرية | GFAP ATF] ل رقم 1815 AIF] FY PO PY (الحبل Grap المتوالية "0 : (القشرة) الشوكي) )059( | رقم: ساعات | أسايع | الشوكي) من الحقن | من الحقن BE IEE BD BES CE كد اكد ان حمطا ل Co] san] مساج wl soo] 0 al ss] al eo] sols المثال 14: القابلية للاحتمال الخاصة بالأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ التي تستهدف COORFT2 5 البشري في الكائنات الرئيسية غير البشرية تم منح قرود إناث من نوع الماح (6-2 كجم) 3 جرعات تبلغ 35 مجم من الأوليجو نوكليوتيد المضاد لاتجاه النسخ في الأيام 1 14» و28 عبر الحقن بجرعة كبيرة في الغمد (1 ملليلتر من جرعة كبيرة بطيئة متبوعة ب 0.25 ملليلتر من محلول غسيل). احتوت كل مجموعة علاج على أربعة قرود. بعد أسبوعين من الجرعة الأخيرة؛ تم ذبح الحيوانات وتم RT-PCR shal على أنسجة CNS 0 متنوعة. تم تحديد مستويات التعبير الوراثي الخاصة ب ATRL كقياس للالتهاب وتم تحديد مستويات التعبير الوراثي الخاصة ب GFAP كقياس لنشاط الخلية الدبقية. تم قياس النتائج إلى 1 ويتم تقديم بالنسبة إلى مجموعة مقارنة باستخدام PBS (1.0) في الجدول التالي لرقم ISIS 801287 5802459 806679
الجدول 17: القابلية للاحتمال الخاصة بالأوليجو نوكليوتيدات المضادة لاتجاه النسخ التي تستهدف 2 في قرود ZG منطقة المخ 80128 80245 | 80667 |80128 | 80245 | 80667 م 9 00 EEE الصدري BE 9ه اكز 09 IE IRENE
Claims (1)
- عناصر الحماية للتركيب الكيميائى التالى: [FE modified oligonucleotide نوكليوتيد معدل gall 1 0 77 : ب pe NH HOU NTN 1 مل Si 0 oo o © NH. 0 ل مم ht i 0 بس ب H§-P=0 SN 0 9 0 no 0 حيدم م [ “ro 9 o 1 NH; 0 op o oJ NH —P=0 SN i : 2 HO 5 An و محم HS-P=0 خم ery ابا Le 0 و00 SE ا HO-P=0 op HS—p=0 aX) ل ° LA 9 NTN 9 NH, ب 7 = لط ° - 9 9 > ال 9 ل o 9 A رما N I HS—P=0 LA o HS—F=0 NH 0 ا 0 0 lL hl 0 1 oH ee 0 o NH; 9 ل 0 I HS—P=0 p NH ب وحور 6 N NN 0 NTN 0 0 0ًَ STAR = ER H8—P=0 or 0 4 I 7 56 مخ I= 0 o 9 ا HS-P=0 (المتوالية رقم : 47( أو ملح منه. للتركيب الكيميائى التالى: [FPS modified oligonucleotide نوكليوتيد معدل gall 2 I) oy i oy 2 NH > HO ON Rh NH, Tr hs i o o/ o © NH, 0 متيل | راض )م s-P=0 يرج 0 Na 9 o م | بدي ب 0 ص 0 يم مه oA a 0 oy i! oJ - 0-p-0 SN 0s 0 i > 1 © © ١ مل 0" 5 ° no ا بي Na مما Na ey Na © N0 o._/ 9 0 I. oo RE RE يه 4 Na” o No د NN ولو ite pe wo LE تمد 9 ل 0 o. Mw o. JN Og الها دق I o الا لب مخ وحمو rl Nay o | “ro Na 0 عب حا م ملا 0 8 الح | NH es-p=0 Is nO s Ng © © NTN 0 9 He ا ل وقوه ©8§-P=0 ™ s © i‘ | م CR No Na oy 0 0ًَ 9 موه ©s-p=0 1 © ذه © Na Na(المتوالية رقم: 47). 3 الأوليجو نوكليوتيد المعدّل Lads modified oligonucleotide لعنصر الحماية 1؛ الذي يكون Ble عن ملح الصوديوم sodium salt أو ملح البوتاسيوم -potassium salt 4 تركيبة صيدلية تتضمن الأوليجو نوكليوتيد المعثل modified oligonucleotide وفقاً لأي من عناصر الحماية 3-1 ومادة حاملة carrier أو مادة مخففة diluent مقبولة صيدلياً.5. التركيبة الصيدلية وفقاً لعنصر الحماية of تتضمن sale مخففة diluent مقبولة صيدلياً 0 حيث أن المادة المخففة diluent المقبولة صيدلياً عبارة عن محلول ملحي منظّم بفوسفات.(PBS) phosphate-buffered saline 6م التتركيبة الصيدلية وفقاً لعنصر الحماية 4؛ حيث أن التركيبة الصيدلية تتكون أساساً من الأوليجو نوكليوتيد المعدّل modified oligonucleotide والمحلول الملحي المنظم بفوسفات.(PBS) phosphate-buffered saline 5 7 مركب يشتمل على أوليجو نوكليوتيد معدل oligonucleotide ل000106» حيث أن الأوليجو نوكليوتيد المعدّل modified oligonucleotide عبارة عن جابمر gapmer يتكون من مقطع جناحي 5" wing segment ”5< ومقطع فجوة مركزي ccentral gap segment ومقطع جناحي wing segment 3 20 :3 حيث: يتكون المقطع الجناحي 5" wing segment ”5 من أربع 0-2 -ميثوكسي إيثيل نوكليوزيدات -”2 «O-methoxyethyl nucleosides يتكون مقطع الفجوة المركزي («central gap segment ثماني 1-1-ديوكسي ريبو نوكليوزيدات «p-D-deoxyribonucleosides و 5 يتكون المقطع الجناحي 3" wing segment 37 من ست 2:-0-ميثوكسي إيثيل نوكليوزيدات -”2 ¢O-methoxyethyl nucleosidesحيث يكون للأوليجو نوكليوتيد المعدّل modified oligonucleotide متوالية القاعدة النووية 5”- *3-GCCTTACTCTAGGACCAA (لمتوالية رقم: 47) حيث أن كل سيتوزين cytosine cytosine عبارة عن 5-ميثيل سيتوزين ¢5-methyleytosine وحيث أن روابط النوكليوزيد البيني internucleoside للأوليجو نوكليوتيد المعدّل | modified oligonucleotide 5 ¢ من 5 إلى 3 © 5005585588888800058» حيث أن كل Ble s عن رابط فوسفوروثيوات cphosphorothioate وكل 0 عبارة عن رابط فوسفو داي .phosphodiester jiu} 8 المركب وفقاً لعنصر الحماية 7 يتضمن الأوليجو نوكليوتيد المعدّل | modified oligonucleotide المرتبط تساهمياً بمجموعة مترافق .conjugate group 109. تركيبة صيدلية تتضمن المركب وفقاً لعنصر الحماية 7 of عنصر الحماية 8 ومادة مخففة diluent أو مادة حاملة carrier مقبولة صيدلياً.0. التركيبة الصيدلية وفقاً لعنصر الحماية 9؛ تتضمن sale مخففة diluent مقبولة صيدلياً حيث أن المادة المخففة diluent المقبولة صيدلياً عبارة عن محلول ملحي منظّم بفوسفات.(PBS) phosphate-buffered saline1. التركيبة الصيدلية وفقاً لعنصر الحماية 9 حيث أن التركيبة الصيدلية تتكون أساساً من المركب والمحلول الملحي المنظم بفوسفات .(PBS) phosphate-buffered salineلاله الهيلة السعودية الملضية الفكرية ا Sued Authority for intallentual Property RE .¥ + \ ا 0 § 8 Ss o + < م SNE اج > عي كي الج TE I UN BE Ca a ةا ww جيثة > Ld Ed H Ed - 2 Ld وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها of سقوطها لمخالفتها ع لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف ع النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية. Ad صادرة عن + ب ب ٠. ب الهيئة السعودية للملكية الفكرية > > > فهذا ص ب 101١ .| لريا 1*١ v= ؛ المملكة | لعربية | لسعودية [email protected]
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201562148691P | 2015-04-16 | 2015-04-16 | |
US201562232941P | 2015-09-25 | 2015-09-25 | |
US201562239400P | 2015-10-09 | 2015-10-09 | |
PCT/US2016/027747 WO2016168592A2 (en) | 2015-04-16 | 2016-04-15 | Compositions for modulating c9orf72 expression |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SA520412451B1 true SA520412451B1 (ar) | 2021-02-22 |
Family
ID=57126261
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SA520412450A SA520412450B1 (ar) | 2015-04-16 | 2017-10-16 | C9orf72 تركيبات لتعديل التعبير الوراثي عن |
SA520412451A SA520412451B1 (ar) | 2015-04-16 | 2017-10-16 | .تركيبات لتعديل التعبير الوراثي عن c9orf72 |
SA517390168A SA517390168B1 (ar) | 2015-04-16 | 2017-10-16 | تركيبات لتعديل التعبير الوراثي عن c9orf72 |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SA520412450A SA520412450B1 (ar) | 2015-04-16 | 2017-10-16 | C9orf72 تركيبات لتعديل التعبير الوراثي عن |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SA517390168A SA517390168B1 (ar) | 2015-04-16 | 2017-10-16 | تركيبات لتعديل التعبير الوراثي عن c9orf72 |
Country Status (30)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US9605263B2 (ar) |
EP (2) | EP3283080B1 (ar) |
JP (3) | JP6606557B2 (ar) |
KR (2) | KR102104163B1 (ar) |
CN (2) | CN107427532B (ar) |
AU (2) | AU2016249002B2 (ar) |
BR (1) | BR112017016068A2 (ar) |
CA (1) | CA2978103A1 (ar) |
CL (4) | CL2017002567A1 (ar) |
CO (1) | CO2017007671A2 (ar) |
CY (1) | CY1122981T1 (ar) |
DK (1) | DK3283080T3 (ar) |
ES (1) | ES2791995T3 (ar) |
HK (1) | HK1250255A1 (ar) |
HR (1) | HRP20200843T1 (ar) |
HU (1) | HUE049233T2 (ar) |
IL (2) | IL253557B (ar) |
LT (1) | LT3283080T (ar) |
MX (2) | MX366128B (ar) |
MY (1) | MY181815A (ar) |
NZ (1) | NZ733882A (ar) |
PH (2) | PH12017501875B1 (ar) |
PL (1) | PL3283080T3 (ar) |
PT (1) | PT3283080T (ar) |
RS (1) | RS60230B1 (ar) |
RU (1) | RU2736574C2 (ar) |
SA (3) | SA520412450B1 (ar) |
SG (2) | SG10202001856WA (ar) |
SI (1) | SI3283080T1 (ar) |
WO (1) | WO2016168592A2 (ar) |
Families Citing this family (23)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2015151857A (ru) | 2008-12-02 | 2019-01-15 | Уэйв Лайф Сайенсес Джапан, Инк. | Способ синтеза модифицированных по атому фосфора нуклеиновых кислот |
AU2010270714B2 (en) | 2009-07-06 | 2015-08-13 | Wave Life Sciences Ltd. | Novel nucleic acid prodrugs and methods use thereof |
DK2620428T3 (da) | 2010-09-24 | 2019-07-01 | Wave Life Sciences Ltd | Asymmetrisk hjælpegruppe |
CN107365339A (zh) | 2011-07-19 | 2017-11-21 | 波涛生命科学有限公司 | 合成官能化核酸的方法 |
CA2879023C (en) | 2012-07-13 | 2017-03-28 | Wave Life Sciences Japan | Asymmetric auxiliary group |
US10577604B2 (en) | 2012-10-15 | 2020-03-03 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for monitoring C9ORF72 expression |
US9963699B2 (en) | 2012-10-15 | 2018-05-08 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for modulating C9ORF72 expression |
JP6570447B2 (ja) | 2012-10-15 | 2019-09-04 | アイオーニス ファーマシューティカルズ, インコーポレーテッドIonis Pharmaceuticals,Inc. | C9orf72発現を調節するための組成物 |
SG11201602597YA (en) | 2013-10-11 | 2016-05-30 | Ionis Pharmaceuticals Inc | Compositions for modulating c9orf72 expression |
KR20230152178A (ko) | 2014-01-16 | 2023-11-02 | 웨이브 라이프 사이언시스 리미티드 | 키랄 디자인 |
WO2017079291A1 (en) | 2015-11-02 | 2017-05-11 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds and methods for modulating c90rf72 |
EP3443094B1 (en) * | 2016-04-13 | 2022-10-19 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for reducing c9orf72 expression |
WO2018081728A1 (en) * | 2016-10-31 | 2018-05-03 | Emendobio Inc. | Compositions for genome editing |
KR20200035301A (ko) * | 2017-08-08 | 2020-04-02 | 웨이브 라이프 사이언시스 리미티드 | 올리고뉴클레오티드 조성물 및 이의 방법 |
WO2019094694A1 (en) | 2017-11-10 | 2019-05-16 | University Of Massachusetts | Compositions and methods for the treatment of expanded repeat-associated disorders |
CA3088112A1 (en) | 2018-01-12 | 2019-07-18 | Bristol-Myers Squibb Company | Antisense oligonucleotides targeting alpha-synuclein and uses thereof |
WO2020023418A1 (en) * | 2018-07-23 | 2020-01-30 | Enclear Therapies, Inc. | Methods of treating neurological disorders |
WO2020027311A1 (ja) | 2018-08-03 | 2020-02-06 | 国立大学法人東京医科歯科大学 | Tdp-43凝集阻害剤 |
BR112021010660A2 (pt) | 2018-12-06 | 2021-08-24 | Biogen Ma Inc. | Proteína de neurofilamento para guiar intervenção terapêutica sobre esclerose lateral amiotrófica |
CA3133784A1 (en) * | 2019-03-29 | 2020-10-08 | University Of Massachusetts | Oligonucleotide-based modulation of c9orf72 |
WO2020227395A2 (en) * | 2019-05-06 | 2020-11-12 | University Of Massachusetts | Anti-c9orf72 oligonucleotides and related methods |
EP4037695A4 (en) * | 2019-10-06 | 2024-03-27 | Wave Life Sciences Ltd. | OLIGONUCLEOTIDE COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF |
WO2024036186A2 (en) * | 2022-08-09 | 2024-02-15 | The University Of Massachusetts | Identification of allele-specific target sequences for c9orf72 |
Family Cites Families (99)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5118800A (en) | 1983-12-20 | 1992-06-02 | California Institute Of Technology | Oligonucleotides possessing a primary amino group in the terminal nucleotide |
FR2567892B1 (fr) | 1984-07-19 | 1989-02-17 | Centre Nat Rech Scient | Nouveaux oligonucleotides, leur procede de preparation et leurs applications comme mediateurs dans le developpement des effets des interferons |
US5506337A (en) | 1985-03-15 | 1996-04-09 | Antivirals Inc. | Morpholino-subunit combinatorial library and method |
US5166315A (en) | 1989-12-20 | 1992-11-24 | Anti-Gene Development Group | Sequence-specific binding polymers for duplex nucleic acids |
US5034506A (en) | 1985-03-15 | 1991-07-23 | Anti-Gene Development Group | Uncharged morpholino-based polymers having achiral intersubunit linkages |
US5185444A (en) | 1985-03-15 | 1993-02-09 | Anti-Gene Deveopment Group | Uncharged morpolino-based polymers having phosphorous containing chiral intersubunit linkages |
US5591722A (en) | 1989-09-15 | 1997-01-07 | Southern Research Institute | 2'-deoxy-4'-thioribonucleosides and their antiviral activity |
DK0497875T3 (da) | 1989-10-24 | 2000-07-03 | Gilead Sciences Inc | 2'-modificerede oligonukleotider |
US5646265A (en) | 1990-01-11 | 1997-07-08 | Isis Pharmceuticals, Inc. | Process for the preparation of 2'-O-alkyl purine phosphoramidites |
US5670633A (en) | 1990-01-11 | 1997-09-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Sugar modified oligonucleotides that detect and modulate gene expression |
GB9009980D0 (en) | 1990-05-03 | 1990-06-27 | Amersham Int Plc | Phosphoramidite derivatives,their preparation and the use thereof in the incorporation of reporter groups on synthetic oligonucleotides |
DE69032425T2 (de) | 1990-05-11 | 1998-11-26 | Microprobe Corp., Bothell, Wash. | Teststreifen zum Eintauchen für Nukleinsäure-Hybridisierungsassays und Verfahren zur kovalenten Immobilisierung von Oligonucleotiden |
US6582908B2 (en) | 1990-12-06 | 2003-06-24 | Affymetrix, Inc. | Oligonucleotides |
EP0538194B1 (de) | 1991-10-17 | 1997-06-04 | Novartis AG | Bicyclische Nukleoside, Oligonukleotide, Verfahren zu deren Herstellung und Zwischenprodukte |
US5359044A (en) | 1991-12-13 | 1994-10-25 | Isis Pharmaceuticals | Cyclobutyl oligonucleotide surrogates |
ATE515510T1 (de) | 1991-12-24 | 2011-07-15 | Isis Pharmaceuticals Inc | Durch dna-abschnitte unterbrochene modifizierte oligonukleotide |
FR2687679B1 (fr) | 1992-02-05 | 1994-10-28 | Centre Nat Rech Scient | Oligothionucleotides. |
EP0577558A2 (de) | 1992-07-01 | 1994-01-05 | Ciba-Geigy Ag | Carbocyclische Nukleoside mit bicyclischen Ringen, Oligonukleotide daraus, Verfahren zu deren Herstellung, deren Verwendung und Zwischenproduckte |
EP0691968B1 (en) | 1993-03-30 | 1997-07-16 | Sanofi | Acyclic nucleoside analogs and oligonucleotide sequences containing them |
US5801154A (en) | 1993-10-18 | 1998-09-01 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense oligonucleotide modulation of multidrug resistance-associated protein |
US5446137B1 (en) | 1993-12-09 | 1998-10-06 | Behringwerke Ag | Oligonucleotides containing 4'-substituted nucleotides |
US5519134A (en) | 1994-01-11 | 1996-05-21 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Pyrrolidine-containing monomers and oligomers |
US5627053A (en) | 1994-03-29 | 1997-05-06 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | 2'deoxy-2'-alkylnucleotide containing nucleic acid |
US5597909A (en) | 1994-08-25 | 1997-01-28 | Chiron Corporation | Polynucleotide reagents containing modified deoxyribose moieties, and associated methods of synthesis and use |
US5681940A (en) * | 1994-11-02 | 1997-10-28 | Icn Pharmaceuticals | Sugar modified nucleosides and oligonucleotides |
JP3756313B2 (ja) | 1997-03-07 | 2006-03-15 | 武 今西 | 新規ビシクロヌクレオシド及びオリゴヌクレオチド類縁体 |
US6770748B2 (en) | 1997-03-07 | 2004-08-03 | Takeshi Imanishi | Bicyclonucleoside and oligonucleotide analogue |
EP2253639A1 (en) | 1997-09-12 | 2010-11-24 | Exiqon A/S | Bi- and tri-cyclic nucleoside, nucleotide and oligonucleoide analogues |
US6794499B2 (en) | 1997-09-12 | 2004-09-21 | Exiqon A/S | Oligonucleotide analogues |
US20030228597A1 (en) | 1998-04-13 | 2003-12-11 | Cowsert Lex M. | Identification of genetic targets for modulation by oligonucleotides and generation of oligonucleotides for gene modulation |
US6043352A (en) | 1998-08-07 | 2000-03-28 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 2'-O-Dimethylaminoethyloxyethyl-modified oligonucleotides |
US5998148A (en) | 1999-04-08 | 1999-12-07 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Antisense modulation of microtubule-associated protein 4 expression |
EP1178999B1 (en) | 1999-05-04 | 2007-03-14 | Santaris Pharma A/S | L-ribo-lna analogues |
US6525191B1 (en) | 1999-05-11 | 2003-02-25 | Kanda S. Ramasamy | Conformationally constrained L-nucleosides |
EP1244667B1 (en) | 1999-12-30 | 2006-04-05 | K.U. Leuven Research & Development | Cyclohexene nucleic acids |
USH2191H1 (en) | 2000-10-24 | 2007-06-05 | Snp Consortium | Identification and mapping of single nucleotide polymorphisms in the human genome |
US20050019915A1 (en) | 2001-06-21 | 2005-01-27 | Bennett C. Frank | Antisense modulation of superoxide dismutase 1, soluble expression |
WO2003004602A2 (en) | 2001-07-03 | 2003-01-16 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Nuclease resistant chimeric oligonucleotides |
AU2003291755A1 (en) | 2002-11-05 | 2004-06-07 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomers comprising modified bases for binding cytosine and uracil or thymine and their use |
AU2003291753B2 (en) | 2002-11-05 | 2010-07-08 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Polycyclic sugar surrogate-containing oligomeric compounds and compositions for use in gene modulation |
US7250496B2 (en) | 2002-11-14 | 2007-07-31 | Rosetta Genomics Ltd. | Bioinformatically detectable group of novel regulatory genes and uses thereof |
ATE517992T1 (de) | 2002-11-14 | 2011-08-15 | Dharmacon Inc | Funktionelle und hyperfunktionelle sirna |
US7790867B2 (en) | 2002-12-05 | 2010-09-07 | Rosetta Genomics Inc. | Vaccinia virus-related nucleic acids and microRNA |
WO2004106356A1 (en) | 2003-05-27 | 2004-12-09 | Syddansk Universitet | Functionalized nucleotide derivatives |
US7427672B2 (en) | 2003-08-28 | 2008-09-23 | Takeshi Imanishi | Artificial nucleic acids of n-o bond crosslinkage type |
AU2004274021B2 (en) | 2003-09-18 | 2009-08-13 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 4'-thionucleosides and oligomeric compounds |
US20050261233A1 (en) | 2004-04-21 | 2005-11-24 | Sanjay Bhanot | Modulation of glucose-6-phosphatase translocase expression |
EP1752536A4 (en) | 2004-05-11 | 2008-04-16 | Alphagen Co Ltd | POLYNUCLEOTIDE CAUSING RNA INTERFERENCE AND METHOD OF REGULATING GENE EXPRESSION WITH THE USE OF THE SAME |
JP2008501693A (ja) | 2004-06-03 | 2008-01-24 | アイシス ファーマシューティカルズ、インク. | 遺伝子調節で使用するための個別に調節された鎖を有する二本鎖組成物 |
EP1766052A4 (en) | 2004-06-03 | 2009-12-16 | Isis Pharmaceuticals Inc | CHIMERIC OLIGOMER COMPOSITIONS WITH CAP |
US20080261905A1 (en) | 2004-11-08 | 2008-10-23 | K.U. Leuven Research And Development | Modified Nucleosides for Rna Interference |
US20070299027A1 (en) | 2006-01-26 | 2007-12-27 | Gene Hung | Compositions and their uses directed to huntingtin |
AU2007211080B9 (en) | 2006-01-27 | 2012-05-03 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 6-modified bicyclic nucleic acid analogs |
ES2386578T3 (es) | 2006-05-05 | 2012-08-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compuestos y procedimientos para modular la expresión de PCSK9 |
ES2389737T3 (es) | 2006-05-11 | 2012-10-31 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Análogos de ácidos nucleicos bicíclicos modificados en 5' |
EP2444494B1 (en) | 2006-10-09 | 2016-09-28 | Roche Innovation Center Copenhagen A/S | Rna antagonist compounds for the modulation of pcsk9 |
CN102604951A (zh) | 2006-12-14 | 2012-07-25 | 诺瓦提斯公司 | 治疗肌肉和心血管病症的组合物和方法 |
US20100190837A1 (en) | 2007-02-15 | 2010-07-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 5'-Substituted-2-F' Modified Nucleosides and Oligomeric Compounds Prepared Therefrom |
EP2170917B1 (en) | 2007-05-30 | 2012-06-27 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | N-substituted-aminomethylene bridged bicyclic nucleic acid analogs |
EP2173760B2 (en) | 2007-06-08 | 2015-11-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Carbocyclic bicyclic nucleic acid analogs |
ATE462787T1 (de) | 2007-06-18 | 2010-04-15 | Commissariat Energie Atomique | Reversibles sirna-silencing eines mutierten und endogenen huntington-wildtypgens und dessen anwendung zur behandlung von morbus huntington |
DK2176280T4 (en) | 2007-07-05 | 2015-07-20 | Isis Pharmaceuticals Inc | 6-Disubstituerede bicykliske nukleinsyreanaloge |
US20090123928A1 (en) | 2007-10-11 | 2009-05-14 | The Johns Hopkins University | Genomic Landscapes of Human Breast and Colorectal Cancers |
EP2217705A2 (en) * | 2007-11-05 | 2010-08-18 | Baltic Technology Development, Ltd. | Use of oligonucleotides with modified bases in hybridization of nucleic acids |
WO2009067647A1 (en) | 2007-11-21 | 2009-05-28 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Carbocyclic alpha-l-bicyclic nucleic acid analogs |
EP2265627A2 (en) | 2008-02-07 | 2010-12-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Bicyclic cyclohexitol nucleic acid analogs |
WO2010036698A1 (en) | 2008-09-24 | 2010-04-01 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Substituted alpha-l-bicyclic nucleosides |
WO2010036696A1 (en) | 2008-09-24 | 2010-04-01 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Cyclohexenyl nucleic acid analogs |
US20120149757A1 (en) | 2009-04-13 | 2012-06-14 | Krainer Adrian R | Compositions and methods for modulation of smn2 splicing |
MX2011013421A (es) | 2009-06-15 | 2012-03-16 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Arnds formulado con lipido de direccionamiento del gen pcsk9. |
CA2767231A1 (en) | 2009-07-06 | 2011-01-13 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Cell-based bioprocessing |
WO2011005860A2 (en) | 2009-07-07 | 2011-01-13 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | 5' phosphate mimics |
WO2011017521A2 (en) | 2009-08-06 | 2011-02-10 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Bicyclic cyclohexose nucleic acid analogs |
EP2563921B1 (en) | 2010-04-30 | 2016-11-23 | Cellectis | Method for modulating double-strand break-induced homologous recombination |
WO2012005898A2 (en) | 2010-06-15 | 2012-01-12 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Chinese hamster ovary (cho) cell transcriptome, corresponding sirnas and uses thereof |
CN106434648A (zh) * | 2010-07-19 | 2017-02-22 | F·C·贝内特 | 肌强直性营养障碍蛋白激酶(dmpk)表达的调节 |
CA3077910A1 (en) * | 2010-11-17 | 2012-05-24 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of alpha synuclein expression |
DK2655621T3 (en) | 2010-12-20 | 2018-08-13 | Massachusetts Gen Hospital | Polycomb-associated non-coding RNAS |
US20140050778A1 (en) | 2010-12-28 | 2014-02-20 | University Of Rochester | Nucleic acid binding compounds, methods of making, and use thereof |
CN103562215B (zh) * | 2011-04-01 | 2017-04-26 | 埃西斯药品公司 | 信号转导及转录激活蛋白3(stat3)表达的调节 |
LT3505528T (lt) * | 2011-04-21 | 2021-04-26 | Glaxo Group Limited | Hepatito b viruso (hbv) raiškos moduliacija |
CA2846307C (en) | 2011-08-31 | 2020-03-10 | Hospital District Of Helsinki And Uusimaa | Method for diagnosing a neurodegenerative disease |
WO2013036833A1 (en) | 2011-09-09 | 2013-03-14 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | Detecting frontotemporal dementia and amyotrophic lateral sclerosis |
CN103906838A (zh) * | 2011-10-25 | 2014-07-02 | Isis制药公司 | Gccr表达的反义调节 |
WO2013075079A1 (en) * | 2011-11-17 | 2013-05-23 | Rheonix, Inc. | System and methods for selective molecular analysis |
EP2785729B1 (en) * | 2011-11-30 | 2020-11-04 | Sarepta Therapeutics, Inc. | Oligonucleotides for treating expanded repeat diseases |
EP2788087A4 (en) | 2011-12-06 | 2015-08-26 | Ohio State Innovation Foundation | NON-IONIC LOW OSMOLARITY CONTRAST AGENTS FOR THE ADMINISTRATION OF ANTISENSE OLIGONUCLEOTIDES AND THE TREATMENT OF DISEASE |
RS56319B1 (sr) | 2012-04-23 | 2017-12-29 | Biomarin Tech Bv | Oligonukleotidi koji moduliraju rnk sa poboljšanim karakteristikama za lečenje neuromišićnih poremećaja |
DK2855500T3 (da) * | 2012-05-24 | 2020-09-14 | Ionis Pharmaceuticals Inc | Fremgangsmåder og sammensætninger til modulering af apolipoprotein (A)-ekspression |
US10577604B2 (en) * | 2012-10-15 | 2020-03-03 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for monitoring C9ORF72 expression |
US9963699B2 (en) | 2012-10-15 | 2018-05-08 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for modulating C9ORF72 expression |
JP6570447B2 (ja) | 2012-10-15 | 2019-09-04 | アイオーニス ファーマシューティカルズ, インコーポレーテッドIonis Pharmaceuticals,Inc. | C9orf72発現を調節するための組成物 |
HUE046434T2 (hu) * | 2013-01-22 | 2020-03-30 | Deutsches Zentrum Fuer Neurodegenerative Erkrankungen E V | Dipeptid-ismétlõdõ fehérjék terápiás célpontként neurodegeneratív betegségekben, hexanukleotid ismétlõdõ expanzióval |
SG11201602597YA (en) * | 2013-10-11 | 2016-05-30 | Ionis Pharmaceuticals Inc | Compositions for modulating c9orf72 expression |
WO2016024205A1 (en) | 2014-08-15 | 2016-02-18 | Pfizer Inc. | Oligomers targeting hexanucleotide repeat expansion in human c9orf72 gene |
WO2016060919A1 (en) | 2014-10-14 | 2016-04-21 | The Board Of Regents Of The University Of Texas System | Allele selective inhibition of mutant c9orf72 foci expression by duplex rnas targeting the expanded hexanucleotide repeat |
WO2017079291A1 (en) | 2015-11-02 | 2017-05-11 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds and methods for modulating c90rf72 |
EP3443094B1 (en) | 2016-04-13 | 2022-10-19 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for reducing c9orf72 expression |
US10399845B2 (en) | 2017-09-22 | 2019-09-03 | Emco Wheaton Retail Corporation | Testable overfill prevention valve for a liquid storage container |
-
2016
- 2016-04-15 KR KR1020177032588A patent/KR102104163B1/ko active IP Right Grant
- 2016-04-15 SI SI201630693T patent/SI3283080T1/sl unknown
- 2016-04-15 CN CN201680016814.1A patent/CN107427532B/zh active Active
- 2016-04-15 MX MX2017013199A patent/MX366128B/es active IP Right Grant
- 2016-04-15 CA CA2978103A patent/CA2978103A1/en active Pending
- 2016-04-15 MY MYPI2017703869A patent/MY181815A/en unknown
- 2016-04-15 BR BR112017016068-4A patent/BR112017016068A2/pt active Search and Examination
- 2016-04-15 US US15/130,818 patent/US9605263B2/en active Active
- 2016-04-15 KR KR1020207010994A patent/KR102258516B1/ko active IP Right Grant
- 2016-04-15 NZ NZ733882A patent/NZ733882A/en unknown
- 2016-04-15 RS RS20200535A patent/RS60230B1/sr unknown
- 2016-04-15 EP EP16780833.6A patent/EP3283080B1/en active Active
- 2016-04-15 PL PL16780833T patent/PL3283080T3/pl unknown
- 2016-04-15 CN CN202110535254.3A patent/CN113265404A/zh active Pending
- 2016-04-15 SG SG10202001856WA patent/SG10202001856WA/en unknown
- 2016-04-15 LT LTEP16780833.6T patent/LT3283080T/lt unknown
- 2016-04-15 JP JP2017546618A patent/JP6606557B2/ja active Active
- 2016-04-15 HU HUE16780833A patent/HUE049233T2/hu unknown
- 2016-04-15 SG SG11201708468YA patent/SG11201708468YA/en unknown
- 2016-04-15 ES ES16780833T patent/ES2791995T3/es active Active
- 2016-04-15 PT PT167808336T patent/PT3283080T/pt unknown
- 2016-04-15 RU RU2017139121A patent/RU2736574C2/ru active
- 2016-04-15 EP EP20163264.3A patent/EP3722424A1/en active Pending
- 2016-04-15 WO PCT/US2016/027747 patent/WO2016168592A2/en active Application Filing
- 2016-04-15 DK DK16780833.6T patent/DK3283080T3/da active
- 2016-04-15 AU AU2016249002A patent/AU2016249002B2/en active Active
-
2017
- 2017-01-12 US US15/404,979 patent/US10138482B2/en active Active
- 2017-07-18 IL IL253557A patent/IL253557B/en active IP Right Grant
- 2017-07-28 CO CONC2017/0007671A patent/CO2017007671A2/es unknown
- 2017-10-11 CL CL2017002567A patent/CL2017002567A1/es unknown
- 2017-10-12 MX MX2019007834A patent/MX2019007834A/es unknown
- 2017-10-13 PH PH12017501875A patent/PH12017501875B1/en unknown
- 2017-10-16 SA SA520412450A patent/SA520412450B1/ar unknown
- 2017-10-16 SA SA520412451A patent/SA520412451B1/ar unknown
- 2017-10-16 SA SA517390168A patent/SA517390168B1/ar unknown
-
2018
- 2018-07-09 HK HK18108871.7A patent/HK1250255A1/zh unknown
- 2018-10-17 US US16/163,402 patent/US10815483B2/en active Active
- 2018-12-12 CL CL2018003582A patent/CL2018003582A1/es unknown
-
2019
- 2019-10-16 AU AU2019250156A patent/AU2019250156B2/en active Active
- 2019-10-18 JP JP2019190648A patent/JP6924242B2/ja active Active
- 2019-12-02 PH PH12019502724A patent/PH12019502724A1/en unknown
-
2020
- 2020-05-25 HR HRP20200843TT patent/HRP20200843T1/hr unknown
- 2020-06-02 CY CY20201100520T patent/CY1122981T1/el unknown
- 2020-07-31 CL CL2020002018A patent/CL2020002018A1/es unknown
- 2020-07-31 CL CL2020002019A patent/CL2020002019A1/es unknown
- 2020-09-18 US US16/948,435 patent/US20210230589A1/en active Pending
- 2020-09-25 IL IL277624A patent/IL277624A/en unknown
-
2021
- 2021-07-30 JP JP2021124953A patent/JP2021184720A/ja not_active Ceased
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
SA520412451B1 (ar) | .تركيبات لتعديل التعبير الوراثي عن c9orf72 | |
US11339393B2 (en) | Compositions for modulating C9ORF72 expression | |
US11111494B2 (en) | Compositions for modulating Ataxin 2 expression | |
US10407678B2 (en) | Compositions for modulating expression of C9ORF72 antisense transcript | |
US11053500B2 (en) | Modulation of prekallikrein (PKK) expression | |
US10793855B2 (en) | Compositions for modulating expression of C9ORF72 antisense transcript | |
EP3126499B1 (en) | Compositions for modulating sod-1 expression | |
US10533178B2 (en) | Methods for modulating Ataxin 2 expression | |
US9963699B2 (en) | Methods for modulating C9ORF72 expression | |
US20160237432A1 (en) | Methods for modulating expression of c9orf72 antisense transcript | |
US20160230172A1 (en) | Compositions for modulating expression of c9orf72 antisense transcript | |
US10961271B2 (en) | Methods of modulating KEAP1 |