RU2673537C2 - Средство для стимуляции роста клеток гранулоцитарного и лимфоидного ряда в костном мозге и регенерации костной ткани и способ его получения - Google Patents
Средство для стимуляции роста клеток гранулоцитарного и лимфоидного ряда в костном мозге и регенерации костной ткани и способ его получения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2673537C2 RU2673537C2 RU2017117742A RU2017117742A RU2673537C2 RU 2673537 C2 RU2673537 C2 RU 2673537C2 RU 2017117742 A RU2017117742 A RU 2017117742A RU 2017117742 A RU2017117742 A RU 2017117742A RU 2673537 C2 RU2673537 C2 RU 2673537C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- osteomyelitis
- bone marrow
- bone
- ratio
- granulocyte
- Prior art date
Links
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 title claims abstract description 21
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 11
- 230000012010 growth Effects 0.000 title claims abstract description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 title abstract description 15
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 title abstract description 7
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 title description 24
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 title description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 title description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 title description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 37
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 34
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 26
- 241001373831 Saussurea controversa Species 0.000 claims abstract description 14
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 206010031252 Osteomyelitis Diseases 0.000 description 41
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 23
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 22
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 17
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 16
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 14
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 13
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 12
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 11
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 10
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 6
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 6
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 5
- MLYYVTUWGNIJIB-BXKDBHETSA-N cefazolin Chemical compound S1C(C)=NN=C1SCC1=C(C(O)=O)N2C(=O)[C@@H](NC(=O)CN3N=NN=C3)[C@H]2SC1 MLYYVTUWGNIJIB-BXKDBHETSA-N 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 5
- 206010031256 Osteomyelitis chronic Diseases 0.000 description 4
- 229960001139 cefazolin Drugs 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 4
- 210000003275 diaphysis Anatomy 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 3
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 3
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 238000007490 hematoxylin and eosin (H&E) staining Methods 0.000 description 3
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 3
- 238000002803 maceration Methods 0.000 description 3
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 3
- 206010063560 Excessive granulation tissue Diseases 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010020565 Hyperaemia Diseases 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 210000001126 granulation tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 2
- 210000004209 hair Anatomy 0.000 description 2
- 210000001564 haversian system Anatomy 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 2
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 2
- 230000001582 osteoblastic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010003497 Asphyxia Diseases 0.000 description 1
- 241000208838 Asteraceae Species 0.000 description 1
- 208000035404 Autolysis Diseases 0.000 description 1
- SLJTWDNVZKIDAU-SVAFSPIFSA-N Betulonic acid Chemical compound C1CC(=O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CC[C@@H](C(=C)C)[C@@H]5[C@H]4CC[C@@H]3[C@]21C SLJTWDNVZKIDAU-SVAFSPIFSA-N 0.000 description 1
- SLJTWDNVZKIDAU-CKURCAGRSA-N Betulonic acid Natural products CC(=C)[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@]3(C)[C@@H](CC[C@@H]4[C@@]5(C)CCC(=O)C(C)(C)[C@@H]5CC[C@@]34C)[C@@H]12)C(=O)O SLJTWDNVZKIDAU-CKURCAGRSA-N 0.000 description 1
- 206010005940 Bone and joint infections Diseases 0.000 description 1
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 description 1
- 206010007882 Cellulitis Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 206010017076 Fracture Diseases 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 101100010166 Mus musculus Dok3 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 208000006735 Periostitis Diseases 0.000 description 1
- 241000241413 Propolis Species 0.000 description 1
- 206010037569 Purulent discharge Diseases 0.000 description 1
- 241000133134 Saussurea Species 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 206010000269 abscess Diseases 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002583 angiography Methods 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000006851 antioxidant defense Effects 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 230000001174 ascending effect Effects 0.000 description 1
- 230000033558 biomineral tissue development Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000036770 blood supply Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000004097 bone metabolism Effects 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 125000001271 cephalosporin group Chemical group 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 210000003022 colostrum Anatomy 0.000 description 1
- 235000021277 colostrum Nutrition 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000001804 debridement Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 230000000925 erythroid effect Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 208000013210 hematogenous Diseases 0.000 description 1
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 description 1
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 230000007124 immune defense Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000000629 knee joint Anatomy 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 210000003593 megakaryocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 210000001167 myeloblast Anatomy 0.000 description 1
- 210000003887 myelocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000000066 myeloid cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000041 non-steroidal anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 230000000399 orthopedic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 1
- 238000002559 palpation Methods 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003460 periosteum Anatomy 0.000 description 1
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 210000004765 promyelocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940069949 propolis Drugs 0.000 description 1
- 229940121896 radiopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 239000012217 radiopharmaceutical Substances 0.000 description 1
- 230000002799 radiopharmaceutical effect Effects 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 208000037921 secondary disease Diseases 0.000 description 1
- 230000028043 self proteolysis Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000002603 single-photon emission computed tomography Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 210000001562 sternum Anatomy 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 239000002676 xenobiotic agent Substances 0.000 description 1
- 230000002034 xenobiotic effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/28—Asteraceae or Compositae (Aster or Sunflower family), e.g. chamomile, feverfew, yarrow or echinacea
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D11/00—Solvent extraction
- B01D11/02—Solvent extraction of solids
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Botany (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к применению средства для стимуляции роста клеток гранулоцитарного и лимфоидного ряда в костном мозге. Применение экстракта листьев соссюреи спорной (Saussurea Controversa DC), полученного путем трехкратной экстракции измельченных до 3-6 мм листьев соссюреи спорной 40% водным этанолом в соотношении 1:15 при 80°С в течение 60 мин, удаление экстрагента, высушивания, для стимуляции роста клеток гранулоцитарного и лимфоидного ряда в костном мозге. Средство, полученное вышеописанным способом, эффективно для стимуляции роста клеток гранулоцитарного и лимфоидного ряда в костном мозге. 5 ил., 2 табл.
Description
Изобретения относятся к фармацевтической промышленности, конкретно к средствам для стимуляции роста клеток гранулоцитарного и лимфоидного ряда в костном мозге и регенерации костной ткани и способам их получения.
Остеомиелит - инфекционный воспалительный процесс, поражающий все элементы кости, костный мозг и нередко характеризующееся генерализацией. К увеличению числа больных с хроническим остеомиелитом в последнее время приводят рост травматизма и широкое использование металлоостеосинтеза в лечении переломов. Несмотря на достигнутые успехи в лечении данного заболевания, частота рецидивов достигает от 10 до 40% и это сопряжено с повторными операциями. При этом наблюдается тенденция к смещению от ограниченных форм заболевания в сторону более тяжелых проявлений [9, 18, 19]. Известно, что развитие остеомиелита сопровождается как метаболическими нарушениями в органической основе костной ткани и костном мозге, так и сосудистыми и иммунными нарушениями [1, 8].
Современное лечение остеомиелита направлено по трем звеньям: воздействие на макроорганизм (консервативная терапия), на микроорганизм (антибиотикотерапия) и на местный очаг (хирургическое удаление инфицированной ткани). По последним двум направлениям исследования ведутся активно. Так, авторами описан ряд оптимальных способов антибиотикотерапии [3, 6, 15] и хирургической санации [10, 11]. Данные способы лечение направлены на устранение инфицирующего агента, либо дефектов костной ткани. В то же время, в патогенезе остеомиелита значение имеют следующие изменения: ослабление иммунной защиты (в том числе, вследствие нарушения функции костного мозга), нарастание воспалительного процесса, нарушение кровоснабжения и регенерации костной ткани в зоне поражения. Применение комплексных средств консервативной терапии остеомиелита мало исследовано, в то же время, их применение при остеомиелите является актуальным и необходимым [4, 5, 7, 17].
Предложены несколько лекарственных средств для лечения остеомиелита антиоксидантами. Так, авторами выявлено изменение показателей перекисного окисления липидов (ПОЛ) и антиоксидантной системы в острой стадии заболевания и их нормализация в динамике комплексной патогенетической терапии синтетическими антиоксидантами [12, 13]. Экспериментально показана эффективность применения при остеомиелите иммуномодулирующих средств: трансфер фактора молозива [16] и средства на основе прополиса [2]. Исследовано влияние β-аланиламида бетулоновой кислоты при остеомиелите, действие которого ускоряет регенерацию костной ткани [14].
Согласно стандартам оказания медицинской помощи при хирургических инфекциях, терапия остеомиелита сопровождается длительным применением антибиотиков, негормональных противовоспалительных средств (НПВС), иммуномодуляторов, обладающих рядом побочных эффектов и обусловливающих высокую ксенобиотическую нагрузку на организм.
Поэтому, поиск лекарственных средств для лечения остеомиелита, является актуальной проблемой современной медицины. В этом плане перспективны лекарственные средства на основе природных биологически активных веществ, обладающие полимодальным фармакологическим действием, сочетанным с низкой токсичностью и редким индуцированием аллергических реакций.
Ранее для лечения остеомиелита на основе растительных экстрактов не были описаны.
Новый технический результат состоит в расширении арсенала средств консервативной терапии остеомиелита, обладающих высокой активностью и низкой токсичностью, а так же способов их получения.
Поставленную задачу решают применением экстракта из листьев соссюреи спорной (Saussurea controversa DC сем. Asteraceae) для стимуляции роста клеток гранулоцитарного и лимфоидного ряда в костном мозге и регенерации костной ткани.
Способ получения экстракта соссюреи спорной заключается в экстракции листьев, измельченных до 3-6 мм 40% этанолом при температуре 80°C трехкратно в течение 60 мин при соотношении сырье-экстрагент 1:15 с последующим удалением экстрагента под вакуумом до получения сухого остатка.
Фармакологические испытания
В качестве объекта исследования использовали листья S.controversa, собранные в июле 2013 г в местах естественного произрастания в Иркутской области. Воздушно-сухой растительный материал с влажностью 6,3±0,1% измельчали и просеивали через сита с диаметром отверстий 2-6 мм. Экстракт получали путем обработки сырья 40% этанолом методом мацерации при нагревании. Извлечения концентрировали под вакуумом досуха при температуре не выше 50°C.
Эксперименты выполняли на белых крысах самцах линии Вистар массой 280-300 г, количество животных в каждой группе - 6. Животных содержали в стандартных условиях вивария при свободном доступе к воде и пище. При проведении экспериментов руководствовались принципами, изложенными в директивах Европейского сообщества (86/609/ЕЕС) и Хельсинской декларации. Экспериментальный остеомиелит развивали с применением ранее разработанной модели (Способ моделирования травматического остеомиелита, патент №2584402 от 21.04.2016). Статистическую обработку результатов проводили с использованием пакета программ статистического анализа Statistica 6,0. Для оценки значимости отличий между выборками использовали непараметрический критерий Манна-Уитни с вычислением среднего арифметического значения М и его стандартной ошибки т.
Первичную оценку эффективности экстракта при экспериментальном остеомиелите проводили с помощью метода трехфазной сцинтиграфии. Животных распределяли на три группы: интактные (1); с экспериментальным остеомиелитом, не леченные (2); с экспериментальным остеомиелитом, леченные экстрактом соссюреи спорной (3). У крыс 2 и 3 групп моделировали травматический остеомиелит правой бедренной кости. С 7-го дня эксперимента животным 3 группы внутрижелудочно вводили экстракт один раз в сутки в течение трех недель в виде водной суспензии в дозе 100 мг/кг. Трехфазную сцинтиграфию с 99mТс-технефор (ООО «Диамед», Россия, 18,5 МБк) выполняли на 7 и 28 сутки эксперимента на однофотонном эмиссионном компьютерном томографе Philips BrightView (США). Исследование включало в себя радионуклидную ангиографию, мягкотканную фазу (blood-pool) и костную фазу исследования (остеосцинтиграфию).
В результате исследования на 7 сутки в группе здоровых крыс определялось одновременное поступление индикатора в магистральные сосуды задних конечностей, отсутствие участков гиперфиксации препарата в мягкотканную и костные фазы исследования. В 2 и 3 группах регистрировалось ускоренное и повышенное поступление препарата в артерии на стороне поражения, а также определялись участки гиперфиксации индикатора в мягкотканую и костную фазы исследования, что расценивалось нами как проявление остеомиелита.
На 28-е сутки у крыс второй группы повышенное поступление препарата на стороне пораженной конечности сохранялось во все фазы сцинтиграфического исследования. В то же время у крыс 3 группы происходило уменьшение фиксации препарата в мягкотканую фазу на 44%, что свидетельствовало о положительной динамике воспалительного процесса в окружающих тканях пораженной конечности (фиг. 1). В костную фазу исследования у крыс 3 группы происходило снижение концентрации препарата, поступающего в правую конечность, на 64% в сравнении с группой 2 (фиг. 2). Полученный результат в виде уменьшения степени аккумуляции радиофармацевтического препарата в 3 группе животных указывает на снижение костного метаболизма и гиперемии мягких тканей, что отражает положительную динамику течения остеомиелита при применении экстракта S. controversa.
Влияние экстракта на состояние костного мозга и костной ткани исследовали на фоне антибиотикотерапии (Цефазолин), рекомендуемой стандартом лечения.
Для этого крыс распределяли на четыре группы: интактные (1); с экспериментальным остеомиелитом, не леченные (2); с экспериментальным остеомиелитом, леченные антибиотиком широкого спектра цефазолином (3); с экспериментальным остеомиелитом, леченные экстрактом S.controversa и антибиотиком (4). Экстракт вводили в желудок в виде водной суспензии в дозе 100 мг/кг в течение 14 дней. Животным 3-5 групп внутримышечно вводили антибиотик цефалоспориновой группы Цефазолин («Рузфарма», Россия) в дозе 50 мг/кг в течение пяти дней. На 21 сутки животных выводили из эксперимента при использовании CO2-асфиксии.
Состояние костномозгового кроветворения у крыс оценивали путем подсчета общего количества миелокариоцитов (ОКК) на бедренную кость (106/бедро) и миелограмм на мазках. Для чего, костный мозг из канала левой бедренной кости вымывали 1 мл 5% раствора уксусной кислоты и ресуспендировали. Дополнительное разведение проводили с помощью лейкоцитарного меланжера (конечное разведение в 20000 раз). Вычисление ОКК проводили с помощью камеры Горяева. Миелограммы подсчитывали на мазках, приготовленных из гомогената фрагмента миелоидной ткани, взятой из сегмента грудины, и аутологичной сыворотки (1:1), комбинированно окрашенных фиксатором-красителем Май-Грюнвальда и азур II-эозином по Нохту. Процентное содержание отдельных клеточных форм при подсчете миелограмм переводили в абсолютные цифры - ×106 клеток на бедро.
Для гистологического исследования правую бедренную кость декальцинировали, обезвоживали в спиртах восходящей концентрации и заливали в парафин. Депарафинированные срезы толщиной 7 мкм окрашивали гематоксилином и эозином.
При наблюдении клинической картины к 10 дню у всех крыс группы 2 появилась боль при пальпации, увеличение объема коленного сустава в 2-3 раза по сравнению со здоровой конечностью, а также наблюдали симптомы разлитого воспаления окружающих тканей. В группе 3 у 5-ти животных происходило расхождение краев раны и наблюдалось серозное, а затем гнойное отделяемое. В то же время, у 2-х животных в группе 4 воспаление локализовалось в виде инкапсулированных абсцессов в области правой бедренной кости, а у 4-х рана затягивалась. Таким образом, применение экстракта S.controversa способствовало локализации воспалительного процесса и положительной динамике при остеомиелите.
ОКК крыс с экспериментальным остеомиелитом (группа 2), в том числе леченных только антибиотиком (группа 3), снижалось на 46 и 58% соответственно в сравнении с ОКК интактных животных (табл.1). Введение экстракта S.controversa заболевшим крысам на фоне антибиотикотерапии (группа 4) способствовало достоверной нормализации общего количества ядросодержащих клеток костного мозга, что свидетельствует о большей эффективности сочетанной терапии в группе 4 по сравнению с монотерапией (группа 3).
В результате развития экспериментального остеомиелита в костном мозге экспериментальных животных (группа 2) наблюдали угнетение гранулоцитарного ростка, о чем свидетельствовало достоверное уменьшение количества молодых форм клеток в среднем на 70% и угнетение эритроидного ростка, вследствие чего общее число эритрокариоцитов уменьшалось на 40%. Кроме того, у крыс в группе 2 в четыре раза возрастало количество мегакариоцитов, а число лимфоцитов снижалось в три раза в сравнении с интактной группой животных. При этом в костном мозге крыс группы 2 наблюдали большое количество разрушенных лимфоцитов.
После монотерапии антибиотиком (группа 3), в костном мозге крыс с экспериментальным остеомиелитом сохранялись изменения со стороны гранулоцитарного ростка. Отмечено достоверное уменьшение количества молодых форм клеток: количество миелобластов уменьшалось на 88%, промиелоцитов - на 73%, миелоцитов - на 60%, сокращалось количество митозов на 83%. Лейкоэритробластическое отношение (ЛЭО) клеток костного мозга смещалось в сторону уменьшения клеток миелоидного ряда. Количество лимфоцитов в костном мозге экспериментальных животных после антибиотикотерапии еще более снижалось.
После курсового применения экстракта 5. controversa на фоне антибиотикотерапии значительно возрастало количество молодых и зрелых форм гранулоцитов и лимфоцитов до показателей в интактной группе. Кроме того, после терапии экстрактом S.controversa наблюдали достоверное увеличение количества зрелых форм эритрокариоцитов по сравнению с животными, получавшими только антибиотикотерапию.
Полученные данные позволяют говорить о стимуляции гранулопоэза и коррекции клеточных показателей костного мозга, измененных в результате антибиотикотерапии экспериментального остеомиелита, при курсовом применении экстракта S. controversa.
При морфологическом исследовании в диафизе бедренной кости крыс, на 21 сутки после моделирования остеомиелита без лечения (группа 2), отмечались признаки выраженного воспаления. В костномозговых пространствах - лейкоцитарная инфильтрация и гиперемия сосудов. Выявлялся некроз и аутолиз костных пластинок кортикального и трабекулярного слоев с образованием секвестров. Нормальное строение остеонов было нарушено, гаверсовы каналы частично запустевали. Наряду с признаками воспаления в кости отмечались не резко выраженные признаки регенерации: разрастание грануляционной ткани и активация остеобластов в области костных дефектов (Фиг. 3).
В группе крыс, получавших антибиотикотерапию цефазолином (группа 3), воспаление имело разлитой характер, однако, его интенсивность была ниже, чем у крыс группы 2. Сохранялась дискомплексация костных пластинок. Процесс резорбции некротизированной костной ткани преобладал над процессом остеогенеза (Фиг. 4).
В группах крыс, получавших терапию антибиотиком в комплексе с экстрактом S. controversa (группа 4) отмечали снижение интенсивности воспалительных процессов. Признаки регенераторных процессов: активация эндооста, периоста, появление остеобластических "почек", формирование грануляционной ткани, были повсеместно видны на протяжении бедренной кости, но более выражены в эпифизарном отделе. Большинство костных пластин имели нормальное строение и равномерную минерализацию (Фиг. 5).
Таким образом, при курсовом применении экстракта S. controversa снижается интенсивность воспалительных процессов в костной ткани и костном мозге, усиливаются гранулопоэз и регенерация костной ткани.
Обоснование способа получения экстракта соссюреи спорной.
Экстракцию сырья осуществляли методом многократной мацерации при нагревании, моделируя технологический процесс в лабораторном реакторе (Radley's, Великобритания), снабженном обогревающейся водяной рубашкой и мешалкой RZR 2020 (Heidolph, Германия) при скорости 300 об/мин. Экстракты, полученные после каждого приема мацерации, объединяли, экстрагент удаляли в роторном испарителе при температуре не выше 50°C, сконцентрированный густой экстракт высушивали методом конвективной сушки до содержания влаги не более 5%. Выбор оптимальных параметров экстракции (соотношение сырья и экстрагента, степень измельченности сырья, время, температура, кратность экстракции) осуществляли после определения выхода экстрактивных веществ (ЭВ).
Опыт 1. В экстрактор помещали 50,0 г сырья, измельченного до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 3-6 мм, заливали 40% этанолом в соотношении 1:15. Второй и третий раз экстракцию проводили в соотношении сырье-экстрагент 1:10. Температура экстракции 80°C, время 30 мин. Общий выход ЭВ составил 19,70 г (39,40%, табл. 2).
Опыт 2. В экстрактор помещали 50,0 г сырья, измельченного до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 3-6 мм, заливали 40% этанолом в соотношении 1:15. Второй и третий раз экстракцию проводили в соотношении сырье-экстрагент 1:10. Температура экстракции 80°C, время 60 мин. Общий выход ЭВ составил 21,56 г (45,10%).
Опыт 3. В экстрактор помещали 50,0 г сырья, измельченного до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 3-6 мм, заливали 40% этанолом в соотношении 1:15. Второй и третий раз экстракцию проводили в соотношении сырье-экстрагент 1:10. Температура экстракции 80°C, время 90 мин. Общий выход ЭВ составил 21,18 г (42,37%).
Опыт 4. В экстрактор помещали 50,0 г сырья, измельченного до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 3-6 мм, заливали 40% этанолом в соотношении 1:15. Экстракцию проводили дважды, второй раз в соотношении сырье-экстрагент 1:10. Температура экстракции 80°C, время 60 мин. Общий выход ЭВ составил 19,58 г (39,20%).
Опыт 5. В экстрактор помещали 50,0 г сырья, измельченного до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 3-6 мм, заливали 40% этанолом в соотношении 1:15. Экстракцию проводили 3 раза при температуре 80°C, 60 мин. Общий выход ЭВ составил 22,85 г (45,70%).
Опыт 6. В экстрактор помещали 50,0 г сырья, измельченного до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 3-6 мм, заливали 40% этанолом в соотношении 1:20. Второй и третий раз экстракцию проводили в соотношении сырье-экстрагент 1:15. Температура экстракции 80°C, время 60 мин. Общий выход ЭВ составил 22,47 г (44,95%).
Опыт 7. В экстрактор помещали 50,0 г сырья, измельченного до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 3-6 мм, заливали 40% этанолом в соотношении 1:10. Второй и третий раз экстракцию проводили в соотношении сырье-экстрагент 1:8. Температура экстракции 80°C, время 60 мин. Общий выход ЭВ составил 17,21 г (34,40%).
Опыт 8. В экстрактор помещали 50,0 г сырья, измельченного до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 3-6 мм, заливали 40% этанолом в соотношении 1:15. Второй и третий раз экстракцию проводили в соотношении сырье-экстрагент 1:10. Температура экстракции 90°C, время 60 мин. Общий выход ЭВ составил 21,80 г (43,60%).
Опыт 9. В экстрактор помещали 50,0 г сырья, измельченного до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 3-6 мм, заливали 40% этанолом в соотношении 1:15. Второй и третий раз экстракцию проводили в соотношении сырье-экстрагент 1:10. Температура экстракции 70°C, время 60 мин. Общий выход ЭВ составил 20,71 г (41,42%).
Опыт 10. В экстрактор помещали 50,0 г сырья, измельченного до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 3-6 мм, заливали 40% этанолом в соотношении 1:15. Второй и третий раз экстракцию проводили в соотношении сырье-экстрагент 1:10. Температура экстракции 60°C, время 60 мин. Общий выход ЭВ составил 19,43 г (38,86%).
Опыт 11. В экстрактор помещали 50,0 г сырья, измельченного до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм, заливали 40% этанолом в соотношении 1:15. Второй и третий раз экстракцию проводили в соотношении сырье-экстрагент 1:10. Температура экстракции 80°C, время 60 мин. Общий выход ЭВ составил 23,15 г (46,30%).
Опыт 12. В экстрактор помещали 50,0 г сырья, измельченного до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 3-6 мм, заливали 40% этанолом в соотношении 1:15. Экстракцию проводили еще три раза в соотношении сырье-экстрагент 1:10. Температура экстракции 80°C, время 60 мин. Общий выход ЭВ составил 20,03 г (40,06%).
Исходя из полученных результатов оптимальное для выхода ЭВ соотношение сырья и экстрагента 1:15 при трехкратной экстракции в течение 60 мин (опыт 5). Дальнейшее уменьшение кратности экстракции, соотношения сырья и экстрагента при одновременном повышении или понижении времени экстракции приводит к снижению выхода ЭВ. Так же влияет снижение температуры экстракции до 60-70°C или ее повышение до 90°C. Максимальный выход ЭВ наблюдали при экстракции фракции сырья, проходящего через отверстия с диаметром 1 мм, отсеянное от пыли (опыт 11). Это явление можно объяснить особенностью строения листа соссюреи спорной: нижний эпидермис листа обильно покрыт нитевидными трихомами, образующими как бы войлочное покрытие. Поэтому даже при измельчении сырья, его частицы посредством волосков слипаются, образуя более крупные. Основная масса сырья (около 98%) просеивается лишь через сита с отверстиями диаметром 3-6 мм. Через отверстия с диаметром 1 мм проходят частицы сырья, свободные от волосков, вследствие чего, содержащие большее количество биологически активных веществ.
Таким образом оптимальным способом получения комплексного средства консервативной терапии остеомиелита является трехкратная экстракция 40% этанолом листьев соссюреи спорной, измельченных до 3-6 мм в соотношении 1:15 при 80°C в течение 60 мин. Этанол из жидкого экстракта удаляют под вакуумом, экстракт высушивают до содержания влаги не более 5%.
Источники информации
1. Акжигитов Г.Н. Гематогенный остеомиелит / Г.Н. Акжигитов, Я.Б. Юдин. - М.: Медицина, 1998. 288 с.
2. Амиров Н.Х., Мубаракова Л.Н., Захаров Ю.А. Способ лечения одонтогенного остеомиелита, осложненного флегмоной. Патент №2232029 от 27.08.2001.
3. Афиногенов Г.Е. Антимикробная биодеградируемая композиция на основе высокомолекулярного поливинилпирролидона для профилактики экспериментального остеомиелита/ Г.Е. Афиногенов, P.M. Тихилов, А.Г. Афиногенова и др. // Травматология и ортопедия России. 2010. №3. С. 47-54.
4. Батаков Е.А. Современные аспекты диагностики и лечения хронического остеомиелита / Е.А. Батаков, Д.Г. Алексеев, В.Е. Батаков. - Самара: Медицина. 2008. 117 с.
5. Белохвостикова Т.С. Коррекция вторичных нарушений иммунной системы при хроническом посттравматическом остеомиелите / Т.С. Белохвостикова, Л.Е. Кирдей, Е.Ю. Гаврилова и др. // Медицинская иммунология. 2002. №4 (2). С. 228-229.
6. Дзюба Г.Г. Опыт использования локальных антибактериальных носителей при лечении хронического гнойного остеомиелита длинных трубчатых костей / Г.Г. Дзюба, С.А. Ерофеев, Д.И. Одарченко // Современные проблемы науки и образования. 2013. №4. С. 111.
7. Кирдей Е.Г. Иммунный статус больных с различными формами остеомиелитов / Е.Г. Кирдей, А.П. Барабаш, Д.Г. Данилов и др. // Сибирский медицинский журнал. 1977. №9 (1-2). С. 19-21.
8. Корженевский А.А. Обоснование выбора препарата для иммунотерапии хронического остеомиелита // Аллергология и иммунология. 2008. №9 (2). С. 227-230.
9. Кутин А.А. Гематогенный остеомиелит у взрослых / А.А. Кутин, Н.И. Мосиенко. - М.: Медицина и жизнь. 2000. 224 с.
10. Ладонин С.В. Экспериментальное обоснование использования аллогенного деминерализованного костного имплантата в комплексном лечении хронического остеомиелита / С.В. Ладонин, Е.А. Белозерцева // Морфологические ведомости. 2011. №1. С. 101-107.
11. Линник С.А. Способ пластики костных дефектов у больных с остеомиелитом предплечья мышечным лоскутом, сфомированным из musculus pronator qvadratus / С.А. Линник, Н.Ф. Фомин, Ш.Л. Динаев и др. // Травматология и ортопедия России.2011. №3. С. 97-100.
12. Матузов С.А. Лечение хронического травматического остеомиелита с применением антиоксидантов: автореф. дисс.… к.м.н. Иркутск, 1997. 27 с.
13. Султонов Ш.Р. Динамика процессов перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы защиты при хроническом гематогенном остеомиелите у детей / Ш.Р. Султонов, А.А. Азизов, A.M. Сабурова // Докл. Акад. наук Респ.Таджикистан. 2009. Т. 52. №9. С. 723-727.
14. Толстикова Т.Г., Сорокина И.В., Жукова Н.А. Средство для лечения остеомиелита. Патент №2604124 от 28.10.2015.
15. Федянин С.Д. Рациональная антибиотикотерапия у пациентов с гематогенным и посттравматическим остеомиелитом // Вестник Витебского государственного медицинского университета. 2004. №2. С. 61-68.
16. Хеннен У.Дж. Трансфер фактор Плюс: идеальная комбинация биологически активных веществ для оптимального иммунитета / У.Дж. Хеннен, Ю.П. Гичева, Э.А. Оганова. - Новосибирск, 2001.
17. Шалыгин А.В. Коррекция реологических свойств крови в лечении острого гематогенного остеомиелиае у детей / А.В. Шалыгин, А.А. Солнышко, А.П. Скударнова // Науки о человеке. Томск, 2003. С. 112.
18. Bohndorf К. Osteomyelitis / К. Bohndorf, 
// Handbuch diagnostische Radiologic 2005. S. 80.
19. Davis J.S. Menagement of bone and joint infections due to Staphilococcus aureus // Intern. Medicine J. 2005. №35. P. 79-96.
Приложение
Фиг. 1. Содержание 99mТс-технефор (%) в мягкотканую фазу сцинтиграфического исследования пораженной конечности крыс с экспериментальным остеомиелитом.
Фиг. 2. Содержание 99mТс-технефор в костную фазу сцинтиграфического исследования пораженной конечности крыс с экспериментальным остеомиелитом.
*p≤0.05 в сравнении с группой-2.
Фиг. 3. Участок диафиза бедренной кости крысы на 21 сутки после моделирования остеомиелита без лечения. Признаки воспаления без видимой активации остеогенеза. Окрашивание гематоксилином и эозином, ×200.
Фиг. 4. Участок диафиза бедренной кости крысы на 21 сутки после моделирования остеомиелита при лечении антибиотиком. Сохранение признаков воспаления, незначительная активация остеогенеза. Окрашивание гематоксилином и эозином, ×200.
Фиг. 5. Участок диафиза бедренной кости крысы вблизи костно-мозгового канала, на 21 сутки после моделирования остеомиелита при терапии антибиотиком в комплексе с экстрактом S. controversa. Активация остеобластических процессов на месте погибших остеонов. Окрашивание гематоксилином и эозином, ×200.
Примечание. 1,2,3 - p≤0,05 в сравнении с группами 1,2 и 3 соответственно.
Claims (1)
- Применение экстракта листьев соссюреи спорной (Saussurea Controversa DC), полученного путем трехкратной экстракции измельченных до 3-6 мм листьев соссюреи спорной 40% водным этанолом в соотношении 1:15 при 80°С в течение 60 мин, удаление экстрагента, высушивания, для стимуляции роста клеток гранулоцитарного и лимфоидного ряда в костном мозге.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017117742A RU2673537C2 (ru) | 2017-05-22 | 2017-05-22 | Средство для стимуляции роста клеток гранулоцитарного и лимфоидного ряда в костном мозге и регенерации костной ткани и способ его получения |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017117742A RU2673537C2 (ru) | 2017-05-22 | 2017-05-22 | Средство для стимуляции роста клеток гранулоцитарного и лимфоидного ряда в костном мозге и регенерации костной ткани и способ его получения |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2017117742A RU2017117742A (ru) | 2018-11-22 |
| RU2017117742A3 RU2017117742A3 (ru) | 2018-11-22 |
| RU2673537C2 true RU2673537C2 (ru) | 2018-11-28 |
Family
ID=64400997
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017117742A RU2673537C2 (ru) | 2017-05-22 | 2017-05-22 | Средство для стимуляции роста клеток гранулоцитарного и лимфоидного ряда в костном мозге и регенерации костной ткани и способ его получения |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2673537C2 (ru) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2259840C2 (ru) * | 2003-11-14 | 2005-09-10 | Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН | Лекарственное средство, обладающее адаптогенной активностью |
| KR20070071029A (ko) * | 2005-12-29 | 2007-07-04 | 주식회사 엘지생활건강 | 천산설연을 포함하는 각질 박리 촉진 효능을 갖는 조성물 |
| US20130028968A1 (en) * | 2011-07-29 | 2013-01-31 | Andy Teh-An Huang | Compositions and methods to relieve chronic diseases symptoms |
-
2017
- 2017-05-22 RU RU2017117742A patent/RU2673537C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2259840C2 (ru) * | 2003-11-14 | 2005-09-10 | Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН | Лекарственное средство, обладающее адаптогенной активностью |
| KR20070071029A (ko) * | 2005-12-29 | 2007-07-04 | 주식회사 엘지생활건강 | 천산설연을 포함하는 각질 박리 촉진 효능을 갖는 조성물 |
| US20130028968A1 (en) * | 2011-07-29 | 2013-01-31 | Andy Teh-An Huang | Compositions and methods to relieve chronic diseases symptoms |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| АВДЕЕВА Е.Ю. и др. Биохимическое исследование активности экстрактов Saussurea Controversa DC. И Filipendula Ulmaria (L.) maxim при экспериментном остеомиелите //Бюллетень сибирской медицины, 2016, подписано в печать 15.03.2016, т.15, N2, стр.5-15. * |
| АВДЕЕВА Е.Ю. и др. Исследование биологически активных веществ экстракта Saussurea Controversa, обладающего иммуностимулирующей активностью //Фенольные соединения: фундаментальные и прикладные аспекты, Сборник материалов IX международного симпозиума, Москва, 20-25 апреля 2015, стр.12-14. АВДЕЕВА Е.Ю. и др. Проблема создания фитопрепаратов для профилактики и лечения остеомелита //Биологические особенности лекарственных и ароматических растений и их роль в медицине, Сборник трудов конференции, Москва, 23-25 июня 2016, стр.559-561. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2017117742A (ru) | 2018-11-22 |
| RU2017117742A3 (ru) | 2018-11-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Bhattacharya et al. | Systematic approach to treat chronic osteomyelitis through localized drug delivery system: bench to bed side | |
| Nuutila et al. | Gene expression profiling of skeletal muscle after volumetric muscle loss | |
| Liu et al. | Treatment of non‑traumatic avascular necrosis of the femoral head | |
| Sun et al. | Total flavonoids of rhizoma drynariae ameliorates bone formation and mineralization in BMP-Smad signaling pathway induced large tibial defect rats | |
| Xu et al. | Staphylococcal enterotoxin C2 expedites bone consolidation in distraction osteogenesis | |
| Singh et al. | To evaluate the role of platelet-rich plasma in healing of acute diaphyseal fractures of the femur | |
| RU2429002C1 (ru) | Способ стимуляции репаративного остеогенеза | |
| Bravo et al. | Temporary inhibition of the plasminogen activator inhibits periosteal chondrogenesis and promotes periosteal osteogenesis during appendicular bone fracture healing | |
| US6344217B1 (en) | Putamen OVI | |
| RU2673537C2 (ru) | Средство для стимуляции роста клеток гранулоцитарного и лимфоидного ряда в костном мозге и регенерации костной ткани и способ его получения | |
| Ye et al. | Kartogenin potentially protects temporomandibular joints from collagenase-induced osteoarthritis via core binding factor β and runt-related transcription factor 1 binding-A rat model study | |
| Reinisch et al. | Autologous lipotransfer for bone defects secondary to osteomyelitis: A report of a novel method and systematic review of the literature | |
| EP1190716B1 (en) | The leaves of cajanus cajan(l.) millsp and extract, formulation and uses thereof | |
| Ezirganli et al. | Effects of Ankaferd BloodStopper on bone healing in an ovariectomized osteoporotic rat model | |
| Högel et al. | Bone healing of critical size defects of the rat femur after the application of bone marrow aspirate and two different rh-BMP7 concentrations | |
| Lin et al. | [Retracted] MRI Manifestations and Diagnostic Value of Chronic Osteomyelitis | |
| Wiweko et al. | Treatment of bone defects with bovine hydroxyapatite xenograft and platelet rich fibrin (PRF) to accelerate bone healing | |
| EP3881858A1 (en) | Heat-treated platelet-derived growth factor extract for use in a method of preventing or treating a tissue defect | |
| Mahadik et al. | Autologous platelet injection in the treatment of long bone nonunion: A prospective interventional study | |
| Vaezi et al. | Bone Regeneration by Homeopathic Symphytum officinale | |
| Hanafiah et al. | The effect of topical application of 3% binahong (Anredera cordifolia (Ten) Steenis) leaves extract gel on the radiographic bone density in post-extraction socket | |
| Çatma et al. | Remote ischemic preconditioning enhances fracture healing | |
| Borrione et al. | Systemic effects of locally injected platelet rich plasma in a rat model: an analysis on muscle and bloodstream | |
| Irban et al. | The effect of ozone therapy on experimental bone fracture healing in rats | |
| CN107648592B (zh) | 趋化因子ccl4作为制备治疗骨折药物的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20190523 |