RU95122776A - Способ скрининга веществ с модулирующим действием на зависимый от рецептора интерлейкина-5 путь передачи сигналов в клетках - Google Patents
Способ скрининга веществ с модулирующим действием на зависимый от рецептора интерлейкина-5 путь передачи сигналов в клеткахInfo
- Publication number
- RU95122776A RU95122776A RU95122776/13A RU95122776A RU95122776A RU 95122776 A RU95122776 A RU 95122776A RU 95122776/13 A RU95122776/13 A RU 95122776/13A RU 95122776 A RU95122776 A RU 95122776A RU 95122776 A RU95122776 A RU 95122776A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- receptor
- interleukin
- cells
- recombinant dna
- subunit
- Prior art date
Links
- 102000010786 Interleukin-5 Receptors Human genes 0.000 title claims 22
- 108010038484 Interleukin-5 Receptors Proteins 0.000 title claims 22
- 239000000126 substance Substances 0.000 title claims 15
- 230000000051 modifying Effects 0.000 title claims 4
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 title claims 2
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 claims 18
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 claims 17
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims 15
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims 15
- 210000004962 mammalian cells Anatomy 0.000 claims 13
- 230000001419 dependent Effects 0.000 claims 11
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 claims 9
- 102100005003 IL5 Human genes 0.000 claims 8
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 claims 8
- 229940100602 Interleukin-5 Drugs 0.000 claims 8
- 230000001105 regulatory Effects 0.000 claims 8
- 230000037361 pathway Effects 0.000 claims 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims 3
- 102100002070 FOS Human genes 0.000 claims 2
- 108060001038 FOS Proteins 0.000 claims 2
- 102000015271 Intercellular Adhesion Molecule-1 Human genes 0.000 claims 2
- 108010064593 Intercellular Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 claims 2
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 claims 2
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 claims 2
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 claims 2
- 108060001084 Luciferase family Proteins 0.000 claims 2
- 230000003042 antagnostic Effects 0.000 claims 2
- 102000010790 Interleukin-3 Receptors Human genes 0.000 claims 1
- 108010038452 Interleukin-3 Receptors Proteins 0.000 claims 1
- 230000003213 activating Effects 0.000 claims 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 claims 1
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 claims 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims 1
- 210000000663 muscle cells Anatomy 0.000 claims 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 claims 1
- 230000001960 triggered Effects 0.000 claims 1
Claims (28)
1. Способ определения модулирующего действия вещества на зависимый от рецептора путь передачи сигналов в человеческой клетке или клетке животного, отличающийся тем, что модулирующее действие вещества на компонент пути передачи сигналов, пускаемого путем активации рецептора интерлейкина-5, определяют путем инкубирования клеток млекопитающего,
а) трансформированных рекомбинантной ДНК, содержащей рецепторный ген и регуляторную последовательность, реагирующую на изменение концентрации одного или несколько вторичных переносчиков зависимого от рецептора интерлейкина-5 пути передачи сигналов, вследствие чего экспрессия репортерного гена модулируется изменением концентрации переносчика, и
б) экспрессирующих функциональный рецептор интерлейкина-5, вместе с исследуемым веществом, определения концентрации продукта репортерного гена и исследования избирательности найденного действия исследуемого вещества относительно зависимого от рецептора интерлейкина-5 пути передачи сигналов путем дополнительной подачи вещества в идентичных условиях на контрольные клетки млекопитающего, экспрессирующие контрольный рецептор, отличающийся от рецептора интерлейкина-5, и трансформированные рекомбинантной ДНК, содержащей репортерный ген и регуляторную последовательность, реагирующую на изменение концентрации вторичного переносчика зависимого от контрольного рецептора пути передачи сигналов, с последующим сравнением концентрации продукта репортерного гена в экспрессирующих рецептор интерлейкина-5 клетках с этой концентрацией в контрольных клетках.
а) трансформированных рекомбинантной ДНК, содержащей рецепторный ген и регуляторную последовательность, реагирующую на изменение концентрации одного или несколько вторичных переносчиков зависимого от рецептора интерлейкина-5 пути передачи сигналов, вследствие чего экспрессия репортерного гена модулируется изменением концентрации переносчика, и
б) экспрессирующих функциональный рецептор интерлейкина-5, вместе с исследуемым веществом, определения концентрации продукта репортерного гена и исследования избирательности найденного действия исследуемого вещества относительно зависимого от рецептора интерлейкина-5 пути передачи сигналов путем дополнительной подачи вещества в идентичных условиях на контрольные клетки млекопитающего, экспрессирующие контрольный рецептор, отличающийся от рецептора интерлейкина-5, и трансформированные рекомбинантной ДНК, содержащей репортерный ген и регуляторную последовательность, реагирующую на изменение концентрации вторичного переносчика зависимого от контрольного рецептора пути передачи сигналов, с последующим сравнением концентрации продукта репортерного гена в экспрессирующих рецептор интерлейкина-5 клетках с этой концентрацией в контрольных клетках.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что антагонистическое действие исследуемого вещества на зависимый от рецептора интерлейкина-5 путь передачи сигналов определяют путем дополнительной подачи интерлейкина-5 на клетки.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что используют клетки, по своей природе экспрессирующие функциональный рецептор интерлейкина-5.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что используют клетки, естественно экспрессирующие лишь β-субъединицу рецептора интерлейкина-5 и трансформированные рекомбинантной ДНК, содержащей кодирующую α-субъединицу рецептора интерлейкина-5 последовательность, вследствие чего клетки экспрессируют функциональный рецептор интерлейкина-5.
5. Способ по п.1, отличающийся тем, что используют клетки, трансформированные рекомбинантной ДНК, содержащей кодирующие α-субъединицу и β-субъединицу рецептора интерлейкина-5 последовательности, вследствие чего клетки экспрессируют функциональный рецептор интерлейкина-5.
6. Способ по п. 5, отличающийся тем, что кодирующие α-субъединицу и β-субъединицу рецептора интерлейкина-5 последовательности имеются на двух разных плазмидах.
7. Способ по одному из пп. 1 - 6, отличающийся тем, что клетки экспрессируют человеческий функциональный рецептор интерлейкина-5.
8. Способ по одному из пп. 1 - 6, отличающийся тем, что клетки экспрессируют мышиный функциональный рецептор интерлейкина-5.
9. Способ по одному из пп. 1 - 6, отличающийся тем, что клетки экспрессируют функциональный рецептор интерлейкина-5, α-субъединица и β-субъединица которого происходят от разных пород.
10. Способ по п.9, отличающийся тем, что α-субъединица имеет человеческое происхождение.
11. Способ по одному из пп. 1 - 10, отличающийся тем, что указанная под а) рекомбинантная ДНК в качестве регуляторной последовательности содержит промотор гена c-fos.
12. Способ по одному из пп. 1 - 10, отличающийся тем, что указанная под а) рекомбинантная ДНК в качестве регуляторной последовательности содержит промотор гена ICAM-1.
13. Способ по п.11 или 12, отличающийся тем, что указанная под а) рекомбинантная ДНК в качестве репортерного гена содержит ген люциферазы.
14. Способ по одному из пп. 2 - 13, отличающийся тем, что антагонистическое действие исследуемого вещества определяют путем дополнительного инкубирования клеток, кроме рецепторов других факторов роста экспрессирующих функциональный рецептор интерлейкина-1 и относительно своего роста зависимых от присутствия по меньшей мере лиганда одного этих рецепторов, с одной стороны, лишь вместе с интерлейкином-5 и, с другой стороны, - вместе с интерлейкином-1 и исследуемым веществом с последующим сравнением пролиферации обеих клеточных культур.
15. Способ по одному из пп. 1 - 13, отличающийся тем, что избирательность модулирующего действия исследуемого вещества на зависимый от рецептора интерлейкина-5 путь передачи сигналов исследуют путем дополнительной подачи вещества в идентичных условиях на контрольные клетки млекопитающего, экспрессирующие контрольный рецептор, отличающийся тем, что от рецептора интерлейкина-5, и трансформированные указанной под а) рекомбинантной ДНК, регуляторная последовательность которой реагирует не только на изменение концентрации одного или несколько вторичных переносчиков зависимого от рецептора интерлейкина-5 передачи сигналов, а также зависимого от контрольного рецептора пути передачи сигналов, с последующим сравнением концентрации продукта репортерного гена в экспрессирующих рецептор интерлейкина-5 клетках с этой концентрацией в контрольных клетках.
16. Способ по п.15, отличающийся тем, что контрольный рецептор представляет собой рецептор интерлейкина-3.
17. Способ по одному из пп. 1 - 13, отличающийся тем, что дополнительно инкубируют клетки млекопитающего, трансформированные указанной под а) рекомбинантной ДНК и не экспрессирующие функционального рецептора интерлейкина-5, в идентичных условиях вместе с исследуемым веществом с последующим определением концентрации продукта репортерного гена.
18. Способ по одному из пп. 1 - 17, отличающийся тем, что его используют в качестве скрининга, в котором подвергаемое исследованию вещество представляет собой одно из многих веществ, вместе с которыми инкубируют определенное количество клеток млекопитающего в определенных условиях, с последующими определение концентрации репортерного гена и проверкой избирательности веществ относительно зависимого от рецептора интерлейкина-5 пути передачи сигналов.
19. Клетки млекопитающего, отличающиеся тем, что а) они трансформированы рекомбинантной ДНК, содержащей репортерный ген и регуляторную последовательность, реагирующую на изменение концентрации одного или несколько переносчиков зависимого от рецептора интерлейкина-5 пути передачи сигналов, и б) они трансформированы рекомбинантной ДНК, кодирующей α-субъединицу или α- и β-субъединицы рецептора интерлейкина-5, благодаря чему они экспрессируют функциональный рецептор интерлейкина-5.
20. Клетки млекопитающего по п.19, отличающиеся тем, что они представляют собой человеческие клетки.
21. Клетки млекопитающего по п.19, отличающиеся тем, что они представляют собой мышечные клетки.
22. Клетки млекопитающего по одному из пп. 19 - 21, отличающиеся тем, что по своей природе они экспрессируют лишь α-субъединицу рецептора интерлейкина-5, причем они трансформированы рекомбинантной ДНК, содержащей кодирующую α-субъединицу последовательность.
23. Клетки млекопитающего по п.22, отличающиеся тем, что α-субъединица происходит от другой породы.
24. Человеческие клетки по п.22, отличающиеся тем, что они трансформированы рекомбинантной ДНК, содержащей кодирующую человеческую α-субъединицу последовательность.
25. Мышиные клетки по п.22, отличающиеся тем, что они трансформированы рекомбинантной ДНК, содержащей кодирующую мышиную α-субъединицу последовательность.
26. Клетки млекопитающего по одному из пп. 19 - 25, отличающиеся тем, что указанная под а) рекомбинантная ДНК в качестве регуляторной последовательности содержит промотор гена c-fos.
27. Клетки млекопитающего по одному из пп. 19 - 25, отличающиеся тем, что указанная под а) рекомбинантная ДНК в качестве регуляторной последовательности содержит промотор гена ICAM-1.
28. Клетки млекопитающего по одному из пп. 19 - 27, отличающиеся тем, что указанная под а) рекомбинантная ДНК в качестве репортерного гена содержит ген люциферазы.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE4317577A DE4317577A1 (de) | 1993-05-27 | 1993-05-27 | Verfahren zum Screenen von Substanzen mit modulierender Wirkung auf einen Interleukin-5-Rezeptor-abhängigen zellulären Signalübertragungsweg |
DEP4317577.5 | 1993-05-27 | ||
PCT/EP1994/001735 WO1994028170A1 (de) | 1993-05-27 | 1994-05-27 | Verfahren zum screenen von substanzen mit modulierender wirkung auf einen interleukin-5-rezeptor-abhängigen zellulären signalübertragungsweg |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU95122776A true RU95122776A (ru) | 1998-02-27 |
RU2139936C1 RU2139936C1 (ru) | 1999-10-20 |
Family
ID=6488996
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU95122776/13A RU2139936C1 (ru) | 1993-05-27 | 1994-05-27 | Способ определения модулирующего действия вещества на зависимый от рецептора интерлейкина-5 путь передачи сигналов в человеческой клетке или клетке животного |
Country Status (17)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US5922549A (ru) |
EP (1) | EP0701628B1 (ru) |
JP (1) | JPH08510643A (ru) |
KR (1) | KR100318188B1 (ru) |
CN (1) | CN1125467A (ru) |
AT (1) | ATE162555T1 (ru) |
AU (1) | AU691816B2 (ru) |
CA (1) | CA2163549A1 (ru) |
DE (2) | DE4317577A1 (ru) |
DK (1) | DK0701628T3 (ru) |
ES (1) | ES2113109T3 (ru) |
FI (1) | FI111016B (ru) |
HU (1) | HU220345B (ru) |
NO (1) | NO316027B1 (ru) |
NZ (1) | NZ291131A (ru) |
RU (1) | RU2139936C1 (ru) |
WO (1) | WO1994028170A1 (ru) |
Families Citing this family (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB9405350D0 (en) * | 1994-03-18 | 1994-05-04 | Sandoz Ltd | Organic compounds |
US5683983A (en) * | 1995-06-07 | 1997-11-04 | Glaxo Group Limited | Peptides and compounds that bind to the IL-5 receptor |
US5677280A (en) * | 1995-06-07 | 1997-10-14 | Glaxo Group Limited | Peptides and compounds that bind to the IL-5 receptor |
US5654276A (en) * | 1995-06-07 | 1997-08-05 | Affymax Technologies N.V. | Peptides and compounds that bind to the IL-5 receptor |
US5668110A (en) * | 1995-06-07 | 1997-09-16 | Affymax Technologies N.V. | Peptides and compounds that bind to the IL-5 receptor |
US7109299B1 (en) | 1999-12-16 | 2006-09-19 | Affymax, Inc. | Peptides and compounds that bind to the IL-5 receptor |
WO2002028168A1 (en) * | 2000-10-03 | 2002-04-11 | University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education | High efficiency regulatable gene expression system |
AU2003286684A1 (en) * | 2002-10-30 | 2004-06-07 | Gail Bishop | Somatic cell gene targeting vectors and methods of use thereof |
WO2004092402A1 (en) * | 2003-04-15 | 2004-10-28 | Pfizer Inc. | Dual reporter/dye reduction methodology for evaluating antiviral activity and cytotoxicity of hepatitis c virus inhibitors |
US20050112551A1 (en) * | 2003-11-24 | 2005-05-26 | Agouron Pharmaceuticals, Inc. | Dual assay for evaluating activity and cytotoxicity of compounds in the same population of cells |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5071773A (en) * | 1986-10-24 | 1991-12-10 | The Salk Institute For Biological Studies | Hormone receptor-related bioassays |
US5401629A (en) * | 1990-08-07 | 1995-03-28 | The Salk Institute Biotechnology/Industrial Associates, Inc. | Assay methods and compositions useful for measuring the transduction of an intracellular signal |
US5453491A (en) * | 1990-09-11 | 1995-09-26 | Kiyoshi Takatsu | Murine interleukin-5 receptor |
WO1992013063A1 (en) * | 1991-01-18 | 1992-08-06 | Oncogene Science, Inc. | Methods of transcriptionally modulating expression of growth factor genes and growth factor receptor genes |
JPH06511386A (ja) * | 1991-10-01 | 1994-12-22 | アメリカ合衆国 | リガンドおよびリガンドのアンタゴニストを同定する方法 |
-
1993
- 1993-05-27 DE DE4317577A patent/DE4317577A1/de not_active Withdrawn
-
1994
- 1994-05-27 RU RU95122776/13A patent/RU2139936C1/ru not_active IP Right Cessation
- 1994-05-27 US US08/553,304 patent/US5922549A/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-05-27 WO PCT/EP1994/001735 patent/WO1994028170A1/de active IP Right Grant
- 1994-05-27 AU AU69977/94A patent/AU691816B2/en not_active Ceased
- 1994-05-27 KR KR1019950705282A patent/KR100318188B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1994-05-27 JP JP7500238A patent/JPH08510643A/ja not_active Ceased
- 1994-05-27 EP EP94918807A patent/EP0701628B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1994-05-27 HU HU9503363A patent/HU220345B/hu not_active IP Right Cessation
- 1994-05-27 DE DE59405120T patent/DE59405120D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1994-05-27 CA CA002163549A patent/CA2163549A1/en not_active Abandoned
- 1994-05-27 DK DK94918807T patent/DK0701628T3/da active
- 1994-05-27 CN CN94192453A patent/CN1125467A/zh active Pending
- 1994-05-27 AT AT94918807T patent/ATE162555T1/de not_active IP Right Cessation
- 1994-05-27 NZ NZ291131A patent/NZ291131A/en unknown
- 1994-05-27 ES ES94918807T patent/ES2113109T3/es not_active Expired - Lifetime
-
1995
- 1995-11-24 NO NO19954781A patent/NO316027B1/no not_active IP Right Cessation
- 1995-11-27 FI FI955700A patent/FI111016B/fi not_active IP Right Cessation
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Zhang et al. | Augmentation of circulating follicular helper T cells and their impact on autoreactive B cells in myasthenia gravis | |
RU95122776A (ru) | Способ скрининга веществ с модулирующим действием на зависимый от рецептора интерлейкина-5 путь передачи сигналов в клетках | |
EP1586658A3 (en) | Assay methods and compositions for detecting and evaluating the intracellular transduction of an extracellular signal | |
Sreter et al. | Cell water, sodium, and potassium in red and white mammalian muscles | |
Orioli et al. | The Eph receptor family: axonal guidance by contact repulsion. | |
Vitale et al. | NKp44, a novel triggering surface molecule specifically expressed by activated natural killer cells, is involved in non–major histocompatibility complex–restricted tumor cell lysis | |
Sugawara et al. | Differential roles of ERK and p38 MAP kinase pathways in positive and negative selection of T lymphocytes | |
Doolittle | [6] Searching through sequence databases | |
Thomis et al. | Peripheral expression of Jak3 is required to maintain T lymphocyte function | |
Dougherty et al. | Cytosolic calcium regulates phorbol diester binding affinity in intact phagocytes. | |
Zon et al. | The erythropoietin receptor transmembrane region is necessary for activation by the Friend spleen focus-forming virus gp55 glycoprotein | |
DE69132564D1 (de) | Verfahren zur identifizierung von verbindungen, die als agonisten oder antagonisten für an der signaltransduktion beteiligte proteine agieren | |
DE3751846D1 (de) | Hybrid-Rezeptoren, diese kodierende Nukleinsäure, ihre Herstellung und ihre Verwendung zur Bestimmung von Liganden sowie deren Antagonisten oder Agonisten | |
Kanakry et al. | Neuregulin-1 regulates cell adhesion via an ErbB2/phosphoinositide-3 kinase/Akt-dependent pathway: potential implications for schizophrenia and cancer | |
Dell'Aquila et al. | Inhibition by bryostatin 1 of the phorbol ester-induced blockage of differentiation in hexamethylene bisacetamide-treated Friend erythroleukemia cells | |
Hu et al. | IL-2 prevents deletion of developing T-regulatory cells in the thymus | |
KR960702532A (ko) | 인터루킨-5-수용체-의존성 세포 시그날 전달 경로에 대한 조절 효과를 갖는 물질을 스크리닝하는 방법(Process for screening substances having a modulating effect on an interleukine-5-receptor-dependent cellular signal transmission path) | |
Muench et al. | A pathogenic Th17/cd38+ macrophage feedback loop drives inflammatory arthritis through TNF-α | |
Rosoff et al. | Isolation and characterization of the chicken m2 acetylcholine receptor promoter region: induction of gene transcription by leukemia inhibitory factor and ciliary neurotrophic factor | |
Park et al. | IL7 receptor signaling in T cells: A mathematical modeling perspective | |
Zola et al. | Detection of cytokine receptors by high-sensitivity immunofluorescence/flow cytometry | |
Turowski et al. | Chicken TREM-B1, an inhibitory Ig-like receptor expressed on chicken thrombocytes | |
Rogers et al. | lmmunomodulatory Activity of Kappa-, Mu-, and Delta-Selective Opioid Compounds | |
Gasser et al. | Constitutive expression of a chimeric receptor that delivers IL-2/IL-15 signals allows antigen-independent proliferation of CD8+ CD44high but not other T cells | |
Hamon et al. | Regional differences in the transduction mechanisms of 5-hydroxytryptamine receptors in the mammalian brain |