RU2795232C2 - Комбинированные лекарственные средства, нацеленные на pd-1, tim-3 и lag-3 - Google Patents

Комбинированные лекарственные средства, нацеленные на pd-1, tim-3 и lag-3 Download PDF

Info

Publication number
RU2795232C2
RU2795232C2 RU2019134934A RU2019134934A RU2795232C2 RU 2795232 C2 RU2795232 C2 RU 2795232C2 RU 2019134934 A RU2019134934 A RU 2019134934A RU 2019134934 A RU2019134934 A RU 2019134934A RU 2795232 C2 RU2795232 C2 RU 2795232C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
seq
amino acid
antibody
acid sequence
nos
Prior art date
Application number
RU2019134934A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2019134934A3 (ru
RU2019134934A (ru
Inventor
Трине Линдстед
Майкл Монрад Грандал
Ева Мария Карлсен Меландер
Камилла Фрелих
Миккель Вандаль Педерсен
Михаэль КРАГХ
Йохан Лантто
Моника Гад
Иван Давид Хорак
Original Assignee
Симфоген А/С
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Симфоген А/С filed Critical Симфоген А/С
Priority claimed from PCT/EP2018/058752 external-priority patent/WO2018185232A1/en
Publication of RU2019134934A publication Critical patent/RU2019134934A/ru
Publication of RU2019134934A3 publication Critical patent/RU2019134934A3/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2795232C2 publication Critical patent/RU2795232C2/ru

Links

Images

Abstract

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложены варианты способа усиления иммунитета у нуждающегося в этом пациента–человека. Способы включают введение пациенту антитела против TIM-3 и антитела против PD-1. Также предложена фармацевтическая композиция для повышения иммунитета и лечения рака, содержащая антитело к TIM-3 или его антигенсвязывающую часть и антитело к PD-1 или его антигенсвязывающую часть. Изобретение обеспечивает повышение иммунитета со значительно увеличенной эффективностью и может быть использовано в терапии рака. 4 н. и 15 з.п. ф-лы, 13 ил., 9 табл., 12 пр.

Description

Ссылка на Родственную Заявку
[0001] Согласно настоящей заявке испрашивается приоритет в соответствии с предварительной заявкой на выдачу патента США 62/481973, поданной 5 апреля 2017 г. раскрытие которой полностью включено в настоящий документ посредством ссылки.
Список последовательностей
[0002] Настоящая заявка содержит Список последовательностей, который был электронно представлен в формате ASCII и полностью включен в настоящий документ посредством ссылки. Электронная копия списка последовательностей, созданная 23 марта 2018 г., названа 022675_WO058_SL.txt и имеет размер 232360 бит.
Уровень техники изобретения
[0003] PD-1, также известный как белок запрограммированной смерти клеток 1 и CD279, представляет собой 268 аминокислотный рецептор клеточной поверхности, который принадлежит к суперсемейству иммуноглобулинов. PD-1 является членом семейства CD28 регуляторов T-клеток и экспрессируется на T-клетках, B-клетках и макрофагах. Он связывает лиганды PD-L1 (также известный как гомолог B7) и PD-L2 (также известный как B7-DC). PD-1 представляет собой мембранный белок I типа, структура которого содержит внеклеточный домен IgV, трансмембранную область и внутриклеточный хвост, содержащий два сайта фосфорилирования. Известный как белок иммунной контрольной точки, PD-1 функционирует в качестве индуцибельного иммуномодулирующего рецептора, принимающего участие, например, в отрицательной регуляции T-клеточных ответов на антигенную стимуляцию.
[0004] PD-L1 является основным лигандом для PD-1. Связывание PD-L1 с PD-1 ингибирует T-клеточную активность, снижая выработку цитокинов и подавляя пролиферацию T-клеток. Раковые клетки, которые экспрессируют PD-L1, способны использовать этот механизм для инактивации противоопухолевой активности T-клеток посредством связывания PD-L1 с рецептором PD-1. Ввиду своих свойств регулирования иммунного ответа PD-1 исследовали в качестве потенциальной мишени для иммунотерапии, включая лечение рака и аутоиммунных заболеваний. Для лечения некоторых видов рака в США и Европе были одобрены два антитела против PD-1, пембролизумаб и ниволумаб.
[0005] Другие белки иммунных контрольных точек включают в себя TIM-3 (белок 3, содержащий T-клеточный иммуноглобулин и домен муцина) и LAG-3 (ген активации лимфоцитов 3). TIM-3, также известный как HAVCR2 (клеточный рецептор 2 вируса гепатита А) или CD366, является членом семейства белков, содержащих T-клеточный иммуноглобулин и домен муцина. У людей TIM-3 кодируется геном Havcr2 и представляет собой гликопротеин I типа 33 кДа с мембранным дистальным доменом IgV и мембранным проксимальным доменом муцина. Он содержит консервативную область из пяти остатков Tyr во внутриклеточном домене, которые фосфорилируются при связывании лиганда. TIM-3 экспрессируется рядом различных клеток, происходящих как из адаптивных, так и из врожденных ветвей иммунной системы, включая T-клетки, дендритные клетки, макрофаги и клетки-натуральные киллеры (NK). Экспрессия TIM-3 низка на наивных T-клетках, но сильно повышается при активации T-клеток. В отличие от T-клеток врожденные клетки, такие как дендритные клетки, NK клетки и моноциты, обладают высокой базальной экспрессией TIM-3. TIM-3 связан с несколькими, главным образом промискуитентными, лигандами, включая галектин-9, фосфатидилсерин, CEACAM-1 и HMGB-1, но точная роль этих лигандов в настоящее время неизвестна.
[0006] Хотя было предположено, что TIM-3 является ингибитором контрольной точки, имеется довольно мало доказательств в поддержку идеи, что TIM-3 непосредственно опосредует подавление активации T-клеток или секреции цитокинов способом, похожим, например, на PD-1. Кроме того, в отличие от PD-1, TIM-3, по-видимому, имеет значение для регуляции клеток врожденной системы и, в частности, дендритных клеток. Большинство функциональных данных, относящихся к TIM-3 и его роли в иммунологии опухоли, получены в исследованиях in vivo с использованием различных антител. В большинстве этих исследований из-за плохой проверки антител неясно, опосредовано ли действие антител против TIM-3 ингибированием связывания лиганда или агонистическим действием на мишень. Ввиду его регуляторных свойств иммунного ответа TIM-3 исследовали в качестве потенциальной мишени для иммунотерапии, в том числе для лечения рака и аутоиммунных заболеваний. Одно антитело против TIM-3 в настоящее время находится в клинической разработке, но в настоящее время нет одобренных антител против TIM-3.
[0007] LAG-3, также известный как CD223, представляет собой белок суперсемейства иммуноглобулинов, который функционирует в качестве рецептора иммунной контрольной точки. Зрелый белок представляет собой трансмембранный белок I типа из 503 аминокислот с четырьмя внеклеточными Ig-подобными доменами. Он экспрессируется на различных типах клеток, включая активированные Т-клетки, Т-регуляторные (Treg) клетки, природные клетки-киллеры, В-клетки и плазмоцитоидные дендритные клетки. Информация о данных последовательности, организации экзона/интрона и хромосомной локализации LAG-3 указывает на то, что он тесно связан с CD4. Подобно CD4, LAG-3 связывает молекулы МНС II класса, хотя и с более высокой аффинностью и в отдельном сайте по сравнению с CD4.
[0008] LAG-3 является коингибирующим рецептором, который, как полагают, регулирует пролиферацию, активацию и гомеостаз Т-клеток способом, похожим на CTLA-4 и PD-1. При связывании лиганда с внеклеточным доменом, LAG-3 оказывает свое действие посредством последующей передачи сигналов через цитоплазматический домен. Лучше всего охарактеризованным лигандом для LAG-3 является МНС II класса (MHCII), но были описаны другие лиганды LAG-3, включая LSECtin. LAG-3 не имеет классических мотивов ITIM или ITSM, но имеет консервативный мотив KIEELE (SEQ ID NO: 397), который, как считается, необходим для оказания его ингибирующего действия на активность Т-клеток. Точный механизм, с помощью которого LAG-3 влияет на активность Т-клеток, понятен слабо. LAG-3 ингибирует экспансию Т-клеток, блокируя проникновение активированных Т-клеток в фазу роста клеточного цикла, что приводит к накоплению клеток в S-фазе. Также полагают, что LAG-3 имеет значение для усиления подавляющей активности регуляторных Т-клеток и для модулирования функции дендритных клеток. Раковые клетки обладают способностью усиливать экспрессию MHCII, который связывает LAG-3 с эффекторными Т-клетками, тем самым ингибируя их активность и вызывая ускользание опухоли от иммунного ответа.
[0009] Ввиду критической роли PD-1, LAG-3 и TIM-3 в качестве иммуномодуляторов, существует необходимость в новых и улучшенных комбинированных лекарственных средствах, которые нацелены на эти рецепторы, для лечения рака и определенных нарушений иммунной системы.
Сущность изобретения
[0010] Настоящее изобретение основано на открытии, что повышающая иммунитет эффективность антитела против PD-1, такого как описано в настоящем документе, значительно увеличивается при применении антитела в комбинации с антителом против TIM-3 и/или антителом против LAG-3. Авторы настоящего изобретения обнаружили, что комбинированные лекарственные средства согласно настоящему изобретению особенно эффективны при лечении рака у пациента-человека путем активации собственного противоракового иммунитета пациента. По сравнению с доступными в настоящее время способами лечения рака, включая лечение антителами, предполагается, что комбинированные лекарственные средства согласно изобретению могут обеспечить превосходный клинический ответ.
[0011] Соответственно, в настоящем изобретении предложен способ усиления иммунитета у нуждающегося в этом пациента-человека, такого как онкопациент, путем введения пациенту (1) антитела против PD-1 или его антигенсвязывающей части, которое конкурирует с антителом, выбранным из группы, состоящей из 12819.15384, 12748.15381, 12748.16124, 12865.15377, 12892.15378, 12796.15376, 12777.15382, 12760.15375 и 13112.15380, за связывание с PD-1 человека или связывается с тем же самым эпитопом PD-1 человека, что и оно; и (2) антитела против TIM-3 или его антигенсвязывающей части и/или антитела против LAG-3 или его антигенсвязывающей части. В некоторых вариантах осуществления способ включает введение антитела против PD-1 или его антигенсвязывающей части, антитела против TIM-3 или его антигенсвязывающей части и антитела против LAG-3 или его антигенсвязывающей части.
[0012] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 связывается с эпитопом PD-1 человека, содержащим:
a) остатки V64, L128, P130, K131 и A132 SEQ ID NO: 388;
b) остатки V44 и T145 SEQ ID NO: 388;
c) остатки K131 и E136 SEQ ID NO: 388; или
d) остатки V44 и T145 SEQ ID NO: 388.
[0013] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 связывается с эпитопом PD-1 человека, содержащим:
a) остатки 56-64, 69-90 и 122-140 SEQ ID NO: 388;
b) остатки 69-90 и 122-140 SEQ ID NO: 388;
c) остатки 69-75 SEQ ID NO: 388;
d) остатки 136-140 SEQ ID NO: 388; или
e) остатки 69-75 и 136-140 SEQ ID NO: 388.
[0014] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 имеет по меньшей мере одно из следующих свойств:
a) связывается с PD-1 человека с KD 750 пМ или менее;
b) связывается с PD-1 яванского макака с KD 7 нМ или менее;
c) связывается с PD-1 мыши с KD 1 нМ или менее;
d) не связывается с PD-1 крысы;
e) увеличивает секрецию IL-2 в анализе стимулированной стафилококковым энтеротоксином B (SEB) цельной крови;
f) увеличивает секрецию IFN-γ в анализе однонаправленной реакции смешанной культуры лимфоцитов;
g) ингибирует взаимодействие PD-1 с PD-L1 по меньшей мере на 60% в концентрации 10 мкг/мл в конкурентном анализе методом проточной цитометрии;
h) блокирует связывание PD-L1 и PD-L2 с PD-1 по меньшей мере на 90% в концентрации 10 мкг/мл, что определяют с помощью анализа методом биослойной интерферометрии; и
i) ингибирует рост опухоли in vivo.
В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 имеет все указанные свойства.
[0015] В некоторых вариантах осуществления определяющие комплементарность области 1-3 тяжелой цепи (H-CDR) и определяющие комплементарность области 1-3 легкой цепи (L-CDR) антитела против PD-1 содержат аминокислотные последовательности из:
a) SEQ ID NO: 228-233, соответственно;
b) SEQ ID NO: 238-243, соответственно;
c) SEQ ID NO: 248-253, соответственно;
d) SEQ ID NO: 258-263, соответственно;
e) SEQ ID NO: 268-273, соответственно;
f) SEQ ID NO: 278-283, соответственно;
g) SEQ ID NO: 288-293, соответственно; или
h) SEQ ID NO: 298-303, соответственно.
[0016] В некоторых вариантах осуществления вариабельные домены тяжелой и легкой цепей антитела против PD-1 содержат аминокислотные последовательности из:
a) SEQ ID NO: 226 и 227, соответственно;
b) SEQ ID NO: 236 и 237, соответственно;
c) SEQ ID NO: 236 и 392, соответственно;
d) SEQ ID NO: 246 и 247, соответственно;
e) SEQ ID NO: 256 и 257, соответственно;
f) SEQ ID NO: 266 и 267, соответственно;
g) SEQ ID NO: 276 и 277, соответственно;
h) SEQ ID NO: 286 и 287, соответственно; или
i) SEQ ID NO: 296 и 297, соответственно.
[0017] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 содержит:
a) тяжелую цепь (HC), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 226 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и легкую цепь (LC), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 227 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 379;
b) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 236 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 237 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 379;
c) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 236 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 392 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 379;
d) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 246 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 247 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 379;
e) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 256 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 257 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 379;
f) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 266 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 267 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 379;
g) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 276 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 277 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 379;
h) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 286 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 287 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 379; или
i) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 296 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 297 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 379.
[0018] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 конкурирует за связывание с TIM-3 человека или связывается с тем же самым эпитопом TIM-3 человека, что и антитело, выбранное из группы, состоящей из 15086.17145, 15086.15086, 15086.16837, 15086.17144, 20131, 20293, 15105, 15107, 15109, 15174, 15175, 15260, 15284, 15299, 15353, 15354, 17244, 17245, 19324, 19416, 19568, 20185, 20300, 20362 и 20621.
[0019] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 связывается с эпитопом TIM-3 человека, содержащим:
a) остатки P50, V60, F61, E62, G64, R69, I117, M118 и D120 SEQ ID NO: 389;
b) остатки F61, R69 и I117 SEQ ID NO: 389; или
c) остатки P50, F61, E62, I117, M118 и D120 SEQ ID NO: 389.
[0020] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 связывается с эпитопом TIM-3 человека, содержащим:
a) остатки 62-67 SEQ ID NO: 389; или
b) остатки 114-117 SEQ ID NO: 389.
[0021] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 имеет по меньшей мере одно из следующих свойств:
a) связывается с TIM-3 человека с KD 23 нМ или менее, что измеряют с помощью поверхностного плазмонного резонанса;
b) связывается с TIM-3 яванского макака с KD 22 нМ или менее, что измеряют с помощью поверхностного плазмонного резонанса;
c) связывается с TIM-3 человека с EC50 1,2 нМ или менее, что измеряют с помощью ELISA;
d) связывается с TIM-3 яванского макака с EC50 46 нМ или менее, что измеряют с помощью ELISA;
e) увеличивает секрецию IFN-γ в анализе однонаправленной реакции смешанной культуры лимфоцитов;
f) увеличивает секрецию IFN-γ в анализе двунаправленной реакции смешанной культуры лимфоцитов;
g) увеличивает секрецию TNF-α в анализе однонаправленной реакции смешанной культуры лимфоцитов;
h) увеличивает секрецию TNF-α из дендритных клеток; и
i) ингибирует взаимодействие TIM-3 с фосфатидилсерином.
В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 имеет по меньшей мере свойства a), c), d), e), g), h) и i).
[0022] В некоторых вариантах осуществления H-CDR1-3 и L-CDR1-3 антитела против TIM-3 содержат аминокислотные последовательности из:
a) SEQ ID NO: 8-13, соответственно;
b) SEQ ID NO: 18-23, соответственно;
c) SEQ ID NO: 28-33, соответственно;
d) SEQ ID NO: 38-43, соответственно;
e) SEQ ID NO: 48-53, соответственно;
f) SEQ ID NO: 58-63, соответственно;
g) SEQ ID NO: 68-73, соответственно;
h) SEQ ID NO: 78-83, соответственно;
i) SEQ ID NO: 88-93, соответственно;
j) SEQ ID NO: 98-103, соответственно;
k) SEQ ID NO: 108-113, соответственно;
l) SEQ ID NO: 118-123, соответственно;
m) SEQ ID NO: 128-133, соответственно;
n) SEQ ID NO: 138-143, соответственно;
o) SEQ ID NO: 148-153, соответственно;
p) SEQ ID NO: 158-163, соответственно;
q) SEQ ID NO: 168-173, соответственно;
r) SEQ ID NO: 178-183, соответственно;
s) SEQ ID NO: 188-193, соответственно;
t) SEQ ID NO: 198-203, соответственно;
u) SEQ ID NO: 208-213, соответственно; или
v) SEQ ID NO: 218-223, соответственно.
[0023] В некоторых вариантах осуществления вариабельные домены тяжелой и легкой цепей антитела против TIM-3 содержат аминокислотные последовательности из:
a) SEQ ID NO: 7 и 4, соответственно;
b) SEQ ID NO: 3 и 4, соответственно;
c) SEQ ID NO: 16 и 17, соответственно;
d) SEQ ID NO: 26 и 27, соответственно;
e) SEQ ID NO: 36 и 37, соответственно;
f) SEQ ID NO: 46 и 47, соответственно;
g) SEQ ID NO: 56 и 57, соответственно;
h) SEQ ID NO: 66 и 67, соответственно;
i) SEQ ID NO: 76 и 77, соответственно;
j) SEQ ID NO: 86 и 87, соответственно;
k) SEQ ID NO: 96 и 97, соответственно;
l) SEQ ID NO: 106 и 107, соответственно;
m) SEQ ID NO: 116 и 117, соответственно;
n) SEQ ID NO: 126 и 127, соответственно;
o) SEQ ID NO: 136 и 137, соответственно;
p) SEQ ID NO: 146 и 147, соответственно;
q) SEQ ID NO: 156 и 157, соответственно;
r) SEQ ID NO: 166 и 167, соответственно;
s) SEQ ID NO: 176 и 177, соответственно;
t) SEQ ID NO: 186 и 187, соответственно;
u) SEQ ID NO: 196 и 197, соответственно;
v) SEQ ID NO: 206 и 207, соответственно; или
w) SEQ ID NO: 216 и 217, соответственно.
[0024] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 содержит:
a) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
b) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
c) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
d) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 27 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
e) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 36 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 37 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
f) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 46 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 47 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
g) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 56 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 57 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
h) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 66 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 67 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
i) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 76 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 77 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
j) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 86 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 87 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
k) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 96 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 97 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
l) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 106 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 107 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
m) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 116 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 117 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
n) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 126 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 127 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
o) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 136 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 137 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
p) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 146 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 147 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
q) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 156 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 157 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
r) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 166 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 167 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
s) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 176 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 177 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
t) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 186 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 187 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
u) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 196 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 197 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
v) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 206 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 207 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378; или
w) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 216 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 217 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378.
[0025] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 конкурирует с антителом, выбранным из группы, состоящей из 15532, 15646, 15723, 15595, 15431, 15572 и 15011, за связывание с LAG-3 человека или связывается с тем же самым эпитопом LAG-3 человека, что и оно.
[0026] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 связывается с эпитопом LAG-3 человека, содержащим:
a) остатки H85, P86, A87, P89, S91, W92 и G93 SEQ ID NO: 68;
b) остатки A40, Q41, P43, P46, P49, D52, T62, Q64, H65, Q66, P67, D68, G93, P94, P96, R98, Y99, T100, V101, P106, G107, R119, E124, R129, G130, D131, S133, R137, P138, D143, R148 и R163 SEQ ID NO: 68;
c) остатки A40, Q41, P43, P46, P49, D52, T62, Q64, H65, Q66, P67, D68, P96, Y99, T100, V101, P106, G107, R119, E124, R129, G130, D131, S133, R137, P138, D143, R148 и R163 SEQ ID NO: 68; или
d) остатки G107, L109, R110 и S111 SEQ ID NO: 68.
[0027] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 связывается с эпитопом LAG-3 человека, содержащим:
a) остатки 98-105 SEQ ID NO: 68;
b) остатки 78-105 и 123-131 SEQ ID NO: 68;
c) остатки 23-30, 40-66, 88-105, 123-137 и 148-152 SEQ ID NO: 68; или
d) остатки 23-30, 40-66, 98-105, 118-137 и 148-161 SEQ ID NO: 68.
[0028] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 имеет по меньшей мере одно из следующих свойств:
a) в концентрации 20 мкг/мл уменьшает связывание LAG-3 человека с MHC II класса человека в клетках A375 более чем на 85% по сравнению с антителом отрицательного контроля, что определяют с помощью конкурентного анализа методом проточной цитометрии;
b) в концентрации 20 мкг/мл уменьшает связывание LAG-3 человека с MHC II класса человека в клетках A375 до 35%-85% по сравнению с антителом отрицательного контроля, что определяют с помощью конкурентного анализа методом проточной цитометрии;
c) блокирует связывание между LAG-3 человека, экспрессируемым в клетках Jurkat, и MHC II класса человека, экспрессируемым в клетках Raji;
d) связывается с LAG-3 человека с EC50 0,1 нМ или менее, что измеряют с помощью проточной цитометрии;
e) связывается с LAG-3 яванского макака с EC50 0,3 нМ или менее, что измеряют с помощью проточной цитометрии;
f) связывается с LAG-3 человека с KD 3,0×10–8 или менее, что измеряют с помощью поверхностного плазмонного резонанса;
g) связывается с LAG-3 яванского макака с KD 1,5×10–7 или менее, что измеряют с помощью поверхностного плазмонного резонанса;
h) связывается с LAG-3 мыши с KD 3,5×10–8 или менее, что измеряют с помощью поверхностного плазмонного резонанса;
i) стимулирует выработку IL-2 в обработанных стафилококковым энтеротоксином B (SEB) мононуклеарных клетках периферической крови человека(PBMC);
j) уменьшает клеточные уровни LAG-3 в T-клетках человека;
k) уменьшает растворимые уровни LAG-3 в культуре T-клеток человека;
l) индуцирует регресс роста опухоли in vivo;
m) задерживает рост опухоли in vivo; и
n) не связывается с тем же самым эпитопом LAG-3 человека, что и антитело 25F7-Lag3.5.
В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 имеет по меньшей мере свойства a), c), d), e), f), g), i), j), k), m) и n).
[0029] В некоторых вариантах осуществления H-CDR1-3 и L-CDR1-3 антитела против LAG-3 содержат аминокислотные последовательности из:
a) SEQ ID NO: 318-323, соответственно;
b) SEQ ID NO: 308-313, соответственно;
c) SEQ ID NO: 328-333, соответственно;
d) SEQ ID NO: 338-343, соответственно;
e) SEQ ID NO: 348-353, соответственно;
f) SEQ ID NO: 358-363, соответственно; или
g) SEQ ID NO: 368-373, соответственно.
[0030] В некоторых вариантах осуществления вариабельные домены тяжелой и легкой цепей антитела против LAG-3 содержат аминокислотные последовательности из:
a) SEQ ID NO: 316 и 317, соответственно;
b) SEQ ID NO: 306 и 307, соответственно;
c) SEQ ID NO: 326 и 327, соответственно;
d) SEQ ID NO: 336 и 337, соответственно;
e) SEQ ID NO: 346 и 347, соответственно;
f) SEQ ID NO: 356 и 357, соответственно; или
g) SEQ ID NO: 366 и 367, соответственно.
[0031] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 содержит:
a) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 316 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 317 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
b) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 306 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 307 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
c) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 326 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 327 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
d) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 336 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 337 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
e) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 346 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 347 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
f) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 356 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 357 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378; или
g) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 366 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 367 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 379.
[0032] В некоторых вариантах осуществления способ включает введение пациенту:
a) антитела против PD-1, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 228-233, соответственно; и антитела против TIM-3, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 8-13, соответственно;
b) антитела против PD-1, VH и VL которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 226 и 227, соответственно; и антитела против TIM-3, VH и VL которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 7 и 4, соответственно; или
c) антитела против PD-1, содержащего HC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 226 и 375, и LC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 227 и 379; и антитела против TIM-3, содержащего HC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 7 и 377, и LC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4 и 378.
[0033] В некоторых вариантах осуществления способ включает введение пациенту:
a) антитела против PD-1, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 228-233, соответственно; и антитела против LAG-3, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 318-323, соответственно;
b) антитела против PD-1, VH и VL которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 226 и 227, соответственно; и антитела против LAG-3, VH и VL которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 316 и 317, соответственно; или
c) антитела против PD-1, содержащего HC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 226 и 375, и LC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 227 и 379; и антитела против LAG-3, содержащего HC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 316 и 375, и LC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 317 и 378.
[0034] В некоторых вариантах осуществления способ включает введение пациенту:
a) антитела против PD-1, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 228-233, соответственно; антитела против TIM-3, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 8-13, соответственно; и антитела против LAG-3, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 318-323, соответственно;
b) антитела против PD-1, VH и VL которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 226 и 227, соответственно; антитела против TIM-3, VH и VL которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 7 и 4, соответственно; и антитела против LAG-3, VH и VL которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 316 и 317, соответственно; или
c) антитела против PD-1, содержащего HC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 226 и 375, и LC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 227 и 379; антитела против TIM-3, содержащего HC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 7 и 377, и LC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4 и 378; и антитела против LAG-3, содержащего HC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 316 и 375, и LC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 317 и 378.
[0035] Антитела или антигенсвязывающие части можно вводить пациенту одновременно (например, в одной фармацевтической композиции) или последовательно.
[0036] Лекарственные средства согласно настоящему изобретению полезны при лечении пациента, у которого есть рак, такой как гематологическая злокачественная опухоль (например, лейкоз, лимфома Ходжкина или неходжкинская лимфома) или солидная опухоль. В некоторых вариантах осуществления у пациента может быть меланома, немелкоклеточный рак легкого, рак мочевого пузыря, плоскоклеточный рак головы и шеи, рак яичников, рак толстого кишечника, почечноклеточный рак, карцинома из клеток Меркеля, фибросаркома, глиосаркома или глиобластома. Кроме того, лекарственные средства согласно настоящему изобретению могут включать облучение или по меньшей мере одно из химиотерапевтического средства, противоопухолевого средства и антиангиогенного средства.
[0037] Также в настоящем изобретении представлено полиспецифическое (например, биспецифическое или триспецифическое) антитело, которое специфически связывается с: a) PD-1 человека и TIM-3 человека; b) PD-1 человека и LAG-3 человека; или c) PD-1 человека, TIM-3 человека и LAG-3 человека. В некоторых вариантах осуществления полиспецифическое антитело содержит антигенсвязывающую часть антитела против PD-1, которое описано в настоящем документе, антигенсвязывающую часть антитела против TIM-3, которое описано в настоящем документе, и/или антигенсвязывающую часть антитела против LAG-3, которое описано в настоящем документе.
[0038] Также в настоящем изобретении предоставлена фармацевтическая композиция, содержащая (1) антитело против PD-1 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, (2) антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающую часть и/или антитело против LAG-3 или его антигенсвязывающую часть и (3) фармацевтически приемлемое вспомогательное средство. Антитело против TIM-3 и антитело против LAG-3 можно выбирать из тех, что описаны в настоящем документе.
[0039] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит:
a) антитело против PD-1, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 228-233, соответственно; антитело против TIM-3, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 8-13, соответственно; и антитело против LAG-3, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 318-323, соответственно;
b) антитело против PD-1, VH и VL которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 226 и 227, соответственно; антитело против TIM-3, VH и VL которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 7 и 4, соответственно; и антитело против LAG-3, VH и VL которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 316 и 317, соответственно; или
c) антитело против PD-1, содержащее HC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 226 и 375, и LC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 227 и 379; антитело против TIM-3, содержащее HC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 7 и 377, и LC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4 и 378; и антитело против LAG-3, содержащее HC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 316 и 375, и LC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 317 и 378.
[0040] Антитела в композиции можно предоставить в равных количествах. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция предназначена для применения при лечении пациента-человека в способе, описанном в настоящем документе. В отдельных вариантах осуществления фармацевтическая композиция предназначена для применения для усиления иммунитета у нуждающегося в этом пациента-человека, например, для лечения рака.
[0041] В настоящем изобретении также представлено антитело против PD-1 или его антигенсвязывающая часть, которые описаны в настоящем документе, для применения в способе лечения, описанном в настоящем документе, например, для усиления иммунитета и/или лечения рака у нуждающегося в этом пациента-человека в комбинации с антителом против TIM-3 или его антигенсвязывающей частью и/или антителом против LAG-3 или его антигенсвязывающей частью. Антитело против TIM-3 и антитело против LAG-3 можно выбирать из тех, что описаны в настоящем документе.
[0042] В настоящем изобретении также представлено антитело против PD-1 или его антигенсвязывающая часть, которые описаны в настоящем документе, для применения при лечении пациента-человека в способе, описанном в настоящем документе.
[0043] В настоящем изобретении также представлено применение антитела против PD-1 или его антигенсвязывающей части, которые описаны в настоящем документе, для получения лекарственного средства для усиления иммунитета и/или лечения рака у нуждающегося в этом пациента (например, пациента-человека) в комбинации с антителом против TIM-3 или его антигенсвязывающей частью и/или антителом против LAG-3 или его антигенсвязывающей частью. В некоторых вариантах осуществления в настоящем изобретении предложено применение антитела против PD-1 или его антигенсвязывающей части, которые описаны в настоящем документе, и антитела против TIM-3 или его антигенсвязывающей части и/или антитела против LAG-3 или его антигенсвязывающей части, для получения лекарственного средства для усиления иммунитета у нуждающегося в этом пациента-человека, например, для лечения рака. Антитело против TIM-3 и антитело против LAG-3 можно выбирать из тех, что описаны в настоящем документе.
[0044] В настоящем изобретении также представлено применение антитела против PD-1 или его антигенсвязывающей части, которые описаны в настоящем документе, для получения лекарственного средства для лечения пациента-человека в способе, описанном в настоящем документе.
[0045] В настоящем изобретении дополнительно представлено готовое изделие, содержащее антитело против PD-1 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, в комбинации с антителом против TIM-3 или его антигенсвязывающей частью и/или антителом против LAG-3 или его антигенсвязывающей частью, причем указанное готовое изделие подходит для усиления иммунитета и/или лечения рака у пациента (такого как пациент-человек), например, в способе лечения, описанном в настоящем документе. Антитело против TIM-3 и антитело против LAG-3 можно выбирать из тех, что описаны в настоящем документе.
Краткое Описание чертежей
[0046] На фиг. 1 представлен набор графиков, показывающий процентное увеличение уровней IFN-γ у трех пар доноров (Панели A-C) после лечения 10 мкг/мл контрольного антитела (IgG1 LALA или IgG2), антитела против PD-1 12819, антитела 15086 против TIM-3.17145 или комбинации антител 12819 и 15086.17145 в соотношении 1:1 после 5 дней культивирования в анализе однонаправленной MLR (реакция смешанной культуры лимфоцитов). Каждая точка на графике представляет двойное значение, а среднее значение показано горизонтальной полосой.
[0047] На фиг. 2 представлен набор графиков, показывающий процентное увеличение уровней IFN-γ у трех пар доноров (Панели A-C) после лечения 10 мкг/мл контрольного антитела (IgG1 LALA или IgG2), антитела против PD-1 12819, антитела 15086 против TIM-3.17145 или комбинации антител 12819 и 15086.17145 в соотношении 1:1 после 5 дней культивирования в анализе двунаправленной MLR. Каждая точка на графике представляет двойное значение, а среднее значение показано горизонтальной полосой.
[0048] На фиг. 3 представлена пара графиков, показывающих действие антитела 15086 против TIM-3.17145 по сравнению с положительным контрольным антителом против PD-1 12819 на пролиферацию T-клеток в анализе однонаправленной MLR. Антитела добавляли до итоговой концентрации 25 мкг/мл и инкубировали с растворимыми антителами к CD3 (Панель B) или без них (Панель A) в течение 5 дней перед добавлением 1 μCi/лунку 3H-тимидина в течение дальнейших 18 часов. Включение 3H-тимидина в собранные клетки определяли с помощью жидкостного сцинтилляционного счетчика.
[0049] На фиг. 4 представлен график, показывающий действие антитела 15086 против TIM-3.17145 на секрецию IL-12p40 из полученных из моноцитов дендритных клеток, инкубированных в течение 5 дней с 10 мкг/мл антитела. Уровни IL-12p40 в супернатантах клеток определяли с использованием ELISA.
[0050] На фиг. 5 представлена пара графиков, показывающих уровни экспрессии выбранных маркеров активации в полученных из моноцитов дендритных клетках после лечения 25 мкг/мл антитела 15086 против TIM-3.17145 в течение 24 часов. На панели A показан анализ экспрессии генов нескольких маркеров активации и костимулирующих молекул. На панели B показано подтверждение повышенных уровней CD80 и Cd86 с использованием FACS. Показанные наложения гистограмм представляют дендритные клетки CD11c+, и числа рядом с гистограммами обозначают значения MFI (средней интенсивности флюоресценции).
[0051] На фиг. 6 представлен график, показывающий воздействие нацеливания TIM-3 на рост опухоли в CD34+ гуманизированной мышиной модели NSG-SGM3 с имплантированной ксенотрансплантатной моделью LG1306, полученной из легкого пациента-человека (PDX). Мышей лечили антителом против TIM-3 15086.17145 в начальной дозе 10 мг/кг с последующей 5 мг/кг 5x Q5D. Серая область обозначает период лечения. Данные представлены в виде средних значений ± SEM. ** p<0,01.
[0052] На фиг. 7 представлена пара графиков, показывающих усиленное воздействие на уровни IL-2 комбинирования антитела 12819 против PD-1 с антителом 15532 против LAG-3 и/или антителом 15086.17145 против TIM-3 в анализе SEB (стафилококкового энтеротоксина B) + PBMC (мононуклеарных клеток периферической крови) для двух пар доноров (Панели A и B). Столбики показывают секрецию IL-2 из PBMC, обработанных 10 мкг/мл указанных антител или смесей антител и SEB в течение 48 часов. Знаки над столбиками показывают раздельное лечение, которое значительно отличается (p<0,05) от контрольного антитела (*), или смеси двух антител, которые значительно отличаются от лечения составляющими отдельными антителами (#).
[0053] На фиг. 8 представлена пара графиков, показывающих действие на рост опухоли 10 мг/кг антитела 12819 против PD-1, антитела C9B7W против LAG-3 (которое способно реагировать с LAG-3 мыши) или комбинации антител против PD-1 и против LAG-3 или лечение нейтральной основой в двух сингенных мышиных опухолевых моделях: MC38 (рак толстой кишки, Панель A) и ASB-XIV (рак легкого, Панель B). Серая область обозначает период лечения. Данные представлены в виде средних значений ± SEM (стандартная ошибка среднего значения). ** p<0,01, ***p<0,001, ****p<0,0001.
[0054] На фиг. 9 представлен график, показывающий действие на рост опухоли 10 мг/кг антитела 12819 против PD-1, антитела 15011 против LAG-3 или комбинации антител против PD-1 и против LAG-3 или лечение нейтральной основой, в ASB-XIV сингенной мышиной опухолевой модели. Серая область обозначает период лечения. Данные представлены в виде средних значений ± SEM. * p<0,05, ****p<0,0001.
[0055] На фиг. 10 представлена пара графиков, показывающих действие на рост опухоли антитела 12819 против PD-1, антитела 5D12 против TIM-3 или комбинации антител против PD-1 и против TIM-3 или действие лечения нейтральной основой на рост опухоли в двух сингенных мышиных опухолевых моделях: ASB-XIV (рак легкого, Панель A) и Sa1N (фибросаркома, Панель B). Лечение антителами у мышей с опухолями ASB-XIV проводили в дозе 10 мг/кг/мишень. Мышам с опухолями Sa1N вводили антитела против PD-1 и против TIM-3 в дозе 1 мг/кг и 10 мг/кг, соответственно. Серая область обозначает период лечения. Данные представлены в виде средних значений ± SEM. ** p<0,01, ***p<0,001, и ****p<0,0001.
[0056] На фиг. 11 представлен набор графиков, показывающих действие на рост опухоли 10 мг/кг антитела 12819 против PD-1, антитела 15086 против TIM-3 или комбинации антител против PD-1 и против TIM-3 или лечение нейтральной основой в модели человеческого ксенотрансплантата опухоли, где мышам с воссозданными PBMC человека имплантировали клеточную линию A375 меланомы человека. В каждом эксперименте использовали одного человека-донора PBMC, и на трех графиках представлено три разных донора (Панели A-C). Серая область обозначает период лечения. Данные представлены в виде средних значений ± SEM. *p<0,05 и **p<0,01.
[0057] На фиг. 12 представлен набор графиков, показывающих действие отдельного и двойного нацеливания PD-1 и TIM-3 на процентное значение выживания (Панель A) и рост опухоли (Панели B-E) у NOD-scid мышей с имплантированной смесью PBMC человека и клеток меланомы A375. Мышей лечили антителом 12819 против PD-1, антителом 15086.17145 против TIM-3 или комбинацией антител против PD-1 и против TIM-3. Лечение антителами проводили в дозе 10 мг/кг три раза в неделю для каждого антитела. Серая область обозначает период лечения. Данные на панели A представлены в виде процентного значения мышей с размером опухоли <400 мм3 в каждой группе лечения с течением времени.
[0058] На фиг. 13 представлен набор графиков, показывающих влияние отдельного, двойного и тройного нацеливания PD-1, LAG-3 и TIM-3 на процентное значение выживания (Панель A) и рост опухоли (Панели B-H) в сингенной опухолевой модели ASB-XIV с использованием антитела 12819 против PD-1, антитела C9B7W против LAG-3, антитела 5D12 против TIM-3, комбинации антител против PD1 и против LAG3, комбинации антител против PD1 и против TIM-3 или «тройного комбинирования» (которое относится к комбинации антител против PD-1, против LAG-3 и против TIM-3). Лечение антителами проводили в дозе 10 мг/кг для каждого антитела. Серая область обозначает период лечения.
Подробное Описание Изобретения
[0059] В настоящем изобретении предложены новые комбинированные лекарственные средства и композиции, которые нацелены на PD-1 человека, TIM-3 человека и/или LAG-3 человека за счет использования антител, которые связывают эти мишени. Лекарственные средства и композиции можно использовать для усиления иммунной системы у пациента-человека, такого как онкопациент. В рамках настоящего изобретения если не указано иное «PD-1» относится к PD-1 человека. Полипептидная последовательность PD-1 человека доступна под учетным номером Uniprot Q15116, показанном в данном документе, как SEQ ID NO: 388. В рамках настоящего изобретения если не указано иное «TIM-3» относится к TIM-3 человека. Полипептидная последовательность TIM-3 человека доступна под учетным номером Uniprot Q8TDQ0, показанном в данном документе, как SEQ ID NO: 389. В рамках настоящего изобретения если не указано иное «LAG-3» относится к LAG-3 человека. Полипептидная последовательность LAG-3 человека доступна под учетным номером Uniprot P18627, показанные в данном документе, как SEQ ID NO: 390.
[0060] Термин «антитело» (Ab) или «иммуноглобулин» (Ig), в рамках настоящего изобретения относится к тетрамеру, содержащему две тяжелые (H) цепи (приблизительно 50-70 кДа) и две легкие (L) цепи (приблизительно 25 кДа), взаимосвязанные дисульфидными связями. Каждая тяжелая цепь состоит из вариабельного домена тяжелой цепи (VH) и константной области тяжелой цепи (CH). Каждая легкая цепь состоит из вариабельного домена легкой цепи (VL) и константной области легкой цепи (CL). Домены VH и VL можно дополнительно подразделить на области гипервариабельности, называемые «определяющие комплементарность области» (CDR), перемежающиеся с областями, которые являются более консервативными, называемыми «каркасные области» (FR). Каждая VH и VL состоит из трех CDR (H-CDR в настоящем документе обозначает CDR из тяжелой цепи; а L-CDR в настоящем документе обозначает CDR из легкой цепи) и четырех FR, расположенных от аминоконца к карбоксильному концу в следующем порядке: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. Назначение номеров аминокислот в тяжелой или легкой цепе может происходить в соответствии с определениями IMGT® (Lefranc et al. Dev Comp Immunol 27(1):55-77 (2003)); или определениями Kabat, Sequences of Proteins of Immunological Interest (National Institutes of Health, Bethesda, MD (1987 и 1991)); Chothia & Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987); или Chothia et al. Nature 342:878-883 (1989). Если не указано иное, все номера аминокислотных остатков антител, упоминаемых в этом раскрытии, представляют собой номера по схеме нумерации IMGT®.
[0061] Термин «рекомбинантное антитело» относится к антителу, которое экспрессируется из клетки или клеточной линии, содержащему нуклеотидную последовательность (последовательности), которые кодируют антитело, причем указанная нуклеотидная последовательность (последовательности) не связаны естественным образом с клеткой.
[0062] Термин «выделенный белок», «выделенный полипептид» или «выделенное антитело» относится к белку, полипептиду или антителу, которые из-за своего происхождения или источника получения (1) не связаны с природно ассоциированными компонентами, которые его сопровождают в нативном состоянии, (2) не содержат других белков того же вида, (3) экспрессируются клеткой другого вида и/или (4) не встречаются в природе. Таким образом, полипептид, который синтезирован химически или синтезирован в клеточной системе, отличающейся от клетки, из которой он естественным образом происходит, будет «выделен» из его природно ассоциированных компонентов. Белок также можно сделать по существу не содержащим природно ассоциированных компонентов путем выделения с использованием технологий очистки белков, хорошо известных в данной области.
[0063] Термин «аффинность» относится к мере притяжения между антигеном и антителом. Присущую силу притяжения антитела для антигена обычно выражают в виде константы равновесия аффинности связывания (KD) конкретного взаимодействия антитело-антиген. Считается, что антитело специфически связывается с антигеном, когда KD составляет ≤ 1 мМ, предпочтительно ≤ 100 нМ. Константу аффинности связывания KD можно измерять, например, с помощью поверхностного плазмонного резонанса (SPR) (BIAcoreTM) или биослойной интерферометрии, например, с использованием системы IBIS MX96 SPR от IBIS Technologies, системы ProteOnTM XPR36 SPR от Bio-Rad или системы OctetTM от ForteBio.
[0064] Термин «koff» относится к константе скорости диссоциации конкретного взаимодействия антитело-антиген. Константу скорости диссоциации koff можно измерять, например, с помощью биослойной интерферометрии, например, с использованием одной из перечисленных выше систем.
[0065] Термин «эпитоп» в рамках настоящего изобретения относится к участку (детерминанте) антигена, который специфически связывается с антителом или связанной молекулой, такой как биспецифическая связывающая молекула. Эпитопные детерминанты обычно состоят из химически активных поверхностных групп молекул, таких как боковые цепи аминокислот или углеводов или сахаров, и обычно имеют специфические трехмерные структурные характеристики, а также специфические характеристики заряда. Эпитоп может быть «линейным» или «конформационным». В линейном эпитопе все точки взаимодействия между белком (например, антигеном) и взаимодействующей молекулой (такой как антитело) расположены линейно вдоль первичной аминокислотной последовательности белка. В конформационном эпитопе точки взаимодействия расположены поперек аминокислотных остатков на белке, которые отделены друг от друга в первичной аминокислотной последовательности. После определения нужного эпитопа на антигене можно получать антитела к этому эпитопу с использованием технологий, хорошо известных в данной области. Например, антитело к линейному эпитопу можно получать, например, путем иммунизации животного пептидом, имеющим аминокислотные остатки линейного эпитопа. Антитело к конформационному эпитопу можно получать, например, путем иммунизации животного мини-доменом, содержащим соответствующие аминокислотные остатки конформационного эпитопа. Антитело к конкретному эпитопу также можно получить, например, путем иммунизации животного интересующей молекулой-мишенью или соответствующей ее частью, затем скрининга на связывание с эпитопом.
[0066] Связывается ли антитело с тем же самым эпитопом, что и антитело, которое описано в настоящем документе, или конкурирует за связывание с ним, можно определить за счет использования способов, известных в данной области, включая, без ограничения, конкурентные анализы, эпитоп-специфическая сортировка и аланиновое сканирование. В некоторых вариантах осуществления тестируемое антитело и антитело, которое описано в настоящем документе, связывают по меньшей мере с одним общим остатком (например, по меньшей мере с двумя, тремя, четырьмя, пятью, шестью, семью, восемью или девятью остатками) на белке-мишени (т.е. TIM-3, PD-1 или LAG-3). В дополнительных вариантах осуществления контактные остатки в белке-мишени полностью идентичны между тестируемым антителом и антителом, которое описано в настоящем документе. В одном варианте осуществления обеспечивают связывание антитела, которое описано в настоящем документе, с белком-мишенью в условиях насыщения, а затем измеряют способность тестируемого антитела связываться с белком-мишенью. Если тестируемое антитело способно связываться с белком-мишенью одновременно с эталонным антителом, то тестируемое антитело связывается с другим эпитопом, чем эталонное антитело. Однако, если тестируемое антитело не способно одновременно связываться с белком-мишенью, то тестируемое антитело связывается с тем же самым эпитопом, перекрывающимся эпитопом или эпитопом, который находится в непосредственной близости к эпитопу, связанному антителом, которое описано в настоящем документе. Этот эксперимент можно проводить с использованием, например, ELISA, RIA, BIACORETM, SPR, биослойной интерферометрии или проточной цитометрии. Для тестирования, конкурирует ли антитело с другим антителом, можно применить описанный выше метод конкуренции в двух направлениях, т.е. определение, блокирует ли известное антитело тестируемое антитело и наоборот. Подобные эксперименты с перекрестной конкуренцией можно проводить, например, с использованием прибора IBIS MX96 SPR или системы OctetTM.
[0067] Термин «химерное антитело» в самом широком смысле относится к антителу, которое содержит одну или более областей из одного антитела и одну или более областей из одного или более других антител, обычно это антитело, которое имеет частично человеческое происхождение, а частично нечеловеческое происхождение, т.е. частично получено от нечеловеческого животного, например, мыши, крысы или другого грызуна или птицы, такой как курица. Химерные антитела являются предпочтительными по сравнению с нечеловеческими антителами, чтобы снизить риск антительного ответа у человека, например, ответа человеческих противомышиных антител в случае мышиного антитела. Примером обычного химерного антитела является антитело, в котором последовательности вариабельного домена являются мышиными, тогда как последовательности константной области являются человеческими. В случае химерного антитела нечеловеческие части можно подвергать дополнительному изменению, чтобы гуманизировать антитело. Химерные антитела, описанные в настоящем документе, имеют куриные последовательности вариабельного домена и человеческие последовательности константной области.
[0068] Термин «гуманизировать» относится к тому факту, что, когда антитело имеет полностью или частично нечеловеческое происхождение (например, мышиное или куриное антитело, полученное в результате иммунизации мышей или куриц, соответственно, интересующим антигеном, или химерное антитело на основе такого мышиного или куриного антитела), можно заменить некоторые аминокислоты, в частности в каркасных областях и константных областях тяжелой и легкой цепей, чтобы избежать или минимизировать иммунный ответ у людей. Хотя невозможно точно спрогнозировать иммуногенность и, следовательно, антительный ответ у человека на конкретное антитело, нечеловеческие антитела имеют тенденцию быть более иммуногенными у людей, чем человеческие антитела. Было показано, что химерные антитела, где инородные константные области (например, грызунов или птиц) были заменены последовательностями человеческого происхождения, обычно являются менее иммуногенными, чем антитела полностью инородного происхождения, и в терапевтических антителах наблюдается тенденция к гуманизированным или полностью человеческим антителам. Таким образом, чтобы снизить риск антительного ответа у человека, можно гуманизировать химерные антитела или другие антитела нечеловеческого происхождения.
[0069] Для химерных антител гуманизация обычно включает модифицирование каркасных областей последовательностей вариабельного домена. В связи с гуманизацией чаще всего не следует изменять аминокислотные остатки, которые являются частью определяющих комплементарность областей (CDR), хотя в некоторых случаях может быть необходимо изменить отдельные аминокислотные остатки CDR, например, для удаления сайта гликозилирования, сайта дезамидирования, сайта изомеризации аспартата или ненужного остатка цистеина или метионина. N-связанное гликозилирование происходит путем присоединения олигосахаридной цепи к остатку аспарагина в трипептидной последовательности Asn-X-Ser или Asn-X-Thr, где X может быть любая аминокислота за исключением Pro. Удаление сайта N-гликозилирования можно обеспечить за счет мутации либо остатка Asn, либо Ser/Thr с другим остатком, предпочтительно путем консервативного замещения. Дезамидирование остатков аспарагина и глютамина может происходить в зависимости от таких факторов, как pH и поверхностное воздействие. Особенно чувствительны к дезамидированию остатки аспарагина, прежде всего, когда они присутствуют в последовательности Asn-Gly, и в меньшей степени в других дипептидных последовательностях, таких как Asn-Ala. Когда в последовательности CDR представлен такой сайт дезамидирования, в частности Asn-Gly, может быть поэтому желательно удалить сайт, обычно путем консервативного замещения, для удаления одного из вовлеченных остатков.
[0070] В данной области известно множество способов гуманизации последовательности антител; см., например, обзор Almagro & Fransson, Front Biosci. 13: 1619-1633 (2008). Одним из обычно используемых способов является трансплантация CDR, которая, например, для химерного антитела, полученного у мыши, включает идентификацию аналогов гена зародышевой линии человека по генам вариабельного домена мыши и трансплантацию в этот каркас последовательностей мышиной CDR. Специфичность взаимодействия антитела с антигеном-мишенью заключается главным образом в аминокислотных остатках, расположенных в шести CDR тяжелой и легкой цепи. Следовательно, аминокислотные последовательности в CDR гораздо более вариабельны между отдельными антителами, чем последовательности вне CDR. Поскольку последовательности CDR ответственны за большинство взаимодействий антитело-антиген, можно экспрессировать рекомбинантные антитела, которые имитируют свойства специфического встречающегося в природе антитела или, в более общем случае, любого специфического антитела с данной аминокислотной последовательностью, например, путем конструирования векторов экспрессии, которые экспрессируют последовательности CDR из конкретного антитела, трансплантированные в каркасные последовательности из другого антитела. В результате, можно «гуманизировать» нечеловеческое антитело и при этом по существу сохранить специфичность связывания и аффинность исходного антитела. Трансплантация CDR может быть основана на определениях CDR Кабата, хотя в более поздней публикации (Magdelaine-Beuzelin et al., Crit Rev.Oncol Hematol. 64: 210-225 (2007)) высказано предположение, что определение IMGT® (международная информационная система® ImMunoGeneTics, www.imgt.org) может улучшить результат гуманизации (см. Lefranc et al., Dev. Comp Immunol. 27: 55-77 (2003)).
[0071] В некоторых случаях трансплантация CDR может снижать специфичность и аффинность связывания и, следовательно, биологическую активность нечеловеческого антитела с трансплантированной CDR по сравнению с родительским антителом, из которого получены CDR. Для восстановления специфичности и аффинности связывания родительского антитела в выбранные позиции антитела с трансплантированной CDR, обычно в каркасных областях, можно вводить обратные мутации (иногда называемые «восстановление каркаса»). Позиции для возможных обратных мутаций можно идентифицировать с использованием информации доступной в литературе и базах данных антител. Аминокислотными остатками, которые являются кандидатами для обратных мутаций, обычно являются остатки, которые находятся на поверхности молекулы антитела, тогда как остатки, которые находятся внутри или которые имеют низкую степень воздействия на поверхность, обычно не будут изменяться.
[0072] Альтернативной технологией гуманизации для трансплантации CDR и обратной мутации является изменение поверхности, при которой не открытые на поверхности остатки нечеловеческого происхождения сохраняют, в то время как остатки на поверхности изменяют на остатки человека.
[0073] В некоторых случаях для улучшения аффинности связывания с эпитопом-мишенью может быть необходимо изменить один или более аминокислотных остатков CDR. Это известно как «созревание аффинности». В данной области известны различные способы созревания аффинности, например, метод сканирующего насыщающего мутагенеза in vitro, описанный Burks et al. Proc Natl Acad Sci USA, 94:412-417 (1997), и метод поэтапного созревания аффинности in vitro Wu et al. Proc Natl Acad Sci USA 95:6037-6042 (1998).
[0074] Термин «человеческое антитело» относится к антителу, в котором последовательности вариабельного домена и константной области получают из человеческих последовательностей. Термин охватывает антитела с последовательностями, которые получены из генов человека, но были модифицированы, например, для уменьшения иммуногенности, увеличения аффинности и/или увеличения стабильности. Кроме того, термин охватывает антитела, полученные рекомбинантно с использованием полученных от человека последовательностей в нечеловеческих клетках, которые могут передавать гликозилирование, не характерное для клеток человека. Термин также охватывает антитела, полученные в трансгенных нечеловеческих организмах с генами антител человека (например, у крыс OmniRat®).
[0075] В рамках настоящего изобретения термин «антигенсвязывающая часть» антитела (или просто «часть антитела»), относится к одному или более участкам или фрагментам антитела, которые сохраняют способность специфически связываться с антигеном (например, TIM-3 человека, PD-1 человека или LAG-3 человека или их частями). Было показано, что некоторые фрагменты полноразмерного антитела могут выполнять антигенсвязывающую функцию антитела. Примеры связывающих фрагментов, охватываемых термином «антигенсвязывающая часть», включают в себя (i) фрагмент Fab: моновалентный фрагмент, состоящий из доменов VL, VH, CL и CH1; (ii) фрагмент F(ab')2: бивалентный фрагмент, содержащий два фрагмента Fab, связанных дисульфидным мостиком в шарнирной области; (iii) фрагмент Fd, состоящий из доменов VH и CH1; (iv) фрагмент Fv, состоящий из доменов VL и VH одного плеча антитела, (v) фрагмент dAb, который состоит из домена VH; и (vi) выделенную определяющую комплементарность область (CDR), способную специфически связываться с антигеном. Кроме того, хотя два домена фрагмента Fv, VL и VH кодируются отдельными генами, их можно объединить, используя рекомбинантные способы, синтетическим линкером, который позволяет получить их в виде единой белковой цепи, в которой пара доменов VL и VH образует моновалентные молекулы (известные как одноцепочечные Fv (scFv)). Также в рамках изобретения находятся антигенсвязывающие молекулы, содержащие VH и/или VL. В случае VH молекула может также содержать одно или более из области CH1, шарнира, CH2 или CH3. Подобные одноцепочечные антитела также предполагают охват термином «антигенсвязывающая часть» антитела. Также охвачены другие формы одноцепочечных антител, такие как диатела. Диатела представляют собой бивалентные, биспецифические антитела, в которых домены VH и VL экспрессируются на одной полипептидной цепи, но с использованием линкера, который является слишком коротким, чтобы обеспечить спаривание между двумя доменами на одной и той же цепи, тем самым вынуждая домены спариваться с комплементарными доменами другой цепи и создавая два антигенсвязывающих сайта.
[0076] Части антител, такие как фрагменты Fab и F(ab')2, можно получать из целых антител с использованием общепринятых методов, таких как расщепление целых антител папаином или пепсином. Кроме того, антитела, части антител и молекулы иммуноадгезии можно получать с использованием стандартных методов рекомбинантной ДНК, например, которые описаны в настоящем документе.
[0077] Класс (изотип) и подкласс описанных в настоящем документе антител можно определить любым способом, известным в данной области. Обычно, класс и подкласс антитела можно определить с использованием антител, которые являются специфическими для конкретного класса и подкласса антитела. Такие антитела имеются в продаже. Класс и подкласс можно определить с помощью ELISA и вестерн-блоттинга, а также других методов. Альтернативно, класс и подкласс можно определить путем секвенирования всех или части константных областей тяжелых и/или легких цепей антител, сравнения их аминокислотных последовательностей с известными аминокислотными последовательностями различных классов и подклассов иммуноглобулинов и определения класса и подкласса антител. Предпочтительным изотипом согласно настоящему изобретению является изотип IgG.
[0078] При ссылке на конкретные аминокислотные остатки в данной позиции последовательности антитела указание, например, «35S» относится к позиции и остатку, то есть в этом случае указывает на наличие остатка серина (S) в позиции 35 последовательности. Точно так же указание, например, «13Q+35S» относится к двум остаткам в соответствующих позициях. Если не указано иное, все номера аминокислотных остатков антител, упомянутые в этом описании, соответствуют номерам в схеме нумерации IMGT®.
Антитела против PD-1
[0079] В некоторых вариантах осуществления антитела против PD-1, раскрытые в настоящем документе, могут быть химерными, с вариабельными доменами, полученными от куриц, и человеческими константными областями, или могут быть гуманизированными.
[0080] Антитела против PD-1, раскрытые в настоящем документе, могут быть обозначены либо 5-значным номером, например, «12819», либо 10-значным номером, например, «12819.15384». В рамках настоящего изобретения 5-значный номер относится ко всем антителам, имеющим последовательности CDR1-3 тяжелой и легкой цепей, показанные для этого номера, тогда как применение 10-значного номера относится к конкретному гуманизированному варианту. Например, 12819.15384 представляет собой конкретный гуманизированный вариант, имеющий последовательности CDR антитела 12819. 5-значный номер охватывает, например, 10-значные варианты, которые являются идентичными за исключением некоторых изменений в FR (например, отсутствие остатков SY на N-конце зрелой легкой цепи или наличие остатков SS вместо SY). Эти модификации не изменяют функциональные (например, антигенсвязывающие) свойства антител.
[0081] В некоторых вариантах осуществления комбинированное лекарственное средство или композиция содержит антитело против PD-1 или его антигенсвязывающую часть, причем антитело против PD-1 представляет собой антитело, упоминаемое в настоящем документе, как антитело 12819.15384, 12748.15381, 12748.16124, 12865.15377, 12892.15378, 12796.15376, 12777.15382, 12760.15375 или 13112.15380 или вариант любого из них, причем вариант может, например, содержать некоторые минимальные аминокислотные изменения относительно указанного антитела (например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 аминокислотных изменений, которые могут быть, например, в каркасных областях) без потери антигенсвязывающей специфичности антитела.
[0082] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 конкурирует с любым из антител 12819.15384, 12748.15381, 12748.16124, 12865.15377, 12892.15378, 12796.15376, 12777.15382, 12760.15375 и 13112.15380 за связывание с PD-1 человека или связывается с тем же самым эпитопом PD-1 человека, что и они.
[0083] В некоторых вариантах осуществления любое из антител против PD-1 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может конкурировать или перекрестно конкурировать с антителами 12865, 12892 и 12777 (например, антителами 12865.15377, 12892.15378 и 12777.15382) за связывание с PD-1. В некоторых вариантах осуществления любое из антител против PD-1 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может конкурировать или перекрестно конкурировать с антителом 12819 (например, антителом 12819.15384) за связывание с PD-1. В некоторых вариантах осуществления любое из антител против PD-1 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может конкурировать или перекрестно конкурировать с антителами 12760 и 13112 (например, антителами 12760.15375 и 13112.15380) за связывание с PD-1. В некоторых вариантах осуществления антитело имеет формат IgG1 или IgG2. В некоторых вариантах осуществления антитело имеет формат IgG1.
[0084] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 конкурирует или перекрестно конкурирует с антителом, CDR1-3 тяжелой цепи (H) и CDR1-3 легкой цепи (L) которого содержат, соответственно, SEQ ID NO: 228-233, 238-243, 248-253, 258-263, 268-273, 278-283, 288-293 или 298-303, за связывание с PD-1 человека, или связывается с тем же самым эпитопом PD-1 человека, что и оно.
[0085] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 содержит H-CDR3, содержащую аминокислотную последовательность H-CDR3 SEQ ID NO: 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290 или 300.
[0086] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 содержит H-CDR1-3, содержащие аминокислотные последовательности H-CDR1-3, соответственно, из SEQ ID NO: 228-230, 238-240, 248-250, 258-260, 268-270, 278-280, 288-290 или 298-300.
[0087] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 имеет VH, аминокислотная последовательность которого по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична SEQ ID NO: 226, 236, 246, 256, 266, 276, 286 или 296.
[0088] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 имеет VH, который содержит SEQ ID NO: 226, 236, 246, 256, 266, 276, 286 или 296.
[0089] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 имеет VH, последовательность которого по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична SEQ ID NO: 226, 236, 246, 256, 266, 276, 286 или 296; и CH, последовательность которой по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична SEQ ID NO: 375.
[0090] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 имеет HC, которая содержит аминокислотную последовательность VH SEQ ID NO: 226, 236, 246, 256, 266, 276, 286 или 296 и аминокислотную последовательность CH SEQ ID NO: 375.
[0091] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 имеет L-CDR3, содержащую аминокислотную последовательность L-CDR3 SEQ ID NO: 233, 243, 253, 263, 273, 283, 293 или 303.
[0092] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 содержит L-CDR1-3, содержащие аминокислотные последовательности L-CDR1-3, соответственно, SEQ ID NO: 231-233, 241-243, 251-253, 261-263, 271-273, 281-283, 291-293 или 301-303.
[0093] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 имеет VL, последовательность которого по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична аминокислотной последовательности VL SEQ ID NO: 227, 237, 247, 257, 267, 277, 287, 297 или 392.
[0094] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 имеет VL, который содержит аминокислотную последовательность VL SEQ ID NO: 227, 237, 247, 257, 267, 277, 287, 297 или 392.
[0095] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 имеет VL, последовательность которого по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична аминокислотной последовательности VL SEQ ID NO: 227, 237, 247, 257, 267, 277, 287, 297 или 392; и CL, последовательность которой по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична SEQ ID NO: 379.
[0096] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 имеет LC, которая содержит аминокислотную последовательность VL SEQ ID NO: 227, 237, 247, 257, 267, 277, 287, 297 или 392 и аминокислотную последовательность CL SEQ ID NO: 379.
[0097] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 содержит любую из приведенных выше последовательностей тяжелой цепи и любую из приведенных выше последовательностей легкой цепи.
[0098] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 содержит H-CDR3 и L-CDR3, содержащие аминокислотные последовательности H-CDR3 и L-CDR3, соответственно, из SEQ ID NO: 230 и 233, 240 и 243, 250 и 253, 260 и 263, 270 и 273, 280 и 283, 290 и 293 или 300 и 303.
[0099] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 содержит H-CDR1-3 и L-CDR1-3, содержащие последовательности H-CDR1-3 и L-CDR1-3, соответственно, из SEQ ID NO: 228-233, 238-243, 248-253, 258-263, 268-273, 278-283, 288-293 или 298-303.
[0100] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 содержит VH, последовательность которого по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 226, 236, 246, 256, 266, 276, 286 или 296, и VL, последовательность которого по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 227, 237, 247, 257, 267, 277, 287, 297 или 392.
[0101] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 имеет VH, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 226, 236, 246, 256, 266, 276, 286 или 296, и VL, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 227, 237, 247, 257, 267, 277, 287, 297 или 392.
[0102] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 имеет HC, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 226, 236, 246, 256, 266, 276, 286 или 296 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375; и LC, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 227, 237, 247, 257, 267, 277, 287, 297 или 392 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 379.
[0103] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 содержит аминокислотные последовательности H-CDR1-3 и L-CDR1-3 из:
a) SEQ ID NO: 228-233, соответственно;
b) SEQ ID NO: 238-243, соответственно;
c) SEQ ID NO: 248-253, соответственно;
d) SEQ ID NO: 258-263, соответственно;
e) SEQ ID NO: 268-273, соответственно;
f) SEQ ID NO: 278-283, соответственно;
g) SEQ ID NO: 288-293, соответственно; или
h) SEQ ID NO: 298-303, соответственно.
[0104] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 содержит VH и VL, имеющие аминокислотные последовательности из:
a) SEQ ID NO: 226 и 227, соответственно;
b) SEQ ID NO: 236 и 237, соответственно;
c) SEQ ID NO: 236 и 392, соответственно;
d) SEQ ID NO: 246 и 247, соответственно;
e) SEQ ID NO: 256 и 257, соответственно;
f) SEQ ID NO: 266 и 267, соответственно;
g) SEQ ID NO: 276 и 277, соответственно;
h) SEQ ID NO: 286 и 287, соответственно; или
i) SEQ ID NO: 296 и 297, соответственно.
[0105] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 содержит:
a) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 226 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 227 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 379;
b) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 236 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 237 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 379;
c) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 236 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 392 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 379;
d) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 246 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 247 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 379;
e) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 256 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 257 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 379;
f) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 266 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 267 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 379;
g) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 276 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 277 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 379;
h) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 286 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 287 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 379; или
i) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 296 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 297 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 379.
[0106] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 228-230, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 226;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 226;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 226 и 375;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 231-233, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 227;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 227;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 227 и 379;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 228-233, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 226, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 227;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 226, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 227; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 226 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 227 и 379.
[0107] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 238-240, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 236;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 236;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 236 и 375;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 241-243, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 237;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 237;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 237 и 379;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 238-243, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 236, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 237;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 236, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 237; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 236 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 237 и 379.
[0108] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 238-240, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 236;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 236;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 236 и 375;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 241-243, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 392;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 392;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 392 и 379;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 238-243, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 236, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 392;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 236, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 392; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 236 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 392 и 379.
[0109] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 248-250, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 246;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 246;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 246 и 375;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 251-253, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 247;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 247;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 247 и 379;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 248-253, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 246, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 247;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 246, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 247; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 246 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 247 и 379.
[0110] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 258-260, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 256;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 256;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 256 и 375;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 261-263, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 257;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 257;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 257 и 379;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 258-263, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 256, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 257;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 256, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 257; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 256 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 257 и 379.
[0111] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 268-270, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 266;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 266;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 266 и 375;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 271-273, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 267;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 267;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 267 и 379;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 268-273, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 266, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 267;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 266, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 267; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 266 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 267 и 379.
[0112] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 278-280, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 276;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 276;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 276 и 375;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 281-283, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 277;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 277;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 277 и 379;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 278-283, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 276, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 277;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 276, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 277; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 276 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 277 и 379.
[0113] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 288-290, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 286;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 286;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 286 и 375;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 291-293, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 287;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 287;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 287 и 379;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 288-293, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 286, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 287;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 286, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 287; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 286 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 287 и 379.
[0114] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 298-300, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 296;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 296;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 296 и 375;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 301-303, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 297;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 297;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 297 и 379;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 298-303, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 296, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 297;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 296, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 297; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 296 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 297 и 379.
[0115] В некоторых вариантах осуществления любое из антител против PD-1 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может связываться с PD-1 человека с KD по меньшей мере 900, по меньшей мере 850, по меньшей мере 800, по меньшей мере 750, по меньшей мере 700, по меньшей мере 650, по меньшей мере 600, по меньшей мере 550, по меньшей мере 500, по меньшей мере 450, по меньшей мере 400, по меньшей мере 350, по меньшей мере 300, по меньшей мере 250, по меньшей мере 200, по меньшей мере 150, по меньшей мере 100, по меньшей мере 50, по меньшей мере 40, по меньшей мере 30 или по меньшей мере 20 пМ. В некоторых вариантах осуществления KD определяют с использованием поверхностного плазмонного резонанса. В отдельных вариантах осуществления антитела против PD-1 или антигенсвязывающие части связываются с PD-1 человека с более высокой аффинностью, чем ниволумаб, пембролизумаб или и то и другое.
[0116] В некоторых вариантах осуществления любое из антител против PD-1 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может связываться с PD-1 яванского макака с KD по меньшей мере 9000, по меньшей мере 8000, по меньшей мере 7000, по меньшей мере 6000, по меньшей мере 5000, по меньшей мере 4000, по меньшей мере 3000, по меньшей мере 2500, по меньшей мере 2000, по меньшей мере 1500, по меньшей мере 1000, по меньшей мере 900, по меньшей мере 800, по меньшей мере 700, по меньшей мере 600, по меньшей мере 500, по меньшей мере 400, по меньшей мере 300, по меньшей мере 200, по меньшей мере 100, по меньшей мере 75, по меньшей мере 50, по меньшей мере 25, по меньшей мере 20, по меньшей мере 15, по меньшей мере 10 или по меньшей мере 5 пМ. В некоторых вариантах осуществления KD определяют с использованием поверхностного плазмонного резонанса.
[0117] В некоторых вариантах осуществления любое из антител против PD-1 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может связываться с PD-1 мыши с KD по меньшей мере 1000, по меньшей мере 950, по меньшей мере 900 или по меньшей мере 850 пМ. В некоторых вариантах осуществления KD определяют с использованием поверхностного плазмонного резонанса.
[0118] В некоторых вариантах осуществления любое из антител против PD-1 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может ингибировать взаимодействие PD-1 с PD-L1 по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 65%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 75%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 81%, по меньшей мере на 82%, по меньшей мере на 83%, по меньшей мере на 84%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 86%, по меньшей мере на 87%, по меньшей мере на 88%, по меньшей мере на 89%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98%, по меньшей мере на 99% или на 100% в концентрации 10 мкг/мл в конкурентном анализе методом проточной цитометрии. В некоторых вариантах осуществления антитела против PD-1 или антигенсвязывающие части могут ингибировать взаимодействие PD-1 с PD-L1 по меньшей мере на 83%.
[0119] В некоторых вариантах осуществления любое из антител против PD-1 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может блокировать связывание PD-L1 и PD-L2 с PD-1 по меньшей мере на 20%, по меньшей мере на 30%, по меньшей мере на 40%, по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98%, по меньшей мере на 99% или на 100% в концентрации 10 мкг/мл, что определяют с помощью анализа методом биослойной интерферометрии. В некоторых вариантах осуществления антитела против PD-1 или антигенсвязывающие части блокируют связывание PD-L1 и PD-L2 с PD-1 по меньшей мере на 90%.
[0120] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 или антигенсвязывающая часть, описанная в настоящем документе, имеет по меньшей мере одно из следующих свойств:
a) связывается с PD-1 человека с KD 750 пМ или менее;
b) связывается с PD-1 яванского макака с KD 7 нМ или менее;
c) связывается с PD-1 мыши с KD 1 нМ или менее;
d) не связывается с PD-1 крысы;
e) увеличивает секрецию IL-2 в анализе стимулированной SEB цельной крови;
f) увеличивает секрецию IFN-γ в анализе однонаправленной реакции смешанной культуры лимфоцитов;
g) ингибирует взаимодействие PD-1 с PD-L1 по меньшей мере на 60% в концентрации 10 мкг/мл в конкурентном анализе методом проточной цитометрии;
h) блокирует связывание PD-L1 и PD-L2 с PD-1 по меньшей мере на 90% в концентрации 10 мкг/мл, что определяют с помощью анализа методом биослойной интерферометрии; и
i) ингибирует рост опухоли in vivo.
Примеры такого антитела включают в себя, без ограничения, антитело 12819 (имеющее свойства a-i); антитела 12748, 12892 и 12777 (имеющие по меньшей мере свойства a, b и e-h); антитела 12865 и 12796 (имеющие по меньшей мере свойства a, b, e, f и h) и антитела 12760 и 13112 (имеющие по меньшей мере свойства a, b, e и f). В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 или антигенсвязывающая часть имеет все указанные свойства. В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 или антигенсвязывающая часть имеет по меньшей мере свойства a, b и e-h. В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 или антигенсвязывающая часть имеет по меньшей мере свойства a, b, e, f и h. В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 или антигенсвязывающая часть имеет по меньшей мере свойства a, b, e и f.
[0121] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 или его антигенсвязывающая часть, которые описаны в настоящем документе, связывается с эпитопом PD-1, который содержит по меньшей мере один (например, по меньшей мере один, по меньшей мере два, по меньшей мере три, по меньшей мере четыре или по меньшей мере пять) следующих остатков SEQ ID NO: 388: V44, V64, L128, P130, K131, A132, E136 и T145. В некоторых вариантах осуществления антитело или антигенсвязывающая часть связывается с эпитопом PD-1, который содержит остатки V64, L128, P130, K131 и A132 SEQ ID NO: 388 (например, антитело 12819, например, антитело 12819.15384). В некоторых вариантах осуществления антитело или антигенсвязывающая часть связывается с эпитопом PD-1, который содержит остатки K131 и E136 SEQ ID NO: 388 (например, антитело 12865, например, антитело 12865.15377). В некоторых вариантах осуществления антитело или антигенсвязывающая часть связывается с эпитопом PD-1, который содержит остатки V44 и T145 SEQ ID NO: 388 (например, антитело 13112, например, антитело 13112.15380).
[0122] В некоторых вариантах осуществления комбинированное лекарственное средство или композиция содержит антитело против PD-1 или его антигенсвязывающую часть, которая связывается с эпитопом PD-1, содержащим аминокислотный остаток K131 SEQ ID NO: 388 (например, антитело 12819 или 12865). В некоторых вариантах осуществления эпитоп дополнительно содержит аминокислотные остатки P130 и A132 и может дополнительно содержать аминокислотные остатки V64 и L128 (например, антитело 12819). В некоторых вариантах осуществления эпитоп дополнительно содержит аминокислотный остаток E136 (например, антитело 12865).
[0123] В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 или его антигенсвязывающая часть, которые описаны в настоящем документе, связывается с эпитопом PD-1, который содержит остатки 56-64, 69-90 и/или 122-140 SEQ ID NO: 388. В некоторых вариантах осуществления антитело или антигенсвязывающая часть связывается с эпитопом PD-1, который содержит остатки 69-90 и 122-140 SEQ ID NO: 388 (например, антитела 12819 и 12865, например, антитела 12819.15384 и 12865.15377). В некоторых вариантах осуществления антитело или антигенсвязывающая часть связывается с эпитопом PD-1, который содержит остатки 56-64, 69-90 и 122-140 SEQ ID NO: 388 (например, антитело 12819). В некоторых вариантах осуществления антитело или антигенсвязывающая часть связывается с эпитопом PD-1, который содержит остатки 69-90 и 122-140 SEQ ID NO: 388 (например, антитело 12865). В некоторых вариантах осуществления антитело или его часть связывается с остатками 69-75 (или их фрагментами, например, с фрагментом одного, двух, трех, четырех, пяти или шести остатков), SEQ ID NO: 388 (например, антитела 12819 и 12865, например, антитела 12819.15384 и 12865.15377). В некоторых вариантах осуществления антитело или его часть связывается с остатками 136-140 (или их фрагментами, например, с фрагментом одного, двух, трех или четырех остатков) SEQ ID NO: 388 (например, антитела 12819 и 12865, например, антитела 12819.15384 и 12865.15377). В некоторых вариантах осуществления антитело или его часть связывается с остатками 69-75 (или их фрагментами) и остатки 136-140 (или их фрагментами) SEQ ID NO: 388, (например, антитела 12819 и 12865, например, антитела 12819.15384 и 12865.15377). Также предусмотрен эпитоп с любой комбинацией приведенных выше остатков.
[0124] В некоторых вариантах осуществления антителом против PD-1 или его антигенсвязывающей частью, которые описаны в настоящем документе, является антитело против PD-1 или антигенсвязывающая часть, описанная в патентной публикации PCT WO 2017/055547 или в патентной заявке PCT PCT/EP 2017/079615, которые полностью включены в настоящий документ посредством ссылки.
Антитела против TIM-3
[0125] В отдельном варианте осуществления антителами против TIM-3, раскрытыми в настоящем документе, являются человеческие антитела, полученные от трансгенных крыс, которые способны генерировать антитела с человеческими идиотипами.
[0126] Антитела против TIM-3, раскрытые в настоящем документе, могут быть обозначены либо 5-значным номером, например, «20131», либо 10-значным номером, например, «15086.16837». 10-значные номера с одинаковыми первыми пятью цифрами получают из одного и того же родительского антитела, как в случае антител 15086.15086, 15086.16837, 15086.17145, 15086.17144. Ожидается, что те антитела, которые имеют одинаковые шесть CDR, имеют одинаковые или по существу одинаковые свойства связывания с мишенью. Как будет понятно из последовательностей белков и ДНК, представленных в настоящем документе, варианты 15086.16837, 15086.17145 и 15086.17144 имеют только одно аминокислотное отличие в последовательности VH по сравнению с родительским антителом 15086 («15086.15086»), а именно E, а не Q, в позиции 6, тогда как аминокислотные последовательности VL являются идентичными. Также должно быть понятно, что эти варианты отличаются прежде всего своим форматом/подклассом антитела, т.е.:
15086.15086: IgG1
15086.16837: IgG1 LALA
15086.17145: IgG2
15086.17144: IgG4
Последовательность VH антител подкласса IgG2 и IgG4 такая же как последовательность варианта IgG1 LALA. Последовательность VL одинаковая для всех четырех подклассов антител.
[0127] В некоторых вариантах осуществления комбинированное лекарственное средство или композиция содержит антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающую часть, причем антителом против TIM-3 является антитело, упоминаемое в настоящем документе, как антитело 15086.17145, 15086.15086, 15086.16837, 15086.17144, 20131, 20293, 15105, 15107, 15109, 15174, 15175, 15260, 15284, 15299, 15353, 15354, 17244, 17245, 19324, 19416, 19568, 20185, 20300, 20362 или 20621 или вариант любого из них, причем вариант может, например, содержать некоторые минимальные аминокислотные изменения относительно указанного антитела (например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 аминокислотных изменений, которые могут быть, например, в каркасных областях) без потери антигенсвязывающей специфичности антитела.
[0128] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 конкурирует или перекрестно конкурирует с антителом 15086.15086, имеющим формат IgG1, антителом 15086.16837, имеющим формат IgG1 LALA, антителом 15086.17145, имеющим формат IgG2, или антителом 15086.17144, имеющим формат IgG4, за связывание с TIM-3 человека или связывается с тем же самым эпитопом TIM-3 человека, что и они. В некоторых вариантах осуществления антитело имеет формат IgG1 или IgG2. В некоторых вариантах осуществления антитело имеет формат IgG2.
[0129] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 конкурирует или перекрестно конкурирует с антителом 20131, 20293, 15105, 15107, 15109, 15174, 15175, 15260, 15284, 15299, 15353, 15354, 17244, 17245, 19324, 19416, 19568, 20185, 20300, 20362 или 20621 за связывание с TIM-3 человека или связывается с тем же самым эпитопом TIM-3 человека, что и они. В некоторых вариантах осуществления антитело имеет формат IgG1 или IgG2. В некоторых вариантах осуществления антитело имеет формат IgG2.
[0130] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 конкурирует или перекрестно конкурирует с антителом, CDR1-3 тяжелой цепи (H) и CDR1-3 легкой цепи (L) которого содержат, соответственно, SEQ ID NO: 8-13, 18-23, 28-33, 38-43, 48-53, 58-63, 68-73, 78-83, 88-93, 98-103, 108-113, 118-123, 128-133, 138-143, 148-153, 158-163, 168-173, 178-183, 188-193, 198-203, 208-213 или 218-223, за связывание с TIM-3 человека или связывается с тем же самым эпитопом TIM-3 человека, что и оно.
[0131] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 содержит H-CDR3, содержащую аминокислотную последовательность H-CDR3 SEQ ID NO: 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210 или 220.
[0132] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 содержит H-CDR1-3, содержащие аминокислотные последовательности H-CDR1-3, соответственно, из SEQ ID NO: 8-10, 18-20, 28-30, 38-40, 48-50, 58-60, 68-70, 78-80, 88-90, 98-100, 108-110, 118-120, 128-130, 138-140, 148-150, 158-160, 168-170, 178-180, 188-190, 198-200, 208-210 или 218-220.
[0133] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 имеет VH, аминокислотная последовательность которого по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична SEQ ID NO: 3, 7, 16, 26, 36, 46, 56, 66, 76, 86, 96, 106, 116, 126, 136, 146, 156, 166, 176, 186, 196, 206 или 216.
[0134] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 имеет VH, который содержит SEQ ID NO: 3, 7, 16, 26, 36, 46, 56, 66, 76, 86, 96, 106, 116, 126, 136, 146, 156, 166, 176, 186, 196, 206 или 216.
[0135] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 имеет VH, последовательность которого по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична SEQ ID NO: 3, 16, 26, 36, 46, 56, 66, 76, 86, 96, 106, 116, 126, 136, 146, 156, 166, 176, 186, 196, 206 или 216; и CH, последовательность которой по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична SEQ ID NO: 374.
[0136] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 имеет HC, которая содержит аминокислотную последовательность VH SEQ ID NO: 3, 16, 26, 36, 46, 56, 66, 76, 86, 96, 106, 116, 126, 136, 146, 156, 166, 176, 186, 196, 206 или 216 и аминокислотную последовательность CH SEQ ID NO: 374.
[0137] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 имеет VH, последовательность которого по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична SEQ ID NO: 7, 16, 26, 36, 46, 56, 66, 76, 86, 96, 106, 116, 126, 136, 146, 156, 166, 176, 186, 196, 206 или 216; и CH, последовательность которой по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична SEQ ID NO: 375, 376 или 377.
[0138] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 имеет HC, которая содержит аминокислотную последовательность VH SEQ ID NO: 7, 16, 26, 36, 46, 56, 66, 76, 86, 96, 106, 116, 126, 136, 146, 156, 166, 176, 186, 196, 206 или 216 и аминокислотную последовательность CH SEQ ID NO: 375, 376 или 377. В некоторых вариантах осуществления аминокислотной последовательностью CH является SEQ ID NO: 377.
[0139] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 содержит L-CDR3, содержащую аминокислотную последовательность L-CDR3 SEQ ID NO: 13, 23, 33, 43, 53, 63, 73, 83, 93, 103, 113, 123, 133, 143, 153, 163, 173, 183, 193, 203, 213 или 223.
[0140] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 содержит L-CDR1-3, содержащие аминокислотные последовательности L-CDR1-3, соответственно, SEQ ID NO: 11-13, 21-23, 31-33, 41-43, 51-53, 61-63, 71-73, 81-83, 91-93, 101-103, 111-113, 121-123, 131-133, 141-143, 151-153, 161-163, 171-173, 181-183, 191-193, 201-203, 211-213 или 221-223.
[0141] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 имеет VL, последовательность которого по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична аминокислотной последовательности VL SEQ ID NO: 4, 17, 27, 37, 47, 57, 67, 77, 87, 97, 107, 117, 127, 137, 147, 157, 167, 177, 187, 197, 207 или 217.
[0142] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 имеет VL, который содержит аминокислотную последовательность VL SEQ ID NO: 4, 17, 27, 37, 47, 57, 67, 77, 87, 97, 107, 117, 127, 137, 147, 157, 167, 177, 187, 197, 207 или 217.
[0143] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 имеет VL, последовательность которого по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична аминокислотной последовательности VL SEQ ID NO: 4, 17, 27, 37, 47, 57, 67, 77, 87, 97, 107, 117, 127, 137, 147, 157, 167, 177, 187, 197, 207 или 217; и CL, последовательность которой по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична SEQ ID NO: 378.
[0144] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 имеет LC, которая содержит аминокислотную последовательность VL SEQ ID NO: 4, 17, 27, 37, 47, 57, 67, 77, 87, 97, 107, 117, 127, 137, 147, 157, 167, 177, 187, 197, 207 или 217 и аминокислотную последовательность CL SEQ ID NO: 378.
[0145] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 содержит любую из приведенных выше последовательностей тяжелой цепи и любую из приведенных выше последовательностей легкой цепи.
[0146] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 содержит H-CDR3 и L-CDR3, содержащие аминокислотные последовательности H-CDR3 и L-CDR3, соответственно, из SEQ ID NO: 10 и 13, 20 и 23, 30 и 33, 40 и 43, 50 и 53, 60 и 63, 70 и 73, 80 и 83, 90 и 93, 100 и 103, 110 и 113, 120 и 123, 130 и 133, 140 и 143, 150 и 153, 160 и 163, 170 и 173, 180 и 183, 190 и 193, 200 и 203, 210 и 213 или 220 и 223.
[0147] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 содержит H-CDR1-3 и L-CDR1-3, содержащие последовательности H-CDR1-3 и L-CDR1-3, соответственно, из SEQ ID NO: 8-13, 18-23, 28-33, 38-43, 48-53, 58-63, 68-73, 78-83, 88-93, 98-103, 108-113, 118-123, 128-133, 138-143, 148-153, 158-163, 168-173, 178-183, 188-193, 198-203, 208-213 или 218-223.
[0148] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 имеет VH, последовательность которого по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 3, 7, 16, 26, 36, 46, 56, 66, 76, 86, 96, 106, 116, 126, 136, 146, 156, 166, 176, 186, 196, 206 или 216, и VL, последовательность которого по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 4, 17, 27, 37, 47, 57, 67, 77, 87, 97, 107, 117, 127, 137, 147, 157, 167, 177, 187, 197, 207 или 217.
[0149] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 имеет VH, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3, 7, 16, 26, 36, 46, 56, 66, 76, 86, 96, 106, 116, 126, 136, 146, 156, 166, 176, 186, 196, 206 или 216, и VL, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, 17, 27, 37, 47, 57, 67, 77, 87, 97, 107, 117, 127, 137, 147, 157, 167, 177, 187, 197, 207 или 217.
[0150] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 имеет HC, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3, 7, 16, 26, 36, 46, 56, 66, 76, 86, 96, 106, 116, 126, 136, 146, 156, 166, 176, 186, 196, 206 или 216 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378; и LC, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, 17, 27, 37, 47, 57, 67, 77, 87, 97, 107, 117, 127, 137, 147, 157, 167, 177, 187, 197, 207 или 217 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377.
[0151] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 содержит аминокислотные последовательности H-CDR1-3 и L-CDR1-3 из:
a) SEQ ID NO: 8-13, соответственно;
b) SEQ ID NO: 18-23, соответственно;
c) SEQ ID NO: 28-33, соответственно;
d) SEQ ID NO: 38-43, соответственно;
e) SEQ ID NO: 48-53, соответственно;
f) SEQ ID NO: 58-63, соответственно;
g) SEQ ID NO: 68-73, соответственно;
h) SEQ ID NO: 78-83, соответственно;
i) SEQ ID NO: 88-93, соответственно;
j) SEQ ID NO: 98-103, соответственно;
k) SEQ ID NO: 108-113, соответственно;
l) SEQ ID NO: 118-123, соответственно;
m) SEQ ID NO: 128-133, соответственно;
n) SEQ ID NO: 138-143, соответственно;
o) SEQ ID NO: 148-153, соответственно;
p) SEQ ID NO: 158-163, соответственно;
q) SEQ ID NO: 168-173, соответственно;
r) SEQ ID NO: 178-183, соответственно;
s) SEQ ID NO: 188-193, соответственно;
t) SEQ ID NO: 198-203, соответственно;
u) SEQ ID NO: 208-213, соответственно; или
v) SEQ ID NO: 218-223, соответственно.
[0152] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 содержит вариабельный домен тяжелой цепи и вариабельный домен легкой цепи, имеющие аминокислотные последовательности из:
a) SEQ ID NO: 7 и 4, соответственно;
b) SEQ ID NO: 3 и 4, соответственно;
c) SEQ ID NO: 16 и 17, соответственно;
d) SEQ ID NO: 26 и 27, соответственно;
e) SEQ ID NO: 36 и 37, соответственно;
f) SEQ ID NO: 46 и 47, соответственно;
g) SEQ ID NO: 56 и 57, соответственно;
h) SEQ ID NO: 66 и 67, соответственно;
i) SEQ ID NO: 76 и 77, соответственно;
j) SEQ ID NO: 86 и 87, соответственно;
k) SEQ ID NO: 96 и 97, соответственно;
l) SEQ ID NO: 106 и 107, соответственно;
m) SEQ ID NO: 116 и 117, соответственно;
n) SEQ ID NO: 126 и 127, соответственно;
o) SEQ ID NO: 136 и 137, соответственно;
p) SEQ ID NO: 146 и 147, соответственно;
q) SEQ ID NO: 156 и 157, соответственно;
r) SEQ ID NO: 166 и 167, соответственно;
s) SEQ ID NO: 176 и 177, соответственно;
t) SEQ ID NO: 186 и 187, соответственно;
u) SEQ ID NO: 196 и 197, соответственно;
v) SEQ ID NO: 206 и 207, соответственно; или
w) SEQ ID NO: 216 и 217, соответственно.
[0153] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 содержит:
a) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
b) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
c) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
d) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 27 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
e) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 36 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 37 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
f) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 46 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 47 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
g) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 56 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 57 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
h) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 66 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 67 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
i) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 76 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 77 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
j) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 86 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 87 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
k) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 96 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 97 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
l) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 106 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 107 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
m) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 116 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 117 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
n) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 126 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 127 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
o) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 136 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 137 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
p) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 146 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 147 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
q) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 156 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 157 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
r) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 166 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 167 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
s) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 176 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 177 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
t) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 186 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 187 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
u) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 196 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 197 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
v) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 206 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 207 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378; или
w) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 216 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 217 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378.
[0154] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 8-10, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 3 или 7;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3 или 7;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 3 и 374 или аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, 376 или 377;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 11-13, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 4;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 8-13, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 3 или 7, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 4;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3 или 15, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 3 и 374 или аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, 376 или 377; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4 и 378.
[0155] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 18-20, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 16;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 16 и SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 21-23, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 17;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 17 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 18-23, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 16, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 17;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 17 и 378.
[0156] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 28-30, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 26;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 26 и SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 31-33, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 27;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 27;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 27 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 28-33, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 26, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 27;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 27; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 27 и 378.
[0157] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 38-40, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 36;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 36;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 36 и SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 41-43, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 37;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 37;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 37 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 38-43, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 36, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 37;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 36, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 37; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 36 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 37 и 378.
[0158] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 48-50, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 46;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 46;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 46 и SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 51-53, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 47;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 47;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 47 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 48-53, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 46, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 47;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 46, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 47; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 46 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 47 и 378.
[0159] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 58-60, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 56;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 56;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 56 и SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 61-63, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 57;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 57;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 57 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 58-63, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 56, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 57;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 56, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 57; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 56 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 57 и 378.
[0160] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 68-70, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 66;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 66;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 66 и SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 71-73, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 67;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 67;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 67 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 68-73, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 66, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 67;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 66, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 67; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 66 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 67 и 378.
[0161] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 78-80, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 76;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 76;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 76 и SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 81-83, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 77;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 77;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 77 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 78-83, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 76, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 77;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 76, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 77; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 76 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 77 и 378.
[0162] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 88-90, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 86;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 86;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 86 и SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 91-93, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 87;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 87;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 87 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 88-93, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 86, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 87;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 86, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 87; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 86 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 87 и 378.
[0163] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 98-100, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 96;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 96;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 96 и SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 101-103, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 97;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 97;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 97 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 98-103, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 96, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 97;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 96, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 97; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 96 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 97 и 378.
[0164] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 108-110, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 106;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 106;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 106 и SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 111-113, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 107;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 107;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 107 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 108-113, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 106, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 107;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 106, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 107; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 106 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 107 и 378.
[0165] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 118-120, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 116;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 116;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 116 и SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 121-123, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 117;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 117;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 117 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 118-123, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 116, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 117;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 116, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 117; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 116 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 117 и 378.
[0166] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 128-130, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 126;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 126;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 126 и SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 131-133, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 127;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 127;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 127 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 128-133, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 126, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 127;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 126, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 127; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 126 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 127 и 378.
[0167] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 138-140, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 136;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 136;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 136 и SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 141-143, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 137;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 137;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 137 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 138-143, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 136, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 137;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 136, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 137; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 136 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 137 и 378.
[0168] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 148-150, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 146;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 146;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 146 и SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 151-153, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 147;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 147;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 147 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 148-53, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 146, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 147;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 146, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 147; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 146 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 147 и 378.
[0169] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 158-160, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 156;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 156;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 156 и SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 161-163, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 157;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 157;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 157 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 158-163, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 156, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 157;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 156, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 157; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 156 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 157 и 378.
[0170] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 168-170, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 166;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 166;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 166 и SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 171-173, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 167;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 167;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 167 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 168-173, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 166, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 167;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 166, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 167; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 166 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 167 и 378.
[0171] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 178-80, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 176;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 176;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 176 и SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 181-183, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 177;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 177;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 177 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 178-183, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 176, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 177;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 176, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 177; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 176 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 177 и 378.
[0172] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 188-190, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 186;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 186;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 186 и SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 191-193, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 187;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 187;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 187 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 188-193, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 186, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 187;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 186, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 187; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 186 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 187 и 378.
[0173] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 198-200, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 196;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 196;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 196 и SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 201-203, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 197;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 197;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 197 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 198-203, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 196, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 197;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 196, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 197; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 196 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 197 и 378.
[0174] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 208-210, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 206;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 206;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 206 и SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 211-213, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 207;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 207;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 207 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 208-213, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 206, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 207;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 206, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 207; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 206 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 207 и 378.
[0175] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 218-220, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 216;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 216;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 216 и SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 221-223, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 217;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 217;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 217 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 218-223, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 216, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 217;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 216, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 217; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 216 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 374, 375, 376 или 377; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 217 и 378.
[0176] В некоторых вариантах осуществления любое из антител против TIM-3 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может ингибировать связывание с TIM-3 таких лигандов как галектин-9, CEACAM1, HMGB-1 и фосфатидилсерин.
[0177] В некоторых вариантах осуществления любое из антител против TIM-3 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может увеличивать активность NK-клеток. В некоторых вариантах осуществления эта активность может опосредовать ADCC.
[0178] В некоторых вариантах осуществления введение антитела против TIM-3 или его антигенсвязывающей части, которые описаны в настоящем документе, может активировать дендритные клетки, вызывая их созревание и, следовательно, их способность стимулировать T-клетки. Не желая связывать себя какой-либо конкретной теорией, полагают, что антитела против TIM-3, описанные в настоящем документе, функционируют в качестве активаторов дендритных клеток, экспрессирующих TIM-3, в связи с чем их воздействие на дендритные клетки служит для стимуляции T-клеток. Таким образом, в связанных с опухолью условиях антитела против TIM-3 будут вызвать созревание и активацию ассоциированных с опухолью дендритных клеток, что приводит к активации опухольспецифических T-клеток.
[0179] В некоторых вариантах осуществления введение антитела против TIM-3 или его антигенсвязывающей части, которые описаны в настоящем документе, может непосредственно активировать T-клетки.
[0180] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 или антигенсвязывающая часть, описанная в настоящем документе, имеет по меньшей мере одно из следующих свойств:
a) связывается с TIM-3 человека с KD 23 нМ или менее, что измеряют с помощью поверхностного плазмонного резонанса;
b) связывается с TIM-3 яванского макака с KD 22 нМ или менее, что измеряют с помощью поверхностного плазмонного резонанса;
c) связывается с TIM-3 человека с EC50 1,2 нМ или менее, что измеряют с помощью ELISA;
d) связывается с TIM-3 яванского макака с EC50 46 нМ или менее, что измеряют с помощью ELISA;
e) увеличивает секрецию IFN-γ в анализе однонаправленной реакции смешанной культуры лимфоцитов;
f) увеличивает секрецию IFN-γ в анализе двунаправленной реакции смешанной культуры лимфоцитов;
g) увеличивает секрецию TNF-α в анализе однонаправленной реакции смешанной культуры лимфоцитов;
h) увеличивает секрецию TNF-α из дендритных клеток; и
i) ингибирует взаимодействие TIM-3 с фосфатидилсерином.
Примеры такого антитела включают в себя, без ограничения, антитело 15086.15086 (имеющее по меньшей мере свойства a, c, d, e, g и h); антитело 15086.17145 (имеющее по меньшей мере свойства a, c, d, e, g, h и i), антитело 15086.16837 или 15086.17144 (имеющее по меньшей мере свойства a, c и d), антитело 20293 или 20131 (имеющее по меньшей мере свойства a, b, c, d, e, f и h), антитело 20362 (имеющее по меньшей мере свойства c, e, f и h) и антитело 19324, 19416, 19568, 20185, 20300 или 20621 (имеющее по меньшей мере свойства c, d, e, f и h). В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 или антигенсвязывающая часть имеет все указанные свойства. В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 или антигенсвязывающая часть имеет по меньшей мере свойства a, c, d, e, g и h. В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 или антигенсвязывающая часть имеет по меньшей мере свойства a, c, d, e, g, h и i. В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 или антигенсвязывающая часть имеет по меньшей мере свойства a, c и d. В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 или антигенсвязывающая часть имеет по меньшей мере свойства a, b, c, d, e, f и h. В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 или антигенсвязывающая часть имеет по меньшей мере свойства c, e, f и h. В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 или антигенсвязывающая часть имеет по меньшей мере свойства c, d, e, f и h.
[0181] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающая часть, которые описаны в настоящем документе, связывается с эпитопом TIM-3, который содержит по меньшей мере один (например, по меньшей мере два, по меньшей мере три, по меньшей мере четыре, по меньшей мере пять, по меньшей мере шесть, по меньшей мере семь, по меньшей мере восемь или по меньшей мере девять) следующих остатков SEQ ID NO: 389: P50, V60, F61, E62, G64, R69, I117, M118 и D120. В некоторых вариантах осуществления антитело или антигенсвязывающая часть связывается с эпитопом TIM-3, который содержит остатки P50, V60, F61, E62, G64, R69, I117, M118 и D120 SEQ ID NO: 389 (например, антитело 15086.15086, 15086.16837, 15086.17145 или 15086.17144). В некоторых вариантах осуществления антитело или антигенсвязывающая часть связывается с эпитопом TIM-3, который содержит остатки F61, R69 и I117 SEQ ID NO: 389 (например, антитело 20293). В некоторых вариантах осуществления антитело или антигенсвязывающая часть связывается с эпитопом TIM-3, который содержит остатки P50, F61, E62, I117, M118 и D120 SEQ ID NO: 389 (например, антитело 20131).
[0182] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающая часть связывается с эпитопом TIM-3, содержащим аминокислотные остатки F61 и I117 SEQ ID NO: 389 (например, антитело 15086.15086, 15086.16837, 15086.17145, 15086.17144, 20293 или 20131). В некоторых вариантах осуществления эпитоп дополнительно содержит аминокислотный остаток R69 (например, антитело 15086.15086, 15086.16837, 15086.17145, 15086.17144 или 20293). В некоторых вариантах осуществления эпитоп дополнительно содержит P50, E62, M118 и D120 (например, антитело 15086.15086, 15086.16837, 15086.17145, 15086.17144 или 20131) и может дополнительно содержать аминокислотные остатки V60 и G64 (например, антитело 15086.15086, 15086.16837, 15086.17145 или 15086.17144).
[0183] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающая часть, которые описаны в настоящем документе, связывается с эпитопом TIM-3, который содержит по меньшей мере один (например, по меньшей мере один, по меньшей мере два, по меньшей мере три, по меньшей мере четыре, по меньшей мере пять, по меньшей мере шесть, по меньшей мере семь, по меньшей мере восемь или по меньшей мере девять) следующих остатков SEQ ID NO: 236: P50, V60, F61, E62, G64, R69, I117, M118 и D120. Предусмотрен эпитоп с любой комбинацией приведенных выше остатков.
[0184] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающая часть, которые описаны в настоящем документе, связывается с эпитопом TIM-3, который содержит остатки 62-67 и/или 114-117 SEQ ID NO: 389. В некоторых вариантах осуществления антитело или его часть связывается с остатками 62-67 (или их фрагментами, например, с фрагментом одного, двух, трех, четырех или пяти остатков) SEQ ID NO: 389 (например, антитела 15086.15086, 15086.16837, 15086.17145, 15086.17144 и 20293). В некоторых вариантах осуществления антитело или его часть связывается с остатками 114-117 (или их фрагментами, например, с фрагментом одного, двух или трех остатков) SEQ ID NO: 389 (например, антитело 20131). Также предусмотрен эпитоп с любой комбинацией приведенных выше остатков.
[0185] В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающая часть не конкурирует с ABTIM3 (из PCT патентной публикации WO 2015/117002) и/или mAb15 (из PCT патентной публикации WO 2016/111947) за связывание с TIM-3. В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 или антигенсвязывающая часть не связывается с тем же самым эпитопом, что и ABTIM3 и/или mAB15; например, антитело или его часть связывается с одним или более остатками на TIM-3, которые не связаны ABTIM3 и/или mAb15.
[0186] В некоторых вариантах осуществления антителом против TIM-3 или его антигенсвязывающей частью, которые описаны в настоящем документе, является антитело против TIM-3 или антигенсвязывающая часть, описанная в патентной публикации PCT WO 2017/178493, которая полностью включена посредством ссылки в настоящий документ.
Антитела против LAG-3
[0187] В некоторых вариантах осуществления антителами против LAG-3, раскрытыми в настоящем документе, являются человеческие антитела, полученные от трансгенных крыс, которые способны генерировать антитела с человеческими идиотипами. В другом варианте осуществления антителами являются полученные от курицы химерные антитела, содержащие последовательности CDR курицы и каркасные области человека, причем каркасные области были подвергнуты гуманизации.
[0058] Одно преимущество новых антител против LAG-3, описанных в настоящем документе, состоит в том, что они способны усиливать активность T-клеток, что измеряют с помощью увеличенной выработки IL-2. Не желая связывать себя какой-либо конкретной теорией, полагают, что антитела против LAG-3 способны блокировать взаимодействие LAG-3 с его предполагаемыми лигандами, такими как MHCII и LSECtin. Антитела могут выполнять это непосредственно путем блокирования области связывания лиганда или путем стимулирования интернализации LAG-3. Еще одно потенциальное преимущество антител против LAG-3, описанных в настоящем документе, состоит в низком уровне вторичных эффекторных функций в антителах, имеющих мутации «LALA» (L234A/L235A), которые препятствуют значимому связыванию антитела с FcgR (Fc-рецепторы гамма) человека и, следовательно, истощению эффекторных T-клеток.
[0188] В некоторых вариантах осуществления комбинированное лекарственное средство или композиция содержит антитело против LAG-3 или его антигенсвязывающую часть, причем антителом против LAG-3 является антитело, упоминаемое в настоящем документе, как антитело 15646, 15532, 15723, 15595, 15431, 15572 или 15011 или вариант любого из них, причем вариант может, например, содержать некоторые минимальные аминокислотные изменения относительно указанного антитела (например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 аминокислотных изменений, которые могут быть, например, в каркасных областях) без потери антигенсвязывающей специфичности антитела.
[0189] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 или его антигенсвязывающая часть конкурирует или перекрестно конкурирует с антителом 15646, 15532, 15723, 15595, 15431, 15572 или 15011 за связывание с LAG-3 человека или связывается с тем же самым эпитопом LAG-3 человека, что и оно. В некоторых вариантах осуществления антитело имеет формат IgG1 или IgG2. В некоторых вариантах осуществления антитело имеет формат IgG2.
[0190] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 конкурирует или перекрестно конкурирует с антителом, CDR1-3 тяжелой цепи (H) и CDR1-3 легкой цепи (L) которого содержат, соответственно, SEQ ID NO: 308-313, 318-323, 328-333, 338-343, 348-353, 358-363 или 368-373, за связывание с LAG-3 человека или связывается с тем же самым эпитопом LAG-3 человека, что и оно.
[0191] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 содержит H-CDR3, содержащую аминокислотную последовательность H-CDR3 SEQ ID NO: 310, 320, 330, 340, 350, 360 или 370.
[0192] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 содержит H-CDR1-3, содержащие аминокислотные последовательности H-CDR1-3, соответственно, из SEQ ID NO: 308-310, 318-320, 328-330, 338-340, 348-350, 358-360 или 368-370.
[0193] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 имеет VH, аминокислотная последовательность которого по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична SEQ ID NO: 306, 316, 326, 336, 346, 356 или 366.
[0194] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 имеет VH, который содержит SEQ ID NO: 306, 316, 326, 336, 346, 356 или 366.
[0195] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 имеет VH, последовательность которого по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична SEQ ID NO: 306, 316, 326, 336, 346, 356 или 366; и CH, последовательность которой по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична SEQ ID NO: 375.
[0196] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 имеет HC, которая содержит аминокислотную последовательность VH SEQ ID NO: 306, 316, 326, 336, 346, 356 или 366 и аминокислотную последовательность CH SEQ ID NO: 375.
[0197] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 содержит L-CDR3, содержащую аминокислотную последовательность L-CDR3 SEQ ID NO: 313, 323, 333, 343, 353, 363 или 373.
[0198] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 содержит L-CDR1-3, содержащие аминокислотные последовательности L-CDR1-3, соответственно, SEQ ID NO: 311-313, 321-323, 331-333, 341-343, 351-353, 361-363 или 371-373.
[0199] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 имеет VL, последовательность которого по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична аминокислотной последовательности VL SEQ ID NO: 307, 317, 327, 337, 347, 357 или 367.
[0200] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 имеет VL, который содержит аминокислотную последовательность VL SEQ ID NO: 307, 317, 327, 337, 347, 357 или 367.
[0201] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 имеет VL, последовательность которого по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична аминокислотной последовательности VL SEQ ID NO: 307, 317, 327, 337, 347 или 357; и CL, последовательность которой по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична SEQ ID NO: 378.
[0202] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 имеет LC, которая содержит аминокислотную последовательность VL SEQ ID NO: 307, 317, 327, 337, 347 или 357 и аминокислотную последовательность CL SEQ ID NO: 378. В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 имеет LC, которая содержит аминокислотную последовательность VL SEQ ID NO: 367 и аминокислотную последовательность CL SEQ ID NO: 379.
[0203] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 содержит любую из приведенных выше последовательностей тяжелой цепи и любую из приведенных выше последовательностей легкой цепи.
[0204] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 содержит H-CDR3 и L-CDR3, содержащие аминокислотные последовательности H-CDR3 и L-CDR3, соответственно, из SEQ ID NO: 310 и 313, 320 и 323, 330 и 333, 340 и 343, 350 и 353, 360 и 363 или 370 и 373.
[0205] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 содержит H-CDR1-3 и L-CDR1-3, содержащие последовательности H-CDR1-3 и L-CDR1-3, соответственно, из SEQ ID NO: 308-313, 318-323, 328-333, 338-343, 348-353, 358-363 или 368-373.
[0206] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 имеет VH, последовательность которого по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 306, 316, 326, 336, 346, 356 или 366, и VL, последовательность которого по меньшей мере на 90% (например, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99%) идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 307, 317, 327, 337, 347, 357 или 367.
[0207] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 имеет VH, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 306, 316, 326, 336, 346, 356 или 366, и VL, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 307, 317, 327, 337, 347, 357 или 367.
[0208] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 имеет HC, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 306, 316, 326, 336, 346, 356 или 366 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375; и LC, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 307, 317, 327, 337, 347 или 357 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378.
[0209] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 имеет HC, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 306, 316, 326, 336, 346, 356 или 366 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375; и LC, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 367 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 379.
[0210] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 содержит аминокислотные последовательности H-CDR1-3 и L-CDR1-3 из:
a) SEQ ID NO: 308-313, соответственно;
b) SEQ ID NO: 318-323, соответственно;
c) SEQ ID NO: 328-333, соответственно;
d) SEQ ID NO: 338-343, соответственно;
e) SEQ ID NO: 348-353, соответственно;
f) SEQ ID NO: 358-363, соответственно; или
g) SEQ ID NO: 368-373, соответственно.
[0211] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 содержит вариабельный домен тяжелой цепи и вариабельный домен легкой цепи, имеющие аминокислотные последовательности из:
a) SEQ ID NO: 306 и 307, соответственно;
b) SEQ ID NO: 316 и 317, соответственно;
c) SEQ ID NO: 326 и 327, соответственно;
d) SEQ ID NO: 336 и 337, соответственно;
e) SEQ ID NO: 346 и 347, соответственно;
f) SEQ ID NO: 356 и 357, соответственно; или
g) SEQ ID NO: 366 и 367, соответственно.
[0212] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 содержит:
a) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 306 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 307 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
b) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 316 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 317 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
c) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 326 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 327 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
d) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 336 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 337 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
e) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 346 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 347 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378;
f) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 356 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 357 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 378; или
g) HC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 366 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 375, и LC, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 367 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 379.
[0213] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 308-310, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 306;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 306;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 306 и 375;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 311-313, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 307;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 307;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 307 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 308-313, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 306, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 307;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 306, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 307; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 306 и 375; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 307 и 378.
[0214] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 318-320, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 316;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 316;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 316 и 375;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 321-323, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 317;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 317;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 317 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 318-323, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 316, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 317;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 316, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 317; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 316 и 375; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 317 и 378.
[0215] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 328-330, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 326;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 326;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 326 и 375;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 331-333, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 327;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 327;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 327 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 328-333, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 326, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 327;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 326, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 327; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 326 и 375; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 327 и 378.
[0216] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 338-340, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 336;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 336;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 336 и 375;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 341-343, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 337;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 337;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 337 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 338-343, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 336, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 337;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 336, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 337; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 336 и 375; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 337 и 378.
[0217] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 348-350, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 346;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 346;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 346 и 375;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 351-353, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 347;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 347;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 347 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 348-353, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 346, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 347;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 346, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 347; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 346 и 375; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 347 и 378.
[0218] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 358-360, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 356;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 356;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 356 и 375;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 361-363, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 357;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 357;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 357 и 378;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 358-363, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 356, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 357;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 356, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 357; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 356 и 375; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 357 и 378.
[0219] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 выбирают из группы, состоящей из:
a) антитела, H-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 368-370, соответственно;
b) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 366;
c) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 366;
d) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 366 и 375;
e) антитела, L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 371-373, соответственно;
f) антитела, последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 367;
g) антитела, VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 367;
h) антитела, LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 367 и 379;
i) антитела, H-CDR1-3 и L-CDR1-3 которого содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 368-373, соответственно;
j) антитела, последовательность VH которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 366, а последовательность VL которого по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 367;
k) антитела, VH которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 366, а VL которого содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 367; и
l) антитела, HC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 366 и 375; а LC которого содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 367 и 379.
[0220] В некоторых вариантах осуществления любое из антител против LAG-3 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может связываться с LAG-3 человека с EC50, например, 0,2 нМ или менее, 0,15 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,09 нМ или менее, 0,08 нМ или менее, 0,07 нМ или менее, 0,06 нМ или менее, 0,05 нМ или менее или 0,04 нМ или менее. В некоторых вариантах осуществления любое из антител против LAG-3 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может связываться с LAG-3 яванского макака, например, с EC50 0,4 нМ или менее, 0,3 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,09 нМ или менее, 0,08 нМ или менее, 0,07 нМ или менее, 0,06 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,04 нМ или менее или 0,03 нМ или менее. В отдельных вариантах осуществления любое из антител против LAG-3 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может связываться с LAG-3 человека, например, с EC50 0,1 нМ или менее и LAG-3 яванского макака, например, с EC50 0,3 нМ или менее.
[0221] В некоторых вариантах осуществления любое из антител против LAG-3 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может связываться с LAG-3 человека с EC50, например, 0,1 нМ или менее. В некоторых вариантах осуществления любое из антител против LAG-3 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может связываться с LAG-3 яванского макака, например, с EC50 0,3 нМ или менее. В отдельных вариантах осуществления любое из антител против LAG-3 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может связываться с LAG-3 человека, например, с EC50 0,1 нМ или менее и LAG-3 яванского макака, например, с EC50 0,3 нМ или менее.
[0222] В некоторых вариантах осуществления любое из антител против LAG-3 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может ингибировать связывание таких лигандов как MHC II класса (MHCII) или LSECtin с LAG-3. Например, при 20 мкг/мл антитело против LAG-3 или антигенсвязывающая часть может снизить связывание LAG-3 с MHCII по меньшей мере на 35%, по меньшей мере на 40%, по меньшей мере на 45%, по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 55%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 65%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 75%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 89%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98%, по меньшей мере на 99% или на 100% по сравнению со связыванием в присутствии антитела отрицательного контроля. В одном варианте осуществления антитело против LAG-3 или антигенсвязывающий белок может снизить связывание LAG-3 с MHCII более чем на 85% по сравнению с отрицательным контролем. В одном варианте осуществления антитело против LAG-3 или антигенсвязывающий белок может снизить связывание LAG-3 с MHCII приблизительно на 25%-95%, 30%-90% или 35%-85% по сравнению с отрицательным контролем.
[0223] В некоторых вариантах осуществления любое из антител против LAG-3 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может блокировать связывание между LAG-3 и MHC II класса, например, LAG-3 человека, экспрессируемым в клетках Jurkat, и MHC II класса человека, экспрессируемым в клетках Raji (например, в концентрации 0,1 мкг/мл, 0,5 мкг/мл, 1 мкг/мл, 5 мкг/мл, 10 мкг/мл, 20 мкг/мл, 30 мкг/мл, 40 мкг/мл или 50 мкг/мл).
[0224] В некоторых вариантах осуществления любое из антител против LAG-3 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может связываться с LAG-3 человека с KD 5,0×10–8 или менее, 4,0×10–8 или менее, 3,0×10–8 или менее, 2,0×10–8 или менее, 1,0×10–8 или менее, 9,0×10–9 или менее, 8,0×10–9 или менее, 7,0×10–9 или менее, 6,0×10–9 или менее, 5,0×10–9 или менее, 4,0×10–9 или менее, 3,0×10–9 или менее, 2,0×10–9 или менее или 1,0×10–9 или менее, что измеряют с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
[0225] В некоторых вариантах осуществления любое из антител против LAG-3 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может связываться с LAG-3 яванского макака с KD 1,5×10–7 или менее, 1,0×10–7 или менее, 9,0×10–8 или менее, 8,0×10–8 или менее, 7,0×10–8 или менее, 6,0×10–8 или менее, 5,0×10–8 или менее, 4,0×10–8 или менее, 3,0×10–8 или менее, 2,0×10–8 или менее или 1,0×10–8 или менее, что измеряют с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
[0226] В некоторых вариантах осуществления любое из антител против LAG-3 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может связываться с LAG-3 мыши с KD 5,0×10–8 или менее, 4,5×10–8 или менее, 4,0×10–8 или менее, 3,5×10–8 или менее или 3,0×10–8 или менее, что измеряют с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
[0227] В некоторых вариантах осуществления любое из антител против LAG-3 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может стимулировать выработку IL-2, например, из стимулированных SEB PBMC.
[0228] В некоторых вариантах осуществления любое из антител против LAG-3 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может снизить клеточные и/или растворимые уровни LAG-3, например, в T-клеточной линии человека (такой как T-клеточная линия человека сверхэкспрессирующая LAG-3).
[0229] В некоторых вариантах осуществления любое из антител против LAG-3 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может индуцировать регресс роста опухоли и/или задерживать рост опухоли in vivo.
[0230] В некоторых вариантах осуществления любое из антител против LAG-3 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может связываться с другим эпитопом LAG-3 человека, чем антитело 25F7-Lag3.5.
[0231] В некоторых вариантах осуществления любое из антител против LAG-3 или антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, может активировать T-клетки, вызывая усиленную противоопухолевую активность.
[0232] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 или антигенсвязывающая часть, описанная в настоящем документе, имеет по меньшей мере одно из следующих свойств:
a) в концентрации 20 мкг/мл уменьшает связывание LAG-3 человека с MHC II класса человека в клетках A375 более чем на 85% по сравнению с антителом отрицательного контроля, что определяют с помощью конкурентного анализа методом проточной цитометрии;
b) в концентрации 20 мкг/мл уменьшает связывание LAG-3 человека с MHC II класса человека в клетках A375 до 35%-85% по сравнению с антителом отрицательного контроля, что определяют с помощью конкурентного анализа методом проточной цитометрии;
c) блокирует связывание между LAG-3 человека, экспрессируемым в клетках Jurkat, и MHC II класса человека, экспрессируемым в клетках Raji;
d) связывается с LAG-3 человека с EC50 0,1 нМ или менее, что измеряют с помощью проточной цитометрии;
e) связывается с LAG-3 яванского макака с EC50 0,3 нМ или менее, что измеряют с помощью проточной цитометрии;
f) связывается с LAG-3 человека с KD 3,0×10–8 или менее, что измеряют с помощью поверхностного плазмонного резонанса;
g) связывается с LAG-3 яванского макака с KD 1,5×10–7 или менее, что измеряют с помощью поверхностного плазмонного резонанса;
h) связывается с LAG-3 мыши с KD 3,5×10–8 или менее, что измеряют с помощью поверхностного плазмонного резонанса;
i) стимулирует выработку IL-2 в обработанных стафилококковым энтеротоксином B (SEB) мононуклеарных клетках периферической крови человека(PBMC);
j) уменьшает клеточные уровни LAG-3 в T-клетках человека;
k) уменьшает растворимые уровни LAG-3 в культуре T-клеток человека;
l) индуцирует регресс роста опухоли in vivo;
m) задерживает рост опухоли in vivo; и
n) не связывается с тем же самым эпитопом LAG-3 человека, что и антитело 25F7-Lag3.5.
Примеры такого антитела включают в себя, без ограничения, антитело 15646 (имеющее по меньшей мере свойства b, c, d, e, i и n), антитело 15532 (имеющее по меньшей мере свойства a, c, d, e, f, g, i, j, k, m и n), антитело 15723 (имеющее по меньшей мере свойства b, c, d, e, i и n), антитело 15595 (имеющее по меньшей мере свойства a, c, d, e, i и n), антитело 15431 (имеющее по меньшей мере свойства a, c, d, e, f, g, i и n), антитело 15572 (имеющее по меньшей мере свойства b, c, d, e, f, g, i и n), и антитело 15011 (имеющее по меньшей мере свойства a, c, d, e, f, g, h, i, j, k, l, m и n). В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 или антигенсвязывающая часть согласно изобретению имеет по меньшей мере 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 из указанных свойств. В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 или антигенсвязывающая часть согласно изобретению имеет по меньшей мере свойства b, c, d, e, i и n; по меньшей мере свойства a, c, d, e, f, g, i, j, k, m и n; по меньшей мере свойства a, c, d, e, i и n; по меньшей мере свойства a, c, d, e, f, g, i и n; по меньшей мере свойства b, c, d, e, f, g, i и n; или по меньшей мере свойства a, c, d, e, f, g, h, i, j, k, l, m и n.
[0233] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 или антигенсвязывающая часть согласно изобретению конкурирует с антителом 15011, 15572 и/или 15431 за связывание с LAG-3 человека.
[0234] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 или антигенсвязывающая часть согласно изобретению связывается с эпитопом LAG-3 человека, имеющим:
a) аминокислотные остатки H85, P86, A87, P89, S91, W92 и G93 SEQ ID NO: 68;
b) аминокислотные остатки A40, Q41, P43, P46, P49, D52, T62, Q64, H65, Q66, P67, D68, G93, P94, P96, R98, Y99, T100, V101, P106, G107, R119, E124, R129, G130, D131, S133, R137, P138, D143, R148 и R163 SEQ ID NO: 68;
c) аминокислотные остатки A40, Q41, P43, P46, P49, D52, T62, Q64, H65, Q66, P67, D68, P96, Y99, T100, V101, P106, G107, R119, E124, R129, G130, D131, S133, R137, P138, D143, R148 и R163 SEQ ID NO: 68; или
d) аминокислотные остатки G107, L109, R110 и S111 SEQ ID NO: 68.
[0235] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 или антигенсвязывающая часть согласно изобретению связывается с эпитопом, имеющим аминокислотные остатки 98-105 SEQ ID NO: 68. Примеры такого антитела включают в себя, без ограничения, антитела 15532, 15431, 15572 и 15011.
[0236] В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 или антигенсвязывающая часть согласно изобретению связывается с эпитопом, имеющим:
a) аминокислотные остатки 78-105 и 123-131 SEQ ID NO: 68;
b) аминокислотные остатки 23-30, 40-66, 88-105, 123-137 и 148-152 SEQ ID NO: 68; или
c) аминокислотные остатки 23-30, 40-66, 98-105, 118-137 и 148-161 SEQ ID NO: 68
[0237] В некоторых вариантах осуществления антителом против LAG-3 или его антигенсвязывающей частью, которые описаны в настоящем документе, является антитело против LAG-3 или антигенсвязывающая часть, описанная в патентной заявке PCT PCT/EP 2017/076188, которая полностью включена в настоящий документ посредством ссылки.
[0238] Класс антитела, описанного в настоящем документе, можно изменить или переключить на другой класс или подкласс. В одном аспекте молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую VL или VH, выделяют с использованием способов, хорошо известных в данной области, таким образом, чтобы она не содержала последовательностей нуклеиновых кислот, кодирующих CL или CH. Затем молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие VL или VH, функционально связывают с последовательностью нуклеиновой кислоты, кодирующей CL или CH, соответственно, из молекулы иммуноглобулина другого класса. Это можно обеспечить с использованием вектора или молекулы нуклеиновой кислоты, которая содержит цепь CL или CH, которая описана выше. Например, антитело, которое изначально было IgM, можно переключить на класс IgG. Кроме того, переключение класса можно использовать для преобразования одного подкласса IgG на другой, например, с IgG1 на IgG2. Константную область легкой цепи κ можно изменить, например, на константную область легкой цепи λ. Предпочтительный способ получения антитела, которое описано в настоящем документе, с нужным изотипом Ig включает стадии выделения молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей тяжелую цепь антитела, и молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей легкую цепь антитела, получения вариабельного домена тяжелой цепи, лигирования вариабельного домена тяжелой цепи с константной областью тяжелой цепи нужного изотипа, экспрессии легкой цепи и лигированной тяжелой цепи в клетке и сбора антител с нужным изотипом.
[0239] Антитело, описанное в настоящем документе, может представлять собой молекулу IgG, IgM, IgE, IgA или IgD, но обычно относится к изотипу IgG, например, к IgG подкласса IgG1, IgG2a или IgG2b, IgG3 или IgG4. В одном варианте осуществления антитело относится к IgG1. В другом варианте осуществления антитело относится к IgG2.
[0240] В одном варианте осуществления антитело может содержать по меньшей мере одну мутацию в области Fc. известно число разных мутаций Fc, где эти мутации обеспечивают измененную эффекторную функцию. Например, во многих случаях будет необходимо снизить или устранить эффекторную функцию, например, когда взаимодействия лиганд/рецептор нежелательны или в случае конъюгатов антитело-лекарственное средство.
[0241] В одном варианте осуществления антитело содержит по меньшей мере одну мутацию в Fc области, которая уменьшает эффекторную функцию. Позиции аминокислот Fc области, которые можно предпочтительно подвергнуть мутации, чтобы снизить эффекторную функцию, включают в себя одну или более позиций 228, 233, 234 и 235, где аминокислотные позиции имеют номера согласно схеме нумерации IMGT®.
[0242] В некоторых вариантах осуществления один или оба аминокислотных остатков в позициях 234 и 235 можно подвергнуть мутации, например, из Leu в Ala (L234A/L235A). Эти мутации снижают эффекторную функцию Fc области IgG1 антител. Дополнительно или альтернативно, аминокислотный остаток в позиции 228 можно подвергнуть мутации, например, в Pro. В некоторых вариантах осуществления аминокислотный остаток в позиции 233 можно подвергнуть мутации, например, в Pro, аминокислотный остаток в позиции 234 можно подвергнуть мутации, например, в Val, и/или аминокислотный остаток в позиции 235 можно подвергнуть мутации, например, в Ala. Аминокислотные позиции имеют номера согласно схеме нумерации IMGT®.
[0243] В некоторых вариантах осуществления, где антитело относится к подклассу IgG4, оно может содержать мутацию S228P, т.е. иметь пролин в позиции 228, где аминокислотный позиция имеет номер согласно Eu схеме нумерации IMGT®. Известно, что эта мутация уменьшает нежелательный обмен Fab-фрагментами (Angal et al. Mol Immunol. 30:105-8 (1993)).
[0244] В некоторых вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающая часть, которые описаны в настоящем документе, могут быть частью более крупной молекулы иммуноадгезии, образованной ковалентной или нековалентной связью антитела или части антитела с одним или более другими белками или пептидами. Примеры подобной молекулы иммуноадгезии включают в себя применение коровой области стрептавидина для получения тетрамерной молекулы scFv (Kipriyanov et al. Human Antibodies and Hybridomas 6:93-101 (1995)) и применение остатка цистеина, маркерного пептида и C-концевой полигистидиновой метки для получения бивалентной и биотинилированной молекулы scFv (Kipriyanov et al. Mol. Immunol. 31:1047-1058 (1994)). Другие примеры включают в себя, когда одну или более CDR из антитела либо ковалентно, либо нековалентно включают в молекулу, чтобы сделать ее иммуноадгезином, который специфически связывается с интересующим антигеном. В таких вариантах осуществления CDR можно встраивать как часть более крупной полипептидной цепи, можно ковалентно связывать с другой полипептидной цепью или можно нековалентно встраивать.
[0245] В другом варианте осуществления можно получить антитело слияния или иммуноадгезин, который содержит все или часть антитела, описанного в настоящем документе, связанное с другим полипептидом. В некоторых вариантах осуществления с полипептидом связывают только вариабельные домены антитела. В некоторых вариантах осуществления домен VH антитела связывают с первым полипептидом, тогда как домен VL антитела связывают со вторым полипептидом, который связывают с первым полипептидом таким образом, чтобы домены VH и VL могли взаимодействовать друг с другом с образованием антигенсвязывающего сайта. В другом предпочтительном варианте осуществления домен VH отделен от домена VL линкером таким образом, чтобы домены VH и VL могли взаимодействовать друг с другом (например, одноцепочечные антитела). Затем антитело VH-линкер-VL связывают с интересующим полипептидом. Кроме того, можно получать антитела слияния, в которых два (или более) одноцепочечных антитела связывают друг с другом. Это полезно, если нужно получить двухвалентное или поливалентное антитело на одной полипептидной цепи, или если нужно получить биспецифическое антитело.
[0246] Для получения одноцепочечного антитела (scFv) кодирующие VH- и VL-фрагменты ДНК функционально связывают с другим фрагментом, кодирующим гибкий линкер, например, кодирующим аминокислотную последовательность (Gly4-Ser)3 (SEQ ID NO: 396), таким образом, чтобы последовательности VH и VL можно было экспрессировать в виде непрерывного одноцепочечного белка, с доменами VL и VH, объединенными гибким линкером. См., например, Bird et al. Science 242:423426 (1988); Huston et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883 (1988); и McCafferty et al. Nature 348:552-554 (1990). Одноцепочечное антитело может быть моновалентным, если используют только один VH и VL; бивалентным, если используют два VH и VL; или поливалентным, если используют более чем два VH и VL. Можно получать биспецифические или поливалентные антитела, которые специфически связываются, например, с PD-1, TIM-3 или LAG-3 человека и с другой молекулой. В некоторых вариантах осуществления биспецифические или поливалентные антитела могут связываться с PD-1 и TIM-3, PD-1 и LAG-3, TIM-3 и LAG-3, или PD-1, TIM-3 и LAG-3.
[0247] В других вариантах осуществления можно получать другие модифицированные антитела с использованием кодирующих антитела молекул нуклеиновых кислот. Например, «каппа тела» (Ill et al. Protein Eng. 10:949-57 (1997)), «минитела» (Martin Et al. EMBO J. 13:5303-9 (1994)), «диатела» (Holliger et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448 (1993)) или «Janusins» (Traunecker et al. EMBO J. 10:3655-3659 (1991) и Trauneck
er et al. Int. J. Рак (Suppl.) 7:51-52 (1992)) можно получать с использованием стандартных молекулярных биологических технологий, следуя указаниям описания.
[0248] Антитело или антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, можно дериватизировать или связывать с другой молекулой (например, другим пептидом или белком). Как правило, антитела или их части дериватизируют таким образом, чтобы дериватизация или мечение не оказывали неблагоприятного воздействия на связывание антигена. Соответственно, антитела и части антител, которые можно использовать в комбинированных лекарственных средствах и композициях согласно изобретению, предназначены для включения как интактных, так и модифицированных форм антител, описанных в настоящем документе. Например, антитело или его часть антитела, которое описано в настоящем документе, можно функционально связать (посредством химического соединения, генетического слияния, нековалентной связи или иным образом) с одним или более другими молекулярными объектами, такими как другое антитело (например, биспецифическое антитело или диатело), детектирующее средство, фармацевтическое средство и/или белок или пептид, которые могут опосредовать связь антитела или части антитела с другой молекулой (такой как коровая область стрептавидина или полигистидиновая метка).
[0249] Один тип дериватизированного антитела получают с помощью поперечного сшивания двух или более антител (одинакового типа или разных типов, например, для получения биспецифических антител). Подходящие сшивающие средства включают в себя средства, которые являются гетеробифункциональными, имеющими две определенно реакционноспособные группы, разделенные подходящим спейсером (например, m-малеимидобензоил-N-гидроксисукцинимидным сложным эфиром) или гомобифункциональными (например, дисукцинимидилсуберат). Подобные линкеры доступны, например, от Pierce Chemical Company, Rockford, Il.
[0250] Антитело также можно дериватизировать с помощью химической группы, такой как полиэтиленгликоль (PEG), метильная или этильная группа или углеводная группа. Эти группы могут быть полезны для улучшения биологических характеристик антитела, например, для увеличения времени полужизни в сыворотке.
[0251] Антитело, которое описано в настоящем документе, также можно метить. В рамках настоящего изобретения термины «метка» или «метить» относятся к включению в антитело другой молекулы. В одном варианте осуществления метка представляет собой обнаруживаемый маркер, например, включение радиоактивно меченой аминокислоты или присоединение к полипептиду биотинильных фрагментов, которые можно обнаружить с помощью маркированного авидина (например, стрептавидина, содержащего флуоресцентный маркер, или ферментативная активность, которую можно обнаружить с помощью оптических или колориметрических способов). В другом варианте осуществления метка или маркер могут быть терапевтическими, например, конъюгат лекарственного средства или токсин. Можно использовать различные способы мечения полипептидов и гликопротеинов, известные в данной области. Примеры меток для полипептидов включают в себя, но без ограничения следующие: радиоизотопы или радионуклиды (например, 3H, 14C, 15N, 35S, 90Y, 99Tc, 111In, 125I, 131I), флуоресцентные метки (например, FITC, родамин, лантаноидные люминофоры), ферментативные метки (например, пероксидаза хрена, β-галактозидаза, люцифераза, щелочная фосфатаза), хемилюминесцентные маркеры, биотинильные группы, заданные полипептидные эпитопы распознаваемые вторичным репортером (например, последовательности пар лейциновой молнии, сайты связывания для вторичных антител, металлсвязывающие домены, эпитопные метки), магнитные средства, такие как хелаты гадолиния, токсины, такие как токсин коклюша, таксол, цитохалазин B, грамицидин D, бромид этидия, эметин, митомицин, этопозид, тенопозид, винкристин, винбластин, колхицин, доксорубицин, даунорубицин, дигидроксиантрациндион, митоксантрон, митрамицин, актиномицин D, 1-дегидротестостерон, глюкокортикоиды, прокаин, тетракаин, лидокаин, пропранолол и пуромицин и их аналоги или гомологи. В некоторых вариантах осуществления для уменьшения потенциального стерического препятствия к спейсерным ножкам прикрепляют метки различной длины.
[0252] В некоторых вариантах осуществления антитела, описанные в настоящем документе, можно представить в нейтральной форме (включая цвиттер-ионные формы) или в виде положительно или отрицательно-заряженных частиц. В некоторых вариантах осуществления антитела могут образовывать комплекс с противоионом с образованием фармацевтически приемлемой соли.
[0253] Термин «фармацевтически приемлемая соль» относится к комплексу, содержащему одно или более антител и один или более противоионов, причем противоионы получают из фармацевтически приемлемых неорганических и органических кислот и оснований.
Комбинированные лекарственные средства
[0254] В настоящем изобретении предложена комбинированное лекарственное средство (например, композиция), которая содержит любое (например, любое одно) из антител против PD-1 или его антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, и любое (например, любое одно) из антител против TIM-3 или его антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления комбинированное лекарственное средство содержит любое (например, любое одно) из антител против PD-1 или его антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, и любое (например, любое одно) из антител против LAG-3 или его антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления комбинированное лекарственное средство содержит любое (например, любое одно) из антител против TIM-3 или его антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, и любое (например, любое одно) из антител против LAG-3 или его антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе. В отдельных вариантах осуществления комбинированное лекарственное средство содержит любое (например, любое одно) из антител против PD-1 или его антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, любое (например, любое одно) из антител против TIM-3 или его антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе, и любое (например, любое одно) из антител против LAG-3 или его антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе. Комбинированное лекарственное средство может принимать вид, например, лекарственного средства с использованием указанных антител или антигенсвязывающих частей или фармацевтической композиции, содержащей указанные антитела или антигенсвязывающие части.
[0255] В некоторых вариантах осуществления комбинированное лекарственное средство или композиция согласно изобретению содержит антитело 12819 против PD-1 и антитело 15086.17145 против TIM-3. В некоторых вариантах осуществления комбинированное лекарственное средство или композиция согласно изобретению содержит антитело 12819 против PD-1 и антитело 15532 против LAG-3. В некоторых вариантах осуществления комбинированное лекарственное средство или композиция согласно изобретению содержит антитело 12819 против PD-1, антитело 15086.17145 против TIM-3 и антитело 15532 против LAG-3.
[0256] В некоторых вариантах осуществления комбинированное лекарственное средство или композиция согласно изобретению содержит:
- антитело против PD-1 или его антигенсвязывающую часть, содержащее аминокислотные последовательности H-CDR1-3 и L-CDR1-3 SEQ ID NO: 228-233, соответственно; и антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающую часть, содержащее аминокислотные последовательности H-CDR1-3 и L-CDR1-3 SEQ ID NO: 8-13, соответственно;
- антитело против PD-1 или его антигенсвязывающую часть, содержащее VH и аминокислотные последовательности VL SEQ ID NO: 226 и 227, соответственно; и антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающую часть, содержащее VH и аминокислотные последовательности VL SEQ ID NO: 7 и 4, соответственно; или
- антитело против PD-1, содержащее HC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 226 и 375, и LC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 227 и 379; и антитело против TIM-3, содержащее HC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 7 и 377, и LC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4 и 378.
[0257] В некоторых вариантах осуществления комбинированное лекарственное средство или композиция согласно изобретению содержит:
- антитело против PD-1 или его антигенсвязывающую часть, содержащее аминокислотные последовательности H-CDR1-3 и L-CDR1-3 SEQ ID NO: 228-233, соответственно; и антитело против LAG-3 или его антигенсвязывающую часть, содержащее аминокислотные последовательности H-CDR1-3 и L-CDR1-3 SEQ ID NO: 318-323, соответственно;
- антитело против PD-1 или его антигенсвязывающую часть, содержащее VH и аминокислотные последовательности VL SEQ ID NO: 226 и 227, соответственно; и антитело против LAG-3 или его антигенсвязывающую часть, содержащее VH и аминокислотные последовательности VL SEQ ID NO: 316 и 317, соответственно; или
- антитело против PD-1, содержащее HC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 226 и 375, и LC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 227 и 379; и антитело против LAG-3, содержащее HC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 316 и 375, и LC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 317 и 378.
[0258] В некоторых вариантах осуществления комбинированное лекарственное средство или композиция согласно изобретению содержит:
антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающую часть, содержащее аминокислотные последовательности H-CDR1-3 и L-CDR1-3 SEQ ID NO: 8-13, соответственно; и антитело против LAG-3 или его антигенсвязывающую часть, содержащее аминокислотные последовательности H-CDR1-3 и L-CDR1-3 SEQ ID NO: 318-323, соответственно;
- антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающую часть, содержащее VH и аминокислотные последовательности VL SEQ ID NO: 7 и 4, соответственно; и антитело против LAG-3 или его антигенсвязывающую часть, содержащее VH и аминокислотные последовательности VL SEQ ID NO: 316 и 317, соответственно; или
- антитело против TIM-3, содержащее HC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 7 и 377, и LC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4 и 378; и антитело против LAG-3, содержащее HC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 316 и 375, и LC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 317 и 378.
[0259] В некоторых вариантах осуществления комбинированное лекарственное средство или композиция согласно изобретению содержит:
- антитело против PD-1 или его антигенсвязывающую часть, содержащее аминокислотные последовательности H-CDR1-3 и L-CDR1-3 SEQ ID NO: 228-233, соответственно; антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающую часть, содержащее аминокислотные последовательности H-CDR1-3 и L-CDR1-3 SEQ ID NO: 8-13, соответственно; и антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающую часть, содержащее аминокислотные последовательности H-CDR1-3 и L-CDR1-3 SEQ ID NO: 318-323, соответственно;
- антитело против PD-1 или его антигенсвязывающую часть, содержащее VH и аминокислотные последовательности VL SEQ ID NO: 226 и 227, соответственно; антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающую часть, содержащее VH и аминокислотные последовательности VL SEQ ID NO: 7 и 4, соответственно; и антитело против LAG-3 или его антигенсвязывающую часть, содержащее VH и аминокислотные последовательности VL SEQ ID NO: 316 и 317, соответственно; или
- антитело против PD-1, содержащее HC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 226 и 375, и LC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 227 и 379; антитело против TIM-3, содержащее HC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 7 и 377, и LC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4 и 378; и антитело против LAG-3, содержащее HC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 316 и 375, и LC, которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 317 и 378.
[0260] В некоторых вариантах осуществления любое или все антитела в комбинированном лекарственном средстве или композиции могут относиться к IgG, например, IgG1 или IgG2.
Полиспецифические Связывающие молекулы
[0261] В дополнительном аспекте в изобретении предоставлена полиспецифическая связывающая молекула, имеющая специфичность связывания (например, содержащая антигенсвязывающие части, такие как антигенсвязывающие части, содержащие шесть CDR):
- антитела против PD-1, которое описано в настоящем документе, и антитела против TIM-3, которое описано в настоящем документе;
- антитела против PD-1, которое описано в настоящем документе, и антитела против LAG-3, которое описано в настоящем документе; или
- антитела против TIM-3, которое описано в настоящем документе, и антитела против LAG-3, которое описано в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1, антитело против TIM-3 и/или антитело против LAG-3 выбирают из антител, описанных в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления полиспецифическая связывающая молекула обладает специфичностью связывания антитела против PD-1, описанного в настоящем документе, антитела против TIM-3, описанного в настоящем документе, и антитела против LAG-3, описанного в настоящем документе. В данной области известны полиспецифические связывающие молекулы, и примеры разных типов полиспецифических связывающих молекул приведены в настоящем документе в другом месте. Комбинированные лекарственные средства согласно изобретению охватывают такие полиспецифические (например, биспецифические или триспецифические) связывающие молекулы.
[0262] В дополнительном аспекте в изобретении предоставлено комбинированное лекарственное средство с двумя или более из биспецифической связывающей молекулы, нацеленной на PD-1, биспецифической молекулы, нацеленной на TIM-3, и биспецифической связывающей молекулы, нацеленной на LAG-3. Биспецифическая связывающая молекула, нацеленная на PD-1, TIM-3 или LAG-3, может иметь специфичность связывания антитела, нацеленного на указанный антиген, как описано в настоящем документе, и специфичность связывания другого антитела, нацеленного на тот же антиген (например, другого антитела, которое описано в настоящем документе) или антитела, которое нацелено на другой белок, например, на другой белок иммунной контрольной точки, раковый антиген или другую молекулу клеточной поверхности, активность которой опосредует состояние болезни, такой как рак. В данной области известны подобные биспецифические связывающие молекулы, и примеры разных типов биспецифических связывающих молекул приведены в настоящем документе в другом месте.
Молекулы нуклеиновых кислот и Векторы
[0263] Также, описаны молекулы нуклеиновых кислот и последовательности, кодирующие антитела против PD-1, против TIM-3 и/или против LAG-3 или их антигенсвязывающие части, описанные в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления разные молекулы нуклеиновых кислот кодируют аминокислотные последовательности тяжелой цепи и легкой цепи антитела против PD-1 или его антигенсвязывающей части, антитела против TIM-3 или его антигенсвязывающей части или антитела против LAG-3 или его антигенсвязывающей части. В других вариантах осуществления та же самая молекула нуклеиновой кислоты кодирует аминокислотные последовательности тяжелой цепи и легкой цепи антитела против PD-1 или его антигенсвязывающей части, антитела против TIM-3 или его антигенсвязывающей части или антитела против LAG-3 или его антигенсвязывающей части.
[0264] если не указано иное, ссылка на нуклеотидную последовательность охватывает ее комплемент. Таким образом, ссылку на нуклеиновую кислоту, имеющую конкретную последовательность, следует понимать, как охватывающую ее комплементарную цепь с ее комплементарной последовательностью. Термин «полинуклеотид» в рамках настоящего изобретения означает полимерную форму нуклеотидов длиной по меньшей мере 10 оснований, либо рибонуклеотиды, либо дезоксинуклеотиды, либо модифицированную форму нуклеотида любого типа. Термин включает в себя одно и двуцепочечные формы.
[0265] В некоторых вариантах осуществления нуклеотидные последовательности по меньшей мере на 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97%, 98% или 99% идентичны одной или более нуклеотидным последовательностям, перечисленным в настоящем документе, например, нуклеотидной последовательности, кодирующей аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей SEQ ID NO: 1, 2, 5, 6, 14, 15, 24, 25, 34, 35, 44, 45, 54, 55, 64, 65, 74, 75, 84, 85, 94, 95, 104, 105, 114, 115, 124, 125, 134, 135, 144, 145, 154, 155, 164, 165, 174, 175, 184, 185, 194, 195, 204, 205, 214, 215, 224, 225, 234, 235, 244, 245, 254, 255, 264, 265, 274, 275, 284, 285, 294, 295, 304, 305, 314, 315, 324, 325, 334, 335, 344, 345, 354, 355, 364, 365 или 391. Термин «процентная идентичность последовательности» в контексте последовательностей нуклеиновых кислот относится к остаткам в двух последовательностях, которые являются одинаковыми при выравнивании для максимального соответствия. Длина сравнения идентичности последовательности может соответствовать протяжению по меньшей мере приблизительно девяти нуклеотидов, обычно по меньшей мере приблизительно 18 нуклеотидов, более предпочтительно по меньшей мере приблизительно 24 нуклеотидов, обычно по меньшей мере приблизительно 28 нуклеотидов, более типично по меньшей мере приблизительно 32 нуклеотидов и предпочтительно по меньшей мере приблизительно 36, 48 или более нуклеотидов. В данной области известен ряд различных алгоритмов, которые можно использовать для измерения идентичности нуклеотидной последовательности. Например, полинуклеотидные последовательности можно сравнивать с использованием FASTA, Gap или Bestfit, которые являются программами в Wisconsin Package Version 10.0, Genetics Computer Group (GCG), Madison, Wisconsin. FASTA, которая включает в себя, например, программы FASTA2 и FASTA3, обеспечивает выравнивания и процентную идентичность последовательностей областей наилучшего перекрытия между последовательностями запроса и поиска (см., например, Pearson, Methods Enzymol. 183:63-98 (1990); Pearson, Methods Mol. Biol. 132:185-219 (2000); Pearson, Methods Enzymol. 266:227-258 (1996); и Pearson, J. Mol. Biol. 276:71-84 (1998); включены в настоящий документ посредством ссылки). Если не указано иное, используются параметры по умолчанию для конкретной программы или алгоритма. Например, процент идентичности последовательности между последовательностями нуклеиновой кислоты можно определить с использованием FASTA с его параметрами по умолчанию (размером слова 6 и коэффициентом NOPAM для матрицы оценки) или с использованием Gap с его параметрами по умолчанию, как предусмотрено в GCG версии 6.1, включенной в настоящий документ посредством ссылки.
[0266] В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты содержит одну или более нуклеотидных последовательностей, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, 2, 5, 6, 14, 15, 24, 25, 34, 35, 44, 45, 54, 55, 64, 65, 74, 75, 84, 85, 94, 95, 104, 105, 114, 115, 124, 125, 134, 135, 144, 145, 154, 155, 164, 165, 174, 175, 184, 185, 194, 195, 204, 205, 214, 215, 224, 225, 234, 235, 244, 245, 254, 255, 264, 265, 274, 275, 284, 285, 294, 295, 304, 305, 314, 315, 324, 325, 334, 335, 344, 345, 354, 355, 364, 365 или 391.
[0267] В любом из приведенных выше вариантов осуществления можно выделить молекулы нуклеиновых кислот. Молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую тяжелую и/или легкую цепь антитела или его антигенсвязывающую часть, описанные в настоящем документе, можно выделить из любого источника, который продуцирует подобное антитело или его часть. В разных вариантах осуществления молекулы нуклеиновых кислот выделяют из B-клеток, которые экспрессируют антитело, выделенное у животного, иммунизированного антигеном PD-1, TIM-3 или LAG-3, или из иммортализированной клетки, полученной из такой B-клетки. В данной области хорошо известны способы выделения нуклеиновых кислот, кодирующих антитела. Для использования в полимеразной цепной реакции (PCR) или клонировании кДНК генов антитела можно выделить и использовать мРНК для получения кДНК. В некоторых вариантах осуществления молекулу нуклеиновой кислоты, которая описана в настоящем документе, можно синтезировать, а не выделять.
[0268] В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты, которая описана в настоящем документе, может содержать нуклеотидную последовательность, кодирующую домен VH из антитела или антигенсвязывающей части, описанных в настоящем документе, присоединенную в рамке к нуклеотидной последовательности, кодирующей константную область тяжелой цепи из любого источника. Аналогично, молекула нуклеиновой кислоты, которая описана в настоящем документе, может содержать нуклеотидную последовательность, кодирующую домен VL из антитела или антигенсвязывающей части, описанных в настоящем документе, присоединенную в рамке к нуклеотидной последовательности, кодирующей константную область легкой цепи из любого источника.
[0269] В дополнительном аспекте молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие вариабельный домен тяжелой (VH) и/или легкой (VL) цепи, можно «преобразовать» в гены полноразмерных антител. В одном варианте осуществления молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие домены VH или VL, преобразуют в гены полноразмерных антител путем встраивания в вектор экспрессии, уже кодирующий константные области тяжелой цепи (CH) или легкой цепи (CL), соответственно, таким образом, чтобы функционально связать внутри вектора сегмент VH с сегментом (сегментами) CH и/или функционально связать внутри вектора сегмент VL с сегментом CL. В другом варианте осуществления молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие домены VH или VL, преобразуют в гены полноразмерных антител путем связывания, например, лигирования, молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей домены VH или VL, с молекулой нуклеиновой кислоты, кодирующей область CH и/или CL, с использованием стандартных молекулярных биологических технологий. Затем молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие полноразмерные тяжелую и/или легкую цепи, можно экспрессировать из клетки, в которую они были введены, и выделить антитело.
[0270] молекулы нуклеиновых кислот можно использовать для рекомбинантной экспрессии больших количеств антител. Молекулы нуклеиновых кислот также можно использовать для получения химерных антител, биспецифических антител, одноцепочечных антител, иммуноадгезинов, диател, мутантных антител и производных антител, которые описаны в настоящем документе.
[0271] Также в настоящем документе описан вектор, подходящий для экспрессии одной или обеих цепей антитела против PD-1 или его антигенсвязывающей части, антитела против TIM-3 или его антигенсвязывающей части и/или антитела против LAG-3 или его антигенсвязывающей части, которые описаны в настоящем документе. Термин «вектор» в рамках настоящего изобретения означает молекулу нуклеиновой кислоты, способную транспортировать другую нуклеиновую кислоту, с которой она была связана. В некоторых вариантах осуществления вектором является плазмида, т.е. кольцевой двухцепочечный фрагмент ДНК, в который можно лигировать дополнительные сегменты ДНК. В некоторых вариантах осуществления вектором является вирусный вектор, в котором в вирусный геном можно лигировать дополнительные сегменты ДНК. В некоторых вариантах осуществления векторы способны к автономной репликации в клетке-хозяине, в которую их вводят (например, бактериальные векторы, имеющие бактериальную точку начала репликации и эписомальные векторы млекопитающих). В других вариантах осуществления векторы (например, неэписомальные векторы млекопитающих) можно интегрировать в геном клетки-хозяина при введении в клетку-хозяина и, следовательно, они реплицируются вместе с геномом хозяина. Кроме того, некоторые векторы способны направлять экспрессию генов, с которыми они функционально связаны. Подобные векторы упоминаются в настоящем документе как «рекомбинантные векторы экспрессии» (или просто, «векторы экспрессии»).
[0272] В некоторых вариантах осуществления векторы содержат молекулы нуклеиновых кислот, которые кодируют тяжелую цепь, легкую цепь или и тяжелую и легкую цепи описанного в настоящем документе антитела или его антигенсвязывающей части. В некоторых вариантах осуществления векторы содержат молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие белки слияния, модифицированные антитела, фрагменты антител и их зонды.
[0273] В некоторых вариантах осуществления антитела против PD-1, против TIM-3 или против LAG-3 или их антигенсвязывающие части экспрессируют путем встраивания ДНК, кодирующей частичные или полноразмерные легкие и тяжелые цепи, полученные как описано выше, в векторы экспрессии, так чтобы гены были функционально связаны с необходимыми последовательностями контроля экспрессии, такими как последовательности контроля транскрипции и трансляции. Векторы экспрессии включают в себя плазмиды, ретровирусы, аденовирусы, аденоассоциированные вирусы (AAV), растительные вирусы, такие как вирус мозаики цветной капусты, вирус мозаики табака, космиды, YAC, полученные из EBV эписомы и тому подобное. Кодирующую последовательность антитела можно лигировать в вектор таким образом, чтобы последовательности контроля транскрипции и трансляции внутри вектора выполняли предназначенную для них функцию регулирования транскрипции и трансляции кодирующей последовательности антитела. Вектор экспрессии и последовательности контроля экспрессии можно выбирать так, чтобы они были совместимы с используемой клеткой-хозяином экспрессии. Последовательность кодирования легкой цепи антитела и последовательность кодирования тяжелой цепи антитела можно встроить в отдельные векторы и можно функционально связать с одинаковыми или разными последовательностями контроля экспрессии (например, промоторами). В одном варианте осуществления обе кодирующие последовательности вставляют в один и тот же вектор экспрессии, и их можно функционально связать с одинаковыми последовательностями контроля экспрессии (например, общим промотором), чтобы отделить идентичные последовательности контроля экспрессии (например, промоторы), или с другими последовательностями контроля экспрессии (например, промоторами). Последовательности кодирования антитела можно вводить в вектор экспрессии стандартными способами (например, лигированием комплементарных сайтов рестрикции на фрагменте и векторе гена антитела или лигированием тупого конца, если сайты рестрикции отсутствуют).
[0274] Подходящим вектором является вектор, который кодирует функционально завершенную последовательность иммуноглобулина CH или CL человека с соответствующими сайтами рестрикции, сконструированный так, что любую последовательность VH или VL можно легко вставить и экспрессировать, как описано выше. Гены, кодирующие HC и LC в таких векторах, могут содержать интронные последовательности, которые будут приводить к повышению общего выхода белка антитела путем стабилизации связанной мРНК. Последовательности интрона фланкируют сайтами донора сплайсинга и акцептора сплайсинга, которые определяют, где произойдет сплайсинг РНК. При использовании нескольких интронов расположение последовательностей интронов может быть либо в вариабельных, либо в константных областях цепей антител, или и в вариабельных и в константных областях. Полиаденилирование и терминация транскрипции могут происходить в нативных хромосомных сайтах после кодирующих областей. рекомбинантный вектор экспрессии также может кодировать сигнальный пептид, который облегчает секрецию цепи антитела из клетки-хозяина. Ген цепи антитела можно клонировать в вектор таким образом, чтобы связать сигнальный пептид в рамке с амино-концом цепи иммуноглобулина. Сигнальным пептидом может быть сигнальный пептид иммуноглобулина или гетерологичный сигнальный пептид (то есть сигнальный пептид из белка, не являющегося иммуноглобулином).
[0275] В дополнение к генам цепей антитела рекомбинантные векторы экспрессии могут нести регуляторные последовательности, которые контролируют экспрессию генов цепей антитела в клетке-хозяине. Специалистам в данной области будет понятно, что конструкция вектора экспрессии, включая выбор регуляторных последовательностей, может зависеть от таких факторов, как выбор клетки-хозяина, подлежащей трансформации, требуемый уровень экспрессии белка и т.д. Предпочтительные регуляторные последовательности для экспрессии клеток-хозяев млекопитающих включают вирусные элементы, которые направляют высокие уровни экспрессии белка в клетках млекопитающих, такие как промоторы и/или энхансеры, полученные из ретровирусных LTR, цитомегаловируса (CMV) (например, промотор/энхансер CMV), вирус обезъян 40 (SV40) (например, промотор/энхансер SV40), аденовирус (например, главный поздний промотор аденовируса (AdMLP)), полиома и сильные промоторы млекопитающих, например, нативные промоторы иммуноглобулина и актина. Дополнительное описание вирусных регуляторных элементов и их последовательностей см., например, в патентах США 5168062, 4510245 и 4968615. В данной области известны способы экспрессии антител в растениях, включая описание промоторов и векторов, а также трансформацию растений. См., например, патент США 6517529. Также в данной области хорошо известны способы экспрессии полипептидов в бактериальных клетках или клетках грибов, например, в дрожжевых клетках.
[0276] В дополнение к генам цепей антител и регуляторным последовательностям рекомбинантные векторы экспрессии могут нести дополнительные последовательности, такие как последовательности, которые регулируют репликацию вектора в клетках-хозяевах (например, начало репликации) и селектируемые маркерные гены. Селектируемый маркерный ген облегчает отбор клеток-хозяев, в которые был введен вектор (см., например, патенты США 4399216, 4634665 и 5179017). Например, обычно селектируемый маркерный ген придает клетке-хозяину, в которую был введен вектор, устойчивость к лекарствам, таким как G418, гигромицин или метотрексат. Например, селектируемые маркерные гены включают в себя ген дигидрофолатредуктазы (DHFR) (для использования в клетках-хозяевах dhfr с селекцией/амплификацией метотрексата), ген neo (для селекции G418) и ген глутаматсинтетазы.
[0277] В рамках настоящего изобретения термин «последовательность контроля экспрессии» означает полинуклеотидные последовательности, которые необходимы для осуществления экспрессии и обработки кодирующих последовательностей, в которые они лигированы. Последовательности контроля экспрессии включают в себя соответствующие последовательности инициации, терминации, промотора и энхансера транскрипции; эффективные сигналы процессинга РНК, такие как сигналы сплайсинга и полиаденилирования; последовательности, которые стабилизируют цитоплазматическую мРНК; последовательности, которые повышают эффективность трансляции (то есть консенсусную последовательность Козака); последовательности, которые повышают стабильность белка; и, при необходимости, последовательности, которые усиливают секрецию белка. Природа таких контрольных последовательностей различается в зависимости от организма хозяина; у прокариот такие контрольные последовательности обычно включают промотор, сайт связывания рибосомы и последовательность терминации транскрипции; у эукариот, как правило, такие контрольные последовательности включают в себя промоторы и последовательность терминации транскрипции. Термин «контрольные последовательности» предназначен для охвата, как минимум, всех компонентов, присутствие которых является существенным для экспрессии и процессинга, а также может охватывать дополнительные компоненты, присутствие которых является предпочтительным, например, лидерные последовательности и последовательности партнеров слияния.
Клетки-хозяева и способы получения антител и композиций антител
[0278] Также описаны способы получения комбинированных лекарственных средств (например, композиций) согласно изобретению. Один вариант осуществления относится к способу получения антител, которые описаны в настоящем документе, включающему предоставление рекомбинантных клеток-хозяев, способных экспрессировать антитела, культивирование указанных клеток-хозяев в условиях, подходящих для экспрессии антител, и выделение полученных антител. Антитела, получаемые в результате такой экспрессии в таких рекомбинантных клетках-хозяевах, называются в настоящем документе «рекомбинантными антителами». Также описаны клетки потомства таких клеток-хозяев и продуцируемые ими антитела.
[0279] В рамках настоящего изобретения термин «рекомбинантная клетка-хозяин» (или просто «клетка-хозяин») означает клетку, в которую был введен рекомбинантный вектор экспрессии. Клетка-хозяин может содержать, например, один или несколько векторов, которые описаны в настоящем документе. Клетки-хозяева могут содержать, например, нуклеотидную последовательность, кодирующую тяжелую цепь или ее антигенсвязывающую часть, нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь или ее антигенсвязывающую часть, или и антитело против PD-1, против TIM-3 и/или против LAG-3 или их антигенсвязывающие части, которые описаны в настоящем документе. Следует понимать, что «рекомбинантная клетка-хозяин» и «клетка-хозяин» означают не только конкретную заявленную клетку, но и потомство такой клетки. Поскольку определенные модификации могут возникать в последующих поколениях из-за мутации или влияния окружающей среды, такое потомство может фактически не быть идентичным родительской клетке, но все же в рамках настоящего изобретения включено в объем термина «клетка-хозяин».
[0280] Молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие антитела против PD-1, против TIM-3 и/или против LAG-3 или их антигенсвязывающие части, и векторы, содержащие эти молекулы нуклеиновой кислоты, можно использовать для трансфекции клетки-хозяина подходящего млекопитающего, растения, бактерии или дрожжей. Трансформацию можно осуществлять любым известным способом введения полинуклеотидов в клетку-хозяина. Способы введения гетерологичных полинуклеотидов в клетки млекопитающих хорошо известны в данной области и включают декстран-опосредованную трансфекцию, осаждение фосфатом кальция, полибрен-опосредованную трансфекцию, слияние протопластов, электропорацию, инкапсуляцию полинуклеотида (полинуклеотидов) в липосомы и прямую микроинъекцию ДНК в ядра. Кроме того, молекулы нуклеиновой кислоты можно вводить в клетки млекопитающих вирусными векторами. Способы трансформации клеток хорошо известны в данной области. См., например, патенты США 4399216, 4912040, 4740461 и 4959455. Способы трансформации растительных клеток хорошо известны в данной области, включая, например, трансформацию, опосредованную Agrobacterium, биолистическую трансформацию, прямую инъекцию, электропорацию и вирусную трансформацию. Способы трансформации бактериальных и дрожжевых клеток также хорошо известны в данной области.
[0281] Клеточные линии млекопитающих, доступные в качестве хозяев для экспрессии, хорошо известны в данной области и включают множество иммортализованных клеточных линий, доступных из Американской коллекции типовых культур (АТСС). К ним относятся, в частности, клетки яичника китайского хомячка (CHO), клетки NS0, клетки SP2, клетки HEK-293T, клетки 293 Freestyle (Invitrogen), клетки NIH-3T3, клетки HeLa, клетки почки новорожденного хомяка (BHK), клетки почки африканской зеленой мартышки (COS), клетки гепатоцеллюлярной карциномы человека (например, Hep G2), клетки A549 и ряд других клеточных линий. Особо предпочтительные клеточные линии выбирают путем определения, какие клеточные линии имеют высокие уровни экспрессии. Другими клеточными линиями, которые можно использовать, являются клеточные линии насекомых, такие как клетки Sf9 или Sf21. Когда рекомбинантные векторы экспрессии, кодирующие гены антител, вводят в клетки-хозяева млекопитающих, антитела получают путем культивирования клеток-хозяев в течение периода времени, достаточного для обеспечения экспрессии антитела в клетках-хозяевах или, более предпочтительно, секреции антитела в культуральной среде, в которой выращивают клетки-хозяева. Антитела можно выделять из культуральной среды с использованием стандартных методов очистки белка. Растительные клетки-хозяева включают, например, Nicotiana, Arabidopsis, ряску, кукурузу, пшеницу, картофель и т.д. Бактериальные клетки-хозяева включают виды E.coli и Streptomyces. Клетки-хозяева дрожжей включают Schizosaccharomyces pombe, Saccharomyces cerevisiae и Pichia pastoris.
[0282] Кроме того, экспрессию антител или их антигенсвязывающих частей, которые описаны в настоящем документе, из полученных клеточных линий можно улучшить с использованием ряда известных методик. Например, система экспрессии гена глутаминсинтетазы (система GS) является общим подходом для усиления экспрессии в определенных условиях. Система GS обсуждается полностью или частично в связи с патентами ЕР 0216846, 0256055, 0323997 и 0338841.
[0283] Вероятно, что антитела, экспрессируемые разными клеточными линиями или у трансгенных животных, будут иметь отличающиеся друг от друга паттерны гликозилирования. Однако все антитела, кодируемые молекулами нуклеиновой кислоты, представленными в настоящем документе, или содержащими аминокислотные последовательности, представленные в настоящем документе, являются частью настоящего изобретения, независимо от состояния гликозилирования антител, и, в более общем смысле, независимо от наличия или отсутствия посттрансляционной модификации (модификаций).
[0284] В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способу получения композиции антител, содержащей антитело против PD-1 и антитело против TIM-3, причем способ включает:
- предоставление первой и второй клеток-хозяев, причем первая клетка-хозяин способна экспрессировать антитело против PD-1, которое описано в настоящем документе, а вторая клетка-хозяин способна экспрессировать антитело против TIM-3, которое описано в настоящем документе,
- культивирование первой и второй клеток-хозяев в условиях, подходящих для экспрессии антитела против PD-1 и антитела против TIM-3, и
- выделение полученных в результате антител.
[0285] В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способу получения композиции антител, содержащей антитело против PD-1 и антитело против LAG-3, причем способ включает:
- предоставление первой и второй клеток-хозяев, причем первая клетка-хозяин способна экспрессировать антитело против PD-1, которое описано в настоящем документе, а вторая клетка-хозяин способна экспрессировать антитело против LAG-3, которое описано в настоящем документе,
- культивирование первой и второй клеток-хозяев в условиях, подходящих для экспрессии антитела против PD-1 и антитела против LAG-3, и
- выделение полученных в результате антител.
[0286] В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способу получения композиции антител, содержащей антитело против TIM-3 и антитело против LAG-3, причем способ включает:
- предоставление первой и второй клеток-хозяев, причем первая клетка-хозяин способна экспрессировать антитело против TIM-3, которое описано в настоящем документе, а вторая клетка-хозяин способна экспрессировать антитело против LAG-3, которое описано в настоящем документе,
- культивирование первой и второй клеток-хозяев в условиях, подходящих для экспрессии антитела против TIM-3 и антитела против LAG-3, и
- выделение полученных в результате антител.
[0287] В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способу получения композиции антител, содержащей антитело против PD-1, антитело против TIM-3 и антитело против LAG-3, причем способ включает:
- предоставление первой, второй и третьей клеток-хозяев, причем первая клетка-хозяин способна экспрессировать антитело против PD-1, которое описано в настоящем документе, вторая клетка-хозяин способна экспрессировать антитело против TIM-3, которое описано в настоящем документе, а третья клетка-хозяин способна экспрессировать антитело против LAG-3, которое описано в настоящем документе,
- культивирование первой, второй и третьей клеток-хозяев в условиях, подходящих для экспрессии антитела против PD-1, антитела против TIM-3 и антитела против LAG-3, и
- выделение полученных в результате антител.
[0288] Для получения композиции антител согласно изобретению антитела, направленные на разные мишени, можно получать отдельно, т.е. каждое антитело получают в отдельном биореакторе, или отдельные антитела можно получать вместе в одном биореакторе. Если композицию антител получают более чем в одном биореакторе, очищенную композицию антител можно получать путем объединения антител, полученных из отдельно очищенных супернатантов из каждого биореактора. В PCT публикации WO 2009/129814 описаны различные подходы для получения композиции поликлональных антител во многих биореакторах, где препараты клеточных линий или антител объединяют в последний момент до или перед или во время последующей обработки.
[0289] В случае получения отдельных антител в одном биореакторе, это можно выполнять, например, как описано в PCT публикации WO 2004/061104 или WO 2008/145133. Способ, описанный в WO 2004/061104, основан на сайтспецифической интеграции кодирующей антитело последовательности в геном отдельных клеток-хозяев, тогда как способ WO 2008/145133 включает в себя альтернативный подход с использованием случайной интеграции для получения антител в одном биореакторе.
[0290] Дополнительную информацию, касающуюся способов, подходящих для получения композиций антител согласно изобретению можно найти в PCT публикациях WO 2012/059857 и WO 2013/164689.
[0291] В настоящем изобретении также представлена поликлональная клеточная линия, которая продуцирует:
- по меньшей мере одно антитело против PD-1 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, и по меньшей мере одно антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе;
- по меньшей мере одно антитело против PD-1 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, и по меньшей мере одно антитело против LAG-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе;
- по меньшей мере одно антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, и по меньшей мере одно антитело против LAG-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе; или
- по меньшей мере одно антитело против PD-1 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, по меньшей мере одно антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, и по меньшей мере одно антитело против LAG-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе.
[0292] В настоящем изобретении также представлен способ получения описанной выше поликлональной клеточной линии, включающий предоставление клеток-хозяев, каждая из которых содержит нуклеотидную последовательность, которая кодирует тяжелую цепь или ее антигенсвязывающую часть, и нуклеотидную последовательность, которая кодирует легкую цепь или ее антигенсвязывающую часть по меньшей мере одного из антител или частей, получаемых с помощью поликлональной клеточной линии.
[0293] В настоящем изобретении также представлены клетки-хозяева, содержащие:
- нуклеотидную последовательность, которая кодирует тяжелую цепь или ее антигенсвязывающую часть, нуклеотидную последовательность, которая кодирует легкую цепь или ее антигенсвязывающую часть, или и то и другое, антитела против PD-1, которое описано в настоящем документе, и нуклеотидную последовательность, которая кодирует тяжелую цепь или ее антигенсвязывающую часть, нуклеотидную последовательность, которая кодирует легкую цепь или ее антигенсвязывающую часть, или и то и другое, антитела против TIM-3, которое описано в настоящем документе;
- нуклеотидную последовательность, которая кодирует тяжелую цепь или ее антигенсвязывающую часть, нуклеотидную последовательность, которая кодирует легкую цепь или ее антигенсвязывающую часть, или и то и другое, антитела против PD-1, которое описано в настоящем документе; и нуклеотидную последовательность, которая кодирует тяжелую цепь или ее антигенсвязывающую часть, нуклеотидную последовательность, которая кодирует легкую цепь или ее антигенсвязывающую часть, или и то и другое, антитела против LAG-3, которое описано в настоящем документе;
- нуклеотидную последовательность, которая кодирует тяжелую цепь или ее антигенсвязывающую часть, нуклеотидную последовательность, которая кодирует легкую цепь или ее антигенсвязывающую часть, или и то и другое, антитела против TIM-3, которое описано в настоящем документе; и нуклеотидную последовательность, которая кодирует тяжелую цепь или ее антигенсвязывающую часть, нуклеотидную последовательность, которая кодирует легкую цепь или ее антигенсвязывающую часть, или и то и другое, антитела против LAG-3, которое описано в настоящем документе; или
- нуклеотидную последовательность, которая кодирует тяжелую цепь или ее антигенсвязывающую часть, нуклеотидную последовательность, которая кодирует легкую цепь или ее антигенсвязывающую часть, или и то и другое, антитела против PD-1, которое описано в настоящем документе; нуклеотидную последовательность, которая кодирует тяжелую цепь или ее антигенсвязывающую часть, нуклеотидную последовательность, которая кодирует легкую цепь или ее антигенсвязывающую часть, или и то и другое, антитела против TIM-3, которое описано в настоящем документе; и нуклеотидную последовательность, которая кодирует тяжелую цепь или ее антигенсвязывающую часть, нуклеотидную последовательность, которая кодирует легкую цепь или ее антигенсвязывающую часть, или и то и другое, антитела против LAG-3, которое описано в настоящем документе.
Фармацевтические композиции
[0294] В еще одном аспекте изобретения представлена фармацевтическая композиция, содержащая в качестве активных ингредиентов (например, в качестве единственных активных ингредиентов):
по меньшей мере одно антитело против PD-1 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, и по меньшей мере одно антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе;
- по меньшей мере одно антитело против PD-1 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, и по меньшей мере одно антитело против LAG-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе;
- по меньшей мере одно антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, и по меньшей мере одно антитело против LAG-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе; или
- по меньшей мере одно антитело против PD-1 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, по меньшей мере одно антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, и по меньшей мере одно антитело против LAG-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе.
В некоторых аспектах фармацевтическая композиция содержит полиспецифическую связывающую молекулу (например, полиспецифическую связывающую молекулу, которая обладает специфичностью связывания антитела против PD-1, которое описано в настоящем документе, и антитела против TIM-3 или против LAG-3, которое описано в настоящем документе; или антитела против PD1, антитела против TIM-3 и антитела против LAG-3, которые описаны в настоящем документе).
[0295] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция может дополнительно содержать одно или более дополнительных антител, которые нацелены на один или более соответствующих рецепторов клеточной поверхности, например, на один или более релевантных для рака рецепторов.
[0296] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция предназначена для улучшения, предотвращения и/или лечения расстройства, заболевания или состояния, которое улучшает или замедляет его прогрессирование путем модуляции PD-1, TIM-3 и/или LAG-3. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция предназначена для улучшения, предотвращения и/или лечения рака. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция предназначена для активации иммунной системы.
[0297] Соотношение между антителами или их антигенсвязывающими частями в фармацевтической композиции согласно изобретению (или отдельными описанными в настоящем документе антителами или частями, вводимыми одновременно, последовательно или по отдельности) часто будет таким, что антитела вводят в равных количествах, но это не обязательно должно быть так. Таким образом, композиция согласно изобретению, содержащая антитело против PD-1 и антитело против TIM-3, антитело против PD-1 и антитело против LAG-3 или антитело против TIM-3 и антитело против LAG-3 может содержать указанные антитела в соотношении приблизительно 1:1. Композиция согласно изобретению, содержащая антитело против PD-1, антитело против TIM-3 и антитело против LAG-3, может содержать указанные антитела в отношении приблизительно 1:1:1: (т.е. в равных количествах). Однако в зависимости от характеристик отдельных антител может быть желательно использовать неравные количества различных антител. Подходящие соотношения для различных антител в композициях согласно изобретению могут быть определены, как описано в публикации РСТ WO 2010/040356, в которой описаны способы идентификации и выбора оптимального стехиометрического соотношения между химическими веществами в комбинированном лекарственном продукте, например, в композиции поликлональных антител, для получения комбинаторного лекарственного средства с оптимальным действием и эффективностью.
[0298] Как правило, фармацевтические композиции, описанные в настоящем документе, пригодны для введения в виде препарата в сочетании с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми вспомогательным средством (средствами), например, как описано ниже.
[0299] Термин «вспомогательное средство» использовано в настоящем документе для описания любого ингредиента, отличного от соединения (соединений) согласно изобретению. Выбор вспомогательного средства (средств) в значительной степени будет зависеть от таких факторов, как конкретный способ введения, влияние вспомогательного средства на растворимость и стабильность и характер лекарственной формы. В рамках настоящего изобретения термин «фармацевтически приемлемое вспомогательное средство» включает в себя любые и все растворители, дисперсионные среды, покрытия, антибактериальные и противогрибковые средства, изотонические средства и средства, замедляющие абсорбцию, и тому подобное, которые являются физиологически совместимыми. Некоторыми примерами фармацевтически приемлемых вспомогательных средств являются вода, физиологический раствор, физиологический раствор с фосфатным буфером, декстроза, глицерин, этанол и тому подобное, а также их комбинации. Во многих случаях будет предпочтительно включать в композицию изотонические средства, например сахара, полиспирты, такие как маннит, сорбит или хлорид натрия. Дополнительными примерами фармацевтически приемлемых веществ являются смачивающие средства или незначительные количества вспомогательных веществ, таких как смачивающие или эмульгирующие средства, консерванты или буферы, которые увеличивают срок годности или эффективность антитела.
[0300] Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению и способы их получения будут очевидны для специалистов в данной области. Такие композиции и способы их получения можно найти, например, в Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th Edition (Mack Publishing Company, 1995). Фармацевтические композиции предпочтительно изготавливаются в условиях GMP (надлежащей производственной практики).
[0301] Фармацевтическую композицию согласно изобретению можно получать, упаковывать или продавать оптом в виде одной разовой дозы или множества отдельных разовых доз. В рамках настоящего изобретения «разовая доза» представляет собой дискретное количество фармацевтической композиции, содержащей заданное количество активного ингредиента. Количество активного ингредиента обычно равно дозировке активного ингредиента, которую вводят субъекту, или подходящей фракции такой дозировки, такой как, например, половина или треть такой дозировки.
[0302] Любой способ введения пептидов, белков или антител, принятый в данной области, можно подходящим образом использовать для антител и антигенсвязывающих частей, описанных в настоящем документе.
[0303] фармацевтические композиции согласно изобретению обычно подходят для парентерального введения. В рамках настоящего изобретения «парентеральное введение» фармацевтической композиции включает в себя любой путь введения, характеризующийся физическим повреждением ткани субъекта и введением фармацевтической композиции через нарушение ткани, что, как правило, приводит к прямому введению в кровоток, в мышцу или во внутренний орган. Таким образом, парентеральное введение включает в себя, но без ограничения, введение фармацевтической композиции путем инъекции композиции, нанесения композиции через хирургический разрез, нанесения композиции через проникающую в ткань нехирургическую рану и тому подобное. В частности, предполагается, что парентеральное введение включает в себя, но без ограничения, подкожную, внутрибрюшинную, внутримышечную, внутригрудинную, внутривенную, внутриартериальную, внутриоболочечную, внутрижелудочковую, внутриуретральную, внутричерепную, внутриопухолевую и внутрисуставную инъекцию или инфузии; и технологии инфузии для диализа почек. Также предусмотрена регионарная перфузия. Конкретные варианты осуществления включают в себя внутривенный и подкожный пути.
[0304] Готовые формы фармацевтической композиции, подходящие для парентерального введения, обычно содержат активный ингредиент в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем, таким как стерильная вода или стерильный изотонический солевой раствор. Подобные готовые формы можно получать, упаковывать или продавать в форме, подходящей для болюсного введения или для непрерывного введение. Инъецируемые готовые формы можно получать, упаковывать или продавать в стандартной лекарственной форме, такой как ампулы или контейнеры с несколькими дозами, содержащие консервант. Готовые формы для парентерального введения включают в себя, но без ограничения суспензии, растворы, эмульсии на масляных или водных нейтральных основах, пасты и тому подобное. Подобные готовые формы могут дополнительно содержать один или более дополнительных ингредиентов, включая, но без ограничения, суспендирующие, стабилизирующие или диспергирующие средства. В одном варианте осуществления готовой формы для парентерального введения, активный ингредиент представлен в сухой (т.е. Порошковой или гранулированной) форме для восстановления с помощью подходящей нейтральной основы (например, стерильной апирогенной воды) перед парентеральным введением восстановленной композиции. Парентеральные готовые формы также включают в себя водные растворы, которые могут содержать вспомогательные средства, такие как соли, углеводы и буферные средства (предпочтительно до pH от 3 дл 9), но для некоторых вариантов применения их можно получать более подходящим образом в виде стерильного неводного раствора или в виде высушенной формы для использования в сочетании с подходящей нейтральной основой, такой как стерильная, апирогенная вода. Иллюстративные формы для парентерального введения включают в себя растворы или суспензии в стерильных водных растворах, например, водных растворах пропиленгликоля или декстрозы. При необходимости такие лекарственные формы можно должным образом забуферивать. Другие полезные вводимые парентерально готовые формы включают в себя формы, которые содержат активный ингредиент в микрокристаллической форме или в липосомном препарате. Готовые формы для парентерального введения можно получить для немедленного и/или модифицированного высвобождения готовые формы для модифицированного высвобождения включают в себя отсроченное, длительное, импульсное, регулируемое, целевое и запрограммированное высвобождение.
[0305] Например, в одном аспекте стерильные инъецируемые растворы можно получить путем объединения композиций в необходимом количестве в подходящем растворителе с одним или комбинацией ингредиентов, перечисленных выше, по мере необходимости с последующей стерилизацией с фильтрацией. Как правило, дисперсии получают путем включения активного соединения в стерильный носитель, который содержит основную дисперсионную среду и необходимые другие ингредиенты из перечисленных выше. В случае стерильных порошков для получения стерильных растворов для инъекций предпочтительными способами получения являются вакуумная сушка и сублимационная сушка, которые дают порошок активного ингредиента плюс любой дополнительный желаемый ингредиент из его предварительно стерильно отфильтрованного раствора. Надлежащую текучесть раствора можно поддерживать, например, путем использования покрытия, такого как лецитин, путем поддержания требуемого размера частиц в случае дисперсии и путем использования поверхностно-активных веществ. Пролонгированная абсорбция инъецируемых композиций может быть достигнута за счет включения в композицию средства, которое задерживает абсорбцию, например, солей моностеарата и желатина, и/или за счет использования покрытий с модифицированным высвобождением (например, покрытий с медленным высвобождением).
Терапевтическое применение комбинированных лекарственных средств и композиций согласно изобретению
В одном аспекте комбинированные лекарственные средства и композиции согласно изобретению используют для усиления или активации иммунной системы у нуждающегося в этом пациента (например, человека). В некоторых вариантах осуществления у пациента подавлен иммунитет. В некоторых вариантах врач может усилить противораковую активность собственной иммунной системы пациента путем введения комбинированного лекарственного средства или композиции согласно настоящему изобретению, отдельно или в комбинации с другими терапевтическими средствами (последовательно или одновременно). Комбинированное лекарственное средство или композиция модулирует активность PD-1, TIM-3 и/или LAG-3 в иммунных клетках, что приводит к повышению противоракового иммунитета. В некоторых вариантах осуществления комбинированные лекарственные средства и композиции согласно изобретению предназначены для применения при лечении рака, например рака, который возникает в таких тканях, как кожа, легкие, кишечник, толстая кишка, яичник, головной мозг, предстательная железа, почка, мягкие ткани, кроветворная система, голова и шея, печень, мочевой пузырь, молочная железа, желудок, матка и поджелудочная железа, и любых видов рака или других состояний, которые зависят от активности PD-1, TIM-3 и/или LAG-3, и/или в которых пациент экспрессирует или сверхэкспрессирует лиганд любого из них.
[0307] В некоторых вариантах осуществления виды рака, которые лечат комбинированными способами лечения и композициями согласно изобретению, могут включать в себя, например, меланому (например, прогрессирующую или метастатическую меланому), немелкоклеточный рак легкого, плоскоклеточный рак головы и шеи, почечноклеточный рак, лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому, глиобластому, глиому, плоскоклеточный рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, гепатоцеллюлярную карциному, рак мочевого пузыря, рак верхних мочевых путей, рак пищевода, рак пищеводно-желудочного перехода, рак желудка, рак печени, рак толстой кишки, колоректальную карциному, множественную миелому, саркомы, острый миелоидный лейкоз, хронический миелоидный лейкоз, миелодлиспластический синдром, рак носоглотки, хронический лимфоцитарный лейкоз, острый лимфобластный лейкоз, лимфоцитарную лимфому, рак яичников, рак желудочно-кишечного тракта, первичный рак брюшины, рак маточной трубы, рак уротелия, HTLV-ассоциированный T-клеточный лейкоз/лимфому, рак предстательной железы, рак мочеполовой системы, менингиому, аденокортикальный рак, глиосаркому, фибросаркому, рак почки, рак молочной железы, рак поджелудочной железы, рак эндометрия, базально-клеточный рак кожи, рак червеобразного отростка, рак желчных протоков, рак слюнных желез, прогрессирующий рак из клеток Меркеля, диффузную В-крупноклеточную лимфому, фолликулярную лимфому, мезотелиому, нейроэндокринные опухоли, рак мочеполовой системы, рак костей, рак грудной клетки, рак дыхательных путей, аденокистозную карциному, рак шейки матки, астроцитому, хордому, нейробластому, рак полости рта, плоскоклеточную карциному кожи, рак щитовидной железы, саркому Капоши, рак анального канала, рак желчного пузыря, рак вилочковой железы, рак матки и солидная опухоли. Рак может быть, например, на ранней, средней, поздней или метастатической стадии.
[0308] В отдельных вариантах осуществления виды рака, которые лечат комбинированными способами лечения и композициями согласно изобретению могут включать в себя, например, меланому (например, прогрессирующую меланому или нерезектабельную или метастатическую меланому), немелкоклеточный рак легкого (например, прогрессирующий немелкоклеточный рак легкого), карциному легкого, плоскоклеточный рак головы и шеи, глиобластому (например, рецидивирующую глиобластому), глиосаркому, карциному из клеток Меркеля, фибросаркому, рак яичников, рак мочевого пузыря, почечноклеточный рак, рак толстого кишечника, лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому, лейкоз (например, острый миелоидный лейкоз), гематологические злокачественные опухоли, солидные опухоли (например, прогрессирующие или метастатические солидные опухоли), опухоли MSI-high, злокачественные новообразования, ассоциированные с HPV и HIV, и опухоли с мутациями BRAC1 и BRAC2.
[0309] В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции согласно изобретению предназначены для лечения иммуноопосредованного расстройства, такого как псориаз, системная красная волчанка, MLS (склероз), болезнь Крона, сахарный диабет и/или язвенный колит.
[0310] В некоторых вариантах осуществления комбинированное лекарственное средство или композиция предназначена для применения при лечении вирусных и/или паразитарных инфекций, например, когда патогены ингибируют иммунный ответ хозяина. Например, возбудителем может быть, например, ВИЧ, гепатит (A, B или C), вирус папилломы человека (HPV), вирус лимфоцитарного хориоменингита (LCMV), аденовирус, флавивирус, эховирус, риновирус, вирус Коксаки, корновирус, респираторный синцитиальный вирус, вирус эпидемического паротита, ротавирус, вирус кори, вирус краснухи, парвовирус, вирус коровьей оспы, T-клеточный лимфотрофный вирус человека (HTLV), цитомегаловирус человека (HCMV), вирус денге, вирус моллюска, полиовирус, вирус бешенства, вирус Джона Каннингема (JC), вирус арбовирусного энцефалита, вирус иммунодефицита обезьян (SIV), грипп, герпес, Giardia, малярия, Leishmania, Staphylococcus aureus или Pseudomonas aeruginosa.
[0311] В некоторых вариантах осуществления комбинированные лекарственные средства и композиции согласно изобретению можно использовать для лечения пациента с ослабленным иммунитетом или с его риском (например, вследствие химиотерапевтической или лучевой терапии).
[0312] В некоторых вариантах осуществления комбинированные лекарственные средства и композиции согласно изобретению можно использовать для активации и размножения антигенспецифических T-клеток ex vivo.
[0313] В некоторых вариантах осуществления пациент мог ранее лечиться от состояния, характеризующегося сверхэкспрессией или избыточной активностью PD-1, TIM-3 и/или LAG-3 или любого из их лигандов (например, от рака или иммунного расстройства). Например, пациент мог лечиться одним или несколькими лекарствами, нацеленными на PD-1, TIM-3 и/или LAG-3, и мог приобрести устойчивость к указанному лекарству (лекарствам).
[0314] «Лечить», «при лечении» и «лечение» относятся к способу облегчения или устранения биологического расстройства и/или по меньшей мере одного из сопутствующих ему симптомов. В рамках настоящего изобретения термин «облегчить» заболевание, расстройство или состояние означает уменьшение тяжести и/или частоты возникновения симптомов заболевания, расстройства или состояния. Кроме того, ссылки в настоящем документе на «лечение» включают ссылки на радикальное, паллиативное и профилактическое лечение.
[0315] «Терапевтически эффективное количество» относится к количеству вводимого терапевтического средства, которое в некоторой степени ослабит один или несколько симптомов подлежащего лечению расстройства. Терапевтически эффективное количество противоракового терапевтического средства может, например, приводить к уменьшению размеров опухоли, увеличению выживаемости, удалению раковых клеток, уменьшению прогрессирования заболевания, обращению метастазирования или другим клиническим конечным точкам, желательным для медицинских работников.
[0316] В некоторых вариантах осуществления антитела, антигенсвязывающие части, или полиспецифическое связывающие молекулы в комбинированном лекарственном средстве согласно изобретению вводят в одной композиции. В других вариантах осуществления антитела, антигенсвязывающие части или полиспецифическое связывающие молекулы вводят более чем в одной композиции. Например, комбинированное лекарственное средство, содержащее антитело против PD-1, антитело против TIM-3 и антитело против LAG-3, может предусматривать введение отдельной композиции, содержащей все три антитела, композиции, содержащей два антитела, и композиции, содержащей одно из антител, или отдельной композиции для каждого антитела. В случае, когда имеется более чем одна композиция, композиции можно вводить одновременно, последовательно, отдельно или в любом сочетании.
[0317] Комбинированные лекарственные средства и композиции согласно изобретению можно вводить отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими лекарственными средствами или антителами (или в виде любой их комбинации). Таким образом, фармацевтические композиции, способы и варианты применения согласно изобретению также охватывают варианты осуществления комбинаций (совместного введения) с другими активными агентами, как подробно описано ниже.
[0318] В рамках настоящего изобретения термины «совместное введение», «совместно вводимый» и «в сочетании с», относящиеся к комбинированным лекарственным средствам или композициям согласно изобретению с одним или несколькими другими терапевтическими средствами, предназначены для обозначения и относятся и включают в себя следующее:
- одновременное введение такого комбинированного лекарственного средства (или его компонента) или композиции и терапевтического средства (средств) нуждающемуся в лечении пациенту, когда подобные компоненты составлены вместе в виде единой лекарственной формы, которая по существу одновременно обеспечивает указанные компоненты указанному пациенту,
- по существу одновременное введение такого комбинированного лекарственного средства (или его компонента) или композиции и терапевтического средства (средств) нуждающемуся в лечении пациенту, когда подобные компоненты составлены отдельно друг от друга в виде отдельных лекарственных форм, которые указанный пациент принимает по существу одновременно, при этом указанные компоненты предоставляются указанному пациенту по существу одновременно,
- последовательное введение такого комбинированного лекарственного средства (или его компонента) или композиции и терапевтического средства (средств) нуждающемуся в лечении пациенту, когда подобные компоненты составлены отдельно друг от друга в виде отдельных лекарственных форм, которые указанный пациент принимает последовательно со значительными временными интервалами между каждым введением, при этом указанные компоненты предоставляются указанному пациенту в существенно разное время; и
- последовательное введение такого комбинированного лекарственного средства (или его компонента) или композиции и терапевтического средства (средств) нуждающемуся в лечении пациенту, когда подобные компоненты составлены вместе в виде единой лекарственной формы, которая высвобождает указанные компоненты регулируемым образом, при этом они предоставляются указанному пациенту одновременно, последовательно и/или с перекрывающимся высвобождением в одно и то же и/или разное время, причем каждую часть можно вводить либо одним и тем же, либо иным путем.
[0319] Комбинированные лекарственные средства и композиции согласно изобретению можно вводить без дополнительных терапевтических воздействий, т.е. в виде отдельной терапии (т.е. монотерапии). Альтернативно, лечение с помощью комбинированного лекарственного средства или композиции согласно изобретению может включать в себя по меньшей мере одно дополнительное терапевтическое воздействие, например, еще одно иммуностимулирующее средство, противораковое средство, противовирусное средство или вакцину (например, противоопухолевую вакцину). В некоторых вариантах осуществления комбинированное лекарственное средство или композицию можно вводить совместно, или его можно составить с другим препаратом/лекарственным средством для лечения рака. Дополнительное терапевтическое воздействие может включать в себя, например, химиотерапевтическое, противоопухолевое или антиангиогенное средство, другое противораковое антитело и/или лучевую терапию.
[0320] Сочетание комбинированных лекарственных средств и композиций согласно изобретению со средствами, о которых известно, что они индуцируют терминальную дифференцировку раковых клеток, может еще более улучшить эффект. Такие соединения, например, можно выбрать из группы, состоящей из ретиноевой кислоты, транс-ретиноевых кислот, цис-ретиноевых кислот, фенилбутирата, фактора роста нервов, диметилсульфоксида, активной формы витамина D3, гамма-рецептора, активируемого пролифератором пероксисом, 12-О-тетрадеканоилфорбол 13-ацетата, гексаметилен-бис-ацетамида, трансформирующего фактора роста-бета, масляной кислоты, циклического АМФ и веснаринона. В некоторых вариантах осуществления соединение выбирают из группы, состоящей из ретиноевой кислоты, фенилбутирата, полностью транс-ретиноевой кислоты и активной формы витамина D.
[0321] Фармацевтические изделия, содержащие комбинированное лекарственное средство или композицию согласно изобретению и по меньшей мере одно другое средство (например, химиотерапевтическое, противоопухолевое или антиангиогенное средство), можно использовать в качестве комбинированного лечения для одновременного, раздельного или последовательного введения при лечении рака. Другим средством может быть любое средство, подходящее для лечения конкретного рассматриваемого рака, например средство, выбираемое из группы, состоящей из алкилирующих агентов, например производных платины, таких как цисплатин, карбоплатин и/или оксалиплатин; растительных алкоидов, например, паклитаксела, доцетаксела и/или иринотекана; противоопухолевых антибиотиков, например, доксорубицина (адриамицина), даунорубицина, эпирубицина, идарубицин митоксантрона, дактиномицина, блеомицина, актиномицина, лютомицина и/или митомицина; ингибиторов топоизомеразы, таких как топотекан; и/или антиметаболитов, например, фторурацила и/или других фторпиримидинов. В некоторых вариантах осуществления другим агентом является дакарбазин или гемцитабин.
[0322] Комбинированное лекарственное средство или композицию согласно изобретению также можно использовать в комбинации с другими противораковыми лекарственными средствами, такими как вакцины, цитокины, ингибиторы ферментов, иммуностимулирующие соединения и T-клеточные лекарственные средства. В случае вакцины это может быть, например, протеиновая, пептидная или ДНК-вакцина, содержащая один или несколько антигенов, которые имеют отношение к подлежащему лечению раку, или вакцина, содержащая дендритные клетки вместе с антигеном. Подходящие цитокины включают в себя, например, IL-2, IFN-гамма и GM-CSF. Примером типа ингибитора фермента, который обладает противораковой активностью, является ингибитор индолеамин-2,3-диоксигеназы (IDO), например 1-метил-D-триптофан (1-D-MT). Адоптивная Т-клеточная терапия относится к различным методам иммунотерапии, которые включают размножение или конструирование собственных Т-клеток пациентов для распознавания и нападения на их опухоли.
[0323] Также предполагается, что комбинированное лекарственное средство или композицию согласно изобретению можно использовать в дополнительной терапии в сочетании с ингибиторами тирозинкиназы. Это синтетические, главным образом, производные хиназолина, молекулы с низкой молекулярной массой, которые взаимодействуют с внутриклеточным тирозинкиназным доменом рецепторов и ингибируют индуцированное лигандом фосфорилирование рецептора, конкурируя за внутриклеточный сайт связывания Mg-ATP.
[0324] В некоторых вариантах осуществления комбинированное лекарственное средство или композицию можно использовать в комбинации с другим препаратом/лекарственным средством, которое опосредует активацию иммунной системы, включая, но без ограничения, средство, которая модулирует экспрессию или активность A2AR, BTLA, B7-H3, B7-H4, CTLA-4, CD27, CD28, CD39, CD40, CD47, CD55, CD73, CD122, CD137, CD160, CGEN-15049, LY108, CHK1, CHK2, CTLA-3, CEACAM (например, CEACAM-1 и/или CEACAM-5), GAL9, GITR, HVEM, ICOS, IDO, KIR, LAIR1, NKG2A, OX40, PD-L1/PD-L2, LILRB2, CMTM6, TIGIT, TGFR-beta, TNFR2, VISTA и/или 2B4. В некоторых вариантах осуществления средством является антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который связывается с одной из перечисленных выше молекул. В отдельных вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающую часть, композицию или биспецифическую связывающую молекулу согласно изобретению можно вводить в комбинации с ингибитором CTLA-4 (например, антителом против CTLA-4, таким как тримелимумаб или ипилимумаб). В одном варианте осуществления антитело или его антигенсвязывающую часть, композицию или биспецифическую связывающую молекулу согласно изобретению можно вводить в комбинации с ипилимумабом. Также предполагается, что комбинированное лекарственное средство или композицию согласно изобретению можно использовать в комбинации с цитокином (например, IL-1, IL-2, IL-12, IL-15 или IL-21), ингибитором EGFR, ингибитором VEGF и т.д.
[0325] В некоторых аспектах комбинированные лекарственные средства и композиции согласно изобретению можно вводить в комбинации с другим ингибитором пути PD-1, TIM-3 или LAG-3, который может нацеливаться на PD-1, TIM-3, LAG-3 или один или более лигандов любой из этих мишеней. Примеры подобных ингибиторов включают в себя:
- другие антитела против PD-1 и антитела, которые нацелены на лиганды и/или корецепторы PD-1, такие как PD-L1 или PD-L2 (например, пембролизумаб и/или ниволумаб);
- другие антитела против TIM-3 и антитела, которые нацелены на лиганды и/или корецепторы TIM-3, такие как галектин-9, HMGB-1, фосфатидилсериновые липиды, CEACAM1, LILRA1-6 или LILRB1-5 (например, MGB453, TSR-022 и/или LY3321367); и
- другие антитела против LAG-3 и антитела, которые нацелены на лиганды и/или корецепторы LAG-3, такие как MHCII, Галектин-3, и LSECtin (например, BMS-986016, GSK2831781, REGN3767, BAP050 или BAP050-chi или LAG525).
[0326] Понятно, что комбинированные лекарственные средства и композиции согласно изобретению можно использовать в способе лечения, который описан в настоящем документе, можно использовать в лечении, как описано в настоящем документе, и/или можно использовать для получения лекарственного средства для лечения, как описано в настоящем документе. В изобретении также представлены наборы и готовые изделия, содержащие комбинированные лекарственные средства или композиции согласно изобретению, которые описаны в настоящем документе.
Доза и Путь введения
[0327] Комбинированные лекарственные средства и композиции согласно изобретению следует вводить в эффективном количестве для лечения рассматриваемого состояния, т.е. в дозировках и в течение периодов времени, необходимых для достижения желаемого результата. Терапевтически эффективное количество может варьировать в зависимости от таких факторов, как конкретное подлежащее лечению состояние, возраст, пол и вес пациента, а также от того, вводятся ли антитела в качестве самостоятельного лечения или в сочетании с одним или несколькими дополнительными способами лечения рака.
[0328] Схемы приема можно корректировать для обеспечения оптимального желаемого ответа. Например, можно вводить единственный болюс, можно вводить несколько разделенных доз с течением времени, или дозу можно пропорционально уменьшать или увеличивать, как указано в зависимости от терапевтической ситуации. Особенно выгодно составлять парентеральные композиции в разовой дозированной форме для простоты введения и единообразия дозировки. В рамках настоящего изобретения разовая дозированная форма относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве единичных доз для подлежащих лечению пациентов/субъектов; каждая единица содержит заданное количество активного соединения, рассчитанное для получения желаемого терапевтического эффекта в сочетании с необходимым фармацевтическим носителем. Спецификация стандартных лекарственных форм согласно изобретению обычно определяется и напрямую зависит от (а) уникальных характеристик химиотерапевтического средства и конкретного терапевтического или профилактического эффекта, который должен быть достигнут, и (b) имеющихся ограничений для чувствительности у индивидуумов согласно уровню техники составления такого активного соединения для лечения.
[0329] Таким образом, на основании представленного в данном документе раскрытия специалисту в данной области техники должно быть понятно, что дозу и схему приема корректируют в соответствии со способами, хорошо известными в области данных лекарственных средств. То есть можно легко установить максимально допустимую дозу, а также можно определить эффективное количество, обеспечивающее обнаруживаемую терапевтическую пользу для пациента, а также временные требования для введения каждого средства для обеспечения обнаруживаемой терапевтической пользы для пациента. Соответственно, хотя в качестве примера в данном документе приведены определенная доза и режимы введения, эти примеры никоим образом не ограничивают дозу и режим введения, которые могут быть предоставлены пациенту при практической реализации настоящего изобретения.
[0330] Следует отметить, что значения доз можно варьировать в зависимости от типа и тяжести состояния, подлежащего облегчению, и они могут включать разовую или множественные дозы. Кроме того, следует понимать, что для любого конкретного субъекта конкретные режимы дозировки необходимо корректировать с течением времени в соответствии с индивидуальной потребностью и профессиональным суждением лица, управляющего или контролирующего введение композиций, и что диапазоны дозировок, изложенные в настоящем документе, являются только иллюстративными и не предназначены для ограничения объема или практического использования выполненного комбинированного лекарственного средства. Кроме того, схема лечения комбинированными лекарственными средствами и композициями согласно данному изобретению могут быть основаны на множестве факторов, включая тип заболевания, возраст, вес, пол, медицинское состояние пациента, тяжесть состояния, путь введения и конкретное используемое антитело. Таким образом, схему лечения можно широко варьировать, но ее можно определять обычным образом с использованием стандартных методов. Например, дозы можно корректировать на основе фармакокинетических или фармакодинамических параметров, которые могут включать клинические эффекты, такие как токсические эффекты и/или лабораторные показатели. Таким образом, настоящее изобретение охватывает индивидуальное повышение дозы, определяемое специалистом в данной области. Определение подходящих дозировок и схем хорошо известно в соответствующей области и должно быть понятно специалисту в данной области техники после того, как будут представлены раскрытые в данном документе идеи.
[0331] Предполагается, что подходящая доза антитела в комбинированном лекарственном средстве или композиции согласно изобретению будет находиться в диапазоне 0,1-100 мг/кг, например, примерно 0,5-50 мг/кг, например, примерно 1-20 мг/кг. Антитело можно, например, вводить в дозировке по меньшей мере 0,25 мг/кг, например, по меньшей мере 0,5 мг/кг, например, по меньшей мере 1 мг/кг, например, по меньшей мере 1,5 мг/кг, например, по меньшей мере 2 мг/кг, например, по меньшей мере 3 мг/кг, например, по меньшей мере 4 мг/кг, например, по меньшей мере 5 мг/кг; и, например, самое большее 50 мг/кг, например, самое большее 30 мг/кг, например, самое большее 20 мг/кг, например, самое большее 15 мг/кг. Обычно введение следует повторять с подходящими интервалами, например, один раз в неделю, один раз каждые две недели, один раз каждые три недели или один раз каждые четыре недели, и в течение срока, который сочтет целесообразным ответственный врач, который может по желанию увеличивать или уменьшать дозировку по мере необходимости.
[0332] Эффективное количество для лечения опухоли можно измерять по его способности стабилизировать прогрессирование заболевания и/или ослаблять симптомы у пациента и предпочтительно обращать вспять прогрессирование заболевания, например, путем уменьшения размера опухоли. Способность комбинированного лекарственного средства согласно изобретению ингибировать рак можно оценить с помощью анализов in vitro, например, как описано в примерах, а также на подходящих животных моделях, на которых прогнозируют эффективность при опухолях человека (см., например, Примеры). Для обеспечения оптимального терапевтического ответа в каждой конкретной ситуации, например, для введения в виде одного болюса или в виде непрерывной инфузии и с возможной корректировкой дозировки, как указано в каждом конкретном случае, следует выбирать подходящие схемы лечения.
Готовые изделия и Наборы
[0333] В настоящем изобретении также представлены готовые изделия, содержащие антитело против PD-1, которое конкурирует с антителом, выбранным из группы, состоящей из 12819.15384, 12748.15381, 12748.16124, 12865.15377, 12892.15378, 12796.15376, 12777.15382, 12760.15375 и 13112.15380, за связывание с PD-1 человека или связывается с тем же самым эпитопом PD-1 человека, что и оно; и антитело против TIM-3 или антитело против LAG-3.
[0334] В некоторых вариантах осуществления готовое изделие содержит:
- по меньшей мере одно антитело против PD-1 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, и по меньшей мере одно антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе;
- по меньшей мере одно антитело против PD-1 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, и по меньшей мере одно антитело против LAG-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе;
- по меньшей мере одно антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, и по меньшей мере одно антитело против LAG-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе; или
- по меньшей мере одно антитело против PD-1 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, по меньшей мере одно антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, и по меньшей мере одно антитело против LAG-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе;
а также способы изготовления указанных изделий.
[0335] В настоящем изобретении также представлены наборы, содержащие антитело против PD-1, которое конкурирует с антителом, выбранным из группы, состоящей из 12819.15384, 12748.15381, 12748.16124, 12865.15377, 12892.15378, 12796.15376, 12777.15382, 12760.15375 и 13112.15380, за связывание с PD-1 человека или связывается с тем же самым эпитопом PD-1 человека, что и оно; и антитело против TIM-3 или антитело против LAG-3.
[0336] В некоторых вариантах осуществления набор содержит:
- по меньшей мере одно антитело против PD-1 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, и по меньшей мере одно антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе;
- по меньшей мере одно антитело против PD-1 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, и по меньшей мере одно антитело против LAG-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе;
- по меньшей мере одно антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, и по меньшей мере одно антитело против LAG-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе; или
- по меньшей мере одно антитело против PD-1 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, по меньшей мере одно антитело против TIM-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе, и по меньшей мере одно антитело против LAG-3 или его антигенсвязывающую часть, которые описаны в настоящем документе.
[0337] Если в настоящем документе не указано иное, научные и технические термины, используемые в связи с настоящим изобретением, должны иметь значения, которые обычно понимают специалисты в данной области техники. ниже описаны иллюстративные способы и материалы, хотя при практическом применении или испытании настоящего изобретения также можно использовать способы и материалы, аналогичные или эквивалентные тем, которые описаны в данном документе. В случае конфликта преимущественную силу будет иметь настоящее описание, включая определения.
[0338] Как правило, номенклатура и технологии, используемые в связи с методами клеточной и тканевой культуры, молекулярной биологии, иммунологии, микробиологии, генетики, аналитической химии, синтетической органической химии, медицинской и фармацевтической химии, а также химии белков и нуклеиновых кислот и гибридизации, описанных в данном документе, хорошо известны и широко используются в данной области. Ферментативные реакции и методы очистки выполняются в соответствии со спецификациями производителя, как это обычно делается в данной области техники или как описано в данном документе.
[0339] Кроме того, если контекст не требует иного, термины в единственном числе включают множественное число, а термины во множественном числе включают единственное число. В данном описании и вариантах осуществления слова «иметь» и «содержать» или такие варианты, как «имеет», «имеющий», «содержит» или «содержащий», следует понимать как подразумевающие включение указанного целого числа или группы целых чисел, но не исключение любого другого целого числа или группы целых чисел.
[0340] Все публикации и другие упомянутые в данном документе ссылки, полностью включены посредством ссылки. Несмотря на то, что в данном документе приведен ряд документов, это цитирование не является признанием того, что любой из этих документов является частью общих знаний в данной области.
[0341] Для лучшего понимания этого изобретения приведены следующие примеры. Эти примеры приведены только в целях иллюстрации, и их никоим образом не следует рассматривать как ограничение объема изобретения.
Примеры
Пример 1: Повышенная активность in vitro комбинированного нацеливания на PD-1/TIM-3 в одностороннем анализе MLR
[0342] Этот пример демонстрирует, что комбинированное нацеливание на PD-1 и TIM-3 с использованием антитела 12819 против PD-1 и антитела 15086.17145 против TIM-3 усиливает секрецию IFN-γ в анализе однонаправленной реакции смешанной культуры лимфоцитов (MLR).
[0343] В анализе однонаправленной MLR дендритные клетки (DC) и CD4+ T-клетки, выделенные от двух разных здоровых доноров-людей, совместно культивировали для индукции аллоантиген-специфической реакции, приводящей к продукции цитокинов и активации/пролиферации T-клеток. Дендритные клетки (DC) дифференцировали из моноцитов CD14+ на 6 день культивирования с 20 нг/мл гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (GM-CSF) и 20 нг/мл интерлейкина-4 (IL-4) и смешивали в соотношение 1:10 с CD4+ Т-клетками, выделенными из мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС) из материала здорового донора-человека. Указанные антитела или смесь антител добавляли до конечной общей концентрации 10 мкг/мл. Смесь антител содержала антитела против PD-1 и против TIM-3 в соотношении 1:1. После 5 дней культивирования супернатанты собирали и определяли уровни IFN-γ с использованием электрохемилюминесцентного анализа цитокинов Meso Scale. Для статистического анализа использовали непарный критерий Стьюдента, а для корректировки нескольких сравнений использовали поправку Бонферрони. Статистически значимым считается скорректированное значение р <0,05.
[0344] На фиг. 1 показано влияние антител против PD-1 и против TIM-3 на секрецию IFN-γ анализе однонаправленной MLR в трех независимых парах доноров. В анализе однонаправленной MLR антитела как против PD-1 (12819), так и против TIM-3 (15086) были функциональны и увеличивали секрецию IFN-γ во всех трех парах доноров. Кроме того, комбинация антител против PD-1 и против TIM-3 проявляет повышенную активность, вызывая статистически значимое увеличение IFN-γ по сравнению с отдельными антителами.
Пример 2: Повышенная активность in vitro объединенного нацеливания на PD-1/TIM-3 в анализе двунаправленной MLR
[0345] Этот пример демонстрирует, что объединенное нацеливание на PD-1 и TIM-3 с использованием антитела 12819 против PD-1 и антитела 15086.17145 против TIM-3 усиливает секрецию IFN-γ в анализе двунаправленной MLR.
[0346] В анализе двунаправленной MLR PBMC от двух разных здоровых человеческих доноров совместно культивировали для индукции аллоантиген-специфической реакции, приводящей к выработке цитокинов и активации/пролиферации T-клеток. РВМС от двух разных доноров смешивали в соотношении 1:1. Антитела тестировали при конечной общей концентрации антител 10 мкг/мл. После 5 дней культивирования супернатанты собирали и определяли уровни IFN-γ с использованием электрохемилюминесцентного анализа цитокинов Meso Scale. Для статистического анализа использовали непарный критерий Стьюдента, а для корректировки нескольких сравнений использовали поправку Бонферрони. Статистически значимым считается скорректированное значение р <0,05.
[0347] На фиг. 2 показано влияние антител против PD-1 и против TIM-3 на секрецию IFN-γ в анализе двунаправленной MLR в трех независимых парах доноров-людей. В анализе двунаправленной MLR антитела против PD-1 и против TIM-3 усиливали секрецию IFN-γ. Кроме того, комбинация антител против PD-1 и против TIM-3 показала повышенную активность, индуцируя повышенную секрецию IFN-γ по сравнению с отдельными антителами.
Пример 3: Антитело против TIM-3 индуцирует пролиферацию T-клеток in vitro в анализе однонаправленной MLR
[0348] Способность антитела 15086.17145 против TIM-3 индуцировать пролиферацию Т-клеток исследовали в анализе однонаправленной MLR. Антитело против TIM-3, антитело положительного контроля против PD-1 (12819) или антитело отрицательного контроля IgG2 добавляли до конечной концентрации 25 мкг/мл и инкубировали в течение 5 дней перед добавлением 1 мкКи/лунку 3H-тимидина в течение дальнейших 18 часов. Клетки собирали, и с помощью жидкостного сцинтилляционного счетчика (MicroBeta2) определяли включение 3H-тимидина.
[0349] Как показано на фиг. 3, антитело 15086.17145 против TIM-3 индуцировало пролиферацию как CD4+, так и CD8+ T-клеток в той же степени, что и антитело положительного контроля против PD-1 (Панель A). Добавление растворимого антитела против CD3 усиливало пролиферацию, индуцированную антителом против TIM-3 (Панель B).
Пример 4: Антитело против TIM-3 индуцирует секрецию IL-12p40 из дендритных клеток
[0350] Происходящие из моноцитов дендритные клетки получали из материала здорового донора, как описано ранее в Примере 1. Дендритные клетки инкубировали в течение 5 дней с 10 мкг/мл антитела 15086.17145 против TIM-3 или антитела IgG2 отрицательного контроля, или без обработки, и уровни IL-12p40 в супернатантах определяли с использованием стандартного анализа цитокинов ELISA.
[0351] Как показано на фиг. 4, лигатирование TIM-3 антителом 15086.17145 против TIM-3 приводило к увеличению секреции IL-12p40 из дендритных клеток.
Пример 5: Антитело против TIM-3 индуцирует экспрессию маркеров активации в дендритных клетках
[0352] Для дальнейшего исследования функциональной роли нацеливания на TIM-3, уровни экспрессии выбранных маркеров активации на дендритных клетках, происходящих из моноцитов, определяли после обработки антителом против TIM-3 15086.17145.
[0353] Дендритные клетки обрабатывали 25 мкг/мл антитела против TIM-3 в течение 24 часов, и экспрессию гена костимулирующих молекул определяли с использованием NaNOtring Technologies. Уровни экспрессии генов нормализовали до 30 генов домашнего хозяйства с равномерной экспрессией. Данные для выбранных соответствующих генов представлены в виде кратного изменения относительно необработанных контрольных клеток.
[0354] Анализ экспрессии генов показал повышенную регуляцию нескольких маркеров активации и костимулирующих молекул, включая MHC-II (HLA-DQB1 и HLA DQA1), CD80 и CD86 (фиг. 5, панель A). Повышенная экспрессия на клеточной поверхности CD80 и CD86 при обработке антителом 15086.17145 против TIM-3 была подтверждена с использованием анализа FACS (фиг. 5, панель B). Показанные наложения гистограммы представляют дендритные клетки CD11c+, а числа, соседствующие с гистограммами, обозначают значения MFI.
Пример 6: Эффективность In vivo антитела 15086 против TIM-3 в отношении роста опухоли легкого PDX человека
[0355] Этот пример показывает эффективность In vivo антитела 15086.17145 против TIM-3 в отношении полученной из легкого пациента-человека (PDX) ксенотрансплантатной опухолевой модели у CD34+ гуманизированных NSG-SGM3 мышей.
[0356] Мышей NSG-SGM3 гуманизировали с использованием клеток CD34+, полученных из пуповинной крови и с ксенотрансплантированными с правой стороны полученными у пациента фрагментами опухоли легких (LG1306). При размерах опухоли 50-150 мм3 мышей рандомизировали, и начинали лечение. Мышам вводили внутрибрюшинную инъекцию носителя или антитела против 15086 TIM-3 с начальной дозой 10 мг/кг, а затем 5 мг/кг 5x Q5D. Опухоли измеряли три раза в неделю штангенциркулем в двух измерениях, а объем опухоли в мм3 рассчитывали по формуле: (ширина) 2 x длина x 0,5. Серая область обозначает период лечения. Для сравнения объемов опухоли в каждый момент времени между группами лечения использовали двусторонний ANOVA с критерием множественного сравнения Бонферрони. Данные представлены в виде среднего ± SEM, ** р <0,01.
[0357] Лечение антителом против TIM-3 15086 приводило к значимому ингибированию роста опухоли в модели PDX легкого человека у CD34+ гуманизированных мышей NSG-SGM3 (Фиг. 6).
Пример 7: Усиленное воздействие объединенного нацеливания на PD-1/LAG-3, PD-1/TIM-3 или PD-1/TIM-3/LAG-3 в анализе PBMC+SEB
[0358] Этот пример описывает усиленное воздействие комбинирования антитела 12819 против PD-1 с антителом 15532 против LAG-3 или антителом 15086.17145 против TIM-3 в анализе PBMC+SEB (Стафилококковый энтеротоксин B).
[0359] SEB является супер-антигеном, который связывается с молекулами MHC II класса и специфическими областями Vβ рецепторов Т-клеток (TCR) и активирует неспецифическую стимуляцию Т-клеток. Это приводит к активации/пролиферации поликлональных Т-клеток и высвобождению цитокинов, включая IL-2. РВМС человека, выделенные из лейкоцитарной пленки от здоровых доноров, высевали в 384-луночные планшеты и оставляли необработанными или обрабатывали 10 нг/мл SEB и 10 мкг/мл указанных отдельных антител или смесей антител. Комбинации антител представляли собой смеси указанных антител 1:1 или 1:1:1. После 48 часов в увлажненном инкубаторе при 37°C супернатанты удаляли и анализировали на уровни IL-2 с использованием набора для ELISA IL-2 (Life Technologies). Данные представлены в виде среднего ± SEM. Значимые различия проверяли с использованием t-критерия Стьюдента с коррекцией Бонферрони.
[0360] На фиг. 7 показано увеличение секреции IL-2 после лечения одним антителом против PD-1, против LAG-3 или против TIM-3, смесью двух антител или смесью всех трех антитела. Данные показали, что уровни IL-2 повышались при однократной обработке антителом против PD-1, против LAG-3 или против TIM-3, тогда как секреция IL-2 дополнительно повышалась при лечении комбинацией антител против PD-1 и против LAG-3 или антител против PD-1 и против TIM-3. Тройная комбинация антител против PD-1, против LAG-3 и против TIM-3 увеличивала секрецию IL-2 в большей степени, чем любая из комбинаций двух антител.
Пример 8: Повышенная эффективность In vivo комбинирования антител против PD-1 и против LAG-3 в двух сингенных мышиных опухолевых моделях
[0361] Этот пример демонстрирует эффективность In vivo комбинирования антитела 12819 против PD-1 с антителом C9B7W против LAG-3 (реагирующим с LAG-3 мыши; BioXcell) или антителом 15011 против LAG-3 в двух сингенных мышиных опухолевых моделях.
[0362] Клетки 0,5 × 106 MC38 (карцинома толстой кишки) или 5×106 ASB-XIV (карцинома легкого) подкожно инокулировали в бок 6-8-недельных самок мышей BALB/cAnNRj (ASB-XIV) или C57BL/6 (MC38), соответственно. Опухоли измеряли три раза в неделю штангенциркулем в двух измерениях, а объем опухоли в мм3 рассчитывали по формуле: (ширина) 2 x длина x 0,5. На 5-й (ASB-XIV) или 13-й (MC38) день после инокуляции при среднем размере опухоли 30-50 мм3 мышей рандомизировали на четыре группы по десять животных, и начинали лечение. Мыши получали лечение три раза в неделю, в общей сложности шесть обработок, путем внутрибрюшинной инъекции буфера с нейтральной основой, антитела 12819 против PD-1, антитела C9B7W против LAG-3, антитела 15011 против LAG-3 или комбинации антител против PD-1 и против LAG-3. Лечение антителами проводили в дозе 10 мг/кг/мишень. Для сравнения объемов опухоли в каждый момент времени между группами лечения применяли двусторонний ANOVA с критерием множественных сравнений Бонферрони. Статистический анализ проводили с использованием GraphPad Prism версии 5.0 (GraphPad Software, Inc.).
[0363] Сингенные опухоли MC38, обработанные моноклональным антителом 12819 против PD-1, демонстрировали непрерывный рост опухоли, хотя и с более медленной кинетикой роста, чем опухоли, обработанные нейтральной основой (фиг. 8). Никакого эффекта лечения отдельно антителом C9B7W против LAG-3 не наблюдалось. Комбинация антитела против PD-1 и антитела против LAG-3 показала повышенное ингибирование роста опухоли по сравнению с лечением антителом против PD-1 и значительное ингибирование роста опухоли по сравнению с опухолями, обработанными нейтральной основой (р <0,001) (фиг. 8).
[0364] Сингенные опухоли ASB-XIV, обработанные антителом 12819 против PD-1, показали замедленный рост опухоли по сравнению с опухолями, обработанными нейтральной основой (фиг. 8 и 9). Никакого эффекта от лечения одним антителом C9B7W против LAG-3 не наблюдалось (фиг. 8), тогда как антитело 15011 против LAG-3 значительно ингибировало рост опухоли по сравнению с лечением нейтральной основой (р <0,05) (фиг. 9). Комбинация антитела против PD-1 и антитела C9B7W против LAG-3 значительно повышала противоопухолевую эффективность по сравнению с лечением нейтральной основой (фиг. 8). Значительно усиленный эффект ингибирования опухоли также наблюдался при сочетании антитела против PD-1 и антитела 15011 против LAG-3 по сравнению с однократной обработкой антителом против PD-1 (p <0,0001) или антителом против LAG-3 (р <0,05) (фиг. 9).
Пример 9: Повышенная эффективность In vivo комбинирования антитела против PD-1 и против TIM-3 в двух сингенных мышиных опухолевых моделях
[0365] Этот пример демонстрирует эффективность In vivo комбинирования антитела 12819 против PD-1 и антитела 5D12 против TIM-3 (реагирующего с мышиные TIM-3; Anderson et al. Science 318:1141-43 (2007)) в двух сингенных мышиных опухолевых моделях.
[0366] Клетки 0,2×106 Sa1N (фибросаркома) или 5×106 ASB-XIV (карцинома легкого) подкожно инокулировали в бок самок мышей A/J (Sa1N) и BALB/cAnNRj (ASB-XIV) в возрасте 6-8 недель соответственно. Опухоли измеряли три раза в неделю штангенциркулем в двух измерениях, и объем опухоли в мм3 рассчитывали по формуле: (ширина) 2 x длина x 0,5. При среднем размере опухоли 60-110 мм3 мышей рандомизировали, и начинали лечение. Мышей лечили однократной дозой (Sa1N) или лечили три раза в неделю, всего шесть обработок (ASB-XIV), путем внутрибрюшинной инъекции буфера с нейтральной основой, антитела 12819 против PD-1 и/или антитела 5D12 против TIM-3. Лечение мышей с опухолями ASB-XIV проводили антителами в дозе 10 мг/кг/мишень. Мышам с опухолями Sa1N вводили антитела против PD-1 и против TIM-3 в дозе 1 мг/кг и 10 мг/кг, соответственно. Для сравнения объемов опухоли в каждый момент времени между группами лечения использовали двусторонний ANOVA с критерием множественных сравнений Бонферрони. Статистический анализ проводили с использованием GraphPad Prism версии 5.0 (GraphPad Software, Inc.).
[0367] На 6-й день после инокуляции опухолевых клеток ASB-XIV при среднем размере опухоли 56 мм3 мышей рандомизировали на четыре группы по десять животных, и начинали лечение. Лечение антителом 12819 против PD-1 задерживало рост опухоли, тогда как лечение антителом 5D12 против TIM-3 не влияло на рост опухоли по сравнению с лечением нейтральной основой. Выраженный эффект ингибирования опухоли наблюдали, комбинируя антитело против PD-1 с антителом против TIM-3, по сравнению с однократной обработкой любым антителом (p <0,001) (фиг. 10).
[0368] На 13-й день после инокуляции опухолевых клеток Sa1N при среднем размере опухоли 110 мм3 мышей рандомизировали на четыре группы по десять животных и проводили одно лечение антителами. Результаты показали начальную задержку роста опухоли после лечения одним антителом, антителом 12819 против PD-1 или антителом 5D12 против TIM-3. Усиление противоопухолевого эффекта наблюдалось при сочетании антитела против PD-1 с антителом против TIM-3 по сравнению с лечением одним антителом. Комбинированное лечение также значительно ингибировало рост опухоли по сравнению с лечением нейтральной основой (р <0,0001) (фиг. 10).
Пример 10: Эффективность In vivo комбинирования антитела против PD-1 и против TIM-3 в модели человеческого ксенотрансплантата опухоли
[0369] Этот пример демонстрирует повышенную эффективность In vivo комбинирования антитела 12819 против PD-1 с антителом 15086.17145 против TIM-3 в модели человеческого ксенотрансплантата опухоли, где клетки A375 (меланомы человека) имплантировали мышам с воссозданными PBMC человека.
[0370] PBMC человека внутрибрюшинно инъецировали мышам NOG (донор 1 и донор 2) или NOG-EXL (hGM-CSF/hIL-3-NOG) (донор 3) за один день до подкожного имплантирования клеток меланомы A375 человека. Лечение начинали в день инъекции РВМС, и мышей трижды в неделю лечили в общей сложности шестью обработками путем внутрибрюшинной инъекции буфера-нейтральной основы, антитела против 12819 PD-1, антитела 15086.17145 против TIM-3 или комбинации антител против PD-1 и против TIM-3. Лечение антителами проводили в дозе 10 мг/кг/мишень. Опухоли измеряли три раза в неделю штангенциркулем в двух измерениях, а объем опухоли в мм3 рассчитывали по формуле: (ширина) 2 × длина × 0,5. Для сравнения объемов опухоли в каждый момент времени между группами лечения использовали двусторонний ANOVA с тестом множественных сравнений Бонферрони. Статистический анализ проводили с использованием GraphPad Prism версии 5.0 (GraphPad Software, Inc.).
[0371] Как показано на фиг. 11, лечение комбинацией антител против PD-1 и против TIM-3 приводило к значимой (и синергетической, по меньшей мере у Донора 3) задержке роста опухоли (p<0,05 и p<0,01), тогда как лечение одним антителом (против PD-1 или против TIM-3) показало ограниченное действие на рост опухоли по сравнению с группой лечения нейтральной основой.
Пример 11: Объединенное нацеливание PD-1 и TIM-3 приводит к повышенной выживаемости мышей с совместно имплантированными иммунными и опухолевыми клетками человека
[0372] Этот пример демонстрирует эффективность In vivo комбинирования антитела 12819 против PD-1 с антителом 15086.17145 против TIM-3 в мышиных моделях опухолей человека.
[0373] 2×106 клеток A375 (меланомы) смешивали с 2×106 PBMC человека и инокулировали подкожно в бок 6-8-недельных самок мышей NOD-scid. Во время инокуляции клеток начинали лечение. Мышей лечили три раза в неделю в общей сложности шестью обработками путем внутрибрюшинной инъекции буфера-нейтральной основы, антитела 12819 против PD-1, антитела 15086.17145 против TIM-3 или комбинации антител против PD-1 и против TIM-3. Лечение антителами проводили в дозе 10 мг кг для каждого антитела. Опухоли измеряли три раза в неделю штангенциркулем в двух измерениях, а объем опухоли в мм3 рассчитывали по формуле: (ширина) 2 x длина x 0,5.
[0374] Выживание определяли как наличие опухоли размером менее 400 мм3. Результаты показали увеличение выживаемости мышей, получавших двойную комбинацию антител против PD-1 и против TIM-3, по сравнению с какой-либо одной обработкой антителами (фиг. 12, панели A-E).
Пример 12: Объединенное нацеливание на PD-1, LAG-3 и TIM-3 приводит к повышенной выживаемости в сингенной мышиной опухолевой модели
[0375] Этот пример демонстрирует эффективность In vivo комбинирования антитела 12819 против PD-1 с антителом C9B7W против LAG-3 и антитело 5D12 против TIM-3 в сингенной мышиной опухолевой модели.
[0376] Клетки 5×106 ASB-XIV (карцинома легкого) подкожно инокулировали в бок 6-8-недельных самок мышей BALB/cAnNRj. Опухоли измеряли три раза в неделю штангенциркулем в двух измерениях, а объем опухоли в мм3 рассчитывали по формуле: (ширина) 2 x длина x 0,5. На 5-й день после инокуляции при среднем размере опухоли 50 мм3 мышей рандомизировали на семь групп по десять животных, и начинали лечение. Мышей лечили три раза в неделю в общей сложности шестью обработками путем внутрибрюшинной инъекции буфера-нейтральной основы, антитела 12819 против PD-1, антитела C9B7W против LAG-3, антитела 5D12 против TIM-3 или комбинации антител против PD-1 и против LAG-3, против PD-1 и против TIM-3 или против PD-1, против LAG-3 и против TIM-3. Лечение антителами проводили в дозе 10 мг/кг для каждого антитела.
[0377] Выживание определяли как наличие опухоли размером менее 400 мм3. Результаты показали увеличение выживаемости мышей, получавших тройную комбинацию антител против PD-1, против LAG-3 и против TIM-3 по сравнению с любым одним или двумя антителами (фиг. 13, панели A-H).
Таблица 1: Идентификаторы Последовательности Антител
Мишень Ab ДНК Белок H-CDR1 H-CDR2 H-CDR3 L-CDR1 L-CDR2 L-CDR3
VH VL VH VL
TIM-3 15086.15086 1 2 3 4 8 9 10 11 12 13
15086.16837
15086.17145
15086.17144		 5 6 7
15105 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23
15107 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33
15109 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43
15174 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53
15175 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63
15260 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73
15284 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83
15299 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93
15353 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103
15354 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113
17244 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123
17245 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133
19324 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143
19416 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153
19568 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163
20131 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173
20185 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183
20293 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193
20300 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203
20362 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213
20621 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223
PD-1 12819.15384 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233
12748.15381 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243
12865.15377 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253
12892.15378 254 255 256 257 258 259 260 261 262 263
12796.15376 264 265 266 267 268 269 270 271 272 273
12777.15382 274 275 276 277 278 279 280 281 282 283
12760.15375 284 285 286 287 288 289 290 291 292 293
13112.15380 294 295 296 297 298 299 300 301 302 303
12748.16124 234 391 236 392 238 239 240 393 394 395
LAG-3 15646 304 305 306 307 308 309 310 311 312 313
15532 314 315 316 317 318 319 320 321 322 323
15723 324 325 326 327 328 329 330 331 332 333
15595 334 335 336 337 338 339 340 341 342 343
15431 344 345 346 347 348 349 350 351 352 353
15572 354 355 356 357 358 359 360 361 362 363
15011 364 365 366 367 368 369 370 371 372 373
Таблица 2: Последовательности константной области
SEQ ID NO Описание Последовательность
374 Белковая последовательность константной области тяжелой цепи IgG1 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
375 Белковая последовательность константной области тяжелой цепи IgG1-LALA ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
376 Белковая последовательность константной области тяжелой цепи IgG4 (S228P) ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
377 Белковая последовательность константной области тяжелой цепи IgG2 ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
378 Белковая последовательность константной области легкой цепи Каппа RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
379 Белковая последовательность константной области легкой цепи лямда GQPKANPTVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADGSPVKAGVETTKPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS
380 ДНК последовательность константной области тяжелой цепи IgG1-LALA, исключая интроны GCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAGAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACAAAACTCACACATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAAGCCGCCGGGGGACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACATGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCTGAGGTCAAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTACAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAATGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGCCCTCCCAGCCCCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAACCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCGGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTATCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTATAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGCAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAGAGCCTCTCCCTGTCCCCGGGTAAA
381 ДНК последовательность константной области тяжелой цепи IgG1-LALA, включая интроны GCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAGAGTTGGTGAGAGGCCAGCACAGGGAGGGAGGGTGTCTGCTGGAAGCCAGGCTCAGCGCTCCTGCCTGGACGCATCCCGGCTATGCAGTCCCAGTCCAGGGCAGCAAGGCAGGCCCCGTCTGCCTCTTCACCCGGAGGCCTCTGCCCGCCCCACTCATGCTCAGGGAGAGGGTCTTCTGGCTTTTTCCCCAGGCTCTGGGCAGGCACAGGCTAGGTGCCCCTAACCCAGGCCCTGCACACAAAGGGGCAGGTGCTGGGCTCAGACCTGCCAAGAGCCATATCCGGGAGGACCCTGCCCCTGACCTAAGCCCACCCCAAAGGCCAAACTCTCCACTCCCTCAGCTCGGACACCTTCTCTCCTCCCAGATTCCAGTAACTCCCAATCTTCTCTCTGCAGAGCCCAAATCTTGTGACAAAACTCACACATGCCCACCGTGCCCAGGTAAGCCAGCCCAGGCCTCGCCCTCCAGCTCAAGGCGGGACAGGTGCCCTAGAGTAGCCTGCATCCAGGGACAGGCCCCAGCCGGGTGCTGACACGTCCACCTCCATCTCTTCCTCAGCACCTGAAgccgccGGGGGACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACATGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCTGAGGTCAAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTACAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAATGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGCCCTCCCAGCCCCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGTGGGACCCGTGGGGTGCGAGGGCCACATGGACAGAGGCCGGCTCGGCCCACCCTCTGCCCTGAGAGTGACCGCTGTACCAACCTCTGTCCCTACAGGGCAGCCCCGAGAACCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCGGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTATCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTATAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGCAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAGAGCCTCTCCCTGTCCCCGGGTAAA
382 ДНК последовательность константной области тяжелой цепи IgG4 (S228P), исключая интроны GCTTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAGGAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACGAAGACCTACACCTGCAACGTAGATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAGAGTTGAGTCCAAATATGGTCCCCCATGCCCAcCATGCCCAGCACCTGAGTTCCTGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTTCAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAGCCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCAGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTACAGCAGGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGGAGGGGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACACAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCTGGGTAAA
383 ДНК последовательность константной области тяжелой цепи IgG4 (S228P), включая интроны GCTTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAGGAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACGAAGACCTACACCTGCAACGTAGATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAGAGTTGGTGAGAGGCCAGCACAGGGAGGGAGGGTGTCTGCTGGAAGCCAGGCTCAGCCCTCCTGCCTGGACGCACCCCGGCTGTGCAGCCCCAGCCCAGGGCAGCAAGGCAGGCCCCATCTGTCTCCTCACCCGGAGGCCTCTGACCACCCCACTCATGCTCAGGGAGAGGGTCTTCTGGATTTTTCCACCAGGCTCCGGGCAGCCACAGGCTGGATGCCCCTACCCCAGGCCCTGaGCATACAGGGGCAGGTGCTGCGCTCAGACCTGCCAAGAGCCATATCCGGGAGGACCCTGCCCCTGACCTAAGCCCACCCCAAAGGCCAAACTCTCCACTCCCTCAGCTCAGACACCTTCTCTCCTCCCAGATCTGAGTAACTCCCAATCTTCTCTCTGCAGAGTCCAAATATGGTCCCCCATGCCCAcCATGCCCAGGTAAGCCAACCCAGGCCTCGCCCTCCAGCTCAAGGCGGGACAGGTGCCCTAGAGTAGCCTGCATCCAGGGACAGGCCCCAGCCGGGTGCTGACGCATCCACCTCCATCTCTTCCTCAGCACCTGAGTTCCTGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTTCAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGTGGGACCCACGGGGTGCGAGGGCCACATGGACAGAGGTCAGCTCGGCCCACCCTCTGCCCTGGGAGTGACCGCTGTGCCAACCTCTGTCCCTACAGGGCAGCCCCGAGAGCCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCAGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTACAGCAGGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGGAGGGGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACACAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCTGGGTAAA
384 ДНК последовательность константной области тяжелой цепи IgG2, исключая интроны GCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAGGAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCTCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCAGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAACTTCGGCACCCAGACCTACACCTGCAACGTAGATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGACAGTTGAGCGCAAATGTTGTGTCGAGTGCCCACCGTGCCCAGCACCACCTGTGGCAGGACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCACGGGAGGAGCAGTTCAACAGCACGTTCCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTTGTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGGCCTCCCAGCCCCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAACCAAAGGGCAGCCCCGAGAACCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCGGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACACCTCCCATGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTACAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGCAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCCGGGTAAA
385 ДНК последовательность константной области тяжелой цепи IgG2, включая интроны GCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAGGAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCTCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCAGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAACTTCGGCACCCAGACCTACACCTGCAACGTAGATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGACAGTTGGTGAGAGGCCAGCTCAGGGAGGGAGGGTGTCTGCTGGAAGCCAGGCTCAGCCCTCCTGCCTGGACGCACCCCGGCTGTGCAGCCCCAGCCCAGGGCAGCAAGGCAGGCCCCATCTGTCTCCTCACCCGGAGGCCTCTGCCCGCCCCACTCATGCTCAGGGAGAGGGTCTTCTGGCTTTTTCCACCAGGCTCCAGGCAGGCACAGGCTGGGTGCCCCTACCCCAGGCCCTTCACACACAGGGGCAGGTGCTTGGCTCAGACCTGCCAAAAGCCATATCCGGGAGGACCCTGCCCCTGACCTAAGCCGACCCCAAAGGCCAAACTGTCCACTCCCTCAGCTCGGACACCTTCTCTCCTCCCAGATCCGAGTAACTCCCAATCTTCTCTCTGCAGAGCGCAAATGTTGTGTCGAGTGCCCACCGTGCCCAGGTAAGCCAGCCCAGGCCTCGCCCTCCAGCTCAAGGCGGGACAGGTGCCCTAGAGTAGCCTGCATCCAGGGACAGGCCCCAGCTGGGTGCTGACACGTCCACCTCCATCTCTTCCTCAGCACCACCTGTGGCAGGACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCACGGGAGGAGCAGTTCAACAGCACGTTCCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTTGTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGGCCTCCCAGCCCCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAACCAAAGGTGGGACCCGCGGGGTATGAGGGCCACATGGACAGAGGCCGGCTCGGCCCACCCTCTGCCCTGGGAGTGACCGCTGTGCCAACCTCTGTCCCTACAGGGCAGCCCCGAGAACCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCGGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACACCTCCCATGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTACAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGCAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCCGGGTAAA
386 ДНК последовательность константной области легкой цепи Каппа CGTACGGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTGT
387 ДНК последовательность константной области легкой цепи лямда CCTAGGTCAGCCCAAGGCCAACCCCACTGTCACTCTGTTCCCGCCCTCCTCTGAGGAGCTCCAAGCCAACAAGGCCACACTAGTGTGTCTGATCAGTGACTTCTACCCGGGAGCTGTGACAGTGGCCTGGAAGGCAGATGGCAGCCCCGTCAAGGCGGGAGTGGAGACCACCAAACCCTCCAAACAGAGCAACAACAAGTACGCGGCCAGCAGCTACCTGAGCCTGACGCCCGAGCAGTGGAAGTCCCACAGAAGCTACAGCTGCCAGGTCACGCATGAAGGGAGCACCGTGGAGAAGACAGTGGCCCCTACAGAATGTTCATAA
Таблица 3: Последовательности Белка-мишени
Белок Аминокислотная последовательность
PD-1 человека UniProt Q15116 (SEQ ID NO: 388) MQIPQAPWPVVWAVLQLGWRPGWFLDSPDRPWNPPTFSPALLVVTEGDNATFTCSFSNTS
ESFVLNWYRMSPSNQTDKLAAFPEDRSQPGQDCRFRVTQLPNGRDFHMSVVRARRNDSGT
YLCGAISLAPKAQIKESLRAELRVTERRAEVPTAHPSPSPRPAGQFQTLVVGVVGGLLGS
LVLLVWVLAVICSRAARGTIGARRTGQPLKEDPSAVPVFSVDYGELDFQWREKTPEPPVP
CVPEQTEYATIVFPSGMGTSSPARRGSADGPRSAQPLRPEDGHCSWPL
TIM-3 человека
UniProt Q8TDQ0
(SEQ ID NO: 389)		 MFSHLPFDCVLLLLLLLLTRSSEVEYRAEVGQNAYLPCFYTPAAPGNLVPVCWGKGACPV
FECGNVVLRTDERDVNYWTSRYWLNGDFRKGDVSLTIENVTLADSGIYCCRIQIPGIMND
EKFNLKLVIKPAKVTPAPTRQRDFTAAFPRMLTTRGHGPAETQTLGSLPDINLTQISTLA
NELRDSRLANDLRDSGATIRIGIYIGAGICAGLALALIFGALIFKWYSHSKEKIQNLSLI
SLANLPPSGLANAVAEGIRSEENIYTIEENVYEVEEPNEYYCYVSSRQQPSQPLGCRFAM
P
LAG-3 человека
UniProt P18627
(SEQ ID NO: 390)		 MWEAQFLGLLFLQPLWVAPVKPLQPGAEVPVVWAQEGAPAQLPCSPTIPLQDLSLLRRAG
VTWQHQPDSGPPAAAPGHPLAPGPHPAAPSSWGPRPRRYTVLSVGPGGLRSGRLPLQPRV
QLDERGRQRGDFSLWLRPARRADAGEYRAAVHLRDRALSCRLRLRLGQASMTASPPGSLR
ASDWVILNCSFSRPDRPASVHWFRNRGQGRVPVRESPHHHLAESFLFLPQVSPMDSGPWG
CILTYRDGFNVSIMYNLTVLGLEPPTPLTVYAGAGSRVGLPCRLPAGVGTRSFLTAKWTP
PGGGPDLLVTGDNGDFTLRLEDVSQAQAGTYTCHIHLQEQQLNATVTLAIITVTPKSFGS
PGSLGKLLCEVTPVSGQERFVWSSLDTPSQRSFSGPWLEAQEAQLLSQPWQCQLYQGERL
LGAAVYFTELSSPGAQRSGRAPGALPAGHLLLFLILGVLSLLLLVTGAFGFHLWRRQWRP
RRFSALEQGIHPPQAQSKIEELEQEPEPEPEPEPEPEPEPEPEQL
Таблица 4: Нуклеотидные последовательности вариабельных доменов тяжелой и легкой цепей антитела против TIM-3
Ab Последовательность (5'-3')
15086.15086 VH CAGGTGCAGCTACAGCAGTCGGGCCCAGGACTGGTGAAGCCTTCACAGACCCTGTCCCTCACCTGCACTGTCTCTGGTGGCTCCATCAGCAGTGGTGGTTACTACTGGAGTTGGACCCGTCAGCACCCAGGGATGGGCCTGGAGTGGATTGGATACATCTCTTACAGTGGGAGTATCTATTACACTCCGTCCCTCAAGAGTCGACTTACCATATCAGTGGACACGTCTAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGACTGCCGCGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAGTTTGGATTCCTGGGGATCTAACCGTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 1)
15086.15086 VL GAAATTGTGTTGACGCAGTCTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAACAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGCAGCGTAGCAACTGGCCGCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATTAAG (SEQ ID NO: 2)
15086.16837/15086.17145/15086.17144 VH CAGGTGCAGCTGCAGGAGAGTGGCCCCGGACTGGTCAAGCCTTCACAGACTCTGAGCCTGACCTGCACAGTGTCTGGCGGAAGTATCAGCTCCGGGGGTTACTATTGGAGCTGGACCCGACAGCACCCAGGAATGGGTCTGGAATGGATCGGGTACATTTCATATAGCGGCTCCATCTACTATACACCCTCACTGAAAAGCAGGCTGACCATTTCCGTGGACACATCTAAGAACCAGTTCAGCCTGAAACTGTCTAGTGTGACAGCCGCTGATACTGCAGTCTACTATTGTGCCTCCCTGGACTCTTGGGGCAGTAATAGAGATTACTGGGGCCAGGGAACTCTGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 5)
15086.16837/ 15086.17145/ 15086.17144 VL GAGATCGTGCTGACTCAGTCCCCAGCCACCCTGTCACTGAGCCCAGGAGAACGAGCAACCCTGTCTTGCAGGGCCTCCCAGTCTGTCAGCTCCTACCTGGCTTGGTATCAGCAGAAGCCCGGGCAGGCACCTCGACTGCTGATCTACGACGCCAGTAACAGAGCTACCGGTATTCCCGCCCGCTTCAGTGGTTCAGGCAGCGGAACAGACTTTACCCTGACAATCTCTAGTCTGGAGCCTGAAGATTTCGCCGTGTACTATTGTCAGCAGAGGTCTAATTGGCCACTGACATTTGGCGGAGGGACTAAGGTCGAGATCAAG (SEQ ID NO: 6)
15105 VH CAGGTCACCTTGAAGGAGTGGGGCGCAGGACTGTTGAGGCCCTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCGCTGTCTATGGTGGGTCCTTCAGTGGTTACTACTGGAGCTGGATCCGCCAGCCCCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATAGGGGAAATCAATCATAGTGGAAGCACCAACTACAACCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCATATCAGTAGACGCGACCAAGAAACAATTCTCCCTGAAGCTGACCTCTGTGACCGCCGCGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGATATTGGGAGCTCCCTGACTACTGGGGCCAGGGCACCCTGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 14)
15105 VL GACATCCAGTTGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGGGCATTAGAAATGATTTAGGCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCGCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACAATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGTCTACAGCATAATAGTTACCCTCCGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAG (SEQ ID NO: 15)
15107 VH CAGATGCAGCTGGTGCAGTGGGGCGCAGGACTGTTGAAGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCGCTGTCTATGGTGGGTCCTTCAGTGGTTACTACTGGAGCTGGATCCGCCAGCCCCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATTGGGGAAATCAATCATAGTGGAAGCACCAACTACAACCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCATGTCAGTTGACACGTCCAAGCACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGACCGCCGCGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGATGGTGGGAGCTTCCTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 24)
15107 VL GAAATTGTGTTGACGCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGGGCATTAGAAATGATTTAGGCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCGCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACAATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGTCTACAGCATAATAGTTACCCGTGGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAG (SEQ ID NO: 25)
15109 VH CAGATGCAGCTGGTGCAATGGGGCGCAGGACTGTTGAAGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCGCTGTCTATGGTGGGTCCTTCAGTGGTTACTACTGGAGCTGGATCCGCCAGCCCCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATTGGGGAAATCAATCATAGTGGAAGCACCAACTACAACCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCATATCAGTAGACACGTCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGACCGCCGCGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGGTTTTACTATGCTCCGAACTTTGACTACTGGGGCCAGGGCACCCTGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 34)
15109 VL GAAATTGTGTTGACGCAGTCTCCTTCCACCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCCAGTCAGAGTATTAGTAGCTGGTTGGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGACAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATAAGGCGTCTAGTTTAGAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATTACTGCCAACAGTATAATAGTTATTCCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA (SEQ ID NO: 35)
15174 VH CAGGTGCAGCTGCAGCAGTCGGGCCCAGGACTGGTGAAGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCACTGTCTCTGGTGGCTCCATCAGCAGTAGTAATTACTACTGGGGCTGGATCCGCCAGCCCCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATTGGGAGTATCTATTATAGTGGGAACACCTACTACAACCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCATATCCGTAGACACGTCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGTTCTGTGACCGCCGCAGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGACAGACAGTGGCTGGCCCCCTCTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 44)
15174 VL GAAATTGTGATGACGCAGTCTCCTTCCACCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCCAGTCAGAGTATTAGTAGCTGGTTGGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGGTCCTGATCTATAAGGCGTCTAGTTTAGAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAACTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATTACTGCCAACAGTATAATAGTTATTCATTCACTTTCGGCCCTGGGACCAAAGTGGATATCAAG (SEQ ID NO: 45)
15175 VH CAGGTCCAGCTGGTGCAATCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTGCTGGATACACCTTAACCGGCTACTATATGCACTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGCCTTGAGTGGATGGGACGGATCAACCCTAACAGTGGTGGCTCAAACAATGCACAGAAGTTTCAGGGCAGGGTCACCATGACCAGGGACACGTCCATCAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGGCTGAGATCTGACGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGAGGGTCCCCTGTATAGCAGTGGCTGGTACGAGGGTGCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGGACAATGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 54)
15175 VL GAAATTGTGATGACGCAGTCTCCTTCCACCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCCAGTCAGAGTATTAGTAGTTGGTTGGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATAAGGCGTCTAGTTTAGAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATTACTGCCAACAGTATAATAGTTATTCTCCGGGGCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAG (SEQ ID NO: 55)
15260 VH CAGATGCAGCTACAGCAGTCAGGTCCAGGACTGGTGAAGCCCTCGCAGACCCTCTCACTCACCTGTGCCATCTCCGGGGACAGTGTCTCTAGCAACAGTGCTGCTTGGAACTGGATCAGGCAGTCCCCATCGAGAGGCCTTGAGTGGCTGGGAAGGACATACTACAGGTCCAAGTGGTATTCTGCTTTTGCAGTATCTGTGAAAAGTCGAATAACCATCAACCCAGACACATCCAAGAACCAGTTCTCCCTGCAGCTGAACTCTGTGACTCCCGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCAAGAGAGGGTAGCAGTGGCTGGTACGGATACGTCCACCACTGGGGCCAGGGCACCCTGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 64)
15260 VL GAAATTGTGTTGACGCAGTCTCCAGCTTCCCTGTCTGTATCTCTGGGAGAAACTGTCACCATCGAATGTCGAGCAAGTGAGGACATTTACAATGGTTTAGCATGGTATCAGCAGAAGCCAGGGAAATCTCCTCAGCTCCTGATCTATAATGCAAATAGCTTGCATACTGGGGTCCCATCACGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGTACACAGTATTCTCTCAAGATAAACAGCCTGCAATCTGAAGATGTCGCAAGTTATTTCTGTCAACAGTATTACGATTATCCTCCGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA (SEQ ID NO: 65)
15284 VH CAGGTGCAGCTGCAGGAGTCGGGCCCAGGACTGGTGAAGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCACTGTCTCTGGTGGCTCCTTCAGCAGTAGTAGTTACTACTGGGGCTGGATCCGCCAGCCCCCTGGGAAGGGGCTGGAGTGGATTGGGATCTTCTATTATAGTGGGACCACCTACTACAACCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCATATCCGCACACACGTCCAAGAGCCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGACCGCCGCAGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGAGGGGGAGAATATTTTGACCGGTTACTCCCCTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 74)
15284 VL GAAATTGTGATGACGCAGTCTCCATCCTTCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCCAGTCAGGGCATTAGCAGTTATTTAGCCTGGTATCAGCAAAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCCACTTTGGAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACAATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGTCAACAGCTTAATAGTTACCCATTCACTTTCGGCCCTGGGACCAAAGTGGATATCAAA (SEQ ID NO: 75)
15299 VH CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCGGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTACAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTGGTGGTAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGTGAAAGATGGGGCAGGAGGCTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 84)
15299 VL GATATTGTGATGACGCAGTCTTCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGGGCATTATAAATCATTTAGGCTGGTATCAGCATAAACCAGGGAAAGCCCCTAATCGCCTAATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACAATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGTCTACGGCATAATAGTTACCCTCCGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAG (SEQ ID NO: 85)
15353 VH CAGGTGCAGCTACAGCAGTCGGGCCCAGGACTGGTGAAGCCTTCACAGACCCTGTCCCTCACCTGCACTGTCTCTGGTGGCTCCATCAACAGTGGTGGTCACTACTGGAGCTGGATCCGCCAGCACCCAGGGAGGGGCCTGGAGTGGATTGGGTACATCTATTACAGTGGGAGCATCTACTACAACCCGTCCCTCAAGAGTCGACTTACCATATCAGTAGACACGTCTAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGACTGCCGCGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGTTATTACTATGCCAGTAGTGGTGATGCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGGACAATGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 94)
15353 VL GAAACGACACTCACGCAGTCTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAACAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGCAGCGTAGCAACTGGCCTCCGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA (SEQ ID NO: 95)
15354 VH CAGGTGCAGCTGCAGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCGGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTACAGCCTCTGGATTCACCTTTAGTAATTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGGTCGTGGTGGTAGCACATTCTTCGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAGCACGCTGTATCTGCAAACGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAAGGGGGCCCGTTGTATAACTGGAACGACGGTGATGGTTTTGATATCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACAGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 104)
15354 VL GAAATTGTGTTGACGCAGTCTCCAGCCACCCTGTCTGTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCAACTTAGCCTGGTACCAGCAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGTGCATCCACCAGGGCCACTGGTATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCACTGGGTCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGTCTGAAGATTTTGCACTTTATTACTGTCAGCAGTATGATAACTGGCCTCCGTGGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA (SEQ ID NO: 105)
17244 VH CAGGTGCAGCTGCAGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCAAGCCTGGAGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTGACTACTACATGACCTGGATCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATTTCATACATTAGTGGTGGTGGTGGTTCCATATACTACGCAGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGGGACAACGCCAAGAACTCACTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTTTATTTCTGTGCGAGAGGGAACTGGGGATCGGCGGCTCTTGATATCTGGGGCCAAGGGACAATGGTCACGGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 114)
17244 VL GAAATTGTGTTGACGCAGTCTCCATCCTCACTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGTCGGGCGAGTCAGGGCATTAACAATTATTTAGCCTGGTTTCAGCAGAAACCAGGGAGAGCCCCTAAGTCCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCGAAGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGCCAACAGTATAATAGTTACCCTCCAACTCTCGGCCCTGGGACCAACGTGGATATCAAA (SEQ ID NO: 115)
17245 VH CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCGGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTACAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTGGTGGTAGTGGTGGTAGCGCATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGTGAAAGATGGGGCAGGAGGCTTTGACTACTGGGGCCAGGGCACCCTGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 124)
17245 VL GACATCCAGTTGACCCAGTCCCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGGGCATTAGAAATCATTTAGGCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCGCCTAATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACAATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGTCTACAGCATAATAGTTACCCTCCGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAG (SEQ ID NO: 125)
19324 VH CAGATGCAGCTACAGCAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCGGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCGTTAGCAGCTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCTAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGGTATTAGTGGTAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAATACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAGATAGTGGGAGCTACCCACTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACGGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 134)
19324 VL GAAATTGTGATGACACAGTCTCCAGACTCCCTGGCTGTGTCTCTGGGCGAGAGGGCCACCATCAACTGCAAGTCCAGCCAGAGTGTTTTATACAGCTCCAACAATAAGAACTACTTAGCTTGGTACCAGCAGAAACCAGGACAGCCTCCTAAGCTGCTCATTTACTGGGCATCTACCCGGGAATCCGGGGTCCCTGACCGATTCAGTGGCAGCGGGTCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGGCTGAAGATGTGGCAGTTTATTACTGTCAGCAATATTATAGTGGTCCGATCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGAGATTAAG (SEQ ID NO: 135)
19416 VH CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCGGGCCCAGGACTGGTGAAGCCTTCACAGACCCTGTCCCTCACCTGCACTGTCTCTGGTGGCTCCATCAACAGTGGTGGTTACTACTGGAGCTGGATCCGCCAGCACCCAGGGAAGGGCCTGGAGTGGATTGGGTACATCTATTACAGTGGGAGCATCTACTACAACCCGTCCCTCAGGAGTCGACTTACCATATCAGTAGACACGTCTAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGACTGCCGCGGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGACTCCTTATTACTATGGTTCGGGGAGTTATGGGGACTACTGGGGCCAGGGCACCCTGGTCACTGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 144)
19416 VL GACATCCAGATGACCCAGTCTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAACAACTACTTAGCCTGGTACCAACAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGCAGCGTAGCAACTGGCCCATCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGAGATTAAA (SEQ ID NO: 145)
19568 VH CAGATGCAGCTGCAGGAGTCGGGCCCAGGACTGGTGAAGCCTTCTCAGACCCTGTCCCTCACCTGCACTGTGTCTGGTGGCTCCATCAGCAGTGTTGGTTACTACTGGAACTGGATCCGCCAGCACCCAGGGAAGGGCCTGGAGTTCATTGGGTACATCTATTACAGTGGGAGCATCTACTACAATCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTTACCATATCCGTAGACACGTCTAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGACTGCCGCGGACACGGCCCTATATTACTGTGCGAGCGTCGGTATAGTGGGAGCCTCCTACTTTGAGTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACAGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 154)
19568 VL GAAATTGTGATGACACAGTCTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAACAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGCAGCGTAGCAACTGGCCTATCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGAGATCAAG (SEQ ID NO: 155)
20131 VH CAGGTGCAGCTACAGCAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTAAGCAGCTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGGTATTAGTGGTAGTGGTGGTAGCACATACAACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTTTCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAAATTTTTGGGTCCTACTACTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACAGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 164)
20131 VL GAAATTGTGATGACACAGTCTCCAGACTCCCTGGCTGTGTCTCTGGGCGAGAGGGCCACCATCAACTGCAAGTCCAGCCAGAGTGTTTTATACAGCTCCAACAATAAGAACTACTTAGCTTGGTACCAGCAGAAACCAGGACAGCCTCCTAAGCTGCTCATTTACTGGACATCTACCCGGGAATCCGGGGTCCCTAACCGATTCAGTGGCAGCGGGTCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGGCTGAAGATGTGGCAGTTTATTACTGTCAGCAATATTATAGTGGTCCTCCGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA (SEQ ID NO: 165)
20185 VH CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTTCGGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGTCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGGTATTAGTGGTAGTGGTGGTAGCACATACAACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTTCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAAATTTTTGGGTCCTACTACTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 174)
20185 VL GAAATTGTGATGACACAGTCTCCAGACTCCCTGGCTGTGTCTCTGGGCGAGAGGGCCACCATCAACTGCAAGTCCAGCCAGAGTGTTTTATACAGCTCCAATAATAAGAACTACTTAGCTTGGTACCAGCAGAAATCAGGACAGCCTCCTAAGCTGCTCATTTACTGGGCATCTACCCGGGAATCCGGGGTCCCTGACCGATTCAGTGGCAGCGGGTCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGGCTGAAGATGTGGCAGTTTATTACTGTCAGCAATATTATAGTGGTCCACCGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA (SEQ ID NO: 175)
20293 VH ACGTGACAGGGCGCGCCCAGGTCCAGCTGCAGGAGAGCGGTCCCGGACTGGTGAAGCCATCCCAGACACTGAGCCTGACTTGTACTGTGAGCGGCGGTAGCATCTCCAGCGGCGGCTACTATTGGTCCTGGATCAGGCAGCACCCAGGCAAGGGCCTGGAGTGGATCGGCTACATCTACTATAGCGGCTCTATCTACTATAACCCTTCCCTGAAGAGCCGGGTGACCATCTCTGTGGACACATCCAAGAATCAGTTCTATCTGAAGCTGTCTTCCGTGACCGCCGCTGATACAGCCGTGTACTATTGCGCCTCACTGATGGTCTGGGGGGTCATGGGCGATTACTGGGGGCAGGGCACACTGGTCACAGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 184)
20293 VL GAGATTGTGCTGACCCAGTCTCCCGCCACCCTGTCTCTGAGTCCTGGCGAGAGAGCCACCCTGAGCTGCAGAGCCTCTCAGTCCGTGTCCAGCTATCTGGCCTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCCAGGCTCCCCGGCTGCTGATCTACGATGCCTCCAATAGAGCCACCGGCATCCCTGCCAGATTCTCCGGCTCTGGCTCTGGCACCGACTTTACCCTGACCATCTCCAGCCTGGAACCCGAGGACTTCGCCGTGTACTACTGCCAGCAGCGGTCCGACTGGCCTCCTACATTTGGCCAAGGCACCAAGGTGGAAATCAAG (SEQ ID NO: 185)
20300 VH CAGGTCCAGCTACAGCAGTCTGGGGGAGGCTTGGTTCATCCTGGGGGGTCCCTAAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCGTTGACACCTATGCCATGACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGGTATTAGCGGTAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAACTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGACGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAGATAGTGGGAGTTACCCACTTTGACTACTGGGGCCAGGGCACCCTGGTCACGGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 194)
20300 VL GAAATTGTGATGACGCAGTCTCCAGACTCCCTGGCTGTGTCTCTGGGCGAGAGGGCCACCATCAACTGCAAGTCCAGCCAGAGTGTTTTATACAGGTCCAACAATAAGAACTATTTAGCTTGGTACCAGCAGAAACCAGGACAGCCTCCTAAGCTGCTCATTTACTGGGCATCTACCCGGGAATCCGGGGTCCCTGACCGATTCAGTGGCAGCGGGTCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGGCTGAAGATGTGGCAGTTTATTACTGTCAGCAATATTATAGTGGTCCGATCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGAGATTAAG (SEQ ID NO: 195)
20362 VH CAGGTCACCTTGAAGGAGTCGGGCCCAGGACTGGTGAAGCCTTCACAGACCCTGTCCCTCACCTGCACTGTCTCTGGTGGCTCCATCAGCAGTGGTGGTCATTACTGGAGCTGGATCCGCCAGCACCCAGGGAAGGGCCTGGAGTGGATTGGGTACATCTCTTACAGTGGGAGCACCTACTACAACCCGTCCCTCAAGAGTCGACTTACCATATCAGTAGACACGTCTAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGACTGCCGCGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGACCGCGTATTACGATATTTTGACTGGTTACCCTTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACGGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 204)
20362 VL GAAATTGTGATGACACAGTCTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAACAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATCCGACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGCAGCGTAGCAACTGGCCGATCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGAGATCAAG (SEQ ID NO: 205)
20621 VH CAGGTGCAGCTACAGCAGTCGGGCCCAGGACTGGTGAAGCCTTCACAGACCCTGTCCCTCACCTGCACTGTCTCTGGTGGCTCCATCAGCAGTGGTGGTTACTACTGGAGCTGGATCCGCCAGCACCCAGGGAAGGGCCTGGAGTGGATTGGGTACATCTCTTATAGTGGGAGTATCTACTACAACCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTTACCATATCAGTAGACACGTCTAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGACTGCCACGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGACCGCGTATTACGATCTTTTGACTGGTTACCCTTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACGGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 214)
20621 VL GAAATTGTGATGACGCAGTCTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAACAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGCAGCGTAGCAACTGGCCGATCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGAGATTAAG (SEQ ID NO: 215)
Таблица 5: Нуклеотидные последовательности вариабельных доменов тяжелой и легкой цепей антитела против TIM-3
(CDR выделены жирным шрифтом и курсивом)
Ab Последовательность (от N-конца до C-конца)
15086.15086 VH QVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCTVSGGSISSGGYYWSWTRQHPGMGLEWIGYISYSGSIYYTPSLKSRLTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCASLDSWGSNRDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 3)
15086.16837 15086.17145 15086.17144
VH		 QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGGSISSGGYYWSWTRQHPGMGLEWIGYISYSGSIYYTPSLKSRLTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCASLDSWGSNRDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 7)
15086.15086 15086.16837 15086.17145 15086.17144
VL		 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPLTFGGGTKVEIK (SEQ ID NO: 4)
15105 VH QVTLKEWGAGLLRPSETLSLTCAVYGGSFSGYYWSWIRQPPGKGLEWIGEINHSGSTNYNPSLKSRVTISVDATKKQFSLKLTSVTAADTAVYYCARYWELPDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 16)
15105 VL DIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNDLGWYQQKPGKAPKRLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCLQHNSYPPTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 17)
15107 VH QMQLVQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSGYYWSWIRQPPGKGLEWIGEINHSGSTNYNPSLKSRVTMSVDTSKHQFSLKLSSVTAADTAVYYCARWWELPDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 26)
15107 VL EIVLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNDLGWYQQKPGKAPKRLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCLQHNSYPWTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 27)
15109 VH QMQLVQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSGYYWSWIRQPPGKGLEWIGEINHSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARFYYAPNFDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 36)
15109 VL EIVLTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQSISSWLAWYQQKPGTAPKLLIYKASSLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYNSYSTFGGGTKVEIK (SEQ ID NO: 37)
15174 VH QVQLQQSGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSSNYYWGWIRQPPGKGLEWIGSIYYSGNTYYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARQTVAGPLFDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 46)
15174 VL EIVMTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQSISSWLAWYQQKPGKAPKVLIYKASSLESGVPSRFSGSGSGTELTLTISSLQPDDFATYYCQQYNSYSFTFGPGTKVDIK (SEQ ID NO: 47)
15175 VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKAAGYTLTGYYMHWVRQAPGQGLEWMGRINPNSGGSNNAQKFQGRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCAREGPLYSSGWYEGAFDIWGQGTMVTVSS (SEQ ID NO: 56)
15175 VL EIVMTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQSISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYKASSLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYNSYSPGLTFGGGTKVEIK (SEQ ID NO: 57)
15260 VH QMQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWNWIRQSPSRGLEWLGRTYYRSKWYSAFAVSVKSRITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVYYCAREGSSGWYGYVHHWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 66)
15260 VL EIVLTQSPASLSVSLGETVTIECRASEDIYNGLAWYQQKPGKSPQLLIYNANSLHTGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDVASYFCQQYYDYPPTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 67)
15284 VH QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSFSSSSYYWGWIRQPPGKGLEWIGIFYYSGTTYYNPSLKSRVTISAHTSKSQFSLKLSSVTAADTAVYYCARGGEYFDRLLPFDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 76)
15284 VL EIVMTQSPSFLSASVGDRVTITCRASQGISSYLAWYQQKPGKAPKLLIYAASTLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQQLNSYPFTFGPGTKVDIK (SEQ ID NO: 77)
15299 VH QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCTASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAIGGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVKDGAGGFDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 86)
15299 VL DIVMTQSSSSLSASVGDRVTITCRASQGIINHLGWYQHKPGKAPNRLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCLRHNSYPPTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 87)
15353 VH QVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCTVSGGSINSGGHYWSWIRQHPGRGLEWIGYIYYSGSIYYNPSLKSRLTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCASYYYASSGDAFDIWGQGTMVTVSS (SEQ ID NO: 96)
15353 VL ETTLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPPTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 97)
15354 VH QVQLQESGGGLVQPGGSLRLSCTASGFTFSNYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGRGGSTFFADSVKGRFTISRDNSKSTLYLQTNSLRAEDTAVYYCAKGGPLYNWNDGDGFDIWGQGTTVTVSS (SEQ ID NO: 106)
15354 VL EIVLTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSNLAWYQQKPGQAPRLLIYGASTRATGIPARFSGTGSGTEFTLTISSLQSEDFALYYCQQYDNWPPWTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 107)
17244 VH QVQLQESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMTWIRQAPGKGLEWISYISGGGGSIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYFCARGNWGSAALDIWGQGTMVTVSS (SEQ ID NO: 116)
17244 VL EIVLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGINNYLAWFQQKPGRAPKSLIYAASSLQSGVPSKFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYNSYPPTLGPGTNVDIK (SEQ ID NO: 117)
17245 VH QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCTASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAIGGSGGSAYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVKDGAGGFDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 126)
17245 VL DIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNHLGWYQQKPGKAPKRLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCLQHNSYPPTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 127)
19324 VH QMQLQQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTVSSYAMSWVRQALGKGLEWVSGISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKIVGATHFDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 136)
19324 VL EIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVLYSSNNKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSGPITFGQGTRLEIK (SEQ ID NO: 137)
19416 VH QVQLVESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGGSINSGGYYWSWIRQHPGKGLEWIGYIYYSGSIYYNPSLRSRLTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCATPYYYGSGSYGDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 146)
19416 VL DIQMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVNNYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPITFGQGTRLEIK (SEQ ID NO: 147)
19568 VH QMQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGGSISSVGYYWNWIRQHPGKGLEFIGYIYYSGSIYYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTALYYCASVGIVGASYFEYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 156)
19568 VL EIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPITFGQGTRLEIK (SEQ ID NO: 157)
20131 VH QVQLQQSGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTLSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSGISGSGGSTYNADSVKGRFTISRDNSKNTLFLQMNSLRAEDTAVYYCAKIFGSYYFDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 166)
20131 VL EIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVLYSSNNKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWTSTRESGVPNRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSGPPTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 167)
20185 VH QVQLVESGGGLVRPGGSLRLSCAVSGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSGISGSGGSTYNADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKIFGSYYFDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 176)
20185 VL EIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVLYSSNNKNYLAWYQQKSGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSGPPTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 177)
20293 VH QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGGSISSGGYYWSWIRQHPGKGLEWIGYIYYSGSIYYNPSLKSRVTISVDTSKNQFYLKLSSVTAADTAVYYCASLMVWGVMGDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 186)
20293 VL EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSDWPPTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 187)
20300 VH QVQLQQSGGGLVHPGGSLRLSCAASGFTVDTYAMTWVRQAPGKGLEWVSGISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRDEDTAVYYCAKIVGVTHFDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 196)
20300 VL EIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVLYRSNNKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSGPITFGQGTRLEIK (SEQ ID NO: 197)
20362 VH QVTLKESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGGSISSGGHYWSWIRQHPGKGLEWIGYISYSGSTYYNPSLKSRLTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCATAYYDILTGYPFDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 206)
20362 VL EIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASDRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPITFGQGTRLEIK (SEQ ID NO: 207)
20621 VH QVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCTVSGGSISSGGYYWSWIRQHPGKGLEWIGYISYSGSIYYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTATDTAVYYCATAYYDLLTGYPFDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 216)
20621 VL EIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPITFGQGTRLEIK (SEQ ID NO: 217)
Таблица 6: Нуклеотидные последовательности вариабельных доменов тяжелой и легкой цепей антитела против PD-1
Ab Последовательность (5'-3')
12819.15384 VH GGCGCGCCGAGGTGCAGCTGCTGGAATCTGGAGGAGGACTGGTCCAGCCAGGTGGATCCCTGCGACTGAGCTGCGCCGCTTCTGGATTCACCTTTACAAGATACGACATGGTGTGGGTCCGCCAGGCACCAGGAAAGGGACTGGAGTGGGTGGCTGGTATCGGCGATAGTAACAAGATGACCCGCTACGCACCTGCCGTCAAAGGGAGGGCAACAATTAGTCGGGACAACTCAAAGAATACTCTGTATCTGCAGATGAATTCCCTGCGAGCTGAGGATACAGCAGTGTACTATTGTGCCAAAGGTAGCTGCATCGCCTGTTGGGACGAAGCTGGCCGTATTGATGCATGGGGACAGGGGACTCTGGTGACCGTCTCGAG (SEQ ID NO: 224)
12819.15384 VL GCTAGCCTCTTACGAGCTGACTCAGGACCCTGCAGTGAGTGTCGCCCTGGGCCAGACAGTGAGAATCACTTGCTCCGGCGGAGGGAGCTACGATGGTTCCAGCTACTATGGCTGGTATCAGCAGAAGCCAGGACAGGCACCTGTGACCGTCATCTATAACAATAACAATAGGCCATCTGACATTCCCGATCGGTTCAGTGGATCTAGTTCAGGGAACACAGCTTCTCTGACCATTACAGGAGCCCAGGCTGAGGACGAAGCAGATTACTATTGTGGGTCATACGACAGGCCAGAAACAAATTCCGATTATGTGGGAATGTTTGGTAGCGGCACTAAAGTCACCGTCCTAGG (SEQ ID NO: 225)
12748.15381 12748.16124 VH GGCGCGCCGAGGTGCAGCTGCTGGAAAGCGGAGGAGGACTGGTCCAGCCAGGTGGATCTCTGCGACTGAGTTGCGCCGCTTCAGGCTTCACATTTTCTGACTACGCCATGAACTGGGTGAGGCAGGCTCCTGGCAAGGGACTGGAGTGGGTCGCAGGAATCGGGAACGATGGAAGTTACACTAATTATGGAGCAGCCGTGAAGGGGAGAGCTACTATTTCCCGCGACAACAGCAAAAATACCCTGTACCTGCAGATGAACTCACTGAGAGCTGAAGATACCGCAGTGTACTATTGTGCCTCTGACATCAGGAGTCGGAATGATTGCTCCTATTTCCTGGGAGGGTGTTCCAGCGGCTTTATTGACGTGTGGGGTCAGGGCACCCTGGTCACAGTCTCGAG (SEQ ID NO: 234)
12748.15381 VL GCTAGCCTCTTACGAGCTGACCCAGGACCCAGCAGTGTCCGTCGCCCTGGGCCAGACAGTGAGAATCACTTGCTCCGGCGGATCCAGCTACAGCTATGGGTGGTTCCAGCAGAAGCCCGGTCAGGCCCCTGTGACCGTCATCTATGAAAGTAACAATAGGCCATCAGACATTCCCGATCGGTTTTCTGGCTCTAGTTCAGGAAACACAGCTAGTCTGACCATCACAGGGGCCCAGGCTGAGGACGAAGCTGATTACTATTGTGGCAATGCAGATTCCAGCTCTGGAATTTTCGGGTCCGGTACTAAAGTCACCGTCCTAGG (SEQ ID NO: 235)
12865.15377 VH GGCGCGCCGAGGTGCAGCTGCTGGAATCCGGAGGAGGACTGGTCCAGCCAGGTGGATCCCTGCGACTGAGCTGCGCCGCTTCTGGATTCGACTTTAGCGATCACGGGATGCAGTGGGTGAGACAGGCACCAGGCAAGGGACTGGAGTACGTGGGTGTCATCGACACCACAGGCCGCTATACATACTATGCACCTGCCGTCAAGGGCAGGGCTACCATTAGTCGGGACAACTCAAAAAATACACTGTACCTGCAGATGAACTCTCTGAGGGCTGAAGATACTGCAGTGTACTATTGCGCCAAAACTACCTGCGTGGGAGGGTACCTGTGCAATACCGTCGGAAGTATCGATGCTTGGGGACAGGGGACACTGGTGACTGTCTCGAG (SEQ ID NO: 244)
12865.15377
VL		 GCTAGCCTCCTACGAGCTGACTCAGGACCCAGCAGTGAGCGTCGCCCTGGGCCAGACAGTGAGAATCACTTGCTCTGGCGGAGGGTCCAGCTCTTACTATGGTTGGTACCAGCAGAAGCCCGGCCAGGCTCCTGTGACCGTCATCTATGACGATACAAACAGGCCAAGTGGAATTCCCGATCGGTTCTCAGGTAGTTCATCCGGCAATACAGCTTCTCTGACCATCACAGGGGCCCAGGCTGAGGACGAAGCAGATTACTATTGTGGTGGCTATGAAGGAAGCTCTCACGCCGGGATTTTTGGAAGTGGGACTAAAGTCACCGTCCTAGG (SEQ ID NO: 245)
12892.15378 VH GGCGCGCCGAGGTGCAGCTGCTGGAAAGTGGAGGAGGACTGGTCCAGCCAGGTGGAAGCCTGAGACTGTCTTGCGCCGCTAGTGGCTTCGACTTTTCCAGCTACACCATGCAGTGGGTGAGGCAGGCACCAGGCAAGGGACTGGAGTGGGTGGGCGTCATCTCTAGTACTGGAGGGTCTACCGGATACGGGCCTGCTGTGAAGGGAAGGGCAACAATTTCACGGGATAACTCCAAAAATACTCTGTATCTGCAGATGAACAGCCTGAGGGCAGAAGACACAGCCGTGTACTATTGCGTGAAATCAATCTCCGGAGATGCCTGGTCTGTGGACGGGCTGGATGCTTGGGGTCAGGGCACCCTGGTCACAGTCTCGAG (SEQ ID NO: 254)
12892.15378
VL		 GCTAGCCTCATACGAGCTGACCCAGGACCCAGCAGTGTCCGTCGCCCTGGGACAGACAGTGAGAATCACTTGCTCCGGAGGAGGATCCGCCTACGGTTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCCAGGCACCTGTGACCGTCATCTACTATAACAATCAGAGGCCATCTGGCATTCCCGACCGGTTCAGTGGATCCAGCTCTGGGAACACAGCAAGTCTGACCATCACAGGCGCCCAGGCTGAGGACGAAGCCGATTACTATTGTGGAAGCTATGATAGTTCAGCTGTGGGGATTTTTGGTTCTGGCACTAAAGTCACCGTCCTAGG (SEQ ID NO: 255)
12796.15376
VH		 GGCGCGCCGAGGTGCAGCTGCTGGAAAGTGGAGGAGGACTGGTCCAGCCAGGTGGAAGCCTGAGACTGTCTTGCGCCGCTAGTGGCTTCGACTTTTCCAGCTACACCATGCAGTGGGTGAGGCAGGCACCAGGCAAGGGACTGGAGTGGGTGGGCGTCATCTCTAGTACTGGAGGGTCTACCGGATACGGGCCTGCTGTGAAGGGAAGGGCAACAATTTCACGGGATAACTCCAAAAATACTCTGTATCTGCAGATGAACAGCCTGAGGGCAGAAGACACAGCCGTGTACTATTGCGTGAAATCAGTCTCCGGAGATGCCTGGTCTGTGGACGGGCTGGATGCTTGGGGTCAGGGCACCCTGGTCACAGTCTCGAG (SEQ ID NO: 264)
12796.15376 VL GCTAGCCTCATACGAGCTGACCCAGGACCCAGCAGTGTCCGTCGCCCTGGGCCAGACAGTGAGAATCACTTGCTCCGGAGGAGGATCCGCCTACGGTTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCCAGGCACCTGTGACCGTCATCTACTATAACAATCAGAGGCCATCTGACATTCCCGATCGGTTCAGTGGATCCAGCTCTGGGAACACAGCAAGTCTGACCATCACAGGCGCCCAGGCTGAGGACGAAGCCGATTACTATTGTGGAAGCTATGATAGTTCAGCTGTGGGGATTTTTGGTTCTGGCACTAAAGTCACCGTCCTAGG (SEQ ID NO: 265)
12777.15382
VH		 GGCGCGCCGAGGTGCAGCTGCTGGAATCCGGAGGAGGACTGGTCCAGCCAGGTGGAAGCCTGCGACTGTCTTGCGCCGCTAGTGGATTCGACTTTTCCAGCTACGGAATGCAGTGGGTGAGGCAGGCACCAGGCAAGGGACTGGAGTGGGTGGGCGTCATCTCTGGAAGTGGGATTACCACACTGTACGCACCTGCCGTCAAGGGAAGGGCTACTATCTCACGGGACAACTCTAAAAATACAGTGTATCTGCAGATGAACTCCCTGAGAGCTGAAGATACCGCAGTCTACTATTGTACACGCTCACCCTCCATCACAGACGGCTGGACTTATGGAGGGGCCTGGATTGATGCTTGGGGTCAGGGCACTCTGGTGACCGTCTCGAG (SEQ ID NO: 274)
12777.15382
VL		 GCTAGCCAGCTACGAGCTGACCCAGGACCCAGCAGTGTCCGTCGCCCTGGGCCAGACAGTGAGAATCACTTGCAGTGGCGGAGATGGGTCATACGGTTGGTTCCAGCAGAAGCCCGGACAGGCCCCTGTGACCGTCATCTATGACAACGATAATAGGCCATCTGACATTCCCGATCGGTTTAGTGGCTCCAGCTCTGGAAACACAGCTTCTCTGACCATCACAGGGGCCCAGGCTGAGGACGAAGCTGATTACTATTGTGGCAATGCAGACCTGTCCGGGGGTATTTTCGGCAGCGGAACTAAAGTCACCGTCCTAGG (SEQ ID NO: 275)
12760.15375
VH		 GGCGCGCCGAGGTGCAGCTGCTGGAATCTGGAGGAGGACTGGTCCAGCCAGGTGGATCCCTGAGACTGAGCTGCGCCGCTTCTGGATTCACCTTTAGTACATTCAACATGGTGTGGGTCAGGCAGGCACCTGGAAAGGGACTGGAGTACGTGGCTGAAATCTCCAGCGACGGCTCTTTTACATGGTATGCAACTGCCGTCAAGGGCAGGGCCACCATTAGTCGGGATAACTCAAAAAATACAGTGTACCTGCAGATGAATTCCCTGAGGGCTGAGGACACCGCAGTCTACTATTGCGCAAAATCCGATTGTTCTAGTTCATACTATGGATATAGCTGTATCGGGATCATTGACGCTTGGGGTCAGGGCACTCTGGTGACCGTCTCGAG (SEQ ID NO: 284)
12760.15375
VL		 GCTAGCCTCCTATGAGCTGACCCAGGACCCAGCAGTGAGCGTCGCCCTGGGCCAGACAGTGAGAATCACTTGCTCCGGCGGAATTAGCGACGATGGCTCTTACTATTACGGATGGTTCCAGCAGAAGCCCGGACAGGCCCCTGTGACCGTCATCTATATTAACGACAGGCGGCCAAGTAATATCCCCGATAGGTTTTCAGGGTCCAGCTCTGGTAACACAGCTTCTCTGACCATTACAGGGGCCCAGGCTGAGGACGAAGCTGATTATTACTGTGGCTCTTACGATAGTTCAGCAGGGGTGGGTATCTTCGGCAGTGGAACTAAAGTCACCGTCCTAGG (SEQ ID NO: 285)
13112.15380
VH		 GGCGCGCCGAGGTGCAGCTGCTGGAAAGTGGAGGAGGACTGGTCCAGCCAGGTGGATCACTGAGACTGTCCTGCGCCGCCTCCGGCTTCACCTTTTCCAGCTACAACATGTTCTGGGTGCGCCAGGCACCAGGAAAGGGACTGGAGTTTGTCGCTGAAATCTCTGGTAGTAATACTGGAAGCCGAACCTGGTACGCACCTGCCGTGAAGGGCAGGGCTACAATTTCTCGGGACAACAGTAAAAATACTCTGTATCTGCAGATGAACTCTCTGAGGGCTGAGGATACAGCAGTGTACTATTGTGCAAAATCAATCTACGGAGGGTATTGCGCCGGTGGCTATTCCTGTGGTGTGGGCCTGATTGACGCATGGGGACAGGGGACCCTGGTCACAGTCTCGAG (SEQ ID NO: 294)
13112.15380
VL		 GCTAGCCTCATACGAGCTGACCCAGGACCCAGCAGTGTCCGTCGCCCTGGGCCAGACAGTGAGAATCACTTGCAGTGGCGGATCCAGCGATTACTATGGGTGGTTCCAGCAGAAGCCCGGTCAGGCCCCTGTGACCGTCATCTACTATAACAACAAGAGGCCATCTGACATTCCCGATCGGTTTAGTGGCTCTAGTTCAGGAAACACAGCCTCCCTGACCATTACAGGGGCCCAGGCTGAGGACGAAGCTGATTACTATTGTGGCAATGCAGACTCCAGCGTGGGAGTCTTCGGGTCTGGTACTAAGGTGACCGTCCTAGG (SEQ ID NO: 295)
12748.16124
VL		 GCTAGCCTCTTACGAGCTGACTCAGCCACCTTCCGTGTCCGTGTCCCCAGGACAGACCGCAAGAATCACATGCAGTGGCGGATCCAGCTACTCATATGGGTGGTTCCAGCAGAAGCCTGGTCAGGCCCCCGTGACAGTCATCTATGAGAGCAACAATAGGCCTTCTGACATTCCAGAACGGTTTAGTGGCTCTAGTTCAGGAACCACAGTGACTCTGACCATCAGCGGGGTCCAGGCCGAGGACGAAGCTGATTACTATTGTGGCAACGCTGATTCCAGCTCTGGAATTTTCGGGTCCGGTACAAAAGTGACTGTCCTAGG (SEQ ID NO: 391)
Таблица 7: Нуклеотидные последовательности вариабельных доменов тяжелой и легкой цепей антитела против PD-1
(CDR выделены жирным шрифтом и курсивом)
Ab Последовательность (от N-конца до C-конца)
12819.15384
VH		 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFTRYDMVWVRQAPGKGLEWVAGIGDSNKMTRYAPAVKGRATISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKGSCIACWDEAGRIDAWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 226)
12819.15384
VL		 SYELTQDPAVSVALGQTVRITCSGGGSYDGSSYYGWYQQKPGQAPVTVIYNNNNRPSDIPDRFSGSSSGNTASLTITGAQAEDEADYYCGSYDRPETNSDYVGMFGSGTKVTVL (SEQ ID NO: 227)
12748.15381
12748.16124
VH		 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDYAMNWVRQAPGKGLEWVAGIGNDGSYTNYGAAVKGRATISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCASDIRSRNDCSYFLGGCSSGFIDVWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 236)
12748.15381
VL		 SYELTQDPAVSVALGQTVRITCSGGSSYSYGWFQQKPGQAPVTVIYESNNRPSDIPDRFSGSSSGNTASLTITGAQAEDEADYYCGNADSSSGIFGSGTKVTVL (SEQ ID NO: 237)
12865.15377
VH		 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFDFSDHGMQWVRQAPGKGLEYVGVIDTTGRYTYYAPAVKGRATISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKTTCVGGYLCNTVGSIDAWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 246)
12865.15377
VL		 SYELTQDPAVSVALGQTVRITCSGGGSSSYYGWYQQKPGQAPVTVIYDDTNRPSGIPDRFSGSSSGNTASLTITGAQAEDEADYYCGGYEGSSHAGIFGSGTKVTVL (SEQ ID NO: 247)
12892.15378
VH		 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFDFSSYTMQWVRQAPGKGLEWVGVISSTGGSTGYGPAVKGRATISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVKSISGDAWSVDGLDAWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 256)
12892.15378
VL		 SYELTQDPAVSVALGQTVRITCSGGGSAYGWYQQKPGQAPVTVIYYNNQRPSGIPDRFSGSSSGNTASLTITGAQAEDEADYYCGSYDSSAVGIFGSGTKVTVL (SEQ ID NO: 257)
12796.15376
VH		 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFDFSSYTMQWVRQAPGKGLEWVGVISSTGGSTGYGPAVKGRATISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVKSVSGDAWSVDGLDAWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 266)
12796.15376
VL		 SYELTQDPAVSVALGQTVRITCSGGGSAYGWYQQKPGQAPVTVIYYNNQRPSDIPDRFSGSSSGNTASLTITGAQAEDEADYYCGSYDSSAVGIFGSGTKVTVL (SEQ ID NO: 267)
12777.15382
VH		 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFDFSSYGMQWVRQAPGKGLEWVGVISGSGITTLYAPAVKGRATISRDNSKNTVYLQMNSLRAEDTAVYYCTRSPSITDGWTYGGAWIDAWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 276)
12777.15382
VL		 SYELTQDPAVSVALGQTVRITCSGGDGSYGWFQQKPGQAPVTVIYDNDNRPSDIPDRFSGSSSGNTASLTITGAQAEDEADYYCGNADLSGGIFGSGTKVTVL (SEQ ID NO: 277)
12760.15375
VH		 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSTFNMVWVRQAPGKGLEYVAEISSDGSFTWYATAVKGRATISRDNSKNTVYLQMNSLRAEDTAVYYCAKSDCSSSYYGYSCIGIIDAWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 286)
12760.15375
VL		 SYELTQDPAVSVALGQTVRITCSGGISDDGSYYYGWFQQKPGQAPVTVIYINDRRPSNIPDRFSGSSSGNTASLTITGAQAEDEADYYCGSYDSSAGVGIFGSGTKVTVL (SEQ ID NO: 287)
13112.15380
VH		 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYNMFWVRQAPGKGLEFVAEISGSNTGSRTWYAPAVKGRATISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKSIYGGYCAGGYSCGVGLIDAWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 296)
13112.15380
VL		 SYELTQDPAVSVALGQTVRITCSGGSSDYYGWFQQKPGQAPVTVIYYNNKRPSDIPDRFSGSSSGNTASLTITGAQAEDEADYYCGNADSSVGVFGSGTKVTVL (SEQ ID NO: 297)
12748.16124
VL		 SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGGSSYSYGWFQQKPGQAPVTVIYESNNRPSDIPERFSGSSSGTTVTLTISGVQAEDEADYYCGNADSSSGIFGSGTKVTVL (SEQ ID NO: 392)
Таблица 8: Нуклеотидные последовательности вариабельных доменов тяжелой и легкой цепей антитела против LAG-3
Ab Последовательность (5'-3')
15646 VH CAGGTGCAGCTGCAGCAGTGGGGTGCCGGTCTGCTGAAGCCTTCTGAAACTCTGTCTCTGACTTGTGCCGTCTATGGTGGATCATTCAGCGGCTACTATTGGTCCTGGATCAGGCAGCCCCCTGGCAAGGGCCTGGAGTGGATCGGCGAGATCAACCACCGGGGCTCTACCAACTACAATCCCTCTCTGAAGAGCAGGGTGACCATCTCCGTGGACACATCTAAGAATCAGTTCAGCCTGAAGCTGAGCTCCGTGACCGCCGCTGATACAGCCGTGTACTATTGCACAAGGGGGGAGGAATGGGAGTCACTGTTCTTTGATTACTGGGGGCAGGGGACACTGGTCACAGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 304)
15646 VL GAAATCGTCCTGACCCAGTCCCCCGCCACCCTGAGCCTGAGCCCCGGAGAAAGAGCCACCCTGTCCTGCCGAGCAAGCCAGTCCATCAGCTCCTATCTCGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGCCAGGCTCCCCGGCTGCTGATCTACGGCGCCTCCAACAGAGCTACAGGAATCCCAGCCCGCTTCAGCGGCTCCGGCTCTGGCACAGACTTTACCCTGACAATCTCTAGCCTGGAGCCTGAGGATTTCGCCGTGTACTATTGCCAGCAGAGATCTAATTGGCCACTGACATTCGGCGGCGGCACACGGGTGGAGATCAAG (SEQ ID NO: 305)
15532 VH CAGGTTCAGCTGCAGCAGTGGGGCGCCGGCCTGCTGAGACCAAGCGAGACCCTGTCCCTGACATGCGCCGTGTATGGCGAGAGCTTCTCCGGCTATTACTGGAACTGGATCCGGCAGCCTCCCGGCAAGGGCCTGGAGTGGATCGGCGAGATCAATCACTCCGGCTCCACCAATTACAACCCATCCCTGAAGTCTCGGGTGACAATCAGCGTGGATACAAGCAAGACCCAGTTCAGCCTGAAGCTGAGCTCCGTGACAGCTGCCGATACCGCCGTGTATTACTGCGCCAGAGGCTGGGACCTGCTGGATTGGAATGACTACTGGAATGAGTACTGGGGCCAGGGGACCCTGGTGACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 314)
15532 VL GAGATCGTGCTGACCCAGTCCCCTGCCACCCTGTCTCTGTCCCCTGGCGAGCGGGCCACCCTGTCCTGTAGAGCTTCTCAGTCCGTGTCTTCCTACCTGGCTTGGTACCAGCAGAAGCCAGGACAGGCCCCAAGACTGCTGATCTATGACGCTTCCAATCGGGCTACCGGCATCCCAGCTCGCTTTAGCGGCTCCGGCTCCGGCACCGACTTCACCCTGACAATCAGCTCCCTGGAGCCAGAGGATTTTGCCGTGTATTACTGTCAGCAGAGGTCCAATTGGCCACTGACATTTGGCGGCGGCACAAAGGTTGAGATCAAG (SEQ ID NO: 315)
15723 VH CAGGTTCAGCTGCAGCAGTGGGGCGCTGGCCTGCTGAAGCCCTCTGAGACCCTGTCTCTGACCTGTGCCGTGTATGGCGGCAGCTTCTCCGGCTATTACTGGAACTGGATCCGCCAGCCCCCCGGCAAGGGCCTGGAGTGGATCGGCGAGATCAACCACTCCGGCTCTACCAACTACAATCCTTCTCTGAAGTCCAGGGTGACAATCAGCGTGGACACCAGCAAGAACCAGTTTAGCCTGAAGCTGTCCAGCGTGACAGCTGCCGATACAGCCGTGTATTACTGCGCCAGAGGCGAGGATTGGGGCGAGAGCTTCTTTGATTACTGGGGCCAGGGGACCCTGGTGACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 324)
15723 VL GAGATCGTGCTGACCCAGTCCCCTGCCACCCTGTCTCTGTCCCCTGGCGAGCGGGCCACCCTGAGCTGTCGGGCCTCCCAGTCCGTGAGCTCCTACCTGGCTTGGTATCAGCAGAAGCCAGGACAGGCCCCAAGACTGCTGATCTACGCCGCTTCCAATCGGGCCACCGGCATCCCCGCCAGATTTTCCGGCTCTGGCTCCGGCACCGATTTCACCCTGACAATCAGCTCCCTGGAGCCAGAGGACTTCGCCGTGTACTACTGCCAGCAGAGGTCTAATTGGCCACTGACATTTGGCGGCGGCACCAAGGTTGAGATCAAG (SEQ ID NO: 325)
15595 VH CAGGTTCAGCTGGTGCAGTCCGGCGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGAGCTTCTGTGAAGGTTTCCTGTAAGGTTTCCGGCTATAGCCTGACCGAGATCTCTATGCACTGGGTACGGCAAGCCCCCGGCAAGGGCCTGGAGTGGATGGGCGGCTTTGACCCAGAGGATGGCGAGACCATCTACGCTCAGAGGTTTCAGGGGCGCGTGATCATGACCGAGGATACCAGCACCGATACCGCCTACATGGAGCTGTCCAGCCTGAGATCCGAGGATACCGCCGTGTATTACTGCGCTACTGGTGGCTGGGGCCCCAATTGGTTCGATCCTTGGGGCCAGGGGACCCTGGTGACCGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 334)
15595 VL GACATCCAGATGACACAGTCTCCTTCCTCTGTGAGCGCCTCTGTGGGCGACCGCGTGACCATCACATGCCGCGCTTCCCAGGGGATCTCTTCCTGGCTGGCTTGGTACCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAGCTGCTGATCTATGCTGCCAGCAGCCTGCAGTCCGGCGTGCCTTCCAGGTTTAGCGGCTCCGGCTCCGGCACCGACTTTACACTGACAATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGATTTTGCCACCTATTACTGTCAGCAGGCGAATTCCTTCCCTTTTACATTCGGCCCTGGCACCAAGGTTGATATCAAG (SEQ ID NO: 335)
15431 VH CAGGTTCAGCTGCAGCAGTCCGGCCCCGGCCTGGTGAAGCCAAGCCAGACCCTGTCTCTGACATGCGCCATCTCCGGCGACAGCGTGTCCTCTAACTCCGCCGCTTGGAATTGGATCCGGCAGTCTCCATCCAGAGGCCTGGAGTGGCTGGGCAGAACCTATTACCGGTCCAAGTGGTACAACGATTATGCCGTGTCCGTGAAGAGCAGAATCACCATCAACCCTGATACCAGCAAGAACCAGTTCAGCCTGCAGCTGAATTCCGTGACCCCAGAGGATACAGCCGTGTATTACTGTGCTAGGGACGATGATTGGAATGACTTCGATTACTGGGGCCAGGGGACCCTGGTGACAGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 344)
15431 VL GAGATCGTGCTGACCCAGTCCCCAGCTACACTGTCCCTGTCTCCCGGCGAGCGGGCCACCCTGAGCTGTAGAGCTTCCCAGTCCGTGTCTTCCTATCTGGCTTGGTATCAGCAGAAGCCAGGACAGGCCCCAAGGCTGCTGATCTACGACGCCTCCAATAGAGCCACCGGCATCCCAGCTAGATTTTCTGGCTCCGGCTCCGGCACCGATTTCACACTGACCATCTCTAGCCTGGAGCCAGAGGATTTTGCTGTATATTACTGCCAGCAGCGCAGCAACTGGCCCCTGACATTTGGCGGCGGCACCAAGGTTGAGATCAAG (SEQ ID NO: 345)
15572 VH CAGCTGCAGCTGCAGGAAAGCGGCCCCGGCCTGGTGAAGCCCTCTGAGACCCTGTCCCTGACATGCACCGTGAGCGGCGATTCCATCAGCTCTTCCAGCTATTACTGGGGCTGGATCCGGCAGCCCCCCGGCAAGGGCCTGGAGTGGATCGGCAGCATCTTCTACTCCGGCAATACATATTATAATCCTTCTCTGAAGAGCAGGGTGACAATCAGCGTGGATACCTCCAAGAATCAGTTTAGCCTGAAGCTGAGCTCCGTGACAGCTGCCGATACAGCCGTGTATTACTGCGCTAGGGAGGACGATTTTCTGACCGATTATTACGGCGCTTTCGACATCTGGGGCCAGGGGACAATGGTGACAGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 354)
15572 VL GATATCCAGATGACCCAGTCTCCAAGCACCCTGAGCGCCTCTGTGGGCGATCGGGTGACCATCACATGTCGGGCTTCTCAGTCCATCAGCAGCTGGCTGGCTTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCAAAGCTGCTGATCTACAAGGCCTCTTCCAGCGAGAGCGGCGTGCCATCCAGGTTTAGCGGCTCCGGCTCCGGCACCGAGTTTACCCTGACCATCTCTTCCCTGCAGCCCGATGACTTTGCCACCTACTACTGTCAGCAGTACAATTCCTATCTGACATTCGGCGGCGGCACCAAGGTTGAGATCAAG (SEQ ID NO: 355)
15011 VH GAGGTGCAGCTGCTGGAATCCGGAGGAGGACTGGTCCAGCCAGGTGGATCCCTGCGACTGAGCTGCGCCGCTTCTGGCTTCGACTTTAGAAGCTACGCAATGATGTGGGTCCGCCAGGCACCAGGAAAGGGACTGGAGTGGGTGGGAGGGATCAACGGTGAAGTCGGTGGCTCTAATACATACTATGCACCTGCCGTCAAGGGAAGGGCTACTATTAGTCGGGACAACTCAAAAAATACCCTGTATCTGCAAATGAACAGTCTGAGGGCCGAGGATACCGCCGTGTACTATTGCGTGAAAGGTGCTGGCGCATGCGGCATCTGTAATGACGATATTGATGCATGGGGACAGGGGACCCTGGTGACAGTCTCGAGT (SEQ ID NO: 364)
15011 VL AGTTATGAGCTGACTCAGGACCCAGCAGTGTCAGTCGCCCTGGGCCAGACAGTGAGAATCACTTGCAGTGGGGCTGGTTCATATGCAGGCTCCTACTATTACGGATGGCACCAGCAGAAGCCCGGACAGGCACCTGTGACAGTCATCTACGACAACGATAAAAGGCCAAGCAATATTCCCGACCGGTTCTCTGGGTCCAGCTCTGGTAACACCGCCTCCCTGACCATTACTGGGGCCCAGGCTGAGGACGAAGCTGATTATTACTGTGGCTCTACAAACGATAATGACGATGGCGGACTGTTTGGCTCCGGAACTAAGGTCACCGTCCTA (SEQ ID NO: 365)
Таблица 9: Нуклеотидные последовательности вариабельных доменов тяжелой и легкой цепей антитела против LAG-3
(CDR выделены жирным шрифтом и курсивом)
Ab Последовательность (от N-конца до C-конца)
15646 VH QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSGYYWSWIRQPPGKGLEWIGEINHRGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCTRGEEWESLFFDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 306)
15646 VL EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSISSYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPLTFGGGTRVEIK (SEQ ID NO: 307)
15532 VH QVQLQQWGAGLLRPSETLSLTCAVYGESFSGYYWNWIRQPPGKGLEWIGEINHSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKTQFSLKLSSVTAADTAVYYCARGWDLLDWNDYWNEYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 316)
15532 VL EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPLTFGGGTKVEIK (SEQ ID NO: 317)
15723 VH QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSGYYWNWIRQPPGKGLEWIGEINHSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARGEDWGESFFDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 326)
15723 VL EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYAASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPLTFGGGTKVEIK (SEQ ID NO: 327)
15595 VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKVSGYSLTEISMHWVRQAPGKGLEWMGGFDPEDGETIYAQRFQGRVIMTEDTSTDTAYMELSSLRSEDTAVYYCATGGWGPNWFDPWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 336)
15595 VL DIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQANSFPFTFGPGTKVDIK (SEQ ID NO: 337)
15431 VH QVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWNWIRQSPSRGLEWLGRTYYRSKWYNDYAVSVKSRITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVYYCARDDDWNDFDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 346)
15431 VL EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPLTFGGGTKVEIK (SEQ ID NO: 347)
15572 VH QLQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGDSISSSSYYWGWIRQPPGKGLEWIGSIFYSGNTYYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCAREDDFLTDYYGAFDIWGQGTMVTVSS (SEQ ID NO: 356)
15572 VL DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQSISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYKASSSESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYNSYLTFGGGTKVEIK (SEQ ID NO: 357)
15011 VH EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFDFRSYAMMWVRQAPGKGLEWVGGINGEVGGSNTYYAPAVKGRATISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVKGAGACGICNDDIDAWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 366)
15011 VL SYELTQDPAVSVALGQTVRITCSGAGSYAGSYYYGWHQQKPGQAPVTVIYDNDKRPSNIPDRFSGSSSGNTASLTITGAQAEDEADYYCGSTNDNDDGGLFGSGTKVTVL (SEQ ID NO: 367)
--->
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> SYMPHOGEN A/S
<120> КОМБИНИРОВАННЫЕ ЛЕКАРСТВЕННЫЕ СРЕДСТВА, НАЦЕЛЕННЫЕ
НА PD-1, TIM-3 И LAG-3
<130> 022675.WO058
<140>
<141>
<150> 62/481,973
<151> 2017-04-05
<160> 397
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 360
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной
последовательности:Синтетический полинуклеотид"
<400> 1
caggtgcagc tacagcagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcacagac cctgtccctc 60
acctgcactg tctctggtgg ctccatcagc agtggtggtt actactggag ttggacccgt 120
cagcacccag ggatgggcct ggagtggatt ggatacatct cttacagtgg gagtatctat 180
tacactccgt ccctcaagag tcgacttacc atatcagtgg acacgtctaa gaaccagttc 240
tccctgaagc tgagctctgt gactgccgcg gacacggccg tatattactg tgcgagtttg 300
gattcctggg gatctaaccg tgactactgg ggccagggaa ccctggtcac cgtctcgagt 360
<210> 2
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 2
gaaattgtgt tgacgcagtc tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agctacttag cctggtacca acagaaacct 120
ggccaggctc ccaggctcct catctatgat gcatccaaca gggccactgg catcccagcc 180
aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag cctagagcct 240
gaagattttg cagtttatta ctgtcagcag cgtagcaact ggccgctcac tttcggcgga 300
gggaccaagg tggagattaa g 321
<210> 3
<211> 120
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 3
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly
20 25 30
Gly Tyr Tyr Trp Ser Trp Thr Arg Gln His Pro Gly Met Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Ile Tyr Tyr Thr Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Ser Leu Asp Ser Trp Gly Ser Asn Arg Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 4
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 4
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 5
<211> 360
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 5
caggtgcagc tgcaggagag tggccccgga ctggtcaagc cttcacagac tctgagcctg 60
acctgcacag tgtctggcgg aagtatcagc tccgggggtt actattggag ctggacccga 120
cagcacccag gaatgggtct ggaatggatc gggtacattt catatagcgg ctccatctac 180
tatacaccct cactgaaaag caggctgacc atttccgtgg acacatctaa gaaccagttc 240
agcctgaaac tgtctagtgt gacagccgct gatactgcag tctactattg tgcctccctg 300
gactcttggg gcagtaatag agattactgg ggccagggaa ctctggtcac cgtctcgagt 360
<210> 6
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 6
gagatcgtgc tgactcagtc cccagccacc ctgtcactga gcccaggaga acgagcaacc 60
ctgtcttgca gggcctccca gtctgtcagc tcctacctgg cttggtatca gcagaagccc 120
gggcaggcac ctcgactgct gatctacgac gccagtaaca gagctaccgg tattcccgcc 180
cgcttcagtg gttcaggcag cggaacagac tttaccctga caatctctag tctggagcct 240
gaagatttcg ccgtgtacta ttgtcagcag aggtctaatt ggccactgac atttggcgga 300
gggactaagg tcgagatcaa g 321
<210> 7
<211> 120
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 7
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly
20 25 30
Gly Tyr Tyr Trp Ser Trp Thr Arg Gln His Pro Gly Met Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Ile Tyr Tyr Thr Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Ser Leu Asp Ser Trp Gly Ser Asn Arg Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 8
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 8
Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly Gly Tyr Tyr
1 5 10
<210> 9
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 9
Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Ile
1 5
<210> 10
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 10
Cys Ala Ser Leu Asp Ser Trp Gly Ser Asn Arg Asp Tyr Trp
1 5 10
<210> 11
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 11
Gln Ser Val Ser Ser Tyr
1 5
<210> 12
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 12
Asp Ala Ser
1
<210> 13
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 13
Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Leu Thr Phe
1 5 10
<210> 14
<211> 345
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 14
caggtcacct tgaaggagtg gggcgcagga ctgttgaggc cctcggagac cctgtccctc 60
acctgcgctg tctatggtgg gtccttcagt ggttactact ggagctggat ccgccagccc 120
ccagggaagg ggctggagtg gataggggaa atcaatcata gtggaagcac caactacaac 180
ccgtccctca agagtcgagt caccatatca gtagacgcga ccaagaaaca attctccctg 240
aagctgacct ctgtgaccgc cgcggacacg gctgtgtatt actgtgcgag atattgggag 300
ctccctgact actggggcca gggcaccctg gtcaccgtct cgagt 345
<210> 15
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 15
gacatccagt tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gggcattaga aatgatttag gctggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagcgcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca caatcagcag cctgcagcct 240
gaagattttg caacttatta ctgtctacag cataatagtt accctccgac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa g 321
<210> 16
<211> 115
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 16
Gln Val Thr Leu Lys Glu Trp Gly Ala Gly Leu Leu Arg Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Ala Thr Lys Lys Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Thr Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Tyr Trp Glu Leu Pro Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser
115
<210> 17
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 17
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 18
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 18
Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr Tyr
1 5
<210> 19
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 19
Ile Asn His Ser Gly Ser Thr
1 5
<210> 20
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 20
Cys Ala Arg Tyr Trp Glu Leu Pro Asp Tyr Trp
1 5 10
<210> 21
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 21
Gln Gly Ile Arg Asn Asp
1 5
<210> 22
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 22
Ala Ala Ser
1
<210> 23
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 23
Cys Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Pro Thr Phe
1 5 10
<210> 24
<211> 345
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 24
cagatgcagc tggtgcagtg gggcgcagga ctgttgaagc cttcggagac cctgtccctc 60
acctgcgctg tctatggtgg gtccttcagt ggttactact ggagctggat ccgccagccc 120
ccagggaagg ggctggagtg gattggggaa atcaatcata gtggaagcac caactacaac 180
ccgtccctca agagtcgagt caccatgtca gttgacacgt ccaagcacca gttctccctg 240
aagctgagct ctgtgaccgc cgcggacacg gctgtgtatt actgtgcgag atggtgggag 300
cttcctgact actggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cgagt 345
<210> 25
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 25
gaaattgtgt tgacgcagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gggcattaga aatgatttag gctggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagcgcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca caatcagcag cctgcagcct 240
gaagattttg caacttatta ctgtctacag cataatagtt acccgtggac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa g 321
<210> 26
<211> 115
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 26
Gln Met Gln Leu Val Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Met Ser Val Asp Thr Ser Lys His Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Trp Trp Glu Leu Pro Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser
115
<210> 27
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 27
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 28
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 28
Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr Tyr
1 5
<210> 29
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 29
Ile Asn His Ser Gly Ser Thr
1 5
<210> 30
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 30
Cys Ala Arg Trp Trp Glu Leu Pro Asp Tyr Trp
1 5 10
<210> 31
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 31
Gln Gly Ile Arg Asn Asp
1 5
<210> 32
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 32
Ala Ala Ser
1
<210> 33
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 33
Cys Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Trp Thr Phe
1 5 10
<210> 34
<211> 351
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 34
cagatgcagc tggtgcaatg gggcgcagga ctgttgaagc cttcggagac cctgtccctc 60
acctgcgctg tctatggtgg gtccttcagt ggttactact ggagctggat ccgccagccc 120
ccagggaagg ggctggagtg gattggggaa atcaatcata gtggaagcac caactacaac 180
ccgtccctca agagtcgagt caccatatca gtagacacgt ccaagaacca gttctccctg 240
aagctgagct ctgtgaccgc cgcggacacg gctgtgtatt actgtgcgag gttttactat 300
gctccgaact ttgactactg gggccagggc accctggtca ccgtctcgag t 351
<210> 35
<211> 318
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 35
gaaattgtgt tgacgcagtc tccttccacc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcacttgcc gggccagtca gagtattagt agctggttgg cctggtatca gcagaaacca 120
gggacagccc ctaagctcct gatctataag gcgtctagtt tagaaagtgg ggtcccatca 180
aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240
gatgattttg caacttatta ctgccaacag tataatagtt attccacttt cggcggaggg 300
accaaggtgg agatcaaa 318
<210> 36
<211> 117
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 36
Gln Met Gln Leu Val Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Phe Tyr Tyr Ala Pro Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 37
<211> 106
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 37
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Ser Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 38
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 38
Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr Tyr
1 5
<210> 39
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 39
Ile Asn His Ser Gly Ser Thr
1 5
<210> 40
<211> 13
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 40
Cys Ala Arg Phe Tyr Tyr Ala Pro Asn Phe Asp Tyr Trp
1 5 10
<210> 41
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 41
Gln Ser Ile Ser Ser Trp
1 5
<210> 42
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 42
Lys Ala Ser
1
<210> 43
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 43
Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Ser Thr Phe
1 5 10
<210> 44
<211> 360
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 44
caggtgcagc tgcagcagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc 60
acctgcactg tctctggtgg ctccatcagc agtagtaatt actactgggg ctggatccgc 120
cagcccccag ggaaggggct ggagtggatt gggagtatct attatagtgg gaacacctac 180
tacaacccgt ccctcaagag tcgagtcacc atatccgtag acacgtccaa gaaccagttc 240
tccctgaagc tgagttctgt gaccgccgca gacacggctg tgtattactg tgcgagacag 300
acagtggctg gccccctctt tgactactgg ggccagggaa ccctggtcac cgtctcgagt 360
<210> 45
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 45
gaaattgtga tgacgcagtc tccttccacc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcacttgcc gggccagtca gagtattagt agctggttgg cctggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaaggtcct gatctataag gcgtctagtt tagaaagtgg ggtcccatca 180
aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ctcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240
gatgattttg caacttatta ctgccaacag tataatagtt attcattcac tttcggccct 300
gggaccaaag tggatatcaa g 321
<210> 46
<211> 120
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 46
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Ser
20 25 30
Asn Tyr Tyr Trp Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Ser Ile Tyr Tyr Ser Gly Asn Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Gln Thr Val Ala Gly Pro Leu Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 47
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 47
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Val Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Leu Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Ser Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 48
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 48
Gly Gly Ser Ile Ser Ser Ser Asn Tyr Tyr
1 5 10
<210> 49
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 49
Ile Tyr Tyr Ser Gly Asn Thr
1 5
<210> 50
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 50
Cys Ala Arg Gln Thr Val Ala Gly Pro Leu Phe Asp Tyr Trp
1 5 10
<210> 51
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 51
Gln Ser Ile Ser Ser Trp
1 5
<210> 52
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 52
Lys Ala Ser
1
<210> 53
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 53
Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Ser Phe Thr Phe
1 5 10
<210> 54
<211> 375
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 54
caggtccagc tggtgcaatc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60
tcctgcaagg ctgctggata caccttaacc ggctactata tgcactgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag gccttgagtg gatgggacgg atcaacccta acagtggtgg ctcaaacaat 180
gcacagaagt ttcagggcag ggtcaccatg accagggaca cgtccatcag cacagcctac 240
atggagctga gcaggctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gagagagggt 300
cccctgtata gcagtggctg gtacgagggt gcttttgata tctggggcca agggacaatg 360
gtcaccgtct cgagt 375
<210> 55
<211> 327
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 55
gaaattgtga tgacgcagtc tccttccacc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcacttgcc gggccagtca gagtattagt agttggttgg cctggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctataag gcgtctagtt tagaaagtgg ggtcccatca 180
aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240
gatgattttg caacttatta ctgccaacag tataatagtt attctccggg gctcactttc 300
ggcggaggga ccaaggtgga gatcaag 327
<210> 56
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 56
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ala Gly Tyr Thr Leu Thr Gly Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Ser Asn Asn Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Gly Pro Leu Tyr Ser Ser Gly Trp Tyr Glu Gly Ala Phe
100 105 110
Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 57
<211> 109
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 57
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Ser Pro
85 90 95
Gly Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 58
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 58
Gly Tyr Thr Leu Thr Gly Tyr Tyr
1 5
<210> 59
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 59
Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Ser
1 5
<210> 60
<211> 20
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 60
Cys Ala Arg Glu Gly Pro Leu Tyr Ser Ser Gly Trp Tyr Glu Gly Ala
1 5 10 15
Phe Asp Ile Trp
20
<210> 61
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 61
Gln Ser Ile Ser Ser Trp
1 5
<210> 62
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 62
Lys Ala Ser
1
<210> 63
<211> 13
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 63
Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Ser Pro Gly Leu Thr Phe
1 5 10
<210> 64
<211> 372
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 64
cagatgcagc tacagcagtc aggtccagga ctggtgaagc cctcgcagac cctctcactc 60
acctgtgcca tctccgggga cagtgtctct agcaacagtg ctgcttggaa ctggatcagg 120
cagtccccat cgagaggcct tgagtggctg ggaaggacat actacaggtc caagtggtat 180
tctgcttttg cagtatctgt gaaaagtcga ataaccatca acccagacac atccaagaac 240
cagttctccc tgcagctgaa ctctgtgact cccgaggaca cggctgtgta ttactgtgca 300
agagagggta gcagtggctg gtacggatac gtccaccact ggggccaggg caccctggtc 360
accgtctcga gt 372
<210> 65
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 65
gaaattgtgt tgacgcagtc tccagcttcc ctgtctgtat ctctgggaga aactgtcacc 60
atcgaatgtc gagcaagtga ggacatttac aatggtttag catggtatca gcagaagcca 120
gggaaatctc ctcagctcct gatctataat gcaaatagct tgcatactgg ggtcccatca 180
cggttcagtg gcagtggatc tggtacacag tattctctca agataaacag cctgcaatct 240
gaagatgtcg caagttattt ctgtcaacag tattacgatt atcctccgac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa a 321
<210> 66
<211> 124
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 66
Gln Met Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Ser Ser Asn
20 25 30
Ser Ala Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Gly Arg Thr Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Ser Ala Phe Ala
50 55 60
Val Ser Val Lys Ser Arg Ile Thr Ile Asn Pro Asp Thr Ser Lys Asn
65 70 75 80
Gln Phe Ser Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Gly Ser Ser Gly Trp Tyr Gly Tyr Val His
100 105 110
His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 67
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 67
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Thr Val Thr Ile Glu Cys Arg Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Asn Gly
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asn Ala Asn Ser Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Ser Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Tyr Asp Tyr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 68
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 68
Gly Asp Ser Val Ser Ser Asn Ser Ala Ala
1 5 10
<210> 69
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 69
Thr Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Ser
1 5
<210> 70
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 70
Cys Ala Arg Glu Gly Ser Ser Gly Trp Tyr Gly Tyr Val His His Trp
1 5 10 15
<210> 71
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 71
Glu Asp Ile Tyr Asn Gly
1 5
<210> 72
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 72
Asn Ala Asn
1
<210> 73
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 73
Cys Gln Gln Tyr Tyr Asp Tyr Pro Pro Thr Phe
1 5 10
<210> 74
<211> 369
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 74
caggtgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc 60
acctgcactg tctctggtgg ctccttcagc agtagtagtt actactgggg ctggatccgc 120
cagccccctg ggaaggggct ggagtggatt gggatcttct attatagtgg gaccacctac 180
tacaacccgt ccctcaagag tcgagtcacc atatccgcac acacgtccaa gagccagttc 240
tccctgaagc tgagctctgt gaccgccgca gacacggctg tgtattactg tgcgagaggg 300
ggagaatatt ttgaccggtt actccccttt gactactggg gccagggaac cctggtcacc 360
gtctcgagt 369
<210> 75
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 75
gaaattgtga tgacgcagtc tccatccttc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcacttgcc gggccagtca gggcattagc agttatttag cctggtatca gcaaaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccactt tggaaagtgg ggtcccatca 180
aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca caatcagcag cctgcagcct 240
gaagattttg caacttatta ctgtcaacag cttaatagtt acccattcac tttcggccct 300
gggaccaaag tggatatcaa a 321
<210> 76
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 76
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Phe Ser Ser Ser
20 25 30
Ser Tyr Tyr Trp Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Ile Phe Tyr Tyr Ser Gly Thr Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Ala His Thr Ser Lys Ser Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Gly Gly Glu Tyr Phe Asp Arg Leu Leu Pro Phe Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 77
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 77
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Asn Ser Tyr Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 78
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 78
Gly Gly Ser Phe Ser Ser Ser Ser Tyr Tyr
1 5 10
<210> 79
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 79
Phe Tyr Tyr Ser Gly Thr Thr
1 5
<210> 80
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 80
Cys Ala Arg Gly Gly Glu Tyr Phe Asp Arg Leu Leu Pro Phe Asp Tyr
1 5 10 15
Trp
<210> 81
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 81
Gln Gly Ile Ser Ser Tyr
1 5
<210> 82
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 82
Ala Ala Ser
1
<210> 83
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 83
Cys Gln Gln Leu Asn Ser Tyr Pro Phe Thr Phe
1 5 10
<210> 84
<211> 351
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 84
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc cgggggggtc cctgagactc 60
tcctgtacag cctctggatt cacctttagc agctatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attggtggta gtggtggtag cacatactac 180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgt gaaagatggg 300
gcaggaggct ttgactactg gggccaggga accctggtca ccgtctcgag t 351
<210> 85
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 85
gatattgtga tgacgcagtc ttcatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gggcattata aatcatttag gctggtatca gcataaacca 120
gggaaagccc ctaatcgcct aatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca caatcagcag cctgcagcct 240
gaagattttg caacttatta ctgtctacgg cataatagtt accctccgac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa g 321
<210> 86
<211> 117
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 86
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Gly Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Lys Asp Gly Ala Gly Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 87
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 87
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Ser Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ile Asn His
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Lys Ala Pro Asn Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Arg His Asn Ser Tyr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 88
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 88
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala
1 5
<210> 89
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 89
Ile Gly Gly Ser Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 90
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 90
Cys Val Lys Asp Gly Ala Gly Gly Phe Asp Tyr Trp
1 5 10
<210> 91
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 91
Gln Gly Ile Ile Asn His
1 5
<210> 92
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 92
Ala Ala Ser
1
<210> 93
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 93
Tyr Pro Pro Thr Phe
1 5
<210> 94
<211> 366
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 94
caggtgcagc tacagcagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcacagac cctgtccctc 60
acctgcactg tctctggtgg ctccatcaac agtggtggtc actactggag ctggatccgc 120
cagcacccag ggaggggcct ggagtggatt gggtacatct attacagtgg gagcatctac 180
tacaacccgt ccctcaagag tcgacttacc atatcagtag acacgtctaa gaaccagttc 240
tccctgaagc tgagctctgt gactgccgcg gacacggccg tgtattactg tgcgagttat 300
tactatgcca gtagtggtga tgcttttgat atctggggcc aagggacaat ggtcaccgtc 360
tcgagt 366
<210> 95
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 95
gaaacgacac tcacgcagtc tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agctacttag cctggtacca acagaaacct 120
ggccaggctc ccaggctcct catctatgat gcatccaaca gggccactgg catcccagcc 180
aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag cctagagcct 240
gaagattttg cagtttatta ctgtcagcag cgtagcaact ggcctccgac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa a 321
<210> 96
<211> 122
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 96
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Asn Ser Gly
20 25 30
Gly His Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Arg Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Ile Tyr Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Ser Tyr Tyr Tyr Ala Ser Ser Gly Asp Ala Phe Asp Ile Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 97
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 97
Glu Thr Thr Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 98
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 98
Gly Gly Ser Ile Asn Ser Gly Gly His Tyr
1 5 10
<210> 99
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 99
Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Ile
1 5
<210> 100
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 100
Cys Ala Ser Tyr Tyr Tyr Ala Ser Ser Gly Asp Ala Phe Asp Ile Trp
1 5 10 15
<210> 101
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 101
Gln Ser Val Ser Ser Tyr
1 5
<210> 102
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 102
Asp Ala Ser
1
<210> 103
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 103
Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Pro Thr Phe
1 5 10
<210> 104
<211> 372
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 104
caggtgcagc tgcaggagtc tgggggaggc ttggtacagc cgggggggtc cctgagactc 60
tcctgtacag cctctggatt cacctttagt aattatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggtc gtggtggtag cacattcttc 180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagag cacgctgtat 240
ctgcaaacga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagggggc 300
ccgttgtata actggaacga cggtgatggt tttgatatct ggggccaagg gaccacggtc 360
acagtctcga gt 372
<210> 105
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 105
gaaattgtgt tgacgcagtc tccagccacc ctgtctgtgt ctccagggga aagagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agcaacttag cctggtacca gcagaaacct 120
ggccaggctc ccaggctcct catctatggt gcatccacca gggccactgg tatcccagcc 180
aggttcagtg gcactgggtc tgggacagag ttcactctca ccatcagcag cctgcagtct 240
gaagattttg cactttatta ctgtcagcag tatgataact ggcctccgtg gacgttcggc 300
caagggacca aggtggaaat caaa 324
<210> 106
<211> 124
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 106
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Ser Gly Arg Gly Gly Ser Thr Phe Phe Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Ser Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Thr Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Gly Gly Pro Leu Tyr Asn Trp Asn Asp Gly Asp Gly Phe Asp
100 105 110
Ile Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 107
<211> 108
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 107
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Thr Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Leu Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Asn Trp Pro Pro
85 90 95
Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 108
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 108
Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Ala
1 5
<210> 109
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 109
Ile Ser Gly Arg Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 110
<211> 19
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 110
Cys Ala Lys Gly Gly Pro Leu Tyr Asn Trp Asn Asp Gly Asp Gly Phe
1 5 10 15
Asp Ile Trp
<210> 111
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 111
Gln Ser Val Ser Ser Asn
1 5
<210> 112
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 112
Gly Ala Ser
1
<210> 113
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 113
Cys Gln Gln Tyr Asp Asn Trp Pro Pro Trp Thr Phe
1 5 10
<210> 114
<211> 357
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 114
caggtgcagc tgcaggagtc tgggggaggc ttggtcaagc ctggagggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt gactactaca tgacctggat ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg gatttcatac attagtggtg gtggtggttc catatactac 180
gcagactctg tgaagggccg attcaccatc tccagggaca acgccaagaa ctcactgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgttt atttctgtgc gagagggaac 300
tggggatcgg cggctcttga tatctggggc caagggacaa tggtcacggt ctcgagt 357
<210> 115
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 115
gaaattgtgt tgacgcagtc tccatcctca ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcacttgtc gggcgagtca gggcattaac aattatttag cctggtttca gcagaaacca 120
gggagagccc ctaagtccct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatcg 180
aagttcagcg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240
gaagattttg caacttatta ctgccaacag tataatagtt accctccaac tctcggccct 300
gggaccaacg tggatatcaa a 321
<210> 116
<211> 119
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 116
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Thr Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Ser Tyr Ile Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Asn Trp Gly Ser Ala Ala Leu Asp Ile Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Met Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 117
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 117
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Asn Asn Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Arg Ala Pro Lys Ser Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Lys Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Pro
85 90 95
Thr Leu Gly Pro Gly Thr Asn Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 118
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 118
Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Tyr
1 5
<210> 119
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 119
Ile Ser Tyr Ile Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ile
1 5 10
<210> 120
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 120
Cys Ala Arg Gly Asn Trp Gly Ser Ala Ala Leu Asp Ile Trp
1 5 10
<210> 121
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 121
Gln Gly Ile Asn Asn Tyr
1 5
<210> 122
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 122
Ala Ala Ser
1
<210> 123
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 123
Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Pro Thr Leu
1 5 10
<210> 124
<211> 351
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 124
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc cgggggggtc cctgagactc 60
tcctgtacag cctctggatt cacctttagc agctatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attggtggta gtggtggtag cgcatactac 180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgt gaaagatggg 300
gcaggaggct ttgactactg gggccagggc accctggtca ccgtctcgag t 351
<210> 125
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 125
gacatccagt tgacccagtc cccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gggcattaga aatcatttag gctggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagcgcct aatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca caatcagcag cctgcagcct 240
gaagattttg caacttatta ctgtctacag cataatagtt accctccgac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa g 321
<210> 126
<211> 117
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 126
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Gly Gly Ser Gly Gly Ser Ala Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Lys Asp Gly Ala Gly Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 127
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 127
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn His
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 128
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 128
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala
1 5
<210> 129
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 129
Ile Gly Gly Ser Gly Gly Ser Ala
1 5
<210> 130
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 130
Cys Val Lys Asp Gly Ala Gly Gly Phe Asp Tyr Trp
1 5 10
<210> 131
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 131
Gln Gly Ile Arg Asn His
1 5
<210> 132
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 132
Ala Ala Ser
1
<210> 133
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 133
Cys Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Pro Thr Phe
1 5 10
<210> 134
<211> 354
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 134
cagatgcagc tacagcagtc tgggggaggc ttggtacagc cgggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccgttagc agctatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120
ctagggaagg ggctggagtg ggtctcaggt attagtggta gtggtggtag cacatactac 180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa tacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaagatagtg 300
ggagctaccc actttgacta ctggggccag ggaaccctgg tcacggtctc gagt 354
<210> 135
<211> 339
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 135
gaaattgtga tgacacagtc tccagactcc ctggctgtgt ctctgggcga gagggccacc 60
atcaactgca agtccagcca gagtgtttta tacagctcca acaataagaa ctacttagct 120
tggtaccagc agaaaccagg acagcctcct aagctgctca tttactgggc atctacccgg 180
gaatccgggg tccctgaccg attcagtggc agcgggtctg ggacagattt cactctcacc 240
atcagcagcc tgcaggctga agatgtggca gtttattact gtcagcaata ttatagtggt 300
ccgatcacct tcggccaagg gacacgactg gagattaag 339
<210> 136
<211> 118
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 136
Gln Met Gln Leu Gln Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Leu Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Ile Val Gly Ala Thr His Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 137
<211> 113
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 137
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser
20 25 30
Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln
85 90 95
Tyr Tyr Ser Gly Pro Ile Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile
100 105 110
Lys
<210> 138
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 138
Gly Phe Thr Val Ser Ser Tyr Ala
1 5
<210> 139
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 139
Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 140
<211> 13
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 140
Cys Ala Lys Ile Val Gly Ala Thr His Phe Asp Tyr Trp
1 5 10
<210> 141
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 141
Gln Ser Val Leu Tyr Ser Ser Asn Asn Lys Asn Tyr
1 5 10
<210> 142
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 142
Trp Ala Ser
1
<210> 143
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 143
Cys Gln Gln Tyr Tyr Ser Gly Pro Ile Thr Phe
1 5 10
<210> 144
<211> 366
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 144
caggtgcagc tggtggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcacagac cctgtccctc 60
acctgcactg tctctggtgg ctccatcaac agtggtggtt actactggag ctggatccgc 120
cagcacccag ggaagggcct ggagtggatt gggtacatct attacagtgg gagcatctac 180
tacaacccgt ccctcaggag tcgacttacc atatcagtag acacgtctaa gaaccagttc 240
tccctgaagc tgagctctgt gactgccgcg gacacggccg tttattactg tgcgactcct 300
tattactatg gttcggggag ttatggggac tactggggcc agggcaccct ggtcactgtc 360
tcgagt 366
<210> 145
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 145
gacatccaga tgacccagtc tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gagtgttaac aactacttag cctggtacca acagaaacct 120
ggccaggctc ccaggctcct catctatgat gcatccaaca gggccactgg catcccagcc 180
aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag cctagagcct 240
gaagattttg cagtttatta ctgtcagcag cgtagcaact ggcccatcac cttcggccaa 300
gggacacgac tggagattaa a 321
<210> 146
<211> 122
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 146
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Asn Ser Gly
20 25 30
Gly Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Ile Tyr Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Arg Ser Arg Leu Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Thr Pro Tyr Tyr Tyr Gly Ser Gly Ser Tyr Gly Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 147
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 147
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Asn Asn Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Ile
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 148
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 148
Gly Gly Ser Ile Asn Ser Gly Gly Tyr Tyr
1 5 10
<210> 149
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 149
Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Ile
1 5
<210> 150
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 150
Cys Ala Thr Pro Tyr Tyr Tyr Gly Ser Gly Ser Tyr Gly Asp Tyr Trp
1 5 10 15
<210> 151
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 151
Gln Ser Val Asn Asn Tyr
1 5
<210> 152
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 152
Asp Ala Ser
1
<210> 153
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 153
Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Ile Thr Phe
1 5 10
<210> 154
<211> 363
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 154
cagatgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttctcagac cctgtccctc 60
acctgcactg tgtctggtgg ctccatcagc agtgttggtt actactggaa ctggatccgc 120
cagcacccag ggaagggcct ggagttcatt gggtacatct attacagtgg gagcatctac 180
tacaatccgt ccctcaagag tcgagttacc atatccgtag acacgtctaa gaaccagttc 240
tccctgaagc tgagctctgt gactgccgcg gacacggccc tatattactg tgcgagcgtc 300
ggtatagtgg gagcctccta ctttgagtac tggggccagg gaaccctggt cacagtctcg 360
agt 363
<210> 155
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 155
gaaattgtga tgacacagtc tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agctacttag cctggtacca acagaaacct 120
ggccaggctc ccaggctcct catctatgat gcatccaaca gggccactgg catcccagcc 180
aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag cctagagcct 240
gaagattttg cagtttatta ctgtcagcag cgtagcaact ggcctatcac cttcggccaa 300
gggacacgac tggagatcaa g 321
<210> 156
<211> 121
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 156
Gln Met Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Val
20 25 30
Gly Tyr Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Phe Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Ile Tyr Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Ser Val Gly Ile Val Gly Ala Ser Tyr Phe Glu Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 157
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 157
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Ile
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 158
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 158
Gly Gly Ser Ile Ser Ser Val Gly Tyr Tyr
1 5 10
<210> 159
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 159
Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Ile
1 5
<210> 160
<211> 15
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 160
Cys Ala Ser Val Gly Ile Val Gly Ala Ser Tyr Phe Glu Tyr Trp
1 5 10 15
<210> 161
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 161
Gln Ser Val Ser Ser Tyr
1 5
<210> 162
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 162
Asp Ala Ser
1
<210> 163
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 163
Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Ile Thr Phe
1 5 10
<210> 164
<211> 354
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 164
caggtgcagc tacagcagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttaagc agctatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcaggt attagtggta gtggtggtag cacatacaac 180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgttt 240
ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaaattttt 300
gggtcctact actttgacta ctggggccag ggaaccctgg tcacagtctc gagt 354
<210> 165
<211> 339
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 165
gaaattgtga tgacacagtc tccagactcc ctggctgtgt ctctgggcga gagggccacc 60
atcaactgca agtccagcca gagtgtttta tacagctcca acaataagaa ctacttagct 120
tggtaccagc agaaaccagg acagcctcct aagctgctca tttactggac atctacccgg 180
gaatccgggg tccctaaccg attcagtggc agcgggtctg ggacagattt cactctcacc 240
atcagcagcc tgcaggctga agatgtggca gtttattact gtcagcaata ttatagtggt 300
cctccgacgt tcggccaagg gaccaaggtg gaaatcaaa 339
<210> 166
<211> 118
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 166
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Leu Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Asn Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Ile Phe Gly Ser Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 167
<211> 113
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 167
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser
20 25 30
Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Thr Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asn Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln
85 90 95
Tyr Tyr Ser Gly Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile
100 105 110
Lys
<210> 168
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 168
Gly Phe Thr Leu Ser Ser Tyr Ala
1 5
<210> 169
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 169
Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 170
<211> 13
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 170
Cys Ala Lys Ile Phe Gly Ser Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp
1 5 10
<210> 171
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 171
Gln Ser Val Leu Tyr Ser Ser Asn Asn Lys Asn Tyr
1 5 10
<210> 172
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 172
Trp Thr Ser
1
<210> 173
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 173
Cys Gln Gln Tyr Tyr Ser Gly Pro Pro Thr Phe
1 5 10
<210> 174
<211> 354
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 174
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggttcggc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag tctctggatt cacctttagc agctatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcaggt attagtggta gtggtggtag cacatacaac 180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240
cttcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaaattttt 300
gggtcctact actttgacta ctggggccag ggaaccctgg tcaccgtctc gagt 354
<210> 175
<211> 339
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 175
gaaattgtga tgacacagtc tccagactcc ctggctgtgt ctctgggcga gagggccacc 60
atcaactgca agtccagcca gagtgtttta tacagctcca ataataagaa ctacttagct 120
tggtaccagc agaaatcagg acagcctcct aagctgctca tttactgggc atctacccgg 180
gaatccgggg tccctgaccg attcagtggc agcgggtctg ggacagattt cactctcacc 240
atcagcagcc tgcaggctga agatgtggca gtttattact gtcagcaata ttatagtggt 300
ccaccgacgt tcggccaagg gaccaaggtg gaaatcaaa 339
<210> 176
<211> 118
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 176
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Arg Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Asn Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Ile Phe Gly Ser Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 177
<211> 113
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 177
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser
20 25 30
Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Gln
35 40 45
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln
85 90 95
Tyr Tyr Ser Gly Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile
100 105 110
Lys
<210> 178
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 178
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala
1 5
<210> 179
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 179
Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 180
<211> 13
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 180
Cys Ala Lys Ile Phe Gly Ser Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp
1 5 10
<210> 181
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 181
Gln Ser Val Leu Tyr Ser Ser Asn Asn Lys Asn Tyr
1 5 10
<210> 182
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 182
Trp Ala Ser
1
<210> 183
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 183
Cys Gln Gln Tyr Tyr Ser Gly Pro Pro Thr Phe
1 5 10
<210> 184
<211> 377
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 184
acgtgacagg gcgcgcccag gtccagctgc aggagagcgg tcccggactg gtgaagccat 60
cccagacact gagcctgact tgtactgtga gcggcggtag catctccagc ggcggctact 120
attggtcctg gatcaggcag cacccaggca agggcctgga gtggatcggc tacatctact 180
atagcggctc tatctactat aacccttccc tgaagagccg ggtgaccatc tctgtggaca 240
catccaagaa tcagttctat ctgaagctgt cttccgtgac cgccgctgat acagccgtgt 300
actattgcgc ctcactgatg gtctgggggg tcatgggcga ttactggggg cagggcacac 360
tggtcacagt ctcgagt 377
<210> 185
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 185
gagattgtgc tgacccagtc tcccgccacc ctgtctctga gtcctggcga gagagccacc 60
ctgagctgca gagcctctca gtccgtgtcc agctatctgg cctggtatca gcagaagccc 120
ggccaggctc cccggctgct gatctacgat gcctccaata gagccaccgg catccctgcc 180
agattctccg gctctggctc tggcaccgac tttaccctga ccatctccag cctggaaccc 240
gaggacttcg ccgtgtacta ctgccagcag cggtccgact ggcctcctac atttggccaa 300
ggcaccaagg tggaaatcaa g 321
<210> 186
<211> 120
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 186
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly
20 25 30
Gly Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Ile Tyr Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe
65 70 75 80
Tyr Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Ser Leu Met Val Trp Gly Val Met Gly Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 187
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 187
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asp Trp Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 188
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 188
Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly Gly Tyr Tyr
1 5 10
<210> 189
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 189
Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Ile
1 5
<210> 190
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 190
Cys Ala Ser Leu Met Val Trp Gly Val Met Gly Asp Tyr Trp
1 5 10
<210> 191
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 191
Gln Ser Val Ser Ser Tyr
1 5
<210> 192
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 192
Asp Ala Ser
1
<210> 193
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 193
Cys Gln Gln Arg Ser Asp Trp Pro Pro Thr Phe
1 5 10
<210> 194
<211> 354
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 194
caggtccagc tacagcagtc tgggggaggc ttggttcatc ctggggggtc cctaagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccgttgac acctatgcca tgacctgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcaggt attagcggta gtggtggtag cacatactac 180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca actccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag agacgaggac acggccgtat attactgtgc gaagatagtg 300
ggagttaccc actttgacta ctggggccag ggcaccctgg tcacggtctc gagt 354
<210> 195
<211> 339
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 195
gaaattgtga tgacgcagtc tccagactcc ctggctgtgt ctctgggcga gagggccacc 60
atcaactgca agtccagcca gagtgtttta tacaggtcca acaataagaa ctatttagct 120
tggtaccagc agaaaccagg acagcctcct aagctgctca tttactgggc atctacccgg 180
gaatccgggg tccctgaccg attcagtggc agcgggtctg ggacagattt cactctcacc 240
atcagcagcc tgcaggctga agatgtggca gtttattact gtcagcaata ttatagtggt 300
ccgatcacct tcggccaagg gacacgactg gagattaag 339
<210> 196
<211> 118
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 196
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Asp Thr Tyr
20 25 30
Ala Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Asp Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Ile Val Gly Val Thr His Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 197
<211> 113
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 197
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Arg
20 25 30
Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln
85 90 95
Tyr Tyr Ser Gly Pro Ile Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile
100 105 110
Lys
<210> 198
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 198
Gly Phe Thr Val Asp Thr Tyr Ala
1 5
<210> 199
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 199
Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 200
<211> 13
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 200
Cys Ala Lys Ile Val Gly Val Thr His Phe Asp Tyr Trp
1 5 10
<210> 201
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 201
Gln Ser Val Leu Tyr Arg Ser Asn Asn Lys Asn Tyr
1 5 10
<210> 202
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 202
Trp Ala Ser
1
<210> 203
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 203
Cys Gln Gln Tyr Tyr Ser Gly Pro Ile Thr Phe
1 5 10
<210> 204
<211> 369
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 204
caggtcacct tgaaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcacagac cctgtccctc 60
acctgcactg tctctggtgg ctccatcagc agtggtggtc attactggag ctggatccgc 120
cagcacccag ggaagggcct ggagtggatt gggtacatct cttacagtgg gagcacctac 180
tacaacccgt ccctcaagag tcgacttacc atatcagtag acacgtctaa gaaccagttc 240
tccctgaagc tgagctctgt gactgccgcg gacacggccg tgtattactg tgcgaccgcg 300
tattacgata ttttgactgg ttaccctttt gactactggg gccagggaac cctggtcacg 360
gtctcgagt 369
<210> 205
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 205
gaaattgtga tgacacagtc tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agctacttag cctggtacca acagaaacct 120
ggccaggctc ccaggctcct catctatgat gcatccgaca gggccactgg catcccagcc 180
aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag cctagagcct 240
gaagattttg cagtttatta ctgtcagcag cgtagcaact ggccgatcac cttcggccaa 300
gggacacgac tggagatcaa g 321
<210> 206
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 206
Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly
20 25 30
Gly His Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Thr Ala Tyr Tyr Asp Ile Leu Thr Gly Tyr Pro Phe Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 207
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 207
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asp Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Ile
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 208
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 208
Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly Gly His Tyr
1 5 10
<210> 209
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 209
Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr
1 5
<210> 210
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 210
Cys Ala Thr Ala Tyr Tyr Asp Ile Leu Thr Gly Tyr Pro Phe Asp Tyr
1 5 10 15
Trp
<210> 211
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 211
Gln Ser Val Ser Ser Tyr
1 5
<210> 212
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 212
Asp Ala Ser
1
<210> 213
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 213
Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Ile Thr Phe
1 5 10
<210> 214
<211> 369
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 214
caggtgcagc tacagcagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcacagac cctgtccctc 60
acctgcactg tctctggtgg ctccatcagc agtggtggtt actactggag ctggatccgc 120
cagcacccag ggaagggcct ggagtggatt gggtacatct cttatagtgg gagtatctac 180
tacaacccgt ccctcaagag tcgagttacc atatcagtag acacgtctaa gaaccagttc 240
tccctgaagc tgagctctgt gactgccacg gacacggccg tgtattactg tgcgaccgcg 300
tattacgatc ttttgactgg ttaccctttt gactactggg gccagggaac cctggtcacg 360
gtctcgagt 369
<210> 215
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 215
gaaattgtga tgacgcagtc tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agctacttag cctggtacca acagaaacct 120
ggccaggctc ccaggctcct catctatgat gcatccaaca gggccactgg catcccagcc 180
aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag cctagagcct 240
gaagattttg cagtttatta ctgtcagcag cgtagcaact ggccgatcac cttcggccaa 300
gggacacgac tggagattaa g 321
<210> 216
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 216
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly
20 25 30
Gly Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Ile Tyr Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Thr Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Thr Ala Tyr Tyr Asp Leu Leu Thr Gly Tyr Pro Phe Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 217
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 217
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Ile
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 218
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 218
Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly Gly Tyr Tyr
1 5 10
<210> 219
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 219
Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Ile
1 5
<210> 220
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 220
Cys Ala Thr Ala Tyr Tyr Asp Leu Leu Thr Gly Tyr Pro Phe Asp Tyr
1 5 10 15
Trp
<210> 221
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 221
Gln Ser Val Ser Ser Tyr
1 5
<210> 222
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 222
Asp Ala Ser
1
<210> 223
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 223
Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Ile Thr Phe
1 5 10
<210> 224
<211> 379
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 224
ggcgcgccga ggtgcagctg ctggaatctg gaggaggact ggtccagcca ggtggatccc 60
tgcgactgag ctgcgccgct tctggattca cctttacaag atacgacatg gtgtgggtcc 120
gccaggcacc aggaaaggga ctggagtggg tggctggtat cggcgatagt aacaagatga 180
cccgctacgc acctgccgtc aaagggaggg caacaattag tcgggacaac tcaaagaata 240
ctctgtatct gcagatgaat tccctgcgag ctgaggatac agcagtgtac tattgtgcca 300
aaggtagctg catcgcctgt tgggacgaag ctggccgtat tgatgcatgg ggacagggga 360
ctctggtgac cgtctcgag 379
<210> 225
<211> 351
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 225
gctagcctct tacgagctga ctcaggaccc tgcagtgagt gtcgccctgg gccagacagt 60
gagaatcact tgctccggcg gagggagcta cgatggttcc agctactatg gctggtatca 120
gcagaagcca ggacaggcac ctgtgaccgt catctataac aataacaata ggccatctga 180
cattcccgat cggttcagtg gatctagttc agggaacaca gcttctctga ccattacagg 240
agcccaggct gaggacgaag cagattacta ttgtgggtca tacgacaggc cagaaacaaa 300
ttccgattat gtgggaatgt ttggtagcgg cactaaagtc accgtcctag g 351
<210> 226
<211> 124
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 226
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Arg Tyr
20 25 30
Asp Met Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Asp Ser Asn Lys Met Thr Arg Tyr Ala Pro Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Ala Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Gly Ser Cys Ile Ala Cys Trp Asp Glu Ala Gly Arg Ile Asp
100 105 110
Ala Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 227
<211> 114
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 227
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Ser Gly Gly Gly Ser Tyr Asp Gly Ser Ser
20 25 30
Tyr Tyr Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Thr Val
35 40 45
Ile Tyr Asn Asn Asn Asn Arg Pro Ser Asp Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln
65 70 75 80
Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Ser Tyr Asp Arg Pro Glu
85 90 95
Thr Asn Ser Asp Tyr Val Gly Met Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Thr
100 105 110
Val Leu
<210> 228
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 228
Gly Phe Thr Phe Thr Arg Tyr Asp
1 5
<210> 229
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 229
Ile Gly Asp Ser Asn Lys Met Thr
1 5
<210> 230
<211> 19
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 230
Cys Ala Lys Gly Ser Cys Ile Ala Cys Trp Asp Glu Ala Gly Arg Ile
1 5 10 15
Asp Ala Trp
<210> 231
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 231
Gly Ser Tyr Asp Gly Ser Ser Tyr
1 5
<210> 232
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 232
Asn Asn Asn
1
<210> 233
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 233
Cys Gly Ser Tyr Asp Arg Pro Glu Thr Asn Ser Asp Tyr Val Gly Met
1 5 10 15
Phe
<210> 234
<211> 400
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 234
ggcgcgccga ggtgcagctg ctggaaagcg gaggaggact ggtccagcca ggtggatctc 60
tgcgactgag ttgcgccgct tcaggcttca cattttctga ctacgccatg aactgggtga 120
ggcaggctcc tggcaaggga ctggagtggg tcgcaggaat cgggaacgat ggaagttaca 180
ctaattatgg agcagccgtg aaggggagag ctactatttc ccgcgacaac agcaaaaata 240
ccctgtacct gcagatgaac tcactgagag ctgaagatac cgcagtgtac tattgtgcct 300
ctgacatcag gagtcggaat gattgctcct atttcctggg agggtgttcc agcggcttta 360
ttgacgtgtg gggtcagggc accctggtca cagtctcgag 400
<210> 235
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 235
gctagcctct tacgagctga cccaggaccc agcagtgtcc gtcgccctgg gccagacagt 60
gagaatcact tgctccggcg gatccagcta cagctatggg tggttccagc agaagcccgg 120
tcaggcccct gtgaccgtca tctatgaaag taacaatagg ccatcagaca ttcccgatcg 180
gttttctggc tctagttcag gaaacacagc tagtctgacc atcacagggg cccaggctga 240
ggacgaagct gattactatt gtggcaatgc agattccagc tctggaattt tcgggtccgg 300
tactaaagtc accgtcctag g 321
<210> 236
<211> 131
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 236
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Asn Asp Gly Ser Tyr Thr Asn Tyr Gly Ala Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Ala Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ser Asp Ile Arg Ser Arg Asn Asp Cys Ser Tyr Phe Leu Gly Gly
100 105 110
Cys Ser Ser Gly Phe Ile Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
115 120 125
Val Ser Ser
130
<210> 237
<211> 104
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 237
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Ser Gly Gly Ser Ser Tyr Ser Tyr Gly Trp
20 25 30
Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Thr Val Ile Tyr Glu Ser
35 40 45
Asn Asn Arg Pro Ser Asp Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser
50 55 60
Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu Asp Glu
65 70 75 80
Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Asn Ala Asp Ser Ser Ser Gly Ile Phe Gly
85 90 95
Ser Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100
<210> 238
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 238
Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Ala
1 5
<210> 239
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 239
Ile Gly Asn Asp Gly Ser Tyr Thr
1 5
<210> 240
<211> 26
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 240
Cys Ala Ser Asp Ile Arg Ser Arg Asn Asp Cys Ser Tyr Phe Leu Gly
1 5 10 15
Gly Cys Ser Ser Gly Phe Ile Asp Val Trp
20 25
<210> 241
<211> 4
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 241
Ser Ser Tyr Ser
1
<210> 242
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 242
Glu Ser Asn
1
<210> 243
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 243
Cys Gly Asn Ala Asp Ser Ser Ser Gly Ile Phe
1 5 10
<210> 244
<211> 385
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 244
ggcgcgccga ggtgcagctg ctggaatccg gaggaggact ggtccagcca ggtggatccc 60
tgcgactgag ctgcgccgct tctggattcg actttagcga tcacgggatg cagtgggtga 120
gacaggcacc aggcaaggga ctggagtacg tgggtgtcat cgacaccaca ggccgctata 180
catactatgc acctgccgtc aagggcaggg ctaccattag tcgggacaac tcaaaaaata 240
cactgtacct gcagatgaac tctctgaggg ctgaagatac tgcagtgtac tattgcgcca 300
aaactacctg cgtgggaggg tacctgtgca ataccgtcgg aagtatcgat gcttggggac 360
aggggacact ggtgactgtc tcgag 385
<210> 245
<211> 330
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 245
gctagcctcc tacgagctga ctcaggaccc agcagtgagc gtcgccctgg gccagacagt 60
gagaatcact tgctctggcg gagggtccag ctcttactat ggttggtacc agcagaagcc 120
cggccaggct cctgtgaccg tcatctatga cgatacaaac aggccaagtg gaattcccga 180
tcggttctca ggtagttcat ccggcaatac agcttctctg accatcacag gggcccaggc 240
tgaggacgaa gcagattact attgtggtgg ctatgaagga agctctcacg ccgggatttt 300
tggaagtggg actaaagtca ccgtcctagg 330
<210> 246
<211> 126
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 246
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asp Phe Ser Asp His
20 25 30
Gly Met Gln Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Val
35 40 45
Gly Val Ile Asp Thr Thr Gly Arg Tyr Thr Tyr Tyr Ala Pro Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Ala Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Thr Thr Cys Val Gly Gly Tyr Leu Cys Asn Thr Val Gly Ser
100 105 110
Ile Asp Ala Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 247
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 247
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Ser Gly Gly Gly Ser Ser Ser Tyr Tyr Gly
20 25 30
Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Thr Val Ile Tyr Asp
35 40 45
Asp Thr Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser
50 55 60
Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu Asp
65 70 75 80
Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Gly Tyr Glu Gly Ser Ser His Ala Gly
85 90 95
Ile Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105
<210> 248
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 248
Gly Phe Asp Phe Ser Asp His Gly
1 5
<210> 249
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 249
Ile Asp Thr Thr Gly Arg Tyr Thr
1 5
<210> 250
<211> 21
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 250
Cys Ala Lys Thr Thr Cys Val Gly Gly Tyr Leu Cys Asn Thr Val Gly
1 5 10 15
Ser Ile Asp Ala Trp
20
<210> 251
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 251
Gly Ser Ser Ser Tyr
1 5
<210> 252
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 252
Asp Asp Thr
1
<210> 253
<211> 13
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 253
Cys Gly Gly Tyr Glu Gly Ser Ser His Ala Gly Ile Phe
1 5 10
<210> 254
<211> 376
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 254
ggcgcgccga ggtgcagctg ctggaaagtg gaggaggact ggtccagcca ggtggaagcc 60
tgagactgtc ttgcgccgct agtggcttcg acttttccag ctacaccatg cagtgggtga 120
ggcaggcacc aggcaaggga ctggagtggg tgggcgtcat ctctagtact ggagggtcta 180
ccggatacgg gcctgctgtg aagggaaggg caacaatttc acgggataac tccaaaaata 240
ctctgtatct gcagatgaac agcctgaggg cagaagacac agccgtgtac tattgcgtga 300
aatcaatctc cggagatgcc tggtctgtgg acgggctgga tgcttggggt cagggcaccc 360
tggtcacagt ctcgag 376
<210> 255
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 255
gctagcctca tacgagctga cccaggaccc agcagtgtcc gtcgccctgg gacagacagt 60
gagaatcact tgctccggag gaggatccgc ctacggttgg tatcagcaga agcccggcca 120
ggcacctgtg accgtcatct actataacaa tcagaggcca tctggcattc ccgaccggtt 180
cagtggatcc agctctggga acacagcaag tctgaccatc acaggcgccc aggctgagga 240
cgaagccgat tactattgtg gaagctatga tagttcagct gtggggattt ttggttctgg 300
cactaaagtc accgtcctag g 321
<210> 256
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 256
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asp Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Thr Met Gln Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Val Ile Ser Ser Thr Gly Gly Ser Thr Gly Tyr Gly Pro Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Ala Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Lys Ser Ile Ser Gly Asp Ala Trp Ser Val Asp Gly Leu Asp Ala
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 257
<211> 104
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 257
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Ser Gly Gly Gly Ser Ala Tyr Gly Trp Tyr
20 25 30
Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Thr Val Ile Tyr Tyr Asn Asn
35 40 45
Gln Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser Gly
50 55 60
Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu Asp Glu Ala
65 70 75 80
Asp Tyr Tyr Cys Gly Ser Tyr Asp Ser Ser Ala Val Gly Ile Phe Gly
85 90 95
Ser Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100
<210> 258
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 258
Gly Phe Asp Phe Ser Ser Tyr Thr
1 5
<210> 259
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 259
Ile Ser Ser Thr Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 260
<211> 18
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 260
Cys Val Lys Ser Ile Ser Gly Asp Ala Trp Ser Val Asp Gly Leu Asp
1 5 10 15
Ala Trp
<210> 261
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 261
Gly Ser Ala
1
<210> 262
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 262
Tyr Asn Asn
1
<210> 263
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 263
Cys Gly Ser Tyr Asp Ser Ser Ala Val Gly Ile Phe
1 5 10
<210> 264
<211> 376
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 264
ggcgcgccga ggtgcagctg ctggaaagtg gaggaggact ggtccagcca ggtggaagcc 60
tgagactgtc ttgcgccgct agtggcttcg acttttccag ctacaccatg cagtgggtga 120
ggcaggcacc aggcaaggga ctggagtggg tgggcgtcat ctctagtact ggagggtcta 180
ccggatacgg gcctgctgtg aagggaaggg caacaatttc acgggataac tccaaaaata 240
ctctgtatct gcagatgaac agcctgaggg cagaagacac agccgtgtac tattgcgtga 300
aatcagtctc cggagatgcc tggtctgtgg acgggctgga tgcttggggt cagggcaccc 360
tggtcacagt ctcgag 376
<210> 265
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 265
gctagcctca tacgagctga cccaggaccc agcagtgtcc gtcgccctgg gccagacagt 60
gagaatcact tgctccggag gaggatccgc ctacggttgg tatcagcaga agcccggcca 120
ggcacctgtg accgtcatct actataacaa tcagaggcca tctgacattc ccgatcggtt 180
cagtggatcc agctctggga acacagcaag tctgaccatc acaggcgccc aggctgagga 240
cgaagccgat tactattgtg gaagctatga tagttcagct gtggggattt ttggttctgg 300
cactaaagtc accgtcctag g 321
<210> 266
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 266
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asp Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Thr Met Gln Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Val Ile Ser Ser Thr Gly Gly Ser Thr Gly Tyr Gly Pro Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Ala Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Lys Ser Val Ser Gly Asp Ala Trp Ser Val Asp Gly Leu Asp Ala
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 267
<211> 104
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 267
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Ser Gly Gly Gly Ser Ala Tyr Gly Trp Tyr
20 25 30
Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Thr Val Ile Tyr Tyr Asn Asn
35 40 45
Gln Arg Pro Ser Asp Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser Gly
50 55 60
Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu Asp Glu Ala
65 70 75 80
Asp Tyr Tyr Cys Gly Ser Tyr Asp Ser Ser Ala Val Gly Ile Phe Gly
85 90 95
Ser Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100
<210> 268
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 268
Gly Phe Asp Phe Ser Ser Tyr Thr
1 5
<210> 269
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 269
Ile Ser Ser Thr Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 270
<211> 18
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 270
Cys Val Lys Ser Val Ser Gly Asp Ala Trp Ser Val Asp Gly Leu Asp
1 5 10 15
Ala Trp
<210> 271
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 271
Gly Ser Ala
1
<210> 272
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 272
Tyr Asn Asn
1
<210> 273
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 273
Cys Gly Ser Tyr Asp Ser Ser Ala Val Gly Ile Phe
1 5 10
<210> 274
<211> 385
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 274
ggcgcgccga ggtgcagctg ctggaatccg gaggaggact ggtccagcca ggtggaagcc 60
tgcgactgtc ttgcgccgct agtggattcg acttttccag ctacggaatg cagtgggtga 120
ggcaggcacc aggcaaggga ctggagtggg tgggcgtcat ctctggaagt gggattacca 180
cactgtacgc acctgccgtc aagggaaggg ctactatctc acgggacaac tctaaaaata 240
cagtgtatct gcagatgaac tccctgagag ctgaagatac cgcagtctac tattgtacac 300
gctcaccctc catcacagac ggctggactt atggaggggc ctggattgat gcttggggtc 360
agggcactct ggtgaccgtc tcgag 385
<210> 275
<211> 318
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 275
gctagccagc tacgagctga cccaggaccc agcagtgtcc gtcgccctgg gccagacagt 60
gagaatcact tgcagtggcg gagatgggtc atacggttgg ttccagcaga agcccggaca 120
ggcccctgtg accgtcatct atgacaacga taataggcca tctgacattc ccgatcggtt 180
tagtggctcc agctctggaa acacagcttc tctgaccatc acaggggccc aggctgagga 240
cgaagctgat tactattgtg gcaatgcaga cctgtccggg ggtattttcg gcagcggaac 300
taaagtcacc gtcctagg 318
<210> 276
<211> 126
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 276
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asp Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met Gln Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Val Ile Ser Gly Ser Gly Ile Thr Thr Leu Tyr Ala Pro Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Ala Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Ser Pro Ser Ile Thr Asp Gly Trp Thr Tyr Gly Gly Ala Trp
100 105 110
Ile Asp Ala Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 277
<211> 103
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 277
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Ser Gly Gly Asp Gly Ser Tyr Gly Trp Phe
20 25 30
Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Thr Val Ile Tyr Asp Asn Asp
35 40 45
Asn Arg Pro Ser Asp Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser Gly
50 55 60
Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu Asp Glu Ala
65 70 75 80
Asp Tyr Tyr Cys Gly Asn Ala Asp Leu Ser Gly Gly Ile Phe Gly Ser
85 90 95
Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100
<210> 278
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 278
Gly Phe Asp Phe Ser Ser Tyr Gly
1 5
<210> 279
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 279
Ile Ser Gly Ser Gly Ile Thr Thr
1 5
<210> 280
<211> 21
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 280
Cys Thr Arg Ser Pro Ser Ile Thr Asp Gly Trp Thr Tyr Gly Gly Ala
1 5 10 15
Trp Ile Asp Ala Trp
20
<210> 281
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 281
Asp Gly Ser
1
<210> 282
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 282
Asp Asn Asp
1
<210> 283
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 283
Cys Gly Asn Ala Asp Leu Ser Gly Gly Ile Phe
1 5 10
<210> 284
<211> 388
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 284
ggcgcgccga ggtgcagctg ctggaatctg gaggaggact ggtccagcca ggtggatccc 60
tgagactgag ctgcgccgct tctggattca cctttagtac attcaacatg gtgtgggtca 120
ggcaggcacc tggaaaggga ctggagtacg tggctgaaat ctccagcgac ggctctttta 180
catggtatgc aactgccgtc aagggcaggg ccaccattag tcgggataac tcaaaaaata 240
cagtgtacct gcagatgaat tccctgaggg ctgaggacac cgcagtctac tattgcgcaa 300
aatccgattg ttctagttca tactatggat atagctgtat cgggatcatt gacgcttggg 360
gtcagggcac tctggtgacc gtctcgag 388
<210> 285
<211> 339
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 285
gctagcctcc tatgagctga cccaggaccc agcagtgagc gtcgccctgg gccagacagt 60
gagaatcact tgctccggcg gaattagcga cgatggctct tactattacg gatggttcca 120
gcagaagccc ggacaggccc ctgtgaccgt catctatatt aacgacaggc ggccaagtaa 180
tatccccgat aggttttcag ggtccagctc tggtaacaca gcttctctga ccattacagg 240
ggcccaggct gaggacgaag ctgattatta ctgtggctct tacgatagtt cagcaggggt 300
gggtatcttc ggcagtggaa ctaaagtcac cgtcctagg 339
<210> 286
<211> 127
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 286
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Phe
20 25 30
Asn Met Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Val
35 40 45
Ala Glu Ile Ser Ser Asp Gly Ser Phe Thr Trp Tyr Ala Thr Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Ala Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Ser Asp Cys Ser Ser Ser Tyr Tyr Gly Tyr Ser Cys Ile Gly
100 105 110
Ile Ile Asp Ala Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 287
<211> 110
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 287
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Ser Gly Gly Ile Ser Asp Asp Gly Ser Tyr
20 25 30
Tyr Tyr Gly Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Thr Val
35 40 45
Ile Tyr Ile Asn Asp Arg Arg Pro Ser Asn Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln
65 70 75 80
Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Ser Tyr Asp Ser Ser Ala
85 90 95
Gly Val Gly Ile Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105 110
<210> 288
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 288
Gly Phe Thr Phe Ser Thr Phe Asn
1 5
<210> 289
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 289
Ile Ser Ser Asp Gly Ser Phe Thr
1 5
<210> 290
<211> 22
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 290
Cys Ala Lys Ser Asp Cys Ser Ser Ser Tyr Tyr Gly Tyr Ser Cys Ile
1 5 10 15
Gly Ile Ile Asp Ala Trp
20
<210> 291
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 291
Ile Ser Asp Asp Gly Ser Tyr Tyr
1 5
<210> 292
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 292
Ile Asn Asp
1
<210> 293
<211> 13
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 293
Cys Gly Ser Tyr Asp Ser Ser Ala Gly Val Gly Ile Phe
1 5 10
<210> 294
<211> 400
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 294
ggcgcgccga ggtgcagctg ctggaaagtg gaggaggact ggtccagcca ggtggatcac 60
tgagactgtc ctgcgccgcc tccggcttca ccttttccag ctacaacatg ttctgggtgc 120
gccaggcacc aggaaaggga ctggagtttg tcgctgaaat ctctggtagt aatactggaa 180
gccgaacctg gtacgcacct gccgtgaagg gcagggctac aatttctcgg gacaacagta 240
aaaatactct gtatctgcag atgaactctc tgagggctga ggatacagca gtgtactatt 300
gtgcaaaatc aatctacgga gggtattgcg ccggtggcta ttcctgtggt gtgggcctga 360
ttgacgcatg gggacagggg accctggtca cagtctcgag 400
<210> 295
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 295
gctagcctca tacgagctga cccaggaccc agcagtgtcc gtcgccctgg gccagacagt 60
gagaatcact tgcagtggcg gatccagcga ttactatggg tggttccagc agaagcccgg 120
tcaggcccct gtgaccgtca tctactataa caacaagagg ccatctgaca ttcccgatcg 180
gtttagtggc tctagttcag gaaacacagc ctccctgacc attacagggg cccaggctga 240
ggacgaagct gattactatt gtggcaatgc agactccagc gtgggagtct tcgggtctgg 300
tactaaggtg accgtcctag g 321
<210> 296
<211> 131
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 296
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Asn Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val
35 40 45
Ala Glu Ile Ser Gly Ser Asn Thr Gly Ser Arg Thr Trp Tyr Ala Pro
50 55 60
Ala Val Lys Gly Arg Ala Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr
65 70 75 80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Ala Lys Ser Ile Tyr Gly Gly Tyr Cys Ala Gly Gly Tyr Ser
100 105 110
Cys Gly Val Gly Leu Ile Asp Ala Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
115 120 125
Val Ser Ser
130
<210> 297
<211> 104
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 297
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Ser Gly Gly Ser Ser Asp Tyr Tyr Gly Trp
20 25 30
Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Thr Val Ile Tyr Tyr Asn
35 40 45
Asn Lys Arg Pro Ser Asp Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser
50 55 60
Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu Asp Glu
65 70 75 80
Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Asn Ala Asp Ser Ser Val Gly Val Phe Gly
85 90 95
Ser Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100
<210> 298
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 298
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Asn
1 5
<210> 299
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 299
Ile Ser Gly Ser Asn Thr Gly Ser Arg Thr
1 5 10
<210> 300
<211> 24
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 300
Cys Ala Lys Ser Ile Tyr Gly Gly Tyr Cys Ala Gly Gly Tyr Ser Cys
1 5 10 15
Gly Val Gly Leu Ile Asp Ala Trp
20
<210> 301
<211> 4
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 301
Ser Ser Asp Tyr
1
<210> 302
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 302
Tyr Asn Asn
1
<210> 303
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 303
Cys Gly Asn Ala Asp Ser Ser Val Gly Val Phe
1 5 10
<210> 304
<211> 357
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 304
caggtgcagc tgcagcagtg gggtgccggt ctgctgaagc cttctgaaac tctgtctctg 60
acttgtgccg tctatggtgg atcattcagc ggctactatt ggtcctggat caggcagccc 120
cctggcaagg gcctggagtg gatcggcgag atcaaccacc ggggctctac caactacaat 180
ccctctctga agagcagggt gaccatctcc gtggacacat ctaagaatca gttcagcctg 240
aagctgagct ccgtgaccgc cgctgataca gccgtgtact attgcacaag gggggaggaa 300
tgggagtcac tgttctttga ttactggggg caggggacac tggtcacagt ctcgagt 357
<210> 305
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 305
gaaatcgtcc tgacccagtc ccccgccacc ctgagcctga gccccggaga aagagccacc 60
ctgtcctgcc gagcaagcca gtccatcagc tcctatctcg cctggtatca gcagaaacca 120
ggccaggctc cccggctgct gatctacggc gcctccaaca gagctacagg aatcccagcc 180
cgcttcagcg gctccggctc tggcacagac tttaccctga caatctctag cctggagcct 240
gaggatttcg ccgtgtacta ttgccagcag agatctaatt ggccactgac attcggcggc 300
ggcacacggg tggagatcaa g 321
<210> 306
<211> 119
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 306
Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn His Arg Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Thr
85 90 95
Arg Gly Glu Glu Trp Glu Ser Leu Phe Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 307
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 307
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Arg Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 308
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 308
Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr Tyr
1 5
<210> 309
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 309
Ile Asn His Arg Gly Ser Thr
1 5
<210> 310
<211> 15
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 310
Cys Thr Arg Gly Glu Glu Trp Glu Ser Leu Phe Phe Asp Tyr Trp
1 5 10 15
<210> 311
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 311
Gln Ser Ile Ser Ser Tyr
1 5
<210> 312
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 312
Gly Ala Ser
1
<210> 313
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 313
Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Leu Thr Phe
1 5 10
<210> 314
<211> 366
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 314
caggttcagc tgcagcagtg gggcgccggc ctgctgagac caagcgagac cctgtccctg 60
acatgcgccg tgtatggcga gagcttctcc ggctattact ggaactggat ccggcagcct 120
cccggcaagg gcctggagtg gatcggcgag atcaatcact ccggctccac caattacaac 180
ccatccctga agtctcgggt gacaatcagc gtggatacaa gcaagaccca gttcagcctg 240
aagctgagct ccgtgacagc tgccgatacc gccgtgtatt actgcgccag aggctgggac 300
ctgctggatt ggaatgacta ctggaatgag tactggggcc aggggaccct ggtgaccgtc 360
tcgagt 366
<210> 315
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 315
gagatcgtgc tgacccagtc ccctgccacc ctgtctctgt cccctggcga gcgggccacc 60
ctgtcctgta gagcttctca gtccgtgtct tcctacctgg cttggtacca gcagaagcca 120
ggacaggccc caagactgct gatctatgac gcttccaatc gggctaccgg catcccagct 180
cgctttagcg gctccggctc cggcaccgac ttcaccctga caatcagctc cctggagcca 240
gaggattttg ccgtgtatta ctgtcagcag aggtccaatt ggccactgac atttggcggc 300
ggcacaaagg ttgagatcaa g 321
<210> 316
<211> 122
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 316
Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Arg Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Glu Ser Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Thr Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Gly Trp Asp Leu Leu Asp Trp Asn Asp Tyr Trp Asn Glu Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 317
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 317
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 318
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 318
Gly Glu Ser Phe Ser Gly Tyr Tyr
1 5
<210> 319
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 319
Ile Asn His Ser Gly Ser Thr
1 5
<210> 320
<211> 18
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 320
Cys Ala Arg Gly Trp Asp Leu Leu Asp Trp Asn Asp Tyr Trp Asn Glu
1 5 10 15
Tyr Trp
<210> 321
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 321
Gln Ser Val Ser Ser Tyr
1 5
<210> 322
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 322
Asp Ala Ser
1
<210> 323
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 323
Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Leu Thr Phe
1 5 10
<210> 324
<211> 357
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 324
caggttcagc tgcagcagtg gggcgctggc ctgctgaagc cctctgagac cctgtctctg 60
acctgtgccg tgtatggcgg cagcttctcc ggctattact ggaactggat ccgccagccc 120
cccggcaagg gcctggagtg gatcggcgag atcaaccact ccggctctac caactacaat 180
ccttctctga agtccagggt gacaatcagc gtggacacca gcaagaacca gtttagcctg 240
aagctgtcca gcgtgacagc tgccgataca gccgtgtatt actgcgccag aggcgaggat 300
tggggcgaga gcttctttga ttactggggc caggggaccc tggtgaccgt ctcgagt 357
<210> 325
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 325
gagatcgtgc tgacccagtc ccctgccacc ctgtctctgt cccctggcga gcgggccacc 60
ctgagctgtc gggcctccca gtccgtgagc tcctacctgg cttggtatca gcagaagcca 120
ggacaggccc caagactgct gatctacgcc gcttccaatc gggccaccgg catccccgcc 180
agattttccg gctctggctc cggcaccgat ttcaccctga caatcagctc cctggagcca 240
gaggacttcg ccgtgtacta ctgccagcag aggtctaatt ggccactgac atttggcggc 300
ggcaccaagg ttgagatcaa g 321
<210> 326
<211> 119
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 326
Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Gly Glu Asp Trp Gly Glu Ser Phe Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 327
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 327
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 328
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 328
Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr Tyr
1 5
<210> 329
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 329
Ile Asn His Ser Gly Ser Thr
1 5
<210> 330
<211> 15
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 330
Cys Ala Arg Gly Glu Asp Trp Gly Glu Ser Phe Phe Asp Tyr Trp
1 5 10 15
<210> 331
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 331
Gln Ser Val Ser Ser Tyr
1 5
<210> 332
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 332
Ala Ala Ser
1
<210> 333
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 333
Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Leu Thr Phe
1 5 10
<210> 334
<211> 357
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 334
caggttcagc tggtgcagtc cggcgctgag gtgaagaagc ctggagcttc tgtgaaggtt 60
tcctgtaagg tttccggcta tagcctgacc gagatctcta tgcactgggt acggcaagcc 120
cccggcaagg gcctggagtg gatgggcggc tttgacccag aggatggcga gaccatctac 180
gctcagaggt ttcaggggcg cgtgatcatg accgaggata ccagcaccga taccgcctac 240
atggagctgt ccagcctgag atccgaggat accgccgtgt attactgcgc tactggtggc 300
tggggcccca attggttcga tccttggggc caggggaccc tggtgaccgt ctcgagt 357
<210> 335
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 335
gacatccaga tgacacagtc tccttcctct gtgagcgcct ctgtgggcga ccgcgtgacc 60
atcacatgcc gcgcttccca ggggatctct tcctggctgg cttggtacca gcagaagccc 120
ggcaaggccc ccaagctgct gatctatgct gccagcagcc tgcagtccgg cgtgccttcc 180
aggtttagcg gctccggctc cggcaccgac tttacactga caatcagctc cctgcagccc 240
gaggattttg ccacctatta ctgtcagcag gcgaattcct tcccttttac attcggccct 300
ggcaccaagg ttgatatcaa g 321
<210> 336
<211> 119
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 336
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Ser Leu Thr Glu Ile
20 25 30
Ser Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Phe Asp Pro Glu Asp Gly Glu Thr Ile Tyr Ala Gln Arg Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Ile Met Thr Glu Asp Thr Ser Thr Asp Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Thr Gly Gly Trp Gly Pro Asn Trp Phe Asp Pro Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 337
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 337
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 338
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 338
Gly Tyr Ser Leu Thr Glu Ile Ser
1 5
<210> 339
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 339
Phe Asp Pro Glu Asp Gly Glu Thr
1 5
<210> 340
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 340
Cys Ala Thr Gly Gly Trp Gly Pro Asn Trp Phe Asp Pro Trp
1 5 10
<210> 341
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 341
Gln Gly Ile Ser Ser Trp
1 5
<210> 342
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 342
Ala Ala Ser
1
<210> 343
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 343
Cys Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro Phe Thr Phe
1 5 10
<210> 344
<211> 363
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 344
caggttcagc tgcagcagtc cggccccggc ctggtgaagc caagccagac cctgtctctg 60
acatgcgcca tctccggcga cagcgtgtcc tctaactccg ccgcttggaa ttggatccgg 120
cagtctccat ccagaggcct ggagtggctg ggcagaacct attaccggtc caagtggtac 180
aacgattatg ccgtgtccgt gaagagcaga atcaccatca accctgatac cagcaagaac 240
cagttcagcc tgcagctgaa ttccgtgacc ccagaggata cagccgtgta ttactgtgct 300
agggacgatg attggaatga cttcgattac tggggccagg ggaccctggt gacagtctcg 360
agt 363
<210> 345
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический полинуклеотид"
<400> 345
gagatcgtgc tgacccagtc cccagctaca ctgtccctgt ctcccggcga gcgggccacc 60
ctgagctgta gagcttccca gtccgtgtct tcctatctgg cttggtatca gcagaagcca 120
ggacaggccc caaggctgct gatctacgac gcctccaata gagccaccgg catcccagct 180
agattttctg gctccggctc cggcaccgat ttcacactga ccatctctag cctggagcca 240
gaggattttg ctgtatatta ctgccagcag cgcagcaact ggcccctgac atttggcggc 300
ggcaccaagg ttgagatcaa g 321
<210> 346
<211> 121
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 346
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Ser Ser Asn
20 25 30
Ser Ala Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Gly Arg Thr Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Asn Asp Tyr Ala
50 55 60
Val Ser Val Lys Ser Arg Ile Thr Ile Asn Pro Asp Thr Ser Lys Asn
65 70 75 80
Gln Phe Ser Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Asp Asp Trp Asn Asp Phe Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 347
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 347
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 348
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 348
Gly Asp Ser Val Ser Ser Asn Ser Ala
1 5
<210> 349
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 349
Thr Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp
1 5
<210> 350
<211> 13
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 350
Cys Ala Arg Asp Asp Asp Trp Asn Asp Phe Asp Tyr Trp
1 5 10
<210> 351
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 351
Gln Ser Val Ser Ser Tyr
1 5
<210> 352
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 352
Asp Ala Ser
1
<210> 353
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 353
Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Leu Thr Phe
1 5 10
<210> 354
<211> 372
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 354
cagctgcagc tgcaggaaag cggccccggc ctggtgaagc cctctgagac cctgtccctg 60
acatgcaccg tgagcggcga ttccatcagc tcttccagct attactgggg ctggatccgg 120
cagccccccg gcaagggcct ggagtggatc ggcagcatct tctactccgg caatacatat 180
tataatcctt ctctgaagag cagggtgaca atcagcgtgg atacctccaa gaatcagttt 240
agcctgaagc tgagctccgt gacagctgcc gatacagccg tgtattactg cgctagggag 300
gacgattttc tgaccgatta ttacggcgct ttcgacatct ggggccaggg gacaatggtg 360
acagtctcga gt 372
<210> 355
<211> 318
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 355
gatatccaga tgacccagtc tccaagcacc ctgagcgcct ctgtgggcga tcgggtgacc 60
atcacatgtc gggcttctca gtccatcagc agctggctgg cttggtatca gcagaagccc 120
ggcaaggccc caaagctgct gatctacaag gcctcttcca gcgagagcgg cgtgccatcc 180
aggtttagcg gctccggctc cggcaccgag tttaccctga ccatctcttc cctgcagccc 240
gatgactttg ccacctacta ctgtcagcag tacaattcct atctgacatt cggcggcggc 300
accaaggttg agatcaag 318
<210> 356
<211> 124
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 356
Gln Leu Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Asp Ser Ile Ser Ser Ser
20 25 30
Ser Tyr Tyr Trp Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Ser Ile Phe Tyr Ser Gly Asn Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Glu Asp Asp Phe Leu Thr Asp Tyr Tyr Gly Ala Phe Asp
100 105 110
Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 357
<211> 106
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 357
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Ser Ser Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Leu Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 358
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 358
Gly Asp Ser Ile Ser Ser Ser Ser Tyr Tyr
1 5 10
<210> 359
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 359
Ile Phe Tyr Ser Gly Asn Thr
1 5
<210> 360
<211> 18
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 360
Cys Ala Arg Glu Asp Asp Phe Leu Thr Asp Tyr Tyr Gly Ala Phe Asp
1 5 10 15
Ile Trp
<210> 361
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 361
Gln Ser Ile Ser Ser Trp
1 5
<210> 362
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 362
Lys Ala Ser
1
<210> 363
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 363
Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Leu Thr Phe
1 5 10
<210> 364
<211> 375
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 364
gaggtgcagc tgctggaatc cggaggagga ctggtccagc caggtggatc cctgcgactg 60
agctgcgccg cttctggctt cgactttaga agctacgcaa tgatgtgggt ccgccaggca 120
ccaggaaagg gactggagtg ggtgggaggg atcaacggtg aagtcggtgg ctctaataca 180
tactatgcac ctgccgtcaa gggaagggct actattagtc gggacaactc aaaaaatacc 240
ctgtatctgc aaatgaacag tctgagggcc gaggataccg ccgtgtacta ttgcgtgaaa 300
ggtgctggcg catgcggcat ctgtaatgac gatattgatg catggggaca ggggaccctg 360
gtgacagtct cgagt 375
<210> 365
<211> 330
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 365
agttatgagc tgactcagga cccagcagtg tcagtcgccc tgggccagac agtgagaatc 60
acttgcagtg gggctggttc atatgcaggc tcctactatt acggatggca ccagcagaag 120
cccggacagg cacctgtgac agtcatctac gacaacgata aaaggccaag caatattccc 180
gaccggttct ctgggtccag ctctggtaac accgcctccc tgaccattac tggggcccag 240
gctgaggacg aagctgatta ttactgtggc tctacaaacg ataatgacga tggcggactg 300
tttggctccg gaactaaggt caccgtccta 330
<210> 366
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 366
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asp Phe Arg Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Gly Ile Asn Gly Glu Val Gly Gly Ser Asn Thr Tyr Tyr Ala Pro
50 55 60
Ala Val Lys Gly Arg Ala Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr
65 70 75 80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Val Lys Gly Ala Gly Ala Cys Gly Ile Cys Asn Asp Asp Ile
100 105 110
Asp Ala Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 367
<211> 110
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 367
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Ser Gly Ala Gly Ser Tyr Ala Gly Ser Tyr
20 25 30
Tyr Tyr Gly Trp His Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Thr Val
35 40 45
Ile Tyr Asp Asn Asp Lys Arg Pro Ser Asn Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln
65 70 75 80
Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Ser Thr Asn Asp Asn Asp
85 90 95
Asp Gly Gly Leu Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105 110
<210> 368
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 368
Gly Phe Asp Phe Arg Ser Tyr Ala
1 5
<210> 369
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 369
Ile Asn Gly Glu Val Gly Gly Ser Asn Thr
1 5 10
<210> 370
<211> 18
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 370
Cys Val Lys Gly Ala Gly Ala Cys Gly Ile Cys Asn Asp Asp Ile Asp
1 5 10 15
Ala Trp
<210> 371
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 371
Gly Ser Tyr Ala Gly Ser Tyr
1 5
<210> 372
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 372
Asp Asn Asp
1
<210> 373
<211> 13
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 373
Cys Gly Ser Thr Asn Asp Asn Asp Asp Gly Gly Leu Phe
1 5 10
<210> 374
<211> 330
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 374
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
225 230 235 240
Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 375
<211> 330
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 375
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
225 230 235 240
Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 376
<211> 327
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 376
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
115 120 125
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
130 135 140
Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp
145 150 155 160
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
165 170 175
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
180 185 190
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
195 200 205
Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
210 215 220
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys
225 230 235 240
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
245 250 255
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
260 265 270
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
275 280 285
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser
290 295 300
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
305 310 315 320
Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
325
<210> 377
<211> 326
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 377
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
115 120 125
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
130 135 140
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
145 150 155 160
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
165 170 175
Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp
180 185 190
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
195 200 205
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu
210 215 220
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
225 230 235 240
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
245 250 255
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
260 265 270
Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
275 280 285
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
290 295 300
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
305 310 315 320
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325
<210> 378
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 378
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 379
<211> 106
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 379
Gly Gln Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 380
<211> 990
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 380
gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg 60
ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120
tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 240
tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagccc 300
aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaagc cgccggggga 360
ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 420
gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 480
tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac 540
agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag 600
gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 660
aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggaggag 720
atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 780
gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg 840
ctggactccg acggctcctt cttcctctat agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 900
cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 960
cagaagagcc tctccctgtc cccgggtaaa 990
<210> 381
<211> 1596
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 381
gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg 60
ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120
tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 240
tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttggtgag 300
aggccagcac agggagggag ggtgtctgct ggaagccagg ctcagcgctc ctgcctggac 360
gcatcccggc tatgcagtcc cagtccaggg cagcaaggca ggccccgtct gcctcttcac 420
ccggaggcct ctgcccgccc cactcatgct cagggagagg gtcttctggc tttttcccca 480
ggctctgggc aggcacaggc taggtgcccc taacccaggc cctgcacaca aaggggcagg 540
tgctgggctc agacctgcca agagccatat ccgggaggac cctgcccctg acctaagccc 600
accccaaagg ccaaactctc cactccctca gctcggacac cttctctcct cccagattcc 660
agtaactccc aatcttctct ctgcagagcc caaatcttgt gacaaaactc acacatgccc 720
accgtgccca ggtaagccag cccaggcctc gccctccagc tcaaggcggg acaggtgccc 780
tagagtagcc tgcatccagg gacaggcccc agccgggtgc tgacacgtcc acctccatct 840
cttcctcagc acctgaagcc gccgggggac cgtcagtctt cctcttcccc ccaaaaccca 900
aggacaccct catgatctcc cggacccctg aggtcacatg cgtggtggtg gacgtgagcc 960
acgaagaccc tgaggtcaag ttcaactggt acgtggacgg cgtggaggtg cataatgcca 1020
agacaaagcc gcgggaggag cagtacaaca gcacgtaccg tgtggtcagc gtcctcaccg 1080
tcctgcacca ggactggctg aatggcaagg agtacaagtg caaggtctcc aacaaagccc 1140
tcccagcccc catcgagaaa accatctcca aagccaaagg tgggacccgt ggggtgcgag 1200
ggccacatgg acagaggccg gctcggccca ccctctgccc tgagagtgac cgctgtacca 1260
acctctgtcc ctacagggca gccccgagaa ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccgg 1320
gaggagatga ccaagaacca ggtcagcctg acctgcctgg tcaaaggctt ctatcccagc 1380
gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg cagccggaga acaactacaa gaccacgcct 1440
cccgtgctgg actccgacgg ctccttcttc ctctatagca agctcaccgt ggacaagagc 1500
aggtggcagc aggggaacgt cttctcatgc tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac 1560
tacacgcaga agagcctctc cctgtccccg ggtaaa 1596
<210> 382
<211> 981
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 382
gcttccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 60
agcacagccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120
tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacgaagacc 240
tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagtcc 300
aaatatggtc ccccatgccc accatgccca gcacctgagt tcctgggggg accatcagtc 360
ttcctgttcc ccccaaaacc caaggacact ctcatgatct cccggacccc tgaggtcacg 420
tgcgtggtgg tggacgtgag ccaggaagac cccgaggtcc agttcaactg gtacgtggat 480
ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagttcaa cagcacgtac 540
cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaacggcaa ggagtacaag 600
tgcaaggtct ccaacaaagg cctcccgtcc tccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 660
gggcagcccc gagagccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccaggagga gatgaccaag 720
aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctacc ccagcgacat cgccgtggag 780
tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gctggactcc 840
gacggctcct tcttcctcta cagcaggctc accgtggaca agagcaggtg gcaggagggg 900
aatgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac acagaagagc 960
ctctccctgt ctctgggtaa a 981
<210> 383
<211> 1588
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 383
gcttccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 60
agcacagccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120
tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacgaagacc 240
tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttggtgag 300
aggccagcac agggagggag ggtgtctgct ggaagccagg ctcagccctc ctgcctggac 360
gcaccccggc tgtgcagccc cagcccaggg cagcaaggca ggccccatct gtctcctcac 420
ccggaggcct ctgaccaccc cactcatgct cagggagagg gtcttctgga tttttccacc 480
aggctccggg cagccacagg ctggatgccc ctaccccagg ccctgagcat acaggggcag 540
gtgctgcgct cagacctgcc aagagccata tccgggagga ccctgcccct gacctaagcc 600
caccccaaag gccaaactct ccactccctc agctcagaca ccttctctcc tcccagatct 660
gagtaactcc caatcttctc tctgcagagt ccaaatatgg tcccccatgc ccaccatgcc 720
caggtaagcc aacccaggcc tcgccctcca gctcaaggcg ggacaggtgc cctagagtag 780
cctgcatcca gggacaggcc ccagccgggt gctgacgcat ccacctccat ctcttcctca 840
gcacctgagt tcctgggggg accatcagtc ttcctgttcc ccccaaaacc caaggacact 900
ctcatgatct cccggacccc tgaggtcacg tgcgtggtgg tggacgtgag ccaggaagac 960
cccgaggtcc agttcaactg gtacgtggat ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag 1020
ccgcgggagg agcagttcaa cagcacgtac cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac 1080
caggactggc tgaacggcaa ggagtacaag tgcaaggtct ccaacaaagg cctcccgtcc 1140
tccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa ggtgggaccc acggggtgcg agggccacat 1200
ggacagaggt cagctcggcc caccctctgc cctgggagtg accgctgtgc caacctctgt 1260
ccctacaggg cagccccgag agccacaggt gtacaccctg cccccatccc aggaggagat 1320
gaccaagaac caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc ttctacccca gcgacatcgc 1380
cgtggagtgg gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac aagaccacgc ctcccgtgct 1440
ggactccgac ggctccttct tcctctacag caggctcacc gtggacaaga gcaggtggca 1500
ggaggggaat gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct ctgcacaacc actacacaca 1560
gaagagcctc tccctgtctc tgggtaaa 1588
<210> 384
<211> 978
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 384
gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 60
agcacagccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120
tggaactcag gcgctctgac cagcggcgtg cacaccttcc cagctgtcct acagtcctca 180
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcaacttcgg cacccagacc 240
tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagac agttgagcgc 300
aaatgttgtg tcgagtgccc accgtgccca gcaccacctg tggcaggacc gtcagtcttc 360
ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc atgatctccc ggacccctga ggtcacgtgc 420
gtggtggtgg acgtgagcca cgaagacccc gaggtccagt tcaactggta cgtggacggc 480
gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagcca cgggaggagc agttcaacag cacgttccgt 540
gtggtcagcg tcctcaccgt tgtgcaccag gactggctga acggcaagga gtacaagtgc 600
aaggtctcca acaaaggcct cccagccccc atcgagaaaa ccatctccaa aaccaaaggg 660
cagccccgag aaccacaggt gtacaccctg cccccatccc gggaggagat gaccaagaac 720
caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc ttctacccca gcgacatcgc cgtggagtgg 780
gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac aagaccacac ctcccatgct ggactccgac 840
ggctccttct tcctctacag caagctcacc gtggacaaga gcaggtggca gcaggggaac 900
gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct ctgcacaacc actacacgca gaagagcctc 960
tccctgtctc cgggtaaa 978
<210> 385
<211> 1585
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 385
gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 60
agcacagccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120
tggaactcag gcgctctgac cagcggcgtg cacaccttcc cagctgtcct acagtcctca 180
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcaacttcgg cacccagacc 240
tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagac agttggtgag 300
aggccagctc agggagggag ggtgtctgct ggaagccagg ctcagccctc ctgcctggac 360
gcaccccggc tgtgcagccc cagcccaggg cagcaaggca ggccccatct gtctcctcac 420
ccggaggcct ctgcccgccc cactcatgct cagggagagg gtcttctggc tttttccacc 480
aggctccagg caggcacagg ctgggtgccc ctaccccagg cccttcacac acaggggcag 540
gtgcttggct cagacctgcc aaaagccata tccgggagga ccctgcccct gacctaagcc 600
gaccccaaag gccaaactgt ccactccctc agctcggaca ccttctctcc tcccagatcc 660
gagtaactcc caatcttctc tctgcagagc gcaaatgttg tgtcgagtgc ccaccgtgcc 720
caggtaagcc agcccaggcc tcgccctcca gctcaaggcg ggacaggtgc cctagagtag 780
cctgcatcca gggacaggcc ccagctgggt gctgacacgt ccacctccat ctcttcctca 840
gcaccacctg tggcaggacc gtcagtcttc ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc 900
atgatctccc ggacccctga ggtcacgtgc gtggtggtgg acgtgagcca cgaagacccc 960
gaggtccagt tcaactggta cgtggacggc gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagcca 1020
cgggaggagc agttcaacag cacgttccgt gtggtcagcg tcctcaccgt tgtgcaccag 1080
gactggctga acggcaagga gtacaagtgc aaggtctcca acaaaggcct cccagccccc 1140
atcgagaaaa ccatctccaa aaccaaaggt gggacccgcg gggtatgagg gccacatgga 1200
cagaggccgg ctcggcccac cctctgccct gggagtgacc gctgtgccaa cctctgtccc 1260
tacagggcag ccccgagaac cacaggtgta caccctgccc ccatcccggg aggagatgac 1320
caagaaccag gtcagcctga cctgcctggt caaaggcttc taccccagcg acatcgccgt 1380
ggagtgggag agcaatgggc agccggagaa caactacaag accacacctc ccatgctgga 1440
ctccgacggc tccttcttcc tctacagcaa gctcaccgtg gacaagagca ggtggcagca 1500
ggggaacgtc ttctcatgct ccgtgatgca tgaggctctg cacaaccact acacgcagaa 1560
gagcctctcc ctgtctccgg gtaaa 1585
<210> 386
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 386
cgtacggtgg ctgcaccatc tgtcttcatc ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct 60
ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat aacttctatc ccagagaggc caaagtacag 120
tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt aactcccagg agagtgtcac agagcaggac 180
agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc accctgacgc tgagcaaagc agactacgag 240
aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag 300
agcttcaaca ggggagagtg t 321
<210> 387
<211> 325
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 387
cctaggtcag cccaaggcca accccactgt cactctgttc ccgccctcct ctgaggagct 60
ccaagccaac aaggccacac tagtgtgtct gatcagtgac ttctacccgg gagctgtgac 120
agtggcctgg aaggcagatg gcagccccgt caaggcggga gtggagacca ccaaaccctc 180
caaacagagc aacaacaagt acgcggccag cagctacctg agcctgacgc ccgagcagtg 240
gaagtcccac agaagctaca gctgccaggt cacgcatgaa gggagcaccg tggagaagac 300
agtggcccct acagaatgtt cataa 325
<210> 388
<211> 288
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 388
Met Gln Ile Pro Gln Ala Pro Trp Pro Val Val Trp Ala Val Leu Gln
1 5 10 15
Leu Gly Trp Arg Pro Gly Trp Phe Leu Asp Ser Pro Asp Arg Pro Trp
20 25 30
Asn Pro Pro Thr Phe Ser Pro Ala Leu Leu Val Val Thr Glu Gly Asp
35 40 45
Asn Ala Thr Phe Thr Cys Ser Phe Ser Asn Thr Ser Glu Ser Phe Val
50 55 60
Leu Asn Trp Tyr Arg Met Ser Pro Ser Asn Gln Thr Asp Lys Leu Ala
65 70 75 80
Ala Phe Pro Glu Asp Arg Ser Gln Pro Gly Gln Asp Cys Arg Phe Arg
85 90 95
Val Thr Gln Leu Pro Asn Gly Arg Asp Phe His Met Ser Val Val Arg
100 105 110
Ala Arg Arg Asn Asp Ser Gly Thr Tyr Leu Cys Gly Ala Ile Ser Leu
115 120 125
Ala Pro Lys Ala Gln Ile Lys Glu Ser Leu Arg Ala Glu Leu Arg Val
130 135 140
Thr Glu Arg Arg Ala Glu Val Pro Thr Ala His Pro Ser Pro Ser Pro
145 150 155 160
Arg Pro Ala Gly Gln Phe Gln Thr Leu Val Val Gly Val Val Gly Gly
165 170 175
Leu Leu Gly Ser Leu Val Leu Leu Val Trp Val Leu Ala Val Ile Cys
180 185 190
Ser Arg Ala Ala Arg Gly Thr Ile Gly Ala Arg Arg Thr Gly Gln Pro
195 200 205
Leu Lys Glu Asp Pro Ser Ala Val Pro Val Phe Ser Val Asp Tyr Gly
210 215 220
Glu Leu Asp Phe Gln Trp Arg Glu Lys Thr Pro Glu Pro Pro Val Pro
225 230 235 240
Cys Val Pro Glu Gln Thr Glu Tyr Ala Thr Ile Val Phe Pro Ser Gly
245 250 255
Met Gly Thr Ser Ser Pro Ala Arg Arg Gly Ser Ala Asp Gly Pro Arg
260 265 270
Ser Ala Gln Pro Leu Arg Pro Glu Asp Gly His Cys Ser Trp Pro Leu
275 280 285
<210> 389
<211> 301
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 389
Met Phe Ser His Leu Pro Phe Asp Cys Val Leu Leu Leu Leu Leu Leu
1 5 10 15
Leu Leu Thr Arg Ser Ser Glu Val Glu Tyr Arg Ala Glu Val Gly Gln
20 25 30
Asn Ala Tyr Leu Pro Cys Phe Tyr Thr Pro Ala Ala Pro Gly Asn Leu
35 40 45
Val Pro Val Cys Trp Gly Lys Gly Ala Cys Pro Val Phe Glu Cys Gly
50 55 60
Asn Val Val Leu Arg Thr Asp Glu Arg Asp Val Asn Tyr Trp Thr Ser
65 70 75 80
Arg Tyr Trp Leu Asn Gly Asp Phe Arg Lys Gly Asp Val Ser Leu Thr
85 90 95
Ile Glu Asn Val Thr Leu Ala Asp Ser Gly Ile Tyr Cys Cys Arg Ile
100 105 110
Gln Ile Pro Gly Ile Met Asn Asp Glu Lys Phe Asn Leu Lys Leu Val
115 120 125
Ile Lys Pro Ala Lys Val Thr Pro Ala Pro Thr Arg Gln Arg Asp Phe
130 135 140
Thr Ala Ala Phe Pro Arg Met Leu Thr Thr Arg Gly His Gly Pro Ala
145 150 155 160
Glu Thr Gln Thr Leu Gly Ser Leu Pro Asp Ile Asn Leu Thr Gln Ile
165 170 175
Ser Thr Leu Ala Asn Glu Leu Arg Asp Ser Arg Leu Ala Asn Asp Leu
180 185 190
Arg Asp Ser Gly Ala Thr Ile Arg Ile Gly Ile Tyr Ile Gly Ala Gly
195 200 205
Ile Cys Ala Gly Leu Ala Leu Ala Leu Ile Phe Gly Ala Leu Ile Phe
210 215 220
Lys Trp Tyr Ser His Ser Lys Glu Lys Ile Gln Asn Leu Ser Leu Ile
225 230 235 240
Ser Leu Ala Asn Leu Pro Pro Ser Gly Leu Ala Asn Ala Val Ala Glu
245 250 255
Gly Ile Arg Ser Glu Glu Asn Ile Tyr Thr Ile Glu Glu Asn Val Tyr
260 265 270
Glu Val Glu Glu Pro Asn Glu Tyr Tyr Cys Tyr Val Ser Ser Arg Gln
275 280 285
Gln Pro Ser Gln Pro Leu Gly Cys Arg Phe Ala Met Pro
290 295 300
<210> 390
<211> 525
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 390
Met Trp Glu Ala Gln Phe Leu Gly Leu Leu Phe Leu Gln Pro Leu Trp
1 5 10 15
Val Ala Pro Val Lys Pro Leu Gln Pro Gly Ala Glu Val Pro Val Val
20 25 30
Trp Ala Gln Glu Gly Ala Pro Ala Gln Leu Pro Cys Ser Pro Thr Ile
35 40 45
Pro Leu Gln Asp Leu Ser Leu Leu Arg Arg Ala Gly Val Thr Trp Gln
50 55 60
His Gln Pro Asp Ser Gly Pro Pro Ala Ala Ala Pro Gly His Pro Leu
65 70 75 80
Ala Pro Gly Pro His Pro Ala Ala Pro Ser Ser Trp Gly Pro Arg Pro
85 90 95
Arg Arg Tyr Thr Val Leu Ser Val Gly Pro Gly Gly Leu Arg Ser Gly
100 105 110
Arg Leu Pro Leu Gln Pro Arg Val Gln Leu Asp Glu Arg Gly Arg Gln
115 120 125
Arg Gly Asp Phe Ser Leu Trp Leu Arg Pro Ala Arg Arg Ala Asp Ala
130 135 140
Gly Glu Tyr Arg Ala Ala Val His Leu Arg Asp Arg Ala Leu Ser Cys
145 150 155 160
Arg Leu Arg Leu Arg Leu Gly Gln Ala Ser Met Thr Ala Ser Pro Pro
165 170 175
Gly Ser Leu Arg Ala Ser Asp Trp Val Ile Leu Asn Cys Ser Phe Ser
180 185 190
Arg Pro Asp Arg Pro Ala Ser Val His Trp Phe Arg Asn Arg Gly Gln
195 200 205
Gly Arg Val Pro Val Arg Glu Ser Pro His His His Leu Ala Glu Ser
210 215 220
Phe Leu Phe Leu Pro Gln Val Ser Pro Met Asp Ser Gly Pro Trp Gly
225 230 235 240
Cys Ile Leu Thr Tyr Arg Asp Gly Phe Asn Val Ser Ile Met Tyr Asn
245 250 255
Leu Thr Val Leu Gly Leu Glu Pro Pro Thr Pro Leu Thr Val Tyr Ala
260 265 270
Gly Ala Gly Ser Arg Val Gly Leu Pro Cys Arg Leu Pro Ala Gly Val
275 280 285
Gly Thr Arg Ser Phe Leu Thr Ala Lys Trp Thr Pro Pro Gly Gly Gly
290 295 300
Pro Asp Leu Leu Val Thr Gly Asp Asn Gly Asp Phe Thr Leu Arg Leu
305 310 315 320
Glu Asp Val Ser Gln Ala Gln Ala Gly Thr Tyr Thr Cys His Ile His
325 330 335
Leu Gln Glu Gln Gln Leu Asn Ala Thr Val Thr Leu Ala Ile Ile Thr
340 345 350
Val Thr Pro Lys Ser Phe Gly Ser Pro Gly Ser Leu Gly Lys Leu Leu
355 360 365
Cys Glu Val Thr Pro Val Ser Gly Gln Glu Arg Phe Val Trp Ser Ser
370 375 380
Leu Asp Thr Pro Ser Gln Arg Ser Phe Ser Gly Pro Trp Leu Glu Ala
385 390 395 400
Gln Glu Ala Gln Leu Leu Ser Gln Pro Trp Gln Cys Gln Leu Tyr Gln
405 410 415
Gly Glu Arg Leu Leu Gly Ala Ala Val Tyr Phe Thr Glu Leu Ser Ser
420 425 430
Pro Gly Ala Gln Arg Ser Gly Arg Ala Pro Gly Ala Leu Pro Ala Gly
435 440 445
His Leu Leu Leu Phe Leu Ile Leu Gly Val Leu Ser Leu Leu Leu Leu
450 455 460
Val Thr Gly Ala Phe Gly Phe His Leu Trp Arg Arg Gln Trp Arg Pro
465 470 475 480
Arg Arg Phe Ser Ala Leu Glu Gln Gly Ile His Pro Pro Gln Ala Gln
485 490 495
Ser Lys Ile Glu Glu Leu Glu Gln Glu Pro Glu Pro Glu Pro Glu Pro
500 505 510
Glu Pro Glu Pro Glu Pro Glu Pro Glu Pro Glu Gln Leu
515 520 525
<210> 391
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полинуклеотид"
<400> 391
gctagcctct tacgagctga ctcagccacc ttccgtgtcc gtgtccccag gacagaccgc 60
aagaatcaca tgcagtggcg gatccagcta ctcatatggg tggttccagc agaagcctgg 120
tcaggccccc gtgacagtca tctatgagag caacaatagg ccttctgaca ttccagaacg 180
gtttagtggc tctagttcag gaaccacagt gactctgacc atcagcgggg tccaggccga 240
ggacgaagct gattactatt gtggcaacgc tgattccagc tctggaattt tcgggtccgg 300
tacaaaagtg actgtcctag g 321
<210> 392
<211> 104
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический полипептид"
<400> 392
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Thr Ala Arg Ile Thr Cys Ser Gly Gly Ser Ser Tyr Ser Tyr Gly Trp
20 25 30
Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Thr Val Ile Tyr Glu Ser
35 40 45
Asn Asn Arg Pro Ser Asp Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser
50 55 60
Gly Thr Thr Val Thr Leu Thr Ile Ser Gly Val Gln Ala Glu Asp Glu
65 70 75 80
Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Asn Ala Asp Ser Ser Ser Gly Ile Phe Gly
85 90 95
Ser Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100
<210> 393
<211> 4
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 393
Ser Ser Tyr Ser
1
<210> 394
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 394
Glu Ser Asn
1
<210> 395
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 395
Cys Gly Asn Ala Asp Ser Ser Ser Gly Ile Phe
1 5 10
<210> 396
<211> 15
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
Синтетический пептид"
<400> 396
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 397
<211> 6
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 397
Lys Ile Glu Glu Leu Glu
1 5
<---

Claims (41)

1. Способ усиления иммунитета у нуждающегося в этом пациента–человека, включающий введение пациенту
антитела против TIM–3 или его антигенсвязывающей части и
антитела против PD–1 или его антигенсвязывающей части, где антитело против TIM–3 имеет H-CDR1-3 и L-CDR1-3, которые содержат аминокислотные последовательности из SEQ ID NO: 8–13, соответственно, и антитело против PD-1
a) имеет H-CDR1-3 и L-CDR1-3, которые содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 228-233, соответственно;
б) представляет собой пембролизумаб; или
в) ниволумаб.
2. Способ по п. 1, в котором антитело против TIM–3 имеет вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и вариабельный домен легкой цепи (VL), которые содержат аминокислотные последовательности из:
a) SEQ ID NO: 7 и 4, соответственно, и антитело против PD-1 имеет VH и VL, которые содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 226 и 227, соответственно.
3. Способ по п. 1, в котором антитело против TIM–3 имеет:
тяжелую цепь (HC), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 7 и 377, и легкую цепь (LC), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4 и 378, и
антитело против PD-1 имеет HC, содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 226 и 375, и LC, содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 227 и 379.
4. Способ по п. 1, в котором антитело против TIM-3 имеет VH и VL, которые содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 7 и 4 соответственно, и антитело против PD-1 представляет собой пембролизумаб или ниволумаб.
5. Способ усиления иммунитета у нуждающегося в этом пациента-человека, включающий введение пациенту антитела против TIM-3 и антитела против PD-1, где
антитело против TIM-3 имеет тяжелую цепь (HC), которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 7 и 377, и легкую цепь (LC), которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4 и 378, и
антитело против PD-1 представляет собой пембролизумаб.
6. Способ усиления иммунитета у нуждающегося в этом пациента-человека, включающий введение пациенту антитела против TIM-3 и антитела против PD-1, где
антитело против TIM-3 имеет тяжелую цепь (HC), которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 7 и 377, и легкую цепь (LC), которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4 и 378, и
антитело против PD-1 представляет собой ниволумаб.
7. Способ по любому из пп. 1–6, в котором антитела или антигенсвязывающие части вводят пациенту одновременно.
8. Способ по п. 7, в котором антитела или их антигенсвязывающие части вводят в одной фармацевтической композиции.
9. Способ по любому из пп. 1–6, в котором антитела или антигенсвязывающие части вводят пациенту последовательно.
10. Способ по любому из пп. 1-9, в котором у пациента есть рак.
11. Способ по п. 10, в котором раком является гематологическая злокачественная опухоль.
12. Способ по п. 11, в котором гематологической злокачественной опухолью является лейкоз, лимфома Ходжкина, неходжкинская лимфома или миелома.
13. Способ по п. 10, в котором раком является солидная опухоль.
14. Способ по п. 10, в котором раком является меланома, немелкоклеточный рак легкого, рак мочевого пузыря, рак желчного пузыря, плоскоклеточный рак головы и шеи, рак пищевода, рак пищеводно–желудочного перехода, рак желудка, рак яичников, рак толстого кишечника, почечноклеточный рак, рак поджелудочной железы, карцинома из клеток Меркеля, фибросаркома, глиосаркома, мезотелиома, рак желчных протоков или глиобластома.
15. Способ по любому из пп. 1-14, дополнительно включающий применение для пациента лучевой терапии или введение по меньшей мере одного из химиотерапевтического средства, противоопухолевого средства и антиангиогенного средства.
16. Способ по п. 15, в котором указанное химиотерапевтическое средство представляет собой иринотекан.
17. Фармацевтическая композиция для повышения иммунитета и лечения рака, содержащая антитело к TIM-3 или его антигенсвязывающую часть и антитело к PD-1 или его антигенсвязывающую часть, где
а) антитело против TIM-3
i) имеет H-CDR1-3 и L-CDR1-3, которые содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 8-13 соответственно;
ii) имеет вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и вариабельный домен легкой цепи (VL), которые содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 7 и 4 соответственно; или
iii) имеет тяжелую цепь (HC), которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 7 и 377, и легкую цепь (LC), которая содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4 и 378; и
b) антитело к PD-1
i) имеет H-CDR1-3 и L-CDR1-3, которые содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 228-233, соответственно;
ii) имеет VH и VL, которые содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 226 и 227, соответственно;
iii) имеет HC, который содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 226 и 375, и LC, который содержит аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 227 и 379;
iv) представляет собой пембролизумаб; или
v) ниволумаб.
18. Фармацевтическая композиция по п. 17, дополнительно содержащая химиотерапевтическое средство, противоопухолевое средство или антиангиогенное средство.
19. Фармацевтическая композиция по п. 18, в которой указанное химиотерапевтическое средство представляет собой иринотекан.
RU2019134934A 2017-04-05 2018-04-05 Комбинированные лекарственные средства, нацеленные на pd-1, tim-3 и lag-3 RU2795232C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201762481973P 2017-04-05 2017-04-05
US62/481,973 2017-04-05
PCT/EP2018/058752 WO2018185232A1 (en) 2017-04-05 2018-04-05 Combination therapies targeting pd-1, tim-3, and lag-3

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2022115820A Division RU2022115820A (ru) 2017-04-05 2018-04-05 Комбинированные лекарственные средства, нацеленные на pd-1, tim-3 и lag-3

Publications (3)

Publication Number Publication Date
RU2019134934A RU2019134934A (ru) 2021-05-05
RU2019134934A3 RU2019134934A3 (ru) 2022-01-14
RU2795232C2 true RU2795232C2 (ru) 2023-05-02

Family

ID=

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2406760C2 (ru) * 2005-05-09 2010-12-20 Оно Фармасьютикал Ко., Лтд. Моноклональные антитела человека к белку программируемой смерти 1 (pd-1) и способы лечения рака с использованием анти-pd-1-антител самостоятельно или в комбинации с другими иммунотерапевтическими средствами
WO2015042246A1 (en) * 2013-09-20 2015-03-26 Bristol-Myers Squibb Company Combination of anti-lag-3 antibodies and anti-pd-1 antibodies to treat tumors
WO2015175340A1 (en) * 2014-05-13 2015-11-19 Bavarian Nordic, Inc. Combination therapy for treating cancer with a poxvirus expressing a tumor antigen and a monoclonal antibody against tim-3

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2406760C2 (ru) * 2005-05-09 2010-12-20 Оно Фармасьютикал Ко., Лтд. Моноклональные антитела человека к белку программируемой смерти 1 (pd-1) и способы лечения рака с использованием анти-pd-1-антител самостоятельно или в комбинации с другими иммунотерапевтическими средствами
WO2015042246A1 (en) * 2013-09-20 2015-03-26 Bristol-Myers Squibb Company Combination of anti-lag-3 antibodies and anti-pd-1 antibodies to treat tumors
WO2015175340A1 (en) * 2014-05-13 2015-11-19 Bavarian Nordic, Inc. Combination therapy for treating cancer with a poxvirus expressing a tumor antigen and a monoclonal antibody against tim-3

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JING W. et al., Combined immune checkpoint protein blockade and low dose whole body irradiation as immunotherapy for myeloma, JOURNAL FOR IMMUNOTHERAPY OF CANCER, 2015;3:2. *
LIU J. et al., Targeting PD-1 and Tim-3 Pathways to Reverse CD8 T-Cell Exhaustion and Enhance Ex Vivo T-Cell Responses to Autologous Dendritic/Tumor Vaccines, Journal of Immunotherapy, 2016, Volume 39, Number 4, pp. 171-180. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI822101B (zh) 靶向ｐｄ－１、ｔｉｍ－３及ｌａｇ－３的組合療法
KR102473028B1 (ko) 항-tim-3 항체 및 조성물
RU2755503C2 (ru) Анти-lag-3 антитела и их композиции
KR102493282B1 (ko) Tim3에 대한 항체 및 그의 용도
CN108137687B (zh) 抗ox40抗体及其用途
KR102204937B1 (ko) 글루코코르티코이드-유도 종양 괴사 인자 수용체 (gitr)에 대한 항체 및 그의 용도
DK2699598T3 (en) COMBINATIONS OF ANTI-4-1BB ANTIBODIES AND ADCC-INducing ANTIBODIES FOR TREATMENT OF CANCER
AU2021254602A1 (en) Humanized anti-MUC1* antibodies
KR102215405B1 (ko) 인간 pac1 항체
KR20180082563A (ko) 글루코코르티코이드-유도된 종양 괴사 인자 수용체 (gitr)에 대한 항체 및 그의 용도
KR102604433B1 (ko) 항-icos 항체
EA033369B1 (ru) Мутантные полипептиды интерлейкина-2 со сниженной аффинностью к высокоаффинному рецептору il-2 и неизменной аффинностью к рецептору il-2 с промежуточной аффинностью и их применение
KR20220040483A (ko) 칼리크레인 관련 펩티다제 2 항원 결합 도메인을 포함하는 단백질 및 이의 용도
KR20220160555A (ko) Cd40에 결합하는 항체 및 이의 용도
KR20200109339A (ko) Tim3에 대한 항체를 사용하여 암을 치료하는 방법
KR20200108870A (ko) Tim3에 대한 항체 및 그의 용도
TW202216743A (zh) Ｉｌ－１０突變蛋白及其融合蛋白
KR20220107252A (ko) 생리학적 철분 과다에 대한 치료
KR20210068065A (ko) 안타고니스트
RU2795232C2 (ru) Комбинированные лекарственные средства, нацеленные на pd-1, tim-3 и lag-3
TW202313110A (zh) 癌症之治療
KR20240007760A (ko) 항-icos 항체의 용도
NZ789986A (en) Antibodies against tim3 and uses thereof