RU2726971C1 - Method of non-invasive early diagnosis of endometriosis - Google Patents
Method of non-invasive early diagnosis of endometriosis Download PDFInfo
- Publication number
- RU2726971C1 RU2726971C1 RU2019139917A RU2019139917A RU2726971C1 RU 2726971 C1 RU2726971 C1 RU 2726971C1 RU 2019139917 A RU2019139917 A RU 2019139917A RU 2019139917 A RU2019139917 A RU 2019139917A RU 2726971 C1 RU2726971 C1 RU 2726971C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- endometriosis
- values
- less
- diagnosis
- tryptophan
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/483—Physical analysis of biological material
- G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
- G01N33/49—Blood
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
- G01N33/6806—Determination of free amino acids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
- G01N33/6806—Determination of free amino acids
- G01N33/6812—Assays for specific amino acids
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Bioinformatics & Computational Biology (AREA)
- Ecology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии, и найдет широкое применение для объективной ранней диагностики эндометриоза.The invention relates to medicine, namely to gynecology, and will find wide application for an objective early diagnosis of endometriosis.
Внедрение в последние 20-30 лет в практику инструментальных, эндоскопических, генетических, иммунологических методов расширило диагностические возможности при обследовании больных с эндометриозом. Частота выявления эндометриоза у больных репродуктивного возраста колеблется от 7 до 50%. Наиболее частыми недостатками в диагностике являются: нераспознавание эндометриоза, ошибочное установление диагноза у некоторых онкологических и неврологических больных при отсутствии у них эндометриоза, поздняя диагностика. «Золотым» стандартом диагностики эндометриоза являются лапароскопия и гистероскопия с последующим гистологическим исследованием биопсированных тканей. Однако частота гистологического подтверждения диагноза колеблется от 70 до 85%. Положительный результат подтверждает диагноз эндометриоза, в то время как отрицательный совершенно не исключает эндометриоидную болезнь, так как на исследование могут попасть лишь отдельные кусочки тканей, лишенные характерных морфологических признаков эндометриоза (Баскаков В.П., Цвелев Ю.В., Кира Е.Ф. Эндометриоидная болезнь. Санкт-Петербург, 2002, 448 с.). В настоящее время отсутствует надежная неинвазивная диагностика малых форм эндометриоза (Kennedy S., Bergqvist A., Chapron С., D'Hooghe Т., Dunselman G., Greb R. et al. ESHRE guideline for the diagnosis and treatment of endometriosis. Hum Reprod 2005, Vol. 20, P. 2698-704; Rogers P.A., D'Hooghe T.M., Fazeabas A., Garget C.E., Giudice L.C., Montgomery G.W., Rombauts L., Salamoonsen L.A., Zondervan K.T. Priorities for endometriosis research: recommendations from an international consensus workshop. Reprod Sci 2009, Vol. 16, P. 335-346), что приводит к увеличению промежутка времени между первым проявлением симптомов боли, бесплодия и хирургическим подтверждением диагноза (Чернуха Г.Е. Эндометриоз и хроническая тазовая боль: причины и последствия. Проблемы репродукции, 2011, №5, с. 83-89; Sinaii N., Plumb К., Cotton L., Lambert A., Kennedy S., Zondervan K. et al. Differences in characteristics among 1,000 women with endometriosis based on extent of diseae. Fertil Steril 2008, Vol. 89, P. 538-45; Gajbhiye R., Sonawani A., Khan S., Suryawanshi A., Kadam S., Warty N., Raut V., Khole V. Выявление и оценка новых сывороточных маркеров для ранней диагностики эндометриоза. Human Reprodaction репродукция человека 2012, №2(26), р. 35-45). Анализ патентной и научно-медицинской литературы позволил установить, что существующие способы диагностики эндометриоза относятся в основном к инвазивным.The introduction in the last 20-30 years into practice of instrumental, endoscopic, genetic, immunological methods has expanded the diagnostic capabilities in the examination of patients with endometriosis. The frequency of detection of endometriosis in patients of reproductive age ranges from 7 to 50%. The most common deficiencies in diagnosis are: non-recognition of endometriosis, erroneous diagnosis in some cancer and neurological patients in the absence of endometriosis, late diagnosis. The "gold" standard for the diagnosis of endometriosis is laparoscopy and hysteroscopy with subsequent histological examination of biopsied tissues. However, the frequency of histological confirmation of the diagnosis ranges from 70 to 85%. A positive result confirms the diagnosis of endometriosis, while a negative result does not completely exclude endometrioid disease, since only individual pieces of tissue that are devoid of the characteristic morphological signs of endometriosis can get into the study (Baskakov V.P., Tsvelev Yu.V., Kira E.F. . Endometrioid disease. St. Petersburg, 2002, 448 p.). Currently, there is no reliable non-invasive diagnosis of small forms of endometriosis (Kennedy S., Bergqvist A., Chapron C., D'Hooghe T., Dunselman G., Greb R. et al. ESHRE guideline for the diagnosis and treatment of endometriosis. Hum Reprod 2005, Vol. 20, P. 2698-704; Rogers PA, D'Hooghe TM, Fazeabas A., Garget CE, Giudice LC, Montgomery GW, Rombauts L., Salamoonsen LA, Zondervan KT Priorities for endometriosis research: recommendations from an international consensus workshop. Reprod Sci 2009, Vol. 16, P. 335-346), which leads to an increase in the time interval between the first manifestation of symptoms of pain, infertility and surgical confirmation of the diagnosis (Chernukha G.E. Endometriosis and chronic pelvic pain: causes and consequences.Problems of reproduction, 2011, No. 5, pp. 83-89; Sinaii N., Plumb K., Cotton L., Lambert A., Kennedy S., Zondervan K. et al. Differences in characteristics among 1,000 women with endometriosis based on the extent of diseae Fertil Steril 2008, Vol. 89, P. 5 38-45; Gajbhiye R., Sonawani A., Khan S., Suryawanshi A., Kadam S., Warty N., Raut V., Khole V. Identification and evaluation of new serum markers for early diagnosis of endometriosis. Human Reprodaction 2012, no. 2 (26), p. 35-45). An analysis of the patent and scientific medical literature made it possible to establish that the existing methods for diagnosing endometriosis are mainly invasive.
Ультразвуковая диагностика прочно вошла в медицинскую практику как один из объективных методов диагностики и динамического наблюдения гинекологических больных. Но трансвагинальное ультразвуковое сканирование, по данным ряда исследователей, не позволяет выявить поверхностные импланты на брюшине малого таза, крестцово-маточных связках (Адамян Л.В., Кулаков В.И., Андреева Е.Н. Эндометриозы: руководство врачей. М., Медицина, 2006, 416 с.; Ищенко А.И., Кудрина Е.А. Эндометриоз: современные аспекты. М., Медицина, 2008, 176 с.; Steinkeler J.A., WoodField С.A., Hillstrom М.М. Female Infertility: A Systematic Approach to Radiologic Imaging and Diagnosis. Radio Graphics 2009, Vol. 29, N. 5, P. 1353-1370).Ultrasound diagnostics firmly entered medical practice as one of the objective methods of diagnostics and dynamic observation of gynecological patients. But transvaginal ultrasound scanning, according to a number of researchers, does not allow detecting superficial implants on the peritoneum of the small pelvis, sacro-uterine ligaments (Adamyan L.V., Kulakov V.I., Andreeva E.N. Endometriosis: doctors' guide. M., Medicine, 2006, 416 pp .; Ishchenko A.I., Kudrina E.A.Endometriosis: modern aspects.M., Medicine, 2008, 176 pp .; Steinkeler JA, WoodField SA, Hillstrom MM Female Infertility: A Systematic Approach to Radiologic Imaging and Diagnosis. Radio Graphics 2009, Vol. 29, No. 5, P. 1353-1370).
В настоящее время применяется MPT-диагностика для эндометриоидных кист яичников, эндометриоза ректовагинального пространства, но с помощью этого метода невозможно обнаружить очаги эндометриоза на тазовой брюшине (малые формы эндометриоза) (Кулаков В.И., Адамян Л.В., Волобуев А.И. и соавт. Магнитнорезонансная томография в диагностике различных форм эндометриоза. Вестник рентгенологии и радиологии 2003, №4, с. 45-59; Труфанов Г.Е., Панов В.О. Руководство по лучевой диагностике в гинекологии. 2008, с. 200-204; Seeber В, Sammel MD, Fan X. Panel of markers can accurately predict endometriosis in a subset of patients. Fertil Steril. 2008, Vol. 89, P. 1073-1081; Al-Jefout M, Dezamaulds G, Cooper M, et al. Diagnosis of endometriosis by detection of nerve fibres in an endometrial biopsy: a double blind study. Hum Reprod. 2009, Vol. 24; P. 3019-3024).Currently, MPT diagnostics is used for endometrioid ovarian cysts, endometriosis of the rectovaginal space, but using this method it is impossible to detect foci of endometriosis on the pelvic peritoneum (small forms of endometriosis) (Kulakov V.I., Adamyan L.V., Volobuev A.I. . et al. Magnetic resonance imaging in the diagnosis of various forms of endometriosis. Bulletin of roentgenology and radiology 2003, No. 4, pp. 45-59; Trufanov GE, Panov VO Guidelines for radiation diagnostics in gynecology. 2008, p. 200 -204; Seeber B, Sammel MD, Fan X. Panel of markers can accurately predict endometriosis in a subset of patients. Fertil Steril. 2008, Vol. 89, P. 1073-1081; Al-Jefout M, Dezamaulds G, Cooper M , et al. Diagnosis of endometriosis by detection of nerve fibers in an endometrial biopsy: a double blind study. Hum Reprod. 2009, Vol. 24; P. 3019-3024).
Настоящее изобретение относится к практической медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для диагностики эндометриоза у пациенток. Наружный генитальный эндометриоз является одним из наиболее распространенных заболеваний, ассоциируемых с бесплодием. Однако при малых его формах и на ранней стадии диагностика неинвазивными методами крайне затруднительна.The present invention relates to practical medicine, namely to gynecology, and can be used to diagnose endometriosis in patients. External genital endometriosis is one of the most common conditions associated with infertility. However, with its small forms and at an early stage, diagnosis by non-invasive methods is extremely difficult.
Эндометриоидные кисты, ретроцервикальный эндометриоз можно верифицировать с помощью бимануального, ультразвукового исследования, магнитно-резонансной томографии, однако наружный эндометриоз тазовой брюшины (малые формы наружного генитального эндометриоза) можно диагностировать только при проведении лапароскопии и последующего гистологического исследования.Endometrioid cysts, retrocervical endometriosis can be verified using bimanual, ultrasound, magnetic resonance imaging, however, external endometriosis of the pelvic peritoneum (small forms of external genital endometriosis) can be diagnosed only during laparoscopy and subsequent histological examination.
Проблема наружного генитального эндометриоза, особенно у женщин с бесплодием, является чрезвычайно важной, поскольку он является весьма распространенным заболеванием женщин репродуктивного возраста, частота которого достигает 10% в популяции (Адамян Л.В., Кулаков В.И., Андреева Е.Н. Эндометриозы: Руководство для врачей. - М.: Медицина, 2006. - 416 с.; Giudice L.C. Endometriosis. // N. Engl. J. Med. - 2010. - Vol. 362. - P. 2389-2398). В свою очередь, бесплодие, которое в значительной степени (до 39%) обусловлено эндометриозом (Кулаков В.И., Овсянникова Т.В. Проблемы и перспективы лечения бесплодия в браке // Акушерство и гинекология. - 1997. - №3. - С. 5-8, Устинкина Т.И. Этиологическая и патогенетическая структура бесплодия в семье: Автореф. дис. д-ра мед. наук. - Л., 1990. - 36 с.), имеет не только медицинское, но и социальное значение.The problem of external genital endometriosis, especially in women with infertility, is extremely important, since it is a very common disease of women of reproductive age, the frequency of which reaches 10% in the population (Adamyan L.V., Kulakov V.I., Andreeva E.N. Endometriosis: A Guide for Physicians. - M .: Medicine, 2006. - 416 p .; Giudice LC Endometriosis. // N. Engl. J. Med. - 2010. - Vol. 362. - P. 2389-2398). In turn, infertility, which is largely (up to 39%) due to endometriosis (Kulakov V.I., Ovsyannikova T.V. Problems and prospects for the treatment of infertility in marriage // Obstetrics and gynecology. - 1997. - No. 3. - S. 5-8, Ustinkina T.I. Etiological and pathogenetic structure of infertility in the family: Abstract of the thesis.Doctor of medical sciences. - L., 1990. - 36 p.), Has not only medical, but also social value.
При отсутствии диагностических маркеров задержка инвазивного инструментального исследования (лапароскопии или лапаротомии) подтверждения эндометриоза от начала болевого синдрома может составлять до 8 лет. Однако даже в этих случаях частота гистологического подтверждения диагноза колеблется от 70 до 85%, причем зачастую только в поздние стадии заболевания (Sinaii N., Plumb K., Cotton L., Lambert A., Kennedy S., Zondervan K. et al. Differences in characteristics among 1,000 women with endometriosis based on extent of disease // Fertil Steril. - 2008. - Vol. 89. - P. 538-545).In the absence of diagnostic markers, the delay of invasive instrumental examination (laparoscopy or laparotomy) for confirmation of endometriosis from the onset of pain syndrome can be up to 8 years. However, even in these cases, the frequency of histological confirmation of the diagnosis ranges from 70 to 85%, and often only in the late stages of the disease (Sinaii N., Plumb K., Cotton L., Lambert A., Kennedy S., Zondervan K. et al. Differences in characteristics among 1,000 women with endometriosis based on the extent of disease // Fertil Steril. - 2008. - Vol. 89. - P. 538-545).
Среди известных в научно-медицинской и патентной литературе методов диагностики наружного генитального эндометриоза можно отметить следующие.Among the methods for diagnosing external genital endometriosis known in the scientific, medical and patent literature, the following can be noted.
Известен способ диагностики наружного генитального эндометриоза (патент RU №2164687, G01N 33/53, G01N 33/48, дата приоритета 20.02.2001, дата публикации 27.03.2001) путем исследования периферической крови, отличающийся тем, что в крови определяют спонтанную НСТ-активность нейтрофилов после их инкубации с ПАМГ-2 и при показателях ее 24% и более диагностируют наружный генитальный эндометриоз. Недостатками данного способа являются: субъективность метода оценки спонтанной НСТ-активности нейтрофилов, поскольку расчет диагностического показателя осуществляется с помощью светового микроскопирования; использование в реакции ПАМГ-2, не имеющего сертификата и не относящегося к числу химических препаратов, включенных в «Реестр новых медицинских изделий, разрешенных к применению МЗ РФ».There is a known method for diagnosing external genital endometriosis (patent RU No. 2164687, G01N 33/53, G01N 33/48, priority date 02/20/2001, publication date 03/27/2001) by examining peripheral blood, characterized in that spontaneous HCT activity is determined in the blood of neutrophils after their incubation with PAMG-2 and at rates of 24% or more, external genital endometriosis is diagnosed. The disadvantages of this method are: the subjectivity of the method for assessing the spontaneous NBT activity of neutrophils, since the calculation of the diagnostic indicator is carried out using light microscopy; the use in the reaction of PAMG-2, which does not have a certificate and is not related to the number of chemicals included in the "Register of new medical devices approved for use by the Ministry of Health of the Russian Federation".
Известен способ диагностики наружного генитального эндометриоза (патент RU №2211454, G01N 33/53, дата приоритета 29.10.2001, дата публикации 27.08.2003) у женщин путем исследования биологического материала, отличающийся тем, что в пробе сыворотки периферической венозной крови определяют концентрацию интерферона-γ и при его содержании, равном 1000 пкг/мл и менее, диагностируют наружный генитальный эндометриоз. Недостатками данного способа являются: неспецифичность, поскольку содержание интерферона-γ в крови изменяется в зависимости от многих эндо- и экзогенных факторов: стресса, наличия аутоиммунных заболеваний, вирусных инфекций, иммунодефицитных состояний и даже воспаления пародонта (Ершов Ф.И. Система интерферона в норме и при патологии. - М.: Медицина, 1996. - 240 с.), которое имеет место у очень многих людей и характеризуется недостаточно высокой точностью (77%).A known method for diagnosing external genital endometriosis (patent RU No. 2211454, G01N 33/53, priority date 10/29/2001, publication date 08/27/2003) in women by examining biological material, characterized in that the concentration of interferon is determined in a serum sample of peripheral venous blood γ and with its content equal to 1000 pg / ml or less, external genital endometriosis is diagnosed. The disadvantages of this method are: nonspecificity, since the content of interferon-γ in the blood changes depending on many endo- and exogenous factors: stress, the presence of autoimmune diseases, viral infections, immunodeficiency states and even periodontal inflammation (Ershov F.I. The interferon system is normal and in pathology. - M .: Medicine, 1996. - 240 p.), which occurs in very many people and is characterized by insufficiently high accuracy (77%).
Известен способ диагностики тяжести наружного генитального эндометриоза (патент RU №2219548, G01N 33/48, дата приоритета 28.01.2002, дата публикации 20.12.2003) путем спектрофотометрического определения в перитонеальной жидкости уровня молекул средней массы и на длине волны 280 нм и показателях экстинкции в пределах 0,100-0,210 е.о.п. диагностируют наружный генитальный эндометриоз I стадии; 0,211-0,310 е.о.п. - наружный генитальный эндометриоз II стадии; 0,311-0,526 е.о.п. - наружный генитальный эндометриоз III стадии; 0,527-0,726 е.о.п. - наружный генитальный эндометриоз IV стадии. Недостатком данного способа является его инвазивность (взятие перитонеальной жидкости); неспецифичность (изменение уровня молекул средней массы, как маркера эндогенной интоксикации, имеет место при различных патологических и даже, функциональных состояниях организма) (Энциклопедия клинических лабораторных тестов. Под ред. Н. Тица. - М.: Издательство «Лабинформ». - 1997. - 960 с.); недостаточная чувствительность (измерение определяемых продуктов в относительных величинах оптической плотности).A known method for diagnosing the severity of external genital endometriosis (patent RU No. 2219548, G01N 33/48, priority date 01/28/2002, publication date 12/20/2003) by spectrophotometric determination in the peritoneal fluid of the level of molecules of average weight and at a wavelength of 280 nm and extinction rates in within 0.100-0.210 p.p. stage I external genital endometriosis is diagnosed; 0.211-0.310 dp - external genital endometriosis stage II; 0.311-0.526 dp - external genital endometriosis stage III; 0.527-0.726 dp - external genital endometriosis stage IV. The disadvantage of this method is its invasiveness (taking peritoneal fluid); nonspecificity (change in the level of average weight molecules, as a marker of endogenous intoxication, takes place in various pathological and even functional states of the body) (Encyclopedia of Clinical Laboratory Tests. Edited by N. Tit. - M .: Publishing House "Labinform". - 1997. - 960 p.); insufficient sensitivity (measurement of the determined products in relative values of optical density).
Известен способ диагностики стадии наружного генитального эндометриоза (патент RU №2242002, G01N 33/53, дата приоритета 13.05.2003, дата публикации 10.12.2004) путем исследования сыворотки крови, отличающийся тем, что определяют содержание макроглобулина и при его уровне от 600,0 мг/дл и выше диагностируют I стадию, при значении от 599,0 до 480,0 мг/дл - эндометриоз II стадии, от 479,0 до 360,0 мг/дл - эндометриоз III стадии и от 359,0 мг/дл - эндометриоз IV стадии. Недостатками этого способа являются низкая специфичность, поскольку изменение содержания α2-макроглобулина в сыворотке крови может быть отражением воспалительных процессов не только в репродуктивных тканях, но и в любом другом органе (печени, поджелудочной железе, желудочно-кишечном тракте) (Энциклопедия клинических лабораторных тестов. Под ред. Н. Тица. М.: Издательство «Лабинформ», - 1997. - 960 с. Иванова О.М. Значение α2-макроглобулина в патогенезе ишемической болезни сердца. - Вестник новых медицинских технологий. - 2008. - №4. - С. 109-112; Зорина В.Н. и др. Роль альфа-2-макроглобулина в патогенезе ревматоидного артрита и системной красной волчанки. - Бюллетень сибирской медицины. - 2010. - №5. - С. 39-44). Не указаны чувствительность и достоверность способа.A known method for diagnosing the stage of external genital endometriosis (patent RU No. 2242002, G01N 33/53, priority date 13.05.2003, publication date 10.12.2004) by examining blood serum, characterized in that the content of macroglobulin is determined and at its level from 600.0 mg / dl and above, stage I is diagnosed, with a value from 599.0 to 480.0 mg / dl - stage II endometriosis, from 479.0 to 360.0 mg / dl - stage III endometriosis and from 359.0 mg / dL - endometriosis stage IV. The disadvantages of this method are low specificity, since a change in the content of α2-macroglobulin in blood serum can be a reflection of inflammatory processes not only in reproductive tissues, but also in any other organ (liver, pancreas, gastrointestinal tract) (Encyclopedia of Clinical Laboratory Tests. Edited by N. Tit. M .: Publishing house "Labinform", - 1997. - 960 pp. Ivanova OM The value of α2-macroglobulin in the pathogenesis of coronary heart disease. - Bulletin of new medical technologies. - 2008. - No. 4. - S. 109-112; Zorina VN et al. The role of alpha-2-macroglobulin in the pathogenesis of rheumatoid arthritis and systemic lupus erythematosus. - Bulletin of Siberian medicine. - 2010. - No. 5. - P. 39-44). The sensitivity and reliability of the method are not indicated.
Также не лишен недостатков способ ранней диагностики наружного генитального эндометриоза у женщин путем исследования биоптата эндометрия (патент RU №2247391, G01N 33/68, дата приоритета 13.05.2003, дата публикации 27.02.2005), отличающийся тем, что в пробе ткани определяют активность катепсина D и при его значении 0,1 Ед. ферм, акт/ч и менее диагностируют наружный генитальный эндометриоз. Способ инвазивен (взятие ЦУГа эндометрия), характеризуется ограниченной информативностью (использование одного фермента только из группы кислых лизосомальных эндопептидаз без учета нейтральных экзопептидаз), недостаточными точностью и специфичностью. Чрезвычайно низкие относительные величины продуктов реакции (десятые и сотые единицы) свидетельствуют о низкой чувствительности способа.Also, the method for the early diagnosis of external genital endometriosis in women by examining the endometrial biopsy (patent RU No. 2247391, G01N 33/68, priority date 05/13/2003, publication date 02/27/2005) is also not without drawbacks, characterized in that cathepsin activity is determined in a tissue sample D and with its value 0.1 U. farms, act / h and less diagnose external genital endometriosis. The method is invasive (taking the CUG of the endometrium), characterized by limited information content (using one enzyme only from the group of acidic lysosomal endopeptidases without taking into account neutral exopeptidases), insufficient accuracy and specificity. The extremely low relative values of the reaction products (tenths and hundredths) indicate the low sensitivity of the method.
Известен диагностический тест, при котором определяется содержание основного фактора роста фибробластов-2 в сыворотке крови и перитонеальной жидкости, повышение которого в обеих биологических жидкостях используется для диагностики наружного генитального эндометриоза (Бурлев В.A., Larsson A., Olovsson М. Фактор роста фибробластов-2 в диагностике перитонеальной формы эндометриоза // Акушерство и гинекология. - 2007. - №3. - С. 50-54). Недостатками метода являются: его инвазивность (исследование перитонеальной жидкости); неспецифичность - он играет важную роль не только для ангиогенеза в эндометрии, но и для ангиогенеза во всех тканях организма человека (Ferriari R.A., Charnock-Jones D.S., Prentice A. et al. Immunohistochemical localization of acidic and basic firoblast growth factors in normal human endometrium and endometriosis and the detection of their mRNA by polymerase chain reaction. // Hum. Reprod. - 1993. - Vol. 8. - P. 11-16, Moller В., Rasmusessen C, Lindblom В., Olovsson M. Expression of the angiogenic growth factors VEGF, FGF-2, EGF and their receptors in normal human endometrium during the menstrual cycle // Mol. Hum. Reprod. - 2001. - Vol. 5. - P. 681-684); ограниченные возможности применения метода (только в крупных перинатальных центрах, для его выполнения необходим высококвалифицированный специалист).Known diagnostic test, which determines the content of the main fibroblast growth factor-2 in serum and peritoneal fluid, the increase in which in both biological fluids is used to diagnose external genital endometriosis (Burlev V.A., Larsson A., Olovsson M. Fibroblast growth factor -2 in the diagnosis of peritoneal endometriosis // Obstetrics and gynecology. - 2007. - No. 3. - P. 50-54). The disadvantages of the method are: its invasiveness (study of the peritoneal fluid); non-specificity - it plays an important role not only for angiogenesis in the endometrium, but also for angiogenesis in all tissues of the human body (Ferriari RA, Charnock-Jones DS, Prentice A. et al. Immunohistochemical localization of acidic and basic firoblast growth factors in normal human endometrium and endometriosis and the detection of their mRNA by polymerase chain reaction. // Hum. Reprod. - 1993. - Vol. 8. - P. 11-16, Moller B., Rasmusessen C, Lindblom B., Olovsson M. Expression of the angiogenic growth factors VEGF, FGF-2, EGF and their receptors in normal human endometrium during the menstrual cycle // Mol. Hum. Reprod. - 2001. - Vol. 5. - P. 681-684); limited possibilities of using the method (only in large perinatal centers, a highly qualified specialist is required to perform it).
Известен способ диагностики генитального эндометриоза (патент RU №2363000, G01N 33/68, дата приоритета 03.08.2007, дата публикации 27.07.2009), включающий исследование сыворотки крови и перитонеальной жидкости, отличающийся тем, что в полученных образцах иммуноферментным методом определяют содержание сосудисто-эндотелиального фактора роста (СЭФР) и, если отношение содержания СЭФР в сыворотке к содержанию СЭФР в перитонеальной жидкости превышает значение 4,35, диагностируют наружный генитальный эндометриоз. К недостаткам метода относятся его инвазивность (исследование перитонеальной жидкости), а также недостаточная специфичность, поскольку ангиогенный СЭФР играет весьма важную роль не только в локальных процессах ангиогенеза в эндометрии, но и на системном уровне в организме женщины (Costa N., Paramanathan S., Mac Donald D., Wierzbicki A.S., Hampson G. Factors regulating circulating vascular endothelial growth factor (VEGF): association with bone mineral density (BMD) in post-menopausal osteoporosis. // Cytokine. - 2009. - Vol. 46, N 3. - P. 376-381; Thielemann A., Baszczuk A., Kopczynski Z., Kopczynski P., Grodecka-Gazdecka S. Clinical usefulness of assessing VEGF and soluble receptors sVEGFR-1 and sVEGFR-2 in women with breast cancer // Ann. Agric Environ Med. - 2013. - Vol. 20, N 2. - P. 293-297).There is a known method for the diagnosis of genital endometriosis (patent RU No. 2363000, G01N 33/68, priority date 08/03/2007, publication date 07/27/2009), including the study of blood serum and peritoneal fluid, characterized in that in the samples obtained by the enzyme-linked immunosorbent method, the content of vascular endothelial growth factor (VEGF) and if the ratio of VEGF in serum to VEGF in peritoneal fluid exceeds 4.35, external genital endometriosis is diagnosed. The disadvantages of the method include its invasiveness (study of the peritoneal fluid), as well as insufficient specificity, since angiogenic VEGF plays a very important role not only in local processes of angiogenesis in the endometrium, but also at the systemic level in a woman's body (Costa N., Paramanathan S., Mac Donald D., Wierzbicki AS, Hampson G. Factors regulating circulating vascular endothelial growth factor (VEGF): association with bone mineral density (BMD) in post-menopausal osteoporosis. // Cytokine. - 2009. - Vol. 46, N 3 - P. 376-381; Thielemann A., Baszczuk A., Kopczynski Z., Kopczynski P., Grodecka-Gazdecka S. Clinical usefulness of assessing VEGF and soluble receptors sVEGFR-1 and sVEGFR-2 in women with breast cancer / / Ann. Agric Environ Med. - 2013. - Vol. 20,
Известен способ диагностики наружного генитального эндометриоза у женщин с бесплодием (патент RU №2291439, G01N 33/577, дата приоритета 04.07.2005, дата публикации 10.01.2007) путем исследования периферической венозной крови, отличающийся тем, что в крови определяют относительное количество CD 16+ моноцитов в моноцитарном гейте и при значениях этого показателя, равного или менее 45%, диагностируют наружный генитальный эндометриоз. Данный способ, как и предыдущие, имеет ряд недостатков:A known method for diagnosing external genital endometriosis in women with infertility (patent RU No. 2291439, G01N 33/577, priority date 07/04/2005, publication date 01/10/2007) by examining peripheral venous blood, characterized in that the relative amount of CD 16 is determined in the blood + monocytes in the monocytic gate and with values of this indicator equal to or less than 45%, external genital endometriosis is diagnosed. This method, like the previous ones, has a number of disadvantages:
- неспецифичность, поскольку количество CD 16+ моноцитов значительно варьирует в венозной крови при различных заболеваниях, патологических и экстремальных состояниях (вирусные инфекции, аутоиммунные заболевания, гастроэнтерологические заболевания, воспалительные процессы, стресс) (Мамедова Л.Н. Клинико-патогенетическое обоснование оптимизации диагностики и лечения воспалительных заболеваний кишечника: Дисс. кан. мед. наук. - Ростов на Дону, 2014. - 180 с. Последние достижения в клинической иммунологии. Под ред. Р.А. Томпсона. М.: Медицина, 1983. - 199 с.);- nonspecificity, since the number of CD 16+ monocytes varies significantly in venous blood in various diseases, pathological and extreme conditions (viral infections, autoimmune diseases, gastroenterological diseases, inflammatory processes, stress) (Mamedova L.N. Clinical and pathogenetic rationale for optimizing diagnostics and Treatment of Inflammatory Bowel Diseases: Diss. Can. of Medical Sciences. - Rostov on Don, 2014. - 180 pp. Recent advances in clinical immunology. Edited by RA Thompson. M .: Medicine, 1983. - 199 pp. );
- недостаточная чувствительность (измерение диагностического показателя в относительных количествах);- insufficient sensitivity (measurement of a diagnostic indicator in relative quantities);
- недостаточная точность (снижена в связи с отсутствием абсолютных величин), почти 20% составляют ложноположительные и ложноотрицательные результаты.- insufficient accuracy (reduced due to the lack of absolute values), almost 20% are false positive and false negative results.
Известен диагностический тест, при котором учитывается абсолютное количество макрофагов в перитонеальной жидкости - 13⋅106, позволяющее диагностировать наличие эндометриоза (Oosterlynk D.J., Lacquaet F.A., Waer М. et al. Lymphokine - activated killer activity in women with endometriosis // Gyn. Obstet. Invest. - 1994. - Vol. 37, #3. - P. 185-190). Недостатком вышеизложенного способа следует отнести его травматичность, так как для диагностики эндометриоза этим методом нужно получить перитонеальную жидкость, для чего проводят лапароскопию. В случае подтверждения диагноза необходимо проводить повторную лапароскопию. В то же время для подсчета абсолютного количества макрофагов в перитонеальной жидкости должен участвовать специалист высокого профессионального уровня.Known diagnostic test, which takes into account the absolute number of macrophages in the peritoneal fluid - 13⋅10 6 , allowing to diagnose the presence of endometriosis (Oosterlynk DJ, Lacquaet FA, Waer M. et al. Lymphokine - activated killer activity in women with endometriosis // Gyn. Obstet Invest. - 1994. - Vol. 37, # 3. - P. 185-190). The disadvantage of the above method should be attributed to its invasiveness, since for the diagnosis of endometriosis by this method, it is necessary to obtain peritoneal fluid, for which laparoscopy is performed. If the diagnosis is confirmed, repeated laparoscopy should be performed. At the same time, a highly professional specialist should be involved in calculating the absolute number of macrophages in the peritoneal fluid.
Известен способ диагностики генитального эндометриоза путем исследования функциональной активности базофилов периферической крови больного в присутствии водного экстракта эндометриоидной ткани с концентрацией белка >200 мкг/мл. При показателе >12% диагностируется генитальный эндометриоз (Патент 2004910. Кулаков В.И., Сухих Г.Т., Пшеничникова Т.Я., Волков Н.И., Ионов И.Д. Российский научно-исследовательский центр перинатологии, акушерства и гинекологии. Способ диагностики генитального эндометриоза. Бюллетень "Изобретения", - 1993. - 45-46. - с. 164.). Недостатки способа:A known method for the diagnosis of genital endometriosis by studying the functional activity of basophils in the peripheral blood of a patient in the presence of an aqueous extract of endometrioid tissue with a protein concentration of> 200 μg / ml. With an indicator> 12%, genital endometriosis is diagnosed (Patent 2004910. Kulakov V.I., Sukhikh G.T., Pshenichnikova T.Ya., Volkov N.I., Ionov I.D. Russian Research Center of Perinatology, Obstetrics and gynecology. Method for the diagnosis of genital endometriosis. Bulletin "Inventions", - 1993. - 45-46. - p. 164.). Disadvantages of the method:
- выделение базофильных лейкоцитов требует забора большого количества крови (18 мл) из-за относительной малочисленности базофилов в периферической крови человека (0,5-1%)- Isolation of basophilic leukocytes requires taking a large amount of blood (18 ml) due to the relative small number of basophils in human peripheral blood (0.5-1%)
- предлагаемый для использования экстракт эндометриоидной ткани не является стандартизованным препаратом и не включен в "Реестр новых медицинских средств и изделий, разрешенных к применению МЗ РФ";- the extract of endometrioid tissue proposed for use is not a standardized preparation and is not included in the "Register of new medical devices and products approved for use by the Ministry of Health of the Russian Federation";
- способ не предусматривает диагностику различных форм генитального эндометриоза (наружный, внутренний), т.к. данный способ применяется для диагностики всех форм генитального эндометриоза;- the method does not provide for the diagnosis of various forms of genital endometriosis (external, internal), because this method is used to diagnose all forms of genital endometriosis;
- не указывается точность способа.- the accuracy of the method is not indicated.
Известен способ диагностики наружного генитального эндометриоза путем определения спонтанного высвобождения гистамина из базофилов периферической крови. При значении этого показателя 49% и более диагностируют наружный генитальный эндометриоз (Авторское свидетельство 1534397. Ионов И.Д., Волков Н.И., Сухих Г.Т., Пшеничникова Т.Я. Всероссийский НИИ по охране здоровья матери и ребенка. Способ диагностики наружного генитального эндометриоза. - Бюллетень «Изобретения». - 1990. - 1. - С. 180). Способ имеет ряд недостатков:A known method for the diagnosis of external genital endometriosis by determining the spontaneous release of histamine from the basophils of the peripheral blood. With a value of this indicator of 49% or more, external genital endometriosis is diagnosed (Author's certificate 1534397. Ionov ID, Volkov NI, Sukhikh GT, Pshenichnikova T.Ya. All-Russian Research Institute for Maternal and Child Health. diagnostics of external genital endometriosis. - Bulletin "Inventions." - 1990. - 1. - P. 180). The method has several disadvantages:
- выделение базофилов требует забора большого количества крови (18 мл) из-за относительной малочисленности базофилов в периферической крови человека (0,5-1%) и низкого содержания в них гистамина;- the isolation of basophils requires the collection of a large amount of blood (18 ml) due to the relative paucity of basophils in the peripheral blood of humans (0.5-1%) and the low content of histamine in them;
- предлагаемый способ неспецифичен, так как повышение высвобождения гистамина базофилами происходит и при других патологических состояниях, в частности воспалениях и аллергических реакциях любого типа;- the proposed method is nonspecific, since an increase in the release of histamine by basophils occurs in other pathological conditions, in particular inflammation and allergic reactions of any type;
- способ не дает возможности установить степень тяжести заболевания и является только качественным;- the method does not make it possible to establish the severity of the disease and is only qualitative;
- не указывается точность способа.- the accuracy of the method is not indicated.
Известен ряд способов диагностики матки на основании исследования сыворотки крови пациенток. Способ диагностики внутреннего эндометриоза матки (патент RU 2117296, G01N 33/68, дата приоритета 27.12.1995, дата публикации 10.08.1998), включающий биохимическое исследование сыворотки крови больной, отличающийся тем, что в сыворотке крови определяют уровень кислой фосфатазы и при выявлении его значения 50,91+6,95 ммоль/л диагностируют внутренний эндометриоз матки. Способ диагностики наружного генитального эндометриоза у женщин с бесплодием (патент RU 2655812, G01N 33/50, дата приоритета 06.06.2017, дата публикации 29.05.2018), включающий исследование крови, отличающийся тем, что в сыворотке крови женщины определяют содержание агматина и при его величине ниже 2,2 мкг/мл диагностируют наружный генитальный эндометриоз. Способ диагностики наружного генитального эндометриоза у пациенток с бесплодием (патент RU 2599019, G01N 33/53, G01N 33/48, дата приоритета 06.04.2015, дата публикации 10.10.2016), включающий измерение в плазме крови концентрации коэнзима Q10 и α-токоферола, и при величине коэнзима Q10 менее 1,057 мкг/мл и α-токоферола менее 18,00 мкг/мл диагностируют тяжелые или умеренные формы наружного генитального эндометриоза; при концентрациях коэнзима Q10 от 1,057 мкг/мл до 1,352 мкг/мл и α-токоферола от 18,00 мкг/мл и до 21,03 мкг/мл - малые формы наружного генитального эндометриоза; при концентрациях коэнзима Q10 более 1,352 мкг/мл и α-токоферола более 21,03 мкг/мл - наружный генитальный эндометриоз исключают.There are a number of methods for diagnosing the uterus based on the study of the blood serum of patients. A method for diagnosing internal endometriosis of the uterus (patent RU 2117296, G01N 33/68, priority date 12/27/1995, publication date 08/08/1998), including a biochemical study of the patient's blood serum, characterized in that the level of acid phosphatase is determined in the blood serum and when it is detected values of 50.91 + 6.95 mmol / l diagnose internal endometriosis of the uterus. A method for diagnosing external genital endometriosis in women with infertility (patent RU 2655812, G01N 33/50, priority date 06/06/2017, publication date 05/29/2018), including a blood test, characterized in that the content of agmatine in the serum of a woman is determined and a value below 2.2 μg / ml is diagnosed with external genital endometriosis. A method for diagnosing external genital endometriosis in patients with infertility (patent RU 2599019, G01N 33/53, G01N 33/48, priority date 04/06/2015, publication date 10/10/2016), including measuring the concentration of coenzyme Q10 and α-tocopherol in blood plasma, and when the value of coenzyme Q10 is less than 1.057 μg / ml and α-tocopherol is less than 18.00 μg / ml, severe or moderate forms of external genital endometriosis are diagnosed; at concentrations of coenzyme Q10 from 1.057 μg / ml to 1.352 μg / ml and α-tocopherol from 18.00 μg / ml and up to 21.03 μg / ml - small forms of external genital endometriosis; at concentrations of coenzyme Q10 more than 1.352 μg / ml and α-tocopherol more than 21.03 μg / ml, external genital endometriosis is excluded.
Недостатками данной группы способов можно назвать следующие:The disadvantages of this group of methods include the following:
- недостаточная точность способов для диагностики эндометриоза на ранних стадиях;- insufficient accuracy of methods for diagnosing endometriosis in the early stages;
- высокая вероятность появления как ложноположительных результатов (например, повышение уровня кислой фосфатазы у женщин может быть связано с гиперпаратиреоидизмом, болезнью Гоше, раком молочной железы и метастазами в костную ткань (Bull Н, Murray PG, Thomas D, Fraser AM, Nelson PN. Acid phosphatases. Mol Pathol. 2002 Apr; 55(2):65-72. doi: 10.1136/mp.55.2.65.), так и ложноотрицательных результатов (например, повышенный уровень агматина в сыворотке крови может быть связан с наличием аутоиммунного заболевания щитовидной железы (Song J, Shan Z, Mao J, Teng W. Serum polyamine metabolic profile in autoimmune thyroid disease patients. Clin Endocrinol (Oxf). 2019 May; 90(5):727-736. doi: 10.1111/cen. 13946.) или даже с приемом биологически активной добавки, содержащей агматин).- a high probability of occurrence as false positive results (for example, an increase in the level of acid phosphatase in women may be associated with hyperparathyroidism, Gaucher disease, breast cancer and bone metastases (Bull H, Murray PG, Thomas D, Fraser AM, Nelson PN. Acid phosphatases. Mol Pathol. 2002 Apr; 55 (2): 65-72. doi: 10.1136 / mp.55.2.65.) and false negative results (for example, elevated serum agmatine levels may be associated with autoimmune thyroid disease). glands (Song J, Shan Z, Mao J, Teng W. Serum polyamine metabolic profile in autoimmune thyroid disease patients. Clin Endocrinol (Oxf). 2019 May; 90 (5): 727-736. doi: 10.1111 / cen. 13946. ) or even taking a dietary supplement containing agmatine).
- недостаточная специфичность, так как указанные маркеры могут относиться к другим патологическим состояниям организма.- insufficient specificity, since these markers may relate to other pathological conditions of the body.
Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату к предлагаемому изобретению является способ диагностики наружного генитального эндометриоза (патент RU 2526823, G01N 33/53, G01N 33/50, G01N 33/48, дата приоритета 05.08.2013, дата публикации 27.08.2014), включающий исследование сыворотки крови биохимическим методом с определением уровня липопротеинов высокой плотности (ЛПВП), при величине которого 0,77 ммоль/л и выше диагностируют наружный генитальный эндометриоз. Недостатками данного метода являются:The closest in technical essence and the achieved result to the proposed invention is a method for diagnosing external genital endometriosis (patent RU 2526823, G01N 33/53, G01N 33/50, G01N 33/48, priority date 08/05/2013, publication date 08/27/2014), including a study of blood serum by a biochemical method with the determination of the level of high density lipoproteins (HDL), at a value of 0.77 mmol / l and above, external genital endometriosis is diagnosed. The disadvantages of this method are:
- исследование суммарного содержания липопротеинов, а не отдельных специфичных соединений, что может давать ложноположительные результаты, например, под влиянием различий в диете пациенток;- study of the total content of lipoproteins, and not of individual specific compounds, which can give false positive results, for example, under the influence of differences in the patient's diet;
- отсутствие специфичности именно к эндометриозу, поскольку повышение ЛПВП может быть обусловлено генетическими заболеваниями, хроническим алкоголизмом, хроническими заболеваниями печени, такими как первичный билиарный цирроз (холангит), гипертиреозом и действием лекарственных средств (таких, например, как кортикостероиды, инсулин, фенитоин, эстрогены) (MSD Manuals, https://www.msdmanuals.com/professional).- lack of specificity to endometriosis, since an increase in HDL can be caused by genetic diseases, chronic alcoholism, chronic liver diseases such as primary biliary cirrhosis (cholangitis), hyperthyroidism and the action of drugs (such as corticosteroids, insulin, phenytoin, estrogens ) (MSD Manuals, https://www.msdmanuals.com/professional).
Указанные недостатки предлагается устранить в заявляемом способе.These disadvantages are proposed to be eliminated in the claimed method.
Задача, на решение которой направлено предлагаемое изобретение заключается в выявлении признаков болезни при ранней диагностике.The problem to be solved by the present invention is to identify signs of the disease in early diagnosis.
Данная задача решается достижением, заключающимся в ранней диагностике признаков заболевания эндометриза, способом химического анализа метаболитов в сыворотке крови, включающим анализ 6 аминокислот.This problem is solved by the achievement of early diagnosis of signs of endometriosis disease by the method of chemical analysis of metabolites in blood serum, including the analysis of 6 amino acids.
Технический результат, получаемый в ходе использования изобретения, состоит в повышении точности и специфичности неинвазивной ранней диагностики эндометриоза у женщин, что позволит своевременно назначать соответствующую адекватную патогенетическую терапию.The technical result obtained in the course of using the invention consists in increasing the accuracy and specificity of non-invasive early diagnosis of endometriosis in women, which will allow timely prescribing an appropriate adequate pathogenetic therapy.
Новизна заявляемого способа заключается в том, что вместо биохимического анализа биологических проб проводится химический анализ метаболитов в сыворотке крови, включающий анализ 6 аминокислот - глицина, аланина, валина, пролина, серина и триптофана в диапазоне концентраций от 0,5 до 10,0 мкг/мл, последующую нормировку полученных значений аналитического сигнала на аналитический сигнал валина для исключения в расчете возможной погрешности определения концентраций аминокислот и выполнение сравнения нормированных значений концентраций 5 аминокислот со средними нормированными значениями для групп больных и здоровых. Если полученные значения нормированных значений концентраций глицина, аланина, пролина и серина не менее чем в 1,4 раза ниже, а триптофана выше, чем средние значения для референсной группы здоровых, то подтверждается возможность постановки диагноза эндометриоз, если полученные значения соответствуют средним по референсной группе здоровых, заболевание не диагностируется. В случае отклонения от соотношений превосходства или недостаточности концентрации триптофана с концентрацией остальных аминокислот проводят дополнительные исследования пациентов.The novelty of the proposed method lies in the fact that instead of the biochemical analysis of biological samples, a chemical analysis of metabolites in blood serum is carried out, including the analysis of 6 amino acids - glycine, alanine, valine, proline, serine and tryptophan in the concentration range from 0.5 to 10.0 μg / ml, the subsequent normalization of the obtained values of the analytical signal to the analytical signal of valine to exclude the possible error in determining the concentration of amino acids in the calculation and comparison of the normalized values of the concentrations of 5 amino acids with the average normalized values for the groups of patients and healthy people. If the obtained values of the normalized values of the concentrations of glycine, alanine, proline and serine are not less than 1.4 times lower, and tryptophan is higher than the average values for the reference group of healthy people, then the possibility of diagnosing endometriosis is confirmed if the obtained values correspond to the average values for the reference group. healthy, the disease is not diagnosed. In case of deviation from the ratio of the superiority or insufficiency of the concentration of tryptophan with the concentration of other amino acids, additional studies of patients are carried out.
Подробное описание способа и примеры его клинического выполнения.A detailed description of the method and examples of its clinical implementation.
Способ осуществляют следующим образом.The method is carried out as follows.
Методом газовой хромато-масс-спектрометрии, с применением газового хроматомасс-спектрометра Shimadzu GCMS-TQ8040 или аналогичного не уступающего по характеристикам, с предварительной подготовкой пробы дериватизацией определяют концентрации 6 аминокислот в сыворотке крови пациентов. Проводят нормирование значений для 5-ти аминокислот путем деления их концентраций на концентрацию валина и получают нормированные значения концентрации для каждой аминокислоты.The method of gas chromatography-mass spectrometry, using a gas chromatography-mass spectrometer Shimadzu GCMS-TQ8040 or similar, is not inferior in characteristics, with preliminary preparation of the sample by derivatization, the concentration of 6 amino acids in the blood serum of patients is determined. Values for 5 amino acids are normalized by dividing their concentrations by the valine concentration, and normalized concentration values are obtained for each amino acid.
В результате определения нормированных концентраций по этой схеме для контрольной группы здоровых (14 человек) и контрольной группы больных с предварительно поставленным диагнозом с подтверждением диагноза по результатам гистологического исследования (14 человек) предварительно полученных средних значений нормированных концентраций для обеих контрольных групп (фигура). На фигуре представлено сопоставление средних нормированных концентраций 5 аминокислот для пациентов контрольной группы с подтвержденным диагнозом эндометриоз и контрольной группы здоровых (Ala - аланин, Gly - глицин, Pro - пролин, Ser - серии, Trp - триптофан). Нормированные значения концентраций глицина, аланина, пролина и серина не менее чем в 1,4 раза ниже, а триптофана выше для контрольной группы больных с предварительно поставленным диагнозом «эндометриоз».As a result of determining the normalized concentrations according to this scheme for the control group of healthy (14 people) and the control group of patients with a preliminary diagnosis with confirmation of the diagnosis based on the results of histological examination (14 people), the previously obtained average values of normalized concentrations for both control groups (figure). The figure shows a comparison of the average normalized concentrations of 5 amino acids for patients of the control group with a confirmed diagnosis of endometriosis and the healthy control group (Ala - alanine, Gly - glycine, Pro - proline, Ser - series, Trp - tryptophan). The normalized values of the concentrations of glycine, alanine, proline and serine are not less than 1.4 times lower, and tryptophan is higher for the control group of patients with a preliminary diagnosis of endometriosis.
Дальнейший метод расчета основан на сравнении нормированных концентраций для пробы пациентов с неизвестным диагнозом с нормированными концентрациями для контрольной группы здоровых пациентов, которые приведены в таблице 1, где представлены граничные значения нормированных концентраций 5 аминокислот, использующиеся для постановки или опровержения диагноза «эндометриоз», с учетом коэффициента 1,4. Для удобства последующего сравнения в таблице 1 рассчитаны граничные значения нормированных концентраций 5 аминокислот, использующиеся для постановки или опровержения диагноза «эндометриоз», с учетом коэффициента 1,4.A further calculation method is based on comparing the normalized concentrations for a sample of patients with an unknown diagnosis with the normalized concentrations for the control group of healthy patients, which are shown in Table 1, which presents the cutoff values of the normalized concentrations of 5 amino acids used to establish or refute the diagnosis of endometriosis, taking into account coefficient 1.4. For the convenience of subsequent comparison in table 1, the boundary values of the normalized concentrations of 5 amino acids are calculated, which are used to formulate or refute the diagnosis of endometriosis, taking into account the coefficient 1.4.
В таблице 2 представлено применение предлагаемого способа диагностики на примере 3-х пациентов с неизвестным диагнозом, где проиллюстрировано проведение постановки диагноза для 3-х пациентов с неизвестным диагнозом по описанному выше способу. 
Из таблицы можно заметить, что при анализе 6 аминокислот, получены значения нормированных значений концентраций для глицина меньше 1,85, для аланина меньше 1,14, для пролина меньше 1,07 и серина меньше 1,93, а для триптофана больше 1,79, то подтверждается возможность постановки диагноза эндометриоз, если полученные значения для глицина больше 1,85, для аланина больше 1,14, для пролина больше 1,07 и серина больше 1,93, а для триптофана меньше 1,79, заболевание не диагностируется. В случае если указанные зависимости не выполняется, то требуются дополнительные исследования для уточнения диагноза пациентов.From the table it can be noted that when analyzing 6 amino acids, the normalized concentration values for glycine were less than 1.85, for alanine less than 1.14, for proline less than 1.07 and serine less than 1.93, and for tryptophan more than 1.79 , then the possibility of diagnosing endometriosis is confirmed, if the obtained values for glycine are more than 1.85, for alanine more than 1.14, for proline more than 1.07 and serine more than 1.93, and for tryptophan less than 1.79, the disease is not diagnosed. If these dependencies are not met, then additional studies are required to clarify the diagnosis of patients.
Claims (2)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019139917A RU2726971C1 (en) | 2019-12-05 | 2019-12-05 | Method of non-invasive early diagnosis of endometriosis |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019139917A RU2726971C1 (en) | 2019-12-05 | 2019-12-05 | Method of non-invasive early diagnosis of endometriosis |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2726971C1 true RU2726971C1 (en) | 2020-07-17 |
Family
ID=71616642
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2019139917A RU2726971C1 (en) | 2019-12-05 | 2019-12-05 | Method of non-invasive early diagnosis of endometriosis |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2726971C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2756027C1 (en) * | 2021-02-24 | 2021-09-24 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта" | Method for diagnosis of external genital endometriosis |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2265223C1 (en) * | 2004-03-26 | 2005-11-27 | Государственное учреждение "Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства им. В.Н. Городкова" Минздрава России | Method for predicting external genital endometriosis |
| US20080318237A1 (en) * | 2007-04-25 | 2008-12-25 | Regents Of The University Of California | Methods of diagnosing endometriosis |
| RU2526823C1 (en) * | 2013-08-05 | 2014-08-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский институт акушерства и педиатрии" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Diagnostic technique for external genital endometriosis |
| WO2018134329A1 (en) * | 2017-01-18 | 2018-07-26 | Biocrates Life Sciences Ag | Metabolic biomarker set for assessing ovarian cancer |
-
2019
- 2019-12-05 RU RU2019139917A patent/RU2726971C1/en active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2265223C1 (en) * | 2004-03-26 | 2005-11-27 | Государственное учреждение "Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства им. В.Н. Городкова" Минздрава России | Method for predicting external genital endometriosis |
| US20080318237A1 (en) * | 2007-04-25 | 2008-12-25 | Regents Of The University Of California | Methods of diagnosing endometriosis |
| RU2526823C1 (en) * | 2013-08-05 | 2014-08-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский институт акушерства и педиатрии" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Diagnostic technique for external genital endometriosis |
| WO2018134329A1 (en) * | 2017-01-18 | 2018-07-26 | Biocrates Life Sciences Ag | Metabolic biomarker set for assessing ovarian cancer |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| DUTTA M et al. Metabolomics reveals perturbations in endometrium and serum of minimal and mild endometriosis. Sci Rep., 2018, 8(1):6466. * |
| КАЛИНИНА Е.А. и др. Молекулярные методы диагностики гинекологических заболеваний. Лечение и профилактика, 2014, 2(10), с.44-53. * |
| КАЛИНИНА Е.А. и др. Молекулярные методы диагностики гинекологических заболеваний. Лечение и профилактика, 2014, 2(10), с.44-53. DUTTA M et al. Metabolomics reveals perturbations in endometrium and serum of minimal and mild endometriosis. Sci Rep., 2018, 8(1):6466. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2756027C1 (en) * | 2021-02-24 | 2021-09-24 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта" | Method for diagnosis of external genital endometriosis |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Mosbah et al. | Interleukin-6, intracellular adhesion molecule-1, and glycodelin A levels in serum and peritoneal fluid as biomarkers for endometriosis | |
| RU2664455C1 (en) | Method for assessing risk of developing complications in the long-term postoperative period in patients with signs of connective tissue dysplasia | |
| Chen et al. | Decreased endometrial vascularity in patients with antiphospholipid antibodies–associated recurrent miscarriage during midluteal phase | |
| RU2726971C1 (en) | Method of non-invasive early diagnosis of endometriosis | |
| BOZOROV et al. | Biochemical Markers for Prediction of Premature Labor in Urogenital Infections. | |
| Bukvić et al. | Prevalence of Balkan endemic nephropathy has not changed since 1971 in the Kolubara region in Serbia | |
| RU2526823C1 (en) | Diagnostic technique for external genital endometriosis | |
| RU2427837C1 (en) | Method of diagnosing destructive pancreatitis | |
| CN106872593B (en) | Application of lysophosphatidic acid as marker in detecting endometriosis | |
| RU2738012C1 (en) | Method for prediction of risk of recurrence of urolithiasis at stage of primary calcium oxalate nephrolithiasis | |
| Torbé et al. | Are vaginal fluid procalcitonin levels useful for the prediction of subclinial infection in patients with preterm premature rupture of membranes? | |
| Wang et al. | Elevated vascular endothelia growth factor-A in the serum and peritoneal fluid of patients with endometriosis | |
| Tripathi et al. | Can preterm labour be predicted in low risk pregnancies? Role of clinical, sonographic, and biochemical markers | |
| Nawar et al. | The relationship between serum osteopontin level and parameters of chronic kidney disease–mineral bone disease in patients on regular hemodialysis | |
| RU2574020C1 (en) | DIAGNOSTIC TECHNIQUE FOR POLYCYSTIC OVARIAN SYNDROME IN ADOLESCENTS BY MEASURING URINE 2-OHE1/16α-OHE1 RATIO | |
| RU2706537C1 (en) | Method for early postoperative risk assessment in patients with connective tissue dysplasia | |
| Golboni et al. | Predictive value of plasma haematocrit level in early diagnosis of pre-eclampsia | |
| RU2571291C1 (en) | Diagnostic technique for early stages of external genital endometriosis | |
| Torbé et al. | Maternal plasma lipopolysaccharide binding protein (LBP) concentrations in pregnancy complicated by preterm premature rupture of membranes | |
| RU2655812C1 (en) | Method for diagnostics of external genital endometriosis in women suffering from infertility | |
| Nuritdinovich | IMPROVEMENT OF DIAGNOSIS METHODS FOR DESTRUCTIVE FORMS OF ACUTE CALCULOSIS CHOLECYSTITIS. | |
| RU2553624C1 (en) | Method for predicting toxaemias of pregnancy | |
| RU2540499C1 (en) | Method for prediction of anembryonic pregnancy | |
| RU2763257C1 (en) | Method for diagnosing the stage of liver fibrosis in chronic liver diseases in children | |
| RU2699666C1 (en) | Diagnostic technique for placental insufficiency of infectious-inflammatory genesis at 34-36 weeks of pregnancy |