RU2676712C1 - Medium for making histological sections - Google Patents

Medium for making histological sections Download PDF

Info

Publication number
RU2676712C1
RU2676712C1 RU2018100371A RU2018100371A RU2676712C1 RU 2676712 C1 RU2676712 C1 RU 2676712C1 RU 2018100371 A RU2018100371 A RU 2018100371A RU 2018100371 A RU2018100371 A RU 2018100371A RU 2676712 C1 RU2676712 C1 RU 2676712C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
medium
sucrose
distilled water
thermostat
bottle
Prior art date
Application number
RU2018100371A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Антон Николаевич Литвиненко
Татьяна Павловна Сатаева
Игорь Владимирович Заднипряный
Original Assignee
Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Крымский федеральный университет имени В.И. Вернадского" (ФГАОУ ВО "КФУ им. В.И. Вернадского")
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Крымский федеральный университет имени В.И. Вернадского" (ФГАОУ ВО "КФУ им. В.И. Вернадского") filed Critical Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Крымский федеральный университет имени В.И. Вернадского" (ФГАОУ ВО "КФУ им. В.И. Вернадского")
Priority to RU2018100371A priority Critical patent/RU2676712C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2676712C1 publication Critical patent/RU2676712C1/en

Links

Images

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/2813Producing thin layers of samples on a substrate, e.g. smearing, spinning-on

Abstract

FIELD: medicine.SUBSTANCE: invention relates to medicine, biology, veterinary medicine and can be used in the practice of histological laboratories for the conclusion and storage of histological preparations. Medium for making histological sections is disclosed, which contains gum arabic in the amount of 35–37 wt%, sucrose – 12–14 wt%, glycerin – 2–5 wt%, phenol – 2–3 wt%, and distilled water – to 100 wt%. At the same time for the preparation of the medium, a vial with a suspension of gum arabic in distilled water in a mass ratio 1:1 is placed in a thermostat at a temperature of 60 °C, with stirring occasionally by rolling the bottle in the horizontal plane, after 12–14 hours, the remaining distilled water and sucrose in the form of fine powder are added, exposed in a thermostat at a temperature of 60 °C until complete dissolution of sucrose, molten phenol and glycerin are added and exposed in a thermostat at 60 °C, periodically rolling the bottle to obtain a homogeneous yellowish opalescent liquid.EFFECT: environment for histological sections is non-toxic, resistant to fungal lesions, plastic, preventing fading and deformation of histological sections, transparent, devoid of air bubbles and reusable after manufacture.1 cl, 2 dwg, 1 ex

Description

Изобретение относится к медицине, биологии, ветеринарии и может быть использовано в практике работы гистологических лабораторий для заключения и хранения гистологических препаратов.The invention relates to medicine, biology, veterinary medicine and can be used in the practice of histological laboratories for the conclusion and storage of histological preparations.

Большинство известных сред для заключения гистологических срезов в виде различных синтетических смол, например, трикапрат целлюлозы, пластифицированный малеиновый полимер, циклопарафиновый полимер, полистирол нейтральны (Меркулов Г.А. Курс патогистологической техники. - М.: «Медицина», 1969. - С. 132.). В данных средах хорошо сохраняются основные анилиновые красители, показатели преломления света оптимальны для микроскопии, но в то же время они нейро- и нефротоксичные, требуют дополнительного введения растворителя при повторном использовании и способствуют выцветанию ряда красителей. Для хранения стекол с заключенными в смолы срезами необходимо иметь специальные коробки, кроме того, такие среды не всегда могут применяться для заключения и исследования замороженных срезов для гистохимических исследований, а также в паразитологии.Most of the known environments for the conclusion of histological sections in the form of various synthetic resins, for example, cellulose tricaprate, plasticized maleic polymer, cycloparaffin polymer, polystyrene are neutral (Merkulov G. A. Course of histological technology. - M .: "Medicine", 1969. - S. 132.). The main aniline dyes are well preserved in these media, the refractive indices of light are optimal for microscopy, but at the same time they are neuro- and nephrotoxic, require additional solvent introduction during repeated use and contribute to the fading of a number of dyes. For the storage of glasses with sections enclosed in resins, it is necessary to have special boxes; in addition, such media cannot always be used for enclosing and examining frozen sections for histochemical studies, as well as in parasitology.

Известна среда для заключения гистологических срезов, часто используемая в отечественной практике - канадский или пихтовый бальзамы, представляющие собой растворы натуральных смол в ксилоле (Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника - М.: Советская наука, 1957. - 469 с.). Однако в процессе высыхания среды за счет улетучивания растворителя под покровное стекло нередко поступают пузырьки воздуха, что создает оптические искажения при исследование препарата. Нередко смола с краев попадает на верхнюю поверхность покровного стекла и, засыхая, образует неровности, что может повредить объектив микроскопа. При длительном хранении бальзамы желтеют, трескаются, кристаллизуются, тем самым разрушая препарат, что часто наблюдается при заключении и хранении толстых срезов. К тому же, основные анилиновые красители в таких препаратах обесцвечиваются, а берлинская лазурь, окрашивание по ван Гизону и эозином довольно быстро выцветают.A well-known medium for the conclusion of histological sections, often used in domestic practice, is Canadian or fir balms, which are solutions of natural resins in xylene (Roskin G.I., Levinson L.B. Microscopic technology - M .: Soviet science, 1957. - 469 from.). However, during the drying of the medium due to the volatilization of the solvent, air bubbles often enter under the coverslip, which creates optical distortions during the study of the drug. Often, the resin from the edges falls on the upper surface of the coverslip and, drying up, forms irregularities, which can damage the microscope lens. During long-term storage, balms turn yellow, crack, crystallize, thereby destroying the drug, which is often observed during the conclusion and storage of thick sections. In addition, the main aniline dyes in such preparations are discolored, and Prussian blue, van Gieson and eosin staining fade quite quickly.

Известна среда для заключения гистологических срезов (Патент РФ №2117273), содержащая 19-21%-ный раствор пенопласта в ксилоле, стабилизированный диметилфталатом из расчета 1:100, причем после нанесения капли раствора на срез и высыхания, последний оказывается заключенным в прозрачный и устойчивый при хранении материал в виде пленки.A well-known medium for the conclusion of histological sections (RF Patent No. 2117273), containing a 19-21% solution of polystyrene foam in xylene, stabilized with dimethyl phthalate at a rate of 1: 100, and after applying a drop of the solution to the section and drying, the latter is enclosed in a transparent and stable when storing material in the form of a film.

К недостаткам данной среды относятся следующие: при нагревании пенопласт выделяет пары формальдегида, предложенный раствор не предполагает использование покровных стекол, что снижает устойчивость препарата к внешним воздействиям, а следовательно и объективность морфологических изменений в срезе; среда не обладает достаточной прозрачностью для изучения срезов, полностью высыхает в течение 20-24 часов, что не позволяет применять ее для исследований срочных операционных биопсий, а также данная среда не может применяться для заключения замороженных срезов при проведении гистохимических исследований, которые в процессе их заключения в данную среду могут коробиться, ломаться или даже плавиться, необходимы особые условия хранения: без доступа прямых солнечных лучей.The disadvantages of this environment include the following: when heated, the foam emits formaldehyde vapor, the proposed solution does not involve the use of coverslips, which reduces the resistance of the drug to external influences, and therefore the objectivity of morphological changes in the section; the medium does not have sufficient transparency for the study of sections, dries completely within 20-24 hours, which does not allow it to be used for urgent surgical biopsy studies, and this medium cannot be used for concluding frozen sections during histochemical studies, which are in the process of their conclusion this environment may warp, break, or even melt; special storage conditions are necessary: without access to direct sunlight.

Известна также среда для заключения гистологических срезов (Роскин Г.И. Микроскопическая техника. - М.: «Рипол Классик», 1951. - c. 165) в виде нетоксичной водорастворимой среды из глицерин-желатина, для приготовления которой 7 г желатина размачивают 2-3 часа в воде, затем после слива воды добавляют 42 мл горячей дистиллированной или кипяченой воды, 50 г глицерина и 0,5 г кристаллической карболовой кислоты, далее полученную смесь нагревают на водяной бане, фильтруют через ткань или вату и остужают, при этом глицерин-желатин застывает. При приготовлении препарата кусочек глицерин-желатина кладут на предметное стекло, которое слегка нагревают на спиртовке. В расплавившийся глицерин-желатин переносят объект из глицерина и накрывают покровным стеклом. Недостатками данной среды при ее использовании является недолговечность препаратов, быстрое засыхание среды и поражение препаратов плесневыми грибками.Also known is the medium for the conclusion of histological sections (Roskin G.I. Microscopic technique. - M .: Ripol Classic, 1951. - p. 165) in the form of a non-toxic water-soluble medium from glycerin-gelatin, for the preparation of which 7 g of gelatin is soaked 2 -3 hours in water, then after draining the water, add 42 ml of hot distilled or boiled water, 50 g of glycerol and 0.5 g of crystalline carbolic acid, then the resulting mixture is heated in a water bath, filtered through a cloth or cotton wool and cooled, while glycerin Gelatin freezes. When preparing the drug, a piece of glycerin-gelatin is placed on a glass slide, which is slightly heated on an alcohol lamp. An object from glycerin is transferred to the molten glycerin-gelatin and covered with a coverslip. The disadvantages of this environment when using it is the fragility of the drugs, the rapid drying of the medium and the defeat of the drugs by mold.

В качестве прототипа заявляемого изобретения выбрана среда для заключения гистологических срезов (Э. Пирс. Гистохимия теоретическая и прикладная (пер. с англ.). - М.: Изд. Иностр. лит. - 1962), содержащая 10 г сухого гуммиарабика, 10 мл дистиллированной воды, 5 г сахарозы и 0,01-0,02 г растолченного тимола, причем первоначально заливают гуммиарабик дистиллированной водой тщательно перемешивая стеклянной палочкой, полученный раствор во флаконе закрывают пробкой и оставляют на 24 часа при комнатной температуре, затем в него высыпают сахарозу и не размешивая, выдерживают 2-3 часа в термостате при температуре 55°С до полного растворения сахарозы, далее в горячий раствор добавляют 0,01-0,02 г растолченного тимола и аккуратно помешивают до получения густого опалесцирующего раствора.As a prototype of the claimed invention, the medium for the conclusion of histological sections was selected (E. Pearce. Theoretical and applied histochemistry (transl. From English). - M .: Publishing House of Foreign Literature. - 1962), containing 10 g of dry gum arabic, 10 ml distilled water, 5 g of sucrose and 0.01-0.02 g of crushed thymol, and gum arabic is initially poured with distilled water, thoroughly stirring with a glass rod, the resulting solution in a vial is closed with a stopper and left for 24 hours at room temperature, then sucrose is poured into it and don't stir Separated, incubated for 2-3 hours in a thermostat at 55 ° C until complete dissolution of the sucrose, then added to a hot solution of 0.01-0.02 g comminuted thymol and gently stir until opalescent dense solution.

Основными недостатками данной среды являются ее чрезмерная вязкость, что приводит к образованию при помешивании долго неисчезающих пузырьков, которые создают погрешности при проведении оптических исследований и, соответственно, нарушают объективность морфологических изменений в срезе, преждевременная порча препаратов плесневыми грибками при отсутствии дополнительной восковой или парафиновой окантовки.The main disadvantages of this medium are its excessive viscosity, which leads to the formation of non-fading bubbles during stirring, which create errors during optical studies and, accordingly, violate the objectivity of morphological changes in the section, premature spoilage of molds in the absence of additional wax or paraffin edging.

В настоящее время, исходя из вышеприведенных составов сред для заключения гистологических срезов, проблемой является улучшение качества среды для прочной и длительной фиксации окрашенных гистологических срезов за счет использования небольшого количества исходных химически материалов, быстрого приготовления среды, низкой токсичности и низкой себестоимости используемых реагентов, высокой прозрачности, длительного срока хранения и возможности повторного использования без добавления растворителя.Currently, based on the above compositions of the media for the conclusion of histological sections, the problem is to improve the quality of the environment for a durable and long-term fixation of stained histological sections through the use of a small amount of starting chemical materials, quick preparation of the medium, low toxicity and low cost of reagents used, high transparency , long shelf life and the possibility of reuse without the addition of solvent.

Техническим результатом, достигаемым изобретением, является разработка нетоксичной среды для заключения гистологических срезов, устойчивой к грибковым поражениям, пластичной, препятствующей выцветанию и деформации гистологических срезов, прозрачной, лишенной пузырьков воздуха и допускающей многократное использование после изготовления, что позволит повысить качество гистологического препарата при сохранении окраски тканей.The technical result achieved by the invention is the development of a non-toxic environment for the conclusion of histological sections, resistant to fungal lesions, plastic, preventing fading and deformation of histological sections, transparent, devoid of air bubbles and allowing repeated use after manufacture, which will improve the quality of the histological preparation while maintaining color tissues.

Для этого, как и в прототипе, предлагается использовать в составе среды для гистологических срезов гуммиарабик, сахарозу и дистиллированную воду.For this, as in the prototype, it is proposed to use gum arabic, sucrose and distilled water as part of the medium for histological sections.

Сущность заявляемого изобретения заключается в том, что среда для заключения гистологических срезов, включающая гуммиарабик, сахарозу и дистиллированную воду, дополнительно содержит глицерин и фенол, при следующем соотношении компонентов, мас. %:The essence of the claimed invention lies in the fact that the medium for the conclusion of histological sections, including gum arabic, sucrose and distilled water, additionally contains glycerin and phenol, in the following ratio, wt. %:

гуммиарабикgum arabic 35-3735-37 сахарозаsucrose 12-1412-14 глицеринglycerol 2-52-5 фенолphenol 2-3,2-3, дистиллированная водаdistilled water до 100%,up to 100%

причем для приготовления среды флакон с взвесью гуммиарабика в дистиллированной воде в соотношении масс. 1:1 помещают в термостат при температуре 60°С, периодически помешивая раскатыванием флакона в горизонтальной плоскости, через 12-14 часов добавляют оставшуюся дистиллированную воду, затем добавляют сахарозу в виде мелкодисперсного порошка и перемешивают с содержимым флакона, экспонируют в термостате при температуре 60°С до полного растворения сахарозы, после чего добавляют расплавленный фенол и глицерин, экспонируют в термостате при температуре 60°С, периодически раскатывая флакон до получения однородной желтоватой опалесцирующей жидкости.moreover, to prepare the medium, a bottle with a suspension of gum arabic in distilled water in a mass ratio. 1: 1 is placed in a thermostat at a temperature of 60 ° C, stirring occasionally by rolling the bottle in a horizontal plane, after 12-14 hours add the remaining distilled water, then add sucrose in the form of fine powder and mix with the contents of the bottle, expose in a thermostat at a temperature of 60 ° C until complete dissolution of sucrose, after which molten phenol and glycerin are added, expose in a thermostat at a temperature of 60 ° C, periodically rolling the bottle until a homogeneous yellowish opalescent liquid is obtained and.

Использование приведенных выше компонентов среды в отличном от данного сочетании при осуществлении изобретения не позволяет достигнуть ожидаемый технический результат, так как только данное сочетание обеспечивает получение максимального положительного эффекта.The use of the above components of the environment in a combination different from this one during the implementation of the invention does not allow to achieve the expected technical result, since only this combination ensures maximum positive effect.

По сравнению с прототипом заявляемая среда характеризуется новым составом компонентов, что подтверждает соответствие заявляемого изобретения критерию "новизна".Compared with the prototype of the claimed environment is characterized by a new composition of the components, which confirms the compliance of the claimed invention with the criterion of "novelty."

Приведенные выше отличительные признаки заявляемого изобретения, по мнению авторов, являются существенными, так как именно такое сочетание отличительных признаков, выполненных в определенной последовательности, позволяет получать среду с высокой прозрачностью, низкой токсичностью, длительным сроком хранения, возможностью повторного использования без добавления растворителя для заключения и хранения окрашенных гистологических срезов, и может применяться в патологоанатомической практике при морфологическом исследовании различного рода биопсий и операционного материала, а также при проведении лабораторных научных исследований в области медицины, биологии, ветеринарии, а также паразитологии, зоологии, ботаники.The above distinguishing features of the claimed invention, according to the authors, are significant, since it is such a combination of distinctive features made in a certain sequence that allows you to get an environment with high transparency, low toxicity, long shelf life, the possibility of reuse without adding solvent to conclude and stained stained histological sections, and can be used in pathological practice in morphological studies of various about the type of biopsy and surgical material, as well as during laboratory scientific research in the field of medicine, biology, veterinary medicine, as well as parasitology, zoology, botany.

В отечественных и в зарубежных информационных источниках использование указанных отличительных признаков для получения заявляемого технического результата авторами не выявлено. Совокупность признаков авторы применили впервые, а полезность доказали экспериментальным путем.In domestic and foreign information sources, the use of these distinctive features to obtain the claimed technical result by the authors has not been identified. The authors used the totality of signs for the first time, and proved utility experimentally.

Причинно-следственная связь между совокупностью существенных признаков и обеспечиваемым изобретением техническим результатом состоит в следующем: добавление в состав среды глицерина позволяет придать ей пластичность, предупреждает деформацию гистологических структур, обеспечивает возможность повторного использования, добавление в среду фенола придает ей противогрибковые свойства, а за счет увеличения количества дистиллированной воды в составе среды уменьшается ее вязкость, что способствует изгнанию пузырьков воздуха и повышает точность проведения оптических исследований, а также способствует защите среды от высыхания при длительном хранении.A causal relationship between the set of essential features and the technical result provided by the invention is as follows: adding glycerol to the medium allows it to be plasticized, prevents deformation of histological structures, provides for reuse, adding phenol to the medium gives it antifungal properties, and by increasing the amount of distilled water in the composition of the medium decreases its viscosity, which contributes to the expulsion of air bubbles and increases the accuracy of optical studies, and also helps protect the environment from drying out during long-term storage.

В результате проведенных исследований определены оптимальные диапазоны содержания компонентов в заявляемой среде, обеспечивающие высокое качество гистологического препарата при сохранении окраски тканей, и являющиеся достаточными для получения среды высокого качества для прочной и длительной фиксации гистологических срезов.As a result of the studies, the optimal ranges of the content of components in the claimed medium were determined, which ensure high quality of the histological preparation while maintaining the color of the tissues, and are sufficient to obtain a high-quality medium for durable and long-term fixation of histological sections.

При добавлении в среду количества глицерина менее заявляемого диапазона свойства среды ухудшаются за счет снижения пластичности, что может приводить к деформации замороженных срезов и выцветанию препаратов, а добавление в состав среды глицерина в большем количестве, чем заявлено, нецелесообразно, так как при этом достижение технического результата проявляется либо в меньшей степени, либо вообще практически неосуществимо.When the amount of glycerin added to the medium is less than the claimed range, the properties of the medium deteriorate due to a decrease in plasticity, which can lead to deformation of frozen sections and fading of the preparations, and adding more glycerol to the medium than stated is impractical, since the achievement of the technical result manifested either to a lesser extent, or generally practically impracticable.

При добавлении в среду фенола в количестве менее заявляемого диапазона могут наблюдаться грибковые поражения препаратов, а добавление фенола в количестве соответственно предлагаемого диапазона достаточно для получения среды с противогрибковыми свойствами.When phenol is added to the medium in an amount less than the claimed range, fungal damage to the preparations can be observed, and phenol addition in an amount corresponding to the proposed range is sufficient to obtain an environment with antifungal properties.

Изобретение осуществляют следующим образом.The invention is as follows.

Емкость 100 мл из светлого стекла, например, флакон, наполняют дистиллированной водой и постепенно добавляют гуммиарабик в соотношении масс. 1:1. Флакон с полученной взвесью гуммиарабика в дистиллированной воде помещают в термостат при температуре 60°С, при этом периодически помешивают аккуратным раскатыванием флакона в горизонтальной плоскости. Затем через 12-14 часов добавляют оставшуюся дистиллированную воду, раскатывают флакон до полного растворения гуммиарабика. Далее отвешивают сахарозу в виде мелкодисперсного порошка и добавляют, аккуратно перемешивая ее с содержимым флакона. Экспонируют в термостате при температуре 60°С до полного растворения сахарозы. После полного растворения сахарозы добавляют расплавленный фенол и глицерин, экспонируют в термостате при температуре 60°С, периодически раскатывая флакон. После получения однородной желтоватой опалесцирующей жидкости во флаконе экспонирование в термостате прекращают.A capacity of 100 ml of light glass, for example, a bottle, is filled with distilled water and gum arabic in the mass ratio is gradually added. 1: 1. A bottle with a suspension of gum arabic in distilled water is placed in a thermostat at a temperature of 60 ° C, while occasionally stirring by neatly rolling the bottle in a horizontal plane. Then, after 12-14 hours, the remaining distilled water is added, the bottle is rolled until gum arabic is completely dissolved. Next, sucrose is weighed in the form of a fine powder and added, gently mixing it with the contents of the vial. Exhibited in a thermostat at a temperature of 60 ° C until complete dissolution of sucrose. After complete dissolution of sucrose, molten phenol and glycerin are added, exposed in a thermostat at a temperature of 60 ° C, periodically rolling the bottle. After obtaining a homogeneous yellowish opalescent liquid in the bottle, exposure to the thermostat is stopped.

Для заключения гистологических срезов каплю разогретой среды наносят стеклянной палочкой на влажный окрашенный промытый срез и накрывают покровным стеклом, оставляя до полного высыхания в строго горизонтальном положении.To conclude histological sections, a drop of the warmed medium is applied with a glass rod to a wet, washed washed section and covered with a coverslip, leaving to dry completely in a strictly horizontal position.

Перед применением полученную среду повторно разогревают до 60°С.Before use, the resulting medium is reheated to 60 ° C.

Сущность изобретения поясняется на следующем примере, показывающем повышение качества гистологического препарата при сохранении окраски тканей.The invention is illustrated by the following example, showing an increase in the quality of the histological preparation while maintaining the color of the tissues.

Пример.Example.

В посуду емкостью 50-100 мл из светлого стекла добавляют 20 мл дистиллированной воды, отвешивают 20 г гуммиарабика, постепенно добавляя его в воду. Полученную взвесь помещают в термостат при температуре 60°С, периодически помешивая аккуратным раскатыванием флакона в горизонтальной плоскости, через 12-14 часов добавляют еще 5 мл дистиллированной воды, раскатывают флакон до полного растворения гуммиарабика. Затем отвешивают 7,2 г сахарозы в виде мелкодисперсного порошка, аккуратно перемешают ее с содержимым флакона и экспонируют в термостате при температуре 60°С до полного растворения сахарозы. После полного растворения сахарозы добавляют 1,3 мл расплавленного фенола и 1,5 мл глицерина, экспонируют в термостате при температуре 60°С, периодически раскатывая флакон. После получения однородной желтоватой опалесцирующей жидкости экспонирование в термостате прекращают.In a container with a capacity of 50-100 ml of light glass add 20 ml of distilled water, weigh 20 g of gum arabic, gradually adding it to water. The resulting suspension is placed in a thermostat at a temperature of 60 ° C, stirring occasionally by gently rolling the bottle in a horizontal plane, after 12-14 hours add another 5 ml of distilled water, roll the bottle until gum arabic is completely dissolved. Then 7.2 g of sucrose in the form of a fine powder is weighed, gently mix it with the contents of the vial and expose in a thermostat at a temperature of 60 ° C until the sucrose is completely dissolved. After complete dissolution of sucrose, 1.3 ml of molten phenol and 1.5 ml of glycerol are added, exposed in a thermostat at a temperature of 60 ° C, periodically rolling the bottle. After obtaining a uniform yellowish opalescent liquid, exposure to the thermostat is stopped.

Возможна микроскопия препарата сражу же после его заключения под покровное стекло при условии удаления избытка среды. Через сутки среда полностью высыхает, обеспечивая прочную фиксацию покровного стекла. Готовые срезы просматривают в световой микроскоп. Перед повторным применением флакон со средой разогревают в термостате при температуре 55°-60°С в течении 10-15 мин.Microscopy of the drug is possible, but after its conclusion under a coverslip, provided that the excess medium is removed. After a day, the medium dries completely, providing a strong fixation of the coverslip. Finished sections are viewed under a light microscope. Before repeated use, the bottle with the medium is heated in a thermostat at a temperature of 55 ° -60 ° C for 10-15 minutes.

На рис. 1 показано выцветание гистологических препаратов при использовании среды, выбранной в качестве прототипа.In fig. 1 shows the fading of histological preparations using a medium selected as a prototype.

На рис. 2 показана сохранность окраски гистологических препаратов при использовании заявляемой среды.In fig. 2 shows the preservation of the color of histological preparations when using the inventive medium.

Заявляемая среда для заключения гистологических срезов обладает низкой токсичностью, низкой стоимостью, простотой в применении, не содержит экологически вредных веществ. При классическом изготовлении гистологического препарата перед заключением в данную среду отпадает потребность в дегидратации среза ткани в спиртах, просветлении и обработке в бензоле и ксилоле.The inventive medium for the conclusion of histological sections has low toxicity, low cost, ease of use, does not contain environmentally harmful substances. In the classical manufacture of a histological specimen before entering into this medium, there is no need for dehydration of a tissue section in alcohols, enlightenment and processing in benzene and xylene.

Среда для заключения гистологических срезов может быть использована при проведении срочных гистологических исследований, включая интраоперационные биопсии, поскольку позволяет изучать гистологический срез сразу после его заключения в среду.The medium for the conclusion of histological sections can be used for urgent histological studies, including intraoperative biopsies, since it allows you to study the histological section immediately after its conclusion on Wednesday.

Claims (3)

Среда для заключения гистологических срезов, включающая гуммиарабик, сахарозу и дистиллированную воду, отличающаяся тем, что дополнительно содержит глицерин и фенол, при следующем соотношении компонентов, мас. %:The environment for the conclusion of histological sections, including gum arabic, sucrose and distilled water, characterized in that it further comprises glycerin and phenol, in the following ratio, wt. %: гуммиарабикgum arabic 35-3735-37 сахарозаsucrose 12-1412-14 глицеринglycerol 2-52-5 фенолphenol 2-32-3 дистиллированная водаdistilled water до 100%,up to 100%
причем для приготовления среды флакон с взвесью гуммиарабика в дистиллированной воде в соотношении масс. 1:1 помещают в термостат при температуре 60°С, периодически помешивая раскатыванием флакона в горизонтальной плоскости, через 12-14 часов добавляют оставшуюся дистиллированную воду, затем добавляют сахарозу в виде мелкодисперсного порошка и перемешивают с содержимым флакона, экспонируют в термостате при температуре 60°С до полного растворения сахарозы, после чего добавляют расплавленный фенол и глицерин, экспонируют в термостате при температуре 60°С, периодически раскатывая флакон до получения однородной желтоватой опалесцирующей жидкости.moreover, to prepare the medium, a bottle with a suspension of gum arabic in distilled water in a mass ratio. 1: 1 is placed in a thermostat at a temperature of 60 ° C, stirring occasionally by rolling the bottle in a horizontal plane, after 12-14 hours add the remaining distilled water, then add sucrose in the form of fine powder and mix with the contents of the bottle, expose in a thermostat at a temperature of 60 ° C until complete dissolution of sucrose, after which molten phenol and glycerin are added, expose in a thermostat at a temperature of 60 ° C, periodically rolling the bottle until a homogeneous yellowish opalescent liquid is obtained and.
RU2018100371A 2018-01-09 2018-01-09 Medium for making histological sections RU2676712C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2018100371A RU2676712C1 (en) 2018-01-09 2018-01-09 Medium for making histological sections

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2018100371A RU2676712C1 (en) 2018-01-09 2018-01-09 Medium for making histological sections

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2676712C1 true RU2676712C1 (en) 2019-01-10

Family

ID=64958612

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018100371A RU2676712C1 (en) 2018-01-09 2018-01-09 Medium for making histological sections

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2676712C1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111896430A (en) * 2020-01-06 2020-11-06 上海恺擎智能科技有限公司 Pollen monitoring method and device
CN112284861A (en) * 2020-10-21 2021-01-29 上海市农业科学院 Fixing liquid for hypsizigus marmoreus basidiospore microscopic observation, preparation method, fixing method and application

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2117273C1 (en) * 1994-09-28 1998-08-10 Тюменская медицинская академия Medium for histological slice inclusion

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2117273C1 (en) * 1994-09-28 1998-08-10 Тюменская медицинская академия Medium for histological slice inclusion

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BANCROFT J.D. Theory and Practice of Histological Techniques // "Elsevier Health Sciences", 2008, p.725. *
ПИРС Э. Гистохимия теоретическая и прикладная // Москва, "Издательство иностранной литературы", 1962, стр.964. *
ПИРС Э. Гистохимия теоретическая и прикладная // Москва, "Издательство иностранной литературы", 1962, стр.964. РОСКИН Г.И. Микроскопическая техника // Москва, "Советская наука", 1957, стр.467. *
РОСКИН Г.И. Микроскопическая техника // Москва, "Советская наука", 1957, стр.467. BANCROFT J.D. Theory and Practice of Histological Techniques // "Elsevier Health Sciences", 2008, p.725. *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111896430A (en) * 2020-01-06 2020-11-06 上海恺擎智能科技有限公司 Pollen monitoring method and device
CN112284861A (en) * 2020-10-21 2021-01-29 上海市农业科学院 Fixing liquid for hypsizigus marmoreus basidiospore microscopic observation, preparation method, fixing method and application

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Steedman Ester wax: a new embedding medium
Sullivan-Brown et al. Embedding, serial sectioning and staining of zebrafish embryos using JB-4 resin
Culling Handbook of histopathological and histochemical techniques: including museum techniques
Slifer The formation and structure of a special waterabsorbing area in the membranes covering the grasshopper egg
Limbourg et al. Permeabilization of Drosophila eggs
Sidman et al. Improved polyester wax embedding for histology
CN105973673A (en) Paraffin sectioning method for eucalyptus tissue
Ravikumar et al. Mounting media: An overview
RU2676712C1 (en) Medium for making histological sections
CN109470534B (en) Pathological tissue transparent dewaxing liquid and preparation method thereof
CN103808550A (en) Myxosporean dyeing and sealed-storage method convenient for morphological observation
CN105131647B (en) A kind of dye composite, application and its application method for biological HE dyeing
Zirkle Combined fixing, staining and mounting media
Pernstich et al. Preparation of serial sections of arthropods using 2, 2-dimethoxypropane dehydration and epoxy resin embedding under vacuum
CN109781492A (en) It is a kind of to colour lasting tissue fixative solution
Lillie et al. Interim report of the committee on histologic mounting media: resinous media
Brygider In what embryonic stage do the eggs of Neodiprion enter the winter diapause?
CN104390834A (en) Sarranine and methyl violet mixed staining method for resin slices and staining solution thereof
Gurav et al. Histological and histochemical staining techniques
Romanov et al. Use of polyethylene glycol (peg, carbowax) as an embedding medium produces results comparable to paraffin
Sax The smear technic in plant cytology
Kalantari-Hesari et al. Modified methods to simplification histochemical, immunohistochemical, and hematoxylin-eosin staining
CN104774907B (en) Method for manufacturing temporary slide specimen of fungous conidium device through colorless and transparent EVA hot melt adhesive bar
Makings Transpiration through the Slifer’s patches of Acrididae (Orthoptera)
Clawson The Finishing of the Stained Slide: A Discussion of the Various Mounting Media and a Brief Excursion Into the Newer Substitutes for Cover Glasses

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20210110