RU2780254C1

RU2780254C1 - Derivative of pyrrolopyrimidine and application thereof

Info

Publication number: RU2780254C1
Application number: RU2021119757A
Authority: RU
Inventors: Сюэцзюнь Чжан; Дабин ЙЕ; Лай ЛИ; Цзе ШЭНЬ; Сяохуан ДИН; Хонна СУН; Чжэ ЛИУ; Ян Чжан; Юнган Вэй
Original assignee: Ухань Хюманвелл Инноватив Драг Ресерч Энд Девелопмент Центр Лимитед Компани
Priority date: 2019-02-01
Filing date: 2020-01-22
Publication date: 2022-09-21

Abstract

FIELD: chemistry.

SUBSTANCE: invention relates to a compound or to a tautomer or a stereoisomer thereof, represented by the formula I, wherein R¹ and R² are each independently selected from -H or -CH₃, on the condition that R¹ and R² are not simultaneously -H; or R¹ and R² are not simultaneously -CH₃.

EFFECT: production of a new compound applicable in medicine for producing a medical product for treating or preventing ATC-related diseases.

11 cl, 2 dwg, 7 tbl, 8 ex

Description

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИFIELD OF TECHNOLOGY

[0001] Настоящее изобретение относится к области биомедицины, в частности, настоящее изобретение относится к производным пирролопиримидина и, конкретнее, настоящее изобретение относится к производным пирролопиримидина, способам получения производных пирролопиримидина и применению производных пирролопиримидина в изготовлении лекарственных средств.[0001] The present invention relates to the field of biomedicine, in particular, the present invention relates to pyrrolopyrimidine derivatives, and more specifically, the present invention relates to pyrrolopyrimidine derivatives, methods for preparing pyrrolopyrimidine derivatives, and the use of pyrrolopyrimidine derivatives in the manufacture of medicines.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИBACKGROUND OF THE INVENTION

[0002] Аутотаксин (сокращенно называемый АТХ) представляет собой секретируемый гликопротеин с активностью фосфодиэстеразы (PDE) и является представителем семейства внеклеточных пирофосфатаз/фосфодиэстераз (ENPP). Таким образом, аутотаксин также называется ENPP2. АТХ также обладает активностью лизофосфолипазы D (LysoPLD) и может гидролизовать лизофосфатидилхолин (LPC) до лизофосфатидной кислоты (LPA) с биологической активностью. LPA представляет собой внутриклеточный липидный медиатор, который влияет на многие биологические и биохимические процессы.[0002] Autotaxin (abbreviated as ATX) is a secreted glycoprotein with phosphodiesterase (PDE) activity and is a member of the extracellular pyrophosphatase/phosphodiesterase (ENPP) family. Thus, autotaxin is also called ENPP2. ATX also has lysophospholipase D (LysoPLD) activity and can hydrolyze lysophosphatidylcholine (LPC) to lysophosphatidic acid (LPA) with biological activity. LPA is an intracellular lipid mediator that influences many biological and biochemical processes.

[0003] Исследования показали, что в патологических условиях уровень LPA можно понижать за счет ингибирования АТХ, обеспечивая тем самым терапевтическую пользу для неудовлетворенных клинических потребностей, включая рак, хоминг лимфоцитов, хроническое воспаление, невропатическую боль, фиброз, тромбоз и холестатический зуд, или фиброзирующие заболевания, которые индуцируются, опосредуются и/или распространяются за счет повышения уровня LPA и/или активации АТХ.[0003] Studies have shown that under pathological conditions, LPA can be lowered by inhibition of ATC, thereby providing a therapeutic benefit for unmet clinical needs, including cancer, lymphocyte homing, chronic inflammation, neuropathic pain, fibrosis, thrombosis, and cholestatic pruritus, or fibrosing diseases that are induced, mediated and/or propagated by elevated levels of LPA and/or activation of ATC.

[0004] Повышенную регуляцию сигнального пути ATX-LPA можно наблюдать в различных воспалительных условиях. Например, провоспалительные эффекты LPA включают дегрануляцию тучных клеток, сокращение гладкомышечных клеток и высвобождение цитокинов из дендритных клеток. Как проявление его общей роли в воспалении, повышенную регуляцию сигнального пути ATX-LPA наблюдали в мышиной модели воздушного мешка с каррагенаном, которая является общепринятой для разработки противовоспалительных лекарственных средств, включая ингибиторы циклооксигеназы для артрита (Hidenobu Kanda, Rebecca Newton, Russell Klein et at, Autotaxin, an ectoenzyme that produces lysophosphatidic acid, promotes the entry of lymphocytes into secondary lymphoid organs[J] Nature Immunology. 2008, 9(4):415-423.). Кроме того, снижение количества LPA в плазме и в воздушном мешке наблюдали в крысиной модели воздушного мешка с каррагенаном с применением ингибитора АТХ, которая подтверждает роль АТХ как основного источника LPA во время воспаления. В качестве другой общей роли в воспалительных заболеваниях был подтвержден «синергетический эффект» между LPA и хемокинами, обуславливающими миграцию лимфоцитов. В участках хронического воспаления можно обнаружить высокую экспрессию АТХ. Было подтверждено, что хоминг Т-клеток в лимфатических тканях можно ингибировать путем внутривенной инъекции инактивированного АТХ, что можно обеспечить посредством конкуренции с эндогенным АТХ и оказания доминантного негативного эффекта. В некоторых случаях АТХ облегчает попадание лимфоцитов в лимфоидные органы. Следовательно, ингибиторы АТХ могут блокировать миграцию лимфоцитов во вторичные лимфоидные органы и полезны при аутоиммунных заболеваниях.[0004] Upregulation of the ATX-LPA signaling pathway can be observed in a variety of inflammatory conditions. For example, the proinflammatory effects of LPA include mast cell degranulation, smooth muscle cell contraction, and cytokine release from dendritic cells. As a manifestation of its general role in inflammation, upregulation of the ATX-LPA signaling pathway has been observed in the carrageenan air sac mouse model, which is well established for the development of anti-inflammatory drugs, including cyclooxygenase inhibitors for arthritis (Hidenobu Kanda, Rebecca Newton, Russell Klein et at, Autotaxin, an ectoenzyme that produces lysophosphatidic acid, promotes the entry of lymphocytes into secondary lymphoid organs [J] Nature Immunology 2008, 9(4):415-423.). In addition, a decrease in plasma and air sac LPA was observed in the rat carrageenan air sac model using an ATC inhibitor, which confirms the role of ATC as the main source of LPA during inflammation. As another common role in inflammatory diseases, a "synergistic effect" between LPA and chemokines mediating lymphocyte migration has been confirmed. In areas of chronic inflammation, high expression of ATC can be detected. It has been confirmed that T cell homing in lymphatic tissues can be inhibited by intravenous injection of inactivated ATC, which can be achieved by competing with endogenous ATC and exerting a dominant negative effect. In some cases, ATC facilitates the entry of lymphocytes into the lymphoid organs. Therefore, ATC inhibitors can block the migration of lymphocytes to secondary lymphoid organs and are useful in autoimmune diseases.

[0005] Было подтверждено, что при ревматоидном артрите экспрессия АТХ повышена в синовиальных фибробластах от пациентов с ревматоидным артритом (РА), а устранение экспрессии АТХ в мезенхимальных клетках (включая синовиальные фибробласты) приводит к ослаблению симптомов в мышиной модели ревматоидного артрита. Следовательно, роль аутотаксина при ревматоидном артрите была полностью установлена.[0005] In rheumatoid arthritis, ATC expression has been confirmed to be increased in synovial fibroblasts from patients with rheumatoid arthritis (RA), and elimination of ATC expression in mesenchymal cells (including synovial fibroblasts) results in symptomatic relief in a mouse model of rheumatoid arthritis. Therefore, the role of autotaxin in rheumatoid arthritis has been fully established.

[0006] LPA также может осуществлять повышающую регуляцию связанных с болью белков посредством LPA₁, который является одним из его гомологичных рецепторов. Нацеленное ингибирование против АТХ-опосредованного биосинтеза LPA может служить механизмом предотвращения невропатической боли, вызванной повреждением нерва, такой как боль, связанная с остеоартритом. Было установлено, что ингибиторы аутотаксина снижают количество LPA и PGE2 и также облегчают воспалительную боль. Также посредством исследований было показано, что нацеленное ингибирование против АТХ-опосредованного биосинтеза LPA может быть новым механизмом для предотвращения невропатической боли, вызванной повреждением нерва.[0006] LPA can also upregulate pain-related proteins through LPA ₁ , which is one of its homologous receptors. Targeted inhibition against ATC-mediated LPA biosynthesis may serve as a mechanism to prevent neuropathic pain caused by nerve injury, such as pain associated with osteoarthritis. Autotaxin inhibitors have been found to reduce LPA and PGE2 and also alleviate inflammatory pain. It has also been shown through research that targeted inhibition against ATC-mediated LPA biosynthesis may be a novel mechanism for preventing neuropathic pain caused by nerve injury.

[0007] После того, как воспаление проходит, а повреждение ткани исправляется, ткань обычно восстанавливается до своего исходного состояния. Избыточное или неконтролируемое восстановление ткани может приводить к тому, что обычно называют фиброзом. Фиброз характеризуется избыточным отложением компонентов внеклеточного матрикса и избыточным ростом фибробластов. Фиброз может возникать во всех тканях, но в особенности распространен в органах, которые часто подвергаются химическому и биологическому повреждению, включая легкие, кожу, пищеварительный тракт, почки и печень. Фиброз часто серьезно вредит нормальному функционированию органов.[0007] After the inflammation subsides and the tissue damage is repaired, the tissue typically recovers to its original state. Excessive or uncontrolled tissue repair can lead to what is commonly referred to as fibrosis. Fibrosis is characterized by excessive deposition of extracellular matrix components and overgrowth of fibroblasts. Fibrosis can occur in all tissues, but is especially common in organs that are subject to frequent chemical and biological damage, including the lungs, skin, digestive tract, kidneys, and liver. Fibrosis often seriously impairs the normal functioning of organs.

[0008] В некоторых случаях LPA стимулирует пролиферацию звездчатых клеток печени, в то же время ингибируя синтез ДНК в гепатоцитах. Уровень LPA и сывороточная активность АТХ повышены у пациентов с хроническим гепатитом С. В крови кроликов с разными поражениями печени плазменная концентрация LPA и сывороточная активность АТХ относительно выше при индуцированном черыреххлористым углеродом фиброзе печени. Плазменная концентрация LPA и сывороточная активность АТХ повышаются с тяжестью разных поражений печени.[0008] In some cases, LPA stimulates the proliferation of hepatic stellate cells while inhibiting DNA synthesis in hepatocytes. LPA levels and serum ATC activity are elevated in patients with chronic hepatitis C. In the blood of rabbits with various liver lesions, plasma LPA concentration and serum ATC activity are relatively higher in carbon tetrachloride-induced liver fibrosis. Plasma LPA concentration and serum ATC activity increase with the severity of various liver lesions.

[0009] Легочный фиброз представляет собой изменение терминальной стадии большой группы заболеваний легких, которые характеризуются пролиферацией фибробластов и накоплением большого количества внеклеточного матрикса, что сопровождается воспалительным повреждением и разрушение структуры ткани, т.е. структурной аномалией (рубцеванием), вызванной аномальным восстановлением после повреждения нормальных альвеолярных тканей. Когда повреждение легких обусловлено различными причинами, интерстициальные ткани будут секретировать коллаген для восстановления. Если восстановление происходит в избытке, т.е. наблюдается избыточная пролиферация фибробластов и накопление внеклеточного матрикса, будет развиваться легочный фиброз.[0009] Pulmonary fibrosis is a change in the terminal stage of a large group of lung diseases that are characterized by fibroblast proliferation and accumulation of a large amount of extracellular matrix, which is accompanied by inflammatory damage and destruction of tissue structure, i.e. a structural abnormality (scarring) caused by abnormal recovery from damage to normal alveolar tissues. When lung damage is due to various causes, the interstitial tissues will secrete collagen to repair. If recovery occurs in excess, i.e. there is excessive fibroblast proliferation and extracellular matrix accumulation, pulmonary fibrosis will develop.

[0010] Сигнал LPA имеет эффект стимуляции фиброза на эпителиальных клетках, эндотелиальных клетках и фибробластах, в частности, посредством рецептора LPA₁: генетическая делеция этого рецептора снижает апоптоз эпителиальных клеток, пропотевание сосудов и накопление фибробластов в модели легочного фиброза.[0010] The LPA signal has a fibrosis-promoting effect on epithelial cells, endothelial cells, and fibroblasts, particularly through the LPA ₁ receptor: genetic deletion of this receptor reduces epithelial cell apoptosis, vascular leakage, and fibroblast accumulation in a model of pulmonary fibrosis.

[0011] Идиопатический легочный фиброз (ИЛФ) представляет собой хроническую, прогрессирующую и фиброзирующую пневмонию с неизвестной этиологией, характеризуемую диффузным альвеолитом и альвеолярными структурными нарушениями, как правило, проявляющуюся как обычная интерстициальная пневмония при визуализации и патологической гистологии. По мере того, как заболевание прогрессирует, ткань легких пациента становится толще и жестче, приводя к появлению перманентных рубцов, или же легкие пациента выглядят как соты, что наглядно называется «сотовым легким» или «люфовидным легким». Хроническое прогрессирующее заболевание приводит к необратимому и непрерывному снижению легочной функции. 50% пациентов могут иметь среднее время выживаемости, составляющее всего 2,8 года с момента постановки диагноза. Таким образом, идиопатический легочный фиброз также называется «опухолеподобным заболеванием». В настоящее время существующие виды лекарственной терапии имеют проблемы, такие как большое количество нежелательных реакций, плохой терапевтический эффект; а нелекарственная терапия включает, главным образом, трансплантацию легких, но органная трансплантация является дорогостоящей и ограниченной по ресурсам, а также сопровождается определенным клиническим риском.[0011] Idiopathic pulmonary fibrosis (IPF) is a chronic, progressive and fibrosing pneumonia of unknown etiology, characterized by diffuse alveolitis and alveolar structural abnormalities, typically presenting as normal interstitial pneumonia on imaging and pathological histology. As the disease progresses, the patient's lung tissue becomes thicker and stiffer, resulting in permanent scarring, or the patient's lungs look like a honeycomb, which is loosely referred to as a "honeycomb lung" or "luphoid lung". Chronic progressive disease leads to an irreversible and permanent decline in lung function. 50% of patients may have a median survival time of as little as 2.8 years from diagnosis. Thus, idiopathic pulmonary fibrosis is also called a "tumor-like disease". Currently existing types of drug therapy have problems such as a large number of adverse reactions, poor therapeutic effect; and non-drug therapies mainly include lung transplantation, but organ transplantation is costly and resource-limited, and comes with some clinical risk.

[0012] Существует свидетельство, демонстрирующее, что пролиферация и сокращение фибробластов и секреция внеклеточного матрикса, стимулируемые LPA, способствуют фиброзирующей пролиферации при других заболеваниях дыхательных путей, таких как хронический бронхит и интерстициальное заболевание легких, а также перибронхиальный фиброз при тяжелой астме. LPA играет роль при фиброзирующем интерстициальном заболевании легких и облитерирующем бронхиолите, при которых повышены как коллаген, так и миофибробласты. Исследования, относящиеся к идиопатическому легочному фиброзу (ИЛФ), показали, что уровень LPA в жидкости бронхоальвеолярного лаважа повышен. Дальнейшие исследования нокаута и ингибиторов LPA1 показали, что LPA играет ключевую роль в процессе легочного фиброза, что дополняет исследование на мышах с клеточно-специфическим нокаутом, у которых отсутствует АТХ в клетках бронхиального эпителия и макрофагах. Было показано, что эти мыши были менее чувствительны в модели легочного фиброза. Роль LPA в других фиброзирующих заболеваниях (почек и кожи) основана на схожих наблюдениях. Роль LPA в ремоделировании легких связана с эффектами LPA на легочные фибробласты (посредством LPA1) и эпителиальные клетки (посредством LPA2). Было показано, что LPA2 играет поворотную роль в активации TGFβ в эпителиальных клетках в случае фиброзирующих нарушений. Роли LPA в ремоделировании и фиброзе связаны с ХОБЛ, ИЛФ и астмой, а ремоделирование легких, как отдаленный результат, будет ограничивать легочную функцию. И наконец, если сфокусироваться на легочных заболеваниях, АТХ является одним из трех основных локусов количественных признаков, которые, вероятно, связаны с разницей в легочной функции у мышей.[0012] There is evidence demonstrating that LPA-stimulated fibroblast proliferation and contraction and extracellular matrix secretion promote fibrosing proliferation in other airway diseases such as chronic bronchitis and interstitial lung disease, as well as peribronchial fibrosis in severe asthma. LPA plays a role in fibrosing interstitial lung disease and bronchiolitis obliterans, in which both collagen and myofibroblasts are elevated. Studies relating to idiopathic pulmonary fibrosis (IPF) have shown that LPA levels in bronchoalveolar lavage fluid are elevated. Further studies on knockout and LPA1 inhibitors showed that LPA plays a key role in the process of pulmonary fibrosis, which complements the study in mice with cell-specific knockout, which lack ATC in bronchial epithelial cells and macrophages. These mice were shown to be less sensitive in the pulmonary fibrosis model. The role of LPA in other fibrosing diseases (kidney and skin) is based on similar observations. The role of LPA in lung remodeling is related to the effects of LPA on lung fibroblasts (via LPA1) and epithelial cells (via LPA2). LPA2 has been shown to play a pivotal role in TGFβ activation in epithelial cells in fibrosing disorders. The roles of LPA in remodeling and fibrosis are associated with COPD, IPF, and asthma, and lung remodeling, as a long-term outcome, will limit lung function. Finally, with a focus on lung disease, ATC is one of the three major loci of quantitative traits that are likely to be associated with differences in lung function in mice.

[0013] В исследовании обнаружили, что концентрация LPA повышена в плазме и асцитах у пациентов с раком яичника на ранних или поздних стадиях. Повышенный уровень LPA и изменения экспрессии и ответа рецепторов LPA могут быть одной из причин начала, прогрессирования или исхода рака яичника. LPA также связана с раком предстательной железы, раком молочной железы, меланомным раком, раком головы и шеи, раком кишечника, раком головного мозга и раком щитовидной железы. LPA участвует в пролиферации и инвазии опухолевых клеток в смежные ткани, что приводит к метастазированию. Эти биологические и патобиологические процессы инициируются активацией сопряженных с протеином G рецепторов LPA. Уровень LPA можно снизить путем ингибирования ферментов, участвующих в биосинтезе LPA, таких как АТХ, для лечения опухолевых пациентов.[0013] The study found that the concentration of LPA is increased in plasma and ascites in patients with early or advanced ovarian cancer. Elevated levels of LPA and changes in the expression and response of LPA receptors may be one of the reasons for the onset, progression or outcome of ovarian cancer. LPA has also been linked to prostate cancer, breast cancer, melanoma cancer, head and neck cancer, colon cancer, brain cancer, and thyroid cancer. LPA is involved in the proliferation and invasion of tumor cells into adjacent tissues, leading to metastasis. These biological and pathobiological processes are initiated by the activation of G protein-coupled LPA receptors. LPA levels can be reduced by inhibiting enzymes involved in LPA biosynthesis, such as ATC, to treat tumor patients.

[0014] В процессе ангиогенеза АТХ и другие ангиогенные факторы вместе приводят к ангиогенезу. Во время опухолевого роста опухоль может подпитываться за счет ангиогенеза. Соответственно, важной стартовой точкой для лечения рака и опухолей является ингибирование ангиогенеза.[0014] During angiogenesis, ATC and other angiogenic factors together lead to angiogenesis. During tumor growth, the tumor can be fueled by angiogenesis. Accordingly, an important starting point for the treatment of cancer and tumors is the inhibition of angiogenesis.

[0015] В патентной заявке WO 2014202458 A1 перечислены эффекты сигнализации ATX-LPA в разных патофизиологических условиях, таких как пролиферативные заболевания, невропатическая боль, воспаление, аутоиммунные заболевания, фиброз, мечение лимфоцитов в лимфатических узлах, ожирение, диабет или эмбриональное образование кровеносных сосудов.[0015] Patent application WO 2014202458 A1 lists the effects of ATX-LPA signaling in different pathophysiological conditions such as proliferative diseases, neuropathic pain, inflammation, autoimmune diseases, fibrosis, lymphocyte tagging in lymph nodes, obesity, diabetes, or embryonic blood vessel formation.

[0016] В настоящее время был достигнут определенный прогресс в лечении рака, фиброзирующих заболеваний, пролиферативных заболеваний, воспалительных заболеваний, аутоиммунных заболеваний, респираторных заболеваний, сердечно-сосудистых заболеваний, нейродегенеративных заболеваний, дерматологических нарушений и/или связанных с аномальным ангиогенезом заболеваний, но его все еще недостаточно. Имеющиеся на сегодня на рынке терапевтические лекарственные средства для ИЛФ включают пирфенидон и нинтеданиб. Пирфенидон может приводить к повреждению печени (такому как печеночная недостаточность, желтуха), реакциям гиперчувствительности (таким как отечность лица, отек гортани, одышка, свистящее дыхание и т.д.) и тяжелым реакциям со стороны желудочно-кишечного тракта, а анализ фотогенотоксичности продемонстрировал, что он может приводить к структурной аномалии хромосом и может приводить к раку кожи при воздействии света. Нинтеданиб характеризуется такими нежелательными явлениями, как диарея, тошнота и боль в животе, частота реакций со стороны желудочно-кишечного тракта может достигать 50%, а распространенные нежелательные явления включают потерю массы, потерю аппетита, повреждение печени и кровотечение и т.д. Среди пациентов, которые принимают пирфенидон и нинтеданиб вероятность прекращения лечения вследствие серьезных нежелательных явлений составляла 20,9% и 26,3%, соответственно (Toby М Maher, et al. Rationale, design and objectives of two phase III, randomised, placebocontrolled studies of GLPG1690, a novel autotaxin inhibitor, in idiopathic pulmonary fibrosis (ISABELA 1 and 2)[TJ. BMJ Open Respiratory Research. 2019, 21; 6(1).). Качество жизни пациентов с ИЛФ сильно ухудшается, при этом в клинических исследованиях ни пирфенидон ни нинтеданиб не смогли улучшить качество жизни этих пациентов. Хотя оба из этих лекарственных средств могут улучшить общие результаты, они могут лишь замедлить течение заболевания, но не могут обратить легочный фиброз. В связи с этим польза от них для пациентов с тяжелым специфическим легочным фиброзом может отсутствовать. GLPG-1690, как одно из лекарственных средств для лечения ИЛФ, которое сейчас находится на стадии разработки и демонстрирует быстрый прогресс, проявляет тенденцию к обращению течения заболевания, но имеет проблемы, связанные с низкой ферментативной активностью, большой дозировкой клинического лекарственного средства и плохим соблюдением приема лекарственного средства.[0016] Some progress has now been made in the treatment of cancer, fibrosing diseases, proliferative diseases, inflammatory diseases, autoimmune diseases, respiratory diseases, cardiovascular diseases, neurodegenerative diseases, dermatological disorders, and/or abnormal angiogenesis-related diseases, but its still not enough. Therapeutic drugs currently on the market for IPF include pirfenidone and nintedanib. Pirfenidone can lead to liver damage (such as liver failure, jaundice), hypersensitivity reactions (such as swelling of the face, swelling of the larynx, shortness of breath, wheezing, etc.) and severe reactions from the gastrointestinal tract, and photogenotoxicity analysis has demonstrated that it can lead to a structural abnormality of chromosomes and can lead to skin cancer when exposed to light. Nintedanib is characterized by adverse events such as diarrhea, nausea and abdominal pain, the incidence of gastrointestinal reactions can reach 50%, and common adverse events include weight loss, loss of appetite, liver damage and bleeding, etc. Among patients taking pirfenidone and nintedanib, the likelihood of treatment discontinuation due to serious adverse events was 20.9% and 26.3%, respectively (Toby M Maher, et al. Rationale, design and objectives of two phase III, randomised, placebocontrolled studies of GLPG1690, a novel autotaxin inhibitor, in idiopathic pulmonary fibrosis (ISABELA 1 and 2) [TJ. BMJ Open Respiratory Research. 2019, 21; 6(1).]. The quality of life of patients with IPF is severely impaired, and neither pirfenidone nor nintedanib has been able to improve the quality of life of these patients in clinical trials. Although both of these drugs may improve overall outcomes, they can only slow down the course of the disease and cannot reverse pulmonary fibrosis. As such, they may not be of benefit to patients with severe specific pulmonary fibrosis. GLPG-1690, as one of the drugs for the treatment of IPF, which is currently under development and showing rapid progress, tends to reverse the course of the disease, but has problems associated with low enzymatic activity, high dosage of clinical drug and poor adherence medicinal product.

[0017] Следовательно, на данный момент существующие варианты терапии все еще остаются неудовлетворительными. Все еще существует большое количество пациентов, нуждающихся в новых вариантах лечения с большей активностью и лучшей эффективностью, которые могут замедлять течение заболевания в большей степени или даже обращать течение заболевания, улучшать соблюдение приема лекарственного средства и обеспечивать пользу для большего числа пациентов с идиопатический легочным фиброзом.[0017] Therefore, currently existing therapy options are still unsatisfactory. There is still a large number of patients in need of new treatment options with greater potency and better efficacy that can slow the course of the disease to a greater extent or even reverse the course of the disease, improve drug compliance, and provide benefits to more patients with idiopathic pulmonary fibrosis.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯSUMMARY OF THE INVENTION

[0018] Цель настоящего изобретения состоит в предоставлении соединения, которое может эффективно ингибировать АТХ и которое можно использовать в качестве улучшения или замещения существующих лекарственных средств или ингибиторов АТХ.[0018] The purpose of the present invention is to provide a compound that can effectively inhibit ATC and that can be used as an improvement or replacement for existing drugs or ATC inhibitors.

[0019] В первом аспекте настоящего изобретения предложено соединение, представленное формулой I, или мезомер, рацемат, таутомер, стереоизомер, гидрат, сольват, соль или пролекарство соединения, представленного формулой I,[0019] In a first aspect, the present invention provides a compound represented by formula I, or a mesomer, racemate, tautomer, stereoisomer, hydrate, solvate, salt, or prodrug of a compound represented by formula I,

гдеwhere

R¹ и R² каждый независимо выбраны из -Н или -СН₃,R ¹ and R ² are each independently selected from -H or -CH ₃ ,

при условии, что:provided that:

R¹ и R² одновременно не представляют собой -Н; илиR ¹ and R ² do not simultaneously represent -H; or

R¹ и R² одновременно не представляют собой -СН₃.R ¹ and R ² are not simultaneously -CH ₃ .

[0020] В соответствии с вариантами осуществления настоящего изобретения вышеуказанное соединение может дополнительно иметь по меньшей мере один из следующих технических признаков.[0020] According to embodiments of the present invention, the above compound may further have at least one of the following technical features.

[0021] В соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения R¹представляет собой -Н, a R² представляет собой -СН₃.[0021] According to an embodiment of the present invention, R ¹ is -H and R ² is -CH ₃ .

[0022] В соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения R¹представляет собой -СН₃, a R² представляет собой -Н.[0022] According to an embodiment of the present invention, R ¹ is -CH ₃ and R ² is -H.

[0023] В соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения соединение представляет собой одно из следующих соединений; или соединение представляет собой мезомер, рацемат, таутомер, стереоизомер, гидрат, сольват, соль или пролекарство одного из следующих соединений:[0023] According to an embodiment of the present invention, the compound is one of the following compounds; or the compound is a mesomer, racemate, tautomer, stereoisomer, hydrate, solvate, salt, or prodrug of one of the following compounds:

[0024] В соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения соль включает фармацевтически приемлемые соли и представляет собой соль по меньшей мере одной кислоты, выбранной из серной кислоты, фосфорной кислоты, азотной кислоты, бромистоводородной кислоты, хлористоводородной кислоты, муравьиной кислоты, уксусной кислоты, пропионовой кислоты, бензолсульфоновой кислоты, бензойной кислоты, фенилуксусной кислоты, салициловой кислоты, альгиновой кислоты, антраниловой кислоты, камфорной кислоты, лимонной кислоты, винилсульфоновой кислоты, муравьиной кислоты, фумаровой кислоты, пирослизевой кислоты, глюконовой кислоты, глюкуроновой кислоты, глутаминовой кислоты, гликолевой кислоты, изэтионовой кислоты, молочной кислоты, малеиновой кислоты, яблочной кислоты, миндальной кислоты, слизевой кислоты, памовой кислоты, пантотеновой кислоты, стеариновой кислоты, янтарной кислоты, сульфаниловой кислоты, винной кислоты, n-толуолсульфоновой кислоты, малоновой кислоты, 2-гидроксипропионовой кислоты, щавелевой кислоты, гликолевой кислоты, глюкуроновой кислоты, галактуроновой кислоты, лимонной кислоты, лизина, аргинина, асперагиновой кислоты, коричной кислоты, n-толуолсульфоновой кислоты, метансульфоновой кислоты, этансульфоновой кислоты или трифторметансульфоновой кислоты. Для специалистов в данной области техники понятно, что помимо фармацевтически приемлемых солей в настоящем изобретении также можно использовать другие соли, действующие как промежуточные соединения при очистке соединений или при получении других фармацевтически приемлемых солей, или для идентификации, изучения характеристик или очистки соединений по настоящему изобретению.[0024] In accordance with an embodiment of the present invention, the salt includes pharmaceutically acceptable salts and is a salt of at least one acid selected from sulfuric acid, phosphoric acid, nitric acid, hydrobromic acid, hydrochloric acid, formic acid, acetic acid, propionic acid , benzenesulfonic acid, benzoic acid, phenylacetic acid, salicylic acid, alginic acid, anthranilic acid, camphoric acid, citric acid, vinylsulfonic acid, formic acid, fumaric acid, pyromucic acid, gluconic acid, glucuronic acid, glutamic acid, glycolic acid, isethionic acid, lactic acid, maleic acid, malic acid, mandelic acid, mucic acid, pamoic acid, pantothenic acid, stearic acid, succinic acid, sulfanilic acid, tartaric acid, p-toluenesulfonic acid, malonic acid, 2-hydroxypropionic acid ota, oxalic acid, glycolic acid, glucuronic acid, galacturonic acid, citric acid, lysine, arginine, asperic acid, cinnamic acid, p-toluenesulfonic acid, methanesulfonic acid, ethanesulfonic acid or trifluoromethanesulfonic acid. Those skilled in the art will recognize that, in addition to the pharmaceutically acceptable salts, other salts may also be used in the present invention to act as intermediates in the purification of compounds or in the preparation of other pharmaceutically acceptable salts, or to identify, characterize, or purify the compounds of the present invention.

[0025] Во втором аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция. В соответствии с вариантами осуществления настоящего изобретения фармацевтическая композиция содержит вышеуказанное соединение в качестве активного ингредиента.[0025] In a second aspect of the present invention, a pharmaceutical composition is provided. According to embodiments of the present invention, the pharmaceutical composition contains the above compound as an active ingredient.

[0026] В третьем аспекте настоящего изобретения предложено применение вышеуказанного соединения или вышеуказанной фармацевтической композиции в производстве лекарственного средства для лечения или предотвращения связанных с АТХ заболеваний.[0026] In a third aspect, the present invention provides the use of the above compound or the above pharmaceutical composition in the manufacture of a medicament for the treatment or prevention of ATC related diseases.

[0027] В соответствии с вариантами осуществления настоящего изобретения применение может дополнительно включать по меньшей мере один из следующих технических признаков.[0027] In accordance with embodiments of the present invention, the application may further include at least one of the following technical features.

[0028] В соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения связанное с АТХ заболевание включает по меньшей мере одно, выбранное из рака, метаболического заболевания, заболевания почек, заболевания печени, фиброзирующего заболевания, интерстициального заболевания легких, пролиферативного заболевания, воспалительного заболевания, боли, аутоиммунного заболевания, респираторного заболевания, сердечно-сосудистого заболевания, нейродегенеративных заболеваний, дерматологического нарушения и/или связанного с аномальным ангиогенезом заболевания.[0028] In accordance with an embodiment of the present invention, an ATC related disease includes at least one selected from cancer, metabolic disease, kidney disease, liver disease, fibrosing disease, interstitial lung disease, proliferative disease, inflammatory disease, pain, autoimmune disease , a respiratory disease, a cardiovascular disease, a neurodegenerative disease, a dermatological disorder, and/or an abnormal angiogenesis-related disease.

[0029] В соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения связанное с АТХ заболевание включает по меньшей мере одно, выбранное из интерстициального заболевания легких, легочного фиброза, печеночного фиброза или почечного фиброза.[0029] In accordance with an embodiment of the present invention, an ATC-related disease includes at least one selected from interstitial lung disease, pulmonary fibrosis, hepatic fibrosis, or renal fibrosis.

[0030] В соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения связанное с АТХ заболевание включает идиопатический легочный фиброз.[0030] In accordance with an embodiment of the present invention, an ATC-associated disease includes idiopathic pulmonary fibrosis.

[0031] В соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения связанное с АТХ заболевание включает диабет типа II и неалкогольный стеатогепатит.[0031] In accordance with an embodiment of the present invention, ATC-associated disease includes type II diabetes and non-alcoholic steatohepatitis.

[0032] В соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения связанное с АТХ заболевание включает невропатическую боль и воспалительную боль.[0032] According to an embodiment of the present invention, ATC-associated disease includes neuropathic pain and inflammatory pain.

[0033] В соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения связанное с АТХ заболевание включает боль, связанную с остеоартритом.[0033] According to an embodiment of the present invention, an ATC related disease includes pain associated with osteoarthritis.

[0034] В четвертом аспекте настоящего изобретения предложена лекарственная комбинация. В соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения лекарственная комбинация содержит вышеуказанное соединение или вышеуказанную фармацевтическую композицию; и дополнительное лекарственное средство для лечения или предотвращения связанных с АТХ заболеваний.[0034] In a fourth aspect of the present invention, a drug combination is provided. In accordance with an embodiment of the present invention, the drug combination contains the above compound or the above pharmaceutical composition; and an additional drug for the treatment or prevention of ATC related diseases.

[0035] В соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения соединение или фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно использовать, чтобы предоставить нуждающимся в этом пациентам лучшие и более эффективные клинические лекарственные средства или схемы. В соответствии с вариантом осуществления в настоящем изобретении предложена серия ингибиторов АТХ с новыми структурами, лучшими фармакокинетическими свойствами, лучшей эффективностью и хорошей лекарственной ориентированностью, способных обеспечивать эффективное лечение связанных с АТХ заболеваний или нарушений.[0035] In accordance with an embodiment of the present invention, the compound or pharmaceutical composition of the present invention can be used to provide better and more effective clinical drugs or regimens to patients in need thereof. According to an embodiment, the present invention provides a series of ATC inhibitors with novel structures, better pharmacokinetic properties, better efficacy, and good drug targeting, capable of providing effective treatment for ATC-related diseases or disorders.

[0036] Настоящее изобретение дополнительно относится к способу лечения связанных с АТХ заболеваний. Этот способ включает введение пациенту терапевтически эффективной дозы фармацевтического состава, содержащего соединение по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль.[0036] The present invention further relates to a method for treating ATC related diseases. This method includes administering to a patient a therapeutically effective dose of a pharmaceutical composition containing a compound of the present invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

[0037] Определения и пояснения терминов[0037] Definitions and explanations of terms

[0038] Если не указано иное, определения групп и термины, описанные в тексте и формуле изобретения, включают действительные определения, типовые определения, предпочтительные определения, определения, записанные в таблицах, и определения конкретных соединений в примерах и т.д., которые можно произвольным образом комбинировать и интегрировать друг с другом. Комбинируемые и интегрируемые группы определений и структуры соединений должны входить в объем настоящего изобретения.[0038] Unless otherwise indicated, group definitions and terms described in the text and claims include actual definitions, exemplary definitions, preferred definitions, definitions written in tables, and definitions of specific compounds in examples, etc., which can be arbitrarily combine and integrate with each other. Combinable and integrable definition groups and compound structures are intended to be within the scope of the present invention.

[0039] Термин «фармацевтически приемлемый» означает соединения, материалы, композиции и/или дозированные формы, которые подходят для применения в контакте с тканями людей и животных без чрезмерных токсичности, раздражения, аллергических реакций или других проблем или осложнений с надлежащей медицинской точки зрения, и соответствуют разумному соотношению польза/риск.[0039] The term "pharmaceutically acceptable" means compounds, materials, compositions and/or dosage forms that are suitable for use in contact with human and animal tissues without undue toxicity, irritation, allergic reactions, or other problems or complications from a proper medical point of view, and correspond to a reasonable benefit/risk ratio.

[0040] Термин «фармацевтически приемлемая соль» относится к фармацевтически приемлемой соли нетоксичной кислоты или основания, включая соли неорганических кислот и оснований, а также органических кислот и оснований. Соли, полученные из неорганических оснований включают, но не ограничиваются этим, соли металлов, образуемые Al, Са, Li, Mg, K, Na и Zn. Соли, полученные из органических оснований, включают, но не ограничиваются этим, соли первичных, вторичных или третичных аминов, включая органические соли, образуемые природными замещенными или незамещенными аминами, циклическими аминами и основными ионообменными смолами, например, органические соли, образуемые аммонием, изопропиламином, триметиламином, диэтиламином, триэтиламином, трипропиламином, диэтаноламином, этаноламином, диметилэтаноламином, 2-диметиламиноэтанолом, 2-диэтиламиноэтанолом, дициклогексил амином, кофеином, прокаином, холином, бетаином, бенетамин пенициллином, этиле ндиамином, глюкозамином, метилглюкамином, теобромином, триэтаноламином, трометамином, пурином, пиперазином, пиперидином, N-этилпиперидином или полиаминовой смолой. Соли, полученные из неорганических и органических кислот, включают, но не ограничиваются этим, органические соли, образуемые серной кислотой, фосфорной кислотой, азотной кислотой, бромистоводородной кислотой, хлористоводородной кислотой, муравьиной кислотой, уксусной кислотой и т.д.[0040] The term "pharmaceutically acceptable salt" refers to a pharmaceutically acceptable salt of a non-toxic acid or base, including salts of inorganic acids and bases, as well as organic acids and bases. Salts derived from inorganic bases include, but are not limited to, metal salts formed by Al, Ca, Li, Mg, K, Na, and Zn. Salts derived from organic bases include, but are not limited to, salts of primary, secondary, or tertiary amines, including organic salts formed from natural substituted or unsubstituted amines, cyclic amines, and basic ion exchange resins, such as organic salts formed from ammonium, isopropylamine, trimethylamine, diethylamine, triethylamine, tripropylamine, diethanolamine, ethanolamine, dimethylethanolamine, 2-dimethylaminoethanol, 2-diethylaminoethanol, dicyclohexylamine, caffeine, procaine, choline, betaine, benetamine penicillin, ethylenediamine, glucosamine, methylglucamine, theobromine, triethanolamine, purine, tromethamine , piperazine, piperidine, N-ethylpiperidine or polyamine resin. Salts derived from inorganic and organic acids include, but are not limited to, organic salts formed from sulfuric acid, phosphoric acid, nitric acid, hydrobromic acid, hydrochloric acid, formic acid, acetic acid, and the like.

[0041] Помимо фармацевтически приемлемых солей в настоящем изобретении также можно применять другие соли, которые могут действовать как промежуточные соединения при очистке соединений или при получении других фармацевтически приемлемых солей, или которые можно использовать для идентификации, изучения характеристик или очистки соединений по настоящему изобретению.[0041] In addition to pharmaceutically acceptable salts, other salts can also be used in the present invention, which can act as intermediates in the purification of compounds or in the preparation of other pharmaceutically acceptable salts, or which can be used to identify, characterize or purify the compounds of the present invention.

[0042] Термин «стереоизомер» относится к изомеру, получаемому за счет разного пространственного упорядочения атомов в молекуле. Определения и правила стереохимии, используемые в настоящем изобретении, в целом соответствуют "McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984)", S.P. Parker, Ed., McGraw-Hill Book Company, New York; and "Stereochemistry of Organic Compounds", Eliel, E. and Wilen, S., John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994. Соединение по настоящему изобретению может содержать центр асимметрии или хиральный центр, и, таким образом, могут существовать разные стереоизомерные формы. Все стереоизомерные формы соединения по настоящему изобретению, включая, но не ограничиваясь этим, диастереоизомеры, энантиомеры, атропизомеры, геометрические (или конформационные) изомеры и их смеси, такие как рацемические смеси, входят в объем настоящего изобретения.[0042] The term "stereoisomer" refers to an isomer resulting from different spatial arrangements of atoms in a molecule. The definitions and rules of stereochemistry used in the present invention are generally in accordance with "McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984)", S.P. Parker, Ed., McGraw-Hill Book Company, New York; and "Stereochemistry of Organic Compounds", Eliel, E. and Wilen, S., John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994. The compound of the present invention may contain an asymmetric center or a chiral center, and thus there may be various stereoisomeric forms. All stereoisomeric forms of a compound of the present invention, including but not limited to diastereoisomers, enantiomers, atropisomers, geometric (or conformational) isomers, and mixtures thereof, such as racemic mixtures, are within the scope of the present invention.

[0043] Многие органические соединения существуют в оптически активных формах, т.е. они способны вращать плоскость плоскополяризованного света. При описании оптически активных соединений приставки D и L, или R и S, используют для обозначения абсолютной конфигурации молекулы относительно ее хирального центра. Приставки D и L, или (+) и (-) представляют собой символы, используемые для уточнения вращения плоскополяризованного света, обусловленного соединением, где (-) или L указывает на то, что соединение является левовращающим, а приставка (+) или D указывает на то, что соединение является правовращающим. Для данной химической структуры эти стереоизомеры идентичны, за исключением того, что эти стереоизомеры являются зеркальными отображениями друг друга. Определенные стереоизомеры могут называться энантиомерами, а смесь таких изомеров называется энантиомерной смесью. Смесь энантиомеров в соотношении 50:50 называется рацемической смесью или рацематом, которые могут возникать в тех случаях, когда в химической реакции или химическом процессе отсутствует стереоселективность или стереоспецифичность.[0043] Many organic compounds exist in optically active forms, ie. they are able to rotate the plane of plane polarized light. When describing optically active compounds, the prefixes D and L, or R and S, are used to indicate the absolute configuration of the molecule about its chiral center. The prefixes D and L, or (+) and (-) are symbols used to specify the rotation of plane polarized light due to the conjunction, where (-) or L indicates that the compound is left-handed and the prefix (+) or D indicates that the connection is dextrorotatory. For a given chemical structure, these stereoisomers are identical, except that these stereoisomers are mirror images of each other. Certain stereoisomers may be referred to as enantiomers, and a mixture of such isomers is referred to as an enantiomeric mixture. A mixture of enantiomers in a ratio of 50:50 is called a racemic mixture or racemate, which can occur when there is no stereoselectivity or stereospecificity in a chemical reaction or chemical process.

[0044] В соответствии с выбором исходным материалов и методов соединение по настоящему изобретению может существовать в форме одного из возможных изомеров или их смеси, например, в виде чистого оптического изомера или в виде смеси изомеров, такой как рацемическая смесь изомеров и диастереоизомерная смесь, в зависимости от числа асимметричных атомов углерода. Оптически активные (R)- или (S)- изомеры можно получать, используя хиральные синтоны или хиральные препараты, или разделять, используя традиционные методики. Если соединение содержит двойную связь, заместители могут находиться в Е- или Z-конфигурации; если соединение содержит двузамещенный циклоалкил, заместитель циклоалкила может иметь цис- или транс-конформацию.[0044] According to the choice of starting materials and methods, the compound of the present invention may exist in the form of one of the possible isomers or a mixture thereof, for example, as a pure optical isomer or as a mixture of isomers, such as a racemic mixture of isomers and a diastereomeric mixture, in depending on the number of asymmetric carbon atoms. Optically active (R)- or (S)-isomers can be obtained using chiral synthons or chiral preparations, or separated using conventional techniques. If the compound contains a double bond, the substituents may be in the E or Z configuration; if the compound contains a disubstituted cycloalkyl, the cycloalkyl substituent may be in the cis or trans conformation.

[0045] Когда связь с хиральным атомом углерода в формуле по настоящему изобретению изображена прямой линией, это следует понимать как то, что обе конфигурации (R) и (S) хирального атома углерода и как получаемое в результате энантиомерно чистое соединение, так и смесь включены в объем, определяемый общей формулой. В данном документе схематическое представление рацемата или энантиомерно чистого соединения взято из Maehr, J. Chem. Ed. 1985, 62: 114-120. Если не указано иное, клиновидная связь и изображенная пунктиром связь используются для представления абсолютной конфигурации стереоцентра.[0045] When a bond to a chiral carbon atom in a formula of the present invention is depicted by a straight line, it should be understood that both configurations (R) and (S) of the chiral carbon atom and both the resulting enantiomerically pure compound and the mixture are included to the volume determined by the general formula. In this document, the schematic representation of a racemate or enantiomerically pure compound is taken from Maehr, J. Chem. Ed. 1985, 62: 114-120. Unless otherwise noted, the wedge bond and the dotted bond are used to represent the absolute configuration of the stereocenter.

[0046] Соединения по настоящему изобретению, содержащие асимметрически замещенные атомы углерода, можно выделять в оптически активной форме или в рацемической форме. Разделение рацемической смеси соединения можно осуществлять любым из ряда способов, известных в данной области техники. Например, эти способы включают фракционную рекристаллизацию с использованием хиральных расщепляющих кислот, которые представляют собой оптически активные солеобразующие органические кислоты. Например, подходящими расщепляющими агентами для фракционной рекристаллизации являются оптически активные кислоты, такие как винная кислота, диацетилвинная кислота, дибензоилвинная кислота, миндальная кислоты, яблочная кислота, молочная кислота или различные оптически активные камфорсульфоновые кислоты, такие как D и L формы β-камфорсульфоновой кислоты. Другие расщепляющие агенты для фракционной рекристаллизации включают α-метилбензиламин в чистой стереоизомерной форме (например, S и R формах или чистой диастереомерной форме), 2-фенилглицинол, норэфедрин, эфедрин, N-метилэфедрин, циклогексилэтиламин, 1,2-диаминоциклогексан и т.д. Разделение рацемической смеси также можно осуществлять путем элюирования колонки, наполненной оптически активным расщепляющим агентом (например, динитробензоилфенилглицином). Также можно применять высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ) или сверхкритическую жидкостную хроматографию (СЖХ). Специалисты в данной области техники смогут выбрать конкретные способ, условия элюирования и хроматографические колонки в соответствии со структурами соединений и экспериментальными результатами. Кроме того, также можно использовать чистые оптически активные исходные материалы или реагенты с известной конфигурацией для получения любых энантиомеров или диастереомеров соединений, описанных в настоящем изобретении, путем стереоорганического синтеза.[0046] Compounds of the present invention containing asymmetrically substituted carbon atoms can be isolated in optically active form or in racemic form. Resolution of a racemic mixture of a compound can be accomplished by any of a number of methods known in the art. For example, these methods include fractional recrystallization using chiral cleaving acids, which are optically active salt-forming organic acids. For example, suitable resolving agents for fractional recrystallization are optically active acids such as tartaric acid, diacetyltartaric acid, dibenzoyltartaric acid, mandelic acids, malic acid, lactic acid, or various optically active camphorsulfonic acids such as the D and L forms of β-camphorsulfonic acid. Other resolving agents for fractional recrystallization include α-methylbenzylamine in pure stereoisomeric form (e.g. S and R forms or pure diastereomeric form), 2-phenylglycinol, norephedrine, ephedrine, N-methylephedrine, cyclohexylethylamine, 1,2-diaminocyclohexane, etc. . Resolution of a racemic mixture can also be accomplished by eluting a column packed with an optically active resolving agent (eg, dinitrobenzoylphenylglycine). High performance liquid chromatography (HPLC) or supercritical liquid chromatography (SLC) can also be used. Those skilled in the art will be able to select specific methods, elution conditions, and chromatographic columns according to compound structures and experimental results. In addition, it is also possible to use pure optically active starting materials or reagents with a known configuration to obtain any enantiomers or diastereomers of the compounds described in the present invention by stereoorganic synthesis.

[0047] Многие геометрические изомеры олефинов, двойные связи C=N и т.п. также могут присутствовать в соединениях, описанных в данном документе, и все такие стабильные изомеры рассматриваются в настоящем изобретении. Когда описанное в данном документе соединение содержит этиленовую двойную связь, такая двойная связь включает Е- и Z-геометрические изомеры, если не указано иное.[0047] Many geometric isomers of olefins, C=N double bonds, and the like. may also be present in the compounds described herein, and all such stable isomers are contemplated in the present invention. When a compound described herein contains an ethylene double bond, such double bond includes the E and Z geometric isomers, unless otherwise indicated.

[0048] Термин «таутомер» относится к изомеру функциональной группы, получаемому в результате быстрого перемещения атома между двумя положениями в молекуле. Соединение по настоящему изобретению может проявлять таутомеризм. Таутомерные соединения могут находится в двух или более взаимно преобразуемых формах. Прототропный таутомер образуется в результате переноса ковалентно связанных атомов водорода между двумя атомами. Таутомер в общем случае существует в равновесной форме. При попытке выделения одного таутомера обычно образуется смесь, физические и химические свойства которой согласуются со смесью соединений. Положение равновесия зависит от внутримолекулярных химических свойств. Например, для многих алифатических альдегидов и кетонов, таких как ацетальдегид, доминантным является кетонный тип; а для фенолов доминантным является енольный тип. Все таутомерные формы соединений включены в настоящее изобретение.[0048] The term "tautomer" refers to an isomer of a functional group resulting from the rapid movement of an atom between two positions in a molecule. The compound of the present invention may exhibit tautomerism. Tautomeric compounds may be in two or more interconvertible forms. A prototropic tautomer is formed by the transfer of covalently bonded hydrogen atoms between two atoms. The tautomer generally exists in an equilibrium form. When attempting to isolate one tautomer, a mixture is usually formed, the physical and chemical properties of which are consistent with the mixture of compounds. The equilibrium position depends on intramolecular chemical properties. For example, for many aliphatic aldehydes and ketones, such as acetaldehyde, the ketone type is dominant; and for phenols, the enol type is dominant. All tautomeric forms of the compounds are included in the present invention.

[0049] В примерах настоящего изобретения протоны могут занимать два или более положений циклической формы гетероциклической кольцевой системы, например, 1Н- и 3Н-имидазол, 1Н-, 2Н- и 4Н-1,2,4-триазол, 1H- и 2Н-изоиндол и 1H- и 2Н-пиразол. Таутомерные формы могут находиться в равновесии или быть стерически зафиксированы в одной форме посредством подходящей замены, например,[0049] In examples of the present invention, protons can occupy two or more positions of the cyclic form of the heterocyclic ring system, for example, 1H- and 3H-imidazole, 1H-, 2H- and 4H-1,2,4-triazole, 1H- and 2H- isoindole and 1H- and 2H-pyrazole. The tautomeric forms may be in equilibrium or be sterically fixed in one form through an appropriate substitution, for example,

[0050]

[0051] Вследствие резонанса атом водорода на атоме азота может быть расположен на любом из трех атомов азота триазола, таким образом, их названия различаются, но фактически эти три формы представляют одно и то же соединение.[0051] Due to resonance, the hydrogen atom on the nitrogen atom can be located on any of the three nitrogen atoms of triazole, thus their names differ, but in fact these three forms represent the same compound.

[0052] Как пример, соединение, представленное следующей формулой, может существовать в форме следующих таутомеров, которые все входят в объем соединения по настоящему изобретению:[0052] As an example, the compound represented by the following formula may exist in the form of the following tautomers, all of which are within the scope of the compound of the present invention:

[0053]

[0053]

[0054] Термин «фармацевтическая композиция» относится к смеси одного или более соединений, описанных в данном документе, или их физиологически/фармацевтически приемлемых солей или пролекарств, и других химических компонентов. Другие химические компоненты могут представлять собой, например, физиологически/фармацевтически приемлемые носители и эксципиенты. Целью фармацевтической композиции является облегчение введения соединения в организм.[0054] The term "pharmaceutical composition" refers to a mixture of one or more of the compounds described herein, or their physiologically/pharmaceutically acceptable salts or prodrugs, and other chemical components. Other chemical components may be, for example, physiologically/pharmaceutically acceptable carriers and excipients. The purpose of a pharmaceutical composition is to facilitate the administration of a compound to the body.

[0055] Термин «сольват» относится к соединению по настоящему изобретению или его соли, содержащим стехиометрический или нестехиометрический растворитель, связанный посредством межмолекулярных нековалентных сил. Когда растворителем является вода, сольват называется гидратом.[0055] The term "solvate" refers to a compound of the present invention, or a salt thereof, containing a stoichiometric or non-stoichiometric solvent bound through intermolecular non-covalent forces. When the solvent is water, the solvate is called a hydrate.

[0056] Термин «пролекарство» можно преобразовать в соединение по настоящему изобретению, имеющее биологическую активность в физиологических условиях, или посредством сольволиза. Пролекарство по настоящему изобретению получают путем модификации функциональных групп в соединении, а модифицирующий фрагмент можно удалять посредством традиционных операций или in vivo, так, чтобы получить родительское соединение. Пролекарство включает соединение, образованное путем соединения фрагмента с гидроксильной группой или аминогруппой в соединении по настоящему изобретению. Когда пролекарство соединения по настоящему изобретению вводят субъекту-млекопитающему происходит диссоциация пролекарства с образованием свободной гидроксильной или аминогруппы.[0056] The term "prodrug" can be converted to a compound of the present invention having biological activity under physiological conditions, or by solvolysis. The prodrug of the present invention is obtained by modifying the functional groups in the connection, and the modifying fragment can be removed through conventional operations or in vivo, so as to obtain the parent compound. A prodrug includes a compound formed by joining a moiety with a hydroxyl group or an amino group in a compound of the present invention. When a prodrug of a compound of the present invention is administered to a mammalian subject, the prodrug dissociates to form a free hydroxyl or amino group.

[0057] Соединение по настоящему изобретению может содержать неприродное соотношение атомных изотопов на одном или более атомах, составляющих соединение. Например, соединение может быть помечено радиоактивным изотопом, таким как тритий (³Н), йод-125 (¹²⁵I) или С-14 (¹⁴С). Трансформация всех изотопных композиций соединений по настоящему изобретению, радиоактивных или нет, включена в объем настоящего изобретения.[0057] The compound of the present invention may contain an unnatural ratio of atomic isotopes on one or more of the atoms constituting the compound. For example, a compound may be labeled with a radioactive isotope such as tritium ( ³ H), iodine-125 ( ¹²⁵ I), or C-14 ( ¹⁴ C). Transformation of all isotopic compositions of the compounds of the present invention, radioactive or not, is included within the scope of the present invention.

[0058] Термин «эксципиент» относится к фармацевтически приемлемому инертному ингредиенту. Примеры «эксципиентов» включают, но не ограничиваются этим, связующие вещества, разрыхлители, смазывающие вещества, глиданты, стабилизаторы, наполнители, разбавители и т.п. Эксципиенты могут улучшать свойства в терминах обработки фармацевтического состава, т.е. позволять составу быть более стабильным в случае прямого прессования за счет повышения текучести и/или адгезии. Примерами типичных «фармацевтически приемлемых носителей», подходящих для вышеуказанных составов, являются сахара, такие как лактоза, сахароза, маннит и сорбит; крахмалы, такие как кукурузный крахмал, крахмал тапиоки и картофельный крахмал; целлюлоза и ее производные, такие как карбоксиметилцеллюлоза натрия, этилцеллюлоза и метилцеллюлоза; фосфаты кальция, такие как дикальцийфосфат и трикальцийфосфат; сульфат натрия; сульфат кальция; поливинилпирролидон; поливиниловый спирт; стеариновая кислота; соли стеариновой кислоты и щелочноземельных металлов, такие как стеарат магния и стеарат кальция; стеариновая кислота; растительные масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, кунжутное масло, оливковое масло и кукурузное масло; неионные, катионные и анионные поверхностно-активные вещества; полимеры этиле нгликоля; жирные спирты; и гидролизаты твердых составляющих злаковых и другие нетоксичные совместимые наполнители, связующие вещества, разрыхлители, буферы, консерванты, антиоксиданты, смазывающие вещества, красители и другие эксципиенты, обычно используемые в фармацевтических составах.[0058] The term "excipient" refers to a pharmaceutically acceptable inert ingredient. Examples of "excipients" include, but are not limited to, binders, disintegrants, lubricants, glidants, stabilizers, fillers, diluents, and the like. Excipients can improve properties in terms of pharmaceutical formulation processing, i.e. allow the composition to be more stable in the case of direct compression by increasing fluidity and/or adhesion. Examples of typical "pharmaceutically acceptable carriers" suitable for the above formulations are sugars such as lactose, sucrose, mannitol and sorbitol; starches such as corn starch, tapioca starch and potato starch; cellulose and its derivatives such as sodium carboxymethylcellulose, ethylcellulose and methylcellulose; calcium phosphates such as dicalcium phosphate and tricalcium phosphate; sodium sulfate; calcium sulfate; polyvinylpyrrolidone; polyvinyl alcohol; stearic acid; salts of stearic acid and alkaline earth metals such as magnesium stearate and calcium stearate; stearic acid; vegetable oils such as peanut oil, cottonseed oil, sesame oil, olive oil and corn oil; nonionic, cationic and anionic surfactants; ethylene glycol polymers; fatty alcohols; and hydrolysates of cereal solids and other non-toxic compatible excipients, binders, disintegrants, buffers, preservatives, antioxidants, lubricants, colorants and other excipients commonly used in pharmaceutical formulations.

[0059] В соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения соединения по настоящему изобретению и/или их композиция могут эффективно ингибировать активность фермента АТХ, обладают преимуществами лучшей печеночной метаболической стабильности и сердечной безопасности и имеют лучшие фармакокинетические свойства, более высокую воздействующую дозу in vivo, большее T_1/2, меньшие дозировку и частоту введения и лучшее соблюдение приема, за счет чего имеют широкие перспективы применения в производстве лекарственных средств для лечения связанных с АТХ заболеваний.[0059] According to an embodiment of the present invention, the compounds of the present invention and/or composition thereof can effectively inhibit ATC enzyme activity, have the advantages of better hepatic metabolic stability and cardiac safety, and have better pharmacokinetic properties, higher in vivo acting dose, greater T _1/2 , lower dosage and frequency of administration, and better adherence to the intake, due to which they have broad prospects for use in the manufacture of drugs for the treatment of ATC-related diseases.

[0060] Дополнительные аспекты и преимущества настоящего изобретения будут частично приведены в следующем описании, а часть из них станут очевидными из следующего описания или могут стать понятными посредством реализации настоящего изобретения.[0060] Additional aspects and advantages of the present invention will be set forth in part in the following description, and some of them will become apparent from the following description or may become clear by carrying out the present invention.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВBRIEF DESCRIPTION OF GRAPHICS

[0061] На Фиг. 1 приведена диаграмма, иллюстрирующая изменение массы тела животного после введения в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения; и[0061] In FIG. 1 is a diagram illustrating the change in body weight of an animal after administration according to an embodiment of the present invention; and

[0062] На Фиг. 2 приведена диаграмма, иллюстрирующая изменения концентрации TGFβ1 в легочной ткани и жидкости бронхоальвеолярного лаважа после введения в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения.[0062] In FIG. 2 is a graph illustrating changes in TGFβ1 concentration in lung tissue and bronchoalveolar lavage fluid following administration according to an embodiment of the present invention.

ОПИСАНИЕ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ DESCRIPTION OF EMBODIMENTS

[0063] Решения по настоящему изобретению будут объяснены ниже в сочетании с примерами. Специалистам в данной области техники будет понятно, что следующие примеры используются просто для иллюстрации настоящего изобретения, и их не следует воспринимать как ограничивающие объем настоящего изобретения. Методики и условия, которые явным образом не указаны, представляют собой методики или условия, описанные в литературе известного уровня техники, или соответствуют инструкциям к продукту. В случае, когда не указан производитель, реагенты или инструменты все представляют собой традиционные продукты, являющиеся коммерчески доступными.[0063] Solutions of the present invention will be explained below in conjunction with examples. Those skilled in the art will appreciate that the following examples are used merely to illustrate the present invention and should not be taken as limiting the scope of the present invention. Methods and conditions that are not explicitly stated are the methods or conditions described in the literature of the prior art, or correspond to the instructions for the product. In the case where the manufacturer is not indicated, the reagents or tools are all conventional products that are commercially available.

[0064] Если не указано иное, структуры соединений по настоящему изобретению определены методом ядерного магнитного резонанса (ЯМР) и/или масс-спектрометрии (МС). Единица ЯМР-сдвига составляет 10^-6 (м.д.). Растворителем для ЯМР-измерений является дейтерированный диметилсульфоксид, дейтерированный хлороформ, дейтерированный метанол и т.д., а внутренним стандартом является тетраметилсилан (ТМС).[0064] Unless otherwise indicated, the structures of the compounds of the present invention were determined by nuclear magnetic resonance (NMR) and/or mass spectrometry (MS). The NMR shift unit is 10 ^-6 (ppm). The solvent for NMR measurements is deuterated dimethyl sulfoxide, deuterated chloroform, deuterated methanol, etc., and the internal standard is tetramethylsilane (TMS).

[0065] Сокращения в настоящем изобретении определены следующим образом:[0065] Abbreviations in the present invention are defined as follows:

[0066] водн.: водный раствор[0066] aq.: aqueous solution

[0067] диоксан: 1,4-диоксан[0067] dioxane: 1,4-dioxane

[0068] ДМФА: N,N-диметилформамид[0068] DMF: N,N-dimethylformamide

[0069] Т3Р: раствор пропилфосфонового ангидрида, т.е. 2,4,6-трипропил-1,3,5,2,4,6-триоксатрифосфин-2,4,6-триоксид[0069] T3P: propylphosphonic anhydride solution, i. 2,4,6-tripropyl-1,3,5,2,4,6-trioxatrifosphine-2,4,6-trioxide

[0070] Н: эквивалентная концентрация, например, 1 Н хлористоводородная кислота обозначает 1 моль/л раствор хлористоводородной кислоты[0070] H: equivalent concentration, e.g. 1 N hydrochloric acid means 1 mol/l hydrochloric acid solution

[0071] NMM: N-метилморфолин[0071] NMM: N-methylmorpholine

[0072] ДИПЭА: диизопропилэтиламин, т.е. N,N-диизопропилэтиламин[0072] DIPEA: diisopropylethylamine, i.e. N,N-diisopropylethylamine

[0073] ВЭЖХ: высокоэффективная жидкостная хроматография[0073] HPLC: high performance liquid chromatography

[0074] СЖХ: сверхкритическая жидкостная хроматография[0074] SLC: supercritical liquid chromatography

[0075] ДМСО: диметилсульфоксид[0075] DMSO: dimethyl sulfoxide

[0076] NADPH: восстановленный кофермент II[0076] NADPH: reduced coenzyme II

[0077] ГЭПЭС: (4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфоновоя кислота)[0077] HEPES: (4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid)

[0078] ЭГТА: этиленгликоль-бис(2-аминоэтилэфир)-N,N,N',N'-тетрауксусная кислота[0078] EGTA: ethylene glycol-bis(2-aminoethylether)-N,N,N',N'-tetraacetic acid

[0079] IC₅₀: Полуингибирующая концентрация, которая относится к концентрации, при которой достигается половина максимального ингибирующего эффекта.[0079] IC ₅₀ : Semi-inhibitory concentration, which refers to the concentration at which half of the maximum inhibitory effect is achieved.

[0080] Если не указано иное, соединения, проиллюстрированные в данном документе, названы и пронумерованы с помощью ChemBioDraw Ultra 13.0.[0080] Unless otherwise indicated, the compounds illustrated in this document are named and numbered using ChemBioDraw Ultra 13.0.

[0081] Пример 1: Получение целевого соединения I-1[0081] Example 1: Obtaining the target compound I-1

[0082] 2-(2-(1H-1,2,3-триазол-4-ил)этокси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)пропан-1-он (целевое соединение I-1)[0082] 2-(2-(1H-1,2,3-triazol-4-yl)ethoxy)-1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)- 5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)propan-1-one (target compound I-1)

[0083]

[0083]

[0084] Схема синтеза целевого соединения I-1 проиллюстрирована ниже:[0084] The scheme for the synthesis of the target compound I-1 is illustrated below:

[0085] Этап 1: Синтез трет-бутил 2-(бут-3-ин-1-илокси)пропаноата (1С)[0085] Step 1: Synthesis of tert-butyl 2-(but-3-yn-1-yloxy)propanoate (1C)

[0086]

[0087] При температуре 0°С 3-бутин-1-ол (15 г, 214 ммоль) добавляли в дихлорметан (300 мл), а затем последовательно добавляли тетрабутиламмония гидросульфат (7,27 г, 21,40 ммоль), гидроксид натрия (300 мл, 3,57 ммоль, 40% водн.) и трет-бутил 2-бромпропионат (49,2 г, 235 ммоль). Затем смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разводили водой (300 мл), а затем экстрагировали дихлорметаном (200 мл × 3). Органические слои объединяли с получением неочищенного продукта, которые разделяли и очищали с помощью силикагелевой колонки (петролейный эфир) с получение бесцветного маслянистого соединения, трет-бутил 2-(бут-3-ин-1-илокси)пропаноата (1С) (35 г, выход 82%).[0087] At a temperature of 0°C, 3-butyn-1-ol (15 g, 214 mmol) was added to dichloromethane (300 ml), and then tetrabutylammonium hydrogen sulfate (7.27 g, 21.40 mmol), sodium hydroxide were added successively (300 ml, 3.57 mmol, 40% aq.) and tert-butyl 2-bromopropionate (49.2 g, 235 mmol). The mixture was then slowly warmed to room temperature and stirred at room temperature for 2 hours. The reaction mixture was diluted with water (300 ml) and then extracted with dichloromethane (200 ml×3). The organic layers were combined to give the crude product, which was separated and purified with a silica gel column (petroleum ether) to give a colorless oily compound, t-butyl 2-(but-3-yn-1-yloxy)propanoate (1C) (35 g, yield 82%).

[0088] Этап 2: Синтез трет-бутил 2-(2-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)этокси)пропаноата (1D)[0088] Step 2: Synthesis of tert-butyl 2-(2-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)ethoxy)propanoate (1D)

[0089]

[0090] В условиях азотной защиты трет-бутил 2-(бут-3-ин-1-илокси)пропаноат (50 г, 252 ммоль) и йодид меди (I) (2,4 г, 12,6 ммоль) добавляли в перемешанный раствор N,N-диметилформамида (300 мл)/метанола (30 мл) с последующим добавлением триметилсилилазида (43,6 г, 378 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали при 90°С в течение 18 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разделяли и очищали с помощью силикагелевой колонки (петролейный эфир: этил ацетат (об./об.) = от 10:1 до 5:1) с получением указанного в заголовке соединения трет-бутил 2-(2-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)этокси)пропаноата (1D) (40 г, 166 ммоль, выход 65,7%).[0090] Under nitrogen protection conditions, tert-butyl 2-(but-3-yn-1-yloxy)propanoate (50 g, 252 mmol) and copper (I) iodide (2.4 g, 12.6 mmol) were added to a stirred solution of N,N-dimethylformamide (300 ml)/methanol (30 ml) followed by the addition of trimethylsilyl azide (43.6 g, 378 mmol) at 0°C. The mixture was stirred at 90°C for 18 h, then cooled to room temperature and concentrated under reduced pressure. The residue was separated and purified with a silica gel column (petroleum ether: ethyl acetate (v/v) = 10:1 to 5:1) to give the title compound tert-butyl 2-(2-(1H-1, 2,3-triazol-5-yl)ethoxy)propanoate (1D) (40 g, 166 mmol, 65.7% yield).

[0091] ЖХ-МС, M/Z (ИЭР): 242,2 (М+1)[0091] LC-MS, M/Z (ESI): 242.2 (M+1)

[0092] Этап 3: Синтез 2-(2-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)этокси)пропановой кислоты (1Е)[0092] Step 3: Synthesis of 2-(2-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)ethoxy)propanoic acid (1E)

[0093]

[0094] При 0°С трифторуксусную кислоту (150 мл) добавляли в раствор трет-бутил 2-(2-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)этокси)пропаноата (50 г, 207 ммоль) в дихлорметане (150 мл), а потом перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали с получением неочищенного продукта 2-(2-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)этокси)пропановой кислоты трифторацетата (62 г, 207 ммоль, выход 100%), который непосредственно использовали на следующем этапе реакции.[0094] At 0°C, trifluoroacetic acid (150 mL) was added to a solution of tert-butyl 2-(2-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)ethoxy)propanoate (50 g, 207 mmol) in dichloromethane (150 ml) and then stirred at room temperature for 2 hours. The reaction mixture was concentrated to give the crude product 2-(2-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)ethoxy)propanoic acid trifluoroacetate ( 62 g, 207 mmol, 100% yield, which was directly used in the next reaction step.

[0095] Этап 4: Синтез 2-(2-(1Н- 1,2,3-триазол-4-ил)этокси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)пропан-1-она (соединение I-1)[0095] Step 4: Synthesis of 2-(2-(1H-1,2,3-triazol-4-yl)ethoxy)-1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl )amino)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)propan-1-one (compound I-1)

[0096]

[0097] При комнатной температуре N-(2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-2-амина гидрохлорид (его синтез описан в патентной заявке WO 2014110000 A1) (7 г, 21,5 ммоль) добавляли в ДМФ (40 мл) с последующим последовательным добавлением 2-(2-(1Н-1,2,3-триазол-4-ил)этокси)пропановой кислоты трифторацетата (9,66 г, 32,3 ммоль) и ДИЭА (27,8 г, 215 ммоль). 2,4,6-трипропил-1,3,5,2,4,6-триоксатрифосфин-2,4,6-триоксид (10,3 г, 32,3 ммоль, 50% раствор ДМФ) добавляли при 0°С. Затем смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Завершение реакции определяли с помощью ТСХ, реакционный раствор, перемешивая, вливали в дистиллированную воду (150 мл), а осажденное твердое вещество разбивали с ацетонитрилом (50 мл) и фильтровали с получением твердого соединения 2-(2-(1H-1,2,3-триазол-4-ил)этокси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)пропан-1-она (8,1 г, выход 90%).[0097] At room temperature, N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-2-amine hydrochloride (its synthesis is described in patent application WO 2014110000 A1) (7 g, 21.5 mmol) was added to DMF (40 ml) followed by successive addition of 2-(2-(1H-1,2,3-triazol-4-yl)ethoxy)propanoic trifluoroacetate acid (9.66 g, 32.3 mmol) and DIEA (27.8 g, 215 mmol). 2,4,6-tripropyl-1,3,5,2,4,6-trioxatrifosphine-2,4,6-trioxide (10.3 g, 32.3 mmol, 50% DMF solution) was added at 0°C . The mixture was then slowly warmed to room temperature and stirred at room temperature for 12 hours. The completion of the reaction was determined by TLC, the reaction solution was poured into distilled water (150 ml) while stirring, and the precipitated solid was partitioned with acetonitrile (50 ml) and filtered to give a solid compound 2-(2-(1H-1,2,3-triazol-4-yl)ethoxy)-1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino )-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)propan-1-one (8.1 g, 90% yield).

[0098] ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,17 (м, 1H), 7,45 (с, 1H), 7,19-7,09 (м, 4Н), 5,53 (с, 1H), 4,73-4,51 (м, 5Н), 4,18-4,15 (м, 1H), 3,73-3,68 (м, 2Н), 3,53-3,29 (м, 2Н), 3,03-2,77 (м, 4Н), 1,19-1,15 (м, 3Н).[0098] ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 8.17 (m, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.19-7.09 (m, 4H), 5.53 (s , 1H), 4.73-4.51 (m, 5H), 4.18-4.15 (m, 1H), 3.73-3.68 (m, 2H), 3.53-3.29 (m, 2H), 3.03-2.77 (m, 4H), 1.19-1.15 (m, 3H).

[0099] ЖХ-МС, M/Z (ИЭР): 420,3 (М+1).[0099] LC-MS, M/Z (ESI): 420.3 (M+1).

[00100] Пример 2: Получение целевого соединения I-1R[00100] Example 2: Preparation of the target compound I-1R

[00101] (R)-2-(2-(1Н-1,2,3-триазол-4-ил)этокси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)пропан-1-он (целевое соединение I-1R)[00101] (R)-2-(2-(1H-1,2,3-triazol-4-yl)ethoxy)-1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl )amino)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)propan-1-one (target compound I-1R)

[00102]

[00102]

[00103] Схема синтеза целевого соединения I-1R проиллюстрирована ниже:[00103] The scheme for the synthesis of the target compound I-1R is illustrated below:

[00104] Этап 1: Синтез (R)-2-(бут-3-ин-1-илокси)пропановой кислоты (2С)[00104] Step 1: Synthesis of (R)-2-(but-3-yn-1-yloxy)propanoic acid (2C)

[00105]

[00106] 3-бутиновый-1 спирт (350 мг, 5 ммоль) добавляли в ДМФ (5 мл), охлаждали до 0°С с последующим добавлением NaH (400 мг, 10 ммоль, 60%), перемешиванием в течение 30 мин. Затем добавляли исходный материал (S)-2-бромпропановую кислоту (700 мг, 4,5 ммоль) с последующим перемешиванием при 0°С в течение 5 ч. Затем в реакционный раствор добавляли воду (10 мл) при 0°С и доводили рН до 1-2 с помощью хлористоводородной кислоты (1 Н). Реакционный раствор экстрагировали этилацетатом (20 мл × 3); а органические фазы объединяли, сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Остаток разделяли и очищали с помощью силикагелевой колонки (петролейный эфир : этилацетат (об./об.) = 1:1) с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-желтой жидкости (R)-2-(бут-3-ин-1-илокси)пропановой кислоты (002С) (390 мг, выход 60%).[00106] 3-Butyne-1 alcohol (350 mg, 5 mmol) was added to DMF (5 ml), cooled to 0°C followed by addition of NaH (400 mg, 10 mmol, 60%), stirring for 30 min. Then, (S)-2-bromopropanoic acid (700 mg, 4.5 mmol) starting material was added, followed by stirring at 0° C. for 5 hours. Then, water (10 ml) was added to the reaction solution at 0° C. and the pH was adjusted to 1-2 with hydrochloric acid (1 N). The reaction solution was extracted with ethyl acetate (20 ml×3); and the organic phases were combined, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated. The residue was separated and purified with a silica gel column (petroleum ether : ethyl acetate (v/v) = 1:1) to give the title compound as a light yellow liquid (R)-2-(but-3-yn- 1-yloxy)propanoic acid (002С) (390 mg, 60% yield).

[00107] Этап 2: Синтез (R)-2-(бут-3-ин-1-илокси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)пропан-1-она (2Е)[00107] Step 2: Synthesis of (R)-2-(but-3-yn-1-yloxy)-1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)-5 ,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)propan-1-one (2E)

[00108]

[00109] Исходный материал (R)-2-(бут-3-ин-1-илокси)пропановую кислоту (56 мг, 4 ммоль) добавляли в ДМФ (2 мл) при комнатной температуре с последующим последовательным добавлением исходных материалов Н-(2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-2-амина (100 мг, 4 ммоль), 2-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилуронийгексафторфосфата (180 мг, 4,4 ммоль) и триэтиламина (82 мг, 8 ммоль). Затем реакционный раствор нагревали до 50°С и перемешивали в течение 15 ч. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры, добавляли воду (6 мл) и экстрагировали этилацетатом (5 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили безводным сульфатом натрия и концентрировали. Остаток разделяли и очищали с помощью силикагелевой колонки (дихлорметан : метанол (об./об.) = 10:1) с получением указанного в заголовке соединения, которое представляло собой желтое твердое вещество (R)-2-(бут-3-ин-1-илокси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)пропан-1-она (80 мг, 53,9%).[00109] Starting material (R)-2-(but-3-yn-1-yloxy)propanoic acid (56 mg, 4 mmol) was added to DMF (2 ml) at room temperature, followed by sequential addition of starting materials H-( 2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidine-2-amine (100 mg, 4 mmol), 2-(7-azabenzotriazole -1-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluronium hexafluorophosphate (180 mg, 4.4 mmol) and triethylamine (82 mg, 8 mmol). Then, the reaction solution was heated to 50° C. and stirred for 15 hours. The reaction solution was cooled to room temperature, water (6 ml) was added, and extracted with ethyl acetate (5 ml×3). The organic phases were combined, dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated. The residue was separated and purified with a silica gel column (dichloromethane : methanol (v/v)=10:1) to give the title compound which was a yellow solid (R)-2-(but-3-yn- 1-yloxy)-1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl )propan-1-one (80 mg, 53.9%).

[00110] Этап 3: Синтез (R)-2-(2-(1Н-1,2,3-триазол-4-ил)этокси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)пропан-1-она (соединение I-1R)[00110] Step 3: Synthesis of (R)-2-(2-(1H-1,2,3-triazol-4-yl)ethoxy)-1-(2-((2,3-dihydro-1H-indene -2-yl)amino)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)propan-1-one (compound I-1R)

[00111]

[00111]

[00112] При комнатной температуре исходный материал (R)-2-(бут-3-ин-1-илокси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)пропан-1-он (80 мг, 0,21 ммоль) добавляли в ДМФ (2 мл) и метанол (0,5 мл) с последующим последовательным добавлением триметилсилилазида (37 мг, 0,32 ммоль) и йодида меди (5 мг, 0,025 ммоль) в условиях азотной защиты. Реакционный раствор нагревали до 80°С и перемешивали в течение 15 ч. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры, добавляли воду (8 мл) и экстрагировали этилацетатом (5 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили безводным сульфатом натрия и концентрировали. Остаток разделяли и очищали с помощью силикагелевой колонки (дихлорметан : метанол (об./об.) = 10:1) с получением указанного в заголовке соединения, желтого твердого вещества (R)-2-(2-(1Н-1,2,3-триазол-4-ил)этокси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)пропан-1-она (8 мг, 8,9%).[00112] At room temperature, starting material (R)-2-(but-3-yn-1-yloxy)-1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)- 5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)propan-1-one (80 mg, 0.21 mmol) was added in DMF (2 ml) and methanol (0.5 ml ) followed by the sequential addition of trimethylsilyl azide (37 mg, 0.32 mmol) and copper iodide (5 mg, 0.025 mmol) under nitrogen protection. The reaction solution was heated to 80° C. and stirred for 15 hours. Then, the reaction solution was cooled to room temperature, water (8 ml) was added and extracted with ethyl acetate (5 ml×3). The organic phases were combined, dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated. The residue was separated and purified with a silica gel column (dichloromethane : methanol (v/v) = 10:1) to give the title compound, a yellow solid (R)-2-(2-(1H-1.2, 3-triazol-4-yl)ethoxy)-1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d ]pyrimidin-6-yl)propan-1-one (8 mg, 8.9%).

[00113] ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 8,31 (д, 1H), 7,61 (с, 1H), 7,57 (с, 1Н), 7,22 (м, 2Н), 7,16 (м, 2Н), 4,69-4,61 (м, 4Н), 4,55-4,53 (м, 1H), 4,30-4,28 (м, 1H), 3,68-3,64 (м, 2Н), 3,33-3,17 (м, 2Н), 2,91-2,85 (м, 4Н), 1,28-1,19 (м, 3Н).[00113] ¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.31 (d, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.22 (m, 2H) , 7.16 (m, 2H), 4.69-4.61 (m, 4H), 4.55-4.53 (m, 1H), 4.30-4.28 (m, 1H), 3 .68-3.64 (m, 2H), 3.33-3.17 (m, 2H), 2.91-2.85 (m, 4H), 1.28-1.19 (m, 3H) .

[00114] ЖХ-МС, M/Z (ИЭР): 420,2 (М+1)[00114] LC-MS, M/Z (ESI): 420.2 (M+1)

[00115] Пример 3: Получение целевого соединения I-1R и целевого соединения I-1S[00115] Example 3: Preparation of Target Compound I-1R and Target Compound I-1S

[00116] (R)-2-(2-(1Н-1,2,3-триазол-4-ил)этокси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)пропан-1-он (целевое соединение I-1R)[00116] (R)-2-(2-(1H-1,2,3-triazol-4-yl)ethoxy)-1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl )amino)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)propan-1-one (target compound I-1R)

[00117] (S)-2-(2-(1Н-1,2,3-триазол-4-ил)этокси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)пропан-1-он (целевое соединение I-1S)[00117] (S)-2-(2-(1H-1,2,3-triazol-4-yl)ethoxy)-1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl )amino)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)propan-1-one (target compound I-1S)

[00118] Целевые соединения получали с помощью СЖХ-разделения.[00118] Target compounds were obtained using SLC separation.

[00119] Рацемат[00119] Racemate

2-(2-(1H-1,2,3-триазол-4-ил)этокси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)пропан-1-она (10,1 г, 24,1 ммоль) разделяли с помощью СЖХ в следующих условиях разделения: тип колонки: Chiralpak IC-350 * 4,6 мм, 3 мкм; подвижная фаза: подвижная фаза А представляла собой СО₂, подвижная фаза В представляла собой 40% этанол (содержащий 0,05% диэтиламина); градиентное элюирование: 40% этанол в СО₂ (содержащий 0,05% диэтиламина); скорость потока: 3 мл/мин; длина волны: 220 нм; температура колонки: 35°С; обратное давление: 100 бар. Были получены один изомер (R)-2-(2-(1Н-1,2,3-триазол-4-ил)этокси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)пропан-1-она (целевое соединение I-1R) (3,51 г, 100% э. и., выход 34,7%) и один изомер (S)-2-(2-(1Н-1,2,3-триазол-4-ил)этокси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)пропан-1-она (целевое соединение I-1S) (3,8 г, 97% э.п., выход 37,6%).2-(2-(1H-1,2,3-triazol-4-yl)ethoxy)-1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)-5.7 -dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)propan-1-one (10.1 g, 24.1 mmol) was separated by SLC under the following separation conditions: column type: Chiralpak IC- 350*4.6mm, 3um; mobile phase: mobile phase A was CO ₂ , mobile phase B was 40% ethanol (containing 0.05% diethylamine); gradient elution: 40% ethanol in CO ₂ (containing 0.05% diethylamine); flow rate: 3 ml/min; wavelength: 220 nm; column temperature: 35°C; back pressure: 100 bar. One isomer (R)-2-(2-(1H-1,2,3-triazol-4-yl)ethoxy)-1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2- yl)amino)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)propan-1-one (Target I-1R) (3.51 g, 100% e. and ., yield 34.7%) and one isomer (S)-2-(2-(1H-1,2,3-triazol-4-yl)ethoxy)-1-(2-((2,3-dihydro -1H-inden-2-yl)amino)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)propan-1-one (target compound I-1S) (3.8 d, 97% e.p., 37.6% yield.

[00120] Посредством сравнения с помощью хиральной ВЭЖХ определили, что при СЖХ-разделении были получены две абсолютные конфигурации соединения.[00120] By comparison using chiral HPLC, it was determined that two absolute configurations of the compound were obtained by SLC separation.

[00121] Целевое соединение I-1R:[00121] Target Compound I-1R:

[00122] ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 14,7 (шир. с, 1H), 8,32 (шир. с, 0,6Н), 8,27 (шир. с, 0,4Н), 7,67 (шир. с, 1H), 7,55 (т, J=12,0 Гц, 1H), 7,21-7,13 (м, 4Н), 4,72-4,59 (м, 3Н), 4,55-4,49 (м, 1H), 4,45-4,44 (м, 1Н), 4,33-4,27 (м, 1H), 3,70-3,64 (м, 2Н), 3,28-3,18 (м, 2Н), 2,93-2,85 (м, 4Н), 1,27 (дд, J=8,0, 4,0 Гц, 3Н).[00122] ¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 14.7 (br s, 1H), 8.32 (br s, 0.6H), 8.27 (br s, 0.4H ), 7.67 (br s, 1H), 7.55 (t, J=12.0 Hz, 1H), 7.21-7.13 (m, 4H), 4.72-4.59 ( m, 3H), 4.55-4.49 (m, 1H), 4.45-4.44 (m, 1H), 4.33-4.27 (m, 1H), 3.70-3, 64 (m, 2H), 3.28-3.18 (m, 2H), 2.93-2.85 (m, 4H), 1.27 (dd, J=8.0, 4.0 Hz, 3H).

[00123] ЖХ-МС, M/Z (ИЭР): 420,3 (М+1).[00123] LC-MS, M/Z (ESI): 420.3 (M+1).

[00124] Время удержания: 2,82 мин[00124] Hold time: 2.82 min

[00125] Целевое соединение I-1S:[00125] Target Compound I-1S:

[00126] ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 14,5 (шир. с, 1Н), 8,32 (шир. с, 0,6Н), 8,27 (шир. с, 0,4Н), 7,63 (шир. с, 1Н), 7,55 (т, J=12,0 Гц, 1Н), 7,22-7,13 (м, 4Н), 4,72-4,59 (м, 3Н), 4,54-4,49 (м, 1H), 4,45-4,44 (м, 1Н), 4,33-4,27 (м, 1H), 3,68-3,64 (м, 2Н), 3,32-3,22 (м, 2Н), 2,92-2,87 (м, 4Н), 1,27 (дд, J=8,0, 4,0 Гц, 3Н).[00126] ¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 14.5 (br s, 1H), 8.32 (br s, 0.6H), 8.27 (br s, 0.4H ), 7.63 (br s, 1H), 7.55 (t, J=12.0 Hz, 1H), 7.22-7.13 (m, 4H), 4.72-4.59 ( m, 3H), 4.54-4.49 (m, 1H), 4.45-4.44 (m, 1H), 4.33-4.27 (m, 1H), 3.68-3, 64 (m, 2H), 3.32-3.22 (m, 2H), 2.92-2.87 (m, 4H), 1.27 (dd, J=8.0, 4.0 Hz, 3H).

[00127] ЖХ-МС, M/Z (ИЭР): 420,3 (М+1).[00127] LC-MS, M/Z (ESI): 420.3 (M+1).

[00128] Время удержания: 4,48 мин[00128] Hold time: 4.48 min

[00129] Пример 4: Получение целевого соединения I-2[00129] Example 4: Preparation of target compound I-2

[00130] 2-((1-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)этан-1-он (целевое соединение I-2)[00130] 2-((1-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)-1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden- 2-yl)amino)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)ethan-1-one (target compound I-2)

[00131]

[00131]

[00132] Схема синтеза целевого соединения I-2 проиллюстрирована ниже:[00132] The scheme for the synthesis of the target compound I-2 is illustrated below:

[00133] Этап 1: Синтез трет-бутил 2-(пент-4-ин-2-илокси)ацетата (3А)[00133] Step 1: Synthesis of tert-butyl 2-(pent-4-yn-2-yloxy)acetate (3A)

[00134]

[00135] Исходный материал 4-пентин-2-ол (84,0 г, 1,0 моль) добавляли в 1000 мл сухого тетрагидрофурана и охлаждали до 0°С, добавляли 60% NAH (80,0 г, 2,0 моль), перемешивали смесь в течение 30 мин, добавляли исходный материал т-бутил бромацетат (234,0 г, 1,2 моль) при 0°С, полученную в результате смесь естественным образом нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 16 ч. В реакционный раствор добавляли воду (2000 мл) при 0°С, рН доводили до 1-2 с помощью 1 Н хлористоводородной кислоты и экстрагировали этилацетатом (2000 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Остаток разделяли и очищали с помощью силикагелевой колонки (петролейный эфир : этилацетат (об./об.) = 3:1) с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-желтой жидкости, трет-бутил 2-(пент-4-ин-2-илокси)ацетата (3А) (180 г, выход 65%).[00135] Starting material 4-pentyn-2-ol (84.0 g, 1.0 mol) was added to 1000 ml dry tetrahydrofuran and cooled to 0°C, 60% NAH (80.0 g, 2.0 mol) was added ), stirred the mixture for 30 minutes, added starting material t-butyl bromoacetate (234.0 g, 1.2 mol) at 0°C, the resulting mixture was naturally warmed to room temperature and stirred for 16 hours. the reaction solution was added water (2000 ml) at 0°C, the pH was adjusted to 1-2 with 1 N hydrochloric acid, and extracted with ethyl acetate (2000 ml×3). The organic phases were combined, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated. The residue was separated and purified with a silica gel column (petroleum ether : ethyl acetate (v/v)=3:1) to give the title compound as a light yellow liquid, t-butyl 2-(pent-4-yn- 2-yloxy)acetate (3A) (180 g, 65% yield).

[00136] Этап 2: Синтез трет-бутил 2-((1-(1H-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)ацетата (3В)[00136] Step 2: Synthesis of tert-butyl 2-((1-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)acetate (3B)

[00137]

[00138] Исходный материал трет-бутил 2-(пент-4-ин-2-илокси)ацетат (40,0 г, 0,2 моль) добавляли в 400 мл ДМФ и 50 мл метанола при комнатной температуре. В условиях азотной защиты добавляли триметилсилилазид (34,6 г, 0,3 моль) и йодид меди (8 г, 0,4 моль), соответственно. Затем реакционный раствор нагревали до 90°С и перемешивали в течение 15 ч. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры, затем добавляли воду (1000 мл) и экстрагировали этилацетатом (1200 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили безводным сульфатом натрия и концентрировали. Остаток разделяли и очищали с помощью силикагелевой колонки (петролейный эфир : этилацетат (об./об.) = 1:1) с получением указанного в заголовке соединения, желтой жидкости трет-бутил 2-((1-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)ацетата (26,0 г, 53%).[00138] Starting material tert-butyl 2-(pent-4-yn-2-yloxy)acetate (40.0 g, 0.2 mol) was added in 400 ml DMF and 50 ml methanol at room temperature. Under nitrogen protection, trimethylsilyl azide (34.6 g, 0.3 mol) and copper iodide (8 g, 0.4 mol) were added, respectively. Then, the reaction solution was heated to 90° C. and stirred for 15 hours. The reaction solution was cooled to room temperature, then water (1000 ml) was added and extracted with ethyl acetate (1200 ml×3). The organic phases were combined, dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated. The residue was separated and purified with a silica gel column (petroleum ether : ethyl acetate (v/v) = 1:1) to give the title compound, a yellow liquid tert-butyl 2-((1-(1H-1.2, 3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)acetate (26.0 g, 53%).

[00139] Этап 3: Синтез 2-((1-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)уксусной кислоты (3С)[00139] Step 3: Synthesis of 2-((1-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)acetic acid (3C)

[00140]

[00141] При комнатной температуре исходный материал трет-бутил 2-((1-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)ацетат (26,0 г, 0,11 моль) добавляли в 300 мл ДМФ и 100 мл воды, а затем добавляли NaOH (8,6 г, 0,22 моль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 40 ч и затем добавляли воду (300 мл). Реакционный раствор экстрагировали этилацетатом (150 мл × 3), а водную фазу концентрировали. Остаток разделяли и очищали с помощью силикагелевой колонки (дихлорметан : метанол (об./об.) = 5:1) с получением указанного в заголовке соединения, желтой жидкости 2-((1-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)уксусной кислоты (20 г, 85%).[00141] At room temperature starting material tert-butyl 2-((1-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)acetate (26.0 g, 0.11 mol) was added to 300 ml DMF and 100 ml water, and then NaOH (8.6 g, 0.22 mol) was added. The mixture was stirred at room temperature for 40 h and then water (300 ml) was added. The reaction solution was extracted with ethyl acetate (150 ml×3) and the aqueous phase was concentrated. The residue was separated and purified with a silica gel column (dichloromethane : methanol (v/v)=5:1) to give the title compound, a yellow liquid 2-((1-(1H-1,2,3-triazole- 5-yl)propan-2-yl)oxy)acetic acid (20 g, 85%).

[00142] Этап 4: Синтез 2-((1-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)этан-1-она (целевое соединение I-2)[00142] Step 4: Synthesis of 2-((1-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)-1-(2-((2,3-dihydro- 1H-inden-2-yl)amino)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)ethan-1-one (target compound I-2)

[00143]

[00143]

[00144] Исходный материал 2-((1-(1H-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)уксусную кислоту (20 г, 0,11 моль) добавляли в 400 мл ДМФ при комнатной температуре. N-(2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[3,4-d] пиримидин-2-амин (его синтез описан в патентной заявке WO 201411000 A1) (12 г, 47,6 ммоль), Т3Р (45,4 г, 71,4 ммоль, 50% раствор этилацетата) и NMM (24 г, 238 ммоль) добавляли при 0°С. Смесь естественным образом нагревали до комнатной температуры и затем перемешивали в течение 16 ч. Реакционный раствор фильтровали. В фильтрат добавляли воду (300 мл) и экстрагировали этилацетатом (1500 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили безводным сульфатом натрия и концентрировали. Остаток разделяли и очищали с помощью силикагелевой колонки (дихлорметан : метанол (об./об.) = 10:1) с получением указанного в заголовке соединения, желтого твердого вещества 2-((1-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)этан-1-она (19,3 г, 92%).[00144] Starting material 2-((1-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)acetic acid (20 g, 0.11 mol) was added in 400 ml DMF at room temperature. N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-2-amine (its synthesis is described in patent application WO 201411000 A1) (12 g, 47.6 mmol), T3P (45.4 g, 71.4 mmol, 50% ethyl acetate solution) and NMM (24 g, 238 mmol) were added at 0°C. The mixture was naturally warmed to room temperature and then stirred for 16 hours. The reaction solution was filtered. Water (300 ml) was added to the filtrate and extracted with ethyl acetate (1500 ml×3). The organic phases were combined, dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated. The residue was separated and purified with a silica gel column (dichloromethane : methanol (v/v) = 10:1) to give the title compound, a yellow solid 2-((1-(1H-1,2,3-triazole -5-yl)propan-2-yl)oxy)-1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3, 4-d]pyrimidin-6-yl)ethan-1-one (19.3 g, 92%).

[00145] ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 8,30 (д, 1H), 7,64 (шир., 1Н), 7,57 (т, 1H), 7,22-7,20 (м, 2Н), 7,16-7,12 (м, 2Н), 4,65-4,59 (м, 3Н), 4,52 (с, 1H), 4,42 (с, 1H), 4,25-4,17 (м, 2Н), 3,87-3,81 (м, 1H), 3,27-3,21 (м, 2Н), 2,90-2,85 (м, 4Н), 1,19 (т, 3Н).[00145] ¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.30 (d, 1H), 7.64 (br, 1H), 7.57 (t, 1H), 7.22-7.20 (m, 2H), 7.16-7.12 (m, 2H), 4.65-4.59 (m, 3H), 4.52 (s, 1H), 4.42 (s, 1H), 4.25-4.17(m, 2H), 3.87-3.81(m, 1H), 3.27-3.21(m, 2H), 2.90-2.85(m, 4H ), 1.19 (t, 3H).

[00146] ЖХ-МС, M/Z (ИЭР): 420,2 (М+1)[00146] LC-MS, M/Z (ESI): 420.2 (M+1)

[00147] Пример 5: Получение целевого соединения I-2S[00147] Example 5: Preparation of the target compound I-2S

[00148] (S)-2-((1-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)этан-1-он (целевое соединение I-2 S)[00148] (S)-2-((1-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)-1-(2-((2,3-dihydro- 1H-inden-2-yl)amino)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)ethan-1-one (target compound I-2 S)

[00149]

[00149]

[00150] Схема синтеза целевого соединения I-2S проиллюстрирована ниже:[00150] The scheme for the synthesis of the target compound I-2S is illustrated below:

[00151] Этап 1: Синтез (S)-5-(триметилсилил)пент-4-ин-2-ола (4А)[00151] Step 1: Synthesis of (S)-5-(trimethylsilyl)pent-4-yn-2-ol (4A)

[00152]

[00153] Раствор тетрагидрофурана и (триметилсилил)ацетилида лития (0,5 М, 52 мл) добавляли в трехгорлую колбу и охлаждали до -70°С в условиях азотной защиты с последующим добавлением раствора тетрагидрофурана и трифторида бора (50%, 2,4 мл) и медленного по каплям добавления (S)-пропиленоксида (1,5 г). После покапельного добавления смесь перемешивали, поддерживая температуру, в течение 1 часа, а затем добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл), чтобы погасить реакцию. После нагревания до комнатной температуры раствор разделяли на органическую фазу и водную фазу. Органическую фазу сушили и концентрировали с получением неочищенного продукта (2,0 г), который непосредственно использовали на следующем этапе реакции.[00153] A solution of tetrahydrofuran and lithium (trimethylsilyl)acetylide (0.5 M, 52 ml) was added to a three-necked flask and cooled to -70°C under nitrogen protection, followed by the addition of a solution of tetrahydrofuran and boron trifluoride (50%, 2.4 ml) and slow dropwise addition of (S)-propylene oxide (1.5 g). After the dropwise addition, the mixture was stirred while maintaining the temperature for 1 hour, and then a saturated aqueous ammonium chloride solution (10 ml) was added to quench the reaction. After warming to room temperature, the solution was separated into an organic phase and an aqueous phase. The organic phase was dried and concentrated to give a crude product (2.0 g) which was used directly in the next reaction step.

[00154] Этап 2: Синтез трет-бутил (S)-2-((5-(триметилсилил)пент-4-ин-2-ил)окси)ацетата (4В)[00154] Step 2: Synthesis of tert-butyl (S)-2-((5-(trimethylsilyl)pent-4-yn-2-yl)oxy)acetate (4B)

[00155]

[00156] Исходный материал (S)-5-(триметилсилил)пент-4-ин-2-ол (2,0 г, 12,8 ммоль) добавляли в 10 мл сухого тетрагидрофурана, охлаждали до 0°С, доводили 60% NaH (0,49 г, 12,8 ммоль), перемешивали в течение 30 минут, а затем добавляли исходный материал трет-бутил 2-бромацетат (3,0 г, 15,4 ммоль) при 0°С. Смесь естественным образом нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 16 ч. В реакционный раствор добавляли воду (20 мл) при 0°С, рН доводили до 12 с помощью 1 H хлористоводородной кислоты и экстрагировали этилацетатом (20 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Остаток разделяли и очищали с помощью силикагелевой колонки (петролейный эфир : этилацетат (об./об.) = 3:1) с получением указанного в заголовке соединения, светло-желтой жидкости трет-бутил (S)-2-((5-(триметилсилил)пент-4-ин-2-ил)окси)ацетата (4В) (2,1 г, выход 60,7%).[00156] Starting material (S)-5-(trimethylsilyl)pent-4-yn-2-ol (2.0 g, 12.8 mmol) was added to 10 ml dry tetrahydrofuran, cooled to 0°C, adjusted to 60% NaH (0.49 g, 12.8 mmol) was stirred for 30 minutes and then the starting material tert-butyl 2-bromoacetate (3.0 g, 15.4 mmol) was added at 0°C. The mixture was naturally warmed to room temperature and stirred for 16 hours. Water (20 ml) was added to the reaction solution at 0°C, the pH was adjusted to 12 with 1 N hydrochloric acid, and extracted with ethyl acetate (20 ml×3). The organic phases were combined, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated. The residue was separated and purified with a silica gel column (petroleum ether : ethyl acetate (v/v) = 3:1) to give the title compound, a light yellow liquid tert-butyl (S)-2-((5-( trimethylsilyl)pent-4-yn-2-yl)oxy)acetate (4B) (2.1 g, 60.7% yield).

[00157] Этап 3: Синтез трет-бутил (S)-2-((1-(4-(триметилсилил)-1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)ацетата (4С)[00157] Step 3: Synthesis of tert-butyl (S)-2-((1-(4-(trimethylsilyl)-1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)acetate (4C)

[00158]

[00159] При комнатной температуре исходный материал трет-бутил (S)-2-((5-(триметилсилил)пент-4-ин-2-ил)окси)ацетат (1,0 г, 3,7 ммоль) добавляли в 10 мл ДМФ и 5 мл метанола с последующим добавлением триметилсилилазида (0,64 г, 5,5 ммоль) и йодида меди (0,14 г, 0,74 ммоль) в условиях азотной защиты, соответственно. Реакционный раствор нагревали до 90°С и перемешивали в течение 15 ч. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры, добавляли воду (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (20 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили безводным сульфатом натрия и концентрировали. Остаток разделяли и очищали с помощью силикагелевой колонки (петролейный эфир : этилацетат (об./об.) = 1:1) с получением указанного в заголовке соединения, желтой жидкости трет-бутил (S)-2-((1-(4-(триметилсилил)-1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)ацетата (0,6 г, 51,8%).[00159] At room temperature, starting material tert-butyl (S)-2-((5-(trimethylsilyl)pent-4-yn-2-yl)oxy)acetate (1.0 g, 3.7 mmol) was added to 10 ml DMF and 5 ml methanol followed by the addition of trimethylsilyl azide (0.64 g, 5.5 mmol) and copper iodide (0.14 g, 0.74 mmol) under nitrogen protection, respectively. The reaction solution was heated to 90° C. and stirred for 15 hours. The reaction solution was cooled to room temperature, water (50 ml) was added and extracted with ethyl acetate (20 ml×3). The organic phases were combined, dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated. The residue was separated and purified with a silica gel column (petroleum ether : ethyl acetate (v/v) = 1:1) to give the title compound, a yellow liquid tert-butyl (S)-2-((1-(4- (trimethylsilyl)-1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)acetate (0.6 g, 51.8%).

[00160] Этап 4: Синтез (S)-2-((1-(4-(триметилсилил)-1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)уксусной кислоты (4D)[00160] Step 4: Synthesis of (S)-2-((1-(4-(trimethylsilyl)-1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)acetic acid (4D )

[00161]

[00162] При комнатной температуре исходный материал трет-бутил (S)-2-((1-(4-(триметилсилил)-1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)ацетат (0,6 г, 1,9 ммоль) добавляли в раствор хлорида водорода и 1,4-диоксана (4 М, 10 мл), перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и концентрировали до сухости с получением неочищенного продукта (S)-2-((1-(4-(триметилсилил)-1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)уксусной кислоты (0,5 г, 100%), который непосредственно использовали на следующем этапе реакции.[00162] At room temperature, starting material tert-butyl (S)-2-((1-(4-(trimethylsilyl)-1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy) acetate (0.6 g, 1.9 mmol) was added to a solution of hydrogen chloride and 1,4-dioxane (4 M, 10 ml), stirred at room temperature for 2 h and concentrated to dryness to give the crude product (S) -2-((1-(4-(trimethylsilyl)-1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)acetic acid (0.5 g, 100%), which is directly used in the next step of the reaction.

[00163] Этап 5: Синтез (S)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)-2-((1-(4-(триметилсилил)-1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)этан-1-она (4Е)[00163] Step 5: Synthesis of (S)-1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d ]pyrimidin-6-yl)-2-((1-(4-(trimethylsilyl)-1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)ethan-1-one (4E )

[00164]

[00164]

[00165] Исходный материал (S)-2-((1-(4-(триметилсилил)-1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)уксусную кислоту (0,5 г, 1,9 ммоль) добавляли в 4 мл ДМФ с последующим добавлением N-(2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-2-амина (0,7 г, 2,1 ммоль), Т3Р (1,5 г, 2,3 ммоль, 50% раствор ДМФ) и диизопропилэтиламина (0,5 г, 3,8 ммоль) при 0°С. Смесь естественным образом нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 16 ч. Реакционный раствор фильтровали, а в фильтрат добавляли воду (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (15 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили безводным сульфатом натрия и концентрировали с получением неочищенного продукта (S)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)-2-((1-(4-(триметилсилил)-1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)этан-1-она (0,3 г).[00165] Starting material (S)-2-((1-(4-(trimethylsilyl)-1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)acetic acid (0.5 g, 1.9 mmol) was added in 4 ml DMF followed by N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidine -2-amine (0.7 g, 2.1 mmol), T3P (1.5 g, 2.3 mmol, 50% DMF solution) and diisopropylethylamine (0.5 g, 3.8 mmol) at 0°C . The mixture was naturally warmed to room temperature and stirred for 16 hours. The reaction solution was filtered, and water (30 ml) was added to the filtrate and extracted with ethyl acetate (15 ml×3). The organic phases were combined, dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated to give the crude product (S)-1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)-5,7-dihydro-6H- pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)-2-((1-(4-(trimethylsilyl)-1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy) ethane-1-one (0.3 g).

[00166] Этап 6: Синтез (S)-2-((1-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)этан-1-она (целевое соединение I-2S)[00166] Step 6: Synthesis of (S)-2-((1-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)-1-(2-((2, 3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)ethan-1-one (target compound I-2S)

[00167]

[00168] Неочищенный продукт (S)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)-2-((1-(4-(триметилсилил)-1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)этан-1-он (0,3 г) добавляли в тетрагидрофуран (10 мл) с последующим добавлением тригидрата фторида тетрабутиламмония (0,4 г, 1,2 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч, добавляли воду (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (20 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили безводным сульфатом натрия и концентрировали. Остаток разделяли с помощью препаративной хроматографии и лиофилизировали с получением (S)-2-((1-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)этан-1-она (68,3 мг, выход за два этапа 8,4%).[00168] Crude product (S)-1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidine -6-yl)-2-((1-(4-(trimethylsilyl)-1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)ethan-1-one (0.3 d) was added to tetrahydrofuran (10 ml) followed by the addition of tetrabutylammonium fluoride trihydrate (0.4 g, 1.2 mmol). The mixture was stirred at room temperature for 5 h, water (20 ml) was added and extracted with ethyl acetate (20 ml x 3). The organic phases were combined, dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated. The residue was separated by preparative chromatography and lyophilized to give (S)-2-((1-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)-1-(2-( (2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)ethan-1-one (68.3 mg , output for two stages 8.4%).

[00169] ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 8,30 (д, 1H), 7,64 (шир., 1H), 7,57 (т, 1H), 7,22-7,20 (м, 2Н), 7,16-7,12 (м, 2Н), 4,65-4,59 (м, 3Н), 4,52 (с, 1H), 4,42 (с, 1H), 4,25-4,17 (м, 2Н), 3,87-3,81 (м, 1Н), 3,27-3,21 (м, 2Н), 2,90-2,85 (м, 4Н), 1,19 (т, 3Н).[00169] ¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.30 (d, 1H), 7.64 (br, 1H), 7.57 (t, 1H), 7.22-7.20 (m, 2H), 7.16-7.12 (m, 2H), 4.65-4.59 (m, 3H), 4.52 (s, 1H), 4.42 (s, 1H), 4.25-4.17 (m, 2H), 3.87-3.81 (m, 1H), 3.27-3.21 (m, 2H), 2.90-2.85 (m, 4H ), 1.19 (t, 3H).

[00170] ЖХ-МС, M/Z (ИЭР): 420,4 (М+1)[00170] LC-MS, M/Z (ESI): 420.4 (M+1)

[00171] Пример 6: Получение целевого соединения I-2R[00171] Example 6: Preparation of the target compound I-2R

[00172] (R)-2-((1-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)этан-1-он (целевое соединение I-2R)[00172] (R)-2-((1-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)-1-(2-((2,3-dihydro- 1H-inden-2-yl)amino)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)ethan-1-one (target compound I-2R)

[00173] Этап 1: Синтез (R)-5-(триметилсилил)пент-4-ин-2-ола (5А)[00173] Step 1: Synthesis of (R)-5-(trimethylsilyl)pent-4-yn-2-ol (5A)

[00174]

[00175] В условиях азотной защиты триметилсилилацетилен (51,7 г) и диэтиловый эфир (600 мл) добавляли в трехгорлую колбу, охлаждали до -78°С с последующим медленным по каплям добавлением н-бутиллития (2,5 М, 217 мл). После завершения покапельного добавления проводили реакцию смеси в течение 1 часа, поддерживая температуру на -78°C, затем добавляли раствор тетрагидрофурана и трифторида бора (50%, 30 мл) и медленно по каплям добавляли (R)-пропиленоксид (30 г). После завершения покапельного добавления в течение 1 часа поддерживали температуру, перемешивая, и добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (300 мл), чтобы погасить реакцию. После нагревания до комнатной температуры реакционный раствор разделяли на слои, а органическую фазу сушили, смешивали с силикагелем и затем разделяли и очищали с помощью силикагелевой колонки (петролейный эфир : этилацетат (об./об.) = 10:1) с получением продукта в виде светло-желтой жидкости соединения (R)-5-(триметилсилил)пент-4-ин-2-ола (34 г, выход 42,1%).[00175] Under nitrogen protection, trimethylsilylacetylene (51.7 g) and diethyl ether (600 ml) were added to a three-necked flask, cooled to -78°C followed by slow dropwise addition of n-butyllithium (2.5 M, 217 ml) . After completion of the dropwise addition, the mixture was reacted for 1 hour while maintaining the temperature at -78°C, then a solution of tetrahydrofuran and boron trifluoride (50%, 30 ml) was added, and (R)-propylene oxide (30 g) was slowly added dropwise. After completion of the dropwise addition, the temperature was maintained for 1 hour with stirring, and a saturated aqueous sodium bicarbonate solution (300 ml) was added to quench the reaction. After warming to room temperature, the reaction solution was separated into layers, and the organic phase was dried, mixed with silica gel, and then separated and purified using a silica gel column (petroleum ether : ethyl acetate (v/v) = 10:1) to obtain the product as light yellow liquid of compound (R)-5-(trimethylsilyl)pent-4-yn-2-ol (34 g, 42.1% yield).

[00176] Этап 2: Синтез трет-бутил (R)-2-((5-(триметилсилил)пент-4-ин-2-ил)окси)ацетата (5В)[00176] Step 2: Synthesis of tert-butyl (R)-2-((5-(trimethylsilyl)pent-4-yn-2-yl)oxy)acetate (5B)

[00177]

[00178] Исходный материал (R)-5-(триметилсилил)пент-4-ин-2-ол (34 г, 218 ммоль) добавляли в 340 мл сухого тетрагидрофурана и охлаждали до 0°С, с последующим добавлением 60% NaH (10,44 г, 261 ммоль), перемешиванием в течение 30 мин и добавлением исходного материала трет-бутил 2-бромацетата (46,7 г, 239 ммоль) при 0°С.Смесь естественным образом нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 16 ч. При 0°С в реакционный раствор добавляли метанол (20 мл), смешивали с силикагелем, концентрировали и разделяли и очищали с помощью силикагелевой колонки (петролейный эфир : этилацетат (об./об.) = 10:1) с получением светло-желтой жидкости соединения трет-бутил (R)-2-((5-(триметилсилил)пент-4-ин-2-ил)окси)ацетата (5В) (50 г, выход 85%).[00178] Starting material (R)-5-(trimethylsilyl)pent-4-yn-2-ol (34 g, 218 mmol) was added to 340 ml of dry tetrahydrofuran and cooled to 0°C, followed by the addition of 60% NaH ( 10.44 g, 261 mmol), stirring for 30 min and adding starting material tert-butyl 2-bromoacetate (46.7 g, 239 mmol) at 0°C. The mixture was naturally warmed to room temperature and stirred for 16 h. At 0°C, methanol (20 ml) was added to the reaction solution, mixed with silica gel, concentrated and separated, and purified using a silica gel column (petroleum ether: ethyl acetate (v/v) = 10:1) to obtain light yellow liquid of tert-butyl (R)-2-((5-(trimethylsilyl)pent-4-yn-2-yl)oxy)acetate (5B) (50 g, 85% yield).

[00179] Этап 3: Синтез трет-бутил (R)-2-(пент-4-ин-2-илокси)ацетата (5С)[00179] Step 3: Synthesis of tert-butyl (R)-2-(pent-4-yn-2-yloxy)acetate (5C)

[00180]

[00181] При комнатной температуре исходный материал трет-бутил (R)-2-((5-(триметилсилил)пент-4-ин-2-ил)окси)ацетата (50 г, 185 ммоль) добавляли в 500 мл тетрагидрофурана, а затем добавляли фторид тетрабутиламмония (53,2 г, 203 ммоль). Реакцию смеси проводили при комнатной температуре в течение 15 ч, смешивали с силикагелем и концентрировали. Остаток разделяли и очищали с помощью силикагелевой колонки (петролейный эфир : этилацетат (об./об.) = 10:1) с получением указанного в заголовке желтого жидкого соединения трет-бутил (R)-2-(пент-4-ин-2-илокси)ацетата (27 г, 73,7%).[00181] At room temperature, the starting material tert-butyl (R)-2-((5-(trimethylsilyl)pent-4-yn-2-yl)oxy)acetate (50 g, 185 mmol) was added to 500 ml of tetrahydrofuran, and then tetrabutylammonium fluoride (53.2 g, 203 mmol) was added. The reaction of the mixture was carried out at room temperature for 15 hours, mixed with silica gel and concentrated. The residue was separated and purified with a silica gel column (petroleum ether : ethyl acetate (v/v) = 10:1) to give the title yellow liquid compound tert-butyl (R)-2-(pent-4-yn-2 -yloxy)acetate (27 g, 73.7%).

[00182] Этап 4: Синтез трет-бутил (R)-2-((1-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)ацетата (5D)[00182] Step 4: Synthesis of tert-butyl (R)-2-((1-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)acetate (5D)

[00183]

[00184] Исходный материал трет-бутил (R)-2-(пент-4-ин-2-илокси)ацетат (27 г, 136 ммоль) добавляли в 150 мл ДМФ и 20 мл метанола при комнатной температуре. Затем в условиях азотной защиты добавляли триметилсилилазид (23,53 г, 204 ммоль) и йодид меди (2,08 г, 10,89 ммоль), соответственно. Реакционный раствор нагревали до 90°С и перемешивали в течение 15 ч. Затем реакционный раствор охлаждали до 40°С, концентрировали до сухости, разводили дихлорметаном, смешивали с силикагелем и концентрировали. Остаток разделяли и очищали с помощью силикагелевой колонки (петролейный эфир : этилацетат (об./об.) = 1:1) с получением желтого маслянистого соединения трет-бутил (R)-2-((1-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)ацетата (14 г, 42,6%).[00184] Starting material tert-butyl (R)-2-(pent-4-yn-2-yloxy)acetate (27 g, 136 mmol) was added in 150 ml DMF and 20 ml methanol at room temperature. Trimethylsilyl azide (23.53 g, 204 mmol) and copper iodide (2.08 g, 10.89 mmol) were then added under nitrogen protection, respectively. The reaction solution was heated to 90°C and stirred for 15 hours Then the reaction solution was cooled to 40°C, concentrated to dryness, diluted with dichloromethane, mixed with silica gel and concentrated. The residue was separated and purified with a silica gel column (petroleum ether : ethyl acetate (v/v) = 1:1) to give a yellow oily compound tert-butyl (R)-2-((1-(1H-1.2, 3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)acetate (14 g, 42.6%).

[00185] Этап 5: Синтез (R)-2-((1-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)уксусной кислоты (5Е)[00185] Step 5: Synthesis of (R)-2-((1-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)acetic acid (5E)

[00186]

[00187] Исходный материал трет-бутил (R)-2-((1-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)ацетат (14 г, 58 ммоль) добавляли в раствор хлорида водорода и 1,4-диоксана (4 моль/л, 70 мл) при комнатной температуре, перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч и фильтровали. Твердое вещество промывали метил-трет-бутиловым эфиром и сушили с получением белого твердого вещества (R)-2-((1-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)уксусной кислоты (9,2 г, 86%).[00187] Starting material tert-butyl (R)-2-((1-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)acetate (14 g, 58 mmol) was added into a solution of hydrogen chloride and 1,4-dioxane (4 mol/l, 70 ml) at room temperature, stirred at room temperature for 16 h and filtered. The solid was washed with methyl tert-butyl ether and dried to give a white solid (R)-2-((1-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)acetic acids (9.2 g, 86%).

[00188] Этап 6: Синтез (R)-2-((1-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)этан-1-она (целевое соединение I-2R)[00188] Step 6: Synthesis of (R)-2-((1-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)-1-(2-((2, 3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)ethan-1-one (target compound I-2R)

[00189]

[00190] Исходные материалы (R)-2-((1-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)уксусную кислоты (9,41 г, 42,5 ммоль) и N-(2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-2-амин (9,2 г, 28,3 ммоль) добавляли в 1000 мл ДМФ с последующим добавлением Т3Р (50% раствор ДМФ) (27 г, 42,5 ммоль) и диизопропилэтиламина (21,95 г, 170 ммоль) при 0°С. Смесь естественным образом нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 16 ч. Реакционный раствор фильтровали, в фильтрат добавляли воду (3 мл) и концентрировали до сухости. Остаток разделяли и очищали с помощью силикагелевой колонки (дихлорметан : метанол (об./об.) = 10:1) с получением 12 г неочищенного продукта. Неочищенный продукт разбивали со 120 мл изопропилацетата в течение 10 ч, фильтровали и сушили с получением (R)-2-((1-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)этан-1-она (7,8 г, выход 65,7%).[00190] Starting materials (R)-2-((1-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)acetic acid (9.41 g, 42.5 mmol ) and N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-2-amine (9.2 g, 28.3 mmol) was added in 1000 ml DMF followed by the addition of T3P (50% DMF solution) (27 g, 42.5 mmol) and diisopropylethylamine (21.95 g, 170 mmol) at 0°C. The mixture was naturally warmed to room temperature and stirred for 16 hours. The reaction solution was filtered, water (3 ml) was added to the filtrate and concentrated to dryness. The residue was separated and purified with a silica gel column (dichloromethane : methanol (v/v) = 10:1) to give 12 g of a crude product. The crude product was broken up with 120 ml of isopropyl acetate for 10 h, filtered and dried to give (R)-2-((1-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy) -1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)ethan-1 -one (7.8 g, 65.7% yield).

[00191] ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 8,30 (д, 1H), 7,64 (шир., 1Н), 7,57 (т, 1H), 7,22-7,20 (м, 2Н), 7,16-7,12 (м, 2Н), 4,65-4,59 (м, 3Н), 4,52 (с, 1Н), 4,42 (с, 1H), 4,25-4,17 (м, 2Н), 3,87-3,81 (м, 1H), 3,27-3,21 (м, 2Н), 2,90-2,85 (м, 4Н), 1,19 (т, 3Н).[00191] ¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.30 (d, 1H), 7.64 (br, 1H), 7.57 (t, 1H), 7.22-7.20 (m, 2H), 7.16-7.12 (m, 2H), 4.65-4.59 (m, 3H), 4.52 (s, 1H), 4.42 (s, 1H), 4.25-4.17(m, 2H), 3.87-3.81(m, 1H), 3.27-3.21(m, 2H), 2.90-2.85(m, 4H ), 1.19 (t, 3H).

[00192] ЖХ-МС, M/Z (ИЭР): 420,4 (М+1)[00192] LC-MS, M/Z (ESI): 420.4 (M+1)

[00193] Пример 7: Получение целевого соединения I-2S и целевого соединения I-2R[00193] Example 7: Preparation of Target Compound I-2S and Target Compound I-2R

[00194] Целевые соединения получали с помощью ВЭЖХ-разделения.[00194] Target compounds were obtained using HPLC separation.

[00195] Рацемат[00195] Racemate

2-((1-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амин о)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)этан-1-она (22 г, 52,5 ммоль) разделяли с помощью ВЭЖХ в следующих условиях разделения: тип колонки: Chiralpak ID (ID00CD-QG003) 4,6 мм, В. О. × 15 см л; подвижная фаза: 100% метанол; скорость потока: 1,0 мл/мин; длина волны: 254 нм; температура колонки: 35°C; обратное давление: 10 МПа. Соединения было получены в одной единственной конфигурации и записаны как пик 1 (7,0 г, 100% э. и., выход 63,6%) и пик 2 (9,9 г, 97% э. и., выход 90,0%), соответственно.2-((1-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)-1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl )amine o)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)ethan-1-one (22 g, 52.5 mmol) was separated by HPLC under the following separation conditions: column type: Chiralpak ID (ID00CD-QG003) 4.6 mm, V.O. × 15 cm L; mobile phase: 100% methanol; flow rate: 1.0 ml/min; wavelength: 254 nm; column temperature: 35°C; back pressure: 10 MPa. Compounds were made in one single configuration and reported as peak 1 (7.0 g, 100% ee, 63.6% yield) and peak 2 (9.9 g, 97% ee, 90 yield, 0%), respectively.

[00196] Путем сравнения времени удержания по данным СЖХ-анализа определили, что при ВЭЖХ-разделении были получены две абсолютные конфигурации соединения.[00196] By comparing retention times from SLC analysis, it was determined that two absolute compound configurations were obtained on HPLC separation.

[00197] Целевое соединение I-2S:[00197] Target Compound I-2S:

[00198] СЖХ-анализ: тип колонки: Chiralpak AY-3 50 × 4,6 мм В. Д., 3 мкм; подвижная фаза: этанол (содержащий 0,05% диэтиламина); градиентное элюирование: 60% этанол в CO₂ (содержащий 0,05% диэтиламина); скорость потока: 3,0 мл/мин; длина волны: 254 нм; температура колонки: 35°C; обратное давление: 100 бар;[00198] SLC analysis: column type: Chiralpak AY-3 50 x 4.6 mm ID, 3 µm; mobile phase: ethanol (containing 0.05% diethylamine); gradient elution: 60% ethanol in CO ₂ (containing 0.05% diethylamine); flow rate: 3.0 ml/min; wavelength: 254 nm; column temperature: 35°C; back pressure: 100 bar;

[00199] Время удержания: 0,964 мин.[00199] Retention time: 0.964 min.

[00200] Целевое соединение I-2R:[00200] Target Compound I-2R:

[00201] СЖХ-анализ: тип колонки: Chiralpak AY-3 50 × 4,6 мм В. Д., 3 мкм; подвижная фаза: этанол (содержащий 0,05% диэтиламина); градиентное элюирование: 60% этанол в СО₂ (содержащий 0,05% диэтиламина); скорость потока: 3,0 мл/мин; длина волны: 254 нм; температура колонки: 35°C; обратное давление: 100 бар;[00201] SLC analysis: column type: Chiralpak AY-3 50 x 4.6 mm ID, 3 µm; mobile phase: ethanol (containing 0.05% diethylamine); gradient elution: 60% ethanol in CO ₂ (containing 0.05% diethylamine); flow rate: 3.0 ml/min; wavelength: 254 nm; column temperature: 35°C; back pressure: 100 bar;

[00202] Время удержания: 2,118 мин.[00202] Retention time: 2.118 min.

[00203] По данным того же СЖХ-анализа время удержания для пика 1 составляло 1,006 мин, а время удержания для пика 1 составляло 2,205 мин. Посредством сравнения времени удержания определили, что пик 1 соответствует соединению I-2S, т.е. (S)-2-((1-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)этан-1-ону, а пик 2 соответствует соединению I-2R, т.е. (R)-2-((1-(1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пропан-2-ил)окси)-1-(2-((2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)амино)-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-d]пиримидин-6-ил)этан-1-ону.[00203] According to the same SLC analysis, the retention time for peak 1 was 1.006 minutes and the retention time for peak 1 was 2.205 minutes. By comparing the retention times, it was determined that peak 1 corresponds to the I-2S compound, i. e. (S)-2-((1-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)-1-(2-((2,3-dihydro-1H-indene -2-yl)amino)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)ethan-1-one, and peak 2 corresponds to compound I-2R, i.e. (R)-2-((1-(1H-1,2,3-triazol-5-yl)propan-2-yl)oxy)-1-(2-((2,3-dihydro-1H-indene -2-yl)amino)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl)ethan-1-one.

[00204] Пример 8: Контрольное соединение и его получение[00204] Example 8: Control Compound and Preparation

[00205] Контрольное соединение синтезировали в соответствии с патентной заявкой WO 2014110000 A1.[00205] The control compound was synthesized in accordance with patent application WO 2014110000 A1.

[00206] Контрольное соединение в тестовых примерах ниже представляет собой соединение, упоминаемое в примере 8.[00206] The control compound in the test cases below is the compound mentioned in Example 8.

[00207] Тестовый пример 1: Анализ ингибирования активности фермента аутотаксина (АТХ)[00207] Test Example 1: Autotaxin Enzyme (ATX) Activity Inhibition Assay

[00208] Ингибирующую активность соединений в отношении фермента аутотаксина выявляли, используя аналитический набор для скрининга ингибиторов аутотаксина (Cayman, 700580). Сначала тестовое соединение получали в виде 10 мМ маточного раствора в растворителе ДМСО, а затем маточный раствор разводили ДМСО до 8 градиентных концентраций. После этого 8 концентраций разводили аутотаксиновым аналитическим буфером (1×), предоставленном в наборе, до 19× рабочих растворов соединения (содержание ДМСО составляло 1,9%). Доставали аутотаксиновый аналитический реагент (10×) и разводили в 10 раз аутотаксиновым аналитическим буфером (1×). Доставали аутотаксиновый субстрат, растворяли путем добавления 1,2 мл аутотаксинового аналитического буфера (1×), равномерно смешивали и отстаивали при комнатной температуре. В 96-луночном планшете 150 мкл аутотаксинового аналитического буфера (1×), 10 мкл полученных и разведенных 19× рабочих растворов соединения, 10 мкл аутотаксинового аналитического реагента (1×) и 20 мкл растворенного аутотаксинового субстрата добавляли в каждую из лунок для каждой концентрации и равномерно смешивали. 96-Луночный планшет встряхивали в шейкере с постоянной температурой при 37°С и инкубировали в темноте в течение 30 мин, затем планшет доставали и помещали в микропланшетный ридер для считывания ОП405. Экспериментальные результаты вводили в программное обеспечение GraphPad Prism и рассчитывали IC₅₀ каждого соединения путем аппроксимации.[00208] The inhibitory activity of the compounds against the autotaxin enzyme was determined using the Autotaxin Inhibitor Screening Assay Kit (Cayman, 700580). First, the test compound was obtained as a 10 mM stock solution in DMSO solvent, and then the stock solution was diluted with DMSO to 8 gradient concentrations. Thereafter, 8 concentrations were diluted with autotaxin assay buffer (1×) provided in the kit to 19× compound working solutions (DMSO content was 1.9%). Autotaxin assay reagent (10x) was taken out and diluted 10-fold with autotaxin assay buffer (1x). The autotaxin substrate was taken out, dissolved by adding 1.2 ml of autotaxin assay buffer (1x), mixed uniformly and allowed to stand at room temperature. In a 96-well plate, 150 µl of autotaxin assay buffer (1×), 10 µl of prepared and 19× diluted compound working solutions, 10 µl of autotaxin assay reagent (1×), and 20 µl of dissolved autotaxin substrate were added to each of the wells for each concentration and mixed evenly. The 96-well plate was shaken in a constant temperature shaker at 37°C and incubated in the dark for 30 min, then the plate was taken out and placed in a microplate reader for reading OP405. The experimental results were entered into the GraphPad Prism software and the IC ₅₀ of each compound was calculated by approximation.

[00209]

[00209]

[00210] Экспериментальные результаты показали, что соединения по настоящему изобретению имеют хорошую ингибирующую активность в отношении фермента АТХ и могут эффективно ингибировать активность фермента АТХ.[00210] Experimental results have shown that the compounds of the present invention have good inhibitory activity against the ATC enzyme and can effectively inhibit the activity of the ATC enzyme.

[00211] Тестовый пример 2: Тест на стабильность с микросомами печени человека[00211] Test Example 2: Stability Test with Human Liver Microsomes

[00212] Тест на стабильность с микросомами печени человека проводили путем инкубации соединения и микросом печени человека in vitro. Сначала тестовое соединение получали в виде 10 мМ маточного раствора в растворителе ДМСО, а затем соединение разводили до 0,5 мМ ацетонитрилом. Микросомы печени человека (Corning) разводили ФСБ и получали в виде раствора микросомы/буфер, который использовали для разведения 0,5 мМ соединения до рабочего раствора. В рабочем растворе концентрация соединения составляла 1,5 мкМ, а концентрация микросом печени человека составляла 0,75 мг/мл. Брали многолуночный планшет с глубокими лунками, в каждую лунку последовательно добавляли 30 мкл рабочего раствора и 15 мкл предварительно нагретого раствора NADPH (6 мМ) для инициации реакции и инкубировали реакционную смесь при 37°С. Через 0, 5, 15, 30 и 45 мин инкубации в соответствующие лунки добавляли по 135 мкл ацетонитрила для терминации реакции. После терминации реакции ацетонитрилом в последний момент времени 45 мин планшет с глубокими лунками вортексно перемешивали в течение 10 мин (600 об/мин), а затем центрифугировали в течение 15 мин. После центрифугирования собирали супернатант и добавляли очищенную воду в соотношении 1:1 для проведения обнаружения методом ЖХ-МС/МС. Соответственно, в каждый момент времени получали соотношение площади пика соединения и площади пика внутреннего стандарта, а соотношения площади пика соединения в моменты 5, 15, 30 и 45 мин сравнивали с соотношением площади пика в момент 0 мин, чтобы рассчитать оставшееся процентное содержание соединения в каждый момент времени. T_1/2рассчитывали, используя Excel.[00212] A stability test with human liver microsomes was performed by in vitro incubation of the compound and human liver microsomes. First, the test compound was obtained as a 10 mM stock solution in DMSO solvent, and then the compound was diluted to 0.5 mM with acetonitrile. Human liver microsomes (Corning) were diluted with PBS and obtained as a microsome/buffer solution, which was used to dilute 0.5 mM compound to a working solution. In the working solution, the concentration of the compound was 1.5 μM, and the concentration of human liver microsomes was 0.75 mg/ml. A deep well multi-well plate was taken, 30 μl of working solution and 15 μl of pre-warmed NADPH solution (6 mM) were sequentially added to each well to initiate the reaction, and the reaction mixture was incubated at 37°C. After 0, 5, 15, 30, and 45 min of incubation, 135 µl of acetonitrile was added to the corresponding wells to terminate the reaction. After terminating the reaction with acetonitrile at the last time point of 45 min, the deep well plate was vortexed for 10 min (600 rpm) and then centrifuged for 15 min. After centrifugation, the supernatant was collected and purified water was added at a ratio of 1:1 to carry out detection by LC-MS/MS. Accordingly, the peak area ratio of the compound to the peak area of the internal standard was obtained at each time point, and the peak area ratios of the compound at 5, 15, 30, and 45 min were compared with the peak area ratio at 0 min to calculate the remaining percentage of the compound at each moment of time. T _1/2 was calculated using Excel.

[00213]

[00213]

[00214] По сравнению с контрольным соединением соединения по настоящему изобретению проявляли лучшую печеночную метаболическую стабильность, метаболизировались медленнее в организме человека и имели большее воздействие. Т_1/2стабильности в микросомах печени соединений по настоящему изобретению лучше, чем для контрольного соединения и даже может превышать значение для контрольного соединения в два раза. Соответственно, клиническую дозировку и частоту введения можно уменьшить, снизить токсические и побочные эффекты клинического введения и улучшить клиническое соблюдение приема.[00214] Compared to the control compound, the compounds of the present invention showed better hepatic metabolic stability, were metabolized more slowly in the human body, and had a greater effect. T _1/2 stability in liver microsomes of the compounds of the present invention is better than for the control compound and can even exceed the value for the control compound by two times. Accordingly, the clinical dosage and frequency of administration can be reduced, the toxic and side effects of clinical administration can be reduced, and clinical compliance can be improved.

[00215] Тестовый пример 3: Выявление ингибирующего эффекта соединений в отношении hERG с использованием полностью автоматического электрофизиологического метода фиксации потенциала QPatch[00215] Test Case 3: Detection of hERG Inhibitory Effect of Compounds Using QPatch Fully Automated Electrophysiological Potential Clamping Method

[00216] Полностью автоматический электрофизиологический метод фиксации потенциала QPatch использовали для выявления ингибирующего эффекта соединений в отношении hERG. Клетками, используемыми в этом тесте, была линия клеток СНО, трансфицированных кДНК hERG и стабильно экспрессирующих каналы hERG (предоставленная Sophion Bioscience, Дания), а номер пассажа был Р24. Клетки культивировали в среде, содержащей следующие компоненты (все приобретены у Invitrogen): среда Хэма F12, инактивированная фетальная бычья сыворотка (10% (об./об.)), гигромицин В (100 мкг/мл) и генетицин (100 мкг/мл). Клетки СНО hERG выращивали в чашке Петри, содержащей вышеуказанную среду, и культивировали в инкубаторе при 37°С, содержащем 5% CO₂.[00216] QPatch, a fully automatic electrophysiological potential clamping method, was used to detect the inhibitory effect of the compounds on hERG. The cell used in this assay was a CHO cell line transfected with hERG cDNA and stably expressing hERG channels (provided by Sophion Bioscience, Denmark) and the passage number was P24. Cells were cultured in medium containing the following components (all purchased from Invitrogen): F12 Ham's medium, inactivated fetal bovine serum (10% (v/v)), hygromycin B (100 μg/ml) and geneticin (100 μg/ml ). CHO hERG cells were grown in a Petri dish containing the above medium and cultured in an incubator at 37°C containing 5% CO ₂ .

[00217] Готовили внеклеточную жидкость (2 мМ CaCl₂, 1 мМ MgCl₂, 4 мМ KCl, 145 мМ NaCl, 10 мМ Glucose, 10 мМ ГЭПЭС, рН: около 7,4, осмотическое давление: около 305 мОсм) и внутриклеточную жидкость (5,374 мМ CaCl₂, 1,75 мМ MgCl₂, 120 мМ KCl, 10 мМ ГЭПЭС, 5 мМ ЭГТА, 4 мМ Na-АТФ, рН около 7,25, осмотическое давление около 295 мОсм).[00217] Extracellular fluid (2 mM CaCl ₂ , 1 mM MgCl ₂ , 4 mM KCl, 145 mM NaCl, 10 mM Glucose, 10 mM HEPES, pH: about 7.4, osmotic pressure: about 305 mOsm) and intracellular fluid were prepared (5.374 mM CaCl ₂ , 1.75 mM MgCl ₂ , 120 mM KCl, 10 mM HEPES, 5 mM EGTA, 4 mM Na-ATP, pH about 7.25, osmotic pressure about 295 mOsm).

[00218] Подлежащее тестированию соединение получали в виде 10 мМ маточного раствора в растворителе ДМСО, разводили соединение до 3 мМ, 1 мМ, 0,3 мМ и 0,1 мМ с помощью ДМСО, а затем разводили соединение до 30 мкМ, 10 мкМ, 3 мкМ, 1 мкМ, 0,3 мкМ и 0,1 мкМ внеклеточной жидкость так, что за исключением того, что конечная концентрация ДМСО в 30 мкМ растворе соединения составляла 0,3%, конечная концентрация ДМСО в растворах соединения всех других концентраций составляла 0,1%.[00218] The compound to be tested was obtained as a 10 mM stock solution in DMSO solvent, the compound was diluted to 3 mM, 1 mM, 0.3 mM and 0.1 mM with DMSO, and then the compound was diluted to 30 μM, 10 μM, 3 μM, 1 μM, 0.3 μM and 0.1 μM extracellular fluid such that, except that the final DMSO concentration in 30 μM compound solution was 0.3%, the final DMSO concentration in compound solutions of all other concentrations was 0 ,one%.

[00219] После расщепления и ресуспендирования клетки СНО hERG добавляли в полностью автоматическую систему QPatch (Sophion, Дания) и проводили тест в соответствии со следующей процедурой.[00219] After digestion and resuspension, hERG CHO cells were added to the fully automatic QPatch system (Sophion, Denmark) and tested according to the following procedure.

[00220] После достижения конфигурационного состояния разорванных цельных клеток на исходной стадии записывали цельноклеточный ток при комнатной температуре (около 25°С), и для обеспечения стабильности запись клеток проводили в течение по меньшей мере 120 секунд. Для теста отбирали стабильные клетки. Во время цельного теста фиксацию потенциала клеток проводили при -80 мВ, напряжение при фиксации потенциала клеток было деполяризовано до +20 мВ, чтобы активировать калиевые каналы hERG, а через 2,5 секунды напряжение при фиксации потенциала клеток составляло -50 мВ, чтобы устранить инактивацию и создать направленный наружу следовой ток. Пиковый следовой ток использовали в качестве значения тока hERG. Описанный выше режим подачи напряжения применяли к клетками для электрофизиологических тестов каждые 15 секунд. Внутриклеточную жидкость, содержащую 0,1% диметилсульфоксида (растворитель) добавляли в клетки, чтобы установить базовую линию, а затем давали току установиться в течение 3 мин. После добавления раствора соединения клетки держали в тестовом окружении до тех пор, пока эффект соединения не достигал стационарного состояния или до 4 мин. В тестовых экспериментах с разными концентрационными градиентами соединения соединение добавляли в фиксированные клетки в концентрации от низкой до высокой. После окончания теста соединения клетки промывали внеклеточной жидкостью до тех пор, пока ток не возвращался к стабильному состоянию.[00220] After reaching the configuration state of broken whole cells at the initial stage, whole cell current was recorded at room temperature (about 25°C), and recording of cells was performed for at least 120 seconds to ensure stability. Stable cells were selected for the test. During the whole test, cell clamping was performed at -80 mV, cell clamp voltage was depolarized to +20 mV to activate hERG potassium channels, and 2.5 seconds later, cell clamp voltage was -50 mV to eliminate inactivation. and create an outward trace current. The peak trace current was used as the hERG current value. The voltage regimen described above was applied to cells for electrophysiological tests every 15 seconds. An intracellular fluid containing 0.1% dimethyl sulfoxide (solvent) was added to the cells to establish a baseline, and then the current was allowed to settle for 3 min. After adding the compound solution, the cells were kept in the test environment until the effect of the compound reached a steady state or up to 4 min. In test experiments with different compound concentration gradients, the compound was added to fixed cells at a low to high concentration. After completion of the connection test, the cells were washed with extracellular fluid until the current returned to a stable state.

[00221] Данные теста анализировали с помощью аналитического программного обеспечения Qpatch, предоставленного Sophion, Excel и Graphpad Prism.[00221] Test data was analyzed using Qpatch analytic software provided by Sophion, Excel and Graphpad Prism.

[00222]

[00222]

[00223] По сравнению с контрольным соединением соединения по настоящему изобретению проявляют более слабую ингибирующую активность в отношении hERG. С учетом значения IC₅₀ соединений, указывающие на ингибирование активности фермента ATX, соединения по настоящему изобретению демонстрируют благоприятное окно безопасности в отношении ингибирования hERG и имеют значительные преимущества в отношении кардиологической безопасности.[00223] Compared to the control compound, the compounds of the present invention exhibit weaker hERG inhibitory activity. Given the IC ₅₀ values of the compounds indicative of inhibition of ATX enzyme activity, the compounds of the present invention exhibit a favorable safety window for hERG inhibition and have significant advantages in terms of cardiac safety.

[00224] Тестовый пример 4: Тест термодинамической растворимости[00224] Test Case 4: Thermodynamic Solubility Test

[00225] Получали фосфатно-солевой буферный раствор (ФСБ, рН 7,4), раствор FeSSIF (рН 5,8, содержащий 10 мМ таурохолата натрия, 2 мМ лецитина, 81,65 мМ гидроксида натрия, 125,5 мМ хлорида натрия, 0,8 мМ олеата натрия, 5 мМ глицерил моноолеата, 55,02 мМ малеиновой кислоты) и раствор FaSSGF (рН 1,6, 1 л раствор, содержащий 80 мкМ таурохолата натрия, 20 мкМ лецитина, 0,1 г пепсина и 34,2 мМ хлорида натрия).[00225] Prepared phosphate buffered saline (PBS, pH 7.4), FeSSIF solution (pH 5.8, containing 10 mM sodium taurocholate, 2 mM lecithin, 81.65 mM sodium hydroxide, 125.5 mM sodium chloride, 0.8 mM sodium oleate, 5 mM glyceryl monooleate, 55.02 mM maleic acid) and FaSSGF solution (pH 1.6, 1 L solution containing 80 μM sodium taurocholate, 20 μM lecithin, 0.1 g pepsin and 34, 2 mM sodium chloride).

[00226] Соединение аккуратно взвешивали и добавляли полученный фосфатный буфер (рН 7,4), раствор FeSSIF (рН 5,8) и раствор FaSSGF (рН 1,6) для получения раствора с концентрацией 4 мг/мл, который встряхивали при 1000 об/мин в течение 1 часа, а затем инкубировали в течение носи при комнатной температуре. После инкубации раствор центрифугировали при 12000 об/мин в течение 10 мин для удаления нерастворенных частиц, а супернатант переносили в новую центрифужную пробирку. Супернатант надлежащим образом разводили, затем добавляли раствор ацетонитрила, содержащий внутренний стандарт, и проводили количественное определение, используя стандартную кривую, полученную с той же матрицей.[00226] The compound was accurately weighed and the obtained phosphate buffer (pH 7.4), FeSSIF solution (pH 5.8) and FaSSGF solution (pH 1.6) were added to obtain a solution with a concentration of 4 mg/ml, which was shaken at 1000 vol. /min for 1 hour, and then incubated for wear at room temperature. After incubation, the solution was centrifuged at 12,000 rpm for 10 min to remove undissolved particles, and the supernatant was transferred to a new centrifuge tube. The supernatant was diluted appropriately, then the acetonitrile solution containing the internal standard was added and quantified using the standard curve obtained with the same matrix.

[00227]

[00227]

[00228] Экспериментальные результаты показывают, что растворимость контрольного соединения является относительно слабой и, таким образом, предполагается, что всасывание в желудочно-кишечном тракте будет относительно слабым, что не способствует разработке лекарственных средств для перорального введения. По сравнению с контрольным соединением термодинамическая растворимость соединений по настоящему изобретению в стимулированном желудочном соке, стимулированном кишечном соке и в нейтральных условиях существенно улучшена. Соответственно, ожидается, что кишечное всасывание в организме человека будет значительно улучшено, а воздействие при пероральном введении будет больше так, чтобы можно было уменьшить клиническую вводимую дозу и улучшить клиническое соблюдение приема.[00228] The experimental results show that the solubility of the control compound is relatively poor and thus absorption in the gastrointestinal tract is expected to be relatively poor, which is not conducive to the development of drugs for oral administration. Compared with the control compound, the thermodynamic solubility of the compounds of the present invention in stimulated gastric juice, stimulated intestinal juice and under neutral conditions is significantly improved. Accordingly, intestinal absorption in the human body is expected to be greatly improved and oral exposure to be greater so that the clinical dose administered can be reduced and clinical compliance improved.

[00229] Тестовый пример 5: Фармакокинетический тест[00229] Test Example 5: Pharmacokinetic Test

[00230] Для in vivo фармакокинетического теста на крысах использовали 6 самцов крыс SD, 180-240 г, не принимавших пищи в течение ночи. Трем крысам соединение вводили перорально через зонд (10 мг/кг), а кровь брали до введения и через 15 мин, 30 мин, 1 ч, 2 ч, 4 ч, 8 ч и 24 ч после введения. 3 другим крысам соединение вводили внутривенно (1 мг/кг), а кровь брали до введения и через 5 мин, 15 мин, 30 мин, 1 ч, 2 ч, 4 ч, 8 ч и 24 ч после введения. Образцы крови центрифугировали при 8000 об/мин при 4°С в течение 6 мин, а плазму собирали и хранили при -20°С. В каждый момент времени брали плазму и добавляли раствор ацетонитрила, содержащий внутренний стандарт в 3-5-кратном количестве, перемешивали на вортексе и смешивали в течение 1 мин, центрифугировали при 13000 об/мин при 4°С в течение 10 мин. Супернатант собирали, добавляли и смешивали с водой в 3-кратном количестве. Надлежащее количество смеси брали для анализа методом ЖХ-МС/МС. Основные фармакокинетические параметры анализировали, используя программное обеспечение WinNonlin 7.0 с некомпартментной моделью.[00230] For the in vivo pharmacokinetic test in rats, 6 male SD rats, 180-240 g, were fasted overnight. Three rats were given compound orally via gavage (10 mg/kg) and blood was taken before administration and 15 minutes, 30 minutes, 1 hour, 2 hours, 4 hours, 8 hours and 24 hours after administration. In 3 other rats, the compound was administered intravenously (1 mg/kg) and blood was taken before administration and 5 minutes, 15 minutes, 30 minutes, 1 hour, 2 hours, 4 hours, 8 hours and 24 hours after administration. Blood samples were centrifuged at 8000 rpm at 4°C for 6 min, and plasma was collected and stored at -20°C. At each time point, plasma was taken and an acetonitrile solution containing an internal standard in a 3-5-fold amount was added, vortexed and mixed for 1 min, centrifuged at 13,000 rpm at 4°C for 10 min. The supernatant was collected, added and mixed with water 3-fold. The proper amount of the mixture was taken for analysis by LC-MS/MS. Key pharmacokinetic parameters were analyzed using WinNonlin 7.0 software with a non-compartmental model.

[00231] Для in vivo фармакокинетического теста на мышах использовали 18 самцов мышей ICR, 20 25 г, не принимавших пищи в течение ночи. Из них 9 мышам соединение вводили перорально через зонд (10 мг/кг), брали кровь 3 мышей в каждый момент сбора крови, и кровь 9 мышей брали поочередно. Другим 9 мышам соединение вводили внутривенно (1 мг/кг), брали кровь 3 мышей в каждый момент сбора крови, и кровь 9 мышей брали поочередно. Остальные операции были такими же, как и в случае фармакокинетических тестов на крысах.[00231] For the in vivo pharmacokinetic test in mice, 18 male ICR mice, 20 25 g, fasted overnight were used. Of these, 9 mice were administered the compound orally via gavage (10 mg/kg), 3 mice were bled at each blood collection time, and 9 mice were bled alternately. In another 9 mice, the compound was injected intravenously (1 mg/kg), blood was taken from 3 mice at each time of blood collection, and blood from 9 mice was taken in turn. The remaining operations were the same as in the case of pharmacokinetic tests in rats.

[00232]

[00233]

[00233]

[00234] Экспериментальные результаты показывают, что по сравнению с контрольным соединением соединения по настоящему изобретению проявляли лучшие фармакокинетические свойства. В особенности у крыс, скорость выведения (CL) соединения I-2R по настоящему изобретению намного ниже, составляя около 1/4 от контрольного соединения, что говорит о том, что это соединение является относительно стабильным в организме, а его пероральные C_max и ППК_0-t могут достигать значение, в 6,1 раза и 4,2 раза больших, чем у контрольного соединения, соответственно.[00234] The experimental results show that compared to the control compound, the compounds of the present invention showed better pharmacokinetic properties. Particularly in rats, the elimination rate (CL) of compound I-2R of the present invention is much lower, about 1/4 that of the control compound, indicating that this compound is relatively stable in the body and its oral _Cmax and AUC _0-t can reach values 6.1 times and 4.2 times greater than the control compound, respectively.

[00235] Тестовый пример 6: Тест ингибирования активности фермента АТХ в плазме человека[00235] Test Example 6: Human Plasma ATC Enzyme Activity Inhibition Test

[00236] цельную кровь брали у здоровых добровольцев и проводили антикоагуляцию гепарином. Пробирки для сбора крови центрифугировали при 3000 об/мин в течение 10 мин, отбирали плазму и хранили при -80°С для использования.[00236] Whole blood was taken from healthy volunteers and anticoagulated with heparin. Blood collection tubes were centrifuged at 3000 rpm for 10 min, plasma was collected and stored at -80°C for use.

[00237] Соединение серийно разводили ДМСО в соответствии с традиционными концентрационными требованиями, а затем в 96-луночный планшет добавляли 3 мкл соединения, а в каждую лунку, содержащую 3 мкл соединения, добавляли 147 мкл ФСБ. После равномерного смешивания отбирали 50 мкл смеси и добавляли в новый 96-луночный планшет. Человеческую плазму доставали из морозильной камеры при -80°С и размораживали посредством быстрого встряхивания на водяной бане при 37°С. Брали 50 мкл человеческой плазмы и добавляли в 96-луночный планшет, содержащий 50 мкл разведенного соединения (конечная система соответствовала 1% ДМСО). Группа без соединения была назначена группой положительного контроля. 96-луночный планшет встряхивали и равномерно смешивали и инкубировали при 37°С в течение 3 ч. Также была предоставлена холостая группа, а плазму холостой группы хранили при -80°С. Холостая группа предоставлена для определения базовой концентрации эндогенной LPA.[00237] The compound was serially diluted in DMSO according to conventional concentration requirements, and then 3 μl of the compound was added to a 96-well plate, and 147 μl of PBS was added to each well containing 3 μl of the compound. After uniform mixing, 50 μl of the mixture was taken and added to a new 96-well plate. Human plasma was removed from the freezer at -80°C and thawed by rapid shaking in a water bath at 37°C. 50 μl of human plasma was taken and added to a 96-well plate containing 50 μl of diluted compound (final system corresponded to 1% DMSO). The group with no connection was designated as the positive control group. The 96-well plate was shaken and evenly mixed and incubated at 37°C for 3 hours. A blank group was also provided and the blank group plasma was stored at -80°C. A blank group is provided to determine the baseline concentration of endogenous LPA.

[00238] После завершения инкубации холостую группу размораживали на льду и переносили в планшет для инкубации. Избыток ацетонитрила, содержащего внутренний стандарт LPA17:0, добавляли в планшет для инкубации для осаждения белка плазмы. После вортексного центрифугирования отбирали и разводили супернатант, а площадь пика LPA18: 2 и площадь пика внутреннего стандарта LPA17: 0 определяли, используя масс-спектрометрию ЖХ-МС/МС.[00238] After completion of the incubation, the blank group was thawed on ice and transferred to an incubation plate. An excess of acetonitrile containing the LPA17:0 internal standard was added to the incubation plate to precipitate plasma protein. After vortex centrifugation, the supernatant was collected and diluted, and the LPA18:2 peak area and LPA17:0 internal standard peak area were determined using LC-MS/MS mass spectrometry.

[00239] Рассчитывали соотношение площади пика LPA18: 2 и площади пика внутреннего стандарта LPA17: 0, а уровень ингибирования образования LPA18: 2 рассчитывали в соответствии со следующей формулой:[00239] The ratio of the peak area of LPA18: 2 and the peak area of the internal standard LPA17: 0 was calculated, and the level of inhibition of the formation of LPA18: 2 was calculated according to the following formula:

[00240] Уровень ингибирования (%) = 100-(группа соединения с разной концентрацией - холостая группа)/(группа положительного контроля - холостая группа)*100[00240] Level of inhibition (%) = 100 - (group of compound with different concentration - blank group) / (positive control group - blank group) * 100

[00241] В соответствии с уровнями ингибирования для разных концентраций соединения рассчитывали значение IC₅₀, которое относится к ингибированию активности фермента АТХ в плазме человека.[00241] According to the levels of inhibition for different concentrations of the compound, the IC ₅₀ value was calculated, which refers to the inhibition of ATX enzyme activity in human plasma.

[00242]

[00242]

[00243] Экспериментальные данные показывают, что соединения по настоящему изобретению имеют хорошую ингибирующую активность в отношении фермента АТХ в плазме человека, могут эффективно ингибировать активность фермента АТХ и существенно лучше контрольного соединения.[00243] Experimental data show that the compounds of the present invention have good inhibitory activity against the ATC enzyme in human plasma, can effectively inhibit the activity of the ATC enzyme, and are significantly better than the control compound.

[00244] Тестовый пример 7: Модель индуцированного блеомицином ИЛФ у крыс[00244] Test Example 7: Rat Model of Bleomycin-Induced IPF

[00245] Используя самцов крыс BN, 180-240 г, индуцировали модель идиопатического легочного фиброза (модель ИЛФ) дозой 5 Е/кг блеомицина. После установления модели животных случайным образом делили на группы, включая контрольную группу растворителя, группу GLPG-1690 (соединение галапагосской клинической фазы III), контрольную группу соединения, группу соединения I-2S и группу соединения I-2R. На вторые сутки после установления модели животным дважды в сутки проводили пероральное введение через зонд, при этом группе введения каждый раз вводили дозу 30 мг/кг, а контрольной группе растворителя вводили пустой растворитель, и продолжали введение в течение 21 суток.[00245] Using male BN rats, 180-240 g, a model of idiopathic pulmonary fibrosis (IPF model) was induced with a dose of 5 U/kg of bleomycin. After establishing the model, animals were randomly divided into groups including a solvent control group, a GLPG-1690 group (Galapagos clinical phase III compound), a compound control group, an I-2S compound group, and an I-2R compound group. On the second day after pattern establishment, the animals were administered oral gavage twice daily, with the administration group receiving 30 mg/kg each time and the solvent control group receiving blank solvent, and continued administration for 21 days.

[00246] Во время введения массу тела измеряли каждые трое суток. На 21 сутки введения получали альвеолярный лаваж через 2 ч после первого ведения, подсчитывали воспалительные клетки в жидкости лаважа и выявляли связанные биомаркеры в супернатанте жидкости лаважа. После лаважа фиксировали левые легкие крыс и окрашивали трихромно по Массону для оценки фиброзной патологии. Оставшиеся доли легких подвергали криоконсервации. Брали супернатант жидкости альвеолярного лаважа и свежезамороженную ткань легких трех групп соединений и проводили выявление в отношении содержания белка TGF-βl и количества общего белка, используя ELISA, и рассчитывали количество TGF-β1 на миллиграмм общего белка.[00246] During administration, body weight was measured every three days. On day 21 of administration, alveolar lavage was obtained 2 hours after the first administration, inflammatory cells were counted in the lavage fluid, and bound biomarkers were detected in the lavage fluid supernatant. After lavage, the left lungs of rats were fixed and stained trichrome by Masson to assess fibrous pathology. The remaining lobes of the lungs were subjected to cryopreservation. The supernatant of the alveolar lavage fluid and the fresh frozen lung tissue of the three groups of compounds were taken and detected for TGF-βl protein content and total protein amount using ELISA, and the amount of TGF-β1 per milligram of total protein was calculated.

[00247] Экспериментальные результаты показывают, что снижение массы животных из групп соединения I-2S и соединения I-2R было существенно меньшим, чем в группе контрольного соединения, а соединения по настоящему изобретению имеют лучшую безопасность (результаты проиллюстрированы на Фиг. 1); содержание TGF-β1 в супернатанте жидкости альвеолярного лаважа и свежезамороженной ткани легких группы соединения I-2R существенно ниже, чем в контрольной группе растворителя, и, таким образом, соединения по настоящему изобретению имеют существенный противофиброзный эффект (результаты приведены на Фиг. 2).[00247] The experimental results show that the weight loss of the animals from Compound I-2S and Compound I-2R groups was significantly less than that of the control compound group, and the compounds of the present invention have better safety (results are illustrated in Fig. 1); the content of TGF-β1 in the supernatant of alveolar lavage fluid and fresh frozen lung tissue of compound group I-2R is significantly lower than in the solvent control group, and thus the compounds of the present invention have a significant anti-fibrotic effect (the results are shown in Fig. 2).

[00248] В данном тексте описания со ссылкой на термины «вариант осуществления», «некоторые варианты осуществления», «примеры», «конкретные примеры» или «некоторые примеры» и т.д. означают конкретные признаки, структуры, материалы или характеристики, описанные в сочетании с вариантом осуществления или примером, включены по меньшей мере в один вариант осуществления или пример по настоящему изобретению. В данном тексте вышеприведенные термины являются иллюстративными и необязательно относятся к одному и тому же варианту осуществления или примеру. Кроме того, описанные конкретные признаки, структуры, материалы или характеристики можно комбинировать подходящим образом в любом одном или более вариантах осуществления или примерах. Дополнительно, специалисты в данной области техники могут комбинировать разные варианты осуществления или примеры и признаки разных вариантов осуществления или примеров без противоречий между ними.[00248] In this description text, with reference to the terms "an embodiment", "some embodiments", "examples", "specific examples" or "some examples", etc. means the specific features, structures, materials, or characteristics described in conjunction with an embodiment or example are included in at least one embodiment or example of the present invention. In this text, the above terms are illustrative and do not necessarily refer to the same embodiment or example. In addition, the specific features, structures, materials, or characteristics described may be combined as appropriate in any one or more embodiments or examples. Additionally, those skilled in the art can combine different embodiments or examples and features of different embodiments or examples without conflicting therebetween.

[00249] Хотя варианты осуществления настоящего изобретения проиллюстрированы и описаны выше, можно понять, что вышеупомянутые варианты осуществления являются иллюстративными, и их не следует воспринимать как ограничения настоящего изобретения. Специалисты в данной области техники могут делать изменения, модификации, замены и вариации на основании вышеупомянутых вариантов осуществления в рамках объема настоящего изобретения.[00249] Although embodiments of the present invention have been illustrated and described above, it can be understood that the above embodiments are illustrative and should not be taken as limitations of the present invention. Those skilled in the art may make alterations, modifications, substitutions, and variations based on the above embodiments within the scope of the present invention.

Claims

1. Соединение, являющееся соединением, представленным формулой I, или являющееся таутомером или стереоизомером соединения, представленного формулой I1. A compound which is a compound represented by formula I or which is a tautomer or stereoisomer of a compound represented by formula I

гдеwhere

R¹ и R² каждый независимо выбран из -Н или -СН₃ при условии, что:R ¹ and R ² are each independently selected from -H or -CH ₃ provided that:

R¹ и R² одновременно не представляют собой -Н илиR ¹ and R ² are not simultaneously -H or

2. Соединение по п. 1, где R¹ представляет собой -Н и R² представляет собой -СН₃.2. A compound according to claim 1 wherein R ¹ is -H and R ² is -CH ₃ .

3. Соединение по п. 1, где R¹ представляет собой -СН₃ и R² представляет собой -Н.3. A compound according to claim 1, wherein R ¹ is -CH ₃ and R ² is -H.

4. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что соединение представляет собой одно из следующих соединений или таутомер или стереоизомер одного из следующих соединений4. The compound according to claim 1, characterized in that the compound is one of the following compounds or a tautomer or stereoisomer of one of the following compounds

5. Применение соединения по любому из пп. 1-4 в производстве лекарственного средства для лечения или предупреждения связанных с АТХ заболеваний.5. The use of a compound according to any one of paragraphs. 1-4 in the manufacture of a medicament for the treatment or prevention of ATC related diseases.

6. Применение по п. 5, отличающееся тем, что связанные с АТХ заболевания включают по меньшей мере одно, выбранное из рака, метаболического заболевания, заболевания почек, заболевания печени, фиброзирующего заболевания, интерстициального заболевания легких, пролиферативного заболевания, воспалительного заболевания, боли, аутоиммунного заболевания, респираторного заболевания, сердечно-сосудистого заболевания, нейродегенеративных заболеваний, дерматологического нарушения и/или связанного с аномальным ангиогенезом заболевания.6. Use according to claim 5, wherein the ATC related diseases include at least one selected from cancer, metabolic disease, kidney disease, liver disease, fibrosing disease, interstitial lung disease, proliferative disease, inflammatory disease, pain, an autoimmune disease, a respiratory disease, a cardiovascular disease, a neurodegenerative disease, a dermatological disorder, and/or an abnormal angiogenesis-related disease.

7. Применение по п. 5, отличающееся тем, что связанные с АТХ заболевания включают по меньшей мере одно, выбранное из интерстицильного заболевания легких, легочного фиброза, печеночного фиброза и почечного фиброза.7. Use according to claim 5, wherein the ATC-related diseases include at least one selected from interstitial lung disease, pulmonary fibrosis, hepatic fibrosis, and renal fibrosis.

8. Применение по п. 5, отличающееся тем, что связанные с АТХ заболевания включают идиопатический легочный фиброз.8. Use according to claim 5, characterized in that ATC-associated diseases include idiopathic pulmonary fibrosis.

9. Применение по п. 5, отличающееся тем, что связанные с АТХ заболевания включают диабет II типа и неалкогольный стеатогепатит.9. Use according to claim 5, characterized in that ATC-associated diseases include type II diabetes and non-alcoholic steatohepatitis.

10. Применение по п. 5, отличающееся тем, что связанные с АТХ заболевания включают невропатическую боль и воспалительную боль.10. Use according to claim 5, characterized in that ATC-related diseases include neuropathic pain and inflammatory pain.

11. Применение по п. 5, отличающееся тем, что связанные с АТХ заболевания включают связанную с остеоартритом боль.11. Use according to claim 5, characterized in that ATC-related diseases include pain associated with osteoarthritis.