RU2742508C2 - Способ идентификации генно-трансформированных семян сои и кукурузы, обработанных протравителем на основе производных фенилпиррола - Google Patents
Способ идентификации генно-трансформированных семян сои и кукурузы, обработанных протравителем на основе производных фенилпиррола Download PDFInfo
- Publication number
- RU2742508C2 RU2742508C2 RU2019102572A RU2019102572A RU2742508C2 RU 2742508 C2 RU2742508 C2 RU 2742508C2 RU 2019102572 A RU2019102572 A RU 2019102572A RU 2019102572 A RU2019102572 A RU 2019102572A RU 2742508 C2 RU2742508 C2 RU 2742508C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- seeds
- μmol
- activity
- identification
- treated
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N59/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing elements or inorganic compounds
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Dentistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Pretreatment Of Seeds And Plants (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
Изобретение относится к сельскому хозяйству и биотехнологии, а именно к способу идентификации ГМО в семенах с протравителем на основе производных фенилпиррола. Изобретение представляет собой способ идентификации генно-трансформированных семян сои, обработанных протравителем на основе производных фенилпиррола, согласно изобретению определяется активность фермента ацетилхолинэстеразы, при этом, если для семян сои значение активности меньше 90 мкмоль/г, то семена генно-модифицированные. 2 табл., 2 пр.
Description
Изобретение относится к сельскому хозяйству и биотехнологии, а именно к способам идентификации генно-инженерных трансформаций в семенах, обработанных протравителем на основе производных фенилпиррола.
Известен список генномодифицированных семян растений и имеются наборы для выявления генно-инженерных модификаций в них. Значительная часть выполняемых операций и реакций является трудоемкой и затратной. Вместе с тем на сегодняшний день требуется быстро дешево выявлять генные модификации в посевном материале и пищевой продукции.
В качестве метода определения генно-инженерных трансформаций известен метод идентификации и количественного определения новых линий ГМО (МУК 4.2.3309-15 Методы идентификации и количественного определения новых линий ГМО 2-го поколения в пищевых продуктах).
Известны ГОСТы на методы анализа для обнаружения ГМО (ГОСТ Р 52173-2003 Сырье и продукты пищевые. Метод идентификации генетически модифицированных источников (ГМИ) растительного происхождения.
ГОСТ Р 52174-2003 Биологическая безопасность. Сырье и продукты пищевые. Метод идентификации генетически модифицированных источников (ГМИ) растительного происхождения с применением биологического микрочипа).
В протравленных семенах сельскохозяйственных растений трудно определить наличие генно-инженерных трансформаций методом ПЦР в реальном времени. Системный протравитель, которым обработаны ГМО-семена, ингибирует ДНК-полимеразу. Данный факт ограничивает возможности этого метода при использовании семенного материала, так как нет возможности полностью «смыть» протравитель.
Фенилпирролы - это класс высокоэффективных фунгицидов, которые ингибируют рост мицелия патогенных грибов, вызывающих болезни сельскохозяйственных культур. Механизм действия данных веществ связан с формированием и нарушением функции клеточных мембран патогенов. Фунгициды эффективно подавляет развитие патогенов из рода Fusarium и Tilletia, вызывающих болезни проростков зерновых культур, а также из рода Altemaria, Ascochyta, Aspergillus, Fusarium, Helminthosporium, Rhizoctonia и Penicillium spp., вызывающих болезни проростков других культур. Используется для протравления семян.
Недостатком предлагаемых методов является их низкая экономическая эффективность, а так же то, что их действие не распространяется на семена, обработанные химическими протравителями на основе производных фенилпиррола.
Задачей изобретения является выявление генно-инженерных трансформаций в семенах сои и кукурузы, обработанных протравителем.
Поставленная задача решается благодаря тому, что в известном способе идентификации генно-трансформированных семян сои и кукурузы, обработанных протравителем на основе производных фенилпиррола, согласно изобретению, определяется активность фермента ацетилхолинэстеразы, при этом, если для семян сои значение активности меньше 90 мкмоль/г, а для семян кукурузы меньше 150 мкмоль/г, то семена генномодифицированные.
Показания активности ацетилхолинэстеразы измеряли в семенах сои и кукурузы, обработанных протравителем на основе производных фенилпиррола и без протравителя.
Испытания проводили на 13-и сортах сои: 1 - Аннушка, 2 - Свапа, 3 - Хпп, 5 - Амандина, 6 - Абелина, 7 - Парадис, 8 - ПР 1134501, 9 - НС Катя, 10 - Пруденс, 11 - Максус, 12 - Оресса, 13 - Ланцетная, 14 - Красная мега; и 5-и сортах кукурузы: 1 - Pioner Hi-Bred ПР-РВ-511, 2 - Pioner, 3 - LG2195, 4 - Марлиз 470, 5 - Grizzly.
Семена сои под номерами 11- Максус, 12 - Оресса и кукурузы 1-Pioner Hi-Bred ПР-РВ-511, 4-Марлиз 470 обработаны протравителем на основе производных фенилпиррола.
Активность ацетилхолинэстеразы определяли общепринятым колориметрическим тестом с бутирилхолином. Холинэстераза катализирует гидролиз бутирилтиохолина с образованием бутирата и тиохолина. Тиохолин восстанавливает железо (III) в гексацианоферрате до (II). Проводили измерение кинетики реакции, согласно которой снижение оптической плотности раствора прямо пропорционально активности холинэстеразы в пробе. Активность ацетилхолинэстеразы выражали в мкмоль на грамм пробы.
Пример 1
Активность ацетилхолинэстеразы в генномодифицированных образцах, обработанных протравителем составляет: Максус - 68,5 мкмоль/г, Оресса -70,5 мкмоль/г. У негенномодифицированных образцов без протравителя данный показатель составляет: Аннушка - 342,5 мкмоль/г, Свапа - 184,9 мкмоль/г, Хпп - 474,5 мкмоль/г, Амандина - 753,5 мкмоль/г, Абелина - 1585,2 мкмоль/г, Парадис - 137 мкмоль/г, ПР 1134501 (Канада) - 274 мкмоль/г, Ланцетная - 253 мкмоль/г, Красная мега - 356 мкмоль/г. (табл.1).
Таким образом, изучение активности фермента ацетилхолинэстеразы в семенах сои, обработанных протравителем, показало, что значения активности ацетилхолинэстеразы в генномодифицированных образцах, обработанных протравителем, находятся в пределах ниже 90 мкмоль/г.
Пример 2
При исследовании активности ферментов ацетилхолинэстеразы в генномодифицированных семенах кукурузы, обработанных протравителем на основе производных фенилпиррола, наблюдалась следующая тенденция:
активность фермента ацетилхолинэстеразы у сорта 1-Pioner Hi-Bred ПР-РВ-511 составляет 136,5 мкмоль/г, у сорта 4-Марлиз 470- 158,9 мкмоль/г.
В негенномодифицированных образцах кукурузы без протравителя показатели активности ацетилхолинэстеразы составляют у сортов: кукуруза LG2195 - 168,4 мкмоль/г, кукуруза Grizzly - 284,9 мкмоль/г, Pioner - 203,7 мкмоль/г (табл.2).
Таким образом, активность фермента ацетилхолинэстеразы семян кукурузы в генномодифицированных образцах, обработанных протравителем на основе производных фенилпиррола ниже, примерно в 2 раза, по сравнению с активностью ацетилхолинэстеразы в образцах кукурузы, необработанных протравителем.
Claims (1)
- Способ идентификации генно-трансформированных семян сои, обработанных протравителем на основе производных фенилпиррола, заключающийся в определении в семенах сои активности фермента ацетилхолинэстеразы, при этом, если для семян сои значение активности меньше 90 мкмоль/г, то семена генно-модифицированные.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019102572A RU2742508C2 (ru) | 2019-01-30 | 2019-01-30 | Способ идентификации генно-трансформированных семян сои и кукурузы, обработанных протравителем на основе производных фенилпиррола |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019102572A RU2742508C2 (ru) | 2019-01-30 | 2019-01-30 | Способ идентификации генно-трансформированных семян сои и кукурузы, обработанных протравителем на основе производных фенилпиррола |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2019102572A3 RU2019102572A3 (ru) | 2020-07-30 |
| RU2019102572A RU2019102572A (ru) | 2020-07-30 |
| RU2742508C2 true RU2742508C2 (ru) | 2021-02-08 |
Family
ID=71950032
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2019102572A RU2742508C2 (ru) | 2019-01-30 | 2019-01-30 | Способ идентификации генно-трансформированных семян сои и кукурузы, обработанных протравителем на основе производных фенилпиррола |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2742508C2 (ru) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2614120C2 (ru) * | 2009-08-19 | 2017-03-22 | ДАУ АГРОСАЙЕНСИЗ ЭлЭлСи | Событие das-40278-9 aad-1, родственные линии трансгенной кукурузы и их событие-специфическая идентификация |
-
2019
- 2019-01-30 RU RU2019102572A patent/RU2742508C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2614120C2 (ru) * | 2009-08-19 | 2017-03-22 | ДАУ АГРОСАЙЕНСИЗ ЭлЭлСи | Событие das-40278-9 aad-1, родственные линии трансгенной кукурузы и их событие-специфическая идентификация |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| GOST R 52174-2003 Biological safety. Raw materials and food products. Method for identification of genetically modified sources (GMI) of plant origin using a biological microchip (as amended, as amended. * |
| ГОСТ Р 52174-2003 Биологическая безопасность. Сырье и продукты пищевые. Метод идентификации генетически модифицированных источников (ГМИ) растительного происхождения с применением биологического микрочипа (с поправкий, с изменением. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2019102572A3 (ru) | 2020-07-30 |
| RU2019102572A (ru) | 2020-07-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ponomareva et al. | Snow mold of winter cereals: A complex disease and a challenge for resistance breeding | |
| Dudoiu et al. | Micoflora associated with maize grains during storage period | |
| Ravnskov et al. | Mycorrhiza induced tolerance in Cucumis sativus against root rot caused by Pythium ultimum depends on fungal species in the arbuscular mycorrhizal symbiosis | |
| Starr et al. | Expression of phenylalanine ammonia lyase genes in maize lines differing in susceptibility to meloidogyne incognita | |
| Cao et al. | Quantifying resistance to P lasmodiophora brassicae in B rassica hosts | |
| CN109371158A (zh) | 与小麦茎基腐病抗性qtl紧密连锁的分子标记及其应用 | |
| Akber et al. | Global distribution, traditional and modern detection, diagnostic, and management approaches of Rhizoctonia solani associated with legume crops | |
| RU2742508C2 (ru) | Способ идентификации генно-трансформированных семян сои и кукурузы, обработанных протравителем на основе производных фенилпиррола | |
| Smiley et al. | Diseases which challenge global wheat production-root, crown, and culm rots | |
| Patil et al. | Molecular prospecting: advancement in diagnosis and control of Rhizoctonia solani diseases in plants | |
| Ozdemir et al. | Determination of fusarium crown rot resistance in wheat to Fusarium culmorum and Fusarium pseudogramineaum using real time PCR | |
| Shofman et al. | Aggressive strains of the late wilt fungus of corn exist in Israel in mixed populations and can specialize in disrupting growth or plant health | |
| Li et al. | Pathogenicity and genetic diversity of Fusarium oxysporum causing soybean root rot in northeast China | |
| Okorski et al. | Fungi associated with conifer seedlings grown in forest nurseries under different systems. | |
| FR3113910A1 (fr) | Methode de detection de souches de venturia inaequalis virulentes | |
| Shiragane et al. | Weed roots facilitate the spread of Rosellinia necatrix, the causal agent of white root rot | |
| Sakr et al. | A simple and reliable assay to quantify host resistance and aggressiveness of the pathogen in the Fusarium head blight-barley pathosystem | |
| Bezděková et al. | Occurrence of Fusarium spp. on malting barley grains in the Czech Republic during 2011-2013. | |
| Giraldo-Arias et al. | Identification of Fusarium cf. verticillioides as the causal agent of pokka boheng disease in sugarcane in the department of Antioquia, Colombia | |
| Etebu et al. | A mini-review on the development and emerging perspectives of seed pathology | |
| JP2016002005A (ja) | イチゴ種子のｄｎａ粗抽出液を用いたイチゴｆ１種子の純度検定法 | |
| Xue et al. | Comparison of the influence of inoculum sources on the development of fusarium head blight and the deoxynivalenol content in spring wheat in a disease nursery | |
| Karakotov et al. | Morphological and molecular identification of Macrophomina phaseolina in the pool of pathogens of sugar beet (Beta vulgaris) root rot: Screening of fungicides for its control | |
| Das et al. | Advances in Management and Detection of Seed Borne Diseases | |
| Charura et al. | Root cap cell corpse clearance limits microbial colonization in Arabidopsis thaliana |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20210131 |