RU2712789C1 - Fiber-glass confocal scanning microscope - Google Patents
Fiber-glass confocal scanning microscope Download PDFInfo
- Publication number
- RU2712789C1 RU2712789C1 RU2019106393A RU2019106393A RU2712789C1 RU 2712789 C1 RU2712789 C1 RU 2712789C1 RU 2019106393 A RU2019106393 A RU 2019106393A RU 2019106393 A RU2019106393 A RU 2019106393A RU 2712789 C1 RU2712789 C1 RU 2712789C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- waveguide
- radiation
- lens
- optical
- aperture
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
-
- G—PHYSICS
- G02—OPTICS
- G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
- G02B21/00—Microscopes
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Microscoopes, Condenser (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к устройствам регистрации излучения, возбуждаемого в локальных областях среды при фокусировке лазерного освещения, и последующего синтеза двухмерного и трехмерного изображений по результатам пространственного сканирования объекта световым пучком. Устройство может быть использовано для спектрального исследования различных биологических сред, включая флуоресцентную диагностику для решения прикладных задач медицины. Конфокальная микроскопия имеет ряд преимуществ по сравнению с традиционной оптической микроскопией, включая регулируемую глубину поля, исключение ухудшающей изображение внефокусной информации, возможность последовательного анализа оптических срезов толстых образцов.The invention relates to devices for detecting radiation excited in local areas of the medium when focusing laser lighting, and the subsequent synthesis of two-dimensional and three-dimensional images based on the results of spatial scanning of an object with a light beam. The device can be used for spectral studies of various biological environments, including fluorescence diagnostics for solving applied problems of medicine. Confocal microscopy has several advantages compared to traditional optical microscopy, including adjustable depth of field, eliminating out-of-focus information that degrades the image, and the possibility of sequential analysis of optical sections of thick samples.
Известен «Аппарат для микроскопии», являющийся первым описанием конфокального микроскопа (MARVIN MlNSKY АМ/111 7- ATTORNEYS United States Patent office Patented Dec. 19, 1961 3,013,467 MICROSCOPY APPARATUS Marvin Minsky, 44 Bowdoin St., Cambridge, Mass. Filed Nov. 7, 1957, Ser. No. 695,107 4 Claims. C1. 88-14). Устройство, согласно изобретению (Патент М. Минский), содержит источник излучения 10, 12 с точечной коллимирующей диафрагмой 16, объектив 11, конфокальную диафрагму 26, фотоприемник 28, светоделительную пластину 17, причем отражающая поверхность пластины 17 обращена к объективу 11 и фотоприемнику 28 с конфокальной диафрагмой 26, а прозрачная поверхность пластины 17 обращена к источнику освещения 10, 12 с точечной коллимирующей диафрагмой 16, устройство пространственного сканирования объекта (Патент М. Минский). Из описания патента следует, что излучение источника проходит сквозь делительную пластину к объекту, а возвращается по другому пути: отражается от делительной пластины и направляется через конфокальную диафрагму на фотоприемник. В данном случае делительная пластина выполняет функцию невзаимного устройства - трех портового циркулятора (Y-циркулятора). Данное техническое решение позволяет исключить внефокусные лучи, задерживаемые конфокальной диафрагмой и, на основе данных о смещении образца устройством пространственного сканирования, построить двухмерное или трехмерное изображение с высокой контрастностью. Механическая система сканирования объекта исследований построена с использованием резонатора на изгибных колебаниях, возбуждаемых электромагнитными устройствами, синхронизированными с разверткой электронного луча осциллографа.The well-known "Microscope Apparatus", which is the first description of a confocal microscope (MARVIN MlNSKY AM / 111 7- ATTORNEYS United States Patent office Patented Dec. 19, 1961 3,013,467 MICROSCOPY APPARATUS Marvin Minsky, 44 Bowdoin St., Cambridge, Mass. Filed Nov. 7 1957, Ser. No. 695,107 4 Claims. C1. 88-14). The device according to the invention (M. Minsky Patent) contains a
Основной недостаток устройства - система фокусировки светового пучка точечного источника 16 на объекте и система управления положением конфокальной диафрагмы 26, должны с высокой точностью обеспечить совмещение изображения освещенной локальной области объекта с точечной конфокальной диафрагмой, размещаемой в сопряженной плоскости объектива. При высоком разрешении микроскопа, вследствие «двойной фокусировки», предъявляются высокие требования к оптомеханике устройства. Кроме того, формирование точечного источника света из протяженного источника с помощью диафрагмы 16 не позволяет получить достаточно высокую плотность мощности сканирующего пучка осветителя на объекте. Представленная механическая система сканера с резонатором, на котором закреплен объект исследований, не может обеспечить независимого смещения по осям координат и имеет ограниченные возможности по исследованию различных сред, подвергающихся вибрационному воздействию.The main disadvantage of this device is the system of focusing the light beam of a
Наиболее близким по совокупности признаков является прибор фирмы Dilor (Франция), ориентированный на проведение измерений с высоким спектральным разрешением, в котором флуоресцентные изображения объектов реконструируются только на основе записанных спектров (А.В. Феофанов «Спектральная лазерная сканирующая конфокальная микроскопия в биологических исследованиях». Успехи биологической химии - т. 47, 2007, с. 371-410, рис. 3 на с. 381). Прибор содержит лазерный источник излучения, возбуждающего флуоресценцию, устройство невзаимной коммутации направляемого на объект излучения и излучения отклика среды в виде светоделительной пластины, объектив, конфокальную диафрагму, фотоприемник с функцией разложения флуоресцентного излучения в спектр и его регистрации, устройство пространственного сканирования оптическим пучком анализируемой области объекта за счет перемещения объектива и синхронного сканирования подвижными зеркалами.The closest in combination of features is the Dilor company (France), which is focused on carrying out measurements with high spectral resolution, in which the fluorescence images of objects are reconstructed only on the basis of the recorded spectra (A.V. Feofanov, “Spectral Laser Scanning Confocal Microscopy in Biological Research”. Advances in Biological Chemistry - vol. 47, 2007, p. 371-410, fig. 3 on p. 381). The device contains a laser source of radiation that excites fluorescence, a device for non-reciprocal switching of the radiation directed to the object and the radiation response of the medium in the form of a beam splitter, a lens, a confocal aperture, a photodetector with the function of decomposing the fluorescence radiation into the spectrum and recording it, a device for spatial scanning with an optical beam of the analyzed region of the object due to the movement of the lens and synchronous scanning with moving mirrors.
Недостатком данного устройства является наличие светоделительной пластины и, соответственно, необходимость в высокоточной системе синхронной фокусировки - фокусировки излучения на объекте и совмещения изображения фокального пятна в сопряженной плоскости объектива с точечной конфокальной диафрагмой. При этом, для возбуждения флуоресценции используется только одна длина волны лазера, а ее смена требует перенастройки прибора. Система сканирования, построенная на синхронном движении зеркал, отличается сложностью механических узлов и имеет ограничения по динамическим характеристикам сканера.The disadvantage of this device is the presence of a beam splitter plate and, accordingly, the need for a high-precision synchronous focusing system - focusing radiation on the object and combining the image of the focal spot in the conjugate plane of the lens with a point confocal aperture. In this case, only one laser wavelength is used to excite fluorescence, and its change requires reconfiguration of the device. The scanning system, built on the synchronous movement of mirrors, is characterized by the complexity of mechanical components and has limitations on the dynamic characteristics of the scanner.
Техническим результатом изобретения является расширение функциональных возможностей устройства и упрощение конструкции микроскопа за счет применения оптоволоконного Y-циркулятора в качестве устройства невзаимной коммутации, направляемого на объект излучения и излучения отклика среды (Оптоволоконный коммутатор лазерного спектроанализатора. Патент RU 2632993 от 04.04.2016. Опубликовано: 11.10.2017, Бюл. №29).The technical result of the invention is to expand the functionality of the device and simplify the design of the microscope through the use of fiber optic Y-circulator as a non-reciprocal switching device directed to the object of radiation and radiation response medium (Fiber optic laser spectrum analyzer. Patent RU 2632993 from 04.04.2016. Published: 11.10 .2017, Bull. No. 29).
Преимущество данной системы состоит в том, что она не содержит селективных делительных зеркал, элементов оптомеханики для выполнения оптической юстировки совмещения изображения фокального пятна сканирующего светового пучка с конфокальной диафрагмой в сопряженной плоскости объектива. Предложенный принцип коммутации оптических пучков решает задачу их разделения независимо от спектрального и модового состава излучения, а также поляризации. В рассматриваемом Y-циркуляторе невзаимность обусловлена топологией пространственной коммутации оптических пучков.The advantage of this system is that it does not contain selective fission mirrors, optomechanical elements to perform optical alignment of combining the image of the focal spot of the scanning light beam with the confocal diaphragm in the conjugate plane of the lens. The proposed principle of switching optical beams solves the problem of their separation regardless of the spectral and mode composition of the radiation, as well as polarization. In the considered Y-circulator, nonreciprocity is due to the topology of spatial switching of optical beams.
Пучок излучения выходного торца первого (однонаправленного) оптического волновода, сопряженного с лазерным источником, возбуждающим флуоресценцию, направляется в торец второго волновода под некоторым углом, задаваемым направляющей системой подложек с канавками в пределах апертурного угла оптического волокна. Излучение выходного торца второго волновода объективом фокусируется на поверхности или в объеме объекта. Отраженное и флуорецентное излучения освещенной локальной области объекта в пределах пространственного угла числовой апертуры собираются объективом и вводятся обратно в выходной торец второго (двухнаправленного) волновода. Пучок излучения объекта из второго волновода направляется в торец третьего (однонаправленного) волновода, расположенного по оси второго волновода. Выход третьего волновода является выходом Y-циркулятора и соединен с входом оптоволоконного спектрометра. Для регистрации спектра флуоресценции в оптический волновод лазерного источника и оптический волновод входа спектрометра дополнительно включены пропускающий и заграждающий фильтры лазерного излучения. Таким образом, выходная апертура второго волновода является как выходной апертурой лазерного источника, так и входной апертурой фотоприемника (конфокальной диафрагмой), блокирующей внефокусные лучи излучения объекта. Исключается высокоточная механика, обеспечивающая совмещение изображения точечного источника флуоресцентного излучения, возбужденного сфокусированным лазерным пучком, с точечной конфокальной диафрагмой, так как конфокальная диафрагма и точечный источник лазерного излучения совмещены в одной апертуре. Остается только одна независимая степень свободы - фокусировка возбуждающего флуоресценцию лазерного излучения в пространственных координатах объекта. Следствием этого является новая возможность построения устройства сканирования микроскопа, когда пространственное сканирование масштабированного объективом изображения апертуры торца второго волновода в сопряженной плоскости, совмещенной с объектом, осуществляется механическим сканированием торца второго волновода (конфокальной диафрагмы) в соответствующем масштабе смещений. Данное решение расширяет возможности построения сканеров наряду с известными техническими решениями - сканированием флуоресцентных сигналов с трехмерным субмикронным разрешением подвижными зеркалами, смещением объекта и смещением объектива. Устройство дополнительно содержит пропускающий и заграждающий оптические фильтры на выходе лазерного источника и входе оптоволоконного спектрометра в соответствии с известным техническим решением, обеспечивающим выделения флуоресцентного излучения на фоне возбуждающего лазерного излучения.The radiation beam of the output end of the first (unidirectional) optical waveguide coupled to a laser source that excites fluorescence is directed to the end of the second waveguide at a certain angle defined by the guiding system of substrates with grooves within the aperture angle of the optical fiber. The radiation from the output end of the second waveguide is focused by the lens on the surface or in the volume of the object. The reflected and fluorescence radiation of the illuminated local area of the object within the spatial angle of the numerical aperture is collected by the lens and introduced back into the output end of the second (bi-directional) waveguide. The radiation beam of the object from the second waveguide is directed to the end of the third (unidirectional) waveguide located along the axis of the second waveguide. The output of the third waveguide is the output of the Y-circulator and is connected to the input of a fiber optic spectrometer. To register the fluorescence spectrum in the optical waveguide of the laser source and the optical waveguide of the input of the spectrometer, transmission and blocking filters of laser radiation are additionally included. Thus, the output aperture of the second waveguide is both the output aperture of the laser source and the input aperture of the photodetector (confocal diaphragm), which blocks out-of-focus radiation rays of the object. High precision mechanics is excluded, which ensures that the image of a point source of fluorescent radiation excited by a focused laser beam is combined with a point confocal diaphragm, since the confocal diaphragm and the point source of laser radiation are combined in one aperture. There remains only one independent degree of freedom - focusing of the laser radiation exciting the fluorescence in the spatial coordinates of the object. The consequence of this is a new possibility of constructing a microscope scanning device, when spatial scanning of the image of the aperture of the end face of the second waveguide in a conjugate plane aligned with the object is carried out by mechanical scanning of the end face of the second waveguide (confocal diaphragm) in the corresponding displacement scale. This solution expands the possibilities of constructing scanners along with well-known technical solutions - scanning fluorescent signals with three-dimensional submicron resolution by moving mirrors, object displacement and lens displacement. The device further comprises transmitting and trapping optical filters at the output of the laser source and the input of the fiber optic spectrometer in accordance with the known technical solution, which provides the allocation of fluorescent radiation against the background of the exciting laser radiation.
Данный технический результат достигается тем, что в оптоволоконном конфокальном микроскопе, содержащем лазерный источник излучения, устройство невзаимной коммутации, направляемого на объект излучения и излучения отклика среды, объектив, конфокальную диафрагму, фотоприемник, устройство пространственного сканирования анализируемой области объекта согласно изобретению, в качестве устройства невзаимной коммутации используется оптоволоконный Y-циркулятор, формирующий пространственное разделение коммутируемых оптических пучков, первый однонаправленный вход оптического волновода которого соединен с источником освещения объекта, а оптический пучок выходного торца этого волновода направляется в торец второго волновода под некоторым углом к оси второго волновода, задаваемым направляющей системой подложек с канавками в пределах апертурного угла оптического волокна, выходной торец оптического двунаправленного второго волновода является апертурой, формирующей световой пучок освещения объекта через объектив и, одновременно апертурой, являющейся конфокальной диафрагмой, фильтрующей излучение отклика среды объекта, проходящего обратно через этот же объектив и второй волновод в торец третьего однонаправленного волновода, расположенного по оси второго волновода, выход которого является выходом Y-циркулятора, соединенным с входом оптоволоконного спектрометра, а излучающий торец второго волновода соединен с механической системой смещения этого торца для сканирования масштабированного объективом изображения апертуры излучателя в сопряженной плоскости, совмещенной с объектом.This technical result is achieved by the fact that in a fiber optic confocal microscope containing a laser radiation source, a non-reciprocal switching device directed to the radiation object and the radiation response medium, a lens, a confocal aperture, a photodetector, a spatial scanning device of the analyzed region of the object according to the invention, as a non-reciprocal device a fiber optic Y-circulator is used, which forms the spatial separation of the switched optical beams, first whose unidirectional input of the optical waveguide is connected to the object light source, and the optical beam of the output end of this waveguide is directed to the end of the second waveguide at an angle to the axis of the second waveguide, defined by the guiding system of substrates with grooves within the aperture angle of the optical fiber, the output end of the optical bidirectional second the waveguide is an aperture that forms a light beam of illumination of the object through the lens and, at the same time, an aperture, which is a confocal diaphragm a mission filtering the radiation response of the medium of the object passing back through the same lens and the second waveguide to the end of the third unidirectional waveguide located along the axis of the second waveguide, the output of which is the output of the Y-circulator connected to the input of the fiber-optic spectrometer, and the radiating end of the second waveguide is connected to a mechanical displacement system of this end for scanning the image of the aperture of the emitter scaled by the lens in the conjugate plane aligned with the object.
Сущность изобретения поясняется схемой, приведенной на Фиг. 1, на которой показан оптоволоконный конфокальный сканирующий микроскоп. Оптоволоконный Y-циркулятор (См. Фиг. 1), формирующий пространственное разделение коммутируемых оптических пучков включает оптические волокна 1, 2, и 3, размещенные на подложке 4. Конфокальная диафрагма и одновременно апертура лазерного излучателя 5 соответствуют выходному торцу оптического волновода 2. Лазерный источник 6, сопряженный с волокном 7 через оптический разъем 8 соединен с входом коллиматора 9, обеспечивающего функционирование пропускающего фильтра 10. Оптический выход коллиматора 9 соединен с волокном 1 Y-циркулятора. Объектив 11 формирует сканирующий лазерный пучок 12 на объекте 13. Выход волокна 3 соединен с входом коллиматора 14, содержащего заграждающий фильтр 15. Выход коллиматора 14 через оптический разъем 16 подключен к входу оптоволоконного спектрометра 17. Излучающий торец волокна 2 соединен с механической системой смещения этого торца 18.The invention is illustrated by the circuit shown in FIG. 1, which shows a fiber optic confocal scanning microscope. Fiber optic Y-circulator (See Fig. 1), which forms a spatial separation of switched optical beams, includes
Работа оптоволоконного конфокального сканирующего микроскопа (см. Фиг. 1) осуществляется следующим образом. Лазерный источник 6, через оптический волновод 7, оптический разъем 8 передает излучение на вход коллиматора 9, формирующего коллимированный пучок излучения с апертурой, необходимой для функционирования фильтра 10, пропускающего основную линию излучения лазера 6 и подавляющего остальное излучение. Выходное излучение коллиматора 9 поступает на вход волокна 1 Y-циркулятора. Выходной оптический пучок волокна 1 направляется на входной торец волокна 2 под заданным углом к оси волокна 2. Излучающий торец 5 волокна 2 расположен в фокальной плоскости объектива 11, формирующего сканирующий пучок 12, сфокусированный в сопряженной плоскости объектива 11 на исследуемым объекте 13. В локальном объеме сфокусированного лазерного излучения среда объекта 13 создает излучение флуоресценции. Это излучение в границах пространственного угла 12 вместе с отраженным лазерным излучением объективом 11 фокусируется на торце 5 волокна 2, апертура которого выполняет функцию конфокальной диафрагмы, так как иные лучи, кроме излучения из области фокусировки, не могут быть введены в волокно 2. Флуоресцентное излучение из волокна 2 в соответствие с направлением оптического пучка вводится в волокно 3, затем поступает в коллиматор 14, проходит через заграждающий фильтр 15, подавляющий лазерное излучение и пропускающий излучение флуоресценции. Выход коллиматора 14 через оптический разъем 16 соединен с входом оптоволоконного спектрометра 17, регистрирующего спектр флуоресценции сканируемой области объекта 13. Излучающий торец волокна 2 соединен с механической системой смещения этого торца 18. Смещение конфокальной диафрагмы 5, апертура которой также является излучателем, приводит к смещению фокального пятна в сопряженной плоскости объектива 11, расположенной на объекте 13.The operation of the optical fiber confocal scanning microscope (see Fig. 1) is as follows. The
Claims (1)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2019106393A RU2712789C1 (en) | 2019-03-06 | 2019-03-06 | Fiber-glass confocal scanning microscope |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2019106393A RU2712789C1 (en) | 2019-03-06 | 2019-03-06 | Fiber-glass confocal scanning microscope |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2712789C1 true RU2712789C1 (en) | 2020-01-31 |
Family
ID=69625484
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2019106393A RU2712789C1 (en) | 2019-03-06 | 2019-03-06 | Fiber-glass confocal scanning microscope |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2712789C1 (en) |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6053731A (en) * | 1997-03-07 | 2000-04-25 | Kaltenbach & Voigt Gmbh & Co. | Device for the recognition of caries, plaque or bacterial infection of teeth |
RU2464549C1 (en) * | 2011-05-12 | 2012-10-20 | Ираида Николаевна Сарычева | Fibre-optic device for detecting fluorescence |
RU2632993C2 (en) * | 2016-04-04 | 2017-10-11 | Владимир Алексеевич Шульгин | Fibre-optic switch of laser spectrometer |
-
2019
- 2019-03-06 RU RU2019106393A patent/RU2712789C1/en active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6053731A (en) * | 1997-03-07 | 2000-04-25 | Kaltenbach & Voigt Gmbh & Co. | Device for the recognition of caries, plaque or bacterial infection of teeth |
RU2464549C1 (en) * | 2011-05-12 | 2012-10-20 | Ираида Николаевна Сарычева | Fibre-optic device for detecting fluorescence |
RU2632993C2 (en) * | 2016-04-04 | 2017-10-11 | Владимир Алексеевич Шульгин | Fibre-optic switch of laser spectrometer |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
"СПЕКТРАЛЬНАЯ ЛАЗЕРНАЯ СКАНИРУЮЩАЯ КОНФОКАЛЬНАЯ МИКРОСКОПИЯ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ" А.В. ФЕОФАНОВ, УСПЕХИ БИОЛОГИЧЕСКОЙ ХИМИИ, 2007, т. 47. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN102841083B (en) | Method and system of laser scanning phase-microscope imaging | |
US9383568B2 (en) | Objective-coupled selective plane illumination microscopy | |
US6088097A (en) | Point-scanning luminescent microscope | |
US6369928B1 (en) | Fiber-coupled, angled-dual-illumination-axis confocal scanning microscopes for performing reflective and two-photon fluorescence imaging | |
US5386112A (en) | Apparatus and method for transmitted-light and reflected-light imaging | |
US7872799B2 (en) | Device for controlling light radiation | |
US5589936A (en) | Optical measuring apparatus for measuring physichemical properties | |
CN103674926B (en) | Optical devices | |
US7688504B2 (en) | Optical scanning microscope | |
US20070051869A1 (en) | Scanning microscope and method for examining a sample by using scanning microscopy | |
JP2008523383A (en) | Multi-spot survey device | |
CN110632045A (en) | Method and device for generating parallel super-resolution focal spots | |
US11029506B2 (en) | Scanning microscope with multiplexed light sources | |
CN103135220A (en) | Illuminating system for microscope and corresponding method | |
JP2022528951A (en) | Coherent anti-Stoke Raman scattering microscope imaging device | |
WO2023221400A1 (en) | Super-resolution single-objective light-sheet optical microscopy system and imaging system comprising same | |
KR20210151709A (en) | Interferometric scattering microscopy | |
JP2002214533A (en) | Confocal microscope | |
EP0536273B1 (en) | Apparatus and method for transmitted-light and reflected-light imaging | |
RU2712789C1 (en) | Fiber-glass confocal scanning microscope | |
RU2579640C1 (en) | Confocal image spectrum analyser | |
CN109060761B (en) | High-speed Raman spectrum scanning imaging method and device with three-dimensional high spatial resolution | |
JP5544548B2 (en) | Scanning microscope and confocal scanning microscope with circulator | |
US11874450B2 (en) | Oblique plane microscope for imaging a sample | |
US20020030886A1 (en) | Microscope |