RU2805207C1 - Pyrazole derivatives and their use - Google Patents

Abstract

FIELD: pharmaceutical chemistry.

SUBSTANCE: group of inventions includes a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof, as well as a pharmaceutical composition based on it. In formula (I) , A is a pyridine ring; Z is CH; R₁ is selected from the group consisting of heterocycloalkyl, heterocycloalkyloxy, heterocycloalkyl-C_1-6-alkoxy, 6–10-membered heterospirocycloalkyl containing 1–2 heteroatoms selected from oxygen and nitrogen, C_3–6-cycloalkyl-C_1–6-alkoxy, where heterocycloalkyl is a 4–6-membered heterocycloalkyl containing 1–2 heteroatoms selected from oxygen and nitrogen, and the nitrogen atom in heterocycloalkyl is optionally substituted with C _1–6 -alkyl; R₂ is selected from the group consisting of halo and C_1–6 haloalkyl; R₃ is C_1–6 alkyl.

EFFECT: using a compound of formula (I) as an inhibitor of PDGFR kinase activity, in particular PDGFR kinasesα and/or PDGFRβ.

12 cl, 5 dwg, 2 tbl, 45 ex

Description

Область техникиField of technology

Настоящая заявка относится к соединению в качестве селективного ингибитора киназы PDGFR, а также к способу и применению для ингибирования активности киназы PDGFR и для лечения заболевания, ассоциированного с ингибированием активности киназы PDGFR с таким соединением..The present application relates to a compound as a selective PDGFR kinase inhibitor, and to a method and use for inhibiting PDGFR kinase activity and for treating a disease associated with inhibition of PDGFR kinase activity with such compound.

Уровень техникиState of the art

Тромбоцитарный фактор роста (ТФР, PDGF) представляет собой семейство эффективных митогенов почти для всех клеток, происходящих из мезенхимы. Существует четыре изоформы PDGF: А, В, С и D, которые образуют пять различных дисульфид-связанных димерных белков PDGF-AA, -ВВ, -АВ, -СС и- DD. Эти факторы роста оказывают свое клеточное действие через два структурно родственных рецептора рецептора а тирозинкиназы PDGF (PDGFRa) и рецептора PDGF р (PDGFRp) (Sandy, J. R. (1998) Br. J. Orthod. 25: 269-74; Betsholtz, C, et al., (2001) BioEssays 23: 494-507).Platelet-derived growth factor (PDGF) is a family of effective mitogens for almost all mesenchymal-derived cells. There are four isoforms of PDGF: A, B, C and D, which form five different disulfide-linked dimeric proteins PDGF-AA, -BB, -AB, -CC and -DD. These growth factors exert their cellular effects through two structurally related receptors, PDGF tyrosine kinase receptor α (PDGFRa) and PDGF receptor β (PDGFRp) (Sandy, J. R. (1998) Br. J. Orthod. 25: 269-74; Betsholtz, C, et al., (2001) BioEssays 23: 494-507).

PDGFRα по своей структуре аналогичен PDGFRβ и может образовывать гетеродимеры и гомодимеры. PDGF-BB и PDGF-DD являются первичными активаторами гомодимеров ββ.PDGF-AA активирует только димеры рецептора αα, в то время как PDGF-AB, PDGF-BB и PDGF-CC активируют как димеры рецептора αα, так и димеры рецептора αβ. Молекула димерного лиганда связывается с двумя рецепторными белками одновременно и индуцирует димеризацию рецепторов, аутофосфорилирование конкретных остатков в цитоплазматическом домене рецептора и клеточную сигнализацию.PDGFRα is structurally similar to PDGFRβ and can form heterodimers and homodimers. PDGF-BB and PDGF-DD are the primary activators of ββ homodimers. PDGF-AA activates only αα receptor dimers, while PDGF-AB, PDGF-BB, and PDGF-CC activate both αα receptor dimers and αβ receptor dimers. The dimeric ligand molecule binds to two receptor proteins simultaneously and induces receptor dimerization, autophosphorylation of specific residues in the cytoplasmic domain of the receptor, and cellular signaling.

Патоморфологической основой хронической гипоксической легочной гипертензии является структурное ремоделирование легочных сосудов, проявляющееся в основном пролиферацией и миграцией гладкомышечных клеток средней оболочки. Пролиферация гладкомышечных клеток зависит от воздействия различных факторов роста, в частности тромбоцитарного фактора роста. Факторы роста регулируют пролиферацию клеток путем связывания с рецепторами фактора роста и активации тирозиновой протеинкиназы (ТПК) в рецепторах для фосфорилирования. Авторы Schermuly et al. сообщили в журнале JCI в 2005 г., что иматиниб в качестве ингибитора PDGFR может значительно улучшить симптомы легочной гипертензии (Schermuly, R.T., et al. 2005. Reversal of experimental pulmonary hypertension by PDGF inhibition. J. Clin. Invest. 115:2811-2821. doi:10.1172/JCI24838.). Авторы также исследовали легочную ткань пациентов с легочной гипертензией, проходящих трансплантацию легких, и наблюдали достоверно повышенный уровень экспрессии фактора роста тромбоцитов (PDGF) у пациентов с легочной гипертензией. Авторы считают, что ингибиторы PDGFR могут представлять собой новое средство клинической терапии легочной гипертензии.The pathological basis of chronic hypoxic pulmonary hypertension is structural remodeling of the pulmonary vessels, manifested mainly by the proliferation and migration of smooth muscle cells of the tunica media. Proliferation of smooth muscle cells depends on the influence of various growth factors, in particular platelet-derived growth factor. Growth factors regulate cell proliferation by binding to growth factor receptors and activating protein tyrosine kinase (TPK) at the receptors for phosphorylation. Authors Schermuly et al. reported in the journal JCI in 2005 that imatinib as a PDGFR inhibitor can significantly improve the symptoms of pulmonary hypertension (Schermuly, R.T., et al. 2005. Reversal of experimental pulmonary hypertension by PDGF inhibition. J. Clin. Invest. 115:2811- 2821. doi:10.1172/JCI24838.). The authors also examined lung tissue from patients with pulmonary hypertension undergoing lung transplantation and observed significantly increased expression levels of platelet-derived growth factor (PDGF) in patients with pulmonary hypertension. The authors believe that PDGFR inhibitors may represent a new clinical therapy for pulmonary hypertension.

Кроме того, хронический эозинофильный лейкоз (ХЭЛ) является типом гиперэозинофильного синдрома (ГЭС). Хронический эозинофильный лейкоз является редким и необъясненным заболеванием системы крови, характеризующимся постоянно повышенным уровнем эозинофильных гранулоцитов, осложненное полиорганным поражением. В 2001 году Schaller et al. впервые сообщили об иматиниба мезилате (торговое название: Gleevec, низкомолекулярный ингибитор тирозинкиназ ABL, KIT и PDGFR) в лечении 1 случая пациента с ГЭС со значительной эффективностью, и, таким образом, предположили, что ГЭС может быть присуща активация ABL, KIT, PDGFR или других неизвестных генов-мишеней (Schaller, J. L., & Burkland, G. A. (2001). Case report: rapid and complete control of idiopathic hypereosinophilia with imatinib mesylate. MedGenMed., 3(5), 9). В 2003 г. авторы Cools et al. обнаружили гибридный ген FIP1L1-PDGFRα у пациентов с ГЭС и в клетках EOL-1, культивируемых in vitro (линия клеток хронического эозинофильного лейкоза), что позволило не только идентифицировать молекулярную мишень лекарственного препарата Гливек для лечения ГЭС, чтобы обеспечить мощные молекулярные маркеры для диагностики и лечения ГЭС, но также выявить на молекулярном уровне, что ГЭС по существу является злокачественным клональным заболеванием системы кроветворения (Cools J., DeAngelo D. J., Gotlib J., A tyrosine kinase created by fusion of the PDGFRA and FIP1L1 genes as a therapeutic target of imatinib in idiopathic hypereosinophilic syndrome. N. Engl. J. Med. 2003, 348(13): 1201-14). Исследования авторов Cools et al. показали, что активатор транскрипции 5 (STAT5) является нижележащей мишенью эффекта слияния гена FIP1L1-PDGFRα, и активация STAT5 способствует пролиферации эозинофильных гранулоцитов.Additionally, chronic eosinophilic leukemia (CEL) is a type of hypereosinophilic syndrome (HES). Chronic eosinophilic leukemia is a rare and unexplained disease of the blood system, characterized by persistently elevated levels of eosinophilic granulocytes, complicated by multiple organ damage. In 2001, Schaller et al. first reported imatinib mesylate (trade name: Gleevec, a small molecule inhibitor of the tyrosine kinases ABL, KIT and PDGFR) in the treatment of 1 case of a patient with HES with significant efficacy, and thus suggested that HES may be characterized by activation of ABL, KIT, PDGFR or other unknown target genes (Schaller, J. L., & Burkland, G. A. (2001). Case report: rapid and complete control of idiopathic hypereosinophilia with imatinib mesylate. MedGenMed., 3(5), 9). In 2003, Cools et al. discovered the FIP1L1-PDGFRα fusion gene in patients with HES and in EOL-1 cells cultured in vitro (a chronic eosinophilic leukemia cell line), which allowed not only to identify the molecular target of the drug Gleevec for the treatment of HES, but also to provide powerful molecular markers for diagnosis and treatment of HES, but also reveal at the molecular level that HES is essentially a malignant clonal disease of the hematopoietic system (Cools J., DeAngelo D. J., Gotlib J., A tyrosine kinase created by fusion of the PDGFRA and FIP1L1 genes as a therapeutic target of imatinib in idiopathic hypereosinophilic syndrome. N. Engl. J. Med. 2003, 348(13): 1201-14). Research by Cools et al. showed that activator of transcription 5 (STAT5) is a downstream target of the FIP1L1-PDGFRα gene fusion effect, and STAT5 activation promotes eosinophil granulocyte proliferation.

Примеры известных в настоящее время селективных ингибиторов, как PDGFRα, так и PDGFRβ, включают: СР-673451 (регистрационный номер CAS: 343787-29-1; молекулярная масса: 417,5) и иматиниб (регистрационный номер CAS: 152459-95-5; молекулярная масса: 493,60), каждый из которых, однако, недостаточно хорош в плане селективности. В дополнение к ингибирующему воздействию на PDGFRα и β, данные селективные ингибиторы также ингибируют ингибирующий эффект в отношении cKIT, BCR-ABL и т.п.Следовательно, необходимо предоставить селективный ингибитор PDGFR, чтобы обеспечить исследовательскую основу для точной таргетной терапии.Examples of currently known selective inhibitors of both PDGFRα and PDGFRβ include: CP-673451 (CAS registration number: 343787-29-1; molecular weight: 417.5) and imatinib (CAS registration number: 152459-95-5 ; molecular weight: 493.60), each of which, however, is not good enough in terms of selectivity. In addition to the inhibitory effect on PDGFRα and β, these selective inhibitors also inhibit the inhibitory effect on cKIT, BCR-ABL, etc. Therefore, it is necessary to provide a selective PDGFR inhibitor to provide a research basis for precise targeted therapy.

Авторы настоящего изобретения посредством экспериментов обнаружили селективный ингибитор PDGFR, который может значительно ингибировать рост опухоли в модели опухоли на мышах с трансплантированными опухолевыми клетками EOL-1, а также может улучшить выживаемость крыс и облегчать состояния легочной гипертензии в крысиной модели легочной гипертензии.The inventors of the present invention have discovered through experiments a selective PDGFR inhibitor that can significantly inhibit tumor growth in a mouse tumor model transplanted with EOL-1 tumor cells, and can also improve the survival of rats and alleviate pulmonary hypertension conditions in a rat model of pulmonary hypertension.

Краткое описание изобретенияBrief description of the invention

В настоящем изобретении предложен селективный ингибитор киназы PDGFR, содержащий соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, сольват, сложный эфир, кислоту, метаболит или пролекарство:The present invention provides a selective PDGFR kinase inhibitor containing a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, ester, acid, metabolite or prodrug thereof:

где,Where,

кольцо А представляет собой пиридиновое кольцо;ring A is a pyridine ring;

Z выбран из группы, состоящей из N и СН;Z is selected from the group consisting of N and CH;

R₁ выбран из группы, состоящей из гетероциклоалкила, гетероциклоалкилокси, гетероциклоалкил C_1-6 алкокси, гетер оциклоалкилами но, гетероспироциклоалкила, гетероспироциклоалкиламино, С_3-6 циклоалкила, C_1-6 алкокси, С_3-6 циклоалкилокси, где гетероциклоалкил представляет собой 4-8-членный гетероциклоалкил, содержащий атом(ы) кислорода и/или азота, причем атом азота в гетероциклоалкиле необязательно замещен С_1-6 алкилом;R ₁ is selected from the group consisting of heterocycloalkyl, heterocycloalkyloxy, heterocycloalkyl C _1-6 alkoxy, heterocycloalkylamino, heterospirocycloalkyl, heterospirocycloalkylamino, C _3-6 cycloalkyl, C _1-6 alkoxy, C _3-6 cycloalkyloxy, where heterocycloalkyl is 4 -8-membered heterocycloalkyl containing oxygen and/or nitrogen atom(s), wherein the nitrogen atom in the heterocycloalkyl is optionally substituted with C _1-6 alkyl;

R₂ выбран из группы, состоящей из галогена и C_1-6 галогеналкила;R ₂ is selected from the group consisting of halogen and C _1-6 haloalkyl;

R₃ выбран из группы, состоящей из C_1-6 алкила и галогена.R ₃ is selected from the group consisting of C _1-6 alkyl and halogen.

Предпочтительно, «гетероциклоалкил», описанный выше, представляет собой 4-6-членный гетероциклоалкил, содержащий атом(ы) кислорода и/или азота, такой как пирролидинил, морфолинил, пиперазинил, тетрагидропиранил, тетрагидрофуранил, оксетанил, азетидинил и т.п., и атом азота в этих гетероциклоалкильных группах необязательно замещен C_1-6 алкилом. В другом аспекте «гетероспироциклоалкил», описанный выше, может быть выбран из 6-10-членных спироциклоалкильных групп, содержащих гетероатом(ы) кислорода и/или азота.Preferably, the “heterocycloalkyl” described above is a 4-6 membered heterocycloalkyl containing oxygen and/or nitrogen atom(s), such as pyrrolidinyl, morpholinyl, piperazinyl, tetrahydropyranyl, tetrahydrofuranyl, oxetanyl, azetidinyl and the like, and the nitrogen atom in these heterocycloalkyl groups is optionally substituted with C _1-6 alkyl. In another aspect, the “heterospirocycloalkyl” described above may be selected from 6-10 membered spirocycloalkyl groups containing oxygen and/or nitrogen heteroatom(s).

В предпочтительном варианте реализации кольцо А выбрано из группы, состоящей из R₂ выбран из группы, состоящей из фтора, хлора и трифторметила.In a preferred embodiment, ring A is selected from the group consisting of R ₂ is selected from the group consisting of fluorine, chlorine and trifluoromethyl.

В другом предпочтительном варианте реализации R₃ выбран из группы, состоящей из метила, фтора и хлора.In another preferred embodiment, R ₃ is selected from the group consisting of methyl, fluorine and chlorine.

В одном аспекте в настоящем изобретении предложен селективный ингибитор киназы PDGFR, содержащий соединение формулы (Ia) или его фармацевтически приемлемую соль, сольват, сложный эфир, кислоту, метаболит или пролекарство:In one aspect, the present invention provides a selective PDGFR kinase inhibitor comprising a compound of formula (Ia) or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, ester, acid, metabolite or prodrug thereof:

гдеWhere

R₁ выбран из группы, состоящей из гетероциклоалкила, гетероциклоалкилокси, гетероциклоалкил-C_1-6-алкокси, гетероциклоалкиламино, гетероспироциклоалкила, гетероспироциклоалкиламино, С_3-6-циклоалкил-С_1-6-алкокси, С_3-6-циклоалкилокси, где гетероциклоалкил представляет собой 4-6-членный гетероциклоалкил, содержащий атом(ы) кислорода и/или азота, причем атом азота в гетероциклоалкиле необязательно замещен C_1-6-алкилом; иR ₁ is selected from the group consisting of heterocycloalkyl, heterocycloalkyloxy, heterocycloalkyl-C _1-6 -alkoxy, heterocycloalkylamino, heterospirocycloalkyl, heterospirocycloalkylamino, C _3-6 -cycloalkyl-C _1-6 -alkoxy, C _3-6 -cycloalkyloxy, where heterocycloalkyl is a 4-6 membered heterocycloalkyl containing oxygen and/or nitrogen atom(s), wherein the nitrogen atom in the heterocycloalkyl is optionally substituted with C _1-6 alkyl; And

один из X и Y представляет собой СН, а другой представляет собой N.one of X and Y represents CH and the other represents N.

В этом варианте реализации изобретения «гетероциклоалкил» и «гетероспироциклоалкил» соответствуют приведенному выше описанию.In this embodiment, “heterocycloalkyl” and “heterospirocycloalkyl” are as defined above.

В предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения R₁ выбран из группы, состоящей из C_1-6-алкилпиперазинила (такого как N-метилпиперазинил, например, 4-метилпиперазин-1-ил), морфолинила (такого как N-морфолинил), тетрагидропиранил-C_1-6-алкокси (такого как тетрагидропиран-4-илметокси), оксетанилокси (такого как оксетан-3-илокси), морфолино-C_1-6-алкокси (такого как 2-морфолиноэтокси), тетрагидрофуранил-С_1-6-алкокси (такого как тетрагидрофуран-2-илметокси), С_3-6-циклоалкил-С_1-6-алкокси (такого как циклопентилметокси) и оксаазаспирогептил (такого как 2-окса-6-аза-спиро[3.3]гепт-6-ил).In a preferred embodiment of the present invention, R ₁ is selected from the group consisting of C _1-6 -alkylpiperazinyl (such as N-methylpiperazinyl, e.g. 4-methylpiperazin-1-yl), morpholinyl (such as N-morpholinyl), tetrahydropyranyl-C _1-6 -alkoxy (such as tetrahydropyran-4-ylmethoxy), oxetanyloxy (such as oxetan-3-yloxy), morpholino-C _1-6 -alkoxy (such as 2-morpholinoethoxy), tetrahydrofuranyl-C _1-6 -alkoxy (such as tetrahydrofuran-2-ylmethoxy), C _3-6 -cycloalkyl-C _1-6 -alkoxy (such as cyclopentyl methoxy) and oxaazaspiroheptyl (such as 2-oxa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-yl ).

Заместитель R₁ предпочтительно замещен при атоме углерода в пара- или мета-положении относительно атома N в пиридиновом кольце, и более предпочтительно замещен при атоме углерода в мета-положении относительно атома N в пиридиновом кольце.Substituent R ₁ is preferably substituted on a carbon atom in the para or meta position relative to the N atom on the pyridine ring, and more preferably substituted on a carbon atom in the meta position relative to the N atom on the pyridine ring.

В другом аспекте настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение, описанное выше, или его фармацевтически приемлемую соль, сольват, сложный эфир, кислоту, метаболит или пролекарство, и фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество и, необязательно, другое терапевтическое средство.In another aspect, the present invention also provides a pharmaceutical composition comprising a compound described above, or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, ester, acid, metabolite or prodrug thereof, and a pharmaceutically acceptable carrier or excipient and, optionally, another therapeutic agent.

В еще одном аспекте настоящее изобретение также относится к способу или применению такого соединения или фармацевтической композиции для ингибирования активности тирозинкиназы (дикого типа или различных мутантов или их комбинации) и для лечения, предотвращения или уменьшения интенсивности заболевания, нарушения или состояния, которое модулируется активностью тирозинкиназы (дикого типа или различных мутантов или их комбинации), где тирозинкиназа может представлять собой PDGFR.In yet another aspect, the present invention also provides a method or use of such a compound or pharmaceutical composition for inhibiting tyrosine kinase activity (wild type or various mutants or combinations thereof) and for treating, preventing or ameliorating a disease, disorder or condition that is modulated by tyrosine kinase activity ( wild type or various mutants or combinations thereof), wherein the tyrosine kinase may be PDGFR.

Настоящее изобретение также относится к ингибитору тирозинкиназы, который селективно оказывает более сильное ингибирующее действие на PDGFR по сравнению с одной или более мишенями cKIT, BCR-ABL, FLT3 и VEGFR2, а также к применению и ингибитора тирозинкиназы и способу с использованием ингибитора тирозинкиназы по настоящему изобретению для селективного ингибирования PDGFR.The present invention also provides a tyrosine kinase inhibitor that selectively exerts a more potent inhibitory effect on PDGFR compared to one or more of the targets cKIT, BCR-ABL, FLT3 and VEGFR2, as well as the use of both the tyrosine kinase inhibitor and the method using the tyrosine kinase inhibitor of the present invention for selective inhibition of PDGFR.

Описание графических материаловDescription of graphic materials

На фиг. 1а показано изменение средней массы тела мышей с течением времени в различных группах лечения с использованием соединения 1, иматиниба и носителя в мышиной модели опухоли с клетками хронического эозинофильного лейкоза человека EOL-1;In fig. 1a shows the change in mean body weight of mice over time in different treatment groups using compound 1, imatinib and vehicle in a murine tumor model with human chronic eosinophilic leukemia EOL-1 cells;

На фиг. 1b показано изменение среднего размера опухолей с течением времени в различных группах лечения с использованием соединения 1, иматиниба и носителя в мышиной модели опухоли с клетками хронического эозинофильного лейкоза человека EOL-1;In fig. 1b shows the change in mean tumor size over time in different treatment groups using Compound 1, imatinib and vehicle in a mouse tumor model with human chronic eosinophilic leukemia EOL-1 cells;

На фиг. 1с показана средняя масса опухолей и рассчитанная степень ингибирования опухоли у мышей на 14 сутки после введения в различных группах лечения с использованием соединения 1, иматиниба и носителя в мышиной модели опухоли с клетками хронического эозинофильного лейкоза человека EOL-1.In fig. 1c shows the average tumor weight and calculated degree of tumor inhibition in mice at day 14 post-administration in various treatment groups using Compound 1, imatinib and vehicle in a murine tumor model with human chronic eosinophilic leukemia EOL-1 cells.

На фиг. 2а показано изменение выживаемости крыс с течением времени в различных группах лечения с использованием соединения 1, иматиниба, бозентана и носителя в крысиной модели легочной гипертензии;In fig. 2a shows the change in rat survival over time in different treatment groups using Compound 1, imatinib, bosentan and vehicle in a rat model of pulmonary hypertension;

На фиг. 2b показано систолическое артериальное давление правого желудочка у крыс в различных группах лечения с использованием соединения 1, иматиниба, бозентана и носителя в крысиной модели легочной гипертензии.In fig. 2b shows right ventricular systolic blood pressure in rats in different treatment groups using Compound 1, imatinib, bosentan and vehicle in a rat model of pulmonary hypertension.

Подробное описание изобретенияDetailed Description of the Invention

ТерминологияTerminology

Если не указано иное, все технические и научные термины, применяемые в настоящем описании, имеют значение, обычно понимаемое специалистами в области, к которой относится заявленное изобретение.Unless otherwise specified, all technical and scientific terms used in this specification have the meaning commonly understood by those skilled in the art to which the claimed invention relates.

Если не указано иное, в настоящем изобретении используются общепринятые методы масс-спектроскопии, ЯМР-спектроскопии, ВЭЖХ, химии белков, биохимии, технологий рекомбинантной ДНК и фармакологии, известные специалистам в данной области. Если конкретные определения не приведены, номенклатура, используемая в аналитической химии, синтетической органической химии и медицинской и фармацевтической химии, а также их лабораторные процедуры и методики, описанные в настоящем изобретении, представляют собой те, которые известны в данной области техники. В целом вышеупомянутые методики и процедуры могут быть выполнены традиционными способами, хорошо известными в данной области техники и описанными в различных общих и более конкретных источниках, которые цитируются и рассматриваются по тексту настоящего описания.Unless otherwise indicated, the present invention uses conventional methods of mass spectroscopy, NMR spectroscopy, HPLC, protein chemistry, biochemistry, recombinant DNA technology and pharmacology known to those skilled in the art. Unless specific definitions are given, the nomenclature used in analytical chemistry, synthetic organic chemistry and medicinal and pharmaceutical chemistry, as well as their laboratory procedures and techniques described in the present invention, are those known in the art. In general, the above techniques and procedures can be performed by traditional methods well known in the art and described in various general and more specific references, which are cited and discussed throughout the text of the present description.

Термин «алкил» относится к алифатической углеводородной группе, которая может представлять собой алкильную группу с разветвленной или прямой цепью. В зависимости от структуры алкильная группа может представлять собой монорадикал или дирадикал (т.е., алкиленовую группу). В настоящем изобретении алкильная группа предпочтительно представляет собой алкил, содержащий от 1 до 8 атомов углерода, более предпочтительно «низший алкил», содержащий от 1 до 6 атомов углерода, и еще более предпочтительно алкил, содержащий от 1 до 4 атомов углерода. Типичные алкильные группы включают, но не ограничиваются ими, метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил и т.п. Следует понимать, что термин «алкил», указанный в настоящем тексте, включает все возможные конфигурации и конформации алкила, которые могут присутствовать. Например, термин «пропил», упоминаемый в настоящем изобретении, включает н-пропил и изо-пропил. Термин «бутил», упоминаемый в настоящем документе, включает н-бутил, изо-бутил и трет-бутил. Термин «пентил», упоминаемый в настоящем документе, включает н-пентил, изо-пентил, нео-пентил, трет-пентил, пент-3-ил и т.п.The term "alkyl" refers to an aliphatic hydrocarbon group, which may be a branched or straight chain alkyl group. Depending on the structure, the alkyl group can be a monoradical or a diradical (ie, an alkylene group). In the present invention, the alkyl group is preferably an alkyl having 1 to 8 carbon atoms, more preferably a "lower alkyl" having 1 to 6 carbon atoms, and even more preferably an alkyl having 1 to 4 carbon atoms. Typical alkyl groups include, but are not limited to, methyl, ethyl, propyl, butyl, pentyl, hexyl, and the like. It should be understood that the term "alkyl" as used herein includes all possible alkyl configurations and conformations that may be present. For example, the term "propyl" used in the present invention includes n-propyl and iso-propyl. The term "butyl" as used herein includes n-butyl, iso-butyl and tert-butyl. The term "pentyl" as used herein includes n-pentyl, iso-pentyl, neo-pentyl, t-pentyl, pent-3-yl and the like.

Термин «алкокси» относится к -О-алкильной группе, где алкил соответствует определению в настоящем документе. Типичные алкоксигруппы включают, но не ограничиваются ими, метокси, этокси, пропокси, бутокси, пентилокси, гексилокси и т.п.The term "alkoxy" refers to an -O-alkyl group, where alkyl is as defined herein. Typical alkoxy groups include, but are not limited to, methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy, pentyloxy, hexyloxy, and the like.

Термин «циклоалкил» относится к моноциклическому или полициклическому радикалу, который содержит только углерод и водород. Циклоалкильные группы включают группы, содержащие от 3 до 10 атомов в кольце. В зависимости от структуры циклоалкильная группа может представлять собой монорадикал или дирадикал (например, циклоалкиленовую группу). В настоящем изобретении циклоалкильная группа предпочтительно представляет собой циклоалкил, содержащий от 3 до 8 атомов углерода, и более предпочтительно «низший циклоалкил», содержащий от 3 до 6 атомов углерода. Примеры циклоалкилов включают, но не ограничиваются ими, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклооктил, циклопентенил, циклогексенил, циклогептенил и диамантанил.The term "cycloalkyl" refers to a monocyclic or polycyclic radical that contains only carbon and hydrogen. Cycloalkyl groups include groups containing from 3 to 10 ring atoms. Depending on the structure, the cycloalkyl group can be a monoradical or a diradical (eg, a cycloalkylene group). In the present invention, the cycloalkyl group is preferably a cycloalkyl having 3 to 8 carbon atoms, and more preferably a "lower cycloalkyl" having 3 to 6 carbon atoms. Examples of cycloalkyls include, but are not limited to, cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cycloheptyl, cyclooctyl, cyclopentenyl, cyclohexenyl, cycloheptenyl and diamantanyl.

В данном документе термин «гетероциклоалкил» или «гетероциклил» относится к неароматическому кольцу, в котором один или более атомов, образующих кольцо, представляют собой гетероатом, выбранный из группы, состоящей из азота, кислорода и серы. Гетероциклоалкильное кольцо может представлять собой моноциклическое или полициклическое кольцо, образованное из трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти или более чем девяти атомов. Гетероциклоалкильное кольцо может быть необязательно замещено. Примеры гетероциклоалкилов включают, но не ограничиваются ими, лактамы, лактоны, циклические имиды, циклические тиоимиды, циклические карбаматы, тетрагидротиопиран, 4Н-пиран, тетрагидропиран, пиперидин, оксетан, 1,3-диоксин, 1,3-диоксан, 1,4-диоксин, 1,4-диоксан, пиперазин, 1,3-оксатиан, 1,4-оксатиин, 1,4-оксатиан, тетрагидро-1,4-тиазин, 2Н-1,2-оксазин, малеимид, сукцинимид, барбитуровую кислоту, тиобарбитуровую кислоту, диоксопиперазин, гидантоин, дигидроурацил, морфолин, триоксан, гексагидро-1,3,5-триазин, тетрагидротиофен, тетрагидрофуран, пирролин, пирролидин, имидазолидин, пирролидон, пиразолин, пиразолидин, имидазолин, имидазолидин, 1,3-диоксол, 1,3-диоксолан, 1,3-дитиол, 1,3-дитиолан, изоксазолин, изоксазолидин, оксазолин, оксазолидин, оксазолидинон, тиазолин, тиазолидин и 1,3-оксатиолан. В зависимости от структуры гетероциклоалкильная группа может представлять собой монорадикал или дирадикал (т.е., гетероциклоалкиленовую группу).As used herein, the term “heterocycloalkyl” or “heterocyclyl” refers to a non-aromatic ring in which one or more of the atoms forming the ring is a heteroatom selected from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulfur. The heterocycloalkyl ring may be a monocyclic or polycyclic ring formed from three, four, five, six, seven, eight, nine or more than nine atoms. The heterocycloalkyl ring may be optionally substituted. Examples of heterocycloalkyls include, but are not limited to, lactams, lactones, cyclic imides, cyclic thioimides, cyclic carbamates, tetrahydrothiopyran, 4H-pyran, tetrahydropyran, piperidine, oxetane, 1,3-dioxine, 1,3-dioxane, 1,4- dioxin, 1,4-dioxane, piperazine, 1,3-oxathiane, 1,4-oxathiine, 1,4-oxathiane, tetrahydro-1,4-thiazine, 2H-1,2-oxazine, maleimide, succinimide, barbituric acid , thiobarbituric acid, dioxopipipurezine, hydrantoin, dihydrouracil, morpholin, trioxan, hexagidro-1,3.5-triazine, tetrahydrotiofen, tetrahydrofuran, pyrroline, pyrroline, imidazolidin, pyrrolidon, pyrazolin, pyrazolydin, imidazolin, imidasolidine, image-raydin, and imasolidine, image-raydin, and imasolidine, imidasolidine Dioxol, 1,3-dioxolane, 1,3-dithiol, 1,3-dithiolane, isoxazoline, isoxazolidine, oxazoline, oxazolidine, oxazolidinone, thiazoline, thiazolidine and 1,3-oxathiolane. Depending on the structure, the heterocycloalkyl group can be a monoradical or a diradical (ie, a heterocycloalkylene group).

В настоящем документе термин «спироциклоалкил» относится к 6 10-членной полициклической алифатической гидрокарбильной группе, в которой два отдельных кольца имеют общий атом углерода. Термин «гетероспироциклоалкил» относится к спироциклоалкилу, где один или более атомов, образующих кольцо, представляют собой гетероатом, выбранный из группы, состоящей из азота, кислорода и серы.As used herein, the term "spirocycloalkyl" refers to a 6 to 10 membered polycyclic aliphatic hydrocarbyl group in which two distinct rings share a common carbon atom. The term “heterospirocycloalkyl” refers to spirocycloalkyl wherein one or more of the atoms forming the ring is a heteroatom selected from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulfur.

Термин «необязательный» означает, что одно или более описанных далее событий могут произойти (иметь место) или не произойти (не иметь места), и включает как происходящие события, так и события, которые не происходят. Термин «необязательно замещенный» или «замещенный» означает, что указанная группа может быть замещена одной или более дополнительной(ыми) группой(ами), каждая из которых независимо выбрана из группы, состоящей из алкила, циклоалкила, арила, гетероарила, гетероциклил а, гидрокси, алкокси, циано, галогена, амида, нитро, галогеналкила, амино, метилсульфонила, алкилкарбонила, алкоксикарбонила, гетероарилалкила, гетероциклоалкилалкилалкила, аминоацила, аминозащитной группы и т.п. Среди прочего, аминозащитная группа предпочтительно выбрана из группы, состоящей из пивалоила, трет-бутилоксикарбонила, бензилоксикарбонила, 9-флуоренилметоксикарбонила, бензила, п-метоксибензила, аллилоксикарбонила, трифторацетила и т.п.The term “optional” means that one or more of the following events may or may not occur (occur) and includes both events that do occur and events that do not occur. The term "optionally substituted" or "substituted" means that said group may be substituted by one or more additional group(s), each independently selected from the group consisting of alkyl, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, heterocyclyl, hydroxy, alkoxy, cyano, halogen, amide, nitro, haloalkyl, amino, methylsulfonyl, alkylcarbonyl, alkoxycarbonyl, heteroarylalkyl, heterocycloalkylalkyl, aminoacyl, amino protecting group and the like. Among others, the amino protecting group is preferably selected from the group consisting of pivaloyl, tert-butyloxycarbonyl, benzyloxycarbonyl, 9-fluorenylmethoxycarbonyl, benzyl, p-methoxybenzyl, allyloxycarbonyl, trifluoroacetyl and the like.

В настоящем документе термин «тирозин-протеинкиназа» (ТПК) относится к классу киназ, которые катализируют перенос γ-фосфата из АТФ в тирозиновый остаток на белках и которые способны катализировать фосфорилирование тирозинового остатка различных белковых субстратов и, таким образом, оказывают важное влияние на рост, пролиферацию и дифференцировку клеток.As used herein, the term "tyrosine protein kinase" (TPK) refers to a class of kinases that catalyze the transfer of γ-phosphate from ATP to a tyrosine residue on proteins and that are capable of catalyzing the phosphorylation of the tyrosine residue of various protein substrates and thus have important effects on growth , proliferation and differentiation of cells.

В настоящем документе термины «ингибировать», «ингибирующий» или «ингибитор», используемые в отношении киназы, относятся к ингибированию фосфотрансферазной активности.As used herein, the terms “inhibit,” “inhibitory,” or “inhibitor” when used in relation to a kinase refer to inhibition of phosphotransferase activity.

«Метаболит» соединения, раскрытого в настоящем документе, представляет собой производное указанного соединения, которое образуется при метаболизме данного соединения. Термин «активный метаболит» относится к биологически активному производному соединения, которое образуется при метаболизме указанного соединения. В настоящем документе термин «метаболизм» относится к совокупности процессов (включая, но не ограничиваясь ими, реакции гидролиза и реакции, катализируемые ферментами, такие как реакции окисления), посредством которых организм изменяет конкретное вещество. Так, ферменты могут вызывать специфические структурные изменения, в результате чего образуется соединение. Например, цитохром Р450 катализирует различные окислительно-восстановительные реакции, а дифосфатглюкуронилтрансферазы катализируют перенос активированной молекулы глюкуроновой кислоты на ароматический спирт, алифатический спирт, карбоновую кислоту, амин и свободную меркаптогруппу. Дополнительную информацию о метаболизме можно почерпнуть в The Pharmacological Basis of Therapeutics, 9th Edition, McGraw-Hill (1996). Метаболиты соединения, раскрытого в настоящем документе, могут быть идентифицированы либо путем введения соединения хозяину и анализа образцов ткани хозяина, либо путем инкубации клеток печени с соединением in vitro и анализа полученного соединения. Оба способа хорошо известны в данной области техники. В некоторых вариантах реализации изобретения метаболиты соединения образуются в результате процессов окисления и соответствуют соответствующему гидроксисодержащему соединению. В некоторых вариантах реализации изобретения соединение метаболизируется до фармакологически активных метаболитов. В настоящем документе термин «модулировать» означает взаимодействовать с мишенью прямо или косвенно с изменением активности мишени, включая, только в качестве примера, усиление активности мишени, ингибирование (подавление) активности мишени, ограничение активности мишени или увеличение длительности активности мишени.A “metabolite” of a compound disclosed herein is a derivative of the compound that is formed by metabolism of the compound. The term "active metabolite" refers to a biologically active derivative of a compound that is formed by metabolism of the compound. As used herein, the term “metabolism” refers to the set of processes (including, but not limited to, hydrolysis reactions and enzyme-catalyzed reactions such as oxidation reactions) by which an organism changes a specific substance. Thus, enzymes can cause specific structural changes, resulting in the formation of a compound. For example, cytochrome P450 catalyzes various redox reactions, and diphosphate glucuronyl transferases catalyze the transfer of an activated glucuronic acid molecule to an aromatic alcohol, an aliphatic alcohol, a carboxylic acid, an amine, and a free mercapto group. Additional information on metabolism can be found in The Pharmacological Basis of Therapeutics, 9th Edition, McGraw-Hill (1996). Metabolites of a compound disclosed herein can be identified either by administering the compound to a host and analyzing host tissue samples, or by incubating liver cells with the compound in vitro and analyzing the resulting compound. Both methods are well known in the art. In some embodiments, metabolites of a compound are formed as a result of oxidation processes and correspond to the corresponding hydroxy-containing compound. In some embodiments, the compound is metabolized to pharmacologically active metabolites. As used herein, the term “modulate” means to interact with a target directly or indirectly to change the activity of the target, including, by way of example only, enhancing the activity of the target, inhibiting the activity of the target, limiting the activity of the target, or increasing the duration of activity of the target.

В настоящем документе термин «белок-мишень» относится к молекуле белка или части белка, которая может связываться селективно связывающим соединением. В некоторых вариантах реализации изобретения белок-мишень представляет собой тирозинкиназу PDGFR (включая ее дикий тип или различные мутанты или их комбинацию).As used herein, the term “target protein” refers to a protein molecule or portion of a protein that can be bound by a selective binding compound. In some embodiments, the target protein is a PDGFR tyrosine kinase (including its wild type or various mutants or a combination thereof).

В настоящем документе GI₅₀ относится к концентрации лекарственного средства, необходимой для 50% ингибирования роста клеток, т.е. к концентрации лекарственного средства, при которой рост 50% клеток (таких как раковые клетки) может ингибироваться или контролироваться лекарственным средством.As used herein, GI ₅₀ refers to the concentration of drug required to achieve 50% inhibition of cell growth, i.e. to the drug concentration at which the growth of 50% of cells (such as cancer cells) can be inhibited or controlled by the drug.

В настоящем документе IC₅₀ относится к количеству, концентрации или дозе конкретного исследуемого соединения, при которой достигается 50% ингибирование максимального ответа в анализе, используемом для измерения такого ответа.As used herein, IC ₅₀ refers to the amount, concentration or dose of a particular test compound that produces 50% inhibition of the maximum response in the assay used to measure that response.

Новый ингибитор киназы согласно настоящему изобретениюNew kinase inhibitor according to the present invention

В настоящем изобретении предложен селективный ингибитор киназы PDGFR, содержащий соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, сольват, сложный эфир, кислоту, метаболит или пролекарственый препарат:The present invention provides a selective PDGFR kinase inhibitor containing a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, ester, acid, metabolite or prodrug thereof:

гдеWhere

кольцо А представляет собой пиридиновое кольцо;ring A is a pyridine ring;

Z выбран из группы, состоящей из N и СН;Z is selected from the group consisting of N and CH;

R₁ выбран из группы, состоящей из гетероциклоалкила, гетероциклоалкилокси, гетероциклоалкил-С_1-6-алкокси, гетероциклоалкиламино, гетероспироциклоалкила, гетероспироциклоалкиламино, С_3-6-циклоалкил-С_1-6-алкокси, С_3-6-циклоалкилокси, где гетероциклоалкил представляет собой 4-8-членный гетероциклоалкил, содержащий атом(ы) кислорода и/ил и азота, и атом азота в гетероциклоалкиле необязательно замещен C_1-6-алкилом;R ₁ is selected from the group consisting of heterocycloalkyl, heterocycloalkyloxy, heterocycloalkyl-C _1-6 -alkoxy, heterocycloalkylamino, heterospirocycloalkyl, heterospirocycloalkylamino, C _3-6 -cycloalkyl-C _1-6 -alkoxy, C _3-6 -cycloalkyloxy, where heterocycloalkyl is a 4-8 membered heterocycloalkyl containing oxygen and/or nitrogen atom(s), and the nitrogen atom in the heterocycloalkyl is optionally substituted with C _1-6 alkyl;

R₂ выбран из группы, состоящей из галогена и C_1-6 галогеналкила;R ₂ is selected from the group consisting of halogen and C _1-6 haloalkyl;

R₃ выбран из группы, состоящей из C_1-6 алкила и галогена.R ₃ is selected from the group consisting of C _1-6 alkyl and halogen.

Предпочтительно кольцо А выбрано из группы, состоящей из R₂ выбран из группы, состоящей из фтора, хлора и трифторметила.Preferably, ring A is selected from the group consisting of R ₂ is selected from the group consisting of fluorine, chlorine and trifluoromethyl.

В другом случае R₃ предпочтительно выбран из группы, состоящей из метила, фтора и хлора.Alternatively, R ₃ is preferably selected from the group consisting of methyl, fluorine and chlorine.

В одном варианте реализации настоящего изобретения предложен селективный ингибитор киназы PDGFR, содержащий соединение формулы (Ia) или его фармацевтически приемлемую соль, сольват, сложный эфир, кислоту, метаболит или пролекарство:In one embodiment, the present invention provides a selective PDGFR kinase inhibitor comprising a compound of formula (Ia) or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, ester, acid, metabolite or prodrug thereof:

гдеWhere

R₁ выбран из группы, состоящей из гетероциклоалкила, гетероциклоалкилокси, гетероциклоалкил-С_1-6-алкокси, гетероциклоалкиламино, гетероспироциклоалкила, гетероспироциклоалкиламино, С_3-6-циклоалкил.С_1-6-алкокси, С_3-6-циклоалкилокси, где гетероциклоалкил необязательно замещен 1-6-алкилом;R ₁ is selected from the group consisting of heterocycloalkyl, heterocycloalkyloxy, heterocycloalkyl-C _1-6 -alkoxy, heterocycloalkylamino, heterospirocycloalkyl, heterospirocycloalkylamino, C _3-6 -cycloalkyl. C _1-6 -alkoxy, C _3-6 -cycloalkyloxy, where heterocycloalkyl optionally substituted with 1-6-alkyl;

один из X и Y представляет собой СН, а другой представляет собой N.one of X and Y represents CH and the other represents N.

В предпочтительном варианте реализации «гетероциклоалкил», описанный выше, предпочтительно представляет собой 4-6-членный гетероциклоалкил, содержащий атом(ы) кислорода и/или азота, такой как пирролидинил, морфолинил, пиперазинил, тетрагидропиранил, тетрагидрофуранил, оксетанил, азетидинил и т.п., и атом азота в этих гетероциклоалкильных группах необязательно замещен C_1-6 алкилом. Термин «гетероспироциклоалкил», описанный выше, предпочтительно представляет собой 6-10-членную спироциклоалкильную группу, содержащую гетероатом(а) кислорода и/или азота.In a preferred embodiment, the “heterocycloalkyl” described above is preferably a 4-6 membered heterocycloalkyl containing oxygen and/or nitrogen atom(s), such as pyrrolidinyl, morpholinyl, piperazinyl, tetrahydropyranyl, tetrahydrofuranyl, oxetanyl, azetidinyl, etc. etc., and the nitrogen atom in these heterocycloalkyl groups is optionally substituted with C _1-6 alkyl. The term “heterospirocycloalkyl” as described above preferably represents a 6-10 membered spirocycloalkyl group containing oxygen and/or nitrogen heteroatom(s).

В предпочтительном варианте реализации R₁ выбран из группы, состоящей из 1-6 алкилпиперазинила (такого как N-метилпиперазинил, например, 4-метилпиперазин-1-ил), морфолинила (такого как N-морфолинил), тетрагидропиранил-С_1-6-алкокси (такого как тетрагидропиран-4-ил-метокси), оксетанилокси (такого как оксетан-3-илокси), морфолино-С_1-6-алкокси (такого как 2-морфолиноэтокси), тетрагидрофуранил-С_1-6-алкокси (такого как тетрагидрофуран-2-ил метокси), С_3-6-циклоалкил-С_1-6-алкокси (такого как циклопентилметокси) и оксаазаспирогептила (такого как, 2-окса-6-азаспиро[3.3]гепт-6-ил).In a preferred embodiment, R ₁ is selected from the group consisting of 1-6 alkylpiperazinyl (such as N-methylpiperazinyl, e.g. 4-methylpiperazin-1-yl), morpholinyl (such as N-morpholinyl), tetrahydropyranyl-C _1-6 - alkoxy (such as tetrahydropyran-4-yl-methoxy), oxetanyloxy (such as oxetan-3-yloxy), morpholino-C _1-6 -alkoxy (such as 2-morpholinoethoxy), tetrahydrofuranyl-C _1-6 -alkoxy (such such as tetrahydrofuran-2-yl methoxy), C _3-6 -cycloalkyl-C _1-6 -alkoxy (such as cyclopentyl methoxy) and oxaazaspiroheptyl (such as 2-oxa-6-azaspiro[3.3]hept-6-yl).

В другом предпочтительном варианте реализации заместитель R₁ замещен при атоме углерода в пара- или положении относительно атома N в пиридиновом кольце, и более предпочтительно замещен при атоме углерода в мета-положении относительно атома N в пиридиновом кольце.In another preferred embodiment, the substituent R ₁ is substituted on a carbon atom in the para or position relative to the N atom on the pyridine ring, and more preferably is substituted on a carbon atom in the meta position relative to the N atom on the pyridine ring.

В предпочтительном варианте реализации ингибитор киназы PDGFR согласно настоящему изобретению выбран из группы, состоящей из следующих соединений или их фармацевтически приемлемых солей:In a preferred embodiment, the PDGFR kinase inhibitor of the present invention is selected from the group consisting of the following compounds or pharmaceutically acceptable salts thereof:

В настоящем документе рассматривается любая комбинация групп, описанных выше для различных переменных. Следует понимать, что заместители и схемы замещения в соединениях, представленных в настоящем документе, могут быть выбраны специалистом в данной области техники для получения химически стабильных соединений, которые могут быть синтезированы методами, известными в данной области, а также методами, указанными в настоящем документеThis document considers any combination of the groups described above for the various variables. It should be understood that the substituents and substitution patterns in the compounds presented herein can be selected by one skilled in the art to provide chemically stable compounds that can be synthesized by methods known in the art as well as by methods described herein

В настоящем документе описан новый ингибитор киназы. Фармацевтически приемлемые соли, сольваты, сложные эфиры, кислоты, фармацевтически активные метаболиты и пролекарства указанных соединений также описаны в настоящем документе.A novel kinase inhibitor is described herein. Pharmaceutically acceptable salts, solvates, esters, acids, pharmaceutically active metabolites and prodrugs of these compounds are also described herein.

В других или дополнительных вариантах реализации соединение, описанное в настоящем документе, метаболизируется при введении в организм, нуждающийся в этом, с образованием метаболита, который затем применяют для получения желаемого эффекта, включая желаемый терапевтический эффект.In other or additional embodiments, a compound described herein is metabolized upon administration to a body in need thereof to form a metabolite, which is then used to obtain a desired effect, including a desired therapeutic effect.

Описанное в настоящем документе соединение может быть образовано и/или применено в виде фармацевтически приемлемой соли. Типы фармацевтически приемлемой соли включают, но не ограничиваются ими: (1) соли присоединения кислоты, образованные путем взаимодействия соединения в форме свободного основания с фармацевтически приемлемой неорганической кислотой, такой как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота, метафосфорная кислота или т.п.; или с органической кислотой, такой как уксусная кислота, пропионовая кислота, гексановая кислота, циклопентанпропионовая кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, молочная кислота, малоновая кислота, яблочная кислота, лимонная кислота, янтарная кислота, малеиновая кислота, винная кислота, фумаровая кислота, трифторуксусная кислота, бензойная кислота, 3-(4-гидроксибензоил)бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, 1,2-этандисульфоновая кислота, 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, толуолсульфоновая кислота, 4-метилбицикло-[2.2.2]окт-2-ен-1-карбоновая кислота, 2-нафталинсульфоновая кислота, трет -бутилуксусная кислота, глюкогептоновая кислота, 4,4'-метиленбис-(3-гидрокси-2-ен-1-карбоновая кислота), 3-фенилпропионовая кислота, триметилуксусная кислота, лаурилсерная кислота, глюконовая кислота, глутаминовая кислота, салициловая кислота, гидроксинафтойная кислота, стеариновая кислота, муконовая кислота или т.п.; (2) соли присоединения основания, образованные, когда кислотный протон, присутствующий в исходном соединении, либо замещен ионом металла, таким как ион щелочного металла (такой как, литий, натрий, калий), ионом щелочноземельного металла (таким как, магний или кальций), либо ионом алюминия; или координируется с органическим основанием или неорганическим основанием. Приемлемые органические основания включают этаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, триметиламин, N-метилглюкамин и тому подобное. Приемлемые неорганические основания включают алюминия гидроксид, кальция гидроксид, калия гидроксид, натрия карбонат, натрия гидроксид и т.п.The compound described herein can be formed and/or used in the form of a pharmaceutically acceptable salt. Types of pharmaceutically acceptable salt include, but are not limited to: (1) acid addition salts formed by reacting the compound in free base form with a pharmaceutically acceptable inorganic acid such as hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, nitric acid, phosphoric acid, metaphosphoric acid acid or the like; or with an organic acid such as acetic acid, propionic acid, hexanoic acid, cyclopentanepropionic acid, glycolic acid, pyruvic acid, lactic acid, malonic acid, malic acid, citric acid, succinic acid, maleic acid, tartaric acid, fumaric acid, trifluoroacetic acid acid, benzoic acid, 3-(4-hydroxybenzoyl)benzoic acid, cinnamic acid, mandelic acid, methanesulfonic acid, ethanesulfonic acid, 1,2-ethanedisulfonic acid, 2-hydroxyethanesulfonic acid, benzenesulfonic acid, toluenesulfonic acid, 4-methylbicyclo[ 2.2.2]oct-2-ene-1-carboxylic acid, 2-naphthalenesulfonic acid, tert-butylacetic acid, glucoheptonic acid, 4,4'-methylenebis-(3-hydroxy-2-ene-1-carboxylic acid), 3-phenylpropionic acid, trimethylacetic acid, lauryl sulfuric acid, gluconic acid, glutamic acid, salicylic acid, hydroxynaphthoic acid, stearic acid, muconic acid or the like; (2) base addition salts formed when the acidic proton present in the parent compound is either replaced by a metal ion, such as an alkali metal ion (such as lithium, sodium, potassium), or an alkaline earth metal ion (such as magnesium or calcium) , or aluminum ion; or coordinates with an organic base or an inorganic base. Suitable organic bases include ethanolamine, diethanolamine, triethanolamine, trimethylamine, N-methylglucamine and the like. Suitable inorganic bases include aluminum hydroxide, calcium hydroxide, potassium hydroxide, sodium carbonate, sodium hydroxide and the like.

Соответствующие противоионы фармацевтически приемлемой соли могут быть исследованы и идентифицированы с применением различных методов, включая, но не ограничиваясь ими, ионообменную хроматографию, ионную хроматографию, капиллярный электрофорез, атомно-эмиссионную спектроскопию с индуктивно связанной плазмой, атомно-абсорбционную спектроскопию, масс-спектрометрию или любую их комбинацию.Corresponding counterions of the pharmaceutically acceptable salt may be examined and identified using a variety of techniques, including, but not limited to, ion exchange chromatography, ion chromatography, capillary electrophoresis, inductively coupled plasma atomic emission spectroscopy, atomic absorption spectroscopy, mass spectrometry, or any their combination.

Соли выделяют с использованием по меньшей мере одного из следующих методов: фильтрация, осаждение осадителем с последующей фильтрацией, выпаривание растворителя или, в случае водных растворов, лиофилизация.Salts are isolated using at least one of the following methods: filtration, precipitation with a precipitating agent followed by filtration, solvent evaporation or, in the case of aqueous solutions, lyophilization.

Скрининг и определение характеристик фармацевтически приемлемых солей, полиморфных форм и/или сольватов могут быть осуществлены с применением различных методов, включая, но не ограничиваясь ими, термический анализ, рентгеновскую порошковую дифрактометрию, спектроскопию, микроскопию и элементный анализ. Различные применяемые спектроскопические методы включают, но не ограничиваются ими, рамановскую спектроскопию, ИК-спектрометрию с Фурье-преобразованием (FTIR), спектрофотометрию в УФ и видимой областях спектра и ЯМР-спектроскопию (в жидком и твердом состоянии). Различные методы микроскопии включают, но не ограничиваются ими, ИК-микроскопию и рамановскую микроскопию.Screening and characterization of pharmaceutically acceptable salts, polymorphs and/or solvates can be accomplished using a variety of techniques, including, but not limited to, thermal analysis, X-ray powder diffractometry, spectroscopy, microscopy and elemental analysis. The various spectroscopic techniques used include, but are not limited to, Raman spectroscopy, Fourier transform infrared spectrometry (FTIR), UV-visible spectrophotometry, and NMR spectroscopy (liquid and solid). Various microscopy techniques include, but are not limited to, IR microscopy and Raman microscopy.

Фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретениюPharmaceutical composition according to the present invention

В настоящем изобретении также предложена фармацевтическая композиция, содержащая по меньшей мере одно соединение формулы (I) или фармацевтически приемлемую соль, сольват, сложный эфир, кислоту, фармацевтически активный метаболит или пролекарство соединения и фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество и необязательно другой терапевтический агент.The present invention also provides a pharmaceutical composition comprising at least one compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, ester, acid, pharmaceutically active metabolite or prodrug of the compound and a pharmaceutically acceptable carrier or excipient and optionally another therapeutic agent.

Во время лечения ее можно применять отдельно или в комбинации с одним или более другими терапевтическими агентами. Лекарственный препарат, содержащий соединение согласно настоящему изобретению, может быть введен пациенту посредством не менее одного способа, выбранного из инъекции, перорального введения, ингаляции, ректального и трансдермального введения. Другие терапевтические агенты могут быть выбраны из группы, состоящей из иммунодепрессантов (таких как такролимус, циклоспорин, рапамицин, метотрексат, циклофосфамид, азатиоприн, меркаптопурин, микофенолат или FTY720), глюкокортикоидов (таких как преднизон, кортизона ацетат, преднизолон, метилпреднизолон, дексаметазон, бетаметазон, триамцинолон, фторгидроксипреднизолон, беклометазон, фторгидрокортизона ацетат, дезоксикортикостерона ацетат, альдостерон), нестероидных противовоспалительных средств (таких как салицилаты, арилалкановые кислоты, 2-арилпропионовые кислоты, N-арилантранильные кислоты, оксикамы, коксибы или сульфонанилиды), аллерговакцины, антигистаминные средства, антилейкотриены, β-агонисты, теофиллин, антихолинергические средства или другие селективные ингибиторы киназ (таких как ингибиторы mTOR, ингибиторы с-Met) или агенты на основе her2-антител. Кроме того, указанные другие терапевтические агенты также могут представлять собой рапамицин, кризотиниб, тамоксифен, ралоксифен, анастрозол, эксеместан, летрозол, Герцептин™ (трастузумаб), Гливек™ (иматиниба мезилат), Таксол™ (паклитаксел), циклофосфамид, ловастатин, минозин, цитарабин, 5-фторурацил (5-ФУ), метотрексат, Таксотер™ (доцетаксел), Золадекс™ (гозерелин), винкристин, винбластин, нокодазол, тенипозид, этопозид, Гемзар™ (гемцитабин), эпотилон, навельбин, камптотецин, даунонибицин, дактиномицин, митоксантрон, амсакрин, доксорубицин (адриамицин), эпирубицин или идарубицин. В качестве альтернативы другие терапевтические агенты могут представлять собой, например, но не ограничиваясь ими, цитокины, такие как ГКСФ (гранулоцитарный колониестимулирующий фактор). В качестве альтернативы другими терапевтическими агентами могут быть, например, но не ограничиваясь ими, CMF (циклофосфамид, метотрексат и 5-фторурацил), CAF (циклофосфамид, адриамицин и 5-фторурацил), АС (адриамицин и циклофосфамид), FEC (5-фторурацил, эпирубицин и циклофосфамид), ACT или АТС (адриамицин, циклофосфамид и паклитаксел) или CMFP (циклофосфамид, метотрексат, 5-фторурацил и преднизолон).During treatment, it can be used alone or in combination with one or more other therapeutic agents. A medicinal preparation containing a compound of the present invention may be administered to a patient by at least one route selected from injection, oral administration, inhalation, rectal and transdermal administration. Other therapeutic agents may be selected from the group consisting of immunosuppressants (such as tacrolimus, cyclosporine, rapamycin, methotrexate, cyclophosphamide, azathioprine, mercaptopurine, mycophenolate or FTY720), glucocorticoids (such as prednisone, cortisone acetate, prednisolone, methylprednisolone, dexamethasone, beta metazone , triamcinolone, fluorohydroxyprednisolone, beclomethasone, fluorohydrocortisone acetate, deoxycorticosterone acetate, aldosterone), non-steroidal anti-inflammatory drugs (such as salicylates, arylalkanoic acids, 2-arylpropionic acids, N-arylanthranyl acids, oxicams, coxibs or sulfonanilides), allergy vaccines, antihist amines, antileukotrienes , β-agonists, theophylline, anticholinergics or other selective kinase inhibitors (such as mTOR inhibitors, c-Met inhibitors) or her2 antibody agents. In addition, these other therapeutic agents may also include rapamycin, crizotinib, tamoxifen, raloxifene, anastrozole, exemestane, letrozole, Herceptin™ (trastuzumab), Gleevec™ (imatinib mesylate), Taxol™ (paclitaxel), cyclophosphamide, lovastatin, minosine, cytarabine, 5-fluorouracil (5-FU), methotrexate, Taxotere™ (docetaxel), Zoladex™ (goserelin), vincristine, vinblastine, nocodazole, teniposide, etoposide, Gemzar™ (gemcitabine), epothilone, navelbine, camptothecin, daunonibicin, dactinomycin , mitoxantrone, amsacrine, doxorubicin (Adriamycin), epirubicin or idarubicin. Alternatively, other therapeutic agents may include, for example, but not limited to, cytokines such as GCSF (granulocyte colony stimulating factor). Alternatively, other therapeutic agents may include, for example, but not limited to, CMF (cyclophosphamide, methotrexate and 5-fluorouracil), CAF (cyclophosphamide, adriamycin and 5-fluorouracil), AC (adriamycin and cyclophosphamide), FEC (5-fluorouracil , epirubicin and cyclophosphamide), ACT or ATC (adriamycin, cyclophosphamide and paclitaxel) or CMFP (cyclophosphamide, methotrexate, 5-fluorouracil and prednisolone).

В вариантах реализации настоящего изобретения при лечении пациента в соответствии с настоящим изобретением количество конкретного агента будет варьировать в зависимости от таких факторов, как конкретный режим дозирования, тип заболевания или состояния и его тяжесть, отличительные черты (например, масса тела) субъекта или хозяина, нуждающегося в лечении, но может быть легко определено способом, известным в данной области техники, в соответствии с конкретными обстоятельствами, включая, например, конкретный вводимый агент, способ введения, подвергаемое лечению состояние и подвергаемого лечению субъекта или хозяина. В целом дозы, используемые для лечения взрослых людей, обычно находятся в диапазоне 0,02-5000 мг в сутки, например около 1-1500 мг в сутки. Необходимая доза может быть удобным образом представлена в виде разовой дозы или отдельных доз, вводимых одновременно (или в течение короткого периода времени) или с соответствующими интервалами, например, в виде двух, трех, четырех или более субдоз в сутки. Специалистам в данной области техники будет понятно, что, хотя приведены вышеупомянутые диапазоны доз, конкретные эффективные количества могут быть соответствующим образом скорректированы в зависимости от состояния пациента и суждения практикующего врача.In embodiments of the present invention, when treating a patient in accordance with the present invention, the amount of a particular agent will vary depending on factors such as the particular dosage regimen, the type of disease or condition and its severity, the characteristics (eg, body weight) of the subject or host in need in treatment, but can be readily determined in a manner known in the art in accordance with the particular circumstances, including, for example, the particular agent being administered, the route of administration, the condition being treated, and the subject or host being treated. In general, doses used to treat adults are typically in the range of 0.02-5000 mg per day, for example about 1-1500 mg per day. The required dose may conveniently be presented as a single dose or separate doses administered simultaneously (or over a short period of time) or at appropriate intervals, for example, as two, three, four or more sub-doses per day. Those skilled in the art will appreciate that while the above dosage ranges are given, the specific effective amounts may be adjusted accordingly depending on the condition of the patient and the judgment of the practitioner.

Применение лекарственных препаратов согласно настоящему изобретению Соединение или его фармацевтически приемлемая соль, сольват, сложный эфир, кислота, метаболит или пролекарство или фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению способны селективно ингибировать активность тирозинкиназы PDGFR (дикого типа или различных мутантов или их комбинации), в частности, активность PDGFRα и PDGFRβ, и, более конкретно, активность PDGFRα. Соединение или его фармацевтически приемлемую соль, сольват, сложный эфир, кислоту, метаболит или пролекарство или фармацевтическую композицию согласно настоящему изобретению можно применять для лечения, предотвращения или облегчения одного или более заболеваний, нарушений или состояний, которые модулируются активностью PDGFR, или зависят от нее или участвуют в ней (в частности, PDGFRα и PDGFRβ), таких как заболевание, выбранное из группы, состоящей из легочной артериальной гипертензии, солидных опухолей (включая доброкачественные или злокачественные типы), саркомы, гастроинтестинальных стромальных опухолей, рака толстой кишки, острого миелобластного лейкоза (ОМЛ), хронического миелолейкоза (ХМЛ), неоплазии, карциномы щитовидной железы, системного мастоцитоза, синдрома эозинофилии, хронического эозинофильного лейкоза, фиброза, красной волчанки, болезни «трансплантат против хозяина», нейрофиброматозы, легочной гипертензии, болезни Альцгеймера, семиномы, дисгерминомы, опухоли тучных клеток, рака легкого, карциномы бронхов, внутриэпителиальной неоплазии яичка, меланомы, рака молочной железы, нейробластомы, папиллярной/фолликулярной карциномы щитовидной железы, злокачественной лимфомы, неходжкинской лимфомы, множественной эндокринной неоплазии 2 типа, феохромоцитомы, карциномы щитовидной железы, паращитовидной гиперплазии/аденомы, рака толстой кишки, колоректальной аденомы, рака яичников, рака предстательной железы, глиобластомы, опухоли головного мозга, злокачественной глиомы, рака поджелудочной железы, злокачественной мезотелиомы плевры, гемангиобластомы, гемангиомы, рака почки, рака печени, карциномы надпочечников, рака мочевого пузыря, рака желудка, рака прямой кишки, рака влагалища, рака шейки матки, рака эндометрия, мыножественной миеломы, опухоли шеи и головы, а также из других пролиферативных состояний или т.п., или их комбинации. Данное соединение особенно предпочтительно для лечения легочной артериальной гипертензии, хронического эозинофильного лейкоза или т.п.или их комбинации.Use of drugs according to the present invention The compound or its pharmaceutically acceptable salt, solvate, ester, acid, metabolite or prodrug or pharmaceutical composition according to the present invention is capable of selectively inhibiting the activity of PDGFR tyrosine kinase (wild type or various mutants or combinations thereof), in particular, the activity PDGFRα and PDGFRβ, and more specifically the activity of PDGFRα. The compound or pharmaceutically acceptable salt, solvate, ester, acid, metabolite or prodrug or pharmaceutical composition thereof of the present invention can be used to treat, prevent or alleviate one or more diseases, disorders or conditions that are modulated by or dependent on the activity of PDGFR or involved (in particular, PDGFRα and PDGFRβ), such as a disease selected from the group consisting of pulmonary arterial hypertension, solid tumors (including benign or malignant types), sarcoma, gastrointestinal stromal tumors, colon cancer, acute myeloid leukemia ( AML), chronic myeloid leukemia (CML), neoplasia, thyroid carcinoma, systemic mastocytosis, eosinophilia syndrome, chronic eosinophilic leukemia, fibrosis, lupus erythematosus, graft-versus-host disease, neurofibromatosis, pulmonary hypertension, Alzheimer's disease, seminoma, dysgerminoma, tumor mast cell, lung cancer, bronchial carcinoma, testicular intraepithelial neoplasia, melanoma, breast cancer, neuroblastoma, papillary/follicular thyroid carcinoma, malignant lymphoma, non-Hodgkin's lymphoma, multiple endocrine neoplasia type 2, pheochromocytoma, thyroid carcinoma, parathyroid hyperplasia Zia/adenomas , colon cancer, colorectal adenoma, ovarian cancer, prostate cancer, glioblastoma, brain tumor, malignant glioma, pancreatic cancer, malignant pleural mesothelioma, hemangioblastoma, hemangioma, kidney cancer, liver cancer, adrenal carcinoma, bladder cancer, cancer stomach, rectal cancer, vaginal cancer, cervical cancer, endometrial cancer, multiple myeloma, neck and head tumors, and other proliferative conditions or the like, or combinations thereof. This compound is particularly preferred for the treatment of pulmonary arterial hypertension, chronic eosinophilic leukemia or the like, or a combination thereof.

Соединение или его фармацевтически приемлемая соль, сольват, сложный эфир, кислота, метаболит или пролекарство или фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению пригодны для лечения, предотвращения или облегчения аутоиммунного заболевания, выбранного из группы, состоящей из артрита, ревматического артрита, волчанки, ревматоидного артрита, воспалительного заболевания кишечника, псориатического артрита, остеоартрита, болезни Стилла, ювенильного артрита, диабета, миастении гравис, тиреоидита Хашимото, тиреоидита Орда, болезни Грейвса, синдрома Шегрена, рассеянного склероза, синдрома Гийена-Барре, острого диссеминированного энцефаломиелита, болезни Аддисона, синдрома опсоклонус-миоклонус, анкилозирующего спондилита, синдрома антифосфолипидных антител, апластической анемии, аутоиммунного гепатита, целиакии, синдрома Гудпасчера, идиопатической тромбоцитопенической пурпури, неврита зрительного нерва, склеродермии, первичного билиарного цирроза, синдрома Рейтера, артериита Такаясу, височного артериита, аутоиммунной гемолитической анемии с тепловыми антителами, гранулематоза Вегенера, псориаза, алопеции универсальной, болезни Бехчета, хронической усталости, дизаутономии, эндометриоза, интерстициального цистита, нейромиотонии, склеродермы, вульводинии или их комбинации.The compound or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, ester, acid, metabolite or prodrug or pharmaceutical composition thereof according to the present invention is suitable for the treatment, prevention or amelioration of an autoimmune disease selected from the group consisting of arthritis, rheumatoid arthritis, lupus, rheumatoid arthritis, inflammatory bowel disease, psoriatic arthritis, osteoarthritis, Still's disease, juvenile arthritis, diabetes, myasthenia gravis, Hashimoto's thyroiditis, Ord's thyroiditis, Graves' disease, Sjögren's syndrome, multiple sclerosis, Guillain-Barre syndrome, acute disseminated encephalomyelitis, Addison's disease, opsoclonus-myoclonus syndrome , ankylosing spondylitis, antiphospholipid antibody syndrome, aplastic anemia, autoimmune hepatitis, celiac disease, Goodpasture's syndrome, idiopathic thrombocytopenic purpura, optic neuritis, scleroderma, primary biliary cirrhosis, Reiter's syndrome, Takayasu's arteritis, temporal arteritis, autoimmune hemolytic anemia with warm antibodies, granules hematosis Wegener's, psoriasis, alopecia universalis, Behçet's disease, chronic fatigue, dysautonomia, endometriosis, interstitial cystitis, neuromyotonia, scleroderma, vulvodynia or a combination thereof.

Получение соединенияGetting a connection

Соединение по настоящему изобретению может быть синтезировано с применением стандартных способов синтеза, известных специалистам в данной области техники, или с применением способов, известных в данной области техники, в комбинации со способами, описанными в настоящем изобретении. Кроме того, растворители, температуры и другие условия реакций, представленные в настоящем изобретении, могут варьировать в зависимости от методик в данной области техники. В качестве дополнительного руководства также могут использоваться следующие способы синтеза.The compound of the present invention can be synthesized using standard synthetic methods known to those skilled in the art, or using methods known in the art in combination with the methods described in the present invention. In addition, the solvents, temperatures and other reaction conditions provided in the present invention may vary depending on the techniques in the art. The following synthesis methods may also be used as additional guidance.

Описанные реакции могут использоваться последовательно для получения соединений, описанных в настоящем изобретении, или они могут использоваться для синтеза строительных блоков, которые впоследствии соединяют способами, описанными в настоящем изобретении и/или известными в данной области техники.The described reactions can be used sequentially to produce the compounds described in the present invention, or they can be used to synthesize building blocks that are subsequently combined by methods described in the present invention and/or known in the art.

В некоторых вариантах реализации в настоящем документе предложены способы получения и способы применения соединений, ингибиторов тирозинкиназы, описанных в настоящем изобретении. В определенных вариантах реализации соединения, описанные в настоящем документе, можно синтезировать с помощью следующих схем синтеза. Соединения могут быть синтезированы с применением методик, аналогичных описанным ниже, с применением соответствующего альтернативного сырья.In some embodiments, provided herein are methods of preparing and methods of using the tyrosine kinase inhibitor compounds described herein. In certain embodiments, the compounds described herein can be synthesized using the following synthesis schemes. The compounds can be synthesized using techniques similar to those described below, using appropriate alternative raw materials.

Сырье, используемое для синтеза соединений, описанных в настоящем изобретении, может быть синтезировано или получено на коммерческой основе. Соединения, описанные в настоящем изобретении, и другие родственные примеси, имеющие отличающиеся заместители, могут быть синтезированы с применением методов и материалов, известных специалистам в данной области техники. Общие способы получения соединений, описанных в настоящем изобретении, могут быть получены на основе реакций, известных в данной области, и реакции могут быть модифицированы с применением соответствующих реактивов и условий, как будет понятно специалисту в данной области техники, для введения различных фрагментов в молекулы, предложенные в настоящем изобретении.The raw materials used for the synthesis of the compounds described in the present invention can be synthesized or obtained commercially. The compounds described in the present invention, and other related impurities having different substituents, can be synthesized using methods and materials known to those skilled in the art. General methods for preparing the compounds described in the present invention can be prepared from reactions known in the art, and the reactions can be modified using appropriate reagents and conditions, as will be appreciated by one skilled in the art, to introduce various moieties into the molecules, proposed in the present invention.

Продукты реакции могут быть выделены и очищены при необходимости с применением традиционных методов, включая, но не ограничиваясь ими, фильтрацию, дистилляцию, кристаллизацию, хроматографию и т.п.Характеристики таких продуктов могут быть определены с применением традиционных средств, включая физические константы и спектральные данные.The reaction products can be isolated and purified, if necessary, using traditional methods, including, but not limited to, filtration, distillation, crystallization, chromatography, etc. The characteristics of such products can be determined using traditional means, including physical constants and spectral data .

Пример 1.Example 1.

Синтез Н-(4-метил-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-6-(трифторметил)пиколинамида 1Synthesis of H-(4-methyl-3-(4-(5-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide 1

Этап 1. Синтез соединения 4-бром-1-(2-метил-5-нитрофенил)-1Н-пиразола а:Stage 1. Synthesis of compound 4-bromo-1-(2-methyl-5-nitrophenyl)-1H-pyrazole a:

Соединения 4-бромпиразол (5 г, 1 экв.), 2-фтор-1-метил-4-нитробензол (5,5 г, 1,05 экв.) и калия карбоната (13,1, 3 экв.) смешивали в ДМФА (50 мл). Смесь перемешивали в течение ночи при температуре 120°С в атмосфере азота, далее охлаждали и концентрировали. В концентрат добавляли этилацетат (200 мл). Далее полученную смесь последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным натрия сульфатом и фильтровали. Фильтрат концентрировали, далее подвергали колоночной хроматографии с получением желтого продукта а (5,2 г).The compounds 4-bromopyrazole (5 g, 1 eq.), 2-fluoro-1-methyl-4-nitrobenzene (5.5 g, 1.05 eq.) and potassium carbonate (13.1, 3 eq.) were mixed in DMF (50 ml). The mixture was stirred overnight at 120°C under a nitrogen atmosphere, then cooled and concentrated. Ethyl acetate (200 ml) was added to the concentrate. Next, the resulting mixture was washed successively with water and saturated saline, dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated and subjected to column chromatography to give yellow product a (5.2 g).

Этап 2. Синтез соединения 1-(2-метил-5-нитрофенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)- 1Н-пиразола b:Step 2. Synthesis of compound 1-(2-methyl-5-nitrophenyl)-4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)-1H-pyrazole b:

Соединение а (5 г, 1 экв.), биспинаколатодибор (5,8 г, 1,3 экв.), калия ацетат (3,5 г, 2 экв.) и [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладия дихлорид (0,72 г, 0,05 экв.) смешивали в 1,4-диоксане (50 мл). Смесь перемешивали в течение ночи при температуре 100°С в атмосфере азота и далее концентрировали. Концентрат подвергали колоночной хроматографии с получением желтого продукта b (4,0 г).Compound a (5 g, 1 eq.), bispinacolatodiboron (5.8 g, 1.3 eq.), potassium acetate (3.5 g, 2 eq.) and [1,1'-bis(diphenylphosphino)ferrocene] palladium dichloride (0.72 g, 0.05 eq.) was mixed in 1,4-dioxane (50 ml). The mixture was stirred overnight at 100°C under a nitrogen atmosphere and further concentrated. The concentrate was subjected to column chromatography to give yellow product b (4.0 g).

Этап 3. Синтез 1-метил-4-(5-(1-(2-метил-5-нитрофенил)-1Н-пиразол-4-ил)пиридин-3-ил)пиперазина с:Step 3. Synthesis of 1-methyl-4-(5-(1-(2-methyl-5-nitrophenyl)-1H-pyrazol-4-yl)pyridin-3-yl)piperazine with:

Соединение b (4,0 г, 1,1 экв.), 1-(5-бромпиридин-3-ил)-4-метилпиперазин (2,8 г, 1 экв.), калия карбонат (3,0 г, 2 экв.) итетракис(трифенилфосфин)палладий(0,6 г, 0,05 экв.) смешивали в 1,4-диоксане (40 мл) и воде (4 мл). Смесь перемешивали в течение ночи при температуре 90°С в атмосфере азота и далее концентрировали. Концентрат подвергали колоночной хроматографии с получением желтого продукта с (3,8 г).Compound b (4.0 g, 1.1 eq), 1-(5-bromopyridin-3-yl)-4-methylpiperazine (2.8 g, 1 eq), potassium carbonate (3.0 g, 2 eq.) iterakis(triphenylphosphine)palladium (0.6 g, 0.05 eq.) was mixed in 1,4-dioxane (40 ml) and water (4 ml). The mixture was stirred overnight at 90°C under a nitrogen atmosphere and further concentrated. The concentrate was subjected to column chromatography to give a yellow product (3.8 g).

Этап 4. Синтез 4-метил-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)анилина d:Step 4. Synthesis of 4-methyl-3-(4-(5-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)aniline d:

Соединение с (2,8 г, 1 экв.) и палладий на угле (0,5 г) смешивали в метаноле (30 мл). Смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре в атмосфере водорода. Далее добавляли дихлорметан (100 мл) для разведения смеси. Полученную смесь фильтровали и концентрировали с получением бледно-зеленого продукта d (2,1 г).Compound c (2.8 g, 1 eq.) and palladium on carbon (0.5 g) were mixed in methanol (30 ml). The mixture was stirred for 2 hours at room temperature under a hydrogen atmosphere. Next, dichloromethane (100 ml) was added to dilute the mixture. The resulting mixture was filtered and concentrated to give pale green product d (2.1 g).

Этап 5. Синтез соединения N-(4-метил-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-6-(трифторметил)пиколинамида 1:Step 5. Synthesis of the compound N-(4-methyl-3-(4-(5-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)-6-( trifluoromethyl)picolinamide 1:

Соединение d (0,05 г, 1 экв.), 6-(трифторметил)пиридин-2-карбоновая кислота (0,27 г, 1 экв.), 2-(7-азабензотриазол)-N,N,N',N'-тетраметилурония гексафторфосфат HATU (0,072 г, 1,1 экв.) и диизопропилэтилендиамин (DIEPA) (0,22 г, 1 экв.) смешивали в N,N-диметилформамиде ДМФА (2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Далее добавляли этилацетат (50 мл) для разведения смеси. Смесь последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным натрия сульфатом и фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением продукта 1 (0,07 г). Точная масса (расчетная): 521,21; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 522,21.Compound d (0.05 g, 1 eq.), 6-(trifluoromethyl)pyridine-2-carboxylic acid (0.27 g, 1 eq.), 2-(7-azabenzotriazole)-N,N,N', N'-tetramethyluronium hexafluorophosphate HATU (0.072 g, 1.1 eq.) and diisopropylethylenediamine (DIEPA) (0.22 g, 1 eq.) were mixed in N,N-dimethylformamide DMF (2 ml). The mixture was stirred at room temperature for 1 hour. Ethyl acetate (50 ml) was then added to dilute the mixture. The mixture was washed successively with water and brine, dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated to give product 1 (0.07 g). Exact mass (calculated): 521.21; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 522.21.

Пример 2.Example 2.

Синтез N-(4-метил-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-2-(трифторметил)изоникотинамида 2Synthesis of N-(4-methyl-3-(4-(5-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)-2-(trifluoromethyl)isonicotinamide 2

Соединение 2 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 521,21; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 522,21.Compound 2 was synthesized using steps similar to those described in Example 1. Exact mass (calculated): 521.21; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 522.21.

Пример 3.Example 3.

Синтез N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидропиран-4-ил)метокси)пиридин-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-2-(трифторметил)изоникотинамида 3Synthesis of N-(4-methyl-3-(4-(4-((tetrahydropyran-4-yl)methoxy)pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)-2-(trifluoromethyl)isonicotinamide 3

Соединение 3 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 537,19; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 538,19.Compound 3 was synthesized using steps similar to those described in Example 1. Exact mass (calculated): 537.19; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 538.19.

Пример 4.Example 4.

Синтез N-(4-метил-3-(4-(4-(2-морфолиноэтокси)пиридин-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-6-(трифторметил)пиколинамида 4Synthesis of N-(4-methyl-3-(4-(4-(2-morpholinoethoxy)pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide 4

Соединение 4 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 552,20; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 553,20.Compound 4 was synthesized using steps similar to those described in Example 1. Exact mass (calculated): 552.20; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 553.20.

Пример 5.Example 5.

Синтез N-(4-метил-3-(4-(4-(2-морфолиноэтокси)пиридин-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-2-(трифторметил)изоникотинамида 5Synthesis of N-(4-methyl-3-(4-(4-(2-morpholinoethoxy)pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)-2-(trifluoromethyl)isonicotinamide 5

Соединение 5 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 552,20; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 553,20.Compound 5 was synthesized using steps similar to those described in Example 1. Exact mass (calculated): 552.20; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 553.20.

Пример 6.Example 6.

Синтез N-(4-метил-3-(4-(4-(оксетан-3-илокси)пиридин-3-ил)-Ш-пиразол-1-ил)фенил)-6-(трифторметил)пиколинамида 6Synthesis of N-(4-methyl-3-(4-(4-(oxetan-3-yloxy)pyridin-3-yl)-N-pyrazol-1-yl)phenyl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide 6

Соединение 6 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 495,15; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 496,15.Compound 6 was synthesized using steps similar to those described in Example 1. Exact mass (calculated): 495.15; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 496.15.

Пример 7.Example 7.

Синтез N-(4-метил-3-(4-(5-(оксетан-3-илокси)пиридин-3-ил)-1H-пиразол-1-ил)фенил)-2-(трифторметил)изоникотинамида 7Synthesis of N-(4-methyl-3-(4-(5-(oxetan-3-yloxy)pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)-2-(trifluoromethyl)isonicotinamide 7

Соединение 7 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 495,15; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 496,15.Compound 7 was synthesized using steps similar to those described in Example 1. Exact mass (calculated): 495.15; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 496.15.

Пример 8.Example 8.

Синтез N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидрофуран-2-ил)метокси)пиридин-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-6-(трифторметил)пиколинамид а 8Synthesis of N-(4-methyl-3-(4-(4-((tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide a 8

Соединение 8 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 523,18; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 524,18.Compound 8 was synthesized using steps similar to those described in Example 1. Exact mass (calculated): 523.18; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 524.18.

Пример 9.Example 9.

Синтез N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидрофуран-2-ил)метокси)пиридин-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-2-(трифторметил)изоникотинамида 9Synthesis of N-(4-methyl-3-(4-(4-((tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)-2-(trifluoromethyl)isonicotinamide 9

Соединение 9 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 523,18; МС (ионизация электрораспылением) m/z (M+l)⁺: 524,18.Compound 9 was synthesized using steps similar to those described in Example 1. Exact mass (calculated): 523.18; MS (electrospray ionization) m/z (M+l) ⁺ : 524.18.

Пример 10.Example 10.

Синтез N-(3-(4-(4-(циклопентилметокси)пиридин-3-ил)-1H-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-6-(трифторметил)пиколинамида 10Synthesis of N-(3-(4-(4-(cyclopentylmethoxy)pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)-4-methylphenyl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide 10

Соединение 10 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 521,20; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 522,20.Compound 10 was synthesized using steps similar to those described in Example 1. Exact mass (calculated): 521.20; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 522.20.

Пример 11.Example 11.

Синтез N-(3-(4-(4-(циклопентилметокси)пиридин-3-ил)-1H-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-2-(трифторметил)изоникотинамида 11Synthesis of N-(3-(4-(4-(cyclopentylmethoxy)pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)-4-methylphenyl)-2-(trifluoromethyl)isonicotinamide 11

Соединение 11 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 521,20; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 522,20.Compound 11 was synthesized using steps similar to those described in Example 1. Exact mass (calculated): 521.20; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 522.20.

Пример 12.Example 12.

Синтез N-(4-метил-3-(4-(5-морфолинопиридин-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-2(трифторметил)изоникотинамида 12Synthesis of N-(4-methyl-3-(4-(5-morpholinopyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)-2(trifluoromethyl)isonicotinamide 12

Соединение 12 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 508,18; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 509,18.Compound 12 was synthesized using steps similar to those described in Example 1. Exact mass (calculated): 508.18; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 509.18.

Пример 13.Example 13.

Синтез N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидропиран-4-ил)метокси)пиридин-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-6-(трифторметил)пиколинамида 13Synthesis of N-(4-methyl-3-(4-(4-((tetrahydropyran-4-yl)methoxy)pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide 13

Соединение 13 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 537,19; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 538,19.Compound 13 was synthesized using steps similar to those described in Example 1. Exact mass (calculated): 537.19; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 538.19.

Пример 14.Example 14.

6-Фтор-N-(4-метил-3 -(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)пиколинамид 146-Fluoro-N-(4-methyl-3 -(4-(5-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)picolinamide 14

Соединение 14 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 471,21; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 472,21.Compound 14 was synthesized using steps similar to those described in Example 1. Exact mass (calculated): 471.21; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 472.21.

Пример 15.Example 15.

N-(4-Метил-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-4-(трифторметил)пиколинамид 15N-(4-Methyl-3-(4-(5-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)-4-(trifluoromethyl)picolinamide 15

Соединение 15 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 521,21; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 522,21.Compound 15 was synthesized using steps similar to those described in Example 1. Exact mass (calculated): 521.21; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 522.21.

Пример 16.Example 16.

N-(4-Метил-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-5-(трифторметил)никотинамид 16N-(4-Methyl-3-(4-(5-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)-5-(trifluoromethyl)nicotinamide 16

Соединение 16 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 521,21; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 522,21.Compound 16 was synthesized using steps similar to those described in Example 1. Exact mass (calculated): 521.21; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 522.21.

Пример 17.Example 17.

6-Хлор-N-(4-метил-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-пиразол-1-ил)фенил)пиколинамид 176-Chloro-N-(4-methyl-3-(4-(5-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)picolinamide 17

Соединение 17 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 487,18; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 488,18.Compound 17 was synthesized using steps similar to those described in Example 1. Exact mass (calculated): 487.18; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 488.18.

Пример 18.Example 18.

Синтез (4-метил-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-1,2,3-триазол-1-ил)фенил)-6-(трифторметил)пиколинамида 18Synthesis of (4-methyl-3-(4-(5-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-1,2,3-triazol-1-yl)phenyl)-6-( trifluoromethyl)picolinamide 18

Этап 1. Синтез 1-метил-4-(5-(2-(триметилсилил)этинил)пиридин-3-ил)пиперазина а Смешивали 1-(5-бромпиридин-3-ил)-4-метилпиперазин (5 г, 1 экв), триметилсилилацетилен (5,7 г, 3 экв.), Pd(PPh₃)₂Cl₂ (0,7 г, 0,05 экв.), Et₃N (5,9 г, 3 экв.), CuI (0,18 г, 0,05 экв.) и ацетонитрил (50 мл). Смесь перемешивали в течение 24 часов при температуре 100°С при защите газообразным азотом, далее охлаждали. Твердое вещество фильтровывали. Фильтрат концентрировали и подвергали колоночной хроматографии с получением коричневого твердого вещества а (4,5 г).Step 1. Synthesis of 1-methyl-4-(5-(2-(trimethylsilyl)ethynyl)pyridin-3-yl)piperazine a Mix 1-(5-bromopyridin-3-yl)-4-methylpiperazine (5 g, 1 eq), trimethylsilylacetylene (5.7 g, 3 eq.), Pd(PPh ₃ ) ₂ Cl ₂ (0.7 g, 0.05 eq.), Et ₃ N (5.9 g, 3 eq.), CuI (0.18 g, 0.05 eq.) and acetonitrile (50 ml). The mixture was stirred for 24 hours at a temperature of 100°C under protection with nitrogen gas, then cooled. The solid was filtered. The filtrate was concentrated and subjected to column chromatography to give a brown solid (4.5 g).

Этап 2. Синтез 1-(5-этинилпиридин-3-ил)-4-метилпиперазина bStep 2. Synthesis of 1-(5-ethynylpyridin-3-yl)-4-methylpiperazine b

1-Метил-4-(5-(2-(триметилсилил)этинил)пиридин-3-ил)пиперазин а (4 г, 1 экв.), K₂CO₃ (4 г, 2 экв.) и метанол (20 мл) перемешивали в течение 0,5 ч при комнатной температуре. Далее добавляли этилацетат (20 мл) для разведения смеси. Полученную смесь последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным натрия сульфатом и фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением черного масла b (2,4 г).1-Methyl-4-(5-(2-(trimethylsilyl)ethynyl)pyridin-3-yl)piperazine a (4 g, 1 eq.), K ₂ CO ₃ (4 g, 2 eq.) and methanol (20 ml) was stirred for 0.5 h at room temperature. Next, ethyl acetate (20 ml) was added to dilute the mixture. The resulting mixture was washed successively with water and brine, dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated to give black oil b (2.4 g).

Этап 3. Синтез 2-азидо-1-метил-4-нитробензола сStep 3. Synthesis of 2-azido-1-methyl-4-nitrobenzene with

2-Метил-5-нитро анилин (5 г, 1 экв.) растворяли в HCl (6,0 моль/л, 4,8 экв.). По каплям добавляли водный раствор NaNO₂ (2,3 г, 1 экв.), далее водный раствор NaN₃ (2,6 г, 1,2 экв.) при температуре 0°С. Смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Далее добавляли воду (200 мл). Полученную смесь фильтровали. Осадок на фильтре промывали водой и сушили с получением желтого твердого вещества с (5,3 г).2-Methyl-5-nitroaniline (5 g, 1 eq.) was dissolved in HCl (6.0 mol/L, 4.8 eq.). An aqueous solution of NaNO ₂ (2.3 g, 1 eq.) was added dropwise, followed by an aqueous solution of NaN ₃ (2.6 g, 1.2 eq.) at a temperature of 0°C. The mixture was stirred for 2 hours at room temperature. Next, water (200 ml) was added. The resulting mixture was filtered. The filter cake was washed with water and dried to give a yellow solid (5.3 g).

Этап 4. Синтез 1-метил-4-(5-(1-(2-метил-5-нитрофенил)-1Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиридин-3-ил)пиперазина dStep 4. Synthesis of 1-methyl-4-(5-(1-(2-methyl-5-nitrophenyl)-1H-1,2,3-triazol-4-yl)pyridin-3-yl)piperazine d

1-(5-Этинилпиридин-3-ил)-4-метилпиперазин b (2 г, 1 экв.), 2-азидо-1-метил-4-нитробензол с (1,8 г, 1 экв.), натрия аскорбат (0,4 г, 0,2 экв.), CuSO₄ (0,16 г, 0,1 экв.) и трет-бутанол/вода (1:1, 30 мл) перемешивали в течение ночи при температуре 90°С. Полученную смесь охлаждали и концентрировали. Концентрат подвергали колоночной хроматографии с получением желтого твердого вещества d (3,1 г).1-(5-Ethynylpyridin-3-yl)-4-methylpiperazine b (2 g, 1 eq.), 2-azido-1-methyl-4-nitrobenzene c (1.8 g, 1 eq.), sodium ascorbate (0.4 g, 0.2 eq.), CuSO ₄ (0.16 g, 0.1 eq.) and tert-butanol/water (1:1, 30 ml) were stirred overnight at 90°C . The resulting mixture was cooled and concentrated. The concentrate was subjected to column chromatography to give yellow solid d (3.1 g).

Синтез соединения 18 завершили с применением этапов, аналогичных последним двум этапам, описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 522,21; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 523,21.The synthesis of compound 18 was completed using steps similar to the last two steps described in example 1. Exact mass (calculated): 522.21; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 523.21.

Пример 19.Example 19.

N-(4-Метил-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1Н-1,2,3-триазол-1-ил)фенил)-2-(трифторметил)изоникотинамид 19N-(4-Methyl-3-(4-(5-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-1,2,3-triazol-1-yl)phenyl)-2- (trifluoromethyl)isonicotinamide 19

Соединение 19 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 18. Точная масса (расчетная): 522,21; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 523,21.Compound 19 was synthesized using steps similar to those described in Example 18. Exact mass (calculated): 522.21; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 523.21.

Пример 20.Example 20.

N-(4-Метил-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1Н-1,2,3-триазол-1-ил)фенил)-5-(трифторметил)никотинамид 20N-(4-Methyl-3-(4-(5-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-1,2,3-triazol-1-yl)phenyl)-5- (trifluoromethyl)nicotinamide 20

Соединение 20 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 18. Точная масса (расчетная): 522,21; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 523,21.Compound 20 was synthesized using steps similar to those described in Example 18. Exact mass (calculated): 522.21; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 523.21.

Пример 21.Example 21.

N-(4-Метил-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1Н-1,2,3-триазол-1-ил)фенил)-4-(трифторметил)пиколинамид 21N-(4-Methyl-3-(4-(5-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-1,2,3-triazol-1-yl)phenyl)-4- (trifluoromethyl)picolinamide 21

Соединение 21 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 18. Точная масса (расчетная): 522,21; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 523,21.Compound 21 was synthesized using steps similar to those described in Example 18. Exact mass (calculated): 522.21; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 523.21.

Пример 22.Example 22.

6-Хлор-N-(4-метил-3 -(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-1,2,3-триазол-1-ил)фенил)пиколинамид 226-Chloro-N-(4-methyl-3 -(4-(5-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-1,2,3-triazol-1-yl)phenyl )picolinamide 22

Соединение 22 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 18. Точная масса (расчетная): 488,18; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 489,18.Compound 22 was synthesized using steps similar to those described in Example 18. Exact mass (calculated): 488.18; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 489.18.

Пример 23.Example 23.

6-Фтор-N-(4-метил-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-1,2,3-триазол-1-ил)фенил)пиколинамид 236-Fluoro-N-(4-methyl-3-(4-(5-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-1,2,3-triazol-1-yl)phenyl )picolinamide 23

Соединение 23 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 18. Точная масса (расчетная): 472,21; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 473,21.Compound 23 was synthesized using steps similar to those described in Example 18. Exact mass (calculated): 472.21; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 473.21.

Пример 24.Example 24.

N-(4-Фтор-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-1,2,3-триазол-1-ил)фенил)-6-(трифторметил)пиколинамид 24N-(4-Fluoro-3-(4-(5-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-1,2,3-triazol-1-yl)phenyl)-6- (trifluoromethyl)picolinamide 24

Соединение 24 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 18. Точная масса (расчетная): 526,18; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 527,18.Compound 24 was synthesized using steps similar to those described in Example 18. Exact mass (calculated): 526.18; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 527.18.

Пример 25.Example 25.

N-(4-Фтор-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-1,2,3-триазол-1-ил)фенил)-2-(трифторметил) изоникотинамид 25N-(4-Fluoro-3-(4-(5-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-1,2,3-triazol-1-yl)phenyl)-2- (trifluoromethyl)isonicotinamide 25

Соединение 25 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 18. Точная масса (расчетная): 526,18; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 527,18.Compound 25 was synthesized using steps similar to those described in Example 18. Exact mass (calculated): 526.18; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 527.18.

Пример 26.Example 26.

N-(4-Фтор-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-1,2,3-триазол-1-ил)фенил)-5-(трифторметил)никотинамид 26N-(4-Fluoro-3-(4-(5-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-1,2,3-triazol-1-yl)phenyl)-5- (trifluoromethyl)nicotinamide 26

Соединение 26 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 18. Точная масса (расчетная): 526,18; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 527,18.Compound 26 was synthesized using steps similar to those described in Example 18. Exact mass (calculated): 526.18; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 527.18.

Пример 27.Example 27.

N-(4-Фтор-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-1,2,3-триазол-1-ил)фенил)-4-(трифторметил)пиколинамид 27N-(4-Fluoro-3-(4-(5-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-1,2,3-triazol-1-yl)phenyl)-4- (trifluoromethyl)picolinamide 27

Соединение 27 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 18. Точная масса (расчетная): 526,18; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 527,18.Compound 27 was synthesized using steps similar to those described in Example 18. Exact mass (calculated): 526.18; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 527.18.

Пример 28.Example 28.

6-Хлор-N-(4-фтор-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1Н-1,2,3-триазол-1-ил)фенил)пиколинамид 286-Chloro-N-(4-fluoro-3-(4-(5-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-1,2,3-triazol-1-yl)phenyl )picolinamide 28

Соединение 28 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 18. Точная масса (расчетная): 492,15; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 493,15.Compound 28 was synthesized using steps similar to those described in Example 18. Exact mass (calculated): 492.15; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 493.15.

Пример 29.Example 29.

6-Фтор-N-(4-фтор-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1Н-1,2,3-триазол-1-ил)фенил)пиколинамид 296-Fluoro-N-(4-fluoro-3-(4-(5-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-1,2,3-triazol-1-yl)phenyl )picolinamide 29

Соединение 29 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 18. Точная масса (расчетная): 476,18; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 477,18.Compound 29 was synthesized using steps similar to those described in Example 18. Exact mass (calculated): 476.18; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 477.18.

Пример 30.Example 30.

6-Хлор-N-(4-хлор-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-1,2,3-триазол-1-ил)фенил)пиколинамид 306-Chloro-N-(4-chloro-3-(4-(5-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-1,2,3-triazol-1-yl)phenyl )picolinamide 30

Соединение 30 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 18. Точная масса (расчетная): 508,12; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 509,12.Compound 30 was synthesized using steps similar to those described in Example 18. Exact mass (calculated): 508.12; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 509.12.

Пример 31.Example 31.

6-Фтор-N-(4-хлор-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1Н-1,2,3-триазол-1-ил)фенил)пиколинамид 316-Fluoro-N-(4-chloro-3-(4-(5-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-1,2,3-triazol-1-yl)phenyl )picolinamide 31

Соединение 31 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 18. Точная масса (расчетная): 492,15; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 493,15.Compound 31 was synthesized using steps similar to those described in Example 18. Exact mass (calculated): 492.15; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 493.15.

Пример 32.Example 32.

N-(3-(4-(5-(2-Окса-6-аза-спиро[3.3]гепт-6-ил]пиридин-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-6-(трифторметил)пиколинамид 32N-(3-(4-(5-(2-Oxa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-yl]pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)-4-methylphenyl) -6-(trifluoromethyl)picolinamide 32

Соединение 32 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 520,18; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 521,18.Compound 32 was synthesized using steps similar to those described in Example 1. Exact mass (calculated): 520.18; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 521.18.

Пример 33.Example 33.

N-(3-(4-(5-(2-Окса-6-аза-спиро[3.3]гепт-6-ил]пиридин-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-2-(трифторметил)изоникотинамид 33N-(3-(4-(5-(2-Oxa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-yl]pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)-4-methylphenyl) -2-(trifluoromethyl)isonicotinamide 33

Соединение 33 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 520,18; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 521,18.Compound 33 was synthesized using steps similar to those described in Example 1. Exact mass (calculated): 520.18; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 521.18.

Пример 34.Example 34.

N-(3-(4-(5-(2-Окса-6-аза-спиро[3.3]гепт-6-ил]пиридин-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-5-(трифторметил)никотинамид 34N-(3-(4-(5-(2-Oxa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-yl]pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)-4-methylphenyl) -5-(trifluoromethyl)nicotinamide 34

Соединение 34 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 520,18; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 521,18.Compound 34 was synthesized using steps similar to those described in Example 1. Exact mass (calculated): 520.18; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 521.18.

Пример 35.Example 35.

N-(3-(4-(5-(2-Окса-6-аза-спиро[3.3]гепт-6-ил]пиридин-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-4-(трифторметил)пиколинамид 35N-(3-(4-(5-(2-Oxa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-yl]pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)-4-methylphenyl) -4-(trifluoromethyl)picolinamide 35

Соединение 35 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 520,18; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 521,18.Compound 35 was synthesized using steps similar to those described in Example 1. Exact mass (calculated): 520.18; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 521.18.

Пример 36.Example 36.

N-(3-(4-(5-(2-Окса-6-аза-спиро[3.3]гепт-6-ил]пиридин-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-6-хлорпиколинамид 36N-(3-(4-(5-(2-Oxa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-yl]pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)-4-methylphenyl) -6-chloropicolinamide 36

Соединение 36 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 486,15; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 487,15.Compound 36 was synthesized using steps similar to those described in Example 1. Exact mass (calculated): 486.15; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 487.15.

Пример 37.Example 37.

N-(3-(4-(5-(2-Окса-6-аза-спиро[3.3]гепт-6-ил]пиридин-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-6-фторпиколинамид 37N-(3-(4-(5-(2-Oxa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-yl]pyridin-3-yl)-1H-pyrazol-1-yl)-4-methylphenyl) -6-fluoropicolinamide 37

Соединение 37 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 470,18; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 471,18.Compound 37 was synthesized using steps similar to those described in Example 1. Exact mass (calculated): 470.18; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 471.18.

Пример 38.Example 38.

N-(3-(4-(5-(2-Окса-6-аза-спиро[3.3]гепт-6-ил]пиридин-3-ил)-1Н-1,2,3-триазол-1-ил)-4-метилфенил)-6-(трифторметил)пиколинамид 38N-(3-(4-(5-(2-Oxa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-yl]pyridin-3-yl)-1H-1,2,3-triazol-1-yl )-4-methylphenyl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide 38

Соединение 38 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 18. Точная масса (расчетная): 521,17; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 522,17.Compound 38 was synthesized using steps similar to those described in Example 18. Exact mass (calculated): 521.17; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 522.17.

Пример 39.Example 39.

N-(3-(4-(5-(2-Окса-6-аза-спиро[3.3]гепт-6-ил]пиридин-3-ил)-1Н-1,2,3-триазол-1-ил)-4-метилфенил)-2-(трифторметил)изоникотинамид 39N-(3-(4-(5-(2-Oxa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-yl]pyridin-3-yl)-1H-1,2,3-triazol-1-yl )-4-methylphenyl)-2-(trifluoromethyl)isonicotinamide 39

Соединение 39 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 18. Точная масса (расчетная): 521,17; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 522,17.Compound 39 was synthesized using steps similar to those described in Example 18. Exact mass (calculated): 521.17; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 522.17.

Пример 40.Example 40.

N-(3-(4-(5-(2-Окса-6-аза-спиро[3.3]гепт-6-ил]пиридин-3-ил)-1Н-1,2,3-триазол-1-ил)-4-метилфенил)-5-(трифторметил)никотинамид 40N-(3-(4-(5-(2-Oxa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-yl]pyridin-3-yl)-1H-1,2,3-triazol-1-yl )-4-methylphenyl)-5-(trifluoromethyl)nicotinamide 40

Соединение 40 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 18. Точная масса (расчетная): 521,17; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 522,17.Compound 40 was synthesized using steps similar to those described in Example 18. Exact mass (calculated): 521.17; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 522.17.

Пример 41.Example 41.

N-(3-(4-(5-(2-Окса-6-аза-спиро[3.3]гепт-6-ил]пиридин-3-ил)-1Н-1,2,3-триазол-1-ил)-4-метилфенил)-4-(трифторметил)пиколинамид 41N-(3-(4-(5-(2-Oxa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-yl]pyridin-3-yl)-1H-1,2,3-triazol-1-yl )-4-methylphenyl)-4-(trifluoromethyl)picolinamide 41

Соединение 41 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 18. Точная масса (расчетная): 521,17; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 522,17.Compound 41 was synthesized using steps similar to those described in Example 18. Exact mass (calculated): 521.17; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 522.17.

Пример 42.Example 42.

N-(3-(4-(5-(2-Окса-6-аза-спиро[3.3]гепт-6-ил]пиридин-3-ил)-1Н-1,2,3-триазол-1-ил)-4-метилфенил)-4-хлорпиколинамид 42N-(3-(4-(5-(2-Oxa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-yl]pyridin-3-yl)-1H-1,2,3-triazol-1-yl )-4-methylphenyl)-4-chloropicolinamide 42

Соединение 42 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 18. Точная масса (расчетная): 487,15; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 488,15.Compound 42 was synthesized using steps similar to those described in Example 18. Exact mass (calculated): 487.15; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 488.15.

Пример 43.Example 43.

N-(3-(4-(5-(2-Окса-6-аза-спиро[3.3]гепт-6-ил]пиридин-3-ил)-1Н-1,2,3-триазол-1-ил)-4-метилфенил)-4-фторпиколинамид 43N-(3-(4-(5-(2-Oxa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-yl]pyridin-3-yl)-1H-1,2,3-triazol-1-yl )-4-methylphenyl)-4-fluoropicolinamide 43

Соединение 43 синтезировали с применением этапов, аналогичных описанным в примере 18. Точная масса (расчетная): 471,18; МС (ионизация электрораспылением) m/z (М+1)⁺: 472,18.Compound 43 was synthesized using steps similar to those described in Example 18. Exact mass (calculated): 471.18; MS (electrospray ionization) m/z (M+1) ⁺ : 472.18.

Пример 44. Влияние нового ингибитора киназы на рост раковых клеток В этом примере использовали первичную В-клетку мыши BaF3 (приобретенную у компании АТСС, США). Кроме того, в этом примере также использовали мышиную BaF3-tel-PDGFRα (стабильно экспрессирующую киназу PDGFRα), мышиную BaF3-tel-PDGFRβ (стабильно экспрессирующую киназу PDGFRβ), BaF3-P210 (стабильно экспрессирующую киназу ABL), BaF3-P210-T315I (стабильно экспрессирующую киназу ABL-T315I), BaF3-FL-BRAF-V600E (стабильно экспрессирующую киназу BRAF-V600E), BaF3-TEL-cKIT (стабильно экспрессирующую киназу cKIT), BaF3-TEL-VEGFR2 (стабильно экспрессирующую киназу VEGFR2), BaF3-TEL-FGFR2 (стабильно экспрессирующую киназу FGFR2). Все вышеуказанные линии клеток были сконструированы в нашей лаборатории следующим способом. Последовательности BCR-ABL человека (Р210 или P210/T315I с мутацией), полноразмерного фрагмента BRAF-V600E, cKIT, VEGFR2, FGFR2, PDGFRα, области PDGFRβ киназы амплифицировали, соответственно, методом ПЦР, и включали, соответственно, в MSCV-Puro вектор (приобретенный у компании Clontech), содержащий N-концевой фрагмент TEL и/или NPM фрагмент, и/или TPR фрагмент, и стабильно переносили в клетки BaF3 мыши методом с использованием ретровируса, а фактор роста ИЛ-3 удаляли. В итоге были получены линии клеток, которые переносятся в белки в зависимости от PDGFRα, PDGFRβ.Example 44 Effect of a Novel Kinase Inhibitor on Cancer Cell Growth In this example, a primary BaF3 mouse B cell (purchased from ATCC, USA) was used. In addition, mouse BaF3-tel-PDGFRα (stably expressing PDGFRα kinase), mouse BaF3-tel-PDGFRβ (stably expressing PDGFRβ kinase), BaF3-P210 (stably expressing ABL kinase), BaF3-P210-T315I ( stably expressing kinase ABL-T315I), BaF3-FL-BRAF-V600E (stably expressing kinase BRAF-V600E), BaF3-TEL-cKIT (stably expressing cKIT kinase), BaF3-TEL-VEGFR2 (stably expressing VEGFR2 kinase), BaF3- TEL-FGFR2 (stably expressing FGFR2 kinase). All of the above cell lines were constructed in our laboratory using the following method. The sequences of human BCR-ABL (P210 or P210/T315I with mutation), full-length fragment of BRAF-V600E, cKIT, VEGFR2, FGFR2, PDGFRα, PDGFRβ kinase region were amplified, respectively, by PCR, and included, respectively, in the MSCV-Puro vector ( purchased from Clontech) containing the N-terminal TEL fragment and/or NPM fragment and/or TPR fragment, and were stably transferred into mouse BaF3 cells by the retroviral method, and the growth factor IL-3 was removed. As a result, cell lines were obtained that transfer proteins depending on PDGFRα, PDGFRβ.

В этом примере к указанным клеткам добавляли растворы исследуемого соединения при разных концентрациях (0,000508 мкМ, 0,00152 мкМ, 0,00457 мкМ, 0,0137 мкМ, 0,0411 мкМ, 0,123 мкМ, 0,370 мкМ, 1,11 мкМ, 3,33 мкМ, 10 мкМ). Клетки инкубировали в течение 72 ч. Инкубированные клетки детектировали с помощью набора для определения жизнеспособности клеток Cell Titer-Glo (приобретенного в компании Promega, США) (при использовании набора Cell Tier-Glo жизнеспособность клеток рассчитывают путем измерения значения люминесценции, которое пропорционально количеству АТФ, которое положительно связано с количеством клеток во флаконе, следовательно, жизнеспособность клеток может быть получена путем определения количества АТФ), для количественного определения жизнеспособных клеток с помощью микропланшетного анализатора. Рассчитывали медианную ингибирующую концентрацию GI₅₀ соответствующих соединений и контрольных соединений по сравнению с пролиферацией соответствующих линий клеток (с результатами, показанными в таблицах 1 и 2). Результаты показывают, что исследованные соединения обладают очень сильным ингибирующим действием в отношении каждого из PDGFRα и PDGFRβ, соединение 1 не обладает ингибирующим действием или относительно слабым ингибирующим действием в отношении других киназных мишеней, таких как BRAF-V600E, ABL, ABL-T315I, cKIT, VEGFR2, FGFR2.In this example, solutions of the test compound at different concentrations (0.000508 μM, 0.00152 μM, 0.00457 μM, 0.0137 μM, 0.0411 μM, 0.123 μM, 0.370 μM, 1.11 μM, 3.33 µM, 10 µM). The cells were incubated for 72 hours. The incubated cells were detected using the Cell Titer-Glo Cell Viability Kit (purchased from Promega, USA) (when using the Cell Tier-Glo kit, cell viability is calculated by measuring the luminescence value, which is proportional to the amount of ATP, which is positively related to the number of cells in the vial, therefore, cell viability can be obtained by determining the amount of ATP) to quantify viable cells using a microplate analyzer. The median GI ₅₀ inhibitory concentration of the respective compounds and control compounds was calculated compared to the proliferation of the respective cell lines (with results shown in Tables 1 and 2). The results show that the compounds tested have a very strong inhibitory effect on each of PDGFRα and PDGFRβ, compound 1 has no inhibitory effect or relatively weak inhibitory effect on other kinase targets such as BRAF-V600E, ABL, ABL-T315I, cKIT, VEGFR2, FGFR2.

Пример 45. Экспериментальные результаты для соединения 1 на мышиных моделях с клетками хронического эозинофильного лейкоза человека EOL-1 (экспрессирующими PDGFRα)Example 45: Experimental Results for Compound 1 in Mouse Models with EOL-1 Human Chronic Eosinophilic Leukemia Cells (PDGFRα Expressing)

1) Самок мышей линии Bal b/с, 46 недель, приобретали в компании Shanghai SLAC Laboratory Animal Co., Ltd. и растили в лаборатории SPF; питьевую воду и подстилку стерилизовали автоклавированием; и все операции с участием мышей выполняли в асептических условиях;1) Female Bal b/c mice, 46 weeks old, were purchased from Shanghai SLAC Laboratory Animal Co., Ltd. and grown in the SPF laboratory; drinking water and bedding were sterilized by autoclaving; and all operations involving mice were performed under aseptic conditions;

2) В нулевой день вводили 1 × 10⁷ клеток хронического эозинофильного лейкоза человека EOL-1 (экспрессирующих PDGFRα) (приобретенных в АТСС (Американской коллекции типовых клеточных культур)) подкожно в левый бок каждой из мышей;2) On day 0, 1 × 10 ⁷ human chronic eosinophilic leukemia EOL-1 cells (expressing PDGFRα) (purchased from ATCC) were injected subcutaneously into the left flank of each mouse;

3) На 15 день мышей случайным образом разделили на четыре группы по пять мышей на группу и вводили соответственно в течение 14 дней. Мышам в группе 1 внутрибрюшинно вводили носитель на основе метилцеллюлозы (приобретенный у компании Sangon); мышам в группах 2 и 3 вводили соединение 1 в дозе 1 мг/кг массы тела мыши и 5 мг/кг массы тела мыши, соответственно; мышам в группе 4 вводили иматиниб в дозе 25 мг/кг (приобретенный в компании МСЕ, Шанхай);3) On day 15, mice were randomly divided into four groups of five mice per group and administered accordingly for 14 days. Mice in group 1 were intraperitoneally injected with methylcellulose-based vehicle (purchased from Sangon); mice in groups 2 and 3 were administered Compound 1 at a dose of 1 mg/kg mouse body weight and 5 mg/kg mouse body weight, respectively; mice in group 4 were administered imatinib at a dose of 25 mg/kg (purchased from MCE, Shanghai);

4) С 15-го дня ежедневно измеряли длину/ширину подкожных опухолей с помощью штангенциркуля, и ежедневно регистрировали массу тела мышей, чтобы определить влияние соединения 1 на массу тела мышей;4) From day 15, the length/width of subcutaneous tumors was measured daily using a caliper, and the body weight of the mice was recorded daily to determine the effect of Compound 1 on the body weight of the mice;

5) На 29-й день мышей умерщвляли углекислым газом, а подкожные опухоли извлекали и взвешивали для сравнения;5) On day 29, mice were killed with carbon dioxide, and subcutaneous tumors were removed and weighed for comparison;

6) Тенденцию роста подкожной опухоли в течение 15-29 дней анализировали статистически. Объем опухоли рассчитывали как длина × ширина × ширина/2 мм³.6) The growth trend of subcutaneous tumor during 15-29 days was analyzed statistically. Tumor volume was calculated as length × width × width/2 mm ³ .

Результаты показаны на фигурах 1а-1с. На фиг. 1а показано изменение средней массы тела мышей с течением времени в различных группах лечения (показано на фигуре в виде относительной массы тела: процент, рассчитанный на основе массы тела мыши в начале введения) в мышиной модели опухоли из клеток хронического эозинофильного лейкоза человека EOL-1; на фиг. 1b показано изменение среднего размера опухолей с течением времени в различных группах лечения (показано на фиг. в виде относительного размера опухоли: процент, рассчитанный на основе размера опухоли, имеющейся у мыши в начале введения) в мышиной модели опухоли клетки хронического эозинофильного лейкоза человека EOL-1; на фиг. 1с показано среднее значение массы опухоли и рассчитанная скорость ингибирования роста опухоли у мышей в различных группах лечения через 14 дней после введения в мышиной модели с клетками хронического эозинофильного лейкоза человека EOL-1.The results are shown in Figures 1a-1c. In fig. 1a shows the change in the average body weight of mice over time in different treatment groups (shown in the figure as relative body weight: percentage calculated based on the body weight of the mouse at the beginning of administration) in the human chronic eosinophilic leukemia EOL-1 cell tumor model of the mouse; in fig. 1b shows the change in mean tumor size over time in the different treatment groups (shown in the figure as relative tumor size: percentage calculated based on the size of tumor present in the mouse at the start of administration) in the EOL-human chronic eosinophilic leukemia cell tumor model. 1; in fig. 1c shows the mean tumor weight and the calculated rate of tumor growth inhibition in mice in different treatment groups 14 days after administration in a murine model of human chronic eosinophilic leukemia EOL-1 cells.

Экспериментальные результаты на фиг. 1b продемонстрировали, что группа, которой вводили соединение 1 в дозе 5 мг/кг, показала превосходный эффект ингибирования опухоли у мышей в мышиной модели опухоли из клеток хронического эозинофильного лейкоза человека EOL-1 (экспрессирующей PDGFRα). Экспериментальные результаты на фиг. 1с показали, что скорость ингибирования роста опухоли достигала 96% через 14 дней после введения в мышиной модели с клетками хронического эозинофильного лейкоза человека EOL-1 для группы, которой вводили соединение 1 в дозе 5 мг/кг (см. рисунок 1с), где степень ингибирования роста опухоли (TGI) = (масса опухоли в контрольной группе - масса опухоли в испытуемой группе)/масса опухоли в контрольной группе. Это указывает на то, что соединение 1 согласно настоящему изобретению может значительно ингибировать рост опухоли в животной модели с клетками хронического эозинофильного лейкоза человека EOL-1 (экспрессирующей PDGFRα). Кроме того, результаты на фиг. 1а также продемонстрировали, что соединение 1 не только эффективно ингибировало рост опухоли у мыши, но и мало влияло на массу тела мыши, что позволяет предположить, что соединение 1 пригодно для введения животному.Experimental results in Fig. 1b demonstrated that the group administered Compound 1 at a dose of 5 mg/kg showed superior tumor inhibition effect in mice in a human chronic eosinophilic leukemia EOL-1 cell tumor model (expressing PDGFRα). Experimental results in Fig. 1c showed that the tumor growth inhibition rate reached 96% 14 days after administration in a mouse model with human chronic eosinophilic leukemia EOL-1 cells for the group that was administered compound 1 at a dose of 5 mg/kg (see Figure 1c), where the degree tumor growth inhibition (TGI) = (tumor weight in the control group - tumor weight in the test group) / tumor weight in the control group. This indicates that Compound 1 of the present invention can significantly inhibit tumor growth in an animal model of human chronic eosinophilic leukemia EOL-1 cells (expressing PDGFRα). Moreover, the results in FIG. 1a also demonstrated that Compound 1 not only effectively inhibited tumor growth in mice, but also had little effect on mouse body weight, suggesting that Compound 1 is suitable for administration to animals.

Пример 46. Экспериментальные результаты для соединения 1 в крысиной модели легочной артериальной гипертензии (ЛАГ)Example 46 Experimental Results for Compound 1 in a Rat Model of Pulmonary Arterial Hypertension (PAH)

120 самцов крыс линии SD массой 180±20 г было предоставлено Центром животноводства Цинлуншань с лицензией №SCXK(SU)2017-0001. Этих крыс кормили обычными гранулами (Jiangsu Xietong Bio. Co., Ltd.), и выращивали в чистом помещении для животных с циклом света/темноты 12 часов/12 часов. Крысы получали пищу и питьевую воду без ограничений. Температуру поддерживали на уровне 20-26°С, а относительная влажность составляла 40-70%.120 male SD rats weighing 180 ± 20 g were provided by Qinglongshan Animal Husbandry Center with license No. SCXK(SU)2017-0001. These rats were fed regular pellets (Jiangsu Xietong Bio. Co., Ltd.) and were raised in a clean animal facility with a 12-h/12-h light/dark cycle. The rats received food and drinking water ad libitum. The temperature was maintained at 20-26°C and the relative humidity was 40-70%.

120 крыс линии SD распределили в 24 клетки по 5 крыс на группу. После адаптивного роста в течение 7 дней без каких-либо аномальных условий 110 крыс использовали для создания модели легочной артериальной гипертензии, а остальных 10 крыс использовали для нормального контроля. С животными обращались в строгом соответствии с правилами этики в отношении животных на протяжении всего эксперимента.120 SD rats were distributed into 24 cages, 5 rats per group. After adaptive growth for 7 days without any abnormal conditions, 110 rats were used to establish a model of pulmonary arterial hypertension, and the remaining 10 rats were used as normal controls. Animals were handled in strict accordance with animal ethics guidelines throughout the experiment.

Согласно способу, описанному в «Фармацевтических экспериментальных моделях животных: Изготовление и применение» ("Pharmaceutical experimental animal models: Fabrication and application") и стандартной операционной процедуре для построения модели ЛАГ в модельном центре для животных крысам внутрибрюшинно вводили раствор 1% монокроталина (МСТ, приобретенный у компании Sigma, США) один раз в дозе 35 мг/кг. На 7-й день после первой инъекции МСТ снова вводили МСТ в дозе 20 мг/кг. Крысам в нормальной контрольной группе внутрибрюшинно вводили эквивалентное количество воды в качестве холостого растворителя. Конкретные этапы представлены ниже.According to the method described in "Pharmaceutical experimental animal models: Fabrication and application" and the standard operating procedure for constructing a PAH model in an animal model center, rats were intraperitoneally injected with a solution of 1% monocrotaline (MCT, purchased from Sigma, USA) once at a dose of 35 mg/kg. On the 7th day after the first MCT injection, MCT was administered again at a dose of 20 mg/kg. Rats in the normal control group were intraperitoneally injected with an equivalent amount of water as a vehicle blank. The specific steps are presented below.

После того, как крысы в каждой из клеток голодали в течение 8 ч, каждую из крыс взвешивали и регистрировали исходную массу тела после голодания; исходя из измеренной иходной массы тела каждой из крыс, количество МСТ, необходимое для инъекции каждой из крыс, рассчитывали в соответствии с модельной дозой 35 мг/кг; исходя из количества МСТ, необходимого для введения каждой крысе, рассчитывали дозу для инъекции 1% раствора МСТ; крыс фиксировали в держателе и внутрибрюшинно вводили 1% раствор МСТ в расчетной дозе; после инъекции крыс возвращали в клетки для обычного кормления.After the rats in each cage had fasted for 8 h, each rat was weighed and initial post-fasting body weight was recorded; Based on the measured starting body weight of each of the rats, the amount of MCT required for injection of each of the rats was calculated in accordance with the model dose of 35 mg/kg; Based on the amount of MCT required for administration to each rat, the dose for injection of a 1% MCT solution was calculated; rats were fixed in a holder and 1% MCT solution was injected intraperitoneally at the calculated dose; After injection, rats were returned to their cages for normal feeding.

Кровь из хвостовой артерии брали для анализа газа крови на 3-й и 4-й неделях, соответственно, после инъекции МСТ. 0,5 мл крови из хвостовой артерии отбирали медленно, переносили в пробирку с антикоагулянтом и загружали в анализатор газов крови для определения индексов парциального давления кислорода (рО₂), парциального давления углекислого газа (pCO₂) и насыщения крови кислородом (SaO₂) в крови. Анализатор газов крови работал в соответствии со стандартной операционной процедурой. На основании измеренных результатов крысы с легочной гипертензией были случайным образом разделены на следующие группы (10 крыс на группу): группа отрицательного контроля (то есть, группа носителя), группа 50 мг/кг бозентана, лекарственный препарат для клинического лечения легочной гипертензии (приобретенный у компании МСЕ, Шанхай), группа 50 мг/кг иматиниба, группа 45 мг/кг соединения 1, группа 30 мг/кг соединения 1 и группа 15 мг/кг соединения 1. Каждой из крыс вводили вещества через желудочный зонд один раз в день, начиная со дня перегруппировки на неделе 4. Крысам в группе отрицательного контроля ежедневно вводили через желудочный зонд с равным объемом метилцеллюлозы в качестве носителя. Крысам в каждой из групп вводили через желудочный зонд в течение 4 последовательных недель (т.е. 28 дней). Для каждой из крыс в соответствующих группах состояние, появление симптомов одышки, снижение активности, ускорение сердцебиения и т.п.наблюдали одновременно с ежедневным введением через желудочный зонд. Крыс взвешивали после голодания в течение ночи два раза в неделю. Дозировку введения рассчитывали на основании результатов взвешивания.Blood from the tail artery was collected for blood gas analysis at weeks 3 and 4, respectively, after MCT injection. 0.5 ml of blood from the tail artery was taken slowly, transferred into a tube with an anticoagulant and loaded into a blood gas analyzer to determine the indices of partial pressure of oxygen (pO ₂ ), partial pressure of carbon dioxide (pCO ₂ ) and blood oxygen saturation (SaO ₂ ) in blood. The blood gas analyzer was operated according to standard operating procedure. Based on the measured results, rats with pulmonary hypertension were randomly divided into the following groups (10 rats per group): negative control group (i.e., vehicle group), 50 mg/kg bosentan group, a drug for the clinical treatment of pulmonary hypertension (purchased from MCE, Shanghai), 50 mg/kg imatinib group, 45 mg/kg Compound 1 group, 30 mg/kg Compound 1 group, and 15 mg/kg Compound 1 group. Each rat was administered the substances by gavage once a day. starting on the rearrangement day in week 4. Rats in the negative control group were gavaged daily with an equal volume of methylcellulose as vehicle. Rats in each group were gavaged for 4 consecutive weeks (i.e., 28 days). For each of the rats in the respective groups, the condition, occurrence of symptoms of dyspnea, decreased activity, increased heart rate, etc. were observed simultaneously with daily gavage. Rats were weighed after overnight fasting twice a week. The dosage of administration was calculated based on the weighing results.

Определение артериального давления в легких и систолического давления в правом желудочке крыс: в конце эксперимента (через 28 дней после введения через зонд) крыс взвешивали и анестезировали путем внутрибрюшинной инъекции 10% хлоралгидрата (приобретенного у компании Sangon) (0,3 мл/100 г). После того, как крысы находились под наркозом, измеряли легочное артериальное давление и систолическое давление правого желудочка крыс. Метод измерения можно найти в стандартных операционных процедурах функциональной экспериментальной системы. Следующие этапы представлены ниже.Determination of pulmonary blood pressure and right ventricular systolic pressure in rats: At the end of the experiment (28 days after gavage), rats were weighed and anesthetized by intraperitoneal injection of 10% chloral hydrate (purchased from Sangon) (0.3 ml/100 g) . After the rats were anesthetized, pulmonary arterial pressure and right ventricular systolic pressure of the rats were measured. The measurement method can be found in the standard operating procedures of the functional experimental system. The next steps are presented below.

Катетер №3.5 для пупочной вены подключали к датчику давления системы. Готовый раствор гепарина натрия (приобретенный у компании Sangon) заливали в датчик и катетер, и выпускали пузырьки. Анестезированную крысу помещали на хирургическую анатомическую пластину, регулируемую по температуре. Температуру пластины регулировали таким образом, чтобы поддерживать ее на уровне около 37°С. Крысу фиксировали в положении лежа на спине. Ножницами разрезали кожу шеи до края ключицы с последующим тупым рассечением подкожных тканей и мышц, обнажая правую наружную яремную вену. Жировую ткань на поверхности удаляли офтальмологическими хирургическими ножницами. Наружную яремную вену лигировали на телецентрическом конце хирургической нитью и делали свободный узел на проксимальном конце для резервирования. Наружную яремную вену осторожно приподнимали офтальмологическим пинцетом и разрезали офтальмологическими ножницами, чтобы сделать V-образное отверстие. Катетер быстро вставляли, и ослабленный узел на проксимальном конце слегка затягивали, чтобы предотвратить кровотечение. Изгиб катетера в переднем сегменте поддерживали в направлении влево, и на расстоянии около 1-1,5 см катетер далее вводился в положение 2 см, при этом подмышечную вену крысы отодвигали, чтобы приблизиться к правой ушной раковине. В это время катетер осторожно вращали по часовой стрелке на 100-180°, удерживая правую ушную раковину на расстоянии. На расстоянии около 3 см конец катетера вошел в правое предсердие и его ввели дальше, чтобы достичь атриовентрикулярного отверстия на расстоянии около 4-4,5 см. В это время катетер осторожно вращали против часовой стрелки на 90-180°, чтобы зацепить атриовентрикулярное отверстие и войти в правый желудочек, при этом наблюдалась волна правого желудочка с относительно большой амплитудой. Катетер далее вводили медленно вперед и вводили в легочную артерию на расстоянии около 5 см.A catheter No. 3.5 for the umbilical vein was connected to the system pressure sensor. A prepared sodium heparin solution (purchased from Sangon) was poured into the probe and catheter, and the bubbles were released. The anesthetized rat was placed on a temperature-controlled surgical anatomical plate. The plate temperature was adjusted to maintain it at about 37°C. The rat was fixed in a supine position. Scissors were used to cut the skin of the neck to the edge of the clavicle, followed by blunt dissection of the subcutaneous tissue and muscle, exposing the right external jugular vein. The fatty tissue on the surface was removed using ophthalmic surgical scissors. The external jugular vein was ligated at the telecentric end with surgical suture and a free knot was made at the proximal end for backup. The external jugular vein was carefully lifted with ophthalmic forceps and cut with ophthalmic scissors to create a V-shaped hole. The catheter was quickly inserted and the loose knot at the proximal end was lightly tightened to prevent bleeding. The curve of the catheter in the anterior segment was maintained in a leftward direction, and at a distance of about 1-1.5 cm, the catheter was further inserted to a position of 2 cm, while the axillary vein of the rat was retracted to approach the right pinna. At this time, the catheter was carefully rotated clockwise 100-180°, keeping the right auricle at a distance. At a distance of about 3 cm, the end of the catheter entered the right atrium and was inserted further to reach the atrioventricular opening at a distance of about 4-4.5 cm. At this time, the catheter was carefully rotated counterclockwise 90-180° to engage the atrioventricular opening and enter the right ventricle, and a right ventricular wave with a relatively large amplitude was observed. The catheter was then inserted slowly forward and inserted into the pulmonary artery at a distance of approximately 5 cm.

Ключевые точки измерения: катетер вводили на 1-2 см, чтобы достичь верхней полой вены, на 2-3 см, чтобы достичь правого предсердия, на примерно 4 см, чтобы войти в правый желудочек, и на около 5 см, чтобы войти в легочную артерию. Давление правого предсердия было близко к нулю, а давление легочной артерии было самым высоким.Key measurement points: the catheter was inserted 1-2 cm to reach the superior vena cava, 2-3 cm to reach the right atrium, approximately 4 cm to enter the right ventricle, and approximately 5 cm to enter the pulmonary artery Right atrial pressure was close to zero, and pulmonary artery pressure was the highest.

После измерения легочной артерии брюшную полость крыс вскрывали, и брюшную аорту осторожно отделяли. Медленно отбирали 3 мл крови из аорты путем введения иглы, направленной к проксимальному концу брюшной аорты, используя шприц объемом 5 мл, инфильтрированный раствором натрия гепарина. Кровь переносили в пробирку с антикоагулянтом и загружали в анализатор газов крови для определения индексов парциального давления кислорода (pO₂), парциального давления углекислого газа (рСО₂) и насыщения крови кислородом (SaO₂) в крови.After measuring the pulmonary artery, the abdominal cavity of the rats was opened, and the abdominal aorta was carefully separated. 3 ml of blood was slowly withdrawn from the aorta by inserting a needle directed towards the proximal end of the abdominal aorta using a 5 ml syringe infiltrated with sodium heparin solution. The blood was transferred into a test tube with an anticoagulant and loaded into a blood gas analyzer to determine the indices of partial pressure of oxygen (pO ₂ ), partial pressure of carbon dioxide (pCO ₂ ) and blood oxygen saturation (SaO ₂ ) in the blood.

В конце эксперимента крыс забивали и извлекали их сердца. Правый желудочек (RV) и левый желудочек и перегородку (LV+S) разделяли, соответственно, промывали физиологическим раствором, и влагу абсорбировали фильтровальной бумагой. Взвешивали RV и LV+S, соответственно. В качестве оценочного показателя гипертрофии правого сердца использовали правый желудочковый индекс (RVI), полученный по следующей формуле: RVI=RV/(LV+S).At the end of the experiment, the rats were sacrificed and their hearts were removed. The right ventricle (RV) and left ventricle and septum (LV+S) were separated, respectively, washed with saline, and the moisture was absorbed with filter paper. RV and LV+S were weighed, respectively. The right ventricular index (RVI) was used as an assessment indicator of right heart hypertrophy, obtained using the following formula: RVI=RV/(LV+S).

Результаты показаны на фиг. 2а-2b. На фиг. 2а показано изменение выживаемости крыс с течением времени в различных группах лечения (показано на фигуре как относительная выживаемость: процент, рассчитанный на основе количества крыс в начале эксперимента) в модели легочной гипертензии крыс; и на фиг. 2b показано систолическое давление в правом желудочке в различных группах лечения в модели легочной гипертензии крыс.The results are shown in Fig. 2a-2b. In fig. Figure 2a shows the change in rat survival over time in different treatment groups (shown in the figure as relative survival: percentage calculated based on the number of rats at the beginning of the experiment) in a rat model of pulmonary hypertension; and in fig. Figure 2b shows right ventricular systolic pressure in different treatment groups in a rat model of pulmonary hypertension.

Как можно видеть из анализа значимых различий среднего давления в легочной артерии (mPAP) в соответствующих группах по сравнению с нормальной группой, группа носителя крайне значимо отличалась (р<0,001); группа иматиниба (n=10, 27,27+2,02) с самым низким mPAP примерно в 1,5 раза превосходила нормальную группу (n=10, 18,33+0,23); по сравнению с группой носителя каждая из двух групп лекарственного средства положительного контроля, группа 45 мг/кг соединения 1, группа 30 мг/кг соединения 1 и группа 15 мг/кг соединения 1 крайне значимо отличались (р<0,001). Группа высокой дозы 45 мг/кг соединения 1 и группа средней дозы 30 мг/кг соединения 1 не показали значимых отличий по сравнению с каждой из группы бозентана и группы иматиниба, и продемонстрировали крайне значимое отличие от каждой из других групп (р<0,001).As can be seen from the analysis of significant differences in mean pulmonary artery pressure (mPAP) in the respective groups compared with the normal group, the vehicle group was extremely significantly different (p<0.001); the imatinib group (n=10, 27.27+2.02) with the lowest mPAP was approximately 1.5 times superior to the normal group (n=10, 18.33+0.23); Compared with the vehicle group, each of the two positive control drug groups, the 45 mg/kg Compound 1 group, the 30 mg/kg Compound 1 group, and the 15 mg/kg Compound 1 group were highly significantly different (p<0.001). The high-dose 45 mg/kg Compound 1 group and the mid-dose 30 mg/kg Compound 1 group showed no significant difference compared to each of the bosentan group and the imatinib group, and showed a highly significant difference from each of the other groups (p<0.001).

Как видно из анализа значимых различий в систолическом давлении в правом желудочке (RVSP) в соответствующих группах по сравнению с нормальной группой, группа носителя крайне значимо отличалась (р<0,001); группа иматиниба с самой низкой RVSP (n=10, 40,84+1,49) примерно в 1,8 раза превосходила нормальную группу (n=10, 22,44+1,09); каждая из двух групп средства положительного контроля, группа высокой дозы 45 мг/кг соединения 1 и группа средней дозы 30 мг/кг соединения 1 была чрезвычайно значительно различна по сравнению с группой носителя (Р<0,001). Группа высокой дозы 45 мг/кг соединения 1 и группа средней дозы 30 мг/кг соединения 1 не показали значимых отличий по сравнению с каждой из группы иматиниба и группы бозентана, и продемонстрировали крайне значимое отличие от каждой из других групп (р<0,001).As can be seen from the analysis of significant differences in right ventricular systolic pressure (RVSP) in the respective groups compared with the normal group, the vehicle group was extremely significantly different (p<0.001); the imatinib group with the lowest RVSP (n=10, 40.84+1.49) was approximately 1.8 times greater than the normal group (n=10, 22.44+1.09); each of the two positive control groups, the high dose 45 mg/kg compound 1 group and the medium dose 30 mg/kg compound 1 group were extremely significantly different compared to the vehicle group (P<0.001). The high dose 45 mg/kg Compound 1 group and the mid dose 30 mg/kg Compound 1 group showed no significant difference compared to each of the imatinib group and the bosentan group, and showed a marginally significant difference from each of the other groups (p<0.001).

Парциальное давление кислорода (рО₂) в артерии, которое отражает поглощение кислорода легочными капиллярами, является показателем, отражающим состояние дыхания, и является наиболее чувствительным показателем гипоксии организма. РО₂ в нормальных условиях составляет около 80-110 мм рт. ст. РО₂ ниже 80 мм рт. ст. свидетельствует о гипоксии организма. Парциальное давление углекислого газа в артериальной крови является важным показателем, отражающим состояние респираторного кислотно-щелочного баланса, и составляет около 35-45 мм рт. ст. в нормальных условиях. В случае нарушения функции легких и недостаточной вентиляции парциальное давление СО₂ увеличивается по таким причинам, как чрезмерно низкое выделение СО₂, которое представляет собой респираторный ацидоз. Насыщение крови кислородом SaO₂, представляющее собой показатель, отражающий процентную долю емкости оксигемоглобина (HbO₂) к общей емкости гемоглобина (Hb), доступной для связывания кислорода, является важным физиологическим параметром дыхательного кровообращения. Если наблюдается патологическое изменение функции легких, то возникает гипоксия, приводящая к снижению насыщения крови кислородом. В нормальных условиях SaO₂≥90%.The partial pressure of oxygen (pO ₂ ) in the artery, which reflects the absorption of oxygen by the pulmonary capillaries, is an indicator reflecting the state of breathing and is the most sensitive indicator of body hypoxia. PO ₂ under normal conditions is about 80-110 mm Hg. Art. PO ₂ below 80 mm Hg. Art. indicates hypoxia of the body. The partial pressure of carbon dioxide in arterial blood is an important indicator reflecting the state of the respiratory acid-base balance and is about 35-45 mm Hg. Art. under normal conditions. In cases of impaired lung function and insufficient ventilation, the partial pressure of CO ₂ increases for reasons such as excessively low CO ₂ production, which represents respiratory acidosis. Blood oxygen saturation SaO ₂ , which is an indicator reflecting the percentage of oxyhemoglobin capacity (HbO ₂ ) to the total hemoglobin capacity (Hb) available for oxygen binding, is an important physiological parameter of the respiratory circulation. If a pathological change in lung function is observed, then hypoxia occurs, leading to a decrease in blood oxygen saturation. Under normal conditions, SaO ₂ ≥90%.

После вмешательства путем введения парциальное давление кислорода, парциальное давление углекислого газа и насыщение крови кислородом изменялись в различной степени в каждой из групп. Анализ данных парциального давления кислорода показал, что по сравнению с группой носителя, группы средства положительного контроля и группа высокой дозы соединения 1, крайне значимо отличались (Р<0,001), и группа средней дозы соединения 1 также продемонстрировала крайне значимое отличие (Р<0,01). Сравнение крыс в каждой из групп показало, что парциальное давление кислорода у крыс в части групп находилось в диапазоне группы нормального контроля, что указывает на то, что лечение лекарственным средством играет определенную роль в поддержании и восстановлении парциального давления кислорода.After the administration intervention, partial pressure of oxygen, partial pressure of carbon dioxide, and blood oxygen saturation changed to varying degrees in each group. Analysis of the partial pressure of oxygen data showed that, compared with the vehicle group, the positive control and high-dose Compound 1 groups were highly significantly different (P<0.001), and the medium-dose Compound 1 group also showed a highly significant difference (P<0.001). 01). Comparison of rats in each group showed that the oxygen partial pressure of rats in some groups was within the range of the normal control group, indicating that drug treatment plays a role in maintaining and restoring oxygen partial pressure.

Анализ данных по парциальному давлению диоксида углерода для соответствующих групп показал, что по сравнению с группой носителя группы средства положительного контроля и группа высокой дозы соединения 1 крайне значимо отличались (Р<0,001), и группа средней дозы соединения 1 крайне значимо отличалась (Р<0,01). Сравнение крыс в каждой из групп показало, что парциальное давление углекислого газа в части групп находилось в диапазоне группы нормального контроля, что указывает на то, что лечение лекарственным средством играет определенную роль в восстановлении вентиляции легких у крыс с легочной гипертензией.Analysis of the partial pressure of carbon dioxide data for the respective groups showed that, compared with the vehicle group, the positive control and high-dose Compound 1 groups were highly significantly different (P<0.001), and the medium-dose Compound 1 group was highly significantly different (P<0). ,01). Comparison of rats in each group showed that the partial pressure of carbon dioxide in some groups was in the range of the normal control group, indicating that drug treatment plays a role in restoring ventilation in rats with pulmonary hypertension.

Анализ данных насыщения крови кислородом для соответствующих групп показал, что по сравнению с группой носителя группы средства положительного контроля и группа высокой дозы соединения 1 значительно отличались (р<0,05). Сравнение крыс в каждой из групп показало, что насыщение крови кислородом части групп находилось в пределах диапазона группы нормального контроля.Analysis of blood oxygen saturation data for the respective groups showed that, compared with the vehicle group, the positive control group and the high dose compound 1 group were significantly different (p<0.05). A comparison of rats in each group showed that the blood oxygen saturation of some groups was within the range of the normal control group.

RVI относится к измерению индекса гипертрофии правого желудочка у крыс. Измеренные результаты показали, что после вмешательства путем введения индекс гипертрофии правого желудочка в каждой из групп изменялся в различной степени, при этом RVI группы бозентана был снижен на 15,7% по сравнению с группой отрицательного контроля, a RVI группы иматиниба был снижен на 17,8% по сравнению с группой отрицательного контроля, RVI группы высокой дозы 45 мг/кг соединения 1 был снижен на 29,6% по сравнению с группой отрицательного контроля, RV1 группы средней дозы 30 мг/кг соединения 1 был снижен на 9,4% по сравнению с группой отрицательного контроля, a RVI группы низкой дозы 15 мг/кг соединения 1 был снижен на 5,5% по сравнению с группой отрицательного контроля.RVI refers to the measurement of the right ventricular hypertrophy index in rats. The measured results showed that after intervention by administration, the right ventricular hypertrophy index in each group changed to varying degrees, with the RVI of the bosentan group being reduced by 15.7% compared with the negative control group, and the RVI of the imatinib group being reduced by 17. 8% compared to the negative control group, the RVI of the high dose 45 mg/kg compound 1 group was reduced by 29.6% compared to the negative control group, the RV1 of the medium dose 30 mg/kg compound 1 group was reduced by 9.4% compared with the negative control group, and the RVI of the low dose 15 mg/kg compound 1 group was reduced by 5.5% compared with the negative control group.

Анализ значимых различий RVI для соответствующих групп показал, что по сравнению с нормальной группой группа носителя была крайне значимо отлична (р<0,001); группа иматиниба с наименьшим RVI (n=10, 0,403+0,016) примерно в 1,4 раза превосходила нормальную группу (n=10, 0,279+0,16); каждая из двух групп средства положительного контроля и группа высокой дозы 45 мг/кг соединения 1 была крайне значимо отличалась от группы носителя (Р<0,001). Группа высоких доз 45 мг/кг соединения 1 не показала значимого отличия по сравнению с каждой из групп иматиниба и группы бозентана и продемонстрировала крайне значимое отличие от с каждой из других групп (р<0,001).Analysis of significant differences in RVI for the respective groups showed that compared with the normal group, the vehicle group was extremely significantly different (p < 0.001); the imatinib group with the lowest RVI (n=10, 0.403+0.016) was approximately 1.4 times greater than the normal group (n=10, 0.279+0.16); each of the two positive control groups and the high dose 45 mg/kg compound 1 group were highly significantly different from the vehicle group (P<0.001). The high-dose 45 mg/kg compound 1 group showed no significant difference compared with each of the imatinib groups and the bosentan group and showed a highly significant difference with each of the other groups (p < 0.001).

Промышленная применимостьIndustrial applicability

В настоящем изобретении предложен селективный ингибитор киназы PDGFR, который можно применять для ингибирования активности киназы PDGFR и для лечения заболевания, расстройства или состояния, связанного с ингибированием активности киназы PDGFR. Таким образом, он может быть изготовлен в виде соответствующего лекарственного средства и имеет промышленную применимость.The present invention provides a selective PDGFR kinase inhibitor that can be used to inhibit PDGFR kinase activity and to treat a disease, disorder or condition associated with inhibition of PDGFR kinase activity. Thus, it can be formulated into a corresponding drug and has industrial applicability.

Несмотря на то, что изобретение было подробно описано в настоящем документе, изобретение не ограничивается описанием, и специалисты в данной области техники могут вносить модификации на основе принципов изобретения, и, таким образом, следует понимать, что все модификации в соответствии с принципами изобретения находятся в рамках объема охраны изобретения.Although the invention has been described in detail herein, the invention is not limited to the description and modifications may be made by those skilled in the art based on the principles of the invention, and it is therefore understood that all modifications in accordance with the principles of the invention are within the scope of within the scope of protection of the invention.

Claims (25)

1. Ингибитор киназы PDGFR, представляющий собой соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль1. A PDGFR kinase inhibitor, which is a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof где кольцо A представляет собой пиридиновое кольцо;wherein ring A is a pyridine ring; Z представляет собой CH;Z represents CH; R₁ выбран из группы, состоящей из гетероциклоалкила, гетероциклоалкилокси, гетероциклоалкил-C_1-6-алкокси, 6-10-членного гетероспироциклоалкила, содержащего 1-2 гетероатома, выбранных из кислорода и азота, C_3-6-циклоалкил-C_1-6-алкокси, где гетероциклоалкил представляет собой 4-6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-2 гетероатома, выбранных из кислорода и азота, и атом азота в гетероциклоалкиле необязательно замещен C_1-6-алкилом;R ₁ is selected from the group consisting of heterocycloalkyl, heterocycloalkyloxy, heterocycloalkyl-C _1-6 -alkoxy, 6-10 membered heterospirocycloalkyl containing 1-2 heteroatoms selected from oxygen and nitrogen, C _3-6 -cycloalkyl-C _{1- 6} -alkoxy, where heterocycloalkyl is a 4-6 membered heterocycloalkyl containing 1-2 heteroatoms selected from oxygen and nitrogen, and the nitrogen atom in the heterocycloalkyl is optionally substituted with C _1-6 -alkyl; R₂ выбран из группы, состоящей из галогена и C_1-6-галогеналкила;R ₂ is selected from the group consisting of halogen and C _1-6 -haloalkyl; R₃ представляет собой C_1-6-алкил. R ₃ represents C _1-6 alkyl. 2. Ингибитор киназы PDGFR по п. 1, характеризующийся тем, что2. PDGFR kinase inhibitor according to claim 1, characterized in that кольцо A выбрано из группы, состоящей изring A is selected from the group consisting of R₂ выбран из группы, состоящей из фтора, хлора и трифторметила.R ₂ is selected from the group consisting of fluorine, chlorine and trifluoromethyl. 3. Ингибитор киназы PDGFR по п. 1, характеризующийся тем, что R₃ представляет собой метил.3. The PDGFR kinase inhibitor according to claim 1, characterized in that R ₃ represents methyl. 4. Ингибитор киназы PDGFR по п. 1, представляющий собой соединение формулы (Ia) или его фармацевтически приемлемую соль4. The PDGFR kinase inhibitor according to claim 1, which is a compound of formula (Ia) or a pharmaceutically acceptable salt thereof где R₁ выбран из группы, состоящей из гетероциклоалкила, гетероциклоалкилокси, гетероциклоалкил-C_1-6-алкокси, 6-10-членного гетероспироциклоалкила, содержащего 1-2 гетероатома, выбранных из кислорода и азота, C_3-6-циклоалкил-C_1-6-алкокси, где гетероциклоалкил представляет собой 4-6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-2 гетероатома, выбранных из кислорода и азота, и атом азота в гетероциклоалкиле необязательно замещен C_1-6-алкилом; иwhere R ₁ is selected from the group consisting of heterocycloalkyl, heterocycloalkyloxy, heterocycloalkyl-C _1-6 -alkoxy, 6-10 membered heterospirocycloalkyl containing 1-2 heteroatoms selected from oxygen and nitrogen, C _3-6 -cycloalkyl-C _{1 -6} -alkoxy, where heterocycloalkyl is a 4-6 membered heterocycloalkyl containing 1-2 heteroatoms selected from oxygen and nitrogen, and the nitrogen atom in the heterocycloalkyl is optionally substituted with C _1-6 -alkyl; And один из X и Y представляет собой CH, а другой представляет собой N.one of X and Y represents CH and the other represents N. 5. Ингибитор киназы PDGFR по любому из пп. 1-4, характеризующийся тем, что заместитель R₁ замещен при углероде в пара- или мета-положении относительно атома N в пиридиновом кольце.5. PDGFR kinase inhibitor according to any one of paragraphs. 1-4, characterized in that the substituent R ₁ is substituted at carbon in the para- or meta-position relative to the N atom in the pyridine ring. 6. Ингибитор киназы PDGFR по любому из пп. 1-4, характеризующийся тем, что гетероциклоалкил выбран из группы, состоящей из пирролидинила, морфолинила, пиперазинила, тетрагидропиранила, тетрагидрофуранила, оксетанила и азетидинила.6. PDGFR kinase inhibitor according to any one of paragraphs. 1-4, characterized in that the heterocycloalkyl is selected from the group consisting of pyrrolidinyl, morpholinyl, piperazinyl, tetrahydropyranyl, tetrahydrofuranyl, oxetanyl and azetidinyl. 7. Ингибитор киназы PDGFR по любому из пп. 1-4, характеризующийся тем, что R₁ выбран из группы, состоящей из C_1-6-алкилпиперазинила, морфолинила, тетрагидропиранила C_1-6-алкокси, оксетанилокси, морфолино C_1-6-алкокси, тетрагидрофуранила C_1-6-алкокси, C_3-6-циклоалкил-C_1-6-алкокси и окса-аза-спирогептила.7. PDGFR kinase inhibitor according to any one of paragraphs. 1-4, characterized in that R ₁ is selected from the group consisting of C _1-6 -alkylpiperazinyl, morpholinyl, tetrahydropyranyl C _1-6 -alkoxy, oxetanyloxy, morpholino C _1-6 -alkoxy, tetrahydrofuranyl C _1-6 -alkoxy , C _3-6 -cycloalkyl-C _1-6 -alkoxy and oxa-aza-spiroheptyl. 8. Ингибитор киназы PDGFR по любому из пп. 1-4, где R₁ выбран из группы, состоящей из N-метилпиперазин-1-ила, N-морфолинила, тетрагидропиран-4-илметокси, оксетан-3-илокси, 2-морфолиноэтокси, тетрагидрофуран-2-ил-метокси, циклопентилметокси и 2-окса-6-аза-спиро[3.3]гепт-6-ила.8. PDGFR kinase inhibitor according to any one of paragraphs. 1-4, where R ₁ is selected from the group consisting of N-methylpiperazin-1-yl, N-morpholinyl, tetrahydropyran-4-ylmethoxy, oxetan-3-yloxy, 2-morpholinoethoxy, tetrahydrofuran-2-yl-methoxy, cyclopentylmethoxy and 2-oxa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-yl. 9. Ингибитор киназы PDGFR по любому из пп. 1-4, который представляет собой соединение, выбранное из группы, состоящей из:9. PDGFR kinase inhibitor according to any one of paragraphs. 1-4, which is a compound selected from the group consisting of: Соединение №Connection No. Структура соединенияConnection structure Соединение № Connection No. Структура соединенияConnection structure 11 22 33 44 55 66 77 88 99 1010 11eleven 1212 1313 1414 1515 1616 1717 3232 3333 3434 3535 3636 3737 10. Фармацевтическая композиция для ингибирования киназы PDGFR, содержащая эффективное количество ингибитора киназы PDGFR по любому из пп. 1-9 и фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество.10. Pharmaceutical composition for inhibiting PDGFR kinase, containing an effective amount of a PDGFR kinase inhibitor according to any one of paragraphs. 1-9 and a pharmaceutically acceptable carrier or excipient. 11. Ингибитор киназы PDGFR по любому из пп. 1-9 для применения для ингибирования активности PDGFRα и/или PDGFRβ.11. PDGFR kinase inhibitor according to any one of paragraphs. 1-9 for use in inhibiting the activity of PDGFRα and/or PDGFRβ. 12. Ингибитор киназы PDGFR по любому из пп. 1-9 для применения в лечении или облегчении заболевания, нарушения или состояния, ассоциированного с ингибированием PDGFRα и/или PDGFRβ, где указанное заболевание, нарушение или состояние представляет собой легочную артериальную гипертензию, хронический эозинофильный лейкоз или их комбинацию.12. PDGFR kinase inhibitor according to any one of paragraphs. 1-9 for use in the treatment or amelioration of a disease, disorder or condition associated with inhibition of PDGFRα and/or PDGFRβ, wherein the disease, disorder or condition is pulmonary arterial hypertension, chronic eosinophilic leukemia, or a combination thereof.