RU2628879C2 - Method for production of therapeutic and prophylactic preparations and biologically active additives - Google Patents
Method for production of therapeutic and prophylactic preparations and biologically active additives Download PDFInfo
- Publication number
- RU2628879C2 RU2628879C2 RU2015109193A RU2015109193A RU2628879C2 RU 2628879 C2 RU2628879 C2 RU 2628879C2 RU 2015109193 A RU2015109193 A RU 2015109193A RU 2015109193 A RU2015109193 A RU 2015109193A RU 2628879 C2 RU2628879 C2 RU 2628879C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- bran
- inoculum
- lactobacillus
- temperature
- sterile
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к пищевой промышленности, медицине и может быть использовано в производстве добавки к пище, обладающей профилактическими свойствами при желудочно-кишечных заболеваниях и дисбиотических состояниях, благодаря чему обеспечивается становление экосистемы пищеварительного тракта человека.The invention relates to the food industry, medicine and can be used in the manufacture of food additives with prophylactic properties in gastrointestinal diseases and dysbiotic conditions, which ensures the formation of the human digestive tract ecosystem.
Известен способ получения биологически активной добавки (БАД) на основе биомассы Saccharomycetaceae по патенту №2233320 (опубл. 27.07.2004), состоящий в том, что готовят питательную среду, культивируют посевной материал в питательной среде с получением посевной массы, размещают посевную массу на отрубях зерновых культур (пшеничные, ржаные, гречишные) и культивируют до требуемой концентрации клеток Saccharomycetaeceae, получая целевой продукт после инактивации биомассы и высушивания.A known method of producing a biologically active additive (BAA) based on Saccharomycetaceae biomass according to patent No. 2233320 (publ. 07/27/2004), which consists in preparing the nutrient medium, cultivating the seed in a nutrient medium to obtain a seed mass, placing the seed mass on bran cereals (wheat, rye, buckwheat) and cultivated to the desired concentration of Saccharomycetaeceae cells, obtaining the target product after inactivation of biomass and drying.
Известна биологически активная добавка (БАД) к пище пребиотического действия, по патенту №2233320 (опубл. 27.07.2004), приводящая к коррекции метаболического синдрома, состоящая из биомассы Saccharomyces иммобилизованных на отрубях зерновых культур, содержащей биотрансформированные органические вещества, представленные углеводами, белками, жирами, витаминами, пищевые волокна и неорганические вещества, содержащая отруби зерновых культур, часть которых представляют собой остатки цитоскелета клеточных мембран зерновых культур, образованных в результате дезинтеграции клеточных мембран во время, например, экструдирования, и имеют ячеистую, пористую поверхность не менее 2,0 м2/г, и содержание растворимой клетчатки увеличено больше чем на 1,0 об. %, а нерастворимой клетчатки уменьшено более чем на 3,0 об. % за счет уменьшения гемицеллюлозы на 3,0 об. % и целлюлозы на 1,9 об. %, причем БАД имеет структуру мелкодисперсных частиц размером не более 2-х мм, а биомасса представляет собой цитоскелет Saccharomyces с концентрацией не менее 109-1012 клеток / 1 г, причем биотрансформированные органические вещества составляют не менее 80-90 мас. % от массы отрубей зерновых культур, остальное составляют биотрансформированные неорганические вещества.Known biologically active food supplement (BAA) for food of prebiotic action, according to patent No. 2233320 (publ. 07/27/2004), leading to the correction of the metabolic syndrome, consisting of biomass of Saccharomyces cereal immobilized on bran containing biotransformed organic substances represented by carbohydrates, proteins, fats, vitamins, dietary fiber and inorganic substances containing bran of cereal crops, some of which are the remains of the cytoskeleton of cell membranes of cereals formed as a result disintegration of cell membranes during, for example, extrusion, and have a cellular, porous surface of at least 2.0 m 2 / g, and the content of soluble fiber is increased by more than 1.0 vol. %, and insoluble fiber is reduced by more than 3.0 vol. % by reducing hemicellulose by 3.0 vol. % and cellulose at 1.9 vol. %, moreover, BAA has a structure of finely dispersed particles no larger than 2 mm in size, and the biomass is a Saccharomyces cytoskeleton with a concentration of at least 10 9 -10 12 cells / 1 g, and biotransformed organic substances are at least 80-90 wt. % of the mass of bran of crops, the rest is biotransformed inorganic substances.
Недостатком данного технического решения является то, что данный препарат, полученный способом по патенту №2233320, не стимулирует антагонистическую активность нормофлоры в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов. Для его производства применяются микроорганизмы семейства Saccharomycetaceae, которые не свойственны нормальной микрофлоре человека. Способ их получения сложен, т.к. предполагает специальную подготовку питательного субстрата, включающую предварительное увлажнение, стерилизацию или пастеризацию, а также особых условий культивирования - создание анаэробной среды или аэрация стерильным воздухом среды культивирования.The disadvantage of this technical solution is that this drug, obtained by the method according to patent No. 2233320, does not stimulate the antagonistic activity of normoflora against pathogenic and conditionally pathogenic microorganisms. For its production, microorganisms of the Saccharomycetaceae family are used, which are not characteristic of the normal human microflora. The method of obtaining them is complicated, because involves a special preparation of the nutrient substrate, including pre-moistening, sterilization or pasteurization, as well as special cultivation conditions - the creation of an anaerobic environment or aeration with sterile air of the culture medium.
Известен способ получения пищевой добавки по патенту №2136175 (опубл. 10.09.1999), для получения которой используют морковь и капусту, взятые дополнительно к пшеничным отрубям в соотношении 2:1:1. Смесь гомогенизируют, проводят пастеризацию и ферментируют Bifidobacterium adolescentis МС-42, Propionibacterium schermanii Э6, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus plantarum 31, взятыми в отдельности или в смеси в равных количествах.A known method of producing food additives according to patent No. 2116175 (publ. 09/10/1999), for which carrots and cabbage are used, taken in addition to wheat bran in a ratio of 2: 1: 1. The mixture is homogenized, pasteurized and fermented with Bifidobacterium adolescentis MC-42, Propionibacterium schermanii E6, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus plantarum 31, taken individually or in an equal amount.
Известна биологически активная добавка (БАД), полученная по способу получения пищевой добавки по патенту №2136175 (опубл. 10.09.1999).Known biologically active additive (BAA) obtained by the method of producing food additives according to patent No. 2136175 (publ. 09/10/1999).
Недостатком данного технического решения является то, что данный препарат не стимулирует антагонистическую активность нормофлоры в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, не обладает необходимой стандартностью как по составу используемого сырья, так и по совокупности бактериальных компонентов для ферментации субстрата.The disadvantage of this technical solution is that this drug does not stimulate the antagonistic activity of normoflora against pathogenic and conditionally pathogenic microorganisms, does not have the necessary standardity both in the composition of the raw materials used and in the aggregate of bacterial components for substrate fermentation.
Наиболее близким аналогом по составу являются БАД по патенту №2048123 «Способ производства продукта для диетического питания» (опубл. 20.11.1995), включающий обработку растительного сырья биологически активным веществом, в качестве растительного сырья используют активированные пищевые волокна, выделенные путем кислотного гидролиза из отрубей, а в качестве биологически активного вещества препарат, полученный из культуры молочнокислых бактерий Lactobacillus acidophilus, обработку осуществляют при соотношении активированных пищевых волокон и препарата 1:(3-10) мас. ч., препарат получают путем заквашивания обезжиренного молока и/или молочной сыворотки.The closest analogue in composition is the dietary supplement according to patent No. 2048123 “Method for the production of a product for dietetic nutrition” (publ. 11/20/1995), including the processing of plant materials with a biologically active substance, activated dietary fiber isolated by acid hydrolysis from bran is used as plant materials and as a biologically active substance, a preparation obtained from a culture of lactic acid bacteria Lactobacillus acidophilus, the processing is carried out at a ratio of activated dietary fiber and the drug 1 : (3-10) wt. including, the preparation is obtained by fermentation of skim milk and / or whey.
Наиболее близким аналогом является биологически активная добавка (БАД), полученная по способу производства продукта для диетического питания» (опубл. 20.11.1995), по патенту №2048123 «Способ производства продукта для диетического питания».The closest analogue is a biologically active additive (BAA), obtained by the method of manufacturing a product for dietetic nutrition "(publ. November 20, 1995), according to patent No. 2048123" Method of manufacturing a product for dietary nutrition ".
Недостатком данного технического решения является то, что способ получения сложен и не технологичен, т.к. предполагает специальное активирование пищевых волокон, а также то, что данный препарат не стимулирует антагонистическую активность нормофлоры в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов.The disadvantage of this technical solution is that the method of obtaining is complex and not technological, because involves the special activation of dietary fiber, as well as the fact that this drug does not stimulate the antagonistic activity of normoflora against pathogenic and conditionally pathogenic microorganisms.
Предлагаемым изобретением решается задача стимуляции антагонистической активности нормофлоры в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, создания натурального пищевого комплекса на основе растительных компонентов, сочетающих в себе естественные факторы, способствующие деятельности ферментных систем физиологичных штаммов молочнокислых микроорганизмов, обладающего про- и пребиотической, бактериостатической и сорбционной активностью, профилактическими свойствами при желудочно-кишечных заболеваниях, благодаря чему обеспечивается становление экосистемы пищеварительного тракта человека.The present invention solves the problem of stimulating the antagonistic activity of normoflora against pathogenic and conditionally pathogenic microorganisms, creating a natural food complex based on plant components that combine natural factors that contribute to the activity of enzyme systems of physiological strains of lactic acid microorganisms with pro and prebiotic, bacteriostatic and sorption activity, prophylactic properties in gastrointestinal diseases, thanks to Mu ensured the establishment of ecosystem human digestive tract.
Техническим результатом изобретения является получение БАД, являющейся синбиотиком сложного состава - содержащей в качестве компонентов, определяющих основные заявленные свойства, пребиотический (ферментированные отруби) и пробиотический комплекс (клетки, компоненты клеток и активные метаболитные комплексы лактобактерий). Данный технический результат обеспечивает увеличение биомассы за счет увеличения количества лактобактерий на единицу объема целевого продукта с заданными свойствами, позволяет достичь увеличения сорбционной поверхности носителя микроорганизмов, причем процесс идет ускоренно. Данный технический результат обеспечивает быстрое увеличение максимального количества микробных клеток лактобактерий, увеличение микробной массы и качественные изменения в составе целевого продукта, выражаемые в увеличении адсорбционной способности, улучшении биоусвояемости и стимуляции антагонистической активности нормофлоры в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов.The technical result of the invention is to obtain a dietary supplement, which is a synbiotic of complex composition — containing, as components that determine the main declared properties, a prebiotic (fermented bran) and probiotic complex (cells, cell components and active metabolite complexes of lactobacilli). This technical result provides an increase in biomass due to an increase in the number of lactobacilli per unit volume of the target product with desired properties, allows to increase the sorption surface of the carrier of microorganisms, and the process is accelerated. This technical result provides a rapid increase in the maximum number of microbial cells of lactobacilli, an increase in microbial mass and qualitative changes in the composition of the target product, expressed as an increase in adsorption capacity, improved bioavailability and stimulation of the antagonistic activity of normoflora against pathogenic and conditionally pathogenic microorganisms.
Для достижения указанного технического результата в способе, включающем обработку растительного сырья культурой бактерий рода Lactobacillus, инокулят готовят получением взвеси лактобактерий штаммов Lactobacillus plantarum 8Р-А3 и/или Lactobacillus fermentum 90Т-С4 с содержанием клеток не менее 1×108 КОЕ/мл, смешивание инокулята и растительного сырья (субстрат) проводят в объемном соотношении от 1:1 до 1:1,5, инкубирование смеси проводят в течение 15-24 ч при температуре 36-38°С до рН 3,5-5,2, инактивацию ферментирующей массы клеток с одновременным высушиванием ферментированного субстрата проводят при температуре 100°С и атмосферном давлении в течение 1,5-2,0 ч с последующим досушиванием продукта до остаточной влажности 10-15% при температуре 55-70°С. Биологически активная добавка получена по вышеописанному способу.To achieve the specified technical result in a method including processing plant materials with a culture of bacteria of the genus Lactobacillus, the inoculum is prepared by suspension of lactobacilli of strains of Lactobacillus plantarum 8P-A3 and / or Lactobacillus
Отличительными признаками предлагаемого способа от указанного выше известного, наиболее близкого к нему, является то, что инокулят готовят получением взвеси лактобактерий Lactobacillus plantarum 8Р-А3 и/или Lactobacillus fermentum 90Т-С4 с содержанием клеток не менее 1×108 КОЕ/мл, смешивание инокулята и растительного сырья (субстрат) проводят в объемном соотношении от 1:1 до 1:1,5, инкубирование смеси проводят в течение 15-24 ч при температуре 36-38 С до рН 3,5-5,2, инактивацию ферментирующей массы клеток с одновременным высушиванием ферментированного субстрата проводят при температуре 100°С и атмосферном давлении в течение 1,5-2,0 ч с последующим досушиванием продукта до остаточной влажности 10-15% при температуре 55-70°С.Distinctive features of the proposed method from the above known, closest to it, is that the inoculum is prepared by obtaining a suspension of Lactobacillus plantarum 8P-A3 and / or Lactobacillus
В таблицах, представленных в графической части, поясняющих сущность изобретения, показано следующее:In the tables presented in the graphic part explaining the essence of the invention, the following is shown:
Таблица 1. Оценка эффективности используемых параметров инактивации лактобактерий и способов (приведенных в примерах 1-3) получения продукта с заданными свойствами.Table 1. Evaluation of the effectiveness of the used parameters of inactivation of lactobacilli and methods (described in examples 1-3) to obtain a product with desired properties.
Таблица 2. Динамика накопления (увеличение количества) лактобактерий при поверхностном способе культивирования (твердая фаза - отруби ржаные 100%) и обоснование применения заявленных штаммов лактобактерий для получения профилактического препарата.Table 2. The dynamics of the accumulation (increase in number) of lactobacilli with a surface cultivation method (solid phase - 100% rye bran) and the rationale for the use of the claimed strains of lactobacilli to obtain a prophylactic drug.
Таблица 3. Динамика накопления кислотности при культивировании лактобактерий L. plantarum 8Р-А3 при поверхностном способе культивирования (твердая фаза - отруби ржаные 100%).Table 3. The dynamics of acidity accumulation during cultivation of
Таблица 4. Динамика роста лактобактерий L. plantarum 8Р-А3 и L. fermentum 90Т-С4 на жидкой питательной среде на основе ржаных отрубей (приготовление инокулята по способу 1).Table 4. The growth dynamics of
Таблица 5. Показатели прямой бактериостатической активности в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов.Table 5. Indicators of direct bacteriostatic activity against pathogenic and conditionally pathogenic microorganisms.
Таблица 6. Показатели стимуляции гетероантагонизма на примере пробиотического штамма L. plantarum 8Р-А3 в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов.Table 6. Indices of stimulation of heteroantagonism on the example of the probiotic
Таблица 7. Данные титра бифидо- и лактобактерий у участников, участвующих в оценке эффективности заявляемого средства (n=15), по отношению к препарату сравнения(n=15).Table 7. The titer data of bifidobacteria and lactobacilli in participants participating in the evaluation of the effectiveness of the proposed drug (n = 15), in relation to the comparison drug (n = 15).
Таблица 8. Сорбционная способность средства.Table 8. Sorption ability of the product.
Таблица 9. Проведены химические исследования заявляемой биологически-активной добавки на наличие пищевых волокон (в т.ч. растворимых и не растворимых), содержания молочной кислоты и витаминов группы В (B1, В3) (Протокол испытаний №280905/16, Испытательные лаборатории ООО «Лаборатории Весселинг», аттестат аккредитации № RA.RU.021АИ88 от 08.06.2016).Table 9. Chemical studies of the inventive biologically active additives for the presence of dietary fiber (including soluble and insoluble), the content of lactic acid and B vitamins (B 1 , B 3 ) were carried out (Test report No. 280905/16, Test laboratories of Wesseling Laboratories LLC, accreditation certificate No. RA.RU.021AI88 dated 08.06.2016).
Способ получения - БАД осуществляют следующим образом.The method of obtaining dietary supplement is as follows.
Посевной материал культивируют в жидкой питательной среде (в один этап), в которую вносят посевную массу с общим конечным содержания клеток от 1×106 до 1×107 КОЕ/мл. Среду готовят путем смешивания отрубей с очищенной или питьевой водой в пропорции от 1:10 до 1:20 с последующей пастеризацией (для извлечения питательных компонентов отрубей в объем среды) или без нее. Инкубирование полученной смеси проводят от 15 до 24 ч при температуре от 36 до 38°С. После накопления клеток в посевном материале до концентрации не менее 1×108 КОЕ/мл его смешивают со стерильными или нестерильными ржаными отрубями в соотношении от 1:1 до 1:1,5 и инкубируют в течение от 20 до 24 ч при температуре от 36 до 38°С в закрытых емкостях или иным способом, обеспечивающим влажность ферментируемой массы на уровне 90-100%, до рН 3,5-5,2. Инактивацию лактобактерий проводят термическим способом, включающим нагревание ферментирующей биомассы при (100±1)°С в течение 1,5 ч при атмосферном давлении, насыщенным паром при температуре (121±1)°С - не менее 15 мин, или при температуре (111±1)°С - не менее 30 мин, или инфракрасным излучением (например, при плотности не более 2,0 Вт/см2 с длиной волны 4,3-8,2 мкм). При термической обработке происходит кислотный гидролиз клеток за счет накопленных продуктов обмена, что приводит к положительным изменениям в продукте - накоплению продуктов гидролиза, увеличению аминного азота.The seed is cultivated in a liquid nutrient medium (in one step), in which the seed mass is added with a total final cell content of 1 × 10 6 to 1 × 10 7 CFU / ml. The medium is prepared by mixing bran with purified or drinking water in a ratio of 1:10 to 1:20, followed by pasteurization (to extract the nutrients of the bran into the medium) or without it. Incubation of the resulting mixture is carried out from 15 to 24 hours at a temperature of 36 to 38 ° C. After the accumulation of cells in the seed to a concentration of at least 1 × 10 8 CFU / ml, it is mixed with sterile or non-sterile rye bran in a ratio of 1: 1 to 1: 1.5 and incubated for 20 to 24 hours at a temperature of 36 up to 38 ° C in closed containers or in another way, ensuring the humidity of the fermented mass at the level of 90-100%, to a pH of 3.5-5.2. Inactivation of lactobacilli is carried out thermally, including heating the fermenting biomass at (100 ± 1) ° C for 1.5 hours at atmospheric pressure, saturated steam at a temperature of (121 ± 1) ° C for at least 15 minutes, or at a temperature of (111 ± 1) ° С - not less than 30 min, or by infrared radiation (for example, at a density of not more than 2.0 W / cm 2 with a wavelength of 4.3-8.2 microns). During heat treatment, acid hydrolysis of cells occurs due to accumulated metabolic products, which leads to positive changes in the product - the accumulation of hydrolysis products, an increase in amine nitrogen.
Далее продукт подвергается досушиванию до остаточной влажности 10-15% при температуре 55-70°С. Возможно высушивание массы в конвективных сушилках при температуре 55-70°С в качестве отдельной операции.Further, the product is subjected to drying to a residual moisture content of 10-15% at a temperature of 55-70 ° C. It is possible to dry the mass in convective dryers at a temperature of 55-70 ° C as a separate operation.
В способе также возможно использовать экструдированные ржаные отруби. При этом основным отличием является обеспечение степени пропитывания субстрата посевным материалом на стадии внесения инокулята.It is also possible to use extruded rye bran in the method. In this case, the main difference is the degree of saturation of the substrate with seed at the inoculum application stage.
Для получения посевного материала сразу в стерильную очищенную воду или стерильный физиологический раствор 0,9% натрия хлорида возможно добавлять чистую культуру штамма лактобактерий до общего количества клеток не менее 1×108 КОЕ/мл.To obtain seed directly into sterile purified water or sterile physiological solution of 0.9% sodium chloride, it is possible to add a pure culture of the lactobacillus strain to a total number of cells of at least 1 × 10 8 CFU / ml.
В целях получения максимального количества микробных тел в биомассе целевого продукта может применяться подготовленный посевной материал от 1 до 1,5 л на 1 кг экструдированных или нативных нестерильных ржаных отрубей. Полученную смесь перемешивают для однородного распределения и сорбции лактобактерий на поверхности отрубей, культивируют в течение 15-24 ч при температуре от 36 до 38°С в закрытых емкостях, или иным способом, обеспечивающим влажность ферментируемой массы на уровне 90-100%, до достижения рН 3,5-5,2, а инактивацию лактобактерий проводят термическим способом, включающим нагревание ферментированной массы при (100±1)°С в течение 1,5 ч при атмосферном давлении, насыщенным паром при температуре (121±1)°С - не менее 15° мин, или при температуре (111±1)°С - не менее 30 мин, или инфракрасным излучением (например, плотность излучения 0,1-2,0 Вт/см2 с длиной волны 4,3-8,2 мкм). Высушивание возможно проводить одновременно с термической инактивацией, которую производят при температуре 100°С в течение 30 мин с последующим досушиванием до достаточной влажности 10-15% при температуре 55-60°С. Высушивание массы возможно проводить отдельно от стадии инактивации в конвективных сушилках различного типа при температуре 55-70°С.In order to obtain the maximum number of microbial bodies in the biomass of the target product, prepared seed from 1 to 1.5 liters per 1 kg of extruded or native non-sterile rye bran can be used. The resulting mixture is stirred for homogeneous distribution and sorption of lactobacilli on the bran surface, cultivated for 15-24 hours at a temperature of 36 to 38 ° C in closed containers, or in another way, ensuring the humidity of the fermented mass at the level of 90-100%, until the pH is reached 3.5-5.2, and the inactivation of lactobacilli is carried out thermally, including heating the fermented mass at (100 ± 1) ° C for 1.5 hours at atmospheric pressure, saturated steam at a temperature of (121 ± 1) ° C - not less than 15 ° min, or at a temperature of (111 ± 1) ° С - not less than 30 in, or infrared radiation (e.g., radiation density of 0.1-2.0 W / cm 2 with a wavelength of 4,3-8,2 microns). Drying can be carried out simultaneously with thermal inactivation, which is carried out at a temperature of 100 ° C for 30 minutes, followed by drying to a sufficient humidity of 10-15% at a temperature of 55-60 ° C. It is possible to dry the mass separately from the inactivation stage in convective dryers of various types at a temperature of 55-70 ° C.
Кроме того, в качестве исходного сырья (носителя лактобактерий при поверхностном культивировании) можно использовать смесь стерильных или нестерильных ржаных отрубей с пшеничными или гречневыми отрубями от 15 до 50 мас. %. Подготовленные смеси увлажняют посевным материалом (инокулятом) от 1 до 1,5 л на 1 кг смеси отрубей.In addition, as a feedstock (carrier of lactobacilli during surface cultivation), you can use a mixture of sterile or non-sterile rye bran with wheat or buckwheat bran from 15 to 50 wt. % The prepared mixture is moistened with seed (inoculum) from 1 to 1.5 liters per 1 kg of bran mixture.
Способы подготовки инокулята:Methods for preparing the inoculum:
Способ 1. В качестве исходного сырья берут сухие нативные ржаные отруби и питьевую или очищенную воду, подготавливают смесь в соотношении от 1:20 до 1:10 (от 5 г до 10 г на 100 мл воды) отрубей и воды, проводят пастеризацию полученной смеси (нагреванием при 70-100°С в течение 1,5 ч) в полученную среду вносят посевную массу лактобактерий до общего содержания клеток от 1×106 до 1×107 КОЕ/мл, далее проводят культивирование течение 15-24 ч при температуре от 36 до 38°С с получением инокулята, содержащего необходимую концентрацию клеток (не менее 1×108 КОЕ/мл).
Способ 2. В стерильную питьевую или очищенную воду, или стерильный физиологический раствор 0,9% натрия хлорида добавляют чистую культуру L. plantarum 8Р-А3 или L. fermentum 90Т-С4 до общего количества клеток не менее 1×108 КОЕ/мл. В качестве чистой культуры можно использовать лекарственное средство Лактобактерий (ЛС 002098-010714).
Способ 3. Сухие нативные ржаные отруби и питьевую или очищенную воду смешивают в соотношении от 1:20 до 1:10 (от 5 г до 10 г на 100 мл воды) отрубей и воды, в полученную среду вносят посевную массу лактобактерий до общего содержания клеток от 1×106 до 1×107 КОЕ/мл, далее проводят культивирование от 15 до 24 ч при температуре от 36 до 38°С с получением инокулята, содержащего необходимый уровень клеток (не менее 1×108 КОЕ/мл).
Примеры получения средства заявленного составаExamples of obtaining funds of the claimed composition
Пример 1.Example 1
Ржаные отруби (или их смесь с пшеничными или гречневыми отрубями от 15 до 50 мас. %) стерилизуют в автоклаве 30 мин при (111±1)°С, охлаждают до 30-35°С, смешивают с посевным материалом в количестве от 1 до 1,5 л на 1 кг отрубей. Посевная доза - не менее 1×108 КОЕ/мл во всем объеме инокулята. Полученную смесь перемешивают для однородного увлажнения всей массы, инкубирование проводят в течение 24-48 ч при температуре от 36 до 38°С в закрытых емкостях, или иным способом, обеспечивающим влажность ферментируемой массы на уровне 90-100% до достижения рН 3,5-5,2. Ферментированную массу нагревают при (100±1)°С в течение 1,5 ч при атмосферном давлении, при давлении насыщенного пара при температуре (121±1)°С - не менее 15 мин, или при температуре (111±1)°С - не менее 30 мин, или инфракрасным излучением для инактивации бактерий в качестве отдельной операции. Инактивированную массу высушивают при температуре 55-70°С в конвективных сушилках различного типаRye bran (or a mixture thereof with wheat or buckwheat bran from 15 to 50 wt.%) Is autoclaved for 30 minutes at (111 ± 1) ° C, cooled to 30-35 ° C, mixed with seed in an amount from 1 to 1.5 liters per 1 kg of bran. Sowing dose - at least 1 × 10 8 CFU / ml in the entire volume of the inoculum. The resulting mixture is stirred to uniformly moisten the entire mass, incubation is carried out for 24-48 hours at a temperature of 36 to 38 ° C in closed containers, or in another way, ensuring the humidity of the fermented mass at a level of 90-100% until a pH of 3.5- 5.2. The fermented mass is heated at (100 ± 1) ° C for 1.5 hours at atmospheric pressure, at saturated vapor pressure at a temperature of (121 ± 1) ° C - for at least 15 minutes, or at a temperature of (111 ± 1) ° C - at least 30 minutes, or by infrared radiation to inactivate bacteria as a separate operation. The inactivated mass is dried at a temperature of 55-70 ° C in convective dryers of various types
Представленные в табл. 2 и 3 данные показывают, что оптимальная продолжительность твердофазного культивирования (ферментации) лежит в интервале от 24 до 48 ч.Presented in the table. 2 and 3, the data show that the optimal duration of solid-phase cultivation (fermentation) lies in the range from 24 to 48 hours
Пример 2.Example 2
Используют ржаные нестерильные отруби (или их смесь с пшеничными или гречневыми отрубями от 15 до 50 мас. %). Посевной материал готовят по способу 1 или 3 и вносят аналогично примеру 1 и проводят культивирование (ферментацию) в течение 15-36 ч при температуре от 36 до 38°С. Данные табл. 2 и 3 свидетельствуют, что процесс культивирования (ферментация) сопровождается интенсивным закислением среды, а количество клеток лактобактерий в культурах не значительно превышает количества в засеваемой дозе или происходит снижение их количества. Кроме того, достаточно четко видна высокая питательная ценность нестерильных отрубей, на которых активность лактобактерий превышает активность по примеру 1. Инактивация лактобактерий и высушивание продукта - аналогичны примеру 1.Use rye non-sterile bran (or a mixture of wheat or buckwheat bran from 15 to 50 wt.%). The seed is prepared according to
Пример 3.Example 3
Используют ржаные стерильные и нестерильные отруби (или их смесь с пшеничными или гречневыми отрубями от 15 до 50 мас. %) ферментированные по примеру 1 или 2, при этом инактивацию бактерий проводят одновременно с высушиванием инактивированной массы при условиях, приведенных в примере 1.Use sterile and non-sterile rye bran (or a mixture of wheat or buckwheat bran from 15 to 50 wt.%) Fermented according to example 1 or 2, while the inactivation of bacteria is carried out simultaneously with the drying of the inactivated mass under the conditions described in example 1.
Все приведенные способы получения (изложенных в примерах 1-3) и способы инактивации лактобактерий позволяют получить продукт с заявленными свойствами, с полным отсутствием лактобактерий (продуцентов органических кислот), посторонней микрофлоры и необходимым уровнем биогенных органических кислот (таблица 1).All the above methods of preparation (described in examples 1-3) and methods of inactivation of lactobacilli allow to obtain a product with the declared properties, with a complete absence of lactobacilli (producers of organic acids), extraneous microflora and the necessary level of biogenic organic acids (table 1).
Сравнительная оценка возможности использования заявленных штаммов лактобактерий, а также данные, показывающие динамику роста лактобактерий и изменение функциональных показателей, представлены в таблицах 2-4.A comparative assessment of the possibility of using the claimed strains of lactobacilli, as well as data showing the dynamics of growth of lactobacilli and a change in functional indicators, are presented in tables 2-4.
Данные таблицы 2 показывают, что исходное сырье (стерильные отруби зерновых культур, например ржаные, или их смеси с пшеничными или гречневыми отрубями от 15 до 50 мас. %) является ценным питательным субстратом для лактобактерий. Показана возможность использования стерильных и нестерильных отрубей при использовании штаммов L. fermentum 90Т-С4 или L. plantarum 8Р-А3, которые выгодно отличаются от остальных штаммов и позволяют в значительной степени накапливать достаточное количество клеток и их естественные метаболиты необходимые для получения заявляемого средства. Использование нестерильных отрубей приводит к значительному увеличению активности лактобактерий, что связано с сохранением нативных ростовых свойств питательного субстрата из-за исключения стадии термической обработки, конкуренции лактобактерий за питательный субстрат и стимуляции выработки бактериоцинов.The data in table 2 show that the feedstock (sterile bran crops, for example rye, or mixtures thereof with wheat or buckwheat bran from 15 to 50 wt.%) Is a valuable nutrient substrate for lactobacilli. The possibility of using sterile and non-sterile bran when using strains of L. fermentum 90T-C4 or
Оптимальным является соотношение от 1 до 1,5 л инокулята на 1 кг смеси отрубей с влажностью не более 15%, при этом данное соотношение примерно одинаково для нативных или экструдированных отрубей.The optimal ratio is from 1 to 1.5 liters of inoculum per 1 kg of bran mixture with a moisture content of not more than 15%, while this ratio is approximately the same for native or extruded bran.
В таблице 3 показана закономерности культивирования лактобактерий штамма L. plantarum 8Р-А3 и накопление необходимого количества кислотности при соотношении твердой фазы и инокулята составляет 1:1 и 1:1,5, оптимальная продолжительность ферментации для отрубей с использованием инокулята полученного способом 1 и 3 составляет не более 24 ч, при использовании инокулята, приготовленного по способу 2 - не более 48 ч и позволяет получать продукт с заданными свойствами.Table 3 shows the patterns of cultivation of lactobacilli strain
В таблице 4 показана возможность культивирования лактобактерий штаммов L. plantarum 8Р-А3 и L. fermentum 90Т-С4 и накопления необходимой посевной дозы и кислотности для возможности засева и подавления сопутствующей микрофлоры при получении средства. Установлена продолжительность культивирования составляет не более 15-24 ч при температуре от 36 до 38°С, более длительное культивирование посевного материала приводит к снижению количества клеток и их ферментативной активности.Table 4 shows the possibility of cultivation of lactobacilli strains of
Данные таблиц 2-4 свидетельствуют, что процесс культивирования (ферментации) сопровождается интенсивным закислением среды (накоплением органических кислот, в частности молочной), а количество клеток лактобактерий в культурах, в случае использования стерильных отрубей, не значительно превышает количества в засеваемой дозе или происходит снижение их количества. Кроме того, достаточно четко видна высокая питательная ценность применяемых стерильных и нестерильных отрубей, на которых активность и уровень накопления биомассы заявляемых штаммов лактобактерий L. plantarum 8Р-А3 и L. fermentum 90Т-С4 значительно превышает активность других штаммов, в том числе используемого в способе получения пищевой добавки по RU 2136175. Заявляемые штаммы обладают высокой активностью роста и биохимической активностью при культивировании с применением сред на основе отрубей, что способствует подавлению посторонней микрофлоры и позволяет использовать нестерильный субстрат. В случаях сравниваемых штаммов (L. acidophilus 100 аш, L. plantarum 7-19 (38), L. fermentum 1-20 (39), L. plantarum 31), используемых в таких же условиях и широко применяемых в пищевой и фармацевтической промышленности, не происходит накопление биомассы и органических кислот до необходимого уровня, что приводит к активации посторонней микрофлоры и контаминации среды культивирования и не возможности их применения для получения БАД с заявленными свойствами (сорбционной, антагонистической и пробиотической активностью).The data in tables 2-4 indicate that the cultivation (fermentation) process is accompanied by intensive acidification of the medium (accumulation of organic acids, in particular lactic acid), and the number of lactobacilli cells in cultures, in the case of using sterile bran, does not significantly exceed the number in the inoculated dose or there is a decrease their quantity. In addition, the high nutritional value of the applied sterile and non-sterile bran is clearly visible, on which the activity and biomass accumulation of the claimed strains of
Культуры штаммов L. plantarum 8Р-А3 и L. fermentum 90Т-С4 могут быть получены из ВКПМ или Государственной коллекции промышленных микроорганизмов ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России или может быть использован препарат Лактобактерий (ЛС 002098-010714).Cultures of strains of
Внесение инокулята изготовленного по способу 1 и 3 в массу отрубей с последующим однородным перемешиванием, существенно снижает время ферментации (культивирования) за счет обеспечения адекватного питания лактобактерий и их предварительной активации, тогда как инокулят, приготовленный внесением лактобактерий в количестве не менее 1×108 КОЕ/мл в стерильную очищенную воду или физиологический раствор натрия хлорида (способ 2), требует более длительной экспозиции при твердофазном культивировании на отрубях, что связано с адаптацией лактобактерий, регидратированием после лиофильного высушивания. Питательная среда на основе отрубей, применяемая для изготовления инокулята по способу 1 и 3, является оптимальной средой подращивания и активации лактобактерий, что дает возможность использовать в качестве субстрата нестерильные отруби. За счет активного роста клеток и выделения значительного количества метаболитов (как фактора колонизационной резистентности) подавляется контаминантная микрофлора нестерильных отрубей, которая в дальнейшем инактивируется (обезвреживаются) термической стерилизацией вместе с лактобактериями.The introduction of the inoculum made by
Накопление достаточного количества лактобактерий (не менее 1×108 КОЕ/мл) при использовании жидкой питательной среды на основе ржаных отрубей (изготовление инокулята по способу 1 и 3) подтверждают данные табл. 4, применение инокулята, изготовленного по способу 1-3 позволяет получать средство с заявляемыми свойствами.The accumulation of a sufficient amount of lactobacilli (at least 1 × 10 8 CFU / ml) when using a liquid nutrient medium based on rye bran (inoculum production according to
Заявляемая биологически активная добавка получена на основе растительного сырья, ферментированного молочнокислыми микроорганизмами с образующимися в результате ферментации сырья метаболитами и органическими кислотами, причем, продукты клеточного метаболизма дополнительно обогащают получаемый продукт и в итоге повышают его биологическую ценность.The inventive biologically active additive is obtained on the basis of plant materials fermented with lactic acid microorganisms with metabolites and organic acids formed as a result of fermentation of the raw materials, moreover, the products of cellular metabolism additionally enrich the resulting product and ultimately increase its biological value.
Предлагаемый способ позволяет получить средство, обладающее следующими свойствами:The proposed method allows to obtain a tool with the following properties:
1. Бактериостатическая активность средства1. Bacteriostatic activity
Сравнительная оценка показателя прямой бактериостатической активности в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов полученного средства в сравнении с препаратом полученным по способу RU 2233320 (таблица 5), была выявлена с помощью метода диффузии в агар (метод колодцев) и свидетельствует об относительно высокой бактериостатической активности полученного препарата превышающей препарат сравнения в среднем на 96,6%.A comparative assessment of the direct bacteriostatic activity index against pathogenic and opportunistic microorganisms of the obtained agent in comparison with the preparation obtained by the method of RU 2233320 (table 5) was revealed using the agar diffusion method (well method) and indicates a relatively high bacteriostatic activity of the obtained drug exceeding the comparison drug by an average of 96.6%.
2. Стимуляция антагонистической активности нормофлоры2. Stimulation of the antagonistic activity of normoflora
Показатель стимуляции антагонистической активности нормофлоры заявляемым средством оценен на примере пробиотического штамма L. plantarum 8Р-А3 в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов (таблица 6). Приведенные данные свидетельствуют о стимуляции антагонизма и подавлении роста тест-штаммов, относящихся к патогенным и условно-патогенным бактериям и возможности использования средства для коррекции дисбактериозов, вызванных усиленным ростом патогенной или условно-патогенной флоры.The stimulation index of the antagonistic activity of normoflora by the claimed agent was evaluated on the example of the probiotic
Представленные данные подтверждают методом «in vitro» наличия у заявляемого препарата пробиотической активности выражаемого в стимуляции роста нормофлоры.The presented data are confirmed by the in vitro method of the presence of a probiotic activity in the claimed preparation expressed in stimulating the growth of normoflora.
Высокая антагонистическая активность объясняется стимуляцией биохимической активности нормофлоры и наличием бактериоцинов и органических кислот в средстве, накапливающихся в процессе его получения.The high antagonistic activity is explained by the stimulation of the biochemical activity of normoflora and the presence of bacteriocins and organic acids in the product that accumulate during its production.
3. Пробиотическая активность3. Probiotic activity
Пробиотическая активность изучалась с привлечением добровольцев с дисбактериозом кишечника различной этиологии и степени выраженности возрастом от 14 до 60 лет, участвующих в определении эффективности.Probiotic activity was studied with the participation of volunteers with intestinal dysbiosis of various etiologies and severity from 14 to 60 years old, participating in determining effectiveness.
При оценке критериев эффективности установлено, что участники отмечали купирование или уменьшение жалоб, характерных для дисбактериоза кишечника: исчезновение отрыжки, метеоризма, урчания и/или вздутия живота, нормализацию и улучшение стула. Наблюдалась достоверное увеличение скорости восстановления титра лакто- и бифидобактерий до нормального уровня (таблица 7), в случае наличия в рандомизированной группе участников в анализе условно-патогенных микроорганизмов в группе принимающих средство, полученное по предлагаемому способу, наблюдалось достоверное снижение их количества вплоть до отсутствия обнаружения в последующих бактериологических анализах, что подтверждает данные о наличии прямого противомикробного действия и высокой стимуляции антагонистической активности в отношении условно-патогенных микроорганизмов. Клинические наблюдения:When evaluating the effectiveness criteria, it was found that participants noted relief or reduction of complaints characteristic of intestinal dysbiosis: disappearance of belching, flatulence, rumbling and / or bloating, normalization and improvement of stool. There was a significant increase in the rate of recovery of the titer of lactobacilli and bifidobacteria to a normal level (table 7), if there were conditionally pathogenic microorganisms in the randomized group of participants in the group taking the drug obtained by the proposed method, a significant decrease in their number was observed up to the absence of detection in subsequent bacteriological analyzes, which confirms the evidence of the presence of direct antimicrobial action and high stimulation of antagonistic activity in relation to opportunistic microorganisms. Clinical observations:
Участник №05Member number 05
На начало приема препарата беспокоил метеоризм средней степени выраженности, на 5-й день после приема выраженность симптома уменьшилась, на 7-й работа ЖКТ нормализовалась.At the beginning of taking the drug, moderate flatulence was worried, on the 5th day after taking the symptom, the severity of the symptom decreased, on the 7th work of the gastrointestinal tract normalized.
Участник №06Member number 06
В бактериологическом анализе кала на этапе скрининга была обнаружена гемолитическая Е. coli 108 КОЕ/г при начале приема средства самочувствие было прежнее без отрицательной динамики по завершении 7 дней приема средства в бактериологическом анализе кала гемолитическая Е. coli. не обнаружена.In the bacteriological analysis of feces at the screening stage, hemolytic E. coli 10 8 CFU / g was found at the beginning of taking the agent, the state of health was the same without negative dynamics at the end of 7 days of taking the agent in the bacteriological analysis of feces, hemolytic E. coli. not found.
Участник №09Member 09
В бактериологическом анализе кала было обнаружено повышенное содержание типичных кишечных палочек 1010 КОЕ/г в бактериологическом анализе кала через 7 дней применения обнаружены типичные кишечные палочки не 104 КОЕ/г, на 14 день приема в анализе не обнаружены.In the bacteriological analysis of feces, an increased content of typical E. coli was found 10 10 CFU / g; in the bacteriological analysis of feces after 7 days of use, typical E. coli not 10 4 CFU / g were found, on the 14th day of administration they were not found in the analysis.
Участник №11Member number 11
До приема препарата на этапе скрининга беспокоил жидкий стул, без патологических примесей, до 3 раз в день, без болей в животе. Самостоятельно не лечился, за медицинской помощью не обращался. Симптом прошел поле приема средства в течение 7 дней, стул нормализовался, без патологических примесей.Before taking the drug at the screening stage, he was worried about loose stools, without pathological impurities, up to 3 times a day, without abdominal pain. I was not treated on my own, I did not seek medical help. The symptom passed the field of taking the drug for 7 days, the stool returned to normal, without pathological impurities.
Участник №14Member number 14
В бактериологическом анализе кала на этапе скрининга был обнаружен St. aureus 104 КОЕ/г после 7 дней применения средства в бактериологическом анализе кала не обнаружен St. aureus.In a bacteriological analysis of feces at the screening stage, St. aureus 10 4 CFU / g after 7 days of use of the drug in the bacteriological analysis of feces not detected aureus.
Участник №13Member number 13
В бактериологическом анализе кала на начало приема средства было обнаружено повышенное содержание условно-патогенных энтеробактерий (Klebsiella oxytoca 107 КОЕ\г). После 7 дней применения средства в бактериологическом анализе кала условно-патогенные энтеробактерий не обнаружены.In the bacteriological analysis of feces at the beginning of taking the drug, an increased content of opportunistic enterobacteria (Klebsiella oxytoca 10 7 CFU / g) was found. After 7 days of using the drug in the bacteriological analysis of feces, opportunistic enterobacteria were not detected.
Таким образом, полученные данные свидетельствуют об эффективности препарата показатели которого превышает препарат сравнения (средство, полученное по способу RU 2233320) в предписанной методике приема, что свидетельствует о возможности применения его в качестве синбиотика (метабиотика), который оказывает благоприятное действие на организм человека за счет прямого подавления условно-патогенной микрофлоры, опосредованной нормализации нарушений микрофлоры и ее функций.Thus, the data obtained indicate the effectiveness of the drug, the indicators of which exceed the comparison drug (the agent obtained by the method of RU 2233320) in the prescribed method of administration, which indicates the possibility of using it as a synbiotic (metabiotic), which has a beneficial effect on the human body due to direct suppression of opportunistic microflora, mediated normalization of microflora disorders and its functions.
4. Сорбционная активность4. Sorption activity
Сорбционная активность заявленного препарата изучена на модели 0,15% раствора метиленового синего, который использовался в качестве маркера по химическому строению и молекулярной массе близкому к средне молекулярным токсикантам (билирубин, желчные кислоты, холестерин, мочевина, меркаптен, индол и др.). Установлено, что способ получения средства, а именно использование ферментации заявленными штаммами L. fermentum 90Т-С4 и L. plantarum 8Р-А3 происходит изменение субстрата (обрабатываемых отрубей) под действием ферментов лактобактерий и активных метаболитов, накапливающихся в процессе их жизнедеятельности. Изменяется сама структура отрубей, увеличивается их пористость (активация поверхности) и приводит к увеличению адсорбционной способности готового продукта, что наглядно показано в таблице 8.The sorption activity of the claimed drug was studied on the model of a 0.15% solution of methylene blue, which was used as a marker for the chemical structure and molecular weight close to the average molecular toxicants (bilirubin, bile acids, cholesterol, urea, mercaptene, indole, etc.). It was found that the method of obtaining the agent, namely the use of fermentation with the claimed strains of L. fermentum 90T-C4 and
Ферментация отрубей в процессе культивирования лактобактериями заявленных штаммов с последующей инактивацией, высушиванием и измельчением, позволяет получить продукт с высокой сорбционной способностью по отношению к низкомолекулярным токсикантам эндогенного и бактериального происхождения и дает возможность использовать средство в качестве энтеросорбента.Fermentation of bran during cultivation of the claimed strains with lactobacilli, followed by inactivation, drying and grinding, allows to obtain a product with high sorption ability in relation to low molecular weight toxicants of endogenous and bacterial origin and makes it possible to use the agent as an enterosorbent.
5. Влияние на рост перевиваемой прогностически значимой опухоли5. The effect on the growth of transplantable prognostic significant tumor
На базе лаборатории комбинированной терапии опухолей НИИ «Экспериментальной диагностики и терапии опухолей» ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России проведено исследование заявляемого средства по программе для потенциальных модификаторов биологических реакций в онкологии.On the basis of the laboratory for combined therapy of tumors of the Research Institute for Experimental Diagnostics and Therapy of Tumors, Federal State Budget Scientific Center named after N.N. Blokhina »The Ministry of Health of the Russian Federation conducted a study of the claimed drug under the program for potential modifiers of biological reactions in oncology.
Определено влияние при пероральном многократном введении на рост подкожно трансплантированного лимфолейкоза Р388 у мышей и выявлено достоверное торможение роста опухоли на разных сроках наблюдения от 29 до 54% (р<0,05), при этом общее состояние и поведение мышей на фоне и после применения было удовлетворительным без патологических изменений, гибели мышей не отмечено. Установлено отсутствие риска стимуляции роста опухоли при рекомендованной схеме приема в качестве БАД.The effect of repeated oral administration of subcutaneously transplanted P388 lymphocytic leukemia in mice was determined and significant inhibition of tumor growth was detected at different follow-up periods from 29 to 54% (p <0.05), while the general condition and behavior of mice during and after use was satisfactory without pathological changes; death of mice was not noted. There was no risk of stimulating tumor growth with the recommended regimen as a dietary supplement.
Дано заключение в отчете от 20 июля 2016 г. о перспективности изучения препарата в качестве симптоматического средства для коррекции паранеопластического синдрома или токсичности химиотерапии у онкологических пациентов.A report was made on July 20, 2016 on the prospects of studying the drug as a symptomatic remedy for the correction of paraneoplastic syndrome or chemotherapy toxicity in cancer patients.
Таким образом, вышеуказанные способы, за счет подобранной композиции (используемых отрубей зерновых культур, штаммов лактобактерий и их метаболитов) позволяют получить средство, стимулирующее антагонистическую активность нормофлоры, обладающее про- и пребиотической, бактериостатической и сорбционной активностью, что позволяет его использовать в качестве энтеросорбента при дисбактериозах различной этиологии и устранения интоксикации организма. Наличие сочетанных свойств и особенность оригинального состава позволяет использовать препарат, получаемый по заявленным способам в качестве симптоматического средства для коррекции паранеопластического синдрома или токсичности химиотерапии у онкологических пациентов.Thus, the above methods, due to the selected composition (used bran of grain crops, strains of lactobacilli and their metabolites) make it possible to obtain a tool that stimulates the antagonistic activity of normoflora, which has pro- and prebiotic, bacteriostatic and sorption activity, which allows it to be used as an enterosorbent in dysbiosis of various etiologies and elimination of intoxication of the body. The presence of combined properties and the peculiarity of the original composition allows using the drug obtained by the claimed methods as a symptomatic agent for the correction of paraneoplastic syndrome or chemotherapy toxicity in cancer patients.
На сегодняшний день отсутствуют препараты, содержащие отруби зерновых культур, биогенную молочную кислоту и инактивированные клетки лактобактерий заявляемых штаммов и обладающих описанными свойствами.To date, there are no preparations containing bran of cereal crops, biogenic lactic acid and inactivated lactobacillus cells of the claimed strains and possessing the described properties.
Проведены химические исследования заявляемой биологически активной добавки на наличие пищевых волокон (в т.ч. растворимых и не растворимых), содержания молочной кислоты, витаминов группы В (В1, В3) и свободных незаменимых аминокислот (Протокол испытаний №280905/16, Испытательные лаборатории ООО «Лаборатории Весселинг», аттестат аккредитации № RA.RU.021АИ88 от 08.06.2016 (таблица 9).Chemical studies of the inventive biologically active additives for the presence of dietary fiber (including soluble and insoluble), the content of lactic acid, B vitamins (B 1 , B 3 ) and free essential amino acids were carried out (Test Report No. 280905/16, Test laboratories of Wesseling Laboratories LLC, accreditation certificate No. RA.RU.021AI88 dated 06/08/2016 (table 9).
Таким образом, заявляемую биологически активную добавку можно считать нутрицевтиком - источником пищевых веществ, применяемых для коррекции химического состава пищи человека. Доказан ее безопасность -отсутствие токсичных элементов, пестицидов, проведены микробиологические исследования, показывающие эффективность применяемых способов инактивации и подавление сопутствующей микрофлоры в процессе ферментации заявленными штаммами лактобактерий (Протокол лабораторных испытаний №15897, ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии Пермского края», аттестат аккредитации №RA.RU510375).Thus, the claimed biologically active additive can be considered nutraceutical - a source of nutrients used to correct the chemical composition of human food. Its safety is proved - the absence of toxic elements, pesticides, microbiological studies have been carried out, showing the effectiveness of the applied methods of inactivation and suppression of concomitant microflora in the process of fermentation with the claimed strains of lactobacilli (Laboratory test report No. 15897, Federal State Health Institution “Center for Hygiene and Epidemiology of the Perm Territory”, accreditation certificate No. RA .RU510375).
На основании полученных данных заявляемая БАД, полученная вышеуказанным способом, была зарегистрирована Роспотребнадзором в качестве биологически активной добавки к пище «Флоралюкс» свидетельство государственной регистрации RU.77.99.11.003.Е.005301.11.16 от 15.11.2016, в качестве источника пищевых волокон и содержащую органические кислоты (биогенную молочную кислоту).Based on the obtained data, the claimed dietary supplement obtained by the above method was registered by Rospotrebnadzor as a biologically active food supplement "Floralux" state registration certificate RU.77.99.11.003.E.005301.11.16 from 11/15/2016, as a source of dietary fiber and containing organic acids (biogenic lactic acid).
Claims (6)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015109193A RU2628879C2 (en) | 2015-03-16 | 2015-03-16 | Method for production of therapeutic and prophylactic preparations and biologically active additives |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015109193A RU2628879C2 (en) | 2015-03-16 | 2015-03-16 | Method for production of therapeutic and prophylactic preparations and biologically active additives |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2015109193A RU2015109193A (en) | 2016-10-10 |
| RU2628879C2 true RU2628879C2 (en) | 2017-08-22 |
Family
ID=57122251
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015109193A RU2628879C2 (en) | 2015-03-16 | 2015-03-16 | Method for production of therapeutic and prophylactic preparations and biologically active additives |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2628879C2 (en) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4806368A (en) * | 1987-09-16 | 1989-02-21 | Reddy Malireddy S | Shelf life and subsequent growth of lactobacillus acidophilus, propionibacterium shermanii and leuconostoc citrovorum in dietary fiber based supplement preparation |
| RU2048123C1 (en) * | 1991-12-10 | 1995-11-20 | Николай Николаевич Терещенко | Method for making dietary product |
| RU2136175C1 (en) * | 1997-05-05 | 1999-09-10 | Московский государственный университет прикладной биотехнологии | Method of food addition preparing |
-
2015
- 2015-03-16 RU RU2015109193A patent/RU2628879C2/en active IP Right Revival
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4806368A (en) * | 1987-09-16 | 1989-02-21 | Reddy Malireddy S | Shelf life and subsequent growth of lactobacillus acidophilus, propionibacterium shermanii and leuconostoc citrovorum in dietary fiber based supplement preparation |
| RU2048123C1 (en) * | 1991-12-10 | 1995-11-20 | Николай Николаевич Терещенко | Method for making dietary product |
| RU2136175C1 (en) * | 1997-05-05 | 1999-09-10 | Московский государственный университет прикладной биотехнологии | Method of food addition preparing |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2015109193A (en) | 2016-10-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN100537740C (en) | Metabolic activity microorganism and production method thereof | |
| CN109810912B (en) | Lactobacillus plantarum LH-511 and application thereof | |
| CN107259578A (en) | A kind of probiotic composition and preparation method thereof | |
| US10576113B2 (en) | Method of preparing stable, water soluble probiotic compositions based on millets and similar cereals | |
| CN106222158B (en) | Preparation method of lactobacillus-embedding microcapsule | |
| US5143845A (en) | Mixture of saccarifying lactic acid producing and butyric acid producing bacteria | |
| CN104542977A (en) | Health beverage containing dioscorease rhizome extract and bifidobacterium bifidum and preparation method of health beverage | |
| CN113061543A (en) | Lactobacillus plantarum and application thereof | |
| CN107287133A (en) | One lactobacillus plantarum LLY 606 and its application | |
| KR20170045050A (en) | Cereals fermented by lactic acid bacteria and method for manufacturing the same | |
| CN110577907B (en) | Bifidobacterium animalis and application thereof | |
| CN110835615B (en) | Active substance of bifidobacterium lactis GKK2, composition containing same and application of active substance and composition in promoting longevity | |
| RU2614116C2 (en) | Method of producing probiotic composition | |
| US20220267717A1 (en) | Method for preparing pure plant-based microbial culture | |
| CN107949633A (en) | Novel lactobacillus species microorganism and the composition for animal feed for including it | |
| JPWO2006112364A1 (en) | Antihypertensive agent obtained by lactic acid bacteria culture | |
| CN101912423B (en) | Method for manufacturing Monascus products containing probiotics | |
| RU2628879C2 (en) | Method for production of therapeutic and prophylactic preparations and biologically active additives | |
| KR20200080629A (en) | Manufacturing method for edible enzyme food using Bacillus sbutilis | |
| RU2646163C1 (en) | Method of preparing the nutrient medium for growing the probiotic crops | |
| RU2273662C2 (en) | Consortium of microorganisms with probiotic effect | |
| RU2307514C1 (en) | Method for obtaining of fermented yogurt-type milk product | |
| TWI766184B (en) | A kind of Lactobacillus plantarum and its use for preparing vegetable condensed yogurt and improving intestinal flora | |
| RU2366699C2 (en) | Method for making bifidus bacteria biomass | |
| RU2802073C1 (en) | Feed additive with probiotic activity for fish |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20170621 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20201102 |