RU2560708C1 - Method for differentiation stage-related hepatocarcinoma cells exposure to lithium nanopreparations - Google Patents
Method for differentiation stage-related hepatocarcinoma cells exposure to lithium nanopreparations Download PDFInfo
- Publication number
- RU2560708C1 RU2560708C1 RU2014111190/15A RU2014111190A RU2560708C1 RU 2560708 C1 RU2560708 C1 RU 2560708C1 RU 2014111190/15 A RU2014111190/15 A RU 2014111190/15A RU 2014111190 A RU2014111190 A RU 2014111190A RU 2560708 C1 RU2560708 C1 RU 2560708C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- lithium
- differentiation
- cells
- stage
- hepatocarcinoma
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области разработки таргетных препаратов для терапии онкологических заболеваний. Разрабатываемые в последнее время противоопухолевые препараты в онкологии направлены на различные звенья опухолевого роста - некроз, апоптоз раковой клетки, блокирование пролиферации, воздействие на микроокружение, блокирование ангио-лимфангиогенеза и др. [3]. Однако, несмотря на достигнутые успехи в лечении онкологических заболеваний, уровень смертности от них в мире возрастает. Одной из причин сложности терапии является высокая степень гетерогенности популяции опухолевых клеток [1]. Для опухолевой ткани в последнее время стали применять термин - раковые стволовые клетки, полагая, что эти клетки способны к длительному выживанию при различных терапевтических воздействиях и что именно они должны быть мишенями лекарственных препаратов [22]. В то же время, согласно стохастической гипотезе развития рака, большую роль в прогрессии опухоли играют микроокружение и опухолевые клетки, не обладающие свойствами стволовых, но модулирующих кинетику стволовых опухолевых клеток и динамику развития опухоли [18]. В связи с этим, важным является не только выявление стволовых раковых клеток, но и фенотипирование всех опухолевых клеток популяции, для выявления морфологических маркеров, позволяющих судить об эффектах терапевтических воздействий. Одной из наиболее агрессивных опухолей человека является гепатокарцинома, которая остается пятой по распространенности и третьей по уровню смертности опухолью в мире, обусловленной наличием резистентности к проводимой полихимиотерапии [28, 29]. Подобно другим солидным опухолям гепатокарцинома характеризуется гетерогенностью популяции опухолевых клеток [11]. Известно, что раковые клетки в пределах одной опухоли характеризуются общими генетическими нарушениями, отражающими их происхождение из общего предшественника [6]. В свою очередь, генетические изменения обусловливают фенотипическую и функциональную гетерогенность опухоли, что затрудняет ее лечение [24].The invention relates to the field of development of targeted drugs for the treatment of cancer. Recently developed antitumor drugs in oncology are aimed at various links of tumor growth - necrosis, cancer cell apoptosis, blocking proliferation, affecting the microenvironment, blocking angio-lymphangiogenesis, etc. [3]. However, despite the successes achieved in the treatment of cancer, the mortality rate from them in the world is increasing. One of the reasons for the complexity of therapy is the high degree of heterogeneity of the tumor cell population [1]. Recently, the term cancer stem cells has been used for tumor tissue, believing that these cells are capable of long-term survival under various therapeutic influences and that they should be targeted by drugs [22]. At the same time, according to the stochastic hypothesis of cancer development, a large role in tumor progression is played by the microenvironment and tumor cells that do not have stem properties, but modulate the kinetics of stem tumor cells and the dynamics of tumor development [18]. In this regard, it is important not only to identify stem cancer cells, but also to phenotype all tumor cells in a population in order to identify morphological markers that make it possible to judge the effects of therapeutic effects. One of the most aggressive human tumors is hepatocarcinoma, which remains the fifth most widespread and third largest tumor in the world due to the presence of resistance to chemotherapy [28, 29]. Like other solid tumors, hepatocarcinoma is characterized by heterogeneity of the tumor cell population [11]. It is known that cancer cells within a tumor are characterized by common genetic disorders that reflect their origin from a common predecessor [6]. In turn, genetic changes determine the phenotypic and functional heterogeneity of the tumor, which complicates its treatment [24].
Стандартными методами лечения гепатоцеллюлярного рака являются хирургическая резекция, этаноловая или радиочастотная аблация [35]. Радиочастотная аблация и этаноловая аблация признаны эффективными для лечения небольших инкапсулированных гепатокарцином менее 3 см в диаметре. Однако большинство пациентов на момент выявления имеют опухоль больших размеров. Резекция опухолей, расположенных рядом с магистральными сосудами и желчными протоками, не проводится. Эти опухоли, не зависимо от размера, трудно поддаются лечению с помощью радиочастотной или химической аблации, а в случаях крупных опухолей добиться полной аблации с помощью этих методов практически не возможно. На более поздней стадии заболевания может быть применена эмболизация (Transcatheter arterial chemoembolization, ТАСЕ), которая проводится посредством введения химиотерапевтического препарата в печеночную артерию [30]. При этом используются препараты, блокирующие рост кровеносных сосудов (Сорафениб, Авастин) [19], или воздействующие на клеточный цикл и стимулирующие апоптоз раковых клеток (доксорубицин, цисплатин, 5-фторурацил) [17]. Недостатком используемых препаратов является развитие побочных эффектов. Негативные последствия используемых препаратов для блокирования клеточного цикла опухолевой клетки, в частности доксорубицина, обусловливаются цитотоксическим действием препарата и его метаболитов на клеточные популяции печени (прежде всего на гепатоциты), выраженными гемодинамическими нарушениями в большом круге кровообращенения [4], а также значительным токсическим воздействием на другие системы организма, в частности, сердечнососудистую [5].The standard methods for treating hepatocellular cancer are surgical resection, ethanol or radiofrequency ablation [35]. Radiofrequency ablation and ethanol ablation have been found to be effective in treating small encapsulated hepatocarcinomas less than 3 cm in diameter. However, most patients at the time of detection have a large tumor. Resection of tumors located next to the main vessels and bile ducts is not performed. These tumors, regardless of size, are difficult to treat using radiofrequency or chemical ablation, and in cases of large tumors, complete ablation using these methods is practically impossible. At a later stage of the disease, embolization (Transcatheter arterial chemoembolization, TACE) can be applied, which is carried out by introducing a chemotherapeutic drug into the hepatic artery [30]. In this case, drugs blocking the growth of blood vessels (Sorafenib, Avastin) [19], or affecting the cell cycle and stimulating apoptosis of cancer cells (doxorubicin, cisplatin, 5-fluorouracil) are used [17]. The disadvantage of the drugs used is the development of side effects. The negative effects of the drugs used to block the cell cycle of the tumor cell, in particular doxorubicin, are due to the cytotoxic effect of the drug and its metabolites on the liver cell populations (primarily hepatocytes), severe hemodynamic disturbances in the large circle of blood circulation [4], as well as a significant toxic effect on other body systems, in particular cardiovascular [5].
Известны также способы воздействия на опухолевый рост и других препаратов, включая препараты лития. Например, карбонат лития используется как усилитель традиционной терапии при карциноме щитовидной железы [7, 32]. Как препарат, способствующий восстановлению костного мозга и состава крови после химиотерапии. Показана нормализация содержания нейтрофилов в крови после радиотерапии и химиотерапии [14], восстановление содержания тромбоцитов в крови [15], повышение CD34+ клеток в крови при лейкемии [9], усиление продукции цитокинов при раке молочной железы [25]. Имеются данные об использовании карбоната лития в качестве нейропротективного агента у больных раком с целью повышения качества жизни за счет сохранения когнитивных способностей, улучшения эмоционального состояния [16, 33, 34], для предотвращения развития периферической нейропатии при агрессивных курсах химиотерапии [26].Methods of influencing tumor growth of other drugs, including lithium preparations, are also known. For example, lithium carbonate is used as an amplifier of traditional therapy for thyroid carcinoma [7, 32]. As a drug that helps restore bone marrow and blood composition after chemotherapy. Normalization of the neutrophil content in blood after radiotherapy and chemotherapy [14], restoration of blood platelet count [15], increase of CD34 + cells in blood with leukemia [9], and increased production of cytokines in breast cancer have been shown [25]. There is evidence of the use of lithium carbonate as a neuroprotective agent in cancer patients in order to improve the quality of life by preserving cognitive abilities, improving the emotional state [16, 33, 34], to prevent the development of peripheral neuropathy during aggressive chemotherapy courses [26].
Известен также способ применения солей лития для воздействии на опухоль при онкопатологии, заключающийся в блокировании пролиферации. Соли лития являются селективными ингибиторами гликоген синтазы киназы-3β или GSK-3β, которая участвует в регуляции клеточной пролиферации, дифференцировки и апоптоза. Показано, что карбонат лития может вызывать остановку пролиферации за счет ареста клеточного цикла в фазе G2/M в трансформированных опухолевых клетках [31]. Выявлено, что карбонат лития индуцирует апоптоз опухолевых клеток, ингибируя экспрессию антиапоптотического белка bc1-2 [22], подавляет подвижность и инвазивность трансформированных клеток [27].There is also known a method of using lithium salts to influence a tumor in oncopathology, which consists in blocking proliferation. Lithium salts are selective inhibitors of glycogen synthase kinase-3β or GSK-3β, which is involved in the regulation of cell proliferation, differentiation and apoptosis. It was shown that lithium carbonate can cause proliferation to halt due to arrest of the cell cycle in the G2 / M phase in transformed tumor cells [31]. It was revealed that lithium carbonate induces apoptosis of tumor cells, inhibiting the expression of the antiapoptotic protein bc1-2 [22], and inhibits the motility and invasiveness of transformed cells [27].
Известно использование в онкологии и других солей лития. Цитрат лития использовали при лечении рака груди [8]. Имеются данные об использовании хлорида лития при лечении рака желудка [10], низко дифференцированных нейроэндокринных опухолей [20]; глиом [13].Known use in oncology and other lithium salts. Lithium citrate has been used in the treatment of breast cancer [8]. There is evidence of the use of lithium chloride in the treatment of gastric cancer [10], low-grade neuroendocrine tumors [20]; gliomas [13].
Соединения лития рассматривают как потенциальные агенты таргетной терапии, способные замедлить рост опухоли.Lithium compounds are considered as potential targeted therapy agents capable of slowing tumor growth.
В тоже время с развитием нанотехнологий выявляются новые, более выраженные свойства наноразмерных структур, по сравнению с исходными формами. В настоящее время наночастицы металлов используют для усиления фотодинамической и гипертермической терапии. Площадь свободной поверхности материала в ультрадисперсном состоянии превышает площадь свободной поверхности вещества, сохраняющего высокую степень порядка, и в результате в твердом теле возникают новые физические явления и свойства, которых не было ранее и которые невозможно предсказать, исходя из строения и свойств массивного вещества.At the same time, with the development of nanotechnology, new, more pronounced properties of nanoscale structures are revealed, in comparison with the initial forms. Currently, metal nanoparticles are used to enhance photodynamic and hyperthermic therapy. The free surface area of the material in the ultrafine state exceeds the free surface area of a substance that retains a high degree of order, and as a result, new physical phenomena and properties appear in a solid that were not there before and which cannot be predicted based on the structure and properties of bulk material.
В настоящее время отсутствуют данные о влиянии солей лития на клетки гепатокарциномы, о фенотипировании стадий дифференцировки клеток гепатокарциномы и, по существу, неизвестны клетки - мишени для воздействия. Кроме того, используемые дозы препаратов лития в онкологии могут оказывать негативные эффекты, способствуя развитию почечной недостаточности [12], и даже приводить к внезапной смерти [21].Currently, there is no data on the effect of lithium salts on hepatocarcinoma cells, on phenotyping of the stages of differentiation of hepatocarcinoma cells, and, essentially, target cells for exposure are unknown. In addition, the used doses of lithium preparations in oncology can have negative effects, contributing to the development of renal failure [12], and even lead to sudden death [21].
Технический результат изобретения - прицельное воздействие на клетки-мишени гепатокарциномы определенной стадии дифференцировки.The technical result of the invention is the targeted effect on target cells of hepatocarcinoma of a certain stage of differentiation.
Стадию дифференцировки опухолевых клеток определяли методами световой, электронной микроскопии, цифровой цитометрии ДНК и проточной цитофлюориметрии. Изменение ультраструктурной организации опухолевых клеток с возрастанием объемной доли цитоплазмы позволяет характеризовать данные клетки как имеющие разные стадии дифференцировки (рис. 1). Распределение по стадиям осуществляется по величине ядерно-цитоплазматического соотношения и по содержанию внутриклеточных органелл. В клетках выделенной нами первой стадии дифференцировки ядерно-цитоплазматическое соотношение составляло 0,797±0,008, второй стадии дифференцировки - 0,681±0,005, 3-й 4-й стадии дифференцировки - соответственно 0,596±0,005 и 0,492±0,004. Клетки, отнесенные к 5-й стадии дифференцировки, имели ядерно-цитоплазматическое соотношение 0,384±0,006.The stage of differentiation of tumor cells was determined by light, electron microscopy, digital DNA cytometry and flow cytometry. A change in the ultrastructural organization of tumor cells with an increase in the volume fraction of the cytoplasm makes it possible to characterize these cells as having different stages of differentiation (Fig. 1). The stages are distributed according to the size of the nuclear-cytoplasmic ratio and according to the content of intracellular organelles. In the cells of the first stage of differentiation that we isolated, the nuclear-cytoplasmic ratio was 0.797 ± 0.008, of the second stage of differentiation, 0.681 ± 0.005, of the 3rd and 4th stages of differentiation, 0.596 ± 0.005 and 0.492 ± 0.004, respectively. Cells assigned to the 5th stage of differentiation had a nuclear-cytoplasmic ratio of 0.384 ± 0.006.
Предлагаемое изобретение позволяет элиминировать из популяции опухолевых клеток гепатокарциномы клетки определенной стадии дифференцировки путем воздействия наноразмерными формами карбоната лития и цитрата лития.The present invention allows to eliminate from a population of tumor cells of hepatocarcinoma cells of a certain stage of differentiation by exposure to nanoscale forms of lithium carbonate and lithium citrate.
Наноразмерные частицы солей лития были получены путем механоактивации образцов в мельнице-активаторе планетарного типа АГО-2С по описанной в литературе методике [2]. Размер частиц солей лития определяли под электронным микроскопом с помощью компьютерной программы Image Tool и он составлял 10 нм.Nanosized particles of lithium salts were obtained by mechanical activation of samples in a mill-activator of the planetary type AGO-2C according to the method described in the literature [2]. The particle size of lithium salts was determined under an electron microscope using the Image Tool computer program and it was 10 nm.
В опытах in vitro было показано, что наноразмерные формы цитрата лития и карбоната лития проявляют антипролиферативный эффект в отношении клеток гепатокарциномы 29 в более узком диапазоне доз и при более низких концентрациях, чем их аналоги цитрат лития и карбонат лития в исходной форме.In vitro experiments have shown that nanoscale forms of lithium citrate and lithium carbonate exhibit an antiproliferative effect on hepatocarcinoma 29 cells in a narrower dose range and at lower concentrations than their analogs of lithium citrate and lithium carbonate in its original form.
В опытах in vivo было показано, что внутрибрюшинное введение цитрата лития в наноразмерной форме (по 0,1 мл взвеси наноразмерных частиц карбоната лития, приготовленных на стерильном 0,85% водном растворе хлорида натрия в дозе 0,92 мг на животное в течение 5 дней) животным после индукции опухолевого процесса приводит к блокированию пролиферации клеток ГК-29 1-3 стадии дифференцировки и снижению количества высокодифференцированных клеток 4-5 стадии дифференцировки.In vivo experiments showed that intraperitoneal administration of lithium citrate in nanoscale form (0.1 ml suspension of nanosized particles of lithium carbonate prepared in a sterile 0.85% aqueous solution of sodium chloride at a dose of 0.92 mg per animal for 5 days ) animals after induction of the tumor process leads to the blocking of proliferation of GK-29 cells of the 1-3 stage of differentiation and a decrease in the number of highly differentiated cells of the 4-5 stage of differentiation.
Выявлено, что внутримышечное введение карбоната лития в наноразмерной форме (по 0,1 мл взвеси наноразмерных частиц карбоната лития, приготовленных на стерильном 0,85% водном растворе хлорида натрия в дозе 0,037 мг на животное в течение 5 дней) животным, после индукции опухолевого процесса, приводит к гибели более дифференцированных клеток 4 и 5-й стадии дифференцировки и снижению количества клеток 3-й стадии дифференцировки.It was found that intramuscular injection of lithium carbonate in nanoscale form (0.1 ml each suspension of nanosized particles of lithium carbonate prepared in a sterile 0.85% aqueous solution of sodium chloride at a dose of 0.037 mg per animal for 5 days) by animals after tumor induction leads to the death of more differentiated cells of the 4th and 5th stage of differentiation and a decrease in the number of cells of the 3rd stage of differentiation.
Показано, что совместное внутрибрюшинное введение наноразмерной формы цитрата лития (в дозе 0,92 мг на животное в течение 5 дней) и внутримышечное введение наноразмерной формы карбоната лития (в дозе 0,037 мг на животное в течение 5), приводит к блокированию пролиферации и гибели клеток 3-й, 4-й и 5-й стадий дифференцировки.It was shown that the combined intraperitoneal administration of a nanoscale form of lithium citrate (at a dose of 0.92 mg per animal for 5 days) and the intramuscular administration of a nanoscale form of lithium carbonate (at a dose of 0.037 mg per animal for 5) leads to blocking cell proliferation and death 3rd, 4th and 5th stages of differentiation.
Таким образом, нанопрепараты лития действуют прицельно. Цитрат лития блокирует пролиферацию клеток 1 -3 стадий дифференцировки, что приводит к снижению количества более дифференцированных клеток 4 и 5 стадий дифференцировки. Введение наноразмерного карбоната лития оказывает цитотоксический эффект на более дифференцированные клетки 4 и 5-ой стадий дифференцировки.Thus, lithium nanopreparations are aimed. Lithium citrate blocks the proliferation of cells of the 1-3 stages of differentiation, which leads to a decrease in the number of more differentiated cells of the 4th and 5th stages of differentiation. The introduction of nanosized lithium carbonate has a cytotoxic effect on the more differentiated cells of the 4th and 5th stages of differentiation.
Отличительным признаком способа воздействия является прицельное воздействие на определенные клетки-мишени гепатокарциномы наноразмерными формами цитрата лития и карбоната лития.A distinctive feature of the method of exposure is the targeted action on certain target cells of hepatocarcinoma with nanoscale forms of lithium citrate and lithium carbonate.
Предлагаемый способ воздействия позволяет блокировать пролиферацию наиболее активных опухолевых клеток гепатокарциномы 1-3 стадий дифференцировки за счет применения наноразмерной формы цитрата лития и элиминировать из популяции более дифференцированные клетки 4-5 стадии дифференцировки при использовании наноразмерной формы карбоната лития.The proposed method of exposure allows to block the proliferation of the most active hepatocarcinoma tumor cells of the 1-3 stages of differentiation by using the nanoscale form of lithium citrate and to eliminate more differentiated cells of the 4-5 stage of differentiation from the population when using the nanoscale form of lithium carbonate.
Отработку наиболее эффективной дозы применения наноразмерных форм цитрата лития и карбоната лития проводили in vitro на культуре клеток гепатокарциномы-29. Для исследования in vitro использовали карбонат лития (Li2CO3) и цитрат лития (Li3C6H5O7×4H2O) в обычной и наноразмерной форме в концентрациях 10-7, 10-6, 10-5, 10-4, 5×10-3, 25×10-3, 50×10-3 М в физиологическом растворе. В контроле в культуральную среду вносили физиологический раствор в аналогичном объеме. Антипролиферативные и цитотоксические свойства данных препаратов оценивали с помощью МТТ-теста. МТТ-метод определения жизнеспособности клеточных культур и их способности к пролиферации заключается в способности живых клеток превращать растворимый желтый бромид 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-тетразолия (МТТ) в нерастворимые пурпурно-синие внутриклеточные кристаллы МТТ-формазана. Нежизнеспособные мертвые клетки такой способностью не обладают.The most effective dose of nanoscale forms of lithium citrate and lithium carbonate was tested in vitro on a hepatocarcinoma-29 cell culture. For in vitro studies, lithium carbonate (Li 2 CO 3 ) and lithium citrate (Li 3 C 6 H 5 O 7 × 4H 2 O) were used in ordinary and nanoscale forms at concentrations of 10 -7 , 10 -6 , 10 -5 , 10 -4 , 5 × 10 -3 , 25 × 10 -3 , 50 × 10 -3 M in physiological saline. In the control, physiological saline was added to the culture medium in the same volume. Antiproliferative and cytotoxic properties of these drugs were evaluated using the MTT test. The MTT method for determining the viability of cell cultures and their ability to proliferate is the ability of living cells to convert soluble yellow 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-tetrazolium bromide (MTT) into insoluble purple-blue intracellular crystals MTT formazan. Nonviable dead cells do not possess this ability.
Клетки гепатокарциномы 29 вносили в низкой плотности (5×103 клеток/мл) в лунки 96-луночного планшета в среде RPMI-1640, содержащей 10% эмбриональной сыворотки, инактивированной в течение 1 ч при 56°C, 300 мкг/мл глутамина, 16 мкг/мл гентамицина и 15 мМ HEPES. Спустя 24 ч вносили препарат в различных концентрациях. Инкубацию с препаратом проводили 3 дня при 37°C, 5% CO2, затем добавляли МТТ в конечной концентрации 0,5 мг/мл. Клетки инкубировали 4 ч, затем среду отбирали и клетки растворяли в ДМСО. Оптическую плотность оценивали на анализаторе иммуноферментных реакций «Stat Fax 2100» США при 540 нм, используя DMSO как нулевой контроль.Hepatocarcinoma 29 cells were introduced in low density (5 × 10 3 cells / ml) into the wells of a 96-well plate in RPMI-1640 medium containing 10% fetal serum inactivated for 1 h at 56 ° C, 300 μg / ml glutamine, 16 μg / ml gentamicin and 15 mM HEPES. After 24 hours, the drug was added in various concentrations. Incubation with the drug was carried out for 3 days at 37 ° C, 5% CO 2 , then MTT was added at a final concentration of 0.5 mg / ml. Cells were incubated for 4 hours, then the medium was taken and the cells were dissolved in DMSO. The optical density was evaluated on a Stat Fax 2100 USA enzyme-linked immunosorbent analyzer at 540 nm, using DMSO as the zero control.
В опытах in vitro было показано, что препараты цитрата лития и карбоната лития в наноразмерной форме проявляют значимый противоопухолевый эффект в более низких концентрациях и в более узком диапазоне - 10-5-10-3 М, чем их аналоги цитрат лития и карбонат лития в исходной форме.In vitro experiments have shown that preparations of lithium citrate and lithium carbonate in nanoscale form exhibit a significant antitumor effect in lower concentrations and in a narrower range of 10 -5 -10 -3 M than their analogues of lithium citrate and lithium carbonate in the original form.
Полученные значения наиболее эффективных доз наноразмерных форм цитрата и карбоната лития пересчитывали для эксперимента in vivo, учитывая способ введения препарата и вес экспериментальных животных. Проводили эксперименты in vivo с введением определенных in vitro доз наноразмерных форм цитрата и карбоната лития животным, с привитой в область бедра гепатокарциномой-29 в целях выявления клеток-мишеней гепатокарциномы для данных папопрепаратов лития и стадий их клеточной дифференцировки.The obtained values of the most effective doses of nanoscale forms of citrate and lithium carbonate were recounted for the in vivo experiment, taking into account the method of administration of the drug and the weight of the experimental animals. In vivo experiments were carried out with the introduction of certain in vitro doses of nanoscale forms of citrate and lithium carbonate in animals, with hepatocarcinoma-29 grafted to the femoral region in order to detect hepatocarcinoma target cells for these lithium paproducts and their cell differentiation stages.
В результате получены следующие данные.As a result, the following data were obtained.
Эксперимент 1. Добавление наноразмерной формы карбоната лития в концентрациях 10-3 М в культуру клеток гепатокарциномы-29 приводило к подавлению жизнеспособности опухолевых клеток на 29±0,6%.Experiment 1. The addition of a nanoscale form of lithium carbonate at concentrations of 10 -3 M in the cell culture of hepatocarcinoma-29 led to the suppression of the viability of tumor cells by 29 ± 0.6%.
Эксперимент 2. Добавление исходной формы карбоната лития в концентрациях 10-3 М в культуру клеток гепатокарциномы-29 не оказывало токсического действия на опухолевые клетки.Experiment 2. The addition of the initial form of lithium carbonate at concentrations of 10 -3 M in the cell culture of hepatocarcinoma-29 had no toxic effect on tumor cells.
Эксперимент 3. Добавление наноразмерной формы цитрата лития в концентрациях 10-3 М в культуру клеток гепатокарциномы-29 приводило к подавлению жизнеспособности опухолевых клеток на 30±0,8%.Experiment 3. The addition of a nanoscale form of lithium citrate at concentrations of 10 -3 M to the hepatocarcinoma-29 cell culture led to the suppression of tumor cell viability by 30 ± 0.8%.
Эксперимент 4. Добавление исходной формы цитрата лития в концентрациях 10-3 М в культуру клеток гепатокарциномы-29 не оказывало токсического действия на опухолевые клетки.Experiment 4. The addition of the initial form of lithium citrate at concentrations of 10 -3 M in the cell culture of hepatocarcinoma-29 had no toxic effect on tumor cells.
Эксперимент 5. Мышам самцам линии СВА (n=10), после индукции опухолевого процесса (через 20 суток после введения опухолевых клеток из асцитической жидкости), внутрибрюшинно по 0,1 мл в физиологическом растворе вводили цитрат лития в наноразмерной форме в дозе 0,92 мг на животное в течение 5 дней. Внутрибрюшинное введение наноразмерной формы цитрата лития было принято для моделирования процесса внутривенного введения препарата. Исследование структуры опухоли выявило снижение на 30% числа клеток 4-й стадии дифференцировки и на 84% уменьшалось количество клеток 5-й стадии дифференцировки, по сравнению с их содержанием в опухоли без воздействия лития.Experiment 5. To mice, males of the CBA line (n = 10), after induction of the tumor process (20 days after the introduction of tumor cells from ascitic fluid), lithium citrate in a nanosized form at a dose of 0.92 was injected 0.1 ml in physiological solution mg per animal for 5 days. Intraperitoneal administration of a nanoscale form of lithium citrate was adopted to simulate the intravenous administration of the drug. The study of the structure of the tumor revealed a 30% decrease in the number of cells of the 4th stage of differentiation and an 84% decrease in the number of cells of the 5th stage of differentiation, compared with their content in the tumor without lithium exposure.
Эксперимент 6. Экспериментальное исследование было проведено на мышах-самцах линии СВА, которые получали пятикратно внутримышечные инъекции по периферии опухолевого роста в правое бедро в объеме 0,1 мл взвеси наноразмерных частиц карбоната лития, приготовленных на стерильном 0,85% водном растворе хлорида натрия в дозе 0,037 мг на животное. Внутримышечное введение наноразмерной формы карбоната лития было принято для моделирования процесса доставки препарата к месту имплантации опухолевых клеток. Через 20 суток эксперимента в опухоли на 45% уменьшилось количество клеток 4-й и на 60% снизилось количество клеток 5-й стадии дифференцировки, по сравнению с опухолью бедра без введения нанопрепарата лития. Сравнение эффектов 2-х наноразмерных форм лития показало, что при введении наноразмерного цитрата лития, по сравнению с карбонатом лития, на 64% было снижено количество клеток 5-й стадии дифференцировки.Experiment 6. An experimental study was conducted on male CBA mice that received five-fold intramuscular injections along the periphery of tumor growth in the right thigh in a volume of 0.1 ml of a suspension of nanosized particles of lithium carbonate prepared in a sterile 0.85% aqueous solution of sodium chloride in dose of 0.037 mg per animal. Intramuscular injection of a nanoscale form of lithium carbonate was taken to simulate the process of drug delivery to the site of tumor cell implantation. After 20 days of the experiment, the number of 4th cells decreased by 45% in the tumor and the number of cells of the 5th stage of differentiation decreased by 60% compared to the femoral tumor without lithium nanopreparation. A comparison of the effects of 2 nanoscale forms of lithium showed that with the introduction of nanoscale lithium citrate, in comparison with lithium carbonate, the number of cells of the 5th stage of differentiation was reduced by 64%.
Эксперимент 7. В эксперименте исследовали совместное внутрибрюшинное введение наноразмерной формы цитрата лития (в физиологическом растворе в дозе 0,92 мг на животное в течение 5 дней) и внутримышечное ведение наноразмерной формы карбоната лития (в физиологическом растворе в дозе 0,037 мг на животное) мышам самцам линии СВА (n=20), после индукции опухолевого процесса. Было выявлено, что при совместном введении наноразмерных форм цитрата и карбоната лития на 35% снизилось количество клеток третьей стадии, на 63% уменьшилось количество клеток 4-й стадии и на 90% клеток 5-й стадии дифференцировки, по сравнению с гепатокарциномой бедра без воздействия.Experiment 7. In the experiment, the joint intraperitoneal administration of a nanoscale form of lithium citrate (in saline at a dose of 0.92 mg per animal for 5 days) and the intramuscular administration of a nanoscale form of lithium carbonate (in saline at a dose of 0.037 mg per animal) to mice were studied line CBA (n = 20), after the induction of the tumor process. It was found that with the combined introduction of nanoscale forms of citrate and lithium carbonate, the number of cells of the third stage decreased by 35%, the number of cells of the 4th stage decreased by 63% and 90% of the cells of the 5th stage of differentiation, compared with femoral hepatocarcinoma without exposure .
Таким образом, определенные нами морфологические критерии стадий дифференцировки клеток ГК-29 позволили выявить различия в направленности воздействия и клетки-мишени использованных нами доз нанопрепаратов лития - наноразмерной формы цитрата лития и наноразмерной формы карбоната лития. Введение наноразмерной формы карбоната лития оказывает цитотоксический эффект на более дифференцированные клетки гепатокарциномы 4 и 5-й стадий дифференцировки, а наноразмерная форма цитрата лития обладает цитостатическим эффектом, блокируя пролиферацию клеток 1-3 стадий дифференцировки, что приводит к снижению количества более дифференцированных клеток 4 и 5 стадий дифференцировки. Совместное использование нанопрепаратов лития способствует большему проценту гибели клеток 3-й стадии дифференцировки и снижению высокодифференцированных клеток 4 и 5 стадии клеточной дифференцировки. Использование наноразмерных форм лития позволяет более эффективно использовать низкие дозы препаратов, что исключает развитие побочных эффектов.Thus, the morphological criteria that we determined for the stages of differentiation of GK-29 cells made it possible to reveal differences in the direction of action and the target cell of the doses of lithium nanopreparations used by us — the nanoscale form of lithium citrate and the nanoscale form of lithium carbonate. The introduction of a nanoscale form of lithium carbonate has a cytotoxic effect on more differentiated cells of hepatocarcinoma of the 4th and 5th stages of differentiation, and the nanoscale form of lithium citrate has a cytostatic effect, blocking cell proliferation of 1-3 stages of differentiation, which leads to a decrease in the number of more differentiated cells 4 and 5 stages of differentiation. The combined use of lithium nanopreparations contributes to a higher percentage of death of cells of the 3rd stage of differentiation and a decrease in highly differentiated cells of the 4th and 5th stage of cell differentiation. The use of nanoscale forms of lithium allows more efficient use of low doses of drugs, which eliminates the development of side effects.
Литературные источникиLiterary sources
1. Геращенко Т.С., Денисов Е.В, Литвяков Н.В., Завьялова М.В., Вторушин С.В., Цыганов М.М., Перельмутер В.М., Чердынцева Н.В. Внутриопухолевая гетерогенность: природа и биологическое значение. Биохимия. 2013. т. 78, №11, с. 1531-1549.1. Gerashchenko TS, Denisov EV, Litvyakov NV, Zavyalova MV, Vtorushin SV, Tsyganov MM, Perelmuter VM, Cherdyntseva NV Intratumoral heterogeneity: nature and biological significance. Biochemistry. 2013.V. 78, No. 11, p. 1531-1549.
2. Исупов В.П., Еремина Н.В., Булина Н.В. Механическая активация карбоната лития. Известия Томского политехнического университета. 2013. Т. 322. Т 3. С. 29-31.2. Isupov V.P., Eremina N.V., Bulina N.V. Mechanical activation of lithium carbonate. News of Tomsk Polytechnic University. 2013.V. 322.T 3.P. 29-31.
3. Кушлинский Н.Е., Герштейн Е.С., Овчинникова Л.К., Дигаева М.А. Молекулярные маркеры опухолей. Бюлл. Эксперим. Биол. Мед. 2009. Т. 148. №8. С. 199-208.3. Kushlinsky N.E., Gershtein E.S., Ovchinnikova L.K., Digaeva M.A. Molecular markers of tumors. Bull. Experiment Biol. Honey. 2009.V. 148. No. 8. S. 199-208.
4. Непомнящих Л.М., Лушникова Е.Л., Молодых О.П., Калинникова М.Г. Структурная реорганизация печени крыс при цитотоксическом действии доксорубицина. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2006. - № 5. - С. 579-585.4. Nepomnyashchikh L. M., Lushnikova E. L., Young O. P., Kalinnikova M. G. Structural reorganization of rat liver with the cytotoxic effect of doxorubicin. Bulletin of Experimental Biology and Medicine. 2006. - No. 5. - S. 579-585.
5. Непомнящих Л.М., Лушникова Е.Л., Молодых О.П., Клинникова М.Г. Ультраструктурные проявления нарушения регенерации кардиомиоцитов при действии доксорубицина // Морфология, 2005. - № 4. - С. 81-84.5. Nepomnyashchikh L. M., Lushnikova E. L., Molodoy O. P., Klinnikova M. G. Ultrastructural manifestations of impaired cardiomyocyte regeneration under the action of doxorubicin // Morphology, 2005. - No. 4. - P. 81-84.
6. Тюряева И.И., Филатова Н.А., Розанов Ю.М., Демин С.Ю., Блинова Г.И., Иванов В.А. Морфологическая и функциональная гетерогенность клеток асцитной гепатомы Зайдена крысы. Цитология. 2010. т. 52, №10, с. 817-826.6. Tyuryaeva I.I., Filatova N.A., Rozanov Yu.M., Demin S.Yu., Blinova G.I., Ivanov V.A. Morphological and functional heterogeneity of rat ascites hepatoma hepatoma cells. Cytology. 2010.V. 52, No. 10, p. 817-826.
7. Ang E.S., Teh H.S., Sundram F.X., Lee K.O. Effect of lithium and oral thyrotrophin-releasing hormone (TRH) on serum thyrotrophin (TSH) and radioiodine uptake in patients with well differentiated thyroid carcinoma // Singapore Med J. 1995. Vol. 36. № 6. P. 606-608.7. Ang E.S., Teh H.S., Sundram F.X., Lee K.O. Effect of lithium and oral thyrotrophin-releasing hormone (TRH) on serum thyrotrophin (TSH) and radioiodine uptake in patients with well differentiated thyroid carcinoma // Singapore Med J. 1995. Vol. 36. No. 6. P. 606-608.
8. Brand T.M., Wheeler D.L. Treating PIK3CA and EGFR overexpressing breast cancer with lithium citrate // Cancer biology & therapy. - 2011.-Vol. 11, №3. - P. 368-370.8. Brand T.M., Wheeler D.L. Treating PIK3CA and EGFR overexpressing breast cancer with lithium citrate // Cancer biology & therapy. - 2011.-Vol. 11, No. 3. - P. 368-370.
9. Canales М.А., Arrieta R., Hernndez-Garcна C., Bustos J.G., Aguado M.J., Hernndez-Navarro F. A single apheresis to achieve a high number of peripheral blood CD34+ cells in a lithium-treated patient with acute myeloid leukaemia. // Bone Marrow Transplant. 1999. Vol 23. №3. P. 305.9. Canales M.A., Arrieta R., Hernndez-Garcna C., Bustos JG, Aguado MJ, Hernndez-Navarro F. A single apheresis to achieve a high number of peripheral blood CD34 + cells in a lithium-treated patient with acute myeloid leukaemia. // Bone Marrow Transplant. 1999. Vol 23. No. 3. P. 305.
10. Cho Y.J., Kim J.H., Yoon J., Cho S.J., Ko Y.S., Park J.W., et al. Constitutive activation of glycogen synthase kinase-3beta correlates with better prognosis and cyclin-dependent kinase inhibitors in human gastric cancer. BMC Gastroenterol. 2010. P. 10:91.10. Cho Y.J., Kim J.H., Yoon J., Cho S.J., Ko Y.S., Park J.W., et al. Constitutive activation of glycogen synthase kinase-3 beta correlates with better prognosis and cyclin-dependent kinase inhibitors in human gastric cancer. BMC Gastroenterol. 2010.P. 10:91.
11. Colombo F., Baldan F., Mazzucchelli S., Martin-Padura I., Marighetti P., Cattaneo A., Foglieni В., Spreafico M., Guerneri S, Baccarin M., Bertolini F., Rossi G., Mazzaferro V., Cadamuro M., Maggioni M., Agnelli L., Rebulla P., Prati D., Porretti L. Evidence of distinct tumour-propagating cell populations with different properties in primary human hepatocellular carcinoma. PLoS One. 2011. v. 6, №6, р. е21369.11. Colombo F., Baldan F., Mazzucchelli S., Martin-Padura I., Marighetti P., Cattaneo A., Foglieni B., Spreafico M., Guerneri S, Baccarin M., Bertolini F., Rossi G. , Mazzaferro V., Cadamuro M., Maggioni M., Agnelli L., Rebulla P., Prati D., Porretti L. Evidence of distinct tumor-propagating cell populations with different properties in primary human hepatocellular carcinoma. Plos one. 2011. v. 6, No. 6, p. E21369.
12. Di Salvo D.N., Park J., Laing F.C. J Lithium nephropathy: unique sonographic findings. // Ultrasound Med. 2012. Vol. 31. № 4. P. 637-644.12. Di Salvo D.N., Park J., Laing F.C. J Lithium nephropathy: unique sonographic findings. // Ultrasound Med. 2012. Vol. 31. No. 4. P. 637-644.
13. Fu Y., Zheng S., Huang R., An N., Zheng Y., Zhang Z., Liang A. A potential strategy for high-grade gliomas: combination treatment with lithium chloride and BmK CT // Biotechnol Lett. 2012. Vol.34. № 1. P. 9-17.13. Fu Y., Zheng S., Huang R., An N., Zheng Y., Zhang Z., Liang A. A potential strategy for high-grade gliomas: combination treatment with lithium chloride and BMK CT // Biotechnol Lett . 2012. Vol. 34. No. 1. P. 9-17.
14. Hager ED, Dziambor H, Нöhmann D, Winkler P, Strama H. Effects of lithium on thrombopoiesis in patients with low platelet cell counts following chemotherapy or radiotherapy. // Biol Trace Elem Res. 2001 Nov; 83(2): 139-48.14. Hager ED, Dziambor H, Höhmann D, Winkler P, Strama H. Effects of lithium on thrombopoiesis in patients with low platelet cell counts following chemotherapy or radiotherapy. // Biol Trace Elem Res. 2001 Nov; 83 (2): 139-48.
15. Hager E.D., Dziambor H., Winkler P., Нöhmann D., Macholdt K. Effects of lithium carbonate on hematopoietic cells in patients with persistent neutropenia following chemotherapy or radiotherapy. // J Trace Elem Med Biol. 2002. Vol. 16. № 2. P. 91-97.15. Hager E.D., Dziambor H., Winkler P., Hohmann D., Macholdt K. Effects of lithium carbonate on hematopoietic cells in patients with persistent neutropenia following chemotherapy or radiotherapy. // J Trace Elem Med Biol. 2002. Vol. 16. No. 2. P. 91-97.
16. Khasraw M., Ashley D., Wheeler G. and Berk M. Using lithium as a neuroprotective agent in patients with cancer // BMC Medicine 2012, 10:131 http://www.biomedcentral.com/1741-7015/10/131.16. Khasraw M., Ashley D., Wheeler G. and Berk M. Using lithium as a neuroprotective agent in patients with cancer // BMC Medicine 2012, 10: 131 http://www.biomedcentral.com/1741-7015/ 10/131.
17. Kudo M. Treatment of Advanced Hepatocellular Carcinoma with Emphasis on Hepatic Arterial Infusion Chemotherapy and Molecular Targeted Therapy // Liver Cancer. 2012. Vol. 1. № 2. P. 62-70.17. Kudo M. Treatment of Advanced Hepatocellular Carcinoma with Emphasis on Hepatic Arterial Infusion Chemotherapy and Molecular Targeted Therapy // Liver Cancer. 2012. Vol. 1. No. 2. P. 62-70.
18. Kusumbe A.P., Bapat S.A. Cancer Stem Cells and Aneuploid Populations within Developing Tumors Are the Major Determinants of Tumor Dormancy. Cancer Res. 2009. v. 69, №24. P. 9245-9253.18. Kusumbe A.P., Bapat S.A. Cancer Stem Cells and Aneuploid Populations within Developing Tumors Are the Major Determinants of Tumor Dormancy. Cancer Res. 2009. v. 69, No. 24. P. 9245-9253.
19. Lee J.E., Bae S.H., Choi J.Y., Yoon S.K., You Y.K., Lee M.A. Epirubicin, Cisplatin, 5-FU combination chemotherapy in sorafenib-refractory metastatic hepatocellular carcinoma // World J Gastroenterol. 2014. Vol. 20. № 1. P. 235-241.19. Lee J.E., Bae S.H., Choi J.Y., Yoon S.K., You Y.K., Lee M.A. Epirubicin, Cisplatin, 5-FU combination chemotherapy in sorafenib-refractory metastatic hepatocellular carcinoma // World J Gastroenterol. 2014. Vol. 20. No. 1. P. 235-241.
20. Lubner S.J., Kunnimalaiyaan M., Holen K.D., Ning L., Ndiaye M., Loconte N.K., Mulkerin D.L., Schelman W.R., Chen H. A preclinical and clinical study of lithium in low-grade neuroendocrine tumors // Oncologist. 2011. Vol. 16. № 4. P. 452-457.20. Lubner S.J., Kunnimalaiyaan M., Holen K.D., Ning L., Ndiaye M., Loconte N.K., Mulkerin D.L., Schelman W.R., Chen H. A preclinical and clinical study of lithium in low-grade neuroendocrine tumors // Oncologist. 2011. Vol. 16. No. 4. P. 452-457.
21. Lyman G.H., Williams C.C., Dinwoodie W.R., Schocken D.D. Sudden death in cancer patients receiving lithium. J Clin Oncol. 1984. Vol. 2. № 11. P. 1270-1276.21. Lyman G.H., Williams C.C., Dinwoodie W.R., Schocken D.D. Sudden death in cancer patients receiving lithium. J Clin Oncol. 1984. Vol. 2. No. 11. P. 1270-1276.
22. Marjanovic N.D., Weinberg R.A., Chaffer C.L. Cell plasticity and heterogeneity in cancer. Clin Chem. 2013. v. 59, №1. p. 168-179.22. Marjanovic N.D., Weinberg R.A., Chaffer C.L. Cell plasticity and heterogeneity in cancer. Clin Chem. 2013. v. 59, No. 1. p. 168-179.
23. Matsebatlela Т, Gallicchio V., Becker R. Lithium modulates cancer cell growth, apoptosis, gene expression and cytokine production in HL-60 promyelocytic leukaemia cells and their drug-resistant sub-clones // Biol Trace Elem Res. 2012. Vol 149. № 3. P. 323-330.23. Matsebatlela T, Gallicchio V., Becker R. Lithium modulates cancer cell growth, apoptosis, gene expression and cytokine production in HL-60 promyelocytic leukaemia cells and their drug-resistant sub-clones // Biol Trace Elem Res. 2012. Vol 149. No. 3. P. 323-330.
24. Meacham C.E., Morrison S.J. Tumour heterogeneity and cancer cell plasticity. Nature. 2013. v. 501, №7467, p. 328-337.24. Meacham C.E., Morrison S.J. Tumor heterogeneity and cancer cell plasticity. Nature. 2013. v. 501, No. 7467, p. 328-337.
25. Merendino R.A., Mancuso G., Tomasello F., Gazzara D., Cusumano V., Chillemi S., Spadaro P., Mesiti M. Effects of lithium carbonate on cytokine production in patients affected by breast cancer. // J Biol Regul Homeost Agents. 1994. Vol. 8. № 3. P. 88-91.25. Merendino R.A., Mancuso G., Tomasello F., Gazzara D., Cusumano V., Chillemi S., Spadaro P., Mesiti M. Effects of lithium carbonate on cytokine production in patients affected by breast cancer. // J Biol Regul Homeost Agents. 1994. Vol. 8. No. 3. P. 88-91.
26. Mo M., Erdelyi I., Szigeti-Buck K., Benbow J.H., Ehrlich B.E. Prevention of paclitaxel-induced peripheral neuropathy by lithium pretreatment // FASEB J. 2012. Vol. 26. № 11. P. 4696-4709.26. Mo M., Erdelyi I., Szigeti-Buck K., Benbow J.H., Ehrlich B.E. Prevention of paclitaxel-induced peripheral neuropathy by lithium pretreatment // FASEB J. 2012. Vol. 26. No. 11. P. 4696-4709.
27. Néel B.D., Lopez J., Chabadel A., Gillet G. Lithium suppresses motility and invasivity of v-src-transformed cells by glutathione-dependent activation of phosphotyrosine phosphatases. // Oncogene.2009. Vol. 28. № 36. P. 3246-3260.27. Néel B.D., Lopez J., Chabadel A., Gillet G. Lithium suppresses motility and invasivity of v-src-transformed cells by glutathione-dependent activation of phosphotyrosine phosphatases. // Oncogene. 2009. Vol. 28. No. 36. P. 3246-3260.
28. Pang R.W., Poon R.T. Cancer stem cell as a potential therapeutic target in hepatocellular carcinoma. Curr Cancer Drug Targets. 2012. v. 1, №12(9), p. 1081-1094.28. Pang R.W., Poon R.T. Cancer stem cell as a potential therapeutic target in hepatocellular carcinoma. Curr Cancer Drug Targets. 2012. v. 1, No. 12 (9), p. 1081-1094.
29. Shen Y., Cao D. Hepatocellular carcinoma stem cells: origins and roles in hepatocarcinogenesis and disease progression. Front Biosci (Elite Ed). 2012. v. 1, №4, p. 1157-1169.29. Shen Y., Cao D. Hepatocellular carcinoma stem cells: origins and roles in hepatocarcinogenesis and disease progression. Front Biosci (Elite Ed). 2012. v. 1, No. 4, p. 1157-1169.
30. Tono Т., Hashimoto K., Yamada Y., Nishida K., Yanagawa Т., Danno K., Fujie Y., Fujita S., Fujita J., Yoshida Т., Onishi Т., Imaoka S., Monden T. Efficacy of stereotactic radiotherapy for primary and metastatic liver cancer // Gan To Kagaku Ryoho. 2013. Vol. 40. №12. P. 1853-1855.30. Tono T., Hashimoto K., Yamada Y., Nishida K., Yanagawa T., Danno K., Fujie Y., Fujita S., Fujita J., Yoshida T., Onishi T., Imaoka S., Monden T. Efficacy of stereotactic radiotherapy for primary and metastatic liver cancer // Gan To Kagaku Ryoho. 2013. Vol. 40. No. 12. P. 1853-1855.
31. Tsui M.M., Tai W.C., Wong W.Y., Hsiao W.L. Selective G2/M arrest in a p53(Val135)-transformed cell line induced by lithium is mediated through an intricate network of MAPK and β-catenin signaling pathways // Life Sci. 2012. Vol. 24; 91. № 9-10. P. 312-321.31. Tsui M.M., Tai W.C., Wong W.Y., Hsiao W.L. Selective G2 / M arrest in a p53 (Val135) -transformed cell line induced by lithium is mediated through an intricate network of MAPK and β-catenin signaling pathways // Life Sci. 2012. Vol. 24; 91. No. 9-10. P. 312-321.
32. Wolff E.F., Hughes M., Merino M.J., Reynolds J.C., Davis J.L., Cochran C.S., Celi F.S. Expression of Benign and Malignant Thyroid Tissue in Ovarian Teratomas and the Importance of Multimodal Management as Illustrated by a BRAF-Positive Follicular Variant of Papillary Thyroid Cancer // THYROID Volume 20, Number 9, 2010 P. 981-987.32. Wolff E.F., Hughes M., Merino M.J., Reynolds J.C., Davis J.L., Cochran C.S., Celi F.S. Expression of Benign and Malignant Thyroid Tissue in Ovarian Teratomas and the Importance of Multimodal Management as Illustrated by a BRAF-Positive Follicular Variant of Papillary Thyroid Cancer // THYROID Volume 20, Number 9, 2010 P. 981-987.
33. Xia F, Yang E, Hallahan D, Lu B: Lithium-mediated neuroprotection during cranial irradiation: a phase I trial. Neuro-oncology 2008, 10(5):887-887.33. Xia F, Yang E, Hallahan D, Lu B: Lithium-mediated neuroprotection during cranial irradiation: a phase I trial. Neuro-oncology 2008, 10 (5): 887-887.
34. Yang E.S., Lu, В., Hallahan D.E.: Lithium-mediated neuroprotection during cranial irradiation: A phase 1 trial. ASTRO (American Society for Therapeutic Radiology and Oncology) - 49th annual Conference Los Angeles CA; 2007.34. Yang E.S., Lu, B., Hallahan D.E .: Lithium-mediated neuroprotection during cranial irradiation: A phase 1 trial. ASTRO (American Society for Therapeutic Radiology and Oncology) - 49th annual Conference Los Angeles CA; 2007.
35. Zhang L., Zhu H., Jin Ch., Zhou K., Li L, Su H., Chen W., Bai J., Wang Zh. High-intensity focused ultrasound (HIFU): effective and safe therapy for hepatocellular carcinoma adjacent to major hepatic veins // Eur Radiol. 2009. Vol. 19. № 2. P. 437-445.35. Zhang L., Zhu H., Jin Ch., Zhou K., Li L, Su H., Chen W., Bai J., Wang Zh. High-intensity focused ultrasound (HIFU): effective and safe therapy for hepatocellular carcinoma adjacent to major hepatic veins // Eur Radiol. 2009. Vol. 19. No. 2. P. 437-445.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014111190/15A RU2560708C1 (en) | 2014-03-24 | 2014-03-24 | Method for differentiation stage-related hepatocarcinoma cells exposure to lithium nanopreparations |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014111190/15A RU2560708C1 (en) | 2014-03-24 | 2014-03-24 | Method for differentiation stage-related hepatocarcinoma cells exposure to lithium nanopreparations |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2560708C1 true RU2560708C1 (en) | 2015-08-20 |
Family
ID=53880792
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014111190/15A RU2560708C1 (en) | 2014-03-24 | 2014-03-24 | Method for differentiation stage-related hepatocarcinoma cells exposure to lithium nanopreparations |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2560708C1 (en) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1318837A2 (en) * | 2000-08-11 | 2003-06-18 | Wyeth | Method of treating estrogen receptor positive carcinoma |
-
2014
- 2014-03-24 RU RU2014111190/15A patent/RU2560708C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1318837A2 (en) * | 2000-08-11 | 2003-06-18 | Wyeth | Method of treating estrogen receptor positive carcinoma |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| В.В. Макарова, А.А. Егорова, Н.П. Бгатова, "Развитие гепатокарциномы Г-29 при введении наноразмерных частиц лития", Сибирский онкологический журнал. 2001. Приложение N1, с.73-74. В.И. Каледин, Н.А. Жукова и др., "Гепатокарцинома-29 - метастазирующая перевиваемая опухоль мышей, вызывающая кахексию", Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2009, Т. 148, N12, с.664-669. Di Salvo D.N., Park J., Laing F.C. J Lithium nephropathy: unique sonographic findings. Ultrasound Med. 2012. Vol. 31. N 4. P. 637-644 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP3222278B1 (en) | Use of azelnidipine in preparing medicinal composition for treating cancers | |
| Bruix et al. | Chemoembolization for hepatocellular carcinoma | |
| Mao et al. | Combined treatment with sorafenib and silibinin synergistically targets both HCC cells and cancer stem cells by enhanced inhibition of the phosphorylation of STAT3/ERK/AKT | |
| Zonta et al. | Clinical lessons from the first applications of BNCT on unresectable liver metastases. | |
| CN100586480C (en) | A sodium alginate microsphere vascular embolizing agent containing water soluble drug, its preparation and application | |
| WO2015178426A1 (en) | Cancer stem cell proliferation inhibitor | |
| Eyol et al. | Chemoembolisation of rat colorectal liver metastases with drug eluting beads loaded with irinotecan or doxorubicin | |
| Alev et al. | Targeting of drug-loaded nanoparticles to tumor sites increases cell death and release of danger signals | |
| Kawano et al. | Caffeine increases the antitumor effect of Cisplatin in human hepatocellular carcinoma cells | |
| TW201440789A (en) | Use of nanoparticles in ultrasound-assisted treatment of a cancer | |
| Li et al. | Preparation of microspheres encapsulating sorafenib and catalase and their application in rabbit VX2 liver tumor | |
| Shen et al. | Bruton’s tyrosine kinase inhibitors in the treatment of primary central nervous system lymphoma: A mini-review | |
| Yoon et al. | Radioprotective effect of captopril on the mouse jejunal mucosa | |
| RU2560708C1 (en) | Method for differentiation stage-related hepatocarcinoma cells exposure to lithium nanopreparations | |
| Wang et al. | Port‑site metastasis as a primary complication following retroperitoneal laparoscopic radical resection of renal pelvis carcinoma or nephron‑sparing surgery: A report of three cases and review of the literature | |
| WO2017160978A1 (en) | Cell cultures and use thereof | |
| CN111249274B (en) | Application of ginkgolide B in preparation of glioma cell activity inhibitor | |
| CN103316035A (en) | Use of sodium bicarbonate in preparation of medicines for treating cancer | |
| JP2014221752A (en) | Differentiation promoting agent for cancer stem cell and brain tumor therapeutic agent | |
| Ueda et al. | Comparison of Epirubicin‐Iodized Oil Suspension and Emulsion for Transcatheter Arterial Chemoembolization in VX2 Tumor | |
| Kim et al. | Efficacy of transarterial embolization with arsenic trioxide oil emulsion in a rabbit VX2 liver tumor model | |
| Kohorn | Uracil Mustard and 5-Fluorouracil Combination Chemotherapy: A Historic Record. | |
| JP6437649B2 (en) | Pharmaceutical composition for cancer treatment and biomarker for drug screening | |
| CN110461311A (en) | Fine nanosizing medicament and its application | |
| WO2021196335A1 (en) | Use of pyr3 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20190325 |