RU2809223C1 - Штамм "O N 2241/Эфиопия/2011" вируса ящура Aphtae epizooticae генотипа О/ЕА-3 для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура - Google Patents
Штамм "O N 2241/Эфиопия/2011" вируса ящура Aphtae epizooticae генотипа О/ЕА-3 для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура Download PDFInfo
- Publication number
- RU2809223C1 RU2809223C1 RU2023117625A RU2023117625A RU2809223C1 RU 2809223 C1 RU2809223 C1 RU 2809223C1 RU 2023117625 A RU2023117625 A RU 2023117625A RU 2023117625 A RU2023117625 A RU 2023117625A RU 2809223 C1 RU2809223 C1 RU 2809223C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- foot
- mouth disease
- strain
- disease virus
- ethiopia
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims abstract description 9
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 title claims abstract description 7
- 241000700605 Viruses Species 0.000 title description 18
- 241000710198 Foot-and-mouth disease virus Species 0.000 claims abstract description 109
- 244000037640 animal pathogen Species 0.000 claims abstract description 3
- 208000007212 Foot-and-Mouth Disease Diseases 0.000 claims description 22
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 abstract description 24
- 239000000725 suspension Substances 0.000 abstract description 15
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 abstract description 14
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 abstract description 9
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 abstract description 9
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 abstract description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 241000699673 Mesocricetus auratus Species 0.000 abstract description 4
- 241000710189 Aphthovirus Species 0.000 abstract description 3
- 241000709664 Picornaviridae Species 0.000 abstract description 3
- 241001250090 Capra ibex Species 0.000 abstract description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 abstract 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 abstract 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 19
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 15
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 12
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 11
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 11
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 11
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 description 8
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 8
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 7
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 7
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 6
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 4
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 4
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 3
- 101710140501 Sulfate adenylyltransferase subunit 2 1 Proteins 0.000 description 3
- 101710173681 Sulfate adenylyltransferase subunit 2 2 Proteins 0.000 description 3
- 102100030100 Sulfate anion transporter 1 Human genes 0.000 description 3
- 101710144481 Sulfate anion transporter 1 Proteins 0.000 description 3
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 3
- 208000002399 aphthous stomatitis Diseases 0.000 description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 238000004264 monolayer culture Methods 0.000 description 3
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 3
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 3
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 3
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 3
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001573881 Corolla Species 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 2
- 241001493546 Suina Species 0.000 description 2
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 2
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 2
- 210000000003 hoof Anatomy 0.000 description 2
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100031974 CMP-N-acetylneuraminate-beta-galactosamide-alpha-2,3-sialyltransferase 4 Human genes 0.000 description 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 1
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 1
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 1
- 108010006464 Hemolysin Proteins Proteins 0.000 description 1
- 101000703754 Homo sapiens CMP-N-acetylneuraminate-beta-galactosamide-alpha-2,3-sialyltransferase 4 Proteins 0.000 description 1
- 102000004407 Lactalbumin Human genes 0.000 description 1
- 108090000942 Lactalbumin Proteins 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241001144416 Picornavirales Species 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 238000002306 biochemical method Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- BTWUORFYKAZQHW-UHFFFAOYSA-L disodium;2-hydroxy-3-[4-[4-[(2-hydroxy-3-sulfonatopropyl)amino]-3-methylphenyl]-2-methylanilino]propane-1-sulfonate Chemical compound [Na+].[Na+].C1=C(NCC(O)CS([O-])(=O)=O)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(NCC(O)CS([O-])(=O)=O)=CC=2)=C1 BTWUORFYKAZQHW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000003228 hemolysin Substances 0.000 description 1
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 1
- 230000008004 immune attack Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 244000309711 non-enveloped viruses Species 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000000601 reactogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000029610 recognition of host Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 238000009281 ultraviolet germicidal irradiation Methods 0.000 description 1
- 210000001364 upper extremity Anatomy 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии и касается нового штамма вируса ящура Aphtae epizooticae генотипа О/ЕА-3 семейства Picornaviridae рода Aphthovirus, депонированного во Всероссийской государственной коллекции экзотических типов вируса ящура и других патогенов животных (ГКШМ) ФГБУ «ВНИИЗЖ» под регистрационным номером №481 - деп/23-31 - ГКШМ ФГБУ «ВНИИЗЖ» штамм «О №2241/Эфиопия/2011» генотипа О/ЕА-3 вируса ящура. Представленный штамм репродуцируется в перевиваемых культурах клеток почки сибирского горного козерога (ПСГК-30), почки свиньи (IB-RS-2), почки новорожденного сирийского хомячка (ВНК-21). В перевиваемой суспензионной культуре клеток почки сирийского хомячка ВНК-21/SUSP/ARRIAH в течение 10,30±0,42 часов инкубирования концентрация 146S компонента штамма «О №2241/Эфиопия/2011» генотипа О/ЕА-3 вируса ящура имеет средние значения 1,69±0,12 мкг/см3 (68,40±1,00%), сохраняя исходные характеристики при пассировании в перевиваемой суспензионной клеточной линии ВНК-21/SUSP/ARRI АН. Представленный штамм «О №2241/Эфиопия/2011» может быть использован для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура генотипа О/ЕА-3 и для контроля антигенной активности противоящурных вакцин. 1 ил., 3 табл., 5 пр.
Description
Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии, может быть использовано для разработки и изготовления средств диагностики, специфической профилактики ящура генотипа О/ЕА-3 и контроля антигенной и иммуногенной активности противоящурных вакцин.
Ящур является самым контагиозным заболеванием млекопитающих животных и обладает большим потенциалом в плане нанесения серьезных экономических потерь у восприимчивых парнокопытных животных [1].
Возбудитель данного заболевания - безоболочечный вирус, который относится к семейству Picornaviridae, роду Aphthovirus. Выделяют 7 следующих серотипов вируса ящура, которые значительно отличаются друг от друга по аминокислотному составу белков: О, А, Азия-1, С и SAT-1, SAT-2, SAT-3, причем самым распространенным является тип О [2]. Геном вируса ящура представлен одноцепочечной молекулой РНК (ssRNA(+)) положительной полярности с длиной около 8400-8500 и.о., кодирует 4 структурных белка: VP1, VP2, VP3, VP4 и множество неструктурных протеинов [2].
Каждый серотип генетически разделен на различные топотипы, генетические линии и сублинии (для некоторых штаммов ограничиваются только топотипом) [1, 2, 3].
Анализ базы данных последовательностей генов вируса ящура GenBank показал, что, помимо точечных мутаций, важную роль в эволюции РНК-вирусов играет рекомбинация. Ген 1D (кодирует белок VP1) имеет самую высокую генетическую изменчивость в геноме возбудителя ящура и поэтому обычно используется для молекулярного типирования его изолятов/штаммов [3].
Штаммы, которые находятся в пределах одной клады и имеют > 95% сходства аминокислотной последовательности в белке VP1, считаются принадлежащими к одному и тому же генотипу [4].
Белок VP1 вируса ящура является наиболее вариабельным, поскольку на него приходится около 90% мутаций всех структурных генов. Самыми вариабельными областями являются участки 40-60, 130-160 и 190-213 а.о. [3, 4]. Участок поверхностного белка VP1 в регионе 130-160 а.о. отличается высокой изменчивостью, поскольку участвует в распознавании рецепторов клетки-хозяина [4, 5].
Изменения в поверхностных белках вируса ящура возникают из-за аминокислотных мутаций, которые изменяют распознавание вирусных белков иммунной системой организма. Поверхностно открытые структуры вируса особенно подвержены иммунной атаке. Процесс появления новых антигенных форм определяется сложным взаимодействием поверхностных вирусных белков и факторов клеток-хозяев [5,6].
Серотип О вируса ящура является наиболее изученным и распространенным во всем мире. Данный серотип разделен на 11 топотипов: EAST AFRICA 1 - 4 (Восточная Африка) (ЕА-1-4), SOUTHEAST ASIA (Юго-Восточная Азия) (SEA), EUROPE-SOUTH AMERICA (Европа-Южная Америка) (EURO-SA), INDONESIA-1 и 2 (Индонезия-1 и 2) (ISA-1 and -2), CATHAY (Китай), MIDDLE EAST-SOUTH ASIA (ME-SA) (Ближний Восток-Южная Азия) и WEST AFRICA (Западная Африка) (WA). Такое генетическое и антигенное разнообразие приводит к проблемам в специфической профилактике ящура при применении культуральных инактивированных противоящурных вакцин, а также затрудняет штаммоспецифическую диагностику выделенных изолятов вируса ящура. В результате возникает необходимость создания новых средств диагностики и специфической иммунопрофилактики в отношении вируса ящура серотипа О и, в частности, генотипа О/ЕА-3, представители которого стали распространяться на территории Восточной Африки и за ее пределами. Следует отметить, что при усилении торгово-экономических связей со странами Африканского континента, возникают риски заноса изолятов данного генотипа на территорию Российской Федерации.
Анализируя вспышки, которые регистрировались на территории Африки, обнаружено, что в Эритрее в 2012 и 2019 гг.были выявлены изоляты вируса ящура, которые принадлежат к генотипу О/ЕА-3, в Эфиопии - в 2019, 2020, 2021, 2022 гг.(данных по 2023 г. в настоящее время не предоставлены), в Южном Судане - в 2017 и 2018 гг., в Судане - в 2016, 2017 и 2020 гг.Таким образом, в странах Африки эпизоотическая ситуация по ящура генотипа О/ЕА-3 в последние годы является напряженной. Данный генотип значительно отличается от других генотипов, принадлежащих серотипу О. Требуется проводить исследования штамма данного генотипа для создания средств диагностики и специфической профилактики ящура генотипа О/ЕА-3.
Известны производственные штаммы вируса ящура серотипа О, которые применяются для производства средств специфической профилактики ящура:
- штамм «О/Тайвань/1997» (генотип O/CATHAY/CAM 94),
- штамм «О/Приморский/2014» (генотип O/SEA/Mya-98),
- штамм «О/Приморский/2012» (генотип O/ME-SA/PanAsia),
- штамм «О/Саудовская Аравия/2008» (генотип 0/ME-SA/PanAsia2),
- штамм «О/Оренбургский/2021» (генотип O/ME-SA/Ind-2001e).
Изолят «О/ЕНТ/2/2011» вируса ящура был выделен от свиньи на территории Федеративной Демократической Республики Эфиопия в населенном пункте Дебре Зейт (Бишофту) в районе Восточная Шева в 2011 году и в 2023 году поступил в ФГБУ «ВНИИЗЖ» из Всемирной справочной лаборатории института Пирбрайта (the World Reference Laboratory for Foot-and-Mouth Disease, the Pirbright institute, Великобритания) для проведения научных исследований.
При проведении научных исследований в ФГБУ «ВНИИЗЖ» был охарактеризован и получил название - штамм «О №2241/Эфиопия/2011».
По результатам сравнительного анализа нуклеотидных последовательностей выделенный штамм принадлежит к генотипу О/ЕА-3 вируса ящура, который значительно отличается от производственных штаммов вируса ящура серотипа О.
Настоящее изобретение позволяет расширить арсенал производственных штаммов вируса ящура серотипа О, обладающих высокой инфекционной, антигенной и иммуногенной активностью в нативном виде, пригодный для контроля антигенной и иммуногенной активности вакцин, изготовления чувствительных и высокоспецифичных диагностических тест-систем и высоко иммуногенных вакцинных препаратов путем получения штамма «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура генотипа О/ЕА-3.
Штамм вируса ящура «О №2241/Эфиопия/2011» депонирован во Всероссийской государственной коллекции экзотических типов вирусов ящура и других патогенов животных (ГКШМ) ФГБУ «ВНИИЗЖ», под регистрационным номером: №481 - деп / 23-31 - ГКШМ ФГБУ «ВНИИЗЖ».
Экспериментально подтверждена возможность использования штамма «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура для изготовления средств диагностики и профилактики ящура генотипа О/ЕА-3.
Сущность изобретения отражена на графическом изображении:
Фиг. 1. - Дендрограмма, отражающая филогенетическое взаимоотношение штамма «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура с эпизоотическими штаммами серологического типа О. Дендрограмма основана на сравнении полных нуклеотидных последовательностей гена VP1.
Сущность изобретения пояснена следующими перечнями последовательностей:
SEQ ID NO: 1 представляет последовательность нуклеотидов гена белка VP1 штамма «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура генотипа О/ЕА-3; SEQ ID NO: 2 представляет последовательность аминокислот гена белка VP1 штамма «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура генотипа О/ЕА-3.
Штамм «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура характеризуется следующими признаками и свойствами. Морфологические признаки
Штамм «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура серотипа О относится к отряду Picornavirales, семейству Picornaviridae, роду Aphthovirus, виду Foot-and-Mouth Disease virus и обладает морфологическими признаками, характерными для возбудителя ящура: форма вириона иксаэдрическая, размер 24 нм. Вирион состоит из молекулы одноцепочечной положительно заряженной молекулы РНК и 60 копий полипептида, каждый из которых представлен белками VP4, VP2, VP3, VP1
Антигенные свойства
По антигенным свойствам штамм «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура относится к серотипу О. Вирус стабильно нейтрализуется гомологичной антисывороткой. У переболевших животных в сыворотке крови образуются типоспецифические антитела, выявляемые в иммуноферментном анализе (ИФА) и реакции микронейтрализации (РМН).
Методом нуклеотидного секвенирования была определена первичная структура ID-гена белка VP1 штамма «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура. Сравнительный анализ нуклеотидных последовательностей показал, что штамм «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура принадлежит к генотипу О/ЕА-3 (Фиг. 1).
Антигенное родство (r1) штамма «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура изучено в РМН, в перекрестном исследовании штамма со специфическими сыворотками, полученными на следующие производственные штаммы вируса ящура:
- штамм «О/Тайвань/1997» (генотип 0/CATHAY/CAM 94),
- штамм «О/Приморский/2014» (генотип O/SEA/Mya-98),
- штамм «О/Приморский/2012» (генотип O/ME-SA/PanAsia),
- штамм «О/Саудовская Аравия/2008» (генотип 0/ME-SA/PanAsia2),
- штамм «О/Оренбургский/2021» (генотип O/ME-SA/Ind-2001e).
Титр референтных сывороток крови КРС, полученных путем иммунизации животных моновалентными вакцинами из производственных штаммов вируса ящура серотипа О, против 102 ТЦД50 гомологичного и гетерологичного вируса определяли в РМН при перекрестном титровании, рассчитывая значения с использованием уравнения линейной регрессии, и выражали в lg. Значение r1 определяли, как антилогарифм разности lg титров сыворотки против гетерологичного и гомологичного вируса [7, 8, 9].
Значение r1 в РМН интерпретировали следующим образом: при ≥ 0,3 -исследуемый и производственный штаммы вируса ящура являются родственными; при < 0,3 - исследуемый образец штамма вируса ящура значительно отличается от производственного штамма. Максимальное родство отмечается при значении r1 в РМН, стремящимся к 1,0.
Показатели антигенного родства при изучении штамма «О №2241/Эфиопия/2011» составили r1 от 0,05 до 0,19, что свидетельствует об отсутствии явного антигенного родства с производственными штаммами вируса ящура серотипа О, а именно для штамма «О/Тайвань/1997» - 0,05, штамма «О/Приморский/2014» - 0,10, штамма «О/Приморский/2012» - 0,14, штамма «О/Саудовская Аравия/2008» - 0,12, штамма «О/Оренбургский/2021» - 0,19.
Полученные данные свидетельствуют об отсутствии антигенного родства с производственными штаммами вируса ящура серотипа О.
Гено- и хемотаксономическая характеристики
Штамм «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура является РНК(+) -содержащим вирусом с молекулярной массой 8,08×106 Д. Нуклеиновая кислота представлена одноцепочной линейной молекулой молекулярной массой 2,8×106 Д. Вирион имеет белковую оболочку, состоящую из четырех основных белков VP1, VP2, VP3 и VP4. Липопротеидная оболочка отсутствует.
Основным антигенным белком является VP1. В вирионе содержится приблизительно 31,5% РНК и 68,5% белка. Вирусная РНК является инфекционной и участвует в образовании белков-предшественников в инфицированных клетках. Предшественники, в свою очередь, расщепляются с образованием более стабильных структурных и неструктурных полипептидов вируса.
Физические свойства
Масса вириона составляет 8,4×10-18 г. Плавучая плотность 1,46 г/см3.
Устойчивость к внешним факторам
Штамм «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура устойчив к эфиру, хлороформу, и ацетону. Наиболее стабилен при рН 7,45-7,70. Сдвиги рН в кислую и сильно щелочную сторону ведут к инактивации вируса. Чувствителен к формальдегиду, УФ-облучению, у-облучению, высоким температурам (выше 38,4°С).
Дополнительные признаки и свойства
Реактогенность - реактогенными свойствами не обладает.
Патогенность - патогенен для парнокопытных животных.
Вирулентность - вирулентен для естественно-восприимчивых животных при контактном, аэрозольном и парентеральном заражении.
Стабильность - сохраняет исходные биологические свойства при пассировании в чувствительных биологических системах в течение 5 пассажей (срок наблюдения) на перевиваемых культурах.
Биотехнологические характеристики
Штамм «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура репродуцируется в перевиваемых культурах клеток: почки сибирского горного козерога (ПСГК-30), почки свиньи (IB-RS-2), почки сирийского хомячка (ВНК-21).
При испытании было проведено 5 последовательных пассажей штамма «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура в перевиваемых культурах клеток ПСГК-30, ВНК-21, IB-RS-2. Биологические свойства характеризовали путем определения инфекционной активности вируса каждого пассажа в перевиваемой клеточной линии IB-RS-2 и на естественно восприимчивых животных - крупном рогатом скоте (КРС) и свиньях.
Сущность предлагаемого изобретения пояснена примерами его исследования, которые не ограничивают объем изобретения.
Пример 1. Исследование биологических свойств штамма «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура при репродукции в монослойных перевиваемых клеточных линиях.
При исследовании штамма «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура с целью получения его однородной популяции, обладающей оптимальными биотехнологическими свойствами, использовали комплекс биологических, вирусологических и биохимических методов, предусмотренных методическими указаниями по выявлению и идентификации штаммов вируса ящура [7].
Биологические и вирусологические методы включали в себя метод выделения в клеточной линии и адаптацию вируса ящура к ним.
Выделение вируса ящура проводили в монослойных перевиваемых клеточных линиях ПСГК-30, IB-RS-2, ВНК-21 с последующей адаптацией в течение 5 последовательных пассажей. Культуры клеток выращивали в соответствующих питательных средах, в стационарных условиях во флаконах с площадью поверхности 25,0 см2, отмывали от ростовой среды и заражали 10%-ной суспензией афтозного материала (множественность заражения составляла 1-10 ТЦЦ50 на клетку), приготовленной в растворе Хэнкса с 0,5% гидролизата лактальбумина по стандартной рецептуре. Для удаления микрофлоры и балластных клеточных компонентов вирусную суспензию предварительно обрабатывали 10%-ным раствором хлороформа. После 30-минутного контакта вируса с клеточной культурой при температуре 37±0,5°С во флаконы вносили по 5,0 см3 поддерживающей среды и инкубировали при температуре 37±0,5°С до появления цитопатического действия (ЦПД) в культуре клеток, которое представлено в виде округления клеток, повышения их оптической плотности, дегенерации и отделении клеток от поверхности субстрата. При ЦПД не менее 90% клеток, флаконы подвергали замораживанию-оттаиванию, очистке клеточной взвеси хлороформом и центрифугированию при 3000 g в течение 15 мин. Полученный вируссодержащий материал использовали для последующих пассажей. Вирус считался адаптированным к культурам клеток, если в течение не менее 24 часов проявлялось 90-100% ЦПД в монослое клеточных культур. Адаптация эпизоотического изолята «О/ЕНТ/2/2011» к различным клеточным линиям наступала на уровне пятого пассажа. В результате был получен штамм «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура. Титр инфекционной активности определяли с помощью разработанной ранее методики [10].
Результаты адаптации штамма вируса ящура к различным клеточным культурам представлены в таблице 1, данные которой свидетельствуют о высокой адаптационной способности штамма «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура к использованным клеточным линиям. В монослойной культуре клеток ПСГК-30 за 13 ч получали вирусную суспензию с активностью в РСК 1:32 и титром инфекционной активности 7,40±0,05 lg ТЦД50/СМ3. В монослойной культуре клеток IB-RS-2 за 14 ч получали вирусную суспензию с активностью в РСК 1:32 и титром инфекционной активности 7,35±0,10 lg ТЦД50/СМ3. В монослойной культуре клеток ВНК-21 за 14 ч получали вирусную суспензию с активностью в РСК 1:32 и титром инфекционной активности 7,40±0,08 lg ТЦД50/СМ3. Каждое исследование и культивирование проводили 5 раз. В итоге получен штамм «О №2241/Эфиопия/2011» с охарактеризованными биологическими культуральными свойствами, который далее использовали для исследования его свойств.
Пример 2. Оценка биологических свойств штамма «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура на крупном рогатом скоте.
Заражение КРС исходным штаммом вируса ящура проводили интрадермолингвально (I пассаж). Адаптацию и наработку штамма «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура на КРС проводили в течение 2 последовательных пассажей. С целью определения титра инфекционной активности адаптированного штамма из афт на этапе 2 пассажа на КРС получали 10%-ную вирусную суспензию, из которой готовили последовательные 10-кратные разведения в 1/15 М фосфатно-солевом буферном растворе (ФСБР). Подготовленные разведения с 10-2 по 10-6 вводили интрадермолингвально в 4 точки по 0,1 см3 двум головам КРС. Учет результатов титрования на животных проводили спустя 24 ч по наличию афт на месте введения разведений вируса ящура штамма «О №2241/Эфиопия/2011». Титр инфекционной активности на КРС данного штамма вируса ящура на стадии первого пассажа на КРС составил 4,75 lg ИД50/0,1 см3, второго пассажа - 5,25 lg ИД50/ОД см3. Таким образом, была получена 10%-ная афтозная суспензия вируса ящура штамма «О №2241/Эфиопия/2011» (2 пассаж на КРС) с титром инфекционной активности 5,25 lg ИД,50/0,1 см3.
Пример 3. Оценка биологических свойств штамма «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура на свиньях.
Заражение свиней исходным штаммом «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура проводили внутрикожно на стадии первого пассажа в область венчика передних конечностей. Адаптацию и наработку штамма «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура на свиньях вели в течение 2 последовательных пассажей. С целью определения титра инфекционной активности адаптированного штамма из афт 2 пассажа на свиньях получали 10%-ную вирусную суспензию, из которой готовили последовательные 10-кратные разведения с использованием в качестве растворителя 1/15 М ФБР. Подготовленные разведения с 10-2 по 10-6 вводили внутрикожно в венчики копытец по 0,1 см3 в 4 точки на каждый палец конечности одного разведения, из расчета 1 разведение на 2 копытца 1 конечности каждому из 2 подопытных подсвинков.
Учет результатов титрования проводили через 24 ч по наличию афт на месте введения разведений. Титр инфекционной активности на свиньях для штамма «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура на свиньях на стадии первого пассажа составил 5,00 lg ИД50/0,1 см3, второго - 5,50 lg ИД50/0,1 см3.
Пример 4. Исследование биологических свойств штамма «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура при репродукции в перевиваемой суспензионной клеточной линии ВНК-21/SUSP/ARRIAH.
Штамм «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура репродуцировали в суспензионной перевиваемой культуре клеток из почки новорожденного сирийского хомячка ВНК-21 /SUSP/ARRIAH. В качестве поддерживающей среды использовали среду Игла, с добавлением ферментативного гидролизата мышц сухого, гидролизата белков крови сухого при рН среды 7,45-7,60. Клеточную линию заражали вирусом из расчета 0,005 ТЦД5о/клетка.
Культивирование штамма «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура осуществляли при температуре 37,0±0,2°С до достижения ЦПД вируса, соответствующего не менее 90%. Полученную вируссодержащую суспензию контролировали на стерильность и содержание 146S компонента и общего вирусного белка (ОВБ). Полученные суспензии были стерильными. Концентрация ОВБ в суспензии составляла 2,47±0,19 мкг/см3. Значения титра инфекционной активности вируса, а также процентное содержание 146S компонента штамма «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура отражены в таблице 2, из данных которой видно, что при средней концентрации клеток ВНК-21/SUSP/ARRIAH, равной 4,05±0,16 млн клеток/см3, дозе заражения 0,005 ТЦД50/клетку и продолжительности репродукции вируса 10,30±0,42 ч средний титр инфекционной активности возбудителя ящура был равен 9,39±0,15 lg ТЦД50/СМ3. Концентрацию 146S компонента вируса ящура определяли с помощью ранее разработанной методики [11]. Содержание данного компонента составило 68,40±1,00% (1,69±0,12 мкг/см3).
Пример 5. Оценка типовой специфичности и активности штамма «О №2241/Эфиопия/2017» вируса ящура
Оценку типовой специфичности и активности штамма «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура проводили в реакции связывания комплемента (РСК).
К полученному антигену штамма «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура, взятому в объеме 0,4 см3 в цельном виде и в разведениях 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64 добавляли по 0,1 см3 гомологичной и гетерологичных гипериммунных сывороток, полученных на вирус ящура в рабочем (удвоенном) титре и 0,1 см3 комплемента в рабочем разведении. Смесь выдерживали в водяной бане в течение 20 мин при температуре 37±0,2°С. Затем вносили по 0,2 см3 гемолитической системы и выдерживали 30 мин при температуре 37±0,2°С. Положительный результат реакции соответствовал 100%-ной задержке гемолиза эритроцитов барана («4 креста»). Параллельно проводили контрольные реакции без сыворотки, без комплемента и компонентов реакции.
В качестве реагентов в РСК использовали сыворотки ящурные типоспецифические гипериммунные морских свинок, полученные на производственные штаммы вируса ящура «А/Турция/06»,
«О №2241/Эфиопия/2011» {предлагаемое изобретение), «Азия-1/Таджикистан/2011», «SAT-1 №96/62», «SAT-2/SAU7/2000»,
«О/Оренбургский/2021», комплемент сухой для РСК, гемолизин (сыворотка гемолитическая), эритроциты барана 2% (взвесь на физиологическом растворе, рН=7,05-7,15). В качестве контроля использовали антигены вируса ящура штаммов «А/Турция/06», «О №2241/Эфиопия/2011»,
«Азия-1/Таджикистан/2011», «SAT-1 №96/62», «SAT-2/SAU7/2000», «О/Оренбургский/2021».
Результаты исследования отражены в таблице 3, из которой следует, что штамм «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура обладает выраженной типовой специфичностью, относится к вирусу ящура серотипа О и активен в РСК в разведении 1:32.
Источники информации, принятые во внимание при составлении описания изобретения к заявке на выдачу патента Российской Федерации на изобретение «Штамм «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура Aphtae epizooticae генотипа О/ЕА-3 для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура».
1. OIE. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals. 7th ed. Paris, 2018. - Ch. 3.1.8
2. Пономарев А.П., Узюмов В. Л. Вирус ящура: структура, биологические и физико-химические свойства. Владимир: Фолиант, 2006. - 250 с.
3. Alexandersen, S. The pathogenesis and diagnosis of foot and mouth disease / S. Alexsandersen, Z. Zhang, A.L. Donaldson // J. Compr. Pathol. - 2003. - V. 129.-P. 268-282.
4. Жильцова M.B. Биологические свойства эпизоотических изолятов вируса ящура типов А, О и Азия-1: Автореф... дис.кан. наук. - Владимир: 2008. -23 с.
5. Бурдов А.Н., Дудников А.И., Малярец П.В. и др. Ящур. / Под ред. А.Н. Бурдова. - М., Агропромиздат, 1990, 320 с.
6. Анализ эпизоотической ситуации по ящуру в России с 2010 г. по март 2019 г. / В. П. Семакина, Т. П. Акимова, В. А. Мищенко, А. К. Караулов // Ветеринария. - 2019. - №11. - С.16-20.
7. Методические рекомендации по выделению и идентификации штаммов вируса ящура /А. А. Гусев, В. М. Захаров, Ж. А. Шажко и др.; ФГУ «ВНИИЗЖ». - Владимир. 2002. - 31 с.
8. Методические рекомендации по определению антигенного соответствия между эпизоотическими изолятами и производственными штаммами вируса ящура в перекрестной реакции микронейтрализации /С.Р. Кременчугская, М. В. Жильцова, Т. К. Майорова; ФГБУ «ВНИИЗЖ». -Владимир, 2012. - 36 с.
9. Эпизоотологические особенности ящура типа А, вызванного гетерологичными штаммами вируса / А. В. Мищенко, В. А. Мищенко, В. В. Дрыгин [и др.] // Ветеринария. -2014. - №11. - С.20-24.
10. Патент №2674076 С1 Российская Федерация, МПК А61К 39/135 C12Q 1/68. Способ определения титра инфекционной активности вируса ящура в неинактивированном сырье для вакцины с применением метода обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции в режиме реального времени: №2017145889: заявл. 25.12.2017: опубл. 04.12.2018 / Д.А. Лозовой, Д.В. Михалишин [и др.]; заявитель Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" (ФГБУ "ВНИИЗЖ").
11. Патент №2712769 С1 Российская Федерация, МПК G01M 33/58, C12Q 1/68. Способ спектрометрического определения концентрации 146S частиц вируса ящура в неинактивированном сырье для вакцины по оценке количества молекул вирусной РНК, выделенной после иммунного захвата вирионов: №2019116272: заявл. 27.05.2019: опубл. 31.01.2020 / Д.А. Лозовой, Д.В. Михалишин [и др.]; заявитель Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" (ФГБУ "ВНИИЗЖ").
--->
<?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?>
<!DOCTYPE ST26SequenceListing PUBLIC "-//WIPO//DTD Sequence Listing
1.3//EN" "ST26SequenceListing_V1_3.dtd">
<ST26SequenceListing dtdVersion="V1_3" fileName="FMDV strain O
2241.xml new.xml" softwareName="WIPO Sequence"
softwareVersion="2.1.2" productionDate="2023-06-02">
<ApplicationIdentification>
<IPOfficeCode>RU</IPOfficeCode>
<ApplicationNumberText>0</ApplicationNumberText>
<FilingDate>2023-06-01</FilingDate>
</ApplicationIdentification>
<ApplicantFileReference>508</ApplicantFileReference>
<EarliestPriorityApplicationIdentification>
<IPOfficeCode>RU</IPOfficeCode>
<ApplicationNumberText>0</ApplicationNumberText>
<FilingDate>2023-06-01</FilingDate>
</EarliestPriorityApplicationIdentification>
<ApplicantName languageCode="ru">ФГБУ "Федеральный центр охраны
здоровья животных" (ФГБУ "ВНИИЗЖ")</ApplicantName>
<ApplicantNameLatin>FGBI "ARRIAH"</ApplicantNameLatin>
<InventorName languageCode="ru">Михалишин Дмитрий
Валерьевич</InventorName>
<InventorNameLatin>Doronin Maksim Igorevich </InventorNameLatin>
<InventionTitle languageCode="ru">Штамм «О № 2241/Эфиопия/2011»
вируса ящура Aphtae epizooticae генотипа O/EA-3 для изготовления
биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики
ящура</InventionTitle>
<SequenceTotalQuantity>2</SequenceTotalQuantity>
<SequenceData sequenceIDNumber="1">
<INSDSeq>
<INSDSeq_length>639</INSDSeq_length>
<INSDSeq_moltype>DNA</INSDSeq_moltype>
<INSDSeq_division>PAT</INSDSeq_division>
<INSDSeq_feature-table>
<INSDFeature>
<INSDFeature_key>source</INSDFeature_key>
<INSDFeature_location>1..639</INSDFeature_location>
<INSDFeature_quals>
<INSDQualifier>
<INSDQualifier_name>mol_type</INSDQualifier_name>
<INSDQualifier_value>genomic DNA</INSDQualifier_value>
</INSDQualifier>
<INSDQualifier id="q1">
<INSDQualifier_name>organism</INSDQualifier_name>
<INSDQualifier_value>FMDV</INSDQualifier_value>
</INSDQualifier>
</INSDFeature_quals>
</INSDFeature>
</INSDSeq_feature-table>
<INSDSeq_sequence>accacctccccaggcgaatcggccgaccctgtgactgccaccgtcgaaa
actacggcggtgagacacaggcccagaggcgccaacacacggacgtctcgttcattcttgacagatttgt
gaaggtaacaccaaaagaccaaatcaatgtgctggacttgatgcagacccctgctcacacgctggttgga
gcgctccttcgcactgccacttactacttcgcagatttagaagtggcggtgaaacacgaggggaacctca
catgggtccctaacggagcaccagaatcagctctggacaacaccaccaatccaacagcctaccacaaggc
accacttactagacttgccttgccctacacggcaccacaccgcgtgttggcaaccgtttacaacggaaac
tgcaagtatggtgagacgttggcgtccaacgtgaggggcgatctccaggtgttggcccagaaggcggcga
gaccgctgcccacctctttcaactacggcgccatcaaggctacgcgggtgactgaattgctttaccgcat
gaagagggctgaaacatactgcccacggcccctgttggccgttcacccaagcgaggccaggcacaagcag
aagatagtggcgcctgtgaagcaactcctg</INSDSeq_sequence>
</INSDSeq>
</SequenceData>
<SequenceData sequenceIDNumber="2">
<INSDSeq>
<INSDSeq_length>213</INSDSeq_length>
<INSDSeq_moltype>AA</INSDSeq_moltype>
<INSDSeq_division>PAT</INSDSeq_division>
<INSDSeq_feature-table>
<INSDFeature>
<INSDFeature_key>source</INSDFeature_key>
<INSDFeature_location>1..213</INSDFeature_location>
<INSDFeature_quals>
<INSDQualifier>
<INSDQualifier_name>mol_type</INSDQualifier_name>
<INSDQualifier_value>protein</INSDQualifier_value>
</INSDQualifier>
<INSDQualifier id="q2">
<INSDQualifier_name>organism</INSDQualifier_name>
<INSDQualifier_value>FMDV</INSDQualifier_value>
</INSDQualifier>
</INSDFeature_quals>
</INSDFeature>
</INSDSeq_feature-table>
<INSDSeq_sequence>TTSPGESADPVTATVENYGGETQAQRRQHTDVSFILDRFVKVTPKDQIN
VLDLMQTPAHTLVGALLRTATYYFADLEVAVKHEGNLTWVPNGAPESALDNTTNPTAYHKAPLTRLALPY
TAPHRVLATVYNGNCKYGETLASNVRGDLQVLAQKAARPLPTSFNYGAIKATRVTELLYRMKRAETYCPR
PLLAVHPSEARHKQKIVAPVKQLL</INSDSeq_sequence>
</INSDSeq>
</SequenceData>
</ST26SequenceListing>
<---
Claims (1)
- Штамм «О №2241/Эфиопия/2011» вируса ящура Aphtae epizooticae генотипа О/ЕА-3, депонированный во Всероссийской государственной коллекции экзотических типов вируса ящура и других патогенов животных (ГКШМ) ФГБУ «ВНИИЗЖ» под регистрационным номером №481 - деп/23-31 - ГКШМ ФГБУ «ВНИИЗЖ» для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура генотипа О/ЕА-3.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2809223C1 true RU2809223C1 (ru) | 2023-12-07 |
Family
ID=
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2793828C1 (ru) * | 2022-12-14 | 2023-04-06 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" (ФГБУ "ВНИИЗЖ") | Штамм "О/Кения/2017" вируса ящура Aphtae epizooticae генотипа O/EA-2 для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура генотипа O/EA-2 |
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2793828C1 (ru) * | 2022-12-14 | 2023-04-06 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" (ФГБУ "ВНИИЗЖ") | Штамм "О/Кения/2017" вируса ящура Aphtae epizooticae генотипа O/EA-2 для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура генотипа O/EA-2 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ЖИЛЬЦОВА M.B. Биологические свойства эпизоотических изолятов вируса ящура типов А, О и Азия-1, автореферат диссертации, Владимир, 2008, 23 с. ALEXANDERSEN S., The pathogenesis and diagnosis of foot and mouth disease, S. Alexsandersen, et al., J. Compr. Pathol., 2003., v. 129, p. 268-282. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Gebauer et al. | Rapid selection of genetic and antigenic variants of foot-and-mouth disease virus during persistence in cattle | |
| RU2809223C1 (ru) | Штамм "O N 2241/Эфиопия/2011" вируса ящура Aphtae epizooticae генотипа О/ЕА-3 для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура | |
| Brown | Stepping stones in foot-and-mouth research: a personal view | |
| RU2806606C1 (ru) | Штамм "О N 2620/Оренбургский/2021" вируса ящура Aphtae epizooticae генотипа O/ME-SA/Ind-2001e для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура | |
| RU2807038C1 (ru) | Штамм вируса ящура Aphtae epizooticae для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура генотипа SAT-1/X | |
| RU2793828C1 (ru) | Штамм "О/Кения/2017" вируса ящура Aphtae epizooticae генотипа O/EA-2 для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура генотипа O/EA-2 | |
| RU2808493C1 (ru) | Штамм вируса ящура Aphtae epizooticae для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура генотипа SAT-2/VII | |
| RU2804634C1 (ru) | Штамм "SAT-1/Кения/2017" вируса ящура Aphtae epizooticae для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура генотипа SAT-1/NWZ | |
| RU2799601C1 (ru) | Штамм А/Афганистан/2017 вируса ящура Aphtae epizooticae типа А для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа А | |
| RU2806602C1 (ru) | Штамм "SAT-2/Кения/19/2017" вируса ящура Aphtae epizooticae для изготовления средств диагностики и профилактики ящура генотипа SAT-2/IV | |
| CN113564132B (zh) | 柯萨奇病毒a16型毒株及其应用 | |
| RU2799606C1 (ru) | Штамм "SAT-1/Танзания/2012" вируса ящура Aphtae epizooticae генотипа SAT-1/I для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура генотипа SAT-1/I | |
| RU2799602C1 (ru) | Штамм А/Иран/2018 вируса ящура Aphtae epizooticae типа А для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа А | |
| RU2817257C1 (ru) | Штамм "SAT-2/XIV/2023" вируса ящура Aphtae epizooticae генотипа SAT-2/XIV для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура | |
| CN114921422A (zh) | 一种犬源猫细小病毒分离株及其应用 | |
| RU2817256C1 (ru) | Штамм А/Египет/EURO-SA/2022 вируса ящура Aphtae epizooticae для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура генотипа A/EURO-SA | |
| RU2810133C1 (ru) | Штамм "А/Танзания/2013" вируса ящура Aphtae epizooticae генотипа A/AFRICA/G-I для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура генотипа A/AFRICA/G-I | |
| RU2773659C1 (ru) | Штамм А 2205/G IV вируса ящура Aphtae epizooticae типа А для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа А | |
| CN115161291A (zh) | 一株猫细小病毒毒株及其应用 | |
| RU2817031C1 (ru) | Штамм "О N 2222/Тайвань/1/2012" вируса ящура Aphtae epizooticae для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура | |
| RU2811585C1 (ru) | Штамм "O/ARRIAH/Mya-98" вируса ящура Aphtae epizooticae для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура | |
| RU2816943C1 (ru) | Штамм "Азия-1/G-V/2006" вируса ящура Aphtae epizooticae генотипа Азия-1/G-V для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура | |
| RU2801950C1 (ru) | Штамм O N 2356/Пакистан/2018 вируса ящура Aphtae epizooticae генотипа O/ME-SA/PanAsia2ANT-10 для изготовления биопрепаратов для диагностики ящура | |
| RU2804875C1 (ru) | Вакцина против ящура генотипа SAT-2/VII из штамма "SAT-2/Eritrea/1998" культуральная инактивированная сорбированная | |
| RU2809219C1 (ru) | Вакцина против ящура генотипа SAT-1/NWZ культуральная инактивированная сорбированная |