RU2685505C1 - Гетероциклические амиды тирозина, обладающие анальгетическим, противовоспалительным и противоотечным действием - Google Patents
Гетероциклические амиды тирозина, обладающие анальгетическим, противовоспалительным и противоотечным действием Download PDFInfo
- Publication number
- RU2685505C1 RU2685505C1 RU2018142241A RU2018142241A RU2685505C1 RU 2685505 C1 RU2685505 C1 RU 2685505C1 RU 2018142241 A RU2018142241 A RU 2018142241A RU 2018142241 A RU2018142241 A RU 2018142241A RU 2685505 C1 RU2685505 C1 RU 2685505C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cream
- inflammatory
- analgesic
- animals
- tyrosine
- Prior art date
Links
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 title claims abstract description 18
- 230000003501 anti-edematous effect Effects 0.000 title claims abstract description 8
- -1 Tyrosine heterocyclic amides Chemical class 0.000 title claims description 9
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 title abstract description 19
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract description 7
- 230000001760 anti-analgesic effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000006071 cream Substances 0.000 abstract description 44
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 23
- 239000000499 gel Substances 0.000 abstract description 19
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 abstract description 16
- 239000002674 ointment Substances 0.000 abstract description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 abstract description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 32
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 26
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 22
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 21
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 18
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 17
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 13
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 13
- 239000000047 product Substances 0.000 description 13
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 208000009386 Experimental Arthritis Diseases 0.000 description 8
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 208000007271 Substance Withdrawal Syndrome Diseases 0.000 description 7
- 206010048010 Withdrawal syndrome Diseases 0.000 description 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 6
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 6
- CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N indomethacin Chemical compound CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(OC)=CC=C2N1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 230000037023 motor activity Effects 0.000 description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 6
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 5
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 5
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 5
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 5
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 5
- DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N ketoprofen Chemical compound OC(=O)C(C)C1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1 DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 5
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 5
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 5
- 150000003667 tyrosine derivatives Chemical class 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 4
- 241000270295 Serpentes Species 0.000 description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 4
- 238000012346 open field test Methods 0.000 description 4
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 4
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 4
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 241000257303 Hymenoptera Species 0.000 description 3
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 3
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 3
- 239000003659 bee venom Substances 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 3
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 229960000905 indomethacin Drugs 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 3
- 230000008533 pain sensitivity Effects 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 2
- 206010012335 Dependence Diseases 0.000 description 2
- 206010020565 Hyperaemia Diseases 0.000 description 2
- 206010028347 Muscle twitching Diseases 0.000 description 2
- 108090000189 Neuropeptides Proteins 0.000 description 2
- 108010093625 Opioid Peptides Proteins 0.000 description 2
- 102000001490 Opioid Peptides Human genes 0.000 description 2
- 208000000114 Pain Threshold Diseases 0.000 description 2
- 206010044565 Tremor Diseases 0.000 description 2
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 2
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 2
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 2
- 230000036461 convulsion Effects 0.000 description 2
- 239000008278 cosmetic cream Substances 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- KPHWPUGNDIVLNH-UHFFFAOYSA-M diclofenac sodium Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)CC1=CC=CC=C1NC1=C(Cl)C=CC=C1Cl KPHWPUGNDIVLNH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000005021 gait Effects 0.000 description 2
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 2
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 2
- 230000001926 lymphatic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003399 opiate peptide Substances 0.000 description 2
- 230000037040 pain threshold Effects 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 229960002702 piroxicam Drugs 0.000 description 2
- QYSPLQLAKJAUJT-UHFFFAOYSA-N piroxicam Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)N(C)C=1C(=O)NC1=CC=CC=N1 QYSPLQLAKJAUJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- GAPYKZAARZMMGP-UHFFFAOYSA-N pyridin-1-ium;acetate Chemical compound CC(O)=O.C1=CC=NC=C1 GAPYKZAARZMMGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 238000006748 scratching Methods 0.000 description 2
- 230000002393 scratching effect Effects 0.000 description 2
- 206010041232 sneezing Diseases 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 2
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 2
- 150000003668 tyrosines Chemical class 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- WLJVXDMOQOGPHL-PPJXEINESA-N 2-phenylacetic acid Chemical class O[14C](=O)CC1=CC=CC=C1 WLJVXDMOQOGPHL-PPJXEINESA-N 0.000 description 1
- 208000030090 Acute Disease Diseases 0.000 description 1
- 101000924591 Apis mellifera Apamin Proteins 0.000 description 1
- 206010003178 Arterial thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 208000025978 Athletic injury Diseases 0.000 description 1
- 208000034656 Contusions Diseases 0.000 description 1
- 101150029544 Crem gene Proteins 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 108010049140 Endorphins Proteins 0.000 description 1
- 102000009025 Endorphins Human genes 0.000 description 1
- 108010092674 Enkephalins Proteins 0.000 description 1
- 206010015995 Eyelid ptosis Diseases 0.000 description 1
- 208000012671 Gastrointestinal haemorrhages Diseases 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- URLZCHNOLZSCCA-VABKMULXSA-N Leu-enkephalin Chemical class C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=CC=C1 URLZCHNOLZSCCA-VABKMULXSA-N 0.000 description 1
- 102400000243 Leu-enkephalin Human genes 0.000 description 1
- 108010022337 Leucine Enkephalin Proteins 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010036176 Melitten Proteins 0.000 description 1
- 102000003840 Opioid Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000137 Opioid Receptors Proteins 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 101100230601 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) HBT1 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010040880 Skin irritation Diseases 0.000 description 1
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000271897 Viperidae Species 0.000 description 1
- BOIZHGCLUSQNLD-UHFFFAOYSA-N acetic acid;1h-indole Chemical class CC(O)=O.C1=CC=C2NC=CC2=C1 BOIZHGCLUSQNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000010398 acute inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 1
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000002322 anti-exudative effect Effects 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940111131 antiinflammatory and antirheumatic product propionic acid derivative Drugs 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 1
- 229960001102 betamethasone dipropionate Drugs 0.000 description 1
- CIWBQSYVNNPZIQ-XYWKZLDCSA-N betamethasone dipropionate Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@H](C)[C@@](C(=O)COC(=O)CC)(OC(=O)CC)[C@@]1(C)C[C@@H]2O CIWBQSYVNNPZIQ-XYWKZLDCSA-N 0.000 description 1
- 230000000035 biogenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 1
- 208000037893 chronic inflammatory disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 229960001259 diclofenac Drugs 0.000 description 1
- DCOPUUMXTXDBNB-UHFFFAOYSA-N diclofenac Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC=C1NC1=C(Cl)C=CC=C1Cl DCOPUUMXTXDBNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 208000000718 duodenal ulcer Diseases 0.000 description 1
- 210000000613 ear canal Anatomy 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 230000008451 emotion Effects 0.000 description 1
- 239000006274 endogenous ligand Substances 0.000 description 1
- 210000000744 eyelid Anatomy 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 1
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 201000005917 gastric ulcer Diseases 0.000 description 1
- 208000030304 gastrointestinal bleeding Diseases 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 210000003128 head Anatomy 0.000 description 1
- 229960001680 ibuprofen Drugs 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000009191 jumping Effects 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- URLZCHNOLZSCCA-UHFFFAOYSA-N leu-enkephalin Chemical compound C=1C=C(O)C=CC=1CC(N)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)NC(C(=O)NC(CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 URLZCHNOLZSCCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003041 ligament Anatomy 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 210000001365 lymphatic vessel Anatomy 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- YVIIHEKJCKCXOB-STYWVVQQSA-N molport-023-276-178 Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N3CCC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CSSC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N2)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1)=O)CC(C)C)[C@@H](C)O)C(N)=O)C1=CNC=N1 YVIIHEKJCKCXOB-STYWVVQQSA-N 0.000 description 1
- 230000008450 motivation Effects 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000002346 musculoskeletal system Anatomy 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 229960000965 nimesulide Drugs 0.000 description 1
- HYWYRSMBCFDLJT-UHFFFAOYSA-N nimesulide Chemical compound CS(=O)(=O)NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1OC1=CC=CC=C1 HYWYRSMBCFDLJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000041 non-steroidal anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 1
- 238000006053 organic reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012430 organic reaction media Substances 0.000 description 1
- 230000032696 parturition Effects 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000037081 physical activity Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 150000005599 propionic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 201000003004 ptosis Diseases 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000000018 receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 229940044601 receptor agonist Drugs 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000001226 reprecipitation Methods 0.000 description 1
- 229940058287 salicylic acid derivative anticestodals Drugs 0.000 description 1
- 150000003872 salicylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000036556 skin irritation Effects 0.000 description 1
- 231100000475 skin irritation Toxicity 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000003998 snake venom Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000005556 structure-activity relationship Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 229940124530 sulfonamide Drugs 0.000 description 1
- 150000003456 sulfonamides Chemical class 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 230000009182 swimming Effects 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N tetramethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)C CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ULSZVNJBVJWEJE-UHFFFAOYSA-N thiazolidine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1NCCS1 ULSZVNJBVJWEJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DZLNHFMRPBPULJ-UHFFFAOYSA-N thioproline Chemical compound OC(=O)C1CSCN1 DZLNHFMRPBPULJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D263/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings
- C07D263/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings
- C07D263/04—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D263/06—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon radicals, substituted by oxygen atoms, attached to ring carbon atoms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
- A61K31/42—Oxazoles
- A61K31/421—1,3-Oxazoles, e.g. pemoline, trimethadione
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
- A61K31/425—Thiazoles
- A61K31/426—1,3-Thiazoles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/10—Antioedematous agents; Diuretics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
- C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
- C07D277/04—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D277/06—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
Изобретение раскрывает гетероциклические производные тирозина общей формулы (I) обладающие противовоспалительным, обезболивающим и противоотечным действием. Заявляемые производные могут использоваться в косметических и лечебных целях в составе кремов, мазей или гелей, обладающих анальгетическим, противовоспалительным и противоотечным действием, не вызывающих побочных эффектов при наружном использовании. 6 ил., 7 табл., 2 пр.
Description
Гетероциклические производные тирозина, обладающие анальгетическим, противовоспалительным и противоотечным действием
Изобретение относится к физиологически активным производным тирозина, обладающим анальгетическим, противовоспалительным и противоотечным действием. Заявляемые производные могут использоваться в косметических и лечебных целях в составе кремов, мазей или гелей с указанным спектром активности.
Известен целый ряд медицинских и косметических средств, в состав которых включены нестероидные противовоспалительные агенты, обладающие обезболивающими и противовоспалительными свойствами. Это малые молекулы различной химической структуры, наиболее важные из них для наружного использования:
1) производные салициловой кислоты, например в комбинации с бетаметазоном дипропионата (патент РФ №2223465, МПК А61К 31/573, опубл. 20.02.2004);
2) производные индолуксусной кислоты, а именно индометацин в составе мази «Индометацин» (Инструкция к применению, Индометацин мазь 10%, производитель Биосинтез, Россия) и геля «Индовазин» (Инструкция к применению, Индовазин гель, 45 г);
3) производные фенилуксусной кислоты, а именно диклофенак в составе препаратов «Вольтарен Эмульгель» (Инструкция к применению, Вольтарен эмульгель, гель), «Дикловит» и др. (Инструкция к применению, Дикловит гель 1%);
4) производные пропионовой кислоты, а именно ибупрофен - «Нурофен гель» (Инструкция к применению Нурофен гель, 5%), кетопрофен - «Фастум гель» (Инструкция к применению Фастум гель) и «Кетонал гель» (Инструкция к применению Кетонал гель);
5) оксикамы, а именно пироксикам - «Пироксикам-гель» (Инструкция к применению Пироксикам гель), «Финалгель» (Инструкция к применению Финалгель);
6) производные сульфонамида, а именно нимесулид - «Найз гель» (Инструкция к применению Найз гель)
Перечисленные вещества входят в состав различных мазей, гелей и кремов, которые применяются в качестве обезболивающих и противовоспалительных средств, главным образом при лечении острых и хронических воспалительных заболеваниях опорно-двигательного аппарата, а также спортивных травм (ушибов, повреждения связок и мышц). Известным недостатком нестероидных противовоспалительных средств является прямое или косвенное поражение слизистой желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) особенно при длительном применении (диарея, язва желудка и двенадцатиперстной кишки, желудочно-кишечные кровотечения), а также риск развития сердечно-сосудистых осложнений (инсульты, инфаркты миокарда, тромбозы периферических артерий). Кроме того, если эти средства применяются на обширных участках в течение длительного времени и в высоких дозах, возможно возникновение системных побочных эффектов.
Известны также нестероидные противовоспалительные средства на основе физиологически активных компонентов ядов пчел и змей.
Пчелиный яд представляет собой комплексную смесь биологически активных веществ. Он содержит ферменты, биогенные амины, аминокислоты (триптофан), пептиды - меллитин, апамин, а также холин, свободные жирные кислоты, сахара, липиды, свободные основания, органические кислоты (фосфорную), магний, микроэлементы. Пептиды составляют более 50% сухого веса пчелиного яда и обусловливают большую часть его физиологической активности. Наиболее известным средством на основе пчелиного яда является мазь «Апизартрон» (Инструкция к применению Апизартрон, мазь).
Близкой противовоспалительной и обезболивающей активностью обладают яды кобры и гадюки. В змеином яде содержатся аминокислоты и белки (в том числе ферменты); жирные кислоты, микроэлементы. Мази «Випросал», Кобратокс и др.
Препараты на основе ядов пчел и змей используются в низких дозах и не имеют таких побочных эффектов, как соединения, перечисленные выше, однако яды пчел и змей являются сильными аллергенами и могут вызвать у пациента аллергическую реакцию. Кроме того, сырье для подобных мазей является труднодоступным и дорогим. Это сырье трудно стандартизировать, что очень важно для промышленного производства.
Известна группа нейропептидов, являющихся эндогенными лигандами - агонистами опиоидных рецепторов. Эти пептиды обладают анальгезирующим действием. К эндогенным опиоидным пептидам относят эндорфины, энкефалины, динорфины и др. Система опиоидных пептидов головного мозга играет важную роль в формировании мотиваций, эмоций, поведенческой привязанности, реакции на стресс и боль и в контроле приема пищи. Пептиды, как правило, нетоксичны, действуют в низких дозах, не вызывают привыкания, в организме имеются ферментные системы для их деградации до аминокислот.Низкомолекулярные пептиды и производные аминокислот не обладают антигенными и иммуногенными свойствами. Пептидные субстанции доступны и легко поддаются стандартизации.
Особенностью структуры нейропептидов является наличие в их составе тирозина, который является функционально значимой аминокислотой. Сам тирозин также обладает физиологичекой активностью, однако его применение в качестве лекарственного препарата ограничено из-за низкой растворимости этой аминокислоты в водных средах.
Задачей данного изобретения является разработка производных тирозина для применения в составе косметических или лекарственных кремов, гелей или мазей, обладающих анальгетическим, противовоспалительным и противоотечным действием, не вызывающих побочных эффектов при наружном использовании со стороны ЖКТ, сердечно-сосудистой системы, аллергических реакций и привыкания.
Технический результат изобретения заключается в достижении анальгетического, противовоспалительного и противоотечного действия без побочных эффектов, аллергических реакций и привыкания.
Технический результат достигается путем синтеза производных тирозина формулы Н - Tyr - X, где X является группой, обеспечивающей растворимость соединения в водных средах.
Атом углерода в пятичленном гетероцикле, помеченный звездочкой, является оптически активным и может иметь как L, так и D- конфигурацию.
Неочевидность изобретения обусловлена тем, что любой дизайн органических молекул на основе аминокислот является чисто теоретическим подходом. В ряду производных аминокислот или их аналогов не существует четкой взаимосвязи структура-активность, так как каждое модифицированное производное аминокислоты является уникальным химическим соединением, его биологическая активность не является очевидной и требует экспериментального подтверждения.
Синтез заявляемых соединений формулы (I) осуществляется методами пептидной химии в растворе путем конденсации соответствующей гетероциклической иминокислоты (оксазолидикарбоновой - для производных (Ia) или тиазолидинкарбоновой - для соединений (Ib)), полученных по описанным методикам, с активированным эфиром ди-Вос-L-тирозина с последующим удалением защитных групп до соединений формулы (I). Для очистки соединений формулы (I) применяли переосаждение и кристаллизацию, а в случае необходимости ионообменную хроматографию на катионообменной смоле.
Структура полученных соединений подтверждена данными 1Н-ЯМР-спектроскопии, а их гомогенность данными высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).
Противовоспалительное и анальгезирующее действие заявляемых производных тирозина изучали в остром эксперименте на модели формалинового отека лапы у мышей и в субхроническом эксперименте на модели адъювантного артрита у крыс. По окончании субхронического эксперимента проводили оценку синдрома отмены. Заявляемые соединения для изучения биологической активности вводили в состав нейтрального косметического крема (крем А содержал заявляемое соединение формулы (Ia), а крем В - заявляемое соединение формулы (Ib)). Острую воспалительную реакцию воспроизводили субплантарным введением в правую заднюю лапу 2% раствора формалина. Кремы, содержащие заявляемые производные тирозина (далее «Крем А», «Крем В»), наносили на лапу за 2 и 1 час до введения формалина. Противовоспалительное действие «Кремов А и В» оценивали по выраженности отека, анальгезирующее действие по поведению животных (в баллах), по двигательной активности (в тесте «открытое поле»).
Результаты проведенного исследования показали, что при накожном применении заявляемых косметических средств - «Крема А» и «Крема В» снижается болевая чувствительность и происходит уменьшение выраженности индуцированного формалином отека лапы. Угнетение отека составило в среднем около 10%.
Хроническое воспаление (адъювантный артрит) моделировали на крысах самках путем субплантарного введения в правую заднюю лапу 0,1 мл полного адъюванта Фрейнда (ПАФ) (Becton, Dickinson and Company, U.S.A. Lot 6292862). Контрольный крем и заявляемые косметические средства наносили крысам через сутки после введения ПАФ и далее ежедневно в течение 27 дней. Воспалительную реакцию оценивали в динамике каждые 2-3 дня по интенсивности воспалительных изменений в суставах пораженной конечности, выраженной в проценте отека, а также по изменению порогов болевой чувствительности. Первичную реакцию (отек на лапе введения) оценивали на 3-й день после инъекции адъюванта.
На второй день после отмены крема тестировали животных на наличие синдрома отмены. Синдром отмены оценивали на второй день после отмены заявляемых косметических средств - «Крем А» и» Крем В», регистрируя анальгетическую активность, двигательную активность в тесте «открытое поле», общее состояние по нарушению ушного и корнеального рефлексов, наличию судорог, тремора, птоза, прыжков, встряхивания, стука зубами, чесания, чихания, бокового положения.
В процессе субхронического эксперимента было установлено, что применение «Кремов А и В» после создания аъювантного артрита тормозит развитие воспалительного процесса. Максимальное угнетение отека составляло 20 - 25% на 7-15 сутки исследования для «Крема В».
После прекращения использования заявляемых косметических средств не было выявлено синдрома отмены. Поведение и рефлексы животных не изменились.
Полученные результаты свидетельствуют о высокой эффективности заявляемого «Крема В» как противовоспалительного и анальгезирующего средства.
Пример 1. Получение N-тирозил-4-карбонил-5-метил-1,3-оксозолидина (Ia)
К суспензии 1.95 г (15,0 ммоль) 4-карбокси-5-метил-1,3-оксозолидина [М.R. Vishnumaya, V.K. Singh Highly efficient small organic molecules for enantioselective direct aldol reaction in organic and aqueous media // J.Org. Chem. 2009, v. 74, p. 4289-4297] в 40 мл сухого диметилфорамида (DMF) при перемешивании прибавляли 4.1 мл (29.3 ммоль) триэтиламина и 7.2 г (15.0 ммоль) Вос2-Tyr-ONSu и перемешивали при комнатной температуре 15 часов. Растворители упаривали, остаток растворяли в 50 мл этилацетата и последовательно промывали 5% раствором серной кислоты и водой до нейтрального значения рН, этилацетатный слой упаривали. Остаток растворяли в 20 мл хлористого метилена и прибавляли 16.5 мл трифторуксусной кислоты. Реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре 1 час и трифторуксусную кислоту упаривали, остаток растворяли в воде и полученный раствор наносили на колонку с катионообменной смолой (СПС БИО Сульфопропил). Продукт элюировали градиентом концентрации пиридин-ацетатного буфера рН 5.5 от 0.05 М (500 мл) до 0.3 М (500 мл). Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли, упаривали и маслообразный остаток еще дважды упаривали с водой. Продукт кристаллизовали из 60 мл изо-пропилового спирта. Выпавший осадок отфильтровывали, промывали на фильтре изо-пропиловым спиртом и высушивали. Выход 3.2 г. (72%). Rf 0.5 (система хлороформ-метанол-32% уксусная кислота 60:45:20). Чистота продукта по данным ВЭЖХ 95.1%. Структура соединения подтверждена данными спектра 1Н-ЯМР. На Фиг. 1 показан Спектр 1Н ЯМР N-тирозил-4-карбонил-5-метил-1,3-оксозолидина (Ia) в DMSO-d6 при 300К.
Пример 2. Получение N-тирозил-4-карбокси-1,3-тиазолидина (Ib)
К суспензии 5.6 г (42.0 ммоль) 4-карбокси-1,3-тиазолидина, полученного по известной методике [М.R. Vishnumaya, V.K. Singh Highly efficient small organic molecules for enantioselective direct aldol reaction in organic and aqueous media // J.Org. Chem. 2009, v. 74, p. 4289-4297] в 100 мл сухого DMF при перемешивании прибавляли 7.6 мл (54.0 ммоль) триэтиламина и 20.1 г (42.0 ммоль) Вос2-Tyr -ONSu. Реакционную смеси перемешивали при комнатной температуре 15 часов. Растворители упаривали, остаток растворяли в 150 мл этилацетата и последовательно промывали 5% раствором серной кислоты и водой до нейтрального значения рН, органический слой упаривали. Остаток растворяли в 50 мл хлористого метилена и прибавляли 50 мл трифторуксусной кислоты. Реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре 1 час и упаривали. Остаток растворяли в воде и полученный раствор наносили на колонку с катионобменной смолой (СПС БИО Сульфопропил). Колонку последовательно промывали двумя объемами пиридин-ацетатного буфера рН 5.5 увеличивая ионную силу буфера от 0.05 М до 0.3 М. Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли и упаривали. Остаток кристаллизовали из 200 мл изо-пропилового спирта. Выпавший осадок отфильтровывали, промывали на фильтре изо-пропиловым спиртом и высушивали. Выход 9.2 г (86.6%), Rf 0.5 (система хлороформ-метанол-32% уксусная кислота -60:45:20). Чистота продукта по данным ВЭЖХ более 95.3%. Структура соединения подтверждена данными спектра 1Н-ЯМР. На Фиг. 2 показан Спектр 1Н ЯМР N-тирозил-4-карбокси-1,3-тиазолидина (Ib) в DMSO-d6 при 300К.
1H-ЯМР-спектры снимали на спектрометре WM-500 (Bruker) 500 МГц в DMSO-d6 при 300 K, концентрация производных тирозина составляла 2-3 мг/мл Химические сдвиги измерялись относительно тетраметилсилана.
Исследование биологической активности выполнено в соответствии с регламентирующими документами.
Все процедуры в исследовании выполнены согласно утвержденному Плану исследования и Стандартным Операционным Процедурам (СОП).
Биологическая тест-система
Количество животных, задействованных в исследовании, было достаточным для полной регистрации изучаемых эффектов и статистической обработки полученных данных. Самки не были беременными или рожавшими.
Вид животных, порода/линия:
Мыши - В ALB/c (самцы)
Крысы - аутбредные (самки)
Начальный вес: Мыши - 25-28 г. Крысы - 210-260 г
Принципы отбора животных и распределения по группам: по весу и возрасту методом случайного отбора. Масса тела каждого животного не отклонялась от средней по группе более чем на 20%.
Все манипуляции с животными проводили согласно правилам, принятым Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для исследований и других научных целей (European Conventionforthe Protectionof Vertebrate Animals Usedfor Experimentalandother Scientific Purposes (ETS 123) Strasbourg, 1986) и Директивой 2010/63/EU Европейского парламента и совета Европейского Союза от 22 сентября 2010 года по охране животных, используемых в научных целях.
Методика эксперимента
Исследуемый препараты - кремы для наружного применения (далее «Крем А» и «Крем В»)
Действующее вещество - заявляемые производные тирозина формулы (I)
Мышам наносили и втирали в лапку 0,02 мл тестируемого косметического средства, крысам 0,1 мл. Это максимально возможный объем крема, который хорошо впитывался и не оставался на поверхности кожи. Экспериментально было установлено, что 1 мл косметического средства весит 1008 мг. Для мышей со средней массой тела 25 г доза составила 20 мг на мышь или 800 мг/кг. Для крыс со средней массой тела 250 г доза составила 101 мг или 404 мг/кг.
«Крем А» и «Крем В» набирали в шприц, объемом 1 мл и дозировано наносили мышам и крысам на опытную лапу, втирая массирующими движениями до полного впитывания крема.
Пример 3. Изучение противовоспалительного действия заявляемых кремов в остром эксперименте при создании формалинового отека
Острую воспалительную реакцию воспроизводили субплантарным введением в правую заднюю лапу 2% раствора формалина в объеме 0,02 мл.
Заявляемые «Кремы А и В» наносили на правую лапу за 2 и 1 час до введения формалина. Контрольным животным в правую лапку втирали нейтральный косметический крем, используемый в качестве основы при создании тестируемых косметических средств (далее «Контрольный крем»).
После окончания наблюдения животных подвергали эвтаназии методом цервикальной дислокации. В таблице 1 показаны условия проведения острого эксперимента.
В результате субплантарного введения 0,02 мл 2% водного раствора формалина в правую заднюю лапу у мышей развивался выраженный отек. Толщину лапок измеряли до введения формалина, через 3 часа, 1 и 2 суток после индукции воспаления с помощью микрометра МКЦ-25 (ООО НПП «ЧИЗ»). Выраженность отека оценивали в процентах по разнице толщины лапки в момент измерения и до формалинового отека. Противовоспалительную активность рассчитывали по формуле:
По полученным данным проводили сравнительный анализ в группах, получавших «Контрольный крем», «Крем А» и «Крем В», результаты влияния заявляемых кремов на выраженность «формалинового» отека лапы мыши (толщина лапки, мкм) приведены в табл. 2 и на Фиг. 3 изображен график влияния заявляемых кремов на выраженность «формалинового» отека лапы мыши (% отека).
Отмечено, что на всех сроках измерения лап, у мышей обработанных «Кремом В» процент отека был меньше, чем у животных обработанных «Контрольным кремом» и «Кремом А».
Пример 4. Изучение анальгетического действия заявляемых кремов в остром эксперименте при создании формалинового отека
Как и в примере 3, острую воспалительную реакцию воспроизводили субплантарным введением в правую заднюю лапу 2% раствора формалина в объеме 0,02 мл.
Заявляемые «Кремы А и В» наносили на правую лапу за 2 и 1 час до введения формалина. Контрольным животным в правую лапку втирали «Контрольный крем».
После окончания наблюдения животных подвергали эвтаназии методом цервикальной дислокации. Дизайн исследования в условиях острого эксперимента аналогичен таковому в примере 3 (см. табл. 1).
В течение первого часа после создания формалинового воспаления вели наблюдение за каждым животным, отмечая признаки боли. Через 3 часа, 1 и 2 суток мышей тестировали по двигательной активности, статико-силовой выносливости и длительности плавания. В эти периоды проводили измерение пораженной конечности и наблюдали за состоянием животных. После окончания наблюдения животных подвергали эвтаназии методом цервикальной дислокации.
Изучение аналъгетического действия по поведению животных
После введения формалина у мышей в течение первых 60 минут учитывали число болевых реакций по 4 типам поведения:
0 - отсутствие реакции;
1 - лапа остается на полу, но животное на нее не опирается;
2 - лапа поднята;
3 - животное облизывает или грызет лапу, либо встряхивает или подергивает ей.
Критерием анальгетического эффекта считали достоверное уменьшение числа болевых реакций в группах, получавших заявляемые «Крем А и В», относительно контрольной группы.
Сразу после субплантарного введения формалина мыши проявляли сильное беспокойство. После возвращения в клетку они начинали усиленно облизывать инъецированную лапу. В течение часа все мыши не опирались на пораженную конечность. Замечено, что мыши, чьи лапы были обработаны «Кремом В» проявляли меньше беспокойства, чем мыши двух других групп. В таблице 4 указано количество поднятия лапы и облизывания ее, выраженное в баллах. В таблице 3 приведены данные о влиянии заявляемых кремов на болевой порог. На Фиг. 4 показан график влияния тестируемых кремов на болевой порог. Из предоставленных данных видно, что применение «Крема В» больше других кремов снижает интенсивность болевого ответа на введение формалина.
Изучение аналъгетического действия по двигательной активности в тесте «открытое поле»
Через 3, 24 и 48 часов после создания формалиновой модели животных по одной особи помещали в экспериментальную установку «открытое поле», которая представляет собой камеру размером 330×430×205 мм. Пол камеры разделен на 20 квадратов. В течение 2 минут учитывали количество вертикальных стоек и количество пересеченных (4 лапами) квадратов. Критерием анальгезирующего действия считали увеличение показателей горизонтальной и вертикальной активности. Данные о влиянии тестируемых кремов на двигательную активность мышей представлены в табл. 4. На Фиг. 5 также показан график влияния заявляемых кремов на двигательную активность мышей. Через 3 часа после введения формалина все мыши активно двигались по арене и вставали на задние лапы, опираясь и на пораженную конечность. Отмечено, что животные, чьи опытные лапы получали крем «Крем В», через 3 часа и 24 часа активнее вставали на задние лапы по сравнению с группой, которой вводили «Контрольный крем». Однако наилучший результат показан в группе, чьи лапы обрабатывали гелем «Крем А». В этой группе мыши чаще пересекали квадраты и вставали на задние конечности.
Пример 5. Изучение противовоспалительного действия «Крема» в субхроническом эксперименте при создании адъювантного артрита.
Методика исследования
Хроническое воспаление (адъювантный артрит) моделировали на крысах самках путем субплантарного введения в правую заднюю лапу 0,1 мл полного адъюванта Фрейнда (ПАФ) (Becton, Dickinson and Company, U.S.A. Lot 6292862). Контрольный крем и заявляемые косметические средства наносили крысам через сутки после введения ПАФ и далее ежедневно в течение 27 дней. Воспалительную реакцию оценивали в динамике каждые 2-3 дня по интенсивности воспалительных изменений в суставах пораженной конечности, выраженной в проценте отека, а также по изменению порогов болевой чувствительности. Первичную реакцию (отек на лапе введения) оценивали на 3-й день после инъекции адъюванта.
На второй день после отмены «Крема» тестировали животных на наличие синдрома отмены.
В таблице 5 показаны условия проведения субхронического эксперимента.
Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью программного обеспечения Microsoft Office Excel 2010. Вычисляли групповое среднее арифметическое (М) и стандартную ошибку среднего (m). Статистическую достоверность различий оценивали по t-критерию Стьюдента. Достоверным считали различие данных групп при р<0,05.
Течение экспериментального адъювант-индуцированного артрита характеризовалось изменением различных показателей. В течение первых 24 часов у всех крыс визуально наблюдалась гиперемия и отек задней правой конечности (место инъекции полного адъюванта Фрейнда). Также отмечалось изменение походки - животные оберегали поврежденную конечность, избегая наступать на нее, поджимали лапу кверху. Анальгезирующий эффект тестируемых кремов отмечали в процессе измерения пораженной конечности. Установлено, что у большинства животных групп, получавших заявляемые косметические средства - «Крем А» и «Крем В», слабый анальгезирующий эффект наступил к 5 суткам эксперимента, в контрольной группе животных, получавших крема «Контрольный крем» - к 7 суткам. Далее болевая реакция у крыс снижалась с уменьшением отека пораженной конечности.
Течение экспериментального адъювант-индуцированного артрита характеризовалось изменением различных показателей. В течение первых 24 часов у всех крыс визуально наблюдалась гиперемия и отек задней правой конечности (место инъекции полного адъюванта Фрейнда). Также отмечалось изменение походки - животные оберегали поврежденную конечность, избегая наступать на нее, поджимали лапу кверху. С течением времени у контрольных животных отек на правой лапе увеличивался, с 12 суток эксперимента начала отекать и другая конечность (вторичная иммунологическая реакция), двигательная активность была снижена, крысы не опирались на поврежденную конечность. Опытные животные, получавшие заявляемые косметические средства, были подвижны, опирались на все конечности, вставали на задние лапы. Разница между левой и правой лапой была не заметна.
Динамику объема пораженной конечности оценивали по толщине опытной лапки, которую измеряли с помощью микрометра МКЦ-25. Полученные данные о влиянии заявляемых кремов на динамику толщины пораженной конечности крыс приведены в таблице 6. На Фиг. 6 приведена Динамика прироста объема лап крысы с адъювантным артритом, %. На протяжении исследования у крыс, которых обрабатывали «Кремом В» процент отека был ниже, чем у крыс, обрабатываемых «Кремом А» и «Контрольным кремом».
Пример 6. Изучение развития синдрома отмены
С целью оценки возможного синдрома отмены проводили оценку основных показателей поведения и рефлексов животных после отмены длительного нанесения заявляемых кремов.
Общее состояние животных на вторые сутки после отмены кремов не изменилось. При нажатии пинцетом на поврежденную конечность все крысы одергивали ее, при раздражении кожи наружного слухового прохода при помощи бумажной трубочки встряхивали головой (ушной рефлекс положительный), при прикосновении к роговице глаза волоска смыкали веки (корнеальный рефлекс положительный). При наблюдении за крысами не было выявлено судорог, тремора, прыжков, встряхиваний, стука зубами, чесания, чихания.
Данные о влиянии заявляемых кремов на эмоционально-двигательную активность крыс в тесте «открытое поле» представлены в таблице 7. После прекращения нанесения заявляемых кремов показатели эмоционально-двигательной активности крыс достоверно не отличались между группами.
После прекращения использования заявляемых косметических средств «Крем А» и «Крем В» не было выявлено синдрома отмены.
Таким образом, проведенное экспериментальное исследование сравнительной фармакологической активности косметических средств: «Контрольного крема», «Крема А», содержащего N-тирозил-4-карбонил-5-метил-1,3-оксозолидин и «Крема В», содержащего N-тирозил-4-карбокси-1,3-тиазолидина показало, что заявляемые кремы обладают противовоспалительным, анальгезирующим и антиэкссудативным действием.
Наиболее выраженными эффектами обладает «Крем В».
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Беленький М.Л. // Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. - Л., 1968, 151 с.
2. Гублер Е.В., Генкин А.А. // Применение непараметрических критериев статистики в медико-биологических исследованиях, Л., 1973 г.
3. Западнюк И.П., Западнюк В.И., Захария Е.А. // Лабораторные животные, их разведение, содержание и использование в эксперименте. - Государственное медицинское издательство УССР, 1982 - 350 с.
4. Международные рекомендации по проведению медико-биологических исследований с использованием животных // Ланиматология. - 1993. - №1 - С. 29.
5. Национальный стандарт Российской Федерации ГОСТ 33044-2014 «Принципы надлежащей лабораторной практики».
6. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств, ред. А.Н. Миронов, М., «Гриф и К», 2012.
7. Требования Международного комитета по науке по использованию в экспериментальных исследованиях лабораторных животных // Бюллетень ИКЛАС. - 1978. - №24. - С. 4-5.
8. Энциклопедия лекарств. 2017. РЛС. Вып. 25 (под ред. Г.Л. Вышковского) Изд: «Веданта», 2016, 1288 стр.
9. Х.-Д. Якубке, X. Ешкайт. Аминокислоты, пептиды, белки Пер. с нем. под ред. Ю.В. Митина. Москва, «Мир» 1985. 455 стр.
10. В.К. Хугаева, В.В. Сучков, М.И. Титов. Влияние лейэнкефалина и тирозина на лимфатические и тирозина на лимфатические и кровеносные сосуды. Кардиология. 1982. т 22, №6. с. 83-86
11. М.R. Vishnumaya, V.K. Singh Highly efficient small organic molecules for enantioselective direct aldol reaction in organic and aqueous media // J.Org. Chem. 2009, v. 74, p. 4289-4297.
Claims (3)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018142241A RU2685505C1 (ru) | 2018-11-29 | 2018-11-29 | Гетероциклические амиды тирозина, обладающие анальгетическим, противовоспалительным и противоотечным действием |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018142241A RU2685505C1 (ru) | 2018-11-29 | 2018-11-29 | Гетероциклические амиды тирозина, обладающие анальгетическим, противовоспалительным и противоотечным действием |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2685505C1 true RU2685505C1 (ru) | 2019-04-19 |
Family
ID=66168218
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2018142241A RU2685505C1 (ru) | 2018-11-29 | 2018-11-29 | Гетероциклические амиды тирозина, обладающие анальгетическим, противовоспалительным и противоотечным действием |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2685505C1 (ru) |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007136921A2 (en) * | 2006-03-21 | 2007-11-29 | Joyant Pharmaceuticals, Inc. | Small molecule apoptosis promoters |
RU2644724C1 (ru) * | 2017-04-18 | 2018-02-13 | Георгий Сергеевич Немов | Средство, обладающее корректирующим действием на метаболизм хрящевой ткани и способ его получения |
-
2018
- 2018-11-29 RU RU2018142241A patent/RU2685505C1/ru active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007136921A2 (en) * | 2006-03-21 | 2007-11-29 | Joyant Pharmaceuticals, Inc. | Small molecule apoptosis promoters |
RU2644724C1 (ru) * | 2017-04-18 | 2018-02-13 | Георгий Сергеевич Немов | Средство, обладающее корректирующим действием на метаболизм хрящевой ткани и способ его получения |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6858286B2 (ja) | ライソゾーム蓄積症を治療するためのシクロデキストリン | |
Weigle et al. | Elevated free fatty acids induce uncoupling protein 3 expression in muscle: a potential explanation for the effect of fasting | |
BR112019019519A2 (pt) | agente terapêutico para a inibição de fosfodiesterase e seus distúrbios relacionados | |
EP2774914A1 (en) | N-benzylaniline derivative and uses thereof | |
CN1951410A (zh) | 含药用人参的脑细胞或神经细胞保护剂 | |
Gu et al. | Upregulation of matrix metalloproteinase-9/2 in the wounded tissue, dorsal root ganglia, and spinal cord is involved in the development of postoperative pain | |
US20130316985A1 (en) | GPR35 Ligands And Uses Thereof | |
RU2685505C1 (ru) | Гетероциклические амиды тирозина, обладающие анальгетическим, противовоспалительным и противоотечным действием | |
KR20080005525A (ko) | 습진 치료를 위한 옥사프로진 또는 밀접관련 화합물 | |
RU2678563C1 (ru) | Водорастворимые производные тирозина, обладающие анальгетическим, противовоспалительным и противоотечным действием | |
RU2536270C1 (ru) | Комбинация для коррекции неврологического и психоэмоционального статуса при органических нарушениях цнс | |
RU2084449C1 (ru) | 1-бензил-2-оксотриптамин гидрохлорид и его производные, обладающие гепатозащитной активностью | |
RU2116309C1 (ru) | 4-[(бензо-2,1,3-тиадиазолил-4)амино]-5,6,7,8-тетрагидробензотиено [2,3-d]пиримидин, обладающий противогельминтной активностью при ларвальном альвеолярном эхинококкозе | |
Ehling et al. | Neuromedin B induces acute itch in mice via the activation of peripheral sensory neurons | |
WO1997035573A2 (en) | NSAIDs IN THE TREATMENT OF PRURITUS | |
US20140357720A1 (en) | Novel phytosphingosine derivatives, and a cosmetic composition comprising the same for preventing and ameliorating inflammatory skin diseases and hyperkeratosis diseases | |
Strus et al. | Study of the toxicity of drugs with sapropel extracts and the testing of the cream effectiveness | |
JP2008031066A (ja) | 脱顆粒反応抑制剤 | |
RU2177802C1 (ru) | Тетрапептид, регулирующий функции предстательной железы, фармакологическое средство на его основе и способ его применения | |
RU2035180C1 (ru) | Антивирусное средство | |
RU2183126C2 (ru) | Средство, нормализующее функциональную активность спинного мозга, и способ его получения | |
RU2607661C1 (ru) | Ректальные суппозитории, обладающие болеутоляющим действием | |
RU2769523C1 (ru) | 4-(3,4-дибромтиофенилкарбонил)-2,6,8,10,12-пентаацетил-2,4,6,8,10,12 гексаазаизовюрцитан в качестве анальгетического средства и способ его получения | |
RU2812294C2 (ru) | Фармацевтические композиции Тиохроменола на основе гексагидро-гетероциклического соединения, обладающие анальгезирующим действием, и методы их использования у домашних и сельскохозяйственных животных | |
Dutra et al. | Celecoxib attenuates neuroinflammation, reactive astrogliosis and promotes neuroprotection in young rats with experimental hydrocephalus |