RU2817673C2

RU2817673C2 - Модифицированные аналоги GIP пептида

Info

Publication number: RU2817673C2
Application number: RU2021119336A
Authority: RU
Inventors: Александр Говард СПАРРЕ-УЛЬРИХ; Бьорн Бэренс СИВЕРТСЕН; Дитте Рибер; Мэтте Мари РОЗЕНКИЛЬДЕ
Original assignee: Антаг Терапьютикс Апс
Priority date: 2018-12-03
Filing date: 2019-12-03
Publication date: 2024-04-18

Abstract

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии, в частности к новым терапевтическим пептидам и может быть применимо в медицине. Изобретение раскрывает новый пептидный аналог глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (GIP), модифицированный путем включения одного или нескольких отдельных аминокислотных замещений и конъюгированный с жирной кислотой с или без линкера для обеспечения повышенной антагонистической активности и улучшенного фармакокинетического профиля. Изобретение может быть использовано в медицинской практике при профилактике или лечении различных метаболических заболеваний. 3 н. и 12 з.п. ф-лы, 1 ил., 3 табл., 2 пр.

Description

Область, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к пептидным аналогам, являющимся производными глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (GIP), которые являются антагонистами GIP рецептора. Данные аналоги GIP пептида являются модифицированными путем включения одного или нескольких отдельных аминокислотных замещений и являются конъюгированными с жирной кислотой с/без линкера для обеспечения повышенной антагонистической активности и улучшенного фармакокинетического профиля.

Уровень техники

Глюкозозависимый инсулинотропный полипептид (GIP) представляет собой гормон, секретируемый из К-клеток кишечника после приема пищи ¹. Подобно родственному ему гормону глюкагон-подобному пептиду 1 (GLP-1), GIP представляет собой эффективный стимулятор секретирования инсулина ². Было показано, что в отличие от глюкагоностатического эффекта GLP-1 ^{3, 4}, GIP демонстрирует глюкагон-высвобождающие свойства при определенных условиях (^{3, 5-13}). Интерес в плане понимания биологии GIP усилился благодаря связи между GIPR (GIP рецептором) у грызунов и ожирением ^14-21. У человека, несмотря на меньшую явность, существует аналогичное свидетельство роли GIP в плане жирового метаболизма на основе демонстрации экспрессии GIPR в жировой ткани ²², связи между высоким ИМТ и повышенными уровнями GIP ^22,23, усиленного кровотока в жировой ткани и отложений TAG (триацилглицерина) после введения GIP при высоком уровне инсулина и высоком уровне глюкозы ²⁴, пониженных базальных уровней и возникающих после приема пищи уровней GIP, наблюдаемых у детей с ожирением на диете ²⁵, и повышенных уровней GIP натощак, наблюдаемых у здоровых молодых людей на диете с высоким содержанием жиров ²⁶.

Таким образом, помимо общего интереса исследователей, которые наблюдали за прогрессом в плане понимания GLP-1 после открытия антагониста рецептора GLP-1, эксендин(9-39) ^{27, 28}, обладающий потенциалом в качестве средства против ожирения, привлек дополнительное внимание в плане разработки эффективных антагонистов GIPR. Было разработано множество разных стратегий для обеспечения антагонизма функции GIP, например антагонист низкомолекулярного рецептора ²⁹, иммунизация против GIP ^30-32, различные усечения и мутации молекулы GIP с антагонистическими свойствами ^33-39, и недавно - эффективное антитело-антагонист против GIPR ⁴⁰.

При физиологических условиях GIP, представляющий собой гормон с 42 аминокислотами, расщепляется ферментом дипептидилпептидазой 4 (DPP-4), которая обеспечивает расщепление в третьем положении молекулы GIP с образованием GIP3-42. Синтетический GIP3-42 свиньи демонстрировал отсутствие антагонистических свойств у свиней или в рамках перфузированной поджелудочной железы крысы при физиологических концентрациях, в то время как in vitro он выступал антагонистом GIPR человека ⁴¹. Многие пептидные гормоны являются модифицированными посттрансляционным образом, что приводит к образованию различных биологических форм с различной длиной и аминокислотными модификациями ^{42, 43}. Таким образом, было показано, что GIP1-30 образуется в результате посттрансляционной обработки ⁴⁴ и что он представляет собой агонист GIPR ^{33, 45}. Если GIP1-30 секретируется в кровотоку человека, то расщепление, катализируемое DPP-4, будет приводить к образованию GIP1-30.

В патенте США 7,875,587 описаны антагонисты GIP рецептора, полученные на основе GIP(1-42), имеющего повышенную резистентность к расщеплению DPP-4, а также их применение для лечения инсулинорезистентности и ожирения. В заявке WO2004/067548 метаболиты DPP-4 являются модифицированными путем ковалентного связывания фармакофора для достижение более длительного времени полувыведения, связанного с пептидными метаболитами, и для сохранения биологической активности расщепленных пептидов, аналогичной нативным пептидам, включая GIP. В заявке WO2012/055770 описан GIP(3-42) в виде эндогенного метаболита, который быстро расщепляется и обладает эффектами антагониста GIPR, а также GIP(2-30) в качестве примера усеченного аналога GIP с активностью агониста GIPR. В заявке WO1998/24464 описан антагонист GIP(7-30).

В заявке WO 2016/034186 и у Hansen et al. 2016 описаны антагонисты GIP(3-30) и GIP(5-30). Pathak et al. 2015 описывают GIP(3-30), который является модифицированным по С-концу Сех с 9 аминокислотами из эксендина (1-39) и модифицированным по лизиновым остаткам пальмитоилом.

Ряд различных подходов применялся для модифицирования структуры соединений GLP-1 для обеспечения более длительного действия in vivo. Они включают внесение липофильного заместителя в аминокислотный остаток (WO 96/29342 и WO 98/08871) и ацилированные аналоги GLP-1 (WO 00/34331). В WO 02/46227 описаны аналоги GLP-1 и эксендина-4, слитые с альбумином сыворотки человека для увеличения времени полувыведения in vivo.

Сущность изобретения

Авторы идентифицировали GIP пептиды, которые представляют собой антагонисты GIPR, которые включают одно или несколько отдельных замещений, которые приводят к получению GIP пептидов с улучшенными антагонистическими свойствами. GIP пептиды по настоящему изобретению являются ацилированными для повышения времени полувыведения и стабильности in vivo. GIP пептиды по настоящему изобретению также являются усеченными по N-концу по сравнению с нативным GIP(1-42) и, по меньшей мере, не включает первые две аминокислоты в положении 1 и 2 GIP(1-42). Авторы также неожиданно обнаружили, что более длинные GIP пептиды, такие как пептиды, включающие один или несколько GIP(31-42) остатков, или пептиды, включающие один или насколько остатков эксендина-4, присоединенных к С-концу любого из GIP3-30, GIP5-30 и GIP6-30, и которые являются ацилированными, сохраняют или даже демонстрируют улучшенные свойства в плане антагонизма GIPR и/или неожиданно длительное время полувыведения in vivo и/или повышенную селективность. Это делает их потенциально применимыми в рамках ряда терапевтических вариантов использования.

В рамках одного аспекта настоящее изобретение относится к аналогу глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (GIP), состоящему из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: XX:

где X₁ и X₂ независимо представляют собой любую аминокислоту или отсутствуют;

или его функциональному варианту, при этом указанный вариант имеет от 1 до 8, например от 1 до 4 отдельных аминокислотных замещений в любой аминокислоте SEQ ID NO: XX,

при этом указанный пептид модифицирован путем присоединения, по меньшей мере, одной молекулы жирной кислоты в одном или нескольких аминокислотных остатках в положениях от 3 до 29 SEQ ID NO XX или его указанного функционального варианта,

при этом Z представляет собой пептид, включающий один или несколько аминокислотных остатков GIP(31-42) (GKKNDWKHNITQ; SEQ ID NO: Z) или один или несколько аминокислотных остатков эксендина-4

(HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS; SEQ ID NO: Е).

Важным преимуществом указанного выше аспекта, в рамках которого GIP(3-30)/GIP(5-30)/GIP(6-30) и его аналоги удлиняются с помощью аминокислотных остатков из С-терминальной части эксендина-4 или GIP(1-42), например GPSSGAPPPS, PSSGAPPPS или GKKNDW, является то, что время полувыведения in vivo увеличивается неожиданно большим образом по сравнению с соответствующими неудлиненными аналогами. Это может быть особенно выражено, когда удлиненные аналоги GIP являются липидированными в определенных положениях, например в положении 18 для удлиненных аналогов GIP(3-30) и в положении 11 для удлиненных аналогов GIP(5-30).

Другим важным преимуществом указанного выше аспекта, в рамках которого GIP(3-30)/GIP(5-30)/GIP(6-30) и его аналоги удлиняются с помощью аминокислотных остатков из С-терминальной части эксендина-4 или GIP(1-42), например GPSSGAPPPS, PSSGAPPPS или GKKNDW, является то, что антагонистические свойства могут быть улучшены и/или является повышенной селективность в плане агонизма GIP рецептора. Таким образом, когда удлиненные аналоги GIP являются липидированными в определенных положениях, например в положении 18 для удлиненных аналогов GIP(3-30) и в положении 11 для удлиненных аналогов GIP(5-30), может быть достигнут улучшенный антагонистический эффект с одновременным увеличением времени полувыведения до неожиданно высокого уровня.

Другим важным преимуществом указанного выше аспекта, в рамках которого GIP(3-30)/GIP(5-30)/GIP(6-30) и его аналоги удлиняются с помощью аминокислотных остатков из С-терминальной части эксендина-4 или GIP(1-42), например GPSSGAPPPS, PSSGAPPPS или GKKNDW, является то, что повышается селективность в плане активации или ингибирования других GPCR рецепторов-членов семейства В, например GLP-1R и глюкагона-R.

Описание фигур

Фиг. 1: Антагонисты GIP(3-30) с удлинениями на С-конце, например АТ631, демонстрируют неожиданно длительное время Ту2 в виде более чем 30 часов по сравнению с антагонистами GIP(3-30) без удлинения на С-конце, например аналогом АТ158. Выполняли подкожное введение липидированного аналога GIP(3-30)NH₂ АТ158 и липидированного аналога GIP(3-30)Cex(31-39) АТ631 свиньям и собирали образцы крови в указанные моменты времени из катетера на центральной вене. Время полувыведения АТ631 определяли на основе RIA (см. "Материалы и способы") и процентное значение Cmax наносили на график с учетом времени (ч). АТ631 демонстрирует неожиданно более длительное время полувыведения по сравнению с АТ158.

Определения

Термин "аффинность" обозначает силу связывания между рецептором и его лигандом (лигандами). В данном контексте аффинность антагониста пептида в отношении его участка связывания (Ki) будет определять длительность ингибирования активности агониста. Аффинность антагониста может быть определена экспериментальным образом с помощью регрессии Шильда в рамках функциональных исследований или с помощью исследований связывания на основе радиолиганда, таких как 1) эксперименты на основе конкурентного связывания с использованием уравнения Ченга-Прусоф (Cheng-Prusoff), 2) экспериментов на основе насыщения связывания с использованием уравнения Скэтчарда или 3) кинетических исследований с определением скоростей ассоциации и диссоциации (K_on и K_off, соответственно).

Термин "IC50" обозначает половину максимальной ингибиторной концентрации (IC50), которая представляет собой меру эффективности вещества в плане ингибирования определенной биологический или биохимической функции. Данная количественная мера указывает сколько определенного лекарства или другого вещества (например, антагониста) требуется для ингибирования указанного биологического процесса (или компонента процесса, то есть фермента, клетки, клеточного рецептора или микроорганизма) вдвое. Он традиционно применяется в качестве меры эффективности лекарства-антагониста в рамках фармакологических исследований. IC50 показывает концентрацию лекарства, которая требуется для 50% ингибирования in vitro. В данном контексте значение IC50 также может обозначать концентрацию лекарства, при которой 50% рад помеченного лиганда отсоединяется от рецептора, что является характеристикой аффинности лекарства в рамках экспериментов на основе конкурентного связывания.

Термин "агонист" в данном контексте обозначает пептид или его аналог, способный связываться и активировать последующие каскады передачи сигнала от рецептора.

Термин "антагонист" в данном контексте обозначает аналог GIP пептида, как определено здесь, способный связываться или блокировать или снижать агонист-опосредованные ответы рецептора. Антагонисты обычно не вызывают биологического ответа сами по себе при связывании с рецептором. Антагонисты обладают аффинностью, но не имеют эффективности в плане соответствующих им рецепторов, при этом связывание антагониста с его рецептором будет ингибировать функцию агониста или обратного агониста на рецепторах. Антагонисты опосредуют свои эффекты путем связывания с активным (ортостерическим) участком или аллостерическими участками на рецепторах, или они могут взаимодействовать на уникальных участках связывания, которые обычно не участвуют в биологической регуляции активности рецептора. Активность антагониста может являться обратимой или необратимой в зависимости от длины комплекса антагонист-рецептор, которая, в свою очередь, зависит от природы связывания антагонист-рецептор. Большинство лекарств антагонистов обычно достигают своей эффективности благодаря конкурированию с эндогенными лигандами или веществами в структурно выраженных участках связывания на рецепторах. Антагонисты могут являться конкурентными, неконкурентными, не способными конкурировать, тихими антагонистами, частичными агонистами или обратными агонистами.

Конкурентный антагонист (также известный как преодолимый антагонист) обратимым образом связывается с рецепторами в том же участке связывания (то есть активном участке), что и эндогенный лиганд или агонист, но без активации рецептора. Агонисты и антагонисты, таким образом, "конкурируют" за один и тот же участок связывания на рецепторе. При связывании антагонист блокирует связывание агониста. Уровень активности рецептора определяется на основе относительной аффинности каждой молекулы в отношении участка и их относительных концентраций. Высокие концентрации конкурентного антагониста будут повышать долю рецепторов, которые занимает антагонист.

Термин "неконкурентный антагонизм" (также называемый непреодолимым антагонизмом) описывает два различных явления с функционально аналогичными результатами: одно, при котором антагонист связывается с активным участком рецептора, и другое, при котором антагонист связывается с аллостерическим участком рецептора. В отличие от конкурентных антагонистов, которые влияют на количество агониста, необходимое для достижения максимального ответа, но не влияют на степень данного максимального ответа, неконкурентные антагонисты снижают степень максимального ответа, которая может быть достигнута с помощью любого количества агониста.

Термин "тихий антагонист" обозначает конкурентный антагонист рецептора, который не имеет какой-либо свойственной ему активности в плане активации рецептора.

Термин "частичный агонист" обозначает агонист, который в рамках указанного рецептора может отличаться в плане степени функционального ответа, который он вызывает после максимального занятия рецептора. Частичные агонисты могут действовать в качестве конкурентных антагонистов в присутствии полного агониста (или более эффективного агониста), поскольку он конкурирует с полным агонистом за занятие рецептора, тем самым продуцируя общее снижение активации рецептора по сравнению с активацией, наблюдаемой в присутствии только полного агониста.

Термин "обратный агонист" обозначает лиганд, такой как аналог GIP пептида, который способен связываться с тем же участком связывания рецептора, что и агонист, и антагонизировать его эффекты. Более того, обратный агонист также может ингибировать базальную активность основных активных рецепторов.

Термин "антагонисты рецептора глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (GIPR)" в соответствии с используемым здесь значением обозначает соединение, такое как пептид, способное связывать и блокировать или снижать агонист-опосредованные ответы GIPR.

Термин "лицо" обозначает позвоночных, в частности членов класса млекопитающих, предпочтительно приматов, включая человека. В соответствии с используемым здесь значением, термины "субъект" и "лицо" могут использоваться взаимозаменяемым образом.

Термин "выделенный пептид" обозначает пептид, отделенный и/или выделенный из компонента его природной, обычно клеточной, среды, который является по существу свободным от загрязняющих клеточных компонентов, таких как углеводные, липидные или иные белковые загрязнения, связанные с полипептидом в природе. Как правило, получение выделенного пептида включает пептид в высокоочищенной форме, то есть, по меньшей мере, приблизительно на 80% чистого, по меньшей мере, приблизительно на 90% чистого, по меньшей мере, приблизительно на 95% чистого, более чем на 95% чистого, или более чем на 99% чистого. Термин "выделенный" не исключает наличия того же пептида в альтернативных физических формах, таких как димеры, тетрамеры или альтернативным образом гликозилированные или производные формы.

"Аминокислотный остаток" может представлять собой встречающийся в природе или не встречающийся в природе аминокислотный остаток, связанный пептидными связями или связями, отличными от пептидных связей. Аминокислотные остатки могут быть в D-конфигурации или L-конфигурации. Аминокислотный остаток выключает амино-терминальную часть (NH₂) и карбокси-терминальную часть (СООН), разделенные центральной частью, включающей атом углерода, или цепью атомов углерода, при этом, по меньшей мере, один из которых включает, по меньшей мере, одну боковую цепь или функциональную группу. NH₂ обозначает аминогруппу, присутствующую на амино-конце аминокислоты или пептида, а СООН обозначает карбоксигруппу, присутствующую на карбокси-конце аминокислоты или пептида. Общий термин "аминокислота" охватывает как встречающиеся, так и не встречающиеся в природе аминокислоты. Встречающиеся в природе аминокислоты стандартной номенклатуры, перечисленные в J. Biol. Chem., 243:3552-59 (1969) и принятые в рамках 37 C.F.R., section 1.822(b)(2), принадлежат к группе перечисленных здесь аминокислот: Y,G,F,M,A,S,I,L,T,V,P,K,H,Q,E,W,R,D,N и С.Не встречающиеся в природе аминокислоты представляют собой те, которые не обязательно перечислены выше. Кроме того, не встречающиеся в природе аминокислотные остатки включают, но без ограничения, модифицированные аминокислотные остатки, L-аминокислотные остатки и стереоизомеры D-аминокислотных остатков.

Термин "эквивалентный аминокислотный остаток" обозначает аминокислотный остаток, способный замещать другой аминокислотный остаток в полипептиде по существу без изменения структуры и/или функциональности полипептида. Эквивалентные аминокислоты, таким образом, обладают аналогичными свойствами, такими как масса боковых цепей, полярность боковых цепей (полярные или неполярные), гидрофобность (гидрофобные или гидрофильные), рН (кислые, нейтральные или основные) и организация боковых цепей углеродных молекул (ароматические/алифатические). Таким образом, "эквивалентные аминокислотные остатки" могут быть отнесены к "консервативным аминокислотным замещениям", при этом они являются замещением аминокислот, чьи боковые цепи обладают аналогичными биохимическими свойствами и, таким образом, не влияют на функционирование пептида.

Среди обычных аминокислот, например, "консервативное аминокислотное замещение" также может быть проиллюстрировано в виде замещения среди аминокислот в рамках каждой из следующих групп: (1) глицин, аланин, валин, лейцин и изолейцин, (2) фенилаланин, тирозин и триптофан, (3) серии и треонин, (4) аспартат и глутамат, (5) глутамин и аспарагин, и (6) лизин, аргинин и гистидин.

В рамках используемого здесь значения термина "эквивалентное аминокислотное замещение", одна аминокислота может быть замещена другой в рамках одного варианта осуществления в группах аминокислот, указанных ниже:

i) Аминокислоты, имеющие полярные боковые цепи (Asp, Glu, Lys, Arg, His, Asn, Gin, Ser, Thr, Tyr и Cys,)

ii) Аминокислоты, имеющие неполярные боковые цепи (Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Phe, Trp, Pro и Met)

iii) Аминокислоты, имеющие алифатические боковые цепи (Gly, Ala Val, Leu, Ile)

iv) Аминокислоты, имеющие циклические боковые цепи (Phe, Tyr, Trp, His, Pro)

v) Аминокислоты, имеющие ароматические боковые цепи (Phe, Tyr, Trp)

vi) Аминокислоты, имеющие кислотные боковые цепи (Asp, Glu)

vii) Аминокислоты, имеющие основные боковые цепи (Lys, Arg, His)

viii) Аминокислоты, имеющие амидные боковые цепи (Asn, Gin)

ix) Аминокислоты, имеющие гидрокси- боковые цепи (Ser, Thr, Tyr)

x) Аминокислоты, имеющие серосодержащие боковые цепи (Cys, Met),

xi) Нейтральные, слабогидрофобные аминокислоты (Pro, Ala, Gly, Ser, Thr)

xii) Гидрофильные, кислые аминокислоты (Gin, Asn, Glu, Asp), и

xiii) Гидрофобные аминокислоты (Leu, Ile, Val)

Кроме того, сериновый остаток пептида по настоящему изобретению может быть замещен аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Gin, Asn и Thr (все из которых представляют собой аминокислоты с полярными незаряженными боковыми цепями); и независимо от них глициновый остаток (Gly) замещен аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Ala, Val, Leu и Ile; и независимо от них аргининовый остаток (Arg) замещен аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Lys и His (все из которых имеют положительно заряженные боковые цепи); и независимо от них лизиновый остаток (Lys) может быть замещен аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Arg и His; и независимо от них метиониновый остаток (Met) может быть замещен аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Leu, Pro, Ile, Val, Phe, Tyr и Trp (все из которых имеют гидрофобные боковые цепи); и независимо от них глютаминовый остаток (Gin) может быть замещен аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Asp, Glu и Asn; и независимо от них аланиновый остаток (Ala) может быть замещен аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Gly, Val, Leu и Ile.

Если L или D форма (оптические изомеры) не была указана, то следует понимать, что указанная аминокислота имеет встречающуюся в природе L форму, см. Pure & Appl. Chem. Vol.(56(5) pp 595-624 (1984), или D форму, так что образованные пептиды могут состоять из аминокислот L формы, D формы, или последовательности смешанных L форм и D форм.

В соответствии с используемым здесь значением, миметик глютаминовой кислоты (Glu) представляет собой часть с двумя функциональными карбоксигруппами, разделенными тремя атомами углерода. Примеры представляют собой бета-Glu, гамма-Glu или глутаровую кислоту.

"Функциональный вариант" пептида представляет собой пептид, способный осуществлять по существу те же функции, что и пептид, функциональным вариантом которого он является. В частности, функциональный вариант может связываться по существу с теми же молекулами, такими как рецепторы, или осуществлять те же самые опосредуемые рецептором ответы, что и пептид, функциональным вариантом которого он является. Функциональный вариант "аналога глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (GIP)" представляет собой пептид, который может связываться с GIPR и либо активировать, либо ингибировать последующую передачу сигналов GIPR, например продуцирование сАМР. Функциональный вариант антагониста рецептора глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (GIPR) представляет собой пептид, который может связываться с GIPR и ингибировать или снижать агонист-опосредованную передачу сигналов GIPR, например продуцирование сАМР.

"Биоактивный агент" (то есть биологически активное вещество/агент) представляет собой любой агент, лекарство, соединение, композицию или смесь, которая обеспечивает некоторый фармакологический, зачастую являющийся полезным эффект, который может быть продемонстрирован in vivo или in vitro. Данный термин обозначает аналоги GIP пептида, как определено здесь, и включающие их соединения или композиции. В соответствии с используемым здесь значением, данные термин дополнительно включает любое физиологически или фармакологически активное вещество, которое продуцирует локализованный или системный эффект у субъекта.

Термины "лекарство" и "медикамент" в соответствии с используемым здесь значением включают биологически, физиологически или фармакологически активные вещества, которые действуют локально или системно в рамках тела человека или животного.

Термин "лечение" в соответствии с используемым здесь значением обозначает управление и уход за пациентом в целях борьбы с состоянием, заболеванием или расстройством. Данный термин включает полный спектр видов лечения указанного состояния, от которого страдает пациент, и обозначает равным образом лечебную терапию, профилактическую терапию и паллиативную терапию, такую как введение пептида или композиции с целью: облегчения или снижения симптомов или осложнений; отсрочку развития состояния, частичное приостановление клинических проявлений заболевания или расстройства; лечение или устранение состояния, заболевания или расстройства; облегчение или временное облегчение состояния или симптомов и ремиссию (частичную или полную), являющуюся детектируемой или недетектируемой; и/или предотвращение или снижение риска возникновения состояния, заболевания или расстройства, при этом термин "предотвращение" следует понимать как обозначающий управление и уход за пациентом с целью задержки развития состояния, заболевания или расстройства, и включает введение активных соединений для предотвращения или снижения риска развития симптомов или осложнений. В соответствии с используемым здесь значением, термин "облегчение" и его варианты означают, что степень и/или нежелательные проявления физиологического состояния или симптома уменьшаются и/или скорость прогрессирования замедляется или растягивается по сравнению с отсутствием введения композиций по настоящему изобретению.

Подвергаемый лечению субъект предпочтительно представляет собой млекопитающее, в частности человека. Однако здесь также охватывается лечение животных, таких как мыши, крысы, собаки, кошки, коровы, лошади, овцы и свиньи.

Термин "нуждающийся в этом субъект" обозначает субъекта, который может получить пользу от настоящего изобретения. В рамках одного варианта осуществления указанный нуждающийся в этом субъект представляет собой субъекта с заболеванием, при этом указанное заболевание может представлять собой метаболическое заболевание или расстройство, такое как ожирение или диабет, расстройство плотности костей или рак.

Лечение по изобретению может являться профилактическим, паллиативным и/или направленным на устранение заболевания.

"Фармакологически эффективное количество", "фармацевтически эффективное количество" или "физиологически эффективное количество" биоактивного агента представляет собой количество биоактивного агента, присутствующее в фармацевтической композиции, как описано здесь, которое требуется для обеспечения требуемого уровня активного агента в крови или в участке его действия у подвергаемого лечению субъекта (например в легких, ЖКТ, кишечной системе, простате и так далее) для достижения ожидаемого физиологического ответа при введении данной композиции. Биоактивный агент в данном контексте обозначает аналог GIP пептида, как описано здесь.

В соответствии с используемым здесь значением, термин "совместное введение" обозначает введение одного или нескольких аналогов GIP пептида по настоящему изобретению и современной фармацевтической композиции. Указанные, по меньшей мере, два компонента могут быть введена по отдельности, последовательно или одновременно.

Осуществление изобретения

"GIP" обозначает глюкозозависимый инсулинотропный полипептид, также известный как желудочный ингибирующий пептид (или полипептид). В соответствии с используемой здесь аббревиатурой, GIP или hGIP представляет собой GIP человека (инвентарный номер Uniprot Р09681). GIP образуется из пробелка с 153 аминокислотами и циркулирует в виде биологически активного пептида с 42 аминокислотами. Он синтезируется К-клетками слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки и в тощей кишке в желудочно-кишечном тракте.

Термин "GIPR" (или GIP рецептор) обозначает рецепторы желудочного ингибирующего пептида. Данные семимембранные белки располагаются, по меньшей мере, на бета-клетках в поджелудочной железе. В соответствии с используемой здесь аббревиатурой, GIPR или hGIPR представляет собой GIPR человека (инвентарный номер Uniprot Р48546).

Авторы идентифицировали GIP пептиды, которые представляют собой антагонисты GIPR, которые включают одно или несколько отдельных замещений, которые приводят к получению GIP пептидов с улучшенными антагонистическими свойствами. GIP пептиды по настоящему изобретению являются ацилированными для повышения времени полувыведения и стабильности in vivo. Авторы также неожиданно обнаружили, что более длинные GIP пептиды, такие как пептиды, включающие один или несколько GIP(31-42) остатков, или пептиды, включающие один или насколько остатков эксендина-4, присоединенных к С-концу любого из GIP3-30, GIP5-30 и GIP6-30, и которые являются ацилированными, сохраняют свойства в плане антагонизма GIPR. Это делает их потенциально применимыми в рамках ряда терапевтических вариантов использования.

В одном варианте осуществления эксендин-4 представляет собой пептид, имеющий аминокислотную последовательность HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS (SEQ ID NO:).

GIP пептиды

Настоящее изобретение охватывает аналоги GIP пептида, которые включают пептидный фрагмент GIP, включающий одно или несколько отдельных замещений, имеющий неожиданные свойства в плане антагонизма GIPR, и одну или несколько жирных кислот, присоединенных к нему для повышения времени полувыведения указанного пептида, в то же время сохраняя свойства, связанные с антагонизмом GIPR.

Удлиненные аналоги GIP пептида

В рамках одного аспекта настоящее изобретение предусматривает аналог глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (GIP), состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: XX:

где X₁ и Х₂ независимо представляют собой любую аминокислоту или отсутствуют;

или его функциональный вариант, при этом указанный вариант имеет от 1 до 8 отдельных аминокислотных замещений в любой аминокислоте SEQ ID NO: XX, при этом указанный пептид модифицирован путем присоединения, по меньшей мере, одной молекулы жирной кислоты в одном или нескольких аминокислотных остатках в положениях от 3 до 29 SEQ ID NO XX или его указанного функционального варианта,

при этом Z представляет собой пептид, включающий один или несколько аминокислотных остатков GIP(31-42) (GKKNDWKHNITQ; SEQ ID NO: Z) или один или несколько аминокислотных остатков эксендина-4 (HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS; SEQ ID NO: Е).

или его функциональный вариант, при этом указанный вариант имеет от 1 до 4 отдельных аминокислотных замещений в любой аминокислоте SEQ ID NO: XX, при этом указанный пептид модифицирован путем присоединения, по меньшей мере, одной молекулы жирной кислоты в одном или нескольких аминокислотных остатках в положениях от 3 до 29 SEQ ID NO XX или его указанного функционального варианта,

В одном варианте осуществления настоящее изобретение предусматривает аналог глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (GIP), выбранный из группы, состоящей из:

пептида, имеющего аминокислотную последовательность, состоящую из SEQ ID NO: hGIP(3-30):

пептида, имеющего аминокислотную последовательность, состоящую из SEQ ID NO: hGIP(5-30):

и

пептида, имеющего аминокислотную последовательность, состоящую из SEQ ID NO: hGIP(6-30):

или его функционального варианта, при этом указанный вариант имеет от 1 до 4 отдельных аминокислотных замещений в любой из SEQ ID NO: и SEQ ID NO:, при этом указанный пептид модифицирован путем присоединения, по меньшей мере, одной молекулы жирной кислоты в одном или нескольких аминокислотных остатках в положениях от 4 до 29 любой из SEQ ID NO: и SEQ ID NO:, или его функциональный вариант, включающий от 1 до 4 аминокислотных замещений в любого одного из SEQ ID NO: и SEQ ID NO:, с/без линкера

при этом Z представляет собой:

глицин или пролин,

фрагмент, выбранный из группы, состоящей из:

GP, GPS, GPSS, GPSSG, GPSSGA, GPSSGAP, GPSSGAPP, GPSSGAPPP и GPSSGAPPPS,

PS, PSS, PSSG, PSSGA, PSSGAP, PSSGAPP, PSSGAPPP и PSSGAPPPS, фрагмент, выбранный из группы, состоящей из:

GK, GKK, GKKN, GKKND, GKKNDW, GRKNDW, GKRNDW, GRRNDW, GKKNDWK, GKKNDWKH, GKKNDWKHN, GKKNDWKHNI, GKKNDWKHNIT и GKKNDWKHNITQ, или

GPSSGA, G PSSGAP, G PSSGAPP, GPSSGAPPP, GPSSGAPPPS, GKKNDW, GRKNDW, GKRNDW, GRRNDW, GKKNDWK, GKKNDWKH, GKKNDWKHN, GKKNDWKHNI, GKKNDWKHNIT и GKKNDWKHNITQ,

или его варианта, включающего 1 или 2 отдельных аминокислотных замещений в любом одном аминокислотном остатке, или

PSSG, PSSGA, PSSGAP, PSSGAPP, PSSGAPPP, PSSGAPPPS,

или его варианта, включающего 1 или 2 отдельных аминокислотных замещения в любом одном аминокислотном остатке.

Важным преимуществом указанного выше аспекта, в рамках которого GIP антагонисты GIP(3-30)/GIP(4-30)/GIP(5-30)/GIP(6-30) и их аналоги удлиняются с помощью аминокислотных остатков из С-терминальной части эксендина-4 или GIP(1-42), например GPSSGAPPPS, PSSGAPPPS или GKKNDW, является то, что время полувыведения in vivo увеличивается неожиданно большим образом по сравнению с соответствующими неудлиненными аналогами. Это может быть особенно выражено, когда удлиненные аналоги GIP(3-30) являются липидированными в определенных положениях, например в положении 11, 12, 17 и 18 для удлиненных аналогов GIP(3-30), GIP(4-30) GIP(5-30) и GIP(6-30). Таким образом, удлинение на С-конце в виде, например, GPSSGAPPPS, PSSGAPPPS, GKKNDW или их фрагментов, и липидирование в определенных положениях может приводить как к повышенному антагонистическому эффекту, так и в то же время к увеличению времени полувыведения неожиданно большим образом в виде более 5 или 10 часов или даже более 15 или 20 часов по сравнению с соответствующей последовательностью без удлинения на С-конце.

В соответствии с используемым здесь значением, термин "GIP(3-30)" обозначает аналог GIP пептида, состоящий из остатков GIP от 3 до 30, или его функциональный вариант, например SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), и их функциональные варианты. В соответствии с используемым здесь значением, термин "GIP(4-30)" обозначает аналог GIP пептида, состоящий из остатков GIP от 4 до 30, или его функциональный вариант, например SEQ ID NO: GIP(4-30) Х₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), и их функциональные варианты. В соответствии с используемым здесь значением, термин " GIP(5-30)" обозначает аналог GIP пептида, состоящий из остатков GIP от 5 до 30, например SEQ ID NO: GIP(5-30), или его функциональный вариант.В соответствии с используемым здесь значением, термин " GIP(6-30)" обозначает аналог GIP пептида, состоящий из остатков GIP от 6 до 30, например SEQ ID NO: GIP(6-30), или его функциональный вариант.

В одном варианте осуществления указанный пептид является карбоксилированным (-СООН) по С-концу.

Не ограничиваясь какой-либо теорией, свободная С-терминальная карбоновая кислота может быть способна повышать связывание альбумина, таким образом неожиданно еще более увеличивая время полувыведения in vivo.

Другое важное преимущество указанного выше аспекта, при котором антагонисты GIP в соответствии с

SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) и их аналоги удлиняются с помощью аминокислотных остатков из С-терминальной части эксендина-4 или GIP(1-42), например GPSSGAPPPS, PSSGAPPPS или GKKNDW, является то, что антагонистические свойства могут быть улучшены и/или является повышенной селективность в плане агонизма GIP рецептора. Поскольку GIP(3-42) является худшим антагонистом, чем GIP(3-30) [Hansen et al 2016 Br J Pharmacol], не ожидается, что антагонизм АТ631 с С-терминальным удлинением, полученным с помощью эксендина-4, -PSSGAPPPS, будет повышен. Более того, эксендин-4 представляет собой агонист GLP-1, поэтому повышение антагонистических эффектов в отношении GIP путем удлинения аналогов SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂,SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) с помощью аминокислотных остатков на С-терминальной части эксендина-4 является маловероятным.

Другое важное преимущество указанного выше аспекта, при котором антагонисты GIP в соответствии с SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) и их аналоги удлиняются с помощью аминокислотных остатков из С-терминальной части эксендина-4 или GIP(1-42), например GPSSGAPPPS, PSSGAPPPS или GKKNDW, является то, что повышается селективность в плане активации или ингибирования других GPCR рецепторов-членов семейства В, например GLP-1R и глюкагона-R.

В одном варианте осуществления предусмотрены антагонисты GIP в соответствии с SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) и их аналоги, удлиненные с помощью аминокислотных остатков из С-терминальной части эксендина-4 или GIP(1-42), например GPSSGAPPPS, PSSGAPPPS или GKKNDW, и являющиеся карбоксилированными по С-концу.

В одном варианте осуществления предусмотрено, что аналог GIP пептида или его функциональный вариант представляет собой выделенный пептид.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом

аминокислота в положении 5 представляет собой Т или отсутствует;

аминокислота в положении 9 выбрана из D, Е и Т;

аминокислота в положении 11 выбрана из S, K и А;

аминокислота в положении 12 выбрана из I, K и 2-аминоизомасляной кислоты (Aib);

аминокислота в положении 13 выбрана из А и Aib;

аминокислота в положении 14 выбрана из М, K, Е, S, L и Nle;

аминокислота в положении 15 выбрана из D и Е;

аминокислота в положении 16 выбрана из K и R;

аминокислота в положении 17 выбрана из I и K;

аминокислота в положении 18 выбрана из Н и K;

аминокислота в положении 20 выбрана из Q и K;

аминокислота в положении 21 выбрана из D и Е;

аминокислота в положении 24 выбрана из N, K, Q и Е;

аминокислота в положении 28 выбрана из А и Е;

аминокислота в положении 29 выбрана из Q и G; и/или

аминокислота в положении 30 выбрана из K, R, G и А.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом указанный функциональный вариант имеет 1 отдельное аминокислотное замещение, например 2 отдельных аминокислотных замещения, например 3 отдельных аминокислотных замещения, например 4 отдельных аминокислотных замещения в любом аминокислотном остатке SEQ ID NO: XX.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом указанный функциональный вариант имеет 1 отдельное аминокислотное замещение, например 2 отдельных аминокислотных замещения, например 3 отдельных аминокислотных замещения, например 4 отдельных аминокислотных замещения в любом аминокислотном остатке SEQ ID NO: XX, при этом указанные замещения представляют собой консервативные аминокислотные замещения.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом указанный функциональный вариант имеет от 1 до 2 отдельных аминокислотных замещений, например от 2 до 3 отдельных аминокислотных замещений, например от 3 до 4 отдельных аминокислотных замещений, например от 4 до 5 отдельных аминокислотных замещений, например от 5 до 6 отдельных аминокислотных замещений, например от 6 до 7 отдельных аминокислотных замещений, например от 7 до 8 отдельных аминокислотных замещений в любом аминокислотном остатке SEQ ID NO: XX.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом указанный аналог GIP пептида состоит из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: XX, при этом X₁ и Х₂ отсутствуют.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом указанный аналог GIP пептида состоит из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: XX, при этом X₁, Х₂, и аминокислотный остаток в положении 5 отсутствуют.В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом указанный функциональный вариант имеет от 1 до 7 отдельных аминокислотных замещений, например 1 отдельное аминокислотное замещение, например 2 отдельных аминокислотных замещения, например 3 отдельных аминокислотных замещения, например 4 отдельных аминокислотных замещения, например 5 отдельных аминокислотных замещения, например 6 отдельных аминокислотных замещения, например 7 отдельных аминокислотных замещения в любом одном аминокислотном остатке от 3 до 30 SEQ ID NO: XX.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом указанный функциональный вариант имеет от 1 до 2 отдельных аминокислотных замещений, например от 2 до 3 отдельных аминокислотных замещений, например от 3 до 4 отдельных аминокислотных замещений, например от 4 до 5 отдельных аминокислотных замещений, например от 5 до 6 отдельных аминокислотных замещений, например от 6 до 7 отдельных аминокислотных замещений, например от 7 до 8 отдельных аминокислотных замещений в любом одном аминокислотном остатке от 3 до 30 SEQ ID NO: XX.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом указанный функциональный вариант имеет от 1 до 2 отдельных аминокислотных замещений, например от 2 до 3 отдельных аминокислотных замещений, например от 3 до 4 отдельных аминокислотных замещений, например от 4 до 5 отдельных аминокислотных замещений, например от 5 до 6 отдельных аминокислотных замещений, например от 6 до 7 отдельных аминокислотных замещений, например от 7 до 8 отдельных аминокислотных замещений в любом одном аминокислотном остатке 3, 4, 7, 8, 9, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 24, 28, 29 и 30 SEQ ID NO: XX.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом указанный функциональный вариант имеет от 1 до 2 отдельных аминокислотных замещений в любом одном аминокислотном остатке от 4 до 10 SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30).

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом указанный функциональный вариант имеет от 1 до 2, например от 1 до 3, например от 2 до 3 отдельных аминокислотных замещений в любом одном аминокислотном остатке от 19 до 27 SEQ ID NO: XX, например как в любом одном из SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂,SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30).

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом, по меньшей мере, один аминокислотный остаток аналога GIP пептида в соответствии с SEQ ID NO: XX замещен Е.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом, по меньшей мере, один аминокислотный остаток в любом одном положении 9, 14, 15, 21, 24 и 28 замещен Е, предпочтительно, по меньшей мере, один аминокислотный остаток в любом одном положении 9, 15, 21 и 24 SEQ ID NO: XX замещен Е.

Замещение одного или нескольких аминокислотных остатков пептида согласно SEQ ID NO: XX на Е, как определено здесь, является особенно полезным, поскольку оно может приводить к повышенному антагонистическому эффекту, повышенной растворимости и/или повышенной стабильности пептида с замещением.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом X₁ представляет собой аминокислотный остаток, выбранный из группы, состоящей из Е, S, G, V, 2-аминоизомасляной кислоты (Aib), Р, D, γ-глютаминовой кислоты (γGlu), D-γ-глютаминовой кислоты (D-γGlu), β-глютаминовой кислоты (βGlu), pyroE (пироглютаминовой кислоты), глутаровой кислоты.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом X₁ представляет собой Е.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом X₁ представляет собой pyroE (пироглютаминовую кислоту).

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом Е (Glu) в положении 3 (hGIP3-30, SEQ ID NO:), например SEQ ID NO: XX, замещен любой аминокислотой, например аминокислотным остатком, выбранным из группы, состоящей из S, G, V, 2-аминоизомасляной кислоты (Aib), Р, D, γ-глютаминовой кислоты (γGlu), D-γ-глютаминовой кислоты (D-γGlu), β-глютаминовой кислоты (βGlu), pyroE (пироглютаминовой кислоты), глутаровой кислоты. Глутаровая кислота, которая также может обозначаться как пентандиовая кислота, представляет собой дезаминоглютаминовую кислоту, то есть глютаминовую кислоту, где отсутствует аминогруппа. Глутаровая кислота также может обозначаться как миметик глютаминовой кислоты.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом X₁ представляет собой Е или глутаровую кислоту.

Аналоги GIP пептида в соответствии с настоящим изобретением, имеющие Е в положении 3, могут являться очень эффективными антагонистами GIPR. Однако наличие Е в положении 3 может приводить к нестабильности соединений. Не ограничиваясь какой-либо теорией, Е в положении 3 может образовывать pyroGlu путем циклизации между аминогруппой на N-конце и карбоновой кислотой боковой цепи Е. Таким образом, может являться полезным осуществить замещение Е в положении 3. Авторы обнаружили, что аминогруппа на N-конце может являться необязательной для получения эффективных антагонистов.

Может являться полезным заместить Е в положении 3 (то есть первую аминокислоту на N-конце) глутаровой кислотой, поскольку глутаровая кислота не имеет аминогруппы и, таким образом, образование N-терминальной pyroGlu невозможно. Образование pyroGlu может являться нежелательной побочной реакцией глютаминовой кислоты. Замещение глутаровой кислотой в положении 3 также может повышать эффективность. Глутаровая кислота является естественным образом продуцируемой в организме при метаболизме некоторых аминокислот, включая лизин и триптофан.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом Е (Glu) в положении 3 (hGIP3-30, SEQ ID NO:), например любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), замещен S (Ser).

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом Е (Glu) в положении 3 (hGIP3-30, SEQ ID NO:), например любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(30-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), замещен pyroE (пироглутаматом).

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом Е (Glu) в положении 3 (hGIP3-30, SEQ ID NO:), например любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(30-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), замещен P (Pro).

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом Е (Glu) в положении 3 (hGIP3-30, SEQ ID NO:), например любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), замещен G (Gly).

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, как описано здесь, при этом Е (Glu) в положении 3 (hGIP3-30, SEQ ID NO:), например любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: С1Р(3-30)Х₁-Х₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), замещен A (Ala).

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом Х₂ представляет собой аминокислотный остаток, выбранный из группы, состоящей из G и Е.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом D в положении 9 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен любой аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом D в положении 9 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен консервативной аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом D в положении 9 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен аминокислотным остатком, выбранным из группы, состоящей из Е и Т. Преимущество наличия Е в положении 9 заключается в том, что может быть повышена эффективность и/или физическая стабильность, например, растворимость. Е в положении 9 также может предотвращать агонистическую активность.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом S в положении 11 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен любой аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом S в положении 11 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен консервативной аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом S в положении 11 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен аминокислотным остатком, выбранным из группы, состоящей из А, K и Orn.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом S в положении 11 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из A, R, K и Orn.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом S в положении 11 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен K или Orn.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом I в положении 12 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен любой аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом I в положении 12 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен консервативной аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом I в положении 12 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен аминокислотным остатком, выбранным из группы, состоящей из K, Orn и 2-аминоизомасляной кислоты (Aib).

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом А в положении 13 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен любой аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом А в положении 13 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен консервативной аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом А в положении 13 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен 2-аминоизомасляной кислотой (Aib). Преимущества наличия Aib в положении 13 заключается в том, что эффективность может быть заметно увеличена. Кроме того, Aib в положении 13 также может повышать стабильность пептида, например in vivo стабильность или физическую стабильность.

Было отмечено, что замещения любых аминокислотных остатков в положениях 12 и 13 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или их функционального варианта может также повышать стабильность и время полувыведения аналога GIP пептида.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом М в положении 14 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен любой аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом М в положении 14 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен консервативной аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом М в положении 14 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен аминокислотным остатком, выбранным из группы, состоящей из L, норлейцина (Nle), Е, S, K и Orn.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом М в положении 14 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен аминокислотным остатком, выбранным из группы, состоящей из L, норлейцина (Nle) и К. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 14 представляет собой L или Nle. Поскольку М предрасположен к окислению, может являться полезным осуществить его замещение другой аминокислотой, такой как L, Nle или K, например L или Nle.

В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 14 представляет собой L.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом D в положении 15 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен любой аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом D в положении 15 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен консервативной аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом D в положении 15 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30), SEQ ID NO: (GIP6-30) или его функционального варианта замещен Е. Преимущество наличия Е в положении 15 заключается в том, что может быть повышена эффективность и/или физическая стабильность, например, растворимость. Е в положении 15 также может предотвращать агонистическую активность.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом D в положении 9 и/или в положении 15 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен Е.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом K в положении 16 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен любой аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом K в положении 16 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен консервативной аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом K в положении 16 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из R, А и Е.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом K в положении 16 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен R.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом I в положении 17 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен любой аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом I в положении 17 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен консервативной аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом I в положении 17 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен K или Orn.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом Н в положении 18 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен любой аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом Н в положении 18 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен консервативной аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом Н в положении 18 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из A, R, K и Orn.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом Н в положении 18 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен K или Orn.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом S в положении 11 и/или Н в положении 18 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)Xi, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен K.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом Q в положении 20 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен любой аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом Q в положении 20 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен консервативной аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом Q в положении 20 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен K или Orn.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом D в положении 21 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен любой аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом D в положении 21 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен консервативной аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом D в положении 21 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен Е. Преимущество наличия Е в положении 21 заключается в том, что может быть повышена эффективность и/или физическая стабильность, например, растворимость.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом N в положении 24 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен любой аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом N в положении 24 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен консервативной аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом N в положении 24 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен аминокислотой, выбранной из Q, А и Е.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом N в положении 24 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен Е. Преимущество наличия Е в положении 24 заключается в том, что может быть повышена физическая стабильность, например, растворимость. Он может также снижать подверженность агрегации.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом А в положении 28 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен любой аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом А в положении 28 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен консервативной аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом А в положении 28 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен Е.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом Q в положении 29 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен любой аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом Q в положении 29 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен консервативной аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом Q в положении 29 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен G.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом K в положении 30 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен любой аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом K в положении 30 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта замещен консервативной аминокислотой.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом K в положении 30 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: (GIP3-30 X₁-Х₂), SEQ ID NO: (GIP3-30 X₂), SEQ ID NO: (GIP3-30 X₁), SEQ ID NO: (GIP3-30), SEQ ID NO: (GIP4-30 X₂), SEQ ID NO: (GIP4-30), SEQ ID NO: (GIP5-30), SEQ ID NO: (GIP6-30) или его функционального варианта замещен аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из R, А, Е и G, предпочтительно аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из R, А и G.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом все аминокислотные остатки в положениях 9, 15, 21 и 24 по отдельности являются стабилизирующими альфа-спираль аминокислотными остатками, выбранными из группы, состоящей из A, L, Е и K.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом указанный аналог GIP пептида включает, по меньшей мере, одно замещение K и одно замещение Е или Aib в любом одном аминокислотном остатке от 3 до 30 SEQ ID NO: XX, например SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂,SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30).

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом указанный аналог GIP пептида включает, по меньшей мере, одно замещение K и одно замещение Е или Aib в любом одном аминокислотном остатке от 3 до 30 SEQ ID NO: XX, например SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂,SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30), при этом, по меньшей мере, один аминокислотный остаток в любом одном положении 11, 14 и/или 18 замещен K, и при этом, по меньшей мере, один аминокислотный остаток в любом одном положении 9, 15, 21 и/или 24 замещен Е.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида (SEQ ID NO: XX) или его функциональный вариант, при этом

аминокислота в положении 5 представляет собой Т;

аминокислота в положении 6 представляет собой F;

аминокислота в положении 10 представляет собой Y;

аминокислота в положении 22 представляет собой F;

аминокислота в положении 23 представляет собой V;

аминокислота в положении 25 представляет собой W;

аминокислота в положении 23 представляет собой L;

аминокислота в положении 25 представляет собой L;

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида (SEQ ID NO: XX) или его функциональный вариант, при этом аминокислота в положении 5 представляет собой Т.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида (SEQ ID NO: XX) или его функциональный вариант, при этом аминокислота в положении 6 представляет собой F.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида (SEQ ID NO: XX) или его функциональный вариант, при этом аминокислота в положении 7 представляет собой I.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида (SEQ ID NO: XX) или его функциональный вариант, при этом аминокислота в положении 10 представляет собой Y.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида (SEQ ID NO: XX) или его функциональный вариант, при этом аминокислота в положении 22 представляет собой F.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида (SEQ ID NO: XX) или его функциональный вариант, при этом аминокислота в положении 23 представляет собой V.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида (SEQ ID NO: XX) или его функциональный вариант, при этом аминокислота в положении 25 представляет собой W.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида (SEQ ID NO: XX) или его функциональный вариант, при этом аминокислота в положении 26 представляет собой L.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида (SEQ ID NO: XX) или его функциональный вариант, при этом аминокислота в положении 27 представляет собой L.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида (SEQ ID NO: XX) или его функциональный вариант, при этом ни один из аминокислотных остатков в положениях 29 и 30 не представляют собой G.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида (SEQ ID NO: XX) или его функциональный вариант, при этом только один из аминокислотных остатков в положениях 29 и 30 представляет собой G.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида (SEQ ID NO: XX) или его функциональный вариант, при этом все аминокислотные остатки в положениях 29 и 30 по отдельности выбраны из группы, состоящей из Q, Е и K.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида (SEQ ID NO: XX) или его функциональный вариант, при этом аминокислота в положении 29 представляет собой Q.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида (SEQ ID NO: XX) или его функциональный вариант, при этом аминокислота в положении 30 представляет собой К.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида (SEQ ID NO: XX), при этом

аминокислотный остаток в положении 3 представляет собой Е или глутаровую кислоту или отсутствует,

аминокислотный остаток в положении 4 представляет собой G или отсутствует,

аминокислотный остаток в положении 5 представляет собой Т,

аминокислотный остаток в положении 6 представляет собой F,

аминокислотный остаток в положении 7 представляет собой I,

аминокислотный остаток в положении 8 представляет собой S,

аминокислотный остаток в положении 9 представляет собой D или Е,

аминокислотный остаток в положении 10 представляет собой Y,

аминокислотный остаток в положении 11 представляет собой K или S,

аминокислотный остаток в положении 12 представляет собой I или K,

аминокислотный остаток в положении 13 представляет собой А или Aib или K,

аминокислотный остаток в положении 14 представляет собой М, L, Nle или K,

аминокислотный остаток в положении 15 представляет собой D или Е,

аминокислотный остаток в положении 16 представляет собой K,

аминокислотный остаток в положении 17 представляет собой I или K,

аминокислотный остаток в положении 18 представляет собой Н или K,

аминокислотный остаток в положении 19 представляет собой Q,

аминокислотный остаток в положении 20 представляет собой Q,

аминокислотный остаток в положении 21 представляет собой D или Е,

аминокислотный остаток в положении 22 представляет собой F,

аминокислотный остаток в положении 23 представляет собой V,

аминокислотный остаток в положении 24 представляет собой N, A, Q или Е,

аминокислотный остаток в положении 25 представляет собой W,

аминокислотный остаток в положении 26 представляет собой L,

аминокислотный остаток в положении 27 представляет собой L,

аминокислотный остаток в положении 28 представляет собой А, Е или K,

аминокислотный остаток в положении 29 представляет собой Q, G или K, а

аминокислотный остаток в положении 30 представляет собой K или G,

или их функциональный вариант.

аминокислота в положении 3 представляет собой Е или глутаровую кислоту или отсутствует;

аминокислота в положении 4 представляет собой Gly или отсутствует;

аминокислота в положении 9 выбрана из D, Е;

аминокислота в положении 12 выбрана из I и K;

аминокислота в положении 14 выбрана из М, L и Nle;

аминокислота в положении 15 выбрана из D и Е;

аминокислота в положении 16 выбрана из K и R;

аминокислота в положении 17 выбрана из I и K;

аминокислота в положении 18 выбрана из Н и K;

аминокислота в положении 20 выбрана из Q и K;

аминокислота в положении 21 выбрана из D и Е;

аминокислота в положении 24 выбрана из N, Q и Е;

аминокислота в положении 28 выбрана из А и Е;

аминокислота в положении 3 представляет собой Glu или глутаровую кислоту или отсутствует;

аминокислота в положении 4 представляет собой Gly или отсутствует

аминокислота в положении 7 представляет собой I;

аминокислота в положении 9 выбрана из D и Е;

аминокислота в положении 12 выбрана из I и K;

аминокислота в положении 15 выбрана из D и Е;

аминокислота в положении 16 выбрана из K и R;

аминокислота в положении 17 выбрана из I и K;

аминокислота в положении 18 выбрана из Н и K;

аминокислота в положении 20 выбрана из Q и K;

аминокислота в положении 21 выбрана из D и Е;

аминокислота в положении 26 представляет собой L;

аминокислота в положении 27 представляет собой L;

аминокислота в положении 29 представляет собой Q; и/или

аминокислота в положении 30 представляет собой K или R.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение предусматривает аналог GIP пептида, состоящий из SEQ ID NO: (GIP3-30 Х₁-Х₂):

В одном варианте осуществления настоящее изобретение предусматривает аналог GIP пептида, состоящий из SEQ ID NO: (GIP3-30 Х₂):

В одном варианте осуществления настоящее изобретение предусматривает аналог GIP пептида, состоящий из SEQ ID NO: (GIP3-30 Х₁):

В одном варианте осуществления настоящее изобретение предусматривает аналог GIP пептида, состоящий из SEQ ID NO: (GIP3-30):

В одном варианте осуществления настоящее изобретение предусматривает аналог GIP пептида, состоящий из SEQ ID NO: (GIP4-30 Х₂):

В одном варианте осуществления настоящее изобретение предусматривает аналог GIP пептида, состоящий из SEQ ID NO: (GIP4-30):

В одном варианте осуществления настоящее изобретение предусматривает аналог GIP пептида, при этом аминокислотный остаток в положении 4 отсутствует, когда аминокислотный остаток в положении 3 отсутствует.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение предусматривает аналог GIP пептида, состоящий из SEQ ID NO: (GIP5-30):

В одном варианте осуществления настоящее изобретение предусматривает аналог GIP пептида, состоящий из SEQ ID NO: (GIP6-30):

Одно свойство аналога GIP пептида по настоящему изобретению заключает в наличие части, обозначаемой как Z, Z пептид или пептид Z. Как предусмотрено здесь, Z представляет собой пептид, включающий один или несколько аминокислотных остатков GIP(31-42) (GKKNDWKHNITQ; SEQ ID NO: Z) или один или несколько аминокислотных остатков эксендина-4

(HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS; SEQ ID NO: Е). Присутствие Z пептида является преимуществом, поскольку он повышает как время полувыведения, так и антагонистическую эффективность аналога GIP пептида.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения Z состоит из одного или нескольких последовательных аминокислотных остатков GIP(31-42) (SEQ ID NO: Z).

В одном варианте осуществления настоящего изобретения Z состоит из одного или нескольких последовательных аминокислотных остатков С-конца эксендина-4 (30-39) (PSSGAPPPS; SEQ ID NO: CE30-39).

В одном варианте осуществления настоящего изобретения Z состоит из одного или нескольких последовательных аминокислотных остатков С-конца эксендина-4 (29-39) (GPSSGAPPPS; SEQ ID NO: CE29-39).

В одном варианте осуществления настоящего изобретения Z включает, по меньшей мере, один G или Р. Не ограничиваясь какой-либо теорией, считается, что когда Z включает G или Р, например в положении 31 и/или 32, время полувыведения аналога GIP пептида повышается, что может быть связано с пониженным расщеплением на С-конце, что повышает in vivo стабильность аналога GIP пептида.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения Z включает, по меньшей мере, два Р.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения Z представляет собой пептид, выбранный из группы, состоящей из

- глицина или пролина,

- GP, GPS, GPSS, GPSSG, GPSSGA, GPSSGAP, GPSSGAPP, GPSSGAPPP и GPSSGAPPPS,

- PS, PSS, PSSG, PSSGA, PSSGAP, PSSGAPP, PSSGAPPP и PSSGAPPPS,

- GK, GKK, GKKN, GKKND, GKKNDW, GRKNDW, GKRNDW, GRRNDW, GKKNDWK, GKKNDWKH, GKKNDWKHN, GKKNDWKHNI, GKKNDWKHNIT и GKKNDWKHNITQ,

- GPSSGA, GPSSGAP, GPSSGAPP, GPSSGAPPP, GPSSGAPPPS, GKKNDW, GKKKDW, GKKNDK GRKNDW, GKRNDW, GRRNDW, GKKNDWK, GKKNDWKH, GKKNDWKHN, GKKNDWKHNI, GKKNDWKHNIT и GKKNDWKHNITQ, или их варианта, включающего 1 или 2 отдельных аминокислотных замещения любого одного аминокислотного остатка, или

- PSSG, PSSGA, PSSGAP, PSSGAPP, PSSGAPPP и PSSGAPPPS, или их варианта, включающего 1 или 2 отдельных аминокислотных замещения любого одного аминокислотного остатка.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения молекула жирной кислоты не присоединена к аминокислотному остатку в положении 3 SEQ ID NO: XX или его варианту.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты не присоединена к N-терминальной аминогруппе аминокислотного остатка в положении 3 SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁ или SEQ ID NO: GIP(3-30).

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты не присоединена к N-терминальной аминогруппе аминокислотного остатка в положении 4 SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂ или SEQ ID NO: GIP(4-30).

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты не присоединена к N-терминальной аминогруппе аминокислотного остатка в положении 5 SEQ ID NO: GIP(5-30).

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты не присоединена к аминокислотному остатку Z.

В одном варианте осуществления аналог GIP пептида по настоящему изобретению имеет свободный N-конец. Таким образом, N-конец аналога GIP пептида включает аминогруппу (-NH₂), которая не является замещенной, например не является ацетилированной, ацилированной или алкилированной. Таким образом, N-конец аналога GIP пептида может включать свободную аминогруппу (-NH₂).

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к аминокислотному остатку в любом одном из положений от 7 до 29 указанного аналога GIP пептида, например SEQ ID NO: XX. В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к аминокислотному остатку в любом одном из положений от 7 до 29 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или их варианту.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к аминокислотному остатку в любом одном из положений от 6 до 29 указанного аналога GIP пептида, например SEQ ID NO: XX. В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к аминокислотному остатку в любом одном из положений от 6 до 29 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или их варианту.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к аминокислотному остатку в любом одном из положений от 4 до 29 указанного аналога GIP пептида, например SEQ ID NO: XX. В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к аминокислотному остатку в любом одном из положений от 4 до 29 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или их варианту.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к аминокислотному остатку в положении 5, в положении 6, в положении 7, в положении 8, в положении 9, в положении 10, в положении 11, в положении 12, в положении 13, в положении 14, в положении 15, в положении 16, в положении 17, в положении 18, в положении 19, в положении 20, в положении 21, в положении 22, в положении 23, в положении 24, в положении 25, в положении 26, в положении 27, в положении 28, в положении 29 указанного аналога GIP пептида, например SEQ ID NO: XX или его функционального варианта.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к аминокислотному остатку в положении 6, в положении 7, в положении 8, в положении 9, в положении 10, в положении 11, в положении 12, в положении 13, в положении 14, в положении 15, в положении 16, в положении 17, в положении 18, в положении 19, в положении 20, в положении 21, в положении 22, в положении 23, в положении 24, в положении 25, в положении 26, в положении 27, в положении 28 или в положении 29 SEQ ID NO: hGIP(6-30) или его функционального варианта.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к аминокислотному остатку в положении 5, в положении 6, в положении 7, в положении 8, в положении 9, в положении 10, в положении 11, в положении 12, в положении 13, в положении 14, в положении 15, в положении 16, в положении 17, в положении 18, в положении 19, в положении 20, в положении 21, в положении 22, в положении 23, в положении 24, в положении 25, в положении 26, в положении 27, в положении 28 или в положении 29 SEQ ID NO: hGIP(5-30) или его функционального варианта.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к аминокислотному остатку в положении 4, в положении 5, в положении 6, в положении 7, в положении 8, в положении 9, в положении 10, в положении 11, в положении 12, в положении 13, в положении 14, в положении 15, в положении 16, в положении 17, в положении 18, в положении 19, в положении 20, в положении 21, в положении 22, в положении 23, в положении 24, в положении 25, в положении 26, в положении 27, в положении 28 или в положении 29 SEQ ID NO: hGIP(3-30) или его функционального варианта.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к одному или нескольким аминокислотным остаткам в среднем участке любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к одному или нескольким аминокислотным остаткам в любом одном из положений от 11 до 21 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к одному или нескольким аминокислотным остаткам в любом одном из положений 11, 12, 17, 18 и 20 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к одному или нескольким аминокислотным остаткам в любом одном из положений 11, 12, 17, 18 и 20 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта. Присоединение жирной кислоты в любом одном из данных положений может приводить к получению аналога GIP пептида с особенно длительным временем полувыведения, имеющего особо высокую антагонистическую эффективность.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к эпсилон-аминогруппе K остатка или Orn остатка указанного аналога GIP пептида, например любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта, включающего, по меньшей мере, один K или Orn остаток.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к аминогруппе боковой цепи аминокислотного остатка в положении 16 указанного аналога GIP пептида, например любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X2, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к K в положении 16 указанного аналога GIP пептида, например любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к аминогруппе боковой цепи аминокислотного остатка в положении 18 указанного аналога GIP пептида, например любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта, при этом Н в положении 18 замещен K или Orn в указанном аналоге GIP пептида. Присоединение жирной кислоты к аминогруппе боковой цепи аминокислотного остатка в положении 18 может приводить к получению аналога GIP пептида с особенно длительным временем полувыведения, имеющего особо высокую антагонистическую эффективность.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к аминогруппе боковой цепи аминокислотного остатка в положении 11 указанного аналога GIP пептида, например любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта, при этом S в положении 11 замещен K или Orn в указанном аналоге GIP пептида.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к аминогруппе боковой цепи аминокислотного остатка в положении 12 указанного аналога GIP пептида, например любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта, при этом I в положении 12 замещен K или Orn в указанном аналоге GIP пептида.

В одном варианте осуществления, по меньшей мере, одна молекула жирной кислоты присоединена к аминокислотному остатку в положении 11 указанного аналога GIP пептида, например любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к K в положении 11 указанного аналога GIP пептида, например любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта.

В одном варианте осуществления, по меньшей мере, одна молекула жирной кислоты присоединена к аминокислотному остатку в положении 12 указанного аналога GIP пептида, например любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к K в положении 12 указанного аналога GIP пептида, например любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта.

В одном варианте осуществления, по меньшей мере, одна молекула жирной кислоты присоединена к аминокислотному остатку в положении 17 указанного аналога GIP пептида, например любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к K в положении 17 указанного аналога GIP пептида, например любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта.

В одном варианте осуществления, по меньшей мере, одна молекула жирной кислоты присоединена к аминокислотному остатку в положении 18 указанного аналога GIP пептида, например любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к K в положении 18 указанного аналога GIP пептида, например любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) или его функционального варианта.

В одном варианте осуществления, по меньшей мере, одна молекула жирной кислоты присоединена к лизину в положении 18 указанного аналога GIP пептида, например любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30), при этом, по меньшей мере, две аминокислоты в положении 9, 15 и 24 любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: С1Р(3-30)Х1-Хг, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) представляют собой E.

В одном варианте осуществления, по меньшей мере, одна молекула жирной кислоты присоединена к аминокислоте в середине аналога GIP пептида, например в любом одном из положений от 11 до 18, например в положении 11 или 18 аналога GIP пептида.

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом указанный пептид представляет собой аналог любого одного из SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30) и имеет последовательность, выбранную из группы, состоящей из:

при этом указанный пептид модифицирован путем присоединения, по меньшей мере, одной молекулы жирной кислоты в одном или нескольких аминокислотных остатках в положениях от 4 до 29 любой из указанных выше последовательностей, и при этом указанный пептид может являться карбоксилированным по С-концу

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом указанный пептид представляет собой аналог hGIP5-30 (SEQ ID NO: GIP(5-30)) и имеет последовательность, выбранную из группы, состоящей из:

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида или его функциональный вариант, при этом указанный пептид представляет собой аналог hGIP6-30 (SEQ ID NO: GIP(6-30)) и имеет последовательность, выбранную из группы, состоящей из:

В одном варианте осуществления аналог GIP пептида по настоящему изобретению является амидированным (-NH₂) по С-концу.

В одном варианте осуществления аналог GIP пептида по настоящему изобретению является карбоксилированным (-СООН) по С-концу, так что С-конец представляет собой свободную карбоновую кислоту.

Функциональные варианты - мутанты

В одном варианте осуществления один или несколько или все указанные аминокислотные замещения представляют собой консервативные аминокислотные замещения (или синонимичные замещения). Консервативное замещение представляет собой замещение аминокислот, чьи боковые цепи обладают аналогичными биохимическими свойствами и, таким образом, не влияют на функционирование пептида.

Конкретные аминокислотные замещения, как описано здесь, представляют собой K на R, A, G; Е на D, S, Р, G, V, 2-аминоизомасляную кислоту (Aib), γ-глютаминовую кислоту (γGlu), D-γ-глютаминовую кислоту (D-γGlu), β-глютаминовую кислоту (βGlu), pyroE (пироглютаминовую кислоту), глутаровую кислоту; L на М; Q на Е; I на V; I на L, K, Aib; А на S, Aib, Е; Y на W; K на Q; S на Т, K; N на S; М на L, Nle, Е, S, K; Н на K; N, I, S, G на A; N, I, S на Т; D на Е, Т; N на Q, Е; Q на R, K, G; G на Е, Т, K.

В другом варианте осуществления функциональный вариант, как определено здесь, включает последовательности, в рамках которых алкиламинокислота замещена на алкиламинокислоту, ароматическая аминокислота замещена на ароматическую аминокислоту, серосодержащая аминокислота замещена на серосодержащую аминокислоту, гидроксисодержащая аминокислота замещена на гидроксисодержащую аминокислоту, кислая аминокислота замещена на кислую аминокислоту, основная аминокислота замещена на основную аминокислоту, и/или двухосновная монокарбоновая аминокислота замещена на двухосновную монокарбоновую аминокислоту.

Консервативные замещения могут быть введены в любом одном или нескольких из указанных выше положений аналога GIP пептида, выбранного из любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁-X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30), при условии, что полученный вариант сохраняет функциональность. Однако также может являться желательным введение неконсервативных замещений в одном или нескольких положениях (несинонимичные замещения).

Неконсервативное замещение, ведущее к образованию варианта аналога GIP пептида, выбранного из любого одного из SEQ ID NO: XX, SEQ ID NO: GIP(3-30)Х1-Хг, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(3-30)X₁, SEQ ID NO: GIP(3-30), SEQ ID NO: GIP(4-30)X₂, SEQ ID NO: GIP(4-30), SEQ ID NO: GIP(5-30), SEQ ID NO: GIP(6-30) в одном варианте осуществления, охватывает замещение аминокислотных остатков, которые i) значительно отличаются в плане полярности, например остаток с неполярной боковой цепью (Ala, Leu, Pro, Trp, Val, Ile, Leu, Phe или Met), замещенный остатком с полярной боковой цепью, таким как Gly, Ser, Thr, Cys, Tyr, Asn или Gin или заряженной аминокислотой, такой как Asp, Glu, Arg или Lys, или замещение заряженного или полярного остатка неполярным; и/или ii) значительно отличаются в плане их влияния на ориентацию пептидного каркаса, например замещение Pro или Gly другим остатком; и/или iii) значительно отличаются в плане электрического заряда, например замещение отрицательно заряженного остатка, такого как Glu или Asp, на положительно заряженный остаток, такой как Lys, His или Arg (и наоборот); и/или iv) значительно отличаются в плане стерической массы, например замещение крупного остатка, такого как His, Trp, Phe или Tyr, имеющим малую боковую цепь остатком, например Ala, Gly или Ser (и наоборот).

В рамках одного варианта осуществления замещение аминокислот может быть реализовано на основе их значений гидрофобности и гидрофильности, а также относительной схожести заместителей в рамках боковых цепей аминокислот, включая заряд, размер, и так далее.

Аналоги GIP пептида или их функциональные вариантные аналоги, как определено здесь, включают протеиногенные или встречающиеся в природе аминокислоты, то есть 22 аминокислоты, естественным образом встроенные в полипептиды. Из них 20 кодируются общим генетическим кодом, а оставшиеся 2, селеноцистеин (Sec, U) и пирролизин (Pyl, О), встроены в белки с помощью уникальных синтетических механизмов.

В одном варианте осуществления аналог GIP пептида, как определено здесь, включает один или несколько не встречающихся в природе аминокислотных остатков (не встречающихся в природе, непротеиногенных или нестандартных аминокислот) или аминокислотные миметики, такие как глутаровая кислота. Не встречающиеся в природе аминокислоты включают, например, без ограничения, бета-2-нафтил-аланин, транс-3-метилпролин, 2,4-метанопролин, цис-4-гидроксипролин, орнитин (Orn), транс-4-гидроксипролин, N-метилголицин, алло-треонин, метилтреонин, гидроксиэтилцистеин, гидроксиэтилгомоцистеин, нитроглутамин, гомоглутамин, пипеколиновую кислоту, тиазолидинкарбоновую кислоту, дегидропролин, 3- и 4-метилпролин, 3,3-диметилпролин, трет-лейцин, норлейцин (Nle), метоксинин (Мох), норвалин, 2-азафенилаланин, 3-азафенилаланин, 4-азафенилаланин, и 4-фторфенилаланин.

В одном варианте осуществления аминокислота Met замещена устойчивым к окислению аналогом аминокислоты, например норлейцином (Nle) или Leu, который сохраняет длину аминокислотной боковой цепи, являющейся важной в плане гидрофобных взаимодействий, но не ее водородсвязывающие свойства; или метоксинином (Мох), нестандартной аминокислотой, которая больше напоминает Met в плане электронных свойств по сравнению с Nle; или Lys.

Данные стандартные и/или нестандартные аминокислоты могут быть связаны с помощью пептидных связей (для образования линейной пептидной цепи) или с помощью непептидных связей (например через вариабельные боковые цепи аминокислот). Предпочтительно, аминокислоты определенных здесь пептидов связаны пептидными связями.

Термин "пептид" также охватывает посттрансляционные модификации, введенные с помощью химических или катализируемых ферментами реакций, как известно из уровня техники. Они включают ацетилирование, фосфорилирование, метилирование, глюкозилирование, гликирование, амидирование, гидроксилирование, деиминирование, деамидирование, карбамилирование и сульфатирование одного или нескольких аминокислотных остатков, а также протеолитические модификации на основе известных протеиназ, включая лизосомальные катепсины, а также кальпаины, секретазы и матриксные металлопротеиназы.

Кроме того, функциональные эквиваленты пептидов могут включать химические модификации, такие как убиквитинирование, мечение (например радионуклидами, различными ферментами, и так далее), пэгилирование (образование производных с помощью полиэтилен гликоля), или путем вставки (или замещения с помощью химического синтеза) аминокислот, таких как орнитин, что обычно не встречается в белках человека (непротеиногенных).

Могут быть получены стерически аналогичные соединения для имитирования ключевых частей структуры пептидов. Это может быть достигнуто с помощью способов моделирования и химического модифицирования, известных специалистам в данной области. Например, эстерификация и другие виды алкилирования могут использоваться для модифицирования амино-конца, например, каркаса диаргининового пептида, для имитирования структуры тетрапептида. Является очевидным, что все подобные стерически аналогичные конструкты лежат в рамках области, охватываемой настоящим изобретением. Пептиды с N-терминальным и С-терминальным алкилированием и эстерификацией также охватываются настоящим изобретением. Например, глутаровая кислота представляет собой стерически аналогичное соединение, которое имитирует глютаминовую кислоту.

В одном варианте осуществления N-терминальная аминокислота аналогов GIP пептида по настоящему изобретению не имеет каких-либо химических модификаций. Может представлять собой преимущество то, что аминогруппа на N-конце аналога GIP пептида является свободной, то есть незамещенной, поскольку замещение может приводить к агонистическим эффектам в GIPR.

Очевидно, что увеличение длины жирной кислоты или линкера, в случае его наличия, может снижать антагонистическую эффективность. Однако похоже, что одновременное включение Aib остатка в положении 13 частично или полностью компенсирует сниженную эффективность, особенно в комбинации с Е в одном или нескольких положениях 9, 15, 21 и 24, например в комбинации с Е в одном или нескольких положениях 9, 15 и 21.

Присоединение молекул жирных кислот

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединяется к одному или нескольким аминокислотным остаткам, имеющим амино-алкильную группу боковой цепи (-C_nH_2nNH₂).

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединяется к одному или нескольким аминокислотным остаткам, имеющим аминогруппу боковой цепи (NH₂).

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединяется к аминогруппе (NH₂) аминокислотного остатка.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединяется к аминогруппе боковой цепи аминокислотного остатка.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединяется к 5 (дельта) аминогруппе боковой цепи орнитинового остатка (Orn).

В одном варианте осуществления аминокислотный остаток, имеющий присоединенную молекулу жирной кислоты, выбран из группы, состоящей из Lys и Orn.

В одном варианте осуществления аминокислотный остаток, имеющий присоединенную молекулу жирной кислоты, представляет собой Lys.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к дельта-аминогруппе Orn остатка указанного аналога GIP пептида, например SEQ ID NO: XX, или его функционального варианта, включающего Orn аминокислотный остаток.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты присоединена к эпсилон-аминогруппе K остатка указанного аналога GIP пептида, например SEQ ID NO: XX, или его функционального варианта.

В одном варианте осуществления аминокислотный остаток, имеющий присоединенную молекулу жирной кислоты, представляет собой наиболее близкий к N-концу аминокислотный остаток, например наиболее близкий к N-концу аминокислотный остаток указанного аналога GIP пептида, например SEQ ID NO: XX, или его варианта, при этом указанная жирная кислота присоединена к аминогруппе, включенной в боковую цепь N-терминальной аминокислоты.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты в соответствии с настоящим изобретением представляет собой жирную кислоту с прямой цепью.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты в соответствии с настоящим изобретением представляет собой жирную кислоту с разветвленной цепью.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты в соответствии с настоящим изобретением представляет собой моноацильную молекулу жирной кислоты, включающую одну жирную кислоту. Моноацильная молекула жирной кислоты представляет собой молекулу жирной кислоты, включающую только одну карбоксильную группу. Предпочтительно, карбоксильная группа расположена на одном конце молекулы жирной кислоты.

Например, GIP пептид может быть конъюгирован с моноацильной жирной кислотой (такой как гексадеканоил) через линкер, как показано в Формуле I:

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты в соответствии с настоящим изобретением представляет собой диацильную молекулу жирной кислоты. Диацильная молекула жирной кислоты представляет собой молекулу жирной кислоты, включающую две карбоксильные группы. Предпочтительно, одна или обе карбоксильные группы расположена на одном конце или на каждом конце молекулы жирной кислоты.

Например, GIP пептид может быть конъюгирован с диацильной жирной кислотой, также обозначаемой как "диацид" (такой как 15-карбокси-пентадеканоил), через линкер, как показано в Формуле II:

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты в соответствии с настоящим изобретением представляет собой диацильную молекулу жирной кислоты, включающую две жирных кислоты.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты в соответствии с настоящим изобретением представляет собой диацильную молекулу жирной кислоты, содержащую две карбоксильных функциональных группы.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты в соответствии с настоящим изобретением включает ацильную группу формулы СН₃(СН₂)_nCO-, при этом n представляет собой целое число от 4 до 24.

В одном варианте осуществления указанная молекула жирной кислоты включает ацильную группу, выбранную из группы, состоящей из СН₃(СН₂)₆СО-, СН₃(СН₂)₈СО-, СН₃(СН₂)₁₀СО-, CH₃(CH₂)₁₂CO-, СН₃(СН₂)₁₄СО-, CH₃(CH₂)₁₆CO-, CH₃(CH₂)₁₈CO-, СН₃(СН₂)₂₀СО- и СН₃(СН₂)₂₂СО-.

В одном варианте осуществления указанная молекула жирной кислоты представляет собой (моно)ацильную жирную кислоту, выбранную из группы, состоящей из СН₃(СН₂)₁₀СО- (лаурил, С12), CH₃(CH₂)₁₂CO- (миристоил, С14), CH₃(CH₂)₁₄CO- (пальмитоил, С16), CH₃(CH₂)₁₆CO- (стеарил, С18), CH₃(CH₂)₁₈CO-(арахидил, С20) и СН₃(СН₂)₂₀СО- (бегенил, С22).

В одном варианте осуществления указанная молекула жирной кислоты представляет собой (ди)ацильную жирную кислоту, выбранную из группы, состоящей из НООС-СН₃(СН₂)₁₀СО- (додеканоил, С12), HOOC-CH₃(CH₂)₁₂CO- (1-тетрадеканоил, С14), HOOC-CH₃(CH₂)₁₄CO- (гексадеканоил, С16), НООС-СН₃(СН₂)₁₅СО- (15-карбокси- пентадеканоил, С17), НООС-СН₃(СН₂)₁₆СО-(октадеканоил, С18), HOOC-CH₃(CH₂)₁₇CO- (17-карбокси-гептадеканоил, С19), HOOC-CH₃(CH₂)₁₈CO- (эйкозаноил, С20), HOOC-CH₃(CH₂)₁₉CO- (19-карбокси-нонадеканоил, С21) и НООС-СН₃(СН₂)₂₀СО- (бегенил, С22).

В одном варианте осуществления указанная молекула жирной кислоты включает две жирных кислоты, каждая из которых выбрана из группы, состоящей из СН₃(СН₂)₁₀СО- (лаурил, С12), CH₃(CH₂)₁₂CO- (миристоил, С14), CH₃(CH₂)₁₄CO-(пальмитоил, С16), CH₃(CH₂)₁₆CO- (стеарил, С18), CH₃(CH₂)₁₈CO- (арахидил, С20) и СН₃(СН₂)₂₀СО- (бегенил, С22).

В одном варианте осуществления указанная молекула жирной кислоты включает ацильную группу формулы СООН(СН₂)_nCO- (дикарбоновая кислота), при этом n представляет собой целое число от 4 до 24.

В одном варианте осуществления указанная молекула жирной кислоты включает ацильную группу, выбранную из группы, состоящей из COOH(CH₂)₁₄CO- (С16 диацид), СООН(СН₂)₁₆СО- (С18 диацид), COOH(CH₂)₁₈CO- (С20 диацид) и СООН(СН₂)₂₀СО- (С22 диацид).

В одном варианте осуществления указанная молекула жирной кислоты выбрана из С14, С16, С18, С20 и С22.

В одном варианте осуществления указанная молекула жирной кислоты выбрана из С14 диацида, С16 диацида, С18 диацида, С20 диацида и С22 диацида.

В одном варианте осуществления указанная молекула жирной кислоты представляет собой пальмитоил.

В одном варианте осуществления указанная молекула жирной кислоты представляет собой 1,16-гексадекандновую кислоту / гексадекандиовую кислоту.

В одном варианте осуществления указанная молекула жирной кислоты представляет собой 15-карбокси-пентадеканоил.

В одном варианте осуществления указанная молекула жирной кислоты представляет собой стеарил.

В одном варианте осуществления указанная молекула жирной кислоты представляет собой 1,18-октадеканд новую кислоту/ октадекандиовую кислоту.

В одном варианте осуществления указанная молекула жирной кислоты представляет собой 17-карбокси-гептадеканоил.

В одном варианте осуществления указанная молекула жирной кислоты представляет собой арахидил.

В одном варианте осуществления указанная молекула жирной кислоты представляет собой 1,20-эйкозановую кислоту / эйкозановую кислоту.

В одном варианте осуществления указанная молекула жирной кислоты представляет собой 19-карбокси-нонадеканоил.

В одном варианте осуществления указанная молекула жирной кислоты представляет собой бегенил.

В одном варианте осуществления указанная молекула жирной кислоты представляет собой 1,22-докозановую кислоту / докозановую кислоту.

В одном варианте осуществления указанная молекула жирной кислоты включает или состоит из COOH(CH₂)₁₄CO-. В одном варианте осуществления указанная молекула жирной кислоты включает или состоит из СООН(СН₂)₁₆СО-. В одном варианте осуществления указанная молекула жирной кислоты включает или состоит из COOH(CH₂)₁₈CO-.

Молекула жирной кислоты может быть присоединена к аминокислотному остатку напрямую, так что карбоксильная группа молекулы жирной кислоты образует амидную связь с аминогруппой аминокислотного остатка.

Присоединение молекул жирных кислот через линкер

Присоединение молекул жирных кислот к пептиду может осуществляться напрямую или не напрямую, то есть через линкер или спейсер.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты в соответствии с настоящим изобретением присоединена к аминокислотному остатку напрямую.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты в соответствии с настоящим изобретением напрямую присоединена к альфа-аминогруппе аминокислотного остатка, при этом указанный аминокислотный остаток представляет собой N-терминальный аминокислотный остаток.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты в соответствии с настоящим изобретением напрямую присоединена к эпсилон-аминогруппе Lys остатка.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты в соответствии с настоящим изобретением напрямую присоединена к дельта-аминогруппе Orn остатка.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты в соответствии с настоящим изобретением присоединена к аминокислотному остатку через линкер или спейсер, как показано в Формуле III:

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты в соответствии с настоящим изобретением присоединена к эпсилон-аминогруппе Lys остатка через линкер или спейсер.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты в соответствии с настоящим изобретением присоединена к дельта-аминогруппе Orn остатка через линкер или спейсер.

В одном варианте осуществления молекула жирной кислоты может быть присоединена к аминокислотному остатку с помощью спейсера (или линкера), так что аминогруппа линкера образует амидную связь с карбоксильной группой молекулы жирной кислоты.

В одном варианте осуществления линкер представляет собой α, ω-аминокислоту. Примеры подходящих линкеров представляет собой янтарную кислоту, Lys, Glu или Asp, или дипептид, такой как Gly-Lys. Когда линкер представляет собой янтарную кислоту, его одна карбоксильная группа может образовывать амидную связь с аминогруппой аминокислотного остатка, при этом другая его карбоксильная группа может образовывать амидную связь с аминогруппой молекулы жирной кислоты. Когда линкер представляет собой Lys, Glu или Asp, его карбоксильная группа может образовывать амидную связь с аминогруппой аминокислотного остатка, при этом его аминогруппа может образовывать амидную связь с карбоксильной группой молекулы жирной кислоты. Когда в качестве линкера используется Lys, дополнительный линкер может быть в некоторых случаях вставлен между ε-аминогруппой Lys и молекулой жирной кислоты. В одном варианте осуществления подобный дополнительный линкер представляет собой янтарную кислоту, которая образует амидную связь с ε-аминогруппой Lys и с аминогруппой, присутствующей в молекуле жирной кислоты. Другие линкеры представляют собой Nε-(γ-L-глутамил), Nε-(β-L-аспарагил), Nε-глицил, и Nε-(α-(γ-аминобутаноил)).

В одном варианте осуществления линкер включает одну или несколько групп, отдельным образом выбранных из группы, состоящей из:

a. α-аминокислоты, γ-аминокислоты или w-аминокислоты,

b. одной или нескольких аминокислот, выбранных из группы, состоящей из янтарной кислоты, Lys, Glu, Asp,

c. одного или нескольких из γ-аминобутаноила (γ-аминомасляная кислота), γ-Glu (γ-глютаминовая кислота), β-Asp (β-аспарагил), β-Ala (β-аланил) и Gly, и

d. [8-амино-3,6-диоксаоктановая кислота]_n (AEEAc_n), где n представляет собой целое число от 1 до 50, например целое число в диапазоне 1-4, 1-3 или 1-2.

В одном варианте осуществления линкер представляет собой гидрофильный линкер. В одном варианте осуществления линкер представляет не встречающийся в природе аминокислотный гидрофильный линкер.

В одном варианте осуществления линкер выбран из группы, состоящей из γ-аминобутаноила (γ-аминомасляная кислота), γ-глутамила (γ-глютаминовая кислота), β-аспарагила, β-аланила и глицила. В одном варианте осуществления линкер включает один или несколько из γ-аминобутаноила (γ-аминомасляная кислота), γ-глутамила (γ-глютаминовая кислота), β-аспарагила, β-аланила и глицила.

В одном варианте осуществления линкер представляет собой повтор отдельных линкерных групп.В одном варианте осуществления линкер представляет собой повтор идентичных линкерных групп.В одном варианте осуществления линкер представляет собой повтор различных линкерных групп.

В одном варианте осуществления линкер представляет собой γ-глютаминовую кислоту.

В одном варианте осуществления линкер представляет собой γ-глютаминовая кислота-8-амино-3,6-диоксаоктановую кислоту (γ-Glu)-(AEEAc) или ее фрагмент.

В одном варианте осуществления линкер включает один или несколько повторов γ-глютаминовая кислота-8-амино-3,6-диоксаоктановой кислоты (γ-Glu)-(AEEAc_n).

Примеры линкеров здесь являются такими, что они могут быть присоединены к аминокислотному остатку аналога GIP пептида через любой один конец линкера. Таким образом, если, например, линкер включает один или несколько повторов γ-глютаминовая кислота-8-амино-3,6-диоксаоктановой кислоты (γ-Glu)-(AEEAc_n), то указанный линкер может быть присоединен к аминокислотному остатку аналога GIP пептида либо через γ-Glu, либо через AEEAc_n.

В одном варианте осуществления линкер представляет собой [γ-глютаминовая кислота] - [8-амино-3,6-диоксаоктановая кислота]_n (γ-Glu)-(AEEAc_n), при этом n представляет собой целое число от 1 до 50.

В одном варианте осуществления линкер представляет собой [γ-глютаминовая кислота] - [8-амино-3,6-диоксаоктановую кислоту]_n (γ-Glu)-(AEEAc_n), при этом n представляет собой целое число от 1 до 50, например целое число в диапазоне 1-2, 2-3, 3-4, 4-5, 5-6, 6-7, 7-8, 8-9, 9-10, 10-11, 11-12, 12-13, 13-14, 14-15, 15-20, 20-25, 25-30, 30-35, 35-40, 40-45, 45-50.

В одном варианте осуществления линкер представляет собой [γ-глютаминовая кислота] - [8-амино-3,6-диоксаоктановую кислоту]_n (γ-Glu)-(AEEAc_n), при этом n представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49 и 50.

В одном варианте осуществления линкер представляет собой [8-амино-3,6-диоксаоктановую кислоту]_n (AEEAc_n), при этом n представляет собой целое число от 1 до 50, например целое число в диапазоне 1-2, 2-3, 3-4, 4-5, 5-6, 6-7, 7-8, 8-9, 9-10, 10-11, 11-12, 12-13, 13-14, 14-15, 15-20, 20-25, 25-30, 30-35, 35-40, 40-45, 45-50.

В одном варианте осуществления линкер представляет собой [8-амино-3,6-диоксаоктановую кислоту]_n (AEEAc_n), при этом n представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49 и 50.

В одном варианте осуществления линкер представляет собой [8-амино-3,6-диоксаоктановую кислоту]_n AEEAc_n), при этом n представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 1, 2, 3.

В одном варианте осуществления линкер представляет собой [γ-глютаминовая кислота] - [8-амино-3,6-диоксаоктановую кислоту]_n (γ-Glu)-AEEAc_n), при этом n представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 1, 2, 3.

В одном варианте осуществления линкер представляет собой [γ-глютаминовая кислота] - [8-амино-3,6-диоксаоктановую кислоту] (γ-Glu)-AEEAc или [8-амино-3,6-диоксаоктановая кислота] - [γ-глютаминовую кислоту] (АЕЕАс- γ-Glu). Например, GIP пептид может быть конъюгирован с жирной кислотой (например С16 или пальмитиновой кислотой / пальмитоилом в Формуле IV, но также может использоваться любая другая жирная кислота) через [γ-глютаминовая кислота] - [8-амино-3,6-диоксаоктановую кислоту], как показано в Формуле IV:

Формула IV: в рамках формулы не показана стереохимические свойства, как правило используется встречающаяся в природе L-форме, если явно не указано иное.

Например, GIP пептид может быть конъюгирован с жирной кислотой (например С16 или пальмитиновой кислотой / пальмитоилом в Формуле IV, но также может использоваться любая другая жирная кислота) через [8-амино-3,6-диоксаоктановая кислота] - [γ-глютаминовую кислоту], как показано в Формуле V:

Формула V: в рамках формулы не показана стереохимические свойства, как правило используется встречающаяся в природе L-форме, если явно не указано иное.

В одном варианте осуществления линкер представляет собой [γ-глютаминовую кислоту] - [8-амино-3,6-диоксаоктановую кислоту]₂ (γ-GIu)-(AEEAc)₂. Например, линкер может включать или состоять из yGlu-AEEAc-AEEAc- или AEEAc-yGlu-АЕЕАс- или AEEAc-AEEAc-yGlu-.

В одном варианте осуществления линкер представляет собой [γ-глютаминовая кислота] - [8-амино-3,6-диоксаоктановую кислоту]₃ (γ-Glu)-(AEEAc)3. Например, линкер может включать или состоять из yGlu-AEEAc-AEEAc- АЕЕАс- или АЕЕАс-yGlu-AEEAc- АЕЕАс- или AEEAc-AEEAc-yGIu-АЕЕАс- или АЕЕАс-АЕЕАс- АЕЕАс-yGlu-.

Как указано здесь, линкер, включающий или состоящий из одной γ-глютаминовой кислоты и одной, двух или трех частей в виде 8-амино-3,6-диоксаоктановой кислоты, может быть присоединен к аминокислтному остатку аналога GIP пептида либо через γ-Glu, либо через AEEAc_n.

В одном варианте осуществления линкер представляет собой аминокислотный остаток за исключением Cys. В одном варианте осуществления линкер представляет собой 4-Abu. В одном варианте осуществления линкер представляет собой γ-аминомасляную кислоту.

В другом варианте осуществления линкер представляет собой дипептид, например дипептид, где С-терминальный аминокислотный остаток представляет собой Lys, His или Trp, предпочтительно Lys, и где N-терминальный аминокислотный остаток выбран из группы, включающей Ala, Arg, Asp, Asn, Gly, Glu, Gin, Ile, Leu, Val, Phe и Pro. В одном варианте осуществления дипептидный линкер представляет собой Gly-Lys.

В одном варианте осуществления линкер включает одну или несколько частей, выбранных из группы, состоящей из γ-аминобутаноила (γ-аминомасляная кислота), γ-глутамила (γ-глютаминовая кислота), β-аспарагила, β-аланила и глицила. В одном варианте осуществления линкер включает один или несколько из у- аминобутаноила (γ-аминомасляная кислота), γ-глутамила (γ-глютаминовая кислота), β-аспарагила, β-аланила, глицила, γ-глютаминовая кислота-8-амино-3,6- диоксаоктановой кислоты (γ-Glu- АЕЕАс, где n представляет собой целое число от 1 до 50), аминокислотного остатка за исключением Cys, 4-Abu, γ-аминомасляной кислоты идипептида.

В другом варианте осуществления линкер представляет собой неразветвленную группу в виде алкан-α, ω-дикарбоновой кислоты, имеющую от 1 до 7 метиленовых групп, предпочтительно две метиленовые группы, при этом линкер образует мостик между аминогруппой исходного пептида и аминогруппой молекулы жирной кислоты.

В одном варианте осуществления описанный здесь аналог GIP пептида включает жирную кислоту, при этом молекула жирной кислоты присоединена к аминокислотному остатку через линкер, так что комбинация линкера и жирной кислоты выбрана из группы, состоящей из:

i. Гексадеканоил-γ-Glu-

ii. Гексадеканоил-γ-Glu-γ-Glu-

iii. Гексадеканоил-γ-Glu-AEEAc-

iv. Гексадеканоил-γ-Glu-AEEAc-AEEAc-

v. Гексадеканоил-γ-Glu-АЕЕАс-АЕЕАс-АЕЕАс-

vi. [15-карбокси-пентадеканоил]-γ-Clu-

vii. [15-карбокси-пентадеканоил]-γ-Clu-γ-Clu

viii. [15-карбокси-пентадеканоил]-γ-Clu-АЕЕАс-

ix. [15-карбокси-пентадеканоил]-γ-Clu-АЕЕАс-АЕЕАс-

x. [15-карбокси-пентадеканоил]-γ-Clu-АЕЕАс-АЕЕАс-AEEAc-

xi. Октадеканоил-v-Glu-

xii. Октадеканоил-γ-Glu-γ-Glu-

xiii. Октадеканоил-v-Glu-AEEAc-

xiv. Октадеканоил-v-Glu-AEEAc-AEEAc-

xv. Октадеканоил-v-Glu-AEEAc-AEEAc-AEEAc-

xvi. [17-карбокси-гептадеканоил]-γ-Clu-

xvii. [17-карбокси-гептадеканоил]-γ-Clu-γ-Clu-

xviii. [17-карбокси-гептадеканоил]-γ-Clu-АЕЕАс-

xix. [17-карбокси-гептадеканоил]-γ-Clu-АЕЕАс-АЕЕАс-

xx. [17-карбокси-гептадеканоил]-γ-Clu-АЕЕАс-АЕЕАс- AEEAc-

xxi. Эйкозаноил-γ-Glu-

xxii. Эйкозаноил-γ-Glu-γ-Glu-

xxiii. Эйкозаноил-γ-Glu-AEEAc-

xxiv. Эйкозаноил-γ-Glu-AEEAc-AEEAc-

xxv. Эй коза но ил-γ-Glu-AEEAc-AEEAc-AEEAc-

xxvi. [19-карбокси-нонадеканоил]-γ-Clu-

xxvii. [19-карбокси-нонадеканоил]-γ-Clu-γ-Clu-

xxviii. [19-карбокси-нонадеканоил]-γ-Clu-АЕЕАс-

xxix. [19-карбокси-нонадеканоил]-γ-Clu-АЕЕАс-АЕЕАс-

xxx. [19-карбокси-нонадеканоил]-γ-Clu-АЕЕАс-АЕЕАс-AEEAc-

B одном варианте осуществления описанный здесь аналог GIP пептида включает жирную кислоту, при этом молекула жирной кислоты присоединена к аминокислотному остатку через линкер, так что комбинация линкера и жирной кислоты выбрана из группы, состоящей из:

i. [15-карбокси-пентадеканоил-γClu

ii. [17-карбокси-гептадеканоил]-γ-Clu-АЕЕАс-АЕЕАс-, и

iii. [17-карбокси-гептадеканоил]-γClu-γClu

GIP пептиды с жирной кислотой

В одном варианте осуществления аналог GIP, как определено здесь, выбран из группы, состоящей из:

или их функционального варианта,

при этом указанная жирная кислота присоединяется напрямую или через линкер/спейсер, как определено здесь.

Далее С16 представляет собой жирную кислоту CH₃(CH₂)₁₄CO- (пальмитоил), а С18 представляет собой жирную кислоту СН₃(СН₂)₁₆СО- (стеарил). Суффикс "-диацид" означает, что молекула жирной кислоты представляет собой диацильную молекулу жирной кислоты. Такой суффикс не обозначает моноацильную молекулу жирной кислоты.

Далее С20 представляет собой жирную кислоту СН₃(СН₂)₁₈СО- (арахидил). Суффикс "-диацид" означает, что молекула жирной кислоты представляет собой диацильную молекулу жирной кислоты. Такой суффикс не обозначает моноацильную молекулу жирной кислоты.

Далее С22 представляет собой жирную кислоту СН₃(СН₂)₂₀СО- (бегенил). Суффикс "-диацид" означает, что молекула жирной кислоты представляет собой диацильную молекулу жирной кислоты. Такой суффикс не обозначает моноацильную молекулу жирной кислоты.

или их функционального варианта.

В одном варианте осуществления аналог GIP выбран из группы, состоящей из:

или их функционального варианта,

Соединение

В рамках другого аспекта предусмотрено соединение, включающее или состоящее из пептида, как определено здесь. В одном варианте осуществления указанное соединение образовано в виде пептидного мономера (то есть включает 1 копию пептида), в то время как в другом варианте осуществления указанное соединение образовано в виде пептидного мультимера.

Мультимерное соединение

В одном варианте осуществления пептид по настоящему изобретению образован в виде мультимера. Мультимер представляет собой белок, включающий или состоящий из нескольких пептидных мономеров. Мультимер представляет собой агрегат нескольких молекул, которые обычно связываются вместе нековалентными связями. Данное определение отличает мультимер от полимера, которые представляет собой несколько мономеров, которые связаны вместе ковалентными связями.

Последовательность пептида по настоящему изобретению в одном варианте осуществления связана с другой (идентичной или неидентичной) последовательностью пептида по настоящему изобретению химической связью или через линкерную группу. В некоторых вариантах осуществления пептид по изобретению образован в виде олигомера или мультимера мономеров, при этом каждый мономер представляет собой пептидную последовательность, как определено согласно настоящему изобретению.

Таким образом, в соответствии с изобретением, мультимерное соединение в одном варианте осуществления представляет собой полимер, включающий две или более пептидные последовательности по изобретению, при этом указанные пептидные последовательности являются идентичными или неидентичными, при этом, по меньшей мере, одна из данных двух или более пептидных последовательностей представляет собой пептид согласно настоящему изобретению. Предпочтительно, обе пептидные последовательности представляют собой пептид согласно настоящему изобретению.

В одном варианте осуществления мультимерное соединение представляет собой димер, включающий два пептида согласно настоящему изобретению, при этом указанные два пептида являются идентичными или неидентичными относительно друг друга.

В другом варианте осуществления мультимерное соединение представляет собой тример, включающий три пептида согласно настоящему изобретению, при этом указанные пептиды являются идентичными или неидентичными относительно друг друга.

В другом варианте осуществления мультимерное соединение представляет собой тетрамер, включающий четыре пептида согласно настоящему изобретению, при этом указанные пептиды являются идентичными или неидентичными относительно друг друга.

В одном варианте осуществления мультимерное соединение представляет собой дендример, такой как тетрамерный или октамерный дендример. Дендримеры представляют собой множественным образом разветвленные имеющие приблизительно сферическую форму крупные молекулы, обычно являющиеся симметричными в области ядра, и зачастую имеют сферическую трехмерную морфологию.

Дендримеры согласно настоящему изобретению могут включать 4 пептида, 8 пептидов, 16 пептидов или 32 пептида. В одном конкретном варианте осуществления указанный дендример включает четыре пептида (тетрамерный дендример) или восемь пептидов (октамерный дендример).

В некоторых конкретных вариантах осуществления мультимерное соединение включает две идентичные аминокислотные последовательности по настоящему изобретению (димер) или соединение включает четыре идентичные копии аминокислотной последовательности по настоящему изобретению (тетрамерный дендример).

Мультимеры согласно изобретению в одном варианте осуществления образованы путем связывания двух или более пептидных мономеров пептидной связью или через линкерную группу. В одном варианте осуществления они связаны с лизиновым каркасом, например лизиновым остатком (каждая пептидная цепь связана с одним лизиновым остатком), или связаны с полимерным носителем, например белковым носителем. Указанная линкерная группа в одном варианте осуществления включает несколько лизиновых остатков, например центральная часть имеет несколько лизиновых остатков, например как в дендромерной структуре на основе лизина, содержащей три, семь, пятнадцать и более лизиновых остатков. Однако может рассматриваться любое иное связывание пептидных мономеров, известное специалисту в данной области.

Связывание в одном варианте осуществления осуществляется на N-конце и/или С-конце пептидных мономеров.

В одном варианте осуществления предусмотрено мультимерное соединение, состоящее из:

А) Одного или нескольких аналогов глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (GIP), выбранных из группы, состоящей из:

- аналога глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (GIP), состоящего из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: XX:

или его функционального варианта, при этом указанный вариант имеет от 1 до 7, например от 1 до 4 отдельных аминокислотных замещений в любой аминокислоте SEQ ID NO: XX,

при этом Z представляет собой пептид, включающий один или несколько аминокислотных остатков GIP(31-42) (GKKNDWKHNITQ; SEQ ID NO: Z) или один или несколько аминокислотных остатков эксендина-4 (HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS; SEQ ID NO: Е); и

- аналога глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (GIP), выбранного из группы, состоящей из:

и

или его функционального варианта, при этом указанный вариант имеет от 1 до 4 отдельных аминокислотных замещений в любого одного из SEQ ID NO: hGIP(5-30) и SEQ ID NO: hGIP(6-30),

при этом указанный пептид модифицирован путем присоединения, по меньшей мере, одной молекулы жирной кислоты в одном или нескольких аминокислотных остатках в положениях от 4 до 29 любого одного из SEQ ID NO: и SEQ ID NO:, или его функционального варианта, включающего от 1 до 4 аминокислотных замещений в любого одного из SEQ ID NO: hGIP(5-30) и SEQ ID NO: hGIP(6-30), с/без линкера, при этом Z представляет собой:

a. глицин или пролин,

b. фрагмент, выбранный из группы, состоящей из:

GP, GPS, GPSS, GPSSG, G PSSGA, G PSSGAP, GPSSGAPP, GPSSGAPPP и GPSSGAPPPS,

b1. фрагмент, выбранный из группы, состоящей из:

PS, PSS, PSSG, PSSGA, PSSGAP, PSSGAPP, PSSGAPPP и PSSGAPPPS,

c. фрагмент, выбранный из группы, состоящей из:

GK, GKK, GKKN, GKKND, GKKNDW, GRKNDW, GKRNDW, GRRNDW, GKKNDWK, GKKNDWKH, GKKNDWKHN, GKKN DWKHNI, GKKNDWKHNIT и GKKNDWKHNITQ, или

d. фрагмент, выбранный из группы, состоящей из:

GPSSGA, GPSSGAP, GPSSGAPP, GPSSGAPPP, GPSSGAPPPS, GKKNDW, GRKNDW, GKRNDW, GRRNDW, GKKNDWK, GKKNDWKH, GKKNDWKHN, GKKN DWKHNI, GKKNDWKHNIT и GKKNDWKHNITQ, или их варианта, включающего 1 или 2 отдельных аминокислотных замещения в любом одном аминокислотном остатке, или

e. а фрагмент, выбранный из группы, состоящей из:

PSSG, PSSGA, PSSGAP, PSSGAPP, PSSGAPPP и PSSGAPPPS, или их варианта, включающего 1 или 2 отдельных аминокислотных замещения в любом одном аминокислотном остатке;

В) необязательно одной или нескольких линкерных групп.

Определение свойств и аффинности антагонистов

Для определения того, является ли пептид антагонистом GIPR, могут использоваться известные в данной области способы, например определение IC50 пептида. Это может быть осуществлено путем построения кривой доза-эффект и анализа эффекта различных концентраций пептида на обращение активности агониста. Агонист может представлять собой GIP1-42, например hGIP-1-42 или hGIP1-30. GIPR может представлять собой hGIPR, rGIPR, mGIPR, GIPR собаки, GIPR свиньи или GIPR Масаса mulatta. Значения IC50 могут быть вычислены для антагониста путем определения концентрации, требуемой для ингибирования половины максимальной биологической реакции агониста. Способ определения того, является ли пептид антагонистом, описан в Примере 4, однако также могут использоваться и другие способы, известные в данной области. Например, может быть реализован анализ на основе графика Шильда для кривых доза-эффект hGIP1-42 сАМР с повышением концентраций пептидов на основе GIP. С помощью этого также может быть определен тип активности антагониста.

Аналоги GIP пептида по настоящему изобретению характеризуются тем, что они обладают антагонистической активностью в отношении GIPR. В частности, аналоги GIP пептида по настоящему изобретению представляют собой эффективные антагонисты GIPR во многом благодаря наличию жирной кислоты в центральной части GIP пептида (остатки от 3 до 29 GIP), а также наличию удлинения на С-конце GIP пептида.

В одном варианте осуществления аналог GIP пептида по настоящему изобретению представляет собой антагонист GIPR.

В одном варианте осуществления аналог GIP пептида по настоящему изобретению ингибирует, например является способным ингибировать, активность GIPR, по меньшей мере, на 70%, например, по меньшей мере, на 75%, например, по меньшей мере, на 80%, например, по меньшей мере, на 85%, например, по меньшей мере, на 90%, например, по меньшей мере, на 95%, например, по меньшей мере, на 100% при измерении с помощью анализа, обеспечивающего определения снижения внутриклеточного сАМР, например с помощью анализа CisBio сАМР и/или с помощью анализа DiscoveRx сАМР, которые описаны в разделе "Материалы и способы".

В одном варианте осуществления аналог GIP пептида по настоящему изобретению ингибирует активность GIPR, по меньшей мере, на 80%, например, по меньшей мере, на 85%, например, по меньшей мере, на 90%, например, по меньшей мере, на 95%, например, по меньшей мере, на 100%, при этом ингибирование активности GIPR определяется в виде снижения внутриклеточного сАМР, например с помощью анализа CisBio сАМР и/или с помощью анализа DiscoveRx сАМР, которые описаны в разделе "Материалы и способы". % ингибирования представляет собой % ингибирования Emax, что означает, что если пептид ингибирует Emax на 85%, то сохраняется 15% активности GIPR.

В одном варианте осуществления аналог GIP пептида по настоящему изобретению имеет антагонистическую активность GIPR, соответствующую значению IC50 50 нМ или менее, например 45 нМ или менее, например 40 нМ или менее, например 35 нМ или менее, например 30 нМ или менее, например 25 нМ или менее, например 20 нМ или менее, например 15 нМ или менее, например 10 нМ или менее, например 5 нМ или менее, например от 1 до 5 нМ, при этом антагонистическая активность (также обозначаемая как "эффективность") измеряется с помощью анализа, обеспечивающего определение снижения внутриклеточного сАМР, такого как анализ CisBio сАМР, и/или с помощью анализа DiscoveRx сАМР, которые описаны в разделе "Материалы и способы".

Способы определения антагонистической активности соединения, например аналога GIP пептида, известны специалистам в данной области. Примеры способов, которые могут применяться для определения антагонистической активности соединения, например аналога GIP пептида, описаны здесь в разделе "Примеры", при этом данные способы включают измерение внутриклеточного сАМР и определение снижения внутриклеточного сАМР вследствие обработки клеток аналогом GIP пептида.

Аналоги GIP пептида по настоящему изобретению также характеризуются тем, что они обладают низкой агонистической активностью или не обладают агонистической активностью в отношении GIPR. Аналоги GIP пептида, имеющие низкую агонистическую активность или не имеющие агонистической активности в отношении GIPR, например агонистическую активность 20% или менее, предпочтительно 10% или менее, даже более предпочтительно 5% или менее, также обозначаются как "тихие антагонисты".

В одном варианте осуществления аналог GIP пептида по настоящему изобретению способен стимулировать активность GIPR не более чем на 30%, например не более чем на 25%, например не более чем на 20%, например не более чем на 15%, например не более чем на 10%, например не более чем на 5%, при этом в одном варианте осуществления аналог GIP пептида по настоящему изобретению не имеет агонистической активности в отношении GIPR, то есть он стимулирует активность GIPR приблизительно на 0%.

Агонистическая активность аналога GIP пептида в отношении GIPR может быть определена таким же образом, что и антагонистическая активность, однако при этом определяется повышение внутриклеточного сАМР вместо понижения, как описано в разделе "Материалы и способы".

Способ обработки

Также в рамках одного из аспектов предусмотрен пептид, как описано здесь, или композиция, включающая пептид, для применения в качестве лекарства.

В рамках одного варианта осуществления предусмотрен аналог глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (GIP), состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: XX:

или его функциональный вариант, при этом указанный вариант имеет от 1 до 8, например от 1 до 4 отдельных аминокислотных замещений в любой аминокислоте SEQ ID NO: XX,

(HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS; SEQ ID NO: Е) для применения в качестве лекарства.

В одном варианте осуществления аналог GIP выбран из группы, состоящей из: пептида, имеющего аминокислотную последовательность, состоящую из SEQ ID NO: hGIP(3-30):

и

или его функционального варианта, при этом указанный вариант имеет от 1 до 4 отдельных аминокислотных замещений в любом одном аминокислотном остатке SEQ ID NO: hGIP(3-30), SEQ ID NO: hGIP(5-30) и SEQ ID NO: hGIP(6-30), при этом указанный пептид модифицирован путем присоединения, по меньшей мере, одной молекулы жирной кислоты в одном или нескольких аминокислотных остатках в положениях от 6 до 29 любого одного из SEQ ID NO: hGIP(3-30), SEQ ID NO: hGIP(5-30) и SEQ ID NO: hGIP(6-30), или его функционального варианта, включающего от 1 до 4 аминокислотных замещений в любом одном из аминокислотных остатков SEQ ID NO: hGIP(3-30), SEQ ID NO: hGIP(5-30) и SEQ ID NO: hGIP(6-30) с/без линкера,

при этом Z представляет собой:

глицин или пролин,

GP, GPS, GPSS, GPSSG, GPSSGA, GPSSGAP, GPSSGAPP, GPSSGAPPP и GPSSGAPPPS,

GK, GKK, GKKN, GKKND, GKKNDW, GRKNDW, GKRNDW, GRRNDW, GKKNDWK, GKKNDWKH, GKKNDWKHN, GKKNDWKHNI, GKKNDWKHNIT и GKKNDWKHNITQ,

или

GPSSGA, GPSSGAP, GPSSGAPP, GPSSGAPPP, GPSSGAPPPS, GKKNDW, GRKNDW, GKRNDW, GRRNDW, GKKNDWK, GKKNDWKH, GKKNDWKHN, GKKNDWKHNI, GKKNDWKH NIT и GKKNDWKHNITQ,

или их вариант, включающий 1 или 2 отдельных аминокислотных замещения в

любом одном аминокислотном остатке, или

PSSG, PSSGA, PSSGAP, PSSGAPP, PSSGAPPP и PSSGAPPPS,

или их вариант, включающий 1 или 2 отдельных аминокислотных замещения в любом одном аминокислотном остатке,

для применения в качестве лекарства.

при этом Z представляет собой пептид, включающий один или несколько аминокислотных остатков GIP(31-42) (GKKNDWKHNITQ; SEQ ID NO: Z) или один или несколько аминокислотных остатков эксендина-4 (HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS; SEQ ID NO: Е) для применения в рамках способа ингибирования или снижения одного или нескольких из i) индуцированного GIP секретирования глюкагона, ii) индуцированного GIP секретирования инсулина, iii) индуцированного GIP секретирования соматостатина, iv) индуцированного GIP поглощения глюкозы, v) индуцированного GIP синтеза жирных кислот и/или встраивания жирных кислот, vi) высокой или повышенной экспрессии или активности GIPR, vii) высвобождения GIP после приема пищи, viii) сывороточных уровней свободных жирных кислот и/или триглицеридов, ix) индуцированного GIP повышения аппетита, х) индуцированного GIP снижения энергозатрат, xi) индуцированного GIP повышения абсорбции питательных веществ в кишечнике, xii) индуцированного GIP снижения эффекта GLP-1 в плане снижения аппетита, xiii) индуцированной GIP резистентности клептину.

и

при этом Z представляет собой: глицин или пролин,

GP, GPS, GPSS, GPSSG, GPSSGA, GPSSGAP, GPSSGAPP, GPSSGAPPP и GPSSGAPPPS,

PS, PSS, PSSG, PSSGA, PSSGAP, PSSGAPP, PSSGAPPP и PSSGAPPPS,

G PSSGA, G PSSGAP, GPSSGAPP, GPSSGAPPP, GPSSGAPPPS, GKKNDW, GRKNDW, GKRNDW, GRRNDW, GKKNDWK, GKKNDWKH, GKKNDWKHN, GKKNDWKHNI, GKKNDWKHNIT и GKKNDWKHNITQ,

или его вариант, включающий 1 или 2 отдельных аминокислотных замещения в любом одном аминокислотном остатке, или

PSSG, PSSGA, PSSGAP, PSSGAPP, PSSGAPPP и PSSGAPPPS,

или его вариант, включающий 1 или 2 отдельных аминокислотных замещения в любом одном аминокислотном остатке,

для применения в рамках способа ингибирования или снижения одного или нескольких из i) индуцированного GIP секретирования глюкагона, ii) индуцированного GIP секретирования инсулина, iii) индуцированного GIP секретирования соматостатина, iv) индуцированного GIP поглощения глюкозы, v) индуцированного GIP синтеза жирных кислот и/или встраивания жирных кислот, vi) высокой или повышенной экспрессии или активности GIPR, vii) высвобождения GIP после приема пищи, viii) сывороточных уровней свободных жирных кислот и/или триглицеридов, ix) индуцированного GIP снижения резорбции костей.

при этом Z представляет собой пептид, включающий один или несколько аминокислотных остатков GIP(31-42) (GKKNDWKHNITQ; SEQ ID NO: Z) или один или несколько аминокислотных остатков эксендина-4 (HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS; SEQ ID NO: Е), для применения в рамках способа лечения состояния, выбранного из группы, состоящей из метаболического синдрома, ожирения, преддиабета, диабета I типа, диабета 2 типа, резистентности к инсулину, повышенного уровня глюкозы натощак, гипергликемии, повышенного уровня триглицеридов в сыворотке крови натощак, низкого уровня липопротеинов очень низкой плотности (VLDL), низкого уровня липопротеинов высокой плотности (HDL), дислипидемии, повышенных/пониженных липопротеинов низкой плотности (LDL),высокого уровня холестерина, аномального отложения липидов, сердечно-сосудистого заболевания, повышенного артериального давления и атеросклероза.

и

или его функционального варианта, при этом указанный вариант имеет от 1 до 4 отдельных аминокислотных замещений в любом одном аминокислотном остатке SEQ ID NO: hGIP(3-30), SEQ ID NO: hGIP(5-30) и SEQ ID NO: hGIP(6-30), при этом указанный пептид модифицирован путем присоединения, по меньшей мере, одной молекулы жирной кислоты в одном или нескольких аминокислотных остатках в положениях от 6 до 29 любого одного из SEQ ID NO: hGIP(3-30), SEQ ID NO: hGIP(5-30) и SEQ ID NO: hGIP(6-30), или его функционального варианта, включающего от 1 до 4 аминокислотных замещений в любом одном из аминокислотных остатков SEQ ID NO: hGIP(3-30), SEQ ID NO: hGIP(5-30) и SEQ ID NO: hGIP(6-30) с/без линкера, при этом Z представляет собой: глицин или пролин,

GP, GPS, GPSS, GPSSG, GPSSGA, GPSSGAP, GPSSGAPP, GPSSGAPPP и GPSSGAPPPS,

PS, PSS, PSSG, PSSGA, PSSGAP, PSSGAPP, PSSGAPPP и PSSGAPPPS,

GK, GKK, GKKN, GKKND, GKKNDW, GRKNDW, GKRNDW, GRRNDW, GKKNDWK, GKKNDWKH, GKKNDWKHN, GKKN DWKHNI, GKKNDWKHNIT и GKKNDWKHNITQ,

или

GPSSGA, GPSSGAP, GPSSGAPP, GPSSGAPPP, GPSSGAPPPS, GKKNDW, GRKNDW, GKRNDW, GRRNDW, GKKNDWK, GKKNDWKH, GKKNDWKHN, GKKNDWKHN1, GKKNDWKHNIT и GKKNDWKHNITQ,

PSSG, PSSGA, PSSGAP, PSSGAPP, PSSGAPPP и PSSGAPPPS,

для применения в рамках способа лечения состояния, выбранного из группы, состоящей из метаболического синдрома, ожирения, лишнего веса, связанного с ожирением расстройства, преддиабета, диабета I типа, диабета 2 типа, связанного с диабетом заболевания, резистентности к инсулину, повышенного уровня глюкозы натощак, гипергликемии, повышенного уровня триглицеридов в сыворотке крови натощак, низкого уровня липопротеинов очень низкой плотности (VLDL), низкого уровня липопротеинов высокой плотности (HDL), дислипидемии, повышенных/пониженных липопротеинов низкой плотности (LDL), высоких уровней холестерина, аномального отложения липидов, сердечно-сосудистого заболевания, повышенного артериального давления и атеросклероза.

при этом Z представляет собой пептид, включающий один или несколько аминокислотных остатков GIP(31-42) (GKKNDWKHNITQ; SEQ ID NO: Z) или один или несколько аминокислотных остатков эксендина-4 (HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS; SEQ ID NO: Е), для применения в рамках способа индуцирования потери веса.

и

GP, GPS, GPSS, GPSSG, GPSSGA, GPSSGAP, GPSSGAPP, GPSSGAPPP и GPSSGAPPPS,

GPSSGA, GPSSGAP, GPSSGAPP, GPSSGAPPP, GPSSGAPPPS, GKKNDW, GRKNDW, GKRNDW, GRRNDW, GKKNDWK, GKKNDWKH, GKKNDWKHN, GKKNDWKHNl, GKKNDWKHNIT и GKKNDWKHNITQ,

PSSG, PSSGA, PSSGAP, PSSGAPP, PSSGAPPP и PSSGAPPPS,

для применения в рамках способа индуцирования потери веса.

при этом Z представляет собой пептид, включающий один или несколько аминокислотных остатков GIP(31-42) (GKKNDWKHNITQ; SEQ ID NO: Z) или один или несколько аминокислотных остатков эксендина-4 (HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS; SEQ ID NO: Е), для применения при производстве лекарства для

лечения состояния, выбранного из группы, состоящей из метаболического синдрома, ожирения, лишнего веса, связанного с ожирением расстройства, преддиабета, диабета I типа, диабета 2 типа, связанного с диабетом заболевания, резистентности к инсулину, повышенного уровня глюкозы натощак, гипергликемии, повышенного уровня триглицеридов в сыворотке крови натощак, низкого уровня липопротеинов очень низкой плотности (VLDL), низкого уровня липопротеинов высокой плотности (HDL), дислипидемии, повышенных/пониженных липопротеинов низкой плотности (LDL), высоких уровней холестерина, аномального отложения липидов, сердечно-сосудистого заболевания, повышенного артериального давления и атеросклероза, или

- индуцирования потери веса, или

лечения рака, включая, но без ограничения, рак толстой кишки, нейроэндокринный раки аденому надпочечника.

и

или его функционального варианта, при этом указанный вариант имеет от 1 до 4 отдельных аминокислотных замещений в любом одном аминокислотном остатке SEQ ID NO: hGIP(3-30), SEQ ID NO: hGIP(5-30) и SEQ ID NO: hGIP(6-30), при этом указанный пептид модифицирован путем присоединения, по меньшей мере, одной молекулы жирной кислоты в одном или нескольких аминокислотных остатках в положениях от 6 до 29 любого одного из SEQ ID NO: hGIP(3-30), SEQ ID NO: hGIP(5-30) и SEQ ID NO: hGIP(6-30), или его функционального варианта, включающего от 1 до 4 аминокислотных замещений в любом одном из аминокислотных остатков SEQ ID NO: hGIP(3-30), SEQ ID NO: hGIP(5-30) и SEQ ID NO: hGIP(6-30) с/без линкера, при этом Z представляет собой: глицин или пролин, фрагмент, выбранный из группы, состоящей из:

GP, GPS, GPSS, GPSSG, GPSSGA, GPSSGAP, GPSSGAPP, GPSSGAPPP и GPSSGAPPPS,

GPSSGA, GPSSGAP, GPSSGAPP, GPSSGAPPP, GPSSGAPPPS, GKKNDW, GRKNDW, GKRNDW, GRRNDW, GKKNDWK, GKKNDWKH, GKKNDWKHN, GKKNDWKHNI, GKKNDWKHNIT и GKKNDWKHNITQ,

PSSG, PSSGA, PSSGAP, PSSGAPP, PSSGAPPP и PSSGAPPPS,

для применения при производстве лекарства для

- лечения состояния, выбранного из группы, состоящей из метаболического синдрома, ожирения, лишнего веса, связанного с ожирением расстройства, преддиабета, диабета I типа, диабета 2 типа, связанного с диабетом заболевания, резистентности к инсулину, повышенного уровня глюкозы натощак, гипергликемии, повышенного уровня триглицеридов в сыворотке крови натощак, низкого уровня липопротеинов очень низкой плотности (VLDL), низкого уровня липопротеинов высокой плотности (HDL), дислипидемии, повышенных/пониженных липопротеинов низкой плотности (LDL), высоких уровней холестерина, аномального отложения липидов, сердечно-сосудистого заболевания, повышенного артериального давления и атеросклероза, или

- индуцирования потери веса, или

- лечения рака, включая, но без ограничения, рак толстой кишки, нейроэндокринный раки аденому надпочечника.

В одном конкретном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида, как определено здесь, для применения в рамках способа лечения сахарного диабета, включая сахарный диабет типа I и типа II.

В одном конкретном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида, как определено здесь, для применения в рамках способа лечения инсулинорезистентности.

В рамках дополнительного аспекта предусмотрен аналог GIP пептида, как определено здесь, для применения в рамках способа лечения рака.

Связанные с ожирением расстройства могут представлять собой любое из следующих расстройств: повышенное потребление пищи, повышенный аппетит, переедание, bulimia nervosa, вызванное приемом антипсихотических препаратов или стероидов ожирение, сниженная/повышенная перистальтика желудка, замедленное/повышенное опорожнение желудка, снижение физической подвижности, остеоартрит, дислипидемия, повышение/понижение липопротеинов низкой плотности (LDL), высокий уровень холестерина, и аномальное отложение липидов.

В некоторых вариантах осуществления дислипидемия, повышение/понижение липопротеинов низкой плотности (LDL), холестерина, и аномальное отложение липидов обозначаются как расстройства, связанные с метаболизмом жирных кислот.

Связанные с диабетом расстройства могут представлять собой любое из следующих расстройств: нарушение толерантности к глюкозе (IGT), прогрессирование от IGT к диабету 2 типа, прогрессирование инсулинонезависимого диабета 2 типа в инсулинозависимый диабет 2 типа, снижение функции бета-клеток, снижение массы бета-клеток, усиление апоптоза бета-клеток, снижение чувствительности глюкозы к бета-клеткам.

Сердечно-сосудистое заболевание может представлять собой любое заболевание из ишемической болезни сердца, инфаркта миокарда, реперфузионной травмы, инсульта, церебральной ишемии, гипертрофии левого желудочка, ишемической болезни сердца, гипертонии, эссенциальной гипертензии, острой гипертонической болезни, кардиомиопатии, сердечной недостаточности, непереносимости физических упражнений, острой и/или хронической сердечной недостаточности, аритмии, сердечной аритмии, синкопии стенокардии, коронарного шунтирования и/или повторной окклюзии стента, перемежающейся хромоты (также называемой облитерирующим атеросклерозом), диастолической дисфункции и систолической дисфункции, и их комбинации.

В одном варианте осуществления рак выбран из группы, состоящей из рака толстой кишки, нейроэндокринного рака и аденомы надпочечника.

В рамках дополнительного аспекта предусмотрен аналог GIP пептида, как определено здесь, для применения в рамках способа лечения расстройства плотности костей (или расстройства объема костей).

В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида, как определено здесь, для применения в рамках способа ингибирования активности костных клеток. В одном варианте осуществления предусмотрен аналог GIP пептида, как определено здесь, для применения в рамках способа ингибирования (или антагонизирования) индуцированного GIP снижения резорбции костей после приема пищи. В одном варианте осуществления предусмотрен пептид, как определено здесь, для применения в рамках способа лечения рака костей.

В одном варианте осуществления расстройство плотности (или объема) костей выбрано из группы, состоящей из остеопороза, характеризуемых низкой плотностью костей и/или сниженным объемом костей расстройств, характеризуемых высокой плотностью костей и/или повышенным объемом костей и остеопорозом расстройств.

В рамках дополнительного аспекта предусмотрен аналог GIP пептида, как определено здесь, для применения в рамках способа описания или анализа аспектов заболевания, и/или описания или анализа аспектов физиологии человека, связанных с расстройством, при этом указанное расстройство в одном варианте осуществления выбрано из метаболического синдрома, ожирения, сахарного диабета, инсулинорезистентности, связанных с ожирением расстройств, как определено здесь, или связанных с диабетом расстройств, как определено здесь. В других аспектах изобретение относится к способам лечения рака, такого как рак толстой кишки или аденома надпочечника. В других аспектах изобретение относится к способам лечения расстройства плотности костей, характеризующегося высокой плотностью костей и/или повышенным объемом костей или остеопорозом. В других аспектах изобретение относится к способам лечения атеросклероза.

Также предусмотрен способ лечения метаболического синдрома, ожирения, избыточного веса, сахарного диабета, инсулинорезистентности, связанного с ожирением расстройства, как определено здесь, или связанного с диабетом расстройства, как определено здесь; рака, такого как рак толстой кишки или аденома надпочечника; расстройства плотности костей, такого как расстройства плотности костей, характеризуемые высокой плотностью костей и/или повышенным объемом костей; или атеросклероза; при этом указанный способ включает этап введения нуждающемуся в этом субъекту эффективного количества пептида, как определено здесь.

Нуждающийся в этом субъект, в соответствии с используемым здесь значением, представляет собой субъект, который может получить пользу от введения пептида или фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению. Такой субъект может страдать от метаболического синдрома, и/или от метаболического расстройства, такого как ожирение, лишний вес, диабет, инсулинорезистентность, связанное с ожирением расстройство, как определено здесь, или связанное с диабетом расстройство, как определено здесь, рак, такой как рак толстой кишки или аденома надпочечника, расстройство плотности костей, или иметь риск их возникновения. Субъект может представлять собой любого человека, мужчину или женщину, ребенка, быть среднего возраста или пожилым. Подвергаемое лечению или предотвращению расстройство у субъекта может быть связано с возрастом субъекта, общим состоянием здоровья субъекта, используемыми для лечения субъекта лекарствами и наличием или отсутствием у субъекта истории заболеваний или расстройств, которые могли вызывать или вызвали метаболический синдром, и/или метаболическим расстройством, таким как ожирение, лишний вес, диабет, инсулинорезистентность, связанное с ожирением расстройство, как определено здесь, или связанное с диабетом расстройство, как определено здесь, раком, таким как рак толстой кишки или аденома надпочечника, атеросклерозом, расстройством плотности костей. В некоторых вариантах осуществления подвергаемое лечению расстройство связано с индуцированной GIP секрецией глюкагона, индуцированной GIP секрецией инсулина, индуцированной GIP секрецией соматостатина, индуцированным GIP поглощением глюкозы, индуцированным GIP синтезом жирных кислот и/или встраиванием жирных кислот, высокой экспрессией и/или активностью GIPR, с высвобождением GIP после приема пищи; при этом термин "высокий" следует понимать в качестве обозначающего уровни, превышающие соответствующие уровни, наблюдаемые у субъектов, не требующих лечения.

Способы получения (пептид)

Пептиды согласно настоящему изобретению могут быть получены с помощью любых способов, известных в данной области. Таким образом, пептиды на основе GIP могут быть получены с помощью стандартных способов получения пептидов, таких как синтез на основе растворов или твердофазный синтез Меррифилда.

В одном варианте осуществления пептид, как определено здесь, представляет собой не встречающийся в природе пептид, полученный из встречающегося в природе нативного GIP, например GIP(1-42).

В одном варианте осуществления пептид согласно настоящему изобретению очищен от его встречающегося в природе источника, например сыворотки. Очистка белка представляет собой последовательность процессов, предназначенных для выделения белка одного типа из сложной смеси. Исходный материал обычно представляет собой биологическую ткань. Различные этапы процесса очистки могут обеспечивать высвобождение белка из матрикса, в котором он заключен, выделение белка и небелковых частей из смеси, и наконец отделение требуемого белка от других белков. Этапы выделения могут быть В одном варианте осуществления пептид согласно изобретению создают или получают синтетическим способом.

Способы синтетического получения пептидов хорошо известны в данной области. Подробное описание, а также практическое руководство по получению синтетических пептидов приведено в Synthetic Peptides: A User's Guide (Advances in Molecular Biology), Grant G. A. ed., Oxford University Press, 2002 или в Pharmaceutical Formulation: Development of Peptides and Proteins, Frokjaer and Hovgaard eds., Taylor and Francis, 1999.

В одном варианте осуществления пептид или пептидные последовательности по изобретению получены синтетически, в частности с помощью способа синтеза пептидов на основе последовательностей (Sequence Assisted Peptide Synthesis, SAPS), с помощью синтеза на основе растворения, с помощью твердофазного синтеза пептидов (Solid-phase peptide synthesis, SPPS), например твердофазного синтеза Меррифилда, с помощью рекомбинантных способов (получения с помощью клеток-хозяев, включающих первую последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующей пептид, являющуюся функционально связанной со второй нуклеиновой кислотой, способной направлять экспрессию в указанных клетках-хозяевах) или ферментативного синтеза. Они хорошо известны специалистам в данной области.

Пептиды могут быть синтезированы в виде партий на полностью автоматизированном синтезаторе пептидов с применением 9-фторенилметилоксикарбонила (Fmoc) или трет-бутилоксикарбонила (Boc) в виде защитной N-a-аминогруппы и подходящих стандартных защитных групп для функций боковых цепей.

После очистки, например с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ, пептиды могут быть дополнительно обработаны для получения, например, циклических или С- или N-терминальных модифицированных изоформ. Способы циклизации и терминальной модификации хорошо известны в данной области.

Пептиды согласно изобретению могут быть синтезированы в виде мономеров или мультимеров, например димеров или тетрамеров.

Фармацевтическая композиция и состав

В то время как является возможным ввести биоактивный агент по настоящему изобретению в виде исходного химического вещества (пептида), иногда является предпочтительным презентировать их в форме фармацевтического состава Подобный фармацевтический состав может быть обозначен как фармацевтическая композиция, фармацевтически приемлемая композиция или фармацевтически безопасная композиция.

Соответственно, далее описана фармацевтическая композиция, которая включает биоактивный агент по настоящему изобретению, или его фармацевтически приемлемую соль или сложный эфир, и фармацевтически приемлемый носитель, наполнитель и/или разбавитель. Фармацевтические составы могут быть получены с помощью стандартных способов, например как описано в Remington: The Science and Practice of Pharmacy 2005, Lippincott, Williams & Wilkins.

Фармацевтически приемлемые соли настоящих пептидных соединений в случае возможности их получения также входят в объем настоящего изобретения. Данные соли будут являться приемлемыми в плане их фармацевтического применения. Под этим подразумевается, что соль будет сохранять биологическую активность исходного соединения и что соль не будет обладать нежелательными или вредными эффектами в плане ее использования и применения при лечении заболеваний.

Фармацевтически приемлемые соли получают с помощью стандартных способов. Если исходное соединение представляет собой основание, то его обрабатывают большим количеством органической или неорганической кислоты в подходящем растворителе. Если исходное соединение представляет собой кислоту, то ее обрабатывают неорганическим или органическим основанием в подходящем растворителе.

Пептидные соединения, как описано здесь, могут быть введены в форме щелочного металла или соли щелочноземельного металла совместно, одновременно или вместе с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем, особенно и предпочтительно в форме их фармацевтической композиции, орально, ректально или парентерально (включая подкожно) в эффективном количестве.

Примеры фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей для применения в рамках фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению включают соли на основе минеральных кислот, например соляной, бромистоводородной, фосфорной, метафосфорной, азотной и серной кислоты, органических кислот, например винной, уксусной, лимонной, яблочной, молочной, фумаровой, бензойной, гликолевой, глюконовой, янтарной, п-толуолсульфоновой кислоты и, например, арилсульфоновой кислоты.

В конкретном варианте осуществления пептид согласно изобретению образован в виде ацетатной соли, HCl (гидрохлоридной) соли или TFA (трифторацетатной) соли.

Введение и дозировка

В соответствии с настоящим изобретением, пептид или композиция, включающая пептид, как определено здесь, вводится нуждающимся в лечении субъектам в фармацевтически эффективных дозах или терапевтически эффективном количестве. Требования по дозировке будут варьироваться в зависимости от конкретной используемой лекарственной композиции, способа введения и конкретного подвергаемого лечению субъекта, что зависит от тяжести и характера заболевания, а также массы тела и общего состояния субъекта. Специалистам в данной области также будет очевидно, что оптимальное количество и разбивка отдельных доз пептидного соединения будет определена на основе природы и тяжести подвергаемого лечению состояния, формы, способа и места введения, а также конкретного подвергаемого лечению пациента, и что подобные условия могут быть определены с помощью стандартных способов. Также специалистам в данной области будет очевидно, что оптимальный курс лечения, то есть количество доз соединения, вводимых в течение дня в течение определенного количества дней, может быть определено с помощью стандартных тестов для определения курса лечения.

В одном варианте осуществления биоактивный агент вводят, по меньшей мере, один раз ежедневно, например один раз ежедневно, например дважды ежедневно, например трижды ежедневно, например четыре раза ежедневно, например пять раз ежедневно.

Доза также может вводиться с перемежающимися интервалами или интервалами, при которых доза не вводится каждый день. Вместо этого одна или более доз могут быть введены в каждый второй день, каждый третий день, каждый четвертый день, каждый пятый день, каждый шестой день, каждую неделю, каждую вторую неделю, каждую третью неделю, каждую четвертую неделю, каждую пятую неделю, каждую шестую неделю или с интервалами в рамках данных диапазонов (например каждые от 2 до 4 недель или от 4 до 6 недель).

В одном варианте осуществления доза вводится один раз каждую неделю, например один раз еженедельно, например в виде одной дозы в неделю.

Способы введения

Очевидно, что предпочтительный способ введения будет зависеть от общего состояния и возраста подвергаемого лечению субъекта, природы подвергаемого лечению состояния, локализации подвергаемой лечению ткани в организме и выбранного активного ингредиента.

Системное лечение

Для системного лечения в соответствии с настоящим изобретением способ введения обеспечивает введение биоактивного агента в кровоток для достижения участков, в которых требуется его действие.

Подобные способы введения представляют собой любые подходящие способы, например энтеральный способ (включая оральное, ректальное, назальное, пульмональное, буккальное, подязычное, чрескожное, цистернальное и внутрибрюшинное введение) и/или парентеральный способ (включая подкожное, внутримышечное, интратекальное, интрацеребральное, внутривенное и внутрикожное введение).

Парентеральное введение

Парентеральное введение представляет собой любой способ введения, отличный от орального/энтерального способа, при котором лекарство избегает расщепления в печени при первом прохождении. Соответственно, парентеральное введение включает любые инъекции и инфузии, например болюсную инъекцию или непрерывную инфузию, например внутривенное введение, внутримышечное введение или подкожное введение. Более того, парентеральное введение включает ингаляции и местное введение.

Соответственно, биоактивный агент может быть введен местным образом для преодоления любой слизистой мембраны животного, которому вводят биологически активное вещество, например в нос, влагалище, глаз, рот, генитальный тракт, легкие, желудочно-кишечный тракт, или кишечник, предпочтительно слизистую оболочку носа или рта, и, соответственно, парентеральное введение может также включать буккальное, подъязычное, назальное, ректальное, вагинальное и внутрибрюшинное введение, а также пульмональное и бронхиальное введение с помощью ингаляции или инсталляции. Кроме того, агент может быть введен местным образом для преодоления кожи.

В соответствии с основным вариантом осуществления изобретения, аналог GIP вводят подкожно.

Местное лечение

Биоактивный агент согласно изобретению может в одном варианте осуществления применяться в качестве местного лечения, то есть вводиться напрямую в участок (участки) действия. Соответственно, биоактивный агент может наноситься на кожу или слизистую оболочку напрямую, или биоактивный агент может быть инъецирован в участок действия, например в подвергнутую заболеванию ткань или в концевую артерию, ведущую напрямую к подвергнутой заболеванию ткани. Данные формы введения предпочтительно не затрагивают гематоэнцефалический барьер мозга.

Набор

Настоящее изобретение также относится к набору, включающему один или несколько описанных выше биоактивных агентов и, по меньшей мере, один дополнительный компонент, например один или несколько вторых активных ингредиентов.

Ссылки

1. Baggio LL, Drucker DJ. Biology of Incretins: GLP-1 and GIP. Gastroenterology 2007;132(6):2131-2157.

2. Hoist JJ. On the Physiology of GIP and GLP-1. Horm Metab Res 2004;36(11/12):747-754.

3. Heer J, Rasmussen C, Coy DH, Hoist JJ. Glucagon-like peptide-1, but not glucose-dependent insulinotropic peptide, inhibits glucagon secretion via somatostatin (receptor subtype 2) in the perfused rat pancreas. Diabetologia 2008;51(12):2263-2270.

4. Gutniak M, Orskov C, Hoist JJ, Ahren B, Efendic S. Antidiabetogenic Effect of Glucagon-like Peptide-1 (7-36)amide in Normal Subjects and Patients with Diabetes Mellitus. N Engl J Med 1992;326(20):1316-1322.

5. Christensen M, Vedtofte L, Hoist JJ, Vilsboell T, Knop FK. Glucose-Dependent Insulinotropic Polypeptide: A Bifunctional Glucose-Dependent Regulator of Glucagon and Insulin Secretion in Humans. Diabetes 2011;60(12):3103-3109.

6. Pederson R, Brown J. Interaction of Gastric Inhibitory Polypeptide, Glucose, and Arginine on Insulin and Glucagon Secretion from the Perfused Rat Pancreas. Endocrinology 1978;103(2):610-615.

7. Adrian ТЕ, Bloom SR, Hermansen K, Iversen J. Pancreatic polypeptide, glucagon and insulin secretion from the isolated perfused canine pancreas. Diabetologia 1978;14(6):413-417.

8. Brunicardi FC, Druck P, Seymour NE, Sun YS, Elahi D, Andersen DK. Selective neurohormonal interactions in islet cell secretion in the isolated perfused human pancreas. Journal of Surgical Research 1990;48(4):273-278.

9. Dupre J, Caussignac Y, McDonald TJ, Van VIlet S. Stimulation of Glucagon Secretion by Gastric Inhibitory Polypeptide in Patients with Hepatic Cirrhosis and Hyperglucagonemia. The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism 1991;72(1):125-129.

10. Ding WG, Renstrom E, Rorsman P, Buschard K, Gromada J. Glucagon-like peptide I and glucose-dependent insulinotropic polypeptide stimulate Ca2+-induced secretion in rat alpha-cells by a protein kinase A-mediated mechanism. Diabetes 1997;46(5):792-800.

11. Meier JJ, Gallwitz B, Siepmann N et al. Gastric inhibitory polypeptide (GIP) dose-dependently stimulates glucagon secretion in healthy human subjects at euglycaemia. Diabetologia 2003;46(6):798-801.

12. Christensen MB, Calanna S, Hoist JJ, Vilsboell T, Knop FK. Glucose-dependent Insulinotropic Polypeptide: Blood Glucose Stabilizing Effects in Patients With Type 2 Diabetes. The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism 2013;99(3):E418-E426.

13. Christensen M, Calanna S, Sparre-Ulrich AH et al. Glucose-Dependent Insulinotropic Polypeptide Augments Glucagon Responses to Hypoglycemia in Type 1 Diabetes. Diabetes 2014.

14. Song DH, Getty-Kaushik L, Tseng E, Simon J, Corkey BE, Wolfe MM. Glucose-Dependent Insulinotropic Polypeptide Enhances Adipocyte Development and Glucose Uptake in Part Through Akt Activation. Gastroenterology 2007; 133(6): 1796-1805.

15. Miyawaki K, Yamada Y, Ban N et al. Inhibition of gastric inhibitory polypeptide signaling prevents obesity. Nat Med 2002;8(7):738-742.

16. Starich GH, Bar RS, Mazzaferri EL. GIP increases insulin receptor affinity and cellular sensitivity in adipocytes. Am J Physiol 1985;249(6 Pt 1):E603-E607.

17. Getty-Kaushik L, Song DH, Boylan MO, Corkey BE, Wolfe MM. Glucose-Dependent Insulinotropic Polypeptide Modulates Adipocyte Lipolysis and Reesterification. Obesity 2006; 14(7): 1124-1131.

18. Hauner H, Glatting G, Kaminska D, Pfeiffer EF. Effects of gastric inhibitory polypeptide on glucose and lipid metabolism of isolated rat adipocytes. Ann Nutr Metab 1988;32(5-6):282-288.

19. Kim SJ, Nian C, Karunakaran S, Clee SM, Isales CM, Mcintosh CHS. GIP-Ove rex pressing Mice Demonstrate Reduced Diet-Induced Obesity and Steatosis, and Improved Glucose Homeostasis. PLoS ONE 2012;7(7):e40156.

20. Nasteska D, Harada N, Suzuki K et al. Chronic Reduction of GIP Secretion Alleviates Obesity and Insulin Resistance Under High-Fat Diet Conditions. Diabetes 2014;63(7):2332-2343.

21. Miyawaki K, Yamada Y, Yano H et al. Glucose intolerance caused by a defect in the entero-insular axis: A study in gastric inhibitory polypeptide receptor knockout mice. Proceedings of the National Academy of Sciences 1999;96(26): 14843-14847.

22. Ahlqvist E, Osmark P, Kuulasmaa T et al. Link Between GIP and Osteopontin in Adipose Tissue and Insulin Resistance. Diabetes 2013;62(6):2088-2094.

23. Calanna S, Christensen M, Hoist JJ et al. Secretion of Glucose-Dependent Insulinotropic Polypeptide in Patients With Type 2 Diabetes: Systematic review and meta-analysis of clinical studies. Diabetes Care 2013;36(10):3346-3352.

24. Asmar M, Simonsen L, Madsbad S, Stallknecht B, Hoist JJ, Biilow J. Glucose-Dependent Insulinotropic Polypeptide May Enhance Fatty Acid Re-esterification in Subcutaneous Abdominal Adipose Tissue in Lean Humans. Diabetes 2010;59(9):2160-2163.

25. Deschamps I, Heptner W, Desjeux JF, Baltakse V, Machinot S, Lestradet H. Effects of diet on insulin and gastric inhibitory polypeptide levels in obese children. Pediatr Res 1980;14(4 Pt 1):300-303.

26. Br0ns C, Jensen CB, Storgaard H et al. Impact of short-term high-fat feeding on glucose and insulin metabolism in young healthy men. The Journal of Physiology 2009;587(10):2387-2397.

27. Raufman JP, Singh L, Eng J. Exendin-3, a novel peptide from Heloderma horridum venom, interacts with vasoactive intestinal peptide receptors and a newly described receptor on dispersed acini from guinea pig pancreas. Description of exendin-3(9-39) amide, a specific exendin receptor antagonist. Journal of Biological Chemistry 1991;266(5):2897-2902.

28. J0rgensen NB, Dirksen C, Bojsen-Moller KN et al. Exaggerated Glucagon-Like Peptide 1 Response Is Important for Improved (3-Cell Function and Glucose Tolerance After Roux-en-Y Gastric Bypass in Patients With Type 2 Diabetes. Diabetes 2013;62(9):3044-3052.

29. Nakamura T, Tanimoto H, Mizuno Y, Tsubamoto Y, Noda H. Biological and functional characteristics of a novel lowGComolecular weight antagonist of glucose-dependent insulinotropic polypeptide receptor, SKL-14959, in vitro and in vivo. Diabetes, Obesity and Metabolism 2012;14(6):511-517.

30. Ebert R, lllmer K, Creutzfeldt W. Release of gastric inhibitory polypeptide (GIP) by intraduodenal acidification in rats and humans and abolishment of the incretin effect of acid by GIP-antiserum in rats. Gastroenterology 1979;76(3):515-523.

31. Fulurija A, Lutz ТА, Sladko K et al. Vaccination against GIP for the Treatment of Obesity. PLoS ONE 2008;3(9):e3163.

32. Irwin N, McClean PL, Patterson S, Hunter K, Flatt PR. Active immunisation against gastric inhibitory polypeptide (GIP) improves blood glucose control in an animal model of obesity-diabetes. Biological Chemistry, bchm 390, 75. 2009. 16-7-2014.

33. Hinke SA, Manhart S, Pamir N et al. Identification of a bioactive domain in the amino-terminus of glucose-dependent insulinotropic polypeptide (GIP). Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Protein Structure and Molecular Enzymology 2001; 1547(1): 143-155.

34. Tseng CC, Kieffer TJ, Jarboe LA, Usdin ТВ, Wolfe MM. Postprandial stimulation of insulin release by glucose-dependent insulinotropic polypeptide (GIP). Effect of a specific glucose-dependent insulinotropic polypeptide receptor antagonist in the rat. J Clin Invest 1996;98(11):2440-2445.

35. Irwin N, Green BD, Parker JC, Gault VA, O'Harte FPM, Flatt PR. Biological activity and antidiabetic potential of synthetic fragment peptides of glucose-dependent insulinotropic polypeptide, GIP(1-16) and (Pro3)GIP(1-16). Regulatory Peptides 2006; 135(1 GC62):45-53.

36. Kerr BD, Flatt AJS, Flatt PR, Gault VA. Characterization and biological actions of N-terminal truncated forms of glucose-dependent insulinotropic polypeptide. Biochemical and Biophysical Research Communications 2011;404(3):870-876.

37. Gelling RW, Coy DH, Pederson RA et al. GIP(6-30amide) contains the high affinity binding region of GIP and is a potent inhibitor of GIP1-42 action in vitro. Regulatory Peptides 1997;69(3):151-154.

38. Deacon CFP. GIP-(3-42) does not antagonize insulinotropic effects of GIP at physiological concentrations. American Journal of Physiology - Endocrinology and Metabolism 2006;291(3):E468-E475.

39. Gault VA, O'Harte FPM, Harriott P, Flatt PR. Characterization of the Cellular and Metabolic Effects of a Novel Enzyme-Resistant Antagonist of Glucose-Dependent Insulinotropic Polypeptide. Biochemical and Biophysical Research Communications 2002;290(5): 1420-1426.

40. Ravn P, Madhurantakam C, Kunze S et al. Structural and Pharmacological Characterization of Novel Potent and Selective Monoclonal Antibody Antagonists of Glucose-dependent Insulinotropic Polypeptide Receptor. Journal of Biological Chemistry 2013;288(27):19760-19772.

41. Deacon CF, Plamboeck A, Rosenkilde MM, de Heer J, Hoist JJ. GIP-(3-42) does not antagonize insulinotropic effects of GIP at physiological concentrations. American Journal of Physiology - Endocrinology and Metabolism 2006;291(3):E468-E475.

42. Goetze JP, Hunter I, Lippert SK, Bardram L, Rehfeld JF. Processing-independent analysis of peptide hormones and prohormones in plasma. Front Biosci 2012;17:1804-1815.

43. Goetze JP, Rehfeld JF. Peptide hormones and their prohormones as biomarkers. Biomarkers Med 2009;3(4):335-338.

44. Fujita Y, Asadi A, Yang GK, Kwok YN, Kieffer TJ. Differential processing of pro-glucose-dependent insulinotropic polypeptide in gut. American Journal of Physiology - Gastrointestinal and Liver Physiology 2010;298(5):G608-G614.

45. Widenmaier SB, Kim SJ, Yang GK et al. A GIP Receptor Agonist Exhibits beta-Cell Anti-Apoptotic Actions in Rat Models of Diabetes Resulting in Improved beta-Cell Function and Glycemic Control. PLoS ONE 2010;5(3):e9590.

46. Graham FL, van der Eb AJ. A new technique for the assay of infectivity of human adenovirus 5 DNA. Virology 1973;52(2):456-467.

47. Kissow H, Hartmann B, Hoist JJ et al. Glucagon-like peptide-1 (GLP-1) receptor agonism or DPP-4 inhibition does not accelerate neoplasia in carcinogen treated mice. Regulatory Peptides 2012;179(1-3):91-100.

48. Hoejberg PV, Vilsboell T, Raboel R et al. Four weeks of near-normalisation of blood glucose improves the insulin response to glucagon-like peptide-1 and glucose-dependent insulinotropic polypeptide in patients with type 2 diabetes. Diabetologia 2009;52(2):199-207.

49. Hansen LS, Sparre-Ulrich AH, et al.. N-terminally and C-terminally truncated forms of glucosedependent insulinotropic polypeptide are high-affinity competitive antagonists of the human GIP receptor. British Journal of Pharmacology 2016; 173 826-838.

Примеры

Настоящие примеры поддерживают следующие выводы:

1) Отдельные аминокислотные замещения в определенных участках приводят к улучшенному антагонистическому профилю

2) Несколько участков ацилирования демонстрируют высокий потенциал как при GIP(3-30) + удлинение, так и при GIP(5-30) + удлинение.

3) Удлинение С-терминальными аминокислотными остатками из GIP(1-42) или эксендина-4 приводит к повышенным эффектам, например антагонистическому эффекту и/или увеличенному времени полувыведения in vivo и/или селективности.

4) Аналоги GIP пептида согласно вариантам осуществления настоящего изобретения обладают повышенной физической стабильности, например повышенной растворимостью.

5) Аналоги GIP пептида согласно вариантам осуществления настоящего изобретения обладают пониженной или отсутствующей агонистической активностью в отношении GIPR.

Материалы и методы

Получение и действие GIP(3-30) и GIP(5-30) пептидов самостоятельно описано в заявке WO 2016/034186.

Материалы

GIP(1-42) человека приобретали у Bachem, Bubendorf, Switzerland (Н5645), а оставшиеся лиганды синтезировали с помощью Casio™, Lyngby, Denmark и Almac Group, Craigavon, United Kingdom, Peptides & Elephants GmbH, Henningsdorf, Germany, и WuXi AppTec, China. кДНК GIP рецептора человека приобретали у Origene, Rockville, Maryland, USA (SC110906) и клонировали в вектор pCMV-Script. кДНК GIP рецептора человека приобретали у Origene, Rockville, Maryland, USA (SC110906) и клонировали в вектор pCMV-Script. Йодированный GIP(1 -42) человека приобретали у PerkinElmer Life Sciences, Skovlunde, Denmark (NEX402025UC).

Животные

Карликовых свиней Gottingen или самцов крыс Wistar содержали в центре содержания животных на факультете здравоохранения и медицинских наук (Faculty of Health and Medical Sciences).

Трансфекции и культура тканей

COS-7 клетки культивировали при 10% СО₂ и 37°С в модифицированной по Дульбекко среде Игла 1885 с добавлением 10% фетальной коровьей сыворотки, 2 мМ глутамина, 180 ед/мл пенициллина и 45 г/мл стрептомицина. Транзиентную трансфекцию COS-7 клеток для накопления сАМР и конкурентное связывание осуществляли с применением способа на основе осаждения фосфатом кальция с добавлением хлорохина46"47.

Анализ сАМР

Вариант 1 (также обозначаемый как анализ DiscoveRx):

Подвергнутые транзиентной трансфекции COS-7 клетки, экспрессирующие рецептор GIP человека, высевали в белые 96-луночные планшеты при плотности 3,5*10⁴/лунка. На следующий день клетки дважды промывали буфером с физиологическим раствором, забуференным Hepes (HBS), и инкубировали с HBS и 1 мМ 3-изобутил-1-метилксантин (IBMX) в течение 30 минут при 37°С. Для тестирования агонистических свойств добавляли лиганды и инкубировали в течение 30 минут при 37°С. Для тестирования антагонистских свойств клетки предварительно инкубировали с антагонистами в течение 10 минут перед добавлением агониста и далее инкубировали в течение дополнительных 20 минут. Выполняли анализ HitHunterTM сАМР XS (DiscoveRx) в соответствии с инструкциями производителя.

Вариант 2 (также обозначаемый как анализ CisBio):

In vitro функциональную активность соединений в отношении GIP рецептора человека также определяли на НЕК-293 клетках, транзиентно экспрессирующих данный рецептор. Вдень выполнения анализа клетки ресуспендировали в HBSS буфере (Gibco, 14025-50) с добавлением 20 мМ HEPES (Gibco, 15630-106), 0,1% Pluronic F-68 (Gibco, 24040-032) и 0,1% казеина (Sigma, С4765) и наносили на 384-луночные планшеты при плотности 5000 клеток/лунка. Аналоги GIP пептида по настоящему изобретению разбавляли в HBSS буфере с добавлением 20 мМ HEPES, 0,1% pluronic, 0,1% казеина и 500 мкМ IBMX. Для тестирования на антагонистические свойства каждый подвергаемый тестированию аналог GIP пептида независимо добавляли в клетки и инкубировали в течение 20 минут при 37°С перед добавлением агониста (GIP1-42) при концентрации ЕС50 и последующим инкубированием при 37°С в течение 30 минут. Полученное снижение внутриклеточного сАМР количественно определяли с помощью набора для анализа CisBio сАМР Dynamic 2 HTRF. Данный анализ основан на конкуренции между нативным сАМР, продуцируемым клетками, и сАМР, помеченным красителем d2 для связывания с меченным криптатом антителом. Специфические сигнал (то есть сигнал, соответствующий передаче энергии) обратно пропорционален концентрации сАМР в образце.

Конъюгат cAMP-d2 и антитело против сАМР-криптат, оба из которых являлись разбавленными в лизисном буфере из набора, добавляли в клетки в соответствии с протоколом производителя. Полученный конкурентный анализ инкубировали в течение 60 минут при комнатной температуре и детектировали сигнал с помощью инструмента PerkinElmer Envision® с возбуждением при 320 нм и эмиссией при 665 нм и 620 нм. Соотношение HTRF (эмиссия при 665 нм/620 нм* 10,000) обратно пропорционально присутствующему количеству сАМР, при этом оно конвертируется в нМ сАМР в расчете на одну лунку с помощью стандартной кривой сАМР. Кривые доза-эффект строили с помощью нелинейного регрессионного анализа (логистическое уравнение с четырьмя параметрами) в GraphPad Prism, при этом определяли значения pIC50.

Для тестирования на агонистические свойства в GIP рецепторе соединения разбавляли и добавляли в клетки как описано выше и инкубировали в течение 30 минут при 37°С. Полученное повышение внутриклеточного сАМР определяли с помощью набора для анализа CisBio сАМР Dynamic 2 HTRF, как описано выше.

Время полувыеедения (Т_1/2, определенное у карликовых свиней Gottingen. 2-3 карликовым свиньям Gottingen подкожно вводили один из аналогов GIP по настоящему изобретению (1-10 нмоль/кг, общий объем 2-6 мл) и собирали образцы крови не более чем через и максимум через 432 часа после подкожного введения из катетера на центральной вене. Катетер промывали солевым раствором и гепарином между взятием образцов. Кровь собирали в пробирки с холодной ЭДТА, центрифугировали, и хранили плазму при -20°С до проведения анализов.

Время полуеыведения (Tyr), определенное у крыс Wistar

3 крысам Wistar внутривенно вводили один из аналогов GIP по настоящему изобретению (7 нмоль/кг, общий объем дозы 1 мл/кг) и собирали образцы крови из кончика хвоста не более чем через и максимум через 72 часа после введения. Кровь собирали в пробирки с холодной ЭДТА, центрифугировали, и хранили плазму при -20°С до проведения анализов.

Определение концентрации модифицированных аналогов GIP пептида в плазме

Концентрацию аналога GIP согласно настоящему изобретению в плазме у карликовых свиней Gottingen или самцов крыс Wistar анализировали с помощью радиоиммуноанализа (RIA) или с помощью жидкостной хроматографии-массовой спектрометрии (ЖХ/МС). Для определения на основе RIA иммунореактивность аналогов определяли с помощью антисывороточных АЬ95234, АЬ95235 или АЬ95236, которые представляют собой поликлональные собственные антитела, полученные в кроликах, являющиеся специфическими в отношении среднего участка GIP(1-30)NH₂ или амидированного С-конца GIP(3-30)NH₂. Для определения на основе ЖХ/МС образцы плазмы осаждали путем добавления 3 частей этанола с дальнейшим тщательным размешиванием. После центрифугирования и разбавления супернатанта образцы анализировали с помощью ЖХ/МС и сравнивали с калибровочной кривой с 9 точками. Калибровочные кривые получали в наивной плазменной матрице карликовых свиней Gottingen. ЖХ/МС осуществляли с помощью Red Glead Discovery АВ, Lund, Sweden.

Анализ данных

Значения IC₅₀, ЕС₅₀, и Emax определяли с помощью нелинейной регрессии. Это осуществляли с помощью программного обеспечения GraphPad Prism 6.0 (GraphPad, San Diego, California, USA) и Microsoft Excel™. Фармакокинетические параметры, включая T1/2 выведения вычисляли с помощью программного обеспечения РК Solutions 2.0 (Summit Research services, US).

Пример 1 - Антагонистические свойства GIP(3-30) и GIP(5-30) человека, удлиненных от 1 до 12 С-терминальными аминокислотными остатками из GIP(1-42) или эксендина-4, сохраняются или улучшаются после добавления дополнительных С-терминальных аминокислотных остатков Эффект добавления от 1 до 12 дополнительных С-терминальных аминокислотных остатков к GIP(3-30) и GIP(5-30) на их антагонистическую активность, а также Т1/2 анализировали как описано ниже. Аналоги GIP были также ацилированными с/без линкера в положении, например, 11, 12, 17, 18 или 20, при этом серин-11, изолейцин-12, изолейцин-17, гистидин-18 или глутамин-20 были ранее замещены лизином.

Результаты:

Аналоги GIP(3-36), например АТ361, являющиеся липидированными С16 диацидом в положении 18, демонстрируют улучшенное значение IC₅₀ в виде 2 нМ по сравнению, например, с АТ158. АТ361 также имел очень высокое значение Т1/2 в виде 31 часа. Время полувыведения является неожиданно длительным по сравнению с аналогичными вариантами GIP(3-30), липидированными С16 диацидом в положении 18, например АТ158, который имеет время полувыведения лишь 14 часов. Длительное время полувыведения достигается без N-кэпа (N-cap) или других типов стабилизации на N-конце, поскольку, например, АТ361 имеет свободную аминогруппу на N-конце.

GIP(3-30) + аминокислоты из С-терминальной части эксендина-4, например АТ631, в целом представляли собой высокоэффективные антагонисты. АТ631 демонстрировал улучшенное 1С5о-значение 1,9 нМ по сравнению, например, с АТ158. Время полувыведения АТ631 также составляет более 30 часов in vivo, поскольку было определено очень длительное время Т_1/2 в виде 56 часов, являющееся неожиданно длительным по сравнению, например, с АТ158 (см. Фигуру 1) или лираглутидом, которые также имеет С16 жирную кислоту. Длительное время полувыведения достигается без N-кэпа (N-cap) или других типов стабилизации на N-конце, поскольку, например, АТ631 имеет свободную аминогруппу на N-конце.

В целом антагонисты GIP(3-30) с С-терминальными удлинениями, такие как, например, АТ361 и АТ631, являлись лучшими антагонистами, чем указанные в РСТ/ЕР2018/064355. Антагонисты, которые тестировали у свиней на Т_1/2, были намного лучшими, чем указанные в РСТ/ЕР2018/064355. Как АТ361, так и АТ631 также демонстрируют неожиданно длительное время Т_1/2 в виде более чем 30 часов по сравнению, например, с аналогом GIP(3-30) АТ158 (см. Таблицу 1 В и Фиг. 1) и другими С16-липидированными пептидами, известными в данной области, например лираглутидом (вводимым один раз в день ежедневно аналогом GLP-1). АТ437, АТ632, АТ587, АТ589, АТ614, АТ616, АТ618, АТ619 также имеют очень длительное время полувыведения. Комбинация С-терминального удлинения GIP(3-30) (например как в АТ361 и АТ631) и ацилирования, то есть присоединения жирной кислоты в определенных положениях, например на лизине в положении 18, может обеспечивать получение неожиданно длительного времени полувыведения. Не ограничиваясь какой-либо теорией, присутствие карбоновой кислоты на С-конце (как в АТ361 и АТ631) также может вносить вклад в увеличенное время полувыведения.

При анализе и сравнении фармакокинетических свойств различных соединений может являться полезным использовать более чем один вид. Как описано выше, указанное время полувыведения было определено исключительно у карликовых свиней. Несмотря на то, что в целом является приемлемым, что время полувыведения является более коротким у крыс, чем у карликовых свиней, далее будет описаны фармакокинетические результаты, полученные у крыс. Из Таблицы 3А и 3В, в которых указаны средние и зависимые от времени значения концентрации в плазме у крыс Wistar, видно, что эффект и время полувыведения являются намного более высокими у аналогов, у которых жирная кислота присоединена к средним участкам пептида, по сравнению, например, с аналогом GIP с жирной кислотой, присоединенной в положении 40 на С-конце, например АТ651. Эффективность в каждый момент времени также является намного более высокой по сравнению, например, с аналогом GIP с жирной кислотой, присоединенной в положении 40 на С-конце, например АТ651, для всех протестированных пептидов в соответствии с вариантами осуществления настоящего изобретения. Таким образом, присоединение жирной кислоты к средним участкам GIP(3-30) с одновременным наличием С-терминального удлинения, например в положении 11 и 18, обеспечивает получение фармакологически более совершенных аналогов, чем в случае присоединения жирной кислоты в положении 40 на С-конце. Также является важным отметить, что несмотря на то, что многие протестированные аналоги имеют присоединенную С16 жирную кислоту (АТ361, АТ631, АТ366, АТ632, АТ447), существует неожиданно длительное время Т_1/2 (11 часов, 7 часов, 7 часов, 8 часов, 5,8 часов, соответственно) по сравнению с аналогичными пептидами с присоединенной жирной кислотой такой же длины, например лираглутидом, который имеет значение Т_1/2 в виде 4 часов у крыс. Не ограничиваясь какой-либо теорией, удлиненные по С-концу GIP пептиды могут представлять собой полезные молекулы в плане увеличения времени полувыведения путем липидирования.

Из Таблицы 2В также видно, что определенные замещения могут являться полезными. Введение стабилизирующих альфа-спираль аминокислот, таких как Е, L, K, А и Aib, в определенных положениях, например отдельным образом в любом из положений 9, 13, 14, 15, 18, 21 и 24, может быть особенно полезным в плане повышения антагонистической эффективности.

Например, замещение на Е в положении 24 обеспечивает сохранение или повышение эффективности.

Замещение в положении 14 на L, Nle или K обеспечивает сохранение или даже повышение эффективности, как видно из, например, АТ618, АТ619 и АТ621. Замещение D в положении 9 и/или положении 15 и/или положении 21 на Е похоже повышает эффективность, как видно из, например, АТ613, АТ614, АТ616 и АТ617, а также, например, АТ693, АТ695, АТ696 и АТ700. В целом также видно, что свободная карбоновая кислота на С-конце повышает эффективность. Когда длина жирной кислоты повышается, например от С16диацид до С18диацид, эффективность зачастую снижается. Однако определенные замещения могут компенсировать это. Например Aib в положении 13 или замещение на Е, например в положении 9 и/или 15 и/или 21. Замещение на Е в положении 24 обеспечивает сохранение или повышение антагонистической эффективности, а также повышенную растворимость, например при физиологическом рН около 7,5. Также из Таблицы 2 В видно, что различные Z обеспечивают сохранение или повышение эффективности, например в АТ467, АТ468, АТ469, АТ470, АТ471, АТ472, АТ473 и АТ474. На основе, например, АТ633 и АТ635 видно, что N-терминальное ацетилирование приводит (частично) кагонизму в GIPR..

Пример 2 - Селективность

Анализ сАМР - селективность

Подвергнутые транзиентной трансфекции COS-7 клетки, экспрессирующие рецептор GIP человека (GLP1R), или GLP2 рецептор (GLP2R), или рецептор глюкагона (GcgR), или рецептор секретина (SCTR), высевали в белые 96-луночные планшеты при плотности 3,5*104/лунка. На следующий день клетки дважды промывали буфером с физиологическим раствором, забуференным Hepes (HBS), и инкубировали с HBS и 1 мМ 3-изобутил-1-метилксантин (IBMX) в течение 30 минут при 37°С. Для тестирования агонистических свойств добавляли лиганды и инкубировали в течение 30 минут при 37°С. Для тестирования антагонистских свойств клетки предварительно инкубировали с антагонистами в течение 10 минут перед добавлением встречающегося в природе агониста для экспрессированного рецептора (GLP1 для экспрессирующих GLP1R клеток, GLP2 для экспрессирующих GLP2R клеток, глюкагон для GcgR и секретин для SCTR) и далее инкубировали в течение дополнительных 20 минут. Для определения IC50 использовали концентрацию встречающегося в природе агониста, соответствующую 50-80% максимального накопления сАМР. Выполняли анализ HitHunterTM сАМР XS (DiscoveRx) в соответствии с инструкциями производителя.

Результаты:

Авторы сравнивали данные по селективности лучших антагонистов, описанных в РСТ/ЕР2018/064355, с лучшими антагонистами из данной заявки. Это осуществляли путем определения антагонистических свойств пептидов в отношении GIPR, рецептора глюкагона и рецептора GLP-1. Как показано в Таблице 3, антагонисты в рамках данной заявки были более селективными, чем антагонисты из РСТ/ЕР2018/064355. Комбинация С-терминального удлинения GIP(3-30) (например как у АТ361 и АТ631) и ацилирование на лизине, например в положении 18, очевидно обеспечивает получение неожиданно селективных антагонистов.

Более того, определяли антагонистические свойства пептидов в отношении GIPR, GLP-2 рецептора и рецептора секретина. Как видно из Таблицы 3В, аналоги GIP по настоящему изобретению, например АТ361 и АТ631, не антагонизируют GPL-2 рецептор или рецептор секретина и, таким образом, являются очень селективными в отношении GIP рецептора.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> ANTAG THERAPEUTICS APS

<120> МОДИФИЦИРОВАННЫЕ АНАЛОГИ GIP ПЕПТИДА

<130> P5300PC00

<140> PCT/EP2019/083506

<141> 2019-12-03

<150> EP 19176739.1

<151> 2019-05-27

<150> EP 18209896.2

<151> 2018-12-03

<160> 221

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223>пептид

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (2)..(2)

<400> 1

Xaa Xaa Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile His

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 2

<211> 12

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (2)..(2)

<400> 2

Gly Lys Lys Asn Asp Trp Lys His Asn Ile Thr Gln

1 5 10

<210> 3

<211> 39

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(39)

<223>эксендин-4

<400> 3

His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu

1 5 10 15

Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser

20 25 30

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 4

<211> 9

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(9)

<223>эксендин 31-39

<400> 4

Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 5

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(10)

<223>эксендин 30-39

<400> 5

Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

1 5 10

<210> 6

<211> 4

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(4)

<223>фрагментэксендина

<400> 6

Gly Pro Ser Ser

1

<210> 7

<211> 5

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(5)

<223>фрагментэксендина

<400> 7

Gly Pro Ser Ser Gly

1 5

<210> 8

<211> 6

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(6)

<223>фрагментэксендина

<400> 8

Gly Pro Ser Ser Gly Ala

1 5

<210> 9

<211> 7

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(7)

<223>фрагментэксендина

<400> 9

Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro

1 5

<210> 10

<211> 8

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(8)

<223>фрагментэксендина

<400> 10

Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro

1 5

<210> 11

<211> 9

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(9)

<223>фрагментэксендина

<400> 11

Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro

1 5

<210> 12

<211> 4

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(4)

<223>фрагментэксендина

<400> 12

Pro Ser Ser Gly

1

<210> 13

<211> 5

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(5)

<223>фрагментэксендина

<400> 13

Pro Ser Ser Gly Ala

1 5

<210> 14

<211> 6

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(6)

<223>фрагментэксендина

<400> 14

Pro Ser Ser Gly Ala Pro

1 5

<210> 15

<211> 7

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(7)

<223>фрагментэксендина

<400> 15

Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro

1 5

<210> 16

<211> 8

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(8)

<223>фрагментэксендина

<400> 16

Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro

1 5

<210> 17

<211> 4

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(4)

<223> фрагмент GIP

<400> 17

Gly Lys Lys Asn

1

<210> 18

<211> 5

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(5)

<223>фрагмент GIP

<400> 18

Gly Lys Lys Asn Asp

1 5

<210> 19

<211> 6

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(6)

<223> фрагмент GIP

<400> 19

Gly Lys Lys Asn Asp Trp

1 5

<210> 20

<211> 6

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(6)

<223>фрагмент GIP

<400> 20

Gly Arg Lys Asn Asp Trp

1 5

<210> 21

<211> 6

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(6)

<223>фрагмент GIP

<400> 21

Gly Lys Arg Asn Asp Trp

1 5

<210> 22

<211> 6

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(6)

<223>фрагмент GIP

<400> 22

Gly Arg Arg Asn Asp Trp

1 5

<210> 23

<211> 7

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(7)

<223> фрагмент GIP

<400> 23

Gly Lys Lys Asn Asp Trp Lys

1 5

<210> 24

<211> 8

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(8)

<223>фрагмент GIP

<400> 24

Gly Lys Lys Asn Asp Trp Lys His

1 5

<210> 25

<211> 9

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(9)

<223>фрагмент GIP

<400> 25

Gly Lys Lys Asn Asp Trp Lys His Asn

1 5

<210> 26

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(10)

<223>фрагмент GIP

<400> 26

Gly Lys Lys Asn Asp Trp Lys His Asn Ile

1 5 10

<210> 27

<211> 11

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(11)

<223>фрагмент GIP

<400> 27

Gly Lys Lys Asn Asp Trp Lys His Asn Ile Thr

1 5 10

<210> 28

<211> 6

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(6)

<223> фрагмент GIP

<400> 28

Gly Lys Lys Lys Asp Trp

1 5

<210> 29

<211> 6

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(6)

<223> фрагмент GIP

<400> 29

Gly Lys Lys Asn Asp Lys

1 5

<210> 30

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (2)..(2)

<400> 30

Glu Xaa Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile His

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 31

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<400> 31

Xaa Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile His

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 32

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP3-30

<400> 32

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile His

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 33

<211> 27

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<400> 33

Xaa Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln

1 5 10 15

Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 34

<211> 27

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(27)

<223> GIP4-30

<400> 34

Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln

1 5 10 15

Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 35

<211> 26

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(26)

<223> GIP5-30

<400> 35

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 36

<211> 25

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(25)

<223> GIP6-30

<400> 36

Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln Gln Asp

1 5 10 15

Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 37

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 37

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile His

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 38

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 38

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 39

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 39

Ser Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 40

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 40

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Glu Gln Lys

20 25

<210> 41

<211> 36

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(36)

<223> GIP(3-30)

<220>

<221> MOD_RES

<222> (36)..(36)

<223> АМИДИРОВАНИЕ

<400> 41

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Pro Ser Ser Gly Ala

20 25 30

Pro Pro Pro Ser

35

<210> 42

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 42

Ser Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Arg Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Arg

20 25

<210> 43

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 43

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Lys Ile Ala Met Asp Lys Ile His

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 44

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 44

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Lys Ala Met Asp Lys Ile His

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 45

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 45

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile His

1 5 10 15

Gln Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 46

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 46

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile His

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Lys Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 47

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 47

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Lys His

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 48

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 48

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Gly

20 25

<210> 49

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 49

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gly Gly

20 25

<210> 50

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 50

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Glu Tyr Ser Ile Ala Met Glu Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 51

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 51

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Glu Tyr Ser Ile Ala Met Glu Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 52

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (10)..(10)

<223> Aib

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 52

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Glu Tyr Ser Ala Ala Leu Glu Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 53

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (11)..(11)

<223> Aib

<400> 53

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Glu Tyr Ser Ile Ala Met Glu Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 54

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 54

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 55

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 55

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 56

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 56

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 57

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 57

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Glu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 58

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 58

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Lys Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 59

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 59

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Ser Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 60

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 60

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Ala

20 25

<210> 61

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 61

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Glu Gln Lys

20 25

<210> 62

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 62

Val Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 63

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Aib

<400> 63

Ala Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 64

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 64

Pro Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 65

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 65

Val Glu Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 66

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Aib

<400> 66

Ala Glu Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 67

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 67

Gly Glu Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 68

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 68

Pro Glu Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 69

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 69

Asp Thr Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 70

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 70

Gly Glu Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ala Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Gly

20 25

<210> 71

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 71

Gly Glu Thr Phe Ile Ser Thr Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Gly

20 25

<210> 72

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 72

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Thr Tyr Lys Ile Ala Leu Asp Lys Ile His

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 73

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (11)..(11)

<223> Aib

<400> 73

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 74

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (11)..(11)

<223> Aib

<400> 74

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 75

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (11)..(11)

<223> Aib

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 75

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 76

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 76

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 77

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 77

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 78

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 78

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Lys Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 79

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 79

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gly Gly

20 25

<210> 80

<211> 28

<212> PRT

<213>Искусственнаяпоследовательность

<220>

<223>пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 80

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gly Gly

20 25

<210> 81

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (11)..(11)

<223> Aib

<400> 81

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Glu Tyr Ser Ile Ala Leu Glu Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Glu Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 82

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (11)..(11)

<223> Aib

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 82

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Glu Tyr Ser Ile Ala Leu Glu Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Glu Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 83

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> гамма-глутамат

<400> 83

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 84

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> бета-глутамат

<400> 84

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 85

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> X=Глутаровая кислота

<400> 85

Xaa Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 86

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 86

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gly Gly

20 25

<210> 87

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 87

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Glu Tyr Ser Ile Ala Leu Glu Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Glu Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 88

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 88

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Glu Tyr Ser Ile Ala Leu Glu Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Glu Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 89

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> гамма-глутамат

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 89

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 90

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> D-isomer of гамма-глутамат

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 90

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 91

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> бета-глутамат

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 91

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 92

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> X=Глутаровая кислота

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223>Nle

<400> 92

XaaGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaLeuAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValGluTrpLeuLeuAlaGlnLys

20 25

<210> 93

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223>бета-глутамат

<220>

<221>MOD_RES

<222> (11)..(11)

<223>Aib

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 93

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 94

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(3-30)

<400> 94

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Glu Gly Gly

20 25

<210> 95

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 95

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Glu Gln Lys

20 25

<210> 96

<211> 26

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(26)

<223>GIP(5-30)

<400> 96

ThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleHisGlnGln

1 5 10 15

AspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLys

20 25

<210> 97

<211> 26

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(26)

<223>GIP(5-30)

<400> 97

ThrPheIleSerAspTyrLysIleAlaMetAspLysIleHisGlnGln

1 5 10 15

AspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLys

20 25

<210> 98

<211> 38

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (38)..(38)

<223>АМИДИРОВАНИЕ

<400> 98

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser Lys

35

<210> 99

<211> 38

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (38)..(38)

<223>АМИДИРОВАНИЕ

<400> 99

ProGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser Lys

35

<210> 100

<211> 26

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(26)

<223> GIP(5-30)

<400> 100

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 101

<211> 26

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(26)

<223>GIP(5-30)

<400> 101

ThrPheIleSerAspTyrLysIleAlaMetAspArgIleHisGlnGln

1 5 10 15

AspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnArg

20 25

<210> 102

<211> 26

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(26)

<223>GIP(5-30)

<400> 102

ThrPheIleSerAspTyrSerLysAlaMetAspLysIleHisGlnGln

1 5 10 15

AspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLys

20 25

<210> 103

<211> 26

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(26)

<223>GIP(5-30)

<400> 103

ThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleHisGlnLys

1 5 10 15

AspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLys

20 25

<210> 104

<211> 26

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(26)

<223>GIP(5-30)

<400> 104

ThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleHisGlnGln

1 5 10 15

AspPheValLysTrpLeuLeuAlaGlnLys

20 25

<210> 105

<211> 25

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(25)

<223> GIP(6-30)

<400> 105

Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys Gln Gln Asp

1 5 10 15

Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys

20 25

<210> 106

<211> 34

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(34)

<223>GIP(3-36)

<400> 106

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGlyLysLysAsn

20 25 30

Asp Trp

<210> 107

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223>пептид

<220>

<221>пептид

<222> (1)..(37)

<223>GIP(3-30+CEX31-39)

<400> 107

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 108

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223>GIP(3-30+CEX31-39)

<220>

<221>MOD_RES

<222> (37)..(37)

<223>АМИДИРОВАНИЕ

<400> 108

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 109

<211> 38

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(38)

<223>GIP(3-30+CEX)

<400> 109

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGlyProSerSer

20 25 30

Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 110

<211> 38

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(38)

<223>GIP(3-30+CEX)

<220>

<221>MOD_RES

<222> (38)..(38)

<223>АМИДИРОВАНИЕ

<400> 110

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGlyProSerSer

20 25 30

Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 111

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223>GIP(3-30+CEX)

<400> 111

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGlyProSerSer

20 25 30

Gly Ala Pro Pro Pro

35

<210> 112

<211> 36

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(36)

<223>GIP(3-30+CEX)

<400> 112

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGlyProSerSer

20 25 30

Gly Ala Pro Pro

35

<210> 113

<211> 35

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223>пептид

<220>

<221>пептид

<222> (1)..(35)

<223>GIP(3-30+CEX)

<400> 113

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Pro Ser Ser

20 25 30

Gly Ala Pro

35

<210> 114

<211> 34

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223>пептид

<220>

<221>пептид

<222> (1)..(34)

<223>GIP(3-30+CEX)

<400> 114

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGlyProSerSer

20 25 30

Gly Ala

<210> 115

<211> 33

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223>пептид

<220>

<221>пептид

<222> (1)..(33)

<223>GIP(3-30+CEX)

<400> 115

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Pro Ser Ser

20 25 30

Gly

<210> 116

<211> 32

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221>пептид

<222> (1)..(32)

<223>GIP(3-30+CEX)

<400> 116

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGlyProSerSer

20 25 30

<210> 117

<211> 31

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(31)

<223>GIP(3-30+CEX)

<400> 117

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGlyProSer

20 25 30

<210> 118

<211> 30

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(30)

<223>GIP(3-30+CEX)

<400> 118

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGlyPro

20 25 30

<210> 119

<211> 29

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(29)

<223>GIP(3-31)

<400> 119

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGly

20 25

<210> 120

<211> 30

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(30)

<223>GIP(3-32)

<400> 120

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGlyLys

20 25 30

<210> 121

<211> 31

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(31)

<223>GIP(3-33)

<400> 121

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGlyLysLys

20 25 30

<210> 122

<211> 32

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(32)

<223>GIP(3-34)

<400> 122

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGlyLysLysAsn

20 25 30

<210> 123

<211> 33

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(33)

<223>GIP(3-35)

<400> 123

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGlyLysLysAsn

20 25 30

Asp

<210> 124

<211> 35

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221>пептид

<222> (1)..(35)

<223>GIP(3-37)

<400> 124

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGlyLysLysAsn

20 25 30

Asp Trp Lys

35

<210> 125

<211> 36

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223>пептид

<220>

<221>пептид

<222> (1)..(36)

<223>GIP(3-38)

<400> 125

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGlyLysLysAsn

20 25 30

Asp Trp Lys His

35

<210> 126

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223>пептид

<220>

<221>пептид

<222> (1)..(37)

<223>GIP(3-39)

<400> 126

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGlyLysLysAsn

20 25 30

Asp Trp Lys His Asn

35

<210> 127

<211> 38

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(38)

<223>GIP(3-40)

<400> 127

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGlyLysLysAsn

20 25 30

Asp Trp Lys His Asn Ile

35

<210> 128

<211> 39

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(39)

<223>GIP(3-41)

<400> 128

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGlyLysLysAsn

20 25 30

Asp Trp Lys His Asn Ile Thr

35

<210> 129

<211> 40

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(40)

<223>GIP(3-42)

<400> 129

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGlyLysLysAsn

20 25 30

Asp Trp Lys His Asn Ile Thr Gln

35 40

<210> 130

<211> 34

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(34)

<223>GIP(3-30)

<400> 130

SerGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGlyLysLysAsn

20 25 30

Asp Trp

<210> 131

<211> 38

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223>пептид

<220>

<221>пептид

<222> (1)..(38)

<223>GIP(3-30)

<400> 131

SerGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGlyProSerSer

20 25 30

Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 132

<211> 34

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(34)

<223>GIP(3-30)

<400> 132

SerGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspArgIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnArgGlyArgArgAsn

20 25 30

Asp Trp

<210> 133

<211> 38

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223>пептид

<220>

<221>пептид

<222> (1)..(38)

<223>GIP(3-30)

<400> 133

SerGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspArgIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnArgGlyProSerSer

20 25 30

Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 134

<211> 34

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(34)

<223> GIP(3-30)

<400> 134

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Lys Ile Ala Met Asp Lys Ile His

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys Lys Asn

20 25 30

Asp Trp

<210> 135

<211> 34

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223>пептид

<220>

<221>пептид

<222> (1)..(34)

<223> GIP(3-30)

<400> 135

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Lys Ala Met Asp Lys Ile His

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys Lys Asn

20 25 30

Asp Trp

<210> 136

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223>пептид

<220>

<221>MOD_RES

<222> (37)..(37)

<223>АМИДИРОВАНИЕ

<400> 136

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleHis

1 5 10 15

Gln Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 137

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (37)..(37)

<223>АМИДИРОВАНИЕ

<400> 137

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysLysHis

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 138

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (37)..(37)

<223>АМИДИРОВАНИЕ

<400> 138

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnGlyProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 139

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (37)..(37)

<223>АМИДИРОВАНИЕ

<400> 139

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlyGlyProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 140

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223>GIP(3-30)

<400> 140

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlyGlyProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 141

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223>GIP(3-30)

<400> 141

GluGlyThrPheIleSerGluTyrSerIleAlaMetGluLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnGluPheValGlnTrpLeuLeuAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 142

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223>GIP(3-30)

<400> 142

GluGlyThrPheIleSerGluTyrSerIleAlaMetGluLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValGluTrpLeuLeuAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 143

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (10)..(10)

<223> Aib

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 143

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Glu Tyr Ser Ala Ala Leu Glu Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 144

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (11)..(11)

<223> Aib

<400> 144

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Glu Tyr Ser Ile Ala Met Glu Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 145

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223>GIP(3-30)

<400> 145

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValGluTrpLeuLeuAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 146

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223> GIP(3-30)

<400> 146

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 147

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 147

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 148

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223>GIP(3-30)

<400> 148

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaGluAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 149

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223>GIP(3-30)

<400> 149

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaLysAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 150

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223>GIP(3-30)

<400> 150

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaSerAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 151

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223>GIP(3-30)

<400> 151

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValGluTrpLeuLeuAlaGlnAlaProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 152

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223>GIP(3-30)

<400> 152

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuGluAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 153

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223>GIP(3-30)

<400> 153

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuGluGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 154

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223>GIP(3-30)

<400> 154

ValGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 155

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223>Aib

<400> 155

AlaGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 156

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223>GIP(3-30)

<400> 156

ProGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 157

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223>GIP(3-30)

<400> 157

ValGluThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 158

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Aib

<400> 158

Ala Glu Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 159

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223>GIP(3-30)

<400> 159

GlyGluThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 160

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223>GIP(3-30)

<400> 160

ProGluThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 161

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223>GIP(3-30)

<400> 161

AspThrThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 162

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223> GIP(3-30)

<400> 162

Gly Glu Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ala Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Gly Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 163

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223>GIP(3-30)

<400> 163

GlyGluThrPheIleSerThrTyrSerIleAlaLeuAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValGluTrpLeuLeuAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 164

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223> GIP(3-30)

<400> 164

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Thr Tyr Lys Ile Ala Leu Asp Lys Ile His

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 165

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (37)..(37)

<223>АМИДИРОВАНИЕ

<400> 165

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 166

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (11)..(11)

<223>Aib

<400> 166

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValGluTrpLeuLeuAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 167

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (11)..(11)

<223> Aib

<400> 167

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 168

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (11)..(11)

<223> Aib

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 168

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 169

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223> GIP(3-30)

<400> 169

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 170

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 170

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 171

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223>GIP(3-30)

<400> 171

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaLysAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValGluTrpLeuLeuAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 172

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 172

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gly Gly Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 173

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 173

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gly Gly Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 174

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (11)..(11)

<223> Aib

<400> 174

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Glu Tyr Ser Ile Ala Leu Glu Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Glu Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 175

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (11)..(11)

<223> Aib

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 175

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Glu Tyr Ser Ile Ala Leu Glu Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Glu Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 176

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223>гамма-глутамат

<400> 176

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 177

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223>бета-глутамат

<400> 177

GluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

GlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysProSerSerGly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 178

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223>X=Глутароваякислота

<400> 178

XaaGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLysIleLys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 179

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223> GIP(3-30)

<400> 179

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gly Gly Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 180

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223> GIP(3-30)

<400> 180

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Glu Tyr Ser Ile Ala Leu Glu Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Glu Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 181

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 181

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Glu Tyr Ser Ile Ala Leu Glu Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Glu Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 182

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> гамма-глутамат

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 182

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 183

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> гамма-глутамат

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 183

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 184

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> бета-глутамат

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 184

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 185

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> X=Глутаровая кислота

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 185

Xaa Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 186

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> бета-глутамат

<220>

<221> MOD_RES

<222> (11)..(11)

<223> Aib

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 186

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 187

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> АЦЕТИЛИРОВАНИЕ

<400> 187

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 188

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> АЦЕТИЛИРОВАНИЕ

<400> 188

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Glu Tyr Ser Ile Ala Met Glu Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 189

<211> 29

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(29)

<223> GIP(5-30)

<400> 189

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Lys Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys Lys

20 25

<210> 190

<211> 32

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(32)

<223> GIP(5-30)

<400> 190

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Lys Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys Lys Asn Asp Trp

20 25 30

<210> 191

<211> 32

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (32)..(32)

<223> АМИДИРОВАНИЕ

<400> 191

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Lys Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys Lys Asn Asp Trp

20 25 30

<210> 192

<211> 32

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(32)

<223> GIP(5-30)

<400> 192

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Lys Ala Met Asp Lys Ile His Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys Lys Asn Asp Trp

20 25 30

<210> 193

<211> 35

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(35)

<223> GIP(5-30)

<400> 193

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Lys Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys Lys Asn Asp Trp

20 25 30

Lys His Asn

35

<210> 194

<211> 38

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(38)

<223> GIP(5-30)

<400> 194

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Lys Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys Lys Asn Asp Trp

20 25 30

Lys His Asn Ile Thr Gln

35

<210> 195

<211> 27

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(27)

<223> GIP(5-30)

<400> 195

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Lys Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly

20 25

<210> 196

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(5-30)

<400> 196

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Lys Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys

20 25

<210> 197

<211> 30

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(30)

<223> GIP(5-30)

<400> 197

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Lys Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys Lys Asn

20 25 30

<210> 198

<211> 31

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(31)

<223> GIP(5-30)

<400> 198

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Lys Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys Lys Asn Asp

20 25 30

<210> 199

<211> 33

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(33)

<223> GIP(5-30)

<400> 199

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Lys Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys Lys Asn Asp Trp

20 25 30

Lys

<210> 200

<211> 34

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(34)

<223> GIP(5-30)

<400> 200

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Lys Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys Lys Asn Asp Trp

20 25 30

Lys His

<210> 201

<211> 36

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(36)

<223> GIP(5-30)

<400> 201

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Lys Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys Lys Asn Asp Trp

20 25 30

Lys His Asn Ile

35

<210> 202

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223> GIP(5-30)

<400> 202

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Lys Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys Lys Asn Asp Trp

20 25 30

Lys His Asn Ile Thr

35

<210> 203

<211> 35

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (35)..(35)

<223> АМИДИРОВАНИЕ

<400> 203

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Lys Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly Ala Pro

20 25 30

Pro Pro Ser

35

<210> 204

<211> 32

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(32)

<223> GIP(5-30)

<400> 204

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Lys Ile Ala Met Asp Arg Ile His Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Arg Gly Arg Arg Asn Asp Trp

20 25 30

<210> 205

<211> 36

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(36)

<223> GIP(5-30)

<400> 205

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Lys Ile Ala Met Asp Arg Ile His Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Arg Gly Pro Ser Ser Gly Ala

20 25 30

Pro Pro Pro Ser

35

<210> 206

<211> 32

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(32)

<223> GIP(5-30)

<400> 206

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys Lys Asn Asp Trp

20 25 30

<210> 207

<211> 36

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (36)..(36)

<223> АМИДИРОВАНИЕ

<400> 207

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Lys Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Pro Ser Ser Gly Ala

20 25 30

Pro Pro Pro Ser

35

<210> 208

<211> 35

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(35)

<223> GIP(5-30)

<400> 208

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Lys Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser Ser Gly Ala Pro

20 25 30

Pro Pro Ser

35

<210> 209

<211> 32

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(32)

<223> GIP(5-30)

<400> 209

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln Lys

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys Lys Asn Asp Trp

20 25 30

<210> 210

<211> 32

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(32)

<223> GIP(5-30)

<400> 210

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Lys Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys Lys Asn Asp Trp

20 25 30

<210> 211

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(28)

<223> GIP(5-30)

<400> 211

Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys Gln Gln Asp

1 5 10 15

Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys Lys

20 25

<210> 212

<211> 31

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(31)

<223> GIP(5-30)

<400> 212

Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys Gln Gln Asp

1 5 10 15

Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys Lys Asn Asp Trp

20 25 30

<210> 213

<211> 34

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(34)

<223> GIP(5-30)

<400> 213

Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys Gln Gln Asp

1 5 10 15

Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys Lys Asn Asp Trp Lys

20 25 30

His Asn

<210> 214

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223> GIP(5-30)

<400> 214

Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys Gln Gln Asp

1 5 10 15

Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys Lys Asn Asp Trp Lys

20 25 30

His Asn Ile Thr Gln

35

<210> 215

<211> 35

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(35)

<223> GIP(5-30)

<400> 215

Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys Gln Gln Asp

1 5 10 15

Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro

20 25 30

Pro Pro Ser

35

<210> 216

<211> 35

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (35)..(35)

<223> АМИДИРОВАНИЕ

<400> 216

Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Lys Ile Ala Met Asp Lys Ile His Gln Gln

1 5 10 15

Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gly Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro

20 25 30

Pro Pro Ser

35

<210> 218

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223> GIP(3-30)

<400> 218

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Glu Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 219

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Nle

<400> 219

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Glu Gln Lys Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 220

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223> GIP(3-30)

<400> 220

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Leu Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Glu Gly Gly Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 221

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> пептид

<220>

<221> пептид

<222> (1)..(37)

<223> GIP(3-30)

<400> 221

Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys Ile Lys

1 5 10 15

Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Glu Gly Gly Pro Ser Ser Gly

20 25 30

Ala Pro Pro Pro Ser

35

<---

Claims

1. Аналог глюкозозависимого инсулинотропного пептида (GIP), состоящий из аминокислотной последовательности:

3 - 4 - 5 - 6 - 7- 8 - 9 - 10 - 11 - 12 - 13 - 14 - 15 - 16

E - G - T - F - I - S - E - Y - S - I - A - L/Nle - E - K

17 - 18 - 19 - 20 - 21 - 22 - 23 - 24 - 25 -26 -27 - 28 - 29 - 30

I - K - Q - Q - E - F - V - E - W - L - L - A - Q - K - Z,

или его функциональный вариант, при этом указанный вариант имеет 1 или 2 отдельных аминокислотных замещений в любой аминокислоте указанной аминокислотной последовательности,

при этом, по меньшей мере, одна молекула жирной кислоты присоединяется напрямую или через линкер к аминокислотному остатку в положении 18 указанной аминокислотной последовательности или его указанного функционального варианта,

при этом Z представляет собой пептид, включающий один или несколько последовательных аминокислотных остатков GIP(31-42) (GKKNDWKHNITQ; SEQ ID NO: 2) или один или несколько последовательных аминокислотных остатков эксендина-4 (HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS; SEQ ID NO: 3), и

причем указанный аналог GIP представляет собой антагонист GIPR.

2. Аналог GIP по п.1, отличающийся тем, что

указанный аналог GIP ингибирует активность GIPR по меньшей мере на 80%, при этом ингибирование активности GIPR определяется как снижение внутриклеточного cAMP, и/или

указанный аналог GIP обладает антагонистической эффективностью в отношении GIPR, соответствующей значению IC₅₀ 50 нМ или менее чем 50 нМ.

3. Аналог GIP по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что указанное 1 или 2 отдельных аминокислотных замещений выбраны из группы, состоящей из:

аминокислота в положении 11 выбрана из S, K, Orn и A;

аминокислота в положении 12 выбрана из I, K, Orn и 2-аминоизомасляной кислоты (Aib);

аминокислота в положении 13 выбрана из A и Aib;

аминокислота в положении 16 выбрана из K и R;

аминокислота в положении 17 выбрана из I, Orn и K;

аминокислота в положении 18 выбрана из K и Orn;

аминокислота в положении 20 выбрана из Q, Orn и K;

аминокислота в положении 28 выбрана из A и E;

аминокислота в положении 29 выбрана из Q и G; и

аминокислота в положении 30 выбрана из K, R, G и A.

4. Аналог GIP по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что указанный функциональный вариант имеет 1 отдельное аминокислотное замещение в любом аминокислотном остатке указанной аминокислотной последовательности и/или указанный функциональный вариант имеет 2 отдельных аминокислотных замещения в любом аминокислотном остатке указанной аминокислотной последовательности, при этом указанные замещения представляют собой консервативные аминокислотные замещения.

5. Аналог GIP по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что Z состоит из одного или нескольких последовательных аминокислотных остатков GIP(31-42) (SEQ ID NO: 2), и/или

Z состоит из одного или нескольких последовательных аминокислотных остатков эксендина-4 (SEQ ID NO: 3), и/или

Z состоит из одного или нескольких последовательных аминокислотных остатков C- конца эксендина-4(30-39) (PSSGAPPPS; SEQ ID NO: 4), и/или

Z состоит из одного или нескольких последовательных аминокислотных остатков C- конца эксендина-4(29-39) (GPSSGAPPPS; SEQ ID NO: 5).

6. Аналог GIP по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что Z представляет собой пептид, выбранный из группы, состоящей из

- глицина или пролина,

- GP, GPS, GPSS (SEQ ID NO: 6), GPSSG (SEQ ID NO: 7), GPSSGA (SEQ ID NO: 8), GPSSGAP (SEQ ID NO: 9), GPSSGAPP (SEQ ID NO: 10), GPSSGAPPP (SEQ ID NO: 11) и GPSSGAPPPS (SEQ ID NO: 5),

- PS, PSS, PSSG (SEQ ID NO: 12), PSSGA (SEQ ID NO: 13), PSSGAP (SEQ ID NO: 14), PSSGAPP (SEQ ID NO: 15), PSSGAPPP (SEQ ID NO: 16) и PSSGAPPPS (SEQ ID NO: 4),

GK, GKK, GKKN (SEQ ID NO: 17), GKKND (SEQ ID NO: 18), GKKNDW (SEQ ID NO: 19), GRKNDW (SEQ ID NO: 20), GKRNDW (SEQ ID NO: 21), GRRNDW (SEQ ID NO: 22), GKKNDWK (SEQ ID NO: 23), GKKNDWKH (SEQ ID NO: 24), GKKNDWKHN (SEQ ID NO: 25), GKKNDWKHNI (SEQ ID NO: 26), GKKNDWKHNIT (SEQ ID NO: 27) и GKKNDWKHNITQ (SEQ ID NO: 2),

- GPSSGA (SEQ ID NO: 8), GPSSGAP (SEQ ID NO: 9), GPSSGAPP (SEQ ID NO: 10), GPSSGAPPP (SEQ ID NO: 11), GPSSGAPPPS (SEQ ID NO: 5), GKKNDW (SEQ ID NO: 19), GKKKDW (SEQ ID NO: 28), GKKNDK (SEQ ID NO: 29), GRKNDW (SEQ ID NO: 20), GKRNDW (SEQ ID NO: 21), GRRNDW (SEQ ID NO: 22), GKKNDWK (SEQ ID NO: 23), GKKNDWKH (SEQ ID NO: 24), GKKNDWKHN (SEQ ID NO: 25), GKKNDWKHNI (SEQ ID NO: 26), GKKNDWKHNIT (SEQ ID NO: 27) и GKKNDWKHNITQ (SEQ ID NO: 2), или их варианта, включающего 1 или 2 отдельных аминокислотных замещения в любом одном аминокислотном остатке, или

- PSSG (SEQ ID NO: 12), PSSGA (SEQ ID NO: 13), PSSGAP (SEQ ID NO: 14), PSSGAPP (SEQ ID NO: 15), PSSGAPPP (SEQ ID NO: 16) и PSSGAPPPS (SEQ ID NO: 4),

или их вариант, включающий 1 или 2 отдельных аминокислотных замещения в любом одном аминокислотном остатке.

7. Аналог GIP по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что молекула жирной кислоты присоединена к аминогруппе боковой цепи аминокислотного остатка в положении 18 указанной аминокислотной последовательности.

8. Аналог GIP по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что указанный аналог GIP имеет аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:

EGTFISEYSIAMEKIKQQEFVQWLLAQK-Z; SEQ ID NO: 50; GIP(3-30) [D9E;D15E;H18K;D21E;N24Q],

EGTFISEYSAibANleEKIKQQDFVEWLLAQK-Z; SEQ ID NO: 52; GIP(3-30) [D9E;I12Aib;M14Nle;D15E;H18K;N24E],

EGTFISEYSIAibMEKIKQQDFVEWLLAQK-Z; SEQ ID NO: 53; GIP(3-30) [D9E;A13Aib;D15E;H18K;N24E],

EGTFISDYSIAibLDKIKQQDFVEWLLAQK-Z; SEQ ID NO: 74; GIP(3-30) [A13Aib;M14L;H18K;N24E],

EGTFISDYSIAibNleDKIKQQDFVEWLLAQK-Z; SEQ ID NO: 75; GIP(3-30) [A13Aib;M14Nle;H18K;N24E],

EGTFISEYSIAibLEKIKQQEFVEWLLAQK-Z; SEQ ID NO: 81; GIP(3-30) [D9E;A13Aib;M14L;D15E;H18K;D21E;N24E],

EGTFISEYSIAibNleEKIKQQEFVEWLLAQK-Z; SEQ ID NO: 82; GIP(3-30) [D9E;A13Aib;M14Nle;D15E;H18K;D21E;N24E],

EGTFISEYSIALEKIKQQEFVEWLLAQK-Z; SEQ ID NO: 87; GIP(3-30) [D9E;M14L;D15E;H18K;D21E;N24E], и

EGTFISEYSIANleEKIKQQEFVEWLLAQK-Z; SEQ ID NO: 88; GIP(3-30) [D9E;M14Nle;D15E;H18K;D21E;N24E], или

их функциональный вариант, имеющий 1 или 2 отдельных аминокислотных замещения.

9. Аналог GIP по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что указанная молекула жирной кислоты представляет собой жирную кислоту с прямой цепью или с разветвленной цепью.

10. Аналог GIP по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что указанная молекула жирной кислоты представляет собой моноацильную молекулу жирной кислоты, включающую одну жирную кислоту или диацильную молекулу жирной кислоты и/или указанная молекула жирной кислоты включает ацильную группу формулы CH₃(CH₂)_nCO-, при этом n представляет собой целое число от 4 до 24, и/или указанная молекула жирной кислоты включает ацильную группу, выбранную из группы, состоящей из HOOC(CH₂)₁₄CO-, HOOC(CH₂)₁₆CO-, HOOC(CH₂)₁₈CO- и HOOC(CH₂)₂₀CO-.

11. Аналог GIP по п.10, отличающийся тем, что указанный линкер включает одну или несколько частей, по отдельности выбранных из группы, состоящей из:

a. α-аминокислоты, γ-аминокислоты или ω-аминокислоты,

d. [8-амино-3,6-диоксаоктановой кислоты]_n(AEEAc_n), где n представляет собой целое число от 1 до 50, например, целое число в диапазоне 1-4, 1-3 или 1-2.

12. Аналог GIP по любому из предыдущих пунктов, выбранный из группы, состоящей из:

EGTFISEYSIAMEKIKQQEFVQWLLAQKPSSGAPPPS-C₁₆-диацид; SEQ ID NO: 141, GIP(3-30)+Cex(31-39) [CexD9E;D15E;H18K;D21E;N24Q], EGTFISEYSIAMEKIKQQDFVEWLLAQKPSSGAPPPS-C₁₆-диацид; SEQ ID NO: 142, GIP(3-30)+Cex(31-39) [D9E;D15E;H18K;N24E], EGTFISEYSAibANleEKIKQQDFVEWLLAQKPSSGAPPPS-C₁₆-диацид/18K; SEQ ID NO: 143, GIP(3-30)+Cex(31-39) [D9E;I12Aib;M14Nle;D15E;H18K;N24E],

EGTFISEYSIAibMEKIKQQDFVEWLLAQKPSSGAPPPS-C₁₆-диацид/18K; SEQ ID NO: 144, GIP(3-30)+Cex(31-39) [D9E;A13Aib;D15E;H18K;N24E],

EGTFISEYSIAibLEKIKQQEFVEWLLAQKPSSGAPPPS-C₁₆-диацид/18K; SEQ ID NO: 174, GIP(3-30)+Cex(31-39) [D9E;A13Aib;M14L;D15E;H18K;D21E;N24E],

EGTFISEYSIAibLEKIKQQEFVEWLLAQKPSSGAPPPS-2xAEEAc+yGlu-C₁₈-диацид/18K; SEQ ID NO: 174, GIP(3-30)+Cex(31-39) [D9E;A13Aib;M14L;D15E;H18K;D21E;N24E],

EGTFISEYSIAibNleEKIKQQEFVEWLLAQKPSSGAPPPS-C₁₆-диацид/18K; SEQ ID NO: 175, GIP(3-30)+Cex(31-39) [D9E;A13Aib;M14Nle;D15E;H18K;D21E;N24E],

EGTFISEYSIAibNleEKIKQQEFVEWLLAQKPSSGAPPPS-2xAEEAc+yGlu-C₁₈-диацид/18K; SEQ ID NO: 175, GIP(3-30)+Cex(31-39) [D9E;A13Aib;M14Nle;D15E;H18K;D21E;N24E],

EGTFISEYSIALEKIKQQEFVEWLLAQKPSSGAPPPS-2xAEEAc+yGlu-C₁₈-диацид/18K; SEQ ID NO: 180, GIP(3-30)+Cex(31-39) [D9E;M14L;D15E;H18K;D21E;N24E], и

EGTFISEYSIANleEKIKQQEFVEWLLAQKPSSGAPPPS-2xAEEAc+yGlu-C₁₈-диацид/18K; SEQ ID NO: 181, GIP(3-30)+Cex(31-39) [D9E;M14Nle;D15E;H18K;D21E;N24E], или

13. Аналог GIP по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что указанный пептид является амидированным по C-концу (-NH₂) и/или карбоксилированным по C-концу (-COOH).

14. Применение аналога GIP по любому из предыдущих пунктов для ингибирования или снижения одного или нескольких из

i) индуцированного GIP секретирования глюкагона,

ii) индуцированного GIP секретирования инсулина,

iii) индуцированного GIP секретирования соматостатина,

iv) индуцированного GIP поглощения глюкозы,

v) индуцированного GIP синтеза жирных кислот и/или встраивания жирных кислот,

vi) высокой или повышенной экспрессии или активности GIPR,

vii) высвобождения GIP после приема пищи,

viii) сывороточных уровней свободных жирных кислот и/или триглицеридов,

ix) индуцированного GIP повышения аппетита,

x) индуцированного GIP снижения энергозатрат,

xi) индуцированного GIP повышения абсорбции питательных веществ в кишечнике,

xii) индуцированного GIP снижения эффекта GLP-1 в плане снижения аппетита,

xiii) индуцированной GIP резистентности к лептину.

15. Применение аналога GIP по любому из предыдущих пунктов для лечения состояния, связанного с высокими уровнями GIP, выбранного из группы, состоящей из метаболического синдрома, ожирения, преддиабета, диабета I типа, диабета II типа, резистентности к инсулину, повышенного уровня глюкозы натощак, гипергликемии, повышенного уровня триглицеридов в сыворотке крови натощак, низкого уровня липопротеинов очень низкой плотности (VLDL), низкого уровня липопротеинов высокой плотности (HDL), дислипидемии, повышенных/пониженных липопротеинов низкой плотности (LDL), высокого уровня холестерина, аномального отложения липидов, сердечно-сосудистого заболевания, повышенного артериального давления и атеросклероза.