RU2734840C1 - Способ оценки имплантационного потенциала эндометрия при эндометриоз-ассоциированном бесплодии - Google Patents

Способ оценки имплантационного потенциала эндометрия при эндометриоз-ассоциированном бесплодии Download PDF

Info

Publication number
RU2734840C1
RU2734840C1 RU2020116166A RU2020116166A RU2734840C1 RU 2734840 C1 RU2734840 C1 RU 2734840C1 RU 2020116166 A RU2020116166 A RU 2020116166A RU 2020116166 A RU2020116166 A RU 2020116166A RU 2734840 C1 RU2734840 C1 RU 2734840C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
implantation
points
expression
endometrium
endometriosis
Prior art date
Application number
RU2020116166A
Other languages
English (en)
Inventor
Мекан Рахимбердыевич Оразов
Ксения Владиславовна Краснопольская
Людмила Михайловна Михалева
Марина Борисовна Хамошина
Снежана Владимировна Волкова
Татьяна Николаевна Хованская
Виктория Борисовна Шустова
Марианна Заурбиевна Абитова
Original Assignee
Мекан Рахимбердыевич Оразов
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Мекан Рахимбердыевич Оразов filed Critical Мекан Рахимбердыевич Оразов
Priority to RU2020116166A priority Critical patent/RU2734840C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2734840C1 publication Critical patent/RU2734840C1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B10/00—Other methods or instruments for diagnosis, e.g. instruments for taking a cell sample, for biopsy, for vaccination diagnosis; Sex determination; Ovulation-period determination; Throat striking implements
    • A61B10/02—Instruments for taking cell samples or for biopsy
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Изобретение относится к медицине, а именно к патоморфологии, гинекологии и репродуктологии, и может быть использовано для оценки имплантационного потенциала эндометрия при эндометриоз-ассоциированном бесплодии. Проводят выполнение пайпель-биопсии эндометрия в период «окна имплантации». В полученном материале определяют уровень экспрессии HOXA10, ERα, ERβ, PR-А в стромальном компартменте эндометрия и PR-В в железистом. Если экспрессия HOXA10 ≤ 21%, присваивают «1 балл», если ˃ 21% – «0 баллов». Если экспрессия ERα ≥ 25%, присваивают «1 балл», если < 25% – «0 баллов». Если экспрессия ERβ ≥ 20%, присваивают «1 балл», если < 20%, – «0 баллов». Если экспрессия PR-А ≤ 23%, присваивают «1 балл», если ˃ 23%, – «0 баллов». Если экспрессия PR-В ≥ 47%, присваивают «1 балл», если < 47%, – «0 баллов». Полученные баллы суммируют. При сумме баллов «4-5 баллов» определяют наличие экстремально низкого имплантационного потенциала эндометрия, указывающего на отрицательный прогноз имплантации. При сумме баллов «2-3 балла» определяют наличие низкого имплантационного потенциала эндометрия, указывающего на отрицательный прогноз имплантации. При сумме баллов «0-1 балл» определяют наличие высокого имплантационного потенциала эндометрия, указывающего на положительный прогноз имплантации. Способ обеспечивает возможность получения точной оценки имплантационного потенциала эндометрия в период «окна имплантации» у пациенток с бесплодием, обусловленным эндометриозом, за счет иммуногистохимического исследования уровней экспрессии маркеров имплантационного потенциала эндометрия, характеризующих его рецептивность при эндометриоз-ассоциированном бесплодии. 3 табл., 4 пр.

Description

Изобретение относится к области медицины, а именно к патоморфологии, гинекологии и репродуктологии и может быть использовано для специфической оценки имплантационного потенциала эндометрия и прогноза вероятности наступления беременности в программах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) на основании иммуногистохимического анализа экспрессии определенных маркеров, характеризующих рецептивность и имплантационную состоятельность эутопического эндометрия у женщин, страдающих бесплодием, опосредованным эндометриозом.
В основе имплантационной несостоятельности эутопического эндометрия при эндометриоз-ассоциированном бесплодии лежит нарушение его рецептивности на фоне дисбаланса стероидных рецепторов в «окно имплантации». Характерные локальные нарушения стероидогенеза, реализуясь в резистентность к прогестерону, отражают патогенетические механизмы снижения имплантационного потенциала эндометрия при инфертильности, ассоциированной с эндометриозом.
Уровень техники
В научно-медицинской и патентной литературе не описано ни одного метода оценки рецептивности эндометрия и его имплантационного потенциала, а также не предложены способы прогнозирования наступления беременности при эндометриоз-ассоциированном бесплодии. Имеют место лишь общие методы диагностики рецептивности эндометрия.
Известен способ прогнозирования рецептивности эндометрия на основании оценки уровня экспрессии и внутриклеточной локализации эзрина в эндометрии женщин с бесплодием и повторными неудачами программы ЭКО (патент РФ 2580629, 15.05.2015 г.). Установлено, что в период «окна имплантации» рецепторный эндометрий характеризуется средней стадией фазы секреции, зрелыми пиноподиями более чем на 20% поверхностного эпителия и высоким уровнем экспрессии эзрина, как в эпителиальном компартменте, так и в пиноподиях. Изобретение позволяет прогнозировать наступления беременности в программах экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) и естественных циклах у женщин с бесплодием.
Недостатком данного способа является ориентация только на один показатель из целого спектра молекул рецептивности эндометрия - экспрессию фактора адгезии - эзрина. Кроме того, способ прогнозирования основан только на исследовании пациенток с трубно-перитонеальным фактором бесплодия и не учитывал другие факторы нарушения рецептивности эндометрия, такие как эндометриоз.
Известен способ прогнозирования рецептивности эндометрия на основании оценки экспрессии GnRG и GnRGR в "окно имплантации" в эндометрии женщин с бесплодием и неудачными попытками программы ЭКО (патент РФ 2617515, 22.04.2016 г.). Прогностически неблагоприятными показателями рецептивности эндометрия считают отставание секреторной трансформации эндометрия, снижение количества клеток, содержащих зрелые пиноподии в поверхностном эпителии, менее чем 20%, а также низкую экспрессию (<2 баллов) GnRG и GnRGR.
Недостатками способа являются отсутствие системной патогномоничной детерминации специфических молекул, характеризующих рецептивность эндометрия, лежащих в основе регуляции имплантации, а также отсутствием специфичных для эндометриоз-ассоциированного бесплодия маркеров.
Известен способ оценки рецептивности эндометрия в период "имплантационного окна" (патент РФ 2651762C1, 23.04.2018 - прототип). Для достижения этой цели исследователи методом пайпель-биопсии эндометрия на 20-23 день менструального цикла проанализировали иммуногистохимическую экспрессию ключевых биомолекул, отвечающих за имплантацию: ERα в строме, PR в строме, р53 в железах, bcl 2 в строме, CD95 в строме, Ki67 в строме, LIFR в железах, LIF в железах эндометрия. На основании полученных результатов исследования авторы рассчитали прогноз рецептивности эндометрия по формуле: d=-1,389х1 + 0,022х2 - 0,044х3 - 0,019х4 + 0,041х5 + 0,006х6 + 0,015х7 - 3,248, где х1 - индекс ER/PR в строме эндометрия (баллы H-score для определения ядерной экспрессии ER и PR), х2 - р53 в железах эндометрия (% окрашенных ядер в поле зрения), х3 - bcl 2 в строме эндометрия (% окрашенных ядер в поле зрения), х4 - CD95+ в строме эндометрия (% окрашенных клеток), х5 - Ki67 в строме эндометрия (% окрашенных ядер в поле зрения), х6 - LIF-R в железах эндометрия (баллы H-score), х7 - LIF в железах эндометрия (баллы H-score). При значениях d>0 эндометрий характеризовали как рецептивный, при d≤0 эндометрий как нерецептивный.
Недостатком данного метода является анализ не всех изоформ стероидных рецепторов, дисбаланс которых так важен для оценки имплантационного потенциала эндометрия при эндометриоз-ассоциированном бесплодии.
Решаемой технической проблемой явилась необходимость определения имплантационного потенциала эндометрия при бесплодии, ассоциированном с эндометриозом, с целью прогнозирования вероятности наступления беременности.
Раскрытие сущности изобретения
Предложенный нами способ основан на анализе комплекса патогномоничных маркеров имплантационного потенциала эндометрия в период «окна имплантации», составляющих единый патогенетический механизм нарушений имплантации при эндометриоз-ассоциированном бесплодии, за счет стероидогенеза и развития резистентности к прогестерону, что в совокупности расширяет возможности оценки рецептивности эндометрия у данной когорты пациенток и позволяет прогнозировать вероятность наступления беременности.
Характер экспрессии прогестероновых и эстрогеновых рецепторов в период «окна имплантации» является одним из главных критериев, определяющих рецептивность и имплантационную состоятельность эндометрия. В литературе описаны следующие закономерности. Так, средняя стадия фазы секреции характеризуется максимальной выработкой прогестерона желтым телом. Экспрессия ER в железах и строме эндометрия начинает повышаться, распределение носит неравномерный характер. В эпителии желез экспрессия PR снижается вплоть до нулевых значений или находится на низком уровне. В тоже время строма эндометрия характеризуется максимальной экспрессией (100%) и равномерным распределением PR [1]. Согласно данным отечественных авторов, при эндометриозе наблюдаются иные закономерности в экспрессии стероидных рецепторов [2,3,4]. Важно отметить, что ни в одной работе не был проведен анализ экспрессии всех изоформ эстрогеновых и прогестероновых рецепторов, а именно ERα, ERβ, PR-A, PR-B. Учитывая, что эндометриоз, являясь хроническим воспалительным эстроген-зависимым и прогестерон-резистентным заболеванием, необходимо детальное изучение не только общих фракций стероидных рецепторов, но и их изоформ, с целью более тщательной оценки имплантационного потенциала эндометрия и возможностей прогнозирования наступления беременности.
HOXA10 – это ген, кодирующий транскрипционные факторы, участвующие в росте, дифференциации и рецептивности эндометрия. Данные ген отвечает за молекулярные и стероидогенные маркеры имплантационной состоятельности эндометрия за счет регуляции и индукции пиноподий, интегрина ανβ3 и других молекул, ответственных за имплантацию бластоцисты [5]. Ключевым патогенетическим паттерном HOXA10 является регуляция прогестероновых сигнальных путей, ответственных за имплантационную состоятельность эндометрия. В нескольких зарубежных исследованиях продемонстрировано, что экспрессия этого гена у женщин с эндометриозом и бесплодием значительно ниже, чем в группе пациентов с эндометриозом, но без бесплодия [6,7]. Таким образом, HOXA-10 является ключевым маркером рецептивности эндометрия и его имплантационной состоятельности при эндометриоз-ассоциированном бесплодии, что позволяет использовать его с целью оценки имплантационного потенциала эндометрия и предиктора вероятности наступления беременности.
Характер экспрессии изоформ эстрогеновых рецепторов α и β, а также прогестероновых рецепторов А и В отражает морфо-функциональное состояние эндометрия и его рецептивные свойства в период «окна имплантации». Дефектная экспрессия стероидных рецепторов негативно сказывается на «диалоге» эндометрия и эмбриона, что выражается в снижении имплантационного потенциала эндометрия, потери его рецептивных свойств и клинические детерминируется отсутствием наступления беременности.
Достигаемым техническим результатом является получение точной оценки имплантационного потенциала эндометрия в период «окна имплантации» у пациенток с бесплодием, обусловленным эндометриозом.
Способ основан на иммуногистохимическом исследовании уровней экспрессии маркеров имплантационного потенциала эндометрия, характеризующих его рецептивность при эндометриоз-ассоциированном бесплодии.
Разработан способ оценки рецептивности эндометрия в период «имплантационного окна», согласно которому на 7 день после пика лютеинизирующего гормона, определяемого в сыворотке крови при динамическом исследовании в околоовуляторный период (как правило, этот период соответствует 20-22 дням менструального цикла) производят пайпель-биопсию эндометрия. Полученный материал исследуют методом иммуногистохимии с применением наборов моноклональных и поликлональных антител к следующим маркерам: ERα, ERβ, PR-A, PR-B, HOXA10 в строме и железах эндометрия.
Производится подсчет процента окрашенных клеток, после чего проводится оценка реакции: нет реакции – ≤1%, низкая экспрессия – 2-10%, умеренная экспрессия –11-50%, выраженная экспрессия – ≥ 51%. Трактовка ИГХ реакции проводится путем сравнения полученных данных с нормами значений, полученных от здоровых фертильных женщин без эндометриоза.
В настоящее исследование были включены 65 женщин в возрасте от 29 до 40 лет (средний возраст составил 35±4,2 года) с морфологически и лапароскопически верифицированным диагнозом наружный генитальный эндометриоз (код по МКБ10 - N80.0), а также инфертильностью (код по МКБ10 N 97.7, установленные в рубрике другие формы женского бесплодия).
Основную группу (n=32) составили пациентки с наружным генитальным эндометриозом и бесплодием, вызванным эндометриальным фактором (средняя продолжительность бесплодия 4,5±0,8), имеющие de facto в анамнезе 2 и более безуспешные попытки переноса 1 эмбриона хорошего качества в полость матки при проведении программ ЭКО (группа ЭАБ - эндометриоз-ассоциированного бесплодия).
Группу сравнения (n=33) составили пациентки с наружным генитальным эндометриозом, реализовавшие свою репродуктивную функцию и не имевшие в анамнезе инфертильности, которые обратились для хирургического лечения тазовой боли, ассоциированной эндометриозом (группа ЭФ – фертильные женщины с эндометриозом).
Группу морфологического контроля (n=13) составили фертильные женщины без эндометриоза, имеющие в анамнезе 2 и более родов доношенными здоровыми детьми, давшие добровольное информированное согласие на участие в исследовании.
Иммуногистохимическое исследование биоптатов эндометрия, взятых методом пайпель-биопсии в период предполагаемого «окна имплантации» – на 7 день после пика лютеинизирующего гормона, определяемого в сыворотке крови при динамическом исследовании в околоовуляторный период (как правило, этот период соответствует 20-22 дням менструального цикла) – проводилось с использованием двухэтапного стрептавидин-биотин-пероксидазного метода с демаскировкой антигена и применением стандартных наборов моноклональных и поликлональных антител фирмы «Ventana», «Cell Marque» и «Diagnostic BioSystems» США. Иммуногистохимическое окрашивание производилось в иммуностейнере Ventana BenchMark ULTRA IHC/ISH (США) на парафиновых срезах по стандартной методике с предварительной демаскировкой антигенов в СВЧ-печи с использованием соответствующих стандартных антител выявляли маркеры (таблица 1).
Таблица 1. Моноклональные и поликлональные антитела, использованные для иммуногистохимического исследования
№п/п Показатель
1 ERα, SP1 Рецепторы альфа к эстрадиолу
2 ERβ, 14C8 Рецепторы бета к эстрадиолу
3 PR - A, C terminal Рецепторы прогестерона А
4 PR – B, YR85 Рецепторы прогестерона В
5 HOXA10, поликлональный Маркер рецептивной состоятельности
Был проведен анализ рецепторного аппарата эндометрия у женщин с эндометриоз-ассоциированным бесплодием, фертильных женщин с эндометриозом и фертильных женщин без эндометриоза, последние составили группу морфологического контроля (таблица 2).
Таблица 2. Рецепторный аппарат эндометрия у женщин с эндометриоз-ассоциированным бесплодием, фертильных женщин с эндометриозом и фертильных женщин без эндометриоза

№ 		Название
маркера 		Локализация
Процент окрашенных клеток эндометрия в основной группе (ЭАБ), n=32 Процент окрашенных клеток эндометрия в группе сравнения (ЭФ), n=33 Процент окрашенных клеток эндометрия в группе морфологического контроля, n=13
1 ERα Железы 1-1,1% 1-1,2% 11-50%
Строма 7,8-41,6% 1-1,6%
2 ERβ Железы 3,5-19% 2,4-14% 2-10%
Строма 4-35% 3,8-13%
3 PR-А Железы 4,2-21,7% 12,3-34,5% 11-50%
Строма 28,3-76,9% 39,2-76,9% 51-100%
4 PR-В Железы 11,2-82,4% 9,1-45,5% 11-50%
Строма 38,4-73,5% 46,4-90,9% 51-100%
5 HOXA10 Железы 17-37% 28,3-58,8% 51-100%
Строма 13,4-28,6% 33,3-90,0%
В ходе исследования выявлено, что в эутопическом эндометрии в период «окна имплантации» у пациенток с эндометриоз-ассоциированным бесплодием (группа ЭАБ) в сравнении с биоптатами женщин с эндометриозом и сохранной фертильной функцией (группа ЭФ) установлены достоверные иммуногистохимические признаки снижения имплантационного потенциала эндометрия за счет нарушения его рецептивности ввиду дисбаланса экспрессии эстрогеновых и прогестероновых рецепторов. Об этом свидетельствует статистически значимая высокая экспрессия ERα (в 19 раз; 24,7% против 1,3%, соответственно) и ERβ в строме эндометрия (в 2,3 раза; 19,5% против 8,4%, соответственно), при сравнении в группах ЭАБ и ЭФ соответственно (р<0,05). Выявленная статистически низкая экспрессия PR-A в строме (в 2,5 раза; 58% против 23,4%, соответственно, р<0,05) и высокая экспрессия PR-B в железах (в 1,7 раза; 46,8% против 27,3%, соответственно, р<0,05) характеризует дисрегуляцию рецепторов прогестерона при эндометриоз-ассоциированном бесплодии.
Таким образом, мы полагаем, что в основе имплантационной несостоятельности эндометрия у женщин с бесплодием на фоне эндометриоза лежит не только стероидогенный дисбаланс (между эстрогеновыми и прогестероновыми рецепторами), но и дисфункция лидирующих изоформ прогестероновых рецепторов за счет достоверно высокой экспрессии PR-В в железах и низкой экспрессии PR-А в стромальном компартменте эндометрия. Вышеизложенные данные дополняют существующие представления о патогенезе резистентности к прогестерону при эндометриоз-ассоциированном бесплодии.
Дополнительный вклад в патогенез имплантационных нарушений у женщин с эндометриоз-ассоциированным бесплодием вносит аберрантная экспрессия HOXA10. Об этом свидетельствует статистически значимое снижение HOXA10 в стромальном компартменте эндометрия (в 3,0 раза; 61,6% против 21%, соответственно, р<0,05), что отражает совокупность нарушений его рецептивности и имплантационной несостоятельности, обусловленной нарушением локального стероидогенеза в эутопическом эндометрии.
Таким образом, на основании полученных статистически значимых результатов установлены признаки снижения имплантационного потенциала эндометрия у женщин с бесплодием, обусловленным эндометриозом.
При иммуногистохимическом исследовании биоптатов эутопического эндометрия у женщин с эндометриоз-ассоциированным бесплодием были установлены патогномоничные пределы чувствительности для HOXA10, ERα, ERβ, PR-А в стромальном компартменте эндометрия и PR-В в железистом (таблица 3).
Таблица 3. Патогномоничные пределы чувствительности для исследуемых маркеров
Маркер Низкий имплантационной потенциал
(баллы)		 Предел чувствительности,
%		 Высокий имплантационный потенциал
(баллы)
HOXA10 1 балл ≤ 21% > 0 баллов
ERα 1 балл ≥ 25% < 0 баллов
ERβ 1 балл ≥ 20%< 0 баллов
PR-А 1 балл ≤ 23% > 0 баллов
PR-В 1 балл ≥ 47%< 0 баллов
С целью прогноза наступления имплантации подсчитывается сумма полученных баллов HOXA10+ERα+ERβ+PR-А+ PR-В:
- 4-5 баллов – экстремально низкий имплантационный потенциал эндометрия (прогноз отрицательный);
- 2-3 балла – низкий имплантационный потенциал эндометрия (прогноз отрицательный);
- 0-1 балл – высокий имплантационный потенциал эндометрия (прогноз положительный).
Таким образом, в эутопическом эндометрии у пациенток с эндометриоз-ассоциированным бесплодием снижение рецептивности эндометрия, определяемое низкой экспрессией HOXA10, происходит на фоне дисбаланса экспрессии прогестероновых и эстрогеновых рецепторов в период «окна имплантации», что в совокупности клинически детерминируется имплантационными неудачами на фоне имплантационной несостоятельности эндометрия.
Осуществление изобретения
Проводят биопсию эндометрия в период предполагаемого «окна имплантации» - на 7 день после пика лютеинизирующего гормона, определяемого в сыворотке крови при динамическом исследовании в околоовуляторный период (как правило, этот период соответствует 20-22 дням менструального цикла) в спонтанном цикле, либо в цикле, предшествующем проведению ЭКО, с помощью аспирационной кюретки. Полученный материал после гистологической проводки в автоматическом гистопроцессоре Leica ASP 30, заливают в парафин на станции Leica EG 1150 (Германия). ИГХ окрашивание производят в иммуностейнере Ventana BenchMark ULTRA IHC/ISH (США) на депарафинизированных и дегидратированных срезах толщиной 4-6 мкм с использованием авидин-биотинового иммунопероксидазного метода. Уровень экспрессии HOXA10, ERα, ERβ, PR-А в стромальном компартменте эндометрия и PR-В в железистом определяют в соответствие с описанными выше методиками с применением соответствующих моноклональных и поликлональных антител. Производится подсчет процента окрашенных клеток, после чего проводится оценка реакции: нет реакции – ≤1%, низкая экспрессия – 2-10%, умеренная экспрессия –11-50%, выраженная экспрессия – ≥ 51%. Трактовка ИГХ реакции проводится путем сравнения полученных данных со следующими параметрами:
- если экспрессия HOXA10 ≤ 21%, то имплантационный потенциал эндометрия снижен – 1 балл, если ˃ 21%, то имплантационный потенциал эндометрия сохранен – 0 баллов;
- если экспрессия ERα ≥ 25%, то имплантационный потенциал эндометрия снижен – 1 балл, если < 25%, то имплантационный потенциал эндометрия сохранен – 0 баллов;
- если экспрессия ERβ ≥ 20%, то имплантационный потенциал эндометрия снижен – 1 балл, если < 20%, то имплантационный потенциал эндометрия сохранен – 0 баллов;
- если экспрессия PR-А ≤ 23%, то имплантационный потенциал эндометрия снижен – 1 балл, если ˃ 23%, то имплантационный потенциал эндометрия сохранен – 0 баллов.
- если экспрессия PR-В ≥ 47%, то имплантационный потенциал эндометрия снижен – 1 балл, если < 47%, то имплантационный потенциал эндометрия сохранен – 0 баллов.
Далее с целью прогноза наступления беременности подсчитывается сумма полученных баллов HOXA10+ERα+ERβ+PR-А+ PR-В:
- 4-5 баллов – экстремально низкий имплантационный потенциал эндометрия (прогноз отрицательный);
- 2-3 балла – низкий имплантационный потенциал эндометрия (прогноз отрицательный);
- 0-1 балл – высокий имплантационный потенциал эндометрия (прогноз положительный).
Клинический пример 1.
Пациентка Ф., 33 года, страдает первичным бесплодием при регулярной половой жизни без контрацепции в браке в течение 7 лет. Обследована полностью. Установлена причина бесплодия - наружный генитальный эндометриоз (оперирована в 2017 году, диагноз верифицирован лапароскопичски и морфологически). Получала адъювантное гормональное лечение в послеоперационном периоде аГнРГ (3,75 мг подкожно 1 раз в месяц) в течение 6 мес. Далее было рекомендовано восстановление фертильности естественным путем – беременность не наступила. Пациентка направлена на преодоление бесплодия методами ВРТ. В рамках программы ЭКО была проведена контролируемая овариальная гиперстимуляция, получено 9 эмбрионов, 4 из которых хорошего качества (4АВ), выполнена их криоконсервация. В последующем было проведено 2 переноса эмбрионов, но беременность не наступила. По данным дополнительных исследований рецидив наружного генитального эндометриоза и болезни эндометрия были исключены. Перед проведением следующей попытки переноса эмбриона была произведена контрольная пайпель-биопсия эндометрия на 22 день менструального цикла с целью оценки его имплантационного потенциала.
По данным иммуногистохимического исследования получены следующие результаты: HOXA10 в строме=12% (1б); ERα в строме=33% (1б); ERβ в строме=8% (0б); PR-А в строме=17% (1б); PR-В в железах=50%(1б).
Сумма баллов составляет 4, что свидетельствует об экстремально низком имплантационном потенциале эндометрия и отрицательном прогнозе наступления беременности.
После переноса эмбриона хорошего качества (4АВ) в следующем менструальном цикле беременность не наступила.
Клинический пример 2.
Пациентка М, 37 лет, обратилась с жалобами на отсутствие наступления беременности при регулярной половой жизни в браке без контрацепции в течение 9 лет. Соматически не отягощена. В анамнезе 2 операции по поводу наружного генитального эндометриоза (II-III стадии по AFS), диагноз которого установлен на основании гистологического результата исследования макропрепаратов. Получала гормональное лечение эндометриоза в течение года, далее было рекомендовано восстановление фертильности естественным путем, но беременность не наступала, в связи с чем была направлена в центр ВРТ для лечения бесплодия. В анамнезе 2 неудачных попытки переноса эуполоидных эмбрионов хорошего качества (4АВ) (было проведено преимплантационное генетическое тестирование). Проведена диагностическая гистероскопия на 10 день менструального цикла – патологии не выявлено, взят аспират из полости матки (эндометрий соответствовал пролиферативной фазе). Перед проведением 3 попытки переноса эмбриона была произведена контрольная пайпель-биопсия эндометрия на 22 день менструального цикла.
По данным иммуногистохимического исследования получены следующие результаты: HOXA10 в строме=55% (0б); ERα в строме=28% (1б); ERβ в строме=11% (0б); PR-А в строме=66% (0б); PR-В в железах=10%(0б).
Сумма баллов составляет 1б, что свидетельствует о высоком имплантационном потенциале эндометрия и положительном прогнозе наступлении беременности.
После ИГХ исследования в следующем менструальном цикле был произведен перенос 1 эуплоидного эмбриона хорошего качества, наступила клиническая прогрессирующая маточная беременность (подтвержденная визуализацией сердцебиения эмбриона и соответствующему сроку уровню ХГЧ в крови). Фертильность была достигнута.
Клинический пример 3.
Пациенка С, 27 лет, обратилась с жалобами на отсутствие наступления беременности при регулярной половой жизни в браке без контрацепции в течение 5 лет. В анамнезе наружный генитальный эндометриоз, верифицированный лапароскопически и морфологически и 2 неудачных попытки переноса эмбрионов в стимулированном и естественном циклах. На 7-ой день после пика ЛГ (соответствовал 21 дню менструального цикла) была произведена пайпель-биопсия эндометрия. При гистологическом исследовании эндометрий соответствовал средней стадии фазы секреции.
По данным иммуногистохимического исследования получены следующие результаты: HOXA10 в строме=15% (1б); ERα в строме=30% (1б); ERβ в строме=10% (0б); PR-А в строме=63% (0б); PR-В в железах=55%(1б).
Сумма баллов составляет 3, что свидетельствует о низком имплантационном потенциале эндометрия и отрицательном прогнозе наступления беременности.
После переноса эмбриона в следующем менструальном цикле беременность не наступила.
Клинический пример 4.
Пациентка А, 30 лет, обратилась с жалобами на отсутствие наступления беременности при регулярной половой жизни в браке без контрацепции в течение 5 лет. В анамнезе наружный генитальный эндометриоз, верифицированный лапароскопически и морфологически. Перед вступлением в программу ЭКО по данным УЗИ органов малого таза заподозрена патология эндометрия (полип эндометрия?). На 22-ой день менструального цикла проведена пайпель-биопсия эндометрия. При гистологическом исследовании эндометрий соответствовал средней стадии фазы секреции, морфологических признаков болезней эндометрия не обнаружено. Решено провести оценку имплантационного потенциала эндометрия.
По данным иммуногистохимического исследования получены следующие результаты: HOXA10 в строме=87% (0б); ERα в строме=15% (0б); ERβ в строме=11% (0б); PR-А в строме=70% (0б); PR-В в железах=9% (0б).
Сумма баллов составляет 0 б., что свидетельствует о высоком имплантационном потенциале эндометрия и положительном прогнозе наступлении беременности.
После переноса эмбриона в полость матки была зарегистрирована прогрессирующая маточная беременность (подтвержденная визуализацией сердцебиения эмбриона и соответствующему сроку уровню ХГЧ в крови).
Список литературы:
1. Толибова Г.Х., Траль Т.Г., Айламазян Э.К., Коган И.Ю. Молекулярные механизмы циклической трансформации эндометрия. Журнал акушерства и женских болезней. 2019; 68(1):5–12.
2. Колотовкина А.В., Калинина Е.А., Коган Е.А. Морфофункциональные особенности эндометрия у больных эндометриоз-ассоциированным бесплодием (обзор литературы). Гинекология. 2012; 4: 9-14.
3. Толибова Г.Х., Траль Т.Г., Ярмолинская М.И., Цыпурдеева А.А. Эндометриальная дисфункция у пациенток с бесплодием, ассоциированным с наружным генитальным эндометриозом. Журнал акушерства и женских болезней. 2017; 66: 84-85.
4. Парамонова Н.Б., Коган Е.А., Колотовкина А.В., Бурменская О.В. Морфологические и молекулярно-биологические признаки нарушения рецептивности эндометрия при бесплодии женщин, страдающих наружным генитальным эндометриозом. Архив патологии. 2018; 3: 11-18.
5. М.Р. Оразов, М.Б. Хамошина, Л.М. Михалева, С.В. Волкова, М.З. Абитова, В.Б. Шустова, Т.Н. Хованская. Молекулярно-генетические особенности состояния эндометрия при эндометриоз-ассоциированном бесплодии. Трудный пациент. 2020; 1(18): 23-32.
6. Celik O, Unlu C, Otlu B, Celik N, Caliskan E. Laparoscopic endometrioma resection increases peri-implantation endometrial HOXA-10 and HOXA-11 mRNA expression. Fertil Steril. 2015; 104(2): 356-365.
7. Özcan C, Özdamar Ö, Gökbayrak ME, Doğer E, Çakıroğlu Y, Çine N. HOXA-10 gene expression in ectopic and eutopic endometrium tissues: Does it differ between fertile and infertile women with endometriosis? Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod. Biol. 2019; 233: 43-8.

Claims (1)

  1. Способ оценки имплантационного потенциала эндометрия при эндометриоз-ассоциированном бесплодии, включающий выполнение пайпель-биопсии эндометрия в период «окна имплантации», отличающийся тем, что в полученном материале определяют уровень экспрессии HOXA10, ERα, ERβ, PR-А в стромальном компартменте эндометрия и PR-В в железистом, если экспрессия HOXA10 ≤ 21%, присваивают «1 балл», если ˃ 21% – «0 баллов»; если экспрессия ERα ≥ 25%, присваивают «1 балл», если < 25% – «0 баллов»; если экспрессия ERβ ≥ 20%, присваивают «1 балл», если < 20%, – «0 баллов»; если экспрессия PR-А ≤ 23%, присваивают «1 балл», если ˃ 23%, – «0 баллов»; если экспрессия PR-В ≥ 47%, присваивают «1 балл», если < 47%, – «0 баллов», полученные баллы суммируют, при сумме баллов «4-5 баллов» определяют наличие экстремально низкого имплантационного потенциала эндометрия, указывающего на отрицательный прогноз имплантации; при сумме баллов «2-3 балла» определяют наличие низкого имплантационного потенциала эндометрия, указывающего на отрицательный прогноз имплантации; при сумме баллов «0-1 балл» определяют наличие высокого имплантационного потенциала эндометрия, указывающего на положительный прогноз имплантации.
RU2020116166A 2020-05-17 2020-05-17 Способ оценки имплантационного потенциала эндометрия при эндометриоз-ассоциированном бесплодии RU2734840C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2020116166A RU2734840C1 (ru) 2020-05-17 2020-05-17 Способ оценки имплантационного потенциала эндометрия при эндометриоз-ассоциированном бесплодии

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2020116166A RU2734840C1 (ru) 2020-05-17 2020-05-17 Способ оценки имплантационного потенциала эндометрия при эндометриоз-ассоциированном бесплодии

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2734840C1 true RU2734840C1 (ru) 2020-10-23

Family

ID=72948984

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2020116166A RU2734840C1 (ru) 2020-05-17 2020-05-17 Способ оценки имплантационного потенциала эндометрия при эндометриоз-ассоциированном бесплодии

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2734840C1 (ru)

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20070287676A1 (en) * 2006-05-16 2007-12-13 Sun-Wei Guo Diagnosis and treatment of endometriosis
CN108061804A (zh) * 2016-11-09 2018-05-22 北京大学人民医院 用于诊断子宫内膜异位症的生物标志物
WO2019115829A1 (en) * 2017-12-15 2019-06-20 Endodiag Pépinière Génopole Entreprises Method of diagnosing endometriosis
RU2724381C1 (ru) * 2020-03-10 2020-06-23 Мекан Рахимбердыевич Оразов Способ оценки рецептивности эндометрия при эндометриоз-ассоциированном бесплодии
RU2724384C1 (ru) * 2020-03-10 2020-06-23 Мекан Рахимбердыевич Оразов Способ оценки имплантационной состоятельности эндометрия при пролиферативно-воспалительных нарушениях в эндометрии при эндометриозе, ассоциированном с эндометриальным фактором бесплодия

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20070287676A1 (en) * 2006-05-16 2007-12-13 Sun-Wei Guo Diagnosis and treatment of endometriosis
CN108061804A (zh) * 2016-11-09 2018-05-22 北京大学人民医院 用于诊断子宫内膜异位症的生物标志物
WO2019115829A1 (en) * 2017-12-15 2019-06-20 Endodiag Pépinière Génopole Entreprises Method of diagnosing endometriosis
RU2724381C1 (ru) * 2020-03-10 2020-06-23 Мекан Рахимбердыевич Оразов Способ оценки рецептивности эндометрия при эндометриоз-ассоциированном бесплодии
RU2724384C1 (ru) * 2020-03-10 2020-06-23 Мекан Рахимбердыевич Оразов Способ оценки имплантационной состоятельности эндометрия при пролиферативно-воспалительных нарушениях в эндометрии при эндометриозе, ассоциированном с эндометриальным фактором бесплодия

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
КОЛОТОВКИНА А.В. Клинико-патогенетические подходы к реализации программы вспомогательных репродуктивных технологий у больных наружным генитальным эндометриозом. Диссер. Москва 2016, стр.1-186. КОГАН Е.А. и *
КОЛОТОВКИНА А.В. Клинико-патогенетические подходы к реализации программы вспомогательных репродуктивных технологий у больных наружным генитальным эндометриозом. Диссер. Москва 2016, стр.1-186. КОГАН Е.А. и др. Бесплодие при эндометриозе: краткий очерк современных представлений. Пространство и время. 2017, 1(27), стр.251-259. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Tuckerman et al. Uterine natural killer cells in peri-implantation endometrium from women with repeated implantation failure after IVF
Likes et al. Medical or surgical treatment before embryo transfer improves outcomes in women with abnormal endometrial BCL6 expression
RU2651762C1 (ru) Способ оценки рецептивности эндометрия в период &#34;имплантационного окна&#34;
Tunc et al. Can serum Inhibin B and FSH levels, testicular histology and volume predict the outcome of testicular sperm extraction in patients with non-obstructive azoospermia?
RU2617515C1 (ru) Способ прогнозирования рецептивности эндометрия на основании оценки экспрессии GnRG и GnRGR в &#34;окно имплантации&#34; в эндометрии женщин бесплодием и неудачными попытками программы эко
Ben-Nagi et al. Effect of cesarean delivery on the endometrium
RU2724381C1 (ru) Способ оценки рецептивности эндометрия при эндометриоз-ассоциированном бесплодии
Lyzikova et al. Increase in FoxP3, CD56 immune cells and decrease in glands PGRMC1 expression in the endometrium are associated with recurrent miscarriages
Bozkurt et al. Hysteroscopic polypectomy decreases NF-κB1 expression in the mid-secretory endometrium of women with endometrial polyp
Liu et al. Evidence from three cohort studies on the expression of MUC16 around the time of implantation suggests it is an inhibitor of implantation
Bentin-Ley et al. Glycodelin in endometrial flushing fluid and endometrial biopsies from infertile and fertile women
Meng et al. Decreased NDRG1 expression is associated with pregnancy loss in mice and attenuates the in vitro decidualization of endometrial stromal cells
Uysal et al. Correlation of endometrial glycodelin expression and pregnancy outcome in cases with polycystic ovary syndrome treated with clomiphene citrate plus metformin: a controlled study
Qiao et al. Existence of chronic endometritis and its influence on pregnancy outcomes in infertile women with minimal/mild endometriosis
Fujii et al. Concentrations of receptor for advanced glycation end products, VEGF and CML in plasma, follicular fluid, and peritoneal fluid in women with and without endometriosis
RU2734840C1 (ru) Способ оценки имплантационного потенциала эндометрия при эндометриоз-ассоциированном бесплодии
RU2724384C1 (ru) Способ оценки имплантационной состоятельности эндометрия при пролиферативно-воспалительных нарушениях в эндометрии при эндометриозе, ассоциированном с эндометриальным фактором бесплодия
RU2565449C1 (ru) Способ отбора пациенток с синдромом &#34;слабого&#34; ответа яичников для проведения программы &#34;донация ооцитов&#34;
Lai et al. Endometrial L-selectin ligand is downregulated in the mid-secretory phase during the menstrual cycle in women with adenomyosis
dos Santos Borges et al. Betamethasone causes intergenerational reproductive impairment in male rats
Wong et al. Do uterine natural killer cell numbers in peri-implantation endometrium predict hypertensive disorder in pregnancy in women with a history of reproductive failure?
Krissi et al. The presence and location of estrogen and progesterone receptors in the human pelvic cardinal ligaments
Uyar et al. The correlation between unexplained infertility and exosomes
Rosette The Expression of β-Catenin in the Epithelial Cells and Stromal Cells of Endometriosis and normal endometrial cells
RU2735218C1 (ru) Способ прогнозирования имплантации в программах врт у женщин старшего репродуктивного возраста с трубно-перитонеальным фактором бесплодия