RU2701343C1 - Nutrient medium for detection of lactic acid bacteria (versions) - Google Patents
Nutrient medium for detection of lactic acid bacteria (versions) Download PDFInfo
- Publication number
- RU2701343C1 RU2701343C1 RU2018131490A RU2018131490A RU2701343C1 RU 2701343 C1 RU2701343 C1 RU 2701343C1 RU 2018131490 A RU2018131490 A RU 2018131490A RU 2018131490 A RU2018131490 A RU 2018131490A RU 2701343 C1 RU2701343 C1 RU 2701343C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- nutrient medium
- lactic acid
- lactose
- glucose
- medium
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/225—Lactobacillus
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к санитарной и медицинской микробиологии и может быть использовано для выявления молочнокислых микроорганизмов в пищевых продуктах, кормах для животных, выяснения причин возникновения порчи пищевых продуктов, испытания проб окружающей среды, отобранных из зоны производства и переработки пищевых продуктов, а также для исследования микробиоты кишечника.The invention relates to sanitary and medical microbiology and can be used to identify lactic acid microorganisms in food products, animal feed, to determine the causes of food spoilage, to test environmental samples taken from the food production and processing zone, as well as to study intestinal microbiota .
Молочнокислые бактерии играют важную роль в хозяйственной деятельности человека, в частности используются для ферментации молока, мяса, овощей, кормов для животных путем молочнокислого сбраживания. Многие виды молочнокислых микроорганизмов являются представителями нормофлоры кишечника человека и изменение их концентрации или видового состава может свидетельствовать о патологических изменениях в организме. В некоторых случаях данные микроорганизмы могут вызывать порчу продуктов питания, например пива или вареных колбас. В связи с этим выявление молочнокислых микроорганизмов является важной задачей. Основные схемы исследования по выявлению молочнокислых микроорганизмов, как в санитарной, так и в медицинской микробиологии ориентированы на классические культуральные методы с посевом на питательные среды.Lactic acid bacteria play an important role in human activities, in particular, they are used for fermentation of milk, meat, vegetables, animal feed by lactic acid fermentation. Many types of lactic acid microorganisms are representative of the human intestinal flora and a change in their concentration or species composition may indicate pathological changes in the body. In some cases, these microorganisms can cause spoilage of food products, such as beer or cooked sausages. In this regard, the identification of lactic acid microorganisms is an important task. The main research schemes for the detection of lactic acid microorganisms, both in sanitary and medical microbiology, are focused on classical cultural methods with culture on culture media.
В соответствии с ГОСТ 10444.11-2013 (ISO 15214:1998) «Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Методы выявления и подсчета количества мезофильных молочнокислых микроорганизмов» рекомендован ряд питательных сред для культивирования молочнокислых микроорганизмов.In accordance with GOST 10444.11-2013 (ISO 15214: 1998) "Microbiology of food and animal feed. Methods for detecting and counting the number of mesophilic lactic acid microorganisms ”recommended a number of culture media for the cultivation of lactic acid microorganisms.
Для культивирования и выделения лактобактерий известна питательная среда MRS, в состав которой входят:For the cultivation and isolation of lactobacilli, MRS nutrient medium is known, which includes:
Недостатком данной питательной среды является то, что она предназначена только для культивирования представителей рода Lactobacillus и не предназначена для культивирования других молочнокислых микроорганизмов, кроме того она не обладает индикаторными свойствами, позволяющими определить изменения значения рН в процессе роста лактобактерий.The disadvantage of this nutrient medium is that it is intended only for the cultivation of representatives of the genus Lactobacillus and is not intended for the cultivation of other lactic acid microorganisms, in addition, it does not have indicator properties that can determine changes in pH during the growth of lactobacilli.
Для выделения молочнокислых микроорганизмов известны среда Бликфельдта плотная, в состав которой входят:To isolate lactic acid microorganisms, Blikfeldt’s dense medium is known, which includes:
и среда Ли, в состав которой входят:and Lee’s environment, which includes:
Недостатками данных питательных сред являются: наличие в составе кальция углекислого, который мало растворим в воде, что может приводить к неоднородности готовой питательной среды; необходимость дополнительно создавать микроаэрофильные условия для культивирования молочнокислых микроорганизмов, растущих при повышенной концентрации углекислого газа.The disadvantages of these nutrient media are: the presence of calcium carbonate, which is slightly soluble in water, which can lead to heterogeneity of the finished nutrient medium; the need to additionally create microaerophilic conditions for the cultivation of lactic acid microorganisms growing at an increased concentration of carbon dioxide.
Наиболее близкой к предлагаемой питательной среде является Бликфельдта жидкая, в состав которой входят:Closest to the proposed nutrient medium is Blikfeldt liquid, which includes:
Для приготовления питательной среды растворяют компоненты или сухую готовую среду в воде при нагревании. С помощью рН-метра устанавливают значение рН, так чтобы после стерилизации он составлял от 7,2 до 7,4. Раствор компонентов разливают в пробирки и стерилизуют в автоклаве при температуре (117±1)°С в течение 15 мин. Приготовленная вышеуказанным способом питательная среда имеет светло-синий цвет и изменяет цвет до бледно-желтого при снижении рН ниже 6,0 в процессе роста молочнокислых микроорганизмов.To prepare a nutrient medium, dissolve the components or dry finished medium in water when heated. Using a pH meter, the pH is adjusted so that after sterilization it is between 7.2 and 7.4. The component solution is poured into test tubes and autoclaved at a temperature of (117 ± 1) ° C for 15 minutes. The nutrient medium prepared by the above method has a light blue color and changes color to pale yellow when the pH drops below 6.0 during the growth of lactic microorganisms.
Питательная среда позволяет идентифицировать рост молочнокислых бактерий по изменению окраски среды с пурпурного (синего) на желтый благодаря наличию в составе кислотно-основного индикатора бромкрезолового пурпурового и не требует дополнительного создания микроаэрофильных условий при культивировании.The nutrient medium allows to identify the growth of lactic acid bacteria by changing the color of the medium from purple (blue) to yellow due to the presence of purple-bromocresol indicator in the acid-base indicator and does not require additional creation of microaerophilic conditions during cultivation.
Недостатками данной питательной среды являются отсутствие компонентов, позволяющих стабилизировать начальное значение рН в диапазоне от 7,2 до 7,4, низкая чувствительность среды и скорость роста молочнокислых микроорганизмов, невозможность проведения первичной дифференциации выросших культур микроорганизмов по морфологии колоний, а также их количественный подсчет.The disadvantages of this nutrient medium are the lack of components to stabilize the initial pH in the range from 7.2 to 7.4, the low sensitivity of the medium and the growth rate of lactic acid microorganisms, the inability to carry out the primary differentiation of the grown cultures of microorganisms according to the colony morphology, as well as their quantitative calculation.
Техническим результатом предлагаемого изобретения является улучшение биологических показателей питательной среды, а именно стабилизация начального значения рН среды в диапазоне от 7,2 до 7,4, возможность проведения количественного подсчета выросших микроорганизмов, повышение чувствительности питательной среды (определяемая как минимальная концентрация засеянных микроорганизмов, позволяющая обнаружить их рост), увеличение скорости роста микроорганизмов (определяемое как время появления признаков роста микроорганизмов), улучшения дифференцирующих свойств среды (определяемых по изменению цвета питательной среды и типичной морфологии колоний различных видов микроорганизмов).The technical result of the invention is to improve the biological parameters of the nutrient medium, namely, stabilization of the initial pH of the medium in the range from 7.2 to 7.4, the possibility of quantitative counting of the grown microorganisms, increasing the sensitivity of the nutrient medium (defined as the minimum concentration of seeded microorganisms that can detect their growth), an increase in the growth rate of microorganisms (defined as the time of appearance of signs of growth of microorganisms), improvements in fferentsiruyuschih properties of the medium (determined by a color change of the nutrient medium and the typical morphology of the colonies of different species of microorganisms).
Технический результат при осуществлении изобретения по первому варианту достигается тем, что предлагаемая питательная среда для выявления молочнокислых бактерий, содержащая питательную основу, лактозу, глюкозу, экстракт дрожжевой и бромкрезоловый пурпуровый, в качестве питательной основы содержит панкреатический гидролизат казеина и дополнительно содержит полисорбат-80, натрий углекислый при следующем количественном содержании компонентов г/л:The technical result in the implementation of the invention according to the first embodiment is achieved by the fact that the proposed nutrient medium for the detection of lactic acid bacteria, containing a nutrient base, lactose, glucose, yeast extract and bromocresol purple, contains pancreatic casein hydrolyzate as a nutrient base and additionally contains polysorbate-80, sodium carbon dioxide in the following quantitative content of components g / l:
Второй вариант предлагаемой питательной среды для выявления молочнокислых бактерий, содержащей питательную основу, лактозу, глюкозу, экстракт дрожжевой и бромкрезоловый пурпуровый, в качестве питательной основы содержит панкреатический гидролизат казеина и дополнительно содержит полисорбат-80, натрий углекислый и агар бактериологический при следующем количественном содержании компонентов г/л:The second version of the proposed nutrient medium for the detection of lactic acid bacteria containing a nutrient base, lactose, glucose, yeast and bromocresol purple extract, contains pancreatic hydrolyzate of casein as a nutrient base and additionally contains polysorbate-80, sodium carbonate and bacteriological agar with the following quantitative content of components g / l:
Отличием предлагаемой питательной среды от прототипа является замена в составе питательной среды пептона на панкреатический гидролизат казеина в концентрации 5,0 г/л и введение в состав среды полисорбата-80 в концентрации 0,5 г/л., что приводит к улучшению биологических показателей питательной среды. Введение в состав среды полисорбата-80 обосновывается тем, что этот компонент является источником жирных кислот для молочнокислых микроорганизмов и увеличивает скорость их роста. Экспериментальные данные, свидетельствуют о повышении чувствительности питательной среды по сравнению с прототипом.The difference between the proposed nutrient medium and the prototype is the replacement of peptone in the medium with pancreatic hydrolyzate of casein at a concentration of 5.0 g / l and the introduction of polysorbate-80 at a concentration of 0.5 g / l., Which leads to an improvement in the biological parameters of the nutrient Wednesday. The introduction of polysorbate-80 into the medium is justified by the fact that this component is a source of fatty acids for lactic acid microorganisms and increases their growth rate. Experimental data indicate an increase in the sensitivity of the nutrient medium compared to the prototype.
Стабилизация значения рН питательной среды решается введением в состав питательной среды натрия углекислого в концентрации от 0,05 до 0,15 г/л в зависимости от значения рН остальных компонентов среды. Натрий углекислый в питательной среде не обладает буферным эффектом и не препятствует снижению значения рН в процессе роста молочнокислых микроорганизмов, что важно для их выявления по изменению окраски кислотно-основного индикатора бромкрезолового пурпурового.The stabilization of the pH value of the nutrient medium is solved by introducing sodium carbonate into the nutrient medium at a concentration of 0.05 to 0.15 g / l, depending on the pH value of the remaining components of the medium. Sodium carbonate in the nutrient medium does not have a buffering effect and does not prevent a decrease in pH during the growth of lactic acid microorganisms, which is important for their detection by changing the color of the acid-base indicator of bromocresol purple.
Улучшение дифференцирующих свойств питательной среды решается увеличением концентрации бромкрезолового пурпурового с 0,01 до 0,025 г/л и снижением концентрации экстракта дрожжевого с 10,0 г/л до 4,0 г/л. Увеличение концентрации брокрезолового пурпурового повышает яркость цвета среды, что способствует более контрастному изменению ее цвета при изменении значения рН. Снижение концентрации экстракта дрожжевого обусловлено тем, что снижение белкового питания вероятно способствует более быстрому сбраживанию углеводов молочнокислыми микроорганизмами, что увеличивает скорость снижения значения рН и ведет к более быстрому изменению окраски среды с пурпурного (синего) на желтый.The improvement of the differentiating properties of the nutrient medium is solved by increasing the concentration of bromocresol purple from 0.01 to 0.025 g / l and reducing the concentration of yeast extract from 10.0 g / l to 4.0 g / l. An increase in the concentration of brocresol purple increases the brightness of the color of the medium, which contributes to a more contrasting change in its color when the pH value changes. A decrease in the concentration of yeast extract is due to the fact that a decrease in protein nutrition probably contributes to a more rapid fermentation of carbohydrates by lactic acid microorganisms, which increases the rate of decrease in pH and leads to a more rapid change in the color of the medium from purple (blue) to yellow.
Придание питательной среде свойств, позволяющих проводить количественный подсчет выросших микроорганизмов и их первичную дифференциацию по морфологии колоний, решается введением в состав питательной среды агара бактериологического в концентрации 0,9 г/л.Giving the nutrient medium the properties that make it possible to quantify the grown microorganisms and their primary differentiation by colony morphology is decided by introducing bacteriological agar at a concentration of 0.9 g / l into the nutrient medium.
Ниже приведены примеры обоснования соотношения компонентов питательной среды для выделения молочнокислых микроорганизмов.Below are examples of justification of the ratio of the components of the nutrient medium for the isolation of lactic acid microorganisms.
Пример приготовления питательной среды по первому варианту.An example of the preparation of a nutrient medium according to the first embodiment.
Навески компонентов питательной среды:Weighed components of the nutrient medium:
размешивают в 1 л дистиллированной воды, кипятят 2 мин, разливают по 9,0 мл в стеклянные пробирки и стерилизуют автоклавированием при температуре 112°С в течение 20 мин. Готовая питательная среда имеет насыщенный цвет от синего до пурпурного. В процессе культивирования молочнокислых микроорганизмов окраска питательной среды изменяется на интенсивный желтый при снижении значения рН ниже 6,0.stir in 1 liter of distilled water, boil for 2 minutes, pour 9.0 ml into glass tubes and sterilize by autoclaving at a temperature of 112 ° C for 20 minutes. The finished culture medium has a saturated color from blue to purple. During the cultivation of lactic acid microorganisms, the color of the nutrient medium changes to intense yellow with a decrease in pH below 6.0.
Пример приготовления питательной среды по второму вариантуAn example of the preparation of a nutrient medium in the second embodiment
Навески компонентов питательной среды:Weighed components of the nutrient medium:
размешивают в 1 л дистиллированной воды, кипятят 2 мин, разливают по 9,0 мл в стеклянные пробирки и стерилизуют автоклавированием при температуре 112°С в течение 20 мин. Готовая питательная среда имеет насыщенный цвет от синего до пурпурного. В процессе культивирования молочнокислых микроорганизмов окраска питательной среды изменяется на интенсивный желтый при снижении значения рН ниже 6,0.stir in 1 liter of distilled water, boil for 2 minutes, pour 9.0 ml into glass tubes and sterilize by autoclaving at a temperature of 112 ° C for 20 minutes. The finished culture medium has a saturated color from blue to purple. During the cultivation of lactic acid microorganisms, the color of the nutrient medium changes to intense yellow with a decrease in pH below 6.0.
В качестве тест-штаммов использовали культуры из Государственной коллекции патогенных микроорганизмов и клеточных культур «ГКПМ-Оболенск»:Lactobacillus plantarum В-4403 (8Р-А3) и Streptococcus thermophilus В-4517 (СТ-1). Посев осуществляли в 9,0 мл питательной среды по 1,0 мл микробных взвесей с концентрациями 103, 102 и 10 КОЕ/мл. Инкубацию проводили при температуре (37±1)°С.Cultures from the State collection of pathogenic microorganisms and cell cultures “GKPM-Obolensk”: Lactobacillus plantarum B-4403 (8P-A3) and Streptococcus thermophilus B-4517 (CT-1) were used as test strains. Sowing was carried out in 9.0 ml of culture medium with 1.0 ml of microbial suspensions with concentrations of 10 3 , 10 2 and 10 CFU / ml. Incubation was carried out at a temperature of (37 ± 1) ° С.
Пример 1. Прототип питательной среды. Тест штаммы выращивали на питательной среде, содержащей пептон 5,0 г, лактозу 10,0 г, глюкозу 10,0 г, экстракт дрожжевой 10,0 г, бромкрезоловый пурпуровый 0,01 г, вода дистиллированная 1 л. Значение рН готовой среды 7,3 устанавливали с помощью раствора гидроокиси натрия концентрации 100 г/л. Готовая питательная среда имела бледно-синий цвет.Example 1. The prototype of the nutrient medium. The test strains were grown on a nutrient medium containing peptone 5.0 g, lactose 10.0 g, glucose 10.0 g, yeast extract 10.0 g, bromocresol purple 0.01 g, distilled water 1 l. The pH of the finished medium 7.3 was set using a solution of sodium hydroxide concentration of 100 g / L. The prepared culture medium was pale blue.
Результат инкубирования Streptococcus thermophilus СТ-1 через 36 ч представлен на фиг. 1 (приложение 1).The result of incubation of Streptococcus thermophilus CT-1 after 36 hours is shown in FIG. 1 (Appendix 1).
Пример 2. Тест штаммы выращивали на питательной среде, содержащей панкреатический гидролизат казеина 5,0 г, лактозу 10,0 г, глюкозу 10,0 г, экстракт дрожжевой 10,0 г, натрий углекислый 0,12 г, бромкрезоловый пурпуровый 0,01 г, вода дистиллированная 1 л. Значение рН готовой питательной среды 7,3. Готовая питательная среда имела бледно-синий цвет.Example 2. Test strains were grown on a nutrient medium containing casein pancreatic hydrolyzate 5.0 g, lactose 10.0 g, glucose 10.0 g, yeast extract 10.0 g, sodium carbonate 0.12 g, bromocresol purple 0.01 g, distilled water 1 l. The pH of the finished nutrient medium is 7.3. The prepared culture medium was pale blue.
Питательная среда указанного состава не требовала дополнительного подведения значения рН и обладала более высокой чувствительностью по сравнению с прототипом, что позволило получить рост L. plantarum В-4403 и S. thermophilus В-4517 при посеве в 9,0 мл питательной среды по 1,0 мл микробных взвесей с концентрациями 10 КОЕ/мл.The nutrient medium of this composition did not require additional pH adjustment and had a higher sensitivity compared to the prototype, which allowed to obtain the growth of L. plantarum B-4403 and S. thermophilus B-4517 when inoculated in 9.0 ml of culture medium 1.0 ml of microbial suspensions with concentrations of 10 CFU / ml.
Пример 3. Тест штаммы выращивали на питательной среде, содержащей панкреатический гидролизат казеина 5,0 г, лактозу 10,0 г, глюкозу 10,0 г, экстракт дрожжевой 10,0 г, натрий углекислый 0,12 г, бромкрезоловый пурпуровый 0,025 г, вода дистиллированная 1 л. Значение рН готовой питательной среды 7,3. Готовая питательная среда имела насыщенный синий цвет.Example 3. Test strains were grown on a nutrient medium containing casein pancreatic hydrolyzate 5.0 g, lactose 10.0 g, glucose 10.0 g, yeast extract 10.0 g, sodium carbonate 0.12 g, bromocresol purple 0.025 g, distilled water 1 l. The pH of the finished nutrient medium is 7.3. The finished culture medium had a saturated blue color.
Питательная среда указанного состава обладала преимуществами среды из примера 2, при этом имела более яркий цвет, что способствовало более контрастному изменению ее цвета при изменении значения рН в процессе роста молочнокислых микроорганизмов.The nutrient medium of this composition had the advantages of the medium of example 2, while it had a brighter color, which contributed to a more contrasting change in its color with a change in pH during the growth of lactic microorganisms.
Пример 4. Тест штаммы выращивали на питательной среде, содержащей панкреатический гидролизат казеина 5,0 г, лактозу 10,0 г, глюкозу 10,0 г, экстракт дрожжевой 4,0 г, натрий углекислый 0,12 г, бромкрезоловый пурпуровый 0,025 г, вода дистиллированная 1 л. Значение рН готовой питательной среды 7,3. Готовая питательная среда имела насыщенный синий цвет.Example 4. Test strains were grown on a nutrient medium containing casein pancreatic hydrolyzate 5.0 g, lactose 10.0 g, glucose 10.0 g, yeast extract 4.0 g, sodium carbonate 0.12 g, bromocresol purple 0.025 g, distilled water 1 l. The pH of the finished nutrient medium is 7.3. The finished culture medium had a saturated blue color.
Питательная среда указанного состава обладала преимуществами среды из примера 3, при этом имела улучшенные дифференцирующие свойства.The nutrient medium of the specified composition had the advantages of the medium of example 3, while it had improved differentiating properties.
Пример 5. Тест штаммы выращивали на питательной среде, содержащей панкреатический гидролизат казеина 5,0 г, полисорбат-80 0,5 г, лактозу 10,0 г, глюкозу 10,0 г, экстракт дрожжевой 4,0 г, натрий углекислый 0,12 г, бромкрезоловый пурпуровый 0,025 г, вода дистиллированная 1 л. Значение рН готовой питательной среды 7,3. Готовая питательная среда имела насыщенный синий цвет.Example 5. Test strains were grown on a nutrient medium containing casein pancreatic hydrolyzate 5.0 g, polysorbate-80 0.5 g, lactose 10.0 g, glucose 10.0 g, yeast extract 4.0 g, sodium carbonate 0, 12 g, bromocresol purple 0.025 g, distilled water 1 l. The pH of the finished nutrient medium is 7.3. The finished culture medium had a saturated blue color.
Питательная среда указанного состава обладала преимуществами среды из примера 4 и отличалась более высокой скоростью роста L. plantarum В-4403 и S. thermophilus В-4517. Результат инкубирования Streptococcus thermophilus СТ-1 через 20 ч представлен на фиг. 2 (приложение 2).The nutrient medium of this composition had the advantages of the medium of example 4 and was characterized by a higher growth rate of L. plantarum B-4403 and S. thermophilus B-4517. The result of incubation of Streptococcus thermophilus CT-1 after 20 hours is shown in FIG. 2 (Appendix 2).
Пример 6. Тест штаммы выращивали на питательной среде, содержащей панкреатический гидролизат казеина 5,0 г, полисорбат-80 0,5 г, лактозу 10,0 г, глюкозу 10,0 г, экстракт дрожжевой 4,0 г, натрий углекислый 0,12 г, бромкрезоловый пурпуровый 0,025 г, агар бактериологический 0,9 г, вода дистиллированная 1 л. Значение рН готовой питательной среды 7,3. Готовая питательная среда имела насыщенный синий цвет.Example 6. Test strains were grown on a nutrient medium containing casein pancreatic hydrolyzate 5.0 g, polysorbate-80 0.5 g, lactose 10.0 g, glucose 10.0 g, yeast extract 4.0 g, sodium carbonate 0, 12 g, bromocresol purple 0.025 g, bacteriological agar 0.9 g, distilled water 1 l. The pH of the finished nutrient medium is 7.3. The finished culture medium had a saturated blue color.
Питательная среда указанного состава обладала преимуществами среды из примера 5 и позволяла проводить количественный подсчет выросших микроорганизмов и их первичную дифференциацию по морфологии колоний. Результат инкубирования Streptococcus thermophilus СТ-1 через 20 ч представлен на фиг. 3 (приложение 3).The nutrient medium of the specified composition had the advantages of the medium of example 5 and made it possible to quantify the grown microorganisms and their primary differentiation according to the morphology of the colonies. The result of incubation of Streptococcus thermophilus CT-1 after 20 hours is shown in FIG. 3 (Appendix 3).
Таким образом, преимущества предлагаемой питательной среды в том, что она превосходит прототип по биологическим показателям, не требует дополнительного подведения начального значения рН, имеют более яркую цветовую дифференциацию при изменении значения рН, что облегчает визуальное определение роста микроорганизмов. Питательная среда по варианту 2 позволяет проводить количественный подсчет выросших микроорганизмов и их первичную дифференциацию по морфологии колоний.Thus, the advantages of the proposed nutrient medium in that it surpasses the prototype in biological indicators, does not require additional adjustment of the initial pH value, have a brighter color differentiation when the pH value changes, which facilitates the visual determination of the growth of microorganisms. The nutrient medium according to option 2 allows quantitative counting of the grown microorganisms and their primary differentiation according to the morphology of the colonies.
Claims (4)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018131490A RU2701343C1 (en) | 2018-09-03 | 2018-09-03 | Nutrient medium for detection of lactic acid bacteria (versions) |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018131490A RU2701343C1 (en) | 2018-09-03 | 2018-09-03 | Nutrient medium for detection of lactic acid bacteria (versions) |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2701343C1 true RU2701343C1 (en) | 2019-09-26 |
Family
ID=68063250
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018131490A RU2701343C1 (en) | 2018-09-03 | 2018-09-03 | Nutrient medium for detection of lactic acid bacteria (versions) |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2701343C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2759305C1 (en) * | 2020-11-02 | 2021-11-11 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Nutrient medium for cultivation of lactic bacteria |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2388815C1 (en) * | 2009-03-10 | 2010-05-10 | Федеральное государственное унитарное предприятие Тихоокеанский научно-исследовательский рыбохозяйственный центр ФГУП "ТИНРО-Центр" | Nutrient medium for cultivation of bifidus bacteria |
-
2018
- 2018-09-03 RU RU2018131490A patent/RU2701343C1/en active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2388815C1 (en) * | 2009-03-10 | 2010-05-10 | Федеральное государственное унитарное предприятие Тихоокеанский научно-исследовательский рыбохозяйственный центр ФГУП "ТИНРО-Центр" | Nutrient medium for cultivation of bifidus bacteria |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| ГОСТ 10444.11-2013 Микробиология пищевых продуктов и кормов животных. Методы выявления и подсчета количества мезофильных молочнокислых микроорганизмов. М.: Стандартинформ, 2014, с. 2-4. * |
| ГОСТ 10444.11-2013 Микробиология пищевых продуктов и кормов животных. Методы выявления и подсчета количества мезофильных молочнокислых микроорганизмов. М.: Стандартинформ, 2014, с. 2-4. ГОСТ Р 513331-99. Продукты молочные. Йогурты. Общие технические условия, М.: Стадартинформ, 2008 с. 14-15. ДОМОТЕНКО Л.В., ШЕПЕЛИН А.П., ДЕТУШЕВ К.В., Сравнительные испытания лактобакагара и MRS агара, Курский научно-практический Вестник "Человек и его здоровье", 2014, N 4, с. 5-10. * |
| ГОСТ Р 513331-99. Продукты молочные. Йогурты. Общие технические условия, М.: Стадартинформ, 2008 с. 14-15. * |
| ДОМОТЕНКО Л.В., ШЕПЕЛИН А.П., ДЕТУШЕВ К.В., Сравнительные испытания лактобакагара и MRS агара, Курский научно-практический Вестник "Человек и его здоровье", 2014, N 4, с. 5-10. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2759305C1 (en) * | 2020-11-02 | 2021-11-11 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Nutrient medium for cultivation of lactic bacteria |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105296591B (en) | A kind of culture medium and detection method for detecting difficult cultivation type lactic acid bacteria in food | |
| CN104928208B (en) | Lactobacillus plantarum Lp90, and screening method and application thereof | |
| CN109913523A (en) | A kind of culture medium of nitrogen source that screening suitable Bifidobacterium proliferation | |
| WO2020083119A1 (en) | Lactobacillus harbinensis and application thereof | |
| CN109536406B (en) | Weak post-acidification streptococcus thermophilus JMCC16, separation and purification method and application | |
| Putri et al. | Isolation and characterization of lactic acid bacteria from Apis mellifera and their potential as antibacterial using in vitro test against growth of Listeria monocytogenes and Escherichia coli | |
| RU2433170C1 (en) | Nutrient liquid medium for culturing plague microbe of vaccine strain eb | |
| Haro et al. | Identification, characterization and antibacterial potential of probiotic lactic acid bacteria isolated from naniura (A traditional batak fermented food from carp) against Salmonella typhi | |
| CN112481350A (en) | Composite culture medium for rapidly detecting total number of moulds and yeasts and preparation method thereof | |
| KR100264361B1 (en) | Lactobacillus plantarum PMO08 (KFCC-11028) with cholesterol lowering ability | |
| RU2701343C1 (en) | Nutrient medium for detection of lactic acid bacteria (versions) | |
| CN105132519A (en) | Selective medium used for quantitative detection of escherichia coli and escherichia coli quantitative detection method | |
| CN102590196B (en) | The detection method of antibacterial medicine residue in a kind of Rapid Screening animal foodstuff sample | |
| RU2580028C1 (en) | Heavy nutrient medium for the cultivation of brucella | |
| Patil et al. | Isolation and characterisation of Lactobacillus species from sheep milk | |
| CN108902601B (en) | Litchi chinensis endogenous lactic acid bacteria and fermented fruit juice beverage thereof | |
| CN106086159B (en) | A kind of zymolyte culture medium that can detect two kinds of fecal pollution indicator bacterias simultaneously and its application | |
| JP5519960B2 (en) | Lactic acid bacteria detection medium and detection method | |
| JP3957132B2 (en) | Separation medium for low turbidity soy sauce lactic acid bacteria, separation method for low turbidity soy sauce lactic acid bacteria using the same medium, and method for producing highly clear soy sauce using the same lactic acid bacteria | |
| Achanta et al. | Isolation and biochemical characterization of probiotic Lactobacillus Species isolated from curd samples of southern regions of Vellore, Tamil Nadu | |
| RU2812423C1 (en) | Dry differential selective nutrient medium for isolation of shigella and salmonella (hectoene entero-agar) | |
| KR20190055463A (en) | Composition of media for culturing and detecting E. coli and method for producing the same | |
| CN114752525B (en) | Lactobacillus casei with blood pressure lowering effect and application thereof | |
| RU2175671C1 (en) | Nutrient medium for isolation of hemoculture in diagnosis of typhoid fever and paratyphoid fever | |
| Andhikawati et al. | Fermentation microbials isolated from marine: A review |