RU2731106C1 - Dipotassium salt of n-(4-hydroxybenzoyl) taurine, having antiaggregant and antithrombotic activity - Google Patents
Dipotassium salt of n-(4-hydroxybenzoyl) taurine, having antiaggregant and antithrombotic activity Download PDFInfo
- Publication number
- RU2731106C1 RU2731106C1 RU2019134135A RU2019134135A RU2731106C1 RU 2731106 C1 RU2731106 C1 RU 2731106C1 RU 2019134135 A RU2019134135 A RU 2019134135A RU 2019134135 A RU2019134135 A RU 2019134135A RU 2731106 C1 RU2731106 C1 RU 2731106C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- taurine
- hydroxybenzoyl
- dipotassium salt
- animals
- antiaggregant
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
- A61K31/165—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide
- A61K31/167—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide having the nitrogen of a carboxamide group directly attached to the aromatic ring, e.g. lidocaine, paracetamol
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C301/00—Esters of sulfurous acid
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C303/00—Preparation of esters or amides of sulfuric acids; Preparation of sulfonic acids or of their esters, halides, anhydrides or amides
- C07C303/32—Preparation of esters or amides of sulfuric acids; Preparation of sulfonic acids or of their esters, halides, anhydrides or amides of salts of sulfonic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C309/00—Sulfonic acids; Halides, esters, or anhydrides thereof
- C07C309/01—Sulfonic acids
- C07C309/02—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms
- C07C309/03—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
- C07C309/13—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton containing nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the carbon skeleton
- C07C309/14—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton containing nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the carbon skeleton containing amino groups bound to the carbon skeleton
- C07C309/15—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton containing nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the carbon skeleton containing amino groups bound to the carbon skeleton the nitrogen atom of at least one of the amino groups being part of any of the groups, X being a hetero atom, Y being any atom
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Hematology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Description
Тромбообразованию принадлежит одна из важнейших ролей в патогенезе инсульта, ишемической болезни сердца и осложнений сахарного диабета. В пожилом и старческом возрасте частота тромбозов увеличивается в несколько раз и достигает 200 случаев на 100000 человек в год [Чазов, Е.И., 2008; Мирзоян, Р.С., 2009; Тюренков, И.Н., 2013; Спасов, А.А., 2013; Дедов, И.И., 2013, (1, 2018)]. С каждым годом число пациентов с сосудистыми поражениями постоянно увеличивается, так отмечается около 1 млн. случаев ишемического инсульта в экономически развитых странах ежегодно, а к 2030 году прогнозируется увеличение данного показателя до 3,4 млн. [Габбасов З.А., Попов Е.Г., Гаврилова И.Ю., и др. Новый высокочувствительный метод анализа агрегации тромбоцитов. // Лабораторное дело. - 1989. - №10 - С. 15-18.; Габриэлян Э.С., Акопов С.Э. Клетки крови и кровообращение. - Ереван: Айастан, 1985. - С. 326-330.234]. В России по состоянию на 2017 год зарегистрированных и взятых на учет свыше 1,7 млн человек с сахарным диабетом и осложнениями, связанными с тромбооразованием [Федеральная служба государственной статистики Обновление от 24.09.2018]. Приведенные данные о распространенности тромбозов и их влиянии на показатели здоровья и смертности населения обосновывают актуальность исследований, изучающих причинные факторы внутрисосудистого тромбообразования. Очевидно, что идентификация значимых факторов риска тромбозов сосудов разных типов (венозных, артериальных, артериовенозного сосудистого доступа) способствует выработке более действенных дифференцированных подходов к их профилактике и лечению, что неизбежно приводит к поиску новых эффективных лекарственных средств.Thrombus formation plays one of the most important roles in the pathogenesis of stroke, coronary heart disease and complications of diabetes mellitus. In old and senile age, the frequency of thrombosis increases several times and reaches 200 cases per 100,000 people per year [Chazov, EI, 2008; Mirzoyan, R.S., 2009; Tyurenkov, I.N., 2013; Spasov, A.A., 2013; Dedov, I.I., 2013, (1, 2018)]. Every year the number of patients with vascular lesions is constantly increasing, so there are about 1 million cases of ischemic stroke in economically developed countries annually, and by 2030 this indicator is projected to increase to 3.4 million [Gabbasov Z.A., Popov E. G., Gavrilova I.Yu., et al. A new highly sensitive method for the analysis of platelet aggregation. // Laboratory work. - 1989. - No. 10 - S. 15-18 .; Gabrielyan E.S., Akopov S.E. Blood cells and circulation. - Yerevan: Hayastan, 1985. - P. 326-330.234]. In Russia, as of 2017, over 1.7 million people with diabetes mellitus and complications associated with thrombosis were registered and registered [Federal State Statistics Service Update of 09.24.2018]. The data presented on the prevalence of thrombosis and their influence on the health and mortality rates of the population substantiate the relevance of studies studying the causal factors of intravascular thrombosis. It is obvious that the identification of significant risk factors for thrombosis of vessels of different types (venous, arterial, arteriovenous vascular access) contributes to the development of more effective differentiated approaches to their prevention and treatment, which inevitably leads to the search for new effective drugs.
Известны средства, обладающие антиагрегантной [Носаль Р. Современное состояние и перспективы антитромбоцитарной терапии // Словакофарма ревю. - 2000. - №1-2. - С. 14-19] и антитромбогенной активностью [Танашян М.М., Домашенко М.А. Трентал при ишемических цереброваскулярных заболеваниях (обзор литературы) // Нервные болезни. - 2005. - №4 - С. 21-24]. По этим видам активности наиболее близким (прототипом) является ацетилсалициловая кислота (АСК), обладающая, аниагрегантной и антитромботической активностью.Known funds with antiplatelet [Nosal R. Current state and prospects of antiplatelet therapy // Slovakofarm revue. - 2000. - No. 1-2. - S. 14-19] and antithrombogenic activity [MM Tanashyan, MA Domashenko. Trental for ischemic cerebrovascular diseases (literature review) // Nervous diseases. - 2005. - No. 4 - S. 21-24]. According to these types of activity, the closest (prototype) is acetylsalicylic acid (ASA), which has aniaggregant and antithrombotic activity.
Цель изобретения заключается в получении высокоэффективного водорастворимого производного дикалиевой соли N-(4-гидроксибензоил)таурина, сочетающего основные эффекты, присущие антиагрегантным и антитромботическим средствам не уступающие или превосходящие АСК.The purpose of the invention is to obtain a highly effective water-soluble derivative of the dipotassium salt of N- (4-hydroxybenzoyl) taurine, combining the main effects inherent in antiplatelet and antithrombotic agents that are not inferior to or superior to ASA.
Сущность изобретения заключается в синтезе дикалиевой соли N-(4-гидроксибензоил)таурина формулыThe essence of the invention lies in the synthesis of the dipotassium salt of N- (4-hydroxybenzoyl) taurine of the formula
и использования его в качестве антиагрегантного и антитромботического средства.and its use as an antiplatelet and antithrombotic agent.
Пример 1. Дикалиевая соль N-(4-гидроксибензоил)тауринаExample 1. N- (4-hydroxybenzoyl) taurine dipotassium salt
В реактор, снабженный мешалкой, помещают раствор 2-аминоэтансульфоновой кислоты (таурина) в 25.00 мл воды и приливают 6 н. раствор гидроксида натрия. По каплям, в раствор глицина прикапывают хлорангидрид 4-гидроксибензойной кислоты в течение 1.5 ч при охлаждении. Затем реакционную смесь перемешивают еще 1.5 ч (при охлаждении), контролируя рН среды (рН>7). Полученную смесь выливают в лед и подкисляют хлороводородной кислотой до рН=5, выпавшие кристаллы N-(4-гидроксибензоил)таурина перекристаллизовывают из изопропанола, отфильтровывают и сушат. Выход 34.2%. Тпл.=204-206°С, Rf=0.753 (н-бутанол - этанол - вода = 5:2:1). ЯМР 1Н, м. д. (ДМСО): 6.76-7.75 (4Н, м, ароматические Н), 7.96-8.23 (1Н, м, NH), 10.185 (1H, с, Ph-OH и SO2-OH), 2.23-3.34 (4Н, м, С2Н4). Для C9H11NO5S найдено, %: С (44.08), Н (4.56), N (5.68); S (13.06); вычислено, %: С (44.08), Н (4.52), N (5.71), S (13.07).A solution of 2-aminoethanesulfonic acid (taurine) in 25.00 ml of water is placed in a reactor equipped with a stirrer and 6 N. sodium hydroxide solution. 4-hydroxybenzoic acid chloride is added dropwise to the glycine solution for 1.5 h while cooling. Then the reaction mixture was stirred for another 1.5 h (with cooling), controlling the pH of the medium (pH> 7). The resulting mixture is poured into ice and acidified with hydrochloric acid to pH = 5, the precipitated crystals of N- (4-hydroxybenzoyl) taurine are recrystallized from isopropanol, filtered off and dried. Yield 34.2%. Tm. = 204-206 ° С, Rf = 0.753 (n-butanol - ethanol - water = 5: 2: 1). NMR 1 H, ppm (DMSO): 6.76-7.75 (4H, m, aromatic H), 7.96-8.23 (1H, m, NH), 10.185 (1H, s, Ph-OH and SO 2 -OH) , 2.23-3.34 (4H, m, C 2 H 4 ). For C 9 H 11 NO 5 S found,%: C (44.08), H (4.56), N (5.68); S (13.06); calculated,%: C (44.08), H (4.52), N (5.71), S (13.07).
Затем в реактор загружают 4.60 г (100 ммоль) этилата калия, 100 мл бензола, 12.26 г (50 ммоль) N-(4-гидроксибензоил)таурина и перемешивают при температуре 100°С в течение 30 мин. После охлаждения продукт, дикалиевую соль N-(4-гидроксибензоил)таурина, отделяют фильтрованием, промывают небольшим количеством спиртового раствора щелочи и сушат. Выход - 94%. Т.разл.=260°СThen, the reactor is charged with 4.60 g (100 mmol) of potassium ethylate, 100 ml of benzene, 12.26 g (50 mmol) of N- (4-hydroxybenzoyl) taurine and stirred at 100 ° C for 30 min. After cooling, the product, the dipotassium salt of N- (4-hydroxybenzoyl) taurine, is separated by filtration, washed with a small amount of an alcoholic alkali solution and dried. The yield is 94%. Decomp. = 260 ° С
Найдено, %: С 33.60; Н 2.80; К 24.30; N 4.34; О 24.85; S 9.96. Вычислено, %: С 33.63; Н 2.82; К 24.33; N 4.36; О 24.89; S 9.98.Found,%: C 33.60; H 2.80; By 24.30; N 4.34; About 24.85; S 9.96. Calculated,%: C 33.63; H 2.82; By 24.33; N 4.36; About 24.89; S 9.98.
Пример 2. Исследование антитромбоцитарной активности дикалиевой соли N-(4-гидроксибензоил)тауринаExample 2. Study of antiplatelet activity of dipotassium salt of N- (4-hydroxybenzoyl) taurine
Изучение влияния соединения на агрегационную активность выполнялось по методу Born G. в модификации Габбасова В.А. (1989) на двухканальном лазерном анализаторе агрегации тромбоцитов «Биола» 220LA (Россия).The study of the effect of the compound on aggregation activity was carried out according to the method of Born G. modified by V.A. Gabbasov. (1989) on a two-channel laser analyzer of platelet aggregation "Biola" 220LA (Russia).
Исследования проводились на богатой тромбоцитами плазме крыс по способу, описанному Люсовым В.А., Белоусовым Ю.Б. (1971). Для данного исследования кровь забирали из брюшной аорты наркотизированных хлоралгидратом (400 мг/кг в/б) крыс, стабилизировали 3.8% раствором цитрата натрия в соотношение с кровью 9:1, а затем центрифугировали в течение 10 мин при 1000 об/мин на центрифуге СМ-6м (ELMI, Латвия). Для получения бедной тромбоцитами плазму центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 мин. В основе данного метода исследования лежит регистрация изменения светопропускания богатой тромбоцитами плазмы при добавлении к ней индукторов агрегации, а также анализе флюктуаций светопропускания образца суспензии, вызванных случайным изменением количества частиц в оптическом анализе прибора. Важным условием агрегации тромбоцитов является механическое перемешивание плазмы (800 об/мин), которое проводилось с помощью магнитной мешалки, прилагаемой к агрегометру. Предварительно, перед началом эксперимента, проводилась калибровка агрегометра по двум точкам с использования ЭДТА. При этом за 0% принималось светопропускания бедной тромбоцитами плазмы, а за 100% - богатой тромбоцитами плазмы. Для получения контрольных проб в ходе эксперимента в кювету анализатора вводили 300 мкл богатой тромбоцитами плазмы и 10 мкл индуктора агрегации тромбоцитов АДФ (Sigma Aldrich, USA), в конечной концентрации 5 мкМ.The studies were carried out on platelet-rich rat plasma according to the method described by V.A. Lyusov, Yu.B. Belousov. (1971). For this study, blood was taken from the abdominal aorta of rats anesthetized with chloral hydrate (400 mg / kg i.p.), stabilized with a 3.8% sodium citrate solution in a ratio of 9: 1 to blood, and then centrifuged for 10 min at 1000 rpm in a CM centrifuge -6m (ELMI, Latvia). To obtain platelet-poor plasma, it was centrifuged at 3000 rpm for 15 minutes. This research method is based on the registration of changes in the light transmission of platelet-rich plasma when aggregation inductors are added to it, as well as the analysis of fluctuations in the light transmission of a suspension sample caused by a random change in the number of particles in the optical analysis of the device. An important condition for platelet aggregation is mechanical mixing of the plasma (800 rpm), which was carried out using a magnetic stirrer attached to the aggregometer. Preliminarily, before the start of the experiment, the aggregometer was calibrated at two points using EDTA. In this case, the light transmission of platelet-poor plasma was taken as 0%, and platelet-rich plasma as 100%. To obtain control samples during the experiment, 300 μL of platelet-rich plasma and 10 μL of platelet aggregation inducer ADP (Sigma Aldrich, USA) were injected into the analyzer cuvette, at a final concentration of 5 μM.
При изучении антиагрегантной активности соединений in vitro в кювету с 300 мкл богатой тромбоцитами плазмой добавляли 10 мкл раствора патентуемого соединения в концентрациях от 10-4 до 10-8 М. Пробы инкубировали в термостатируемых ячейках агрегометра при 37°С в течение 5 мин. Затем, после включения агрегатограммы, в кювету добавляли АДФ на 10 секунде регистрации процесса. В качестве препарата сравнения использовали АСК. В ходе регистрации процесса агрегации тромбоцитов в течение 5 мин.When studying the antiplatelet activity of compounds in vitro, 10 μL of a solution of the patented compound at concentrations from 10 -4 to 10 -8 M was added to a cuvette with 300 μL of platelet-rich plasma. Samples were incubated in thermostated cells of an aggregometer at 37 ° C for 5 min. Then, after turning on the aggregatogram, ADP was added to the cuvette at 10 seconds of registration of the process. ASA was used as a reference drug. During the registration of the platelet aggregation process for 5 minutes.
Патентуемое соединение - дикалиевая соль N-(4-гидроксибензоил)таурина - обладает антитромбоцитарной активностью на модели АДФ - индуцированной агрегации тромбоцитов у здоровых животных.The patented compound, the dipotassium salt of N- (4-hydroxybenzoyl) taurine, has antiplatelet activity in the model of ADP-induced platelet aggregation in healthy animals.
У животных контрольной группы степень агрегации тромбоцитов составляла 7.01±0.49%, тогда как этот показатель при добавлении АСК в концентрациях 10-4 М составляла 4.5±0.2, 10-5 М - 4.8±0.3, 10-6 М - 5.4±0.3, 10-7 М - 4.9±0.64, 10-8 М - 4.3±0.7, что на 36.5%, 32%, 23%, 30% и 38% меньше референтных значений. При добавлении дикалиевой соль N-(4-гидроксибензоил)таурина были получены следующие значения степени агрегации в концентрации 10-4 М составляла 3.8±0.6, 10-5 М - 3.9±0.5, 10-6 М - 3.7±0.7 10-7 М - 3.54±0.47, 10-8 М 4.7±0.4 что на 46.5%, 43.5%, 48%, 49.5%, 34%, меньше референтных значений (Рисунок 1А).In animals of the control group, the degree of platelet aggregation was 7.01 ± 0.49%, while this indicator with the addition of ASA at concentrations of 10 -4 M was 4.5 ± 0.2, 10 -5 M - 4.8 ± 0.3, 10 -6 M - 5.4 ± 0.3, 10 -7 M - 4.9 ± 0.64, 10 -8 M - 4.3 ± 0.7, which is 36.5%, 32%, 23%, 30% and 38% less than the reference values. With the addition of the dipotassium salt of N- (4-hydroxybenzoyl) taurine, the following values of the degree of aggregation were obtained at a concentration of 10 -4 M: 3.8 ± 0.6, 10 -5 M - 3.9 ± 0.5, 10 -6 M - 3.7 ± 0.7 10 -7 M - 3.54 ± 0.47, 10 -8 M 4.7 ± 0.4 which is 46.5%, 43.5%, 48%, 49.5%, 34%, less than the reference values (Figure 1A).
В крови полученной от животных с экспериментальным сахарным диабетом этот показатель агрегации тромбоцитов составил 6.7±0.8%, в то время как при добавление патентуемого соединения степень агрегации составила 10-4 М - 6.1±0.7; 10-5 М - 5.5±0.7; 10-6 М - 5.5±0.1; 10-7 М - 4.4±0.6, что на 12%, 20.5%, 19.5% и 36% меньше референтных значений. (Рисунок 1Б).In the blood obtained from animals with experimental diabetes mellitus, this indicator of platelet aggregation was 6.7 ± 0.8%, while with the addition of the patented compound, the degree of aggregation was 10 -4 M - 6.1 ± 0.7; 10 -5 M - 5.5 ± 0.7; 10 -6 M - 5.5 ± 0.1; 10 -7 М - 4.4 ± 0.6, which is 12%, 20.5%, 19.5% and 36% less than the reference values. (Figure 1B).
Таким образом, дикалиевая соль N-(4-гидроксибензоил)таурина обладает антитромбоцитарной активностью на модели АДФ - индуцированной агрегации тромбоцитов у здоровых животных и животных с экспериментальным сахарным диабетом.Thus, the dipotassium salt of N- (4-hydroxybenzoyl) taurine has antiplatelet activity in the model of ADP-induced platelet aggregation in healthy animals and animals with experimental diabetes mellitus.
Пример 3. Исследование антитромбогенной активности дикалиевой соли N-(4-гидроксибензоил)тауринаExample 3. Study of antithrombogenic activity of dipotassium salt of N- (4-hydroxybenzoyl) taurine
Данное исследование проводилось in vivo на модели артериального тромбоза, индуцированного аппликацией 50% раствора хлорида железа (III) на сонную артерию крыс, согласно методу Kurz K.D (1990). Изучаемые соединения вводились животным интраперитонеально. Через 60 мин после этого, животных также интраперитонеально наркотизировали хлоралгидратом (400 мг/кг). Для получения доступа к сонной артерии, послойно вскрывали кожу и ткани на шее животного, после чего, отделяя блуждающий и симпатические нервы, отпрепаровывали сонную артерию на 3 см в длину. На участок сосуда длиной примерно 1 см помещали ватный диск размером 2 мм × 8 мм, предварительно смоченный 50% раствором хлорида железа (III) (0,025 мл), и укладывали пленку Parafilm для изоляции окружающих тканей. Исследование проводили с использованием ультразвукового допплерографа («Мини-Макс Допплер», Санкт-Петербург, РФ). Ультразвуковой датчик прибора устанавливали на артерию на расстоянии от ватного диска ближе к голове.This study was carried out in vivo on a model of arterial thrombosis induced by the application of a 50% solution of iron (III) chloride to the carotid artery of rats, according to the method of Kurz K.D (1990). The studied compounds were administered to the animals intraperitoneally. 60 min after this, the animals were also intraperitoneally anesthetized with chloral hydrate (400 mg / kg). To gain access to the carotid artery, the skin and tissues on the animal's neck were opened layer by layer, after which, separating the vagus and sympathetic nerves, the carotid artery was dissected 3 cm in length. A 2 mm × 8 mm cotton pad previously moistened with 50% iron (III) chloride solution (0.025 ml) was placed on a section of the vessel approximately 1 cm long, and Parafilm was placed to isolate the surrounding tissues. The study was carried out using an ultrasound Doppler ("Mini-Max Doppler", St. Petersburg, RF). The ultrasound probe of the device was installed on the artery at a distance from the cotton pad closer to the head.
Модель артериального тромбоза, индуцированного электрическим током была поставлена согласно методу Guglielmi G. et al (1991) на нелинейных крысах - самцах массой 350-400. На данной модели в механизм тромбообразования вовлечена АТФ. В результате повреждения эндотелия сосудистой стенки воздействием постоянного электрического тока активируется его выработка, что приводит к инициации процессов активации и агрегации тромбоцитов с формированием, в конечном итоге, тромбиновых сгустков крови.A model of arterial thrombosis induced by electric current was set according to the method of Guglielmi G. et al (1991) on non-linear male rats weighing 350-400. In this model, ATP is involved in the mechanism of thrombus formation. As a result of damage to the endothelium of the vascular wall by exposure to direct electric current, its production is activated, which leads to the initiation of the processes of activation and aggregation of platelets with the formation, ultimately, of thrombin blood clots.
Артериальный тромбоз, вызванный воздействием электрического тока на сонную артерию крыс, моделировали на наркотизированных хлоралгидратом (400 мг/кг, в/бр) животных. Затем проводили послойное вскрытие кожи и тканей, после чего отпрепаровывали сонную артерию на 3 см в длину. На участок сосуда длиной около 1 см были наложены золотые электроды, на места их контакта с артерией наносился акустический гель. Окружающие ткани изолировались пленкой Parafilm. На расстоянии 2 см от данного участка устанавливался датчик аппарата с рабочей частотой ультразвукового зондирования 25 МГц. Индукция тромбоза сонной артерии проводилась постоянным электрическим током напряжением 12 В, сила тока при этом соответствовала 50 мА. Воздействие на сосуд выполнялось до момента полной окклюзии. Регистрация артериального кровотока проводилась с помощью ультразвукового допплерографа «Минимакс-Допплер-К («СП Минимакс», Санкт-Петербург, Россия). В качестве параметра, характеризующего антитромботические свойства исследуемых веществ, использовался интервал времени от момента начала стимуляции до полной окклюзии каротидной артерии.Arterial thrombosis caused by the action of an electric current on the carotid artery of rats was simulated in animals anesthetized with chloral hydrate (400 mg / kg, i / b). Then, a layer-by-layer dissection of the skin and tissues was performed, after which the carotid artery was dissected 3 cm in length. Gold electrodes were applied to a section of the vessel about 1 cm long, and an acoustic gel was applied to the places of their contact with the artery. The surrounding tissues were insulated with Parafilm. At a distance of 2 cm from this area, a sensor of the apparatus with an operating frequency of ultrasonic sounding of 25 MHz was installed. The induction of carotid artery thrombosis was carried out with a constant electric current of 12 V, the current strength being 50 mA. The influence on the vessel was performed until the moment of complete occlusion. Registration of arterial blood flow was carried out using an ultrasound Doppler instrument "Minimax-Doppler-K" ("SP Minimax", St. Petersburg, Russia). As a parameter characterizing the antithrombotic properties of the investigated substances, we used the time interval from the start of stimulation to complete occlusion of the carotid artery.
Обработка данных производилась с помощью пакетов программ «Statistica 6.0» (StatSoft, США), Excel из пакета Office ХР (Microsoft, США) и Graph.Pad.Prism 6.0 (США).Data processing was performed using Statistica 6.0 (StatSoft, USA), Excel from Office XP (Microsoft, USA), and Graph.Pad.Prism 6.0 (USA).
Уровень кровотока в сонной артерии крыс контрольной группы составлял 7.6±1.16 мл/мин. После аппликации хлорида железа на поверхность сонной артерии у всех животных происходило полное прекращение кровотока по сосуду. Среднее время полной остановки кровотока до нуля составило 1074.5±41 секунд. Значение исходного кровотока у крыс получавших АСК 7.5±0.7 мл/сек, время полной окклюзии 1335.8±208.1, что на 24% больше чем у животных в контрольной группе. Патентуемое соединение дикалиевая соль N-(4-гидроксибензоил)таурина исходный кровоток составлял 7.7±0.7 мл/мин, время полной окклюзии 1346.3±100.4 сек, что на 25% больше чем у животных в контрольной группе (таблица 1). Таким образом, дикалиевая соль N-(4-гидроксибензоил)таурина вызывает увеличение времени образования тромба по сравнению с группой контрольных животных и обладает антитромбогенной активностью (Таблица 1).The blood flow level in the carotid artery of the control rats was 7.6 ± 1.16 ml / min. After application of ferric chloride to the surface of the carotid artery, all animals experienced complete cessation of blood flow through the vessel. The average time to complete cessation of blood flow to zero was 1074.5 ± 41 seconds. The value of the initial blood flow in rats receiving ASA was 7.5 ± 0.7 ml / sec, the time of complete occlusion was 1335.8 ± 208.1, which is 24% more than in animals in the control group. The patented compound N- (4-hydroxybenzoyl) taurine dipotassium salt, the initial blood flow was 7.7 ± 0.7 ml / min, the time of complete occlusion was 1346.3 ± 100.4 sec, which is 25% more than in animals in the control group (Table 1). Thus, the dipotassium salt of N- (4-hydroxybenzoyl) taurine causes an increase in the time of thrombus formation in comparison with the group of control animals and has antithrombogenic activity (Table 1).
В модели артериального тромбоза, индуцированного электрическим током исходное значение кровотока у крыс контрольной группы составило 9±1.8 мл/сек, среднее время полной остановки кровотока до нуля составило 908.8±155.9 сек. При введение соединения дикалиевая соль N-(4-гидроксибензоил)таурина исходный кровоток составлял 9.8±1.1 мл/сек, время полной окклюзии 1425.4±140.7 сек, что на 57% больше чем у животных в контрольной группе (Таблица 2).In the model of arterial thrombosis induced by electric current, the initial value of blood flow in rats of the control group was 9 ± 1.8 ml / sec, the mean time for complete cessation of blood flow to zero was 908.8 ± 155.9 sec. With the introduction of the compound dipotassium salt of N- (4-hydroxybenzoyl) taurine, the initial blood flow was 9.8 ± 1.1 ml / sec, the time of complete occlusion was 1425.4 ± 140.7 sec, which is 57% more than in animals in the control group (Table 2).
Использование дикалиевой соли N-(4-гидроксибензоил)таурина вызывает увеличение времени образования тромба по сравнению с группой контрольных животных и обладает выраженной антитромбогенной активностью.The use of the N- (4-hydroxybenzoyl) taurine dipotassium salt causes an increase in the time of thrombus formation in comparison with the group of control animals and has a pronounced antithrombogenic activity.
Пример 4. Определение острой токсичностиExample 4. Determination of acute toxicity
Острую суточную токсичность при однократном введении изучали на мышах-самках массой 30-40 г. Соединение в дистиллированной воде вводили животным (в/бр и per os) в различных возрастающих дозах однократно. Наблюдение за животными проводили в течение суток, отмечая количество погибших животных. Расчет LD50 проводили методом пробит анализа.Acute daily toxicity with a single injection was studied on female mice weighing 30-40 g. The compound was administered to animals in distilled water (i / b and per os) in various increasing doses once. Observation of the animals was carried out during the day, noting the number of dead animals. The calculation of LD 50 was carried out by the probit analysis method.
Исследования острой токсичности показали, что по классификации токсичности веществ при их введении под кожу и в брюшную полость животных (К.К. Сидорова, 1973) заявляемое вещество относится к классу малотоксичных (таблица 3).Studies of acute toxicity have shown that according to the classification of toxicity of substances when they are introduced under the skin and into the abdominal cavity of animals (KK Sidorova, 1973), the claimed substance belongs to the class of low toxicity (Table 3).
Claims (3)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019134135A RU2731106C1 (en) | 2019-10-23 | 2019-10-23 | Dipotassium salt of n-(4-hydroxybenzoyl) taurine, having antiaggregant and antithrombotic activity |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019134135A RU2731106C1 (en) | 2019-10-23 | 2019-10-23 | Dipotassium salt of n-(4-hydroxybenzoyl) taurine, having antiaggregant and antithrombotic activity |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2731106C1 true RU2731106C1 (en) | 2020-08-28 |
Family
ID=72421559
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2019134135A RU2731106C1 (en) | 2019-10-23 | 2019-10-23 | Dipotassium salt of n-(4-hydroxybenzoyl) taurine, having antiaggregant and antithrombotic activity |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2731106C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2778686C1 (en) * | 2021-08-12 | 2022-08-23 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Башкирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Agent with antiaggregatory activity and method for production thereof |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4199601A (en) * | 1977-03-23 | 1980-04-22 | La Cooperation Pharmaceutique Francaise | Derivatives of taurine having reinforced neuro-muscular activity |
-
2019
- 2019-10-23 RU RU2019134135A patent/RU2731106C1/en active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4199601A (en) * | 1977-03-23 | 1980-04-22 | La Cooperation Pharmaceutique Francaise | Derivatives of taurine having reinforced neuro-muscular activity |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| БРЕЛЬ А.К. и др.: "ПРОИЗВОДНЫЕ ГИДРОКСИБЕНЗОЙНЫХ КИСЛОТ И ИХ СОЛИ: СИНТЕЗ И ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ", ЖУРНАЛ ОБЩЕЙ ХИМИИ, 85(2), 2015, стр.213-218. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2778686C1 (en) * | 2021-08-12 | 2022-08-23 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Башкирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Agent with antiaggregatory activity and method for production thereof |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Hemonnot et al. | Microglia in Alzheimer disease: well-known targets and new opportunities | |
| Zhang et al. | Mechanisms of NLRP3 inflammasome activation: its role in the treatment of Alzheimer’s disease | |
| JP6667438B2 (en) | Methods and compositions for treating conditions associated with aging | |
| Yu et al. | Targeting connexin 43 provides anti-inflammatory effects after intracerebral hemorrhage injury by regulating YAP signaling | |
| JP2000508645A (en) | Method for treating immune diseases using polyunsaturated fatty acids | |
| Ortiz‐González et al. | Homozygous boricua TBCK mutation causes neurodegeneration and aberrant autophagy | |
| Sato et al. | Caroli's disease: current knowledge of its biliary pathogenesis obtained from an orthologous rat model | |
| Bhopatkar et al. | Granulins modulate liquid–liquid phase separation and aggregation of the prion-like C-terminal domain of the neurodegeneration-associated protein TDP-43 | |
| JPH07108900B2 (en) | Novel 3- (hydroxybenzylidenyl) -indoline-2-ones, process for their production and pharmaceutical compositions containing them | |
| Speich et al. | Are oxidative stress and ischemia significant causes of bladder damage leading to lower urinary tract dysfunction? Report from the ICI‐RS 2019 | |
| JP2009149657A (en) | Thiolalkyl benzoic acid derivative | |
| Rouaud et al. | Pathophysiology of Parkinson's disease: Mitochondria, alpha-synuclein and much more… | |
| Hariharan et al. | Brain capillary pericytes are metabolic sentinels that control blood flow through a KATP channel-dependent energy switch | |
| RU2731106C1 (en) | Dipotassium salt of n-(4-hydroxybenzoyl) taurine, having antiaggregant and antithrombotic activity | |
| Chen et al. | Cysteamine affects skeletal development and impairs motor behavior in zebrafish | |
| KR20000067915A (en) | Furan nitrone compounds | |
| SU1107759A3 (en) | Method of obtaining indolinone derivatives | |
| RU2730835C1 (en) | Dicalcium salt of n-(3-hydroxybenzoyl)taurine, having antiaggregant and antithrombotic activity in combination with cerebroprotective action | |
| Meade | Thrombosis and ischaemic heart disease. | |
| David et al. | Study on forms of intoxication with ***e and evolutionary aspects | |
| AU703667B2 (en) | Drugs to improve synaptic transmission | |
| Lazarov et al. | Harnessing neurogenesis in the adult brain—A role in type 2 diabetes mellitus and Alzheimer's disease | |
| Jakopec et al. | Structurally similar diazenes exhibit significantly different biological activity | |
| Janna | Biological markers in the diagnosis of cerebral ischemia | |
| KR20180101404A (en) | Compositions of polyhydroxylated benzophenone and methods of treating neurodegenerative disorders |