RU2698111C2 - Radiopharmaceutical preparation for therapy of primary hepatocellular carcinoma and metastatic formations to liver, as well as composition and method for production thereof - Google Patents

Abstract

FIELD: medicine.

SUBSTANCE: group of inventions refers to nuclear medicine. Kit for preparing a suspension of polypeptide biodegradable microparticles for conducting transarental radioembolisation of liver capillaries contained in isotonic 0.9 % aqueous solution of sodium chloride labelled with a rhenium isotope consisting of auxiliary reagents: antioxidant - ascorbic acid in amount of 10 mg; rhenium reducing agent to a lower valence state - tin dihydrate chloride - 13.3 mg; emulsifier - polysorbate-80 - 2.5 mg; polypeptide radionuclide carrier - human blood albumen microsphere with diameter of 20–40 mcm - 10 mg; transhecalator and stabilizer pH-K, Na- tartaric acid (tartrate K, Na) - 18.9 mg; wherein all auxiliary reagents are packaged in three bottles: in bottle No. 1 contains a mixture of a reducing agent and an antioxidant, in bottle No. 2 there is a mixture of a polypeptide carrier of radionuclide and emulsifier atoms, flask No. 3 contains a transhecalator and a pH stabilizer which enables to achieve the pH value of the polypeptide biodetibular microparticles suspension in isotonic 0.9 % aqueous solution of sodium chloride, labelled with rhenium isotope in range from 2 to 5, wherein content of each flask is sterile and lyophilised. Also disclosed is a sequential three-stage method of producing a polypeptide biodetibular microparticle suspension.

EFFECT: group of inventions provides therapy of malignant growths in liver.

4 cl, 1 dwg, 1 tbl

Description

В качестве изобретения будет рассмотрен состав и способ получения полипептидных макромолекул диаметром 20-40 мкм, меченных изотопами рения в терапевтических целях.As an invention, a composition and method for producing polypeptide macromolecules with a diameter of 20-40 μm labeled with rhenium isotopes for therapeutic purposes will be considered.

Значительное число научных работ было посвящено решению проблемы терапии гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК). При отсутствии возможности проведения хирургического вмешательства в качестве альтернативы используется метод контактной лучевой терапии источниками ионизирующего излучения (радионуклидная терапия - РНТ). Положительный эффект метода достигается за счет трансартериальной радиоэмболизации (ТАРЭ) капилляров печени, питающих опухолевые клетки. ТАРЭ осуществляется полимерными макромолекулами, содержащими источники ионизирующего излучения. Таким образом, синергетический эффект снижения поступления питательных веществ в опухолевые клетки вместе с локальным воздействием ионизирующего излучения приводит к замедлению роста, а затем к деструкции злокачественных образований в печени. Дополнительно стоит отметить, что преимущества РНТ перед хирургическим вмешательством заключается в подавлении болевого синдрома, уменьшении потребления анальгетиков, а также в улучшении дальнейшего качества жизни и уменьшении времени реабилитации [1].A significant number of scientific works have been devoted to solving the problem of therapy for hepatocellular carcinoma (HCC). In the absence of the possibility of surgical intervention, the method of contact radiation therapy with sources of ionizing radiation (radionuclide therapy - PHT) is used as an alternative. The positive effect of the method is achieved due to transarterial radioembolization (TARE) of the capillaries of the liver that feed the tumor cells. TARE is carried out by polymer macromolecules containing sources of ionizing radiation. Thus, the synergistic effect of reducing the intake of nutrients in tumor cells, together with local exposure to ionizing radiation, leads to a slowdown in growth, and then to the destruction of malignant tumors in the liver. Additionally, it is worth noting that the advantages of RNT over surgical intervention are the suppression of pain, a decrease in the consumption of analgesics, as well as an improvement in the further quality of life and a reduction in the time of rehabilitation [1].

В настоящее время в целях терапии ГЦК исследована эффективность применения полимерных макромолекул из различных материалов, меченных достаточно широким спектром бета-излучающих радионуклидов (¹⁹⁸Au, ¹³¹I, ³²Р, ⁹⁰Y, ²⁰⁶Bi, ³⁵S), однако наибольшее распространение получили методики радиоэмболизации с применением ¹³¹I-липиодола и стеклянных микросфер (TheraSphere^®) или смолы (SIR-Spheres^®), меченных ⁹⁰Y [2-5].Currently, for the treatment of HCC, the effectiveness of using polymer macromolecules from various materials labeled with a wide enough spectrum of beta-emitting radionuclides ( ¹⁹⁸ Au, ¹³¹ I, ³² P, ⁹⁰ Y, ²⁰⁶ Bi, ³⁵ S) has been studied, however, the methods of radioembolization using ¹³¹ I-lipiodole and glass microspheres (TheraSphere ^® ) or resin (SIR-Spheres ^® ) labeled with ⁹⁰ Y [2-5].

Стоит отметить, что изотопы рения, особенно ¹⁸⁸Re, в качестве действующего вещества для РНТ в составе ТАРЭ при ГЦК обладают рядом преимуществ по сравнению с изотопами ⁹⁰Y и ¹³¹I. По сравнению с ¹⁸⁸Re РФП на основе изотопа ⁹⁰Y обладают более высокой стоимостью одной терапевтической дозы, большей трудоемкостью процесса получения микросфер на основе стеклянной матрицы, лучевая нагрузка на здоровые ткани пациента за счет ядерно-физических характеристик ⁹⁰Y выше, а также изотоп ⁹⁰Y является чистым β^- эмиттером, что в отличие от ¹⁸⁸Re не дает возможности наблюдать биораспределение изотопа в теле пациента с помощью гамма-камеры. По сравнению с ¹⁸⁸Re изотоп ¹³¹I не обладает такими же способностями к комплексообразованию, что снижает перечень возможных носителей радионуклида, а также является долгоживущим радионуклидом, что, в свою очередь, повышает дозовую нагрузку на здоровые органы пациента.It is worth noting that rhenium isotopes, especially ¹⁸⁸ Re, as an active substance for RNT in TARE with fcc have several advantages compared to ⁹⁰ Y and ¹³¹ I isotopes. Compared to ¹⁸⁸ Re, radiopharmaceuticals based on the ⁹⁰ Y isotope have a higher cost one therapeutic dose, the greater complexity of the process of producing microspheres based on a glass matrix, the radiation load on healthy patient tissues due to the nuclear physical characteristics of ⁹⁰ Y is higher, and the ⁹⁰ Y isotope is a pure β ^- emitter, which, unlike ¹⁸⁸ Re, makes it impossible n biodistribution was observed isotope in a patient's body using a gamma camera. Compared to ¹⁸⁸ Re, the ¹³¹ I isotope does not have the same complexation abilities, which reduces the list of possible carriers of the radionuclide and is also a long-lived radionuclide, which, in turn, increases the dose burden on the patient’s healthy organs.

Известен способ получения микросфер для радиотерапии ГЦК на основе изотопа ⁹⁰Y, в котором защищается метод формирования микросфер в виде стеклянных частиц сплавлением оксидов кремния, иттрия и алюминия [6]. Микросферы обрабатывают щавелевой кислотой с концентрацией 0,1-0,2 М, или соляной кислотой с концентрацией 0,2-1,5 М, или плавиковой кислотой с концентрацией 0,01-0,05 М, или смесью соляной и плавиковой кислот в соотношении, соответственно, от 10:1 до 20:1, или смесью соляной, плавиковой и щавелевой кислот в соотношении, соответственно, от 10:1:1 до 20:1:1. После кислотной обработки проводят промывание суспензии, как минимум, два раза водой для инъекций и, как минимум, два раза спиртом. Далее проводят облучение микросфер тепловыми нейтронами в реакторе при температуре от 20 до 60°C до получения толщины обработанного слоя от 10 до 100 нм. Технический результат изобретения заключается в сохранении высокой удельной активности микросфер при их использовании в течение длительного времени.A known method of producing microspheres for radiotherapy of fcc based on the ⁹⁰ Y isotope, which protects the method of forming microspheres in the form of glass particles by fusion of silicon oxides, yttrium and aluminum [6]. The microspheres are treated with oxalic acid with a concentration of 0.1-0.2 M, or hydrochloric acid with a concentration of 0.2-1.5 M, or hydrofluoric acid with a concentration of 0.01-0.05 M, or a mixture of hydrochloric and hydrofluoric acids in the ratio, respectively, from 10: 1 to 20: 1, or a mixture of hydrochloric, hydrofluoric and oxalic acids in a ratio, respectively, from 10: 1: 1 to 20: 1: 1. After acid treatment, the suspension is washed at least twice with water for injection and at least twice with alcohol. Next, the microspheres are irradiated with thermal neutrons in the reactor at a temperature of from 20 to 60 ° C to obtain a thickness of the treated layer from 10 to 100 nm. The technical result of the invention is to maintain a high specific activity of the microspheres when used for a long time.

Недостатки этого метода связаны в основном с наличием высокотемпературных процессов и необходимостью реакторного облучения при формировании РФП, что обусловлено трудоемкостью процесса и сказывается на стоимости производства. Также высокая плотность микросфер способствует их осаждению в кровеносном русле, не достигая целевой точки радиоэмболизации, что приводит к неоправданным лучевым нагрузкам на здоровые ткани и органы. Кроме того, может происходить эффект выщелачивания в организм ионов металлов с поверхности стеклянных микросфер.The disadvantages of this method are mainly associated with the presence of high-temperature processes and the need for reactor irradiation during the formation of radiopharmaceuticals, which is due to the complexity of the process and affects the cost of production. Also, the high density of the microspheres contributes to their deposition in the bloodstream, not reaching the target point of radioembolization, which leads to unjustified radiation loads on healthy tissues and organs. In addition, the effect of leaching into the body of metal ions from the surface of glass microspheres can occur.

Известен способ, в котором в качестве носителя действующего вещества в составе РФП выступают микросферы альбумина человека диаметром от 20 до 40 мкм [7]. Способ включает эмульгирование раствора альбумина в растительном масле, дальнейшую тепловую обработку эмульсии и ее фильтрацию. При этом стабильный изотоп Pd и радионуклид ¹⁰³Pd в виде хлористого палладия в 0,1 М растворе соляной кислоты смешивают с микросферами альбумина. Полученную смесь обрабатывают ультразвуком до получения гомогенной суспензии, после чего ее выдерживают при комнатной температуре в течение 18-24 часов. Микросферы выделяют из смеси центрифугированием с последующим восстановлением гидросульфитом натрия. Используют фракцию микросфер с диаметром 20-40 микрон. Изобретение позволяет получить микросферы альбумина с высокой удельной активностью.There is a known method in which microspheres of human albumin with a diameter of from 20 to 40 microns act as a carrier of the active substance in the composition of the radiopharmaceutical [7]. The method includes emulsification of a solution of albumin in vegetable oil, further heat treatment of the emulsion and its filtration. In this case, the stable isotope Pd and the radionuclide ¹⁰³ Pd in the form of palladium chloride in a 0.1 M hydrochloric acid solution are mixed with albumin microspheres. The resulting mixture was sonicated to obtain a homogeneous suspension, after which it was kept at room temperature for 18-24 hours. Microspheres are isolated from the mixture by centrifugation followed by reduction with sodium hydrosulfite. A fraction of microspheres with a diameter of 20-40 microns is used. The invention allows to obtain microspheres of albumin with high specific activity.

Также известны способы получения липиодола, меченного изотопами ¹³¹I [8], ⁹⁰Y [9] и ¹⁸⁸Re [10]. Однако масло семян опийного мака в качестве носителя радионуклидов в целях радиоэмболизации при ГЦК обладает рядом недостатков. Во-первых, вероятность его статичного расположения вблизи опухоли меньше, чем для твердых микросфер. Во-вторых, удержание изотопов молекулами липиодола хуже, нежели стеклянными либо полипептидными микросферами.Also known are methods for producing lipiodol labeled with the isotopes ¹³¹ I [8], ⁹⁰ Y [9], and ¹⁸⁸ Re [10]. However, opium poppy seed oil as a carrier of radionuclides for the purpose of radioembolization with fcc has several disadvantages. Firstly, the probability of its static location near the tumor is less than for solid microspheres. Secondly, the retention of isotopes by lipiodol molecules is worse than glass or polypeptide microspheres.

Микросферы альбумина человека являются оптимальными объектами для транспортной доставки радионуклидов терапевтического либо диагностического назначения к злокачественной опухоли. Они биодеградируемы и не являются чужеродными организму человека.The microspheres of human albumin are optimal objects for the transport delivery of therapeutic or diagnostic radionuclides to a malignant tumor. They are biodegradable and are not alien to the human body.

Известен способ приготовления суспензии микросфер альбумина человека, меченых изотопами ^99mTc, ¹⁸⁸Re или ¹⁸⁶Re с помощью поэтапного смешения содержимого четырех флаконов [11]. Во флаконе «А», согласно формуле изобретения, содержится хлорид олова двухводного (SnCl₂⋅2H₂O) массой от 2,5 до 10 мг в водном растворе соляной, уксусной либо фосфорной кислоты. Во флаконе «В» содержится стабилизатор соли олова - лимонная кислота массой от 10 до 30 мг. В флаконе «С» содержатся МСА человека от 10 до 60 мкм, подлежащие мечению, массой от 2 до 3 мг. Флакон «D», в свою очередь, содержит стабилизатор pH до величины 6-8, в качестве которого может быть использован едкий натр, аммиак, натрий-фосфатный буфер, трис-буфер. Реакция мечения МСА проходит под воздействием микроволнового излучения и протекает в течение нескольких минут.A known method of preparing a suspension of microspheres of human albumin labeled with isotopes ^99m Tc, ¹⁸⁸ Re or ¹⁸⁶ Re using a phased mixing of the contents of four vials [11]. In the bottle "A", according to the claims, contains tin chloride of two-water (SnCl ₂ ⋅ 2H ₂ O) weighing from 2.5 to 10 mg in an aqueous solution of hydrochloric, acetic or phosphoric acid. The bottle "B" contains a stabilizer of tin salt - citric acid weighing from 10 to 30 mg. The “C” vial contains human MCA from 10 to 60 microns, subject to labeling, weighing from 2 to 3 mg. Bottle "D", in turn, contains a pH stabilizer up to a value of 6-8, which can be used caustic soda, ammonia, sodium phosphate buffer, Tris buffer. The MCA labeling reaction takes place under the influence of microwave radiation and proceeds within a few minutes.

Недостатком данного способа является количество флаконов, а именно четыре, что приводит к увеличению потерь активности действующего вещества либо одного из вспомогательных компонентов. Дополнительно стоит отметить, что восстановитель - SnCl₂⋅2H₂O находится в подкисленном водном растворе во флаконе «А», что в свою очередь может отразиться на результате мечения изотопом полипептидной молекулы, так как реакционный объем, и как следствие концентрация радионуклида в реакционной смеси прямо пропорциональна выходу реакции мечения.The disadvantage of this method is the number of vials, namely four, which leads to an increase in the loss of activity of the active substance or one of the auxiliary components. In addition, it is worth noting that the reducing agent — SnCl ₂ ⋅ 2H ₂ O is in an acidified aqueous solution in bottle “A”, which in turn can affect the result of isotope labeling of the polypeptide molecule, since the reaction volume, and as a result, the concentration of the radionuclide in the reaction mixture directly proportional to the yield of the labeling reaction.

Также известен способ приготовления микросфер [12], меченых ¹⁸⁸Re, основанный на суспендировании частиц биополимера либо органического полимера в растворе с pH от 1 до 3, содержащем водорастворимую соль олова двухвалентного и соль ¹⁸⁸Re с активностью от 1000 МБк до 60000 МБк; нагреванием раствора в течение 45-70 минут в диапазоне температур от 80 до 100°C. В формуле изобретения защищается как состав, так и способ приготовления конечного РФП. Все производные поделены на три контейнера, во флаконе «А» содержится водорастворимая соль двухвалентного олова и комплексообразователь для стабилизации этой соли (2,5-дигидроксибензойная кислота; аскорбиновая кислота; лимонная кислота; малоновая кислота; глюконовая кислота; молочная кислота; гидроксиизомасляная кислота; уксусная кислота; винная кислота; янтарная кислота; соли указанных кислот, либо глюкопентонатов), флакон «В» включает в себя частицы биополимера либо органического синтетического полимера диаметром от 10 до 30 мкм, во флаконе «С» содержится вещество для увеличения pH раствора, а именно: цитрат, ацетат или тартрат в кристаллической форме либо в водном растворе, обеспечивая величину pH продукта от 5 до 8,5.Also known is a method of preparing microspheres [12] labeled with ¹⁸⁸ Re, based on the suspension of particles of a biopolymer or an organic polymer in a solution with a pH from 1 to 3 containing a water-soluble divalent tin salt and an ¹⁸⁸ Re salt with activity from 1000 MBq to 60,000 MBq; heating the solution for 45-70 minutes in the temperature range from 80 to 100 ° C. In the claims, both the composition and the method for preparing the final radiopharmaceutical are protected. All derivatives are divided into three containers, bottle “A” contains a water-soluble salt of divalent tin and a complexing agent to stabilize this salt (2,5-dihydroxybenzoic acid; ascorbic acid; citric acid; malonic acid; gluconic acid; lactic acid; hydroxyisobutyric acid; acetic acid acid; tartaric acid; succinic acid; salts of these acids or glucopentonates), bottle "B" includes particles of a biopolymer or an organic synthetic polymer with a diameter of 10 to 30 microns, in fl horse "C" contains a substance for increasing the pH of the solution, namely the citrate, acetate or tartrate in crystalline form or in aqueous solution, providing a product pH value of 5 to 8.5.

Основными недостатками данного способа являются: во-первых, время нагрева, недостаточное для достижения значения выхода реакции мечения более 95%, во-вторых, использование диаметра полимерных микрочастиц от 10 до 30 мкм, что может быть недостаточным для радиоэмболизации более крупных капилляров, что в свою очередь приведет к увеличению необоснованной лучевой нагрузки на здоровые ткани организма.The main disadvantages of this method are: firstly, the heating time is insufficient to achieve a tagging reaction yield of more than 95%, and secondly, the use of the diameter of polymer microparticles from 10 to 30 microns, which may be insufficient for radioembolization of larger capillaries, which in turn, will lead to an increase in unjustified radiation exposure to healthy body tissues.

Задачей настоящего изобретения является создание суспензии полипептидных макромолекул, меченных изотопами ¹⁸⁸Re или ¹⁸⁶Re для целей ядерной медицины, при этом устраняя вышеизложенные недостатки уже имеющихся в мировой практике разработок.The present invention is the creation of a suspension of polypeptide macromolecules labeled with ¹⁸⁸ Re or ¹⁸⁶ Re isotopes for nuclear medicine, while eliminating the above disadvantages of existing developments in world practice.

В качестве первого объекта изобретения будет рассмотрен состав набора для приготовления суспензии полипептидных биодеградабельных микрочастиц. Набор для приготовления РФП состоит из трех флаконов из дрота для лекарственных средств вместимостью 10 мл, герметично укупоренные резиновыми пробками и обжатые алюминиевыми колпачками. На каждый из флаконов набора нанесена этикетка с обозначением номера.. В каждом флаконе реагенты находятся в лиофилизированной форме (таблица 1). Содержимое каждого флакона стерильно.As a first object of the invention, the composition of the kit for preparing a suspension of polypeptide biodegradable microparticles will be considered. The set for the preparation of the radiopharmaceutical consists of three vials of a drug drip with a capacity of 10 ml, hermetically sealed with rubber stoppers and crimped with aluminum caps. A label with a number designation is applied to each of the bottles in the kit. In each bottle, the reagents are in lyophilized form (Table 1). The contents of each vial are sterile.

Во флаконе №1 содержится стерильный лиофилизат смеси восстановителя - хлорида олова (SnCl₂⋅2H₂O) и антиоксиданта - аскорбиновой кислоты (C₆H₈O₆). Олово дихлорид 2х-водный является восстановителем рения до более низкого валентного состояния, так как рений в высшем окисленном состоянии (степень окисления +7) не образует комплекса с носителем (микросферы альбумина), а аскорбиновая кислота необходима для предотвращения радикальных реакций.Bottle No. 1 contains a sterile lyophilisate of a mixture of a reducing agent - tin chloride (SnCl ₂ ⋅ 2H ₂ O) and an antioxidant - ascorbic acid (C ₆ H ₈ O ₆ ). Tin dichloride 2-water is a rhenium reducing agent to a lower valence state, since rhenium in a higher oxidized state (oxidation state +7) does not form a complex with a carrier (albumin microspheres), and ascorbic acid is necessary to prevent radical reactions.

Во флаконе №2 содержится стерильный лиофилизат смеси носителя атомов радионуклида - микросфер альбумина человека диаметром от 20 до 40 мкм и эмульгатора - полисорбата - 80 (C₆₄Н₁₂₄O₂₆). МСА представляют собой сферические монолитные частицы с зеркальной поверхностью, плотность их составляет 1,26±0,12 г/см3. В 10 мг МСА содержится 561 000±53 400 шт., средний радиус МСА (~ 30 мкм). Tween-80 в составе компонентов для приготовления суспензии используется для улучшения смачиваемости микросфер альбумина, так как их поверхность обладает гидрофобными свойствами.Bottle No. 2 contains a sterile lyophilisate of a mixture of a carrier of atoms of a radionuclide - microspheres of human albumin with a diameter of 20 to 40 microns and emulsifier - polysorbate - 80 (C ₆₄ H ₁₂₄ O ₂₆ ). MCAs are spherical monolithic particles with a mirror surface, their density is 1.26 ± 0.12 g / cm3. In 10 mg of ISA contains 561,000 ± 53,400 pcs., The average radius of the ISA (~ 30 microns). Tween-80 in the composition of the components for the preparation of the suspension is used to improve the wettability of the albumin microspheres, since their surface has hydrophobic properties.

Во флаконе №3 содержится стерильный лиофилизат трансхелатора и стабилизатора pH. Для этих целей используется соль тартрат-Na,K (Na,K -виннокислый), который является лигандом, образующим комплекс ¹⁸⁸Re или ¹⁸⁶Re с низкой константой стабильности с последующим перелигандирующим свойством. Кроме этого, калий-натрий виннокислый является реагентом, поддерживающим буфферность реакционной смеси и выполняющий роль стабилизатора pH.Bottle No. 3 contains a sterile lyophilisate of a transhelator and a pH stabilizer. For these purposes, the salt of tartrate-Na, K (Na, K-sulphate) is used, which is a ligand forming a complex of ¹⁸⁸ Re or ¹⁸⁶ Re with a low stability constant followed by a religanding property. In addition, potassium sodium tartrate is a reagent that supports the buffering of the reaction mixture and acts as a pH stabilizer.

Методика получения лиофилизатов согласно таблице 1 приведена ниже, все операции проводятся в асептических условиях в ламинарном шкафу.The method of obtaining lyophilisates according to table 1 is given below, all operations are carried out under aseptic conditions in a laminar cabinet.

Флакон №1Bottle number 1

В круглодонную колбу с двумя горловинами емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, помещают 100 мл воды для инъекций, добавляют 1000 мг аскорбиновой кислоты, перемешивают до полного растворения, затем добавляют 1330 мг двухлористого олова двухводного, тщательно перемешивают в течение 5 минут. Полученный раствор фильтруют под вакуумом через ацетат-целлюлозный стерилизующий фильтр с размером пор 0,22 мкм. Фильтрованный раствор расфасовывают автоматической пипеткой с номиналом 100-1000 мкл во флаконы вместимостью 10 мл по 1 мл в каждый (всего 100 флаконов). Весь процесс проводят в токе аргона. Затем флаконы помещают в камеру сублиматора на полку, охлажденную до минус 20°C. В камере создают давление 0,1-0,2 мм. рт.ст.с помощью вакуумного насоса. При этих условиях проводят лиофильную сушку в течение 43 ч, после этого камеру заполняют сухим аргоном до атмосферного давления. Затем флаконы удаляют из камеры, укупоривают резиновыми пробками и вальцуют алюминиевыми колпачками (. Режим лиофилизации подробно представлен далее.In a 250 ml round bottom flask equipped with a magnetic stirrer, 100 ml of water for injection is placed, 1000 mg of ascorbic acid are added, stirred until complete dissolution, then 1330 mg of two-water tin dichloride is added, mixed thoroughly for 5 minutes. The resulting solution was filtered under vacuum through an acetate-cellulose sterilizing filter with a pore size of 0.22 μm. The filtered solution is packaged with an automatic pipette with a nominal value of 100-1000 μl into vials with a capacity of 10 ml, 1 ml each (100 vials in total). The whole process is carried out in a stream of argon. Then the bottles are placed in a sublimator chamber on a shelf, cooled to minus 20 ° C. A pressure of 0.1-0.2 mm is created in the chamber. Hg using a vacuum pump. Under these conditions, freeze drying is carried out for 43 hours, after which the chamber is filled with dry argon to atmospheric pressure. Then the vials are removed from the chamber, corked with rubber stoppers and rolled with aluminum caps (. The lyophilization mode is described in detail below.

Флакон №2Bottle number 2

В круглодонную колбу с двумя горловинами емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, помещают 250 мг твина-80 и 100 мл воды для инъекций, тщательно перемешивают, добавляют 1000 мг МСА с размерами 20-40 мкм (предварительно выдержанные в сухожаровом шкафу при 120°C в течение 1 ч), перемешивают в течение 10 мин. Полученный раствор расфасовывают автоматической пипеткой с номиналом 100-1000 мкл во флаконы вместимостью 10 мл по 1 мл в каждый (всего 100 флаконов). Весь процесс проводят в токе аргона. Затем флаконы помещают в камеру сублиматора на полку, охлажденную до минус 20°C. В камере создают давление 0,1- 0,2 мм. рт. ст. с помощью вакуумного насоса. При этих условиях проводят лиофильную сушку в течение 47 ч, после этого камеру заполняют сухим аргоном до атмосферного давления. Затем флаконы удаляют из камеры, укупоривают резиновыми пробками и вальцуют алюминиевыми колпачками. Режим лиофилизации подробно представлен далее.In a round-bottomed flask with two necks with a capacity of 250 ml equipped with a magnetic stirrer, 250 mg of Tween-80 and 100 ml of water for injection are placed, mix thoroughly, add 1000 mg of MCA with sizes of 20-40 microns (previously aged in a dry oven at 120 ° C for 1 h), stirred for 10 minutes The resulting solution is packaged in an automatic pipette with a nominal value of 100-1000 μl into vials with a capacity of 10 ml, 1 ml each (total 100 vials). The whole process is carried out in a stream of argon. Then the bottles are placed in a sublimator chamber on a shelf, cooled to minus 20 ° C. A pressure of 0.1-0.2 mm is created in the chamber. Hg. Art. using a vacuum pump. Under these conditions, freeze drying is carried out for 47 hours, after which the chamber is filled with dry argon to atmospheric pressure. Then the vials are removed from the chamber, corked with rubber stoppers and rolled with aluminum caps. The lyophilization regimen is described in detail below.

Флакон №3Bottle number 3

В круглодонную колбу с двумя горловинами емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, помещают 100 мл воды для инъекций, добавляют 1890 мг K,Na виннокислого, тщательно перемешивают до полного растворения. Полученный раствор фильтруют под вакуумом через ацетат-целлюлозный стерилизующий фильтр с размером пор 0,22 мкм. Фильтрованный раствор расфасовывают автоматической пипеткой с номиналом 100-1000 мкл во флаконы вместимостью 10 мл по 1 мл в каждый (всего 100 флаконов). Весь процесс проводят в токе аргона. Затем флаконы помещают в камеру сублиматора на полку, охлажденную до минус 20°C. В камере создают давление 0,1-0,2 мм. рт. ст. с помощью вакуумного насоса. При этих условиях проводят лиофильную сушку в течение 47 ч, после этого камеру заполняют сухим аргоном до атмосферного давления. Затем флаконы удаляют из камеры, укупоривают резиновыми пробками и вальцуют алюминиевыми колпачками. Режим лиофилизации подробно представлен далее.In a round-bottomed flask with two necks with a capacity of 250 ml, equipped with a magnetic stirrer, 100 ml of water for injection is placed, 1890 mg of K, Na tartrate are added, thoroughly mixed until completely dissolved. The resulting solution was filtered under vacuum through an acetate-cellulose sterilizing filter with a pore size of 0.22 μm. The filtered solution is packaged with an automatic pipette with a nominal value of 100-1000 μl into vials with a capacity of 10 ml, 1 ml each (100 vials in total). The whole process is carried out in a stream of argon. Then the bottles are placed in a sublimator chamber on a shelf, cooled to minus 20 ° C. A pressure of 0.1-0.2 mm is created in the chamber. Hg. Art. using a vacuum pump. Under these conditions, freeze drying is carried out for 47 hours, after which the chamber is filled with dry argon to atmospheric pressure. Then the vials are removed from the chamber, corked with rubber stoppers and rolled with aluminum caps. The lyophilization regimen is described in detail below.

Методика лиофильной сушки реагентов.The method of freeze drying of reagents.

Перед расфасовкой растворов компонентов для получения набора лиофилизатов включают сублимационную установку и охлаждают полки до минус 30°C. Флаконы с расфасованными растворами устанавливают на охлажденные полки, закрывают герметично двери сублимационной камеры и продолжают замораживание растворов во флаконах в течение 30 мин. После этого включают конденсер, доводят температуру конденсера до 50-55°C, включают вакуумный насос. После достижения вакуума 0,3 мм. рт. ст. отключают охлаждение полок и проводят лиофильную сушку в таком режиме (плавающий режим). В плавающем режиме через 20 ч вакуум в сублимационной камере достигает 4⋅10^-3 мм. рт. ст.Температура полок постепенно повышается до минус 12°C через 1 ч после начала сушки, через 3 ч температура полок повышается до минус 8°C, через 10 ч - до 0°C, через 20 ч до плюс 10°C, через 40 ч температура в камере повышается до плюс 24-27°C. При температуре плюс 24-27°C проводят сушку в течение 4 ч. Суммарная длительность сушки составляет 44 ч. После этого отключают вакуумный насос, открывают штуцер сублимационной камеры и через силиконовый шланг заполняют сублимационную камеру аргоном до атмосферного давления, фильтруя аргон через фильтр с размером пор 0,22 мкм. После этого открывают дверь сублимационной камеры, которая находится в стерильном помещении, удаляют поддоны с флаконами из камеры, быстро закрывают флаконы резиновыми пробками и обжимают алюминиевыми колпачками. На флаконы наклеивают этикетки, помещают их в холодильник и хранят при температуре плюс 2-8°C.Before packaging solutions of the components to obtain a set of lyophilisates, a sublimation unit is turned on and the shelves are cooled to minus 30 ° C. Vials with pre-packaged solutions are placed on chilled shelves, the doors of the sublimation chamber are sealed, and freezing of solutions in vials is continued for 30 minutes. After that, turn on the condenser, bring the temperature of the condenser to 50-55 ° C, turn on the vacuum pump. After reaching a vacuum of 0.3 mm. Hg. Art. turn off the cooling of the shelves and conduct freeze drying in this mode (floating mode). In the floating mode, after 20 hours the vacuum in the sublimation chamber reaches 4⋅10 ^-3 mm. Hg. Art. The temperature of the shelves gradually rises to minus 12 ° C after 1 hour after the start of drying, after 3 hours the temperature of the shelves rises to minus 8 ° C, after 10 hours to 0 ° C, after 20 hours to plus 10 ° C, after 40 h the temperature in the chamber rises to plus 24-27 ° C. Drying is carried out for 4 hours at a temperature of plus 24-27 ° C. The total drying time is 44 hours. After that, turn off the vacuum pump, open the sublimation chamber fitting and fill the sublimation chamber with argon to a atmospheric pressure through a silicone hose, filtering argon through a filter with a size then 0.22 μm. After that, the door of the sublimation chamber is opened, which is located in a sterile room, the trays with bottles are removed from the chamber, the bottles are quickly closed with rubber stoppers and crimped with aluminum caps. Labels are glued onto the bottles, placed in a refrigerator and stored at a temperature of plus 2-8 ° C.

В качестве второго объекта изобретения будет рассмотрен способ приготовления суспензии полипептидных биодеградабельных микрочастиц, позволяющий получать инъекционную форму РФП непосредственно в медицинских учреждениях. В качестве действующего вещества, как уже отмечалось выше, используются изотопы ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re в форме перренат ионов в изотоническом растворе 0,9% NaCl. Изотоп ¹⁸⁸Re возможно получать в медицинских учреждениях из радионуклидного генератора.As a second object of the invention, a method for preparing a suspension of polypeptide biodegradable microparticles, which allows to obtain an injectable form of radiopharmaceuticals directly in medical institutions, will be considered. As the active substance, as noted above, ¹⁸⁶ Re, ¹⁸⁸ Re isotopes are used in the form of perrenate ions in an isotonic solution of 0.9% NaCl. The ¹⁸⁸ Re isotope can be obtained in medical institutions from a radionuclide generator.

Все операции проводятся в асептических условиях в ламинарном радиохимическом шкафу.All operations are performed under aseptic conditions in a laminar radiochemical cabinet.

Способ приготовления, описанный ниже, состоит из трех этапов (рисунок 1):The preparation method described below consists of three stages (Figure 1):

Этап №1Stage number 1

Изотонический раствор натрия перрената (¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re) объемом от 1 до 5 мл и активностью от 100 МБк/флакон до 18500 МБк/флакон через прокол резиновой пробки переносится одноразовым стерильным шприцем в флакон со стерильным лиофилизатом №1, который затем устанавливается в шейкер с частотой вращения 100-150 об/мин на 5 минут. В результате, во флаконе №1 образуется раствор с величиной pH от 1,5 до 2,5.An isotonic sodium perrenate solution ( ¹⁸⁶ Re, ¹⁸⁸ Re) with a volume of 1 to 5 ml and an activity of 100 MBq / vial to 18500 MBq / vial is transferred through a rubber stopper through a disposable sterile syringe into a vial with No. 1 sterile lyophilisate, which is then inserted into a shaker with a rotation speed of 100-150 rpm for 5 minutes. As a result, a solution with a pH value of from 1.5 to 2.5 is formed in vial No. 1.

Этап №2Stage number 2

По завершении предыдущего этапа образовавшийся во флаконе №1 раствор, прокалывая резиновую пробку, отбирают одноразовым стерильным шприцем. Как только весь раствор собран, на шприц одевают мембранный фильтр с диаметром пор 0,22 мкм и вносят содержимое шприца через прокол резиновой пробки во флакон со стерильным лиофилизатом №2, обеспечивая таким образом дополнительную стерилизацию методом фильтрования раствора, попадающего во флакон №2. Затем флакон №2 помещают в печку, где нагревают при температуре 90-99°C в течение 1,5 часов, периодически перемешивая содержимое флакона. В результате во флаконе №2 образуется суспензия микросфер альбумина, меченных изотопом рения на 60-80%, с величиной рН раствора от 1,5 до 2,5.At the end of the previous stage, the solution formed in the bottle No. 1, puncturing the rubber stopper, is taken with a disposable sterile syringe. As soon as the entire solution has been collected, a membrane filter with a pore diameter of 0.22 μm is put on the syringe and the contents of the syringe are introduced through the puncture of the rubber stopper into the vial with sterile lyophilisate No. 2, thus providing additional sterilization by filtering the solution entering the bottle No. 2. Then the bottle No. 2 is placed in the oven, where it is heated at a temperature of 90-99 ° C for 1.5 hours, periodically mixing the contents of the bottle. As a result, a suspension of albumin microspheres labeled with rhenium isotope 60-80% is formed in vial No. 2 with a solution pH of 1.5 to 2.5.

Этап №3Stage number 3

По завершении предыдущего этапа флакон №2 достают из печки и оставляют остывать при комнатной температуре на 15-20 минут. Затем остывшую суспензию прокалывая резиновую пробку, отбирают стерильным одноразовым шприцем и переносят во флакон со стерильным лиофилизатом №3, который помещают в шейкер на 10 мин. при частоте оборотов 100 об/мин. После перемешивания образуется суспензия микросфер альбумина, меченых изотопом рения минимум на 95%, с величиной pH надосадочной жидкости от 2,5 до 3,5. Содержимое флакона №3 представляет собой готовую инъекционную форму РФП.At the end of the previous stage, bottle No. 2 is taken out of the oven and allowed to cool at room temperature for 15-20 minutes. Then, the cooled suspension is punctured with a rubber stopper, taken out with a sterile disposable syringe and transferred into a vial with sterile lyophilisate No. 3, which is placed in a shaker for 10 minutes. at a speed of 100 rpm. After mixing, a suspension of albumin microspheres is formed, labeled with a rhenium isotope of at least 95%, with a pH of the supernatant from 2.5 to 3.5. The contents of the bottle No. 3 is a ready-made injectable form of the radiopharmaceutical.

В качестве третьего объекта изобретения рассматривается возможность использования суспензии микросфер альбумина, меченных изотопамиThe possibility of using a suspension of albumin microspheres labeled with isotopes is considered as a third object of the invention.

¹⁸⁸Re, в медицинских целях в качестве радиофармацевтических препаратов терапевтического назначения. Микросферы альбумина благодаря своим размерам имеют возможность депонировать в капиллярах, питающих опухоль, в непосредственной близости от злокачественных клеток. МСА, меченные изотопами ¹⁸⁶Re и ¹⁸⁸Re, были исследованы на лабораторных животных с искусственно созданной моделью патологии печени. Целью исследования было выявление терапевтического эффекта полученного РФП. ¹⁸⁸ Re, for medical purposes as therapeutic radiopharmaceuticals. Due to their size, albumin microspheres have the ability to be deposited in the capillaries that feed the tumor, in close proximity to malignant cells. MCAs labeled with ¹⁸⁶ Re and ¹⁸⁸ Re isotopes were studied in laboratory animals with an artificially created model of liver pathology. The aim of the study was to identify the therapeutic effect of the resulting radiopharmaceutical.

В ходе выполнения работы было изучено терапевтическое действие РФП по критериям: торможение роста опухоли, сравнение продолжительности жизни животных-опухоленосителей, изменение их качества жизни. Полученные результаты показали улучшение общего состояния животных (сохранение двигательной активности, уровня потребления корма и воды, функций пищеварения), и, как следствие, улучшение качества жизни. Продолжительность жизни животных с имплантированными опухолями печени после введения им исследуемого РФП увеличилась в среднем на 15% по сравнению с животными, оставшимися без лечения. Отмечено торможение роста опухоли в среднем на 9,49%, отсутствие метастазирования первичной опухоли в группе крыс с проведением терапии РФП (МСА 20-40 мкм, меченные ¹⁸⁸Re). Изученный радиофармацевтический препарат отвечает заявленным критериям терапевтического действия как радиофармацевтический лекарственный препарат для внутриартериальной радионуклидной терапии гепатоцеллюлярной карциномы и метастатических поражений.In the course of the work, the therapeutic effect of radiopharmaceuticals was studied according to the criteria: inhibition of tumor growth, comparison of the life expectancy of tumor-bearing animals, and a change in their quality of life. The results showed an improvement in the general condition of animals (preservation of motor activity, level of feed and water consumption, digestion functions), and, as a result, an improvement in the quality of life. The life expectancy of animals with implanted liver tumors after administration of the studied RFP increased by an average of 15% compared with animals left without treatment. Tumor inhibition of tumor growth was noted on average by 9.49%, the absence of metastasis of the primary tumor in the rat group with radiopharmaceutical treatment (MCA 20-40 μm, labeled ¹⁸⁸ Re). The studied radiopharmaceutical drug meets the stated criteria for therapeutic action as a radiopharmaceutical drug for intra-arterial radionuclide therapy of hepatocellular carcinoma and metastatic lesions.

Литература:Literature:

[1] P. Smith, R. Krohn, G. Hermanson, A. Mallia, F. Gartner, M. Provenzano, Measurement of protein using bicinchoninic acid. // Analytical Biochemistry, Vol. 150, 1985, 76-85.[1] P. Smith, R. Krohn, G. Hermanson, A. Mallia, F. Gartner, M. Provenzano, Measurement of protein using bicinchoninic acid. // Analytical Biochemistry, Vol. 150, 1985, 76-85.

[2] J.I. Bilbao, M.F. Reiser, Liver radioembolization with 90Y microspheres // Berlin Springer, 2008. 162-167.[2] J.I. Bilbao, M.F. Reiser, Liver radioembolization with 90Y microspheres // Berlin Springer, 2008.16-2-167.

[3] R.T. Hoffmann, P.M. Paprottka, A. Schon, F. Bamberg, A. Haug, Durr, E.M. Rauch В., С.T. Trumm, T.F. Jakobs, Т.К. Helmberger, M.F. Reiser, F.T. Kolligs, Transarterial hepatic yttrium-90 radioembolization in patients with unresectable intrahepatic cholangiocarcinoma: factors associated with prolonged survival // Cardiovasc. Intervent Radiol, Vol. 35, No. 1, 2012, 105-116.[3] R.T. Hoffmann, P.M. Paprottka, A. Schon, F. Bamberg, A. Haug, Durr, E.M. Rauch B., C.T. Trumm, T.F. Jakobs, T.K. Helmberger, M.F. Reiser, F.T. Kolligs, Transarterial hepatic yttrium-90 radioembolization in patients with unresectable intrahepatic cholangiocarcinoma: factors associated with prolonged survival // Cardiovasc. Intervent Radiol, Vol. 35, No. 1, 2012, 105-116.

[4] J.L. Raoul, M. Messner, E. Boucher, J.F. Bretagne, J.P. Campion, K. Boudjema, Preoperative treatment of hepatocellular carcinoma with intra-arterial injection of 131I-labelled lipiodol // Br. J. Surg., Vol. 90, No. 11, 2003, 1379-1383.[4] J.L. Raoul, M. Messner, E. Boucher, J.F. Bretagne, J.P. Campion, K. Boudjema, Preoperative treatment of hepatocellular carcinoma with intra-arterial injection of 131I-labelled lipiodol // Br. J. Surg., Vol. 90, No. 11, 2003, 1379-1383.

[5] K. Memon, R.J. Lewandowski, A. Riaz, R. Salem, Yttrium 90 microspheres for the treatment of hepatocellular carcinoma // Recent Results Cancer Res. Vol. 190, 2013, 207-224.[5] K. Memon, R.J. Lewandowski, A. Riaz, R. Salem, Yttrium 90 microspheres for the treatment of hepatocellular carcinoma // Recent Results Cancer Res. Vol. 190, 2013, 207-224.

[6] В.В. Каныгин, О.Б. Егоров, Способ получения микросфер для радиотерапии, патент РФ №2485059 (2011).[6] V.V. Kanygin, O.B. Egorov, A method of producing microspheres for radiotherapy, RF patent No. 2485059 (2011).

[7] В.М. Петриев, В.К. Ширяев, Л.А. Смахтин, В.Г. Скворцов, Б.Л. Жуйков, Способ получения меченых радионуклидом микросфер, патент РФ №2359702 (2007).[7] V.M. Petriev, V.K. Shiryaev, L.A. Smakhtin, V.G. Skvortsov, B.L. Zhuykov, Method for producing radionuclide-labeled microspheres, RF patent No. 2359702 (2007).

[8] Н. Ahmadzadehfar, A. Sabet, K. Wilhelm, Н. J. Biersack, J. Risse, Iodine-131-Lipiodol therapy in hepatic tumours // Methods, Vol. 55, 2011, 246-252.[8] N. Ahmadzadehfar, A. Sabet, K. Wilhelm, N. J. Biersack, J. Risse, Iodine-131-Lipiodol therapy in hepatic tumors // Methods, Vol. 55, 2011, 246-252.

[9] M. Chen, S. Wang, B. Shieh, L. Sheen, R. Tsay, G. Ting, W. Lin, Novel preparation of Y-90 Lipiodol by using of conjugating technique, патент TW №334438 (1998).[9] M. Chen, S. Wang, B. Shieh, L. Sheen, R. Tsay, G. Ting, W. Lin, Novel preparation of Y-90 Lipiodol by using of conjugating technique, patent TW No. 334438 (1998 )

[10] H. Нуарэ, Э. Гарин, H. Лепаръер, В. Ардиссон, Композиция для лечения рака печени у людей на основе рения-188 и способ получения такой композиции, патент РФ №2543342 (2011).[10] H. Noiret, E. Garin, H. Leparier, V. Ardisson, Composition for the treatment of liver cancer in humans based on rhenium-188 and a method for producing such a composition, RF patent No. 2543342 (2011).

[11] S. Chen, С. Li, Т. Lee, С. Chang, Kit and method for quickly preparing radio-isotope labeled human serum albumin microspheres, патент US №2016058897 (2016).[11] S. Chen, C. Li, T. Lee, C. Chang, Kit and method for quickly preparing radio-isotope labeled human serum albumin microspheres, US patent No. 201658897 (2016).

[12] G. Wunderlich, A. Drews, Method and kit for the production of particles labelled with rhenium-188, патент US 2008219923 (2008).[12] G. Wunderlich, A. Drews, Method and kit for the production of particles labelled with rhenium-188, US patent 2008219923 (2008).

Claims (7)

1. Набор для приготовления суспензии полипептидных биодеградабельных микрочастиц для проведения трансартериальной радиоэмболизации капилляров печени, находящихся в изотоническом 0,9% водном растворе хлорида натрия, меченных изотопом рения, состоящий из вспомогательных реагентов: антиоксиданта - аскорбиновой кислоты в количестве 10 мг; восстановителя рения до более низкого валентного состояния - хлорида олова дигидрата в количестве 13,3 мг; эмульгатора - полисорбата-80 в количестве 2,5 мг; полипептидного носителя радионуклидов - микросфер альбумина крови человека диаметром 20-40 мкм в количестве 10 мг; трансхелатора и стабилизатора рН - K,Na- виннокислого (тартрат K, Na) в количестве 18,9 мг; при этом все вспомогательные реагенты расфасованы по трем флаконам: во флаконе №1 содержится смесь восстановителя и антиоксиданта, во флаконе №2 содержится смесь полипептидного носителя атомов радионуклида и эмульгатора, во флаконе №3 содержится трансхелатор и стабилизатор рН, способствующий достижению величины рН суспензии полипептидных биодеградабельных микрочастиц, находящихся в изотоническом 0,9% водном растворе хлорида натрия, меченных изотопом рения, в интервале от 2 до 5, при этом содержимое каждого флакона стерильно и лиофилизировано.1. A kit for the preparation of a suspension of polypeptide biodegradable microparticles for transarterial radioembolization of liver capillaries in an isotonic 0.9% sodium chloride solution labeled with rhenium isotope, consisting of auxiliary reagents: antioxidant ascorbic acid in an amount of 10 mg; rhenium reducing agent to a lower valence state - tin chloride dihydrate in an amount of 13.3 mg; emulsifier - polysorbate-80 in an amount of 2.5 mg; a polypeptide carrier of radionuclides - microspheres of human blood albumin with a diameter of 20-40 microns in an amount of 10 mg; transhelator and pH stabilizer - K, Na-tartrate (tartrate K, Na) in the amount of 18.9 mg; in this case, all auxiliary reagents are packaged in three bottles: bottle No. 1 contains a mixture of a reducing agent and an antioxidant, bottle No. 2 contains a mixture of a polypeptide carrier of radionuclide atoms and an emulsifier, bottle No. 3 contains a transhelator and a pH stabilizer, which helps to achieve a pH value of a suspension of polypeptide biodegradable microparticles in an isotonic 0.9% aqueous solution of sodium chloride labeled with rhenium isotope in the range from 2 to 5, while the contents of each vial are sterile and lyophilized It is possible. 2. Набор для приготовления суспензии полипептидных биодеградабельных микрочастиц, находящихся в изотоническом 0,9% водном растворе хлорида натрия, меченных изотопом рения согласно п. 1., где в качестве изотопов рения используется радионуклид ^I86Re или радионуклид ¹⁸⁸Re.2. A kit for preparing a suspension of polypeptide biodegradable microparticles in an isotonic 0.9% aqueous solution of sodium chloride labeled with rhenium isotope according to claim 1., where the radionuclide ^I86 Re or the radionuclide ¹⁸⁸ Re is used as rhenium isotopes. 3. Последовательный трехэтапный способ получения суспензии полипептидных биодеградабельных микрочастиц для проведения трансартериальной радиоэмболизации капилляров печени из набора по п. 1, в котором:3. A sequential three-stage method for producing a suspension of polypeptide biodegradable microparticles for transarterial radioembolization of liver capillaries from the kit according to claim 1, in which: на первом этапе раствор радионуклида рения переносится во флакон №1 с последующим перемешиванием флакона №1 в течение 5 минут при частоте оборотов шейкера от 100 до 150 об/мин, при этом величина рН раствора во флаконе №1 по окончании первого этапа находится в интервале от 1,5 до 2,5;at the first stage, the rhenium radionuclide solution is transferred to bottle No. 1, followed by stirring of bottle No. 1 for 5 minutes at a shaker speed of 100 to 150 rpm, and the pH of the solution in bottle No. 1 at the end of the first stage is in the range from 1.5 to 2.5; на втором этапе содержимое флакона №1 после осуществления первого этапа переносится во флакон №2 через мембранный фильтр с порами 0,22 мкм, после чего содержимое флакона №2 периодически перемешивается при температуре от 90 до 99°С в течение 71-110 мин, при этом величина рН раствора во флаконе №2 по окончании второго этапа находится в интервале от 1,5 до 2,5, а значение выхода реакции мечения полимерных, биодеградабельных микрочастиц радионуклидом принадлежит интервалу от 60% до 80%;in the second stage, the contents of the bottle No. 1 after the first stage is transferred to the bottle No. 2 through a membrane filter with pores of 0.22 μm, after which the contents of the bottle No. 2 are periodically mixed at a temperature of from 90 to 99 ° C for 71-110 minutes, this pH value of the solution in the bottle No. 2 at the end of the second stage is in the range from 1.5 to 2.5, and the yield of the labeling reaction of polymer, biodegradable microparticles with a radionuclide belongs to the range from 60% to 80%; на третьем этапе содержимое флакона №2 после осуществления второго этапа охлаждается до температуры окружающей среды, а затем переносится во флакон №3 с последующим перемешиванием в течение 10 минут при частоте оборотов от 50 до 120 об/мин, при этом по окончании третьего этапа содержимое флакона №3 представляет собой суспензию биодеградабельных полимерных микрочастиц, меченных изотопом рения с величиной рН в интервале от 2 до 5 и выходом реакции мечения не менее 95%.in the third stage, the contents of the bottle No. 2 after the second stage is cooled to ambient temperature, and then transferred to the bottle No. 3, followed by stirring for 10 minutes at a speed of 50 to 120 rpm, while at the end of the third stage the contents of the bottle No. 3 is a suspension of biodegradable polymer microparticles labeled with a rhenium isotope with a pH in the range from 2 to 5 and a tagging reaction yield of at least 95%. 4. Последовательный трехэтапный способ получения суспензии полипептидных биодеградабельных микрочастиц, меченных изотопом рения согласно п. 3, в котором раствор изотопа рения представляет собой изотонический водный раствор 0,9% хлорида натрия объемом от 1 мл до 5 мл, содержащий радионуклид ^l86Re или радионуклид ¹⁸⁸Re с объемной активностью от 37 МБк/мл до 18,5 ГБк/мл.4. A sequential three-stage method for producing a suspension of polypeptide biodegradable microparticles labeled with a rhenium isotope according to claim 3, wherein the rhenium isotope solution is an isotonic aqueous solution of 0.9% sodium chloride with a volume of 1 ml to 5 ml containing a ^l86 Re radionuclide or an ¹⁸⁸ radionuclide Re with a volume activity of 37 MBq / ml to 18.5 GBq / ml.

Images