RU2800510C1 - C-aryl glucose sglt2 inhibitors and method of their use - Google Patents

Abstract

FIELD: pharmaceuticals.

SUBSTANCE: invention relates to a pharmaceutical composition having an inhibitory effect on SGLT2. This composition includes a compound of formula

and a pharmaceutically acceptable vehicle.

EFFECT: obtaining a pharmaceutical composition capable to inhibit sodium-dependent glucose transporters found in the intestines and kidneys of mammals and being of value for the treatment of diabetes mellitus and its micro- and macrovascular complications.

1 cl, 3 tbl, 1 ex

Description

Область техникиTechnical field

Настоящее изобретение относится к С-арил глюкозидам, которые являются ингибиторами натрий-зависимых переносчиков глюкозы, обнаруживаемых в кишечнике и почках (SGLT2), а также к способу лечения сахарного диабета, преимущественно сахарного диабета 2-го типа, гипергликемии, гиперинсулинемии, ожирения, гипертриглицеридемии, Синдрома X, осложнений сахарного диабета, атеросклероза и сопутствующих состояний, заключающемуся в использовании таких С-арил глюкозидов как в качестве монотерапии, так и в комбинации с одним, двумя или более антидиабетическими препаратами и в комбинации с одним, двумя или более другими лекарственными средствами, такими, как антигиперлипидемические препараты.The present invention relates to C-aryl glucosides which are inhibitors of sodium-dependent glucose transporters found in the intestine and kidneys (SGLT2), as well as to a method for the treatment of diabetes mellitus, predominantly type 2 diabetes, hyperglycemia, hyperinsulinemia, obesity, hypertriglyceridemia , Syndrome X, complications of diabetes mellitus, atherosclerosis and related conditions, consisting in the use of such C-aryl glucosides both as monotherapy and in combination with one, two or more antidiabetic drugs and in combination with one, two or more other drugs such as antihyperlipidemic drugs.

Предпосылки создания изобретенияPrerequisites for the creation of the invention

Приблизительно 100 миллионов человек во всем мире страдают сахарным диабетом 2-го типа (NIDDM), для которого характерна гипергликемия, являющаяся следствием избыточной продукции глюкозы печенью и инсулинорезистентности периферических тканей, причина которых до сих пор неизвестна. Гипергликемия считается основным фактором риска для развития осложнений сахарного диабета, и, вероятно, вносит непосредственный вклад в ухудшение секреции инсулина, наблюдаемой при развитом сахарном диабете 2-го типа. Нормализация уровня глюкозы в плазме крови у пациентов, страдающих NIDDM, позволит улучшить секрецию инсулина и отсрочить развитие осложнений сахарного диабета.Approximately 100 million people worldwide suffer from type 2 diabetes mellitus (NIDDM), which is characterized by hyperglycemia resulting from excessive hepatic glucose production and peripheral tissue insulin resistance, the cause of which is still unknown. Hyperglycemia is considered a major risk factor for the development of complications of diabetes mellitus, and probably contributes directly to the deterioration in insulin secretion seen in advanced type 2 diabetes. Normalization of plasma glucose levels in NIDDM patients will improve insulin secretion and delay the development of complications of diabetes mellitus.

Предположительно, ингибирование натрий-зависимых переносчиков глюкозы SGLT2 в почках будет способствовать нормализации уровня глюкозы в плазме крови, а также, возможно, нормализации массы тела за счет увеличения экскреции глюкозы.Presumably, inhibition of sodium-dependent glucose transporters SGLT2 in the kidneys will help normalize plasma glucose levels, and possibly also normalize body weight by increasing glucose excretion.

Создание новых безопасных и пероральных антидиабетических средств также желательно для дополнения уже существующей терапии, основанной на использовании таких препаратов, как производные сульфонилмочевины, метформин и инсулин, а также для снижения возможных побочных эффектов, возникающих при использовании других указанных сахароснижающих препаратов.The development of new safe and oral antidiabetic agents is also desirable to complement existing therapies based on the use of drugs such as sulfonylurea derivatives, metformin and insulin, as well as to reduce the possible side effects that occur with the use of other indicated hypoglycemic drugs.

Гипергликемия является маркером сахарного диабета 2-го типа (NIDDM); стойкий контроль уровня глюкозы в плазме крови может замедлить развитие осложнений и деструкции бета-клеток, которая наблюдается при развитом сахарном диабете 2-го типа. В норме глюкоза плазмы крови фильтруется в почечных клубочках и активно реабсорбируется в проксимальных почечных канальцах. Считается, что основными переносчиками, отвечающими за реабсорбцию глюкозы в проксимальных почечных канальцах, являются SGLT2. Применение специфического ингибитора SGDT - флоризина или его аналогов у грызунов и собак - моделей диабета - приводило к нормализации уровня глюкозы плазмы крови путем усиления экскреции глюкозы с мочой без развития побочных эффектов, связанных с гипогликемией. Продолжительное (в течение 6 месяцев) лечение крыс линии Zucker - моделей диабета - с помощью ингибитора SGLT2 приводило к усилению инсулинового ответа на гликемию, улучшению чувствительности тканей к инсулину и препятствовало развитию нефропатии и нейропатии у этих животных при одновременном отсутствии каких-либо патологических изменений в почках и электролитного дисбаланса в плазме крови. Предполагается, что селективное ингибирование SGrT2 у пациентов, страдающих сахарным диабетом, позволит нормализовать уровень глюкозы в плазме крови путем усиления ее экскреции с мочой, а также улучшит чувствительность тканей к инсулину и отсрочит развитие осложнений.Hyperglycemia is a marker of type 2 diabetes mellitus (NIDDM); stable control of plasma glucose levels can slow down the complications and destruction of beta-cells, which is observed in advanced type 2 diabetes mellitus. Normally, plasma glucose is filtered in the renal glomeruli and actively reabsorbed in the proximal renal tubules. It is believed that the main transporters responsible for glucose reabsorption in the proximal renal tubules are SGLT2. The use of a specific SGDT inhibitor, phlorizin or its analogs, in rodents and dogs - models of diabetes - led to the normalization of blood plasma glucose levels by increasing urinary glucose excretion without the development of side effects associated with hypoglycemia. Long-term (for 6 months) treatment of Zucker rats - models of diabetes - with an SGLT2 inhibitor led to an increase in insulin response to glycemia, improved tissue sensitivity to insulin, and prevented the development of nephropathy and neuropathy in these animals, while the absence of any pathological changes in kidneys and electrolyte imbalance in blood plasma. It is assumed that selective inhibition of SGrT2 in patients with diabetes mellitus will normalize the level of glucose in blood plasma by increasing its excretion in the urine, as well as improve tissue sensitivity to insulin and delay the development of complications.

Девяносто процентов всей глюкозы, реабсорбирующейся в почках, реабсорбируется в эпителиальных клетках, выстилающих начальный S1 сегмент почечных кортикальных проксимальных канальцев, и, вероятно, SGLT2 являются основными переносчиками ответственными за эту реабсорбцию. SGDT2 представляет собой белок, состоящий из 67 2 аминокислот и включающий 14 перекрывающихся мембранных сегментов, который, преимущественно, экспрессируется в начальном S1 сегменте проксимальных почечных канальцев. Субстратная специфичность, зависимость от ионов натрия и локализация SGLT2 сочетаются с такими их свойствами, как большая емкость и низкая аффинность. Кроме того, исследования, основанные на истощении гибридов, показали, что SGLT2 являются преобладающими натрий-зависимыми переносчиками глюкозы в S1 сегменте проксимальных канальцев, поскольку практически вся натрий-зависимая активность транспорта глюкозы, определяемая мРНК, выделенной из коркового вещества почек крысы, ингибируется антисмысловым олигонуклеотидом, специфичным к SGLT2 крысы. Возможно, ген SGLT2 отвечает за некоторые формы семейной глюкозурии, генетически обусловленного заболевания, при котором различным образом нарушается реабсорбция глюкозы в почках. Ни один из этих синдромов, обнаруженных на сегодняшнее время, не связан с 36bT2-локусом на хромосоме 16. Однако, исследования высокогомологичных SGLT2 грызунов явно свидетельствуют о том, что SGLT2 являются основными натрий-зависимыми переносчиками глюкозы в почках, и позволяют считать, что картированный локус глюкозурии кодирует регулятор SGLT2. Можно предположить, что ингибирование SGLT2 позволит снизить уровень глюкозы в плазме крови посредством усиления ее экскреции у больных сахарным диабетом.Ninety percent of all glucose reabsorbed in the kidney is reabsorbed in the epithelial cells lining the initial S1 segment of the renal cortical proximal tubules, and it is likely that SGLT2 is the primary transporter responsible for this reabsorption. SGDT2 is a 672 amino acid protein with 14 overlapping membrane segments that is predominantly expressed in the initial S1 segment of the proximal renal tubule. The substrate specificity, sodium ion dependence, and localization of SGLT2 are combined with their high capacity and low affinity properties. In addition, hybrid depletion studies have shown that SGLT2s are the predominant sodium-dependent glucose transporters in the S1 segment of the proximal tubule, since virtually all of the sodium-dependent glucose transport activity determined by mRNA isolated from rat kidney cortex is inhibited by the antisense oligonucleotide specific for rat SGLT2. It is possible that the SGLT2 gene is responsible for some forms of familial glucosuria, a genetically determined disease in which the reabsorption of glucose in the kidneys is impaired in various ways. None of these syndromes found to date are associated with the 36bT2 locus on chromosome 16. However, studies of highly homologous rodent SGLT2s clearly suggest that SGLT2s are the major sodium-dependent glucose transporters in the kidneys and suggest that mapped the glucosuria locus encodes the SGLT2 regulator. It can be assumed that inhibition of SGLT2 will reduce the level of glucose in blood plasma by increasing its excretion in patients with diabetes mellitus.

SGLT1, другой натрий-зависимый переносчик глюкозы, который идентичен по своей аминокислотной последовательности SGLT2 на 60%, экспрессируется в тонком кишечнике и более дистальном S3 сегменте проксимальных почечных канальцев. Несмотря на сходство аминокислотных последовательностей, SGLT1 и SGLT2 различны по своим биохимическим свойствам. Для SGLT1 молярное соотношение между ионами Na⁺ и транспортируемой глюкозой составляет 2:1, в то время как для SGLT2 оно равно 1:1. Km для ионов Na⁺ составляет 32 и 250-300 мМоль для SGLT1 и SGLT2, соответственно. Значения Km по захвату глюкозы и неметаболизируемого аналога глюкозы α-метил-D-глюкопиранозида (AMG) являются сходными для SGLT1 и SGLT2, то есть 0.8 и 1.6 мМоль (глюкозы) и 0.4 и 1.6 мМоль (AMG) для SGLT1 и SGLT2 переносчиков, соответственно. Однако эти два переносчика значительно различаются своей субстратной специфичностью по отношению к сахарам, например, галактозе, которая является субстратом только для SGLT1.SGLT1, another sodium-dependent glucose transporter that is 60% identical in amino acid sequence to SGLT2, is expressed in the small intestine and the more distal S3 segment of the proximal renal tubule. Despite the similarity in amino acid sequences, SGLT1 and SGLT2 differ in their biochemical properties. For SGLT1, the molar ratio between Na ⁺ ions and transported glucose is 2:1, while for SGLT2 it is 1:1. Km for Na ⁺ ions is 32 and 250-300 mM for SGLT1 and SGLT2, respectively. The Km values for glucose uptake and the non-metabolizable glucose analogue α-methyl-D-glucopyranoside (AMG) are similar for SGLT1 and SGLT2, i.e. 0.8 and 1.6 mM (glucose) and 0.4 and 1.6 mM (AMG) for SGLT1 and SGLT2 transporters, respectively . However, the two transporters differ significantly in their substrate specificity for sugars such as galactose, which is a substrate only for SGLT1.

Применение флоризина, специфического ингибитора активности SGLT, позволило in vivo подтвердить данную концепцию, поскольку привело к усилению экскреции глюкозы, снижению уровней глюкозы плазмы натощак и после еды, а также к усилению утилизации глюкозы без возможных побочных эффектов, связанных с гипогликемией, у нескольких грызунов и одной собаки - моделей диабета. Такие возможные последствия применения флоризина в течение двух недель, как ионный дисбаланс в плазме крови, нарушение функции почек и изменение нормальной структуры почечной ткани, отмечены не были. Кроме того, гипогликемия и другие побочные эффекты не наблюдались даже при применении флоризина у здоровых животных, несмотря на наличие глюкозурии. Применение ингибитора почечных SGLT в течение 6 месяцев приводило к нормализации уровней глюкозы плазмы натощак и после еды, улучшению секреции инсулина и усилению утилизации глюкозы, а также препятствовало развитию нефропатии и нейропатии у крыс, являющихся моделями сахарного диабета и ожирения, при одновременном отсутствии гипогликемии и патологических изменений со стороны почек.The use of phlorizin, a specific inhibitor of SGLT activity, allowed in vivo validation of this concept, as it resulted in increased glucose excretion, decreased fasting and postprandial plasma glucose levels, and increased glucose utilization without potential hypoglycemic side effects in several rodents and one dog - models of diabetes. Such possible consequences of the use of Florizin for two weeks, such as ion imbalance in blood plasma, impaired renal function and changes in the normal structure of the renal tissue, were not noted. In addition, hypoglycemia and other side effects were not observed even when using phlorizin in healthy animals, despite the presence of glucosuria. The use of a renal SGLT inhibitor for 6 months resulted in the normalization of fasting and postprandial plasma glucose levels, improved insulin secretion and increased glucose utilization, and also prevented the development of nephropathy and neuropathy in rat models of diabetes mellitus and obesity, while the absence of hypoglycemia and pathological kidney changes.

Флоризин не подходит для перорального применения, поскольку он представляет собой неспецифический SGLT1/ SGLT2 ингибитор, который подвергается гидролизу в кишечнике, в результате которого образуется агликоновый флоретин, являющийся сильным ингибитором облегченных переносчиков глюкозы. Конкурентное ингибирование облегченных переносчиков глюкозы (ГЛЮТов) является нежелательным, поскольку оно может привести к усилению инсулинорезистентности периферических тканей, а также способствовать гипергликемии в центральной нервной системе. Ингибирование SGLT1 также может иметь серьезные последствия, которые возможно проследить на наследственном синдроме мальабсорбции глюкозы и галактозы (GGM), при котором мутация SGLT1 переносчика приводит к снижению захвата глюкозы в кишечнике и развитию угрожающей жизни диареи и дегидратации. Различные биохимические свойства SGLT1 и SGLT2, а также процент несоответствий их аминокислотных последовательностей, позволяют идентифицировать селективные ингибиторы SGLT2.Florizin is not suitable for oral use because it is a non-specific SGLT1/SGLT2 inhibitor that undergoes hydrolysis in the gut to form the aglycone phloretin, which is a potent inhibitor of facilitated glucose transporters. Competitive inhibition of facilitated glucose transporters (GLUTs) is undesirable because it can lead to increased insulin resistance in peripheral tissues, as well as promote hyperglycemia in the central nervous system. Inhibition of SGLT1 can also have serious consequences, which can be traced to the hereditary syndrome of glucose-galactose malabsorption (GGM), in which mutation of the SGLT1 transporter leads to a decrease in glucose uptake in the intestine and the development of life-threatening diarrhea and dehydration. The different biochemical properties of SGLT1 and SGLT2, as well as the percentage of mismatches in their amino acid sequences, allow the identification of selective inhibitors of SGLT2.

Синдромы семейной глюкозурии представляют собой состояния, при которых кишечный транспорт глюкозы, а также почечный транспорт других ионов и аминокислот является нормальным. Пациенты, страдающие семейной глюкозурией, развиваются без отклонений, имеют нормальный уровень глюкозы плазмы крови и не страдают от каких-либо серьезных нарушений здоровья, несмотря на иногда довольно высокие значения экскретируемой глюкозы (110-140 г/сутки). Основные симптомы, наблюдаемые у таких пациентов - это полифагия, полиурия и полидипсия; при этом их почки функционируют нормально и не имеют морфологических изменений. Таким образом, из имеющихся данных можно сделать вывод о том, что нарушения почечной реабсорбции глюкозы в почках, по-видимому, имеют минимальные отсроченные негативные последствия, у в остальном нормальных индивидуумов.Familial glucosuria syndromes are conditions in which the intestinal transport of glucose as well as the renal transport of other ions and amino acids is normal. Patients suffering from familial glucosuria develop without abnormalities, have normal plasma glucose levels and do not suffer from any serious health problems, despite sometimes quite high values of excreted glucose (110-140 g / day). The main symptoms observed in such patients are polyphagia, polyuria and polydipsia; while their kidneys function normally and have no morphological changes. Thus, from the available data, it can be concluded that impaired renal glucose reabsorption by the kidneys appears to have minimal long-term adverse effects in otherwise normal individuals.

Последующие ссылки относятся к С-арил глюкозидным ингибиторам SGLT2 для лечения сахарного диабета.The following references refer to C-aryl glucoside SGLT2 inhibitors for the treatment of diabetes mellitus.

WO 01/27128 относится к соединениям, имеющим следующую структуру:WO 01/27128 refers to compounds having the following structure:

где А представляет собой О, S, NH или (СН₂)_n, где n - это 0-3; R¹, R², и R^2a независимо друг от друга представляют собой водород, ОН, OR⁵, алкил, CF₃, OCHF₂, OCF₃, SR⁵ⁱ или галоген, и так далее;where A represents O, S, NH or (CH ₂ ) _n where n is 0-3; R ¹ , R ² , and R ^2a are independently hydrogen, OH, OR ⁵ , alkyl, CF ₃ , OCHF ₂ , OCF ₃ , SR ⁵ⁱ or halogen, and so on;

R³ и R⁴ независимо друг от друга представляют собой водород, ОН, OR^5a, ОАрил, ОСН₂Арил, алкил, циклоалкил, CF₃, -OCHF₂, OCF₃, галоген, и т.д. Считается, что данные соединения являются ингибиторами SGLT2 переносчиков и, следовательно, могут представлять собой средства для лечения сахарного диабета и его осложнений.R ³ and R ⁴ are independently hydrogen, OH, OR ^5a , OAryl, OCH ₂ Aryl, alkyl, cycloalkyl, CF ₃ , -OCHF ₂ , OCF ₃ , halogen, etc. It is believed that these compounds are inhibitors of SGLT2 transporters and, therefore, may be agents for the treatment of diabetes mellitus and its complications.

WO 98/31697 относится к соединениям, имеющим следующую структуру:WO 98/31697 refers to compounds having the following structure:

где Ar представляет собой, помимо всего прочего, фенил, бифенил, дифенилметан, дифенилэтан и дифенилэфир, R¹ представляет собой гликозид, R² представляет собой Н, ОН, амино, галоген, карбокси, алкил, циклоалкил или карбоксамидо и R³ представляет собой галоген, алкил, или ацил, а к, тип независимо друг от друга равны 1-4. Подмножество соединений, описанных в WO 98/31697, включает соединения, имеющие следующую структуру:where Ar is, among other things, phenyl, biphenyl, diphenylmethane, diphenylethane and diphenylether, R ¹ is a glycoside, R ² is H, OH, amino, halogen, carboxy, alkyl, cycloalkyl or carboxamido and R ³ is halogen , alkyl, or acyl, and k, type are independently 1-4. A subset of the compounds described in WO 98/31697 includes compounds having the following structure:

где А представляет собой О или (СН₂)_x, где х=0-3where A is O or (CH ₂ ) _x where x=0-3

R₃ представляет собой водород, алкил- или ацил-группу, где n=1-4R ₃ is hydrogen, an alkyl or acyl group, where n=1-4

R² представляет собой водород, алкил, ОН, NH, галоген, СО₂Н или карбоксимид, где k=1-4R ² is hydrogen, alkyl, OH, NH, halogen, CO ₂ H or carboximide, where k=1-4

Указанные соединения рассматриваются как средства для лечения и профилактики воспалительных заболеваний, аутоиммунных заболеваний, инфекций, рака и раковых метастазов, реперфузионных заболеваний, тромбозов, язв, ран, остеопороза, сахарного диабета и атеросклероза и др.These compounds are considered as agents for the treatment and prevention of inflammatory diseases, autoimmune diseases, infections, cancer and cancer metastases, reperfusion diseases, thrombosis, ulcers, wounds, osteoporosis, diabetes mellitus and atherosclerosis, etc.

Описание изобретенияDescription of the invention

Настоящее изобретение относится к С-арил глюкозидным соединениям, имеющим формулу I:The present invention relates to C-aryl glucosidic compounds having the formula I:

а также к их фармацевтически приемлемым солям, всем возможным их стереоизомерам и сложным эфирам этих соединений, представляющим собой пролекарства.as well as their pharmaceutically acceptable salts, all their possible stereoisomers and prodrug esters of these compounds.

Соединение формулы I обладает способностью ингибировать натрий-зависимые переносчики глюкозы, обнаруживаемые в кишечнике и почках у млекопитающих, и представляет ценность для лечения сахарного диабета и его микро- и макрососудистых осложнений, таких как ретинопатия, нейропатия, нефропатия, а также для лечения ран.The compound of formula I has the ability to inhibit sodium-dependent glucose transporters found in the intestines and kidneys of mammals and is of value in the treatment of diabetes mellitus and its micro- and macrovascular complications such as retinopathy, neuropathy, nephropathy, as well as in the treatment of wounds.

Настоящее изобретение относится к соединению формулы I, фармацевтическим композициям, включающим это соединение, и к способам его применения.The present invention relates to a compound of formula I, pharmaceutical compositions comprising this compound, and methods of using the same.

Кроме того, настоящее изобретение относится к способу лечения и замедления прогрессирования или начала диабета, преимущественно сахарного диабета 1-го и 2-го типов, включая осложнения диабета, такие как ретинопатия, нейропатия, нефропатия; к способу лечения ран, а также к способу лечения сопутствующих состояний, таких как инсулиновая резистентность (нарушенный гомеостаз глюкозы), гипергликемия, гиперинсулинемия, повышение в крови уровня жирных кислот и глицерина, ожирение, гиперлипидемия, включая гипертриглицеридемию, Синдром X, атеросклероз и гипертензия, а также к способу повышения в крови уровня липопротеинов высокой плотности, заключающемуся в применении по отношению к человеку, который нуждается в лечении, соединения формулы I.In addition, the present invention relates to a method for treating and slowing the progression or onset of diabetes, preferably type 1 and type 2 diabetes, including complications of diabetes such as retinopathy, neuropathy, nephropathy; to a method for treating wounds, as well as to a method for treating concomitant conditions such as insulin resistance (impaired glucose homeostasis), hyperglycemia, hyperinsulinemia, increased blood levels of fatty acids and glycerol, obesity, hyperlipidemia, including hypertriglyceridemia, Syndrome X, atherosclerosis and hypertension, and also to a method for increasing the level of high-density lipoproteins in the blood, which consists in applying to a person who needs treatment, a compound of formula I.

Настоящее изобретение также относится к способу лечения диабета и сопутствующих состояний, описываемому выше, заключающемуся в применении по отношению к человеку, который нуждается в лечении, терапевтически эффективного количества смеси соединения формулы I и антидиабетического средства другого типа и/или другого лекарственного средства, такого как гиполипидемическое средство.The present invention also relates to a method for the treatment of diabetes and associated conditions as described above, comprising administering to a person in need of treatment a therapeutically effective amount of a mixture of a compound of formula I and another type of antidiabetic agent and/or another drug, such as a lipid-lowering agent. means.

Состояния, заболевания и расстройства, объединенные понятием "Синдром X" (также известный как метаболический синдром), детально описаны у Johannsson J. Clin. Endocrinol. Metab., 82, 121-34 (1991).The conditions, diseases, and disorders collectively referred to as "Syndrome X" (also known as metabolic syndrome) are described in detail in Johannsson J. Clin. Endocrinol. Metab., 82, 121-34 (1991).

Термин "другие лекарственные средства", используемый здесь, относится к одному или более антидиабетическому средству (не к ингибитору SGLT2 формулы I), одному или более средству против ожирения, антигипертензивному средству, антитромбоцитарному средству, антиатеросклеротическому средству и/или одному или более гиполипидемическому средству (включая антиатеросклеротические средства).The term "other drugs" as used herein refers to one or more antidiabetic agents (not an SGLT2 inhibitor of formula I), one or more antiobesity agents, an antihypertensive agent, an antiplatelet agent, an antiatherosclerotic agent, and/or one or more lipid-lowering agents ( including anti-atherosclerotic agents).

Согласно способу, описанному выше, соединение формулы I, заявленное в соответствии с настоящим изобретением, будет вводиться совместно с одним или двумя, или более антидиабетическими средствами и/или совместно с одним, двумя или более другими лекарственными средствами (в зависимости от способа их введения), в соотношениях от 0.01:1 до 300:1, предпочтительно, от 0.1:1 до 10:1.According to the method described above, the compound of formula I, declared in accordance with the present invention, will be administered together with one or two or more antidiabetic agents and / or together with one, two or more other drugs (depending on the method of administration) , in ratios from 0.01:1 to 300:1, preferably from 0.1:1 to 10:1.

Детальное описание изобретенияDetailed description of the invention

Соединение формулы I, заявленное в соответствии с настоящим изобретением, может быть получено согласно схеме, приведенной ниже, и ее описанию, при этом температура выражена в значениях стоградусной шкалы.The compound of formula I, declared in accordance with the present invention, can be obtained according to the scheme below, and its description, while the temperature is expressed in centigrade values.

Соединение формулы I может быть получено согласно схеме 1 путем обработки соединения формулы IIA compound of formula I can be prepared according to Scheme 1 by treating a compound of formula II

основанием, таким как LiOH или NaOH, в присутствии растворителя, такого как смесь H₂O/THF/MeOH в соотношении 1:2:3 или водн. МеОН, или водн. EtOH.base, such as LiOH or NaOH, in the presence of a solvent, such as a mixture of H ₂ O/THF/MeOH in a ratio of 1:2:3 or aq. MeOH, or aq. EtOH.

Соединение формулы II (которое представляет собой легко кристаллизующееся новое промежуточное соединение) обеспечивает необходимые условия для очистки соединения формулы Ia, получаемого в виде смеси α- и β-аномеров.The compound of formula II (which is a readily crystallizable new intermediate) provides the necessary conditions for the purification of the compound of formula Ia, obtained as a mixture of α- and β-anomers.

Соединение формулы II может быть получено путем обработки соединения Ia с помощью Ас₂О в растворителе, таком как CH₂Cl₂, содержащем пиридин и катализатор, такой как диметиламинопиридин (DMAP).A compound of formula II can be prepared by treating compound Ia with Ac ₂ O in a solvent such as CH ₂ Cl ₂ containing pyridine and a catalyst such as dimethylaminopyridine (DMAP).

Соединения формулы Ia могут быть получены путем восстановления соединения формулы III с помощью восстанавливающего агента, такого как Et₃SiH в растворителе, таком как смесь CH₂Cl₂/MeCN в соотношении 1:1 при температуре - 10° в присутствии кислого катализатора Льюиса, такого как BF₃⋅Et₂O.Compounds of formula Ia can be prepared by reducing a compound of formula III with a reducing agent such as Et ₃ SiH in a solvent such as CH ₂ Cl ₂ /MeCN 1:1 at -10° in the presence of a Lewis acid catalyst such as as BF ₃ ⋅Et ₂ O.

Соединение формулы II может быть альтернативно получено из соединения формулы III с помощью ацетилирования соединения формулы III при использовании Ac₂O в растворителе, таком как толуол или CH₂Cl₂, содержащем основание, такое как основание Хьюнига или Et₃N, и катализатор, такой как DMAP, для получения соединения формулы IV.A compound of formula II may alternatively be prepared from a compound of formula III by acetylation of a compound of formula III using Ac ₂ O in a solvent such as toluene or CH ₂ Cl ₂ containing a base such as Hunig's base or Et ₃ N and a catalyst such as DMAP, to obtain a compound of formula IV.

Последующее превращение соединения IV в соединение II может быть достигнуто путем обработки соединения IV при температуре 20° восстановителем, таким как Et₃SiH, в растворителе, таком как МеОН, содержащем 1 экв. Н₂О и кислый катализатор Льюиса, такой как BF₃⋅Et₂O.Subsequent conversion of compound IV to compound II can be achieved by treating compound IV at 20° with a reducing agent such as Et ₃ SiH in a solvent such as MeOH containing 1 eq. H ₂ O and a Lewis acid catalyst such as BF ₃ ⋅ Et ₂ O.

Схема 1Scheme 1

Соединение формулы III может быть получено согласно схеме 2, путем 1) добавления холодного THF раствора арил лития формулы V к персилированному глюконолактону формулы VI в растворителе, таком как толуол при температуре -75°. Затем через 30 минут добавляют раствор протонсодержащей кислоты, такой метансульфоновая кислота (MSA), в метаноле и раствор перемешивают при температуре 20° до тех пор, пока не произойдет полная трансформация промежуточного лактола в соединение III.A compound of formula III can be prepared according to Scheme 2 by 1) adding a cold THF solution of an aryl lithium of formula V to persylated gluconolactone of formula VI in a solvent such as toluene at -75°. Then, after 30 minutes, a solution of a protic acid such as methanesulfonic acid (MSA) in methanol is added and the solution is stirred at 20° until complete transformation of the lactol intermediate into compound III.

Соединение формулы VI может быть получено путем обработки коммерчески-доступного D-глюконолактона силирующим агентом, таким как хлорид триметилсилила в растворителе, таком как THF, содержащем основание, такое как N-метилморфолин.A compound of formula VI can be prepared by treating commercially available D-gluconolactone with a silating agent such as trimethylsilyl chloride in a solvent such as THF containing a base such as N-methylmorpholine.

Соединение формулы V может быть получено путем обработки соединения формулы VII алкил литием, таким как n-BuLi или t-Buli в растворителе, таком как THF, при температуре -75°.A compound of formula V can be prepared by treating a compound of formula VII with an alkyl lithium such as n-BuLi or t-Buli in a solvent such as THF at -75°.

Соединение формулы VIII может быть легко получено путем обработки соединения формулы III восстанавливающим агентом, таким как Et₃SiH в растворителе, таком как смесь CH₂Cl₃/MeCN в соотношении 1:1 при температуре 0°-20° в присутствии кислого катализатора Льюиса, такого как BF₃⋅Et₂O.A compound of formula VIII can be readily prepared by treating a compound of formula III with a reducing agent such as Et ₃ SiH in a solvent such as CH ₂ Cl ₃ /MeCN 1:1 at 0°-20° in the presence of a Lewis acid catalyst, such as BF ₃ ⋅Et ₂ O.

Соединение формулы VIII может быть получено с помощью реакции ацилирования Фриделя-Крафта с использованием коммерчески доступного этоксибензена (фенетола)и 2-хлор-5-бромбензоилхлорида в растворителе, таком как CH₂Cl₂, содержащем эквивалент кислого катализатора Льюиса, такого как AlCl₃ или AlBr₃.A compound of formula VIII can be prepared by a Friedel-Craft acylation reaction using commercially available ethoxybenzene (phenetol) and 2-chloro-5-bromobenzoyl chloride in a solvent such as CH ₂ Cl ₂ containing the equivalent of a Lewis acid catalyst such as AlCl ₃ or AlBr ₃ .

2-хлор-5-бромбензоилхлорид можно легко получить из коммерчески доступной 2-хлор-5-бромбензойной кислоты путем обработки последней оксалилхлоридом в растворителе, таком, как CH₂Cl₂, содержащем DMF в каталитическом количестве.2-chloro-5-bromobenzoyl chloride can be easily prepared from commercially available 2-chloro-5-bromobenzoic acid by treating the latter with oxalyl chloride in a solvent such as CH ₂ Cl ₂ containing catalytic DMF.

Схема 2Scheme 2

Далее приводится список сокращений химических соединений и терминов, используемых для характеристики настоящего изобретения. Эти сокращения соответствуют указанным соединениям и терминам по всему тексту описания (если специальным образом не оговаривается иное)и могут быть использованы как сами по себе, так и в сочетаниях друг с другом.The following is a list of chemical compound abbreviations and terms used to characterize the present invention. These abbreviations correspond to the indicated compounds and terms throughout the text of the description (unless specifically stated otherwise) and can be used either alone or in combination with each other.

Для характеристики настоящего изобретения используются следующие сокращения:The following abbreviations are used to characterize the present invention:

Ph = фенилPh = phenyl

Bn = бензилBn = benzyl

t-Bu = третичный бутилt-Bu = tertiary butyl

Me = метилMe = methyl

Et = этилEt = ethyl

TMS = триметилсилилTMS = trimethylsilyl

TBS - трет-бутилдиметилсилилTBS - tert-butyldimethylsilyl

THF = тетрагидрофуранTHF = tetrahydrofuran

Et₂O = диэтиловый эфирEt ₂ O = diethyl ether

EtOAc = этилацетатEtOAc = ethyl acetate

DMF = диметилформамидDMF = dimethylformamide

МеОН = метанолMeOH = methanol

EtOH = этанолEtOH = ethanol

i-PrOH = изопропанолi-PrOH = isopropanol

НОАс или АсОН = уксусная кислотаHOAc or AcOH = acetic acid

TFA - трифторуксусная кислотаTFA - trifluoroacetic acid

i-Pr₂NEt = диизопропилэтиламинi-Pr ₂ NEt = diisopropylethylamine

Et₃N = триэтиламинEt ₃ N = triethylamine

DMAP = 4-диметиламинопиридинDMAP = 4-dimethylaminopyridine

NaBH₄ = борогидрат натрияNaBH ₄ = sodium borohydrate

n-BuLi = n-бутиллитийn-BuLi = n-butyllithium

Pd/С = палладий на углеродеPd/C = palladium on carbon

KOH = гидроксид калияKOH = potassium hydroxide

NaOH = гидроксид натрияNaOH = sodium hydroxide

LiOH = гидроксид литияLiOH = lithium hydroxide

K₂CO₃ = карбонат калияK ₂ CO ₃ \u003d potassium carbonate

NaHCO₃ = гидрокарбонат натрияNaHCO ₃ = sodium bicarbonate

Ar = аргонAr = argon

N₂ = азотN ₂ = nitrogen

мин = минута (минуты)min = minute(s)

ч = час (часы)h = hour (hours)

л = литрl = liter

мл = миллилитрml = milliliter

мкл = микролитрµl = microliter

г = граммg = gram

мг = миллиграммmg = milligram

мол. = мольthey say = mole

мМол. = миллимольmmol. = millimole

мэкв. = миллиэквивалентmeq. = milliequivalent

RT = комнатная температураRT = room temperature

нас. = насыщенныйus. = saturated

водн. = водныйaq. = water

TLC = тонкослойная хроматографияTLC = thin layer chromatography

HPLC = жидкостная хроматография высокого разрешенияHPLC = high performance liquid chromatography

LC/MS = жидкостная хроматография высокого разрешения/масс-спектрометрияLC/MS = high performance liquid chromatography/mass spectrometry

MS или Mass Spec = масс-спектрометрияMS or Mass Spec = mass spectrometry

ЯМР = ядерно-магнитный резонансNMR = nuclear magnetic resonance

т.пл. = точка плавленияm.p. = melting point

Термин "низший алкил", используемый здесь как самостоятельно, так и в составе других терминов, если дополнительно не оговаривается иное, относится к прямым и разветвленным углеводородным цепям, содержащим от 1 до 8 атомов углерода, а термин "алкил" или "алк", используемый здесь как самостоятельно, так и в составе других терминов, относится к прямым и разветвленным углеводородным цепям, содержащим от 1 до 20 атомов углерода, предпочтительно от 1 до 10 атомов углерода, еще более предпочтительно от 1 до 8 атомов углерода в нормальной цепи, таким как метил, этил, пропил, изопропил, бутил, трет-бутил, изобутил, пентил, гексил, изогексил, гептил, 4,4-диметилпентил, октил, 2,2,4-триметилпентил, нонил, децил, ундецил, додецил, а также к их изомерам с разветвленными цепями и подобным соединениям, а также к группам, имеющим от 1 до 4 заместителей, таких как галоген, например, F, Br, Cl или J или CF₃, алкил алкокси, арил, арилокси, арил(арил)или диарил, арилалкил, арилалкилокси, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкенил, циклоалкилалкил, циклоалкилалкилокси, факультативно замещенный амин, гидрокси, гидроксиалкил, ацил, алканоил, гетероарил, гетероарилокси, циклогетероалкил, арилгетероарил, арилалкоксикарбонил, гетероарилалкил, гетероарилалкокси, арилоксиалкил, арилоксиарил, алкиламино, алканоиламино, арилкарбониламино, нитро, циано, тиол, галоалкил, тригалоалкил и/или алкилтио.The term "lower alkyl", as used here either alone or as part of other terms, unless otherwise specified, refers to straight and branched hydrocarbon chains containing from 1 to 8 carbon atoms, and the term "alkyl" or "alk", used here either alone or as part of other terms, refers to straight and branched hydrocarbon chains containing from 1 to 20 carbon atoms, preferably from 1 to 10 carbon atoms, even more preferably from 1 to 8 carbon atoms in the normal chain, such as methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, tert-butyl, isobutyl, pentyl, hexyl, isohexyl, heptyl, 4,4-dimethylpentyl, octyl, 2,2,4-trimethylpentyl, nonyl, decyl, undecyl, dodecyl, a also to their branched chain isomers and the like, as well as to groups having from 1 to 4 substituents such as halogen, for example F, Br, Cl or J or CF ₃ , alkyl alkoxy, aryl, aryloxy, aryl(aryl ) or diaryl, arylalkyl, arylalkyloxy, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, cycloalkenyl, cycloalkylalkyl, cycloalkylalkyloxy, optionally substituted amine, hydroxy, hydroxyalkyl, acyl, alkanoyl, heteroaryl, heteroaryloxy, cycloheteroalkyl, arylheteroaryl, arylalkoxycarbonyl, heteroarylalkyl, heteroaryl coxy, aryloxyalkyl, aryloxyaryl, alkylamino, alkanoylamino, arylcarbonylamino, nitro, cyano, thiol, haloalkyl, trihaloalkyl and/or alkylthio.

Термин "циклоалкил", используемый здесь как самостоятельно, так и в составе других терминов, если дополнительно не оговаривается иное, относится к насыщенным или частично насыщенным (имеющим 1 или 2 двойные связи) циклическим углеводородным группам, имеющим от 1 до 3 колец, и включающим моноциклический алкил, бициклический алкил и трициклический алкил, кольца которых состоят в целом из 3-20 атомов углерода, более предпочтительно, из 3-10 атомов углерода и могут быть объединены с 1-2 ароматическими кольцами, как описано для арила, которые включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклооктил, циклодецил и циклододецил, циклогексенил,The term "cycloalkyl", as used here either alone or as part of other terms, unless otherwise specified, refers to saturated or partially saturated (having 1 or 2 double bonds) cyclic hydrocarbon groups having from 1 to 3 rings, and including monocyclic alkyl, bicyclic alkyl and tricyclic alkyl, the rings of which consist of a total of 3-20 carbon atoms, more preferably 3-10 carbon atoms and can be combined with 1-2 aromatic rings, as described for aryl, which include cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cycloheptyl, cyclooctyl, cyclodecyl and cyclododecyl, cyclohexenyl,

причем любая из этих групп может быть факультативно замещена 1-4 заместителями, такими как галоген, алкил, алкокси, гидрокси, арил, арилокси, арилалкил, циклоалкил, алкиламидо, алканоиламино, оксо, ацил, арилкарбониламино, амино, нитро, циано, тиол и/или алкилтио и/или любым алкильным заместителем.wherein any of these groups may optionally be substituted with 1-4 substituents such as halogen, alkyl, alkoxy, hydroxy, aryl, aryloxy, arylalkyl, cycloalkyl, alkylamido, alkanoylamino, oxo, acyl, arylcarbonylamino, amino, nitro, cyano, thiol, and /or alkylthio and/or any alkyl substituent.

Термин "алканоил", используемый здесь как самостоятельно, так и в составе других терминов, относится к алкилу, связанному с карбонильной группой.The term "alkanoyl", as used here either alone or as part of other terms, refers to an alkyl bonded to a carbonyl group.

Термин "галоген" или "гало", используемый здесь как самостоятельно, так и в составе других терминов, относится к хлору, брому, фтору и йоду; при этом хлор и фтор являются более предпочтительными.The term "halogen" or "halo", as used here either alone or as part of other terms, refers to chlorine, bromine, fluorine and iodine; with chlorine and fluorine being more preferred.

Термин "ион металла" относится к ионам щелочных металлов, таким как натрий, калий или литий, и к ионам щелочноземельных металлов, таким как магний и кальций, а также цинк и алюминий.The term "metal ion" refers to alkali metal ions such as sodium, potassium or lithium, and alkaline earth metal ions such as magnesium and calcium, as well as zinc and aluminum.

Термин "арил" или "Арил", используемый здесь как самостоятельно, так и в составе других терминов, если дополнительно не оговаривается иное, относится к моноциклическим и бициклическим ароматическим группам, имеющим от 6 до 10 атомов углерода в кольце (таким как фенил или нафтил, включая 1-нафтил и 2-нафтил),которые могут необязательно включать 1-3 дополнительных кольца, объединенных с углеродным кольцом или гетероциклическим кольцом (таким как, например, кольцо арила, циклоалкила, гетероарила или циклогетероалкила, напримерThe term "aryl" or "Aryl", used here either alone or as part of other terms, unless otherwise specified, refers to monocyclic and bicyclic aromatic groups having from 6 to 10 carbon atoms in the ring (such as phenyl or naphthyl , including 1-naphthyl and 2-naphthyl), which may optionally include 1-3 additional rings combined with a carbon ring or a heterocyclic ring (such as, for example, an aryl, cycloalkyl, heteroaryl or cycloheteroalkyl ring, for example

и могут быть факультативно замещены по подходящим углеродным атомам 1, 2 или 3 группами, включающими водород, гало, галоалкил, алкил, галоалкил, алкокси, галоалкокси, алкенил, трифторметил, трифторметокси, алкинил, циклоалкил-алкил, циклогетероалкил, циклогетероалкилалкил, арил, гетероарил, арилалкил, арилокси, арилоксиалкил, арилалкокси, алкоксикарбонил, арилкарбонил, арилалкенил, аминокарбониларил, арилтиоарилсульфинил, арилазо, гетероарилалкил, гетероарилалкенил, гетероарилгетероарил, гетероарилокси, гидрокси, нитро, циано, амино, замещенные амины, где амин содержит 1-2 заместителя (к которым относятся алкил, арил или любое другое арильное соединение, упоминающееся в определениях), тиол, алкилтио, арилтио, гетероарилтио, арилтиоалкил, алкоксиарилтио, алкилкарбонил, арилкарбонил, алкиламинокарбонил, ариламинокарбонил, алкоксикарбонил, аминокарбонил, алкилкарбонилокси, арилкарбонилокси, алкилкарбониламино, арилкарбониламино, арилсульфинил, арилсульфинилалкил, арилсульфониламино и арилсульфонаминокарбонил и/или любой алкильный заместитель, упоминающийся здесь.and may optionally be substituted on suitable carbon atoms with 1, 2 or 3 groups including hydrogen, halo, haloalkyl, alkyl, haloalkyl, alkoxy, haloalkoxy, alkenyl, trifluoromethyl, trifluoromethoxy, alkynyl, cycloalkyl-alkyl, cycloheteroalkyl, cycloheteroalkylalkyl, aryl, heteroaryl , arylalkyl, aryloxy, aryloxyalkyl, arylalkoxy, alkoxycarbonyl, arylcarbonyl, arylalkenyl, aminocarbonylaryl, arylthioarylsulfinyl, arylazo, heteroarylalkyl, heteroarylalkenyl, heteroarylheteroaryl, heteroaryloxy, hydroxy, nitro, cyano, amino, substituted amines, where amine contains 1-2 substituents (to which includes alkyl, aryl or any other aryl compound mentioned in the definitions), thiol, alkylthio, arylthio, heteroarylthio, arylthioalkyl, alkoxyarylthio, alkylcarbonyl, arylcarbonyl, alkylaminocarbonyl, arylaminocarbonyl, alkoxycarbonyl, aminocarbonyl, alkylcarbonyloxy, arylcarbonyloxy, alkylcarbonyl ylamino, arylcarbonylamino, arylsulfinyl, arylsulfinylalkyl , arylsulfonylamino and arylsulfonaminocarbonyl and/or any alkyl substituent mentioned here.

Термины "низший алкокси", "алкокси", "арилокси" или "аралкокси", используемые здесь как самостоятельно, так и в составе других терминов, если дополнительно не оговаривается иное, относятся к любым упоминающимся выше группам алкила, аралкила или арила, связанным с атомом кислорода.The terms "lower alkoxy", "alkoxy", "aryloxy" or "aralkoxy" as used herein, either alone or as part of other terms, unless otherwise specified, refer to any alkyl, aralkyl or aryl groups mentioned above, associated with an oxygen atom.

Термины "низший алкилтио", "алкилтио", "арилтио" или "аралкилтио", используемые здесь как самостоятельно, так и в составе других терминов, если дополнительно не оговаривается иное, относятся к любым упоминающимся выше группам алкила, аралкила или арила, связанным с атомом серы.The terms "lower alkylthio", "alkylthio", "arylthio" or "aralkylthio" as used herein, either alone or as part of other terms, unless otherwise specified, refer to any alkyl, aralkyl or aryl groups mentioned above, associated with a sulfur atom.

Термин "полигалоалкил", используемый здесь, относится к "алкил" группе, охарактеризованной выше, имеющей от 2 до 9, предпочтительно от 2 до 5 гало-заместителей, таких как F или Cl, предпочтительно F, таких как CF₃CH₂, CF₃ или CF₃CF₂CH₂.The term "polyhaloalkyl" as used herein refers to an "alkyl" group as defined above having 2 to 9, preferably 2 to 5 halo substituents such as F or Cl, preferably F such as CF ₃ CH ₂ , CF ₃ or CF ₃ CF ₂ CH ₂ .

Термин "полигалоалкилокси", используемый здесь, относится к "алкокси" или "алкилокси" группе, охарактеризованной выше, имеющей от 2 до 9, предпочтительно, от 2 до 5 гало-заместителей, таких как F или Cl, предпочтительно F, таких как CF₃CH₂O, CF₃O или CF₃CF₂CH₂O.The term "polyhaloalkyloxy" as used herein refers to an "alkoxy" or "alkyloxy" group as defined above having 2 to 9, preferably 2 to 5 halo substituents, such as F or Cl, preferably F, such as CF ₃ CH ₂ O, CF ₃ O or CF ₃ CF ₂ CH ₂ O.

Термин "сложные эфиры, представляющие собой пролекарства", используемый здесь, относится к сложным эфирам и карбонатам, полученным при взаимодействии одного или более гидроксила соединений формулы I с алкил, алкокси или арил-замещенным ацилирующим агентом при использовании методов для получения ацетатов, пивалатов, метилкарбонатов, бензоатов и им подобных соединений, хорошо известных специалистам в данной области. Кроме того, из уровня техники известны сложные эфиры, на основе карбоновых и фосфорных кислот, такие как метиловый, этиловый, бензиловый и т.д.The term "prodrug esters" as used herein refers to esters and carbonates obtained by reacting one or more hydroxyl compounds of formula I with an alkyl, alkoxy or aryl-substituted acylating agent using methods to prepare acetates, pivalates, methyl carbonates. , benzoates and the like, well known to those skilled in the art. In addition, esters based on carboxylic and phosphoric acids, such as methyl, ethyl, benzyl, etc., are known from the prior art.

Примерами таких эфиров являются:Examples of such esters are:

В том случае, когда соединения формулы I находятся в форме кислот, они могут формировать фармацевтически приемлемые соли, такие как соли щелочных металлов, таких как литий, натрий или калий; соли щелочноземельных металлов, таких как кальций или магний, а также цинк и алюминий, и другие катионы, такие как аммоний, хлор, диэтаноламин, лизин (D или L), этилендиамин, трет-бутиламин, трет-октиламин, три-(гидроксиметил)аминометан (TRIS), N-метил глюкозамин (NMG), триэтаноламин и дегидроабиетиламин.When the compounds of formula I are in the form of acids, they can form pharmaceutically acceptable salts such as alkali metal salts such as lithium, sodium or potassium; alkaline earth metal salts such as calcium or magnesium, as well as zinc and aluminum, and other cations such as ammonium, chlorine, diethanolamine, lysine (D or L), ethylenediamine, tert-butylamine, tert-octylamine, tri-(hydroxymethyl) aminomethane (TRIS), N-methyl glucosamine (NMG), triethanolamine and dehydroabietylamine.

Настоящее изобретение также рассматривает все стереоизомеры соединений, как в смеси, так в очищенной или частично очищенной форме. Соединение, заявленное в соответствии с настоящим изобретением, может иметь асимметричные центры в любом из атомов углерода, включая любой R-заместитель. Следовательно, соединение формулы I может существовать в формах энантиомеров или диастереомеров или их смеси. При получении соединений можно использовать рацематы, энантиомеры или диастереомеры в качестве начальных соединений. После получения, энантиомеры и диастереомеры могут быть разделены с помощью традиционных методов, таких как хроматография или фракционная кристаллизация.The present invention also contemplates all stereoisomers of the compounds, whether in admixture or in purified or partially purified form. The compound of the present invention may have asymmetric centers at any of the carbon atoms, including any R substituent. Therefore, the compound of formula I may exist in the form of enantiomers or diastereomers or mixtures thereof. In the preparation of compounds, racemates, enantiomers or diastereomers may be used as starting compounds. Once obtained, enantiomers and diastereomers can be separated using conventional methods such as chromatography or fractional crystallization.

При необходимости соединения формулы I могут быть использованы в комбинации с одним или более другими антидиабетическими средствами или одним или более другими лекарственными средствами, которые могут вводиться как перорально в одинаковой дозированной форме, а также в отдельной оральной дозированной форме или путем инъекции.If necessary, the compounds of formula I can be used in combination with one or more other antidiabetic agents or one or more other drugs, which can be administered either orally in the same dosage form, as well as in a separate oral dosage form or by injection.

К таким антидиабетическим средствам, которые могут применяться совместно с ингибиторами SGLT2 формулы I, относятся 1,2,3 или более антидиабетических средств или антигипергликемические средства, включая стимуляторы секреции инсулина или сенсибилизаторы инсулина, или другие антидиабетические средства, предпочтительно имеющие отличный от ингибиторов SGLT2 механизм действия и включающие бигуаниды, производные сульфонилмочевины, ингибиторы глюкозидазы, PPAR у агонисты, такие как тиазолидиндионы, аР2 ингибиторы, PPAR α/γ двойные агонисты, ингибиторы дипептидил пептидазы IV (DP4) и/или меглитиниды, а также инсулин, глюкагоноподобный пептид 1, ингибиторы РТР1 В, ингибиторы гликоген-фосфорилазы и/или ингибиторы глюкозо-6-фосфатазы.Such antidiabetic agents which may be used in conjunction with SGLT2 inhibitors of formula I include 1,2,3 or more antidiabetic agents or antihyperglycemic agents, including insulin secretagogues or insulin sensitizers, or other antidiabetic agents, preferably having a different mechanism of action than SGLT2 inhibitors. and including biguanides, sulfonylurea derivatives, glucosidase inhibitors, PPARy agonists such as thiazolidinediones, aP2 inhibitors, PPARα/γ dual agonists, dipeptidyl peptidase IV (DP4) inhibitors and/or meglitinides, as well as insulin, glucagon-like peptide 1, PTP1 inhibitors B, glycogen phosphorylase inhibitors and/or glucose-6-phosphatase inhibitors.

К другим лекарственным средствам, которые могут применяться совместно с ингибиторами SGLT2 формулы I, относятся средства для лечения ожирения, антигипертензивные средства, антитромбоцитарные средства, антиатеросклеротические средства и/или гиполипидемические средства.Other drugs that may be used in conjunction with SGLT2 inhibitors of formula I include anti-obesity agents, antihypertensive agents, antiplatelet agents, anti-atherosclerotic agents and/or lipid-lowering agents.

Ингибитор SGLT2 формулы I также может применяться совместно с лекарственными средствами для лечения осложнений диабета. К таким лекарственным средствам относятся ингибиторы PKC и/или ингибиторы AGE.The SGLT2 inhibitor of formula I can also be used in conjunction with drugs to treat complications of diabetes. Such drugs include PKC inhibitors and/or AGE inhibitors.

Считается, что применение соединений формулы I в комбинации с 1,2,3 или более другими антидиабетическими средствами приводит к более значительному антигипергликемическому эффекту, чем при использовании этих же препаратов по отдельности и большему, чем общий аддитивный антигипергликемический эффект, обусловливаемый этими препаратами.It is believed that the use of the compounds of formula I in combination with 1,2,3 or more other antidiabetic agents leads to a more significant antihyperglycemic effect than when using the same drugs alone and greater than the total additive antihyperglycemic effect due to these drugs.

Таким антидиабетическим средством может быть оральный антигипергликемический препарат, предпочтительно из группы бигуанида, такой как метформин или фенформин или их соли, предпочтительно метформин HCl.Such an antidiabetic agent may be an oral antihyperglycemic agent, preferably from the biguanide group, such as metformin or phenformin or salts thereof, preferably metformin HCl.

В том случае, когда в качестве дополнительного антидиабетического средства используется препарат из группы бигуанида, соединение формулы I вводится в весовом соотношении к этому препарату, равном 0.01:1-100:1, предпочтительно, 0.1:1-5:1.When a drug from the biguanide group is used as an additional antidiabetic agent, the compound of formula I is administered in a weight ratio to this drug equal to 0.01:1-100:1, preferably 0.1:1-5:1.

Также дополнительным антидиабетическим средством может, предпочтительно, быть средство из группы производных сульфонилмочевины, такое как глубирид (также известный как глибенкламид), глимепирид (описанный в патенте СШ7А №4,379,785), глипизид, гликлазид или хлорпропамид, или любое известное средство из этой группы или другое антигипергликемическое средство, которое воздействует на АТФ-зависимые каналы р-клеток; глубирид и глипизид являются предпочтительными и могут применяться в одинаковых или различных оральных дозированных формах.Also, the additional anti-diabetic agent may preferably be an agent from the group of sulfonylurea derivatives such as glubiride (also known as glibenclamide), glimepiride (described in US Pat. No. 4,379,785), glipizide, gliclazide or chlorpropamide, or any known agent from this group or other an antihyperglycemic agent that acts on ATP-dependent β-cell channels; glubiride and glipizide are preferred and may be used in the same or different oral dosage forms.

Соединение формулы I в таком случае вводится в весовом соотношении к производному сульфонилмочевины, равном 0.01:1-100:1, предпочтительно, 0.2-10:1.The compound of formula I is then introduced in a weight ratio to the sulfonylurea derivative of 0.01:1-100:1, preferably 0.2-10:1.

Кроме того, дополнительным антидиабетическим средством может быть средство из группы ингибиторов глюкозидазы, такое как акарбоза (описанная в патенте США №4,904,769) или миглитол (описанный в патенте США №4,639,436), которые могут применяться в одинаковых или различных оральных дозированных формах.In addition, the additional anti-diabetic agent may be an agent from the group of glucosidase inhibitors such as acarbose (described in US Pat. No. 4,904,769) or miglitol (described in US Pat. No. 4,639,436), which can be used in the same or different oral dosage forms.

Соединение формулы I в таком случае вводится в весовом соотношении к ингибитору глюкозидазы, равном 0.01:1-100:1, предпочтительно, 0.5:1-50:1.The compound of formula I is then administered in a weight ratio to the glucosidase inhibitor of 0.01:1-100:1, preferably 0.5:1-50:1.

Соединение формулы I может применяться в комбинации с PPAR у агонистом, таким как оральный антигипогликемический препарат тиазолидиндион или другой сенсибилизатор иснулина (который обладает инсулин-сенсибилизирующим эффектом у пациентов с NIDDM), такой как троглитазон (Rezulin® фирмы Warner-Lambert, описанный в патенте США №4,572,912), розиглитазон (SKB), пиоглитазон (Takeda), МСС-555 фирмы Mitsubishi (описанный в патенте США №5,594,016), GL-262570 фирмы Glaxo-Welcome, энглитазон (СР-68722 фирмы Pfizer) или дарглитазон (СР-86325 фирмы Pfizer, изаглитазон (MIT/J&J), JTT-501 (JPNT/P&U), L-895645 (Merk), R-119702 (Sakyo/WL), NN-2344 (Dr. Reddy/NN)или YM-440 (Yamanouchi), предпочтительно розиглитазон и пиоглитазон.A compound of formula I can be used in combination with a PPAR agonist such as the oral antihypoglycemic drug thiazolidinedione or another insulin sensitizer (which has an insulin sensitizing effect in NIDDM patients) such as troglitazone (Rezulin® from Warner-Lambert, described in US Pat. 4,572,912), rosiglitazone (SKB), pioglitazone (Takeda), MCC-555 from Mitsubishi (described in US Pat. No. 5,594,016), GL-262570 from Glaxo-Welcome, englitazone (CP-68722 from Pfizer), or darglitazone (CP-86325). Pfizer, isaglitazone (MIT/J&J), JTT-501 (JPNT/P&U), L-895645 (Merk), R-119702 (Sakyo/WL), NN-2344 (Dr. Reddy/NN), or YM-440 ( Yamanouchi), preferably rosiglitazone and pioglitazone.

Соединение формулы I в таком случае вводится в весовом соотношении к тиазолидиндиону равном 0.01:1-100:1, предпочтительно, 0.2:1-10:1.The compound of formula I is then introduced in a weight ratio to thiazolidinedione equal to 0.01:1-100:1, preferably 0.2:1-10:1.

Производные сульфонилмочевины и тиазолидиндион в количествах менее чем 150 мг орального антидиабетического агента могут быть объединены в одну таблетку с соединением формулы I.Sulfonylureas and thiazolidinedione in amounts less than 150 mg of an oral anti-diabetic agent may be combined in one tablet with a compound of formula I.

Соединение формулы I может также применяться в комбинации с антигипергликемическим средством, таким как инсулин или глюкагоноподобный пептид 1(GLP-1), такой как GLP-1(1-36)амид, GLP-1(7-36)амид, GLP-1(7-37) (как описано в патенте США №5,614,492 Habener, приведенном здесь в качестве ссылки), а также АС2993 (Amylen) и LY-315902 (Lilly), которые могут вводиться инъекционно, интраназально, трансдермально или буккально.The compound of formula I can also be used in combination with an antihyperglycemic agent such as insulin or a glucagon-like peptide 1(GLP-1) such as GLP-1(1-36)amide, GLP-1(7-36)amide, GLP-1 (7-37) (as described in Habener US Pat. No. 5,614,492, incorporated herein by reference), as well as AC2993 (Amylen) and LY-315902 (Lilly), which can be injected, intranasally, transdermally or buccally.

В случае их использования метформин, производные сульфонилмочевины, такие как глубирид, глимепирид, глипирид, глипизид, хлорпромамид и гликлазид, и ингибиторы глюкозидазы, такие как акарбоза и миглитол, или инсулин (инъекционный, пульмонарный, буккальный или оральный), могут применяться в соответствии с рецептурами, приведенными выше, и в количествах и дозах, указанных в настольном справочнике врача.If used, metformin, sulfonylurea derivatives such as glubiride, glimepiride, glipiride, glipizide, chlorpromamide and gliclazide, and glucosidase inhibitors such as acarbose and miglitol, or insulin (injectable, pulmonary, buccal or oral) may be used according to formulations above, and in the amounts and doses indicated in the doctor's desk reference.

В случае их использования, метформин и его соли могут применяться в количествах, находящихся в пределах от 500 до 2000 мг в сутки, которые могут вводиться как в единичных, так и в разделенных дозах от одного до четырех раз в сутки.If used, metformin and its salts can be used in amounts ranging from 500 to 2000 mg per day, which can be administered in single or divided doses from one to four times a day.

В случае их использования, антидиабетические средства из группы тиазолидиндионов могут применяться в количествах, находящихся в пределах от 0.01 до 2000 мг в сутки, которые могут вводиться как в единичных, так и в разделенных дозах от одного до четырех раз в сутки.When used, antidiabetic agents from the thiazolidinedione group can be used in amounts ranging from 0.01 to 2000 mg per day, which can be administered either in single or divided doses from one to four times a day.

В случае его использования, инсулин может применяться в соответствии с рецептурами, количествами и дозировками, указанными в настольном справочнике врача.If used, insulin can be used in accordance with the formulations, quantities and dosages indicated in the doctor's desk reference.

В случае их использования, GLP-1 пептиды могут применяться в виде оральных щечных лекарственных форм, вводиться интраназально или парентерально, как описано в патентах США №5,346,701 (TheraTech), 5,614,492 и 5,631,224, приведенных здесь в качестве ссылки.When used, GLP-1 peptides can be administered as oral, buccal, intranasal, or parenteral dosage forms as described in US Pat.

Помимо всего прочего, антидиабетическим средством, которое может применяться совместно с соединением формулы I может быть PPAR α/γ двойной агонист, такой как AR-H039242 (Astra/Zeneca), GW-409544 (Glaxo-Wel1come), KRP297 (Kyorin Merck), а также средства, описанные у Мураками и соавт."Новый сенсибилизатор инсулина работает как колиганд для альфа рецептора, активируемого пероксисомной пролиферацией (PPAR альфа), и для гамма PPAR. Влияние PPAR активизации на неправильный метаболизм липидов в печени у крыс линии Zucker, страдающих ожирением", Диабет 47, 1841-1847 (1998), а также средства раскрытые в заявке №60/155,400 от 22 сентября 1999, упомянутой здесь в качестве ссылки, и вводимые в указанных там дозировках; предпочтительными являются соединения, упомянутые в вышеуказанной заявке как наиболее пригодные.Among other things, an antidiabetic agent that can be used in conjunction with a compound of formula I can be a PPAR α/γ dual agonist such as AR-H039242 (Astra/Zeneca), GW-409544 (Glaxo-Wel1come), KRP297 (Kyorin Merck), as well as those described by Murakami et al. "A novel insulin sensitizer works as a coligand for peroxisome proliferation-activated receptor alpha (PPAR alpha) and for PPAR gamma. Effect of PPAR activation on abnormal hepatic lipid metabolism in obese Zucker rats ", Diabetes 47, 1841-1847 (1998), as well as the agents disclosed in application No. 60/155,400 of September 22, 1999, mentioned here by reference, and administered at the dosages indicated therein; preferred are the compounds mentioned in the above application as the most suitable.

Также другим антидиабетическим средством может быть ингибитор аР2, такой как описан в заявке на патент США №09/391,053 от 7 сентября 1999 и в заявке на патент США №60/127,745 от 5 апреля 1999, применяемый в дозировках, указанных там. Предпочтительными являются соединения, упомянутые в вышеуказанных заявках как наиболее подходящие.Also, another anti-diabetic agent may be an aP2 inhibitor such as described in US Patent Application No. 09/391,053, filed September 7, 1999, and US Patent Application No. 60/127,745, filed April 5, 1999, used at the dosages indicated therein. Preferred are the compounds mentioned in the above applications as the most suitable.

Кроме того, другим антидиабетическим средством может быть ингибитор DP4, такой, как описан в WO 99/38501, WO 99/46272, WO 99/67279 (PROBIODRUG), WO 99/67278 (PROBIODRUG), WO 99/61431 (PROBIODRUG), NVP-DPP728A (1-[[2-[(5-цианопиридин-2-ил)амино]этил]амино]ацетил]-2-циано-(S)- пирролидин)(Novartis) (предпочтительно), как описано у Hunges et al, Biochemistry, 38 (36), 11597-11603, 1999, TSL-225 (триптофил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоксильная кислота (описано у Yamada et al, Biorg.& Med. Chem. Lett. 8 (1998) 1537-1540, 2-цианопирролидиды и 4-цианопирролидиды, как описано у Ashworth et al., Bioorg.& Med. Chem. Lett., Vol.6, No. 22, стр. 1163-1166 и 2745-2748 (1996), применяемый в дозировках, указанных в вышеупомянутых ссылках.In addition, another anti-diabetic agent may be a DP4 inhibitor such as described in WO 99/38501, WO 99/46272, WO 99/67279 (PROBIODRUG), WO 99/67278 (PROBIODRUG), WO 99/61431 (PROBIODRUG), NVP-DPP728A (1-[[2-[(5-cyanopyridin-2-yl)amino]ethyl]amino]acetyl]-2-cyano-(S)-pyrrolidine)(Novartis) (preferred), as described by Hunges et al, Biochemistry, 38 (36), 11597-11603, 1999, TSL-225 (tryptophyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-3-carboxylic acid (described in Yamada et al, Biorg. & Med. Chem. Lett.8 (1998) 1537-1540, 2-cyanopyrrolidides and 4-cyanopyrrolidides as described in Ashworth et al., Bioorg. & Med. Chem. Lett., Vol. 6, No. 22, pp. 1163-1166 and 2745-2748 (1996) used at the dosages indicated in the above references.

Соединением из группы меглитинида, которое может применяться совместно с соединением формулы I, может быть репаглинид, натеглинид (Novartis) или KAD1229 (PF/Kissei); рапаглинид является предпочтительным.A compound from the meglitinide group which may be used in conjunction with a compound of formula I may be repaglinide, nateglinide (Novartis) or KAD1229 (PF/Kissei); rapaglinide is preferred.

Ингибитор SGLT2 формулы I в таком случае вводится в весовом соотношении к меглитиниду, PPAR у агонисту, PPAR α/γ двойному агонисту, аР2 ингибитору или DP4 ингибитору, равном 0.01:1-100:1, предпочтительно 0.2:1-10:1.The SGLT2 inhibitor of formula I is then administered in a weight ratio of 0.01:1-100:1, preferably 0.2:1-10:1, to meglitinide, PPAR agonist, PPAR α/γ dual agonist, aP2 inhibitor or DP4 inhibitor.

Гиполипидемические средства, которые могут применяться совместно с соединениями формулы I, могут включать 1,2,3 или более средств из группы МРТ ингибиторов, ингибиторов ГМГ-КоА редуктазы, ингибиторов сквален-синтетазы, производных фибровой кислоты, ингибиторов АЛАТ, ингибиторов липоксигеназы, ингибиторов абсорбции холестерина, ингибиторов кишечного Na⁺/желчная кислота совместного переносчика, регуляторов активности рецепторов ЛПНП, секвестрантов желчных кислот и/или никотиновую кислоту и ее производные.Lipid-lowering agents which may be used in conjunction with compounds of formula I may include 1,2,3 or more of the MRI inhibitors, HMG-CoA reductase inhibitors, squalene synthetase inhibitors, fibric acid derivatives, ALAT inhibitors, lipoxygenase inhibitors, absorption inhibitors cholesterol, inhibitors of intestinal Na ⁺ /bile acid co-transporter, regulators of LDL receptor activity, bile acid sequestrants and/or nicotinic acid and its derivatives.

К МТР ингибиторам, которые могут применяться в соответствии с настоящим изобретением, относятся МТР ингибиторы, описанные в патенте США №5,595,872, патенте США №5,739,135, патенте США №5,712,279, патенте США №5,760,246, патенте США №5,827,875, патенте США №5,885,983, а также в патенте США №5,962,440. Предпочтительным является каждый из ингибиторов МТР, описанный в вышеупомянутых документах. Все вышеупомянутые патенты США и заявки приведены здесь в качестве ссылки.MTP inhibitors that may be used in accordance with the present invention include the MTP inhibitors described in US Pat. No. 5,595,872; US Pat. No. 5,739,135; US Pat. No. 5,712,279; See also US Pat. No. 5,962,440. Preferred is each of the MTP inhibitors described in the above documents. All of the aforementioned US patents and applications are incorporated herein by reference.

Гиполипидемическим средством может быть средство из группы ингибиторов ГМГ-КоА редуктазы, которая включает (без ограничений указанным) мевастатин и родственные соединения, описанные в патенте США №3,983,140; ловастатин (мевинолин)и родственные соединения, описанные в патенте США №4,231,938; правастатин и родственные соединения, описанные в патенте США №4,346,227; симвастатин и родственные соединения, описанные в патентах США №4,448,784 и 4,450,171. Гиполипидемическими средствами также могут быть соединения, описанные в заявках США на патент №60/211,594 и 60/211,595. К другим ингибиторам ГМГ-КоА редуктазы, которые могут применяться в соответствии с настоящим изобретением, относятся (без ограничений указанным) флувастатин, описанный в патенте США №5,354,772; церивастатин, описанный в патентах США №5,006,530 и 5,177,080; аторвастатин, описанный в патентах США №4,681,893, 5,273,995, 5,385,929 и 5,686,104; атавастатин (нивастатин фирмы Nissan/Sankyo (NK-104)), описанный в патенте США №5,011,930; визастатин фирмы Shionogi-Astra/Zeneca (ZD-4522), описанный в патенте США №5,260,440, и родственные статинам соединения, описанные в патенте США №5,753,675; пиразоловые аналоги производных мевалонолактона, описанные в патенте США №4,613,610, инденовые аналоги производных мевалонолактона, описанные в заявке РСТ WO 86/03488; 6-[2-(замещенный-пиррол-1-ил)-алкил)пуран-2-оны и их производные, описанные в патенте США №4,647,576; SC-45355 дихлорацетат фирмы Searl (3-замещенное производное пентандиоевой кислоты); имидазоловые аналоги производных мевалонолактона, описанные в заявке РСТ WO 86/07 054; производные 3-карбокси-2-гидрокси-пропан-фосфоновой кислоты, описанные в патенте Франции №2,596,393; производные 2,3-двузамещенного пиррола, фурана и тиофена, описанные в заявке на европейский патент №0,221,025; нафтиловые аналоги мевалонолактона, описанные в патенте США №4,686,237; октагидрогнафталены, описанные в патенте США №4,499,289, кето-аналоги мевинолина (ловастатин), описанные в заявке на европейский патент №0,142,146 А2, и хинолиновые и пиридиновые производные, описанные в патентах США №5,506,219 и 5,691,322.The lipid-lowering agent may be an agent from the group of HMG-CoA reductase inhibitors, which includes, but is not limited to, mevastatin and related compounds described in US Pat. No. 3,983,140; lovastatin (mevinolin) and related compounds described in US patent No. 4,231,938; pravastatin and related compounds described in US patent No. 4,346,227; simvastatin and related compounds described in US Pat. Nos. 4,448,784 and 4,450,171. Lipid-lowering agents can also be compounds described in US patent applications No. 60/211,594 and 60/211,595. Other HMG-CoA reductase inhibitors that can be used in accordance with the present invention include (but are not limited to) fluvastatin described in US patent No. 5,354,772; cerivastatin as described in US Pat. Nos. 5,006,530 and 5,177,080; atorvastatin described in US Pat. Nos. 4,681,893, 5,273,995, 5,385,929 and 5,686,104; atavastatin (nivastatin from Nissan/Sankyo (NK-104)), described in US patent No. 5,011,930; visastatin from Shionogi-Astra/Zeneca (ZD-4522) described in US Pat. No. 5,260,440 and statin-related compounds described in US Pat. No. 5,753,675; pyrazole analogs of mevalonolactone derivatives described in US patent No. 4,613,610, indene analogs of mevalonolactone derivatives described in PCT application WO 86/03488; 6-[2-(substituted-pyrrol-1-yl)-alkyl)puran-2-ones and their derivatives described in US patent No. 4,647,576; SC-45355 dichloroacetate from Searl (3-substituted pentanedioic acid derivative); imidazole analogs of mevalonolactone derivatives as described in PCT application WO 86/07 054; derivatives of 3-carboxy-2-hydroxy-propane-phosphonic acid, described in French patent No. 2,596,393; derivatives of 2,3-disubstituted pyrrole, furan and thiophene, described in the application for European patent No. 0,221,025; naphthyl analogues of mevalonolactone, described in US patent No. 4,686,237; octahydrognaphthalenes as described in US Pat.

Кроме того, соединения фосфиновой кислоты, обладающие способностью ингибировать ГМГ-КоА редуктазу и подходящие для использования в соответствии с настоящим изобретением, описаны в GB 2205837.In addition, phosphinic acid compounds having the ability to inhibit HMG-CoA reductase and suitable for use in accordance with the present invention are described in GB 2205837.

К ингибиторам сквален-синтетазы, подходящим для использования в соответствии с настоящим изобретением, относятся (без ограничений указанным) α-фосфоно-сульфонаты, описанные в патенте США №5,712,396; ингибиторы, описанные у Biller et al, J. Med. Chem., 1988, Vol.31, No. 10, стр. 1869-1871, включая изопреноид (фосфинил-метил) фосфонаты, а также другие известные ингибиторы сквален-синтетазы, например, описанные в патентах США №4,871,721 и 4,924,024 и Biller, S.A., Neuenschwander, K., Ponpipom, М.М., и у Poulter, CD., Current Pharmaceutical Design, 2, 1-40 (1996).Suitable squalene synthetase inhibitors for use in accordance with the present invention include, but are not limited to, the α-phosphonosulfonates described in US Pat. No. 5,712,396; the inhibitors described in Biller et al, J. Med. Chem., 1988, Vol.31, No. 10, pp. 1869-1871, including isoprenoid (phosphinyl-methyl) phosphonates, as well as other known squalene synthetase inhibitors, such as those described in US Pat. M., and Poulter, CD., Current Pharmaceutical Design, 2, 1-40 (1996).

Кроме того, дополнительные ингибиторы сквален-синтетазы, подходящие для использования в соответствии с настоящим изобретением, включают терпеноид пирофосфаты, описанные Р. Otiz de Mintelliano et al, J. Med. Chem., 1977, 20, 243-249; аналоги фарнесил дифосфата А и аналоги пресквален пирофосфата (PSQ-PP), описанные Corey и Volante, J. Am. Chem. Soc, 1976, 98, 1291-1293; фосфинилфосфонаты, описанные McClard, R.W. et al, J.A.C.S., 1987, 109, 5544 и циклопропаны, описанные в диссертации Capson, T.L., июнь, 1987, Dept. Med. Chem. U of Utach, реферат, таблица, стр. 16,17, 40-43, 48-51, резюме.In addition, additional squalene synthetase inhibitors suitable for use in accordance with the present invention include the terpenoid pyrophosphates described by P. Otiz de Mintelliano et al, J. Med. Chem., 1977, 20 , 243-249; farnesyl diphosphate A analogs and presqualene pyrophosphate analogs (PSQ-PP) described by Corey and Volante, J. Am. Chem. Soc, 1976, 98, 1291-1293; phosphinylphosphonates as described by McClard, RW et al, JACS, 1987, 109, 5544; and cyclopropanes as described in Capson, TL, June 1987, Dept. Med. Chem. U of Utach, abstract, table, pp. 16,17, 40-43, 48-51, summary.

Другими гиполипидемическими агентами, подходящими для использования в соответствии с настоящим изобретением, являются (без ограничений указанным) производные фибровой кислоты, такие как фенофибрат, гемфиброзил, клофибрат, безафибрат, ципрофибрат, клинофибрат и им подобные средства; пробукол и родственные соединения, описанные в патенте США №3,674,836; (робукол и гемфиброзил являются предпочтительными); секвестранты желчных кислот, такие как холестирамин, колестипол и DEAE-Сефадекс (Secholex®, Policexide®), а также липостабил (Phone-Poulenc); Eisai Е-5050 (N-замещенное производное этаноламина); иманиксил (НОЕ-402); тетрагидролипстатин (THL); истигмастанилфосфорилхолин (SPC, Roche); аминоциклодекстрин (Tanabe Seiyoki); Ajinomoto AJ-814 (производное азулена); мелинамид (Sumitomo); Sandoz 58-035, American Cyanamid CL-277,082 и CL-283, 546 (двузамещенные производные мочевины); никотиновая кислота; аципимокс; ацифран; неомицин; р-аминосалициловая кислота; аспирин, поли(диаллилметиламин) производные, описанные в патенте США №4,759,923; четвертичный амин поли(диаллилдиметиламмонийхлорид) и ионы, такие, как описанные в патенте США №4,027,009, а также другие известные средства, снижающие уровень холестерина в сыворотке крови.Other lipid-lowering agents suitable for use in accordance with the present invention include (but are not limited to) fibric acid derivatives such as fenofibrate, gemfibrozil, clofibrate, bezafibrate, ciprofibrate, clinofibrate, and the like; probucol and related compounds described in US patent No. 3,674,836; (robucol and gemfibrozil are preferred); bile acid sequestrants such as cholestyramine, colestipol and DEAE-Sephadex (Secholex®, Policexide®), and lipostabil (Phone-Poulenc); Eisai E-5050 (N-substituted ethanolamine derivative); imanixil (NOE-402); tetrahydrolipstatin (THL); istigmastanylphosphorylcholine (SPC, Roche); aminocyclodextrin (Tanabe Seiyoki); Ajinomoto AJ-814 (azulene derivative); melinamide (Sumitomo); Sandoz 58-035, American Cyanamid CL-277,082 and CL-283, 546 (disubstituted urea derivatives); a nicotinic acid; acipimox; atsifran; neomycin; p-aminosalicylic acid; aspirin, poly(diallylmethylamine) derivatives described in US patent No. 4,759,923; poly(diallyldimethylammonium chloride) quaternary amine; and ions such as those described in US Pat. No. 4,027,009, as well as other known serum cholesterol lowering agents.

Другим гиполипидемическим средством может быть ингибитор АСАТ, такой как описан, например, в публикациях "Лекарственные средства будущего 24", 9-15 (1999), (Avasimibe); "Ингибитор АСАТ, С1-1011 - эффективное средство для профилактики и замедления развития жировых полосок в аорте у хомяков", Nicolosi et al, Атеросклероз (Shannon, Irel). (1998), 137 (1), 77-85; "Фармакологический профиль FCE 27677: новый ингибитор АСАТ с потенциальной гиполипидемической активностью, обусловленной селективной супрессией печеночной секреции ApoB100-несущего липопротеина", Ghiselli, Giancarlo, Cardiovasc. Drug Rev. (1998), 16(1), 16-30; "RP 73163: биодоступный алкилсульфинил-дифенилимидазоловый АСАТ ингибитор", Smith, С, et al, Bioorg. Med. Chem. Lett. (1996), 6(1), 47-50; "Ингибиторы АСАТ: физиологические механизмы гиполипидемической и антиатеросклеротической активности у экспериментальных животных", Krause et al, Editor(s): Ruffolo, Robert R., Jr.; Hollinger, Mannfred А., Воспаление: пути медиаторов (1995), 173-98, Издатель: CRC, Boca Raton, Fla.; "Ингибиторы АСАТ: потенциальные антиатеросклеротические агенты", Sliskovic et al, Curr. Med. Chem. (1994), 1(3), 204-25; "Ингибиторы ацил-КоА: холестерин О-ацил трансферазы (АСАТ) как гипохолестеринемические средства. б. Первый водорастворимый ингибитор АСАТ с липид-регулирующей активностью". Ингибиторы ацил-КоА: холестерин ацилтрансферазы (АСАТ)7. Разработка серии замещенных производных N-фенил-N'-[(1-фенилциклопентил)метил]мочевины, обладающих высокой гипохолестеринемической активностью", Stout et al, Chemtracts: Org. Chem. (1995), 8(6), 395-62, или TS-962 (Taisho Pharmaceutical Co. Ltd).Another lipid-lowering agent may be an ACAT inhibitor such as described, for example, in Drugs of the Future 24, 9-15 (1999), (Avasimibe); "The ACAT inhibitor, C1-1011, is an effective agent for preventing and slowing the development of fatty streaks in the aorta in hamsters", Nicolosi et al, Atherosclerosis (Shannon, Irel). (1998), 137(1), 77-85; "Pharmacological profile of FCE 27677: a novel ACAT inhibitor with potential hypolipidemic activity due to selective suppression of hepatic secretion of ApoB100-bearing lipoprotein", Ghiselli, Giancarlo, Cardiovasc. Drug Rev. (1998), 16(1), 16-30; "RP 73163: Bioavailable alkylsulfinyl-diphenylimidazole ACAT inhibitor", Smith, C, et al, Bioorg. Med. Chem. Lett. (1996), 6(1), 47-50; "ASAT inhibitors: physiological mechanisms of lipid-lowering and anti-atherosclerotic activity in experimental animals", Krause et al, Editor(s): Ruffolo, Robert R., Jr.; Hollinger, Mannfred A., Inflammation: mediator pathways (1995), 173-98, Publisher: CRC, Boca Raton, Fla.; "ASAT inhibitors: potential anti-atherosclerotic agents", Sliskovic et al, Curr. Med. Chem. (1994), 1(3), 204-25; "Acyl-CoA inhibitors: cholesterol O-acyl transferase (ACAT) as hypocholesterolemic agents. b. The first water-soluble ACAT inhibitor with lipid-regulating activity." Acyl-CoA inhibitors: cholesterol acyltransferase (ACAT)7. Development of a series of substituted N-phenyl-N'-[(1-phenylcyclopentyl)methyl]urea derivatives with high hypocholesterolemic activity", Stout et al, Chemtracts: Org. Chem. (1995), 8(6), 395-62, or TS-962 (Taisho Pharmaceutical Co. Ltd).

Гиполипидемическим средством также может быть регулятор повышающей активности рецептора LD2, такой как, MD-700 (Taisho Pharmaceutical Co. Ltd) или LY295427 (Eli Lilly).The lipid-lowering agent may also be an LD2 receptor upregulator such as MD-700 (Taisho Pharmaceutical Co. Ltd) or LY295427 (Eli Lilly).

Гиполипидемическим средством также может быть ингибитор абсорбции холестерина, предпочтительно, SCH48461 фирмы Shering-Plough, а также средства, описанные в публикациях "Атеросклероз" 115, 45-63 (1995) и J. Med. Chem. 41, 973 (1998).The lipid-lowering agent may also be a cholesterol absorption inhibitor, preferably SCH48461 from Shering-Plough, as well as those described in Atherosclerosis 115, 45-63 (1995) and J. Med. Chem. 41, 973 (1998).

Гиполипидемическим средством также может быть ингибитор кишечного Na⁺/желчная кислота совместного переносчика, такой как описан в публикации "Лекарственные средства будущего", 24, 425-430 (1999).The lipid-lowering agent can also be an inhibitor of the intestinal Na ⁺ /bile acid co-transporter such as described in Drugs of the Future, 24, 425-430 (1999).

Предпочтительными гиполипидемическими средствами являются правастатин, ловастатин, симвастатин, аторвастатин, флувастатин, церивастатин, атавастатин и розувастатин.Preferred lipid-lowering agents are pravastatin, lovastatin, simvastatin, atorvastatin, fluvastatin, cerivastatin, atavastatin and rosuvastatin.

Упомянутые выше патенты США приведены здесь в качестве ссылок. Дозировка применяемых лекарственных средств соответствует дозировке, приведенной в настольном справочнике врача или в вышеуказанных патентах.The US patents cited above are incorporated herein by reference. The dosage of the drugs used corresponds to the dosage given in the doctor's desk reference or in the above patents.

Соединения формулы I, заявленные в соответствии с настоящим изобретением, будут применяться в весовом соотношении к гиполипидемическим средствам (в случае их использования), равном 500:1-1:100.Compounds of formula I, declared in accordance with the present invention, will be used in a weight ratio to lipid-lowering agents (if used), equal to 500:1-1:100.

Используемая дозировка должна тщательным образом подбираться в соответствии с возрастом, весом и соматическим состоянием пациента, так же как и путь введения, лекарственная форма и режим введения и желаемый результат.The dosage used must be carefully selected in accordance with the age, weight and physical condition of the patient, as well as the route of administration, dosage form and mode of administration and the desired result.

Дозировки и рецептуры гиполипидемических средств соответствуют изложенным в различных патентах и заявках, приведенных выше.The dosages and formulations of the lipid-lowering agents are as set forth in the various patents and applications cited above.

Дозировки и рецептуры других гиполипидемических средств, в случае их использования, соответствуют изложенным в последнем издании настольного справочника врача.Dosages and formulations of other lipid-lowering agents, if used, are in accordance with the latest edition of the Physician's Desk Reference.

При пероральном введении удовлетворительный результат может быть получен при использовании ингибитора МТР в количестве, находящемся в пределах от 0.01 мг/кг до 500 мг, предпочтительно, от 0.1 мг до 100 мг, вводимом от одного до четырех раз в день.When administered orally, a satisfactory result can be obtained by using an MTP inhibitor in an amount ranging from 0.01 mg/kg to 500 mg, preferably from 0.1 mg to 100 mg, administered one to four times a day.

Предпочтительные лекарственные формы для перорального введения, такие, как таблетки или капсулы, содержат МТР ингибитор в количестве, которое варьирует от 1 до приблизительно 500 мг, предпочтительно от 2 до приблизительно 400 мг, более предпочтительно от 5 до приблизительно 250 мг, от одного до четырех раз в день.Preferred oral dosage forms, such as tablets or capsules, contain an MTP inhibitor in an amount that ranges from 1 to about 500 mg, preferably from 2 to about 400 mg, more preferably from 5 to about 250 mg, from one to four once a day.

При пероральном введении удовлетворительный результат может быть получен при использовании ингибиторов ГМГ-Коа редуктазы, например, правастатина, ловастатина, симвастатина, аторвастатина, флувастатина или церивастатина в дозировках, указанных в настольном справочнике врача, например в количестве, находящемся в пределах от 1 до 2000 мг, предпочтительно от 4 до 2 00 мг.When administered orally, a satisfactory result can be obtained with the use of HMG-CoA reductase inhibitors, for example, pravastatin, lovastatin, simvastatin, atorvastatin, fluvastatin or cerivastatin at dosages indicated in the physician's desk reference, for example, in an amount ranging from 1 to 2000 mg , preferably from 4 to 200 mg.

Ингибитор сквален-синтетазы может вводиться в количестве, находящемся в пределах от 10 мг до 2000 мг и, предпочтительно, от 25 мг до 200 мг.The squalene synthetase inhibitor may be administered in an amount ranging from 10 mg to 2000 mg and preferably from 25 mg to 200 mg.

Предпочтительные лекарственные формы для перорального применения, такие как таблетки или капсулы, содержат ингибитор ГМГ-КоА редуктазы в количестве, которое варьирует от 0.1 до 100 мг, предпочтительно от 5 до 80 мг, и, более предпочтительно, от 10 мг до 4 0 мг.Preferred oral dosage forms such as tablets or capsules contain the HMG-CoA reductase inhibitor in an amount that varies from 0.1 to 100 mg, preferably from 5 to 80 mg, and more preferably from 10 mg to 40 mg.

Предпочтительная лекарственная форма для перорального применения, такая как таблетки или капсулы, содержат ингибитор сквален-синтетазы в количестве, которое варьирует от 10 до 500 мг, предпочтительно, от 25 до 200 мг.A preferred oral dosage form, such as tablets or capsules, contains the squalene synthetase inhibitor in an amount that ranges from 10 to 500 mg, preferably 25 to 200 mg.

Другим гиполипидемическим средством может также быть ингибитор липооксигеназы, включая ингибитор 15-липооксигеназы (15-LO), относящийся к классу бензимидазол производных, такой, как описан в WO 97/12615; LO-15 ингибиторы, описанные в WO 97/12613; изотиазолоны, описанные в WO 96/38144; и 15-LO ингибиторы, описанные Sendobry et al в публикациях "Ослабление диет-индуцированного атеросклероза у кроликов с помощью высокоселективного ингибитора 15-липоксигензы, имеющего значительную антиоксидантную активность", Brit. J. Pharmacology (1997) 120, 1199-1206, и Cornicelli et al, "15-липоксигеназа и ее ингибирование: новая терапевтическая возможность в лечении сосудистых заболеваний", Current Pharmaceutical Design, 1999, 5, 11-20.Another lipid-lowering agent may also be a lipoxygenase inhibitor, including a 15-lipoxygenase (15-LO) inhibitor belonging to the class of benzimidazole derivatives such as described in WO 97/12615; LO-15 inhibitors as described in WO 97/12613; the isothiazolones described in WO 96/38144; and 15-LO inhibitors as described by Sendobry et al in "Attenuation of diet-induced atherosclerosis in rabbits with a highly selective 15-lipoxygenase inhibitor having significant antioxidant activity", Brit. J. Pharmacology (1997) 120, 1199-1206, and Cornicelli et al, "15-lipoxygenase and its inhibition: a new therapeutic possibility in the treatment of vascular disease", Current Pharmaceutical Design, 1999, 5, 11-20.

Соединения формулы I и гиполипидемические средства могут применяться вместе как в одной лекарственной форме для перорального применения, так и в виде отдельных лекарственных форм, принимаемых одновременно.The compounds of formula I and the lipid-lowering agents may be used together in the same oral dosage form or as separate dosage forms taken simultaneously.

Композиции, описанные выше, могут вводиться в лекарственных формах, описанных выше, в единичных или разделенных дозах от одного до четырех раз в день. Предпочтительно начинать лечение с комбинации низких дозировок в с постепенным повышением дозировки до высокой.The compositions described above may be administered in the dosage forms described above in single or divided doses from one to four times a day. It is preferable to start treatment with a combination of low dosages with a gradual increase in dosage to a high one.

Предпочтительными гиполипидемическими средствами являются правастатин, симвастатин, ловастатин, аторвастатин, флувастатин, церивастатин, атавастатин и розувастатин.Preferred lipid-lowering agents are pravastatin, simvastatin, lovastatin, atorvastatin, fluvastatin, cerivastatin, atavastatin and rosuvastatin.

Кроме того, другими лекарственными средствами, которые могут применяться совместно с соединениями формулы I, являются 1,2,3 или более лекарственных средств для лечения ожирения, в том числе агонисты бета-3-адренергических рецепторов, ингибиторы липазы, ингибиторы обратного захвата серотонина (и допамина), препараты для воздействия на бета-рецепторов щитовидной железы, аноректические средства, NPY антагонисты, аналоги лептина и/или агонисты МС4.In addition, other drugs that can be used in conjunction with the compounds of formula I are 1,2,3 or more drugs for the treatment of obesity, including beta-3-adrenergic receptor agonists, lipase inhibitors, serotonin reuptake inhibitors (and dopamine), thyroid beta receptor drugs, anorectics, NPY antagonists, leptin analogs and/or MC4 agonists.

Агонистом бета-3-адренергических рецепторов, который может применяться совместно с соединением формулы I, может быть AJ9677 (Takeda/Dainippon), L750355 (Merck) или СР331648 (Pfizer) или любые другие известные агонисты бета-3-адренергических рецепторов, например, описанные в патентах США №5,541,204, 5,770,615, 5,491,134, 5,776,983 и 5,488,064; предпочтительными являются AJ9677, L750,335 и СР331648.The beta-3 adrenergic receptor agonist which may be used in conjunction with a compound of formula I may be AJ9677 (Takeda/Dainippon), L750355 (Merck) or CP331648 (Pfizer) or any other known beta-3 adrenergic receptor agonist, such as those described US Pat. Nos. 5,541,204, 5,770,615, 5,491,134, 5,776,983 and 5,488,064 AJ9677, L750.335 and CP331648 are preferred.

Ингибиторами липазы, которые могут применяться совместно с соединениями формулы I, являются орлистат и ATL-962 (Alizyme); орлистат является предпочтительным.Lipase inhibitors that can be used in conjunction with the compounds of formula I are orlistat and ATL-962 (Alizyme); orlistat is preferred.

Ингибиторами обратного захвата серотонина (и допамина), которые могут применяться совместно с соединениями формулы I, являются сибутрамин, топирамат (Johnson & Johnson) или аксокин (Regeneron); сибутрамин и топирамат являются предпочтительными.Serotonin (and dopamine) reuptake inhibitors which may be used in conjunction with compounds of formula I are sibutramine, topiramate (Johnson & Johnson) or axokine (Regeneron); sibutramine and topiramate are preferred.

Препаратом для воздействия на бета-рецепторы щитовидной железы, который может применяться совместно с соединениями формулы I, может быть лиганд рецептора щитовидной железы, такой, как описан в WO 97/21993 (U. Cal SF), WO 99/00353 (KaroBio) и GB 98/284425 (KaroBio); соединения, раскрытые в заявках KaroBio, являются предпочтительными.The thyroid beta receptor agent which may be used in conjunction with compounds of formula I may be a thyroid receptor ligand such as described in WO 97/21993 (U. Cal SF), WO 99/00353 (KaroBio) and GB 98/284425 (KaroBio); the compounds disclosed in KaroBio applications are preferred.

Аноректическими средствами, которые могут применяться совместно с соединениями формулы I, являются дексамфетамин, фентермин, фенилпропаноламин или мазиндол; дексамфетамин является предпочтительным.Anorectic agents that can be used in conjunction with the compounds of formula I are dexamphetamine, phentermine, phenylpropanolamine or mazindol; dexamphetamine is preferred.

Соединения формулы I и средства для лечения ожирения могут применяться вместе как в одной лекарственной форме, так и в виде отдельных лекарственных форм, принимаемых одновременно, дозировка и режим введения общеизвестен специалистам, а также указан в настольном справочнике врача.Compounds of formula I and agents for the treatment of obesity can be used together both in the same dosage form and in the form of separate dosage forms taken simultaneously, the dosage and mode of administration is well known to specialists, and is also indicated in the doctor's desk reference.

Примерами антитромбоцитарных лекарственных средств, которые могут применяться совместно с соединениями, заявленными в соответствии с настоящим изобретением, являются абциксимаб, тиклопидин, эптифибатид, дипиридамол, аспирин, анагрелид, тирофибан и/или клопидогрел.Examples of antiplatelet drugs that can be used in conjunction with the compounds of the present invention are abciximab, ticlopidine, eptifibatide, dipyridamole, aspirin, anagrelide, tirofiban and/or clopidogrel.

К антигипертензивным лекарственным средствам, которые могут применяться совместно с соединениями, заявленными в соответствии с настоящим изобретением, относятся ингибиторы АПФ, антагонисты кальция, альфа-блокаторы, диуретики, лекарственные средства центрального действия, антагонисты ангиотензина-II, бета-блокаторы и ингибиторы вазопептидазы.Antihypertensive drugs that can be used in conjunction with the compounds of the present invention include ACE inhibitors, calcium antagonists, alpha-blockers, diuretics, centrally acting drugs, angiotensin-II antagonists, beta-blockers, and vasopeptidase inhibitors.

Примерами ингибиторов АПФ являются лизиноприл, эналаприл, хинаприл, беназеприл, фозиноприл, рамиприл, каптоприл, эналаприлат, моексиприл, тандолаприл и периндоприл; примерами антагонистов кальция являются амлодипин, дилтиазем, нифедипин, верапамил, фелодипин, низолдипин, израдипин и никардипин; примерами альфа-блокаторов являются теразозин, доксазозин и празозин; примерами диуретиков являются гидрохлортиазид, торасемид, фуросемид, спиронолактон и индапамид; примерами лекарственных средств центрального действия являются клонидин и гуанфацин; примерами ингибиторов ангиотензина-II являются лозартан, валсартан, ирбесартан, кандесартан и телмисартан; примерами бета-блокаторов являются метопролол, пропанолол, атенолол, карведилол и соталол; и примерами ингибиторов вазопептидазы являются омапатрилат и гемопатрилат.Examples of ACE inhibitors are lisinopril, enalapril, quinapril, benazepril, fosinopril, ramipril, captopril, enalaprilat, moexipril, tandolapril and perindopril; examples of calcium antagonists are amlodipine, diltiazem, nifedipine, verapamil, felodipine, nisoldipine, isradipine and nicardipine; examples of alpha blockers are terazosin, doxazosin and prazosin; examples of diuretics are hydrochlorothiazide, torasemide, furosemide, spironolactone and indapamide; examples of centrally acting drugs are clonidine and guanfacine; examples of angiotensin-II inhibitors are losartan, valsartan, irbesartan, candesartan and telmisartan; examples of beta-blockers are metoprolol, propanolol, atenolol, carvedilol and sotalol; and examples of vasopeptidase inhibitors are omapatrilat and hemopatrilat.

Способ, заявленный в соответствии с настоящим изобретением, подразумевает применение фармацевтической композиции, включающей соединение формулы I как совместно с другим антидиабетическим, гиполипидемическим или другим лекарственным средством, так и без него, а также фармацевтически приемлемый переносчик или разбавитель. Фармацевтическая композиция может быть получена при использовании обычных твердых или жидких переносчиков или разбавителей и фармацевтических добавок, соответствующих желаемому способу введения. Соединения могут вводиться млекопитающим, включая человека, обезьян, собак и т.д., как перорально, например, в форме таблеток, капсул, гранул или порошков, так и парентерально, в форме инъекционных препаратов, а также интраназально или с помощью трансдермальных пластырей. Доза для взрослой особи находится, предпочтительно, в пределах от 10 до 2000 мг в день, и может вводиться как однократно, так и быть разделена на несколько приемов от 1 до 4 раз в день.The method of the present invention involves the use of a pharmaceutical composition comprising a compound of formula I, either with or without another antidiabetic, lipid-lowering or other drug, and a pharmaceutically acceptable carrier or diluent. The pharmaceutical composition can be prepared using conventional solid or liquid carriers or diluents and pharmaceutical additives appropriate to the desired route of administration. The compounds can be administered to mammals, including humans, monkeys, dogs, etc., both orally, for example in the form of tablets, capsules, granules or powders, and parenterally, in the form of injections, as well as intranasally or via transdermal patches. The dose for an adult is preferably in the range of 10 to 2000 mg per day, and may be administered as a single dose or divided into several doses from 1 to 4 times a day.

Типичную лекарственную форму для инъекционного введения приготавливают путем помещения соединения формулы I в асептических условиях в ампулу, которую потом асептически высушивают сублимацией и герметизируют. Перед введением содержимое ампулы растворяют в 2 мл физиологического раствора для получения инъекционного препарата.A typical injectable dosage form is prepared by placing a compound of formula I under aseptic conditions in an ampoule which is then aseptically freeze-dried and sealed. Before administration, the contents of the ampoule are dissolved in 2 ml of saline to obtain an injectable preparation.

Ингибирующая активность соединения формулы I может быть определена с помощью исследований, приведенных ниже.The inhibitory activity of a compound of formula I can be determined using the assays below.

Исследование SGLT2 активностиStudy of SGLT2 activity

Последовательность мРНК человеческого SGLT2 (GenBank #М95549) была клонирована с помощью обратной транскрипции и амплификации мРНК, взятой из почки человека, с использованием стандартных технологий молекулярной биологии. Последовательность кДНК была устойчиво трансфицирована в СНО клетки и клоны исследовали на SGLT2 активность, как описано у Ryan et al. (1994). Оценка активности ингибирования SGLT2 в клеточных линиях, отобранных с помощью клональной селекции, проводилась, как описано у Ryan et al., со следующими модификациями. Клетки выращивали в 96-луночных планшетах в течение 2-4 дней до количества 75,000 или 30,000 клеток на лунку в F-12 питательной смеси (Ham's F-12)с добавлением 10% эмбриональной бычей сыворотки, 300 мкг/мл генетицина и пенициллин-стрептомицина. В состоянии монослоя клетки отмыли дважды 10 мМоль раствором Hepes/Tris, рН 7.4, 137 мМоль N-метил-D-глюкамина, 5.4 мМоль KCl, 2.8 мМоль CaCl г, 1.2 мМоль MgSO₄. Затем клетки инкубировали с 10 мкМоль [¹⁴C]AMG и 10 мкМоль ингибитора (конечный DMSO=0.5%) в 10 мМоль раствора Herpes/Tris, рН 7.4, 137 мМоль NaCl, 5.4 мМоль KCl, 2.8 мМоль CaCl г, 1.2 мМоль MgSO₄ при температуре 37°С в течение 1.5 ч. Исследования по захвату метки были проведены в ледяном IX PBS, содержащем 0.5 ммоль флоризина, и клетки лизировали в 0.1% NaOH. После добавления сцинцилляционной жидкости MicroScint, клетки оставили перемешиваться на 1 час, и затем [¹⁴C]AMG подсчитали на счетчике TopCount. Контроль осуществлялся как в присутствии NaCl, так и при его отсутствии. Для определения показателя ЕС₅₀, использовались 10-кратные концентрации ингибитора с интервалами 2 log в подходящей зоне ответа в трехкратном повторении на планшетах. Ryan MJ, Johnson G, Kirk J, Fuerstenberg SM, Zager RA и Torok-Storb B. 1994. HK-2: бессмертная клеточная линия эпителия проксимальных почечных канальцев здоровой почки взрослого человека. Kidney International 45: 48-57.The human SGLT2 mRNA sequence (GenBank #M95549) was cloned by reverse transcription and amplification of human kidney mRNA using standard molecular biology techniques. The cDNA sequence was stably transfected into CHO cells and the clones were assayed for SGLT2 activity as described in Ryan et al. (1994). Evaluation of SGLT2 inhibition activity in cell lines selected by clonal selection was performed as described by Ryan et al., with the following modifications. Cells were grown in 96-well plates for 2-4 days to 75,000 or 30,000 cells per well in F-12 nutrient mixture (Ham's F-12) supplemented with 10% fetal bovine serum, 300 μg/ml geneticin and penicillin-streptomycin . In the monolayer state, the cells were washed twice with 10 mM Hepes/Tris solution, pH 7.4, 137 mM N-methyl-D-glucamine, 5.4 mM KCl, 2.8 mM CaCl g, 1.2 mM MgSO ₄ . Cells were then incubated with 10 µM [ ¹⁴ C]AMG and 10 µM inhibitor (final DMSO=0.5%) in 10 mM Herpes/Tris solution, pH 7.4, 137 mM NaCl, 5.4 mM KCl, 2.8 mM CaCl g, 1.2 mM MgSO ₄ at 37°C for 1.5 h. Label uptake studies were performed in ice-cold IX PBS containing 0.5 mmol phlorizin, and cells were lysed in 0.1% NaOH. After addition of MicroScint scintillation fluid, the cells were allowed to mix for 1 hour and then [ ¹⁴ C]AMG was counted on a TopCount counter. The control was carried out both in the presence of NaCl and in its absence. To determine the EC ₅₀ index, 10-fold inhibitor concentrations were used at 2 log intervals in the appropriate response zone in triplicate on the plates. Ryan MJ, Johnson G, Kirk J, Fuerstenberg SM, Zager RA, and Torok-Storb B. 1994. HK-2: An immortal proximal tubular epithelial cell line of healthy adult kidney. Kidney International 45: 48-57.

Следующие Примеры иллюстрируют настоящее изобретение. Температура, если дополнительно не оговаривается иное, выражена в значениях стоградусной шкалы.The following Examples illustrate the present invention. Temperatures, unless otherwise specified, are expressed in centigrade units.

ПримерExample

А. 5-бром-2-хлор-4'-этоксибензофенонA. 5-bromo-2-chloro-4'-ethoxybenzophenone

К перемешанной суспензии коммерческой 5-бром-2-хлорбензойной кислоты (250 г, 1.06 моль) в 450 мл CH₂Cl₂, содержащей оксалил хлорид (1.1 моль) добавили 1.5 мл DMF. После прекращения интенсивного выделение газа, реакционную смесь перемешивали в течение ночи, после чего удалили летучие соединения в вакууме с помощью вращающегося испарителя. После растворения неочищенного 5-бром-2-хлорбензоилхлорида в 200 мл CH₂Cl₂, желтый раствор поместили в двухлитровую колбу с тремя горлышками, оснащенную наружным миксером и внутренним термометром. Данную перемешанную смесь охладили до - 3° после чего добавили фенетол (130 г, 1.08 моль).To a stirred suspension of commercial 5-bromo-2-chlorobenzoic acid (250 g, 1.06 mol) in 450 ml of CH ₂ Cl ₂ containing oxalyl chloride (1.1 mol) was added 1.5 ml of DMF. After the intensive evolution of gas ceased, the reaction mixture was stirred overnight, after which the volatile compounds were removed in vacuo using a rotary evaporator. After dissolving the crude 5-bromo-2-chlorobenzoyl chloride in 200 ml CH ₂ Cl ₂ , the yellow solution was placed in a 2 liter three-necked flask equipped with an external mixer and an internal thermometer. This stirred mixture was cooled to -3° after which phenetol (130 g, 1.08 mol) was added.

Далее с помощью твердой воронки в течение 30 минут добавляли AlCl₃ (140 г, 1.07 моль) для того, чтобы не произошло повышения температуры выше 4°. Значительное количество газообразной HCl, которая начала выделяться после добавления 60% AlCl₃, улавливали путем пропускания газа через перемешанный концентрированный раствор NaOH. Жидкостная хроматография высокого разрешения (HPLC) выявила завершение реакции на 95% в течение 10 мин. после окончания добавления AlCl₃. Далее смесь перемешивали при температуре 4° в течение 1 ч, после чего реакционную смесь охладили с помощью льда. Впоследствии суспензию развели Н₂О (1 л) и экстрагировали трехкратно с помощью CH₂Cl₂. Комбинированные органические экстракты отмыли два раза 1Н. HCl, один раз Н₂О, два раза 1М NaOH и два раза солевым раствором, после чего высушили над Na₂SO₄. После удаления летучих веществ, при использовании HPLC получили осадок, представляющий собой смесь орто/пара изомеров в соотношении 1:7.Next, AlCl ₃ (140 g, 1.07 mol) was added with a solid funnel over 30 minutes to prevent the temperature from rising above 4°. A significant amount of gaseous HCl, which began to evolve after the addition of 60% AlCl ₃ , was captured by passing the gas through a stirred concentrated NaOH solution. High Performance Liquid Chromatography (HPLC) indicated 95% completion of the reaction within 10 minutes. after the completion of the addition of AlCl ₃ . Next, the mixture was stirred at 4°C for 1 h, after which the reaction mixture was cooled with ice. Subsequently, the suspension was diluted with H ₂ O (1 l) and was extracted three times with CH ₂ Cl ₂ . The combined organic extracts were washed twice with 1H. HCl, once H ₂ O, twice 1M NaOH and twice brine, then dried over Na ₂ SO ₄ . After removal of volatiles, using HPLC, a precipitate was obtained, which is a mixture of ortho/para isomers in a ratio of 1:7.

Двухкратная рекристаллизация с помощью 400 мл абсолютного этилового спирта привела к получению 230 г (64%) 5-бром-2-хлор-4'-этоксибензофенона.Recrystallization twice with 400 ml absolute ethanol gave 230 g (64%) of 5-bromo-2-chloro-4'-ethoxybenzophenone.

В. 5-бром-2-хлор-4'-этоксидифенилметанB. 5-bromo-2-chloro-4'-ethoxydiphenylmethane

К перемешанному раствору Et₃SiH (400 мл, 2.51 моль) и 5-бром-2-хлор-4'-этоксибензофенона (390 г, 1.15 моль) в 900 мл смеси 1,2-дихлорэтан/MeCN в соотношении 1:2 при температуре 10° добавили BF₃⋅Et₂O (150 мл, 1.58 моль) при условии, что температура не превышала 20°С. В процессе добавления происходило умеренное выделение тепла.To a stirred solution of Et ₃ SiH (400 ml, 2.51 mol) and 5-bromo-2-chloro-4'-ethoxybenzophenone (390 g, 1.15 mol) in 900 ml of a mixture of 1,2-dichloroethane/MeCN in a ratio of 1:2 at temperature of 10° was added BF ₃ ⋅Et ₂ O (150 ml, 1.58 mol) provided that the temperature did not exceed 20°C. Moderate heat evolution occurred during the addition.

Смесь перемешивали в течение ночи при температуре 20°С, после чего HPLC выявила завершение реакции на 90%. После добавления 40 мл Et₃SiH и 15 мл BF₃⋅Et₂O реакционную смесь нагревали до 50°С в течение 3 ч. (замечено, высокие температуры усиливают образование продукта реакции Риттера - N-ацетил 5-бром-2-хлор-4'-этоксидифенилметиламина). Для охлаждения в реакционную смесь добавили 120 г KOH в 300 мл Н₂О. После перемешивания в течение 2 ч, слои разделили. Водный слой экстрагировали дважды с помощью CH₂Cl₂; комбинированные органические слои отмыли однократно с помощью 300 мл 2М KOH, дважды с помощью Н₂О, содержащей 10% солевого раствора, для усиления сепарации слоев, и дважды с помощью солевого раствора непосредственно перед высушиванием над Na₂SO₄. После удаления летучих веществ, осадок рекристаллизировали из абсолютного этилового спирта для получения 230 г 5-бром-2-хлор-4'-этоксидифенилметана в виде белого твердого вещества.The mixture was stirred over night at a temperature of 20°C, after which HPLC revealed the completion of the reaction by 90%. After adding 40 ml of Et ₃ SiH and 15 ml of BF ₃ ⋅Et ₂ O, the reaction mixture was heated to 50°C for 3 hours (it was noted that high temperatures enhance the formation of the Ritter reaction product - N-acetyl 5-bromo-2-chloro- 4'-ethoxydiphenylmethylamine). To cool the reaction mixture, 120 g KOH in 300 ml H ₂ O was added. After stirring for 2 hours, the layers were separated. The aqueous layer was extracted twice with CH ₂ Cl ₂ ; the combined organic layers were washed once with 300 ml of 2M KOH, twice with H ₂ O containing 10% brine to enhance separation of the layers, and twice with brine just before drying over Na ₂ SO ₄ . After removal of the volatiles, the residue was recrystallized from absolute ethanol to give 230 g of 5-bromo-2-chloro-4'-ethoxydiphenylmethane as a white solid.

С. 2,3,4,6-тетра-О-Триметилсилил-β-D-глюколактонC. 2,3,4,6-tetra-O-Trimethylsilyl-β-D-glucolactone

К перемешанному при температуре -5°С раствору глюконолактона (239 г, 1.34 моль) и N-метилморфолина (1180 мл, 10.73 моль) в 2.4 л THF под Ar через капельную воронку добавили хлорид триметилсилила (1022 мл, 8.05 моль) таким образом, чтобы температура не превышала 5°С. Затем реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, после чего нагревали ее до 35°С в течение 5 часов и перемешивали в течение ночи, в результате чего произошло снижение температуры смеси до 20°С. Затем смесь развели 3.6 л толуола и охладили до 0-5°С перед аккуратным добавлением 7 л Н₂О таким образом, чтобы температура не превышала 10°С. Следует обратить внимание на интенсивное выделение тепла во время добавления первой порции Н₂О. После перемешивания фазы сепарировали и разделили. Органические фазы отмыли с помощью водн. NaH₂PO₄ (2 л), Н₂О (1 л) и солевого раствора (1 л). Органический слой затем концентрировали над вакуумом, используя вращающийся испаритель; образовавшееся светло-желтое масло дважды обработали 250 мл толуола и повторно сконцентрировали до получения 616 г указанного соединения.To a solution of gluconolactone (239 g, 1.34 mol) and N-methylmorpholine (1180 ml, 10.73 mol) stirred at -5°C in 2.4 L of THF under Ar was added trimethylsilyl chloride (1022 ml, 8.05 mol) through a dropping funnel in such a way that so that the temperature does not exceed 5°C. Then the reaction mixture was stirred for 1 h, after which it was heated to 35°C for 5 hours and stirred overnight, resulting in a decrease in the temperature of the mixture to 20°C. The mixture was then diluted with 3.6 L of toluene and cooled to 0-5°C before carefully adding 7 L of H ₂ O so that the temperature did not exceed 10°C. Attention should be paid to intense heat evolution during the addition of the first portion of H ₂ O. After mixing, the phases were separated and separated. The organic phases were washed with aq. NaH ₂ PO ₄ (2 L), H ₂ O (1 L) and brine (1 L). The organic layer was then concentrated under vacuum using a rotary evaporator; the resulting light yellow oil was treated twice with 250 ml of toluene and re-concentrated to give 616 g of the title compound.

К перемешанному при температуре -78°С раствору части В 5-бром-2-хлор-4'-этоксидифенилметана (150 г, 0.4 6 моль) в 1.15 л смеси сухой THF/толулол в соотношении 1:2 под Ar добавили 184 мл 2.5 М n-BuLi в гексане по каплям, таким образом, чтобы температура не поднималась выше -70°С. После перемешивания в течение 30 мин., раствор с помощью канюли поместили в перемешанный при -78°С раствор части С 2,3,4,6-тетра-О-триметилсилил-β-D-глюколактона (236 г, 0.51 моль) в 1.1 л толуола, таким образом, чтобы температура оставалась ниже -70°С. После перемешивания раствора в течение 30 мин. при температуре -78°С его охладили путем добавления 1 л МеОН, содержащего метансульфоновую кислоту (41.8 мл, 0.64 моль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи и температура смеси поднялась до 20°С. HPLC выявила два новых пика, соответствующих массе ожидаемого О-метилглюкозида; соотношение варьировало в пределах от 95:5 до 80:20. Желаемый продукт соответствует главному пику с более коротким временем удержания. Следует обратить внимание на то, что более длительное протекание реакции или добавление более 50% метансульфоновой кислоты способствует превращению всего изомерного продукта в желаемый О-метилглюкозид. После завершения реакции смесь охладили с помощью добавления NaHCO₃ (37 г, 0.37 моль) в 200 мл Н₂О. Если рН не является слабоосновным, добавляют еще NaHCO₃ перед двукратным разведением слоев H₂O и трехкратном экстрагированием с помощью EtOAc. Комбинированные EtOAc фракции отмыли солевым раствором и высушили над Na₂SO₄. После концентрирования с помощью вращающегося испарителя, осадок растворили в горячем толуоле (150 мл). Полученный раствор влили в литр перемешанного гексана. Преципитат собрали с помощью вакуумной фильтрации; полученный осадок на фильтре отмыли два раза с помощью 500 мл гексана и затем высушили на воздухе для получения 171 г желаемого соединения в виде белого твердого вещества.184 ml of 2.5 M n-BuLi in hexane drop by drop, so that the temperature does not rise above -70°C. After stirring for 30 minutes, the solution was cannulated into a stirred at -78°C solution of part C of 2,3,4,6-tetra-O-trimethylsilyl-β-D-glucolactone (236 g, 0.51 mol) in 1.1 l of toluene, so that the temperature remains below -70°C. After stirring the solution for 30 min. at a temperature of -78°C it was cooled by adding 1 l of MeOH containing methanesulfonic acid (41.8 ml, 0.64 mol). The reaction mixture was stirred overnight and the temperature of the mixture rose to 20°C. HPLC revealed two new peaks corresponding to the weight of the expected O-methyl glucoside; the ratio varied from 95:5 to 80:20. The desired product corresponds to the main peak with a shorter retention time. It should be noted that a longer reaction time or the addition of more than 50% methanesulfonic acid tends to convert all of the isomeric product to the desired O-methyl glucoside. After completion of the reaction, the mixture was cooled by adding NaHCO ₃ (37 g, 0.37 mol) in 200 ml H ₂ O. If the pH is not weakly basic, add more NaHCO ₃ before doubling the H ₂ O layers and extracting three times with EtOAc. The combined EtOAc fractions were washed with brine and dried over Na ₂ SO ₄ . After concentration using a rotary evaporator, the residue was dissolved in hot toluene (150 ml). The resulting solution was poured into a liter of stirred hexane. The precipitate was collected by vacuum filtration; the resulting filter cake was washed twice with 500 ml of hexane and then air-dried to give 171 g of the desired compound as a white solid.

К перемешанному при -10°С раствору части D O-метилглюкозида (123 г, 0.28 моль) в 1.2 л смеси CH₂Cl₂/MeCN в соотношении 1:1 добавили сначала Et3SiH (65.27 г, 0.56 моль), а затем BF₃⋅Et₂O (59.75 г, 0.42 моль) таким образом, чтобы температура оставалась в пределах от -5° до -10°С. Температура перемешанного раствора поднималась до 0°С в течение 5 ч. Когда жидкостная хроматография высокого разрешения (HPLC) выявила завершение реакции, реакционную смесь охладили путем добавления насыщенного водного NaHCO₃ (310 мл). Органические летучие вещества удалили над вакуумом с помощью вращающегося испарителя. Осадок разделили между EtOAc и Н₂О, используя по 2 л каждого вещества. После разделения фаз, водный слой экстрагировали двукратно с помощью 2 л EtOAc. Комбинированные органические фазы отмыли Н₂О (2 л) и солевым раствором (2 л), затем высушили над MgSO₄ и сконцентрировали с помощью вращающегося испарителя до получения 104.6 г желтой застывшей пены. После растворения полученного осадка в CH₂Cl₂ (750 мл) добавили пиридин (200 г, 2.53 моль) и Ас₂О (261.1 г, 2.56 моль) в одной порции. После того, как завершилось выделение тепла, повысившее температуру смеси с 28°С до 47°С, добавили DMAP (1.56 г, 13 мМоль). Через 1.5 ч реакционную смесь охладили путем добавления Н₂О (1.8 л), HPLC выявила завершение реакции. Смесь экстрагировали двукратно с помощью CH₂Cl₂ (общий объем 2.7 л); комбинированные органические слои отмыли дважды 1н. HCl (1.8 л), дважды солевым раствором (1.8 л), после чего высушили над MgSO₄. После концентрирования с помощью вращающегося испарителя, осадок рекристаллизировали из абсолютного этилового спирта (750 мл) для получения 8 9.5 г желаемого тетраацетилированного β-С-глюкозида в виде белого твердого вещества. Исходная жидкость содержала соответствующий α-С-глюкозид и более полярный изомер фуранозы.Et3SiH ( _65.27 g, _0.56 mol), and then BF ₃ ⋅Et ₂ O (59.75 g, 0.42 mol) so that the temperature remains between -5° and -10°C. The temperature of the stirred solution was raised to 0° C. over 5 hours. When high performance liquid chromatography (HPLC) showed completion of the reaction, the reaction mixture was cooled by adding saturated aqueous NaHCO ₃ (310 ml). Organic volatiles were removed over vacuum using a rotary evaporator. The precipitate was partitioned between EtOAc and H ₂ O using 2 L of each. After phase separation, the aqueous layer was extracted twice with 2 L of EtOAc. The combined organic phases were washed with H ₂ O (2 L) and brine (2 L), then dried over MgSO ₄ and concentrated using a rotary evaporator to obtain 104.6 g of a yellow solidified foam. After dissolving the resulting precipitate in CH ₂ Cl ₂ (750 ml), pyridine (200 g, 2.53 mol) and Ac ₂ O (261.1 g, 2.56 mol) were added in one portion. After heat evolution was completed, which raised the temperature of the mixture from 28°C to 47°C, DMAP (1.56 g, 13 mmol) was added. After 1.5 h the reaction mixture was cooled by adding H ₂ About (1.8 l), HPLC showed the completion of the reaction. The mixture was extracted twice with CH ₂ Cl ₂ (total volume 2.7 l); the combined organic layers were washed twice with 1N. HCl (1.8 L), twice with brine (1.8 L), then dried over MgSO ₄ . After concentration with a rotary evaporator, the residue was recrystallized from absolute ethanol (750 ml) to give 8×9.5 g of the desired tetraacetylated β-C-glucoside as a white solid. The initial liquid contained the corresponding α-C-glucoside and the more polar furanose isomer.

Альтернативно, часть D О-метилглюкозида может быть сначала ацетилирована, а затем восстановлена для получения желаемого тетраацетилированного С-арилгликоида, в соответствии со следующей процедурой.Alternatively, the D portion of the O-methyl glucoside may be first acetylated and then reduced to give the desired tetraacetylated C-aryl glycoside, according to the following procedure.

Раствор части D О-метилглюкозида (3.0 г, 6.8 мМоль) в толуоле (45 мл), содержащий диизопропилэтиламин (6.9 мл, 40 мМоль)охладили до 0°С, после чего к нему добавили уксусный ангидрид (3.35 мл, 35.5 мМоль) и DMAP (84 мг, 0.6 8 мМоль). Температура раствора поднялась до 20°С в течение 6 ч, после чего тонкослойная хроматография выявила завершение образования тетраацетата. Реакционную смесь охладили путем добавления 50 мл 20% Н₃РО₄. После разделения слоев, водную фазу двукратно экстрагировали с помощью толуола. Комбинированные органические фазы отмыли один раз 50 мл Н₂О, после чего сконцентрировали над вакуумом. Полученное масло растворили в 20 мл толуола и сконцентрировали для получения густого масла (4.15 г), которое использовалось далее без дополнительного очищения.A solution of part D of O-methylglucoside (3.0 g, 6.8 mmol) in toluene (45 ml) containing diisopropylethylamine (6.9 ml, 40 mmol) was cooled to 0°C, after which acetic anhydride (3.35 ml, 35.5 mmol) was added and DMAP (84 mg, 0.6-8 mmol). The temperature of the solution rose to 20°C for 6 h, after which thin layer chromatography revealed the completion of the formation of tetraacetate. The reaction mixture was cooled by adding 50 ml of 20% H ₃ RO ₄ . After separation of the layers, the aqueous phase was extracted twice with toluene. The combined organic phases were washed once with 50 ml H ₂ O and then concentrated under vacuum. The resulting oil was dissolved in 20 ml of toluene and concentrated to obtain a thick oil (4.15 g), which was used further without further purification.

Раствор указанного выше неочищенного масла (4.15 г, 6.8 моль) в MeCN (60 мл), содержащий один эквивалент Н₂О (123 мг, 6.8 моль) охладили до 0°С, после чего добавили сначала Et₃SiH (3.27 мл, 20.5 мМоль) и затем BF₃⋅Et₂O (1.73 мл, 13.7 мМоль). После перемешивания в течении 1 ч. температура раствора поднялась до 20°С. Через 4 ч. осуществили однократный анализ с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения (HPLC), который выявил отсутствие прогрессивного течения реакции свыше 60%, после чего добавили 2 мл Et₃SiH и 1 мл BF₃⋅Et₂O. Два часа спустя, HPLC выявила отсутствие исходного материала. После добавления водн. NaHCO₃ для охлаждения реакционной смеси последнюю перемешивали в течение 30 мин., после чего трехкратно экстрагировали с помощью EtOAc. Комбинированные органические слои отмыли один раз водн. NaHCO₃ и солевым раствором, после чего высушили над Na₂SO₄. Полученное после концентрирования над вакуумом масло растворили в 70 мл горячей 25% смеси EtOAc/гексан. В процессе охлаждения кристаллизовалось 2.45 г желаемого тетраацетилированного β-С-арилглюкозида, который последовательно выделили с помощью фильтрации.A solution of the above crude oil (4.15 g, 6.8 mol) in MeCN (60 ml) containing one equivalent of H ₂ O (123 mg, 6.8 mol) was cooled to 0°C, after which Et ₃ SiH (3.27 ml, 20.5 mmol) and then BF ₃ ⋅Et ₂ O (1.73 ml, 13.7 mmol). After stirring for 1 hour, the temperature of the solution rose to 20°C. After 4 hours, a single analysis was performed using high performance liquid chromatography (HPLC), which showed no progressive reaction over 60%, after which 2 ml of Et ₃ SiH and 1 ml of BF ₃ ⋅Et ₂ O were added. Two hours later, HPLC revealed the absence of source material. After adding aq. NaHCO ₃ to cool the reaction mixture, the latter was stirred for 30 minutes, after which it was extracted three times with EtOAc. The combined organic layers were washed once with aq. NaHCO ₃ and brine, then dried over Na ₂ SO ₄ . The oil obtained after concentration under vacuum was dissolved in 70 ml of hot 25% EtOAc/hexane. During cooling, 2.45 g of the desired tetraacetylated β-C-arylglucoside crystallized and was successively isolated by filtration.

К перемешанному при температуре 20°С раствору тетраацетилированного β-С-глюкозида (27.2 г., 49 мМоль) полученного в соответствии с пунктом Е) в 480 мл смеси THF/MeOH/H₂O в соотношении 2:3:1 добавили LiOH⋅H₂O (2.3 г., 57 мМоль). После перемешивания в течение ночи летучие вещества удалили с помощью вращающегося испарителя. Осадок после растворения в EtOAc (300 мл) отмыли один раз солевым раствором (150 мл), один раз солевым раствором (50 мл), содержащим 10 мл 5% водн. KHSO₄, и снова солевым раствором (50 мл), после чего высушили над Na₂SO₄. Летучие вещества удалили с помощью вращающегося испарителя и полученное масло в минимальном количестве CH₂Cl₂ вспенили над вакуумом для получения 2 0.4 г. желаемого С-арилглюкозида в виде стекловидного вещества белого цвета, содержащего 0.11 моль % EtOAc.To a solution of tetraacetylated β-C-glucoside (27.2 g, 49 mmol) obtained in accordance with point E) in 480 ml of a mixture of THF/MeOH/H ₂ O in a ratio of 2:3:1 was added LiOH⋅ H ₂ O (2.3 g, 57 mmol). After stirring overnight, the volatiles were removed using a rotary evaporator. The precipitate after dissolution in EtOAc (300 ml) was washed once with brine (150 ml), once with brine (50 ml) containing 10 ml of 5% aq. KHSO ₄ , and again with saline (50 ml), then dried over Na ₂ SO ₄ . The volatiles were removed using a rotary evaporator and the resulting oil in a minimum amount of CH ₂ Cl ₂ was frothed under vacuum to obtain 20.4 g of the desired C-aryl glucoside as a white glassy substance containing 0.11 mol% EtOAc.

Время удержания HPLC: 7.08 мин., 94%-ная чистота, YMC S5 С-18 4.6×50 мм колонка, 2.5 мл/мин, определение при 220 нм; 8 мин - градиент 0-100% В поддерживается 5 мин при 100% В. Растворитель А: 10% МеОН/Н₂О + 0.2% H₃PO₄. Растворитель В: 90% МеОН/H₂O + 0.2% Н₃РО₄.HPLC retention time: 7.08 min, 94% purity, YMC S5 C-18 4.6×50 mm column, 2.5 ml/min, detection at 220 nm; 8 min - 0-100% B gradient maintained for 5 min at 100% B. Solvent A: 10% MeOH/H ₂ O + 0.2% H ₃ PO ₄ . Solvent B: 90% MeOH/H ₂ O + 0.2% H ₃ PO ₄ .

¹Н ЯМР (500 МГц, CD₃OD) δ 7.33 (d, 1Н, J=6 Гц), 7.31 (d, 1Н, J=2.2 Гц), 7.31 (dd, 1H, J=6 Гц, J=2.2 Гц), 7.07 (d, 2H, J=8.8 Гц), 6.78 (d, 2H, J=8.8 Гц), 4.07-3.90 (m, 7H), 3.85 (d, 1H, J=10.6 Гц), 3.69 (dd, 1H, J=5.3, 10.6 Гц), 3.42-3.25 (m, 4Н)Гц), 1.34 (t, 3H, J=7 Гц). ¹ H NMR (500 MHz, CD ₃ OD) δ 7.33 (d, 1H, J=6 Hz), 7.31 (d, 1H, J=2.2 Hz), 7.31 (dd, 1H, J=6 Hz, J=2.2 Hz), 7.07 (d, 2H, J=8.8 Hz), 6.78 (d, 2H, J=8.8 Hz), 4.07-3.90 (m, 7H), 3.85 (d, 1H, J=10.6 Hz), 3.69 ( dd, 1H, J=5.3, 10.6 Hz), 3.42-3.25 (m, 4Н) Hz), 1.34 (t, 3H, J=7 Hz).

¹³С ЯМР (125 МГц, CD₃OD) δ 158.8, 140.0, 139.9, 134.4, 132.9, 131.9, 130.8, 130.1, 128.2, 115.5, 82.9, 82.2, 79.7, 76.4, 71.9, 64.5, 63.1, 39.2, 15.2. ¹³ C NMR (125 MHz, CD ₃ OD) δ 158.8, 140.0, 139.9, 134.4, 132.9, 131.9, 130.8, 130.1, 128.2, 115.5, 82.9, 82.2, 79.7, 76.4, 71.9, 64.5, 63.1, 39.2, 15.2.

Anal Calcd для C₂₁H₂₅ClO₆ LC-MS [M+Na⁺] 431; найден 431.Anal Calcd for C ₂₁ H ₂₅ ClO ₆ LC-MS [M+Na ⁺ ] 431; found 431.

Ниже описано получение промежуточных соединений, а также их спектральные характеристики.The preparation of intermediates is described below, as well as their spectral characteristics.

Белое твердое вещество. ЖХВР: колонка Zorbax SB С18, 4,6×75 мм, 0-100% В в течение 8 мин, выдержка 4 мин, А=10% МеОН / 90% H₂O / 0,2% Н₃РО₄, В=10% H₂O / 90% МеОН / 0,2% H₃PO₄, комн. темп. = 7,60 мин, степень чистоты 100%.White solid. HPLC: column Zorbax SB C18, 4.6×75 mm, 0-100% B for 8 min, exposure 4 min, A=10% MeOH / 90% H ₂ O / 0.2% H ₃ PO ₄ , V \u003d 10% H ₂ O / 90% MeOH / 0.2% H ₃ PO ₄ , room. pace. = 7.60 min, 100% purity.

LC-MS: колонка Phenomex Luna 5u, 4,6×5 0 мм, 0-100% В в течение 4 мин, выдержка 1 мин, А=10% CH₃CN / 90% H₂O / 10 мМ NH₄Ac, В=10% H₂O / 90% CH₃CN / 10 мМ NH₄Ac, комн. темп. = 2,00 мин, рассчитано для C₂₂H₃₁ClNO₇ (М+NH4₎ ⁺ 456,2, найдено 456,3.LC-MS: Phenomex Luna 5u column, 4.6×50 mm, 0-100% B for 4 min, hold 1 min, A=10% CH ₃ CN / 90% H ₂ O / 10 mM NH ₄ Ac , B=10% H ₂ O / 90% CH ₃ CN / 10 mM NH ₄ Ac, room. pace. = 2.00 min, calculated for C ₂₂ H ₃₁ ClNO ₇ (M + NH4 ₎ ⁺ 456.2, found 456.3.

¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ 7,77 (s, 1Н), 7,22-7,27 (m, 2Н), 7,02 (d, J=8,8, 2Н), 6,74 (d, J=9,3, 2Н), 5,01 (s, 1Н), 4,84 (s, 1H), 3,75-4, 06 (m, 8H), 3, 47-3, 60 (m, 2H), 3,17 (t, J=8,3 Гц, 1H), 3,00 (m, 1H), 2,89 (s, 3H), 1,33 (t, J=6,6, 1H). ¹³C ЯМР (100 МГц, CD₃OD) δ 157.3, 138.6, 136.6, 134.4, 131.4, 130.0, 129.7, 129.3, 126.7, 114.4, 101.0, 74.7, 72.5, 70.1, 63.4, 62.0, 49.2, 38.5, 14.9. ¹ H NMR (400 MHz, CD ₃ OD) δ 7.77 (s, 1H), 7.22-7.27 (m, 2H), 7.02 (d, J=8.8, 2H), 6 .74 (d, J=9.3, 2H), 5.01 (s, 1H), 4.84 (s, 1H), 3.75-4.06 (m, 8H), 3.47-3 , 60 (m, 2H), 3.17 (t, J=8.3 Hz, 1H), 3.00 (m, 1H), 2.89 (s, 3H), 1.33 (t, J= 6.6, 1H). ¹³ C NMR (100 MHz, CD ₃ OD) δ 157.3, 138.6, 136.6, 134.4, 131.4, 130.0, 129.7, 129.3, 126.7, 114.4, 101.0, 74.7, 72.5, 70.1, 63.4, 62.0, 49.2, 38.5, 14.9.

Белое твердое вещество, t_пл = 120°С (не корректировалась). ЖХВР t_R=3,9 мин, степень чистоты 100%. Время удерживания для ЖХВР на колонке Phenomex Luna С-18, 4,6 мм × 50 мм, элюент с градиентом 4 мин 0-100% растворителя В; при этом растворитель А: 10: 90: 0,1 CH₂OH = H₂O - ТФК и растворитель В: 90:10:0,1 СН₃ОН = H₂O - ТФК.White solid, t _pl = 120°C (not corrected). HPLC t _R =3.9 min, 100% purity. HPLC retention time on a Phenomex Luna C-18 column, 4.6 mm x 50 mm, eluent with a 4 min gradient 0-100% solvent B; while solvent A: 10: 90: 0.1 CH ₂ OH = H ₂ O - TFA and solvent B: 90:10: 0.1 CH ₃ OH = H ₂ O - TFA.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7, 35 (d, J=8,4, 1Н), 7,19 (dd, J=1,8, 8,4, 1H), 7,07 (d, J=1,8, 1H), 7,05 (d, J=8,8, 2H), 6,82 (d, J=8,8, 2H), 5,28 (t, J=9,2, 1H), 5,20 (t, J=9,2, 1H), 5,05 (t, J=9,2, 1H), 4,31 (d, J=9,7, 1H), 4,26 (dd, J=4,8, 12,8, 1H), 4,14 (dd, J=2,2, 12,4, 1H), 3,95-4,07 (m, 4H), 3,80 (m, 1H), 2,08 (s, 3H), 2,04 (s, 3H), 1,99 (s, 3H), 1,71 (s, 3H), 1,40 (t, J=7,0, 3H). ¹³C ЯМР (100 МГц, CDCl₃) δ 170.7, 170.3, 169.45, 168.7, 157.5, 139.1, 135.1, 134.6, 131.0, 129.79, 126.0, 114.5, 79.5, 76.1, 74.1, 72.5, 68.5, 63.4, 62.3, 38.2, 20.7, 20.6, 20.3, 14.8. HRMS вычислено для C₂₉H₃₃ClNaO₁₀ (M+Na)⁺: 599, 1660; найдено: 599, 1649. Рассчитано для C₂₉H₃₃ClO₁₀: С, 60, 36; Н, 5,76. Найдено: С, 60,43; Н, 5,56. ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 7.35 (d, J=8.4, 1H), 7.19 (dd, J=1.8, 8.4, 1H), 7.07 (d , J=1.8, 1H), 7.05 (d, J=8.8, 2H), 6.82 (d, J=8.8, 2H), 5.28 (t, J=9, 2, 1H), 5.20 (t, J=9.2, 1H), 5.05 (t, J=9.2, 1H), 4.31 (d, J=9.7, 1H), 4.26 (dd, J=4.8, 12.8, 1H), 4.14 (dd, J=2.2, 12.4, 1H), 3.95-4.07 (m, 4H) , 3.80 (m, 1H), 2.08 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.71 (s, 3H), 1.40 ( t, J=7.0, 3H). ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ 170.7, 170.3, 169.45, 168.7, 157.5, 139.1, 135.1, 134.6, 131.0, 129.79, 126.0, 114.5, 79.5, 76.1, 74 .1, 72.5, 68.5, 63.4, 62.3, 38.2 , 20.7, 20.6, 20.3, 14.8. HRMS calculated for C ₂₉ H ₃₃ ClNaO ₁₀ (M+Na) ⁺ : 599, 1660; found: 599, 1649. Calculated for C ₂₉ H ₃₃ ClO ₁₀ : C, 60, 36; H, 5.76. Found: C, 60.43; H, 5.56.

Для основного аномера: ЖХВР t_R=3,45 мин, степень чистоты 100%. Время удерживания для ЖХВР на колонке Phenomex Luna С-18, 4,6 мм × 5 0 мм, элюент с градиентом 4 мин 0-100% растворителя В; при этом растворитель А: 10: 90: 0,1 СН₃ОН - H₂O - ТФК; растворитель В: 90: 10: 0,1 СН₃ОН - H₂O - ТФК.For the main anomer: HPLC t _R =3.45 min, 100% purity. HPLC retention time on a Phenomex Luna C-18 column, 4.6 mm x 50 mm, eluent with a 4 min gradient 0-100% solvent B; while solvent A: 10: 90: 0.1 CH ₃ OH - H ₂ O - TFA; solvent B: 90: 10: 0.1 CH ₃ OH - H ₂ O - TFA.

¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ 7, 54 (d, J=2,2, 1Н), 7,45 (dd, J=2,2, 8,4, 1H), 7,35 (d, J=8,4, 1H), 7,08 (d, J=8,8, 2H), 6,79 (d, J=8,8, 2H), 4,08 (d, J=15,0, 1H), 3,99 (d, J=15,0, 1H), 3,98 (q, J=7,0, 2H), 3,92 (dd, J=2,2, 11,8, 1H), 3,80 (dd, J=5,3, 11,9, 1H), 3,74 (t, J=9,2, 1H), 3,57 (m, 1H), 3,41 (d, J=8,8, 1H), 3,08 (d, J=9,7, 1H), 3,06 (s, 3H), 1,35 (t, J=7,0, 3H). ¹³C ЯМР (100 МГц, CDCl₃) δ 158.2, 139.0, 138.5, 134.2, 132.4, 131.2, 130.1, 129.2, 127.6, 114.8, 101.8, 78.0, 75.3, 74.5, 71.1, 63.8, 62.1, 49.0, 38.7, 14.5. Рассчитано для C₂₂H₂₇ClO₇: С, 60, 20; Н, 6,20; Cl, 8,07. Найдено: С, 60, 05; Н, 6,21; Cl, 8,01. ¹ H NMR (400 MHz, CD ₃ OD) δ 7.54 (d, J=2.2, 1H), 7.45 (dd, J=2.2, 8.4, 1H), 7.35 ( d, J=8.4, 1H), 7.08 (d, J=8.8, 2H), 6.79 (d, J=8.8, 2H), 4.08 (d, J=15 .0, 1H), 3.99 (d, J=15.0, 1H), 3.98 (q, J=7.0, 2H), 3.92 (dd, J=2.2, 11, 8, 1H), 3.80 (dd, J=5.3, 11.9, 1H), 3.74 (t, J=9.2, 1H), 3.57 (m, 1H), 3, 41 (d, J=8.8, 1H), 3.08 (d, J=9.7, 1H), 3.06 (s, 3H), 1.35 (t, J=7.0, 3H ). ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ 158.2, 139.0, 138.5, 134.2, 132.4, 131.2, 130.1, 129.2, 127.6, 114.8, 101.8, 78.0, 75.3, 74.5, 71.1, 63.8, 62.1, 49.0, 38.7, 14.5 . Calculated for C ₂₂ H ₂₇ ClO ₇ : C, 60, 20; H, 6.20; Cl, 8.07. Found: C, 60, 05; H, 6.21; Cl, 8.01.

Прозрачное масло. ЖХВР: колонка Zorbax SB С 18, 4,6 × 75 мм, 0-100% В в течение 8 мин, выдержка 4 мин, А=10% МеОН / 90% H₂O / 0,2% Н₃РО₄, В=10% H₂O / 90% МеОН / 0,2% H₃PO₄, комн. темп. = 8,85 мин, степень чистоты 98,1%.Transparent oil. HPLC: Zorbax SB C 18 column, 4.6 x 75 mm, 0-100% B for 8 min, hold 4 min, A=10% MeOH / 90% H ₂ O / 0.2% H ₃ PO ₄ , B \u003d 10% H ₂ O / 90% MeOH / 0.2% H ₃ PO ₄ , room. pace. = 8.85 min, 98.1% purity.

LC-MS: колонка Phenomex Luna 5u, 4,6 × 50 мм, 0-100% В в течение 4 мин, выдержка 1 мин, А=10% CH₃CN / 90% Н₂0 / 10 мМ NH₄Ac, В=10% H₂O / 90% CH₃CN / 10 мМ NH₄Ac, комн. темп. = 3,55 мин. Рассчитано для C₃₀H₃₉ClNO₁₁ (М+NH₄) + 624, 2, найдено 624, 3. ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ 7,38 (d, J=8,3, 1Н), 7,27 (dd, J=1,7, 8,8, 1H), 7,21 (d, J=2,2, 1H), 7,03 (d, J=8,8, 2H), 6,81 (d, J=8,2, 2H), 5,55 (t, J=9,9, 1H), 5,21 (t, J=9, 6, 1H), 4,92 (d, J=10,5, 1H), 4,34 (dd, J=5,0, 12,0, 1H), 4,20 (dd, J=2,8, 12,1, 1H), 3,97-4,08 (m, 5H), 3,09 (s, 3H), 2,10 (s, 3Н), 2,09 (s, 3Н), 1,94 (s, 3Н), 1,76 (s, 3Н), 1,39 (t, J=7,2, 3Н). ¹³C ЯМР (100 МГц, CD₃OD) δ 170.7, 170.2, 170.1, 169.6, 169.0, 157.5, 139.0, 135.1, 134.7, 131.1, 129.8, 129.7, 129.3, 126.0, 114.6, 100.1 80.8, 73.9, 71.3, 68.9, 68.8, 63.4, 62.1, 52.1, 49.5, 38.4, 20.7, 20.6, 20.3, 14.9.LC-MS: Phenomex Luna 5u column, 4.6 x 50 mm, 0-100% B for 4 min, hold 1 min, A=10% CH ₃ CN / 90% H ₂ 0 / 10 mM NH ₄ Ac, B=10% H ₂ O / 90% CH ₃ CN / 10 mM NH ₄ Ac, room. pace. = 3.55 min. Calcd for C ₃₀ H ₃₉ ClNO ₁₁ (M+NH ₄ ) + 624.2, found 624.3. ¹ H NMR (400 MHz, CD ₃ OD) δ 7.38 (d, J=8.3, 1H) , 7.27 (dd, J=1.7, 8.8, 1H), 7.21 (d, J=2.2, 1H), 7.03 (d, J=8.8, 2H), 6.81 (d, J=8.2, 2H), 5.55 (t, J=9.9, 1H), 5.21 (t, J=9.6, 1H), 4.92 (d , J=10.5, 1H), 4.34 (dd, J=5.0, 12.0, 1H), 4.20 (dd, J=2.8, 12.1, 1H), 3, 97-4.08 (m, 5H), 3.09 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 1.94 (s, 3H), 1.76 (s, 3H), 1.39 (t, J=7.2, 3H). ¹³ C NMR (100 MHz, CD ₃ OD) δ 170.7, 170.2, 170.1, 169.6, 169.0, 157.5, 139.0, 135.1, 134.7, 131.1, 129.8, 129.7, 129.3, 126.0, 11 4.6, 100.1 80.8, 73.9, 71.3, 68.9 , 68.8, 63.4, 62.1, 52.1, 49.5, 38.4, 20.7, 20.6, 20.3, 14.9.

5-бром-2-хлор-4'-этоксидифенилметан5-bromo-2-chloro-4'-ethoxydiphenylmethane

Белое твердое вещество; т.пл. 37°С (не корректировалась). ЖХВР t_R=4,43 мин, степень чистоты 100%. Время удерживания для ЖХВР на колонке Phenomex Luna С-18, 4,6 мм × 50 мм, элюент с градиентом 4 мин, 0-100% растворителя В; растворитель А: 10: 90: 0,1 СН₃ОН - H₂O - ТФК; растворитель В: 90: 10: 0,1 СН₃ОН -H₂O - ТФК.White solid; m.p. 37°C (not corrected). HPLC t _R =4.43 min, 100% purity. HPLC retention time on a Phenomex Luna C-18, 4.6 mm x 50 mm column, 4 min gradient eluent, 0-100% solvent B; solvent A: 10: 90: 0.1 CH ₃ OH - H ₂ O - TFA; solvent B: 90: 10: 0.1 CH ₃ OH -H ₂ O - TFA.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,20-7,28 (m, 3Н), 7,08 (d, J=8,8, 2Н), 4,00 (q, J=7,0, 2H), 3,96 (s, 2H), 1,40 (t, J=7,0, 3Н). ¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃) δ 157.6, 141.3, 133.5, 133.1, 130.9, 130.5, 130.4, 130.0, 120.4, 114.6, 63.4, 38.2, 14.9. Вычислено для C₁₅H₁₄BrClO: С, 55, 32; Н, 4,33. Найдено: С, 55,22; Н, 4,25. ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 7.20-7.28 (m, 3H), 7.08 (d, J=8.8, 2H), 4.00 (q, J=7.0 , 2H), 3.96 (s, 2H), 1.40 (t, J=7.0, 3H). ^13C NMR (125 MHz, _CDCl3 ) δ 157.6, 141.3, 133.5, 133.1, 130.9, 130.5, 130.4, 130.0, 120.4, 114.6, 63.4, 38.2, 14.9. Calculated for C ₁₅ H ₁₄ BrClO: C, 55, 32; H, 4.33. Found: C, 55.22; H, 4.25.

5-литий-2-хлор-4'-этоксидифенилметан5-lithium-2-chloro-4'-ethoxydiphenylmethane

Данные не удалось получить, продукт термически неустойчив выше -75°С, происходит быстрое разложение,Data could not be obtained, product is thermally unstable above -75°C, rapid decomposition occurs,

илиor

5-бром-2-хлор-4'-этоксибензофенон5-bromo-2-chloro-4'-ethoxybenzophenone

Белое твердое вещество; т.пл. = 60°С (не корректировалась). ЖХВР t_R=3,9 мин, степень чистоты 100%. Время удерживания при ЖХВР с применением колонки Phenomex Luna С-18, 4,6 мм × 50 мм, элюент с градиентом 4 мин 0-100% растворителя В; растворитель А: 10: 90: 0,1 СН₃ОН - Н₂О - ТФК; растворитель В: 90: 10: 0,1 СН₃ОН - H₂O - ТФК.White solid; m.p. = 60°C (not corrected). HPLC t _R =3.9 min, 100% purity. HPLC retention time using Phenomex Luna C-18 column, 4.6 mm x 50 mm, eluent with 4 min gradient 0-100% solvent B; solvent A: 10: 90: 0.1 CH ₃ OH - H ₂ O - TFA; solvent B: 90: 10: 0.1 CH ₃ OH - H ₂ O - TFA.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,76 (d, J=8,8, 2Н), 7,53 (dd, J=2,2, 8,4, 1H), 7,48 (d, J=2,2, 1H), 7,32 (d, J=8,8, 1H), 6,93 (d, J=8,8, 2H), 4,11 (q, J=7,0, 2H), 1,45 (t, J=7,0, 3Н). ¹³C ЯМР (100 МГц, CDCl₃) δ 192.0, 163.9, 140.7, 133.7, 132.6, 131.4, 130.1, 128.6, 120.5, 114.5, 63.9, 14.6. ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 7.76 (d, J=8.8, 2H), 7.53 (dd, J=2.2, 8.4, 1H), 7.48 (d , J=2.2, 1H), 7.32 (d, J=8.8, 1H), 6.93 (d, J=8.8, 2H), 4.11 (q, J=7, 0.2H), 1.45 (t, J=7.0, 3H). ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ 192.0, 163.9, 140.7, 133.7, 132.6, 131.4, 130.1, 128.6, 120.5, 114.5, 63.9, 14.6.

HRMS вычислено для C₁₅H₁₃BrClO₂ (M+H)⁺: 338, 9787; найдено 338, 9785. Вычислено для C₁₅H₁₂BrClO₂: С, 53, 05; Н, 3,56. Найдено: С, 53,11; Н, 3,28.HRMS calculated for C ₁₅ H ₁₃ BrClO ₂ (M+H) ⁺ : 338, 9787; found 338, 9785. Calculated for C ₁₅ H ₁₂ BrClO ₂ : C, 53, 05; H, 3.56. Found: C, 53.11; H, 3.28.

Спектральные приборы и условияSpectral instruments and conditions

Спектры ЯМР (¹Н, ¹³С) снимали на спектрометрах JEOL JNM-EPC-500, JEOL GSX400 и Bruker 400. Химические сдвиги указаны в ч/млн. (ppm), в области слабых полей относительно внутреннего эталона, тетраметилсилана; константы сочетания (величины J) приведены в Гц (Hz). Элементный анализ проводили в Discovery Analytical Science Department. Температуры плавления определяли на приборе Hoover Uni-melt, они не корректировались. LC/MS записывали на приборе Shimadzu LC-10AT, снабженном инжектором SIL-10A, детектор SDD-10AV обычно работал при длине волны 200 нм и с помощью масс-спектрометра Micromass ZMD. Если иное не указано, время удерживания при LC/MS или ЖХВР определяли на колонке Phenomex Luna С-18, 4,6 мм × 50 мм, элюент с градиентом 4 мин 0-100% растворителя В; при этом растворитель А: 10: 90: 0,1 СН₃ОН - H₂O - ТФК и растворитель В: 90: 10: 0,1 СН₃ОН - H₂O - ТФК.NMR spectra ( ¹ H, ¹³ C) were recorded on JEOL JNM-EPC-500, JEOL GSX400, and Bruker 400 spectrometers. Chemical shifts are indicated in ppm. (ppm), in the field of weak fields relative to the internal standard, tetramethylsilane; coupling constants (J values) are given in Hz (Hz). Elemental analysis was performed at the Discovery Analytical Science Department. Melting points were determined on a Hoover Uni-melt apparatus and were not corrected. LC/MS was recorded on a Shimadzu LC-10AT instrument equipped with a SIL-10A injector, the SDD-10AV detector was typically operated at 200 nm and using a Micromass ZMD mass spectrometer. Unless otherwise indicated, LC/MS or HPLC retention times were determined on a Phenomex Luna C-18 column, 4.6 mm x 50 mm, eluent with a 4 min gradient of 0-100% solvent B; while solvent A: 10: 90: 0.1 CH ₃ OH - H ₂ O - TFA and solvent B: 90: 10: 0.1 CH ₃ OH - H ₂ O - TFA.

Биологические данныеbiological data

Соединение формулы I (Пример)Compound of Formula I (Example)

является активным и селективным ингибитором основного люминального переносчика глюкозы в почечном проксимальном канальце (SGLT2).is an active and selective inhibitor of the main luminal glucose transporter in the renal proximal tubule (SGLT2).

- При таких низких дозах, как 0,1 мг/кг, соединение формулы I стимулировал значительное выделение глюкозы в моче у обычных крыс, а при таких низких дозах, как 0,01 мг/кг, соединение формулы I стимулировало выделение глюкозы в моче у крыс ZDF, страдающих от глюкозурии вследствие диабета. Эти данные позволяют предположить, что соединение формулы I действует на диабетическую почку со снижением порогового содержания глюкозы в почке. Свойство соединения формулы I стимулировать выделение глюкозы у обычных крыс оказывается более сильным, чем в случае серглифлозина, 9Т-1095, или флоризина, введенных подкожно.- At doses as low as 0.1 mg/kg, the compound of formula I stimulated significant urinary glucose excretion in normal rats, and at doses as low as 0.01 mg/kg, the compound of formula I stimulated urinary glucose excretion in rats ZDF suffering from glucosuria due to diabetes. These data suggest that the compound of formula I acts on the diabetic kidney to lower the threshold glucose in the kidney. The property of the compounds of formula I to stimulate glucose release in normal rats is stronger than in the case of sergliflozin, 9T-1095, or florizin administered subcutaneously.

- У самцов крыс ZDF введение соединения формулы I в течение 15 дней привело к значительно меньшему ускорению и уровню глюкозы в плазме по сравнению с крысами, которым вводили носитель.- In male ZDF rats, administration of a compound of formula I for 15 days resulted in significantly lower acceleration and plasma glucose levels compared to vehicle-treated rats.

- При проведении исследования гиперинсулинемии-нормогликемии с применением клэмпов значительное увеличение инфузии глюкозы и скорости утилизации глюкозы сопровождались значительным уменьшением HGP у крыс, получавших соединение формулы I, по сравнению с крысами, которым вводили носитель.- In a clamp study of hyperinsulinemia-normoglycemia, a significant increase in glucose infusion and glucose utilization rate was accompanied by a significant decrease in HGP in Formula I treated rats compared to vehicle treated rats.

- Доклиническая фармакология соединения формулы I позволяет предположить, что этот агент может корректировать гипергликемию в условиях окружающей среды и улучшать метаболический статус у крыс ZDF с развившимся диабетом. С учетом отсутствия побочных эффектов в желудочно-кишечном тракте или гипергликемии эти данные позволяют предположить, что соединение формулы I является возможным терапевтическим кандидатом для лечения диабета.- Preclinical pharmacology of the compound of formula I suggests that this agent can correct environmental hyperglycemia and improve metabolic status in diabetic ZDF rats. Given the absence of side effects in the gastrointestinal tract or hyperglycemia, these data suggest that the compound of formula I is a possible therapeutic candidate for the treatment of diabetes.

Повышенная селективность к SGLT2 по сравнению с SGLT1Increased selectivity for SGLT2 compared to SGLT1

Эффективность ингибирования in vitro SGLT (ЕС50) соединения формулы I и, в отдельных экспериментах, Примера 12 публикации W0 01/27128, оценивали путем мониторинга ингибирования накопления радиоактивно меченого α-метил-D-глюкопиранозида (AMG) клетками яичника китайского хомячка, стабильно экспрессирующими SGLT2 и SGLT1 человека.The in vitro SGLT (EC50) potency of a compound of formula I and, in separate experiments, Example 12 of W0 01/27128 was evaluated by monitoring the inhibition of accumulation of radiolabeled α-methyl-D-glucopyranoside (AMG) by Chinese hamster ovary cells stably expressing SGLT2 and human SGLT1.

Средние значения ЕС₅₀ для SGLT2 и SGLT1 для каждого соединения представлены в Таблице 1 ниже.Average EC ₅₀ values for SGLT2 and SGLT1 for each compound are presented in Table 1 below.

Как показано в Таблице 1, соединение формулы I демонстрирует среднее значение ЕС₅₀ против SGLT2, равное 1.1 нМ, по сравнению со средним значением ЕС₅₀ для Примера 12 из W0 '128, равным 1.0 нМ. По отношению к SGLT1 соединение формулы I и Пример 12 из WO '128 показали средние значения ЕС₅₀ 1390 нМ и 762 нМ, соответственно.As shown in Table 1, the compound of formula I exhibits a mean EC ₅₀ against SGLT2 of 1.1 nM compared to an average EC ₅₀ for Example 12 of W0 '128 of 1.0 nM. With respect to SGLT1, the compound of formula I and Example 12 from WO '128 showed mean EC ₅₀ values of 1390 nM and 762 nM, respectively.

Эти результаты показывают, что соединение формулы I является высокоселективным (в 1,263 раза) в отношении SGLT2 по сравнению с SGLT1 и примерно в 1.7 раза более селективен в отношении SGLT2 по сравнению с SGLT1 относительно Примера 12 из WO 01/27128.These results show that the compound of formula I is highly selective (1.263 times) for SGLT2 over SGLT1 and about 1.7 times more selective for SGLT2 over SGLT1 relative to Example 12 of WO 01/27128.

Повышенная способность снижать уровень глюкозы в крови через 5 часов после перорального введения у крыс с диабетом, индуцированным STZ (краткосрочная модель исследования на животных)Increased ability to lower blood glucose levels 5 hours after oral administration in rats with STZ-induced diabetes (short-term animal model)

Была проведена оценка in vivo эффективности соединения формулы I и Примера 12 из WO 01/27128 с применением модели STZ-индуцированного диабета у крыс. После перорального введения соединения формулы I в виде однократной дозы 0.03 или 0.1 мг/кг уровни глюкозы в крови измеряли каждый час в течение 5 часов, в течение которых крыс лишали пищи. В отдельных исследованиях вводили однократную дозу 0.03 или 0.1 мг/кг Примера 12 из WO 01/27128.The in vivo efficacy of the compound of formula I and Example 12 of WO 01/27128 was evaluated using a rat model of STZ-induced diabetes. Following oral administration of a compound of formula I as a single dose of 0.03 or 0.1 mg/kg, blood glucose levels were measured every hour for 5 hours, during which the rats were deprived of food. In separate studies, a single dose of 0.03 or 0.1 mg/kg of Example 12 from WO 01/27128 was administered.

Результаты представлены в Таблице 2 ниже. Значения за 5 часов в Таблице 2 представляют собой средний процент снижения уровней глюкозы в крови относительно исходных значений для этой когорты крыс. Поскольку крысы не имели доступа к пище в течение этого 5-часового периода, показатели глюкозы в крови как обработанных, так и необработанных крыс снизились. Чтобы скорректировать этот эффект, процентное изменение уровня глюкозы в час 5 для контрольной группы, получавшей носитель, вычитали из процентного изменения уровня глюкозы через 5 часов после введения дозы.The results are presented in Table 2 below. The 5 hour values in Table 2 represent the mean percent reduction in blood glucose levels from baseline for this cohort of rats. Since the rats did not have access to food during this 5 hour period, the blood glucose values of both treated and untreated rats decreased. To correct for this effect, the percent change in glucose at hour 5 for the vehicle control group was subtracted from the percent change in glucose at 5 hours post-dose.

Средние значения процентных изменений через 5 часов в группах, получавших лекарственное средство, сравнивали со средними значениями процентных изменений через 5 часов, полученными в группе, получающей носитель, с использованием Т-теста. Все значения р были меньше или равны 0.0006, что считалось статистически значимым.The mean percent change at 5 hours in the drug groups was compared to the mean percent change at 5 hours from the vehicle group using a T-test. All p values were less than or equal to 0.0006, which was considered statistically significant.

Как показано в Таблице 2, среднее снижение уровней глюкозы в крови по сравнению с контролем было выше для соединения формулы I, чем для Примера 12 из WO 01/27128 (32.9% против 26.2% при дозе 0.03 мг/кг; 42.7% против 35.9% при дозе 0.1 мг/кг). Это соответствует увеличению снижения уровней глюкозы в крови под действием соединения формулы I по сравнению с Примером 12 на 25% ((32.9-26.2)/26.2) и 19% ((42.7-35.9)/35.9) при 0.03 и 0.1 мг/кг, соответственно.As shown in Table 2, the mean reduction in blood glucose levels compared to control was higher for the Formula I compound than for Example 12 of WO 01/27128 (32.9% vs. 26.2% at the 0.03 mg/kg dose; 42.7% vs. 35.9% at a dose of 0.1 mg/kg). This corresponds to a 25% ((32.9-26.2)/26.2) and 19% ((42.7-35.9)/35.9) increase in the reduction in blood glucose levels under the action of the compound of formula I compared to Example 12 at 0.03 and 0.1 mg/kg, respectively.

Повышенная способность снижать уровень глюкозы в плазме в течение 15-дневного периода после перорального введения у крыс с диабетом, индуцированным STZ (долгосрочная модель исследования на животных)Increased ability to lower plasma glucose over a 15-day period after oral administration in rats with STZ-induced diabetes (long-term animal model)

Эффективность in vivo соединения формулы I и Примера 12 из WO 01/27128 также была изучена в прямом сравнительном исследовании на модели крыс с диабетом, индуцированным STZ (диабетические тучные крысы Цукера, модель, генетически предрасположенная к развитию диабета) в течение двухнедельного субхронического исследования.The in vivo efficacy of the compound of formula I and Example 12 of WO 01/27128 was also studied in a head-to-head comparison study in a rat model with STZ-induced diabetes (Zucker's diabetic obese rat, a model genetically predisposed to developing diabetes) during a two-week subchronic study.

10. В этом прямом сравнительном исследовании соединение формулы I и Пример 12 вводили ежедневно в дозе 0.5 мг/кг. Концентрацию глюкозы в плазме измеряли на исходном уровне (то есть, исходную глюкозу в плазме до 1-й дозы лекарственного средства) и после 8-го и 15-го дня лечения после 18-часового голодания. Результаты приведены в Таблице 3 ниже.10. In this direct comparative study, the compound of formula I and Example 12 were administered daily at a dose of 0.5 mg/kg. Plasma glucose concentration was measured at baseline (ie, baseline plasma glucose prior to the 1st dose of drug) and after days 8 and 15 of treatment following an 18 hour fast. The results are shown in Table 3 below.

Средние значения глюкозы в плазме натощак сравнивали у крыс, получавших носитель и лекарственное средство, на 8-й и 15-й день. В проведенных Т-тестах сравнивали значения глюкозы в плазме натощак в группах, получавших лекарственное средство и получавших носитель. Значения р были меньше или равны 0.002, что считалось статистически значимым.Mean fasting plasma glucose values were compared between vehicle and drug treated rats on days 8 and 15. The T-tests performed compared fasting plasma glucose values in the drug-treated and vehicle-treated groups. The p values were less than or equal to 0.002, which was considered statistically significant.

Как показано в Таблице 3, Пример 12 из WO 01/27128 снижал уровни глюкозы натощак примерно с 304 до 196 мг/дл (снижение на 35.4%; снижение на 33.6% по сравнению с контролем) на 15 день, тогда как соединение формулы I снижало уровни глюкозы натощак примерно от около 304 до 138 мг/дл (снижение на 54.5%; снижение на 53.2% по сравнению с контролем) за тот же период.As shown in Table 3, Example 12 of WO 01/27128 reduced fasting glucose levels from about 304 to 196 mg/dl (35.4% reduction; 33.6% reduction compared to control) at day 15, while the compound of formula I reduced fasting glucose levels from about 304 to 138 mg/dl (54.5% decrease; 53.2% decrease compared to control) over the same period.

13. Эти данные демонстрируют, что соединение формулы I на 58% ((53.2-33.6)/33.5)) более эффективен, чем Пример 12, в снижении уровня глюкозы в плазме по сравнению с контролем в течение 15-дневного периода.13. These data demonstrate that the compound of formula I is 58% ((53.2-33.6)/33.5)) more effective than Example 12 in lowering plasma glucose compared to control over a 15 day period.

Claims (2)

Фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующим действием в отношении SGLT2, включающая соединение формулы A pharmaceutical composition having an inhibitory effect on SGLT2, comprising a compound of the formula и фармацевтически приемлемый носитель. and a pharmaceutically acceptable carrier.