RU2705270C1 - Enterococcus hirae lactobacillus strain - producer of lactic acid and antibiotic substances and starter component for production of probiotic beverages - Google Patents

Abstract

FIELD: biotechnology.

SUBSTANCE: invention relates to the biotechnology. Strain of lactobacilli Enterococcus hirae T-8 13-2018, having the ability to produce lactic acid and high antagonist activity with respect to opportunistic and pathogenic microflora deposited under registration number VKPM V-13055. Strain can be used for production of cultured milk-and-alcohol beverages.

EFFECT: invention allows to increase the shelf life of the ready product.

1 cl

Description

Штамм лактобактерий Enterococcus hirae - продуцент молочной кислоты, антибиотических веществ и компонент закваски для производства пробиотических напитков.The lactobacillus strain Enterococcus hirae is a producer of lactic acid, antibiotic substances and a starter component for the production of probiotic drinks.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности может быть использовано в пищевой промышленности.The invention relates to biotechnology, in particular, can be used in the food industry.

Известен штамм Enterococcus hirae ВКПМ В-10088 (патент №2476591 от 27.02.2013 г.), полученный на доступных питательных средах и применяемый в качестве бактериальной закваски при приготовлении молочнокислых продуктов, характеризуемый высокой скоростью сквашивания молока.Known strain Enterococcus hirae VKPM B-10088 (patent No. 2476591 dated 02.27.2013), obtained on accessible nutrient media and used as bacterial starter culture in the preparation of lactic acid products, characterized by a high rate of milk fermentation.

Однако данный штамм обладает более низкой антагонистической активностью по сравнению с предлагаемым штаммом.However, this strain has a lower antagonistic activity compared to the proposed strain.

Техническое решение - выделение высокопродуктивного нового местного штамма лактобактерий путем селекции.The technical solution is the selection of a highly productive new local strain of lactobacilli by selection.

Технический результат - получение чистой культуры молочнокислого микроорганизма Enterococcus hirae ВКПМ В-13055, выделенный из толстого отдела кишечника подсосного теленка в РСО-Алания путем многократных перевивок на питательных средах.EFFECT: obtaining a pure culture of the lactic acid microorganism Enterococcus hirae VKPM B-13055 isolated from the large intestine of the suckling calf in North Ossetia-Alania by repeated inoculations on nutrient media.

Идентификацию штамма проводили по методике Банниковой Л.А. и методом ПЦР-диагностики.The identification of the strain was carried out according to the method of Bannikova L.A. and PCR diagnostics.

Этапы и результаты генетических исследований, а) Секвенирование участков последовательности, кодирующей ген 16S рРНК.Stages and results of genetic studies, a) Sequencing of sections of the sequence encoding the 16S rRNA gene.

б) Анализ последовательностей гена, кодирующего 16S рРНК.b) Sequence analysis of the gene encoding 16S rRNA.

По результатам проведенного анализа секвенсов вариабельных участков генов, кодирующих 16S рРНК и анализа филогенетического родства, построенного с использованием типовых штаммов близкородственных бактерий тестируемый штамм наиболее близок к виду Enterococcus hirae (99%) и депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) ГосНИИГенетика под номером ВКПМ В-13055.According to the results of the analysis of sequencing of variable regions of genes encoding 16S rRNA and analysis of phylogenetic kinship constructed using typical strains of closely related bacteria, the test strain is closest to Enterococcus hirae (99%) and deposited at the All-Russian Collection of Industrial Microorganisms (VKPM) of the State Research Institute of Genetics and Genetics under the number B-13055.

Свойства штамма Enterococcus hirae ВКПМ В-13055:Properties of the strain Enterococcus hirae VKPM B-13055:

- диплококки, короткими цепочками;- diplococci, in short chains;

- образуют мелкие колонии на MRS-arape.- form small colonies on MRS-arape.

- скорость сквашивания молока 7 часов.- milk fermentation rate of 7 hours.

- предел кислотообразования - 95°Т.- the limit of acid formation is 95 ° T.

продукты, синтезируемые штаммом - молочная кислота и антибиотические вещества.the products synthesized by the strain are lactic acid and antibiotic substances.

- диаметр зоны подавления роста Staphylococcus aureus - 27 мм;- the diameter of the zone of inhibition of growth of Staphylococcus aureus - 27 mm;

- диаметр зоны подавления роста Escherichia coli - 29 мм.- the diameter of the zone of inhibition of growth of Escherichia coli is 29 mm.

Определение антибиотической активности штамма Enterococcus hiraeDetermination of the antibiotic activity of Enterococcus hirae strain

ВКПМ В-13055 проводили на плотной питательной среде (МПА) методом диффузии в агар.VKPM B-13055 was carried out on solid nutrient medium (MPA) by agar diffusion.

Способ, условия и состав сред для длительного хранения штамма -лиофилизация; хранение при температуре 4-6°С; питательные среды: MRS; Rogosa et.al.; молоко с мелом; молоко с дрожжевым автолизатом, глюкозой, лакмусом, печеночным экстрактом и СаСО₃.The method, conditions and composition of media for long-term storage of strain-lyophilization; storage at a temperature of 4-6 ° C; culture media: MRS; Rogosa et.al .; milk with chalk; milk with yeast autolysate, glucose, litmus, liver extract and CaCO ₃ .

Способ, условия и состав сред для размножения штамма - при температуре 37°С - среды: MRS; обезжиренное молоко, несоленая подсырная молочная сыворотка с содержанием не менее 4,0% сахара.The method, conditions and composition of the media for the propagation of the strain - at a temperature of 37 ° C - environment: MRS; skim milk, unsalted cheese whey with a content of at least 4.0% sugar.

Оптимальные условия и состав среды для ферментации - температура 37°С; среды: MRS, несоленая подсырная молочная сыворотка с содержанием не менее 4,0% сахара; молоко коровье.Optimum conditions and composition of the medium for fermentation - temperature 37 ° C; Wednesday: MRS, unsalted cheese whey with a content of at least 4.0% sugar; cow's milk.

Предлагаемый новый штамм Enterococcus hirae ВКПМ В-13055, выделенный из толстого отдела кишечника подсосного теленка в РСО-Алания, хорошо приспособлен к местным условиям. Неприхотлив в культивировании и хранении, обладает низкой предельной кислотностью и высокой скоростью свертывания молока, что позволяет повысить экономическую эффективность при производстве (за счет ускорения производственного процесса и увеличения срока годности готовой продукции).The proposed new strain Enterococcus hirae VKPM B-13055, isolated from the colon of the intestine of the suckling calf in North Ossetia-Alania, is well adapted to local conditions. It is unpretentious in cultivation and storage, has a low marginal acidity and a high rate of milk coagulation, which allows to increase economic efficiency in production (by speeding up the production process and increasing the shelf life of the finished product).

Штамм проявляет высокую антагонистическую способность по отношению к условно-патогенной и патогенной микрофлоре.The strain exhibits a high antagonistic ability in relation to opportunistic and pathogenic microflora.

Предлагаемый новый штамм лактобактерий Enterococcus hirae ВКПМ В-13055 обладает высокой биологической активностью и является основой для получения кисломолочных напитков. Пример технологии получения заявленного препарата:The proposed new strain of lactobacilli Enterococcus hirae VKPM B-13055 has high biological activity and is the basis for the production of fermented milk drinks. An example of the technology for obtaining the claimed drug:

Claims (1)

Штамм лактобактерий Enterococcus hirae ВКПМ В-13055 - продуцент молочной кислоты, антибиотических веществ и компонент закваски для производства пробиотических напитков.The lactobacillus strain Enterococcus hirae VKPM B-13055 is a producer of lactic acid, antibiotic substances and a starter component for the production of probiotic drinks.