RU2682678C1 - Method of obtaining dispiroindolinones - Google Patents

Abstract

FIELD: chemistry.SUBSTANCE: invention relates to the field of organic chemistry, in particular, to a method for producing dispiroindolinones of general formula 1, where X is S or O; R1 is selected from the group comprising hydrogen, phenyl, phenyl, substituted by 1-2 substituents selected from halogen atom (fluorine, chlorine, bromine), hydroxy, lower alkoxy group (methoxy, ethoxy, isopropyloxy, propargyloxy) or C1-C6 alkyl (methyl, ethyl, propyl, butyl, pentyl, hexyl); R2 is selected from the group consisting of unsubstituted pyridyl or phenyl, substituted by 1-2 substituents selected from halogen atom (fluorine, chlorine, bromine), hydroxy, lower alkoxy group (methoxy, ethoxy, isopropyloxy, propargyloxy), aldehyde group or C1-C6 alkyl (methyl, ethyl, propyl, butyl, pentyl, hexyl); R3 is selected from the group consisting of a halogen atom, hydrogen atom or a nitro group; R4 is C1-C5 alkyl (methyl, ethyl, propyl, butyl, pentyl); R5 represents a hydrogen atom or alkyl C1-C3 (methyl, ethyl, propyl), characterized in that 1±0.1 molar eq. of the corresponding imidazolidin-4-one is dissolved in a monohydric alcohol, taken in an amount of 10 ml per 0.5±0.1 mmol, and boiled at 100±10 °C for 10±2 min after boiling the resulting solution, then sarcosine, taken at the rate of 2±0.2 eq., is added to the boiling mixture, and the corresponding isatin, taken in an amount of 2±0.2 eq. in relation to the corresponding imidazolidin-4-one, the resulting mixture is boiled until the end of the reaction, then the mixture is cooled to room temperature, the precipitated precipitate is filtered under vacuum with a glass porous filter and a Bunsen flask.1.EFFECT: new method has been developed for the preparation of dihydro derivatives based on 5-arylidene-2-thioxo-imidazolin-4-ones and 5-arylidene-2-oxo-imidazolidin-4-ones, which allows to obtain compounds with high yields.1 cl, 1 tbl, 33 ex

Description

Область техникиTechnical field

Настоящее изобретение относится к области органической и медицинской химии, а также молекулярной биологии и касается новых соединений биологически активных веществ с улучшенными значениями цитотоксичности - ингибиторов белок-белкового взаимодействия MDM2/p53 и способа их получения, которые могут быть использованы в качестве активных компонентов для фармацевтических композиций и лекарственных средств для лечения онкологических заболеваний.The present invention relates to the field of organic and medical chemistry, as well as molecular biology, and relates to new compounds of biologically active substances with improved values of cytotoxicity - inhibitors of protein-protein interaction MDM2 / p53 and a method for their preparation, which can be used as active components for pharmaceutical compositions and drugs for the treatment of cancer.

Уровень техникиState of the art

Последние несколько лет наблюдается повышенный интерес к поиску непептидных низкомолекулярных соединений способных препятствовать взаимодействию клеточных белков p53-MDM2. Белок р53 является опухолевым супрессором, играющим важную роль в жизненном цикле клетки и апоптозе, а MDM2 - его эндогенный ингибитор [Wu X., Bayle J.Н., Olson D., Levine A.J., Genes DeV., 1993, 7, 1126; Vogelstein В., Lane D., Levine A.J., Nature, 2000, 408, 307]. Если блокировать взаимодействие этих белков, то высвобождающийся р53 активирует процесс разрушения опухоли, что является новым направлением в терапии раковых заболеваний. Как известно, нарушение взаимодействия p53-MDM2 сопутствует большинству онкологических заболеваний [Hock, А. & Vousden, K.Н. Regulation of the р53 pathway by ubiquitin and related proteins. Int. J. Biochem. Cell Biol. 42, 1618-1621 (2010)], а повышенная концентрация белка MDM2 присутствует в 80% раковых клеток [Vogelstein, В., Lane, D. & Levine, A.J. Surfing the p53 network. Nature 408, 307-310 (2000)].Over the past few years, there has been increased interest in the search for non-peptide low molecular weight compounds that can interfere with the interaction of cellular proteins p53-MDM2. Protein p53 is a tumor suppressor that plays an important role in the cell life cycle and apoptosis, and MDM2 is its endogenous inhibitor [Wu X., Bayle J.N., Olson D., Levine A.J., Genes DeV., 1993, 7, 1126; Vogelstein B., Lane D., Levine A.J., Nature, 2000, 408, 307]. If the interaction of these proteins is blocked, then the released p53 activates the destruction of the tumor, which is a new direction in the treatment of cancer. As is known, a violation of the interaction of p53-MDM2 is associated with most oncological diseases [Hock, A. & Vousden, K.N. Regulation of the p53 pathway by ubiquitin and related proteins. Int. J. Biochem. Cell Biol. 42, 1618-1621 (2010)], and an increased concentration of MDM2 protein is present in 80% of cancer cells [Vogelstein, B., Lane, D. & Levine, A.J. Surfing the p53 network. Nature 408, 307-310 (2000)].

Алкалоиды спиро-оксиндольного типа были впервые выделены из растений семейств Apocynaceae и Rubiacae [Galliford, С.V.; Scheidt, K.A. Angew. Chem. Int. Ed. 2007, 46, 8748]. Ключевой особенностью этих соединений является наличие индолинонового спиросодержащего фрагмента с различными заместителями в фрагментах пирролидина и индолинона.Spiro-oxindole type alkaloids were first isolated from plants of the Apocynaceae and Rubiacae families [Galliford, C.V .; Scheidt, K.A. Angew. Chem. Int. Ed. 2007, 46, 8748]. A key feature of these compounds is the presence of an indolinone spiro-containing fragment with various substituents in the pyrrolidine and indolinone fragments.

Известные биологически активные производные 2-арилиден-гидантоинов являются гетероциклическими соединениями с многообещающей противоопухолевой активностью [Jung, М.Е.; Ouk, S.; Yoo, D.; Sawyers, С.L.; Chen, С; Tran, С; Wongvipat, J. J. Med. Chem. 2010, 53, 2779], [Sawyers, C.L. U.S. Patent 8658681 B2, 2014]. Эти соединения также могут быть использованы в качестве удобных отправных точек или промежуточных продуктов в синтезе широкого спектра структурно различных природных продуктов [Lanman, В.А.; Overman, L.Е.; Paulini, R.; White, N.S. J. Am. Chem. Soc. 2007, 129, 12896].Known biologically active derivatives of 2-arylidene-hydantoins are heterocyclic compounds with promising antitumor activity [Jung, M.E .; Ouk, S .; Yoo, D .; Sawyers, C. L .; Chen, C; Tran, C; Wongvipat, J. J. Med. Chem. 2010, 53, 2779], [Sawyers, C.L. U.S. Patent 8658681 B2, 2014]. These compounds can also be used as convenient starting points or intermediates in the synthesis of a wide range of structurally different natural products [Lanman, VA; Overman, L.E .; Paulini, R .; White, N.S. J. Am. Chem. Soc. 2007, 129, 12896].

Так, известны соединения и способы их получения такие как, A1 (Sanofi) [Allen, J.G. et al. Discovery and optimization of chromenotriazolopyrimidines as potent inhibitors of the mouse double minute 2-tumor protein 53 protein-protein interaction. J. Med. Chem. 52, 7044-7053 (2009)], RD-37 (University of California) [Wassman, C.D. et al. Computational identification of a transiently open L1/S3 pocket for reactivation of mutant p53. Nature Commun. 4, 1407 (2013)] со значением IC₅₀=124 нМ на клетках LNCaP, А2 (University of Debrecen) [Noguchi, T. et al. Affinity-based screening of MDM2/MDMX-p53 interaction inhibitors by chemical array: identification of novel peptidic inhibitors. Bioorg. Med. Chem. Lett. 23, 3802-3805 (2013)] со значением IC₅₀<1 мМ на клетках Hep G2, A3 (Johnson & Johnson) [Vu, В. et al. Discovery of RG7112: a small-molecule MDM2 inhibitor in clinical development. ACS Med. Chem. Lett. 4, 466-469 (2013)]. Получение данных производных, на примере соединения A3, возможно из ацилированных 1-дезокси-β-D-глюкопиразонил цианидов путем первоначального радикального бромирования с получением соответствующих бром-производных, в последующим их восстановлением до амидов с использованием TiCl₄ в системе вода-уксусная кислота. После хроматографической очистки продукт вводили в реакцию с незамещенным тиогидантоином в присутствии 4-х эквивалентов цианата серебра или калия, в нитрометане при температуре 80°С. Побочно наблюдали образование гидроксиамида в соотношении с целевым продуктом 1:2.Thus, compounds and methods for their preparation are known such as A1 (Sanofi) [Allen, JG et al. Discovery and optimization of chromenotriazolopyrimidines as potent inhibitors of the mouse double minute 2-tumor protein 53 protein-protein interaction. J. Med. Chem. 52, 7044-7053 (2009)], RD-37 (University of California) [Wassman, CD et al. Computational identification of a transiently open L1 / S3 pocket for reactivation of mutant p53. Nature Commun. 4, 1407 (2013)] with IC ₅₀ = 124 nM on LNCaP, A2 (University of Debrecen) cells [Noguchi, T. et al. Affinity-based screening of MDM2 / MDMX-p53 interaction inhibitors by chemical array: identification of novel peptidic inhibitors. Bioorg. Med. Chem. Lett. 23, 3802-3805 (2013)] with an IC ₅₀ value <1 mM on Hep G2, A3 cells (Johnson & Johnson) [Vu, B. et al. Discovery of RG7112: a small-molecule MDM2 inhibitor in clinical development. ACS Med. Chem. Lett. 4, 466-469 (2013)]. The preparation of these derivatives, using compound A3 as an example, is possible from acylated 1-deoxy-β-D-glucopyrazonyl cyanides by initial radical bromination to obtain the corresponding bromine derivatives, followed by reduction to amides using TiCl ₄ in a water-acetic acid system. After chromatographic purification, the product was reacted with unsubstituted thiohydantoin in the presence of 4 equivalents of silver or potassium cyanate, in nitromethane at a temperature of 80 ° C. The formation of hydroxyamide in the ratio with the target product 1: 2 was side-observed.

Основными недостатками способа получения данных соединений является трудоемкий способ синтеза конечных соединений, использование больших количеств высокотоксичных реагентов и элюэнтов при синтезе и очистке, инертных атмосфер, в некоторых случаях при синтезе оптически-активных соединений необходимо использование дорогостоящих неорганических катализаторов, также являющихся токсичными. На некоторых из стадий авторам удавалось выделить Целевые продукты с выходами 4-20%. Также нежелательным является и использование в синтезе радикальных реакций, поскольку в этом случае в смеси наблюдаются не только продукты моно-бромирования, что значительно понижает общий выход и эффективность реакции.The main disadvantages of the method for producing these compounds is a laborious method for the synthesis of final compounds, the use of large amounts of highly toxic reagents and eluents in the synthesis and purification, inert atmospheres, in some cases, the synthesis of optically active compounds requires the use of expensive inorganic catalysts that are also toxic. At some of the stages, the authors were able to isolate Target products with 4-20% yields. The use of radical reactions in the synthesis is also undesirable, since in this case not only mono-bromination products are observed in the mixture, which significantly reduces the overall yield and reaction efficiency.

Из уровня техники известен способ получения ряда спиро-индолинонов с перспективной противоопухолевой активностью (например, B1 - В6). Эти соединения были представлены как высокоактивные ингибиторы белок-белкового взаимодействия (PPI) MDM2/p53 [Liu, Jin-Jun; et al World Intellectual Property Organization, WO 2008055812 A1 2008-05-15]. Получение данных производных, на примере соединения В1, возможно из соответствующего рацемического (1R,2S)-6'-хлор-2-(3-хлорфенил)спиро[5-циклогексен-1,3'-[3Н]индол]-2',4(1'H)-диона, CuCl, Ph₃P и фенилмагний бромида в атмосфере аргона в абсолютном ТГФ при 0°С. После экстракции и отделения органической фазы из смеси были выделены два изомера, которые далее были разделены на хиральной колонке. Основными недостатками получаемых производных являются сложный путь синтеза исходного рацемического (1R,2S)-6'-хлор-2-(3-хлорфенил)спиро[5-циклогексен-1,3'-[3Н]индол]-2',4(1'H)-диона, использование дорогостоящих хиральных колонок и токсичных органических растворителей при очистке.The prior art method for producing a number of spiro-indolinones with promising antitumor activity (for example, B1 - B6). These compounds were presented as highly active inhibitors of protein-protein interaction (PPI) MDM2 / p53 [Liu, Jin-Jun; et al World Intellectual Property Organization, WO2008055812 A1 2008-05-15]. Obtaining these derivatives, using the example of compound B1, is possible from the corresponding racemic (1R, 2S) -6'-chloro-2- (3-chlorophenyl) spiro [5-cyclohexene-1,3 '- [3H] indole] -2' , 4 (1'H) -dione, CuCl, Ph ₃ P and phenyl magnesium bromide in argon atmosphere in absolute THF at 0 ° С. After extraction and separation of the organic phase, two isomers were isolated from the mixture, which were then separated on a chiral column. The main disadvantages of the derivatives obtained are the difficult way to synthesize the original racemic (1R, 2S) -6'-chloro-2- (3-chlorophenyl) spiro [5-cyclohexene-1,3 '- [3H] indole] -2', 4 ( 1'H) -dione, the use of expensive chiral columns and toxic organic solvents during purification.

Из уровня техники известен способ получения соединений, содержащих в своей структуре один спиро фрагмент, например, серия MI-43 или ISA-27, которые в настоящее время проходят доклинические испытания и, заключающийся в первоначальной конденсации ароматического альдегида с бензилцианидами, дальнейшей циклизацией совместно с третбутиловым эфиром енамина в присутствии фторида серебра и триметиламина, гидролизом сложного эфира в трифторуксусной кислоте, дальнейшим разделением энантиомеров на хиральной колонке и конденсацией с 2-метокси-4-карбоксианилином совместно с дифенилфосфинил хлоридом. В ходе дальнейших реакций оптимизации стереохимии, замещения бензольных колец на алкильные цепочки, введения амидных связей с подбором алициклического фрагмента была получена целевая структура соединения MI-43 или ISA-27 [Gomez-Monterrey, I.; Bertamino, A.; Porta, A.; et al. J. Med. Chem. 2010, 53, 8319]. MI-43 в настоящее время находится в Фазе I клинических испытаний против рака [http://clinicaltrials.gov/show/NCT01636479]. Основными недостатками способа получения данных соединений является длительный и трудоемкий способ синтеза конечных соединений, включающий более 15 стадий, а также необходимость разделения хиральных препаратов на дорогостоящих оптически-активных препаративных колонках и использование при этом больших объемов токсичных элюэнтов и растворителей.The prior art method for producing compounds containing one spiro fragment in its structure, for example, the MI-43 or ISA-27 series, which are currently undergoing preclinical trials and consisting in the initial condensation of aromatic aldehyde with benzyl cyanides, further cyclization together with tert-butyl enamine ether in the presence of silver fluoride and trimethylamine, hydrolysis of the ester in trifluoroacetic acid, further separation of the enantiomers on a chiral column and condensation with 2-methoxy-4-carb ksianilinom together with diphenylphosphinyl chloride. In the course of further reactions of optimizing stereochemistry, replacing benzene rings with alkyl chains, introducing amide bonds with the selection of an alicyclic fragment, the target structure of compound MI-43 or ISA-27 was obtained [Gomez-Monterrey, I .; Bertamino, A .; Porta, A .; et al. J. Med. Chem. 2010, 53, 8319]. MI-43 is currently in Phase I of the clinical trial against cancer [http://clinicaltrials.gov/show/NCT01636479]. The main disadvantages of the method for producing these compounds is a long and laborious method for the synthesis of final compounds, which includes more than 15 stages, as well as the need to separate chiral preparations into expensive optically active preparative columns and the use of large volumes of toxic eluents and solvents.

Также, Daiichi Sankyo сообщает о высоко активных ингибиторах белок-белкового взаимодействия MDM2/p53 со значениями IC₅₀ в диапазоне от 24.1 нМ до 181 мкМ [Zhao, Y.; Liu, L.; Sun, W.; et al. J. Am. Chem. Soc. 2013, 135, 7223]. Диспиро аналоги среди данных соединений описаны более слабо и включают арил-замещенный (3''R)-4,4-диметилдиспиро[циклогексан-1,2'-пирролидин-3',3''-индол]-2''(1''H)-он В6 [Sugimoto, Y. U.S. 20130165424 А9, 2012]. Эти агенты ингибируют белок-белковое взаимодействие MDM2/p53 со значениями IC₅₀ в диапазоне 0.001-0.05 мкМ и являются ингибиторами р53-MDM2 взаимодействия. На первом этапе синтеза целевого соединения была проведена конденсация 5-замещенного изатина с этиловым эфиром цистеина при помощи микроволнового излучения, на следующем этапе с использованием тиофосгена и триэтиламина и последующим введением производного анилина. Далее, полученное диспиропроизводное ацилировали по атому азота изатина и выделяли нужный изомер на препаративной хиральной колонке. Основными недостатками метода получения данных соединений являются сложный и длительный путь синтеза конечных препаратов, необходимость дополнительных очисток и перекристаллизаций с использованием токсичных растворителей, необходимость использования дорогостоящей препаративной колонки, а также ряд побочных эффектов самих соединений.Also, Daiichi Sankyo reports highly active MDM2 / p53 protein-protein interaction inhibitors with IC ₅₀ values ranging from 24.1 nM to 181 μM [Zhao, Y .; Liu, L .; Sun, W .; et al. J. Am. Chem. Soc. 2013, 135, 7223]. Dispiro analogs among these compounds are described more poorly and include aryl-substituted (3''R) -4,4-dimethyldispiro [cyclohexane-1,2'-pyrrolidin-3 ', 3''-indole]-2''(1'' H) -one B6 [Sugimoto, YUS 20130165424 A9, 2012]. These agents inhibit the protein-protein interaction of MDM2 / p53 with IC ₅₀ values in the range of 0.001-0.05 μM and are inhibitors of p53-MDM2 interaction. At the first stage of the synthesis of the target compound, 5-substituted isatin was condensed with cysteine ethyl ester using microwave radiation, at the next stage using thiophosgene and triethylamine and the subsequent introduction of the aniline derivative. Next, the resulting dispersion derivative was acylated at the isatin nitrogen atom and the desired isomer was isolated on a preparative chiral column. The main disadvantages of the method of obtaining these compounds are the complex and lengthy path of synthesis of the final preparations, the need for additional purifications and recrystallizations using toxic solvents, the need to use an expensive preparative column, and a number of side effects of the compounds themselves.

Наиболее близкими к заявляемому является способ получения диспиропроизводных соединений на основе 2-тиогидантоинов, являющихся ингибиторами p53-MDM2 взаимодействия, заключающийся в трехкомпонентной реакции 1,3-диполярного циклоприсоединения с изатином, саркозином и 2-тиогидантоином [(1) Yan A. Ivanenkov, et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 25, 2, 2015, 404; (2) Белоглазкина E.К., Белоглазкина A.A. Кукушкин M.E., Мажуга А.Г, Иваненков Я.А. Номер заявки ФИПС 2015113026/04(020403) от 09.04.2015]. Однако, в способе используются эквимолярные соотношения компонентов, все компоненты загружают в реактор и кипятят одновременно. Полученные таким образом соединения обладают низкой цитотоксичностью (около 20 мкМ) и селективностью, а также способ характеризуется низкими выходами (30-60%) соединений. Для всех соединений обсуждается только различные значения по цитотоксичности на клеточных линиях рака простаты LNCap и РС3, отсутствует информация об общей токсичности, а также данные по цитотоксичности на клеточных линиях одной морфологии HCTwt и НСТ-/-.Closest to the claimed one is a method for the preparation of dispersion derivatives based on 2-thiohydantoins, which are inhibitors of p53-MDM2 interaction, which consists in a three-component reaction of 1,3-dipolar cycloaddition with isatin, sarcosine and 2-thiohydantoin [(1) Yan A. Ivanenkov, et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 25, 2, 2015, 404; (2) Beloglazkina E.K., Beloglazkina A.A. Kukushkin M.E., Mazhuga A.G., Ivanenkov Y.A. FIPS application number 2015113026/04 (020403) dated 04/09/2015]. However, the method uses equimolar ratios of the components, all components are loaded into the reactor and boiled at the same time. The compounds thus obtained have low cytotoxicity (about 20 μM) and selectivity, and the method is characterized by low yields (30-60%) of the compounds. For all compounds, only different values of cytotoxicity on the cell lines of prostate cancer LNCap and PC3 are discussed, information on general toxicity, as well as data on cytotoxicity on cell lines of the same morphology of HCTwt and HCT - / -, are not available.

Раскрытие изобретенияDisclosure of invention

Задачей настоящего изобретения является разработка способа получения низкомолекулярных ингибиторов белок-белкового взаимодействия MDM2/p53.An object of the present invention is to provide a method for producing low molecular weight protein-protein interaction inhibitors MDM2 / p53.

Техническим результатом заявляемого изобретения является получение диспиропроизводных на основе 5-арилиден-2-тиоксо-имидазолин-4-онов и 5-арилиден-2-оксо-имидазолин-4-онов позволяет получить соединения с более высокими выходами (не менее 62% по сравнению с 30-60%). Также полученые оксодиспиропроизводные на основе 5-арилиден-2-тиоксо-имидазолин-4-онов и 5-арилиден-2-оксо-имидазолин-4-онов, являющихся ингибиторами белок-белкового взаимодействия MDM2/p53 обладают высокой активностью и селективностью действия в отношении клеток экспрессирующих белок р53 как одной морфологии (HCTwt и НСТ-/-.), так и разной (LNCap и РС3). Данное свойство позволяет использовать активный компонент для лечения заболеваний, связанных с нарушением активности белка р53, с меньшей дозировкой при избирательном действии на раковые клетки, не затрагивая при этом здоровые клетки. При этом, полученные заявляемым способом соединения обладают низкой общей токсичностью, о чем свидетельствует отсутствие активности на клеточной линии здоровых клеток фибробластов легких человека VA13.The technical result of the claimed invention is the production of disper derivatives based on 5-arylidene-2-thioxo-imidazolin-4-ones and 5-arylidene-2-oxo-imidazolin-4-ones allows to obtain compounds with higher yields (not less than 62% compared from 30-60%). Also, the obtained oxodispiro derivatives based on 5-arylidene-2-thioxo-imidazolin-4-ones and 5-arylidene-2-oxo-imidazolin-4-ones, which are MDM2 / p53 protein-protein interaction inhibitors, have high activity and selectivity of action with respect to cells expressing p53 protein as one morphology (HCTwt and HCT - / -.), and different (LNCap and PC3). This property allows you to use the active component for the treatment of diseases associated with impaired activity of the p53 protein, with a lower dosage with a selective effect on cancer cells, without affecting healthy cells. Moreover, the compounds obtained by the claimed method have low general toxicity, as evidenced by the lack of activity of healthy VA13 human lung fibroblast cells on the cell line.

Поставленная задача решается способом получения диспиро-индолинонов общей формулы 1:The problem is solved by the method of producing dispiro-indolinones of the general formula 1:

где X S или О, R1 выбран из группы, включающей водород, фенил, фенил, замещенный 1-2 заместителями, выбранными из атома галогена (фтор, хлор, бром), гидрокси-, низшей алкокси-группы (метокси, этокси, изопропилокси, пропаргилокси) или С1-С6 алкила (метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил); R2 выбран из группы, включающей незамещенный пиридил или фенил, замещенный 1-2 заместителями, выбранными из атома галогена (фтор, хлор, бром), гидрокси-, низшей алкокси-группы (метокси, этокси, изопропилокси, пропаргилокси), альдегидную группу или С1-С6 алкила (метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил); R3 выбран из группы, включающей атом галогена, водорода или нитро-группу; R4 представляет собой С1-С5 алкил (метил, этил, пропил, бутил, пентил); R5 представляет собой атом водорода или алкил С1-С3 (метил, этил, пропил), характеризующийся тем, что 1±0.1 мольных экв. соответствующего имидазолидин-4-она растворяют в одноатомном спирте, взятого в количестве 10 мл на 0.5±0.1 ммоль и кипятят при температуре 100±10°С в течение 10±2 минут после закипания образовавшегося раствора, затем в кипящую смесь добавляют саркозин, взятый из расчета 2±0.2 экв. и соответствующего изатина, взятого в количестве 2±0.2 экв по отношению к соответствующему имидазолидин-4-ону, полученную смесь кипят до окончания реакции, затем смесь охлаждают до комнатной температуры, выпавший осадок отфильтровывают на вакууме со стеклянным пористым фильтром и колбой Бунзена.where XS or O, R1 is selected from the group consisting of hydrogen, phenyl, phenyl substituted with 1-2 substituents selected from a halogen atom (fluorine, chlorine, bromine), hydroxy, lower alkoxy groups (methoxy, ethoxy, isopropyloxy, propargyloxy ) or C1-C6 alkyl (methyl, ethyl, propyl, butyl, pentyl, hexyl); R2 is selected from the group consisting of unsubstituted pyridyl or phenyl substituted with 1-2 substituents selected from a halogen atom (fluorine, chlorine, bromine), hydroxy, lower alkoxy groups (methoxy, ethoxy, isopropyloxy, propargyloxy), aldehyde group, or C1 -C6 alkyl (methyl, ethyl, propyl, butyl, pentyl, hexyl); R3 is selected from the group consisting of a halogen atom, hydrogen, or a nitro group; R4 is C1-C5 alkyl (methyl, ethyl, propyl, butyl, pentyl); R5 represents a hydrogen atom or C1-C3 alkyl (methyl, ethyl, propyl), characterized in that 1 ± 0.1 molar equivalents. the corresponding imidazolidin-4-one is dissolved in monohydric alcohol taken in an amount of 10 ml per 0.5 ± 0.1 mmol and boiled at a temperature of 100 ± 10 ° C for 10 ± 2 minutes after boiling the resulting solution, then sarcosine taken from calculation 2 ± 0.2 eq. and the corresponding isatin, taken in an amount of 2 ± 0.2 eq relative to the corresponding imidazolidin-4-one, the resulting mixture was boiled until the reaction was completed, then the mixture was cooled to room temperature, the precipitate was filtered off under vacuum with a glass porous filter and a Bunsen flask.

Предметом данного изобретения является активный компонент, обладающий свойством ингибитора белок-белкового взаимодействия MDM2/p53, представляющее собой соединение общей формулы 1.The subject of this invention is an active component having the property of a protein-protein interaction inhibitor MDM2 / p53, which is a compound of general formula 1.

Осуществление изобретенияThe implementation of the invention

Ниже приведены определения терминов, которые используются в описании настоящего изобретения.The following are definitions of terms that are used in the description of the present invention.

«IC₅₀» (ПК₅₀) - концентрация соединения, при которой наблюдается 50% ингибирование ферментативной активности."IC ₅₀ " (PK ₅₀ ) is the concentration of the compound at which 50% inhibition of enzymatic activity is observed.

«Алифатический заместитель» (алкил, алкенил, алкинил) означает алифатическую углеводородную линейную или разветвленную группу с 1-12 атомами углерода в цепи, необязательно содержащий двойную или тройную связь. Разветвленная означает, что алкильная цепь имеет один или несколько «низших алкильных» заместителей. Алкил, алкенил, алкинил могут иметь один или несколько одинаковых или различных заместителей («алкильных заместителей») включая галоген, алкенилокси, циклоалкил, арил, гетероарил, гетероциклил, ароил, циано, гидрокси, алкокси, карбокси, алкинилокси, аралкокси, арилокси, арилоксикарбнил, алкилтио, гетероарилтио, аралкилтио, арилсульфонил, алкилсульфонилгетероаралкилокси, аннелированный гетероарилциклоалкенил, аннелированный гетероарилциклоалкил, аннелированный гетероарилгетероцикленил, аннелированный гетероарилгетероциклил, аннелированный арилциклоалкенил, аннелированный арилциклоалкил, аннелированный арилгетероцикленил, аннелированный арилгетероциклил, алкоксикарбонил, аралкоксикарбонил, гетероаралкилоксикарбонил или R_k ^aR_k+1 ^aN-, R_k ^aR_k+1 ^aNC(=O)-, R_k ^aR_k+1 ^aNC(=S)-, R_k ^aR_k+1 ^aNSO₂-, где R_k ^a и R_k+1 ^a независимо друг от друга представляют собой «заместители амино группы», например, атом водорода, алкил, арил, аралкил, гетероаралкил, гетероциклил или гетероарил, или R_k ^a и R_k+1 ^a вместе с атомом N, с которым они связаны, образуют через R_k ^a и R_k+1 ^a 4-7 членный гетероциклил или гетероцикленил. Предпочтительными алкильными группами являются метил, трифторметил, циклопропилметил, циклопентилметил, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, трет-бутил, н-пентил, 3-пентил, метоксиэтил, карбоксиметил, метоксикарбонилметил, этоксикарбонилметил, бензилоксикарбонилметил метоксикарбонилметил и пиридилметилоксикарбнилметил. Предпочтительными «алкильными заместителями» являются циклоалкил, арил, гетероарил, гетероциклил, гидрокси, алкокси, алкоксикарбонил, аралкокси, арилокси, алкилтио, гетероарилтио, аралкилтио, алкилсульфонил, арилсульфонил, алкоксикарбонил, аралкоксикарбонил, гетероаралкилоксикарбонил или R_k ^aR_k+1 ^aN-, R_k ^aR_k+1 ^aNC(=O)-, аннелированный арилгетероцикленил, аннелированный арилгетероциклил."Aliphatic substituent" (alkyl, alkenyl, alkynyl) means an aliphatic hydrocarbon linear or branched group with 1-12 carbon atoms in the chain, optionally containing a double or triple bond. Branched means that the alkyl chain has one or more "lower alkyl" substituents. Alkyl, alkenyl, alkynyl may have one or more of the same or different substituents (“alkyl substituents”) including halogen, alkenyloxy, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, heterocyclyl, aroyl, cyano, hydroxy, alkoxy, carboxy, alkynyloxy, aralkoxy, aryloxy, aryloxycarbonyl , alkylthio, heteroarylthio, aralkylthio, arylsulfonyl, alkylsulfonylheteroaralkyloxy, annelated heteroarylcycloalkenyl, annelated heteroarylcycloalkyl, annelated heteroarylheterocyclenyl, annelated heteroarylheterocycle ovanny arylcycloalkenyl, annelated arylcycloalkyl, annelated arylheterocyclenyl, annelated arylheterocyclyl, alkoxycarbonyl, aralkoxycarbonyl, geteroaralkiloksikarbonil or R _k ^a R _{k + 1 ^{a N-, R k a R k}} + ₁ ^{a NC (= O) -,} R k a R k + ₁ ^a NC (= S) -, R _k ^a R _{k + 1} ^a NSO ₂ -, where R _k ^a and R _{k + 1} ^{a are} independently “amino substituents”, for example, a hydrogen atom, an alkyl, aryl, aralkyl, heteroaralkyl, heterocyclyl or heteroaryl, or R _k ^a and R _{k + 1} ^a, together with the N atom to which they are bonded, form ^a 4-7 membered heterocyclyl or heterocyclenyl through R _k ^a and R _{k + 1} ^a . Preferred alkyl groups are methyl, trifluoromethyl, cyclopropylmethyl, cyclopentylmethyl, ethyl, n-propyl, iso-propyl, n-butyl, tert-butyl, n-pentyl, 3-pentyl, methoxyethyl, carboxymethyl, methoxycarbonylmethylmethyloxycarbonylmethyloxycarbonylmethyloxycarbonylmethyloxycarbonylmethyloxycarbonylmethyloxycarbonylmethyloxycarbonylmethylene . The preferred "alkyl substituents" are cycloalkyl, aryl, heteroaryl, heterocyclyl, hydroxy, alkoxy, alkoxycarbonyl, aralkoxy, aryloxy, alkylthio, heteroarylthio, aralkylthio, alkylsulfonyl, arylsulfonyl, alkoxycarbonyl, aralkoxycarbonyl, geteroaralkiloksikarbonil or R _k ^a R _{k + 1} ^a N- , R _k ^a R _{k + 1} ^a NC (= O) -, annelated arylheterocyclenyl, annelated arylheterocyclyl.

Предпочтительными алкильными группами в данном изобретении являются аллил, циклопропил, циклогексил и 4-этилморфолин.Preferred alkyl groups in this invention are allyl, cyclopropyl, cyclohexyl and 4-ethylmorpholine.

«Арил» означает ароматическую моноциклическую или полициклическую систему, включающую от 6 до 14 атомов углерода, преимуществено от 6 до 10 атомов углерода. Арил может содержать один или более «заместителей циклической системы», которые могут быть одинаковыми или разными. Представителями арильных групп являются фенил или нафтил, замещенный фенил или замещенный нафтил. Арил может быть аннелирован с ароматической и неароматической циклической системой или гетероциклом, включая арил, ароил, аралкокси, арилгидрокси, арилокси, арилоксикарбонил, аралкилтио, арилсульфонил, арилгалоген, гетероарил гетероциклил, гетероаралкилокси, гетероарилтио, аннелированный гетероарилциклоалкенил, аннелированный гетероарилциклоалкил, аннелированный гетероарилгетероцикленил, аннелированный гетероарилгетероциклил, аннелированный арилциклоалкенил, аннелированный арилциклоалкил, аннелированный арилгетероцикленил, аннелированный арилгетероциклил, алкоксикарбонил, аралкоксикарбонил, гетероаралкилоксикарбонил или R_k ^aR_k+1 ^aN-, R_k ^aR_k+1 ^aNC(=O)-, R_k ^aR_k+1 ^aNC(=S)-, R_k ^aR_k+1 ^aNSO₂-, где R_k ^a и R_k+1 ^a независимо друг от друга представляют собой «заместители амино группы», значение которых определено в данном разделе.“Aryl” means an aromatic monocyclic or polycyclic system comprising from 6 to 14 carbon atoms, preferably from 6 to 10 carbon atoms. Aryl may contain one or more “cyclic system substituents”, which may be the same or different. Representative aryl groups are phenyl or naphthyl, substituted phenyl or substituted naphthyl. Aryl could be annelated with aromatic and nonaromatic cyclic system or heterocycle, including aryl, aroyl, aralkoxy, arilgidroksi, aryloxy, aryloxycarbonyl, aralkylthio, arylsulfonyl, arilgalogen, heteroaryl, heterocyclyl, heteroaralkyloxy, heteroarylthio, annelated heteroarylcycloalkenyl, annelated heteroarylcycloalkyl, annelated heteroarylheterocyclenyl, annelated heteroarylheterocyclyl annelated arylcycloalkenyl, annelated arylcycloalkyl, annelated arylheterocyclenyl, and non-lined arylheterocyclyl, alkoxycarbonyl, aralkoxycarbonyl, heteroaralkyloxycarbonyl or R _k ^a R _{k + 1} ^a N-, R _k ^a R _{k + 1} ^a NC (= O) -, R _k ^a R _{k + 1} ^a NC (= S) -, R _k ^a R _{k + 1} ^a NSO ₂ -, where R _k ^a and R _{k + 1} ^{a are} independently “amino substituents”, the meaning of which is defined in this section.

Предпочтительными арильными группами в данном изобретении являются фенил C₆H₅-, 3-хлор-4-фторфенил 3-Cl-4-F-C₆H₃-, 4-этоксифенил 4-C₂H₅O-C₆H₄-, 3-хлор-4-этоксифенил 3-Cl-4- C₂H₅O-C₆H₃-, 2-хлорфенил 2-Cl-C₆H₄-, 4-хлорфенил 4-Cl-C₆H₄-, 4-этилфенил 4-C₂H₅-C₆H₄-, 3,4-диметоксифенил 3,4-ОМе-C₆H₃-,4-метоксифенил 4-СН₃О-C₆H₄-, 4-фторфенил 4-F-C₆H₄-, 4-бромфенил 4-Br-C₆H₄-, 4-пропилоксифенил 4-O(iC₃H₇)C₆H₄, циклопентоксибензил.Preferred aryl groups in this invention are phenyl C ₆ H ₅ -, 3-chloro-4-fluorophenyl 3-Cl-4-FC ₆ H ₃ -, 4-ethoxyphenyl 4-C ₂ H ₅ OC ₆ H ₄ -, 3- chloro-4-ethoxyphenyl 3-Cl-4- C ₂ H ₅ OC ₆ H ₃ -, 2-chlorophenyl 2-Cl-C ₆ H ₄ -, 4-chlorophenyl 4-Cl-C ₆ H ₄ -, 4-ethylphenyl 4-C ₂ H ₅ -C ₆ H ₄ -, 3,4-dimethoxyphenyl 3,4-OMe-C ₆ H ₃ -, 4-methoxyphenyl 4-CH ₃ O-C ₆ H ₄ -, 4-fluorophenyl 4- FC ₆ H ₄ -, 4-bromophenyl 4-Br-C ₆ H ₄ -, 4-propyloxyphenyl 4-O (iC ₃ H ₇ ) C ₆ H ₄ , cyclopentoxybenzyl.

«Белок-белковое взаимодействие» означает установление связей между белками р53 и MDM2 в результате их взаимодействий за счет электростатических, гидрофобных или гидрофильных контактов.“Protein-protein interaction” means the establishment of bonds between p53 and MDM2 proteins as a result of their interactions through electrostatic, hydrophobic or hydrophilic contacts.

«Галоген» означает фтор, хлор, бром и йод. Предпочтительными являются фтор, хлор и бром.“Halogen” means fluoro, chloro, bromo and iodo. Fluorine, chlorine and bromine are preferred.

«Гетероциклил» (гетероциклический заместитель) означает ароматическую или неароматическую насыщенную моноциклическую или полициклическую систему, включающую от 3 до 10 атомов углерода, преимущественно от 5 до 6 атомов углерода, в которой один или несколько атомов углерода заменены на гетероатом, такой как азот, кислород, сера. Приставка «аза», «окса» или «тиа» перед гетероциклилом означает наличие в циклической системе, атома азота, атома кислорода или атома серы, соответственно. Гетероциклил может иметь один или несколько «заместителей циклической системы», которые могут быть одинаковыми или разными. Атомы азота и серы, находящиеся в гетероциклиле могут быть окислены до N-оксида, S-оксида или S-диоксида. Представителями гетероциклилов являются пиперидин, пирролидин, пиперазин, морфолин, тиоморфолин, тиазолидин, 1,4-диоксан, тетрагидрофуран, тетрагидротиофен, гетероаралкил, гетероциклил или гетероарил, или R_k ^a и R_k+1 ^a вместе с атомом N, с которым они связаны, образуют через R_k ^a и R_k+1 ^a 4-7 членный гетероцикл.“Heterocyclyl” (heterocyclic substituent) means an aromatic or non-aromatic saturated monocyclic or polycyclic system comprising from 3 to 10 carbon atoms, preferably from 5 to 6 carbon atoms, in which one or more carbon atoms are replaced by a heteroatom such as nitrogen, oxygen, sulfur. The prefix "aza", "oxa" or "thia" before heterocyclyl means the presence in the cyclic system of a nitrogen atom, an oxygen atom or a sulfur atom, respectively. Heterocyclyl may have one or more “cyclic system substituents,” which may be the same or different. The nitrogen and sulfur atoms in the heterocyclyl can be oxidized to N-oxide, S-oxide or S-dioxide. Representative heterocyclyls are piperidine, pyrrolidine, piperazine, morpholine, thiomorpholine, thiazolidine, 1,4-dioxane, tetrahydrofuran, tetrahydrothiophene, heteroaralkyl, heterocyclyl or heteroaryl, or R _k ^a and R _{k + 1} ^a with which they are bonded to the N atom with which form through R _k ^a and R _{k + 1} ^a 4-7 membered heterocycle.

Предпочтительной гетероциклической группой в данном изобретении является пиридин.The preferred heterocyclic group in this invention is pyridine.

«Гидрат» означает сольват, в котором вода является молекулой или молекулами растворителя."Hydrate" means a solvate in which water is a molecule or molecules of a solvent.

«Заместитель» означает химический радикал, который присоединяется к скэффолду (фрагменту), например, «заместитель алкильный», «заместитель амино группы», «заместитель карбамоильный», «заместитель циклической системы», значения которых определен в данном разделе.“Substituent” means a chemical radical that is attached to a scaffold (fragment), for example, “substituent alkyl”, “substituent of amino group”, “substituent carbamoyl”, “substituent of the cyclic system”, the meanings of which are defined in this section.

«Лекарственное начало» (активный компонент, лекарственная субстанция лекарственное вещество, drug-substance) означает физиологически активное вещество синтетического или иного (биотехнологического, растительного, животного, микробного и прочего) происхождения, обладающее фармакологической активностью и являющееся активным началом фармацевтической композиции, используемой для производства и изготовления лекарственного препарата (средства).“Medicinal principle” (active component, medicinal substance, medicinal substance, drug-substance) means a physiologically active substance of synthetic or other (biotechnological, plant, animal, microbial and other) origin, having pharmacological activity and being the active principle of the pharmaceutical composition used for the manufacture and the manufacture of a drug (agent).

«Лекарственное средство (препарат)» - вещество (или смесь веществ в виде фармацевтической композиции), в виде таблеток капсул инъекций, мазей и др. готовых форм предназначенное для восстановления, исправления или изменения физиологических функций у человека и животных, а также для лечения и профилактики болезней, диагностики, анестезии, контрацепции, косметологии и прочего.“Medicinal product (preparation)” - a substance (or a mixture of substances in the form of a pharmaceutical composition), in the form of tablets, capsules of injections, ointments, and other finished forms designed to restore, correct, or alter physiological functions in humans and animals, as well as for the treatment and disease prevention, diagnosis, anesthesia, contraception, cosmetology and more.

«Фармацевтическая композиция» обозначает композицию, включающую в себя соединение формулы 1 и, по крайней мере, один из компонентов, выбранных из группы, состоящей из фармацевтически приемлимых и фармакологически совместимых наполнителей, растворителей, разбавителей, носителей, вспомогательных, распределяющих и воспринимающих средств, средств доставки, таких как консерванты, стабилизаторы, наполнители, измельчители, увлажнители, эмульгаторы, суспендирующие агенты, загустители, подсластители, отдушки, ароматизаторы, антибактериальные агенты, фунгициды, лубриканты, регуляторы пролонгированной доставки, выбор и соотношение которых зависит от природы и способа назначения и дозировки. Примерами суспендирующих агентов являются этоксилированный изостеариловый спирт, полиоксиэтилен, сорбитол и сорбитовый эфир, микрокристаллическая целлюлоза, метагидроксид алюминия, бентонит, агар-агар и трагакант, а также смеси этих веществ. Защита от действия микроорганизмов может быть обеспечена с помощью разнообразных антибактериальных и противогрибковых агентов, например, таких как, парабены, хлорбутанол, сорбиновая кислота и подобные им соединения. Композиция может включать также изотонические агенты, например, сахара, хлористый натрий и им подобные. Пролонгированное действие композиции может быть обеспечено с помощью агентов, замедляющих абсорбцию активного начала, например, моностеарат алюминия и желатин. Примерами подходящих носителей, растворителей, разбавителей и средств доставки являются вода, этанол, полиспирты, а также их смеси, растительные масла (такие, как оливковое масло) и инъекционные органические сложные эфиры (такие, как этилолеат). Примерами наполнителей являются лактоза, молочный сахар, цитрат натрия, карбонат кальция, фосфат кальция и им подобные. Примерами измельчителей и распределяющих средств являются крахмал, алгиновая кислота и ее соли, силикаты. Примерами лубрикантов являются стеарат магния, лаурилсульфат натрия, тальк, а также полиэтиленгликоль с высоким молекулярным весом. Фармацевтическая композиция для перорального, сублингвального, трансдермального, внутримышечного, внутривенного, подкожного, местного или ректального введения активного начала, одного или в комбинации с другим активным началом, может быть введена животным и людям в стандартной форме введения, в виде смеси с традиционными фармацевтическими носителями. Пригодные стандартные формы введения включают пероральные формы, такие как таблетки, желатиновые капсулы, пилюли, порошки, гранулы, жевательные резинки и пероральные растворы или суспензии, сублингвальные и трансбуккальные формы введения, аэрозоли, имплантаты, местные, трансдермальные, подкожные, внутримышечные, внутривенные, интраназальные или внутриглазные формы введения и ректальные формы введения."Pharmaceutical composition" means a composition comprising a compound of formula 1 and at least one of the components selected from the group consisting of pharmaceutically acceptable and pharmacologically compatible excipients, solvents, diluents, carriers, excipients, distributing and perceiving agents, agents delivery, such as preservatives, stabilizers, fillers, grinders, moisturizers, emulsifiers, suspending agents, thickeners, sweeteners, perfumes, flavors, antibacterial agents, fungicides, lubricants, prolonged delivery regulators, the choice and ratio of which depends on the nature and method of administration and dosage. Examples of suspending agents are ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene, sorbitol and sorbitol ether, microcrystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar-agar and tragacanth, as well as mixtures of these substances. Protection against the action of microorganisms can be provided with a variety of antibacterial and antifungal agents, for example, parabens, chlorobutanol, sorbic acid and the like. The composition may also include isotonic agents, for example, sugars, sodium chloride and the like. The prolonged action of the composition can be achieved using agents that slow down the absorption of the active principle, for example, aluminum monostearate and gelatin. Examples of suitable carriers, solvents, diluents and delivery vehicles are water, ethanol, polyalcohols, and also mixtures thereof, vegetable oils (such as olive oil) and injectable organic esters (such as ethyl oleate). Examples of excipients are lactose, milk sugar, sodium citrate, calcium carbonate, calcium phosphate and the like. Examples of grinders and distributors are starch, alginic acid and its salts, silicates. Examples of lubricants are magnesium stearate, sodium lauryl sulfate, talc, and high molecular weight polyethylene glycol. The pharmaceutical composition for oral, sublingual, transdermal, intramuscular, intravenous, subcutaneous, local or rectal administration of the active principle, alone or in combination with another active principle, can be administered to animals and humans in a standard administration form, in the form of a mixture with traditional pharmaceutical carriers. Suitable unit dosage forms include oral forms such as tablets, gelatine capsules, pills, powders, granules, chewing gums and oral solutions or suspensions, sublingual and buccal administration forms, aerosols, implants, local, transdermal, subcutaneous, intramuscular, intravenous, intranasal or intraocular administration forms and rectal administration forms.

«Фармацевтически приемлемая соль» означает относительно нетоксичные органические и неорганические соли кислот и оснований, заявленных в настоящем изобретении. Эти соли могут быть получены in situ в процессе синтеза, выделения или очистки соединений или приготовлены специально. В частности, соли оснований могут быть получены специально, исходя из очищенного свободного основания заявленного соединения и подходящей органической или неорганической кислоты. Примерами полученных таким образом солей являются гидрохлориды, гидробромиды, сульфаты, бисульфаты, фосфаты, нитраты, ацетаты, оксалаты, валериаты, олеаты, пальмитаты, стеараты, лаураты, бораты, бензоаты, лактаты, тозилаты, цитраты, малеаты, фумараты, сукцинаты, тартраты, мезилаты, малонаты, салицилаты, пропионаты, этансульфонаты, бензолсульфонаты, сульфаматы и им подобные (Подробное описание свойств таких солей дано в Berge S.M., et al., "Pharmaceutical Salts" J. Pharm. Sci. 1977, 66: 1-19). Соли заявленных кислот также могут быть специально получены реакцией очищенной кислоты с подходящим основанием, при этом могут быть синтезированы соли металлов и аминов. К металлическим относятся соли натрия, калия, кальция, бария, цинка, магния, лития и алюминия, наиболее желательными из которых являются соли натрия и калия. Подходящими неорганическими основаниями, из которых могут быть получены соли металлов, являются гидроксид, карбонат, бикарбонат и гидрид натрия, гидроксид и бикарбонат калия, поташ, гидроксид лития, гидроксид кальция, гидроксид магния, гидроксид цинка. В качестве органических оснований, из которых могут быть получены соли заявленных кислот, выбраны амины и аминокислоты, обладающие достаточной основностью, чтобы образовать устойчивую соль, и пригодные для использования в медицинских целях (в частности, они должны обладать низкой токсичностью). К таким аминам относятся аммиак, метиламин, диметиламин, триметиламин, этиламин, диэтиламин, триэтиламин, бензиламин, дибензиламин, дициклогексиламин, пиперазин, этилпиперидин, трис(гидроксиметил)аминометан и подобные им. Кроме того, для солеобразования могут быть использованы гидроокиси тетраалкиламмония, например, такие как, холин, тетраметиламмоний, тетраэтиламмоний и им подобные. В качестве аминокислот могут быть использованы основные аминокислоты - лизин, орнитин и аргинин.“Pharmaceutically acceptable salt” means the relatively non-toxic organic and inorganic salts of the acids and bases of the present invention. These salts can be obtained in situ during the synthesis, isolation or purification of the compounds or prepared specially. In particular, base salts can be prepared on the basis of the purified free base of the claimed compound and a suitable organic or inorganic acid. Examples of salts thus obtained are hydrochlorides, hydrobromides, sulfates, bisulfates, phosphates, nitrates, acetates, oxalates, valeriates, oleates, palmitates, stearates, laurates, borates, benzoates, lactates, tosylates, citrates, maleates, fumarates, succinates, tartrates mesylates, malonates, salicylates, propionates, ethanesulfonates, benzenesulfonates, sulfamates and the like (Detailed description of the properties of such salts is given in Berge SM, et al., Pharmaceutical Salts J. Pharm. Sci. 1977, 66: 1-19). Salts of the claimed acids can also be specially prepared by reacting the purified acid with a suitable base, and metal and amine salts can be synthesized. Metal salts include sodium, potassium, calcium, barium, zinc, magnesium, lithium and aluminum salts, the most desirable of which are sodium and potassium salts. Suitable inorganic bases from which metal salts can be obtained are hydroxide, carbonate, sodium bicarbonate and hydride, potassium hydroxide and bicarbonate, potash, lithium hydroxide, calcium hydroxide, magnesium hydroxide, zinc hydroxide. As organic bases from which salts of the claimed acids can be obtained, amines and amino acids are selected that are sufficiently basic to form a stable salt and are suitable for medical use (in particular, they should have low toxicity). Such amines include ammonia, methylamine, dimethylamine, trimethylamine, ethylamine, diethylamine, triethylamine, benzylamine, dibenzylamine, dicyclohexylamine, piperazine, ethylpiperidine, tris (hydroxymethyl) aminomethane and the like. In addition, tetraalkylammonium hydroxides, for example, such as choline, tetramethylammonium, tetraethylammonium and the like, can be used for salt formation. As amino acids, the main amino acids can be used - lysine, ornithine and arginine.

«Циклоалкил» означает не ароматическую моно- или полициклическую систему, включающую от 3 до 10 атомов углерода. Циклоалкил может иметь один или несколько «заместителей циклической системы», которые могут быть одинаковыми или разными. Представителями циклоалкильных групп являются циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, декалин, адамант-1-ил и т.п. Циклоалкил может быть аннелирован с ароматическим циклом или гетероциклом.“Cycloalkyl” means a non-aromatic mono- or polycyclic system containing from 3 to 10 carbon atoms. Cycloalkyl may have one or more “ring system substituents”, which may be the same or different. Representative cycloalkyl groups are cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, decalin, adamant-1-yl, and the like. Cycloalkyl can be annelated with an aromatic ring or heterocycle.

Был проведен синтез разнообразных гетероциклических диспиро соединений [Yan A. Ivanenkov, et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 25, 2, 2015, 404.], а также биологические испытания этих соединений в экспериментах с клеточными линиями HepG2, Hek, MCF-7, SiHa, НСТ p53(+,+) и НСТ р53(-,-), РС3 и LNCap. Заявляемые соединения обладают выраженной активностью по отношению к клеточным линиям, экспрессирующим р53. Были найдены новые производные 2-арил-5-арилметилидензамещенных тетрагидро-4Н-имидазол-4-онов, а также была проведена оптимизация способа получения 2-тиоксо-тетрагидро-4Н-имидазол-4-онов в виде оснований и фармакологически приемлемых солей и гидратов, обладающие свойствами низкомолекулярных ингибиторов белок-белкового взаимодействия MDM2/p53. Получение данных соединений является экономичным и включает в себя три-пять стадий в зависимости от заместителей, не требует применения больших объемов растворителей, в ходе реакции сразу образуется оптически-активная молекула, которая не требует применения дорогостоящих хиральных катализаторов и дальнейшего разделения на хиральных колонках. Эффективность по отношению к белку р53 подтверждается активностью как активностью на опухолевых клеточных линиях, экспрессирующих данный белок (НСТ wt, НСТ -/-, LNCap, РС3), так и полным отсутствием цитотоксического эффекта на нераковых клеточных линиях. Дополнительно, были проведены исследования in vivo, которые также продемонстрировали спосбоность данного класса к торможению роста опухоли лимфолейкоза Р388 на 85%.A synthesis of a variety of heterocyclic dispiro compounds [Yan A. Ivanenkov, et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 25, 2, 2015, 404.], as well as biological tests of these compounds in experiments with cell lines HepG2, Hek, MCF-7, SiHa, HCT p53 (+, +) and HCT p53 (-, -), PC3 and LNCap. The inventive compounds have a pronounced activity against cell lines expressing p53. New derivatives of 2-aryl-5-arylmethylidene-substituted tetrahydro-4H-imidazol-4-ones were found, and a method for the preparation of 2-thioxo-tetrahydro-4H-imidazole-4-ones in the form of bases and pharmacologically acceptable salts and hydrates was optimized having the properties of low molecular weight protein-protein interaction inhibitors MDM2 / p53. The preparation of these compounds is economical and involves three to five stages depending on the substituents, does not require the use of large volumes of solvents, an optically active molecule is formed immediately during the reaction, which does not require the use of expensive chiral catalysts and further separation on chiral columns. Efficiency with respect to the p53 protein is confirmed by activity both on activity on tumor cell lines expressing this protein (HCT wt, HCT - / -, LNCap, PC3), and the complete absence of a cytotoxic effect on non-cancer cell lines. Additionally, in vivo studies were conducted that also demonstrated the ability of this class to inhibit the growth of P388 lymphocytic leukemia tumor by 85%.

Известно, что применяемые ингибиторы белок-белкового взаимодействия р53-MDM2 в экспериментах на аналогичных клеточных линиях показывают худшую активность [Zhao, Y.; Liu, L.; Sun, W.; Lu, J.; McEachern, D.; Li, X.; Yu, S.; Bernard, D.; Ochsenbein, P.; Ferey, V.; Carry, J.-C.; Deschamps, J.R.; Sun, D.; Wang, S. Diastereomeric spirooxindoles as highly potent and efficacious MDM2 inhibitors. J. Am. Chem. Soc. 2013, 135, 7223-7734], однако в настоящее время они проходят дальнейшие клинические испытания в терапии онкологических заболеваний, что свидетельствует о перспективности исследуемых в настоящей заявке ингибиторов. В настоящий момент, на основании предложенной ранее методики получения диспиропроизводных на основе 2-арил-5-арилметилидензамещенных тетрагидро-4Н-имидазол-4-онов [Yan A. Ivanenkov, et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 25, 2, 2015, 404] была произведена оптимизация и получены новые ингибиторы p53-MDM2 взаимодействия.The p53-MDM2 protein-protein interaction inhibitors used are known to exhibit poorer activity in experiments on similar cell lines [Zhao, Y .; Liu, L .; Sun, W .; Lu, J .; McEachern, D .; Li, X .; Yu, S .; Bernard, D .; Ochsenbein, P .; Ferey, V .; Carry, J.-C .; Deschamps, J.R .; Sun, D .; Wang, S. Diastereomeric spirooxindoles as highly potent and efficacious MDM2 inhibitors. J. Am. Chem. Soc. 2013, 135, 7223-7734], however, they are currently undergoing further clinical trials in the treatment of cancer, which indicates the promise of the inhibitors studied in this application. Currently, on the basis of the previously proposed method for the preparation of disper derivatives based on 2-aryl-5-arylmethylidene substituted tetrahydro-4H-imidazol-4-ones [Yan A. Ivanenkov, et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 25, 2, 2015, 404] was optimized and new inhibitors of p53-MDM2 interaction were obtained.

Соотношение реагентов на конечной стадии образования диспиропрозводного, заключающееся в двукратном избытке изатина и саркозина по отношению к исходному 2-арил-5-арилметилидензамещенному тетрагидро-4Н-имидазол-4-ону, а также порядок добавления реагентов (первоначальное добавлениие саркозина в кипящий раствор с последующим добавлением изатина), позволяет улучшить выходы конечных ингибиторов в 1,5-3 раза, а также добиться значений цитотоксичности на два порядка, чем у соединений, полученных другим способом.The ratio of reagents at the final stage of the formation of dihydroisolate, consisting in a twofold excess of isatin and sarcosine relative to the starting 2-aryl-5-arylmethylidene-substituted tetrahydro-4H-imidazole-4-one, as well as the order of addition of the reagents (initial addition of sarcosine to a boiling solution followed by by adding isatin), it allows to improve the yields of the final inhibitors by 1.5-3 times, and also achieve cytotoxicity values by two orders of magnitude than that of compounds obtained in another way.

Для получения заявляемых соединений 1±0.1 экв. соответствующего имидазолидин-4-она растворяют в одноатомном спирте (например, этанол, метанол), взятого в количестве 10 мл на 0.5±0.1 ммоль и кипятят при температуре 100±10°С в течение 10±2 минут после закипания образовавшегося раствора, затем в кипящую смесь добавляют саркозин, взятый из расчета 2±0.2 экв. и, после повторного закипания, соответствующего изатина, взятого в количестве 2±0.2 экв по отношению к соответствующему имидазолидин-4-ону. Полученную смесь кипят до окончания реакции, окончание реакции определяют по возникновению пятна нового продукта на ТСХ в системе петролейный эфир : этилацетат = 3:1. В среднем реакция протекает в течение 7±2 часов. После охлаждения смеси до комнатной температуры на воздухе наблюдают выпадение белого осадка. Затем выпавший осадок отфильтровывают на вакууме со стеклянным пористым фильтром и колбой Бунзена.To obtain the claimed compounds 1 ± 0.1 eq. the corresponding imidazolidin-4-one is dissolved in monohydric alcohol (for example, ethanol, methanol) taken in an amount of 10 ml per 0.5 ± 0.1 mmol and boiled at a temperature of 100 ± 10 ° C for 10 ± 2 minutes after boiling the resulting solution, then in sarcosine, taken from the calculation of 2 ± 0.2 equiv. and, after repeated boiling, the corresponding isatin taken in an amount of 2 ± 0.2 eq. relative to the corresponding imidazolidin-4-one. The resulting mixture is boiled until the end of the reaction, the end of the reaction is determined by the appearance of a stain of a new product on TLC in the system of petroleum ether: ethyl acetate = 3: 1. On average, the reaction proceeds within 7 ± 2 hours. After the mixture was cooled to room temperature in air, a white precipitate was observed. Then the precipitate formed is suction filtered with a glass porous filter and a Bunsen flask.

Общая схема синтеза получаемых соединений исходя из 2-аридиден-замещенных 2-тиогидантоинов представлена на следующей синтетической схеме:The general scheme for the synthesis of the obtained compounds based on 2-aridide-substituted 2-thiohydantoins is presented in the following synthetic scheme:

Таким образом, за счет использования двукратного избытка компонентов на конечной стадии, последовательности введения реагентов, экологичной температуры 100±10°С, были синтезированы диспиропроизводные на основе 5-арилиден-2-тиоксо-имидазолин-4-онов, но также и их оксоаналогов. Цитотоксичность получаемых соединений была оценена не только на линиях рака простаты LNCap и РС3, но также и на клеточных линиях экспрессирующих белок р53 как одной морфологии (HCTwt и НСТ-/-.). По сравнению с близким прототипом значения IC₅₀ которого составляли 10-20 мкМ, для получаемых целевых соединений значения цитотоксичности составили) 0,5-10 мкМ для клеточных линий, экспресиирующих р53 и ≥50 мкМ для неэкспрессирующих; получаемые соединения оксазались нетоксичными по отношению к нераковым линиям фибробластов легких человека VA13 по сравнению с предыдущим методом [Yan A. Ivanenkov, et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 25, 2, 2015, 404].Thus, due to the use of a twofold excess of components at the final stage, the sequence of the introduction of the reagents, and the ecological temperature of 100 ± 10 ° С, the spiro derivatives based on 5-arylidene-2-thioxo-imidazolin-4-ones, but also their oxo analogs, were synthesized. The cytotoxicity of the compounds obtained was evaluated not only on the prostate cancer lines LNCap and PC3, but also on cell lines expressing p53 protein as one morphology (HCTwt and HCT - / -.). Compared with the close prototype, the IC ₅₀ values of 10-20 μM, for the obtained target compounds, the cytotoxicity values were) 0.5-10 μM for cell lines expressing p53 and ≥50 μM for non-expressing; the compounds obtained were found to be non-toxic to non-cancerous lines of human lung fibroblasts VA13 compared to the previous method [Yan A. Ivanenkov, et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 25, 2, 2015, 404].

Для получения солей была использована методика, разработанная авторами ранее [Белоглазкина Е.К., Белоглазкина А.А. Кукушкин М.Е., Мажуга А.Г, Иваненков Я.А., заявка РФ №2015113026/04(020403) от 9.04.2015].To obtain salts, the technique developed by the authors earlier was used [Beloglazkina E.K., Beloglazkina A.A. Kukushkin M.E., Mazhuga A.G., Ivanenkov Y.A., application of the Russian Federation No. 2015113026/04 (020403) dated 04/09/2015].

Фармацевтические композиции могут включать фармацевтически приемлемые эксципиенты. Под фармацевтически приемлемым эксципиентами подразумеваются применяемые в сфере фармацевтики разбавители, вспомогательные агенты и/или носители. Фармацевтическая композиция наряду с соединением общей формулы 1, или его фармацевтически приемлемой солью и/или гидратом по настоящему изобретению, может включать и другие активные субстанции, в том числе обладающие противоопухолевой активностью, при условии, что они не вызывают нежелательных эффектов.Pharmaceutical compositions may include pharmaceutically acceptable excipients. By pharmaceutically acceptable excipients are meant diluents, excipients and / or carriers used in the pharmaceutical field. The pharmaceutical composition along with the compound of general formula 1, or a pharmaceutically acceptable salt and / or hydrate thereof of the present invention, may include other active substances, including those having antitumor activity, provided that they do not cause undesirable effects.

При необходимости использования фармацевтической композиции по настоящему изобретению в клинической практике она может смешиваться с традиционными фармацевтическими носителями.If necessary, the use of the pharmaceutical composition of the present invention in clinical practice, it can be mixed with traditional pharmaceutical carriers.

Носители, используемые в фармацевтических композиций по настоящему изобретению, представляют собой носители, которые применяются в сфере фармацевтики для получения распространенных форм, в том числе: в пероральных формах используются связующие вещества, смазывающие агенты, дезинтеграторы, растворители, разбавители, стабилизаторы, суспендирующие агенты, бесцветные агенты, корригенты вкуса; в формах для инъекций используются антисептические агенты, солюбилизаторы, стабилизаторы; в местных формах используются основы, разбавители, смазывающие агенты, антисептические агенты.The carriers used in the pharmaceutical compositions of the present invention are carriers that are used in the pharmaceutical industry to obtain common forms, including: in oral forms, binders, lubricants, disintegrants, solvents, diluents, stabilizers, suspending agents, colorless are used agents, flavoring agents of taste; antiseptic agents, solubilizers, stabilizers are used in injection forms; in local forms, bases, diluents, lubricants, antiseptic agents are used.

Лекарственное средство для профилактики и лечения пролиферативных заболеваний, связанных с белок-белковым взаимодействием MDM2/p53, а именно рак простаты и колоректальный рак, являющиеся наиболее распространенными заболеваниями данного типа, в виде таблеток, капсул или инъекций, помещенных в фармацевтически приемлемую упаковку, содержащее в эффективном количестве активный компонент или фармацевтическую композицию по настоящему изобретению.A drug for the prevention and treatment of proliferative diseases associated with the protein-protein interaction MDM2 / p53, namely prostate cancer and colorectal cancer, which are the most common diseases of this type, in the form of tablets, capsules or injections, placed in a pharmaceutically acceptable package containing an effective amount of an active ingredient or pharmaceutical composition of the present invention.

В соответствии с данным изобретением способ профилактики или лечения пролиферативных заболеваний, связанных с белок-белковым взаимодействием MDM2/p53 у животных и людей, заключается во введении пациенту нового лекарственного средства или новой фармацевтической композиции.In accordance with this invention, a method for the prevention or treatment of proliferative diseases associated with the protein-protein interaction of MDM2 / p53 in animals and humans, is the introduction of a new drug or a new pharmaceutical composition to a patient.

Лекарственные средства могут вводиться перорально или парентерально (например, внутривенно, подкожно, внутрибрюшинно или местно). Клиническая дозировка средства, содержащего соединение общей формулы 1, у пациентов может корректироваться в зависимости от терапевтической эффективности и биодоступности активных ингредиентов в организме, скорости их обмена и выведения из организма, а также в зависимости от возраста, пола и стадии заболевания пациента, при этом суточная доза у взрослых обычно составляет 10~500 мг, предпочтительно - 50~300 мг. Поэтому во время приготовления из фармацевтической композиции лекарственного средства по настоящему изобретению в виде единиц дозировки необходимо учитывать вышеназванную эффективную дозировку, при этом каждая единица дозировки препарата должна содержать 10~500 мг средства общей формулы 1, предпочтительно - 50~300 мг. В соответствии с указаниями врача или фармацевта данные препараты могут приниматься несколько раз в течение определенных промежутков времени (предпочтительно - от одного до шести раз) до достижения терапевтического эффекта.Medicines can be administered orally or parenterally (for example, intravenously, subcutaneously, intraperitoneally or topically). The clinical dosage of an agent containing a compound of general formula 1 in patients can be adjusted depending on the therapeutic efficacy and bioavailability of the active ingredients in the body, their metabolic rate and excretion from the body, as well as on the age, sex and stage of the patient’s disease. the dose in adults is usually 10 ~ 500 mg, preferably 50 ~ 300 mg. Therefore, when preparing the pharmaceutical composition of the drug of the present invention in the form of dosage units, the above effective dosage must be taken into account, with each dosage unit of the drug containing 10 ~ 500 mg of the agent of general formula 1, preferably 50 ~ 300 mg. In accordance with the instructions of a doctor or pharmacist, these drugs can be taken several times during certain periods of time (preferably from one to six times) until a therapeutic effect is achieved.

Представленные ниже примеры иллюстрируют, но не ограничивают настоящее изобретение.The following examples illustrate but do not limit the present invention.

Пример 1. Получение 1-(3-хлор-4-фторфенил)-4'-(4-изопропилоксифенил)-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.1).Example 1. Obtaining 1- (3-chloro-4-fluorophenyl) -4 '- (4-isopropyloxyphenyl) -1'-methyl-2-thioxo-5H-disiro [imidazolidin-4,3'-pyrrolidin-2', 3 '' - indole] -2 '', 5 (1``H) dione (1.1).

Смесь 0,25 г (0,6 ммоль, 1±0.1 экв.) соответствующего (Z)-3-(4-хлор-3-фторфенил)-5-(4-изопропилоксибензилиден)-2-тиоксоимидазолидин-4-она растворяли в 10 мл этанола и кипятили в течение 10 минут при температуре 80°С, после чего добавляли 0,11 г (1,2 ммоль, 2±0.2 экв.) саркозина, и 0,18 г (1,2 ммоль, 2±0.2 экв.) изатина и кипятили в течение 7 часов (окончание реакции определяют по ТСХ). Затем выпавший осадок отфильтровывали и промывали при необходимости спиртом. Выход составил 69%. Т_пл=271°C.A mixture of 0.25 g (0.6 mmol, 1 ± 0.1 equiv.) Of the corresponding (Z) -3- (4-chloro-3-fluorophenyl) -5- (4-isopropyloxybenzylidene) -2-thioxoimidazolidin-4-one was dissolved in 10 ml of ethanol and boiled for 10 minutes at a temperature of 80 ° C, after which 0.11 g (1.2 mmol, 2 ± 0.2 equiv.) of sarcosine were added, and 0.18 g (1.2 mmol, 2 ± 0.2 equiv.) Of isatin and boiled for 7 hours (the end of the reaction was determined by TLC). Then, the precipitate formed was filtered off and washed with alcohol if necessary. The yield was 69%. _Mp = 271 ° C.

¹Н NMR (400 MHz, DMSO-d₆), δ, ppm (J, Hz): 1.25 (s, 3H, CH₃,i-C₃H₇), 1.27 (s, 3H, CH₃,i-C₃H₇), 2.14 (s, 3H, NCH₃), 3.43 (t, J=8.7 Hz, 1H, CH-H), 3.95 (t, J=9.4 Hz, 1H, CH), 4.27 (t, J=9.3 Hz, 1H, CH-H), 4.61 (m, 1H, CH, i-C₃H₇), 6.68 (m, 1H, ArH), 6.78 (m, 1H, ArH), 6.87 (m, 3H, ArH), 7.01 (t, J=7.6 Hz, 1H, ArH), 7.31-7.37 (m, 4H, ArH), 7.46 (t, J=8.9 Hz, 1H, ArH), 10.34 (s, 1H, NH), 10.66 (s, 1H, NH). Найдено, %: С 60.93; H 4.23; N 9.34. C₂₉H₂₆ClFN₄O₃S. Вычислено, %: С 61.64; Н 4.64; N 9.92. ¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ, ppm (J, Hz): 1.25 (s, 3H, CH ₃ , iC ₃ H ₇ ), 1.27 (s, 3H, CH ₃ , iC ₃ H ₇ ), 2.14 (s, 3H, NCH ₃ ), 3.43 (t, J = 8.7 Hz, 1H, CH-H), 3.95 (t, J = 9.4 Hz, 1H, CH), 4.27 (t, J = 9.3 Hz , 1H, CH-H), 4.61 (m, 1H, CH, iC ₃ H ₇ ), 6.68 (m, 1H, ArH), 6.78 (m, 1H, ArH), 6.87 (m, 3H, ArH), 7.01 (t, J = 7.6 Hz, 1H, ArH), 7.31-7.37 (m, 4H, ArH), 7.46 (t, J = 8.9 Hz, 1H, ArH), 10.34 (s, 1H, NH), 10.66 (s , 1H, NH). Found,%: C 60.93; H 4.23; N, 9.34. C ₂₉ H ₂₆ ClFN ₄ O ₃ S. Calculated,%: C 61.64; H 4.64; N, 9.92.

Пример 2. Получение 5''-хлор-1-(3-хлор-4-фторфенил)-4'-(4-хлорфенил)-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.2).Example 2. Obtaining 5 '' - chloro-1- (3-chloro-4-fluorophenyl) -4 '- (4-chlorophenyl) -1'-methyl-2-thioxo-5H-dispiro [imidazolidin-4,3' -pyrrolidin-2 ', 3' '- indole] -2' ', 5 (1``H) -dione (1.2).

Проводят аналогично способу по примеру 1, из 0,25 г (0,6 ммоль) соответствующего (Z)-3-(4-хлор-3-фторфенил)-5-(4-хлорбензилиден)-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,24 г (1,2 ммоль) 5-хлоризатина и 0,11 г (1,2 ммоль) саркозина получили 0,42 г целевого соединения. Выход составил 72%. Т_пл=197°С.Carried out analogously to the method of example 1, from 0.25 g (0.6 mmol) of the corresponding (Z) -3- (4-chloro-3-fluorophenyl) -5- (4-chlorobenzylidene) -2-thioxoimidazolidin-4-one 0.24 g (1.2 mmol) of 5-chlorisatin and 0.11 g (1.2 mmol) of sarcosine gave 0.42 g of the target compound. The yield was 72%. _Mp = 197 ° C.

¹Н NMR (400 MHz, DMSO-d₆), δ, ppm (J, Hz): 2.14 (s, 3H, NCH₃), 3.48 (t, J=8.6 Hz, 1H, CH-H), 3.99 (t, J=9.0 Hz, 1H, CH), 4.31 (t, J=9.0 Hz, 1H, CH-H), 6.68 (m, 1H, ArH), 6.86 (m, 2H, ArH), 7.0 (t, J=7.7 Hz, 1H, ArH), 7.26 (d, J=7.3 Hz, 1H, ArH), 7.32 (t, J=7.7 Hz, 1H, ArH), 7.41-7.52 (m, 5H, ArH), 10.44 (s, 1H, NH), 10.70 (s, 1H, NH). Найдено, %: С 58.11; H 3.24; N 10.95. C₂₆H₁₉BCl₂FN₄O₂S. Рассчитано, %: С 57.68; Н 3.54; N 10.35. ¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ, ppm (J, Hz): 2.14 (s, 3H, NCH ₃ ), 3.48 (t, J = 8.6 Hz, 1H, CH-H), 3.99 ( t, J = 9.0 Hz, 1H, CH), 4.31 (t, J = 9.0 Hz, 1H, CH-H), 6.68 (m, 1H, ArH), 6.86 (m, 2H, ArH), 7.0 (t, J = 7.7 Hz, 1H, ArH), 7.26 (d, J = 7.3 Hz, 1H, ArH), 7.32 (t, J = 7.7 Hz, 1H, ArH), 7.41-7.52 (m, 5H, ArH), 10.44 (s, 1H, NH), 10.70 (s, 1H, NH). Found,%: C 58.11; H 3.24; N, 10.95. C ₂₆ H ₁₉ BCl ₂ FN ₄ O ₂ S. Calculated,%: C 57.68; H 3.54; N, 10.35.

Пример 3. Получение 5''-бром-1-(3-хлор-4-фторфенил)-4'-(4-изопропилоксифенил)-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.3).Example 3. Obtaining 5 '' - bromo-1- (3-chloro-4-fluorophenyl) -4 '- (4-isopropyloxyphenyl) -1'-methyl-2-thioxo-5H-disiro [imidazolidin-4,3' -pyrrolidin-2 ', 3' '- indole] -2' ', 5 (1``H) dione (1.3).

Из 0,25 г (0,7 ммоль) соответствующего (Z)-3-(4-хлор-3-фторфенил)-5-(4-изопропилоксибензилиден)-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,26 г (1,2 ммоль) 5-бромизатина и 0,12 г (1,2 ммоль) саркозина получили 0,38 г целевого соединения. Выход составил 62% Т_пл=267°C.From 0.25 g (0.7 mmol) of the corresponding (Z) -3- (4-chloro-3-fluorophenyl) -5- (4-isopropyloxybenzylidene) -2-thioxoimidazolidin-4-one, 0.26 g (1 , 2 mmol) of 5-bromisatin and 0.12 g (1.2 mmol) of sarcosine gave 0.38 g of the target compound. The yield was 62% T _mp = 267 ° C.

¹Н NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ, ppm (J, Hz): 1.25 (s, 6H, 2CH₃,i-C₃H₇), 2.16 (s, 3H, NCH₃), 3.46 (t, J=8.7 Hz, 1H, CH-H), 3.91 (t, J=9.4 Hz, 1H, CH), 4.25 (t, J=9.2 Hz, 1H, CH-H), 4.60 (m, 1H, CH, i-C₃H₇), 6.72-6.93 (m, 5H, ArH), 7.28-7.61 (m, 5H, ArH), 10.57 (s, 1H, NH), 10.79 (s, 1H, NH). Найдено, %: С 54.73; H 3.21; N 8.38. C₂₉H₂₅BrClFN₄O₃S. Рассчитано, %: С 54.09; Н 3.91; N 8.70. ¹ N NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ, ppm (J, Hz): 1.25 (s, 6H, 2CH ₃ , iC ₃ H ₇ ), 2.16 (s, 3H, NCH ₃ ), 3.46 (t, J = 8.7 Hz, 1H, CH-H), 3.91 (t, J = 9.4 Hz, 1H, CH), 4.25 (t, J = 9.2 Hz, 1H, CH-H), 4.60 (m, 1H, CH, iC ₃ H ₇ ), 6.72-6.93 (m, 5H, ArH), 7.28-7.61 (m, 5H, ArH), 10.57 (s, 1H, NH), 10.79 (s, 1H, NH). Found,%: C 54.73; H 3.21; N, 8.38. C ₂₉ H ₂₅ BrClFN ₄ O ₃ S. Calculated,%: C 54.09; H 3.91; N, 8.70.

Пример 4. Получение 1-(4-этоксифенил)-4'-(4-хлорфенил)-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.4).Example 4. Obtaining 1- (4-ethoxyphenyl) -4 '- (4-chlorophenyl) -1'-methyl-2-thioxo-5H-disiro [imidazolidin-4,3'-pyrrolidin-2', 3 "- indole] -2 '', 5 (1``H) dione (1.4).

Из 0,24 г (0,7 ммоль) соответствующего (Z)-3-(4-этоксифенил)-5-(4-хлорбензилиден)-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,26 г (1,2 ммоль) 5-изатина и 0,12 г (1,2 ммоль) саркозина получили 0.44 г целевого соединения. Выход составил 78% Т_пл=210°С.Of 0.24 g (0.7 mmol) of the corresponding (Z) -3- (4-ethoxyphenyl) -5- (4-chlorobenzylidene) -2-thioxoimidazolidin-4-one, 0.26 g (1.2 mmol) 5-isatin and 0.12 g (1.2 mmol) of sarcosine received 0.44 g of the target compound. The yield was 78% T _mp = 210 ° C.

¹Н NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ, ppm (J, Hz): 1.31 (t, 3H, CH₃), 2.14 (s, 3H, NCH₃), 3.46 (t, J=8.6 Hz, 1H, CH-H), 3.94-4.05 (m, 3H(1H, CH, 2H, OCH₂)), 4.31 (t, J=9.0 Hz, 1H, CH-H), 6.52 (d, J=8.8 Hz, 2H, ArH), 6.84-6.90 (m, 3H, ArH), 7.01 (t, J=7.6 Hz, 1H, ArH), 7.29-7.33 (m, 2H, ArH), 7.41-7.49 (dd, J=8.6 Hz, 4H, ArH) 10.12 (s, 1H, NH), 10.68 (s, 1H, NH). Найдено, %: С 62.41; H 4.82; N 9.96. C₂₈H₂₅ClN₄O₃S. Рассчитано, %: С 63.09; Н 4.73; N 10.51. ¹ N NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ, ppm (J, Hz): 1.31 (t, 3H, CH ₃ ), 2.14 (s, 3H, NCH ₃ ), 3.46 (t, J = 8.6 Hz, 1H , CH-H), 3.94-4.05 (m, 3H (1H, CH, 2H, OCH ₂ )), 4.31 (t, J = 9.0 Hz, 1H, CH-H), 6.52 (d, J = 8.8 Hz, 2H, ArH), 6.84-6.90 (m, 3H, ArH), 7.01 (t, J = 7.6 Hz, 1H, ArH), 7.29-7.33 (m, 2H, ArH), 7.41-7.49 (dd, J = 8.6 Hz, 4H, ArH) 10.12 (s, 1H, NH), 10.68 (s, 1H, NH). Found,%: C 62.41; H 4.82; N, 9.96. C ₂₈ H ₂₅ ClN ₄ O ₃ S. Calculated,%: C 63.09; H 4.73; N, 10.51.

Пример 5. Получение 1-(3-хлор-4-фторфенил)-4'-(4-этилфенил)-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.5).Example 5. Obtaining 1- (3-chloro-4-fluorophenyl) -4 '- (4-ethylphenyl) -1'-methyl-2-thioxo-5H-disiro [imidazolidin-4,3'-pyrrolidin-2', 3 '' - indole] -2 '', 5 (1``H) dione (1.5).

Из 0,24 г (0,6 ммоль) соответствующего (Z)-3-(4-хлор-3-фторфенил)-5-(4-этилбензилиден)-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,22 г (1,2 ммоль) изатина и 0,12 г (1,2 ммоль) саркозина получили 0.36 г целевого соединения. Выход составил 63% Т_пл=315°C.From 0.24 g (0.6 mmol) of the corresponding (Z) -3- (4-chloro-3-fluorophenyl) -5- (4-ethylbenzylidene) -2-thioxoimidazolidin-4-one, 0.22 g (1 , 2 mmol) of isatin and 0.12 g (1.2 mmol) of sarcosine received 0.36 g of the target compound. The yield was 63% T _mp = 315 ° C.

¹Н NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ, ppm (J, Hz): 1.18 (t, 3H, CH₃), 2.14 (s, 3H, NCH₃), 2.58-2.63 (q, 2H, CH₂), 3.44 (t, J=8.8 Hz, 1H, CH-H), 3.99 (t, J=9.4 Hz, 1H, CH), 4.29 (t, J=9.2 Hz, 1H, CH-H), 6.6-7.1 (m, 4H, ArH), 7.19-7.51 (m, 7H, ArH), 10.35 (s, 1H, NH), 10.68 (s, 1H, NH). Найдено, %: С 63.02; H 4.47; N 9.82. C₂₈H₂₄ClFN₄O₂S. Рассчитано, %: С 62.86; Н 4.52; N 10.47. ¹ N NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ, ppm (J, Hz): 1.18 (t, 3H, CH ₃ ), 2.14 (s, 3H, NCH ₃ ), 2.58-2.63 (q, 2H, CH ₂ ), 3.44 (t, J = 8.8 Hz, 1H, CH-H), 3.99 (t, J = 9.4 Hz, 1H, CH), 4.29 (t, J = 9.2 Hz, 1H, CH-H), 6.6 -7.1 (m, 4H, ArH), 7.19-7.51 (m, 7H, ArH), 10.35 (s, 1H, NH), 10.68 (s, 1H, NH). Found,%: C 63.02; H 4.47; N, 9.82. C ₂₈ H ₂₄ ClFN ₄ O ₂ S. Calculated,%: C 62.86; H 4.52; N, 10.47.

Пример 6. Получение 5''-бром-1-(4-этоксифенил)-4'-(4-хлорфенил)-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.6).Example 6. Obtaining 5 '' - bromo-1- (4-ethoxyphenyl) -4 '- (4-chlorophenyl) -1'-methyl-2-thioxo-5H-dispiro [imidazolidine-4,3'-pyrrolidin-2 ', 3' '- indole] -2' ', 5 (1``H) -dione (1.6).

Из 0,24 г (0,6 ммоль) соответствующего (Z)-3-(4-этоксифенил)-5-(4-хлорбензилиден)-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,25 г (1,2 ммоль) 5-бромизатина и 0,12 г (1,2 ммоль) саркозина получили 0.48 г целевого соединения. Выход составил 89% Т_пл=301°С.Of 0.24 g (0.6 mmol) of the corresponding (Z) -3- (4-ethoxyphenyl) -5- (4-chlorobenzylidene) -2-thioxoimidazolidin-4-one, 0.25 g (1.2 mmol) 5-bromisatin and 0.12 g (1.2 mmol) of sarcosine received 0.48 g of the target compound. The yield was 89% T _mp = 301 ° C.

¹Н NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ, ppm (J, Hz): 1.31 (t, 3H, CH₃), 2.16 (s, 3H, NCH₃), 3.49 (t, J=8.7 Hz, 1H, CH-H), 3.94 (t, J=9.2 Hz, 1H, CH), 4.0-4.05 (q, J=6.9 Hz, 2H, OCH₂), 4.31 (t, J=9.0 Hz, 1H, CH-H), 6.56 (d, J=8.6 Hz, 2H, ArH), 6.81 (d, J=8.3 Hz, 1H, ArH), 6.90 (d, J=8.6 Hz, 2H, ArH), 7.38-7.54 (m, 6H, ArH), 10.38 (s, 1H, NH), 10.82 (s, 1H, NH). Найдено, %: С 54.47; H 3.89; N 9.27. C₂₈H₂₄BrClN₄O₃S. Вычислено, %: С 54.96; Н 3.95; N 9.16. ¹ N NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ, ppm (J, Hz): 1.31 (t, 3H, CH ₃ ), 2.16 (s, 3H, NCH ₃ ), 3.49 (t, J = 8.7 Hz, 1H, CH-H), 3.94 (t, J = 9.2 Hz, 1H, CH), 4.0-4.05 (q, J = 6.9 Hz, 2H, OCH ₂ ), 4.31 (t, J = 9.0 Hz, 1H, CH -H), 6.56 (d, J = 8.6 Hz, 2H, ArH), 6.81 (d, J = 8.3 Hz, 1H, ArH), 6.90 (d, J = 8.6 Hz, 2H, ArH), 7.38-7.54 ( m, 6H, ArH), 10.38 (s, 1H, NH), 10.82 (s, 1H, NH). Found,%: C 54.47; H 3.89; N, 9.27. C ₂₈ H ₂₄ BrClN ₄ O ₃ S. Calculated,%: C 54.96; H 3.95; N 9.16.

Пример 7. Получение 5''-бром-1-(3-хлор-4-фторфенил)-4'-(4-хлорфенил)-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.7).Example 7. Obtaining 5 '' - bromo-1- (3-chloro-4-fluorophenyl) -4 '- (4-chlorophenyl) -1'-methyl-2-thioxo-5H-dispiro [imidazolidin-4,3' -pyrrolidin-2 ', 3' '- indole] -2' ', 5 (1''H) -dione (1.7).

Из 0,24 г (0,6 ммоль) соответствующего (Z)-3-(3-хлор-4-фторфенил)-5-(4-хлорбензилиден)-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,25 г (1,2 ммоль) 5-бромизатина и 0,12 г (1,2 ммоль) саркозина получили 0.32 г целевого соединения. Выход составил 66% Т_пл=197°C.Of 0.24 g (0.6 mmol) of the corresponding (Z) -3- (3-chloro-4-fluorophenyl) -5- (4-chlorobenzylidene) -2-thioxoimidazolidin-4-one, 0.25 g (1 , 2 mmol) of 5-bromisatin and 0.12 g (1.2 mmol) of sarcosine received 0.32 g of the target compound. The yield was 66% T _mp = 197 ° C.

¹Н NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ, ppm (J, Hz): 2.16 (s, 3H, NCH₃), 3.51 (t, J=8.7 Hz, 1H, CH-H), 3.95 (t, J=9.5 Hz, 1H, CH), 4.31 (t, J=9.0 Hz, 1H, CH-H), 6.74-6.9 (m, 3H, ArH), 7.36-7.58 (m, 7H, ArH), 10.65 (s, 1H, NH), 10.84 (s, 1H, NH). Найдено, %: С 50.21; H 3.01; N 8.96. C₂₆H₁₈BrCl₂FN₄O₂S. Рассчитано, %: С 50.34; Н 2.92; N 9.03. ¹ N NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ, ppm (J, Hz): 2.16 (s, 3H, NCH ₃ ), 3.51 (t, J = 8.7 Hz, 1H, CH-H), 3.95 (t, J = 9.5 Hz, 1H, CH), 4.31 (t, J = 9.0 Hz, 1H, CH-H), 6.74-6.9 (m, 3H, ArH), 7.36-7.58 (m, 7H, ArH), 10.65 ( s, 1H, NH), 10.84 (s, 1H, NH). Found,%: C 50.21; H 3.01; N, 8.96. C ₂₆ H ₁₈ BrCl ₂ FN ₄ O ₂ S. Calculated,%: C 50.34; H 2.92; N 9.03.

Пример 8. Получение 5''-хлор-1-(3-хлор-4-фторфенил)-4'-(4-этилфенил)-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.8).Example 8. Obtaining 5 '' - chloro-1- (3-chloro-4-fluorophenyl) -4 '- (4-ethylphenyl) -1'-methyl-2-thioxo-5H-dispiro [imidazolidin-4,3' -pyrrolidin-2 ', 3' '- indole] -2' ', 5 (1''H) -dione (1.8).

Из 0,24 г (0,6 ммоль) соответствующего (Z)-3-(3-хлор-4-фторфенил)-5-(4-этилбензилиден)-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,24 г (1,2 ммоль) 5-хлоризатина и 0,12 г (1,2 ммоль) получили 0,49 г целевого соединения. Выход составил 73% Т_пл=210°C.Of 0.24 g (0.6 mmol) of the corresponding (Z) -3- (3-chloro-4-fluorophenyl) -5- (4-ethylbenzylidene) -2-thioxoimidazolidin-4-one, 0.24 g (1 , 2 mmol) of 5-chlorisatin and 0.12 g (1.2 mmol) gave 0.49 g of the target compound. The yield was 73% T _mp = 210 ° C.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ, ppm (J, Hz): 1.18 (t, 3H, CH₃), 2.17 (s, 3H, NCH₃), 2.58-2.63 (q, J=7.6 Hz, 2H, CH₂), 3.47 (t, J=8.7 Hz, 1H, CH-H), 3.96 (t, J=9.4 Hz, 1H, CH), 4.27 (t, J=9.2 Hz, 1H, CH-H), 6.72-6.8 (m, 2H, ArH), 6.84 (d, J=8.3 Hz, 1H, ArH), 7.20 (d, J=8.0 Hz, 2H, ArH), 7.38 (d, J=8.0 Hz, 2H, ArH), 7.42-7.54 (m, 3H, ArH), 10.56 (s, 1H, NH), 10.81 (s, 1H, NH). Найдено, %: С 54.63; H 3.91; N 9.28. C₂₈H₂₃BrClFN₄O₂S. Расчитано, %: С 54.78; Н 3.78; N 9.13. ¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ, ppm (J, Hz): 1.18 (t, 3H, CH ₃ ), 2.17 (s, 3H, NCH ₃ ), 2.58-2.63 (q, J = 7.6 Hz , 2H, CH ₂ ), 3.47 (t, J = 8.7 Hz, 1H, CH-H), 3.96 (t, J = 9.4 Hz, 1H, CH), 4.27 (t, J = 9.2 Hz, 1H, CH- H), 6.72-6.8 (m, 2H, ArH), 6.84 (d, J = 8.3 Hz, 1H, ArH), 7.20 (d, J = 8.0 Hz, 2H, ArH), 7.38 (d, J = 8.0 Hz , 2H, ArH), 7.42-7.54 (m, 3H, ArH), 10.56 (s, 1H, NH), 10.81 (s, 1H, NH). Found,%: C 54.63; H 3.91; N, 9.28. C ₂₈ H ₂₃ BrClFN ₄ O ₂ S. Calculated,%: C 54.78; H 3.78; N 9.13.

Пример 9. Получение 5''-бром-1'-метил-1-фенил-4'-пиридин-2-ил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.9).Example 9. Obtaining 5 '' - bromo-1'-methyl-1-phenyl-4'-pyridin-2-yl-2-thioxo-5H-dispiro [imidazolidin-4,3'-pyrrolidin-2 ', 3' '-indole] -2``, 5 (1''H) -dione (1.9).

Из 0,24 г (0,6 ммоль) соответствующего (Z)-3-фенил-5-(пиридин-2-илметилен)-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,23 г (1,2 ммоль) 5-бромизатина и 0,12 г (1,2 ммоль) саркозина получили 0,33 г целевого соединения. Выход составил 62% Т_пл=343°С.From 0.24 g (0.6 mmol) of the corresponding (Z) -3-phenyl-5- (pyridin-2-ylmethylene) -2-thioxoimidazolidin-4-one, 0.23 g (1.2 mmol) 5- bromisatin and 0.12 g (1.2 mmol) of sarcosine received 0.33 g of the target compound. The yield was 62% T _mp = 343 ° C.

¹Н NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ, ppm (J, Hz): 2.2 (s, 3H, NCH₃), 3.61 (t, J=8.7 Hz, 1H, CH-H), 4.06 (t, J=9.4 Hz, 1H, CH), 4.55 (t, J=9.3 Hz, 1H, CH-H), 6.81 (d, J=8.3 Hz, 1H, ArH), 6.91 (d, J=6.9 Hz, 2H, ArH), 7.31 (m, 1H, ArH), 7.38-7.47 (m, 5H, ArH), 7.55 (d, J=1.8 Hz, 1H, ArH), 7.83 (t, J¹=1.7, Hz, J²=7.7, Hz, 1H, ArH), 8.50 (d, J=4.2 Hz, 1H, ArH), 10.19 (s, 1H, NH), 10.72 (s, 1H, NH). Найдено, %: С 56.83; H 3.47; N 12.94. C₂₅H₂₀BrN₅O₂S. Рассчитано, %: С 56.19; Н 3.77; N 13.10. ¹ N NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ, ppm (J, Hz): 2.2 (s, 3H, NCH ₃ ), 3.61 (t, J = 8.7 Hz, 1H, CH-H), 4.06 (t, J = 9.4 Hz, 1H, CH), 4.55 (t, J = 9.3 Hz, 1H, CH-H), 6.81 (d, J = 8.3 Hz, 1H, ArH), 6.91 (d, J = 6.9 Hz, 2H , ArH), 7.31 (m, 1H, ArH), 7.38-7.47 (m, 5H, ArH), 7.55 (d, J = 1.8 Hz, 1H, ArH), 7.83 (t, J ¹ = 1.7, Hz, J ² = 7.7, Hz, 1H, ArH), 8.50 (d, J = 4.2 Hz, 1H, ArH), 10.19 (s, 1H, NH), 10.72 (s, 1H, NH). Found,%: C 56.83; H 3.47; N, 12.94. C ₂₅ H ₂₀ BrN ₅ O ₂ S. Calculated,%: C 56.19; H 3.77; N 13.10.

Пример 10. Получение 1-(2-морфолиноэтил)-4'-(3-хлорфенил)-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.10).Example 10. Obtaining 1- (2-morpholinoethyl) -4 '- (3-chlorophenyl) -1'-methyl-2-thioxo-5H-disiro [imidazolidin-4,3'-pyrrolidin-2', 3 "- indole] -2``, 5 (1``H) dione (1.10).

Из 0,15 г (0,3 ммоль) соответствующего (Z)-5-(3-хлорбензилиден)-3-(2-морфолиноэтил)-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,14 г (0,6 ммоль) 5-бромизатина и 0,1 г (0,6 ммоль) саркозина получили 0,27 г целевого соединения. Выход составил 78% Т_пл=219°С.From 0.15 g (0.3 mmol) of the corresponding (Z) -5- (3-chlorobenzylidene) -3- (2-morpholinoethyl) -2-thioxoimidazolidin-4-one, 0.14 g (0.6 mmol) 5-bromisatin and 0.1 g (0.6 mmol) of sarcosine received 0.27 g of the target compound. The yield was 78% T _mp = 219 ° C.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1Н, NH), 10.67 (s, 1H, NH), 7.50 (t, J=8.6 Hz, 3H), 7.37-7.42 (m, 3H), 7.31 (s, 1H), 6.85-6.90 (m, 2H), 6.74-6.78 (m, 1H), 4.33 (t, J=9.7 Hz, 1H), 3.92 (t, J=9.2 Hz, 1H), 3.51 (t, J=9.7 Hz, 1H), 2.15 (s, 3H). HRMS (ESI, m/z) Calcd for C26H18Cl3FN4O2S [M+H]⁺, 575,0200; Found 575.0207.1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1H, NH), 10.67 (s, 1H, NH), 7.50 (t, J = 8.6 Hz, 3H), 7.37-7.42 (m, 3H), 7.31 (s, 1H), 6.85-6.90 (m, 2H), 6.74-6.78 (m, 1H), 4.33 (t, J = 9.7 Hz, 1H), 3.92 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.51 (t, J = 9.7 Hz, 1H), 2.15 (s, 3H). HRMS (ESI, m / z) Calcd for C26H18Cl3FN4O2S [M + H] ⁺ , 575.0200; Found 575.0207.

Пример 11. Получение 5''-бром-1-циклопропил-4'-(4-фторфенил)-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.11).Example 11. Obtaining 5 '' - bromo-1-cyclopropyl-4 '- (4-fluorophenyl) -1'-methyl-2-thioxo-5H-disiro [imidazolidin-4,3'-pyrrolidin-2', 3 ' '-indole] -2``, 5 (1''H) -dione (1.11).

Из 0,15 г (0,3 ммоль) соответствующего (Z)-3-циклопропил-5-(4-фторбензилиден)-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,14 г (0,6 ммоль) 5-бромизатина и 0,1 г (0,6 ммоль) саркозина получили 0,14 г целевого соединения. Выход составил 66% Т_пл=243°С.Of 0.15 g (0.3 mmol) of the corresponding (Z) -3-cyclopropyl-5- (4-fluorobenzylidene) -2-thioxoimidazolidin-4-one, 0.14 g (0.6 mmol) of 5-bromisatin and 0.1 g (0.6 mmol) of sarcosine gave 0.14 g of the target compound. The yield was 66% T _mp = 243 ° C.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.69 (s, 1Н, NH), 9.86 (s, 1H, NH), 7.45 (dd, J=2.0 Hz, J₂=8.2 Hz, 1H), 7.42-7.35 (m, 3H), 7.13 (d, J=8.8 Hz, 2H), 6.75 (d, J=8.2 Hz, 1H), 4.18 (t, J=9.2 Hz, 1H), 3.85 (t, J=9.4 Hz, 1H), 3.42 (t, J=8.6 Hz, 1H), 2.45 (m, 1H), 2.12 (s, 3H), 0.82-0.68 (m, 2H), 0.39 (m, 1H), 0.05 (m, 1H). HRMS (ESI) m/z: Calcd for C₂₃H₂₀BrFN₄O₂S, [M+K]⁺, 555.0086 found 555.0087.1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.69 (s, 1H, NH), 9.86 (s, 1H, NH), 7.45 (dd, J = 2.0 Hz, J ₂ = 8.2 Hz, 1H), 7.42-7.35 (m, 3H), 7.13 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.75 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.18 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.85 (t, J = 9.4 Hz , 1H), 3.42 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 2.45 (m, 1H), 2.12 (s, 3H), 0.82-0.68 (m, 2H), 0.39 (m, 1H), 0.05 (m, 1H). HRMS (ESI) m / z: Calcd for C ₂₃ H ₂₀ BrFN ₄ O ₂ S, [M + K] ⁺ , 555.0086 found 555.0087.

Пример 12. Получение 5''-бром-1-циклогексил-4'-фенил-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.12).Example 12. Obtaining 5 "- bromo-1-cyclohexyl-4'-phenyl-1'-methyl-2-thioxo-5H-disiro [imidazolidin-4,3'-pyrrolidin-2 ', 3" - indole] -2``, 5 (1``H) dione (1.12).

Из 0,14 г (0,3 ммоль) соответствующего (Z)-3-циклогексил-5-фенил-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,14 г (0,6 ммоль) 5-бромизатина и 0,1 г (0,6 ммоль) саркозина получили 0,17 г целевого соединения. Выход составил 71% Т_пл=253°C.Of 0.14 g (0.3 mmol) of the corresponding (Z) -3-cyclohexyl-5-phenyl-2-thioxoimidazolidin-4-one, 0.14 g (0.6 mmol) of 5-bromisatin and 0.1 g (0.6 mmol) of sarcosine gave 0.17 g of the target compound. The yield was 71% T _mp = 253 ° C.

1Н NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.71 (s, 1H, NH), 9.91 (s, 1H, NH), 7.49-7.42 (m, 2H), 7.34-7.21 (m, 5H), 6.75 (d, J=8.1 Hz, 1H), 4.17 (t, J=9.2 Hz, 1H), 4.10 (m, 1H), 3.93 (t, J=9.5 Hz, 1H), 3.42 (t, J=8.4 Hz, 1H), 2.13 (s, 3H), 1.89 (m, 1H), 1.80 (m, 1H), 1.72-1.59 (m, 2H), 1.54 (m, 1H), 1.20 (m, 1H), 1.15-0.98 (m, 3H), 0.88 (m, 1H). HRMS (ESI) m/z: Calcd for C₂₆H₂₇BrN₄O₂S, [M+H]⁺, 541.1091 found 541.1081.1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.71 (s, 1H, NH), 9.91 (s, 1H, NH), 7.49-7.42 (m, 2H), 7.34-7.21 (m, 5H), 6.75 (d , J = 8.1 Hz, 1H), 4.17 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 4.10 (m, 1H), 3.93 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 3.42 (t, J = 8.4 Hz, 1H ), 2.13 (s, 3H), 1.89 (m, 1H), 1.80 (m, 1H), 1.72-1.59 (m, 2H), 1.54 (m, 1H), 1.20 (m, 1H), 1.15-0.98 ( m, 3H), 0.88 (m, 1H). HRMS (ESI) m / z: Calcd for C ₂₆ H ₂₇ BrN ₄ O ₂ S, [M + H] ⁺ , 541.1091 found 541.1081.

Пример 13. Получение 1-циклогексил-4'-фенил-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.13).Example 13. Obtaining 1-cyclohexyl-4'-phenyl-1'-methyl-2-thioxo-5H-dispiro [imidazolidin-4,3'-pyrrolidin-2 ', 3 "- indole] -2``, 5 (1``H) -dione (1.13).

Из 0,12 г (0,3 ммоль) соответствующего (Z)-3-циклогексил-5-фенил-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,12 г (0,6 ммоль) изатина и 0,1 г (0,6 ммоль) саркозина получили 0,15 г целевого соединения. Выход составил 68% Т_пл=319°C.Of the 0.12 g (0.3 mmol) of the corresponding (Z) -3-cyclohexyl-5-phenyl-2-thioxoimidazolidin-4-one, 0.12 g (0.6 mmol) of isatin and 0.1 g (0 , 6 mmol) of sarcosine gave 0.15 g of the target compound. The yield was 68% T _mp = 319 ° C.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.71 (s, 1Н, NH), 9.91 (s, 1H, NH), 7.49-7.42 (m, 2H), 7.34-7.21 (m, 5H), 6.75 (d, J=8.1 Hz, 1H), 4.17 (t, J=9.2 Hz, 1H), 4.10 (m, 1H), 3.93 (t, J=9.5 Hz, 1H), 3.42 (t, J=8.4 Hz, 1H), 2.13 (s, 3H), 1.89 (m, 1H), 1.80 (m, 1H), 1.72-1.59 (m, 2H), 1.54 (m, 1H), 1.20 (m, 1H), 1.15-0.98 (m, 3H), 0.88 (m, 1H). HRMS (ESI) m/z: Calcd for C₂₆H₂₇BrN₄O₂S, [M+H]⁺, 541.1091 found 541.1081.1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.71 (s, 1H, NH), 9.91 (s, 1H, NH), 7.49-7.42 (m, 2H), 7.34-7.21 (m, 5H), 6.75 (d , J = 8.1 Hz, 1H), 4.17 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 4.10 (m, 1H), 3.93 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 3.42 (t, J = 8.4 Hz, 1H ), 2.13 (s, 3H), 1.89 (m, 1H), 1.80 (m, 1H), 1.72-1.59 (m, 2H), 1.54 (m, 1H), 1.20 (m, 1H), 1.15-0.98 ( m, 3H), 0.88 (m, 1H). HRMS (ESI) m / z: Calcd for C ₂₆ H ₂₇ BrN ₄ O ₂ S, [M + H] ⁺ , 541.1091 found 541.1081.

Пример 14. Получение 1-(4-фторфенил)-4'-(4-этоксифенил)-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.14).Example 14. Obtaining 1- (4-fluorophenyl) -4 '- (4-ethoxyphenyl) -1'-methyl-2-thioxo-5H-disiro [imidazolidin-4,3'-pyrrolidin-2', 3 "- indole] -2``, 5 (1``H) dione (1.14).

Из 0,13 г (0,3 ммоль) соответствующего (Z)-3-(4-фторфенил)-5-(4-этоксибензилиден)-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,12 г (0,6 ммоль) изатина и 0,1 г (0,6 ммоль) саркозина получили 0,14 г целевого соединения. Выход составил 62% Т_пл=225°C.Of 0.13 g (0.3 mmol) of the corresponding (Z) -3- (4-fluorophenyl) -5- (4-ethoxybenzylidene) -2-thioxoimidazolidin-4-one, 0.12 g (0.6 mmol) isatin and 0.1 g (0.6 mmol) of sarcosine received 0.14 g of the target compound. The yield was 62% T _mp = 225 ° C.

1Н NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.64 (s, NH, 1H), 10.08 (s, 1H, NH), 7.38-7.32 (m, 3H), 7.29 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.22 (t, J=8.7 Hz, 2H), 7.01 (t, J=7.5 Hz, 1H), 6.89 (d, J=8.6 Hz, 2H), 6.85 (d, J=7.6 Hz, 2H), 6.66 (dd, J=4.9, 8.8 Hz, 2H), 4.28 (t, J=9.1 Hz, 1H), 4.01 (k, J=7.0 Hz, 2H), 3.94 (t, J=9.5 Hz, 1H), 3.43 (t, J=8.0 Hz, 1H), 2.14 (s, 3H), 1.32 (t, J=7.0 Hz, 3H). HRMS (ESI) m/z: Calcd for C₂₈H₂₅FN₄O₃S, [M+H]⁺, 517.1704 found 517.1698.1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.64 (s, NH, 1H), 10.08 (s, 1H, NH), 7.38-7.32 (m, 3H), 7.29 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.22 (t, J = 8.7 Hz, 2H), 7.01 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.89 (d, 8.6 Hz, 2H), 6.85 (d, 7.6 Hz, 2H), 6.66 ( dd, J = 4.9, 8.8 Hz, 2H), 4.28 (t, J = 9.1 Hz, 1H), 4.01 (k, J = 7.0 Hz, 2H), 3.94 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 3.43 ( t, J = 8.0 Hz, 1H), 2.14 (s, 3H), 1.32 (t, J = 7.0 Hz, 3H). HRMS (ESI) m / z: Calcd for C ₂₈ H ₂₅ FN ₄ O ₃ S, [M + H] ⁺ , 517.1704 found 517.1698.

Пример 15. Получение 1-(4-хлорфенил)-4'-(4-метоксифенил)-фенил-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.15).Example 15. Obtaining 1- (4-chlorophenyl) -4 '- (4-methoxyphenyl) phenyl-1'-methyl-2-thioxo-5H-disiro [imidazolidin-4,3'-pyrrolidin-2', 3 ' '-indole] -2``, 5 (1''H) -dione (1.15).

Из 0,15 г (0,4 ммоль) соответствующего (Z)-3-(4-хлорфенил)-5-(4-метоксибензилиден)-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,14 г (0,8 ммоль) изатина и 0,15 г (0,8 ммоль) саркозина получили 0,17 г целевого соединения. Выход составил 73% Т_пл=201°С.From 0.15 g (0.4 mmol) of the corresponding (Z) -3- (4-chlorophenyl) -5- (4-methoxybenzylidene) -2-thioxoimidazolidin-4-one, 0.14 g (0.8 mmol) isatin and 0.15 g (0.8 mmol) of sarcosine received 0.17 g of the target compound. The yield was 73% T _mp = 201 ° C.

1Н NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.63 (s, 1H, NH), 10.22 (s, 1H, NH), 7.46 (d, J=8.7 Hz, 2H), 7.34-7.38 (m, 3H), 7.28 (t, J=7.28 Hz, 1H), 7.00 (t, J=8.1 Hz, 1H), 6.90 (d, J=8.7 Hz, 2H), 6.65 (d, J=8.1 Hz, 1H), 4.27 (t, J=8.1 Hz, 1H), 3.93 (t, J=9.3 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.42 (t, J=9.9 Hz, 1H), 2.12 (s, 3H). HRMS (ESI) m/z: Calcd for C27H23ClN4O3S, [M+H]⁺, 519,1179 found 519.12.1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.63 (s, 1H, NH), 10.22 (s, 1H, NH), 7.46 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.34-7.38 (m, 3H), 7.28 (t, J = 7.28 Hz, 1H), 7.00 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 6.65 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.27 ( t, J = 8.1 Hz, 1H), 3.93 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.42 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 2.12 (s, 3H). HRMS (ESI) m / z: Calcd for C27H23ClN4O3S, [M + H] ⁺ , 519.1179 found 519.12.

Пример 16. Получение 5''-хлор-1-фенил-4'-(3-формилфенил)-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.16).Example 16. Obtaining 5 '' - chloro-1-phenyl-4 '- (3-formylphenyl) -1'-methyl-2-thioxo-5H-disiro [imidazolidin-4,3'-pyrrolidin-2', 3 ' '-indole] -2``, 5 (1''H) -dione (1.16).

Из 0,15 г (0,4 ммоль) соответствующего (Z)-3-фенил-5-(3-формилфенил)-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,15 г (0,8 ммоль) 5-хлоризатина и 0,12 г (0,8 ммоль) саркозина получено 0,18 г целевого соединения. Выход составил 72% Т_пл=170°С.From 0.15 g (0.4 mmol) of the corresponding (Z) -3-phenyl-5- (3-formylphenyl) -2-thioxoimidazolidin-4-one, 0.15 g (0.8 mmol) of 5-chlorosatin and 0.12 g (0.8 mmol) of sarcosine obtained 0.18 g of the target compound. The yield was 72% T _mp = 170 ° C.

1Н HMR (400 MHz, DMSO-d6) 10.82 (s, 1Н), 10.54 (s, 1H), 10.02 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.83 (dd, J=14.02, 7.58 Hz, 2H), 7.59 (t, J=7.46 Hz, 1H), 7.34-7.40 (m, 6H), 6.87 (d, J=9.05 Hz, 1H), 6.62-6.67 (m, 2H), 4.44 (t, J=9.66 Hz, 1H), 4.02 (t, J=9.29 Hz, 1H), 3.54 (t, J=8.93, 1H), 2.18 (s, 3H).1H HMR (400 MHz, DMSO-d6) 10.82 (s, 1H), 10.54 (s, 1H), 10.02 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.83 (dd, J = 14.02, 7.58 Hz, 2H ), 7.59 (t, J = 7.46 Hz, 1H), 7.34-7.40 (m, 6H), 6.87 (d, J = 9.05 Hz, 1H), 6.62-6.67 (m, 2H), 4.44 (t, J = 9.66 Hz, 1H), 4.02 (t, J = 9.29 Hz, 1H), 3.54 (t, J = 8.93, 1H), 2.18 (s, 3H).

Пример 17. Получение 1-(3-хлор-4-фтор)-4'-(4-циклопентоксифенил)-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.17).Example 17. Obtaining 1- (3-chloro-4-fluoro) -4 '- (4-cyclopentoxyphenyl) -1'-methyl-2-thioxo-5H-disiro [imidazolidin-4,3'-pyrrolidin-2', 3 '' - indole] -2 '', 5 (1``H) dione (1.17).

Из 0,2 г (0,6 ммоль) соответствующего (Z)-3-(3-хлор-4-фтор)-5-(4-циклопентоксифенил)-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,19 г (1,2 ммоль) изатина и 0,15 г (1,2 ммоль) саркозина получено 0,22 г целевого соединения. Выход составил 73% Т_пл=239°С.Of 0.2 g (0.6 mmol) of the corresponding (Z) -3- (3-chloro-4-fluoro) -5- (4-cyclopentoxyphenyl) -2-thioxoimidazolidin-4-one, 0.19 g (1 , 2 mmol) of isatin and 0.15 g (1.2 mmol) of sarcosine, 0.22 g of the target compound are obtained. The yield was 73% T _mp = 239 ° C.

1Н NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.63 (s, 1H, NH), 10.26 (s, 1H, NH), 7.45 (t, J=9.1, 1H), 7.35 (d, J=8.3 Hz, 2H), 7.33-7.27 (m, 2H), 7.00 (t, J=7.3 Hz, 1H), 6.86 (d, J=8.2 Hz, 3H), 6,77 (dd, J=2.0, 6.4 Hz, 1H), 6.68 (m, 1H), 4.80 (m, 1H), 4,27 (t, J=9.2 Hz, 1H), 3.94 (t, J=9.5 Hz, 1H), 3.43 (t, J=8.8 Hz, 1H), 2.14 (s, 3H), 1.97-1.84 (m, 2H), 1.77-1.63 (m, 4H), 1.63-1.52 (m, 2H). HRMS (ESI) m/z: Calcd for C₃₁H₂₈ClFN₄O₃S, [M+H]⁺, 591.1627 found 591.1625.1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.63 (s, 1H, NH), 10.26 (s, 1H, NH), 7.45 (t, J = 9.1, 1H), 7.35 (d, J = 8.3 Hz, 2H ), 7.33-7.27 (m, 2H), 7.00 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 8.2 Hz, 3H), 6.77 (dd, J = 2.0, 6.4 Hz, 1H) , 6.68 (m, 1H), 4.80 (m, 1H), 4.27 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.94 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 3.43 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 2.14 (s, 3H), 1.97-1.84 (m, 2H), 1.77-1.63 (m, 4H), 1.63-1.52 (m, 2H). HRMS (ESI) m / z: Calcd for C ₃₁ H ₂₈ ClFN ₄ O ₃ S, [M + H] ⁺ , 591.1627 found 591.1625.

Пример 18. Получение 5''-нитро-1-фенил-4'-фенил-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.18).Example 18. Obtaining 5 "- nitro-1-phenyl-4'-phenyl-1'-methyl-2-thioxo-5H-dispiro [imidazolidin-4,3'-pyrrolidin-2 ', 3" - indole] -2``, 5 (1``H) dione (1.18).

Из 0,2 г (0,6 ммоль) соответствующего (Z)-3-фенил-5-фенил-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,2 г (1,2 ммоль) 5-нитроизатина и 0,15 г (1,2 ммоль) саркозина получено 0,28 г целевого соединения. Выход составил 67% Т_пл=201°C.Of 0.2 g (0.6 mmol) of the corresponding (Z) -3-phenyl-5-phenyl-2-thioxoimidazolidin-4-one, 0.2 g (1.2 mmol) of 5-nitroisatin and 0.15 g (1.2 mmol) of sarcosine obtained 0.28 g of the target compound. The yield was 67% T _mp = 201 ° C.

NMR ¹Н (DMSO-d⁶, 400 Hz): 11,36 (s., 1H), 10,63 (s., 1H), 8,27 (d.d., J1=6,36 Hz, J2=2,32 Hz, 1H), 8,19 (d., J=2,32 Hz, 1H), 7,28-7,45 (m., 8H), 7,04 (d., J=8,68 Hz, 1H), 6,58-6,65 (m., 2H), 4,35 (t., J=9,05 Hz, 1H), 4,00 (t., J=9,34 Hz, 1H), 3,55 (t., J=8,68 Hz, 1H), 2,21 (s., 3H).NMR ¹ H (DMSO-d ⁶ , 400 Hz): 11.36 (s., 1H), 10.63 (s., 1H), 8.27 (dd, J1 = 6.36 Hz, J2 = 2, 32 Hz, 1H), 8.19 (d., J = 2.32 Hz, 1H), 7.28-7.45 (m., 8H), 7.04 (d., J = 8.68 Hz , 1H), 6.58-6.65 (m., 2H), 4.35 (t., J = 9.05 Hz, 1H), 4.00 (t., J = 9.34 Hz, 1H ), 3.55 (t., J = 8.68 Hz, 1H), 2.21 (s., 3H).

Пример 19. Получение 5''-бром-1-(4-метоксифенил)-4'-(3-хлорфенил)-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-дион (1.19).Example 19. Obtaining 5 '' - bromo-1- (4-methoxyphenyl) -4 '- (3-chlorophenyl) -1'-methyl-2-thioxo-5H-dispiro [imidazolidine-4,3'-pyrrolidin-2 ', 3' '- indole] -2' ', 5 (1``H) -dione (1.19).

Из 0,2 г (0,6 ммоль) соответствующего (Z)-3-(4-метоксифенил)-5-(3-хлорфенил)-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,2 г (1,2 ммоль) 5-бромизатина и 0,15 г (1,2 ммоль) саркозина получено 0,29 г целевого соединения. Выход составил 78% Т_пл=230°C.From 0.2 g (0.6 mmol) of the corresponding (Z) -3- (4-methoxyphenyl) -5- (3-chlorophenyl) -2-thioxoimidazolidin-4-one, 0.2 g (1.2 mmol) 5-bromisatin and 0.15 g (1.2 mmol) of sarcosine obtained 0.29 g of the target compound. The yield was 78% T _mp = 230 ° C.

1Н NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.79 (s, 1Н, NH), 10.45 (s, 1H, NH), 7.55 (s, 1H), 7.50 (dd, J=1.7, 8.3 Hz, 1H), 7.46 (m, 1H), 7.38 (s, J=7.5 Hz, 1H), 6.93 (d, J=8.8 Hz, 2H), 6.82 (d, J=7.8 Hz, 1H), 6.58 (d, J=8.8 Hz, 2H), 4.31 (t, J=9.2 Hz, 1H), 3.98 (t, J=9.4 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.47 (t, J=8.6 Hz, 1H), 2.16 (s, 3H). HRMS (ESI) m/z: Calcd for C₂₇H₂₂BrClN₄O₃S, [M+H]⁺, 599.0337 found 599.0353.1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.79 (s, 1H, NH), 10.45 (s, 1H, NH), 7.55 (s, 1H), 7.50 (dd, J = 1.7, 8.3 Hz, 1H), 7.46 (m, 1H), 7.38 (s, J = 7.5 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.82 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.58 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.31 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.98 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.47 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 2.16 ( s, 3H). HRMS (ESI) m / z: Calcd for C ₂₇ H ₂₂ BrClN ₄ O ₃ S, [M + H] ⁺ , 599.0337 found 599.0353.

Пример 20. Получение 5''-бром-1-(3-хлор-4-метоксифенил)-4'-(3-хлорфенил)-1'-пропаргил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.20).Example 20. Obtaining 5 '' - bromo-1- (3-chloro-4-methoxyphenyl) -4 '- (3-chlorophenyl) -1'-propargyl-2-thioxo-5H-disiro [imidazolidin-4.3' -pyrrolidin-2 ', 3' '- indole] -2' ', 5 (1''H) -dione (1.20).

Из 0,2 г (0,6 ммоль) соответствующего (Z)-3-(3-хлор-4-метоксифенил)-5-(3-хлорфенил)-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,2 г (1,2 ммоль) 5-бромизатина и 0,15 г (1,2 ммоль) саркозина получили 0,28 г целевого соединения. Выход составил 72% Т_пл=214°С.From 0.2 g (0.6 mmol) of the corresponding (Z) -3- (3-chloro-4-methoxyphenyl) -5- (3-chlorophenyl) -2-thioxoimidazolidin-4-one, 0.2 g (1 , 2 mmol) of 5-bromisatin and 0.15 g (1.2 mmol) of sarcosine gave 0.28 g of the target compound. The yield was 72% T _mp = 214 ° C.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.64 (s, 1H, NH), 7.57 (s, 1H), 7.49-7.35 (m, 5H), 7.18-7.10 (m, 3H), 6.64 (d, J=2.4 Hz, 1H), 6.60 (dd, J₁=2.4 Hz, J₂=8.7 Hz, 1H), 4.62-4.49 (m, 2H), 4.39 (t, J=9.2 Hz, 1H), 3.96 (t, J=9.3 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.52 (t, J=9.0 Hz, 1H), 3.24 (t, J=2.2 Hz, 1H), 2.10(s, 3H).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.64 (s, 1H, NH), 7.57 (s, 1H), 7.49-7.35 (m, 5H), 7.18-7.10 (m, 3H), 6.64 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.60 (dd, J ₁ = 2.4 Hz, J ₂ = 8.7 Hz, 1H), 4.62-4.49 (m, 2H), 4.39 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.96 ( t, J = 9.3 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.52 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 3.24 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 2.10 (s, 3H).

Пример 21. Получение 1-(4-гидроксифенил)-4'-(2-хлорфенил)-1'-метил--2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.21).Example 21. Obtaining 1- (4-hydroxyphenyl) -4 '- (2-chlorophenyl) -1'-methyl - 2-thioxo-5H-disiro [imidazolidin-4,3'-pyrrolidin-2', 3 " -indole] -2``, 5 (1''H) -dione (1.21).

Из 0,2 г (0,6 ммоль) соответствующего (Z)-3-(4-гидроксифенил)-5-(2-хлорфенил)-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,2 г (1,2 ммоль) изатина и 0,15 г (1,2 ммоль) саркозина получили 0,31 г целевого соединения. Выход составил 94% Т_пл=221°C.From 0.2 g (0.6 mmol) of the corresponding (Z) -3- (4-hydroxyphenyl) -5- (2-chlorophenyl) -2-thioxoimidazolidin-4-one, 0.2 g (1.2 mmol) isatin and 0.15 g (1.2 mmol) of sarcosine received 0.31 g of the target compound. The yield was 94% T _mp = 221 ° C.

ЯМР ¹Н (DMSO-d⁶, 400 Hz): 10,65 (s., 1H), 10,02 (s., 1H), 9,74 (s., 1H), 7,45 (d., J=8,44 Hz, 2H), 7,40 (d., J=8,44 Hz, 2H), 7,25-7,32 (m., 2H), 6,99 (t., J=7,46 Hz, 1H), 6,83 (d., J=7,70 Hz, 1H), 6,68 (d., J=8,56 Hz, 2H), 6,39 (d., J=8,68 Hz, 2H), 4,28 (t., J=9,66 Hz, 1H), 3,95 (t., J=9,29 Hz, 1H), 3,44 (t., J=8,68 Hz, 1H), 2,11 (s., 3H)NMR ¹ H (DMSO-d ⁶ , 400 Hz): 10.65 (s., 1H), 10.02 (s., 1H), 9.74 (s., 1H), 7.45 (d., J = 8.44 Hz, 2H), 7.40 (d., J = 8.44 Hz, 2H), 7.25-7.32 (m., 2H), 6.99 (t., J = 7.46 Hz, 1H), 6.83 (d., J = 7.70 Hz, 1H), 6.68 (d., J = 8.56 Hz, 2H), 6.39 (d., J = 8.68 Hz, 2H), 4.28 (t., J = 9.66 Hz, 1H), 3.95 (t., J = 9.29 Hz, 1H), 3.44 (t., J = 8.68 Hz, 1H), 2.11 (s., 3H)

Пример 22. Получение 1-фенил-4'-(2-бромфенил)-1'-метил--2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.22).Example 22. Obtaining 1-phenyl-4 '- (2-bromophenyl) -1'-methyl - 2-thioxo-5H-dispiro [imidazolidin-4,3'-pyrrolidin-2', 3 "- indole] - 2``, 5 (1``H) dione (1.22).

Из 0,3 г (0,8 ммоль) соответствующего (Z)-3-фенил-5-(2-бромфенил)-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,28 г (1,6 ммоль) изатина и 0,18 г (1,6 ммоль) саркозина получили 0,45 г целевого соединения. Выход составил 88% Т_пл=139°С.Of 0.3 g (0.8 mmol) of the corresponding (Z) -3-phenyl-5- (2-bromophenyl) -2-thioxoimidazolidin-4-one, 0.28 g (1.6 mmol) of isatin and 0, 18 g (1.6 mmol) of sarcosine received 0.45 g of the target compound. The yield was 88% T _mp = 139 ° C.

1Н HMR (400 MHz, DMSO-d6) 10.71 (s, 1Н), 9.74 (s, 1H), 8.05 (dd, J=6.42, 1.22 Hz, 1H), 7.65 (dd, J=6.85, 1.10 Hz, 1H), 7.51 (t, J=7.58 Hz, 1H), 7.38-7.44 (m, 3H), 7.35 (dt, J=7.70, 1.10 Hz, 1H), 7.28 (dt, J=7.46, 1.10 Hz, 1H), 7.20 (d, J=6.97 Hz, 1H), 7.03 (dt, J=7.58, J=0.86 Hz, 1H), 6.88 (d, J=7.58 Hz, 1H), 6.65-6.71 (m, 2H), 4.61 (t, J=8.56 Hz, 1H), 4.20 (t, J=8.93 Hz, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.49 (t, J=8.44 Hz, 1H).1H HMR (400 MHz, DMSO-d6) 10.71 (s, 1H), 9.74 (s, 1H), 8.05 (dd, J = 6.42, 1.22 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 6.85, 1.10 Hz, 1H ), 7.51 (t, J = 7.58 Hz, 1H), 7.38-7.44 (m, 3H), 7.35 (dt, J = 7.70, 1.10 Hz, 1H), 7.28 (dt, J = 7.46, 1.10 Hz, 1H) , 7.20 (d, J = 6.97 Hz, 1H), 7.03 (dt, J = 7.58, J = 0.86 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 7.58 Hz, 1H), 6.65-6.71 (m, 2H), 4.61 (t, J = 8.56 Hz, 1H), 4.20 (t, J = 8.93 Hz, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.49 (t, J = 8.44 Hz, 1H).

Пример 23. Получение 5''-хлор-1-(4-этоксифенил)-4'-(3,4-диметоксифенил)-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.23).Example 23. Obtaining 5 '' - chloro-1- (4-ethoxyphenyl) -4 '- (3,4-dimethoxyphenyl) -1'-methyl-2-thioxo-5H-dispiro [imidazolidin-4,3'-pyrrolidine -2 ', 3' '- indole] -2' ', 5 (1``H) -dione (1.23).

Из 0,2 г (0,6 ммоль) соответствующего (Z)-3-(4-этоксифенил)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,2 г (1,2 ммоль) 5-хлорзатина и 0,15 г (1,2 ммоль) саркозина получили 0,34 г целевого соединения. Выход составил 91%. Т_пл=201°С.From 0.2 g (0.6 mmol) of the corresponding (Z) -3- (4-ethoxyphenyl) -5- (3,4-dimethoxyphenyl) -2-thioxoimidazolidin-4-one, 0.2 g (1.2 mmol) of 5-chlorzatin and 0.15 g (1.2 mmol) of sarcosine gave 0.34 g of the target compound. The yield was 91%. _Mp = 201 ° C.

1Н NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.79 (s, 1H, NH), 10.40 (s, 1H, NH), 7.34-7.48 (m, 5H), 6.87-6.91 (m, 3H), 6.55 (d, J=8.8 Hz, 2H), 4.31 (t, J=8.8 Hz, 1H), 3.98-4.03 (m, 2H), 3.93 (t, J=10.5 Hz, 1H), 3.49 (t, J=8.8 Hz, 1H), 2.49-2.50 (m, 3H), 2.15 (s, 3H), 1.28-1.32 (m, 3H).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.79 (s, 1H, NH), 10.40 (s, 1H, NH), 7.34-7.48 (m, 5H), 6.87-6.91 (m, 3H), 6.55 (d , J = 8.8 Hz, 2H), 4.31 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 3.98-4.03 (m, 2H), 3.93 (t, J = 10.5 Hz, 1H), 3.49 (t, J = 8.8 Hz , 1H), 2.49-2.50 (m, 3H), 2.15 (s, 3H), 1.28-1.32 (m, 3H).

Пример 24. Получение 5''-хлор-1-фенил-4'-(3,4-дихлорфенил)-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-диона (1.24).Example 24. Obtaining 5 "- chloro-1-phenyl-4 '- (3,4-dichlorophenyl) -1'-methyl-2-thioxo-5H-disiro [imidazolidin-4,3'-pyrrolidin-2', 3 '' - indole] -2 '', 5 (1``H) dione (1.24).

ИЗ 0,2 г (0,6 ммоль) соответствующего (Z)-3-фенил-5-(3,4-дихлорфенил)-2-тиоксоимидазолидин-4-она, 0,2 г (1,2 ммоль) 5-хлорзатина и 0,15 г (1,2 ммоль) саркозина получили 0,32 г целевого соединения. Выход составил 66% Т_пл=214°C.FROM 0.2 g (0.6 mmol) of the corresponding (Z) -3-phenyl-5- (3,4-dichlorophenyl) -2-thioxoimidazolidin-4-one, 0.2 g (1.2 mmol) 5- chlorzatin and 0.15 g (1.2 mmol) of sarcosine received 0.32 g of the target compound. The yield was 66% T _mp = 214 ° C.

1Н NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1Н, NH), 10.64 (s, 1H, NH), 7.80 (s, 1H), 7.61 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.46-7.34 (m, 5H), 7.32 (d, J=2.0 Hz, 1H), 6.88 (d, J=8.22, 1H), 6.73-6.66 (m, 2H), 4.34 (t, J=9.2 Hz, 1H), 3.92 (t, J=9.0 Hz, 1H), 3.51 (t, J=8.6 Hz, 1H), 2.16 (s, 3H).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1H, NH), 10.64 (s, 1H, NH), 7.80 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.46- 7.34 (m, 5H), 7.32 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 8.22, 1H), 6.73-6.66 (m, 2H), 4.34 (t, J = 9.2 Hz, 1H) , 3.92 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 3.51 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 2.16 (s, 3H).

Пример 25. Получение 1-фенил-4'-(2-бромфенил)-1'-метил-2-оксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-дион (1.25).Example 25. Obtaining 1-phenyl-4 '- (2-bromophenyl) -1'-methyl-2-oxo-5H-dispiro [imidazolidin-4,3'-pyrrolidin-2', 3 "- indole] -2 '', 5 (1``H) -dione (1.25).

Из 0,1 г (0,3 ммоль) соответствующего (Z)-3-фенил-5-(2-бромфенил)-2-оксоимидазолидин-4-она, 0,1 г (0,6 ммоль) изатина и 0,08 г (0,6 ммоль) саркозина получено 0,15 г целевого соединения. Выход составил 81% Т_пл=202°C.From 0.1 g (0.3 mmol) of the corresponding (Z) -3-phenyl-5- (2-bromophenyl) -2-oxoimidazolidin-4-one, 0.1 g (0.6 mmol) of isatin and 0, 08 g (0.6 mmol) of sarcosine obtained 0.15 g of the target compound. The yield was 81% T _mp = 202 ° C.

1Н NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.60 (s, 1Н, NH), 8.36 (s, 1H, NH),), 8,25 (d.d., J1=6,36 Hz, J2=2,32 Hz, 1H), 8,16 (d., J=2,32 Hz, 1H), 7,28-7,45 (m., 8H), 7,02 (d., J=8,68 Hz, 1H), 6,58-6,65 (m., 2H), 4,35 (t, J=9,05 Hz, 1H), 4,00 (t., J=9,34 Hz, 1H), 3,55 (t., J=8,68 Hz, 1H), 2,21 (s., 3H).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.60 (s, 1H, NH), 8.36 (s, 1H, NH),), 8.25 (dd, J1 = 6.36 Hz, J2 = 2.32 Hz , 1H), 8.16 (d., J = 2.32 Hz, 1H), 7.28-7.45 (m., 8H), 7.02 (d., J = 8.68 Hz, 1H ), 6.58-6.65 (m., 2H), 4.35 (t, J = 9.05 Hz, 1H), 4.00 (t., J = 9.34 Hz, 1H), 3 55 (t., J = 8.68 Hz, 1H); 2.21 (s., 3H).

Пример 26. Получение 1-(4-хлорфенил)-4'-фенил-1'-метил-2-оксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-дион (1.26.)Example 26. Obtaining 1- (4-chlorophenyl) -4'-phenyl-1'-methyl-2-oxo-5H-dispiro [imidazolidin-4,3'-pyrrolidin-2 ', 3 "- indole] -2 '', 5 (1``H) -dione (1.26.)

Из 0,2 г (0,6 ммоль) соответствующего (Z)-3-(4-хлорфенил)-5-фенил-2-оксоимидазолидин-4-она, 0,2 г (1,2 ммоль) изатина и 0,15 г (1,2 ммоль) саркозина получено 0,25 г целевого соединения. Выход составил 72% Т_пл=226°C.From 0.2 g (0.6 mmol) of the corresponding (Z) -3- (4-chlorophenyl) -5-phenyl-2-oxoimidazolidin-4-one, 0.2 g (1.2 mmol) of isatin and 0, 15 g (1.2 mmol) of sarcosine obtained 0.25 g of the target compound. The yield was 72% T _mp = 226 ° C.

1Н NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.60 (s, 1Н, NH), 8.56 (s, 1H, NH), 8,17 (d.d., J1=6,35 Hz, J2=2,32 Hz, 1H), 8,10 (d., J=2,32 Hz, 1H), 7,28-7,49 (m., 7H), 7,08 (d., J=8,68 Hz, 1H), 6,56-6,67 (m., 2H), 4,35 (t., J=9,05 Hz, 1H), 4,00 (t., J=9,34 Hz, 1H), 3,55 (t., J=8,68 Hz, 1H), 2,21 (s., 3H).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.60 (s, 1H, NH), 8.56 (s, 1H, NH), 8.17 (dd, J1 = 6.35 Hz, J2 = 2.32 Hz, 1H ), 8.10 (d., J = 2.32 Hz, 1H), 7.28-7.49 (m., 7H), 7.08 (d., J = 8.68 Hz, 1H), 6.56-6.67 (m., 2H), 4.35 (t., J = 9.05 Hz, 1H), 4.00 (t., J = 9.34 Hz, 1H), 3, 55 (t., J = 8.68 Hz, 1H); 2.21 (s., 3H).

Пример 27. Получение 5''-бром-1-(4-этоксифенил)-4'-(4-хлорфенил)-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-дион (1.27).Example 27. Obtaining 5 '' - bromo-1- (4-ethoxyphenyl) -4 '- (4-chlorophenyl) -1'-methyl-2-thioxo-5H-dispiro [imidazolidine-4,3'-pyrrolidin-2 ', 3' '- indole] -2' ', 5 (1``H) -dione (1.27).

Из 0,2 г (0,6 ммоль) соответствующего (Z)-3-(4-этоксифенил)-5-(4-хлорфенил)-2-оксоимидазолидин-4-она, 0,2 г (1,2 ммоль) 5-бромизатина и 0,15 г (1,2 ммоль) саркозина получено 0,22 г целевого соединения. Выход составил 63% Т_пл=210°C.From 0.2 g (0.6 mmol) of the corresponding (Z) -3- (4-ethoxyphenyl) -5- (4-chlorophenyl) -2-oxoimidazolidin-4-one, 0.2 g (1.2 mmol) 5-bromisatin and 0.15 g (1.2 mmol) of sarcosine obtained 0.22 g of the target compound. The yield was 63% T _mp = 210 ° C.

1Н NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.60 (s, 1Н, NH), 8.65 (s, 1H, NH), 8,15 (d.d., J1=6,35 Hz, J2=2,32 Hz, 1H), 8,12 (d., J=2,32 Hz, 1H), 7,34-7,53 (m., 6H), 7,08 (d., J=8,68 Hz, 1H), 6,56-6,67 (m., 2H), 4,35 (t., J=9,05 Hz, 1H), 4,00 (t., J=9,34 Hz, 1H), 3,99-4,02 (m., 2H), 3,55 (t., J=8,68 Hz, 1H), 2,21 (s., 3H), 1,29-1,32 (m., 3H).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.60 (s, 1H, NH), 8.65 (s, 1H, NH), 8.15 (dd, J1 = 6.35 Hz, J2 = 2.32 Hz, 1H ), 8.12 (d., J = 2.32 Hz, 1H), 7.34-7.53 (m., 6H), 7.08 (d., J = 8.68 Hz, 1H), 6.56-6.67 (m., 2H), 4.35 (t., J = 9.05 Hz, 1H), 4.00 (t., J = 9.34 Hz, 1H), 3, 99-4.02 (m., 2H), 3.55 (t., J = 8.68 Hz, 1H), 2.21 (s., 3H), 1.29-1.32 (m., 3H).

Пример 28. Получение 1-(4-метоксифенил)-4'-(4-хлорфенил)-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-дион (1.28).Example 28. Preparation of 1- (4-methoxyphenyl) -4 '- (4-chlorophenyl) -1'-methyl-2-thioxo-5H-disiro [imidazolidin-4,3'-pyrrolidin-2', 3 "- indole] -2 '', 5 (1``H) -dione (1.28).

Из 0,15 г (0,5 ммоль) соответствующего (Z)-3-(4-метоксифенил)-5-(4-хлорфенил)-2-оксоимидазолидин-4-она, 0,14 г (1,0 ммоль) изатина и 0,09 г (1,0 ммоль) саркозина получено 0,18 г целевого соединения. Выход составил 66% Т_пл=208°C.From 0.15 g (0.5 mmol) of the corresponding (Z) -3- (4-methoxyphenyl) -5- (4-chlorophenyl) -2-oxoimidazolidin-4-one, 0.14 g (1.0 mmol) isatin and 0.09 g (1.0 mmol) of sarcosine obtained 0.18 g of the target compound. The yield was 66% T _mp = 208 ° C.

1Н NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.60 (s, 1Н, NH), 8.67 (s, 1H, NH), 8,17 (d.d., J1=6,35 Hz, J2=2,32 Hz, 1H), 8,10 (d., J=2,32 Hz, 1H), 7,28-7,49 (m., 6H), 7,08 (d., J=8,68 Hz, 1H), 6,56-6,67 (m., 2H), 4,35 (t, J=9,05 Hz, 1H), 4,00 (t, J=9,34 Hz, 1H), 3.74 (s, 3H), 3,55 (t., J=8,68 Hz, 1H), 2,21 (s., 3H).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.60 (s, 1H, NH), 8.67 (s, 1H, NH), 8.17 (dd, J1 = 6.35 Hz, J2 = 2.32 Hz, 1H ), 8.10 (d., J = 2.32 Hz, 1H), 7.28-7.49 (m., 6H), 7.08 (d., J = 8.68 Hz, 1H), 6.56-6.67 (m., 2H), 4.35 (t, J = 9.05 Hz, 1H), 4.00 (t, J = 9.34 Hz, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.55 (t., J = 8.68 Hz, 1H), 2.21 (s., 3H).

Пример 29. Получение 1-(3-хлор-4-фторфенил)-4'-(4-этилфенил)-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-дион (1.29).Example 29. Obtaining 1- (3-chloro-4-fluorophenyl) -4 '- (4-ethylphenyl) -1'-methyl-2-thioxo-5H-disiro [imidazolidin-4,3'-pyrrolidin-2', 3 '' - indole] -2 '', 5 (1``H) -dione (1.29).

Из 0,2 г (0,6 ммоль) соответствующего (Z)-3-(3-хлор-4-фторфенил)-5-(4-этилфенил)-2-оксоимидазолидин-4-она, 0,19 г (1,2 ммоль) изатина и 0,15 г (1,2 ммоль) саркозина получено 0,28 г целевого соединения. Выход составил 87%. Т_пл=219°C.From 0.2 g (0.6 mmol) of the corresponding (Z) -3- (3-chloro-4-fluorophenyl) -5- (4-ethylphenyl) -2-oxoimidazolidin-4-one, 0.19 g (1 , 2 mmol) of isatin and 0.15 g (1.2 mmol) of sarcosine, 0.28 g of the target compound are obtained. The yield was 87%. _Mp = 219 ° C.

1Н NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.21 (s, 1Н, NH), 8.32 (s, 1H, NH), 8,14 (d.d., J1=6,35 Hz, J2=2,32 Hz, 1H), 8,10 (d., J=2,32 Hz, 1H), 7,32-7,47 (m., 6H), 7,03 (d., J=8,68 Hz, 1H), 6,58-6,69 (m., 2H), 4,32 (t., J=9,05 Hz, 1H), 4,01 (t., J=9,34 Hz, 1H), 3,55 (t., J=8,68 Hz, 1H), 2.58-2.62 (m., 2H), 2,21 (s., 3H), 1,18 (t., 1H).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.21 (s, 1H, NH), 8.32 (s, 1H, NH), 8.14 (dd, J1 = 6.35 Hz, J2 = 2.32 Hz, 1H ), 8.10 (d., J = 2.32 Hz, 1H), 7.32-7.47 (m., 6H), 7.03 (d., J = 8.68 Hz, 1H), 6.58-6.69 (m., 2H), 4.32 (t., J = 9.05 Hz, 1H), 4.01 (t., J = 9.34 Hz, 1H), 3, 55 (t., J = 8.68 Hz, 1H), 2.58-2.62 (m., 2H), 2.21 (s., 3H), 1.18 (t., 1H).

Пример 30. Получение 5''-бром-1-фенил-4'-(4-бромфенил)-1'-метил-2-тиоксо-5Н-диспиро[имидазолидин-4,3'-пирролидин-2',3''-индол]-2'',5(1''Н)-дион (1.30).Example 30. Preparation of 5 '' - bromo-1-phenyl-4 '- (4-bromophenyl) -1'-methyl-2-thioxo-5H-disiro [imidazolidin-4,3'-pyrrolidin-2', 3 ' '-indole] -2``, 5 (1''H) -dione (1.30).

Из 0,15 г (0,5 ммоль) соответствующего (Z)-3-фенил-5-(4-бромфенил)-2-оксоимидазолидин-4-она, 0,14 г (1 ммоль) 5-бромизатина и 0,09 г (1 ммоль) саркозина получено 0,18 г целевого соединения. Выход составил 63%. Т_пл=247°С.Of 0.15 g (0.5 mmol) of the corresponding (Z) -3-phenyl-5- (4-bromophenyl) -2-oxoimidazolidin-4-one, 0.14 g (1 mmol) of 5-bromisatin and 0, 09 g (1 mmol) of sarcosine obtained 0.18 g of the target compound. The yield was 63%. _Mp = 247 ° C.

1Н NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.75 (s, 1Н, NH), 10.48 (s, 1H, NH), 7.59 (s, 1H), 7.46-7.21-7.50 (m., 5H), 7.01-7.12 (m., 3H), 6.82 (d, J=7.8 Hz, 2H), 6.58 (d, J=8.8 Hz, 2H), 4.30 (t, J=9.2 Hz, 1H), 3.99 (t, J=9.4 Hz, 1H), 3.47 (t, J=8.6 Hz, 1H), 2.16 (s, 3H).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.75 (s, 1H, NH), 10.48 (s, 1H, NH), 7.59 (s, 1H), 7.46-7.21-7.50 (m., 5H), 7.01- 7.12 (m., 3H), 6.82 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 6.58 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.30 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.99 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 3.47 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 2.16 (s, 3H).

Пример 31. Получение солей (в виде гидрохлоридов)Example 31. Obtaining salts (in the form of hydrochlorides)

Для получения солей диспиро-индолинонов формулы 1 полученные соединения 1.1-1.30 растворяют в спирте, добавляют к ним насыщенный спиртовой раствор хлороводорода. После окончания реакции выпавший осадок отфильтровывают. Получают кристаллы гидрохлоридов соединений 1.1-1.30.To obtain the salts of dispiro-indolinones of formula 1, the obtained compounds 1.1-1.30 are dissolved in alcohol, a saturated alcoholic solution of hydrogen chloride is added to them. After completion of the reaction, the precipitate formed is filtered off. Hydrochloride crystals of compounds 1.1-1.30 are obtained.

Пример 32. Биологические испытания.Example 32. Biological tests.

Все представленные диспиро-индолиноны формулы 1 были протестированы на их способность блокировать клеточный рост и вызывать апоптоз на различных штаммах опухолевых клеточных линий.All of the presented dispiro-indolinones of formula 1 were tested for their ability to block cell growth and induce apoptosis in various strains of tumor cell lines.

Эти модели включают дифференцированные клетки гепатоцеллюлярной карциномы человека (HepG2), эмбриональные клетки почек (НЕК293), линию раковых клеток молочной железы (MCF-7), шейки матки (SiHa) и клетки рака толстой кишки (НСТ116 Р53-/- и НСТ116 Р53+/+), а также клетки рака простаты РС3 и LNCap. Цитотоксичность этих вещества оценивали с помощью стандартного МТТ-теста с (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенил тетразолий бромидом. Результаты биологических испытаний представлены в Таблице 1.These models include differentiated human hepatocellular carcinoma cells (HepG2), embryonic kidney cells (HEK293), a line of breast cancer cells (MCF-7), cervical cancer (SiHa) and colon cancer cells (HCT116 P53 - / - and HCT116 P53 + / +), as well as prostate cancer cells PC3 and LNCap. The cytotoxicity of these substances was evaluated using a standard MTT test with (3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl tetrazolium bromide. The results of biological tests are presented in Table 1.

Известно, что в клеточной линии LNCAp белок р53 экспрессирован в большей концентрации по сравнению с клеточной линией РС3 [Wassman, С.D. et al. Computational identification of a transiently open L1/S3 pocket for reactivation of mutant p53. Nature Commun. 4, 1407 (2013)]. Таким образом, имея различия в значениях цитотоксичности соединений на этих двух линиях более, чем на один порядок, мы можем судить о эффективности полученных соединений как ингибиторов p53-MDM2 для терапии рака простаты. Как видно из данных Таблицы 1, соединение 1.2 обладает значительным цитототоксическим эффектом на клеточных линиях всех типов, проявляя селективность пот отношению к линии LNCap со значением IC₅₀ 3.45±1.86 мкМ, соединение 1.5, также проявляет селективность по отношению к линии LNCAp со значением IC₅₀ 4.65±2.36 мкМ. Соединение 1.6 проявляет цитотоксический эффект по отношению к линии LNCAp со значением IC₅₀ 4.65±2.36 мкМ, соединение 1.10 имеет значение IC₅₀ 2.41±0.88 мкМ, соединение 1.11 имееет значение IC₅₀ 13.05±1.98 мкМ, соединение 1.12 и 1.13 имеют значения IC₅₀ на клеточных линиях 9.03±1.28 и 9.67±1.56 мкМ соответственно. Для соединений 1.22, 1.24, 1.25 и 1.28 значения цитотоксичности IC₅₀ составляют 6.85±0.75, 12.72±3.90, 3.14±0.72 и 7.5±2.1 мкМ. Данные соединения могут быть использованы как противоопухолевые препараты для терапии рака простаты.In the LNCAp cell line, p53 protein is known to be expressed at a higher concentration than the PC3 cell line [Wassman, C. D. et al. Computational identification of a transiently open L1 / S3 pocket for reactivation of mutant p53. Nature Commun. 4, 1407 (2013)]. Thus, having differences in the cytotoxicity of compounds on these two lines by more than one order of magnitude, we can judge the effectiveness of the compounds as p53-MDM2 inhibitors for the treatment of prostate cancer. As can be seen from the data in Table 1, compound 1.2 has a significant cytotoxic effect on cell lines of all types, exhibiting sweat selectivity to the LNCap line with an IC ₅₀ value of 3.45 ± 1.86 μM, compound 1.5 also exhibits selectivity to the LNCAp line with an IC ₅₀ value 4.65 ± 2.36 μM. Compound 1.6 exerts a cytotoxic effect with respect to the LNCAp line with an IC ₅₀ value of 4.65 ± 2.36 μM, compound 1.10 has an IC ₅₀ value of 2.41 ± 0.88 μM, compound 1.11 has an IC ₅₀ value of 13.05 ± 1.98 μM, compound 1.12 and 1.13 have an IC ₅₀ value of cell lines 9.03 ± 1.28 and 9.67 ± 1.56 μM, respectively. For compounds 1.22, 1.24, 1.25, and 1.28, the IC ₅₀ cytotoxicity values are 6.85 ± 0.75, 12.72 ± 3.90, 3.14 ± 0.72, and 7.5 ± 2.1 μM. These compounds can be used as antitumor drugs for the treatment of prostate cancer.

Дополнительно было проведено исследование цитотоксичности на клеточных линиях НСТ116 Р53+/+, экспрессирующей белок р53 и НСТ116 Р53-/- не имеющей данный белок. Данные линии являются клеточными линиями общей морфологии рака прямой и толстой кишки, однако в линии НСТ116 Р53-/ белок р53 генетически модифицирован и содержится в минимальной концентрации. Как видно из Таблицы 1, соединения 1.6, 1.9 и 1.10 имеют значения цитоксичности IC₅₀ на клеточной линии НСТ116 Р53+/+ 16.3±6.7, 2.84±0.77 и 4.50±0.81 мкМ соответственно. Для соединений 1.18, 1.22 и 1.25 значения цитотоксичности на линии НСТ116 Р53+/+ составляют 3.14±1.02, 2.15±0.58 и 4.56±1.51 мкМ. Наилучший цитотоксический эфеект и большую селективность проявляет соединение 1.29, которое имеет IC₅₀ 0.9±0.02 мкМ. Данные соединения могут быть использованы как противоопухолевые препараты для терапии рака толстой и прямой кишки.Additionally, a study was conducted of cytotoxicity on cell lines HCT116 P53 + / +, expressing the protein p53 and HCT116 P53 - / - not having this protein. These lines are cell lines of the general morphology of colorectal cancer, however, in the HCT116 line, P53- / p53 protein is genetically modified and contains a minimum concentration. As can be seen from Table 1, compounds 1.6, 1.9, and 1.10 have IC ₅₀ cytoxicity values on the HCT116 P53 + / + 16.3 ± 6.7, 2.84 ± 0.77, and 4.50 ± 0.81 μM cell line, respectively. For compounds 1.18, 1.22, and 1.25, the cytotoxicity values on the HCT116 P53 + / + line are 3.14 ± 1.02, 2.15 ± 0.58, and 4.56 ± 1.51 μM. Compound 1.29, which has an IC _{50 of} 0.9 ± 0.02 μM, exhibits the best cytotoxic effect and greater selectivity. These compounds can be used as antitumor drugs for the treatment of colon and rectal cancer.

Пример 33. Протокол исследования цитотоксичности.Example 33. Protocol research cytotoxicity.

Цитотоксичность тестируемых веществ оценивали с помощью стандартного МТТ-теста с использованием 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенил тетразолий бромида [Ciapetti G, Cenni Е, Pratelli L, Pizzoferrato А. 1993. In vitro evaluation of cell/biomaterial interaction by MTT assay. Biomaterials 14: 359-364]. Для этого рассевают 4000 клеток на лунку в 130 мкл среды DMEM в 96-луночном планшете и выдерживают в инкубаторе при температуре 37°C с 5% CO₂ в течение первых 24 ч без обработки. Затем в плашки добавляют 15 мкл растворов вода-ДМСО испытуемых веществ к клеткам (восемь разведений от 50 нМ до 100 мкМ) и инкубируют клетки 72 ч, используя в качестве контроля доксорубицин (восемь разведений от 3 нМ до 6 мкмоль). После этого добавляют МТТ с концентрацией 0,5 мг/мл в среде, инкубируют клетки 2 ч с последующим удалением среды и добавлением 100 мкл ДМСО и измеряют пропускание при 565 нм с использованием планшетного ридера. IC₅₀ рассчитывают с использованием "GraphPad Prism 6" software (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA).The cytotoxicity of the test substances was assessed using a standard MTT assay using 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl tetrazolium bromide [Ciapetti G, Cenni E, Pratelli L, Pizzoferrato A. 1993. In vitro evaluation of cell / biomaterial interaction by MTT assay. Biomaterials 14: 359-364]. To do this, 4000 cells per well are sown in 130 μl of DMEM medium in a 96-well plate and incubated at 37 ° C with 5% CO ₂ for the first 24 hours without treatment. Then, 15 μl of water-DMSO solutions of the test substances are added to the plates in the plates (eight dilutions from 50 nM to 100 μM) and the cells are incubated for 72 h using doxorubicin (eight dilutions from 3 nM to 6 μmol) as a control. Then, MTT with a concentration of 0.5 mg / ml in the medium is added, the cells are incubated for 2 hours, followed by removal of the medium and the addition of 100 μl of DMSO, and the transmission at 565 nm is measured using a plate reader. IC _{50 are} calculated using the "GraphPad Prism 6" software (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA).

Настоящее изобретение может быть использовано для синтеза соединений для терапии онкологических заболеваний.The present invention can be used for the synthesis of compounds for the treatment of cancer.

Claims (3)

Способ получения диспироиндолинонов общей формулы 1,The method of producing dispiroindolinone of General formula 1,

где X - S или О; R1 выбран из группы, включающей водород, фенил, фенил, замещенный 1-2 заместителями, выбранными из атома галогена (фтор, хлор, бром), гидрокси-, низшей алкокси-группы (метокси, этокси, изопропилокси, пропаргилокси) или С1-С6 алкила (метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил); R2 выбран из группы, включающей незамещенный пиридил или фенил, замещенный 1-2 заместителями, выбранными из атома галогена (фтор, хлор, бром), гидрокси-, низшей алкокси-группы (метокси, этокси, изопропилокси, пропаргилокси), альдегидной группы или С1-С6 алкила (метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил); R3 выбран из группы, включающей атом галогена, водорода или нитро-группу; R4 представляет собой С1-С5 алкил (метил, этил, пропил, бутил, пентил); R5 представляет собой атом водорода или алкил С1-С3 (метил, этил, пропил), характеризующийся тем, что 1±0.1 мольных экв. соответствующего имидазолидин-4-она растворяют в одноатомном спирте, взятом в количестве 10 мл на 0.5±0.1 ммоль, и кипятят при температуре 100±10°С в течение 10±2 мин после закипания образовавшегося раствора, затем в кипящую смесь добавляют саркозин, взятый из расчета 2±0.2 экв., и соответствующий изатин, взятый в количестве 2±0.2 экв. по отношению к соответствующему имидазолидин-4-ону, полученную смесь кипят до окончания реакции, затем смесь охлаждают до комнатной температуры, выпавший осадок отфильтровывают на вакууме со стеклянным пористым фильтром и колбой Бунзена.where X is S or O; R1 is selected from the group consisting of hydrogen, phenyl, phenyl substituted with 1-2 substituents selected from a halogen atom (fluorine, chlorine, bromine), hydroxy, lower alkoxy groups (methoxy, ethoxy, isopropyloxy, propargyloxy) or C1-C6 alkyl (methyl, ethyl, propyl, butyl, pentyl, hexyl); R2 is selected from the group consisting of unsubstituted pyridyl or phenyl substituted with 1-2 substituents selected from a halogen atom (fluorine, chlorine, bromine), hydroxy, lower alkoxy group (methoxy, ethoxy, isopropyloxy, propargyloxy), aldehyde group, or C1 -C6 alkyl (methyl, ethyl, propyl, butyl, pentyl, hexyl); R3 is selected from the group consisting of a halogen atom, hydrogen, or a nitro group; R4 is C1-C5 alkyl (methyl, ethyl, propyl, butyl, pentyl); R5 represents a hydrogen atom or C1-C3 alkyl (methyl, ethyl, propyl), characterized in that 1 ± 0.1 molar equivalents. the corresponding imidazolidin-4-one is dissolved in monohydric alcohol taken in an amount of 10 ml per 0.5 ± 0.1 mmol and boiled at a temperature of 100 ± 10 ° C for 10 ± 2 min after boiling the resulting solution, then add sarcosine taken in a boiling mixture from the calculation of 2 ± 0.2 eq., and the corresponding isatin, taken in an amount of 2 ± 0.2 eq. with respect to the corresponding imidazolidin-4-one, the resulting mixture is boiled until the reaction is complete, then the mixture is cooled to room temperature, the precipitate formed is suction filtered with a glass porous filter and a Bunsen flask.