RU2754617C1 - Способ получения фармацевтического средства для торможения пролиферативной активности опухолевых клеток - Google Patents
Способ получения фармацевтического средства для торможения пролиферативной активности опухолевых клеток Download PDFInfo
- Publication number
- RU2754617C1 RU2754617C1 RU2021100394A RU2021100394A RU2754617C1 RU 2754617 C1 RU2754617 C1 RU 2754617C1 RU 2021100394 A RU2021100394 A RU 2021100394A RU 2021100394 A RU2021100394 A RU 2021100394A RU 2754617 C1 RU2754617 C1 RU 2754617C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- pharmaceutical agent
- proliferative activity
- powder
- reactor
- explosion
- Prior art date
Links
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 title claims abstract description 20
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 title claims abstract description 16
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 title claims abstract description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 6
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 title abstract description 12
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 35
- 238000004880 explosion Methods 0.000 claims abstract description 15
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims abstract description 14
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims abstract description 14
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 12
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 claims abstract description 9
- UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N Carbon monoxide Chemical compound [O+]#[C-] UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000012071 phase Substances 0.000 claims abstract description 7
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 claims abstract description 6
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 claims abstract description 6
- 229910001209 Low-carbon steel Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 claims abstract description 5
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims abstract description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 abstract description 18
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 16
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 10
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 10
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 4
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910045601 alloy Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000956 alloy Substances 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- SCJNCDSAIRBRIA-DOFZRALJSA-N arachidonyl-2'-chloroethylamide Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(=O)NCCCl SCJNCDSAIRBRIA-DOFZRALJSA-N 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical class CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010052360 Colorectal adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910017112 Fe—C Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 238000002441 X-ray diffraction Methods 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 229940008201 allegra Drugs 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 229910001566 austenite Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000008274 breast adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 201000010989 colorectal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000007599 discharging Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- RWTNPBWLLIMQHL-UHFFFAOYSA-N fexofenadine Chemical compound C1=CC(C(C)(C(O)=O)C)=CC=C1C(O)CCCN1CCC(C(O)(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)CC1 RWTNPBWLLIMQHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 1
- 239000008240 homogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- UQSXHKLRYXJYBZ-UHFFFAOYSA-N iron oxide Inorganic materials [Fe]=O UQSXHKLRYXJYBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013980 iron oxide Nutrition 0.000 description 1
- VBMVTYDPPZVILR-UHFFFAOYSA-N iron(2+);oxygen(2-) Chemical class [O-2].[Fe+2] VBMVTYDPPZVILR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000005296 lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000002923 metal particle Substances 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 102220240796 rs553605556 Human genes 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
- A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
- A61K33/26—Iron; Compounds thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B22—CASTING; POWDER METALLURGY
- B22F—WORKING METALLIC POWDER; MANUFACTURE OF ARTICLES FROM METALLIC POWDER; MAKING METALLIC POWDER; APPARATUS OR DEVICES SPECIALLY ADAPTED FOR METALLIC POWDER
- B22F1/00—Metallic powder; Treatment of metallic powder, e.g. to facilitate working or to improve properties
- B22F1/05—Metallic powder characterised by the size or surface area of the particles
- B22F1/052—Metallic powder characterised by the size or surface area of the particles characterised by a mixture of particles of different sizes or by the particle size distribution
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B22—CASTING; POWDER METALLURGY
- B22F—WORKING METALLIC POWDER; MANUFACTURE OF ARTICLES FROM METALLIC POWDER; MAKING METALLIC POWDER; APPARATUS OR DEVICES SPECIALLY ADAPTED FOR METALLIC POWDER
- B22F1/00—Metallic powder; Treatment of metallic powder, e.g. to facilitate working or to improve properties
- B22F1/05—Metallic powder characterised by the size or surface area of the particles
- B22F1/054—Nanosized particles
- B22F1/056—Submicron particles having a size above 100 nm up to 300 nm
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B22—CASTING; POWDER METALLURGY
- B22F—WORKING METALLIC POWDER; MANUFACTURE OF ARTICLES FROM METALLIC POWDER; MAKING METALLIC POWDER; APPARATUS OR DEVICES SPECIALLY ADAPTED FOR METALLIC POWDER
- B22F1/00—Metallic powder; Treatment of metallic powder, e.g. to facilitate working or to improve properties
- B22F1/14—Treatment of metallic powder
- B22F1/145—Chemical treatment, e.g. passivation or decarburisation
- B22F1/147—Making a dispersion
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B22—CASTING; POWDER METALLURGY
- B22F—WORKING METALLIC POWDER; MANUFACTURE OF ARTICLES FROM METALLIC POWDER; MAKING METALLIC POWDER; APPARATUS OR DEVICES SPECIALLY ADAPTED FOR METALLIC POWDER
- B22F9/00—Making metallic powder or suspensions thereof
- B22F9/02—Making metallic powder or suspensions thereof using physical processes
- B22F9/14—Making metallic powder or suspensions thereof using physical processes using electric discharge
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82B—NANOSTRUCTURES FORMED BY MANIPULATION OF INDIVIDUAL ATOMS, MOLECULES, OR LIMITED COLLECTIONS OF ATOMS OR MOLECULES AS DISCRETE UNITS; MANUFACTURE OR TREATMENT THEREOF
- B82B3/00—Manufacture or treatment of nanostructures by manipulation of individual atoms or molecules, or limited collections of atoms or molecules as discrete units
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B22—CASTING; POWDER METALLURGY
- B22F—WORKING METALLIC POWDER; MANUFACTURE OF ARTICLES FROM METALLIC POWDER; MAKING METALLIC POWDER; APPARATUS OR DEVICES SPECIALLY ADAPTED FOR METALLIC POWDER
- B22F1/00—Metallic powder; Treatment of metallic powder, e.g. to facilitate working or to improve properties
- B22F1/05—Metallic powder characterised by the size or surface area of the particles
- B22F1/054—Nanosized particles
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B22—CASTING; POWDER METALLURGY
- B22F—WORKING METALLIC POWDER; MANUFACTURE OF ARTICLES FROM METALLIC POWDER; MAKING METALLIC POWDER; APPARATUS OR DEVICES SPECIALLY ADAPTED FOR METALLIC POWDER
- B22F2301/00—Metallic composition of the powder or its coating
- B22F2301/35—Iron
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B22—CASTING; POWDER METALLURGY
- B22F—WORKING METALLIC POWDER; MANUFACTURE OF ARTICLES FROM METALLIC POWDER; MAKING METALLIC POWDER; APPARATUS OR DEVICES SPECIALLY ADAPTED FOR METALLIC POWDER
- B22F2304/00—Physical aspects of the powder
- B22F2304/05—Submicron size particles
- B22F2304/054—Particle size between 1 and 100 nm
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B22—CASTING; POWDER METALLURGY
- B22F—WORKING METALLIC POWDER; MANUFACTURE OF ARTICLES FROM METALLIC POWDER; MAKING METALLIC POWDER; APPARATUS OR DEVICES SPECIALLY ADAPTED FOR METALLIC POWDER
- B22F2304/00—Physical aspects of the powder
- B22F2304/10—Micron size particles, i.e. above 1 micrometer up to 500 micrometer
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B22—CASTING; POWDER METALLURGY
- B22F—WORKING METALLIC POWDER; MANUFACTURE OF ARTICLES FROM METALLIC POWDER; MAKING METALLIC POWDER; APPARATUS OR DEVICES SPECIALLY ADAPTED FOR METALLIC POWDER
- B22F2998/00—Supplementary information concerning processes or compositions relating to powder metallurgy
- B22F2998/10—Processes characterised by the sequence of their steps
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B22—CASTING; POWDER METALLURGY
- B22F—WORKING METALLIC POWDER; MANUFACTURE OF ARTICLES FROM METALLIC POWDER; MAKING METALLIC POWDER; APPARATUS OR DEVICES SPECIALLY ADAPTED FOR METALLIC POWDER
- B22F2999/00—Aspects linked to processes or compositions used in powder metallurgy
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Manufacturing & Machinery (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Настоящее изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальным исследованиям в онкологии, и может быть использовано для получения фармацевтического средства для торможения пролиферативной активности клеток рака шейки матки Hela, включающее использование металлического порошка, полученного электрическим взрывом металлической проволоки в атмосфере газа, при этом ведут электрический взрыв проволоки из низкоуглеродистой стали при удельной энергии 7-18 кДж/г и длительности импульса 1,2-2 мкс в реакторе, предварительно вакуумированном до остаточного давления 10-2 Па, а затем заполненном монооксидом углерода до давления 105 Па при скорости циркуляции газового потока в реакторе 10 м/с, осажденные в ловушку продукты взрыва пассивируют в атмосфере воздуха в течение не менее 48 часов, полученный порошок извлекают и смешивают с раствором питательной среды RPMI-1640 с L-глутамином, рН которого составляет 7,2, в пропорции массы порошка к объёму указанного раствора от 1:10 до 2,7:10, затем центрифугируют до разделения фаз, жидкую фазу сливают и используют в качестве фармацевтического средства. Техническим результатом настоящего изобретения является расширение арсенала средств для торможения пролиферативной активности опухолевых клеток. 12 ил., 3 пр.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальным исследованиям в онкологии, и может быть использовано для торможения пролиферативной активности опухолевых клеток.
Известен способ получения противоопухолевой композиции [RU 2686679 С2, МПК (2006.01) A61K 33/30, A61K 47/12, A61K 47/36, А61Р 35/00, опубл. 30.04.2019], заключающийся в том, что готовят водный раствор ацилированного производного гиалуроновой кислоты, затем добавляют суперпарамагнитные наночастицы, диспергированные в органическом галогенидном растворителе и стабилизированные олеиновой кислотой. Полученную суспензию обрабатывают ультразвуком до образования гомогенной смеси, а затем свободные суперпарамагнитные наночастицы отделяют от суперпарамагнитных наночастиц, загруженных в наномицеллы, центрифугированием и последующей фильтрацией. Фильтрат затем лиофилизируют и стерилизуют автоклавированием в окончательной упаковке. Лиофилизат может быть растворен в водном растворе, а затем подвергнут стерилизации автоклавированием в окончательной упаковке. Суперпарамагнитные наночастицы, имеющие размер от 5 до 20 нм, представляют собой наночастицы на основе оксидов железа. Количество железа в композиции составляет от 0,3 до 3 мас. %.
Полученная композиция может содержать лекарственное вещество и является селективно цитотоксической как в отношении суспензионных, так и адгезивных клеточных опухолевых линий, особенно в отношении опухолевых клеточных линий колоректальной карциномы и аденокарциномы, карциномы легкого, гепатоцеллюлярной карциномы и аденокарциномы молочной железы.
Известен способ получения фармацевтического средства для угнетения пролиферативной активности опухолевых клеток [пример 2 из RU 2560432 С2, МПК (2006.01) B01J 20/06, В82В 3/00, A61K 33/08246, опубл. 20.08.2015], принятый за прототип, включающий получение биметаллических наночастиц Fe-Al с размером частиц около 100 им параллельным электрическим взрывом железной и алюминиевой проволоки в атмосфере азота при соотношении Fe:Al=50:50% масс. 20 г полученного порошка заливают 2000 мл дистиллированной воды и нагревают при постоянном перемешивании до 60°С, контролируя и поддерживая рН реагирующей смеси на уровне 9,0 раствором аммиака. Реакцию проводят в течение 60 мин. Затем суспензию отфильтровывают, промывают дистиллированной водой до нейтральной реакции промывных вод и сушат при температуре 90°С в течение 4 часов.
Полученное фармацевтическое средство в виде порошка суспендируют в ростовом средстве и добавляют смесь трипсин:версена (в соотношении 1:3) и используют для подавления пролиферативной активности раковых клеток, которую оценивают путем определения индекса пролиферации (отношение числа выросших клеток к числу посеянных) через 48 и 72 часа.
Техническим результатом предложенного изобретения является расширение арсенала средств для торможения пролиферативной активности опухолевых клеток.
Способ получения фармацевтического средства для торможения пролиферативной активности клеток рака также как в прототипе включает использование металлического порошка, полученного электрическим взрывом металлической проволоки в атмосфере газа.
Согласно изобретению ведут электрический взрыв проволоки из низкоуглеродистой стали при удельной энергии 7-18 кДж/г и длительности импульса 1,2-2 мкс в реакторе, предварительно вакуумированном до остаточного давления 10-2 Па, а затем заполненном монооксидом углерода до давления 105 Па при скорости циркуляции газового потока в реакторе 10 м/с. Осажденные в ловушку продукты взрыва пассивируют в атмосфере воздуха в течение не менее 48 часов. Полученный порошок извлекают и смешивают с питательным раствором, рН которого составляет 7,2, в пропорции Т:Ж от 1:10 до 2,7:10, затем центрифугируют до разделения фаз, жидкую фазу сливают и используют в качестве фармацевтического средства.
В качестве питательного раствора используют среду RPMI-1640 с L-глутамином.
В предложенном способе при получении металлического порошка происходит взаимодействие наночастиц металлического железа с монооксидом углерода по реакции:
Fe+5СО=Fe(CO)5
Так как продукты взрыва потоком газа переносятся в ловушку, то эта реакция не доходит до конца. Образующийся продукт накапливается в адсорбционном слое и остается на поверхности твердых наночастиц.
Для отделения Fe(CO)5 от непрореагировавших металлических частиц в качестве растворителя использован питательный раствор.
Использование предложенного фармацевтического средства позволяет тормозить пролиферативную активность опухолевых клеток с индексом пролиферации менее 1,0 отн. ед. через 5-10 часов.
На фиг. 1 представлена схема установки для получения металлического порошка.
На фиг. 2 представлены фотографии частиц порошка, полученного в примере 1.
На фиг. 3 и 4 показано распределение частиц полученного в примере 1 порошка по размерам.
На фиг. 5 представлена рентгенограмма полученного в примере 1 порошка.
На фиг. 6 проиллюстрировано изменение клеточного индекса в клетках HeLa после добавления фармацевтического средства.
На фиг. 7 и 8 представлены фотографии частиц порошка, полученного в примере 2.
На фиг. 9 показано распределение частиц полученного в примере 2 порошка по размерам.
На фиг. 10 и 11 представлены фотографии частиц порошка, полученного в примере 3.
На фиг. 12 показано распределение частиц по размерам полученного в примере 3 порошка.
Установка для получения металлического порошка содержит горизонтально установленный реактор 1, внутри которого расположены высоковольтный 2 и заземленный 3 электроды, а также механизм подачи 4 заготовки проволоки. Электрод 2 подключен к источнику питания 5 (ИП). Снизу реактор 1 соединен трубопроводом с входом в циклон 6 цилиндрического типа, нижняя часть которого снабжена бункером 7 для сбора порошка. Выход циклона 6 соединен с верхней частью реактора 1 трубопроводом, в котором размещен вентилятор 8. Циклон 6 через соответствующие трубопроводы, оснащенные вентилями, соединен с баллоном 9 (БГ), содержащим монооксид углерода, с форвакуумным насосом 10 (ВН) и с вентилем сброса рабочего газа.
Пример 1.
Катушку стальной низкоуглеродистой проволоки сплава марки СВ-08 разместили в механизме подачи 4 проволоки в реакторе 1. Диаметр проволоки составлял 0,3 мм, а длина межэлектродного промежутка 80 мм. С помощью форвакуумного насоса 10 (ВН) вакуумировали объем установки до остаточного давления 10-2. Затем из баллона 9 (БГ) заполнили рабочий объем установки монооксидом углерода до давления 105 Па. Включив вентилятор 8 по трубопроводу, соединяющему его с реактором 1, осуществляли непрерывную циркуляцию монооксида углерода со скоростью 10 м/с. Включив механизм подачи 4 обеспечили непрерывную подачу проволоки в направлении от заземленного 3 электрода к высоковольтному 2. Расстояние межэлектродного промежутка составляло 80 мм. На высоковольтный 2 электрод от источника питания 5 (ИП) подавали высокое напряжение длительностью 1,5 мкс. При касании проволоки, подаваемой в реактор 1, высоковольтного электрода 2 происходил ее взрыв, затраченная удельная энергия составляла 14 кДж/г. Продукты взрыва проволоки газовым потоком выносились из реактора 1 в циклон 6, где происходило их отделение от монооксида углерода и осаждение в бункере 7. Очищенный газ из циклона 6 возвращался на вход вентилятора 8 и вновь поступал в реактор 1. После заполнения бункера 7 наработанными продуктами взрыва проволоки, отключили источник питания 5 (ИП), механизм подачи 4 проволоки, вентилятор 8 и отсоединили бункер 7 от циклона 6. Бункер 7 накрыли крышкой с отверстием диаметром 1 мм и выдержали в таком состоянии в течение 48 часов для приведения полученного продукта в равновесное состояние. После этого полученный металлический порошок извлекли из бункера 7 и поместили в емкость для хранения.
Полученный металлический порошок представляет собой смесь наночастиц размером от 20 до 300 нм (фиг. 2, 3) с максимумом распределения в 80 нм и микрочастиц с размером до 2 мкм и максимумом распределения около 0,8 мкм. При этом количество частиц размером более 500 нм составляет не более 1% (фиг. 4).
Рентгенофазовый анализ показал, что полученный металлический порошок состоит из частиц чистого железа в виде фазы α-Fe и соединения аустенита в виде Fe-C (фиг. 5). Площадь его удельной поверхности составила 9,3 м2/г.
В стерильных условиях из полученного металлического порошка взяли навеску массой 270 мкг и прилили к нему 1000 мкл питательного раствора RPMI-1640 с L-глутамином с рН 7,2. Полученную смесь перемешали ультразвуком в течение 10 минут в ультразвуковой ванне «WiseClean» с рабочей частотой 300 кГц. Затем полученную суспензию центрифугировали 10 минут на центрифуге «Allegra 64R» (USA) при 3000 об/мин для разделения жидкой и твердой фаз. Жидкую фазу, которая является готовым фармацевтическим средством, слили в емкость.
Полученное фармацевтическое средство использовали для проведения тестирования в клетках HeLa в режиме in vitro.
Использовали клеточную линию рака шейки матки HeLa, полученную из яичника китайского хомячка СНО-K1. Клетки содержались в полной питательной среде RPMI-1640, содержащей 10% инактивированной эмбриональной телячьей сыворотки и антибиотики (50 ед/мл пенициллина и 50 мкг/мл стрептомицина), при 37°С, при 5% содержании СО2, во влажной среде(в СО2 инкубаторе).
Действие полученного фармацевтического средства на эпителиоидную карциному рака шейки матки человека He-La клеток рака осуществляли с помощью планшета. Клетки высаживали в каждую лунку 8-ми луночного планшета от системы iCelligence (ACEA Bioscience, США) из расчета 70 тысяч клеток на лунку.
Через 4 часа после посева клеток в одни лунки прилили 200 мкл полученного фармацевтического средства, а в другие - 200 мкл питательного раствора RPMI-1640.
Для определения уровня пролиферативной активности использовали систему оценки в режиме реального времени iCelligence (ACEA Bioscience, США). Снятие показаний осуществляли в автоматическом режиме с интервалом в 1 час. Система iCelligence производила автоматический пересчет снимаемых значений в клеточный индекс, свидетельствующий об уровне пролиферативной активности клеток, а так же подсчет стандартного отклонения. Статистическую обработку данных проводили в программе Statistica.
Кривая малинового цвета (270 мкг/мл) на фиг.6 показывает торможение пролиферативной активности опухолевых клеток HeLa относительно контроля (кривая красного цвета). Торможение пролиферативной активности опухолевых клеток начинается практически сразу после добавления фармацевтического средства. Клеточный индекс составляет 0,5 отн. ед., а в контроле 3,25 отн. ед. за 120 час наблюдения.
Пример 2.
В условиях аналогичных примеру 1 осуществляли электрический взрыв заготовки диаметром 0,3 мм и длиной 80 мм из стальной низкоуглеродистой проволоки сплава марки СВ08, подавая энергию 7 кДж/г в течение 2 мкс.
Характерные изображения частиц полученного порошка приведены на фиг. 7 и 8.
Порошок представляет собой смесь микронных частиц с размером до 6 мкм и максимумом распределения в 2 мкм и нанометровых частиц размером от 20 до 300 нм с максимумом распределения 80 нм. Количество частиц размером более 500 нм составляет более 2% (фиг. 9). Фазовый состав полученного порошка такой же, как в примере 1 (фиг. 5). Площадь удельной поверхности этого порошка оставила 4 м2/г.
В стерильных условиях из полученного металлического порошка взяли навеску массой 100 мкг и прилили к нему 1000 мкл питательного раствора RPMI-1640 с L-глутамином с рН 7,2. При таких же условиях, как в примере 1, приготовили фармацевтическое средство.
Внесли в одни лунки полученное фармацевтическое средство из расчета 100 мкг/мл, а в контрольные - питательный раствор. Результаты наблюдения представлены голубой кривой на фиг. 6 (100 мкг/мл). Торможение пролиферативной активности опухолевых клеток HeLa относительно контрольной кривой красного цвета, начинается практически сразу после добавления фармацевтического средства. Клеточный индекс составляет 0,75 отн. ед., а в контроле 3,25 отн. ед. за 120 час наблюдения.
Пример 3.
В условиях аналогичных примеру 1 осуществляли электрический взрыв заготовки диаметром 0,3 мм и длиной 80 мм из стальной низкоуглеродистой проволоки сплава марки СВ08, подавая энергию 18 кДж/г в течение 1,2 мкс.
Характерные изображения частиц полученного порошка приведены на фиг. 10, 11.
Полученный порошок представляет собой смесь микронных частиц размером до 2 мкм и максимумом распределения в 500 нм и частично спекшихся нанометровых частиц размером от 20 до 300 нм с максимумом распределения 80 нм. Количество частиц размером более 500 нм составляет не более 0,5% (фиг. 12).Фазовый состав порошка такой же, как в примере 1 (фиг. 5). Площадь удельной поверхности этого порошка составила 11 м2/г.
Из полученного порошка взяли навеску массой 170 мкг и прилили к нему 1000 мкл питательного раствора RPMI-1640 L-глутамином с рН 7,2. При таких же условиях, как в примере 1, приготовили фармацевтическое средство. Внесли в одни лунки полученное фармацевтическое средство из расчета 170 мкг/мл, а в контрольные - питательный раствор. Результаты наблюдения представлены кривой зеленого цвета на фиг. 6 (170 мкг/мл). Торможение пролиферативной активности опухолевых клеток HeLa относительно контрольной кривой красного цвета начинается практически сразу после добавления фармацевтического средства. Клеточный индекс составляет 0,75 отн. ед., а в контроле 3,25 отн. ед. за 120 час наблюдения.
Claims (1)
- Способ получения фармацевтического средства для торможения пролиферативной активности клеток рака шейки матки Hela, включающий использование металлического порошка, полученного электрическим взрывом металлической проволоки в атмосфере газа, отличающийся тем, что ведут электрический взрыв проволоки из низкоуглеродистой стали при удельной энергии 7-18 кДж/г и длительности импульса 1,2-2 мкс в реакторе, предварительно вакуумированном до остаточного давления 10-2 Па, а затем заполненном монооксидом углерода до давления 105 Па при скорости циркуляции газового потока в реакторе 10 м/с, осажденные в ловушку продукты взрыва пассивируют в атмосфере воздуха в течение не менее 48 часов, полученный порошок извлекают и смешивают с раствором питательной среды RPMI-1640 с L-глутамином, рН которого составляет 7,2, в пропорции массы порошка к объёму указанного раствора от 1:10 до 2,7:10, затем центрифугируют до разделения фаз, жидкую фазу сливают и используют в качестве фармацевтического средства.
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2021100394A RU2754617C1 (ru) | 2021-01-11 | 2021-01-11 | Способ получения фармацевтического средства для торможения пролиферативной активности опухолевых клеток |
| PCT/RU2022/050003 WO2022149998A1 (en) | 2021-01-11 | 2022-01-10 | Method of obtaining a pharmaceutical agent used for inhibiting the proliferation of tumor cells |
| US18/259,175 US20240066058A1 (en) | 2021-01-11 | 2022-01-10 | Method of obtaining a pharmaceutical agent used for inhibiting the proliferation of tumor cells |
| CA3204393A CA3204393A1 (en) | 2021-01-11 | 2022-01-10 | Method of obtaining a pharmaceutical agent used for inhibiting the proliferation of tumor cells |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2021100394A RU2754617C1 (ru) | 2021-01-11 | 2021-01-11 | Способ получения фармацевтического средства для торможения пролиферативной активности опухолевых клеток |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2754617C1 true RU2754617C1 (ru) | 2021-09-06 |
Family
ID=77669936
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2021100394A RU2754617C1 (ru) | 2021-01-11 | 2021-01-11 | Способ получения фармацевтического средства для торможения пролиферативной активности опухолевых клеток |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20240066058A1 (ru) |
| CA (1) | CA3204393A1 (ru) |
| RU (1) | RU2754617C1 (ru) |
| WO (1) | WO2022149998A1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2022149999A1 (en) * | 2021-01-11 | 2022-07-14 | Limited Liability Company "Laboratory Of Innovative Technologies" | A method for producing a metal powder, comprising an electric explosion of a piece of a steel wire |
| WO2022149998A1 (en) * | 2021-01-11 | 2022-07-14 | Limited Liability Company "Laboratory Of Innovative Technologies" | Method of obtaining a pharmaceutical agent used for inhibiting the proliferation of tumor cells |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104684546A (zh) * | 2012-06-07 | 2015-06-03 | 哈佛大学校长及研究员协会 | 用于药物靶向的纳米疗法 |
| RU2560432C2 (ru) * | 2013-05-20 | 2015-08-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт физики прочности и материаловедения Сибирского отделения Российской академии наук (ИФПМ СО РАН) | Агломераты оксигидроксидов металлов и их применение |
| JP6174185B2 (ja) * | 2008-04-04 | 2017-08-02 | イミュノライト・エルエルシー | ｉｎ ｓｉｔｕでのフォトバイオモデュレーションのための非侵襲性システムおよび方法 |
| RU2674952C1 (ru) * | 2017-12-27 | 2018-12-13 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт физики прочности и материаловедения Сибирского отделения Российской академии наук (ИФПМ СО РАН) | Способ получения микро-мезопористых наноматериалов на основе складчатых нанолистов оксигидроксида алюминия и материал, полученный данным способом |
| RU2699886C1 (ru) * | 2018-12-13 | 2019-09-11 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт физики прочности и матероиаловедения Сибирского отделения Российской академии наук (ИФПМ СО РАН) | Способ получения металлического порошка и устройство для его осуществления |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2754617C1 (ru) * | 2021-01-11 | 2021-09-06 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Лаборатория Инновационных Технологий" | Способ получения фармацевтического средства для торможения пролиферативной активности опухолевых клеток |
-
2021
- 2021-01-11 RU RU2021100394A patent/RU2754617C1/ru active
-
2022
- 2022-01-10 WO PCT/RU2022/050003 patent/WO2022149998A1/en active Application Filing
- 2022-01-10 US US18/259,175 patent/US20240066058A1/en active Pending
- 2022-01-10 CA CA3204393A patent/CA3204393A1/en active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP6174185B2 (ja) * | 2008-04-04 | 2017-08-02 | イミュノライト・エルエルシー | ｉｎ ｓｉｔｕでのフォトバイオモデュレーションのための非侵襲性システムおよび方法 |
| CN104684546A (zh) * | 2012-06-07 | 2015-06-03 | 哈佛大学校长及研究员协会 | 用于药物靶向的纳米疗法 |
| RU2560432C2 (ru) * | 2013-05-20 | 2015-08-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт физики прочности и материаловедения Сибирского отделения Российской академии наук (ИФПМ СО РАН) | Агломераты оксигидроксидов металлов и их применение |
| RU2674952C1 (ru) * | 2017-12-27 | 2018-12-13 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт физики прочности и материаловедения Сибирского отделения Российской академии наук (ИФПМ СО РАН) | Способ получения микро-мезопористых наноматериалов на основе складчатых нанолистов оксигидроксида алюминия и материал, полученный данным способом |
| RU2699886C1 (ru) * | 2018-12-13 | 2019-09-11 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт физики прочности и матероиаловедения Сибирского отделения Российской академии наук (ИФПМ СО РАН) | Способ получения металлического порошка и устройство для его осуществления |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2022149999A1 (en) * | 2021-01-11 | 2022-07-14 | Limited Liability Company "Laboratory Of Innovative Technologies" | A method for producing a metal powder, comprising an electric explosion of a piece of a steel wire |
| WO2022149998A1 (en) * | 2021-01-11 | 2022-07-14 | Limited Liability Company "Laboratory Of Innovative Technologies" | Method of obtaining a pharmaceutical agent used for inhibiting the proliferation of tumor cells |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2022149998A1 (en) | 2022-07-14 |
| US20240066058A1 (en) | 2024-02-29 |
| WO2022149998A4 (en) | 2022-09-01 |
| CA3204393A1 (en) | 2022-07-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2754617C1 (ru) | Способ получения фармацевтического средства для торможения пролиферативной активности опухолевых клеток | |
| Liang et al. | A protein@ metal–organic framework nanocomposite for pH-triggered anticancer drug delivery | |
| CN101966344B (zh) | 一种具有磁性和发光性能的中空核壳纳米介孔载药体系及其制备与应用 | |
| EP2657223B1 (en) | Metal-salen complex compound and production method for same | |
| CN108853055B (zh) | 一种多功能核壳结构Fe3O4@TiO2@ZIF-8纳米粒子载药体系及其制备方法 | |
| CN107936058B (zh) | 多西紫杉醇衍生物及其制备方法和应用 | |
| Li et al. | Mesoporous caged‐γ‐AlOOH‐double‐stranded RNA analog complexes for cancer immunotherapy | |
| CN111643480A (zh) | 具有靶向性及pH响应性的金属有机框架复合纳米材料及其制备方法与应用 | |
| Wang et al. | Synergistic effects of stellated fibrous mesoporous silica and synthetic dsRNA analogues for cancer immunotherapy | |
| Cioran et al. | Preparation and characterization of Au nanoparticles capped with mercaptocarboranyl clusters | |
| KR20180076885A (ko) | 나노 복합체, 이를 포함하는 코팅용 조성물, 나노 복합체의 제조 장치 및 방법 | |
| CN115381965A (zh) | 一种γδT细胞功能化的磁性微球、制备方法及其用途 | |
| Gang et al. | Synthesis and biological evaluation of fluorescent hyaluronic acid modified amorphous calcium phosphate drug carriers for tumor-targeting | |
| CN106361724B (zh) | 一种20(R)-人参皂苷Rg3缓释纳米微球组合及其制备方法 | |
| CN110732027A (zh) | 一种刺激响应的靶向聚多糖超分子诊疗组装体及其制备方法 | |
| CN108516964B (zh) | 一种具有聚集诱导发光效应的纳米材料及其应用 | |
| Zhu et al. | Enhanced anti-metastatic activity of etoposide using layered double hydroxide nano particles | |
| CN113230418A (zh) | 一种超小核壳结构铁纳米颗粒的制备方法及应用 | |
| CN113527702B (zh) | 一种两亲性含磷树冠大分子材料及其制备和应用 | |
| CN113663060A (zh) | 全细胞肿瘤纳米疫苗、其制备方法和用途 | |
| CN110623938B (zh) | 一种mpc修饰的树状大分子包裹纳米金颗粒及其制备和应用 | |
| Zhang et al. | Ferroptosis-inducing inorganic arsenic (II) sulfide nanocrystals enhance immune activation | |
| Chattopadhyay et al. | Antigen conjugated nanoparticles reprogrammed the tumor-conditioned macrophages toward pro-immunogenic type through regulation of NADPH oxidase and p38MAPK | |
| Tr et al. | The use of iron oxide magnetic nanospheres and nanocubes for targeted doxorubicin delivery into 4t1 mouse breast carcinoma cells | |
| EP2277544A1 (en) | Biocompatible magnetic nano-clusters containing iron oxide respectively iron oxide - boron with primary use in magnetic drug targeting and boron neutron capture therapy |