RU2617418C1 - Способ прогнозирования развития раннего тромбоза зоны реконструкции после реконструктивных операций на брюшной аорте и артериях нижних конечностей в зависимости от генетических вариантов наследственных тромбофилий и клинико-лабораторных показателей - Google Patents
Способ прогнозирования развития раннего тромбоза зоны реконструкции после реконструктивных операций на брюшной аорте и артериях нижних конечностей в зависимости от генетических вариантов наследственных тромбофилий и клинико-лабораторных показателей Download PDFInfo
- Publication number
- RU2617418C1 RU2617418C1 RU2016127946A RU2016127946A RU2617418C1 RU 2617418 C1 RU2617418 C1 RU 2617418C1 RU 2016127946 A RU2016127946 A RU 2016127946A RU 2016127946 A RU2016127946 A RU 2016127946A RU 2617418 C1 RU2617418 C1 RU 2617418C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- blood
- thrombosis
- level
- risk
- mthfr
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6806—Preparing nucleic acids for analysis, e.g. for polymerase chain reaction [PCR] assay
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6813—Hybridisation assays
- C12Q1/6827—Hybridisation assays for detection of mutation or polymorphism
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
- C12Q1/6858—Allele-specific amplification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
- C12Q1/686—Polymerase chain reaction [PCR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2531/00—Reactions of nucleic acids characterised by
- C12Q2531/10—Reactions of nucleic acids characterised by the purpose being amplify/increase the copy number of target nucleic acid
- C12Q2531/113—PCR
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2561/00—Nucleic acid detection characterised by assay method
- C12Q2561/113—Real time assay
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2565/00—Nucleic acid analysis characterised by mode or means of detection
- C12Q2565/10—Detection mode being characterised by the assay principle
- C12Q2565/125—Electrophoretic separation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/118—Prognosis of disease development
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/156—Polymorphic or mutational markers
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/32—Cardiovascular disorders
- G01N2800/329—Diseases of the aorta or its branches, e.g. aneurysms, aortic dissection
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
-
- G—PHYSICS
- G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
- G16B—BIOINFORMATICS, i.e. INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR GENETIC OR PROTEIN-RELATED DATA PROCESSING IN COMPUTATIONAL MOLECULAR BIOLOGY
- G16B40/00—ICT specially adapted for biostatistics; ICT specially adapted for bioinformatics-related machine learning or data mining, e.g. knowledge discovery or pattern finding
-
- G—PHYSICS
- G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
- G16C—COMPUTATIONAL CHEMISTRY; CHEMOINFORMATICS; COMPUTATIONAL MATERIALS SCIENCE
- G16C20/00—Chemoinformatics, i.e. ICT specially adapted for the handling of physicochemical or structural data of chemical particles, elements, compounds or mixtures
- G16C20/70—Machine learning, data mining or chemometrics
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области медицинской диагностики и предназначено для прогнозирования риска развития раннего тромбоза зоны реконструкции после реконструктивных операций на брюшной аорте и артериях нижних конечностей. У пациента осуществляют забор крови, выделение ДНК и анализ полиморфизмов генов 677 С/Т MTHFR и 455 G/A FGB. В крови определяют уровень Д-димера, гомоцистеина, фибриногена, антитромбина III, ЛПВП, ЛПВП и количество тромбоцитов. Полученные значения включают в формулы расчета y1 и y2. Риск формирования тромбоза зоны реконструкции прогнозируют в случае, если y1 больше y2. Изобретение позволяет формировать группы риска по развитию осложнений после реконструктивных операций на брюшной аорте и артериях нижних конечностей, что будет способствовать более эффективной реализации лечебно-профилактических мероприятий по предупреждению развития тромбоза зоны реконструкции. 2 ил., 2 табл., 2 пр.
Description
Изобретение относится к области медицинской диагностики, может быть использовано для прогнозирования риска развития тромбоза после реконструктивных операций на брюшной аорте и артериях нижних конечностей.
Одной из наиболее частых причин повторных реконструктивных операций являются тромбозы и окклюзии шунтов и зон реконструкций [Султанян Т.Л. Осложнения после реконструктивных операций на магистральных артериях нижних конечностей и методы их коррекции / Т.Л. Султанян, А.С. Саркисян, А.М. Хачатрян // Ангиология и сосудистая хирургия. - 2013. - Т. 19, №1. - С. 124-128]. По данным литературы, частота тромбозов после операций на аорто-бедренном сегменте достигает 9,3%, а бедренно-подколенно-тибиальном до 12% [Прогнозирование ранних тромбогеморрагических осложнений после реконструктивных операции на магистральных артериях нижних конечностей / А.А. Полянцев, П.В. Мозговой, Д.В. Фролов [и др] // Вестник Волгоградского государственного медицинского университета. - 2004. - №11. - С. 68-72]. Среди причин развития тромботических осложнений в первые месяцы послеоперационного периода многие авторы выделяют ошибки хирургической техники и несостоятельность дистального русла [Покровский, А.В. Результаты использования комбинированных шунтов с дистальным анастомозом ниже щели коленного сустава / А.В. Покровский, Д.И. Яхонтов // Ангиология и сосудистая хирургия. - 2014. - Т. 20, №2. - С. 140-147]. Значительную роль в развитии тромботических окклюзий играют нарушения свертывающей системы крови [Белов Ю.В. Повторные реконструктивные операции на аорте и магистральных артериях / Ю.В. Белов, А.Б. Степаненко. - Москва: Медицинское информационное агентство, 2009. - 176 с.; Risk Stratification for the Development of Respiratory Adverse Events Following Vascular Surgery / E.A. Genovese, L. Fish, G.E. Al-Khoury, M.S. Makaroun, D.T. Baril // Journal of Vascular Surgery. - 2015. - Vol. 62, Issue 3. - P. 793-794]. Реокклюзии шунтов по срокам их возникновения подразделяют на ранние, формирующиеся в течение трех месяцев после хирургического вмешательства, отсроченные, развивающиеся в сроки до 1,5 лет, и поздние, проявляющиеся спустя 1,5 года и более, после операции [Современное состояние проблемы реокклюзии после реконструктивных вмешательств на артериях таза и нижних конечностей у больных облитерирующим атеросклерозом / М.Р. Кузнецов, К.В. Комов, С.А. Тепляков, И.В. Косых, Б.В. Тугдумов // Ангиология и сосудистая хирургия. - 2009. - Т. 15, №4. - С. 145-151]. По данным Белова Ю.В., (2009) ранними послеоперационными тромбозами считаются тромботические осложнения, возникшие в первые шесть месяцев после операции, соответственно, - поздние послеоперационные тромбозы, возникшие более шести месяцев после вмешательства. Увеличение числа артериальных тромбозов может быть связано с комбинацией различных факторов генетического риска тромбоза [Sheweita S.A. Role of genetic changes in the progression of cardiovascular diseases / S.A. Sheweita, H. Baghdadi, A.R. Allam // International Journal of Biomedical Sciences. - 2011. - Vol. 7 (4). - P. 238-248]. Факторы риска тромбообразования и механизмы формирования тромбофилических состояний, создающие высокий риск развития тромбозов и тромбоэмболий, во многом определяют дальнейшее течение и последующий прогноз заболевания, как в раннем послеоперационном периоде, так и в отдаленные сроки [Современные методы распознавания состояния тромботической готовности: монография / А.П. Момот, Л.П. Цывкина, И.А. Тараненко [и др.]; под ред. А.П. Момота. - Барнаул: Изд-во Алтайского государственного университета, 2011. - 138 с.]. Современные диагностические лабораторные методы позволяют выявить нарушения гемостаза на дооперационном этапе и далее контролировать качество проводимой терапии в послеоперационном периоде. Основным методом исследования и контроля состояния системы гемостаза является коагулограмма [Вавилова Т.В. Лабораторные исследования в монторинге антитромботической терапии / Т.В. Вавилова // Новости хирургии. - 2010. - Т. 18, №3. - С. 150-161], а также ряд отдельных исследований свертывающей системы крови: антитромбин, D-димер и гомоцистеин, выделяемые из сыворотки крови больного. Гипергомоцистеинемия развивается за счет мутации гена MTHFR, способствуя формированию как венозных, так и артериальных тромбозов. Гипергомоцистеинемия приводит к раннему развитию атеросклероза и тромбоза коронарных, церебральных и периферических артерий за счет развития эндотелиальной дисфункции через активацию тромбоцитов [Тарханова И.Ю. и др., 2009; Федосеева А.А. Гомоцистеин сыворотки крови и некоторые показатели гемостаза при дегенеративно-дистрофических заболеваниях тазобедренного сустава / А.А. Федосеев, Д.Я. Алейник // Медицинских альманах. - 2012. - №1. - С. 149-152.; Генетическая предрасположенность к венозному тромбозу: роль полиморфизмов компонентов плазменного и тромбоцитарного звеньев гемостаза / С.И. Капустин, В.М. Шмелева, А.М. Паншина [и др.] // Ученые записки СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова. - 2004. - Т. 11, №3. - С. 10-15], нарушению липидного обмена [Казанцев А.В. Исследование системы гемостаза и маркеров дисфункции эндотелия у больных с облитерирующим атеросклерозом бедренно-подколенной локализации / А.В. Казанцев, Е.А. Корымасов // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Сер. Медицина. Фармация. - 2010. - Т. 12, №22. - С. 80-85]. Антитромбин играет центральную роль в ингибировании коагуляции и воспалительных процессов сосудистого эндотелия [Khor, В. Laboratory tests for antithrombin deficiency / В. Khor, E.M. Van Cott // American Journal of Hematology. - 2010. - Vol. 85. - P. 947]. Измененные его уровни в плазме крови, повышают риск тромбообразования в венозном и артериальном руслах [Inherited Thrombophilia / Н.М. Phillippe, L.В. Hornsby, S. Treadway, Е.М. Armstrong, J.М. Bellone // Journal of Pharmacy Practice. - 2014. - 27 (3). - P. 227-233]. D-димер - это специфический продукт деградации фибрина, является диагностическим маркером активации системы гемостаза, который отражает процессы как образования фибрина, так и его лизиса [Adam S.S., Key N.S., Greenberg C.S. D-dimer antigen: current concepts and future prospects. //Blood. - 2009. - Vol. 113. - №13. - P. 2878-2887]. Повышение его концентрации свидетельствует о риске развития тромботических осложнений. Доказана значимая роль генетических факторов наследственных тромбофилий (1691G/A фактора V, 20210G/A протромбина, -455 G/A фибриногена, 677С/Т MTHFR и др.) в развитии венозных и артериальных тромбозов любой локализации как в дооперационном, так и в послеоперационном периоде (раннем и позднем) [Yilmaz, S. Inherited risk factors in low-risk venous thromboembolism in patients under 45 years / S. Yilmaz, S. Gunaydin // Interactive Cardiovascular and Thoracic Surgery. - 2015. - Vol. 20 (1). - P. 21-23; Role of thrombophilia factors in acute systemic-pulmonary shunt obstruction / Y. Ergul, N. Kiplapinar, I.C. Tanidir, E. Ozturk, A. Guzeltas, S. Hay din, A. Akcay, E. Erek, M. Yeniterzi, E. Odemis, I. Bakir // Pediatrics International. - 2015. - Vol. 57 (6). - P. 1072-1077]. Работы, посвященные изучению вклада наследственных тромбофилий в развитие тромботических окклюзий зоны реконструкции при операции на брюшной аорте и артериях нижних конечностей немногочисленны и представлены в основном исследованиями зарубежных авторов [Bilateral renal artery thrombosis in inherited thrombophilia: a rare cause of acute kidney injury / K.S. Wiles, L. Hastings, V.M. Muthuppalaniappan, M. Hanif, S. Abeygunasekara // International Journal of Nephrology and Renovascular Disease. - 2014. - Vol. 7. - P. 35-38; Thrombosis of the aorta abdominalis in infants-diagnosis and thrombolytic therapy / U. Krause, H.E. Schneider, M. Webel, T. Paul // Klinische Padiatrie. - 2012. - Vol. 224 (3). - P. 179-182].
Для оценки сложившейся патентной ситуации был выполнен поиск по охранным документам за период с 1990 по 2015 гг. Анализ документов производился по направлению: способ прогнозирования риска развития раннего тромбоза зоны анастомоза после реконструктивных операций на брюшной аорте и артериях нижних конечностей на основе молекулярно-генетических факторов риска в зависимости от полиморфных маркеров генов 677 С/Т MTHFR, 455 G/A FGB.
Способ оценки состоятельности русла оттока при бедренно-подколенном шунтировании в изолированный сегмент у больных с критической ишемией (RU 2545419). Способ основан на оценке состояния путей «оттока», т.е. состояния артериального русла берцового сегмента, в сочетании с оценкой степени ишемии конечности. Каждому показателю присваивается определенный балл и затем по балльной шкале определяется качество берцового сегмента, по которому можно прогнозировать срок службы шунта. Недостатком способа является отсутствие учета данных о системе гемостаза, в том числе молекулярно-генетических, которые не в меньшей мере влияют на сроки развития тромбоза зоны реконструкции.
За прототип способ диагностики наследственной предрасположенности к тромбофилий по патенту РФ №2352641 (опубликован 20.04.2009), сущность которого заключается в том, что у пациента берут пробу крови, производят выделение ДНК, амплификацию участков генов МТГФР человека, V фактора свертываемости крови (FV) и протромбина (FII) путем проведения полимеразной цепной реакции с использованием трех пар специально подобранных олигонуклеотидных праймеров, обработку амплификационных фрагментов эндонуклеазой рестрикции TaqI и определение размера полученных фрагментов с помощью электрофореза. При выявлении полиморфных замен С677→Т в гене МТГФР, G1691→А в гене FV и G20210→А в гене FII диагностируют наследственную предрасположенность к тромбофилии.
Недостатком способа является отсутствие ассоциации генетических вариантов генов наследственных тромбофилий с клинико-лабораторными показателями. Изолированное выявление факта наличия наследственной тромбофилий не позволяет создать модель прогнозирования рисков развития тромбоза зоны реконструкции в послеоперационном периоде.
Задачей настоящего исследования является расширение способов диагностики, а именно создание способа прогнозирования развития тромбоза зоны реконструкции после реконструктивных операций на брюшной аорте и артериях нижних конечностей в первые 6 месяцев после оперативного вмешательства на основе данных о генетическом полиморфизме генов 677 С/Т MTHFR, 455 G/A FGB в сочетании с другими клинико-лабораторными показателями.
Технический результат использования изобретения - получение критериев оценки риска развития тромбоза зоны реконструкции после реконструктивных операций на брюшной аорте и артериях нижних конечностей жителей Центрального Черноземья России русской национальности для формирования группы с повышенным риском развития данной патологии.
В соответствии с поставленной задачей был разработан способ прогнозирования риска развития тромбоза зоны реконструкции после реконструктивных операций на брюшной аорте и артериях нижних конечностей, включающий:
- забор крови у пациента;
- выделение ДНК из периферической венозной крови;
- анализ полиморфизмов генов 677 С/Т MTHFR, 455 G/A FGB;
- определение уровня других клинико-лабораторных предикторов тромбоза зоны реконструкции: Д-димер, гомоцистеин, количество тромбоцитов в крови, фибриноген, антитромбин III, липопротеиды низкой плотности (ЛПНП), липопротеиды высокой плотности (ЛПВП);
- определение y1 и y2 по формулам линейной дискриминантной функции (ЛДФ):
y1=-101,554+8,549х1+5,193х2+1,733х3+0,154х4+3,796х5+0,735х6++1,255х7+8,135х8;
y2=-71,4118+6,1074х1+1,6767х2+1,0168х3+0,1197х4+2,8396х5+0,6612х6++2,4880x7+6,1074х8,
где x1 - генетический полиморфизм 455 G/A FGB, 677 С/Т MTHFR (1 - комбинация аллелей 455 A FGB и 677 Т MTHFR, 2 - другие комбинации генетических вариантов по локусам 455 G/A FG и 677 С/Т MTHFR), х2 - уровень Д-димера в крови (мкг/мл), х3 - уровень гомоцистеина в крови (мкмоль/л), х4 - количество тромбоцитов в крови (×109/л), х5 - уровень фибриногена в крови (г/л), x6 - уровень антитромбина III в крови (%), х7 - уровень ЛПНП в крови (ммоль/л), х8 - уровень ЛПВП в крови (ммоль/л);
- прогнозирование риска формирования тромбоза зоны реконструкции в случае, если y1 больше y2.
Новизна и изобретательский уровень заключаются в том, что из уровня техники не известна возможность прогноза риска развития тромбоза зоны реконструкции после реконструктивных операций на брюшной аорте и артериях нижних конечностей по данным о генетических вариантах 677 С/Т MTHFR, 455 G/A FGB в сочетании с другими факторами риска.
Способ осуществляют следующим образом.
Производят забор крови у пациента. ДНК выделяют из образцов периферической венозной крови индивидуумов в 2 этапа. На первом этапе к 4 мл крови добавляют 25 мл лизирующего буфера, содержащего 320 мМ сахарозы, 1% тритон Х-100, 5 мМ MgCl2, 10 мМ трис-HCl (рН=7,6). Полученную смесь перемешивают и центрифугируют при 4°С, 4000 об./мин в течение 20 минут. После центрифугирования надосадочную жидкость сливают, к осадку добавляют 4 мл раствора, содержащего 25 мМ ЭДТА (рН=8,0) и 75 мМ NaCl, ресуспензируют. Затем прибавляют 0,4 мл 10% SDS, 35 мкл протеиназы К (10 мг/мл) и инкубируют образец при 37°С в течение 16 часов.
На втором этапе из полученного лизата последовательно проводят экстракцию ДНК равными объемами фенола, фенол-хлороформа (1:1) и хлороформа с центрифугированием при 4000 об./мин в течение 10 минут. После каждого центрифугирования производят отбор водной фазы. ДНК осаждают из раствора двумя объемами охлажденного 96% этанола. Сформированную ДНК растворяют в бидистиллированной, деионизованной воде и хранят при -20°С. Выделенную ДНК затем подвергают полимеразной цепной реакции.
Анализ полиморфизмов генов 677 С/Т MTHFR, 455 G/A FGB проводят методом полимеразной цепной реакции синтеза ДНК на амплификаторе IQ5 (Bio-Rad) в режиме real time с использованием ДНК-полимеразы Thermus aquaticus производства фирмы «Силекс-М» и олигонуклеотидных праймеров и зондов, синтезированных фирмой «Синтол» с последующим анализом полиморфизмов методом дискриминации аллелей. Для дискриминации аллелей используют программу Bio-Rad «IQ5-Standart Edition». Генотипирование осуществляют методом TagMan зондов по данным величин уровня относительной флуоресценции (УОФ) каждого зонда.
Изобретение охарактеризовано на фиг. 1, где представлена дискриминация аллелей по локусу -455 G/A FGB (где 
- гомозиготы -455GG FGB, 
- гомозиготы -455АА FGB, 
- гетерозиготы -455GA FGB, 
- неопределенный или отрицательный контроль.
Две полосы, вертикальная и горизонтальная, делят график на Фиг. 1 на четыре секции: одна для каждого гомозиготного состояния, одна для гетерозиготного состояния и секция без реакции. Присвоение генотипов неизвестным образцам определяется вычерчиванием УОФ для одного флуорофора на оси х относительно УОФ для другого флуорофора на оси у на диаграмме дискриминации аллелей. Зонд с флуоресцентным красителем ROX соответствует аллелю А, зонд с красителем FAM - аллелю G.
- Если значения УОФ неизвестного образца находятся выше горизонтальной полосы и правее вертикальной полосы, генотип гетерозиготен (GA).
- Если значения УОФ неизвестного образца находятся выше горизонтальной полосы и левее вертикальной полосы, генотип гомозиготен по аллелю А (УОФ аллеля А отложены по оси y).
- Если значения УОФ неизвестного образца находятся ниже горизонтальной полосы и правее вертикальной, генотип гомозиготен по аллелю G (УОФ аллеля А отложены по оси x).
- Если значения УОФ неизвестного образца находятся ниже горизонтальной полосы и левее вертикальной, определение генотипа невозможно: в данном случае неопределенный образец - отрицательный контроль.
На Фиг. 2 представлена дискриминация аллелей по локусу 677 СТ гена MTHFR (где 
- гомозиготы 677Т гена MTHFR, 
- гомозиготы 677С гена MTHFR, 
- гетерозиготы 677С/Т гена MTHFR, 
- неопределенный или отрицательный контроль).
Возможность использования предложенного способа для оценки риска развития тромбоза зоны реконструкции после реконструктивных операций на брюшной аорте и артериях нижних конечностей подтверждает анализ результатов наблюдений 84 пациентов после реконструктивных операций на брюшной аорте и артериях нижних конечностей (44 случаев тромбоза зоны реконструкции, 40 без тромботических осложнений) и 35 человек контрольной группы.
Критерии включения в исследуемые выборки:
1. Индивидуумы мужского пола, русской национальности, являющиеся уроженцами Центрального Черноземья РФ и не имеющие родства между собой.
2. Добровольное согласие пациентов на проведение исследования.
3. В группу больных включались индивидуумы с впервые установленным или подтвержденным диагнозом: облитерирующий атеросклероз артерий нижних конечностей со степенью хронической артериальной недостаточности нижних конечностей II Б - III степенью по классификации Фонтейна - Покровского [Покровский А.В., 2004], перенесшие операцию прямой реваскуляризации брюшной аорты и артерий нижних конечностей.
Диагностика осуществлялась на основании результатов общепринятых стандартов обследования больных с облитерирующими заболеваниями аорты и периферических артерий, представленные в Российском консенсусе «Рекомендуемые стандарты для оценки результатов лечения пациентов с хронической ишемией нижних конечностей» (2005 г.).
4. В контрольную группу включались индивидуумы мужского пола, не имеющие сопутствующих инфекционных или воспалительных заболеваний (в том числе брюшной аорты и магистральных артерий).
Критерии исключения из исследуемых выборок:
1. Пациенты женского пола.
2. Больные, имеющие сопутствующие инфекционные или воспалительные заболевания (в том числе брюшной аорты и магистральных артерий).
3. Наличие онкологических заболеваний на момент исследования или в анамнезе.
4. Наличие клинических или лабораторных признаков тромбофилий.
Клиническое и лабораторное обследование индивидуумов проводилось на базе отделения сосудистой хирургии ОГБУЗ Белгородской областной клинической больницы Святителя Иоасафа. Типирование молекулярно-генетических маркеров осуществлялось в лаборатории «Молекулярной генетики человека» медицинского института Белгородского государственного национального исследовательского университета. Формирование базы данных и статистические расчеты осуществлялись с использованием программы «STATISTICA 6.0».
Прогнозирование риска развития тромбоза зоны реконстукции после реконструктивных операций на брюшной аорте и артериях нижних конечностей осуществлялось с использованием дискриминантного анализа [Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA [Текст] / О.Ю. Реброва. - [3-е изд.]. - Москва: Медиа Сфера, 2006. - 305 с.: ил.; Боровиков В.П. Statistical искусство анализа данных на компьютере [Текст] / В.П. Боровиков. - 2-е изд. - Санкт-Петербург: Питер, 2003. - 688 с.]. Анализировались результаты молекулярно-генетического обследования, анамнестические данные, клинико-лабораторные показатели, позволяющие дискриминировать индивидуумов на две группы: с высоким риском развития тромбоза зоны реконструкции и низким риском развития тромбоза зоны реконструкции. Уравнение линейной дискриминантной функции (ЛДФ) имеет следующий вид [Реброва О.Ю., 2006]:
y=a1x1+a2x2+a3x3+…+anxn+С,
где xi - информативные признаки, ai - коэффициенты для данных признаков, С - константа.
Коэффициенты в уравнениях линейных дискриминантных функций для индивидуумов с высоким риском развития тромбоза зоны реконструкции и низким риском развития тромбоза зоны реконструкции включают следующие генетические и клинико-лабораторные показатели: генетические варианты по локусам 455 G/A FGB и 677 С/Т MTHFR, уровень Д-димера, гомоцистеина в крови, количество тромбцитов в крови, уровень фибриногена, антитромбина III, ЛПНП и ЛПВП в крови.
Следовательно, после подстановки соответствующих коэффициентов аi, приведенных в таблице 1, в уравнение линейных дискриминантных функций получают две дискриминантные функции:
y1=-101,554+8,549x1+5,193x2+1,733x3+0,154x4+3,796x5+0,735x6++1,255х7+8,135х8;
y2=-71,4118+6,1074x1+1,6767х2+1,0168х3+0,1197x4+2,8396х5+0,6612х6++2,4880x7+6,1074х8,
где:
x1 - генетический полиморфизм 455 G/A FGB, 677 С/Т MTHFR (1 - комбинация аллелей 455 A FGB и 677 Т MTHFR, 2 - другие комбинации генетических вариантов по локусам 455 G/A FG и 677 С/Т MTHFR);
x2 - уровень Д-димера в крови (мкг/мл);
x3 - уровень гомоцистеина в крови (мкмоль/л);
x4 - количество тромбоцитов в крови (×109/л);
x5 - уровень фибриногена в крови (г/л);
x6 - уровень антитромбина III в крови (%);
х7 - уровень ЛПНП в крови (ммоль/л);
x8 - уровень ЛПВП в крови (ммоль/л).
Значения коэффициентов ai для информативных признаков xi в уравнениях линейных дискриминантных функций.
Выявленные нами показатели при дискриминантном анализе дали значение критерия Уилкса 0,21489, при F (8,70)=31,969 и р<0,0000. Эти данные позволяют заключить, что две рассматриваемые группы индивидов (с развитием раннего тромбоза в зоне реконструкции и контрольная группа) по набору из восьми изученных параметров демонстрируют неслучайную межгрупповую вариацию. Значения критериев Уилкса, F-критериев, вероятности Р, а также показателей толерантности для каждого из выявленных в дискриминантном анализе показателей представлены в таблице 2. Анализ F-критериев и показателей вероятности статистической ошибки 1-го рода (р) по отдельным показателям свидетельствует о том, что по всем изученным параметрам р<0,05, и это позволяет их использовать при дискриминантном анализе. Значения толерантности по рассматриваемым показателям (Т=0,84-0,94) существенно выше критического уровня Т<0,10 [Дерябин, 2001], что исключает мультиколлениарность данных признаков, т.е. отсутствуют высокие взаимные корреляции этих признаков, наличие которых снижает точность оценок. Точность распознания индивидов, относящихся к группе больных с ранним тромбозом зоны реконструкции, составляет 95,46%, а в контрольной группе - 100%. В среднем процент правильных дискриминаций в группу больных с ранним тромбозом зоны реконструкции после операции на брюшной аорте и артериях нижних конечностей и в контрольную группу на основе данных о генетических вариантах по локусам 455 G/A FGB, 677 С/Т MTHFR и клинико-лабораторных показателях (уровень Д-димера, гомоцистеина в крови, количество тромбцитов в крови, уровень фибриногена, антитромбина III, ЛПНП и ЛПВП в крови) составляет 97,47%.
Значения критериев отбора для признаков, включенных в дискриминантный анализ.
В вышеуказанные уравнения ЛДФ подставляют значения соответствующих показателей у конкретного индивидуума и рассчитывают значения y1 и y2. Установлено, что в случае, когда y1 больше y2, индивидуума следует отнести в группу пациентов с высоким риском развития тромбоза зоны реконструкции, а в случае, когда y2 больше y1, можно прогнозировать низкий риск развития тромбоза зоны реконструкции [Боровиков, 2001].
С целью проверки работоспособности заявленного технического решения в анализ были включены дополнительно еще два пациента.
У больного И. по данным молекулярно-генетического обследования выявлены генотипы 455GA FGB и 677 СТ MTHFR (2), при лабораторном исследовании во время подготовки к реконструктивной операции на артериях нижних конечностей выявлены следующие показатели: уровень Д-димера в крови - 2,3 мкг/мл; уровень гомоцистеина в крови - 16,2 мкмоль/л; количество тромбоцитов в крови - 315×109/л; уровень фибриногена в крови - 4,7 г/л; уровень антитромбина III в крови - 101,3%; уровень ЛПНП в крови - 2,9 ммоль/л; уровень ЛПВП в крови - 0,95 ммоль/л. Подставляем эти значения признаков в два вышеуказанных уравнения ЛДФ и находим в каждом уравнении новый признак y.
y1 для больных с ранним тромбозом зоны реконструкции после операции на брюшной аорте и артериях нижних конечностей
y1=-101,554+8,549х1+5,193х2+1,733х3+0,154х4+3,796х5+0,735х6++1,255x7+8,135х8=-101,554+8,549×2+5,193×2,3+1,733×16,2+0,154×315++3,796×4,7+0,735×101,3+1,255×2,9+8,135×0,95=107,737
y2 для контрольной группы=-71,4118+6,1074х1+1,6767х2++1,0168х3+0,1197х4+2,8396х5+0,6612х6++2,4880х7++6,1074х8=-71,4118++6,1074×2+1,6767×2,3+1,0168×16,2+0,1197×315+2,8396×4,7+0,6612×101,3++2,4880×2,9+6,1074×0,95=92,18
Поскольку у данного пациента значение y1 превышает значение y2, это позволяет отнести данного пациента в группу с высоким риском раннего тромбоза зоны реконструкции. Дальнейшее амбулаторное наблюдение за больным выявило развитие тромбоза в зоне пластики бедренной артерии через 3 месяца после операции.
У больного Д. по данным молекулярно-генетического обследования выявлены генотипы 455GG FGB и 677 СС MTHFR (1), при лабораторном исследовании во время подготовки к реконструктивной операции на артериях нижних конечностей выявлены следующие показатели: уровень Д-димера в крови - 0,35 мкг/мл; уровень гомоцистеина в крови - 9,7 мкмоль/л; количество тромбоцитов в крови - 202×109/л; уровень фибриногена в крови - 3,84 г/л; уровень антитромбина III в крови - 107%; уровень ЛПНП в крови - 2,27 ммоль/л; уровень ЛПВП в крови - 1,15 ммоль/л. Подставляем эти значения признаков в два вышеуказанных уравнения ЛДФ и находим в каждом уравнении новый признак y.
y для больных с ранним тромбозом зоны реконструкции после операции на брюшной аорте и артериях нижних конечностей
y1=-101,554+8,549x1+5,193х2+1,733х3+0,154х4+3,796х5+0,735х6+1,255х7++8,135х8=-101,554+8,549×1+5,193×0,35+1,733×9,7+0,154×202++3,796×3,84+0,735×107+1,255×2,27+8,135×1,15=62,16
y2 для контрольной группы = -71,4118+6,1074x1+1,6767x2++1,0168х3+0,1197х4+2,8396х5+0,6612х6++2,4880х7++6,1074х8=-71,4118++6,1074×1+1,6767×0,35+1,0168×9,7+0,1197×202+2,8396×3,84+0,6612×107++2,4880×2,27+6,1074×1,15=63,65
Так как у данного пациента значение y2 превышает значение y2, это позволяет отнести данного пациента в группу с низким риском развития раннего тромбоза зоны реконструкции. Дальнейшее наблюдение за пациентом в течении 6 месяцев не выявило тромботической окклюзии бедренно-подколенного шунта.
Предложенный способ прогнозирования риска развития тромбоза зоны реконструкции в первые 6 месяцев после операции на брюшной аорте и артериях нижних конечностей позволяет формировать среди пациентов группы риска по развитию данного осложнения, что будет способствовать более эффективной реализации лечебно-профилактических мероприятий по предупреждению развития тромбоза зоны реконструкции и его раннему выявлению с целью своевременного начала лечения и предупреждения прогрессирования заболевания.
Claims (4)
- Способ прогнозирования риска развития раннего тромбоза зоны реконструкции после реконструктивных операций на брюшной аорте и артериях нижних конечностей, включающий забор крови у пациента, отличающийся тем, что выделяют ДНК из периферической венозной крови, проводят анализ полиморфизмов генов 677 С/Т MTHFR, 455 G/A FGB, определяют уровень других клинико-лабораторных предикторов тромбоза зоны реконструкции, определяют значения y1 и y2 по формулам линейной дискриминантной функции:
- y1 = -101,554 + 8,549х1 + 5,193х2 + 1,733х3 + 0,154х4 + 3,796х5 + 0,735х6 + 1,255х7 + 8,135х8;
- y2 = -71,4118 + 6,1074x1 + 1,6767x2 + 1,0168x3 + 0,1197х4 + 2,8396х5 + 0,6612х6 + 2,4880x7 + 6,1074х8,
- где х1 - генетический полиморфизм 455 G/A FGB, 677 С/Т MTHFR (1 - комбинация аллелей 455 A FGB и 677 Т MTHFR, 2 - другие комбинации генетических вариантов по локусам 455 G/A FG и 677 С/Т MTHFR), х2 - уровень Д-димера в крови (мкг/мл), х3 - уровень гомоцистеина в крови (мкмоль/л), х4 - количество тромбоцитов в крови (х 109/л), х5 - уровень фибриногена в крови (г/л), х6 - уровень антитромбина III в крови (%), х7 - уровень ЛПНП в крови (ммоль/л), х8 - уровень ЛПВП в крови (ммоль/л), и прогнозируют риск формирования тромбоза зоны реконструкции в случае, если y1 больше y2.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016127946A RU2617418C1 (ru) | 2016-07-11 | 2016-07-11 | Способ прогнозирования развития раннего тромбоза зоны реконструкции после реконструктивных операций на брюшной аорте и артериях нижних конечностей в зависимости от генетических вариантов наследственных тромбофилий и клинико-лабораторных показателей |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016127946A RU2617418C1 (ru) | 2016-07-11 | 2016-07-11 | Способ прогнозирования развития раннего тромбоза зоны реконструкции после реконструктивных операций на брюшной аорте и артериях нижних конечностей в зависимости от генетических вариантов наследственных тромбофилий и клинико-лабораторных показателей |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2617418C1 true RU2617418C1 (ru) | 2017-04-25 |
Family
ID=58643078
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2016127946A RU2617418C1 (ru) | 2016-07-11 | 2016-07-11 | Способ прогнозирования развития раннего тромбоза зоны реконструкции после реконструктивных операций на брюшной аорте и артериях нижних конечностей в зависимости от генетических вариантов наследственных тромбофилий и клинико-лабораторных показателей |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2617418C1 (ru) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2740444C1 (ru) * | 2020-07-17 | 2021-01-14 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования развития тромботических осложнений после реконструктивно-восстановительных вмешательств на магистральных артериях нижних конечностей |
| RU2750129C1 (ru) * | 2020-12-30 | 2021-06-22 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования развития рестеноза у пациентов с периферическим атеросклерозом после эндоваскулярных вмешательств |
| US11143659B2 (en) | 2015-01-27 | 2021-10-12 | Arterez, Inc. | Biomarkers of vascular disease |
| RU2804847C1 (ru) * | 2023-03-22 | 2023-10-06 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования ранних тромботических осложнений после операций на брюшной аорте и аорто-подвздошном сегменте |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2352641C1 (ru) * | 2007-11-09 | 2009-04-20 | Елена Николаевна Воронина | Способ диагностики наследственной предрасположенности к тромбофилии |
-
2016
- 2016-07-11 RU RU2016127946A patent/RU2617418C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2352641C1 (ru) * | 2007-11-09 | 2009-04-20 | Елена Николаевна Воронина | Способ диагностики наследственной предрасположенности к тромбофилии |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| FALKOWSKI A. et al. [Pharmacogenetics of the local thrombolysis in patients with deep vein thrombosis] [Article in Polish]. Pol Arch Med Wewn. 2005 Jul; 114(1): 644-651. * |
| МОЗГОВОЙ П.В. Тромбогеморрагические осложнения после реконструктивных операций на брюшном отделе аорты и магистральных артериях нижних конечностей (профилактика, диагностика, лечение). Автореф. дисс. доктора мед. наук. Волгоград, 2004, 46 c. [Найдено 21.10.2016] [он-лайн]. Найдено из Интернет, Медицинские Диссертации: URL: http://medical-diss.com/medicina/trombogemorragicheskie-oslozhneniya-posle-rekonstruktivnyh-operatsiy-na-bryushnom-otdele-aorty-i-magistralnyh-arteriyah-n-1#ixzz4NhpqX01Z. ФРОЛОВ Д.В. Прогнозирование ранних тромботических реокклюзий у больных облитерирующими заболеваниями артерий нижних конечностей. Автореф. дисс. канд. мед. наук. Волгоград, 2000, 27 c. * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US11143659B2 (en) | 2015-01-27 | 2021-10-12 | Arterez, Inc. | Biomarkers of vascular disease |
| US11821905B2 (en) | 2015-01-27 | 2023-11-21 | Arterez, Inc. | Biomarkers of vascular disease |
| RU2740444C1 (ru) * | 2020-07-17 | 2021-01-14 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования развития тромботических осложнений после реконструктивно-восстановительных вмешательств на магистральных артериях нижних конечностей |
| RU2750129C1 (ru) * | 2020-12-30 | 2021-06-22 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования развития рестеноза у пациентов с периферическим атеросклерозом после эндоваскулярных вмешательств |
| RU2804847C1 (ru) * | 2023-03-22 | 2023-10-06 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования ранних тромботических осложнений после операций на брюшной аорте и аорто-подвздошном сегменте |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Cuenca et al. | Genetic basis of familial dilated cardiomyopathy patients undergoing heart transplantation | |
| Mansourati et al. | Prevalence of factor V Leiden in patients with myocardial infarction and normal coronary angiography | |
| Rehak et al. | The prevalence of activated protein C (APC) resistance and factor V Leiden is significantly higher in patients with retinal vein occlusion without general risk factors | |
| Bishehsari et al. | TNF-alpha gene (TNFA) variants increase risk for multi-organ dysfunction syndrome (MODS) in acute pancreatitis | |
| Marini et al. | 17p12 influences hematoma volume and outcome in spontaneous intracerebral hemorrhage | |
| Thaler et al. | Evaluation of S100B in the diagnosis of suspected intracranial hemorrhage after minor head injury in patients who are receiving platelet aggregation inhibitors and in patients 65 years of age and older | |
| Jones et al. | Occurrence of rheumatoid arthritis is not increased in the first degree relatives of a population based inception cohort of inflammatory polyarthritis. | |
| RU2617418C1 (ru) | Способ прогнозирования развития раннего тромбоза зоны реконструкции после реконструктивных операций на брюшной аорте и артериях нижних конечностей в зависимости от генетических вариантов наследственных тромбофилий и клинико-лабораторных показателей | |
| CN105442052A (zh) | 一种检测诊断主动脉夹层病致病基因的dna文库及其应用 | |
| WO2012171949A2 (en) | Thromboembolic disease | |
| RU2540928C1 (ru) | Способ прогнозирования риска развития хронической плацентарной недостаточности с синдромом задержки роста плода 2-3-ей степени у беременных | |
| WO2013080227A1 (en) | Genetic variants useful for risk assessment of arterial disease | |
| Shadrina et al. | Polymorphisms of genes involved in inflammation and blood vessel development influence the risk of varicose veins | |
| Dodson et al. | Chronic thromboembolic pulmonary hypertension cases cluster in families | |
| Van Vlijmen-Van Keulen et al. | Genome-wide linkage in three Dutch families maps a locus for abdominal aortic aneurysms to chromosome 19q13. 3 | |
| Rawanduzy et al. | The effect of frailty and patient comorbidities on outcomes after acute subdural hemorrhage: a preliminary analysis | |
| Oraby et al. | MicroRNA-499 Gene Expression in Egyptian Type 2 Diabetes Mellitus Patients with and without Coronary Heart Disease. | |
| Dinger et al. | Development of multiple intracranial aneurysms: beyond the common risk factors | |
| Arnaoutoglou et al. | Relationship between normal preoperative white blood cell count and major adverse events after endovascular repair for abdominal aortic aneurysm: results of a pilot study | |
| WO2022220298A1 (ja) | 乳幼児おむつ皮膚炎の症度の検出方法 | |
| RU2642939C1 (ru) | Способ прогнозирования риска развития преэклампсии | |
| Klincheva et al. | Endothelial nitric oxide synthase T-786C mutation, prothrombin gene mutation (G-20210-A) and protein S deficiency could lead to myocardial infarction in a very young male adult | |
| Rijken et al. | How significant is the antifibrinolytic effect of lipoprotein (a) for blood clot lysis? | |
| Lounici et al. | A descriptive monocentric study in Algeria of adults with cerebral venous thrombosis | |
| Abdullah et al. | Role of fibrinolytic markers in acute stroke |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180712 |