RU2765601C1 - Method for differentiated treatment of corneal erosions and ulcers - Google Patents

Method for differentiated treatment of corneal erosions and ulcers Download PDF

Info

Publication number
RU2765601C1
RU2765601C1 RU2021124328A RU2021124328A RU2765601C1 RU 2765601 C1 RU2765601 C1 RU 2765601C1 RU 2021124328 A RU2021124328 A RU 2021124328A RU 2021124328 A RU2021124328 A RU 2021124328A RU 2765601 C1 RU2765601 C1 RU 2765601C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
depth
corneal
platelet
prp
treatment
Prior art date
Application number
RU2021124328A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Екатерина Валериановна Ченцова
Елена Викторовна Федосеева
Иван Николаевич Пономарев
Наталья Валерьевна Боровкова
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России) filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России)
Priority to RU2021124328A priority Critical patent/RU2765601C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2765601C1 publication Critical patent/RU2765601C1/en

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61FFILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
    • A61F9/00Methods or devices for treatment of the eyes; Devices for putting-in contact lenses; Devices to correct squinting; Apparatus to guide the blind; Protective devices for the eyes, carried on the body or in the hand
    • A61F9/007Methods or devices for eye surgery
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/14Blood; Artificial blood
    • A61K35/19Platelets; Megacaryocytes
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02Ophthalmic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

FIELD: medicine.
SUBSTANCE: invention refers to medicine, namely to ophthalmology, and can be used for differentiated treatment of corneal erosions and ulcers. For this purpose, a product of platelet-rich autoplasma (PRP) is used. For corneal erosions and ulcers with depth of 100 mcm and less, PRP lysate is used, obtained from platelet-rich plasma containing platelet count of not less than 1,000*109 cells/l, with a proportion of functionally adequate thrombocytes of not less than 38 %. In case of erosions, PRP lysate is instilled in dose of 1 drop 3 times a day until complete healing. In case of ulcer depth of 100 mcm and less — subconjunctival injections once a day in dose of 0.5 ml, in total 3 injections. In case of corneal ulcer with depth of more than 100 mcm — covering of cornea with thrombofibrin clot fixed by amniotic membrane, combined with subconjunctival introduction along limb in 4 quadrants of autologous serum in total volume of 1 ml. Tarsorrhaphy is performed.
EFFECT: invention provides effective treatment of the cornea depending on the nature and depth of its damage with accelerated healing of the injured surface, formation of opacity of lower intensity with deep injuries, reduction of recurrence rate.
1 cl, 3 dwg, 3 ex

Description

Предлагаемое изобретение относится к офтальмологии и предназначено для дифференцированного лечения эрозий и язв роговицы различной этиологии в зависимости от глубины дефекта. По данным ВОЗ, причиной слепоты у 5% населения мира являются заболевания роговицы. Роговица постоянно подвержена влиянию различных агрессивных факторов внешней среды из-за своих топографических особенностей. Эрозии и язвы роговицы являются чаще всего хроническим процессом, пусковым механизмом развития которых являются: инфекционный процесс, ожоги, механическая травма роговицы, хирургическое вмешательство.The present invention relates to ophthalmology and is intended for differentiated treatment of corneal erosions and ulcers of various etiologies, depending on the depth of the defect. According to WHO, the cause of blindness in 5% of the world's population is corneal disease. The cornea is constantly exposed to various aggressive environmental factors due to its topographic features. Erosions and ulcers of the cornea are most often a chronic process, the triggers for the development of which are: an infectious process, burns, mechanical trauma to the cornea, and surgery.

Уровень техникиState of the art

Традиционная консервативная терапия пациентов с повреждениями роговицы предполагает применение противовоспалительных, антибактериальных препаратов, стимуляторов регенерации роговицы (Декспантенол, Солкосерил), сульфатированных гликозаминогликанов для ускорения репаративных процессов в роговице. Хирургическое лечение представляет собой чаще всего поверхностную кератэктомию, с последующим покрытием роговицы амниотической мембраной [Макаров П.В., Кугушева А.Э., Слепова О.С., Ченцова Е.В., Хазамова А.И. // Российский офтальмологический журнал - N2, 2015. С. 41-44]. Также применяют в качестве хирургического лечения фототерапевтическую кератэктомию. Однако такое лечение не всегда сопровождается полным и долгосрочным восстановлением ткани роговицы. Кроме того, использование антибактериальных и противовирусных препаратов оказывает угнетающее действие на репаративные функции ткани, учитывая механизм их действия, подразумевающий нарушение процессов синтеза ДНК, нередко приводит к необходимости хирургического лечения, включая пересадку роговицы.Traditional conservative therapy of patients with corneal injuries involves the use of anti-inflammatory, antibacterial drugs, corneal regeneration stimulants (Dexpanthenol, Solcoseryl), sulfated glycosaminoglycans to accelerate reparative processes in the cornea. Surgical treatment is most often superficial keratectomy, followed by covering the cornea with an amniotic membrane [Makarov P.V., Kugusheva A.E., Slepova O.S., Chentsova E.V., Khazamova A.I. // Russian Ophthalmological Journal - N2, 2015. P. 41-44]. Phototherapeutic keratectomy is also used as a surgical treatment. However, such treatment is not always accompanied by a complete and long-term restoration of the corneal tissue. In addition, the use of antibacterial and antiviral drugs has a depressing effect on the reparative functions of the tissue, given the mechanism of their action, which implies a violation of the processes of DNA synthesis, often leads to the need for surgical treatment, including corneal transplantation.

Альтернативным методом лечения является применение различных продуктов аутологичных тромбоконцентратов. Наиболее частым и перспективным является применение богатой тромбоцитами плазмы (БоТП или platelet rich plasma - PRP). На протяжении многих лет она успешно используется для купирования воспаления и ускорения регенерации различных тканей [Foster Т.Е., Puskas B.L., Mandelbaum B.R., Gerhardt М.В., Rodeo S.A. Platelet-rich plasma: from basic science to clinical applications. Am J Sports Med. 2009, vol. 37, №11, pp. 2259-2272].An alternative method of treatment is the use of various products of autologous platelet concentrates. The most frequent and promising is the use of platelet rich plasma (PRP or platelet rich plasma - PRP). For many years, it has been successfully used to relieve inflammation and accelerate the regeneration of various tissues [Foster T.E., Puskas B.L., Mandelbaum B.R., Gerhardt M.V., Rodeo S.A. Platelet-rich plasma: from basic science to clinical applications. Am J Sports Med. 2009, vol. 37, no. 11, pp. 2259-2272].

Лечение с помощью препаратов аутологичной богатой тромбоцитами плазмы основано на том факте, что факторы роста тромбоцитов поддерживают три фазы каскада заживления ран - воспаление, пролиферация, моделирование. Основное научное обоснование данной терапии заключается в том, что инъекция концентрированных тромбоцитов в места повреждения может инициировать восстановление тканей за счет высвобождения биологически активных факторов (факторов роста, цитокинов, лизосом) и белков адгезии, которые ответственны за запуск гемостатического каскада, синтез новой соединительной ткани и реваскуляризацию. Кроме того, белки плазмы, такие как: фибриноген, протромбин и фибронектин, присутствуют во фракции плазмы с низким содержанием тромбоцитов. Тромбоконцентраты могут стимулировать супрафизиологическое высвобождение факторов роста, чтобы ускорить заживление хронических травм и ускорить процесс заживления острых повреждений [Everts Р.А.М., Кnаре J.T.A., Weibrich G.,

Figure 00000001
J.P., Hoffmann J., Overdevest Е.Р., Box H.A.M., Van Zundert A. Platelet-Rich Plasma and Platelet Gel: A Review. J. Extra Corpor. Technol. 2006; 38:174-187]. На всех этапах процесса восстановления ткани широкий спектр факторов роста, цитокинов вносит вклад в большинство основных функций клеток через эндокринные, паракринные, аутокринные механизмы. Основными преимуществами БоТП являются его безопасность и оригинальные методы приготовления биологического препарата, который может быть использован в широком спектре патологий [Andia I., Maffulli N. A contemporary view of platelet-rich plasma therapies: Moving toward refined clinical protocols and precise indications. Regen. Med. 2018; 13:717-728. doi: 10.2217/rme-2018-0042]. Однако алгоритм применения продуктов БоТП при повреждениях роговицы не разработан по настоящее время. Применение препаратов аутологичных тромбоцитов в офтальмологии не имеет стандартизированных методик и носит весьма ориентировочный характер.Treatment with autologous platelet-rich plasma preparations is based on the fact that platelet growth factors support the three phases of the wound healing cascade - inflammation, proliferation, and modeling. The main scientific rationale for this therapy is that injection of concentrated platelets into injury sites can initiate tissue repair due to the release of biologically active factors (growth factors, cytokines, lysosomes) and adhesion proteins, which are responsible for triggering the hemostatic cascade, synthesis of new connective tissue and revascularization. In addition, plasma proteins such as fibrinogen, prothrombin, and fibronectin are present in the platelet-poor plasma fraction. Thromboconcentrates can stimulate the supraphysiological release of growth factors to accelerate the healing of chronic injuries and accelerate the healing process of acute injuries [Everts P.A.M., Knare JTA, Weibrich G.,
Figure 00000001
JP, Hoffmann J., Overdevest E.P., Box HAM, Van Zundert A. Platelet-Rich Plasma and Platelet Gel: A Review. J. Extra Corpor. Technol. 2006; 38:174-187]. At all stages of the tissue repair process, a wide range of growth factors, cytokines, contribute to most of the basic functions of cells through endocrine, paracrine, autocrine mechanisms. The main advantages of PRP are its safety and original methods for preparing a biological preparation that can be used in a wide range of pathologies [Andia I., Maffulli N. A contemporary view of platelet-rich plasma therapies: Moving towards refined clinical protocols and precise indications. Reg. Med. 2018; 13:717-728. doi: 10.2217/rme-2018-0042]. However, the algorithm for the use of PRP products for corneal injuries has not been developed to date. The use of autologous platelet preparations in ophthalmology does not have standardized methods and is very indicative.

При лечении повреждения роговицы главной задачей является купирование воспалительной реакции, усиление и ускорение репарации, чего можно добиться посредством применения биологически активных пептидов, содержащихся в гранулах тромбоцитов человека. Известно, что альфа-гранулы тромбоцитов содержат более 30 цитокинов и факторов роста, которые способствуют улучшению репаративных процессов в тканях. Факторы роста, высвобождаемые из активированных тромбоцитов, инициируют и модулируют заживление ран [Nurden А.Т., Nurden P., Sanchez M., Andia I., et al. Platelets and wound healing. // Front. Biosci., 2008, 13, 3532-3548].In the treatment of corneal damage, the main task is to stop the inflammatory reaction, enhance and accelerate repair, which can be achieved through the use of biologically active peptides contained in human platelet granules. It is known that platelet alpha granules contain more than 30 cytokines and growth factors, which contribute to the improvement of reparative processes in tissues. Growth factors released from activated platelets initiate and modulate wound healing [Nurden AT, Nurden P., Sanchez M., Andia I., et al. Platelets and wound healing. // front. Biosci., 2008, 13, 3532-3548].

Известен способ лечения герпетических эрозий роговицы с помощью БоТП (патент RU 2653260, 05.07.18). Лечение проводят в два этапа. На первом этапе в течение трех недель проводят противовирусную, антибактериальную, репаративную терапию. На втором этапе добавляют инстилляции богатой тромбоцитами плазмы 6 раз в день в сочетании с субконъюнктивальной инъекцией богатой тромбоцитами плазмы 1 раз в неделю. Длительность лечения составляет от 3 до 5 недель. При такой форме применения БоТП отсутствие клинического эффекта в ряде случаев может быть связано с недостаточной концентрацией цитокинов в месте повреждения роговицы за счет смывания или разбавления БоТП слезной жидкостью.A known method for the treatment of herpetic corneal erosions using PRP (patent RU 2653260, 05.07.18). Treatment is carried out in two stages. At the first stage, antiviral, antibacterial, reparative therapy is carried out for three weeks. At the second stage, instillations of platelet-rich plasma are added 6 times a day in combination with subconjunctival injection of platelet-rich plasma once a week. The duration of treatment is from 3 to 5 weeks. With this form of application of PRP, the absence of a clinical effect in some cases may be due to insufficient concentration of cytokines at the site of corneal injury due to washing off or dilution of PRP with tear fluid.

Известен способ лечения эрозивных и других повреждений роговицы с помощью аутологичного тромбофибринового сгустка, который фиксируют амниотической мембраной (Alio J.L., Amalich-Montiel F, Rodriguez AE. The role of "eye platelet rich plasma" (E-PRP) for wound healing in ophthalmology. // Curr Pharm BiotechnoL 2012 Jun; 13(7):1257-65]. Для получения сгустка у пациента производят забор 40-60 мл венозной крови непосредственно перед операцией, после одноступенчатого центрифугирования отбирают плазму, ближайшую к эритроцитам, избегая слоя лимфоцитов. Концентрация тромбоцитов в БоТП в 2-3 раза выше, чем в цельной крови. Один миллилитр полученной БоТП помещали в каждую лунку 4-луночного планшета с плоским дном и добавляли 50 мкл 10% хлорида кальция для активации, затем инкубировали при t37°C в течение 30 минут. Через 30 минут формировался сгусток БоТП, готовый к наложению на дефект поверхности роговицы с фиксацией его под амниотической мембраной.A known method for the treatment of erosive and other damage to the cornea using an autologous thrombofibrin clot, which is fixed with an amniotic membrane (Alio JL, Amalich-Montiel F, Rodriguez AE. The role of "eye platelet rich plasma" (E-PRP) for wound healing in ophthalmology. // Curr Pharm BiotechnoL 2012 Jun; 13(7): 1257-65]. To obtain a clot, 40-60 ml of venous blood is taken from the patient immediately before the operation, after one-stage centrifugation, the plasma closest to the erythrocytes is taken, avoiding the layer of lymphocytes. platelet count in PRP is 2-3 times higher than in whole blood One milliliter of obtained PRP was placed in each well of a 4-well flat bottom plate and 50 μl of 10% calcium chloride was added for activation, then incubated at t37°C for 30 After 30 minutes, a PRP clot was formed, ready to be applied to the corneal surface defect with its fixation under the amniotic membrane.

Данные способы актуальны, но не отражают дальнейшего алгоритма лечения, в зависимости от площади или глубины поражения, а описаны при отдельных патологиях. Кроме того, еще одним недостатком данных способов является отсутствие методик стандартизации плазмы по количеству функционально полноценных тромбоцитов, в связи с этим получаемый эффект может быть неоднозначным. Данный способ принят за ближайший аналог.These methods are relevant, but do not reflect the further treatment algorithm, depending on the area or depth of the lesion, but are described for individual pathologies. In addition, another disadvantage of these methods is the lack of methods for plasma standardization by the number of functionally complete platelets, in connection with this, the resulting effect may be ambiguous. This method is taken as the closest analogue.

Задачей изобретения является разработка алгоритма лечения эрозий и язв роговицы с помощью продуктов аутологичной богатой тромбоцитами плазмы, в зависимости от объема поражения.The objective of the invention is to develop an algorithm for the treatment of erosions and ulcers of the cornea using products of autologous platelet-rich plasma, depending on the extent of the lesion.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является повышение эффективности лечения в зависимости от характера и глубины повреждения роговицы с ускорением заживления поврежденной поверхности роговицы, формированием помутнения меньшей интенсивности при глубоких повреждениях, снижением частоты рецидивов.The technical result of the invention is to increase the effectiveness of treatment depending on the nature and depth of damage to the cornea with acceleration of the healing of the damaged surface of the cornea, the formation of clouding of less intensity in case of deep damage, and a decrease in the frequency of relapses.

Технический результат достигается за счет использования трех форм введения препаратов богатой тромбоцитами плазмы в зависимости от характера и глубины повреждения роговицы - лизата в инстилляциях и инъекциях и покрытия тромбофибриновым сгустком, фиксированным амниотической мембраной, в сочетании с лимбальными инъекциями сыворотки, полученных из аутоплазмы.The technical result is achieved through the use of three forms of administration of platelet-rich plasma preparations, depending on the nature and depth of damage to the cornea - lysate in instillations and injections and coating with a thrombofibrin clot fixed by the amniotic membrane, in combination with limbal injections of serum obtained from autoplasma.

Важным аспектом является наличие трех форм препарата, которые позволяют обеспечить целевую концентрацию цитокинов в течение определенного времени. При эрозиях роговицы достаточно наименее инвазивного способа введения - инстилляций лизата БоТП. При язвах глубиной 100 мкм и менее необходимо более длительное воздействие ростстимулирующих факторов, что обусловливает применение субконъюнктивальных инъекций лизата. При глубоких язвах (более 100 мкм глубиной) необходимо использование БоТП в виде покрытия тромбофибриновым сгустком, фиксированным амниотической мембраной, в комбинации с субконъюнктивальным введением сыворотки, с целью «тампонирования» дефекта, а также медленного выхода из клеток ростстимулирующих и противовоспалительных цитокинов. Таким образом, можно получить более длительное, постепенное терапевтическое воздействие непосредственно в зоне повреждения роговицы пациента.An important aspect is the presence of three forms of the drug, which allow you to provide the target concentration of cytokines for a certain time. In case of corneal erosions, the least invasive method of administration is sufficient - instillations of PRP lysate. With ulcers with a depth of 100 microns or less, a longer exposure to growth-stimulating factors is necessary, which leads to the use of subconjunctival lysate injections. For deep ulcers (more than 100 µm deep), it is necessary to use PRP in the form of a coating with a thrombofibrin clot fixed by the amniotic membrane, in combination with subconjunctival administration of serum, in order to “tamponate” the defect, as well as slow release of growth-stimulating and anti-inflammatory cytokines from cells. Thus, it is possible to obtain a longer, gradual therapeutic effect directly in the area of damage to the patient's cornea.

Использование терапевтически значимого уровня биологически активных факторов в зоне повреждения в виде тромбофибринового сгустка (БоТП), характеризующегося содержанием функционально полноценных тромбоцитов (с гранулами) в определенной концентрации, что обеспечивает наиболее полноценный эффект в зоне повреждения роговицы.The use of a therapeutically significant level of biologically active factors in the area of damage in the form of a thrombofibrin clot (TPC), characterized by the content of functionally complete platelets (with granules) in a certain concentration, which provides the most complete effect in the area of damage to the cornea.

Субконъюнктивальное введение по лимбу в 4-х квадрантах аутологичной сыворотки оказывает стимулирующее влияние на клетки лимбальной зоны, а вместе с тем усиление процессов регенерации роговицы. Сочетание эффекта от присутствующего на поверхности роговицы тромбофибринового сгустка и введенной аутологичной сыворотки обеспечивает усиление лечебного эффекта.Subconjunctival administration of autologous serum through the limbus in 4 quadrants has a stimulating effect on the cells of the limbal zone, and at the same time enhances the processes of regeneration of the cornea. The combination of the effect of the thrombofibrin clot present on the surface of the cornea and the injected autologous serum enhances the therapeutic effect.

Тарзорафия и амниотическая мембрана действуют как дополнительная биологическая повязка, препятствующая смещению сгустка и защищающая переднюю поверхность глаза от внешних воздействий, что также вносит свой вклад в получение наиболее адекватного клинического эффекта.Tarsorrhaphy and the amniotic membrane act as an additional biological bandage that prevents clot displacement and protects the anterior surface of the eye from external influences, which also contributes to obtaining the most adequate clinical effect.

Способ осуществляют следующим образом.The method is carried out as follows.

У пациента с поражением роговицы применяют для лечения продукт богатой тромбоцитами аутоплазмы (БоТП). При этом используют при эрозии и язве роговицы глубиной 100 мкм и менее лизат БоТП, полученный из богатой тромбоцитами плазмы, содержащей количество тромбоцитов не менее 1000*109 кл/л и с долей функционально полноценных тромбоцитов не менее 38%. При эрозии проводят инстилляций лизата БоТП по 1 капле 3 раза в день до полного заживления. При язве глубиной 100 мкм и менее - субконъюнктивальные инъекции 1 раз в день через день по 0.5 мл всего 3 инъекции. При язве роговицы глубиной более 100 мкм - покрытие роговицы тромбофибриновым сгустком, фиксированным амниотической мембраной, в сочетании с субконъюнктивальным введением по лимбу в 4-х квадрантах аутологичной сыворотки в общем объеме 1 мл. Выполняют тарзорафию.In a patient with corneal involvement, a platelet-rich autoplasma product (PRP) is used for treatment. At the same time, PRP lysate obtained from platelet-rich plasma containing at least 1000*10 9 cells/l and with a fraction of functionally complete platelets of at least 38% is used for erosion and ulcer of the cornea with a depth of 100 μm or less. In case of erosion, PRP lysate is instilled 1 drop 3 times a day until complete healing. With an ulcer with a depth of 100 microns or less - subconjunctival injections 1 time per day every other day, 0.5 ml, only 3 injections. With a corneal ulcer with a depth of more than 100 microns - covering the cornea with a thrombofibrin clot fixed by an amniotic membrane, in combination with subconjunctival administration along the limbus in 4 quadrants of autologous serum in a total volume of 1 ml. Perform tarsorrhaphy.

Для получения лизата богатой тромбоцитами плазмы у пациентов забирали 20 мл венозной крови в пробирки с антикоагулянтом ЭДТА. С сохранением стерильности кровь подвергали двухэтапному центрифугированию, выделяя тромбоциты. Затем определяли концентрацию тромбоцитов в суспензиии и проводили морфофункциональный анализ. Конечные концентрации тромбоцитов составляли >1000*109, тромбоцитов с гранулами 38% и более. После этого производили лизирование клеток путем замораживания до -40°C с последующим дефростированием при температуре +4°С в течение 10-12 ч. После чего пробирку центрифугировали с ускорением 3000g с целью осаждения разрушенных клеток Надосадочную плазму отбирали и разделяли на несколько доз. Хранение лизата осуществляли при температуре +4°С.To obtain a lysate of platelet-rich plasma, 20 ml of venous blood was taken from patients in tubes with EDTA anticoagulant. While maintaining sterility, the blood was subjected to two-stage centrifugation, isolating platelets. Then the concentration of platelets in the suspension was determined and a morphofunctional analysis was performed. The final concentration of platelets was >1000*10 9 , platelets with granules 38% or more. After that, the cells were lysed by freezing to -40°C, followed by defrosting at +4°C for 10–12 h. After that, the tube was centrifuged at an acceleration of 3000g to precipitate the destroyed cells. The supernatant plasma was collected and divided into several doses. The lysate was stored at +4°C.

Для получения тромбофибринового сгустка у пациента проводили забор венозной крови по тому же принципу. Кровь подвергали двухэтапному центрифугированию, после чего, с сохранением стерильности, отбирали ближайшую к эритроцитам плазму с тромбоцитами. Из 20 мл крови получали 3 мл БоТП с концентрацией тромбоцитов не менее 1000×109 кл/л. Для получения сгустка один миллилитр полученной БоТП помещали в пробирку с круглым дном и добавляли 50 мкл 10% хлорида кальция для активации тромбоцитов. После чего, плазму инкубировали при t 37°С в термостате до формирования геля. В результате констрикции гель разделялся на сгусток и сыворотку.To obtain a thrombofibrin clot in a patient, venous blood was taken according to the same principle. The blood was subjected to two-stage centrifugation, after which, while maintaining sterility, the plasma closest to the erythrocytes with platelets was taken. From 20 ml of blood, 3 ml of PRP were obtained with a platelet concentration of at least 1000×10 9 cells/l. To obtain a clot, one milliliter of the obtained PRP was placed in a round bottom tube and 50 μl of 10% calcium chloride was added to activate platelets. After that, the plasma was incubated at t 37°C in a thermostat until the gel was formed. As a result of constriction, the gel was separated into a clot and serum.

Всем пациентам перед началом лечения проводили базовое офтальмологическое исследование, оптическую когерентную томографию. На полученных результатах лечения большой группы пациентов с различной степенью повреждения роговицы был разработан определенный алгоритм дифференцированного лечения в зависимости от степени повреждения роговицы.All patients underwent a basic ophthalmological examination and optical coherence tomography before the start of treatment. Based on the results of treatment of a large group of patients with varying degrees of corneal damage, a certain algorithm for differentiated treatment was developed depending on the degree of corneal damage.

Клинический пример 1.Clinical example 1.

Пациентка К. поступила в отделение с жалобами на снижение зрения, дискомфорт в левом глазу. В анамнезе - химический ожог неизвестной жидкостью 9 лет назад; многократные реконструктивные операции на веках. Две недели назад произошло обострение кератоконъюнктивита, по месту жительства выявили эрозию роговицы (Фиг. 1а - Дефект роговицы на момент начала лечения), проводили консервативное лечение - безуспешно. Нами начато лечение с помощью инстилляций лизата богатой тромбоцитами плазмы, содержащей количество тромбоцитов не менее 1000*109 кл/л и с долей функционально полноценных тромбоцитов не менее 38%, при этом провели инстилляций лизата БоТП по 1 капле 3 раза в день до полного заживления.Patient K. was admitted to the department with complaints of decreased vision, discomfort in the left eye. In the anamnesis - a chemical burn with an unknown liquid 9 years ago; multiple reconstructive surgeries on the eyelids. Two weeks ago there was an exacerbation of keratoconjunctivitis, corneal erosion was detected at the place of residence (Fig. 1a - Corneal defect at the time of treatment), conservative treatment was carried out - unsuccessfully. We started treatment with instillations of platelet-rich plasma lysate containing a platelet count of at least 1000 * 10 9 cells / l and with a proportion of functionally complete platelets of at least 38%, while instilling PRP lysate 1 drop 3 times a day until complete healing .

При осмотре на 7 сутки лечения лизатом отмечается уменьшение интенсивности помутнения за счет снижения отека, роговица не окрашивается флюоресцеином (Фиг. 1б - Роговица на 7-е сутки лечения). При наблюдении в динамике в течение 3-х месяцев рецидива не было.When viewed on the 7th day of treatment with lysate, there is a decrease in the intensity of turbidity due to a decrease in edema, the cornea is not stained with fluorescein (Fig. 1b - Cornea on the 7th day of treatment). When observed in the dynamics for 3 months, there was no recurrence.

Клинический пример 2.Clinical example 2.

Пациентка Н. поступила в отделение с жалобами на боли, снижение зрения на левом глазу. В анамнезе операция на веках (блефаропластика), после которой появились дискомфорт и сухость в глазах. В течение 3-х последних месяцев отмечает светобоязнь, боль, слезотечение, был поставлен диагноз OS трофическая рецидивирующая язва роговицы с глубиной поражения 20 мкм (Фиг. 2а - На момент начала применения лизата, 2б - Данные ОСТ, глубина дефекта 20 мкм). Начато лечение с помощью субконъюнктивальных инъекций лизата БоТП, содержащего количество тромбоцитов не менее 1000*109 кл/л и с долей функционально полноценных тромбоцитов не менее 38%, 1 раз в день через день по 0.5 мл, всего 3 инъекции.Patient N. was admitted to the department with complaints of pain, decreased vision in the left eye. She has a history of eyelid surgery (blepharoplasty), which resulted in discomfort and dryness in the eyes. Over the past 3 months, he has been noted photophobia, pain, lacrimation, was diagnosed with OS trophic recurrent corneal ulcer with a lesion depth of 20 µm (Fig. 2a - At the time of the start of the lysate, 2b - OST data, defect depth 20 µm). Treatment was started with subconjunctival injections of PRP lysate containing a platelet count of at least 1000*10 9 cells/l and with a fraction of functionally complete platelets of at least 38%, 0.5 ml once a day every other day, 3 injections in total.

Через одну неделю после начала лечения отмечали уменьшение глубины дефекта, снижение интенсивности окрашивания.One week after the start of treatment, a decrease in the depth of the defect and a decrease in the intensity of staining were noted.

При осмотре на 14 сутки дефект полностью эпителизировался, отмечалось уменьшение отека роговицы (с 667 мкм до 645 мкм) (Фиг. 2в - На 14-е сутки от начала применения лизата, 2г - Данные ОСТ на 14 сутки).On examination on the 14th day, the defect was completely epithelialized, there was a decrease in corneal edema (from 667 μm to 645 μm) (Fig. 2c - On the 14th day from the start of the lysate, 2d - OST data on the 14th day).

Клинический пример 3.Clinical example 3.

Пациент В., поступил в стационар: постожоговая язва роговицы с субтотальной конъюнктивизацией, лимбально-клеточная недостаточность правого глаза. Из анамнеза: со слов ожог произошел в быту (кипятком). Находился на стационарном лечении по месту жительства, где проводили длительную консервативную терапию. Спустя 3 месяца после травмы пациент обратился в НМИЦ с жалобами на отсутствие предметного зрения, ощущение инородного тела, слизистое отделяемое из глаза.Patient V. was admitted to the hospital: post-burn corneal ulcer with subtotal conjunctivization, limbal cell insufficiency of the right eye. From the anamnesis: according to the words, the burn occurred in everyday life (boiling water). He was on inpatient treatment at the place of residence, where they carried out long-term conservative therapy. 3 months after the injury, the patient turned to the NMIC with complaints of lack of object vision, foreign body sensation, mucous discharge from the eye.

При поступлении Vis OD pr.l.certae OS 1.0. При осмотре глазная щель сужена. В центре роговицы язва диаметром 5,5×5,0 мм, с неоднородной рыхлой поверхностью глубиной 110 мкм (фиг. 3а - Дефект роговицы на момент обращения).Upon receipt of Vis OD pr.l.certae OS 1.0. On examination, the palpebral fissure is narrowed. In the center of the cornea there is an ulcer with a diameter of 5.5×5.0 mm, with a heterogeneous loose surface 110 μm deep (Fig. 3a - Corneal defect at the time of treatment).

Учитывая, что пациенту проводилась длительная репаративная терапия с использованием кератопротекторов без видимого эффекта, принято решение о применении тромбофибринового сгустка.Considering that the patient underwent long-term reparative therapy using keratoprotectors with no visible effect, a decision was made to use a thrombofibrin clot.

Полученный сгусток уложили на поверхность роговицы, затем сверху покрыли амниотической мембраной (Фиг. 3б - Сгусток уложен на поверхность роговицы, фиксирован амниотической мембраной). Мембрану фиксировали к эписклере по границе лимба циркулярным швом, по лимбу в 4-х квадрантах произвели инъекции аутологичной сыворотки. После этого была выполнена блефарорафия.The resulting clot was placed on the surface of the cornea, then covered with an amniotic membrane from above (Fig. 3b - The clot was placed on the surface of the cornea, fixed with an amniotic membrane). The membrane was fixed to the episclera along the border of the limbus with a circular suture, injections of autologous serum were made along the limbus in 4 quadrants. After that, blepharoscopy was performed.

На 5 сутки произвели расшивание век. Амниотическая мембрана и остатки тромбофибринового сгустка были удалены для оценки эпителизации. При осмотре выявлено равномерное окрашивание флюоресцеином. Площадь эрозии сократилась до 4,0×4,0 мм, обрела более четкие границы (Фиг. 3в - Клиническая картина на 5-е сутки, после снятия конструкции).On the 5th day, the eyelids were embroidered. The amniotic membrane and remnants of thrombofibrin clot were removed to assess epithelialization. Examination revealed uniform staining with fluorescein. The area of erosion decreased to 4.0×4.0 mm, acquired clearer boundaries (Fig. 3c - Clinical picture on the 5th day after removal of the structure).

Учитывая положительную динамику, но не полное закрытие дефекта, процедуру повторили. Пациент был выписан под амбулаторное наблюдение с необходимостью осмотра через 2 недели. При повторном осмотре, после снятия швов с век и удаления остатков амниотической мембраны с роговицы, наблюдали уменьшение инъекции глазного яблока, роговица полностью эпителизировалась, не окрашивалась флюоресцеином. Vis OD счет пальцев у лица эксцентрично (Фиг. 3г - Клиническая картина на 14-е сутки, роговица не окрашивается флюоресцеином).Given the positive dynamics, but not complete closure of the defect, the procedure was repeated. The patient was discharged under outpatient observation with the need for examination after 2 weeks. Upon re-examination, after removing the sutures from the eyelids and removing the remnants of the amniotic membrane from the cornea, a decrease in the injection of the eyeball was observed, the cornea was completely epithelialized, not stained with fluorescein. Vis OD counting fingers in the face eccentrically (Fig. 3d - Clinical picture on the 14th day, the cornea is not stained with fluorescein).

Таким образом, предложенный способ дифференцированного лечения эрозий и язв роговицы позволяет добиться адекватных лечебных результатов.Thus, the proposed method for the differentiated treatment of corneal erosions and ulcers makes it possible to achieve adequate therapeutic results.

Claims (2)

1. Способ лечения эрозий и язв роговицы, включающий применение продукта богатой тромбоцитами аутоплазмы (БоТП), отличающийся тем, что используют при эрозии и язве роговицы глубиной 100 мкм и менее лизат БоТП, полученный из богатой тромбоцитами плазмы, содержащей количество тромбоцитов не менее 1000×109 кл/л и с долей функционально полноценных тромбоцитов не менее 38%, при этом при эрозии проводят инстилляции лизата БоТП по 1 капле 3 раза в день до полного заживления, при язве глубиной 100 мкм и менее - субконъюнктивальные инъекции 1 раз в день через день по 0.5 мл, всего 3 инъекции, а при язве роговицы глубиной более 100 мкм - покрытие роговицы тромбофибриновым сгустком с его фиксацией амниотической мембраной к эписклере в сочетании с субконъюнктивальным введением по лимбу в 4-х квадрантах аутологичной сыворотки в общем объеме 1 мл и выполняют тарзорафию.1. A method for the treatment of corneal erosions and ulcers, including the use of a platelet-rich autoplasma product (PRP), characterized in that PRP lysate obtained from platelet-rich plasma containing a platelet count of at least 1000× is used for corneal erosion and ulcer with a depth of 100 μm or less 10 9 cells / l and with a proportion of functionally complete platelets of at least 38%, while in case of erosion, PRP lysate is instilled 1 drop 3 times a day until complete healing, with an ulcer with a depth of 100 microns or less - subconjunctival injections 1 time per day through 0.5 ml per day, 3 injections in total, and in case of a corneal ulcer with a depth of more than 100 microns - covering the cornea with a thrombofibrin clot with its fixation with an amniotic membrane to the episclera in combination with subconjunctival injection through the limbus in 4 quadrants of autologous serum in a total volume of 1 ml and perform tarsorrhaphy. 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что при недостаточной эффективности лечения язвы глубиной более 100 мкм процедуру повторяют.2. The method according to p. 1, characterized in that if the treatment of an ulcer with a depth of more than 100 microns is insufficient, the procedure is repeated.
RU2021124328A 2021-08-17 2021-08-17 Method for differentiated treatment of corneal erosions and ulcers RU2765601C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2021124328A RU2765601C1 (en) 2021-08-17 2021-08-17 Method for differentiated treatment of corneal erosions and ulcers

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2021124328A RU2765601C1 (en) 2021-08-17 2021-08-17 Method for differentiated treatment of corneal erosions and ulcers

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2765601C1 true RU2765601C1 (en) 2022-02-01

Family

ID=80214527

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2021124328A RU2765601C1 (en) 2021-08-17 2021-08-17 Method for differentiated treatment of corneal erosions and ulcers

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2765601C1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2782129C1 (en) * 2022-03-31 2022-10-21 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России) Method for surgical treatment of corneal defects of various origins

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK1294414T3 (en) * 2000-06-29 2006-07-24 Biosyntech Canada Inc Preparation and method of healing and regenerating cartilage and other tissues
WO2013061309A2 (en) * 2011-10-27 2013-05-02 Turzi Mr Antoine New a-prp medical device & tissue engineering composition, manufacturing machines and process
RU2699206C1 (en) * 2019-02-27 2019-09-03 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России) Method of treating corneal defects via an autologous thrombofibrin clot
RU2717448C1 (en) * 2019-04-02 2020-03-23 Государственное бюджетное учреждение здравоохранения города Москвы Научно-исследовательский институт скорой помощи имени Н.В. Склифосовского Департамента здравоохранения г. Москвы Method of producing thrombocyte-rich plasma and method for producing thrombo-fibbrin gel or clot with serum, containing growth factors from unstabilised venous blood

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK1294414T3 (en) * 2000-06-29 2006-07-24 Biosyntech Canada Inc Preparation and method of healing and regenerating cartilage and other tissues
WO2013061309A2 (en) * 2011-10-27 2013-05-02 Turzi Mr Antoine New a-prp medical device & tissue engineering composition, manufacturing machines and process
RU2699206C1 (en) * 2019-02-27 2019-09-03 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России) Method of treating corneal defects via an autologous thrombofibrin clot
RU2717448C1 (en) * 2019-04-02 2020-03-23 Государственное бюджетное учреждение здравоохранения города Москвы Научно-исследовательский институт скорой помощи имени Н.В. Склифосовского Департамента здравоохранения г. Москвы Method of producing thrombocyte-rich plasma and method for producing thrombo-fibbrin gel or clot with serum, containing growth factors from unstabilised venous blood

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ALIO J.L. et al., The role of "eye platelet rich plasma" (E-PRP) for wound healing in ophthalmology, Curr Pharm Biotechnol, 2012; 13 (7): 1257-65. *
SABATER A.L. et al., Use of autologous plasma rich in growth factors fibrin membrane in the surgical management of ocular surface diseases, Int Ophthalmol, 2021 Jul; 41 (7): 2347-2358. *
ЛОШКАРЕВА А.О. и др. Применение богатой тромбоцитами плазмы у пациентов с хроническими эрозиями роговицы, XI Всероссийская научная конференция молодых ученых "Актуальные проблемы офтальмологии", Современные технологии в офтальмологии N4, 2016, с. 131-132. *
ФЕДОСЕЕВА Е.В. и др. Морфофункциональные особенности плазмы, богатой тромбоцитами, и ее применение в офтальмологии, Офтальмология, 2018; 15 (4): 388-393. *
ФЕДОСЕЕВА Е.В. и др. Морфофункциональные особенности плазмы, богатой тромбоцитами, и ее применение в офтальмологии, Офтальмология, 2018; 15 (4): 388-393. ЛОШКАРЕВА А.О. и др. Применение богатой тромбоцитами плазмы у пациентов с хроническими эрозиями роговицы, XI Всероссийская научная конференция молодых ученых "Актуальные проблемы офтальмологии", Современные технологии в офтальмологии N4, 2016, с. 131-132. ALIO J.L. et al., The role of "eye platelet rich plasma" (E-PRP) for wound healing in ophthalmology, Curr Pharm Biotechnol, 2012; 13 (7): 1257-65. SABATER A.L. et al., Use of autologous plasma rich in growth factors fibrin membrane in the surgical management of ocular surface diseases, Int Ophthalmol, 2021 Jul; 41 (7): 2347-2358. *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2782129C1 (en) * 2022-03-31 2022-10-21 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России) Method for surgical treatment of corneal defects of various origins
RU2822412C1 (en) * 2023-10-19 2024-07-04 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России) Method for preventing keratotransplant lysis in urgent surgery

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Ronci et al. Platelet-rich plasma as treatment for persistent ocular epithelial defects
Nishida et al. Clinical evaluation of fibronectin eyedrops on epithelial disorders after herpetic keratitis
RU2652076C1 (en) Method of surgical treatment of end-to-end idiopathic macular ruptures of the retina
RU2548741C2 (en) Activated leukocyte composition
Kohnen et al. Effect of heparin in irrigating solution on inflammation following small incision cataract surgery
US5145680A (en) Eye drop formulation useful for treating lesions of corneal epithelium
RU2765601C1 (en) Method for differentiated treatment of corneal erosions and ulcers
RU2699206C1 (en) Method of treating corneal defects via an autologous thrombofibrin clot
RU2720164C1 (en) Method for surgical treatment of macular ruptures using autologous thrombocyte enriched plasma
Halmay et al. Bilateral band-shaped deep keratitis and iridocyclitis in systemic lupus erythematosus
CN105188731B (en) For treating the protein s LURP-1 of eye disease
Wu et al. Chitosan-based thermosensitive hydrogel with longterm release of murine nerve growth factor for neurotrophic keratopathy
RU2714193C1 (en) Method of treating inflammatory or dystrophic eye diseases
RU2393824C1 (en) Method of treating macular oedemas of various geneses
RU2809012C1 (en) Method of treating corneal defects of various etiologies
RU2607163C1 (en) Method of surgical management of corneal defects of various geneses
EP4125749A1 (en) Methods of using umbilical cord products for treatment of ocular surface disorders
RU2440801C1 (en) Method of treating deep stromal keratites
RU2807860C1 (en) Method of combined fixation of amniotic membrane for treatment of chronic corneaal erosions
RU2822412C1 (en) Method for preventing keratotransplant lysis in urgent surgery
RU2813951C1 (en) Method for biocoating of injured cornea
RU2733576C1 (en) Method of treating post-traumatic scars of peri-orbital region and eyelid region
RU2095067C1 (en) Method of stimulation of repair and trophic processes in organism tissues
RU2177801C1 (en) Agent inhibiting angiogenesis in visual organ disease
JPS62501628A (en) wound healing agent