RU2612082C1 - Method for prediction of pathological process direction in case of pancreas head cancer - Google Patents

Method for prediction of pathological process direction in case of pancreas head cancer Download PDF

Info

Publication number
RU2612082C1
RU2612082C1 RU2015144218A RU2015144218A RU2612082C1 RU 2612082 C1 RU2612082 C1 RU 2612082C1 RU 2015144218 A RU2015144218 A RU 2015144218A RU 2015144218 A RU2015144218 A RU 2015144218A RU 2612082 C1 RU2612082 C1 RU 2612082C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
generalization
malignant
months
head cancer
activity
Prior art date
Application number
RU2015144218A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Олег Иванович Кит
Елена Михайловна Франциянц
Лариса Степановна Козлова
Станислав Станиславович Мезенцев
Умар Мухмадович Газиев
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт" Министерства здравоохранения Российской Федерации
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт" Министерства здравоохранения Российской Федерации filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт" Министерства здравоохранения Российской Федерации
Priority to RU2015144218A priority Critical patent/RU2612082C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2612082C1 publication Critical patent/RU2612082C1/en

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer

Abstract

FIELD: medicine.
SUBSTANCE: invention refers to medicine, namely to gastroenterology and may be used to determine the generalization of malignant process after surgical treatment of pancreas head cancer. To do this, the activity of 2-macroglobulin universal inhibitor is determined in the patient's blood plasma on the 15th day after pancreatoduodenectomy. If the value of this index is from 10.57 IU/ml to 12.37 IU/ml, development of malignant process generalization is predicted within 2.5-6 months after surgery. When the value is from 5.18 IU/ml to 5.98 IU/ml postoperative course without generalization process is predicted for 12 months.
EFFECT: prediction method allowing to predict the pathological process direction in case of pancreas head cancer and to carry out early detection of malignant process generalization terms.
1 tbl, 2 ex

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к биологическим исследованиям в онкологии, и может быть использовано для определения дальнейшего развития (генерализации) злокачественного процесса после оперативного лечения рака головки поджелудочной железы.The invention relates to medicine, namely to biological research in oncology, and can be used to determine the further development (generalization) of the malignant process after surgical treatment of pancreatic head cancer.

В структуре смертности РПЖ занимает четвертое место в мире с пятилетней выживаемостью около 5%. При этом пациенты, оперировавшиеся по поводу операбельных форм заболевания, имеют 20% 5-летнюю выживаемость с медианой от 12 до 20 месяцев. У пациентов с местнораспространенными формами заболевания без отдаленных метастазов медиана выживаемости составляет от 6 до 10 месяцев (см. Никулин М.П., Сельчук В.Ю., Чистяков С.С., Ибрагимов Т.Ф., Титова Г.В. Рак поджелудочной железы. Независимое издание для практикующих врачей. Источник www.rmj.ru (1726, публикация 22.03.14)).In the structure of mortality, prostate cancer ranks fourth in the world with a five-year survival rate of about 5%. Moreover, patients operated on for operable forms of the disease have a 20% 5-year survival rate with a median of 12 to 20 months. In patients with locally advanced forms of the disease without distant metastases, the median survival is from 6 to 10 months (see Nikulin M.P., Selchuk V.Yu., Chistyakov S.S., Ibragimov T.F., Titova G.V. Cancer pancreas. Independent publication for practitioners. Source www.rmj.ru (1726, publication 03.22.14)).

В России заболеваемость раком поджелудочной железы составляет в среднем 8-9 человек на 100 тысяч населения. Рак поджелудочной железы наиболее часто регистрируют в возрасте 60-80 лет. Мужчины страдают в 1,5 раза чаще, чем женщины. Рак поджелудочной железы у 80% больных локализуется в головке органа, реже - в теле и хвосте железы, еще реже наблюдают мультицентрическую локализацию опухоли, а также диффузный рак, поражающий всю поджелудочную железу. Повышенная частота опухолей поджелудочной железы в головке органа связана с тем, что именно там потенциально высок контакт с канцерогенами, содержащимися в желчи или дуоденальном содержимом (см. Никулин М.П., Сельчук В.Ю., Чистяков С.С., Ибрагимов Т.Ф., Титова Г.В. Рак поджелудочной железы. Независимое издание для практикующих врачей. Источник www.rmj.ru (1726, публикация 22.03.14)).In Russia, the incidence of pancreatic cancer is an average of 8-9 people per 100 thousand of the population. Pancreatic cancer is most often reported at the age of 60-80 years. Men suffer 1.5 times more often than women. Pancreatic cancer in 80% of patients is localized in the head of the organ, less often in the body and tail of the gland, even less often observed multicentric localization of the tumor, as well as diffuse cancer that affects the entire pancreas. The increased frequency of pancreatic tumors in the head of the organ is due to the fact that it is there that the contact with carcinogens contained in bile or duodenal contents is potentially high (see Nikulin M.P., Selchuk V.Yu., Chistyakov S.S., Ibragimov T .F., Titova GV Pancreatic cancer. Independent publication for practitioners. Source www.rmj.ru (1726, publication 03/22/14)).

Воздействие повреждающих факторов формирует разветвленную сеть взаимозависимых и взаимопотенцирующих изменений в пораженном органе. Модификация и/или деструкция мембран и цитоскелета клеток под воздействием протеолиза, развитие иммунопатологических, воспалительных, гидролитических, окислительных процессов приводят к массированному разрушению еще неповрежденных клеток поджелудочной железы, выходу интерстиций их содержимого, включая многочисленные протеолитические ферменты.The impact of damaging factors forms an extensive network of interdependent and mutually potentizing changes in the affected organ. Modification and / or destruction of cell membranes and cytoskeleton under the influence of proteolysis, the development of immunopathological, inflammatory, hydrolytic, oxidative processes lead to massive destruction of still intact pancreatic cells, the release of interstitium of their contents, including numerous proteolytic enzymes.

Названные факторы дополнительно потенцируют воспалительные, иммунопатологические, окислительные и протеолитические реакции. Это, в свою очередь, делает процесс поражения поджелудочной железы тотальным и нарастающим по степени, т.е. возможно и генерализованное распространение злокачественного процесса (Кульчиев А.А., Сланов А.В., Морозов А.А., Елоев В.А., Харахаш А.Я. Хирургические заболевания. Для послевузовской профессиональной подготовки Специальность №0401226 «Хирургия». Учебное пособие. Владикавказ 2009. 558 с.).These factors additionally potentiate inflammatory, immunopathological, oxidative and proteolytic reactions. This, in turn, makes the process of pancreatic lesion total and increasing in degree, i.e. generalized spread of the malignant process is also possible (Kulchiev A.A., Slanov A.V., Morozov A.A., Eloev V.A., Kharakhash A.Ya. Surgical diseases. For postgraduate training, specialty No. 0401226 "Surgery". Textbook. Vladikavkaz 2009. 558 p.).

Изменения в системе протеолиза в пораженном органе отражаются в показателях активности не только ферментов системы общего и специфического протеолиза, но и белков, ограничивающих протеолитические реакции, - универсальных ингибиторов, в частности альфа-2-макроглобулина (α2М), поскольку этот высокомолекулярный ингибитор является белком острой фазы воспаления и контролирует активность практически всех известных протеиназ.Changes in the proteolysis system in the affected organ are reflected in the activity indicators of not only enzymes of the general and specific proteolysis system, but also proteins that limit proteolytic reactions, universal inhibitors, in particular alpha-2-macroglobulin (α 2 M), since this high molecular weight inhibitor protein of the acute phase of inflammation and controls the activity of almost all known proteinases.

Существуют данные о способности злокачественных опухолей синтезировать и выделять в окружающую среду различные белки, в том числе собственный α2М, защищающий опухоль от атак иммунной системы (Зорина В.Н., Козлов И.Г., Третьякова Т.В. и соавт. Некоторые реактанты острой фазы при различных типах пролиферативных заболеваний придатков матки. Клиническая лабораторная диагностика. 2009; (10): 16-19).There is evidence of the ability of malignant tumors to synthesize and release various proteins into the environment, including their own α 2 M, which protects the tumor from attacks of the immune system (Zorina V.N., Kozlov I.G., Tretyakova T.V. et al. Some acute phase reactants in various types of proliferative diseases of the uterine appendages. Clinical laboratory diagnostics. 2009; (10): 16-19).

В связи с этим становится очевидной целесообразность исследования острофазных белков крови, а именно α2М, поскольку закономерными признаками опухолевой прогрессии являются дестабилизация биологических мембран, инициированная протеолизом, нарушение межклеточного взаимодействия и контактного ингибирования малигнизированных клеток. В процессе формирования синдрома системного воспалительного ответа организм теряет способность его регулировать. Причины этого пока не выяснены. Выделяемый опухолью модифицированный α2М с искаженными свойствами не выполняет своих функций и не может препятствовать протеолитической агрессии.In this regard, the feasibility of studying acute-phase blood proteins, namely α 2 M, becomes obvious, since the natural signs of tumor progression are destabilization of biological membranes initiated by proteolysis, disruption of intercellular interaction and contact inhibition of malignant cells. In the process of forming a systemic inflammatory response syndrome, the body loses its ability to regulate it. The reasons for this have not yet been clarified. Modified α 2 M secreted by the tumor with distorted properties does not fulfill its functions and cannot interfere with proteolytic aggression.

Известен способ прогнозирования безрецидивной выживаемости путем исследования матричной металлопротеиназы (ММП-9) (см. Serum matrikx metalloproteinase-9 in head and neck squamous cell carcinoma is a prognostic marker. Ruokolainen Henni,

Figure 00000001
Paavo, Turpreenniemi-Hujanen Taina. Int. J. Cancer. 2005; 116 (3): 422-427). Авторы определяли ММП-9 в сыворотке крови больных плоскоклеточным раком головы и шеи. Высокий уровень сывороточной ММП-9 связывали с низкой безрецидивной выживаемостью (до 40% больных) и, наоборот, низкий уровень сывороточной ММП-9 связывали с хорошей выживаемостью (до 69% больных). Считают, что уровень сывороточной ММП-9 перед лечением может служить прогностическим фактором. Однако этот способ не использовался при злокачественных опухолях головки поджелудочной железы и не является для них специфичным.A known method for predicting relapse-free survival by examining matrix metalloproteinase (MMP-9) (see Serum matrikx metalloproteinase-9 in head and neck squamous cell carcinoma is a prognostic marker. Ruokolainen Henni,
Figure 00000001
Paavo, Turpreenniemi-Hujanen Taina. Int. J. Cancer. 2005; 116 (3): 422-427). The authors determined MMP-9 in the blood serum of patients with squamous cell carcinoma of the head and neck. A high level of serum MMP-9 was associated with low disease-free survival (up to 40% of patients) and, conversely, a low level of serum MMP-9 was associated with good survival (up to 69% of patients). It is believed that the level of serum MMP-9 before treatment can serve as a prognostic factor. However, this method was not used for malignant tumors of the pancreatic head and is not specific to them.

Известен способ определения белка S-100B в сыворотке крови больных меланомой (см. Significace of serum S-100B in melanoma patients before and after sentinel node bipsy. Smit Leonie H.M., Nieweg Omgo E., Korse Catharina M., Bonfrer Joahnnes M.G., Kroon Bin B.R. Surg. Oncol. 2005; 90 (2): 66-70). Однако такой анализ не проводился при злокачественных новообразованиях головки поджелудочной железы, что не дает возможности прогнозировать генерализацию процесса при этой патологии. По мнению самих авторов, использование теста для раннего выявления рецидива меланомы дает сомнительные результаты. Метод пригоден только для выявления уже развившегося рецидива меланомы.A known method for determining the protein S-100B in the blood serum of patients with melanoma (see Significace of serum S-100B in melanoma patients before and after sentinel node bipsy. Smit Leonie HM, Nieweg Omgo E., Korse Catharina M., Bonfrer Joahnnes MG, Kroon Bin BR Surg. Oncol. 2005; 90 (2): 66-70). However, such an analysis was not carried out in case of malignant neoplasms of the pancreatic head, which makes it impossible to predict the generalization of the process in this pathology. According to the authors themselves, the use of the test for the early detection of relapse of melanoma gives dubious results. The method is only suitable for detecting an already developed relapse of melanoma.

Известен способ определения в сыворотке крови тимидинкиназы у больных с глиальными опухолями ЦНС (Neuron specific enolase [NSE] and thymidine kinase [TK] as markhers in biological fluids of brain tineos patients. Boiardi A., Munari L., Silvani A., Solero C.L., Bombardieri E. Ital. Y / Neurol. Sci. 1990; 11 (4): 359-366). Сущность метода заключается в том, что определяют сывороточную тимидинкиназу и используют в качестве маркера рецидива заболевания после хирургического лечения больных с глиальными опухолями. Метод основан на флуориметрическом определении тимина в биологическом материале путем окисления 12,5% бромной водой и последующей нейтрализации щелочным раствором о-аминобензальдегида. Однако этот метод не применялся для прогнозирования генерализации злокачественного процесса при опухолях поджелудочной железы и, по мнению самих авторов, специфичность метода для злокачественных опухолей составляет 36%, что, с нашей точки зрения, недостаточно для использования данного показателя в качестве маркера генерализации процесса. Кроме того, в ходе определения образуется несколько промежуточных продуктов обмена (глюкоза, ацетомолочная кислота и ряд других), которые имеют близкую флуоресценцию и мешают определению, что снижает точность анализа.A known method for the determination of serum thymidine kinase in patients with glial CNS tumors (Neuron specific enolase [NSE] and thymidine kinase [TK] as markhers in biological fluids of brain tineos patients. Boiardi A., Munari L., Silvani A., Solero CL , Bombardieri E. Ital. Y / Neurol. Sci. 1990; 11 (4): 359-366). The essence of the method is that serum thymidine kinase is determined and used as a marker of disease recurrence after surgical treatment of patients with glial tumors. The method is based on the fluorimetric determination of thymine in biological material by oxidation with 12.5% bromine water and subsequent neutralization with an alkaline solution of o-aminobenzaldehyde. However, this method was not used to predict the generalization of the malignant process in pancreatic tumors and, according to the authors themselves, the specificity of the method for malignant tumors is 36%, which, in our opinion, is insufficient to use this indicator as a marker for generalizing the process. In addition, during the determination, several intermediate metabolic products are formed (glucose, acetolactic acid, and a number of others), which have close fluorescence and interfere with the determination, which reduces the accuracy of the analysis.

Известен способ определения (см. Патент RU №2433410. Бюллетень №31 от 10.11.2011), разработанный в РНИОИ и который мы выбрали в качестве прототипа. Сущность метода заключается в том, что в ликворе больных в 1-2 сутки после удаления злокачественной опухоли головного мозга определяют активность сериновой протеиназы - плазмина и на основании полученных результатов прогнозируют развитие продолженного роста опухоли в течение 4-5 месяцев после операции. Метод хорошо зарекомендовал себя и используется в отделении опухолей центральной нервной системы РНИОИ по настоящее время. Однако данный метод неприменим для прогноза направленности патологического процесса при раке поджелудочной железы, поскольку при развитии в головке поджелудочной железы злокачественной опухоли вызывает, как правило, механическую желтуху, что влияет на белковосинтетическую функцию печени - основного органа синтеза плазминогена и его активаторов. Наличие злокачественной опухоли в ткани поджелудочной железы существенно влияет на содержание этих белков в плазме крови, поэтому данные показатели не могут быть использованы в качестве прогностических.There is a known method of determination (see Patent RU No. 2433410. Bulletin No. 31 of November 10, 2011) developed at RNII and which we have chosen as a prototype. The essence of the method lies in the fact that in the cerebrospinal fluid of patients, the activity of serine proteinase, plasmin, is determined 1-2 days after the removal of a malignant brain tumor, and on the basis of the results obtained, the development of continued tumor growth is predicted for 4-5 months after surgery. The method has proven itself and is used in the Department of tumors of the central nervous system of the RNII to date. However, this method is not applicable for predicting the direction of the pathological process in pancreatic cancer, since when a malignant tumor develops in the pancreatic head, it usually causes mechanical jaundice, which affects the protein-synthetic function of the liver, the main organ of plasminogen synthesis and its activators. The presence of a malignant tumor in the pancreatic tissue significantly affects the content of these proteins in blood plasma, therefore, these indicators cannot be used as prognostic ones.

Перечисленные методы не применялись при обследовании больных с опухолями головки поджелудочной железы и не могут быть использованы для прогнозирования отдаленных последствий, в частности генерализации злокачественного процесса в ближайшие месяцы после оперативного лечения.The above methods were not used in the examination of patients with tumors of the pancreatic head and cannot be used to predict long-term consequences, in particular, generalization of the malignant process in the coming months after surgical treatment.

Техническим результатом изобретения являются прогноз направленности патологического процесса при раке головки поджелудочной железы, раннее выявление сроков генерализации злокачественного процесса.The technical result of the invention is the prediction of the direction of the pathological process in pancreatic head cancer, early detection of the timing of the generalization of the malignant process.

Поставленная цель достигается тем, что в цитратной плазме крови больного на 15-е сутки после панкреатодуоденальной резекции определяют активность универсального ингибитора α2-макроглобулина, при значении этого показателя от 10,57 ИЕ/мл до 12,37 ИЕ/мл прогнозируют развитие генерализации злокачественного процесса в течение 2,5-6 месяцев после операции, а при его значении от 5,18 ИЕ/мл до 5,98 ИЕ/мл прогнозируют течение послеоперационного периода без генерализации процесса в течение 12 месяцев.This goal is achieved by the fact that in the patient’s citrated blood plasma on the 15th day after pancreatoduodenal resection, the activity of a universal α 2 -macroglobulin inhibitor is determined, with a value from 10.57 IE / ml to 12.37 IE / ml, the development of malignant generalization is predicted process within 2.5-6 months after surgery, and with its value from 5.18 IE / ml to 5.98 IE / ml, the postoperative period is predicted without generalizing the process for 12 months.

Изобретение «Способ прогнозирования направленности патологического процесса у больных злокачественными опухолями головки поджелудочной железы» является новым, так как оно неизвестно из уровня достижений медицины в области прогнозирования развития генерализации злокачественного процесса.The invention "A method for predicting the direction of the pathological process in patients with malignant tumors of the pancreatic head" is new, since it is unknown from the level of medical advances in predicting the development of generalization of the malignant process.

Новизна изобретения заключается в том, что в плазме крови больного, полученной на 15-17 сутки после панкреатодуоденальной резекции, определяют активность α2-макроглобулина и при ее повышении свыше 10 ИЕ/мл (ингибиторных единиц на 1 мл плазмы крови) прогнозируют генерализацию злокачественного процесса в течение 2,5-6 месяцев после оперативного вмешательства. Активность α2-макроглобулина ниже 6 ИЕ/мл позволяет прогнозировать течение послеоперационного периода без развития генерализации злокачественного процесса в течение 12 месяцев. Такой способ прогнозирования является новым и дает возможность своевременно принять адекватные меры для разработки патогенетической терапии с целью предотвращения развития генерализации злокачественного процесса.The novelty of the invention lies in the fact that in the patient’s blood plasma obtained on days 15-17 after pancreatoduodenal resection, the activity of α 2 -macroglobulin is determined and, when it is increased above 10 IE / ml (inhibitor units per 1 ml of blood plasma), the generalization of the malignant process is predicted within 2.5-6 months after surgery. The activity of α 2 -macroglobulin below 6 IE / ml allows predicting the course of the postoperative period without the development of generalization of the malignant process within 12 months. This method of forecasting is new and makes it possible to take adequate measures in a timely manner to develop pathogenetic therapy in order to prevent the development of generalization of the malignant process.

В открытых источниках информации России, стран СНГ, ближнего и дальнего зарубежья указаний на аналогичный способ прогнозирования развития генерализации злокачественного процесса после панкреатодуоденальной резекции нами не обнаружено.In open sources of information from Russia, the CIS countries, near and far abroad, we did not find indications of a similar method for predicting the development of generalization of the malignant process after pancreatoduodenal resection.

Изобретение является промышленно применимым, так как может быть воспроизведено и многократно повторено в любой клинической лаборатории лечебных учреждений системы здравоохранения.The invention is industrially applicable, as it can be reproduced and repeated many times in any clinical laboratory of medical institutions of the healthcare system.

Способ осуществляется следующим образом.The method is as follows.

На 15-17 сутки после панкреатодуоденальной резекции и лечения (перед выпиской) у больного производится взятие крови в стандартную пластиковую пробирку, содержащую цитрат натрия, в соотношении 9:1. Цитратную кровь центрифугируют 15 мин при 3000 об/мин, отбирают плазму и 50 микролитров используют для определения α2-макроглобулина по его трипсинсвязывающей способности (см. Пасхина Т.С. Современные методы в биохимии. М.: Наука. 1987 г.).On the 15-17th day after pancreatoduodenal resection and treatment (before discharge), the patient is taken in a standard plastic tube containing sodium citrate in a ratio of 9: 1. Citrate blood is centrifuged for 15 min at 3000 rpm, plasma is taken and 50 microliters are used to determine α 2 -macroglobulin by its trypsin-binding ability (see Paschina TS Modern methods in biochemistry. M .: Science. 1987).

Определение основано на способности α2-макроглобулина блокировать протеолитическую активность протеиназ, в данном случае - трипсина, сохраняя способность ферментов к расщеплению низкомолекулярных синтетических субстратов. Реагирование с молекулой фермента осуществляется путем конформационных изменений в молекуле ингибитора, при этом его молекула образует карман, в котором располагается активный центр, туда же попадает центр фермента, обладающий протеолитической активностью. Реакция образования ковалентной связи между ферментом и ингибитором осуществляется уже в кармане ингибитора. Центр эстеразной активности фермента остается снаружи. После окончания реакции фермент теряет протеолитическую и сохраняет эстеразную активность, при этом он становится недоступным для действия других ферментов и ингибиторов. Последнее его свойство используется при определении количества α2М в исследуемом образце. В качестве связываемого фермента применяется трипсин.The determination is based on the ability of α 2 macroglobulin to block the proteolytic activity of proteinases, in this case trypsin, while maintaining the ability of enzymes to cleave low molecular weight synthetic substrates. The reaction with the enzyme molecule is carried out by conformational changes in the inhibitor molecule, while its molecule forms a pocket in which the active center is located, the center of the enzyme with proteolytic activity also gets there. The reaction of the formation of a covalent bond between the enzyme and the inhibitor is carried out already in the pocket of the inhibitor. The center of esterase activity of the enzyme remains outside. After the reaction, the enzyme loses its proteolytic and retains esterase activity, while it becomes inaccessible to the action of other enzymes and inhibitors. Its last property is used in determining the amount of α 2 M in the test sample. Trypsin is used as a binding enzyme.

Ход определения.The course of determination.

В кювету спектрофотометра, содержащую 1,75 мл 0,05 М трис-HCl буфера, рН 8,0, вносят 100 мкл разведенной в 10 раз плазмы крови и 50 мкл 0,1% раствора трипсина в 0,001 н. HCl, содержащей 10 ммоль CaCl2.In a cuvette of a spectrophotometer containing 1.75 ml of 0.05 M Tris-HCl buffer, pH 8.0, 100 μl of 10-fold diluted blood plasma and 50 μl of a 0.1% trypsin solution in 0.001 N are added. HCl containing 10 mmol CaCl 2 .

После инкубации при 25°C добавляют 0,03% раствор соевого ингибитора трипсина в 0,05 М трис-HCl буфере рН 8,0 и после следующей 5-минутной инкубации при 25°C в реакционную среду вносят 1 мл раствора низкомолекулярного синтетического субстрата - этилового эфира N-α-бензоил-L-аргинина.After incubation at 25 ° C, add a 0.03% solution of soybean trypsin inhibitor in 0.05 M Tris-HCl buffer pH 8.0 and after the next 5-minute incubation at 25 ° C add 1 ml of a solution of a low molecular weight synthetic substrate to the reaction medium - N-α-benzoyl-L-arginine ethyl ester.

После этого регистрируют на спектрофотометре реакцию гидролиза низкомолекулярного синтетического субстрата (этилового эфира N-α-бензоил-L-аргинина) со связанным с α2М трипсином при длине волны 253 нанометра в течение 10 минут против контрольной пробы, содержащей только реактивы (2 мл 0,05 М трис-HCl буфера, рН 8,0+1 мл раствора низкомолекулярного синтетического субстрата этилового эфира N-α-бензоил-L-аргинина).After this, the hydrolysis reaction of a low molecular weight synthetic substrate (N-α-benzoyl-L-arginine ethyl ester) with α 2 M trypsin at a wavelength of 253 nanometers is recorded for 10 minutes against a control sample containing only reagents (2 ml 0 , 05 M Tris-HCl buffer, pH 8.0 + 1 ml of a solution of a low molecular weight synthetic substrate of ethyl ester of N-α-benzoyl-L-arginine).

Результаты сравниваются с данными исследования донорской плазмы крови, полученной со станции переливания крови. На выполнение метода вместе с расчетом требуется 30-40 минут.The results are compared with the data of a study of donor blood plasma obtained from a blood transfusion station. It takes 30-40 minutes to complete the method along with the calculation.

В качестве примера приводим выписки из историй болезни.As an example, we provide extracts from medical records.

Пример №1. Больная У. Дата рождения 29.05.1946. Поступила в торакоабдоминальное отделение 13.01.2014 г. Жалобы при поступлении на общую слабость, снижение массы тела на 15 кг, наличие холангиостомы.Example No. 1. Patient U. Date of birth 05.29.1946. I entered the thoracoabdominal department 01/13/2014. Complaints of admission to general weakness, weight loss by 15 kg, the presence of cholangiostomy.

02.10.2013 проведена чрескожная чреспеченочночная холангиостомия, аппаратный плазмаферез, 05.12.2013 - курс XT: Гемзар 1000 мг в 1 и 8 дни.10/02/2013 percutaneous transhepatic cholangiostomy, hardware plasmapheresis performed, 12/05/2013 - XT course: Gemzar 1000 mg on days 1 and 8.

Объективный (локальный) статус - лимфоузлы, доступные пальпации, не увеличены, симптом Щёткина отрицательный, живот мягкий, безболезненный. Предварительный диагноз при поступлении: Рак головки поджелудочной железы, кл. гр. 2Objective (local) status - lymph nodes, accessible palpations, are not enlarged, Shchetkin's symptom is negative, the abdomen is soft, painless. Preliminary diagnosis on admission: Pancreatic head cancer, cl. column 2

УЗИ: брюшная полость, 09.01.2014, заключение: Образование на головке поджелудочной железы, состояние после ЧЧХС и холецистэктомии. Дилатация Вирсунгова протока. Печень без очаговых изменений. Нефроптоз 2 степени справа.Ultrasound: abdominal cavity, 01/09/2014, conclusion: The formation on the head of the pancreas, the state after ChCHS and cholecystectomy. Dilation of the Wirsung duct. Liver without focal changes. Nephroptosis 2 degrees on the right.

КТ: брюшная полость, 25.09.2013, заключение: КТ картина соответствует гиповаскулярному образованию головки поджелудочной железы. Дилатация желчных протоков.CT: abdominal cavity, 09/25/2013, conclusion: CT picture corresponds to the hypovascular formation of the pancreatic head. Dilation of the bile ducts.

Верификация процесса (гистологический анализ): №1921-923/14 G2: протоковая аденокарцинома с нейроэндокринноклеточным компонентом, с инвазией стенки кишки. Проведенное лечение: операция 14.01.2014 - панкреатодуоденальная резекция.Verification of the process (histological analysis): No. 1921-923 / 14 G2: ductal adenocarcinoma with a neuroendocrine cell component, with invasion of the intestinal wall. Treatment performed: surgery 01/14/2014 - pancreatoduodenal resection.

Заключительный диагноз: злокачественное заболевание головки поджелудочной железы, St II, T3N0M0, кл. гр. 3.Final diagnosis: malignant disease of the head of the pancreas, St II, T 3 N 0 M 0 , cl. column 3.

29.01.2015 активность α2-макроглобулина плазмы составила 12,04 ИЕ/мл.01/29/2015 the activity of α 2 plasma macroglobulin was 12.04 IE / ml.

07.02.2014 г. больная выписана из стационара. Больная выписалась в удовлетворительном состоянии. На контрольный осмотр через 1 месяц не явилась. Смерть наступила от генерализации процесса через 5 месяцев после выписки.02/07/2014, the patient was discharged from the hospital. The patient was discharged in satisfactory condition. At the follow-up examination after 1 month did not appear. Death occurred from the generalization of the process 5 months after discharge.

Пример №2. Больной К. Дата рождения 27.03.1957. 08.04.2014 г. поступил в торакоабдоминальное отделение. Жалобы при поступлении: на наличие холангиостомы в правом подреберье, доставляющей неудобства, снижение массы тела.Example No. 2. Patient K. Date of birth 03/27/1957. 04/08/2014, he entered the thoracoabdominal ward. Complaints at admission: on the presence of cholangiostomy in the right hypochondrium, which causes inconvenience, weight loss.

Объективный (локальный) статус - лимфоузлы, доступные пальпации, не увеличены, симптом Щёткина отрицательный, живот при пальпации мягкий, безболезненный.Objective (local) status - lymph nodes, accessible palpations, not increased, Shchetkin's symptom is negative, abdomen is soft, painless on palpation.

MPT от 07.03.2014: опухоль головки поджелудочной железы с инвазией в окружающую клетчатку.MPT 03/07/2014: Pancreatic head tumor with invasion of the surrounding tissue.

Верификация процесса (гистологический анализ): умеренно дифференцированная протоковая аденокарцинома с инфильтративным ростом, фиброзом стромы, выраженным некрозом.Verification of the process (histological analysis): moderately differentiated ductal adenocarcinoma with infiltrative growth, stromal fibrosis, severe necrosis.

УЗИ от 07.03.2014: образование в проекции головки поджелудочной железы.Ultrasound from 03/07/2014: formation in the projection of the head of the pancreas.

ФДС от 07.03.2014 - выраженный эрозивный гастрит, кандидоз пищевода.FDS from 03/07/2014 - pronounced erosive gastritis, candidiasis of the esophagus.

09.04.2014 выполнена операция - панкреатодуоденальная резекция и наложение обходных анастомозов.04.09.2014 an operation was performed - pancreatoduodenal resection and the imposition of bypass anastomoses.

Заключительный диагноз. Рак поджелудочной железы T4N1M0, st III, кл. гр. 2 (с-25).The final diagnosis. Pancreatic cancer T 4 N 1 M 0 , st III, cl. column 2 (s-25).

24.04.2015 г. активность α2-макроглобулин плазмы крови составила 5,32 ИЕ/мл.04.24.2015, the activity of α 2 -macroglobulin in blood plasma was 5.32 IE / ml.

В послеоперационном периоде выписался без осложнений, в удовлетворительном состоянии.In the postoperative period, was discharged without complications, in satisfactory condition.

Контрольные осмотры: 2.06.14; 22.07.14; 2.09.14; 28.10.14; 26.01.15; 30.03.15.Control examinations: 2.06.14; 07/22/14; 2.09.14; 10/28/14; 01/26/15; 03/30/15.

В течение 12 месяцев ухудшения состояния не зафиксировано.Within 12 months, no deterioration was recorded.

Авторами были обследованы 62 больных раком головки поджелудочной железы, находившихся на лечении в отделении абдоминальной онкологии №2 РНИОИ и подвергавшихся поэтапному лечению по поводу рака головки поджелудочной железы.The authors examined 62 patients with pancreatic head cancer who were undergoing treatment at the Abdominal Oncology Unit No. 2 of the RNII and underwent phased treatment for pancreatic head cancer.

На 15 сутки после панкреатодуоденальной резекции у больных взята кровь из локтевой вены с соблюдением общепринятых правил, в плазме крови определена активность универсального ингибитора α2М. Результаты исследования плазмы крови у 7 больных раком головки поджелудочной железы на 15 сутки после ПДР показали активность α2М в пределах от 10,13 ИЕ/мл до 13,63 ИЕ/мл, а у больных без осложнений - от 4,095 ИЕ/мл до 5,951 ИЕ/мл, что не имело достоверных отличий от нормы. Установлено, что у 19 больных (30,7%) наблюдались различные осложнения, из них у 7 человек (11,3% от общего количества больных) в послегоспитальный период наблюдалась генерализация злокачественного процесса в сроки от 2,5 до 6 месяцев после панкреатодуоденальной резекции (ПДР).On the 15th day after pancreatoduodenal resection, blood was taken from the ulnar vein in accordance with generally accepted rules, the activity of a universal inhibitor α 2 M was determined in blood plasma. The results of a study of plasma in 7 patients with pancreatic head cancer on day 15 after PDR showed α 2 M activity in the range from 10.13 IE / ml to 13.63 IE / ml, and in patients without complications - from 4.095 IE / ml to 5.951 IE / ml, which did not have significant differences from the norm. It was established that 19 patients (30.7%) had various complications, of which 7 people (11.3% of the total number of patients) in the post-hospital period showed a generalization of the malignant process in the period from 2.5 to 6 months after pancreatoduodenal resection (DA).

Figure 00000002
Figure 00000002

Технико-экономическая эффективность способа заключается в его высокой специфичности, возможности объективной оценки индивидуальной реакции на развитие рака головки поджелудочной железы, удаление опухоли, быстрого проведения анализа в день взятия крови, что позволит своевременно изменить схемы лечения.The technical and economic effectiveness of the method lies in its high specificity, the possibility of an objective assessment of an individual reaction to the development of cancer of the head of the pancreas, tumor removal, quick analysis on the day of blood collection, which will allow timely change of treatment regimen.

Специфичность способа для прогнозирования течения послегоспитального периода без развития генерализации злокачественного процесса - 88,7%, для прогнозирования дальнейшего развития злокачественного заболевания в организме после панкреатодуоденальной резекции в послегоспитальный период - 93,6%.The specificity of the method for predicting the course of the post-hospital period without the development of generalization of the malignant process is 88.7%, for predicting the further development of a malignant disease in the body after pancreatoduodenal resection in the post-hospital period, 93.6%.

Claims (1)

Способ прогнозирования направленности патологического процесса при раке головки поджелудочной железы, включающий панкреатодуоденальную резекцию, отличающийся тем, что в цитратной плазме крови больного на 15-е сутки после панкреатодуоденальной резекции определяют активность универсального ингибитора α2-макроглобулина, при значении этого показателя от 10,57 ИЕ/мл до 12,37 ИЕ/мл прогнозируют развитие генерализации злокачественного процесса в течение 2,5-6 месяцев после операции, а при его значении от 5,18 ИЕ/мл до 5,98 ИЕ/мл прогнозируют течение послеоперационного периода без генерализации процесса в течение 12 месяцев.A method for predicting the direction of the pathological process in pancreatic head cancer, including pancreatoduodenal resection, characterized in that in the citrated blood plasma of a patient on the 15th day after pancreatoduodenal resection, the activity of a universal α 2 -macroglobulin inhibitor is determined, with a value of this indicator from 10.57 IE / ml to 12.37 IE / ml predict the development of generalization of the malignant process within 2.5-6 months after surgery, and with its value from 5.18 IE / ml to 5.98 IE / ml predict postoperative period without generalization of the process for 12 months.
RU2015144218A 2015-10-14 2015-10-14 Method for prediction of pathological process direction in case of pancreas head cancer RU2612082C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015144218A RU2612082C1 (en) 2015-10-14 2015-10-14 Method for prediction of pathological process direction in case of pancreas head cancer

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015144218A RU2612082C1 (en) 2015-10-14 2015-10-14 Method for prediction of pathological process direction in case of pancreas head cancer

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2612082C1 true RU2612082C1 (en) 2017-03-02

Family

ID=58459648

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2015144218A RU2612082C1 (en) 2015-10-14 2015-10-14 Method for prediction of pathological process direction in case of pancreas head cancer

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2612082C1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2779088C1 (en) * 2021-12-13 2022-08-31 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Алтайский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации Method for predicting three-month survival in patients with stage iv pancreatic cancer using photodynamic therapy

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2212188C2 (en) * 2001-03-20 2003-09-20 Ростовский научно-исследовательский онкологический институт Method for predicting complications in the cases of pacreatoduodenal resection
US20140179558A1 (en) * 2011-08-04 2014-06-26 Toray Industries, Inc. Method for detecting pancreatic cancer
RU2568766C2 (en) * 2014-02-20 2015-11-20 Оксана Владимировна Паклина Method for analysing pancreatic cancer, method for analysing excised complex of organs and using it

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2212188C2 (en) * 2001-03-20 2003-09-20 Ростовский научно-исследовательский онкологический институт Method for predicting complications in the cases of pacreatoduodenal resection
US20140179558A1 (en) * 2011-08-04 2014-06-26 Toray Industries, Inc. Method for detecting pancreatic cancer
RU2568766C2 (en) * 2014-02-20 2015-11-20 Оксана Владимировна Паклина Method for analysing pancreatic cancer, method for analysing excised complex of organs and using it

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ЛОГВИНЕНКО А.А. И ДР. Состояние системы фибринолиза в сыворотке крови крыс с перивитой опухолью С-45 // Сибирский онкологический журнал, 2010, Приложение 1, стр.70. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2779088C1 (en) * 2021-12-13 2022-08-31 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Алтайский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации Method for predicting three-month survival in patients with stage iv pancreatic cancer using photodynamic therapy

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Zamanova et al. Carbonic anhydrases as disease markers
Kudo et al. Matrix metalloproteinase-13 (MMP-13) directly and indirectly promotes tumor angiogenesis
Gohji et al. Elevation of serum levels of matrix metalloproteinase‐2 and‐3 as new predictors of recurrence in patients with urothelial carcinoma
Kato et al. High expression of PRL-3 promotes cancer cell motility and liver metastasis in human colorectal cancer: a predictive molecular marker of metachronous liver and lung metastases
Bai et al. Overexpression of Cullin1 is associated with poor prognosis of patients with gastric cancer
Chen et al. Cathepsins in digestive cancers
Zhou et al. Up-regulation of SERPINA3 correlates with high mortality of melanoma patients and increased migration and invasion of cancer cells
Betsunoh et al. Clinical relevance of hepsin and hepatocyte growth factor activator inhibitor type 2 expression in renal cell carcinoma
Zhang et al. Hsp60 exerts a tumor suppressor function by inducing cell differentiation and inhibiting invasion in hepatocellular carcinoma
Bian et al. Overexpressed ACP5 has prognostic value in colorectal cancer and promotes cell proliferation and tumorigenesis via FAK/PI3K/AKT signaling pathway
Weng et al. OTUB1 promotes tumor invasion and predicts a poor prognosis in gastric adenocarcinoma
Altadill et al. Liver expression of matrix metalloproteases and their inhibitors in hepatocellular carcinoma
Cho et al. Matrix metalloproteinase-9 activity is associated with poor prognosis in T3-T4 node-negative colorectal cancer
Pontious et al. Cathepsin E expression and activity: Role in the detection and treatment of pancreatic cancer
Leiser et al. Prognostic value of heparanase expression and cellular localization in oral cancer
Larrinaga et al. Prolyl endopeptidase activity is correlated with colorectal cancer prognosis
Liu et al. Solute carrier family 34 member 2 overexpression contributes to tumor growth and poor patient survival in colorectal cancer
Tang et al. First evidence that sika deer (Cervus nippon) velvet antler extract suppresses migration of human prostate cancer cells
Zeng et al. Increased expression of formin-like 3 contributes to metastasis and poor prognosis in colorectal carcinoma
Yan et al. Asparaginyl endopeptidase enhances pancreatic ductal adenocarcinoma cell invasion in an exosome-dependent manner and correlates with poor prognosis
CN110187112B (en) Cardia adenocarcinoma auxiliary diagnosis kit related to group of genes
Waszkiewicz et al. Lysosomal exoglycosidases and cathepsin D in colon adenocarcinoma
Tsai et al. S100A2, a potential marker for early recurrence in early-stage oral cancer
Szymańska et al. The diagnostic value of nuclear matrix proteins in bladder cancer in the aspect of environmental risk from carcinogens
RU2466399C1 (en) Method for prediction of developing acute postoperative pancreatitis in oncological patients

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20171015