RU93013383A - METHOD FOR DETERMINING AN IRREVERSIBLE CHOLINESTERASE INHIBITOR AND A SUSPENSIVE METAL SALT UNDER THEIR JOINT PRESENCE IN WATER - Google Patents

Claims (1)

Изобретение относится к области экологии и может быть использовано для контроля окружающей среды. Техническим результатом предлагаемого способа является повышение селективности и достоверности определения в воде необратимого ингибитора холинэстеразы в присутствии соли тяжелого металла с использованием фермент-субстратной системы холинэстераза - ацилтиохолин и окислительно-восстановительного индикатора на тиольную группу при одновременном определении содержания соли тяжелого металла в анализируемой пробе. Указанный результат достигается тем, что кинетическая кривая ферментативного гидролиза ацилтиохолина под воздействием холинэстеразы в присутствии в анализируемой пробе соли тяжелого металла имеет специфический вид. В отличие от кинетической кривой, соответствующей опыту в отсутствие соли тяжелого металла, при наличии в пробе соли тяжелого металла на кинетической кривой появляется плато, которое предшествует участку возрастания оптической плотности, причем длина плато пропорциональна концентрации соли тяжелого металла. Новым в способе является определение биохимическим методом и ингибитора холинэстеразы, и соли тяжелого металла при их совместном присутствии в пробе с использованием следующей системы уравнений при обработке результатов измерений: t au = А₀ + А₁ x₁ + А₂ x₂ + А₃ x₃ + А_1 2 x₁ x₂ + А_2 3 x₂ x₃ + А_1 3 x₁ x₃ + А_1 2 3 x₁ x₂ x₃ l gv = B₀ + B₁ x₁ + B₂ x₂ + B₃ x₃ + B_1 2 x₁ x₂ + B_2 3 x₂ x₃ + B_1 3 x₁ x₃ + B_1 2 3 x₁ x₂ x₃, где x₁ - концентрация соли тяжелого металла, x₂ - концентрация ингибитора, x₃ - активность холинэстеразы в растворе; t au - ширина плато, которое предшествует на кинетической кривой участку возрастания оптической плотности; l gv - логарифм отношения тангенса угла наклона кинетической кривой ферментативного гидролиза ацилтиохолина на участке возрастания оптической плотности в холостом опыте к тангенсу угла наклона для анализируемой пробы.The invention relates to the field of ecology and can be used to control the environment. The technical result of the proposed method is to increase the selectivity and reliability of determining an irreversible cholinesterase inhibitor in water in the presence of a heavy metal salt using the enzyme-substrate system cholinesterase - acylthiocholine and a redox indicator for the thiol group, while simultaneously determining the salt content of the heavy metal in the analyzed sample. This result is achieved by the fact that the kinetic curve of the enzymatic hydrolysis of acyl thiocholine under the influence of cholinesterase in the presence of a heavy metal salt in the analyzed sample has a specific appearance. In contrast to the kinetic curve corresponding to experience in the absence of a heavy metal salt, when a heavy metal salt is present in the sample, a plateau appears on the kinetic curve, which precedes the increase in optical density, and the plateau length is proportional to the concentration of the heavy metal salt. A new method is the determination of a biochemical method and a cholinesterase inhibitor, and a heavy metal salt when they are present together in a sample using the following system of equations when processing measurement results: t au = A ₀ + A ₁ x ₁ + A ₂ x ₂ + A ₃ x ₃ + А _{1 2} x ₁ x ₂ + А _{2 3} x ₂ x ₃ + А _{1 3} x ₁ x ₃ + А _{1 2 3} x ₁ x ₂ x ₃ l gv = B ₀ + B ₁ x ₁ + B ₂ x ₂ + B ₃ x ₃ + B _{1 2} x ₁ x ₂ + B _{2 3} x ₂ x ₃ + B _{1 3} x ₁ x ₃ + B _{1 2 3} x ₁ x ₂ x ₃ , where x ₁ is the salt concentration of a heavy metal , x ₂ - inhibitor concentration, x ₃ - cholinesterase activity in solution; t au is the plateau width, which precedes on the kinetic curve the area of increasing optical density; l gv is the logarithm of the ratio of the slope of the kinetic curve of the enzymatic hydrolysis of acylthiocholine in the area of increasing optical density in the blank experiment to the slope of the slope for the analyzed sample.