RU2821779C1 - Способ комплексной коррекции нерубцовых алопеций в эксперименте - Google Patents
Способ комплексной коррекции нерубцовых алопеций в эксперименте Download PDFInfo
- Publication number
- RU2821779C1 RU2821779C1 RU2023118071A RU2023118071A RU2821779C1 RU 2821779 C1 RU2821779 C1 RU 2821779C1 RU 2023118071 A RU2023118071 A RU 2023118071A RU 2023118071 A RU2023118071 A RU 2023118071A RU 2821779 C1 RU2821779 C1 RU 2821779C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- miliacin
- anagen
- oleanene
- methoxy
- alopecia
- Prior art date
Links
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 title claims abstract description 64
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 37
- 231100000360 alopecia Toxicity 0.000 title claims abstract description 32
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 title claims abstract description 26
- 230000037390 scarring Effects 0.000 title claims abstract description 12
- 238000012937 correction Methods 0.000 title claims description 13
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 claims abstract description 61
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 claims abstract description 24
- 201000002996 androgenic alopecia Diseases 0.000 claims abstract description 23
- 230000035617 depilation Effects 0.000 claims abstract description 23
- 210000004919 hair shaft Anatomy 0.000 claims abstract description 11
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 claims abstract description 11
- 229940049964 oleate Drugs 0.000 claims abstract 4
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 claims abstract 2
- YZBNXQLCEJJXSC-LZBBLKFASA-N (3S,4aR,6aS,6aR,6bR,8aR,14aR,14bR)-3-methoxy-4,4,6a,6b,8a,11,11,14b-octamethyl-1,2,3,4a,5,6,6a,7,8,9,10,13,14,14a-tetradecahydropicene Chemical compound C1([C@H]2CC[C@H]34)=CC(C)(C)CC[C@]1(C)CC[C@@]2(C)[C@]4(C)CC[C@@H]1[C@]3(C)CC[C@H](OC)C1(C)C YZBNXQLCEJJXSC-LZBBLKFASA-N 0.000 claims description 56
- DYWBABNJDLLCOR-UHFFFAOYSA-N Miliacin Natural products COC1CCC2(C)C3CCC4(C)C5=CC(C)(C)CCC5(C)CCC4(C)C3(C)CCC2(C)C1(C)C DYWBABNJDLLCOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 56
- YZBNXQLCEJJXSC-UHFFFAOYSA-N O-Methyl-germanicol Natural products C12CCC3C4=CC(C)(C)CCC4(C)CCC3(C)C1(C)CCC1C2(C)CCC(OC)C1(C)C YZBNXQLCEJJXSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 56
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 claims description 33
- 206010068168 androgenetic alopecia Diseases 0.000 claims description 21
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 abstract description 53
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 11
- 230000003781 hair follicle cycle Effects 0.000 abstract description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 5
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 abstract description 4
- 230000004090 etiopathogenesis Effects 0.000 abstract description 3
- 210000003780 hair follicle Anatomy 0.000 description 92
- 229950004959 sorbitan oleate Drugs 0.000 description 27
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 26
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 24
- 230000003778 catagen phase Effects 0.000 description 22
- 230000003797 telogen phase Effects 0.000 description 20
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 18
- 210000004209 hair Anatomy 0.000 description 15
- 230000003777 Anagen VI Effects 0.000 description 11
- 210000004761 scalp Anatomy 0.000 description 11
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 10
- 244000062793 Sorghum vulgare Species 0.000 description 9
- 235000019713 millet Nutrition 0.000 description 9
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 9
- 150000003408 sphingolipids Chemical class 0.000 description 9
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 208000022605 chemotherapy-induced alopecia Diseases 0.000 description 8
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 8
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 8
- 208000024963 hair loss Diseases 0.000 description 8
- 238000007490 hematoxylin and eosin (H&E) staining Methods 0.000 description 8
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 7
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 7
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- 230000003676 hair loss Effects 0.000 description 6
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 6
- 230000003771 Anagen II Effects 0.000 description 5
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 5
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 5
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 229940059453 millet extract Drugs 0.000 description 5
- 150000002966 pentacyclic triterpenoids Chemical class 0.000 description 5
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 5
- 210000004918 root sheath Anatomy 0.000 description 5
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 5
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 4
- 230000003726 Anagen I Effects 0.000 description 4
- 230000003772 Anagen III Effects 0.000 description 4
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 4
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 4
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 4
- 238000007491 morphometric analysis Methods 0.000 description 4
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 4
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 4
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 4
- NWGKJDSIEKMTRX-AAZCQSIUSA-N Sorbitan monooleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O NWGKJDSIEKMTRX-AAZCQSIUSA-N 0.000 description 3
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 3
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 3
- 235000007882 dietary composition Nutrition 0.000 description 3
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 3
- 230000003779 hair growth Effects 0.000 description 3
- 230000003752 improving hair Effects 0.000 description 3
- 150000002634 lipophilic molecules Chemical class 0.000 description 3
- 230000003061 melanogenesis Effects 0.000 description 3
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 3
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 3
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 238000012552 review Methods 0.000 description 3
- 210000001732 sebaceous gland Anatomy 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- XBZYWSMVVKYHQN-MYPRUECHSA-N (4as,6as,6br,8ar,9r,10s,12ar,12br,14bs)-10-hydroxy-2,2,6a,6b,9,12a-hexamethyl-9-[(sulfooxy)methyl]-1,2,3,4,4a,5,6,6a,6b,7,8,8a,9,10,11,12,12a,12b,13,14b-icosahydropicene-4a-carboxylic acid Chemical compound C1C[C@H](O)[C@@](C)(COS(O)(=O)=O)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CCC(C)(C)C[C@H]5C4=CC[C@@H]3[C@]21C XBZYWSMVVKYHQN-MYPRUECHSA-N 0.000 description 2
- GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N (D)-(+)-Pantothenic acid Chemical compound OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 238000012313 Kruskal-Wallis test Methods 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 2
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 229940062331 androgel Drugs 0.000 description 2
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 2
- 230000003796 beauty Effects 0.000 description 2
- 229940076810 beta sitosterol Drugs 0.000 description 2
- LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N beta-Sitostanol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NJKOMDUNNDKEAI-UHFFFAOYSA-N beta-sitosterol Natural products CCC(CCC(C)C1CCC2(C)C3CC=C4CC(O)CCC4C3CCC12C)C(C)C NJKOMDUNNDKEAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 230000031774 hair cycle Effects 0.000 description 2
- 230000003659 hair regrowth Effects 0.000 description 2
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 2
- 238000012735 histological processing Methods 0.000 description 2
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 2
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 2
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 2
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 2
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 2
- 239000003495 polar organic solvent Substances 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N sitosterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N 0.000 description 2
- 229950005143 sitosterol Drugs 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 2
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 210000000434 stratum corneum Anatomy 0.000 description 2
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000013271 transdermal drug delivery Methods 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 2
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 2
- -1 β-sitosterol Chemical class 0.000 description 2
- 206010002261 Androgen deficiency Diseases 0.000 description 1
- 108060000903 Beta-catenin Proteins 0.000 description 1
- 102000015735 Beta-catenin Human genes 0.000 description 1
- GHOKWGTUZJEAQD-UHFFFAOYSA-N Chick antidermatitis factor Natural products OCC(C)(C)C(O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000003024 Diffuse alopecia Diseases 0.000 description 1
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 1
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 1
- 108010063907 Glutathione Reductase Proteins 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- 239000002211 L-ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000000069 L-ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N L-cystine Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CSSC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- 239000004158 L-cystine Substances 0.000 description 1
- 235000019393 L-cystine Nutrition 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- ZFMITUMMTDLWHR-UHFFFAOYSA-N Minoxidil Chemical compound NC1=[N+]([O-])C(N)=CC(N2CCCCC2)=N1 ZFMITUMMTDLWHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 206010048886 Onychoclasis Diseases 0.000 description 1
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 1
- 240000008114 Panicum miliaceum Species 0.000 description 1
- 235000007199 Panicum miliaceum Nutrition 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 208000017442 Retinal disease Diseases 0.000 description 1
- 244000189123 Rumex japonicus Species 0.000 description 1
- 235000005247 Rumex japonicus Nutrition 0.000 description 1
- 238000011869 Shapiro-Wilk test Methods 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000004086 alkylating cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000002152 alkylating effect Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 1
- 229940030486 androgens Drugs 0.000 description 1
- 230000002280 anti-androgenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002424 anti-apoptotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002790 anti-mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000051 antiandrogen Substances 0.000 description 1
- 229940030495 antiandrogen sex hormone and modulator of the genital system Drugs 0.000 description 1
- 238000011319 anticancer therapy Methods 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000007876 drug discovery Methods 0.000 description 1
- 230000002996 emotional effect Effects 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003645 female-pattern hair loss Effects 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 210000004392 genitalia Anatomy 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 208000035474 group of disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003648 hair appearance Effects 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000030214 innervation Effects 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 235000020778 linoleic acid Nutrition 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N linoleic acid group Chemical group C(CCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC)(=O)O OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- 229960003632 minoxidil Drugs 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 235000021313 oleic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000002889 oleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 1
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 150000002943 palmitic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229940055726 pantothenic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019161 pantothenic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011713 pantothenic acid Substances 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000001991 pathophysiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000003961 penetration enhancing agent Substances 0.000 description 1
- 239000002831 pharmacologic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 230000008521 reorganization Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 229940092258 rosemary extract Drugs 0.000 description 1
- 235000020748 rosemary extract Nutrition 0.000 description 1
- 239000001233 rosmarinus officinalis l. extract Substances 0.000 description 1
- 230000008591 skin barrier function Effects 0.000 description 1
- 206010040882 skin lesion Diseases 0.000 description 1
- 231100000444 skin lesion Toxicity 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 201000001297 telogen effluvium Diseases 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000037317 transdermal delivery Effects 0.000 description 1
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
Abstract
Группа изобретений относится к медицине, а именно к экспериментальной дерматологии. В нулевой день эксперимента производят индукцию анагена путем депиляции стержней волос с кожи спины. С первого дня эксперимента на очаг депиляции ежедневно наносят 1% гель тестостерона из расчета 5 мг/кг с последующим нанесением через 30 минут комплекса милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена с полиоксиэтилированным-20-сорбита-олеатом с концентрацией милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена 30 мг/мл. При моделировании андрогенной алопеции комплекс наносят в течение 28 суток. При моделировании алопеции, индуцированной циклофосфамидом, комплекс наносят в течение 15-33 дней с введением на девятый день эксперимента однократно внутрибрюшинно 125 мг/кг циклофосфамида. Группа изобретений позволяет изучить влияние комплекса милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена с полиоксиэтилированным-20-сорбита-олеатом в условиях моделирования нерубцовых алопеций с различным этиопатогенезом и характером нарушения цикла волосяного фолликула для разработки новых способов лечения нерубцовых алопеций. 2 н.п. ф-лы, 13 ил., 6 табл., 2 пр.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной дерматологии, и может быть использовано в качестве способа комплексной коррекции нарушений цикла и морфофункциональной регенерации волосяных фолликулов в экспериментальных моделях нерубцовых алопеций.
Нерубцовые алопеции представляют собой гетерогенную группу заболеваний, в основе которых лежит нарушение цикла волосяного фолликула (ВФ) [1]. Наиболее распространенной формой нерубцовых алопеций является андрогенетическая алопеция (АГА) [2]. Цикл ВФ при АГА характеризуется преждевременным вступлением ВФ в фазу катагена и задержкой перехода ВФ из фазы телогена в фазу анагена, что ассоциировано с сокращением продолжительности фазы анагена [3]. Наличие противопоказаний, побочные эффекты, ограниченная эффективность и доступность существующих средств и методов лечения АГА определяют актуальность разработки новых способов лечения этого заболевания [4, 5].
Волосяные фолликулы в фазе анагена чрезвычайно чувствительны к различным токсическим воздействиям, особенно к химиотерапевтическим препаратам, применяемым в онкологической практике. Клинико-патологически алопеция, индуцированная химиотерапией, является сочетанием анагеновой и телогеновой алопеции [6]. Алопеция, индуцированная химиотерапией, остается важной нерешенной клинической проблемой, особенно, учитывая вероятность влияния трихотропных препаратов на эффективность противоопухолевой терапии с увеличением риска метастазов злокачественной опухоли в кожу головы [6, 7]. Несколько классов фармакологических препаратов с различными механизмами действия были оценены на животных моделях алопеции, индуцированной химиотерапией. На сегодняшний день информация об их клинической эффективности не представлена [7].
Независимо от этиологии и клинической разновидности эмоциональный стресс, вызванный выпадением волос, их поредением и отсутствием роста с формированием алопеции, существенно снижает качество жизни [4, 8].
Пентациклические тритерпеноиды обладают широким спектром биологической и фармакологической активности [9, 10]. К числу пентациклических тритерпеноидов относится милиацин, имеющий химическую формулу 3-β-метокси-Δ18-олеанен, и выделяемый из семян проса [11, 12]. В ряде экспериментальных исследований доказана его мембранопротекторная [13, 14], антиоксидантная [15], антимутагенная [16], антиапоптотическая активность, способность регулировать экспрессию генов, отвечающих за редокс-баланс клеток [17], повышать терапевтическую активность противоопухолевых препаратов, в частности метоторексата [18], и другие свойства, наряду с низкой токсичностью [19]. Установлено, что экстракт проса, называемый в ряде работ милиацин [20-22], значительно увеличивает пролиферативную и метаболическую активность кератиноцитов человека, указывая на то, что он может стимулировать рост волос [23].
Приоритетным для коррекции алопеций является топическое введение трихотропных средств, что позволяет создавать их высокие локальные концентрации в очагах поражения кожи [24]. Однако липофильных соединений, к числу которых относится милиацин - 3-β-метокси-Δ18-олеанен, характеризуются низкой трансдермальной проницаемостью. С учетом морфологических особенностей кожи и различной полярности слоев кожи, относительно свободное прохождение липофильных соединений возможно только через роговой слой, обладающий гидрофобными свойствами, с ограниченной проницаемостью в более глубокие слои эпидермиса, дерму и гиподерму, где расположены кровеносные сосуды и луковицы волосяных фолликулов [25].
Уровень техники
Известно средство, предназначенное для предотвращения или замедления выпадения волос (Семейство патентов АТ-173608-Т; DE-69414857-D1; DE-69414857-T2; ЕР-0714276-А1; ЕР-0714276-В1; ES-2126136-Т3; FR-2708854-A1; FR-2708854-B1; WO-9505146-A1 Composition against hair loss and brittle nails» J.-P. Maurice Oury, 13.08.1993). Средство представляет композицию для лечения кожного покрова, в частности против выпадения волос и ломкости ногтей, предпочтительно перорального введения, отличающаяся тем, что содержит эффективную дозу одного, по крайней мере, из следующих компонентов: инозитол, кунжут (сухой экстракт), просо (экстракт), экстракт морских водорослей, цинк и магний, предпочтительно со следующими составляющими: серосодержащими аминокислотами, такими как L-цистин, витаминами, такими как витамин Н (биотин) и/или витамином В5 (пантотеновая кислота) в составе капсул. Недостатком известного технического решения является то, что, во-первых, используется экстракт проса, при этом содержание милиацина, как чистого активного вещества, не указывается, во-вторых, экстракт проса является необязательным компонентом композиции.
Известно применение композиции для улучшения внешнего вида волос и способ получения блестящих волос (семейство патентов СА-3016934-А1; DK-3453381-T3; ЕР-3453381-А1; ЕР-3453381-В1; ES-2850350-T3 «Method and use of a composition for improving hair арреагапсе» S. Boudon, P. Kurka, C. Gnacke [et al.], 08.09.2017). В указанных патентах раскрывается нетерапевтический метод, характеризующийся приемом пищевой добавки в форме капсул, содержащих экстракт проса, а также биотин, L-цистин, пантотеновую кислоту, для придания волосам блеска.
В качестве прототипа выбран способ применения косметической, фармацевтической или диетической композиции, содержащей масло проса, экстракт пшеницы с полярным органическим растворителем и фармацевтически приемлемую среду, а также способ получения такой композиции (Патент № US-9180135-B2 «Miliacin and sphingolipids and/or phospholipids composition for hair and scalp саге», F. Lamay, I. Lamour, E. Gaillard, 26.04.2013. Семейство патентов EP-2821052-A1 Combination of miliacin and polar lipids, in particular of sphingolipids and/or phospholipids, for care of the hair and scalp»; EP-2821052-B1; ES-2614379-T3 Association of miliacin and polar lipids, specifically sphingolipids and / or phospholipids, for hair and scalp саге»; FR-3004947-A1 «Association of miliacin and polar lipids, in particular sphingolipids and / or phospholipids, for the care of hair and scalp»; FR-3004947-B1; US-2014315864-A1 Association of miliacin and polar lipids, particularly sphingolipids and/or phospholipids, for hair and scalp саге»; US-9180135-B2 «Miliacin and sphingolipids and/or phospholipids composition for hair and scalp саге», F. Lamay, I. Lamour, E. Gaillard, 26.04.2013). В частности, изобретение относится к композиции для перорального введения или для нанесения на кожу, содержащей комбинацию активных веществ для борьбы с выпадением волос и/или стимуляции роста и/или повторного роста волос, и/или улучшения их красоты (блеска, мягкости, силы) и/или повышения комфорта кожи головы, или борьбы с чрезмерным выпадением волос, и/или стимуляции роста волос, и/или улучшения их красоты. Раскрыто, в том числе, в семействе перечисленных патентов, приготовление композиции путем получения масла проса, содержащего милиацин, получение экстракта пшеницы в полярном органическом растворителе, и смешивание масла проса и экстракта пшеницы. Просяное масло присутствует в композиции в количестве, эффективном для получения косметической или диетической композиции, содержащей от 0,01% до 10% по массе милиацина или от 0,1 до 2% по массе милиацина в расчете на общую массу указанной косметической или диетической композиции. Масло проса получают путем измельчения целых или очищенных семян проса Panicum miliaceum с получением муки проса. Затем проводят экстракцию, например, с помощью сверхкритического CO2. Полученный экстракт сушат в вакууме и стабилизируют экстрактом розмарина. Состав получаемого экстракта проса, предпочтительно следующий: от 85 до 99% триглицеридов (включая линолевую, олеиновую и пальмитиновую кислоты), от 0,5 до 2% стеролов, в том числе, β-ситостерол, δ-7-стимастерол и другие стерины, и от 0,1 до 2,0% милиацина. Недостатком данного способа является содержание в композиции триглицеридов с полиненасыщенной линолевой и мононенасыщенной олеиновой жирными кислотами, которые способны подвергаться окислению, как спонтанно, так и при воздействии кислорода воздуха, тепла, а также в случае естественного присутствия следов металлов, в используемых растительных экстрактах. В процессе окисления могут изменяться физико-химические показатели композиции и биологическая активность входящих в состав композиции соединений, сокращаться сроки годности средства. Кроме того, известно, что состав и содержание активных веществ в исходном растительном сырье может изменяться в зависимости от ряда факторов, в том числе, места произрастания и условий выращивания [26], что может приводить к значительным колебаниям количества милиацина в составе композиции. Это особенно важно, с учетом плохой биодоступности, присущей пентациклическим тритерпеноидам [27]. В связи с этим, недостатком способа является недоучет особенностей трансдермальной проницаемости композиции для наружного применения, так как жирные кислоты, в частности цис-олеиновая кислота выступает в основном как усилитель проницаемости только через роговой слой [28]. Кроме того, масло проса помимо милиацина, содержит совокупность других соединений растительного происхождения с известной трихотропной биологической активностью [29, 30]. В связи с этим эффективность известного средства не может быть объяснена только присутствием милиацина.
Задача изобретения.
Основной задачей, на решение которой направлено заявляемое изобретение, является разработка способа коррекции нерубцовых алопеций у экспериментальных животных, основанного на методике использования комплекса милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена и полиоксиэтилированного-20-сорбитаноолеата в фиксированной комбинации.
Раскрытие изобретения
Сущность изобретения заключается в том, что по предлагаемому способу воспроизводятся нерубцовые алопеции с разным этиопатогенезом, а именно, животная модель андрогенетической алопеции и модель алопеции, индуцированной химиотерапией, путем введения циклофосфамида. Комплексная коррекция проявлений патологии волосяных фолликулов проводится топическим однократным ежедневным нанесением на кожу всей поверхности очага поражения милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена в концентрации 30 мг/мл в комплексе с полиоксиэтилированным-20-сорбитаноолеатом. Выбор основы обусловлен сложностью трансдермального переноса милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена, характеризующегося липофильными свойствами. Полиоксиэтилированный-20-сорбитаноолеат является гидрофильным неионогенным поверхностно активным соединением со свойствами эффективного растворителя липофильных соединений, и отличается стабильностью, биосовместимостью, электронейтральностью, низкой токсичностью [31, 32, 33]. Свойства полиоксиэтилированного-20-сорбитаноолеата определяют его способность преодолевать кожный барьер и усиливать проницаемость введенных в его состав соединений [34]. Методика использования комплекса милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена с полиоксиэтилированным-20-сорбитаноолеатом зависит от разновидности экспериментальной нерубцовой алопеции. В модели андрогенетической алопеции комплекс милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена с полиоксиэтилированным-20-сорбитаноолеатом с концентрацией милиацина -3-β-метокси-Δ18-олеанена 30 мг/мл, наносится на весь очаг поражения в течение действия значимого этиопатогенетического фактора, 28 суток. В случае алопеции, индуцированной циклофосфамидом, нанесение комплекса милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена с полиоксиэтилированным-20-сорбитаноолеатом с концентрацией милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена 30 мг/мл, на очаг депиляции начинается с первых суток после индукции анагена, за 8 суток до введения алкилирующего химиотерапевтического средства циклофосфамида, и длится весь период наблюдения за животными (15 суток и 33 суток). Оценка результатов применения способа проводится морфологически с помощью количественной гистоморфометрии.
Осуществление способа
Эксперимент 1 проведен на мышиной модели андрогенетической алопеции. В стандартных условиях вивария 30 мышам-самцам линии C57BL/6 в возрасте 6-7 недель, был индуцирован анаген путем депиляции стержней волос с кожи спины. Длительность эксперимента составила 28 дней, день индукции анагена считался нулевым днем. Моделирование андрогенетической алопеции проводилось путем ежедневного нанесения всем животным опытных групп 1% геля тестостерона из расчета 5 мг/кг. Использовался препарат Андрогель® (производитель Besins-Healthcare), обеспечивающий непрерывную трансдермальную доставку тестостерона на протяжении 24 ч после однократного нанесения [35]. Способ коррекции включал топическое однократное нанесение на весь очаг поражения комплекса милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена с полиоксиэтилированным-20-сорбитаноолеатом. Концентрация милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена в составе равнялась 30 мг/мл. Для приготовления состава использовали кристаллы химически чистого милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена, полученные стандартным способом [12].
Животных разделили на 5 групп по 6 животных в каждой:
- контрольная группа - интактная;
- I опытная группа - мыши, получавшие 1% гель тестостерона 5 мг/кг наружно (модель андрогенетической алопеции);
- II опытная группа - мыши, получавшие наружно 1% гель тестостерона 5 мг/кг наружно с последующим нанесением 2% раствора миноксидила (положительный контроль);
- III опытная группа - мыши, получавшие наружно 1% гель тестостерона 5 мг/кг наружно однократно с последующим, через 30 минут, нанесением комплекса милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена с полиоксиэтилированным-20-сорбитаноолеатом;
- IV опытная группа - мыши получали наружно 1% гель тестостерона 5 мг/кг наружно с последующим, через 30 минут, нанесением полиоксиэтилированного-20-сорбитаноолеата (плацебо) на всю площадь поражения.
Животных выводили из эксперимента на 28 сутки после индукции анагена путем смещения шейных позвонков. Эксперименты с животными проводились с соблюдением «Правил проведения работ с использованием экспериментальных животных». Полученные образцы кожи области депиляции помещали в забуференный 10% нейтральный формалин и фиксировали при комнатной температуре в течение суток. После стандартной гистологической проводки материал заливали в парафиновые блоки, полученные срезы толщиной 5 мкм, окрашивали гематоксилином Майера и эозином. Стадии цикла волосяных фолликулов определяли исходя из данных, представленных S. Müller-Röver et al. [36]. Путем проведения гистоморфометрического анализа рассчитывался удельный вес волосяных фолликулов в каждой из фаз цикла волосяного фолликула и индекс цикла волосяного фолликула для каждой исследуемой группы, как описано Maurer М. et al. (1998) [37], с учетом следующего соответствия: фаза фаза раннего анагена=1, фаза среднего анагена=2, фаза позднего анагена=3, фаза катагена=4, телогена=5. Морфометрический анализ изображений фрагментов кожи проводился с помощью программного обеспечения ImageJ. Диаметры наружных корневых влагалищ измерялись на уровне впадения сальной железы. Статистический анализ полученных данных выполнялся с использованием таблиц Excel и программы Statistica 10.0. Количественные данные представлены в виде средней арифметической и стандартной ошибки среднего (М±m), 95% доверительные интервалы рассчитаны по методу Уилсона. Для сравнения показателей нескольких независимых групп использовали критерий Краскела-Уоллиса, попарные сравнения проводили с помощью критерия Манна-Уитни. Различия считались статистически значимыми при р≤0,05. Уровень изменчивости морфологических признаков оценивали с помощью коэффициента вариации (Cv).
Осуществление способа в экспериментальной модели андрогенетической алопеции привело к повышению плотности волосяных фолликулов на единицу площади (табл. 1); увеличению диаметра наружных корневых влагалищ при снижении показателя их вариабельности (табл. 2); увеличению удельного веса волосяных фолликулов в фазе анагена и увеличению соотношения количества ВФ в фазе анагена к таковому в фазе телогена (табл. 3, фиг. 1, фиг. 2).
Применение комплекса милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеаненом с полиоксиэтилированным-20-сорбитаноолеатом, с концентрацией милиацина -3-β-метокси-Δ18-олеанена 30 мг/мл, увеличивает продолжительность фазы анагена. Об этом свидетельствуют значения индекса цикла ВФ, соответствующие о средней фазе цикла ВФ. Максимальное значение индекса ВФ, равное 5,0, соответствует фазе телогена ВФ кожи мышей контрольной группы и I опытной группы. Значения индекса ВФ кожи животных II и IV опытных группы свидетельствуют об анаген-катагеновой и катаген-телогеновой трансформации ВФ соответственно. В отличие от индексов цикла ВФ указанных выше, данный показатель в коже мышей III опытной группы говорит о переходе ВФ из подфазы среднего анагена в подфазу позднего анагена, таким образом, свидетельствует о продлении фазы анагена (табл. 4).
Эксперимент 2 выполнен на мышиной модели алопеции, индуцированной химиотерапией. В стандартных условиях вивария 30 мышам-самцам линии C57BL/6 в возрасте 6-7 недель, был индуцирован анаген путем депиляции стержней волос с кожи спины. День эпиляции считали нулевым днем эксперимента. Моделирование алопеции, индуцированной химиотерапией, осуществлялось путем однократного внутрибрюшинного введения животным 125 мг/кг циклофосфамида на 9-е сутки после индукции анагена, когда ВФ кожи мышей вступили в финальную стадию фазы роста, в фазу анагена VI [37]. Способ коррекции включал предварительное начало топического нанесения поражения комплекса милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена с полиоксиэтилированным-20-сорбитаноолеатом, которое начиналось на первые сутки после индукции анагена, то есть за восемь дней до введения циклофосфамида, и продолжалось до завершения эксперимента. Методика аппликации заключалась в ежедневном однократном нанесении комбинации на очаг алопеции. Концентрация милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена в составе равнялась 30 мг/мл. Для приготовления состава использовали кристаллы химически чистого милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена, полученные стандартным способом [12].
Животных разделили на 3 группы по 10 животных в каждой:
- I группа (контроль) - животные получили однократную инъекцию 0,9% раствора натрия хлорида в количестве еквиобъемном вводимому количеству циклофосфамида;
- II группа (группа сравнения) - мыши получили 125 мг/кг циклофосфамида внутрибрюшинно однократно на 9-е сутки после индукции анагена и, начиная с 1-х суток после индукции анагена на кожу области депиляции наружно ежедневно им наносили полиоксиэтилированный-20-сорбитаноолеат (плацебо);
- III группа (опытная группа) - животные получили 125 мг/кг циклофосфамида внутрибрюшинно однократно на 9-е сутки после депиляции и начиная с 1-х суток после индукции анагена на кожу области депиляции ежедневно наружно им наносили милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена в комбинации с полиоксиэтилированным-20-сорбитаноолеатом.
Мыши выводились из эксперимента на 15-е и 33-и сутки после индукции анагена путем смещения шейных позвонков. Эксперименты с животными проводились с соблюдением «Правил проведения работ с использованием экспериментальных животных». Полученные образцы кожи области депиляции помещали в забуференный 10% нейтральный формалин и фиксировали при комнатной температуре в течение суток. После стандартной гистологической проводки материал заливали в парафиновые блоки, полученные срезы толщиной 5 мкм, окрашивали гематоксилином Майера и эозином. На 15-е сутки после индукции анагена оценивалась ранняя ответная реакция волосяных фолликулов на химическое повреждение циклофосфамидом. Количественная гистоморфометрия с расчетом индекса дистрофии ВФ проводилась исходя из данных и по методике, изложенной в работах Maurer, 1997; Bichsel, 2013 [37, 38], с учетом следующего соответствия: дистрофический анаген VI=1, ранний дистрофический катаген=2, средний дистрофический катаген=3, поздний дистрофический катаген=4, анаген I=4, анаген II=5, средний анаген=6, анаген VI=8.
На 33-и сутки оценивалась регенерация волосяных фолликулов в модели алопеции, индуцированной циклофосфамидом. Количественная гистоморфометрия с расчетом индекса цикла ВФ выполнена исходя из данных и методики, представленных Maurer, 1997; Bichsel, 2013 [37, 38], с учетом следующего соответствия: дистрофический анаген VI=1, ранний дистрофический катаген=2, средний дистрофический катаген=3, анаген I=4, анаген II=5, анаген III=6, анаген VI=7, катаген=8, телоген=9. Морфометрический анализ изображений фрагментов кожи проводился с помощью программного обеспечения ImageJ. Статистический анализ полученных данных выполнялся с использованием таблиц Excel и программы Statistica 10.0. Нормальность распределения данных определяли с использованием критерия Шапиро-Уилка. Количественные данные представлены в виде средней арифметической и стандартной ошибки среднего (М±m). Для сравнения показателей нескольких независимых групп использовали критерий Краскела-Уоллиса, попарные сравнения проводили с помощью критерия Манна-Уитни. Различия считались статистически значимыми при р≤0,05.
Осуществление способа на примере экспериментальной модели алопеции, индуцированной циклофосфамидом, привело к модификации цикла ВФ с ускорением морфофункциональной регенерации химически поврежденных ВФ.
В опытной группе животных, получавших милиацин - 3-β-метокси-Δ18-олеанена в комбинации с полиоксиэтилированным-20- сорбитаноолеатом, удельный вес дистрофических форм ВФ, представленных ВФ в фазе дистрофического катагена, было статистически значимо меньше и составило лишь 9,2±3,2%, остальные ВФ находились в фазах раннего и среднего анагена и не имели признаков химически индуцированной дистрофии (табл. 5, фиг. 3, фиг. 4). Это свидетельствует о том, что заявляемый способ коррекции способствует быстрой трансформации химически поврежденных ВФ в фазу дистрофического катагена, значительно укороченного телогена и последующей полной регенерацией ВФ с началом нового цикла. Последнее подтверждается расчетом индекса дистрофии ВФ (фиг. 5).
При анализе структурно-функциональных изменений ВФ кожи мышей, выявленных на 33-и сутки после индукции анагена, также получены данные, подтверждающие ускорение регенерации химически поврежденных ВФ при коррекции алопеции заявляемым способом. В коже мышей группы сравнения сохранялись ВФ в прогнозируемо длительном дистрофическом анагене VI, наряду ВФ, вступившие в новый цикл ВФ. В коже мышей опытной группы дистрофических форм ВФ не встречается (табл. 6, фиг. 6, фиг. 7).
Расчет индекса цикла ВФ свидетельствует о катаген-телогеновой трансформации ВФ кожи мышей опытной группы, в то время как средняя фаза цикла ВФ в коже мышей группы сравнения соответствует переходу ВФ из фазы дистрофического катагена в фазу раннего анагена, то есть началу вступления ВФ в новый цикл и начало полной их регенерации только к 33-м суткам после индукции анагена (фиг. 8).
Таким образом, реализация способа комплексной коррекции в модели андрогенетической алопеции и модели алопеции, индуцированной циклофосфамидом, имеющих разный патогенез, позволила выявить новые свойства милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена и установить влияния этого вещества на структурно-функциональную реорганизацию ВФ в условиях моделирования нарушений цикла ВФ и регенеративную способность ВФ при химически индуцированном повреждении.
Новизной изобретения является то, что впервые использована методика топического применения комплекса милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена с полиоксиэтилированным-20-сорбитаноолеатом, с фиксированной концентрацией милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена, равной 30 мг/мл, в условиях моделирования нерубцовых алопеций с различным этиопатогенезом и характером нарушения цикла волосяного фолликула.
Техническим результатом предлагаемого изобретения является реализация способа комплексной коррекции нерубцовых алопеций с применением методики ежедневного однократного топического нанесения на весь очаг поражения комплекса милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена в с полиоксиэтилированным-20-сорбитаноолеатом, с фиксированной концентрацией милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена, равной 30 мг/мл.
Преимуществами способа является, во-первых, использование чистого вещества милиацина-3-β-метокси-Δ18-олеанена, что позволяет стандартизировать состав и получать фиксированную концентрацию милиацина-3-β-метокси-Δ18-олеанена, с возможностью изучать его фармакокинетический профиль; во-вторых, учет физико-химических особенностей милиацина-3-β-метокси-Δ18-олеанена, а именно его липофильности и связанной с этим трудности его трансдермального переноса, что обосновало использование комплекса милиацина-3-β-метокси-Δ18-олеанена с полиоксиэтилированным-20-сорбитаноолеатом, являющимся усилителем проницаемости; в-третьих, химическая стабильность комплекса милиацина-3-β-метокси-Δ18-олеанена с полиоксиэтилированным-20-сорбитаноолеатом, его устойчивость к окислению, и, следовательно, удлинению сроков годности.
Способ иллюстрируется приведенными ниже примерами.
Пример 1. Самцам мышей линии C57BL/6 в возрасте 6-7 недель, которые содержались в стандартных условиях вивария, индуцировали анаген путем депиляции стержней волос с кожи спины восковыми полосками под эфирным наркозом (нулевой день эксперимента). Модель андрогенетической алопеции воспроизводили путем нанесения на кожу области депиляции 1% геля тестостерона. С целью оценки возможности использования милиацина-3-β-метокси-Δ18-олеанена для комплексной коррекции андрогенетической алопеции в модельном эксперименте была разработана методика применения комплекса милиацина-3-β-метокси-Δ18-олеанена с полиоксиэтилированным (20) сорбитаноолеатом, с концентрацией милиацина 30 мг/мл. С 1-го по 28-й день эксперимента на кожу области депиляции наносили 1% гель тестостерона из расчета 5 мг/кг (препарат Андрогель®, производитель Besins-Healthcare), спустя полчаса - комплекса милиацина-3-β-метокси-Δ18-олеанена с полиоксиэтилированным (20) сорбитаноолеатом, с концентрацией милиацина 30 мг/мл. На 28-й день после депиляции животных под эфирным наркозом умерщвляли. Отбор образцов кожи проводили с межлопаточной области, затем помещали их в 10% нейтральный формалин и фиксировали при комнатной температуре в течение суток. После стандартной гистологической проводки материал заливали в парафин. Гистосрезы толщиной 5 мкм окрашивали гематоксилином Майера и эозином. Морфометрический анализ изображений фрагментов кожи проводили с помощью программного обеспечения ImageJ. На микрофотографиях поперечных срезов проводили подсчет количества ВФ на единицу площади; на уровне впадения сальной железы проводили измерение диаметров наружных корневых влагалищ (фиг. 9). На продольных срезах оценивали морфологические признаки принадлежности ВФ к отдельным фазам цикла ВФ (фигура 10). Плотность волосяных фолликулов на единицу площади в коже мышей составила 5,33±0,12 (табл. 1, фиг. 11), средний диаметр наружных корневых влагалищ был равен 77,98±2,14 (табл. 2, фиг. 9), волосяных фолликулов в фазе анагена было 77,26±2,39, катагена - 1,24±0,42, телогена - 21,72±2,57, соотношение количества ВФ в фазе анагена к таковому в фазе телогена - 3,8±0,52 (табл. 3, фиг. 10, 11). Индекс фазы цикла, характеризующий среднюю фазу цикла ВФ в коже исследуемых мышей, составил 2,9±0,04 (табл. 4).
Пример 2. Самцам мышей линии C57BL/6 в возрасте 6-7 недель, которые содержались в стандартных условиях вивария, индуцировали анаген путем депиляции стержней волос с кожи спины восковыми полосками под эфирным наркозом (нулевой день эксперимента). С 1-х суток эксперимента мышам на кожу области депиляции наносили комплекс милиацина-3-β-метокси-Δ18-олеанена с полиоксиэтилированным (20) сорбитаноолеатом, с концентрацией милиацина 30 мг/мл. С целью моделирования алопеции, индуцированной химиотерапией, мышам внутрибрюшинно был введен алкилирующий цитостатический препарат циклофосфамид из расчета 125 мг/кг веса животного. Препарат вводился на 9-й день после депиляции, что у данной линии мышей соответствует раннему анагену VI. На 15-й день после депиляции половину животных умерщвляли под эфирным наркозом с целью оценки ранней ответной реакции ВФ кожи мышей на химическое повреждении циклофосфамидом. Оставшихся животных выводили из эксперимента на 33-и сутки после депиляции для изучения фазы регенерации химически поврежденных ВФ. Отбор образцов кожи проводили с межлопаточной области, затем помещали их в 10% нейтральный формалин и фиксировали при комнатной температуре в течение суток. После стандартной гистологической проводки материал заливали в парафин. Гистосрезы толщиной 5 мкм окрашивали гематоксилином Майера и эозином. Морфометрический анализ изображений фрагментов кожи проводили с помощью программного обеспечения ImageJ. На 15-е сутки после индукции анагена в коже мышей подавляющее большинство ВФ находилось в фазах анагена и не имело признаков химического повреждения: 14,2±2,66% - в фазе анагена I, 61,82±5,84% - в фазе анагена II, 14,78±4,3% - в фазе анагена III. Оставшиеся ВФ, составившие лишь 9,2±3,2% от общего числа классифицированных ВФ находилось в фазе позднего дистрофического катагена (табл. 5, фиг. 6, фиг. 12). На 33-и сутки после индукции анагена в коже мышей было обнаружено 11,34±2,7% ВФ в фазе анагена VI, 51,1±6,65% ВФ - в фазе катагена и 37,55±5,49% ВФ - в фазе телогена (табл. 6, фиг. 6, фиг. 13). Признаков дистрофических изменений обнаружено не было (табл.6). Индекс фазы дистрофии составил 5,16 на 15-е сутки, индекс цикла ВФ на 33-и сутки после индукции анагена был равен 8,28 (фиг. 8).
Результаты исследования поясняются графическими материалами:
На фиг. 1 показан удельный вес волосяных фолликулов в отдельных фазах цикла волосяного фолликула в контрольной и опытных группах в модели андрогенетической алопеции (* - попарные различия удельного веса ВФ в фазе анагена между опытными группами при уровне значимости р<0,01; ** - попарные различия удельного веса ВФ в фазе телогена между опытными группами при уровне значимости р<0,01)
Фигура 2. Фрагменты кожи спины мышей контрольной и опытных групп, 28-е сутки после индукции анагена. Модель андрогенетической алопеции. Окраска гематоксилином Майера и эозином. Ув. 300. (ВФ - волосяной фолликул): А. Контрольная группа. ВФ в фазе телогена. В. I опытная группа. ВФ в фазе телогена. С. II опытная группа. ВФ в фазе позднего анагена (анагена VI). D. II опытная группа. ВФ в фазе телогена. Е. III опытная группа. ВФ в фазе катагена. F. III опытная группа. ВФ в фазе раннего анагена (анаген II). G. III опытная группа. ВФ в фазе среднего анагена (анаген III). Н. IV опытная группа. Волосяные фолликулы в фазе телогена.
На фиг. 3 изображены репрезентативные микрофотографии волосяных фолликулов (ВФ) кожи мышей контрольной группы, группы сравнения и опытной группы на 15-е сутки после индукции анагена в модели алопеции, индуцированной циклофосфамидом. Окраска гематоксилином Майера и эозином. Ув. 300. А. Контрольная группа - ВФ в фазе анагена VI; Группа сравнения (В - Е) наблюдаются ВФ с признаками химически индуцированного повреждения: В. - ВФ в фазе дистрофического анагена VI, наблюдаются эктопированные гранулы меланина, сокращение зоны меланогенеза, искажение ВФ, нарушение пигментации стержня волоса; С. ВФ в фазе позднего дистрофического катагена, компактный округлый дермальный сосочек окружен конгломератами меланина; D. Расширение канала волоса, прерывание хода стержня волоса, нарушение пигментации стержня волоса; Е. Стержни волос с нарушенной пигментацией и структурой в каналах волос. Опытная группа (F - Н): ВФ в фазах раннего и среднего анагена не имеют признаков химического повреждения. F. ВФ в фазе позднего дистрофического катагена, конгломераты меланина окружают округлый дермальный сосочек; G. ВФ в фазе раннего анагена (анагена II), кератиноциты в виде полулуния окружают дермальный сосочек более чем на половину его объема; Н. ВФ в фазе среднего анагена (анаген IIIb), над верхним полюсом дермального сосочка наблюдается зона меланогенеза.
Фигура 4. Удельный вес волосяных фолликулов на разных стадиях цикла в коже мышей на 15-е сутки после депиляции в модели алопеции, индуцированной циклофосфамидом. Планки погрешностей отражают стандартную ошибку среднего; * - различия по удельному весу волосяных фолликулов фазе дистрофического катагена в коже мышей группы сравнения и опытной группы на уровне р<0,01.
Фигура 5. Индексы дистрофии волосяных фолликулов кожи мышей на 15-е сутки после депиляции в модели алопеции, индуцированной циклофосфамидом. Индекс дистрофии ВФ кожи мышей группы сравнения, равный 2,78, соответствует прогрессированию ВФ из фазы раннего дистрофического катагена в фазу позднего дистрофического катагена. Индекс дистрофии ВФ кожи мышей опытной группы, равный 5,16 означал трансформацию ВФ из фазы раннего анагена в фазу среднего анагена нового цикла ВФ. Планки погрешностей отражают стандартную ошибку среднего; - различия с индексом дистрофии волосяного фолликула контрольной группы с показателем опытной группы на уровне р<0,01; * - различия с индексом дистрофии волосяного фолликула группы сравнения с показателем опытной группы на уровне р<0,01.
Фигура 6. Удельный вес волосяных фолликулов на разных стадиях цикла в коже мышей на 33-и сутки после депиляции. Планки погрешностей отражают стандартную ошибку среднего; * - различия по удельному весу волосяных фолликулов в отдельных стадиях цикла в коже мышей группы сравнения и опытной группы на уровне р<0,01.
На фиг. 7 изображены репрезентативные микрофотографии волосяных фолликулов (ВФ) кожи мышей контрольной группы, группы сравнения и опытной группы на 33-и сутки после индукции анагена в модели алопеции, индуцированной циклофосфамидом. Окраска гематоксилином Майера и эозином. Ув. 300. *Ув. 150. А. Контрольная группа - ВФ в фазе телогена; Группа сравнения (В - Е) наблюдаются ВФ с как с признаками химически индуцированного повреждения, так и без них: В. - ВФ в фазе телогена; С. ВФ в фазе среднего анагена (анагена III); D. ВФ в фазе дистрофического анагена VI, расширение канала волоса, сокращение зоны меланогенеза в отдельных ВФ; Е. ВФ в фазе дистрофического анагена VI, искажение структуры ВФ. Опытная группа (F - Н): ВФ в фазах анагена, катагена и телогена не имеют признаков химического повреждения. F. ВФ в фазе телогена; G. ВФ в фазе среднего катагена; Н. ВФ в фазе анагена VI.
Фигура 8. Индексы цикла волосяных фолликулов кожи мышей на 33-и сутки после депиляции. Планки погрешностей отражают стандартную ошибку среднего; * - различия с индексом цикла волосяного фолликула контрольной группы на уровне р<0,01; - различия с индексом цикла волосяного фолликула группы сравнения на уровне р<0,01.
Фигура 9. Фрагмент кожи спины мыши, получавшей комплекс милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена с полиоксиэтилированным-20-сорбитаноолеатом в модели андрогенетической алопеции. 28-е сутки после индукции анагена. Поперечный срез на уровне впадения сальных желез, наружные корневые влагалища волосяных фолликулов. Окраска гематоксилин Майера и эозин. Ув. 300.
Фигура 10. Фрагмент кожи спины мыши, получавшей комплекс милиацина -3-β-метокси-Δ18-олеанена с полиоксиэтилированным-20-сорбитаноолеатом в модели андрогенетической алопеции. 28-е сутки после индукции анагена. Продольный срез, волосяной фолликул в фазе анагена I. Окраска гематоксилин Майера и эозин. Ув. 300.
Фигура 11. Фрагмент кожи спины мыши, получавшей комплекс милиацина -3-β-метокси-Δ18-олеанена с полиоксиэтилированным-20-сорбитаноолеатом в модели андрогенетической алопеции. 28-е сутки после индукции анагена. Продольный срез, волосяные фолликулы в фазе телогена. Окраска гематоксилин Майера и эозин. Ув. 300.
Фигура 12. Фрагмент кожи спины мыши, получавшей комплекс милиацина -3-β-метокси-Δ18-олеанена с полиоксиэтилированным-20-сорбитаноолеатом в модели алопеции, индуцированной циклофосфамидом. 15-е сутки после индукции анагена. Продольный срез, волосяные фолликулы в фазе позднего дистрофического катагена. Окраска гематоксилин Майера и эозин. Ув. 300.
Фигура 13. Фрагмент кожи спины мыши, получавшей комплекс милиацина -3-β-метокси-Δ18-олеанена с полиоксиэтилированным-20-сорбитаноолеатом в модели алопеции, индуцированной циклофосфамидом. 33-и сутки после индукции анагена. Продольный срез, волосяные фолликулы в фазе анагена VI. Окраска гематоксилин Майера и эозин. У в. 300.
Список литературы:
1. Resting no more: re-defining telogen, the maintenance stage of the hair growth cycle / M. Geyfman [et al.] // Biol. Rev. Camb. Philos. Soc. - 2015. - Vol. 90. - N4. - P. 1179-96.
2. Physiopathology and current treatments of androgenetic alopecia: Going beyond androgens and antiandrogens / T. Katzer [et al.] // Dermatologic Therapy. - 2019. - Vol. 32. - P. e13059.
3. Ramos, P.M. Female Pattern Hair Loss: a clinical and pathophysiological review / P.M. Ramos, H.A. Miot // An. Bras. Dermatol. - 2015. - Vol. 90. - N4. - P. 529-43.
4. Choi, B.Y. Targeting Wnt/β-Catenin Pathway for Developing Therapies for Hair Loss / B.Y. Choi // Int. J. Mol. Sci. - 2020. - Vol. 21. - N14. - P. 4915.
5. The Hair Growth-Promoting Effect of Rumex japonicus Houtt. Extract / H. Lee [et al.] // Evid Based Complement Alternat Med. - 2016. - Vol. 2016. - P. 1873746.
6. Chemotherapy-Induced Alopecia / A.C. Villasante [et al.] // J. Clin. Investigat. Dermatol. - 2014. - Vol. 2. - N2. - P. 8.
7. A Clinical and Biological Guide for Understanding Chemotherapy-Induced Alopecia and Its Prevention / C.J. Dunnill [et al.] //Oncologist. - 2018. - Vol. 23. - N1. - P. 84-96.
8. Сложный пациент трихолога: руководство по эффективному лечений алопеций и сопутствующих заболеваний / Ральф М. Трюб; пер. с англ. под ред. Н.Г. Баруновой, В.П. Ткачева. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2018. - 392.
9. The Potential Application of Pentacyclic Triterpenoids in the Prevention and Treatment of Retinal Diseases / Z. Cheng [et al.] // Planta Med. - 2021. - Vol. 87. - N7. - P. 511-527.
10. Tetracyclic and Pentacyclic Triterpenes with High Therapeutic Efficiency in Wound Healing Approaches / R. Ghiulai [et al.] // Molecules. - 2020. - Vol. 26. - N25(23). - P. 5557.
11. Олифсон, Л.Е. Химическая природа и биологическая активность милиацина /Л.Е. Олифсон, Н.Д. Осадчая, Б.Г. Нузов, [и др.] // Вопросы питания. - 1991. - №2. - С. 57-59.
12. Павлова, Маргарита Михайловна. Изучение влияния биологически активного стероида проса (3-β-метокси-Δ18-олеанена) при токсическом поражении печени четыреххлористым углеродом в эксперименте: диссертация … кандидата биологических наук: 03.00.04. - Оренбург, 1984. - 154 с.: ил.
13. Патент РФ на изобретение №1043860. «Средство, стабилизирующее биологические мембраны. Чернов А.Н., Павлова М.М., Олифсон Л.Е., 1983.
14. Фролов Б.А., Кириллова А.В. Милиацин как мембранопротектор. Защитное действие милиацина при детергент-индуцированной иммуносупрессии // Российский аллергологический журнал. - 2011. - Т. 4. - №1. - С. 402-403.
15. Панфилова, Т.В. Тритерпеноид милиацин снижает индуцируемое стрессом ПОЛ / Т.В. Панфилова, А.А. Штиль, Б.А. Фролов // Бюлл. экспер. биол и мед. - 2006. - Т. 141. - №6. - С. 633-635.
16. Сарычева Ю.А., Токарева А.А., Панфилова Т.В., Железнова А.Д., Штиль А.А., Красиков СИ., Фролов Б.А. Патент на изобретение RU 2698204 С1 от 23.08.2019. Заявка №2019111740 от 17.04.2019.
17. Природный тритерпеноид милиацин возбудительный метотрексатом окислительный стресс и форсирует экспрессию генов Syp 2e1 и глутатионредуктазы в печени / О.В. Калинина [и др.] // Патол. физиол. и экспер. терапия. - 2013а. - №1. - С. 70-74.
18. Калинина О.В., Фролов Б.А., Штиль А.А., Перетолчина НМ., Смирнова З.С.Патент на изобретение RU 2411947 С1 от 27.04.2009. Заявка №2009122188/15 от 09.06.2009.
19. Олифсон, Л.Е. Химическая природа и биологическая активность милиацина /Л.Е. Олифсон, Н.Д. Осадчая, Б.Г. Нузов, [и др.] // Вопросы питания. - 1991. - №2. - С. 57-59.
20. Патент №US-9180135-B2 «Miliacin and sphingolipids and/or phospholipids composition for hair and scalp саге», F. Lamay, I. Lamour, E. Gaillard, 26.04.2013.
21. Семейство патентов EP-2821052-A1 «Combination of miliacin and polar lipids, in particular of sphingolipids and/or phospholipids, for care of the hair and scalp»; F. Lamay, I. Lamour, E. Gaillard, 26.04.2013
22. Патент EP-2821052-B1; ES-2614379-T3 Association of miliacin and polar lipids, specifically sphingolipids and / or phospholipids, for hair and scalp саге» F. Lamay, I. Lamour, E. Gaillard, 26.04.2013
23. Патент Canada №EP-3453381-B1 «Method and use of a composition for improving hair арреагапсе» S. Boudon, P. Kurka, C. Gnacke [et al.], 08.09.2017
24. Yang, G. Transdermal Drug Delivery for Hair Regrowth / G. Yang, G. Chen, Z. Gu // Mol. Pharm. - 2021. - Vol.18. - N2. - P. 483-490.
25. Barry B.W. Skin transport // Dermatological formulations. Ed. Barry B.W. -New York: Marcel&Dekker, 1983. - P. 95-126.
26. Biostimulants in Plant Science: A Global Perspective / O.I. Yakhin [et al.] // Front. Plant. Sci. - 2017. - Vol. 26. - N7. - P. 2049.
27. Pentacyclic Triterpenoids with Nitrogen-Containing Heterocyclic Moiety, Privileged Hybrids in Anticancer Drug Discovery / V. Khwaza [et al.] // Molecules. - 2021. - Vol. 26. - N9. - P. 2401.
28. Lane, ME. Skin penetration enhancers/ ME. Lane // Int. J. Pharm. - 2013. - Vol. 447. - N1-2. - P. 12-21.
29. Upadhyay, K. Development and characterization of phyto-vesicles of β-sitosterol for the treatment of androgenetic alopecia / K. Upadhyay, N.K. Gupta, V.K. Dixit // Arch. Dermatol. Res. - 2012. - Vol. 304. - N7. - P. 511-9.
30. A Systemic Review on Topical Marketed Formulations, Natural Products, and Oral Supplements to Prevent Androgenic Alopecia: A Review / S. Ashique [et al.] // Nat. Prod. Bioprospect. - 2020. - Vol.10. - N6. - P. 345-365.
31. Шенфельд, H. Поверхностно-активные вещества на основе оксида этилена. - М.: Химия, 1982. - 748 с.
32. Som, I. Status of surfactants as penetration enhancers in transdermal drug delivery / I. Som, K. Bhatia, M. Yasir // J. Pharmacy Bioallied Sci. - 2012. - Vol. 4. - N1. - P. 2-9.
33. Задымова H.M., Ямпольская Г.П. Термодинамически устойчивые дисперсные системы // Практикум по коллоидной химии. Ред. Куличихин В.Г. - М.: Вузовский учебник: ИНФРА-М, 2012. Гл. 6. С. 141-172.
34. Akhtar N., Rehman M.U., Khan H.M.S., Rasool F., Saeed Т., Murtaza G. Penetration enhancing effect of polysorbate 20 and 80 on the in vitro percutaneous absorption of L-ascorbic acid // Tropical J. Of Pharmaceutical Research. - 2011. - Vol. 10. - N3. - P. 281-288.
35. Винаров, А.З. Влияние терапии тестостероном (1% трансдермальный гель) на качество жизни мужчин с андрогенодефицитом в условиях рутинной клинической практики: 6-месячное наблюдательное исследование / А.З. Винаров [и др.] // Андрология и генитальная хирургия. - 2016. - Т. 17 - №4. - С. 59-67.
36. Müller-Röver, S. A comprehensive guide for the accurate classification of murine hair follicles in distinct hair cycle stages / S. Muller-Rover [et al.] // J. Invest. Dermatol. - 2001. - Vol. 117. - N1. - P. 3-15.
37. Maurer, M. Intact hair follicle innervation is not essential for anagen induction and development / M. Maurer [et al.] // Arch. Dermatol. Res. - 1998. - Vol. 290. - N10. - P. 574-8.
38. Role for the Epidermal Growth Factor Receptor in Chemotherapy-Induced Alopecia / K.J. Bichsel [et al.] // PLoS ONE. - 2013. - Vol. 8. - N7. - P. e69368.
Claims (2)
1. Способ комплексной коррекции нерубцовой алопеции у мышей в эксперименте, отличающийся тем, что моделируют андрогенную алопецию, при этом в нулевой день эксперимента производят индукцию анагена путем депиляции стержней волос с кожи спины, с первого дня эксперимента на очаг депиляции ежедневно наносят 1% гель тестостерона из расчета 5 мг/кг с последующим нанесением через 30 минут комплекса милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена с полиоксиэтилированным-20-сорбита-олеатом с концентрацией милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена 30 мг/мл в течение 28 суток.
2. Способ комплексной коррекции нерубцовой алопеции у мышей в эксперименте, отличающийся тем, что моделируют алопецию, индуцированную циклофосфамидом, при этом в нулевой день эксперимента производят индукцию анагена путем депиляции стержней волос с кожи спины, с первого дня эксперимента на очаг депиляции ежедневно наносят комплекс милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена с полиоксиэтилированным-20-сорбита-олеатом с концентрацией милиацина - 3-β-метокси-Δ18-олеанена 30 мг/мл в течение 15-33 дней с введением на девятый день эксперимента однократно внутрибрюшинно 125 мг/кг циклофосфамида.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2821779C1 true RU2821779C1 (ru) | 2024-06-26 |
Family
ID=
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU95105982A (ru) * | 1993-05-07 | 1997-02-27 | Л'Ореаль (FR) | Композиция для усиления возобновления роста волос и/или для уменьшения выпадения волос |
| RU2381786C2 (ru) * | 2005-06-24 | 2010-02-20 | Аризона Борд Оф Риджентс Он Бихаф Оф Дзе Юниверсити Оф Аризона | Способ лечения нарушений роста волос, таких как облысение по женскому типу, и применяемые в нем композиции |
| US9180135B2 (en) * | 2013-04-26 | 2015-11-10 | Arco S.A.S. | Miliacin and sphingolipids and/or phospholipids composition for hair and scalp care |
| CN106880693A (zh) * | 2017-03-22 | 2017-06-23 | 广州国草夏方生物科技有限公司 | 一种治疗脂溢性脱发的生发液组合物及其制备方法 |
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU95105982A (ru) * | 1993-05-07 | 1997-02-27 | Л'Ореаль (FR) | Композиция для усиления возобновления роста волос и/или для уменьшения выпадения волос |
| RU2381786C2 (ru) * | 2005-06-24 | 2010-02-20 | Аризона Борд Оф Риджентс Он Бихаф Оф Дзе Юниверсити Оф Аризона | Способ лечения нарушений роста волос, таких как облысение по женскому типу, и применяемые в нем композиции |
| US9180135B2 (en) * | 2013-04-26 | 2015-11-10 | Arco S.A.S. | Miliacin and sphingolipids and/or phospholipids composition for hair and scalp care |
| CN106880693A (zh) * | 2017-03-22 | 2017-06-23 | 广州国草夏方生物科技有限公司 | 一种治疗脂溢性脱发的生发液组合物及其制备方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| LEE E. et al. Millet seed oil activates β-catenin signaling and promotes hair growth. Front Pharmacol. 2023 May 9; 14:1172084. * |
| КАЛИНИНА О.В. и др. Влияние милиацина на противоопухолевую активность метотрексата на модели перевиваемой карциномы легких Льюис. Российский биотерапевтический журнал, 2009, vol. 8, no. 4, с. 45-48. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4563521B2 (ja) | コラーゲン産生促進剤および皮膚外用剤 | |
| EP2001460A2 (en) | Compositions for promoting hair growth | |
| JP2009545587A (ja) | エステル化レシチンを用いたナノリポソーム及びその製造方法、及びこれを含む皮膚疾患の予防又は治療用組成物 | |
| KR20100018119A (ko) | 탈모의 예방, 치료, 또는 육모용 조성물 | |
| TW200306209A (en) | Medicament for curing itching rough skin or sensitive skin and for skin whitening based on reducing production and/or release of stem cell factor | |
| KR101443180B1 (ko) | 신규한 경피흡수용 약물전달체, 그를 이용한 탈모방지 외용제 조성물 및 화장료 | |
| EP2255782A1 (en) | Composition for the prevention or treatment of hair loss, and method of preparation | |
| JP2007262012A (ja) | ヒアルロン酸産生促進剤、並びにそのヒアルロン酸産生促進剤を含む皮膚外用剤、化粧料、医薬部外品、肌荒れ改善剤、及びしわ改善剤 | |
| JPH11500145A (ja) | 毛髪の成長の刺激または促進および／または脱毛を抑制するブラジキニン拮抗薬の使用 | |
| KR20150010691A (ko) | 호의초, 황련, 어성초, 인삼, 작약, 모란, 효모액기스, 하수오를 함유하는 피부 및 두피보호, 탈모방지용 한방 화장료 조성물 및 그 제조방법 | |
| KR101621194B1 (ko) | 마유 포접 리포좀, 그 제조방법 및 이를 포함하는 화상 치료 또는 자외선 차단용 조성물 | |
| ES2311727T3 (es) | Procedimiento de estimulacion del crecimiento del cabello usando benzopiranos. | |
| RU2821779C1 (ru) | Способ комплексной коррекции нерубцовых алопеций в эксперименте | |
| CN113057964A (zh) | 一种动物模型构建方法及其用途 | |
| JP3908953B2 (ja) | 皮膚外用剤及び薬剤 | |
| JP7135106B2 (ja) | 頭皮頭髪用組成物 | |
| JPH10175868A (ja) | 津液改善組成物 | |
| KR20020008268A (ko) | 오배자 추출물을 함유하는 테스토스테론 5알파-리덕타아제저해제 | |
| JP4586178B2 (ja) | 火傷による損傷皮膚改善用外用剤 | |
| JP6656890B2 (ja) | フィラグリン産生促進剤 | |
| RU2813104C1 (ru) | Средство для лечения алопеции на основе четвертичного аммониевого соединения, содержащего фрагмент пиридоксина | |
| US20180318184A1 (en) | Method and composition for inhibiting aged skin | |
| WO2023191015A1 (ja) | コラーゲン産生促進剤、化粧料組成物又は皮膚外用剤、及び経口投与剤 | |
| JP2013144651A (ja) | ケラチン産生促進剤、食品、皮膚外用剤及び育毛剤 | |
| RU2799324C2 (ru) | Экстракт леспедецы головчатой для применения в области ухода за волосами |